BITACORA DE INMUNIZACIÓN

INMUNOLOGÍA

Q.F.B. CARMEN AYDEE VELASCO

HUGO ALEJANDRO SOLIS MENDOZA No.47 4C

 INTRODUCCIÓN

La inmunización es el proceso natural o artificial, mediante el cual el individuo

competente desarrolla una respuesta inmune al entrar en contacto con un
antígeno.

La dosis del inmunógeno es un factor importante para lograr una respuesta

inmune, ya que cantidades excesivas o mínimas del antígeno pueden inducir el
fenómeno de tolerancia, el cual se define como un estado de no respuesta a
un antígeno en particular.

No hay esquemas establecidos para la inmunización de un animal con un

antígeno determinado. Los esquemas en los diferentes laboratorios se han
establecido realizando pruebas de ensayo y error.
 INMUNIZACION DE CONEJOS

Via Intravenosa:

1. Colocar al conejo en el cepo.

2. Localizar las venas marginales de la oreja del animal.
3. Sujetar bien la oreja con los dedos medio y anular.
4. Limpiar la zona de inmunización con alcohol al 70%
5. Proceder a inyectar al animal. Si se va a llevar acabo una serie de
inmunizaciones, es recomendable comenzar en el extremo de la oreja
mas alejado de la cabeza y se procede a inyectar hacia la base de la oreja
del conejo.
Via Subcutánea:

1. Elegir la zona de inoculación, cortar el pelo del animal con tijeras y

limpiar con una torunda.
2. Levantar ligeramente la piel del conejo e introducir la aguja
lateralmente, aproximadamente una tercera parte de esta y depositar el
antígeno. No debe formarse pápula en el sitio de la inoculación.
Via Intradermica:

1. Rasurar el lomo del animal.

2. Aplicar en esta zona la crema depiladora durante 5-8 minutos.
Posteriormente limpiar la zona con un trapo húmedo hasta eliminar
totalmente la crema.
3. Introducir la aguja de 22x32 mm en la dermis del animal con el bisel
hacia arriba. Una vez dentro de la piel girar 120º y depositar el inóculo.
En este sitio de la inoculación se debe observar la formación de una
pápula.
Via Intramuscular:

1. Desinfectar la parte externa del muslo del animal

2. Fijar con los dedos la zona seleccionada para la inyección
3. Introducir la aguja de la jeringa con un movimiento firme hasta su
inserción en la masa muscular.
4. Depositar el inoculo lentamente y retirar la jeringa de forma rápida.
5. Presionar con una torunda el sitio de la inyección.
 PROTOCOLO DE PRESIPITINAS “ALBUMINA”

Día Dosis Vía de Material

Administración Inoculado
12 Abril .1 ml Intravenosa Albumina 1:2
13 Abril .3 ml intravenosa Albumina 1:2
19 Abril .5 ml Intravenosa Albumina 1:2
20 Abril 1 ml Intradérmica Albumina 1:2
26 Abril 1 ml Intradérmica Albumina 1:2
29 Abril 1 ml Intradérmica Albumina 1:2

7 Mayo SANGRADO INTRACARDIACO

 PROTOCOLO DE AGLUTININAS “ERITROCITOS”

Día Dosis Vía de Material

Administración Inoculado
12 Abril .5 ml Subcutáneo Sangre Total
14 Abril 1 ml Subcutáneo Sangre Total
16 Abril 1.5 ml Subcutáneo Sangre Total
18 Abril 2 ml Subcutáneo Sangre Total
20 Abril 2.5 ml Subcutáneo Sangre Total
23 Abril 1 ml Intravenoso Eritrocitos al 2%
26 Abril 1 ml Intravenoso Eritrocitos al 20%

28 Abril SANGRADO INTRACARDIACO

DIARIO
12 de Abril

Peso: 1.780 kg.

Temperatura: 38.6º

Via de Administracion: intravenosa

Comportamiento: durante el dia tuvo un comportamiento batastante

tranquilo, comio y bebió agua lo normal, en la inoculación también estuvo
tranquilo y no dio problemas cuando se inoculaba. Después de la
inoculación al igual se mantuvo tranquilo y volvió a comer y beber de
manera normal.
13 de Abril:

Peso: 1.650 kg.

Temperatura: 38.4º

Vía de Administración: intravenosa

Comportamiento: Hoy se realizara la segunda la segunda inoculación, antes

de la inoculación se presento todo normal, durante la inoculación se puso
nervioso y se movia a la hora de inocularlo, después de ello todo regreso a
la normalidad.
14 de Abril… Comportamiento: Se mantuvo muy activo durante el día de
hoy, no presentamos problemas, se alimento de manera normal.

15 de Abril… Comportamiento: durante el día el conejo estuvo tranquilo

comió a las horas y durmió a las horas que siempre duerme.

16 de Abril… Comportamiento: el conejo se mantuvo bien, no presenta algo

raro y este dumio un poco durante el día y se estuvo activo.

17 de Abril… Comportamiento: El día de hoy durmió gran parte del día, mas
sin embargo cuando estuvo despierto estuvo juguetón y comió mucho.

18 de Abril… Comportamiento: se comporto muy tranquilo el dia de hoy,

durmió durante la tarde, y estuvo muy tranquilo.
19 de Abril:

Peso: 1.440 kg.

Temperatura: 38.5º

Via de Administracion: intravenosa

Comportamiento: Su comportamiento durante la inoculación fue nerviosa,

se nos dificulto un poco ya que se movio mucho el conejo, después de la
inoculación todo regreso a la normalidad.
20 de Abril:

Peso: 1.450 kg.

Temperatura: 38.8º

Via de Administracion: intradermica

Comportamiento: En esta inoculación el conejo estuvo tranquilo, no se nos

difuculto la inoculación y después este comio mucho y se presento todo
normal.

21 de Abril… Comportamiento: se comporto muy tranquilo el dia de hoy,

durmió durante la tarde, y estuvo muy tranquilo.
22 de Abril… Comportamiento: Se mantuvo muy activo durante el día de
hoy, no presentamos problemas, se alimento de manera normal.

23 de Abril… Comportamiento: El día de hoy durmió gran parte del día, mas
sin embargo cuando estuvo despierto estuvo juguetón y comió mucho.

24 de Abril… Comportamiento: Se mantuvo muy activo durante el día de

hoy, no presentamos problemas, se alimento de manera normal.

25 de Abril… Comportamiento: se comporto muy tranquilo el dia de hoy,

durmió durante la tarde, y estuvo muy tranquilo.
26 de Abril:

Peso: 1.400 kg.

Temperatura: 39.3º

Via de Administracion: intradermica

Comportamiento: Se volvió a comportar muy tranquilo en esta inoculación

no tuvimos problemas y después de esto el conejo volvió a presentarse a lo
normal

27 de Abril Comportamiento: El día de hoy durmió gran parte del día, mas
sin embargo cuando estuvo despierto estuvo juguetón y comió mucho.
28 de Abril… Comportamiento: se comporto muy tranquilo el dia de hoy,
durmió durante la tarde, y estuvo muy tranquilo.

29 de Abril:

Peso: 1.550 kg.

Temperatura: 39.1º

Via de Administracion: intradermica

Comportamiento: El conejo se comporto muy tranquilo no se movio mucho

durante la inoculación y después de ella se manifestó todo bien.

30 de Abril… Comportamiento: Hoy estuvo muy activo, comió y estuvo

jugando mucho. Todo normal.
1 de Mayo… Comportamiento: El conejo estuvo tranquilo el dia de hoy, casi
no hizo alguna actividad trascendente.

2 de Mayo… Comportamiento: El dia de hoy estuvo activo durante el día, se

alimento bien y al igual estuvo tomando mucha agua.

4 de Mayo… Comportamiento: El conejo se comporto muy tranquilo no se

movio mucho durante la inoculación y después de ella se manifestó todo
bien.

5 de Mayo… Comportamiento: El día de hoy durmió gran parte del día, mas
sin embargo cuando estuvo despierto estuvo juguetón y comió mucho.

6 de Mayo… Comportamiento: Se mantuvo muy activo durante el día de

hoy, no presentamos problemas, se alimento de manera normal.
7 de Mayo:

Peso: 1.500 kg.

Temperatura: 38.9º

SANGRADO INTRACARDIACO

Comportamiento: durante el sangrado el conejo no se movio mucho,

relativamente se podría decir que estuvo tranquilo, después del sangrado
se miraba un poco triste pero al final de cuentas el conejo sobrevivió.
1ra PARTE TITULACION DE PRECIPITINAS

Número del Dilución Agregar

tubo
1 1:10 .5 ml de albumina + 4.5 de solución salina
2 1:100 1 ml de dilución 1:10 + 9 de solución salina
3 1:500 2 ml de dilución 1:100 + 8 de solución salina
4 1:1000 1 ml de dilución 1:100 + 9 de solución salina
5 1:2000 3 ml de dilución 1:1000 + 3 de solución salina
6 1:4000 3 ml de dilución 1:2000 + 3 de solución salina
7 1:8000 3 ml de dilución 1:4000 + 3 de solución salina
2da. PARTE TITULACION DE PRECIPITINAS

Dilución 1:10 1:100 1:500 1:100 1:2000 1:4000 1:8000

0
Número del tubo 1 2 3 4 5 6 7
Dilución de .25 ml .25 ml .25 ml .25 ml .25 ml .25 ml .25 ml
albumina
Antisuero .25 ml .25 ml .25 ml .25 ml .25 ml .25 ml .25 ml

PROCEDIMIENTO:

1. Preparar dilciones como lo indica l primera parte de nuestra tabla de

titulación de precipitinas.
2. Preparar del tubo #0 ageagando .25 de suero testigo en lugar del
antisuero.
3. Del tubo 1 de la dilución 1:10 paso .25 de la solución de albumina a mi
tubo #1 de la 2da parte y agreago .25 ml de antisuero.
4. Del tubo 2 de la dilución 1:100 paso .25 de la solución de albumina a mi
tubo #2 de la 2da parte y agrego .25 ml de antisuero.
5. Del tubo 3 de la dilución 1:10 paso .25 de la solución de albumina a mi
tubo #3 de la 2da parte y agrego .25 ml de antisuero.
6. Del tubo 4 de la dilución 1:10 paso .25 de la solución de albumina a mi
tubo #4 de la 2da parte y agrego .25 ml de antisuero.
7. Del tubo 5 de la dilución 1:10 paso .25 de la solución de albumina a mi
tubo #5 de la 2da parte y agrego .25 ml de antisuero.
 8. Del tubo 6 de la dilución 1:10 paso .25 de la solución de albumina a mi
tubo #6 de la 2da parte y agrego .25 ml de antisuero.
9. Del tubo 7 de la dilución 1:10 paso .25 de la solución de albumina a mi
tubo #7 de la 2da parte y agrego .25 ml de antisuero.
10. Mezclar
11.agitar
12.Encubar a 55º C por 15 minutos
13. Centrifugar 5 minutos a 2500 rpm
14.Observar precipitado
15. Reportar el título máximo al que se observe el precipitado.

TITULACION DE PRECIPITINAS
1. Se preparan los 7 tubos de la primera parte como lo indica nuestra tabla
de titulación de precipitina, teniendo cuidado de tomar la cantidad
exacta y del tubo correspondiente.
2. Preparar el tubo # 0, poniendo .25 de suero testigo (del primero que se
saco) y .25 del tubo #1 de la primera parte.
3. Preparar los 7 tubos de la 2 parte en los que podremos .125 de suero
hiperhimune (el ultimo que se saco) y .25 del tubo correspondiente, del
tubo 1 de la primera parte al tubo 1 de la segunda parte, del tubo 2 de la
primera parte al tubo 2 de la segunda parte, y asi hasta llegar al #7.
4. Agitar 5 minutos
5. Incubar 15 minutos a 55ºC
6. Centrifugar 5 minutos a 2500 rpm
7. Reportar precipitación.
 1ra PARTE TITULACION DE AGLUTININAS

Numero Antisuero Tomar solución Tomar solución Dilución

del tubo buffer
1 .5 ml 1:100
2 .5 ml .5 ml 1:200
3 .5 ml 1 ml .5 ml pasar al tubo 6 1:300
4 .5 ml 1.5 ml .5 ml pasar al tubo 7 1:400
5 .5 ml 2 ml .5 ml pasar al tubo 8 1:500
6 .5 ml .5 ml pasar al tubo 9 1:600
7 .5 ml .5 ml pasar al tubo 10 1:800
8 .5 ml 1:1000
9 .5 ml 1:1100
10 .5 ml 1:1600

2da PARTE TITULACION DE AGLUTININAS

Numero del tubo Dilución Dilución de Eritrocitos al 2% Solucion buffer

antisuero
1 1:100 .2 ml .2 ml .4 ml
2 1:200 .2 ml .2 ml .4 ml
3 1:300 .2 ml .2 ml .4 ml
4 1:400 .2 ml .2 ml .4 ml
5 1:500 .2 ml .2 ml .4 ml
6 1:600 .2 ml .2 ml .4 ml
7 1:800 .2 ml .2 ml .4 ml
8 1:1000 .2 ml .2 ml .4 ml
9 1:1100 .2 ml .2 ml .4 ml
10 1:1600 .2 ml .2 ml .4 ml

PROCEDIMIENTO:

1. Inactivar el complemento (quitar el complemento alrededor de la

membrana) poniendo el suero que esta en el vial dentro de un vasi
de precipitado por 15 minutos a 56º C ( cambiara de color )
Checaremos temperatura con termómetro.
2. Preparar dilución 1:100, 4.95 de slucion buffer y 0.005 de antisuero
este será nuestro tubo #X
3. Tomar .5 ml del tubo X e introducirlo en el tubo 1
4. Tomar .5 ml del tubo X mas .5 ml de solución buffer e introducirlo en
el tubo 2
5. Tomar .5 ml del tubo X mas 1 ml de solución buffer e introducirlo en
el tubo 3
6. Tomar .5 ml del tubo X mas 1.5 ml de solución buffer e introducirlo
en el tubo 4
7. Tomar .5 ml del tubo X mas 2 ml de solución buffer e introducirlo en
el tubo 5
8. Del tubo 3 tomaremos .5 ml y los pasaremos al tubo 6 al que le
pondremos también .5 de solución de buffer
9. Del tubo 4 tomaremos .5 ml y los pasaremos al tubo 7 al que le
pondremos también .5 de solución de buffer
 10.Del tubo 5 tomaremos .5 ml y los pasaremos al tubo 8 al que le
pondremos también .5 de solución de buffer
11.Del tubo 6 tomaremos .5 ml y los pasaremos al tubo 9 al que le
pondremos también .5 de solución de buffer
12.Del tubo 7 tomaremos .5 ml y los pasaremos al tubo 10 al que le
pondremos también .5 de solución de buffer

2da PARTE

1. Tomar .2 ml de suerotestigo, mas .2 de eritrocitos al 2% y .4 de solución

buffer que será nuestro tubo 0
2. Tomar .2 ml de eritrocitos al 2% y .4 de solución buffer e introducir la
misma cantidad en los 10 tubos
3. .2 ml del tubo 1 de la 1ra parte al tubo 1 de la 2da parte.
4. .2 ml del tubo 2 de la 1ra parte al tubo 2 de la 2da parte.
5. .2 ml del tubo 3 de la 1ra parte al tubo 3 de la 2da parte.
6. .2 ml del tubo 4 de la 1ra parte al tubo 4 de la 2da parte.
7. .2 ml del tubo 5 de la 1ra parte al tubo 5 de la 2da parte.
8. .2 ml del tubo 6 de la 1ra parte al tubo 6 de la 2da parte.
9. .2 ml del tubo 7 de la 1ra parte al tubo 7 de la 2da parte.
10. .2 ml del tubo 8 de la 1ra parte al tubo 8 de la 2da parte.
11. .2 ml del tubo 9 de la 1ra parte al tubo 9 de la 2da parte.
12. .2 ml del tubo 10 de la 1ra parte al tubo 10 de la 2da parte.
13. Se agitan 5 minutos
14.Se incuban por 15 minutos a 55ºC
15. Centrifugar a 2500 RPM durante 5 minutos
 16.Reportar el título de la aglutinación que se observe en el ultimo tubo (la
aglutinación de aran los eritrocitos)

RESULTADO:

Después de haber trabajado las inoculaciones con el conejo, el momento de

saber la verdad había llegado, era el dia de la titulación y realizamos todo el
protocolo correspondiente para hacer la titulación, después de centrifugar
verificamos si el trabajo realizado en estas semanas había sido el correcto, al
finalizar todo, pudimos percatar que nuestro trabajo salió bien. El complejo
insoluble que esperábamos se formo en los 7 tubos. En conclusión, el equipo
trabajo bien, inoculando los días que debíamos, administrando la dosis
correcta e inmunizado por la via qe se debió.