BANCO DE SANGRE

TO HELP
 PRESENTADO POR
ANNIA VALDEZ
(100312693)
CRISTINA INORKA CID
(100203900)
DEYANIRA PERALTA
(100513942)
MARIA ESTHER VASQUEZ
(100370246)
ANA ALMONTE
(100374454)
ILIANA MARCELINO
(100479467)
ROSA YRIS RODRIGUEZ
(100413317)
YOAN CORDERO
(100471524)

KAREN JOSELIN CUEVAS

(100343410)
INDICE
I. Introducción.
II. Misión, Visión y valores.
III. Objetivo.
IV. Reglamentos y ley para banco de sangre. V. Bioseguridad.
VI. Criterio de selección del personal.
VII. Documentación y registro.
VIII. Calidad en el banco de sangre incluyendo el personal.
IX. Normas generales de bioseguridad.
X. Recomendaciones para la educación y selección de donantes
potenciales.
XI. Productos y hemoderivados que ofrecerán.
XII. Los formularios que poseen un banco de sangre.
XIII. Técnica y procedimientos de las pruebas incluyendo prueba NAT.
XIV. Bibliografía.
 Introducción
Un banco de sangre es el lugar donde se almacenan y procesan sangre y
componentes sanguíneos. Los bancos de sangre se localizan tanto en los
centros de transfusión como en los servicios de transfusión hospitalarios.
Los bancos de sangre trabajan gracias a la donación altruista de sangre,
cuyas muestras en su mayoría son separadas mediante el proceso de
fraccionamiento, etiquetado y tipificación en los centros de transfusión, dando
lugar a los distintos componentes, para después ser congeladas como es el
caso del plasma, o refrigeradas a sus correspondientes temperaturas, como es
el caso de concentrados de hematíes y plaquetas.
 Misión
Ofrecerle un servicio de calidad, con un personal de alta capacidad de estudio,
para una confiabilidad de resultados de un 100%.

Visión
Siempre estar dentro de los primeros laboratorios en estar actualizado, para
brindarle todos los mejores componente de sangre, con una credibilidad
intacta, y con un alto alcance para todas la población.

Valores
 -Honestidad
 -Integridad
 -Solidaridad
 -Responsabilidad
 -Confidencialidad
 -Trabajo en equipo
 -Respecto
 -Dedicación
 Objetivo
Obtener grandes desempeños en todos los procesos que
vamos realizar en el laboratorio, con un personal altamente
capacitado, y una entrega de resultado rápido y confiable.
LEY Y REGLAMENTOS PARA BANCO
DE SANGRE
 La Ley General de Salud No. 42- 01, de fecha 8 de marzo del
2001 establece que toda persona tiene derecho a recibir
servicios de salud seguros y de calidad en base a normas y
criterios previamente establecidos.

 ARTICULO 14.- Reconocimiento. La SESPAS a través de la

Unidad Técnica y Normativa de los Bancos de Sangre y
Servicios de Transfusión reconocerá́ públicamente o por medio
de una certificación especial a aquellos Bancos de Sangre o
Servicios de Transfusión que cumplieran satisfactoriamente con
las especificaciones contenidas en los formularios de
supervisión e inspección que se diseñen para este propósito.

 ARTICULO 20.- Dirección y personal técnico de los Bancos de

Sangre. Todos los Bancos de Sangre deben contar con los
servicios de un director Médico y un director técnico. Además
del personal administrativo deberán contar con suficiente
personal profesional técnico debidamente calificado y
adiestrado en todos los procedimientos y técnicas analíticas
propias de estas categorías de servicios. Este personal
profesional debe ser graduado de Licenciatura en Bioanálisis y
tener el entrenamiento apropiado para su desempeño en estas
categorías de servicios o puede ser otro profesional de la salud
con la acreditación y competencia académica en el área
demostrada para ejercer sus funciones.
 BIOSEGURIDAD
 Mantener el lugar de trabajo en óptimas condiciones de higiene y aseo.

 No fumar, beber y comer cualquier alimento en el sitio de trabajo.

 No guardar alimentos, ni sustancias contaminantes o químicos en las

heladeras ni en los equipos de refrigeración.

 Manejar a todo paciente / dador como potencialmente infectado.

 Lavarse cuidadosamente las manos antes y después de cada

procedimiento, o si se tiene contacto con material patógeno y después
del contacto con pacientes o donantes.

 Utilizar sistemáticamente guantes de látex en la manipulación de

elementos biológicos, instrumental o equipo contaminado.

 Los guantes deben estar limpios, pero no es necesario que siempre

estén estériles.
Criterio de selección del personal
Los criterios de selección incluyen la experiencia, capacidades, atributos
personales, calificaciones, conocimientos y habilidades necesarias para
desempeñarte bien en un empleo.
Los criterios de selección pueden ser muy amplios y, por lo tanto, bastante
abrumadores. Intenta dividir los criterios en secciones, de manera que puedas
concentrarte en responder partes breves y no un gran ensayo.
El personal y los profesionales de los bancos de sangre se ven expuesto a
peligros biológicos, químicos Y en algunos casos, también a radiaciones
solares cuando se irradian hemocomponentes para transfusiones en
oncohematología.
CALIDAD EN EL BANCO DE SANGRE INCLUYENDO
EL PERSONAL
El sistema de aseguramiento de la calidad debe asegurar que todos los

procedimientos considerados críticos, tales como la adquisición de materia

prima, materiales de inicio, selección de donantes, extracción de sangre,

preparación de hemocomponentes, conservación, estudios de laboratorio,

distribución y medidas de control de calidad asociadas están especificadas

en instrucciones apropiadas y son realizadas de acuerdo con los principios

de buenas prácticas así como cumplir con la normativa legal vigente

establecida por la Autoridad Sanitaria Competente. El control de calidad de

células empacadas, plasma fresco congelado y plaquetas cuando el

número de unidades producidas de estos componentes supera las 400

unidades mes, se debe llevar a cabo en por lo menos el 1% de estas

unidades, cuando la producción es inferior a este valor el control de calidad

se realizará a 4 unidades mensuales. El control de calidad de los diferentes

tipos de tarjetas, así como las pruebas rápidas e inmucoombs se debe

realizar cada vez que se utiliza una nueva caja o paquete de pruebas. El

control de calidad para equipo: microcentrífuga, refrigerador, baño de

maría e incubadora de tarjetas y del material lavado debe de realizar una

vez por semana para poder garantizar la eficiencia y eficacia en los

resultados.
Control de calidad: Generalidades

Preparación de componentes sanguíneos:

 Los servicios de sangre definirán, establecerán y documentarán

procedimientos para la preparación de componentes, siguiendo
las buenas prácticas de manufactura. La preparación de
componentes se realizará en ambientes de temperatura
controlada.

Plazos de procesamiento de unidades de sangre:

 Los Bancos de sangre definirán los plazos de elaboración de

componentes de acuerdo con las condiciones de colecta,
transporte y almacenamiento previo al procesamiento de las
unidades de sangre.

Pruebas a la sangre del donante:

 Los servicios de sangre examinaran como mínimo cada donación

para:
 El grupo ABO y el factor Rh
 Anti-VIH I+II (para el virus de la inmunodeficiencia adquirida)
 AgHBs (para el virus de la hepatitis B)
 Anti VHC (para el virus de la hepatitis C)  Anti-Tripanosoma
cruzi

Recolección o preparación:

 Al recolectar sangre completa o un componente sanguíneo, la

bolsa debe estar etiquetada de conformidad con los requisitos
que se han diseñado para asegurar:
 Manejo, preparación y conservación apropiadas de la unidad.
 Investigación de reacciones adversas en pacientes
transfundidos.
 Inclusión de información requerida en la bolsa final
Bolsa final:

 La bolsa final deberá estar etiquetada de conformidad con los

requisitos que están diseñados para asegurar.

Conservación y manejo apropiados de la unidad:

 Selección de la unidad para un paciente en particular.

 Instrucciones para el transfusionista.
 Investigación de reacciones adversas en el paciente
transfundido.

Entrega de sangre para transfusión:

 La sangre asignada a un paciente específico para transfusión

deberá además estar etiquetada con:
 Nombres, apellidos y número de identificación del receptor.
 Grupo ABO y factor Rh del receptor.
 Numero de la unidad.
 Fecha de realización e interpretación de las pruebas de
compatibilidad.

Control de equipos, inspección de mediciones y exámenes:

 Determinar las medidas que se harán y la precisión requerida y

seleccionarán el equipo de inspección.
 Identificar el equipo de inspección, medir y calibrarlo y ajustarlo,
antes de su uso y a intervalos establecidos.
 Mantener los registros de inspección, medición y exámenes
adecuadamente.
 Hay que asegurar que las condiciones ambientales son
apropiadas.
 Proteger y mantener los equipos para que no sufran desajustes
que invaliden su punto de calibración.
 Asegurar el buen manejo, preservación y almacenamiento del
equipo.
  Hay que asegurar que exista un procedimiento para la corrección
de la calibración que estén fuera de los valores establecidos.
 Procedimiento que verifique las especificaciones del fabricante
del insumo y lo cumplan.

La información en las etiquetas debe incluir:

 Identificación de la institución recolectora.

 Identificación numérica o alfanumérica de la unidad.
 Tipo, volumen o cantidad del componente sanguíneo.
 Tipo y volumen de anticoagulante.
 Grupo ABO y tipo Rh y anticuerpos irregulares.
 Fecha de recolección.
 Resultado de las pruebas de tamizaje de marcadores
infecciosos. Fecha de caducidad (hora, cuando sea apropiado).
 NORMAS GENERALES DE
BIOSEGURIDAD
Manual de bioseguridad

La organización del sistema de bioseguridad (establecimiento de normas y

reglamentos) en los servicios de sangre, deben contar con un manual de

bioseguridad que comprenden un conjunto de medidas de prevención y

control, encaminadas a garantizar la seguridad.

Estas medidas deberán operar sobre:

 El personal.
 Infraestructura e instalaciones.
 Manejo del material de trabajo.
 Manipulación de microorganismos infectantes.
 Transporte del material o sustancias infecciosas.
 Accidentes o exposiciones a materiales contaminantes.
 Sobre las personas ajenas que ingresan al servicio. ➢ Los que
retiran todo tipo de desechos del servicio. ➢ Registro e Informe
de accidentes laborales.

Las normas de bioseguridad que se debe implementar en un banco de

sangre son:

 Mantener el lugar de trabajo en óptimas condiciones de higiene y

aseo.

 No fumar, beber y comer cualquier alimento en el sitio de trabajo.


No guardar alimentos, ni sustancias contaminantes o químicos en
las neveras ni en los equipos de refrigeración.

 Manejar a todo paciente o donador como potencialmente infectado.

 Lavarse cuidadosamente las manos antes y después de cada
procedimiento, o si se tiene contacto con material patógeno y
después del contacto con pacientes o donantes.
 Utilizar sistemáticamente guantes de látex en la manipulación de
elementos biológicos, instrumental, equipo contaminado o contacto
con paciente.

 Usar guantes estériles o de látex. Una vez usados los guantes

deben ser descartados como residuos patológicos, después de
haber retirados los guantes debe hacer lavado de manos.

 Absténgase de tocar con las manos enguantadas alguna parte de

su cuerpo y de manipular objetos diferentes a los requeridos

durante el procedimiento.

 Emplee mascarillas y protectores oculares, batas o cubiertas

plásticas en procedimientos que puedan generar salpicaduras,

gotitas, aerosoles, durante la estancia por el banco de sangre.

 Evite deambular con los elementos de protección personal por otros

lugares que no sean los de su trabajo.

 Mantenga los elementos de protección personal en óptimas

condiciones de aseo, en un lugar seguro y de fácil acceso.

 Evite la atención directa de pacientes y donantes si el personal

presenta lesiones exudativas o algún otro tipo de lesión o herida en
la piel.

 Desinfectar y limpiar las superficies y los equipos de trabajo, en

caso de contaminación.

 Mantenga actualizados su esquema de vacunación de hepatitis B.

 Las mujeres embarazadas que trabajen en bancos de sangre

deberán ser muy estrictas en el cumplimiento de las normas de
bioseguridad, de ser posible deben ser reubicadas en áreas de
menor riesgo.

 Aplique en todo procedimiento las normas de asepsia necesarias.

 Utilice las técnicas correctas en la realización de todo
procedimiento.
 Manipular, transportar y enviar las muestras en recipientes seguros,
con tapa y rotulación adecuada.
 Maneje con estricta precaución los elementos cortopunzantes y
dispóngalos o deséchelos en recipientes a prueba de
perforaciones.

 No cambie elementos cortopunzantes de un recipiente a otro.

 Evite desenfundar manualmente la aguja de la jeringa (pinzas)


Absténgase de colocar el protector a la aguja con la mano, sino
que se debe piscar.

 No reutilizar el material contaminado como agujas, jeringas, etc.


Los recipientes para transportes de muestras: de material
irrompible y cierre hermético e identificarse como material biológico.


Todo el material patógeno debe ser colocados en bolsas
resistentes de color rojo que son paras residuos patológicos o
desechos contaminantes.


Descartar los contenidos de las bolsas de sangre agregando
hipoclorito de sodio al 10% durante 30 minutos. Posteriormente
deséchelas en una bolsa plástica roja.


Realizar los procedimientos empleando las técnicas correctas para
minimizar el riesgo de aerosoles, salpicaduras o derrames. Utilice
las centrífugas con las tapas cerradas.


Usar pipetas descartables para evitar cualquier riesgo de
contaminación oral.

 Evitar insuflar aire en un líquido que contenga agentes infecciosos.


No mezclar el material infeccioso aspirando e insuflando
alternativamente a través de una pipeta.
 No se debe expulsar a la fuerza material infeccioso de una pipeta.


 Pipetas usadas: descartar previa desinfección (hipoclorito de sodio

al 10%, 30 min) en bolsas de color rojo de residuos patológicos.

Tubos de ensayo con sangre en coágulo: desinfección con
hipoclorito de sodio al 10%, 30 min – desechar el contenido –
lavado y esterilización con calor seco
 Durante el trabajo, conservar las puertas del banco de sangre
cerradas y evitar el ingreso de personas ajenas al área, si esto
ocurre éstas deben ser informadas sobre los posibles riesgos y
deberán cumplir con las normas exigidas dentro del laboratorio.
Recomendaciones para la educación
Personal de salud que labora en Bancos de Sangre:

Informar al donante potencial sobre la importancia de donar sangre segura;

proporcionar además información acerca de las infecciones trasmisibles

por transfusión como la hepatitis B (VHB), hepatitis C (VHC), el Virus de

Inmunodeficiencia Humana (VIH), T. Cruzi, y malaria.

La selección de donantes:

Es uno de los procesos más importantes para proteger la seguridad de la

sangre, comprende desde la captación de la población que tiene la

intención de donar, hasta la venopunción que permitirá la recolección de la

sangre. La aceptabilidad de los donantes debe ser determinada por un

médico o profesional en laboratorio clínico capacitados en banco de

sangre.

Este proceso aporta el mayor porcentaje de seguridad de la sangre

colectada, complementándose con las pruebas de tamizaje normadas, que

se efectúan de rutina en todas las unidades de sangre. El propósito

principal es determinar si el donante potencial goza de buena salud, a fin

de proteger al “receptor”.

Los donantes deben comprender la información que se les proporciona, a

fin de que la donación sea una decisión informada.

Las preguntas de la historia médica deben ser hechas por un profesional

de la salud, además, el donante debe de estar consciente para responder

con veracidad.
Información del donante:

En la sala de atención de usuarios del Banco de Sangre de cada

institución, la persona asignada, debe dar la bienvenida, generar un

espacio de comodidad y confianza a los pre donantes. Para lo cual deberá

Presentarse.

Informar sobre el proceso de donación y los pasos por seguir para completar

dicho proceso, los cuales son:

Entrega de documento de identidad:

Se debe explicar que la donación es un proceso que requiere de un respaldo

legal, que es necesario portar el documento de identidad personal o

pasaporte, en el caso de extranjeros, para identificar al donante. Así también,

es necesario firmar el consentimiento informado, para hacer constar que la

persona ha comprendido la información brindada, de acuerdo con el Anexo

N.º 2.

Asignación del turno:

Se le asignará un turno de acuerdo con el orden de llegada.

Registro de datos:

Tiene como objetivo documentar la donación y crear el registro del donante.

Los donantes potenciales deben encontrarse en buen estado de salud el

día que donan sangre. Un individuo que está enfermo o que se está

recuperando de una enfermedad reciente, puede sufrir consecuencias

adversas en la donación debido a que fisiológicamente no está apto para

donar.
Productos y hemoderivados que
ofrecemos

 Sangre total
 Paquete Globular
 Plasma
 Concentrado de plaqueta
 Crioprecipitado
 Albuminas
 Inmunoglobulina
Formularios que poseen un banco de
sangre
Técnica y procedimientos de las
pruebas incluyendo prueba NAT.

Tipificación: Determinación de Sistema

ABO y Rho
Fundamento: Se basa en la interpretación de los antígenos presentes en la
superficie de la membrana celular eritrocitaria presentes en la muestra
sanguínea con su anticuerpo correspondiente contenido en el antisuero
comercial hemo clasificador, presentando aglutinación visible, lo que evidencia
una reacción positiva que indica la presencia del antígeno correspondiente al
anticuerpo contenido en el antisuero usado en cambio sí hay ausencia del
antígeno correspondiente no habrá aglutinación visible ósea la prueba es
negativa para ese antígeno que no está presente en las células eritrocitaria de
esa muestra.

Reactivos:

 Antisuero anti-A

 Antisuero anti-B

 Antisuero anti-AB

 Antisuero anti-D

 Células A y B al 5%

Método:

 Aglutinación en tubo
Medio de

Conservación:

Solución salina al

09%

MaterialeS

 Tubos de ensayo 12 X 75mm

 Goteros, Gradilla
 Lápiz marcador
 Centrifuga serofuge
 Lámpara de visualización
 Baño de María

Muestra: Sangre sin anticoagulante

Procedimiento:

1. Centrifugar la sangre problema

2. Rotular los tubos y separar el suero
3. Depositar de 4 a 5 gotas de sangre en un tubo rotulado de 12 x 75 mm
lavar 3 veces por (Tiempo óptimo de la centrifugación) y luego separarlas
al 5% en solución salina, Y luego preparar estas células al 5%.
4. Rotular 7 tubos de la siguiente manera: D, A, B, AB, AC, CA, Y CB
5. Depositar en el tubo D una gota de los hematíes lavado al 5%, una gota
de anti-D, una gota de albúmina bovina al 22%, incubar a 37º Celsius por
15 minutos.
6. Depositar una gota de suspensión de hematíes problemas al 5% en los
tubos A, B, AB, AC.
7. Depositar en los tubos marcados CA y CB dos gotas del suero de la
sangre problema.
8. Agregar:
• En el tubo marcado A una gota de anti-A
 • En el tubo marcado B una gota de anti-B
• En el tubo marcado AB una gota de anti-AB
• En el tubo marcado AC una gota del suero problema

9. En el tubo marcado CA y CB Una gota de la suspensión de células a y

una gota de suspensión de células b Respectivamente.
Centrifugar todos los tubos: D, A, B, AB, AC, CA, Y CB por el TOC (Tiempo
óptimo de centrifugación) a 3400 RPM y leer.
DETERMINACION DE VARIANTE D
DEBIL
Fundamento:

Se fundamenta en determinar la expresión débil del antígeno D normal,

es decir, la menor concentración de antígeno D por glóbulos

rojos.

Objetivo:

Investigar la presencia o ausencia del antígeno D débil en personas Rho

negativas.

Tipo de muestra:

Hematíes Rho negativo

Reactivos:

 Anti-Rho o anti-D
 Albúmina bovina el 22%
 Antiglobulina humana
 Células Rho positivas al 5% (control positivo)  Células Rho
negativo al 5% (control negativo)  Células control de Coombs
Materiales y Equipos:

 Tubos de ensayo 12 X 75 mm
 Baño de María
 Lámpara de visualización
 Goteros
 Gradillas
Método:

Aglutinación en tubo

Medio de Conservación:

Solución salina al 09%

Procedimiento:
1. Identificar 3 tubos 12 x 75mm: (1 muestra(M), (2control positivo (CP), (3
control negativo (CN).
2. Preparar suspensiones al 5% de las células rojas de los hematíes Rho
negativos (lavando las muestras de la manera ya conocida).
3. Depositar:
 En el tubo M una gota de anti-Rho y una gota de albúmina bovina el
22%.
 En el tubo CP una gota de anti-Rho.
 En el tubo CN una gota de albúmina bovina al 22%.
4. Añadir al tubo marcado M dos gotas de suspensión de los hematíes en
prueba (Rho negativo) al 5%.
5. Añadir al tubo CP dos gotas de suspensión de células Rho negativo al 5%
al (control positivo).
6. Añadir al tubo CN dos gotas de suspensión de células Rho negativo al 5%
al control negativo).
7. Mezclar el contenido con todos los tubos y llevar al baño de María a 37ºC
por 15 minutos.
8. Lavar todos los tubos 3 veces por un minuto y en el último lavado secar
bien toda la solución Salina.
9. Añadir una gota de antiglobulina humana a cada tubo y centrifugar por un
minuto observar en busca de aglutinación y comparar las muestras con los
controles positivos y negativos para luego reportar.
PRUEBA DE COMPATIBILIDAD
SANGUINEA
Principio

Garantiza la ausencia de anticuerpos séricos del paciente, capaces de

reaccionar con los antígenos de los glóbulos rojos transfundidos.

La prueba de compatibilidad es una prueba te suma importancia

para para la realización de transfusiones sanguíneas y su finalidad

es detectar la presencia de reacciones antígeno anticuerpo en esta

prueba no se detectan errores sistemáticos del sistema Rho.

Partes de la prueba de compatibilidad sanguínea

La prueba de compatibilidad debe ser realizada con un gran cuidado antes de

administrar la sangre para transfusiones ésta consta de 2 partes.

 Prueba cruzada mayor: En ésta el suero del receptor

es enfrentado con las células del donante en varias
fases y detectan anticuerpos en los sueros del receptor
que puedan dañar los glóbulos rojos que va a recibir.
 Prueba cruzada menor: En ésta el suero del donante
es enfrentado con los glóbulos rojos del receptor, y
detectamos anticuerpos en el suero del donante contra
los antígenos de baja frecuencia.

Las fases de la prueba de compatibilidad:

1. Fase salina o temperatura ambiente: Detectan errores del sistema

ABO.
2. Fase albuminoidea: Ayuda a la mejor unión de los hematíes
disminuyendo el potencial Z.
3. Fase térmica o de incubación: Proporciona la temperatura necesaria a
los anticuerpos de tipo IgG.
4. Fase antiglobulina: Detecta anticuerpos irregulares.
Tipo de muestra:

 Sangre sin anticoagulante del donante

 Sangre sin anticoagulante del paciente o receptor Recolección y
condición de la muestra:
 Tomar dos tubos diferentes, debidamente rotulados 5ml de
sangre sin anticoagulantes del receptor y el donante.  Dejar
retraer el coágulo.

Reactivos:

 Antiglobulina humana o suero Coombs

 Albúmina bovina al 22%
 Solución salina al 0.9%
 Células control de Coombs

Método: Aglutinación en tubo

Materiales y Equipos:

 Tubos 12 x 75mm
 Gradilla
 Goteros
 Baño de María
 Microscopio
 Lámpara de visualización

Procedimiento:

1. Centrifugar la muestra del donante y el paciente.

2. Separar el suero de las células en tubos rotulados correctamente
(suero de paciente (SP) Y las del donante (CD) respectivamente).
3. En tubos identificados células del paciente (CP) y células del donante
(CD) agregar de 5-10 gotas de células de cada uno, lavar 3 veces por
un minuto y preparar al 5% en solución salina.
4. Rotular 3 tubos cruce mayor(C+) Cruce menor (C-) y autocontrol (AC).
Fase salina o temperatura ambiente:

1. En el tubo rotulado cruce mayor(C+) deposite una gota de células del

donante al 5% en solución salina y dos gotas de suero del paciente
(SP/CD).
2. En el tubo rotulado cruce menor(C-) deposite una gota de células del
paciente al 5% en solución salina y dos gotas de suero del donante
(SD/CP).
3. En el tubo rotulado autocontrol (AC) deposite una gota de células del
paciente al 5% en solución salina y dos gotas de suero del del paciente
(SP/CP).
4. Centrifugar los 3 tubos a 3400 RPM durante un minuto re suspender y
observar en busca de aglutinación o hemólisis

Fase albuminoidea:

1. Agregar a los 3 tubos una gota de albúmina bovina al 22% o 33%

2. Centrifugar los 3 tubos a 3400 RPM durante un minuto re suspender y
observar en busca de aglutinación o hemólisis

Fase térmica o de incubación:

1. Incubar los 3 tubos a 37º Celsius durante 15-60 minutos
2. Centrifugar los 3 tubos a 3400 RPM durante un minuto fue suspender y
observar en busca de aglutinación o hemólisis.

Fase antiglobulina:

1. Lavar los tubos 3 veces con abundante solución salina al 9%

decantando bien el último lavado
2. Agregar a todos los tubos una gota de suero de antiglobulina humana
centrifugar a 3400 RPM durante un minuto y leer en busca de
aglutinación o hemólisis (leer en el microscopio).
3. Si no aparece aglutinación o hemólisis agregarle una gota de células
control de Coombs y deben aglutinar de lo contrario repetir todo el
procedimiento.
PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA (PAD)
Principio

La prueba de antiglobulina directa (PAD): Se fundamenta en detectar la

presencia de las células rojas revestidas o sensibilizadas de anticuerpos, a
través de una reacción antígeno anticuerpo. esto significa que la fijación de los
anticuerpos sobre los eritrocitos ocurrió invito.
Tipo de muestra: Sangre sin anticoagulante
Recolección y condición de la muestra:
▪ Tomar en un tubo sin anticoagulante 5ml de sangre. Dejar en reposo hasta
que se extraiga el coágulo Y conservar de 2 a 8º Celsius no más de 72 horas
Reactivos:

▪ Suero antiglobulina humana o suero de Coombs

▪ Solución salina al 0.9%
▪ Células control de Coombs

Método: Aglutinación en tubo

Materiales y equipos

 tubos 12 x 75mm
 gradilla
 goteros
 microscopio
 lámpara de visualización

Procedimiento:

1. Resuspender la muestra en su propio suero y depositar en un tubo,

previamente rotulado, de 5 a 10 gotas. lavar los hematíes 3 veces con
solución salina al 0.9% y preparar una suspensión de eritrocitos al 5%.
2. Rotular un tubo 12 x 75 mm y agregar una gota de suspensión.
3. Lavar cuatro veces la solución salina decantar bien el último lavado y
secar.
4. Agregar una gota de suero antiglobulinico, Mezclar y centrifugar a 3400
RPM por un minuto.
5. Resuspender y leer en busca de aglutinación.
 6. Verificar el resultado si es negativo agregar una gota de células control
de Coombs a los tubos negativos sin anticoagulante, centrifugar y
observar la aglutinación si no hay aglutinación debes repetir la prueba.
7. Cuando el resultado es positivo no se agrega las células control de
Coombs.

PRUEBA DE ANTIGLUBULINA
INDIRECTA (PAI)
Principio

La prueba de antiglobulina indirecta (PAI): Se fundamenta en determinar la

presencia de anticuerpos irregulares circulantes, a través de una reacción

antígeno-anticuerpo, estos anticuerpos irregulares reaccionan invitó con el

correspondiente antígeno.

Tipo de muestra: Sangre sin anticoagulante.

Recolección y condición de la muestra:

Tomar en un tubo sin anticoagulante 5ml de sangre, dejar en reposo hasta que
se retraiga el coágulo.

Reactivos:

 Células antígenos conocidas (selectogeno I y II)

 Antiglobulina humana o suero de Coombs
 Albúmina bovina al 22%
 Solución salina al 0.9%

Método: Aglutinación en tubo

Materiales y equipos

 Tubos 12 x 75mm
 Gradilla
 Goteros
  Lámpara de visualización

Procedimiento:

1. Centrifugar la sangre a 3400 RPM 5 minutos y separe el suero en el

tubo debidamente identificado.
2. Macera el coágulo y depositar 5 gotas en el tubo previamente rotulado,
lavar 3 veces con solución salina 0.9% y preparar al 5%
3. Rotule 3 tubos de la siguiente manera:

 I-A qué significa células I en albúmina

 II-A qué significa células II en albúmina
 AC-A qué significa células Autocontrol en albúmina
4. Agregar una gota de selectogeno I al tubo rotulado I-A Y una gota de
selectogeno II al tubo marcado II-A.
5. Añada una gota de suspensión de eritrocitos del paciente al tubo AC-A.
6. Añadir dos gotas de suero del paciente a los 3 tubos.
7. Coloque todos los tubos a temperatura ambiente por 15 minutos,
mezcle centrifugue y noté los resultados (fase salina).
8. Agregar dos gotas de albúmina bovina a todos los tubos mezcle
centrifugue a 3400 RPM por minuto, lea y a nosotros los resultados
(fase albuminoidea).
9. Coloque los tubos al baño de María a 37º Celsius de 15 a 60 minutos
(fase térmica).
10. Al finalizar la incubación centrífuga los 3 tubos, lea y anote los
resultados.
11. Lavar los 3 tubos con solución salina al 0.9% decantar bien el último
lavado y secar.
12. Agregar a cada 1 de los tubos una gota de antiglobulina humana (fase
antiglobulina).
13. Centrifugar, leer y anotar los resultados.
14. Si es negativo agregar una gota de células control de Coombs a los
tubos negativos sin aglutinación, centrífuga y observar la aglutinación si
no hay aglutinación debes repetir la prueba.
15. Cuando el resultado es positivo no se le agrega la solución control de
Coombs.
PRUEBA NAT
Se basa en la amplificación de la secuencia genética que se quiere detectar

para su posterior revelado. Consta de tres pasos: extracción de los ácidos

nucleicos, amplificación y detección de las aplicaciones.

Las pruebas de ácido nucleico (NAT):

Buscan el virus mismo en la sangre e implican extraer sangre de una vena. La

prueba puede indicar si la persona tiene el VIH o la cantidad de virus presente

en la sangre (se conoce como prueba de carga viral de

VIH).

En los pacientes sintomáticos, durante los primeros 7 días de enfermedad,

toda muestra de suero debe someterse a una prueba de ácido nucleico (NAT)

y una prueba de anticuerpos IgM, ya que ambas pruebas pueden realizarse en

suero.

Realizar ambas pruebas puede detectar más casos que si se realiza solo una.

Después del séptimo día, pocos casos se pueden detectar con la prueba NAT.

Tipos de muestras

Suero
Plasma
Sangre entera
Líquido cefalorraquídeo

Las muestras de suero han sido las más ampliamente validadas. La

sensibilidad relativa del suero, el plasma y la sangre entera no está bien
documentada. En ocasiones se ha detectado el virus del dengue en líquido
cefalorraquídeo.
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