INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIÓLOGICAS

INGENIERÍA BIOQUÍMICA
LABORATORIO DE BIOQUÍMICA Y METABOLISMO MICROBIANO

PRÁCTICA 4

Oxidación de Azufre y Ión

Ferroso por bacterias
Quimiolitotróficas
GRUPO 5IM1
 LAS CÉLULAS
Las células requieren un mínimo de nutrientes: Fuente externa de
carbono, hidrógeno, oxígeno, fósforo y azufre, mas otros iones inorgánicos.

Fuente de carbono:
Organismos heterótrofos: Organismos autótrofos:
Obtienen carbono fijado Utilizan compuestos inorgánicos como
exclusivamente a partir de moléculas fuente de carbono para fabricar
orgánicas ya preformadas por otros moléculas orgánicas (Fijación de
organismos. carbono)

Utilizan el carbono de
compuestos orgánicos Heterótrofos -> Degradan para obtener energía y
simples componentes
Glucosa Autótrofos -> Sintetizan moléculas orgánicas a
Aminoácidos partir de moléculas inorgánicas simples
Ácidos grasos

Curtis, H., Barnes, N.S., Schnek, A., Massarini, A. (2008). Curtis Biología. (7ª Ed). Editorial medica Panamericana
 Fuente de energía: Autótrofos

Quimiótrofos:
Obtienen energía a partir de
Fotótrofos:
reacciones de oxidación de
Obtienen su energía a partir
compuestos químicos
de la luz solar
(orgánicos e inorgánicos)

Oxidan
• Thiobacillus concretivorans compuestos
• Thiobacillus thiooxidans reducidos del
• Nitrosomonas azufre
• Nitrobacter
Chromatiaceae sp.
Thiobacillus thiooxidans • Ferrobacillus ferrooxidans
• Chromatiaceae sp.
• Cyanobacteria sp.
Nelson, D.L, Cox, M.M. (2017). Lehninger, Principios de Bioquímica. (7ª Ed.). OMEGA
 Figura 1. Los
organismos pueden
clasificarse según su
fuente de energía y su
fuente de carbono
ORGANISMO QUIMIOORGÁNOTROFO Rhizobium sp
Azospirillum sp
Azotobacter sp
Organismos que como fuente de energía y de Actinomicetos
carbono utilizan compuestos orgánicos, que
se suministra directamente como sustrato a
partir de una fuente exógena. (hidratos de
carbono, hidrocarburos, lípidos, proteínas,
alcoholes...)
La oxidación de la fuente orgánica de
carbono no solo sirve como donante de
electrones para la fosforilación oxidativa,
sino que también sirve para generar
intermediarios metabólicos...

Bacterias y hongos en rizósfera: a) Rizósfera, b)

Biosíntesis
Azospirillum sp, c) Azotobacter sp, d) Solubilizadora
de fosfato, e) Hongos heterótrofos
Rosano. M (2011)

Rosano, Maria. (2011). Cap 4: Los ecosistemas de Campeche y sus recursos microbianos. Obtenido de: https://www.researchgate.net/figure/Figura-3-Bacterias-y-hongos-en-rizosfera-a-Rizosfera-b-Azospirillum-sp-c_fig3_264970483
El uso de bacterias fijadoras de nitrógeno en Agricultura Ecológica – MAGRAMA Bacterias simbióticas fijadoras de nitrógeno – CT 3 (2011) 173- 186 – S.C.G – U. de Salamanca[:]
ORGANISMO QUIMIOORGÁNOTROFO
AEROBIO ANAEROBIO

Rosano, Maria. (2011). Cap 4: Los ecosistemas de Campeche y sus recursos microbianos. Obtenido de: https://www.researchgate.net/figure/Figura-3-Bacterias-y-hongos-en-rizosfera-a-Rizosfera-b-Azospirillum-sp-c_fig3_264970483
El uso de bacterias fijadoras de nitrógeno en Agricultura Ecológica – MAGRAMA Bacterias simbióticas fijadoras de nitrógeno – CT 3 (2011) 173- 186 – S.C.G – U. de Salamanca[:]
ORGANISMO QUIMIOORGÁNOTROFO
 ORGANISMOS QUIMIOLITÓTROFO
Microorganismos que utilizan
compuestos inorgánicos reducidos
como fuente de energía y CO2 como
fuente de carbono. Dentro de los quimiolitotrofos se pueden clasificar en
obligados y facultativos:

Obligados: No pueden utilizar carbono orgánico

porque los organismos son incapaces de
transportarlos al interior de las células. no pueden
utilizar donantes de electrones orgánicos. (Bacterias
nitrifcantes)
Facultativos: Utilizan compuestos orgánicos.
(Thiobacillus)

Minero, T. (2021, 23 marzo). La biolixiviación: ¿Qué es y cómo mejorar los procesos? Tiempo Minero. https://camiper.com/tiempominero-noticias-en-mineria-para-el-peru-y-elmundo/biolixiviacion-metodo-obtener-mayor-cantidad-metal/ • Kim, B. H.,
& Gadd, G. M. (2008). Bacterial physiology and metabolism. Cambridge University Press
 QUE A SU VEZ SE DIVIDEN EN:
Ejemplos
Quimiolitoautotrofo:
Bacterias que oxidan al amonio
Energía a partir de reacciones de oxidación de en nitritos- genero Nitrosomas •
compuestos químicos inorgánicos Bacterias que oxidan de nitritos a
nitratos – Genero Nitrobacter
Fuente de electrones es a partir de sustancias
inorgánicas sencillas reducidas y el carbono de la
fijación de CO2
Quimiolitoheterótrofo:
Energía a partir de reacciones de oxidación de
compuestos químicos inorgánicos
Fuente de electrones es a partir de sustancias
inorgánicas sencillas reducidas y no pueden fijar
el CO2, por lo que su fuente de carbono proviene
de compuestos orgánicos.
Mixotróficos (facultativo): Tiene como fuente de
Nitrosomonas. Image from The Microbe Zoo (by
energía a un sustrato inorgánico. Yuichi Suwa).

Minero, T. (2021, 23 marzo). La biolixiviación: ¿Qué es y cómo mejorar los procesos? Tiempo Minero. https://camiper.com/tiempominero-noticias-en-mineria-para-el-peru-y-elmundo/biolixiviacion-metodo-obtener-mayor-cantidad-metal/ • Kim, B. H.,
& Gadd, G. M. (2008). Bacterial physiology and metabolism. Cambridge University Press
 Ejemplos
Bacterias que hacen uso de compuestos inorgánicos
de azufre: sulfuro, azufre elemental, tiosulfato, sulfito.

Importancia
EJEMPLOS: Bacterias del género Thiobacillus que
oxidan compuestos reducidos de azufre. Thiobacillus
ferrooxidans y Thiobacillus thiooxidans

Tienen un papel fundamental en los

ciclos biogeoquímicos (azufre,
nitrógeno y fierro), asimismo son
utilizadas en la industria minera en el
proceso de livixiación de los metales.
Livixiación de los metales.

Minero, T. (2021, 23 marzo). La biolixiviación: ¿Qué es y cómo mejorar los procesos? Tiempo Minero. https://camiper.com/tiempominero-noticias-en-mineria-para-el-peru-y-elmundo/biolixiviacion-metodo-obtener-mayor-cantidad-metal/ • Kim, B. H.,
& Gadd, G. M. (2008). Bacterial physiology and metabolism. Cambridge University Press
 Vías por la que los quimiolitoautótrofos fijan el CO2
Los quimiolitoautótrofos obligados: fijan el CO2 por el ciclo de Calvin-Benson.
Los quimiolitoautrótofos facultativos: crecen en presencia de CO2 teniendo otro compuesto
inorgánico como fuente de energía.

Nitrificación
Quimiolitotrofia Desnitrificación
Oxidación de azufre (HS, SO)

Ciclo biogeoquímico: Permiten transferir materia

y energía. Poseen etapas bióticas y abióticas.

Los microorganismos
están presentes en el
proceso de
El S se reduce o se oxida
regeneración para su
por microorganismos
incorporación a la
autótrofos Ej. Ciclo biogeoquímico
biomasa.

Diniz Bezerra, T. (2015). Monitorización de la diversidad microbiana en biofiltros percoladores mediante pirosecuenciación tag-454 y
optimización de protocolos para hibridación con fluorescencia in situ (FISH). Universitat Autònoma de Barcelona,.
 NOTA:

Los quimiolitótrofos
NO pueden usar el
donador de
electrones como
fuente de carbono.

Ciclo de Calvin-Benson
 ORGANISMO MIXÓTROFO
Aquellos organismos que emplean de manera simultánea sustratos orgánicos (por ejemplo,
azúcares) e inorgánicos (por ejemplo, CO2, CO y H2) para su crecimiento y el metabolismo.

Los organismos mixótrofo son capaces de

obtener su energía metabólica mediante la luz, y
de compuestos organicos e inorgánicos como
fuente de energía.

Stoecker, D. K., Hansen, P. J., Caron, D. A., & Mitra, A. (2017). Mixotrophy in the marine plankton. Annual Review of Marine Science, 9, 311-335.
 Clasificación
Se clasifican de tres maneras diferentes:
Mixótrofos Tipo I: Tienen sus propios plásmidos, son
capaces de crecer con igual éxito tanto de forma
autótrofa como heterótrofa.
Mixótrofos Tipo II: También contienen sus propios
plastidios, pero preferiblemente son autótrofos.
Estos organismos consumen la materia orgánica
sólo como fuente adicional de nutrición y energía
cuando, por cualquier motivo, la autotrófica se
vuelve insuficientemente eficiente.
Mixótrofos: Tipo III: Son principalmente
heterótrofos, pero ocasionalmente adquieren la
capacidad del modo de vida autótrofo. Mesodinium rubrum

Esteban, G. F., Fenchel, T., & Finlay, B. J. (2010). Mixotrophy in ciliates. Protist, 161(5), 621-641.
Matantseva, O. y Skarlatoo, S. (2013). Mixotrophy in microorganisms: Ecological and cytophysiological aspects.
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/24459857/
 QUIMIOLITOTROFOS
OXIDADORES DE
HIDROGENO MOLECULAR
QUIMIOLITOTROFOS OXIDADORES DE HIDROGENO MOLECULAR

Donador de
electrones

Aceptor de electrones
 QUIMIOLITOTROFOS OXIDADORES DE HIDROGENO MOLECULAR
Reacción global de trasnferencia de electrones

Semireacción del donador de electrones

Semireacción del aceptor de electrones

Reacción global

Madigan, T., Martinko, J.M., Bender, K.S., Buckley, D.H., & Stahl, D.A., (2015). Brock. Biología de los
microorganismos (14ª. Edición). Asociación Latinoamericana de Microbiologia. Pearson. pp 87, 418, 419
Mecanismo para la obtención de energía.

Sitios de acoplamiento

Fuerza protón motriz

(fpm)

Madigan, T., Martinko, J.M., Bender, K.S., Buckley, D.H., & Stahl, D.A.,
(2015). Brock. Biología de los microorganismos (14ª. Edición).
Asociación Latinoamericana de Microbiologia. Pearson. pp 87, 418,
419
 Obtención del Poder Reductor

Si se tiene solo la hidrogenasa de

membrana, el poder reductor se
sintetiza mediante el flujo inverso
de electrones de Q hacia NAD+,
formando NADH.

La hidrogenasa
citoplasmática se une al
hidrógeno para catalizar la
reducción de NAD+ a
NADH.

DeLong, E. F., Lory, S., Stackebrandt, E., & Thompson, F. (2014). The Prokaryotes: Other Major Lineages of Bacteria and The
Archaea. Springer.
 Microorganismos y Dónde Encontrarlos

Metanobacteria bryantii Pyrobaculum islandicum

Ralstonia eutropha Acidianus infernus
Pseudomonas hydrogenovora Metallosphaera sedula
Methanopyrus kandleri

Ralstonia eutropha
Metallosphaera sedula
Falkow, S., Rosenberg, E., Schleifer, K., & Stackebrandt, E. (2006b). The Prokaryotes: Vol. 3: Archaea. Bacteria: Firmicutes, Actinomycetes.
Springer Science & Business Media.
 Sedimentos
marinos y
lacustres
Manantiales
termales
Respiraderos
hidrotermales
Hábitats
volcánicos

Falkow, S., Rosenberg, E., Schleifer, K., & Stackebrandt, E. (2006a). The Prokaryotes: Vol. 2: Ecophysiology and Biochemistry. Springer Science & Business Media.
 Papel Ecológico

Consumen el H2 formado Sedimentos marinos

durante la fermentación de
materia orgánica por parte
de otros microorganismos Sedimentos lacustres

Falkow, S., Rosenberg, E., Schleifer, K., & Stackebrandt, E. (2006a). The Prokaryotes: Vol. 2: Ecophysiology and Biochemistry.
Springer Science & Business Media.
 Aplicaciones
Bacterias y arqueas
metanógenas se
utilizan para la
generación de
biogás y tratamiento
de algunos desechos.
Arqueas
hipertermófilas se
espera sean
fuente de enzimas
de
bioprocesamiento
estables a altas
temperaturas.

Falkow, S., Rosenberg, E., Schleifer, K., & Stackebrandt, E. (2006b). The Prokaryotes: Vol. 3: Archaea. Bacteria: Firmicutes, Actinomycetes. Springer Science & Business Media
 QUIMIOLITOTROFOS
OXIDADORES DE
MONÓXIDO DE CARBONO
QUIMIOLITOTROFOS OXIDADORES DE MONÓXIDO
DE CARBONO
Endógeno Descarboxilación
CO

Exógeno Disoluciones acuosas

Citocromos
resistentes al CO
Fijación del CO
2

Ciclo de Calvin
QUIMIOLITOTROFOS OXIDADORES DE MONÓXIDO DE CARBONO

- Reacción global de la transferencia

Donador de e
de e- a través del sistema
respiratorio
Ya que forman parte de
las bacterias del H 2, son
aquellas que pueden -
CO + H 2 O CO 2 + 2 e + 2H+
crecer aeróbicamente
con CO como donador de
G° = - 20 KJ/mol
electrones.
2H+ + 2e - + 1/2 O 2 H 2O
 Quimilitotrofo/ respiración aerobia aceptor de electrones: O2

-----> e-

------------- ---------------------
CO
----- e- CO DESHIDROGENASA
CO2

-
-----> e

Generación de fuerza
MECANISMO DE protón motriz
OBTENCIÓN DE ENERGIA
ATP
 Potenciales redox
Oligotropha carboxydovorans
(Pseudomonas carboxydovorans)
Cadena respiratoria ramificada

Oxidasa terminal
sensible al CO
Oxidasa terminal
insensible al CO

Meyer, O., Jacobitz, S., & Krüger, B. (1986). Biochemistry and

physiology of aerobic carbon monoxide-utilizing bacteria.
Fems Microbiology Letters, 39(3), 161-179.
https://doi.org/10.1111/j.1574-6968.1986.tb01858.x
 CO deshidrogenasa
Unida a la cara interna de la
Flavoproteína molibdo Fe-S
membrana citoplasmatica

Cofactor
Microorganismo
aerobios

Microorganismos
Wook, S. (2008). Mechanism of carbon monoxide
oxidation at the active site [Ni-4Fe-5S] cluster of anaerobios facultativos
carbon monoxide dehydrogenase from
Carboxydothermus hydrogenoformans. Universidad de
Bayreuth. https://epub.uni-
bayreuth.de/id/eprint/527/1/HaDiss.pdf
 Microorganismos Papel ecológico
característicos
Representan probablemente el
1. Oligotropha principal sumidero de monóxido de
carboxidovorans carbono en la naturaleza.

2. Bacillus schlegelli
3. Alcalígenes carboxydus Aplicaciones

Construcción de biosensores
enzimáticos, de tipo amperométrico,
Aisladas a partir del suelo y algunas se para la detección de CO.
han obtenido de aguas residuales
Cuervo, R. A., Gómez, D. M., Bravo, E., Benítez, N., Torres, W., Upegui, O., & Larmat, F. (2005). Aislamiento y caracterización de bacterias carboxidótrofas potencialmente útiles en el desarrollo de un sensor enzimático
para monóxido de carbono. Revista Guillermo de Ockham, 3(2),117-125.[fecha de Consulta 12 de Noviembre de 2023]. ISSN: 1794-192X. Recuperado de: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=105316854006
 Bacterias carboxidótrofas aisladas a partir de aguas residuales
en una planta de tratamiento situada en Colombia por MET.

Colonias de bacterias carboxidótrofas observadas en microscopio

Leica 60x.

Cuervo, R. A., Gómez, D. M., Bravo, E., Benítez, N., Torres, W., Upegui, O., & Larmat, F. (2005). Aislamiento y caracterización de bacterias carboxidótrofas potencialmente útiles en el desarrollo de un sensor enzimático
para monóxido de carbono. Revista Guillermo de Ockham, 3(2),117-125.[fecha de Consulta 12 de Noviembre de 2023]. ISSN: 1794-192X. Recuperado de: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=105316854006
QUIMIOLITOTROFOS
OXIDADORES DE IÓN
AMONIO
 QUIMIOLITOTROFOS
OXIDADORES DE ION
AMONIO (Aerobios)

M. T. Madigan, J. M. Martinko, J. Parker. Brock. Biología de

los Microorganismos. 12a (2009) Ed. Prentice Hall-Pearson
Education, p. 423.
M. T. Madigan, J. M. Martinko, J. Parker. Brock. Biología de los Microorganismos. 12a (2009) Ed. Prentice Hall-Pearson Education, p.
418.
Kim, B. H., & Gadd, G. M. (2008). Bacterial physiology and metabolism. Cambridge University
Press. p. 356
 QUIMIOLITOTROFOS OXIDADORES DE ION AMONIO
(Anaerobios)
A
N
A
M
O
X

Anamox.(c) Reacciones en el anamoxosoma de Brocadia anammoxidans; NiR, nitritoreductasa; HH, hidrazina-

hidrolasa; HZO, hidrazina-deshidrogenasa.
M. T. Madigan, J. M. Martinko, J. Parker. Brock. Biología de los Microorganismos. 12a (2009) Ed. Prentice Hall-Pearson Education, p. 425.
 ) Catabolismo

Hd

NiR, nitritoreductasa
HH, hidrazina-hidrolasa
Hd, hidrazina-deshidrogenasa.

PDF) State-of-the-Art Anaerobic Ammonium Oxidation (AnaMMOX) Technology. (2015, October 1). ResearchGate.
https://www.researchgate.net/publication/299871311_State-of-the-Art_Anaerobic_Ammonium_Oxidation_Anammox_Technology
 ) Transporte inverso de elctrones

oxidorreductasa

NiR, nitritoreductasa; HH, hidrazina-hidrolasa

Hd, hidrazina-deshidrogenasa; NaR, nitrato reductasa
Fx: ferredoxina; Fdh: formiato deshidrogenasa

PDF) State-of-the-Art Anaerobic Ammonium Oxidation (AnaMMOX) Technology. (2015, October 1). ResearchGate.
https://www.researchgate.net/publication/299871311_State-of-the-Art_Anaerobic_Ammonium_Oxidation_Anammox_Technology
 brana unitaria

Sanabria, J., Bedoya, L., Sánchez, J. (2009). "Proceso Anammox: Una Aplicación en Ingeniería - Revisión General de los Aspectos Microbianos."
Ingeniería de Recursos Naturales y del Ambiente, (8), 83-92. [Fecha de Consulta: 13de noviembre de 2021]. ISSN: 1692-9918. Disponible en:
https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=231116390010
 Microorganismos oxidadores de ion amonio

Aerobios

Todos son bacterias Gram

negativas y en su mayoría
quimiolitotróficos obligados.

Algunos ejemplos (géneros) son:

• Nitrosomas (para bacterias)
• Nitrosopumilus (para arqueas)

Ejemplo para arqueas: Figura. Nitrosopumilus maritmus capturadas con

microscopía de fluorescencia (arriba), electrónica
Nitrosopumilus maritimus de transmisión (abajo a la izquierda) y electrónica
de barrido (abajo a la derecha). De Könneke et al.,
2005.

Könneke, M., Bernhard, AE, de la Torre, JR, Walker, CB, Waterbury, JB y Stahl, DA 2005. Aislamiento de una arqueona
marina autótrofa que oxida el amoníaco. Naturaleza 437:543-546.
 Anaerobios

En Bacterias Anammox
(bacterias cocoides)
“Candidatus”, se han descrito 5
géneros:
• Candidatus Kuenenia
• Candidatus Brocadia
• Candidatus Anammoxoglobus
• Candidatus Jettenia
• Candidatus Scalindua

Figura. Estructura interna de Brocadia Sin embargo el microorganismo

anammoxidans. El nucleoide es la masa oscura y el más estudiado es: Brocadia
anammoxosoma es la zona central de la célula.
anammoxidans

Narita, Y., Zhang, L., Kimura, Z., Ali, M., Fujii, T., & Okabe, S. (2017). Enrichment and physiological characterization of an anaerobic ammonium-oxidizing bacterium
“ Candidatus Brocadia sapporoensis.” Systematic and Applied Microbiology, 40(7), 448–457. doi:10.1016/j.syapm.2017.07.004 10.1016/j.syapm.2017.07.004
 Sanabria, J., Bedoya, L., Sánchez, J. (2009). "Proceso Anammox: Una Aplicación en Ingeniería - Revisión General de los Aspectos Microbianos." Ingeniería de Recursos
Naturales y del Ambiente, (8), 83-92. [Fecha de Consulta: 13de noviembre de 2021]. ISSN: 1692-9918. Disponible en: https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=231116390010
 Aplicaciones

Papel de la oxidación anaeróbica de amonio (Anammox) en la eliminación de nitrógeno de un acuífero de agua dulce
Smith, R. L., Böhlke, J. K., Song, B., & Tobias, C. R. (2015). Role of Anaerobic Ammonium Oxidation (Anammox) in
Nitrogen Removal from a Freshwater Aquifer. Environmental Science & Technology, 49(20), 12169-12177.
https://doi.org/10.1021/acs.est.5b02488
QUIMIOLITOTROFOS
OXIDADORES DE
NITRITOS
 DONADORES DE ELECTRONES

El amoniaco es oxidado
en dos etapas por la vía de
la Hidroxilamina y
Nitroxilo

En nitrito producido por la

oxidación es usado por la
nitrito oxidorreductasa
(NOR) a nitrato al donar
sus electrones.

Connor, N. (2020, 30 junio). ¿Qué es el donador de electrones y el receptor de electrones? - definición. Radiation Dosimetry. Recuperado 13 de noviembre de 2023, de https://www.radiation-dosimetry.org/es/que-es-
el-donador-de-electrones-y-el-receptor-de-electrones-definicion/
Quimiolitotrófos oxidadores de
nitritos
 Flujo de electrones en la cadena

El nitrito se oxida a nitrato por la nitrito oxidorreductasa transfiriendo 2 electrones

hasta el último aceptor que es el oxígeno generando su reducción a agua.

NITRIFICACION. (s. f.). PDF. Recuperado 13 de noviembre de 2023, de https://www.ugr.es/~cjl/nitrificacion.pdf

 Mecanismo empleado para la obtención de energía
Obtención de energia en forma
de ATP a partir de fosforilación
oxidativa

Transporte de electrones que

dona el nitrito a partir de la
nitrito oxidorreductasa hasta la
citocromo terminal

Se bombean 2 protones al
periplasma para la síntesis de
ATP gracias a los cambios
conformacionales de la ATP
asa-sintasa generando la unión
de ADP y fosfato inorgánico.

Metabolic diversity of microorganisms. (2018, marzo). ppt download. https://slideplayer.com/slide/16972682/

 Mecanismo de obtención del poder reductor

Parte de la fuerza protón motriz se utiliza para forzar a los electrones a fluir en un sentido no
espontaneo por el gradiente de potencial de reducción del nitrito hacia el NAD+.

Fosforilación oxidativa (artículo) | Khan Academy. (s. f.). Khan Academy. Recuperado 13 de noviembre de 2023, de https://es.khanacademy.org/science/ap-biology/cellular-energetics/cellular-
respiration-ap/a/oxidative-phosphorylation-etc
 Microorganismos característicos

Nitrococcus mobilis Nitrobacter winogradskyi Nitrospina gracilis Nitrospira marina

DR KARI LOUNATMAA/SCIENCE PHOTO LIBRARY & DR KARI LOUNATMAA/SCIENCE PHOTO LIBRARY. (2023, 22 junio). Nitrosospira Sp. bacterium - Stock Image B238/0055. Science Photo Library. Recuperado 10 de
noviembre de 2023, de https://www.sciencephoto.com/media/13120/view/nitrosospira-sp-bacterium

Nitrococcus mobilis - microbewiki. (s. f.). Recuperado 11 de noviembre de 2023, de https://microbewiki.kenyon.edu/index.php/Nitrococcus_mobilis

 APLICACIONES

El nitrato es un importante aceptor

terminal de electrones en suelos y
sedimentos anaeróbicos, particularmente
en ambientes que han sido impactados
por fertilizantes de nitrato. Además, los
NOB son componentes críticos de los
procesos de tratamiento de eliminación
de nitrógeno en muchas plantas de
tratamiento de aguas residuales.

APLICACION DEL NITROGENO. (s. f.). pdf. Recuperado 11 de noviembre de 2023, de https://es.greenpeace.org/es/wp-
content/uploads/sites/3/2021/04/Nitratos_Qu%C3%A9Son.pdf
 PAPEL ECOLOGICO
Las bacterias nitrificantes se
encuentran en los lugares con
cantidades considerables de
amoníaco (lugares en los que la
descomposición de proteínas es
intensa y plantas de tratamiento
de aguas residuales).
Prosperan en lagos y arroyos con
altos insumos y con salidas de
aguas residuales debido al alto
contenido en amoníaco.

Wikiwand - Bacterias nitrificantes. (s. f.). Wikiwand. Recuperado 13 de noviembre de 2023, de https://www.wikiwand.com/es/Bacterias_nitrificantes
 QUIMIOLITOTROFOS
OXIDADORES DE
COMPUESTOS REDUCIDOS
DEL AZUFRE
 COMPUESTOS REDUCIDOS DEL AZUFRE
Bacterias que utilizan compuestos reducidos del azufre.

Bacterias Bacterias
aerobias anaerobias
Suelen vivir en una interfase entre un ambiente Bacterias fototróficas verdes
anaeróbico y otro aeróbico. y rojas, almacenan el S en forma de
Acumulan el azufre en forma de gránulos amarillos gránulos al interior de la célula,
dentro de la célula. Chlorobium
Cromatium, Thiocapsa
Utilizan H2S como donador de e- para
Theobacillus, Beggiatoa, la reducción fotosintética del CO2,
Thiomicrospira oxidándolo hasta S.
 Compuestos del azufre más usados como donadores de electrones
Sulfuro de Azufre
Tiosulfato Sulfito
hidrógeno elemental

La oxidación de estos compuestos libera la energía suficiente para la generación de ATP, acoplada al
transporte electrónico en membrana y a la producción de FPM

Producto(s) final de oxidación (común) Sulfato (SO42-) y protones (H+)

Estos productos pueden formar H2SO4, lo que acidifica el medio.

Bioquímica de la oxidación del azufre
1.- Se hace uso de la enzima sulfito oxidasa , que
oxida al sulfito y transfiere los electrones de forma
directa a la CTE para generar FPM.

2.- Se oxida el sulfito a través de la actividad

inversa de la fosfosulfato de adenosina-reductasa
en la reaccion se genera un enlace fosfato de alta
energía cuando el AMP se convierte en ADP.

3.- La APS reductasa cataliza la union del AMP al

sulfito, para obtener APS, para después por accion
de la enzima ATP sulforilasa se libere fosfato y se
forme ADP a partir de AMP.
Sistema SOx
Sistema de oxidación del sulfuro y
tiosulfato.
Oxida compuestos reducidos de azufre
directamente a sulfato sin que se forme
sulfito como intermediario.
Lo realizan bacterias como Paracoccus
pantotrophus.
Algunas lo llevan a acabo finalidad de
obtener el poder reductor para la fijación
de CO2, en lugar de energía.
Otros aspectos de la oxidación quimiolitótrofa del azufre

Los electrones generado de la oxidacion

de los compuestos reducidos del azufre
entran finalmente a la cadena de
transporte de electrones para asi
generar FPM por la ATPasa.

Los electrones para la fijación autótrofa

de CO2 proceden del flujo inverso de
electrones, y a su vez producen NADH.
 Ambientes naturales
Lagos alcalino-sódicos, fuentes hidrotermales, subsuelo profundo y sitios de
drenaje.

Drenaje de la CDMX Fuente hidrotermal

Participación en los ciclos biogénicos
Relevancia ambiental y biotecnológica
Las actividades antropogénicas generan una alta emisión de compuestos
como dióxido de azufre, sulfuro de dihidrogeno y disulfuro de carbono.

Lluvia ácida causada por la emisión Corrosión del concreto por el ácido
excesiva de dióxido de azufre. sulfúrico

El sulfuro de hidrógeno es el principal contaminante. De su metabolismo

derivan el ion sulfato y el azufre elemental (preferible).
QUIMIOLITOTROFOS
OXIDADORES DE IÓN
FERROSO
 Donador de electrones
Condiciones:

Aerobias Anaerobias
Fe (II) soluble en el medio Fe (II) soluble en el medio
o insoluble en minerales
Ubicacion de la bacteria
en interfases para evitar Reductor para la fijación
la oxidación espontánea de CO

Kim, B. y Gadd, G. (2008). Bacterial physiology and metabolism (1a ed., pp. 362–364). U.K.: Cambridge University Press.
 Donador de electrones

Valdés, J., Pedroso, I., Quatrini, R. et al. (2008). Acidithiobacillus ferrooxidans metabolism: from genome sequence to industrial applications. BMC Genomics 9, 597. https://doi.org/10.1186/1471-2164-9-597
Reacción global de la transferencia

Madigan, M. T., Martinko, J., Bender, K. y Stahl, D. (2015). Brock. Biología de los microorganismos. (14a ed., pp.421–423). España: Pearson Education.
 Flujo de electrones
1. Fe2+es oxidado a Fe3+por un citocromo c
(membrana externa).
2. El citocromo C lo transfiere al periplasma
donde la proteína rusticianina (+0.68 V)
acepta el electrón.
3. La proteína reduce al citocromo c (en
periplasma) transfiriéndole el electrón.
4. El citocromo c transfiere el electrón al
citocromo aa3 (en citoplasma).
5. El citocromo aa3 lleva a cabo la reducción
de O2 a H2O

Madigan, M. T., Martinko, J., Bender, K. y Stahl, D. (2015). Brock. Biología de los microorganismos. (14a ed., pp.421–423). España: Pearson Education.
 Flujo de electrones
Electrón se transfiere al citocromo C
mandándolo a la rusticianina (reduce
al citocromo C), así, el electrón llega al
citocromo aa3

+0.68 V

Madigan, M. T., Martinko, J., Bender, K. y Stahl, D. (2015). Brock. Biología de los microorganismos. (14a ed., pp.421–423). España: Pearson Education.
Valdés, J., Pedroso, I., Quatrini, R. et al. (2008). Acidithiobacillus ferrooxidans metabolism: from genome sequence to industrial applications. BMC Genomics 9, 597. https://doi.org/10.1186/1471-2164-9-597
 Mecanismo para obtener ATP
El rendimiento energético es muy bajo por
lo que han de oxidarse grandes cantidades
de hierro a fin de obtener energía suficiente. El consumo de protones se
produce durante la
reducción de O 2 en la CTE, y
esta reacción requiere
electrones, que vienen de la
oxidación de
2+ 3+
Fe a Fe

Madigan, M. T., Martinko, J., Bender, K. y Stahl, D. (2015). Brock. Biología de los microorganismos. (14a ed., pp.421–423). España: Pearson Education.
 Mecanismo empleado para la obtención de su poder reductor
+
El NADH se forma por reducción de NAD
2+
con electrones obtenidos del Fe que son
forzados a volver atrás hacia el citocromo
bc1, y el reservorio de quinonas se forma
a expensas de la fuerza protón motriz.

Madigan, M. T., Martinko, J., Bender, K. y Stahl, D. (2015). Brock. Biología de los microorganismos. (14a ed., pp.421–423). España: Pearson Education.
Valdés, J., Pedroso, I., Quatrini, R. et al. (2008). Acidithiobacillus ferrooxidans metabolism: from genome sequence to industrial applications. BMC Genomics 9, 597. https://doi.org/10.1186/1471-2164-9-597
 Leptospirillum ferriphilum
En lugares ácidos y ricos en
Microorganismos
metales. característicos
Es esencial en procesos de
biominería comercial. Leptospirillum ferrooxidans
Participan en el ciclo del hierro.
En lagos o suelos de pH ácido.
Thiobacillus ferrooxidans Incrementa la posibilidad de
proliferación de bacterias del azufre
Capacidad de convertir metales
Contribuye a la recuperación de
insolubles a solubles.
metales.
Presente en cuevas y en minas.
Utilizado en biohidrometalúrgia.

Roman, B. (2017). Estudio de bacterias acidófilas ferrooxidantes presentes en mineral magnetita de Toquepala, concentrado de pirita de poracota y agua de mina de cobre de quiruvilca (Tesis). Universidad Peruana Cayetano Heredia.
Recuperado de: https://repositorio.upch.edu.pe/bitstream/handle/20.500.12866/1022/Estudio_RomanLeon_Betsabe.pdf?sequence=1&isAllowed=y
 PROTOCOLO
EXPERIMENTAL
Composición de los medios
Medio A Medio B Medio C

NHCl ----------------(0.3g) (NH)SO 4-------------(0.4g) (NH)SO -------------------(3g)

4 42 4 2 4
KHPO4-------------(3g) KHPO
2 4-----------------(4g) KCl -----------------------------(0.1g)
2
MgCl*6HO
2 2
-------(0.01g) MgSO*7HO4 2
----------(0.5g) KHPO
2 4----------------------(0.5g)
FeCl3----------------(0.01g) CaCl 2-------------------(0.25g) MgSO*7HO----------------(0.5g)
4 2
En volumen de 1000ml de FeSO4------------------(0.01g) Ca(NO) 2---------------------(0.01g)
3
agua destilada. NaSO2 3
----------------(5g) En un volumen de 700ml de
2
Ajusta pH 4.5 En volumen de 1000ml de agua agua destilada
destilada. pH 7 con NaOH 1N. HSO--------------------------
2 4
(1ml)
Ajustar pH 6.5-7 FeSO*7HO
4 2
--------------(300ml)
Ajustar pH 2.5
 a)Obtención de los cultivos:
Se preparan 3 series de 4 matraces para cada medio de A, B y C.

Medio 1 3 30°C
5 días
A 1 2 3 4 5ml de T. thiooxidans
+ - + -
Medio 1 3 30°C

B 1 2 3 4 7 días
5ml de T. thioparus
+ - + -

Medio 1 3 30°C

C 1 2 3 4 5 días
5ml de T. ferrooxidans
+ - + -
b) Determinación del crecimiento de los microorganismos en:
Azufre residual

Peso cte

4
2
1

Peso por
diferencia

60°C Peso cte

Acidez titulable MEDIO A Y B
5 mL 5 mL
Filtrado 1 Filtrado 3 25 mL agua
destilada
NaOH 0.1 N

3 gotas de
fenolftaleína

5 mL 5 mL
Filtrado 2 Filtrado 4
 Determinación de azufre de sulfatos
Blanco de
1 mL filtrados
reactivos
0.5 mL HCl 6N
7.5 mL agua Leer turbidez
destilada 445nm
1 mL BaCl2 al 10%
1 2 3 4
Absorbancia

Solución tipo de
NaS04 con 240
2
μg S de SO4

0 240 μg S de SO 4
Tiosulfato residual, medio B
Tiosulfato con
3 gotas solución solución de yodo 0.1N
10 mL de cada medio
almidón 1%

1 2 3 4

Medición pH
Se realiza para los 3 medios

1 2 3 4
Determinación de ión ferroso (MEDIO C)
Valorar en frío
K MnO 0.1 N
4

10 mL del cultivo C
aparición rosa permanente

+10 ml H 2 SO 4 18N

+ 2ml de H3 PO 4 concentrado
 Fundamento de las titulaciones Yodométricas
Ácido-Base Medio B

Medio A
2(S₂O₃)⁼+ I₂ → (S₂O₆)⁼ + 2I⁻
Sº+ H₂O+ O₂ → H₂SO₃
H₂SO₃ + O₂ → H₂SO₄

Medio B Permanganométricas
S₂O₃⁼+ H₂O+2O₂ →2(SO₄)⁼+2H₂O Medio C

4Fe⁺² + O₂ + 4H⁺ → 2H₂O + 4Fe⁺³

2KMnO₄ + 8H₂SO₄ + 10FeSO₄ → 5Fe₂(SO₄)₃ + 2MnSO₄+ K₂SO₄ +8H₂O

¿Cuál es la finalidad de evaluar medios inoculados y
no inoculados?

SIN INOCULAR Ejemplo

Control negativo que sirva como referencia
para comparar con otros cultivos. Esto nos
permite ayudar a identificar cualquier
contaminación externa durante el proceso y a
evaluar la pureza del medio de cultivo.

INOCULADO
Proporcionar un entorno propicio para el
crecimiento y la proliferación del
microorganismo. Esto nos permite estudiar sus
características, realizar pruebas y facilitar la
observación de su comportamiento en
condiciones controladas.
¡GRACIAS POR SU
ATENCIÓN!