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Pauliana Mendes Duarte Las expresiones diferenciales de citoquinas afectan

Adriana Cutrim de
la gravedad de la enfermedad periimplantaria.
Mendonc¸a
María Beatriz Braz Máximo
Vanessa Renata Santos
Marta Ferreira Bastos
Francisco Humberto Nociti
Júnior

Afiliaciones de los autores: Palabras clave: citocinas, expresión génica, mucositis, enfermedades periimplantarias, periimplantitis.
Poliana Mendes Duarte, Adriana Cutrim de
Mendonc¸a, María Beatriz Braz Máximo, Vanessa
Abstracto
Renata Santos, Marta Ferreira Bastos, Departamento de
Periodoncia, División de Investigación Dental, Objetivo: Este estudio evaluó la expresión génica mediante reacción en cadena de la polimerasa cuantitativa
Universidad de Guarulhos, Guarulhos, Sao Paulo, Brasil
de factores inflamatorios [interleucina (IL)­12, factor de necrosis tumoral a (TNF­a), IL­4 e IL­10] y relacionados
Francisco Humberto Nociti Junior, Departamento de
Prostodoncia/Periodoncia, División de con la osteoclastogénesis [receptor]. activador del ligando NF­kB (RANKL) y osteoprotegerina (OPG)]
Periodoncia, Facultad de Odontología de Piracicaba,
en sitios que exhiben diferentes gravedades de enfermedad periimplantaria.
Universidad de Campinas, Sao Paulo, Brasil
Material y métodos: Se obtuvieron biopsias de tejido blando periimplantario (n = 48) de sitios de implante sano
Correspondencia a: (HI), mucositis (MC), periimplantitis inicial (IP) y periimplantitis grave (SP).
Poliana Mendes Duarte Rua
Resultados: Los niveles de ARNm de IL­12 y TNF­a fueron mayores en SP, seguidos de IP y MC (P <0,05).
Dr. Nilo Pec¸anha n. 81­Pre
´dio U­61 Andar­Centro­Guarulhos CEP: 07011­040 La IL­4 fue mayor en HI, seguida de MC, SP e IP (P<0,05). La IL­10 fue la más baja en HI, mientras que no se
Sa˜o Paulo SP Brasil Tel.: þ 55 11
detectaron diferencias entre los grupos enfermos (P40.05). Los niveles de ARNm de OPG fueron más altos
246 en HI, seguido de IP, SP y MC, mientras que RANKL aumentó a medida que aumentaba la gravedad
41769 Fax: þ 55 11 246 41758 de la periimplantitis (P <0,05). La relación OPG/RANKL más alta se observó en HI y la más baja en SP
e­mail: poliduarte@yahoo.com/
(P<0,01).
pduarte @ung.br
Conclusión: Estos hallazgos sugieren que las expresiones de factores relacionados con la
inflamación y la osteoclastogénesis pueden desempeñar un papel importante en la aparición y la gravedad de
las enfermedades periimplantarias.

Estudios anteriores han demostrado que los
patógenos desempeñan el papel más
importante en el desarrollo de lesiones
inflamatorias periimplantarias (Mombelli et al.
1987; Berglundh et al. 2002). La mucositis
(MC) es una reacción inflamatoria reversible
confinada a los tejidos blandos periimplantarios,
y la periimplantitis es un proceso irreversible
que afecta el tejido blando y el hueso de
soporte alrededor de los implantes en función
oclusal (Pontoriero et al. 1994; Berglundh et
al. 2002). Al igual que otras enfermedades
Fecha: inflamatorias crónicas, parece que las
Aceptado el 1 de octubre de 2008
citoquinas pro y antiinflamatorias desempeñan
Para citar este artículo: papeles importantes en la progresión y
Duarte PM, de Mendonc¸a AC, Ma´ximo MBB, Santos VR, Bastos MF,
Nociti Junior FH. Las expresiones diferenciales de citoquinas afectan la gravedad de la enfermedad periimplantaria (Konttinen et al.
(OPG), cuyas expresiones están
gravedad de la enfermedad periimplantaria.
2006; Machtei et al. 2006). En general, en la
Clínico. Implicación oral. Res., 20, 2009; 514–520. doi:
10.1111/j.1600­0501.2008.01680.x respuesta inmune del huésped, las citoquinas
implicadas en la respuesta T helper (Th) 1 [p.
ej., interleucina (IL)­1b, IL­12 e interferón
(IFN) – g] inducen un proceso mediado por
células, mientras que las citocinas de la
respuesta Th2 (p. ej., IL­4 e IL­10) estimulan
predominantemente la producción de
anticuerpos. De esta manera, la diferente
expresión de mediadores inflamatorios es
consistente con un cambio del perfil
inmunológico Th1 al Th2 en enfermedades
crónicas (Chaplin 2006; Medzhitov 2007).
Estudios anteriores también han demostrado
que la resorción ósea está controlada por la
interacción del activador del receptor del
ligando NF­kB (RANKL) y la osteoprotegerina
estrechamente reguladas por mediadores
inflamatorios y productos bacterianos. RANKL induce la f

514 c 2009 John Wiley e hijos A/S

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y activación, mientras que OPG es un receptor
señuelo para RANKL que inhibe la osteoclastogénesis
(Boyle et al. 2003; Troen 2003).
Aunque estudios previos han evaluado la
presencia de citocinas inflamatorias en el líquido
crevicular periimplantario
y tejidos mediante ELISA y técnicas de
inmunohistoquímica (Ataoglu et al. 2002;
Konttinen et al. 2006; Machtei et al. 2006),
ningún estudio hasta la fecha ha examinado los efectos pro y
Perfiles antiinflamatorios en diferentes grados de
enfermedad periimplantaria. Por lo tanto,
El objetivo de este estudio fue evaluar el gen.
Expresión de pro y antiinflamatorios.
citoquinas [IL­12, factor de necrosis tumoral
(TNF­a), IL­4 e IL­10] y factores relacionados con la
osteoclastogénesis (RANKL y OPG)
en sitios que exhiben diferentes severidades de
Enfermedad inflamatoria periimplantaria.
material y métodos
Población de estudio
Este estudio fue aprobado por el Comité Institucional
de Ética en Investigación Clínica de la Universidad
de Guarulhos. Los pacientes eran
informado de la naturaleza del estudio, y
dio su consentimiento por escrito a lo descrito
procedimientos. Los sujetos fueron seleccionados
consecutivamente durante las visitas de seguimiento en un
período de marzo de 2006 a abril de 2007
de la población referida a tres odontólogos
centros clínicos: Universidad de Guarulhos
Facultad de Odontología, la Facultad de Odontología de
Piracicaba (UNICAMP) y la brasileña
Asociación de Facultad de Odontología. De 224
personas examinadas, 176 no cumplieron con los
criterios de inclusión. Por lo tanto, nuestra muestra
de conveniencia se comprometió con cuarenta y ocho
(48) sujetos y un total de cuarenta y ocho (48)
implantes. Los criterios de inclusión fueron totalmente
o sujetos parcialmente desdentados con al menos
al menos un sistema Bra˚nemark (3i Implant
Innovations, Palm Beach, FL, USA) implante en
funcionamiento durante al menos un año. Todo
Los sujetos no eran fumadores ni estaban embarazadas.
o lactantes y sistémicamente sanas. Los sujetos
parcialmente edéntulos estaban periodontalmente
sanos o, si presentaban un
antecedentes de enfermedad periodontal, deben
han sido tratados periodontalmente y han participado
en una terapia periodontal de apoyo.
Los criterios de exclusión fueron el uso de antibióticos,
Medicamentos antiinflamatorios y agentes
antimicrobianos orales dentro de los 6 anteriores.
meses. Los criterios de exclusión de implantes fueron
c 2009 John Wiley e hijos A/S
Duarte et al. Expresión génica en enfermedades periimplantarias.
movilidad, deterioro del diagnóstico clínico
debido al diseño de la supraestructura del implante,
prótesis desatornilladas y tratamiento periimplantario
previo.
Exámenes clínicos
Los siguientes parámetros fueron evaluados en
seis sitios en cada implante (mesio­bucal,
medio­bucal, disto­bucal, mesio­lingual,
medio­lingual y disto­lingual) usando un
sonda periodontal (Carolina del Norte – Hu­Friedy,
Chicago, IL, EE. UU.): acumulación de placa (PI):
presencia o ausencia de placa
a lo largo del margen mucoso; Sangrado marginal
(MB): presencia o ausencia de sangrado.
registrado pasando una sonda a lo largo de la suave
margen tisular; Sangrado al sondaje (BOP):
presencia o ausencia de sangrado de hasta 15 s
después de un suave sondeo; supuración (SUP):
presencia o ausencia de espontánea o en
sondeo SUP; Profundidad de sondaje (PD/mm):
distancia entre el margen mucoso y el
parte inferior del surco/bolsa. Después,
Radiografías intraorales periapicales (Insight
películas dentales, Eastman Kodak Company,
SP, Brasil) se obtuvieron para cada implante
utilizando la técnica del paralelismo. Porque el
Los implantes y prótesis eran anteriormente
Colocados por los estudiantes de las escuelas de
odontología antes mencionadas, el hueso radiográfico
El nivel en el momento de la colocación del implante era
obtenidos de los expedientes de los sujetos. Residencia en
este nivel óseo inicial, las nuevas radiografías
fueron analizados para determinar la pérdida ósea periimplantaria mediante
el mismo examinador (PMD) usando suave
componentes y roscas de los implantes como
puntos de referencia.
Los parámetros clínicos anteriores y el
nivel de apego clínico (CAL/mm) fueron
evaluado alrededor de los dientes en sujetos
parcialmente desdentados para examinar la condición
periodontal. Exámenes clínicos
fueron realizados por el mismo examinador
(PMD), quien fue capacitado y calibrado
según Araujo et al. (2003). La variabilidad
intraexaminador fue de 0,14 mm para los dientes.
PD y 0,16 mm para dientes CAL y
0,08 mm para implante PD. la clínica
parámetros registrados de forma dicotómica, es decir,
MB, BOP y SUP fueron calculados por el
Prueba Kappa­Light. El intraexaminador
acuerdo fue 40,85.
Diseño experimental
Se realizó una biopsia de tejido blando periimplantario.
obtenidos de cada sujeto sometido a
Cirugías antiinfecciosas para periimplantario.
lesiones o motivos no relacionados con enfermedades.
Según criterios clínicos y radiológicos.
parámetros, las 48 biopsias se dividieron
en uno de los siguientes grupos: saludable
implante (HI) (n = 11): PD4 mm, sin
MB, BOP, SUP y evidencia de pérdida ósea
radiográfica; MC (n = 15): MB y/o
BOP y ausencia de hueso radiográfico
pérdida y SUP; periimplantitis inicial (PI)
(n = 10): PD 5 mm con BOP y/o
SUP y pérdida ósea radiológica que involucra
cuatro hilos; y periimplantitis severa
(SP) (n = 12): PD 5 mm con BOP y/
o SUP y pérdida ósea radiográfica que implica
4cuatro hilos. Si el mismo sujeto hubiera
HI e implantes enfermos, se incluyó en un solo grupo
según el
peor diagnóstico de la siguiente manera: SP, IP, MC
y hola. Además, si dos o más implantes presentaran
un diagnóstico clínico similar
en el mismo tema, el más anterior
Se eligió el implante para el muestreo.
extracción de ARN
Las biopsias se almacenaron en un tubo que
contenía ARN posterior (Ambion Inc., Austin, TX,
EE.UU.) en 701C para la evaluación del
Niveles de ARNm de IL­12, TNF­a, IL­4,
IL­10, RANKL y OPG. ARN total
de las biopsias se aisló mediante el método Tri­zols
(Gibco BRL, Life Technolo­gies, Rockville, MD, EE.
UU.) según el
recomendación del fabricante. ARN
Las muestras se resuspendieron en agua tratada
con pirocarbonato de dietilo y se almacenaron a
701C. La concentración de ARN se determinó a
partir de la densidad óptica utilizando el
Biofotómetro (Eppendorff AG, Hamburgo,
Alemania).
Reacciones de PCR en tiempo real
Transcripción inversa
El ARN total fue tratado con ADNasa (Turbo
libre de ADN , Ambion Inc., Austin, Texas,
EE.UU.), y se utilizó 1 mg para la síntesis de ADNc.
La reacción se llevó a cabo utilizando el
Kit de síntesis de ADNc de primera cadena (Roche
Dia­agnostic Co., Indianápolis, IN, EE. UU.),
siguiendo las recomendaciones del fabricante.
Diseño de imprimación
Los cebadores se diseñaron utilizando el software
de diseño de sondas Light­Cyclers (Roche
Diagnostics GmbH, Mannheim, Alemania).
Los experimentos se realizaron dos veces, con
resultados comparables. El perfil de amplificación,
515 | Clínico. Implicación oral. Res. 20, 2009 / 514–520
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Duarte et al. Expresión génica en enfermedades periimplantarias.

Las secuencias y concentraciones de los cebadores son
presentado en la Tabla 1.
Reacciones de PCR
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR) se
realizó en el sistema LightCyclers (Roche
Diagnostics GmbH) mediante FastStart
Kit DNA Masterplus SYBR Verde (Roche
análisis estadístico
Los datos fueron analizados mediante un software
estadístico (BioEstat 3.0, Sociedade Civil
Mamiraua´, CNPq, BR). Los medios de PI,
MB, BOP, SUP y PD de seis sitios por
implante o diente fueron calculados, promediados
dentro de la materia y entre materias en el
cuatro grupos. Se calcularon las medias CAL
usando el mismo método. Clínica y OPG/
se determinaron mediante ANOVA unidireccional. si un
Se detectó una diferencia estadística, una comparación
múltiple por pares realizada por Bonferroni
Se realizó la prueba t. El análisis de Spearman.
Se utilizó para probar las posibles correlaciones.
entre los niveles de ARNm y el periimplantario
Datos clinicos. El nivel de significancia establecido
para todos los análisis fue del 5% (P<0,05).

Co. de diagnóstico). El producto de la reacción fue Los resultados del índice RANKL fueron comparados por el
Prueba de Kruskal­Wallis. En los casos en que un Resultados
cuantificado con la herramienta de Cuantificación
Relativa (LightCyclers Software 4, Roche Se detectó una diferencia, los datos se obtuvieron
Análisis clínico
Diagnostics GmbH), con gliceraldehído­3­fosfato utilizando la prueba de Dunn para un análisis por pares.
Las características demográficas y clínicas de los
deshidrogenasa (GAPDH) como comparación múltiple. Edad, tiempo de implantación de
sujetos se presentan en la Tabla 2.
el gen de referencia. carga y otras comparaciones de citoquinas
No hubo diferencias significativas
entre los grupos con respecto al periodontal
Tabla 1. Secuencias de cebadores para cada gen, perfil de amplificación y longitud estimada de la PCR perfil, tiempo de carga y edad (P40.05).
producto
Como era de esperar, PI, MB y BOP fueron
Secuencia GEN (50 ! 30 ) Perfil de amplificación Longitud de significativamente mayores en los implantes enfermos.
[temperatura (1C)/ producto de PCR
en comparación con los HI
tiempo(s)] (pb)
(P00,05). La PD media fue mayor en
GAPDH GAAGGTGAAGGTCGGAGTC 95/0; 51/9; 72/3 226
GAAGATGGTGATGGGATTTC periimplantitis, seguida de MC y HI
IL­12 ACTGAACCAAAGGGACTACGA 95/0; 55/03; 72/7 151 implantes (Po0.05). Sólo se observó SUP
GTTCTTGGGGTGGGTCCG en los grupos de periimplantitis.
TNF­a TCCACCCATGTACTCCTCAC 95/0; 55/6; 72/20 155
CCTCCCAGATAGATGGCTCATA
IL­4 GTTGACCGTAACAGACTCTTTG 95/0; 55/5; 72/6 182 Análisis de expresión genética.
CGAGCCGTTTCAGGAATC
La Figura 1 muestra los resultados de IL­12, TNF­a,
IL­10 GCCTACATGACAATGAAGATACGA 95/0; 55/6; 72/20 151
CTATAAGAGAGGGTACAATAAGGGTTTCTCAA ARNm de IL­4, IL­10, RANKL y OPG
RANKL CGACATCCCATCTGGTTCC 95/0; 51/9; 72/3 199 niveles relativos a GAPDH. Análisis de los datos
GCTGGTTTTAGTGACGTACACC demostró que los niveles de IL­12 y TNF­a
OPG CAAAGTAAACGCAGAGAGTGTAGA 95/0; 55/7; 72/20 187
fueron significativamente mayores en SP, seguido por
GAAGGTGAGGTTAGCATGCC
IP y MC, que no eran diferentes de
GAPDH: gliceraldehído­3­fosfato deshidrogenasa; IL: interleucina; TNF­a: factor de necrosis tumoral alfa; RANKL: entre sí. Los niveles más bajos de IL­12 y TNF­a
Activador del receptor del ligando del factor nuclear kappaB; OPG: Osteoprotegerina.
Se observaron niveles en HI (P <0,05). IL­4

Tabla 2. Características demográficas, datos clínicos periodontales y periimplantarios de diferentes grupos experimentales en la población estudiada
Saludable mucositis Periimplantitis inicial Periimplantitis grave

Perfil demográfico
Número de sujetos/implantes 15 10 12
Edad (años; media DE) 11 49,1 11,6 F 55,8 17 F 8, 56,7 14,9 F 6, 59,4 14,6
Género; F (hembra), M (masculino) 6, M 5 3 8 M778 M464 F 6, M 6
Número de sujetos totalmente edéntulos 6
Número de sujetos parcialmente edéntulos 6
Perfil periodontal
IP dental de boca completa (%) 11,8 10,3 5,1 15,4 15,9 23,4 5,1 14,2 26,2 4,9
MB dental de boca completa (%) 0.3 6,1 12,9 8,3 19 9.3
BOP dental de boca completa (%) 4,4 8,7 2 6 13 2,1 17,8 8,3 2 19,2 6,3
PD dental de boca completa (mm) 0,4 2,5 0,3 2,3 0,3 0,3 3 1,2 2.1 0,5
CAL dental boca completa (mm) 0,7 3.2 1.2
Perfil periimplantario
Tiempo de carga (años) 3,8 1,5 5 2,2 4.7 2,1 4,9 1,5
PI (%) 19,7 23,4a 0a 92,2 20,8b 97,8 88,9 33,3b 100b 90,9 30,2b
MB (%) 0a 8,6b 95,6 11,7b 100b 97 10.1b
balanza de pagos (%) 0a 0a 5,3 1,3b 100b
SORBER (%) 42,6 40,1b 7,3 36,4 40b
PD (mm) 3,8 0,8a 1,7c 7,5 2,5c

No hubo diferencias entre los grupos con respecto al perfil periodontal, según la prueba de Kruskal­Wallis (P40.05). No hubo diferencias entre los grupos.
con respecto a la edad y el tiempo de carga mediante ANOVA unidireccional (P40.05). Letras minúsculas diferentes, dentro de cada columna, indican estadísticamente significativas
diferencias mediante pruebas de Kruskal­Wallis y Dunn en el perfil periimplantario (Po0,05).

516 | Clínico. Implicación oral. Res. 20, 2009 / 514–520 c 2009 John Wiley e hijos A/S
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Duarte et al. Expresión génica en enfermedades periimplantarias.

IL­12 TNF­α Niveles de ARNm, que se asociaron positivamente

3 7.5 C
con IL­10 y RANKL. La expresión de IL­4 mostró
una correlación positiva
C
2 5.0 con niveles de OPG/RANKL y IL­10
b
mostró una asociación positiva con
2P1
/mDN
)H G(I
RA­AL

NAG
­PFRA
/mDN
)H T
α(
b b RANGO. Las expresiones de IL­12, TNF­a
1 2.5
b a e IL­10 se correlacionaron negativamente con
a IL­4, OPG y OPG/RANKL. RANKL
0 0.0 Los niveles de ARNm presentaron correlaciones
Hola MC IP SP Hola MC IP SP
negativas con IL­4 y OPG. PI y BOP fueron
3 a IL­4 IL­10
4 correlacionado positivamente con las expresiones
b
b de IL­12, TNF­a, IL­10 y RANKL, y
b 3
2 b correlacionada negativamente con IL­4, OPG y
OPG/RANKL. SUP y PD presentaron correlaciones
RA­ALG(I
)/HmDNP4

C
0P1
/mDN
)H G(I
RA­AL
2
positivas con IL­12, TNF­a y
1 d a
RANKL y se asociaron negativamente
1
con IL­4 y la relación OPG/RANKL

0 (Tabla 3).
0
Hola MC IP SP Hola MC IP SP
3 OPG 4 RANKL
C Discusión
a 3
2
Los implantes dentales osteointegrados han sido
PAG
PRA O(

2
)/HmDNG

0P1
/mDN G(I
RA­AL

ampliamente utilizado como alternativa a las

)H

b
1 C
b prótesis convencionales en pacientes edéntulos.
1 En consecuencia, la incidencia de
d a
a La enfermedad periimplantaria también ha aumentado.
0 0
Hola MC IP SP Hola MC IP SP Aunque los patógenos son los reconocidos
50 OPG/RANKL agentes etiológicos en la enfermedad inflamatoria
a
periimplantaria, la progresión posterior de la
40 enfermedad y la gravedad pueden atribuirse a

30 diferencias en la respuesta del huésped a la

eO
A
alP
N
LiKc/G
nó R

desafío bacteriano, como se observó en otros

20 enfermedades infecciosas (Medzhitov 2007). En

10 breve, la respuesta del anfitrión está compuesta por

b b dos brazos principales: la respuesta inmune innata
C
0 y adaptativa. Se ha observado que los linfocitos T
Hola MC IP SP
auxiliares (Th)
Fig. 1. Distribución de los niveles de ARNm de la [interleucina (IL)­12 proinflamatoria y del factor de necrosis tumoral­a.
juega un papel importante en la adaptación
(TNF­a)], antiinflamatorios (IL­4 e IL­10) y factores relacionados con la osteoclastogénesis [activador del receptor de NF­
respuesta inmune. Estas células pueden
kB (RANK) y osteoprotegerina (OPG)] en los tejidos periimplantarios de sanos ( HI), mucositis (MC), inicial
periimplantitis (IP) y periimplantitis grave (SP). Las barras horizontales muestran el valor medio de los niveles de ARNm. diferenciarse en células T auxiliares tipo 1 (Th1
[ARNm/GAPDH, gliceraldehído­3­fosfato deshidrogenasa (GAPDH)]. Los puntos individuales representan ARNm/ células), que son responsables de la inmunidad
GAPDH para cada muestra. Diferentes letras minúsculas indican diferencias estadísticamente significativas según ANOVA mediada por células, o ayudante tipo 2
y la prueba t de Bonferroni (Po0.05) para IL­12, TNF­a, IL­4, IL­10, activador del receptor del ligando NF­kB (RANKL)
Células T (células Th2) que ayudan a la formación de anticuerpos.
y OPG o por las pruebas de Kruskal­Wallis y Dunn para la relación RANKL / OPG (P <0,05).
producción. La respuesta inmune a la infección
está regulada por el equilibrio entre
Los niveles de ARNm fueron significativamente mayores en aumentó significativamente a medida que aumentaba citoquinas pro y antiinflamatorias, producidas
HI, seguido de MC, SP e IP, respectivamente la gravedad de la periimplantitis (Po0,05). El más alto principalmente por células Th1 y Th2 (Chaplin
(Po0.05). La expresión de IL­10 fue la La relación OPG/RANKL se observó en HI 2006; Medzhitov 2007). Además,
más bajo en HI (Po0.05), mientras que no se y el más bajo en SP (Po0.01). Allá Las células Th y sus citoquinas han sido
detectaron diferencias significativas entre los no hubo diferencia en el OPG/RANKL reconocidos como reguladores clave de los osteoclastos
grupos enfermos (P40.05). OPG fue relación entre MC e IP. y diferenciación y actividad de osteoblastos,
significativamente mayor en HI, seguido de IP, mediando la destrucción ósea inflamatoria
SP y MC, respectivamente (Po0,05). (Weitzmann y Pacifici 2005). Por lo tanto,
Correlaciones clínicas e inmunológicas.
Los niveles de RANKL fueron más bajos en HI y MC datos Para comprender mejor la patogénesis de la
grupos, que no diferían entre sí Se encontraron correlaciones positivas enfermedad inflamatoria periimplantaria,
otro. La expresión del progreso de RANKL estadísticamente significativas entre IL­12 y TNF­a. este estudio evaluó, mediante PCR cuantitativa,

c 2009 John Wiley e hijos A/S 517 | Clínico. Implicación oral. Res. 20, 2009 / 514–520
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Duarte et al. Expresión génica en enfermedades periimplantarias.
Tabla 3. Coeficientes de correlación (valores rs) para parámetros clínicos periimplantarios y
citoquinas
IL­12 TNF­a IL­4
TNF­a 0,6421nn
IL­4 0,3855nn 0,3754nn
IL­10 0,4286nn 0,477nn 0,3551n
RANKL 0,704nn 0,6013nn 0,602nn 0,4245nn
OPG/RANKL 0,7112nn 0,61nn 0,4667nn 0,4447nn
OPG 0,4572nn 0,5236nn 0,0286 0,3878nn 0,2823n
PL 0,5897nn 0,6666nn 0,4768nn 0,3605n 0,6157nn 0,6307nn 0,6113nn
BOP 0,57 nn 0,6738 nn 0,5505 nn 0,4515 nn 0,6669 nn 0,7259 nn 0,6634 nn
SUP 0,3416n 0,3334n 0,4283nn 0,1163 0,5346nn
PD 0,3932nn 0,5606nn 0,2239
La correlación es significativa en el nivel Po0,05 (coeficientes de correlación de rango de Spearman).
norte
La correlación es significativa en el nivel P0,01 (coeficientes de correlación de rango de Spearman).
citocinas pro y antiinflamatorias y
factores relacionados con la osteoclastogénesis en sitios
que exhiben diferentes gravedades clínicas y
radiográficas de la enfermedad periimplantaria.
Los hallazgos del presente estudio demostraron,
por primera vez, que
Los niveles de ARNm de citocinas proinflamatorias
(IL­12 y TNF­a) fueron mayores en
sitios enfermos en comparación con los HI
y correlacionado positivamente con PI, BOP,
SUP y PD. Estos resultados indican una
respuesta inflamatoria alterada en pacientes
grupos, lo que sugiere que IL­12 y TNF­a
puede ser crítico en la destrucción del tejido
periimplantario. De hecho, la IL­12 es un importante
citocina de la inmunidad innata temprana
respuesta y el principal mediador para
mantener la respuesta inmune mediada por células
que, si es persistente, contribuye a
desarrollo de enfermedades inflamatorias crónicas
(Romagnani et al. 1996). El ARNm de IL­12 fue
ya reportado en los tejidos periimplantarios
por un estudio previo (Schierano et al. 2003);
sin embargo, no se evaluaron parámetros clínicos,
lo que impidió una comparación más significativa
con los resultados actuales.
Estudios previos informaron resultados no
concluyentes sobre la implicación del TNF­a en las
enfermedades periimplantarias.
utilizando técnicas inmunológicas (Ataoglu
et al. 2002; Konttinen et al. 2006; Machtei
et al. 2006). Este es el primer estudio que muestra
que el aumento de los niveles de ARNm de TNF­a puede
estar relacionado con la inflamación periimplantaria.
Se reconoce que el TNF­a es fundamental
para la inflamación y destrucción de tejidos por
activación de citocinas y quimiocinas, células
moléculas de adhesión y factores de transcripción
(Wajant et al. 1998). Actualmente, se han hecho
esfuerzos considerables en un
intento de dilucidar la interferencia entre
el sistema inmunológico y el tejido óseo y para
518 | Clínico. Implicación oral. Res. 20, 2009 / 514–520
IL­10 OPG DE RANGO OPG/RANKL
0,6591nn 0,0197 0.507nn
0,6978nn 0,1968 0,6281nn
determinar los mecanismos mediante los cuales
La infección conduce a la pérdida ósea por desregulación.
Función Th (Weitzmann & Pacifici 2005).
Además de las funciones inflamatorias,
El TNF­a también parece desempeñar un papel importante
papel en la destrucción ósea. TNF­a es capaz de
inducir la pérdida ósea directamente, aumentando la
actividad osteoclástica, como se observó anteriormente
en enfermedades óseas inflamatorias crónicas
como periodontitis y artritis reumatoide (Boyce et
al. 2005). Los resultados de
El presente estudio sugiere que el TNF­a es
también un mediador importante en la pérdida ósea
relacionada con la periimplantitis, principalmente en los casos másLa función de OPG en el sistema inmunológico es
etapa avanzada de la enfermedad. TNF­a puede
También mejora la formación de osteoclastos
indirectamente al regular positivamente la célula estromal.investigaciones sobre el papel de OPG en el
producción de RANKL y aumentando
la capacidad de respuesta de los precursores de osteoclastos
a RANKL (Hofbauer et al. 1999; Naka­shima et al.
2000; Zou et al. 2001; Boyce et al.
Alabama. 2005). Unión de RANKL a su receptor
activador de NF­kB (RANK), expresado en
las células precursoras de osteoclastos, estimula
diferenciación y activación de osteoclastos,
inducir hueso fisiológico y patológico.
reabsorción (Yasuda et al. 1998; Boyle et al.
2003). Por otro lado, OPG es un señuelo.
para RANKL que inhibe la osteoclastogénesis
en competencia con RANK (Simonet et al.
1997; Boyle et al. 2003). Por lo tanto, es probable
que la actividad de los osteoclastos dependa de la
equilibrio relativo entre RANKL y
OPG, y un desequilibrio en el OPG/
Los sistemas RANKL se han relacionado con
diversas enfermedades que implican destrucción ósea.
como osteoporosis, artritis reumatoide
y periodontitis (Bostanci et al. 2007;
Kearns et al. 2008). Estudios in vitro anteriores
sugirieron que la destrucción del hueso alveolar en
la periodontitis puede ser inducida
por expresión de RANKL por osteo­
Blastos o células Th en respuesta a bacterias.
infección (Kikuchi et al. 2001; Sato et al.
2004; Tanaka et al 2005). Además,
Se detectó ARNm de RANKL en células Th
aislado de lesiones de artritis reumatoide,
y se han observado células Th activadas
para estimular la formación de osteoclastos in vitro
(Horwood et al. 1999; Kong et al. 1999).
Hasta el momento, ningún estudio ha evaluado el ARNm.
niveles de RANKL y OPG en periimplantario
sitios enfermos en comparación con los HI. El
Los hallazgos del presente estudio muestran una
regulación positiva de RANKL y una regulación
negativa de los niveles de ARNm de OPG en los
grupos de periimplantitis, favoreciendo la resorción
ósea periimplantaria a través de disminuciones en
la relación OPG/RANKL. La correlación positiva
entre TNF­a y RANKL, como
así como su asociación negativa con OPG,
reforzar la hipótesis de que tales moléculas pueden
estar involucradas colectivamente en la
Proceso de pérdida ósea periimplantaria.
Inesperadamente, se observó un nivel bajo de
ARNm de OPG en el grupo MC en el presente
estudiar. La OPG se ha estudiado principalmente en
su papel de regular el recambio óseo y
apoptosis en la salud y la enfermedad (Holen &
Marinero 2006; Roodman 2006); sin embargo,
todavía oscuro (Maruyama et al. 2006).
Por lo tanto, este hallazgo justifica más
inicio de las enfermedades periimplantarias.
Para comprender mejor las complejas redes de
citocinas implicadas en la
enfermedades periimplantarias, niveles de ARNm de
citocinas antiinflamatorias (IL­4 y
IL­10) también fueron evaluados por el presente
estudiar. El análisis de datos demostró una menor
niveles de IL­4 en sitios enfermos en relación con
Los HI, especialmente en la periimplantitis.
grupos. Un fenómeno similar se observó
anteriormente en las enfermedades periodontales,
en el que la ausencia localizada de IL­4 fue
relacionado con un estado de enfermedad (Shapira et al.
1992). En contraste con los resultados actuales,
Schierano et al. (2003) no detectaron IL­4
ARNm en cualquier muestra extraída de tejidos
blandos periimplantarios. Este hallazgo contradictorio
puede explicarse por las diferencias metodológicas
y el momento de la biopsia utilizado.
en ambos estudios. Se ha informado que la IL­10
mostrar antiinflamatorios más potentes
actividades que la IL­4 debido a diferentes
mecanismos de supresión de los mediadores
proinflamatorios (Sagawa et al. 1996;
Gru¨tz 2005). De hecho, en el presente estudio,
c 2009 John Wiley e hijos A/S
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Los niveles de ARNm de IL­10 parecían ser más
sensible a la condición inflamatoria,
porque los sitios inflamados, independientemente de la
gravedad de la enfermedad, mostró niveles más altos de IL­10
niveles en comparación con los HI. Estos
Los hallazgos sugieren que la IL­10 es un importante
citocina en la modulación de la cascada inflamatoria de la
enfermedad periimplantaria. Regulación positiva de IL­10
en los grupos enfermos.
puede representar un intento de controlar la
respuesta potencialmente destructiva en inflamados
Tejidos blandos alrededor de los implantes dentales,
como se sugirió anteriormente para la periodontitis crónica.
(Sasaki et al. 2000; Garlet et al. 2003).
Hasta el momento se han realizado muy pocos estudios
realizado para evaluar la patogénesis de la enfermedad
inflamatoria periimplantaria. Juntos,
los hallazgos del presente estudio sugieren
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factores relacionados con la osteoclastogénesis a nivel local
expresado en los tejidos periimplantarios puede
desempeñan un papel importante en la aparición de enfermedades y
gravedad. Sin embargo, en la actualidad hay que tener cuidado
debe ejercerse al sacar conclusiones de estos resultados,
porque la PCR
La tecnología no es capaz de estimar moléculas
biológicamente activas, y la expresión de ARNm no indica
necesariamente la
síntesis de la proteína. porque algunos
Se presentan moléculas biológicamente activas.
a un nivel demasiado bajo para ser detectado mediante
ensayos inmunológicos, la evaluación de los niveles de
ARNm de citocinas puede proporcionar importantes
información sobre las respuestas inmunorreguladoras
locales que se ejercen en el
establecimiento y progresión de enfermedades crónicas.
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Esencial para el desarrollo de nuevas estrategias
terapéuticas para controlar el proceso inflamatorio como
coadyuvante de los antiinfecciosos.
terapias. Además, el conocimiento de
El mecanismo implicado en las enfermedades.
La progresión puede ser útil para una temprana
diagnóstico.
Agradecimientos: Este estudio fue
apoyado por la FAPESP (# 05/02561­3; 06/
04604­4) y CNPq (#471282/2007­3;
303980/2007­9). A los autores les gustaría
agradecer a los profesores Renato Mazzonetto
y Marta González Riesco por su
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