DEPARTAMENTO DE BIOQUÍMICA

MÉTODOS DE ANÁLISIS
PROBLEMARIO DE CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA

2020

1. En la siguientes figuras se observa la separación de la misma muestra, en tres columnas que

difieren en la fase estacionaria. Loa compuestos separados son: 1) uracilo, 2) fenol, 3) acetofenona, 4)
nitrobenceno, 5) benzoato de metilo, 6) tolueno. Las condiciones de la separación fueron: columna IBM
4.5 X 250 mm, F.M. metanol/agua (50/50), elución isocrática, vel.= 1.0 mL/min, detección a 254 nm

a)

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22 24
Minutos

b) c)

0 2 4 6 8 10 12 14 16 0 2 4 6 8
Minutos
Minutos

Se observan cambios en los tiempos de elución, así como en la forma de los picos, dependiendo
de la columna empleada. Para los picos separados en cada columna, determine lo siguiente:

a) El número de latos teóricos promedio

b) El factor de capacidad para cada compuesto
c) La selectividad entre los picos 2-3, 3-4, 4-5, 5-6
d) La resolución para los picos mismos picos
e) Con base en los resultados obtenidos, diga cuál de las columna ofrece la mejor separación.
Explique su respuesta.
f) Investigue la diferencia en el material de empaque de la columna (metilo, octilo, octadecilo).
2. El siguiente cromatograma muestra la separación de una mezcla de gases, a partir de la
tabla anexa, calcule la masa de cada uno de los gases que se separaron.

Propano
Isopentano
Isobutano n-pentano
Etano
n-butano

Metano

Inyección de
la muestra

0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
Tiempo/ min

Gas Masa Altura del Altura del Masa problema

(pg) pico estándar (mm) pico prob.(mm) (pg)
Metano 50 30

Etano 65 40

Propano 97 58

Isobutano 55 45

N-butano 60 32

Isopentano 75 43

n-pentano 70 54

Complete la tabla y escriba la ecuación matemática que empleó para hacer los cálculos.