Diferenciación del sexo.

Controles
genéticos para la determinación
del sexo
Embriogénesis y desarrollo
del aparato reproductor
CONTENIDO
1. Objetivos

2. Introducción
Determinación primaria genética: cromosomas sexuales
Determinación secundaria hormonal
3. Genes determinantes para la diferenciación de los
testículos

4. Genes determinantes para la diferenciación de los

ovarios

5. Fisiopatología de la diferenciación sexual

6. Bibliografía
 Diferenciación del sexo. Controles genéticos para la determinación del sexo | 3

Objetivos
En este tema se visualizará la importancia de
las características genéticas y hormonales para
la determinación y la diferenciación del sexo.
Adicionalmente, resulta importante reiterar la distinción
entre los términos determinación y diferenciación
sexual; aunque con ciertas excepciones en marsupiales,
los embriones del mamífero forman cuatro primordios
embrionarios, a partir de los cuales emerge el dimorfismo
sexual: el seno urogenital, las gónadas, los conductos de
Müller y los conductos de Wolff. La determinación sexual
se refiere a los eventos moleculares que especifican el
destino sexual y preceden la diferenciación morfológica
y funcional de las gónadas.

Figura 1. Diferenciación sexual. Tomada de: https://slideplayer.es/

Introducción slide/28890/

El ratón es el modelo más estudiado en el determinismo Determinación primaria genética:

sexual. A partir de él se han extrapolado, a otras
especies de mamíferos, los mecanismos moleculares
que establecen vías alternas de expresión de genes
previos a la diferenciación sexual morfológica de la
gónada embrionaria. En mamíferos, la determinación
sexual genética ocurre al fusionarse los pronúcleos
del espermatozoide y el ovocito, lo cual va a formar el
núcleo del cigoto. La determinación sexual gonadal
representa el establecimiento y estabilización de
vías dismórficas de expresión génica, las cuales
conducen a la diferenciación de ovarios o testículos.
La tercera etapa de la determinación sexual es la
denominada determinación sexual somática y se
refiere a la diferenciación sexual de los conductos
de Wolff, Müller y del seno urogenital, los cuales son
precursores embrionarios de los tractos genitales y
genitales externos, respectivamente. Sin embargo,
los mecanismos que llevan al dimorfismo sexual
del individuo se ven afectados por los mecanismos
neuroendocrinos, que conducen a la emergencia de
las características sexuales secundarias postnatales
y al establecimiento de un patrón dismórfico de
comportamiento sexual; esto completa el complejo
proceso de diferenciación sexual del individuo.
La determinación del sexo está íntimamente relacionada
con el control del desarrollo del sexo gonadal o primario,
es decir, de los ovarios o los testículos; por otro lado,
la diferenciación sexual depende de los sucesos
que ocurran después de la organogénesis gonadal.
Se distinguen dos tipos de determinación del sexo:
una determinación primaria genética (a partir de los
cromosomas sexuales) y una determinación secundaria
hormonal. (figura 1)
cromosomas sexuales
En muchas especies de mamíferos, aves, algunos
reptiles, etc., el sexo está determinado por la presencia
específica de un cromosoma sexual y, por tanto, de
uno o varios genes presentes en ese cromosoma. El
sexo heterogamético (con dos cromosomas sexuales
diferentes) puede ser el macho, como en los mamíferos
(macho XY y hembra XX), o la hembra, como en las aves
(macho WW y hembra ZW). Los cromosomas X y Z son
ricos en genes y son de talla importante, mientras que
los cromosomas Y y W son más pequeños y pobres en
genes. Sin embargo, los cromosomas sexuales (X, Y) y
(Z, W) han evolucionado a partir de autosomas diferentes
y se ha explicado que no tienen homología (1). (figura 2)
Una de las consecuencias del determinismo sexual
con cromosomas sexuales es que puede inducir una
diferencia entre los machos y las hembras en cuanto
a la cantidad de expresión de los genes usados por
estos cromosomas. Por ejemplo, todas las hembras
XX poseen un cromosoma X más que los machos XY.
La expresión de los genes usados por este segundo
cromosoma es teóricamente el doble en las hembras
que en los machos. A diferencia del cromosoma Y, que
tiene pocos genes, el cromosoma X contiene muchos
(940 genes codificantes en ratones). Por otro lado,
aunque el cromosoma X se llama cromosoma sexual,
la mayoría de sus genes no tienen nada que ver con la
determinación del sexo. Varias estrategias que están
presentes en el reino animal permiten nivelar esta
diferencia potencial entre machos y hembras. En la
gallina, se ha observado un mecanismo incompleto de
compensación génica con una disminución parcial de
la expresión del cromosoma Z en el macho (ZZ). En los
mamíferos, uno de los dos cromosomas X es activado
de manera aleatoria en la hembra (XX) (2). (figura 3)
 Diferenciación del sexo. Controles genéticos para la determinación del sexo | 4
Figura 2. Relación cromosómica de la diferenciación sexual. Fuente:
Salame A, et al. (2008).
Figura 3. Cromosoma X y cromosoma Y. Tomada de: https://www.
fantasymundo.com/el-cromosoma-y-masculino-tiene-mas-funciones-
de-lo-que-pensabamos/
Determinación secundaria
hormonal
Si la elección del sexo se determina genéticamente, la
determinación y la diferenciación del sexo fenotípico, es
decir, el establecimiento de características masculinas
o femeninas, está bajo el control de hormonas en los
mamíferos. Este relevo ha sido puesto en evidencia
experimentalmente con la demostración de que la
gónada es indispensable para lograr una diferenciación
sexual normal, de acuerdo con el cariotipo. Mediante
la irradiación de ratones a los 13 días de desarrollo
o la castración química en conejos entre los días
19 y el 23 de desarrollo, Albert Raynaud y Alfred Jost
demostraron en 1947, que la presencia de la gónada
era indispensable al inicio del desarrollo sexual para la
diferenciación masculina. En efecto, en su ausencia, el
feto XY se desarrolla con un fenotipo femenino. Estos
resultados han demostrado que la diferenciación
sexual femenina no requiere la expresión de factores
específicos. Alfred Jost luego demostró el carácter
dominante masculinizante del testículo con injertos de
testículos fetales, los cuales son capaces de inducir la
masculinización del desarrollo sexual del feto XX, en
particular, la regresión del canal de Müller y el desarrollo
del canal de Wolff. En ese momento, el único factor
testicular conocido era la testosterona, de la familia de
los andrógenos. (figura 4)
Figura 4. Determinación hormonal del sexo y diferenciación sexual.
Fuente: Gilbert SF; 2005.
La presencia de testosterona en un feto XX o en el feto
XY castrado induce un desarrollo de tipo masculino. Sin
embargo, este desarrollo es incompleto, ya que el canal
de Müller, esencial para el desarrollo femenino, persiste.
Por lo tanto, la testosterona es un factor esencial para el
desarrollo del canal de Wolff, pero no para la inhibición
del canal de Müller. Estos resultados llevaron a Alfred
Jost a predecir la existencia de un factor testicular
responsable de la regresión del canal de Müller. Esta
teoría fue confirmada en 1984 por Nathalie Josso y
Jean-Yves Picard y fue reiterada en 1986 por Richard
Cate en los bovinos: la hormona antimulleriana. La
determinación secundaria hormonal permite generalizar
al conjunto del organismo una identidad macho o
hembra que hasta ahora estaba restringida a la gónada
(2).
Andrógenos y estrógenos
La testosterona pertenece a la familia de los esteroides
derivados del metabolismo del colesterol. Se pueden
distinguir tres grandes categorías de esteroides: en
primer lugar, los esteroides no sexuales como el cortisol
o la aldosterona, que son producidos por las glándulas
suprarrenales, los andrógenos y los estrógenos. Los
machos y las hembras poseen todas las enzimas
necesarias para la síntesis de todos estos esteroides.
Con respecto a la testosterona, la fuente principal es el
testículo, aunque también se produce por las glándulas
suprarrenales, incluso en hembras, en cantidades
muy inferiores. Los andrógenos son los esteroides
que controlan el desarrollo y el mantenimiento de la
diferenciación masculina, a diferencia de los estrógenos
que son las hormonas sexuales femeninas primarias. Es
interesante observar que los estrógenos son derivados
de los andrógenos como resultado de la acción de una
enzima, la aromatasa, y que son reconocidos por otra
familia de receptores nucleares (1). (figura 5)
 Diferenciación del sexo. Controles genéticos para la determinación del sexo | 5
Figura 5. Formación de andrógenos y estrógenos. Fuente: Picón MJ,
Azriel S; 2000.
Los andrógenos son producidos por las células de
Leydig en el testículo. La testosterona es esencial para
el mantenimiento del canal de Wolff por difusión directa,
induciendo la formación de los canales deferentes,
vesículas seminales y epidídimo. La testosterona
también puede transformarse en dihidrotestosterona
(DHT) que tiene una afinidad mucho más fuerte para los
receptores de andrógenos (AR) y que es responsable
de la diferenciación de la próstata y de los órganos
genitales externos (figura 4). La testosterona juega
un papel importante en el momento de la pubertad
al inducir la espermatogénesis; adicionalmente,
actúa en el cerebro modificando el comportamiento
(agresividad creciente, comportamiento sexual, cantos
de aves durante el período de reproducción, etc.) y en
la anatomía (desarrollo muscular, etc.). Una deficiencia
en la producción de andrógenos o en la cascada de
señalización inducida por estas hormonas tiene el efecto
de inducir la feminización del fenotipo en individuos XY.
Esta feminización puede ser parcial, por lo tanto, se
puede hablar de un pseudohermafroditismo o completo
(excepto las gónadas no afectadas directamente) en el
caso de una insensibilidad completa a los andrógenos
por mutación de su receptor (2).
El trabajo de Alfred Jost también demostró que no había
hormonas femeninas implicadas en la diferenciación
sexual femenina, a diferencia de la diferenciación
masculina. Por lo tanto, los estrógenos no afectan a la
diferenciación sexual femenina, pero son producidos
por las células de la teca y las células foliculares en las
hembras a partir de la pubertad y desempeñan un papel
importante en el control del ciclo ovárico. Se debe tener
en cuenta que la expresión de la aromatasa CYP19, la
cual permite la producción de estrógenos, está bajo el
control del selector hembra FOXL2. Los estrógenos, en
cambio, participan en la determinación del sexo y la
diferenciación sexual en los otros vertebrados, las aves
en particular (2). (figura 6)
Figura 6. Esquema de la acción biológica de los estrógenos a través
de su unión específica a los receptores de estrógenos (ER) α y β,
miembros de una extensa familia de factores de transcripción. Tras la
unión específica ligando–receptor, se formará un dímero (α-α, α-β o β-β),
el cual puede entrar en el núcleo celular, unirse a genes específicos y
activar, en cascada, la expresión de múltiples genes relacionados con el
desarrollo sexual. Fuente: Matthews J, Gustafsson JA; 2003.
AMH (hormona antimulleriana)
La AMH es una glicoproteína que se une a los receptores
de tipo I BMPRIa/Alk3 y Acvr1/Alk2 y al receptor de tipo
II: AMHR2, activando las proteínas Smad1, 5 y 8. Las
células de Sertoli producen AMH e inducen la formación
de los cordones seminíferos, precursores de los tubos
seminíferos. La AMH no se produce en hembras en el
momento de la iniciación de la diferenciación de las
gónadas, pero se produce más tarde por las células de
la granulosa y tiene un papel importante en el desarrollo
de los folículos.
La AMH induce la regresión del canal de Müller que
contribuye, en la hembra, a las trompas de Falopio, al
útero y a la parte superior de la vagina. La ausencia
de AMH o de su receptor específico AMHR2 conduce
al síndrome de persistencia de los canales de Müller,
caracterizada por la presencia de útero y trompas
en individuos XY que presentan, por lo tanto, un sexo
masculino no ambiguo, aparte de problemas de
criptorquidia (localización abdominal de los testículos).
(figura 7)
Figura 7. Diferenciación sexual de las gónadas. Disponible en: https://
www.seep.es/images/site/home/GUIA_MANEJO_ADS_DSD_SEEP.PDF
 Diferenciación del sexo. Controles genéticos para la determinación del sexo | 6
En los bovinos, en los cuales la cantidad de AMH producida
durante la gestación es muy importante, se ha observado
el fenómeno freemartinismo. Si se presentan conexiones
entre las placentas de fetos masculinos y femeninos,
la AMH producida por el feto masculino interfiere con el
desarrollo normal del canal de Müller del feto femenino; por
lo tanto, esto conduce al nacimiento de novillas estériles.
Es interesante señalar que, en dos especies de peces, los
genes que codifican el AMH o su receptor AMHR2 son los
determinantes genéticos del sexo. En estas situaciones
se puede hablar, en sentido estricto, de determinación
hormonal del sexo (2). (figura 8)
Figura 8. Anastomosis placentaria en la gestación gemelar de un macho
y una hembra bovinos. Fuente: Wilkes (1981)
Genes determinantes para
la diferenciación de los
testículos
El gen Sry (Sex determining Region of the Y chromosome)
se ubica en el brazo corto del cromosoma Y de los
mamíferos. Mutaciones de este gen pueden provocar
tanto en el ratón como en el hombre un fenotipo femenino.
En 1991, el equipo de Robin Lovell-Badge demostró que
la sobreexpresión de Sry en ratones transgénicos XX es
suficiente para inducir la reversión del sexo, aportando
una prueba directa del papel de Sry como factor de
determinación del sexo masculino. Ese gen codifica
un factor de transcripción que posee un dominio HMG
(High Mobility Group). En el ratón, su expresión solo
se detecta en los machos, en los progenitores de las
células de Sertoli dentro de las crestas genitales. Sry
induce directamente la expresión de Sox9 (familia de los
factores de transcripción Sry-related HMG box 9) el cual
es codificado en un autosoma. Sox9 es el gen clave de
la cascada de determinación del sexo masculino; este
induce numerosos genes, los cuales codifican factores
importantes secretados como FGF9, el cual permite
el mantenimiento de la expresión de Sox9. Otro factor
importante codificado es el AMH (gen que codifica la
hormona antimulleriana) (3). (figura 9)
Figura 9. Fuente: Norman AW, Henry HL; 2015.
El gen Sry se expresa en el testículo durante el periodo
crítico de la determinación sexual. El Sox9 es un gen
autosómico de la familia de Sry. La proteína Sox9 posee
dos dominios de activación transcripcional. Uno de los
dominios es rico en residuos prolina-glutamina-serina
(dominio pqs) y es indispensable para la actividad
transcripcional. El dominio adyacente rico en prolina-
glutamina-alanina (dominio pqa) es necesario para
mantener la actividad de transcripción al máximo, ya que
mutaciones en este dominio disminuyen la capacidad
de transactivación de Sox9.
Durante la determinación del sexo, SF1, Lhx9, WT1
(+ KTS), GATA4 / Fog2, Cbx2/M33, Emx2, Ir, Irr, Igfr1
y Map3k4 se expresan en las gónadas masculinas
indiferenciadas y son esenciales para la expresión de
Sry.
• Sry y SF1 regulan directamente la expresión de
Sox9 y luego desencadenan una cascada de genes
para mediar el desarrollo de los testículos.
• Sox9 mantiene su propia expresión a través de
las vías mediadas por Sox9/SF1, Fgf9 / FGFR2 y
PTGDS / PGD2. Adicionalmente, regula la expresión
de AMH, Vanin-1 y Cyp26b1.
• En las gónadas masculinas, las señales Cyp26b1 y
Fgf9 antagonizan las funciones del ácido retinoico,
inducen la detención mitótica (detención G0/
G1) de las células germinales masculinas y son
responsables de la expresión de varios marcadores
de células germinales masculinas (Nanos, Dnmt3L,
P15 y Oct4).
• Después de la etapa de determinación del sexo, se
requieren Sox8, Sox9 y Sox10 para el mantenimiento
de la fertilidad y la expresión de Dhh y Gdnf, que
luego induce la secreción de testosterona en las
células de Leydig (4). (figura 10)
 Diferenciación del sexo. Controles genéticos para la determinación del sexo | 7
Figura 10. Modelos moleculares de redes reguladoras de genes en la
determinación del sexo de machos y el desarrollo gonadal. Fuente: She
Z-Y, Yang W-X (2017).
El gen Sry no existe en las aves ni en los mamíferos
monotremas. Otros genes maestros de la determinación
del sexo, codificantes para factores de transcripción, han
sido identificados: Dmrt1 en la gallina, Dmy/dmrt1by
en el medaka común (pez arroz japonés) y DW-W en
el Xenopus (anfibio). Esos genes tienen un ancestro
común, pero si Dmrt1 y Dmy/dmrt1by son selectores
testiculares, DM-W es un selector ovárico. En el ratón,
Dmrt1 no es un selector masculino, pero ese gen es
importante para mantener la diferenciación masculina
después de nacer. (figura 11)
Figura 11. Control endocrino de la diferenciación sexual en vertebrados
no mamíferos. Fuente: Piferrer F; 2018.
Genes determinantes para
la diferenciación de los
ovarios
La comprensión de la cascada de determinación del
sexo masculino ha permitido comprender numerosos
casos de reversión del sexo. Ahora bien, a diferencia de
lo que se pensaba inicialmente, el sexo femenino no es
un sexo “por defecto”. Existe también una cascada de
determinación del sexo femenino que se inhibe por la
expresión de Sox9. Esta cascada está bajo el control
de la vía Wnt4 y del factor de transcripción FOXL2
(Forkhead box).
• FOXL2 reprime la cascada masculina mediante la
represión de la expresión de Sox9 en la hembra.
• En gónadas indiferenciadas XX, se detectan bajos
niveles de Sox9. Sin embargo, la regulación positiva
de Sox9 no alcanza el umbral requerido para iniciar
la determinación y diferenciación de las células
de Sertoli y, en consecuencia, la organización del
testículo.
• Debido a que en la cresta genital bipotencial XX no
se encuentra el Sry, los niveles de Sox9 son muy
bajos y, por lo tanto, no se inhibe la expresión de
Wnt4.
• Los niveles de Wnt4 aumentan y junto con Sf1
mantienen bajos los niveles de Sox9.
Esta represión recíproca es primordial para controlar la
formación de gónadas que contengan células de Sertoli,
que luego se convertirán en testículos, o, al contrario,
células de la granulosa, las cuales se volverían ovarios
(figura 12). Una gónada en la cual coexisten células que
expresan Sry y células que no lo expresan es, o bien un
testículo, o bien un ovario, o bien una ovotestis (mezcla
de los dos) (2). (figura 13)
Figura 12. Niveles de expresión de los genes Sry y Sox9 durante
la determinación sexual y el desarrollo testicular y ovárico. Fuente:
Kashimada K., Koopman, P. (2010).
 Diferenciación del sexo. Controles genéticos para la determinación del sexo | 8

Figura 14. Modelos moleculares de redes reguladoras de genes en la

determinación del sexo de hembras y el desarrollo gonadal. Fuente: She
ZY, Yang WX; 2017.

Figura 13. Fuente: Norman AW, Henry HL; 2015.

Las gónadas femeninas Rspo1 y Wnt4 controlan la vía

de la β-catenina, con el objetivo de regular la expresión
de folisatina y establecer el desarrollo ovárico femenino.
FOXL2 se sinergiza con Esr1/2 para regular la expresión
de CYP19A1. Esto finalmente produce aromatasa en
las células de la granulosa y estrógenos en las células
de la teca. El ácido retinoico, un producto de Aldh1a1,
es esencial para la expresión de Stra8 en las células
germinales femeninas e inicia la meiosis y la ovogénesis
(4). (figura 14)

Fisiopatología de la Figura 15. Niveles de expresión de los genes Sry y Sox9 durante
la determinación sexual y el desarrollo testicular y ovárico. Fuente:
diferenciación sexual Kashimada K, Koopman P; 2010.

Las anomalías de la diferenciación sexual (ADS), Bibliografía

lo que actualmente se denomina Desarrollo Sexual
Diferente (DSD), por cuestiones éticas engloban un
amplio espectro de discordancias entre los criterios
cromosómico, gonadal y fenotípico (genital), los cuales
definen la diferenciación sexual.
Las DSD son provocadas por cualquier alteración
cromosómica o mutación que afecte a alguno de los
genes que participan en la cascada génica de desarrollo
gonadal; esto modificaría las vías de expresión génica y
alteraría el desarrollo adecuado hacia testículo u ovario
(disgenesia gonadal). Cuando esta alteración es total se
habla de disgenesia gonadal completa; por otro lado, se
dice que es parcial cuando la gónada se ha desarrollado
en mayor o menor grado hacia testículo u ovario. A su
vez, cualquier fallo producido durante la determinación
secundaria hormonal determinaría una anomalía del
desarrollo sexual, la cual es detectable:
• Al nacimiento: en forma de ambigüedad genital o
discordancia entre el genotipo y fenotipo sexual
• En la pubertad: en forma de retraso puberal o
infertilidad.
Por lo tanto, desde un punto de vista fisiopatológico,
las ADS/DSD pueden clasificarse como anomalías del
desarrollo gonadal o anomalías en la producción o
acción hormonal (5). (figura 15)
1. Salame A, Méndez F, Aguirre G, Serrano H. Disrupción
endocrina de la diferenciación sexual. 2008;70:43-
49.
2. Boujard D, Leclers V, Vincent S. Biologie du
développement. Malakoff: Dunod; 2016. 301 p.
3. Kashimada K, Koopman P. Sry: the master switch
in mammalian sex determination. Development.
2010;37:3921-3930.
4. She Z-Y, Yang W-X. Sry and SoxE genes: How
they participate in mammalian sex determination
and gonadal development?. Seminars in cell &
Developmental Biology. 2017;63:13-22.
5. Guerrero-Fernández J, Azcona C, Barreiro J,
Bermúdez JA, Carcavilla A, Castaño LA, et al. Guía
de actuación en las Anomalías de la Diferenciación
Sexual (ADS)/Desarrollo Sexual Diferente (DSD).
Grupo de trabajo sobre ADS/DSD de la Sociedad
Española de Endocrinología pediátrica (SEEP).
(s.f). p. 1-77. Recuperado de: https://www.seep.
es/images/site/home/GUIA_MANEJO_ADS_DSD_
SEEP.PDF