Gametogénesis

En la fertilización, los genomas materno y paterno se unen en el óvulo fecundado

de una célula, formando el cigoto. Para llevar los dos genomas al sitio de
unificación en el oviducto, se han desarrollado células especializadas conocidas
como gametos. El gameto materno, el ovocito, es la célula más grande del cuerpo
y tiene una competencia inherente para iniciar el desarrollo embrionario una vez
que ha pasado por un proceso conocido como activación, descrito bajo fertilización
en el Capítulo 5. Esta habilidad particular del ovocito se utiliza
biotecnológicamente, especialmente en clonación por transferencia nuclear. La
clonación implica eliminar el propio genoma del ovocito y luego hacer que el
citoplasma restante inicie el desarrollo embrionario basado en el genoma de una
célula donante nuclear fusionada con el ovocito (véase el capítulo 21). El gameto
paterno, el espermatozoide, por otro lado, ha desarrollado un capacidad de
movimiento y penetración de las inversiones del ovocito; Son estas cualidades
dinámicas del espermatozoide las que le permiten transportar el genoma paterno
del macho a la hembra. A continuación, nos centraremos en cómo se desarrollan
estos gametos especializados, cómo se prepara su genoma para la fertilización y
cómo se consigue la arquitectura particular de las células. La primera fase de este
proceso involucra la población de la gónada en desarrollo por las células
germinales primordiales a partir de las cuales se desarrollan las células
germinales. El proceso posterior, por el cual los gametos maternos y paternos se
producen a partir de las células germinales primordiales, se denomina
gametogénesis. La gametogénesis incluye la meiosis, para permitir la
recombinación de material genético y la reducción del número de cromosomas del
complemento diploide al haploide, y la citodiferenciación, para lograr la estructura
celular característica del gameto femenino o masculino.

CÉLULAS GERMINALES PRIMORDIALES

Las células germinales primordiales son las predecesoras de los gametos
femeninos y masculinos. Cuando el embrión se diferencia en las capas germinales
somáticas (ectodermo, mesodermo y endodermo) durante el proceso de
gastrulación (véase el capítulo 7), la mayoría de las células pierden su
pluripotencia (la capacidad de convertirse en todos los tipos de células del cuerpo
de los mamíferos). Sin embargo, un conjunto de células sigue siendo pluripotente.
Estas son las células germinales primordiales que, al menos en el cerdo, se
vuelven reconocibles por primera vez en el borde posterior del disco embrionario
en la gastrulación. Desde aquí se mueven hacia el mesodermo y el endodermo
recién formados (fig. 4-1). Unos días más tarde, las células germinales
primordiales se encuentran en el mesodermo visceral que rodea el saco vitelino y
el alantoides fuera del embrión propiamente dicho. Presumiblemente, las células
germinales primordiales se llevan a esta ubicación fuera del embrión en formación
para "rescatarlas" de las señales de diferenciación que impulsan la gastrulación
dentro del embrión propiamente dicho. Cuando se forman los primeros somitas,
las células germinales primordiales se pueden encontrar en el mesodermo tanto
del saco vitelino como del allan-tois, pero también en el mesodermo de la cresta
genital incipiente, donde están listas para poblar la gónada en desarrollo ( Figuras
4-2, 4-3, 4-4). Por lo tanto, activamente

Fig4-1: Posición de las células germinales primordiales en el endodermo. A: Disco

embrionario de un embrión de cerdo en el día 14 de desarrollo. Tenga en cuenta la
racha primitiva (1). La línea "B" indica el plano de sección de la Fig. 4-1B. B:
sección transversal del disco embrionario teñido para el 4 de octubre. Tenga en
cuenta los núcleos teñidos con Oct4 individuales en el endodermo (1) que
identifican las células germinales primordiales (flechas). 2: mesodermo; 3:
Ectodermo ;.
Fig4-2: Migración de las
células germinales
primordiales (rojo) desde el
saco vitelino (1) a lo largo del
tallo del saco vitelino (2) hacia
el mesenterio (4) del intestino
primitivo (3) y hacia la cresta
gonadal (5) ubicada medial al
mesonefros (6). 7: alantoides;
8: Urachus (tallo alantoides).
Cortesía de Sinowatz y Rüsse
(2007)
Fig 4-3: Embrión porcino en el día 21 de desarrollo teñido para OCT4. Observe las
células germinales primordiales (pequeños puntos oscuros) en el tallo del saco
vitelino (flecha) donde regresan al embrión propiamente dicho.

o pasivamente, las células germinales primordiales se llevan a lo largo de la cara

caudal del saco vitelino y la alantoides hacia el mesenterio primitivo y luego hacia
la gónada aún indiferenciada, pero en desarrollo. Durante su reubicación, las
células germinales primordiales pueden reconocerse por su tamaño relativamente
grande y por el uso de técnicas de tinción especiales, como las de la actividad de
la fosfatasa alcalina o el factor de transcripción OCT4, que participa en el
mantenimiento de la pluripotencia celular (Figuras 4-3, 4). -4) Durante y después
de su migración, las células germinales primordiales proliferan por mitosis. Las
células germinales primordiales femeninas (XX) y masculinas (XY) se involucran
en la diferenciación sexual específica de las gónadas y quedan rodeadas por
células somáticas (capítulo 15). Ahora se les conoce como ovogonias y
espermatogonias, respectivamente. Estas células experimentan una mayor
proliferación antes de entrar en gametogénesis y, por tanto, en meiosis.

LOS CROMOSOMAS, MITOSIS Y MEIOSIS

Los rasgos de un nuevo individuo están determinados por genes específicos
identificados como secuencias de nucleótidos en el ácido desoxirribonucleico
(ADN). Es importante tener en cuenta que no son las secuencias de genes en sí
mismas, sino la expresión equilibrada y controlada de genes controlados por
regulación epigenética lo que es crucial para el comportamiento de las células y,
por tanto, para el desarrollo del concepto. Juntos con
Fig4-4: Corte sagital de un embrión porcino en el día 16 de desarrollo (A). La
sección está teñida para el 4 de octubre. Las casillas "B" y "C" están ampliadas. B:
núcleo de dos células germinales primordiales (flechas) ubicadas en la región de
la cresta gonadal en desarrollo. C: los núcleos de tres células germinales
primordiales (flechas) en la pared del alantoides (1). 2: saco vitelino; 3: intestino
primitivo; 4: cavidad amniótica; 5: Corazón. Modificado de Vejlsted et al. (2006).
Reproducido con permiso de John wiley & Sons, Inc.

numerosas proteínas, el ADN forma los cromosomas. Los cromosomas de un

individuo se heredan de la madre y el padre. En los seres humanos, donde los
genes se han cartografiado ampliamente a través del Proyecto del Genoma
Humano (HUGO), se estima que hay unos 25.000 genes en los 46 cromosomas.
El número de genes funcionales en los animales domésticos es probablemente
similar. En las células somáticas, los cromosomas aparecen como pares
homólogos para formar el complemento cromosómico diploide. El número de
cromosomas diploides se designa 2n, ya que incluye una copia materna y una
copia paterna de cada cromosoma. Los números de cromo-algunos diploides en
los animales domésticos se enumeran en la Tabla 4-1. Un par de cromosomas
comprende los cromosomas sexuales, mientras que los otros se denominan
autosomas. Si el par de cromosomas sexuales es XX, el individuo es
genéticamente una mujer; si es XY, genéticamente un macho. Un cromosoma de
cada par se hereda de la madre a través del ovocito y el otro del padre a través del
espermatozoide. Por lo tanto, para dar como resultado un complemento
cromosómico diploide normal en la fertilización, los gametos deben contener solo
un cromosoma de cada par, denominado complemento cromosómico haploide y
designado 1n. Los gametos, entonces, contienen solo la mitad del número de
cromosomas presentes en las células somáticas. Las divisiones de las células
somáticas ocurren a través de la mitosis, que transfiere una copia del
complemento cromosómico completo a cada una de las células hijas. Durante la
gametogénesis, sin embargo, los mecanismos especiales de la meiosis son
responsables de producir el complemento cromosómico haploide en las células
germinales.

Mitosis
La mitosis es el proceso por el cual una célula divide su complemento de
cromosoma uniformemente entre sus células hijas; karyokinesis describe el
proceso completo, incluida la mitosis, a través del cual el núcleo de un
Tabla 41: Número de cromosomas en varias especies animales (Rüsse y
Sinowatz, 1998)

célula da lugar a un núcleo en cada una de sus células hijas. Normalmente, la

cariocinesis se acompaña de citocinesis, la división del citoplasma (incluidos
orgánulos e inclusiones) entre las células hijas. Por tanto, la cariocinesis y la
citocinesis en combinación dan lugar a dos células hijas que, en principio, son
genéticamente idénticas a la célula madre, y cada una de ellas recibe el
complemento cromosómico diploide completo (fig. 4-5). La mitosis es una fase del
ciclo celular somático, la otra fase es la interfase. La interfase se subdivide en una
fase de brecha 1 (G1), una fase sintética de ADN (S) y una fase de brecha 2 (G2).
Durante la fase S, cada cromosoma replica su ADN para producir dos cromátidas.
Como ya se mencionó, el complemento cromosómico diploide se denomina 2n.
Antes de la fase S, cada cromosoma consta de una sola hebra de ADN, por lo que
cada gen está presente en dos copias (2c), una de origen materno y otra de origen
paterno. Después de la fase S, debido a que cada cromosoma ahora consta de
dos cromátidas, cada gen estará presente en cuatro copias (4c) aunque el número
de cromosomas se mantiene en 2n. Durante las fases G1, S y G2, los
cromosomas son extremadamente largos, se diseminan a través del núcleo en
dominios particulares y no se pueden reconocer con el microscopio óptico. La
mitosis se puede subdividir en pro, meta, ana y tello. etapas. Cuando la célula
pasa de G2 de la interfase a la profase de la mitosis, los cromosomas se enrollan,
se contraen, se condensan y se espesan (fig. 4-5 B). Se vuelven visibles con el
microscopio óptico y se puede ver que cada una consta de dos cromátidas, unidas
en una región estrecha conocida como centrómero. También durante la profase, el
par de centriolos se duplica en el citoplasma adyacente al núcleo y los dos pares
resultantes se disponen en polos opuestos del núcleo. A medida que la célula se
mueve de la pro a la metafase (una etapa a la que a menudo se hace referencia
como pro-metafase), los microtúbulos comienzan a formarse a partir de los dos
pares de centriolos y la envoltura nuclear comienza a desmantelarse (Fig. 4-5 C).
Algunos de los microtúbulos de cada par de centríolos se adhieren a las
estructuras de las cromátidas, los cinetocoros, que se encuentran en el
centrómero de cada cromosoma. Esto establece el huso mitótico con un par de
centríolos en cada polo. Otros microtubulos pasan continuamente de un par de
centriolos a otro sin adherirse a los cromosomas. A medida que se forma el huso,
los cromosomas se alinean en su plano ecuatorial, definiendo la metafase de la
célula.

Fig. 4-5: Fases de la mitosis: A: G2 de la interfase; B: profase; C: Prometafase; D:

metafase; E: anafase; F: telofase; G: Células hijas en G1 de interfase. Cortesía de
Sinowatz y Rüsse (2007).
división (Fig. 4-5 D). Posteriormente, el centrómero de cada cromosoma se divide,
las dos cromátidas se separan y, tiradas por los microtúbulos, comienzan a migrar
hacia los polos del huso durante la fase ana (fig. 4-5 E). En esta etapa, cada
cromátida se ha transformado en un nuevo cromosoma. La disposición de los
cromosomas en dos grupos, uno en cada polo del huso, establece la telofase de la
división (Fig. 4-5 F). Más adelante en la telofase, los cromosomas se desenrollan y
alargan, y se vuelve a formar una envoltura nuclear en cada una de las células
hijas nacientes (Fig. 4-5 G). Este evento completa la división del núcleo y su ADN
(cariocinesis) en dos núcleos hijos que contienen las mismas secuencias de ADN
y el mismo número de cromosomas que el núcleo parental inicial (2n, 2c). A la
cariocinesis le sigue la citocinesis para dividir el citoplasma por igual entre las
células hijas.

Mitosis
La meiosis es un proceso que involucra dos divisiones celulares especializadas
(meiosis I y II) que tienen lugar en las células germinales para generar gametos
maternos y paternos haploides, el ovocito y el espermatozoide. Cada una de las
dos divisiones meióticas incluye las mismas fases que en la mitosis: pro, meta-,
ana- y telofase excepto por la falta de profase en la meiosis II. Además de producir
gametos con el complemento haploide de los cromosomas, una segunda función
de la meiosis, igualmente importante, es permitir la recombinación genética; el
proceso que asegura que el genoma de la próxima generación será una
combinación única de genomas parentales. Los procesos más complejos ocurren
durante la meiosis I, que se caracteriza por una profase particularmente larga que
se puede subdividir en etapas de leptoteno, cigoteno, paquiteno y diploteno y
diaquinesis. Está más allá del alcance de este texto abordar cada uno de estos
subestados más allá de decir que toman sus nombres de la apariencia morfológica
de los cromosomas. Tan pronto como la célula germinal ha iniciado la meiosis I, la
materna se denomina ovocito primario, mientras que el equivalente paterno es un
espermatocito primario. En la mujer, la meiosis se inicia durante la vida fetal, luego
se detiene en la etapa de diploteno de la meiosis I hasta después de la pubertad, y
solo se reanuda poco antes de la ovulación. Esta duración prolongada de la etapa
de diploteno también se conoce como etapa de dictado. En el hombre, por otro
lado, la meiosis no se inicia hasta después de la pubertad, pero luego se convierte
en un proceso continuo.

Crossover y recombinación genética

Como en la mitosis, las células germinales maternas y paternas (ovogonias y
espermatogonias) pasan por una fase S antes de iniciar la meiosis. Esto forma dos
cromátidas en cada cromosoma (2n, 4c) como en la mitosis. Este es el estado de
la célula germinal cuando entra en la etapa lepto-tene de la profase de la meiosis I
(fig. 4-6). Sin embargo, a diferencia de la mitosis, los cromosomas homólogos se
alinean en pares durante la profase de la meiosis I. Por lo tanto, cada par de
cromosomas consta de cuatro cromátidas (4c) y, por lo tanto, se denomina
tétrada. unido a su contraparte paterna en toda su longitud por el complejo
sinaptonemal. Las cromátidas encajan perfectamente, punto por punto, en la
hembra; lo mismo ocurre en el hombre, excepto en la combinación XY, donde el
cromosoma Y más pequeño no coincide con el cromosoma X. Este
emparejamiento de cromosomas permite el intercambio de segmentos de
cromátidas a través de un proceso de cruce. Las cromátidas se retuercen, o se
cruzan, en ciertos puntos (los quiasmas) para formar una estructura en forma de
X. Más tarde, durante la profase, el complejo sinaptonémico se descompone
gradualmente, el ADN se rompe en el quiasma y los extremos libres de las
contrapartes se unen, intercambiando así segmentos de ADN entre las cromátidas
maternas y paternas. Este intercambio de cromatina, junto con la segregación
aleatoria de los cromosomas maternos y paternos durante la meiosis II (ver más
adelante), proporciona el trasfondo molecular para la recombinación genética que
es característica de la reproducción sexual. Durante la diaquinesis, los
cromosomas homólogos se liberan gradualmente de cada uno de ellos. otro. Con
la transición de la diaquinesis a la metafase de la meiosis I, la envoltura nuclear
desaparece y
Fig 4-6: Fases de la meiosis en el macho (A) y la hembra (B). Cortesía de
Sinowatz y Rüsse (2007)

se forman husillos meióticos. En la célula germinal masculina, los polos del huso
meiótico están constituidos por pares de centriolos como durante la mitosis. Sin
embargo, al menos en las grandes especies domésticas y en contraste con las de
los ratones, el ovocito carece de centríolos y los polos del huso están formados
por material desconocido ultraestructuralmente reconocible como pequeños
grupos de vesículas. Los microtúbulos del huso se unen a cada cromosoma
homólogo en una tétrada en la meiosis I en lugar de a las cromátidas como lo
hacen en la mitosis. Durante la metafase de la meiosis I, los cromosomas se
alinean en el plano ecuatorial pero, durante la anafase, son los cromosomas
homólogos, no sus cromátidas, los que se separan para agruparse en los polos
del huso durante la telofase. Por tanto, a diferencia de la mitosis, la meiosis I
separa los cromosomas homólogos en lugar de las cromátidas. Una vez
completada la meiosis I, la célula germinal es haploide y contiene solo un
cromosoma (1n) de cada par de cromosomas. Debe subrayarse, sin embargo, que
el contenido de ADN de la célula germinal en esta etapa sigue siendo 2c porque
cada cromosoma consta de dos cromátidas.

Espermatocitos, espermátidas, ovocitos y cuerpos polares

Al final de la telofase de la meiosis I, el espermatocito primario se divide en dos
espermatocitos secundarios por citocinesis (fig. 4-6). En el ovocito, sin embargo, el
huso se encuentra en la periferia de la célula esférica grande y la telofase está
asociada con una citocinesis muy desigual, lo que hace que una de las dos células
hijas sea mucho más grande que la otra. La célula hija más grande ahora se
conoce como un ovocito secundario, mientras que la célula hija pequeña, que está
casi desprovista de orgánulos, es el primer cuerpo polar. Inmediatamente después
de la finalización de la meiosis I, los ovocitos secundarios y los espermatocitos
secundarios inician la meiosis II sin una interfase. En consecuencia, no hay fase S,
no hay replicación del ADN y los cromosomas permanecen con la misma cantidad
de ADN (2c). Los cromosomas también permanecen contraídos, listos para
progresar directamente a través de la meta-, ana- y telofase de la meiosis II sin
necesidad de pasar por una profase. Por telofase de la meiosis II, las dos
cromátidas de cada cromosoma se han separado, por lo que cada gameto recibe
solo un cromosoma de cada par homólogo (1n) que contiene una sola hebra de
ADN (1c). El espermatocito secundario se divide en dos espermátidas. El ovocito,
en cambio, se vuelve a dividir de manera desigual dando lugar a una gran célula
hija, precursora del cigoto y el embrión, y un pequeño segundo cuerpo polar.
Además, en el ovocito, la meiosis II se detiene en la metafase, la etapa (M II) en la
que se ovula el ovocito. Las excepciones a esta regla se encuentran en el perro y
el zorro donde el ovocito es ovulado en la profase de la meiosis I. En las grandes
especies domésticas al menos, el primer y segundo cuerpo polar degeneran sin
dividirse.

CITODIFERENCIACIÓN DE LOS JUEGOS

Si bien la meiosis equipa a los gametos con el número de cromosomas haploides
y permite la recombinación genética, existe una necesidad paralela de construir la
arquitectura celular especializada que caracteriza a los dos gametos. Esta
citodiferenciación forma ovocitos de ovogonias a través de ovogénesis y
espermatozoides de espermatogonias a través de espermatogénesis.

Ovogénesis
Desarrollo de folículos primordiales.
Después de llegar y proliferar en la gónada femenina en desarrollo, las células
germinales primordiales quedan rodeadas por células foliculares, células
somáticas planas derivadas del epitelio de la superficie del ovario en desarrollo
(fig. 4-7). Esto convierte a las células germinales primordiales en ovogonias que
continúan proliferando, pero sin completar la citocinesis, dejándolas unidas entre
sí por estrechos puentes citoplasmáticos. Las agrupaciones resultantes de
ovogonias derivadas de células germinales primordiales individuales pueden
identificarse en el embrión en etapas de desarrollo que varían según la especie
(cuadro 4-2).

Fig4-7: El desarrollo del folículo primordial. A: Célula germinal primordial (1)

rodeada de células prefoliculares (2). B: Grupo de ovogonias (3) y ovocitos (4)
asociados con células prefoliculares. C: multiplicación de células precaliculares
(5). D: Desarrollo de las células prefoliculares en células foliculares (6) rodeadas
por una lámina basal (7) y asociadas con ovocitos individuales. E: el último folículo
primordial aislado. Cortesía de Sinowatz y Rüsse (2007).
La mayoría de las ovogonias continúan con su proliferación mitótica, pero algunas
se diferencian en ovocitos primarios mucho más grandes. Estos últimos entran
inmediatamente en la fase S del ciclo celular y luego en la profase de la meiosis I.
Los oogonios proliferan rápidamente y en algunas especies (en particular, la vaca
y el ser humano) se cuentan en millones (cuadro 4-3). Sin embargo, esta
proliferación es seguida por la apoptosis que conduce a la pérdida de la mayoría
de las ovogonias y ovocitos primarios y sólo sobrevive una pequeña población
cerca de la superficie del ovario en desarrollo. Todos los ovocitos primarios
supervivientes han entrado en la profase de la meiosis I cuando se detienen en la
etapa de diploteno, todavía con un núcleo intacto. Cubiertos por células foliculares
planas, estos ovocitos forman folículos primordiales (Figs. 4-8, 4-9, 4-10). Las
células foliculares descansan sobre una membrana basal que las separa de las
células estromales circundantes. Los folículos primordiales constituyen el conjunto
de folículos quiescentes de los cuales la hembra reclutará folículos para el
crecimiento y la ovulación por el resto de su vida reproductiva. El número de
células germinales primordiales, ovogonias y ovocitos en varias especies animales
y en el hombre se enumeran en la tabla 4-3.

Crecimiento folicular y de ovocitos

El crecimiento folicular ocurre cuando los folículos se reclutan del conjunto
primordial y se convierten en
Tabla 4-2: Cronología de eventos durante la diferenciación de la gónada en varias
especies (Rüsse y Sinowatz, 1998)
folículos primarios, secundarios y terciarios. Cabe destacar que la gran mayoría de
los folículos que entran en una fase de crecimiento no la completan; la mayoría
degenera a través de un proceso denominado atresia y solo una minoría completa
su crecimiento hasta el punto de la ovulación. Al menos en las grandes especies
domésticas, el crecimiento folicular se inicia durante la vida fetal (cuadro 4-2). Sin
embargo, ninguno de los ovocitos encerrados en los folículos (excepto, quizás,
algunos folículos atrésicos) reanuda la meiosis hasta que se alcanza la pubertad.
Tras la activación del folículo primordial, las células foliculares comienzan a
proliferar y forman una monocapa cuboidal alrededor del ovocito para establecer el
folículo primario (Figs. 4-8, 4-9, 4-10). Las células foliculares ahora se denominan
células de la granulosa. Con esta activación se inicia una fase de crecimiento de
los ovocitos en la que el ovocito de la especie doméstica crece desde menos de
30 μm hasta más de 120 μm de diámetro. Durante este crecimiento, el ovocito
sufre muchos cambios morfológicos, incluido el desarrollo de gránulos corticales
(ver más abajo) en el citoplasma. Además, se vuelve competente tanto para
reanudar la meiosis como para mantener el desarrollo embrionario después de la
fertilización.Las células de la granulosa proliferan para formar varias capas
alrededor del ovocito en lo que se conoce como el folículo secundario (Figuras 4-
8, 4-9, 4-10). . El ovocito y las células de la granulosa circundantes sintetizan
ciertas glicoproteínas que se depositan entre él y las células de la granulosa
circundantes como zona pelúcida. Esta estructura está atravesada por numerosas
proyecciones de las células de la granulosa más internas que, por lo tanto,
mantienen el contacto con el ovocito a través de uniones gap. Las células
estromales que rodean las células de la granulosa se diferencian en un interior
Tabla 4-3: Número de ovogonias y ovocitos en distintas edades en diferentes
especies (Rüsse y Sinowatz, 2000)

la teca interna, una capa de células productoras de esteroides, y la teca externa,

formada por capas concéntricas de células que tienen funciones de apoyo. Las
células esteroidogénicas de la teca interna y las células de la granulosa son,
juntas, responsables de la síntesis de estradiol en el folículo a través de un
sistema de "dos células"; Las células de la teca interna producen andrógenos que
se transportan a las células de la granulosa donde se aromatizan en estrógenos. A
medida que continúa el desarrollo, aparecen espacios llenos de líquido entre las
células de la granulosa y se fusionan en una sola cavidad, el antro, que
caracteriza el folículo terciario ( Figuras 4-8, 4-9, 4-10). Estos folículos también se
denominan folículos antrales. En paralelo con la expansión del antro, el ovocito se
ubica en una protuberancia de células de la granulosa, el cúmulo oóforo, que se
extiende hacia el antro. Las células de la granulosa del cumulus oophorus se
denominan células de cumulus. A medida que se desarrolla el folículo, también lo
hace el ovocito hasta que alcanza su característica
 Figura 4-8: Desarrollo folicular
en el ovario bovino desde el
folículo primordial (1) a través
del folículo primario (2) y
secundario (3) hasta el
terciario (4). En el oviducto se
observa el ovocito maduro en
la metafase II (5), el cigoto
fecundado (6) que presenta
dos pronúcleos, el estadio de
2- (7), 4- (8) y 8 células (9), y
en la punta del cuerno uterino
se muestran la mórula (10) y
el blastocisto (11).

estructura. El proceso de ovulación es desencadenado por el pico preovulatorio de

LH, pero alguna evidencia sugiere que incluso antes de este estímulo, el ovocito
sufre cambios en el folículo antral en desarrollo que aumentan su competencia
para ser fertilizado y para apoyar el desarrollo embrionario inicial. Este proceso
puede denominarse capacitación de ovocitos.
Fig4-9: Desarrollo folicular en ganado. A: folículo primordial. El ovocito (1) está
rodeado por células foliculares planas (2) que descansan sobre una membrana
basal (3). 4: célula estromal; 5: Arteriola. B: folículo primario. El ovocito (1) está
rodeado por células de la granulosa cuboideas (2). C: folículo secundario
temprano en el que se ha hecho evidente la polarización del compartimento de las
células de la granulosa (flechas). El inserto muestra un detalle de la interfase
ovocito-célula de la granulosa con microvellosidades de ovocito (1), proyecciones
de células de la granulosa (2). 3: Mitocondria de ovocitos. D: folículo secundario.
El ovocito (1) está rodeado por un compartimento de células de la granulosa
multicapa (2) y las células del estroma han iniciado la formación de las capas de
teca (3). El inserto muestra un detalle de la interfase ovocito-célula de la granulosa
con proyecciones de células de la granulosa (4) que penetran en la zona pelúcida
en desarrollo (5). Las proyecciones de las células de la granulosa forman un
contacto de unión gap con el ovocito (6). 7: Complejo de Golgi de ovocitos. E:
Pequeño folículo terciario que presenta el antro (1) y el ovocito ubicado en el
cúmulo oóforo (2). F: Gran folículo terciario que presenta el ovocito en el cúmulo
oóforo (1) y la capa de células de la granulosa (2) que rodea el antro. La teca
interna (3) y la externa (4) se han diferenciado y están separadas de las células de
la granulosa por la membrana basal (6). Cortesía de Sinowatz y Rüsse (2007).

Fig4-10: Desarrollo folicular en ganado. A: folículo primordial que presenta células

foliculares planas (1) y el ovocito (2) con su núcleo (flecha). B: folículo primario
que presenta células de la granulosa cuboidea (3). 2: ovocito; Flecha: núcleo de
ovocitos. C: folículo secundario que presenta una capa de células granulosas
multicapa (3). 2: ovocito; Flecha: núcleo de ovocitos. D: Folículo terciario que
presenta la capa de células de la granulosa (3) y las células del cúmulo (5) que
encierran el ovocito (2). Las capas de células de teca (7) han comenzado a
formarse. 2: ovocito; 4: Antro; 6: Zona pelúcida.

Maduración folicular y de ovocitos

El folículo terciario continúa su desarrollo y, si se selecciona para la ovulación,
entra en una fase final de maduración folicular y de ovocitos estimulada por el pico
preovulatorio de LH. El período desde el inicio del pico de LH hasta la ovulación es
específico de la especie y varía desde menos de 12 h hasta más de 40 h. Durante
la maduración preovulatoria del folículo, la síntesis de esteroides cambia de
estradiol a la producción de progesterona y la pared del folículo se prepara para
romperse y liberar el ovocito. La maduración preovulatoria del ovocito tiene
componentes nucleares y citoplasmáticos (figs. 4-11, 4-12). Nuclear
Fig4-11: Maduración final de los ovocitos después del pico del pico de LH en el
ganado. Antes del pico de LH, el ovocito se encuentra en la etapa de diploteno y
se caracteriza por un núcleo ubicado periféricamente (rojo) y una ubicación
periférica de los orgánulos. A nivel ultraestructural, el ovocito presenta un retículo
endoplásmico liso (SER; verde) bien desarrollado, asociado con gotitas de lípidos
(grandes esferas negras) y mitocondrias (azul), complejos de Golgi (rojo) y grupos
de gránulos corticales (pequeñas esferas negras). . El ovocito se comunica a
través de uniones gap con proyecciones de las células del cúmulo (flechas).
Aproximadamente 10 h después del pico de LH, el ovocito ha reanudado la
meiosis y la envoltura nuclear se disuelve en SER, lo que hace que el núcleo, es
decir, la vesícula germinal, se rompa y los microtúbulos (líneas negras) aparezcan
adyacentes a los cromosomas en condensación (negro en rojo). núcleo). Se
desarrolla el espacio perivitelino entre el ovocito y la zona pelúcida, y en el ovocito
las mitocondrias tienden a organizarse alrededor de las gotitas de lípidos y los
complejos de Golgi han disminuido de tamaño. Las uniones gap entre el ovocito y
las proyecciones de las células del cúmulo se pierden parcialmente.
Aproximadamente 15 h después del pico de LH, el ovocito ha alcanzado la
metafase de la primera división meiótica (metafase I). El número y tamaño de las
gotas de lípidos ha aumentado, las mitocondrias se han reunido alrededor de las
gotas y estos conglomerados han alcanzado una distribución más uniforme en
todo el citoplasma. Han aparecido numerosos ribosomas (puntos negros),
especialmente alrededor de los cromosomas, y el tamaño de los complejos de
Golgi ha disminuido aún más. Se han roto las uniones entre el ovocito y las
proyecciones de las células del cúmulo. Aproximadamente 24 h después del pico
de LH, el ovocito ha alcanzado la metafase de la segunda división meiótica
(metafase II) y el primer cuerpo polar se ha abstricto. La mayor parte de los
gránulos corticales se distribuyen en posiciones solitarias a lo largo de la
membrana plasmática. Las gotitas de lípidos y las mitocondrias han alcanzado una
ubicación más central en el citoplasma dejando una zona periférica bastante libre
de orgánulos en la que las características más prominentes son grandes grupos
de SER. Los complejos de Golgi están prácticamente ausentes. La ovulación
ocurre alrededor de 24 h después del pico del pico de LH.
Fig. 4-12: Secciones de ovocitos bovinos. A: Ovocito bovino en etapa de diploteno.
Flecha: Núcleo. 1: Zona pelúcida; 2: Células de cúmulo. B: ovocito bovino en la
metafase de la segunda división meiótica (metafase II). Flecha: placa en metafase
II con el primer cuerpo polar adyacente; 1: Zona pelúcida; 2: Células de cúmulo.

La maduración de los ovocitos se refiere al proceso de meiosis que se reanuda

desde la etapa de diploteno de la meiosis I y continúa hasta la metafase de la
meiosis II cuando (excepto en el perro y el zorro) el ovocito está ovulado. El núcleo
del ovocito primario a menudo se denomina vesícula germinal y la reanudación de
la meiosis se evidencia morfológicamente por la ruptura de esta estructura (fig. 4-
11). La maduración de los ovocitos citoplasmáticos implica la reestructuración y
modulación de muchos de los orgánulos del ovocito. Es particularmente conspicuo
en el ganado, donde los gránulos corticales (que, antes del pico de LH, se
encuentran en grandes grupos) migran a posiciones solitarias adyacentes a la
membrana plasmática en preparación para la exocitosis en la fertilización (Fig. 4-
11).
Espermatogénesis
Desarrollo de espermatogonias y túbulos seminíferos.
Después de llegar y proliferar en la gónada en desarrollo masculina, las células
germinales primordiales se localizan en cordones sólidos de células
sustentaculares primitivas, las progenitoras de las células de Sertoli, desarrolladas
a partir del epitelio superficial de la gónada. Poco antes de la pubertad, los
cordones celulares adquieren una luz y se convierten en los túbulos seminíferos
de los testículos. En paralelo, las células sustentaculares asumen gradualmente
las características de las células de Sertoli y las células germinales primordiales se
convierten en espermatogonias (Figs. 4-13, 4-14). La espermatogénesis incluye
todos los eventos por los cuales las espermatogonias se transforman en
espermatozoides. Este proceso se puede subdividir en espermatocitogénesis (el
desarrollo de espermatocitos a partir de espermatogonias), meiosis (las dos
divisiones meióticas de los espermatocitos) y espermiogénesis (la reestructuración
celular de las espermátidas en espermatozoides sin división celular). La meiosis
ya se ha descrito, por lo que el énfasis aquí estará en la espermatogénesis y la
espermiogénesis. Existe una estrecha relación celular entre las células
espermatogénicas y las células de Sertoli durante la espermatogénesis; Las
células de Sertoli son necesarias tanto para el apoyo físico como para la
regulación paracrina de la espermatogénesis, y también forman la barrera hemato-
testicular sellando los túbulos seminíferos con uniones estrechas.

Espermacitogénesis
Las espermatogonias se localizan periféricamente en los túbulos seminíferos
adyacentes a la lámina basal y afuera (es decir, en el lado de la sangre) de la
barrera hemato-testicular. Se pueden identificar tres tipos: espermatogonias tipo A,
intermedias y tipo B. Las espermatogonias de tipo A1 son las células madre de la
espermatogénesis. Por tanto, las primeras mitosis en un espermatogonio de tipo
A1 darán como resultado una nueva célula madre de tipo A1 y un espermatogonio
de tipo A2 de segunda generación con la capacidad de progresar a través de la
espermatogénesis (fig. 4-15). Esto asegura una población perpetua de células
madre para la espermatogénesis. El espermatogonio de tipo A2 dará lugar, al
menos en rumiantes, a otra generación subsiguiente de espermatogonias de tipo
A3, que finalmente se dividirán en espermatogonias intermedias que comparten
características morfológicas con las espermatogonias de tipo A y de tipo B. Las
espermatogonias intermedias dan lugar a espermatogonias de tipo B de
espermatogonias que se localizan periféricamente en los túbulos seminíferos
adyacentes a la lámina basal y fuera (es decir, en el lado de la sangre) de la
barrera hemato-testicular. Se pueden identificar tres tipos: espermatogonias tipo A,
intermedias y tipo B. Las espermatogonias de tipo A1 son las células madre de la
espermatogénesis. Por tanto, las primeras mitosis en un espermatogonio de tipo
A1 darán como resultado una nueva célula madre de tipo A1 y un espermatogonio
de tipo A2 de segunda generación con la capacidad de progresar a través de la
espermatogénesis (fig. 4-15). Esto asegura una población perpetua de células
madre para la espermatogénesis. El espermatogonio de tipo A2 dará lugar, al
menos en rumiantes, a otra generación subsiguiente de espermatogonias de tipo
A3, que finalmente se dividirán en espermatogonias intermedias que comparten
características morfológicas con las espermatogonias de tipo A y de tipo B. Las
espermatogonias intermedias dan lugar a espermatogonias de tipo B de las que
hay dos generaciones, al menos en rumiantes.

Mitosis
La última división mitótica de las espermatogonias de tipo B da como resultado la
formación de espermatocitos primarios. Estas células entran en la meiosis I, con
su profase característicamente prolongada. A diferencia del ovocito, el
espermatocito no se detiene en la etapa de diploteno en la profase. Los
espermatocitos se reubican a través de la barrera hemato-testicular hacia el
compartimento luminal de los túbulos seminíferos. Esto es provocado por un
mecanismo similar a una cremallera que involucra uniones estrechas; las uniones
se forman detrás (basales) de los espermatocitos antes de que las uniones
delante de ellos (en su lado luminal) se disuelvan para dejar pasar las células. La
finalización de la meiosis I da como resultado la formación de dos espermatocitos
secundarios que se dividen cada uno en dos espermátidas a través de la meiosis
II. A lo largo de esta serie de divisiones, desde la espermatogonía de tipo A de
segunda generación hasta las espermátidas, la citocinesis es incompleta, dejando
a todas las células de una generación aún conectadas a través de delgados
puentes citoplasmáticos.

Espermiogénesis
Las espermátidas se transforman en espermatozoides por espermiogénesis, que
comprende cuatro fases: las fases de Golgi, capuchón, acrosoma y maduración.
Durante la fase de Golgi, el complejo de Golgi produce gránulos acrosomales que
se fusionan para formar un solo gránulo acrosómico grande que se localiza
adyacente al núcleo (fig. 4-16). El par centríolo de la espermátide se reubica en el
polo opuesto del núcleo donde el centríolo proximal se une al núcleo. Al mismo
tiempo, un axonema, que consta de dos microtúbulos centrales rodeados por
nueve dobletes, se desarrolla a partir del centríolo distal. Durante la fase de tapa,
el gránulo acrosómico se aplana y cubre una porción más grande del núcleo de la
espermátide. Durante la fase acrosómica, el croma-estaño en el núcleo se
condensa a medida que se acumulan las histonas.

Fig4-13: Célula de Sertoli y células espermatogénicas en los túbulos seminíferos

del testículo. 1: célula de Sertoli; 2: Espermátide - fase de maduración; 3:
Espermátide - fase cap; 4: Espermátide - fase acrosómica; 5: Espermátide - Fase
de Golgi; 6: espermatocitos primarios conectados por puentes citoplásmicos; 7:
barrera hemato-testicular; 8: espermatogonio; 9: Lámina basal; 10: Núcleo de
células de Sertoli. Modificado de Liebich (2004).
Fig.4-14: Secciones de los testículos de un jabalí (A) y un carnero (B). A: Túbulos
seminíferos (1) del testículo del verraco con células de Leydig (2) entre ellos. B:
Túbulo seminífero del carnero con células de Sertoli (3), espermatogonias (4),
espermatocitos (5) y espermátidas (6).

intercambiado con protaminas. El gránulo acrosómico se reestructura en el

acrosoma, que contiene enzimas de importancia para la penetración del
espermatozoide de las inversiones del ovocito en la fecundación. Finalmente, el
acrosoma cubre aproximadamente dos tercios del núcleo condensado del
esperma-tid, el citoplasma se asigna al desarrollo de la cola del esperma y las
mitocondrias se disponen alrededor del axonema en crecimiento. A medida que
avanzan estos cambios, la espermátide gira de modo que el acrosoma se enfrenta
a la lámina basal del túbulo seminífero y la cola en desarrollo se enfrenta a la
luz.Durante la fase de maduración, se desarrolla la arquitectura específica de la
cabeza y la cola del espermatozoide. La mayor parte del citoplasma, incluida la
mayoría de los orgánulos, se extrae como cuerpo residual (que es fagocitado por
la célula de Sertoli) y se intercambia con protaminas. El gránulo acrosómico se
reestructura en el acrosoma, que contiene enzimas de importancia para la
penetración del espermatozoide de las inversiones del ovocito en la fecundación.
Finalmente, el acrosoma cubre aproximadamente dos tercios del núcleo
condensado del esperma-tid, el citoplasma se asigna al desarrollo de la cola del
esperma y las mitocondrias se disponen alrededor del axonema en crecimiento. A
medida que avanzan estos cambios, la espermátide gira de modo que el
acrosoma se enfrenta a la lámina basal del túbulo seminífero y la cola en
desarrollo se enfrenta a la luz.Durante la fase de maduración, se desarrolla la
arquitectura específica de la cabeza y la cola del espermatozoide. La mayor parte
del citoplasma, incluida la mayor parte de los orgánulos, está restringida como
cuerpo residual (que es fagocitado por la célula de Sertoli) y las espermátidas
están desconectadas entre sí. Finalmente, los espermatozoides se liberan de las
células de Sertoli al lumen de los túbulos seminíferos.

Espermatozoide
La longitud del espermatozoide en el momento de la liberación varía según la
especie, pero varía de aproximadamente 60 μm en el jabalí a 75 μm en el toro. A
nivel microscópico óptico, los espermatozoides parecen estar formados por dos
estructuras: la cabeza y la cola. Sin embargo, con el microscopio electrónico, la
cola se puede subdividir en cuello, pieza intermedia, pieza principal y pieza
terminal (figs. 4-17). La cabeza del espermatozoide contiene el núcleo, que
determina la forma de la cabeza.
Figura 4-15: Espermatogénesis en el toro. El espermatogonio del tallo A1 rodeado
se divide en un espermatogonio A2, que ingresa a la diferenciación en los
espermatozoides, y un espermatogonio A1, que asegura el suministro continuo de
células madre espermatogénicas en los túbulos seminíferos.

La porción anterior del núcleo está cubierta por el acrosoma delimitado por una
membrana acrosomal externa e interna. El acrosoma contiene enzimas hidrolíticas
que se liberan durante la fertilización como resultado de la reacción del acrosoma
(capítulo 5). La región posterior del acrosoma es estrecha y esta región de la
cabeza del esperma se denomina región ecuatorial, que continúa posteriormente
hacia la región postacrosómica. El núcleo del espermatozoide tiene una capa
citoesquelética conocida como teca perinuclear que contiene factores activadores
de los ovocitos. El cuello es corto y está conectado a la cabeza por una placa
basal. Contiene un centríolo proximal y un centríolo distal que continúa en el
axonema de la cola. Los centríolos están rodeados por nueve fibras gruesas
periféricas, que se continúan en las fibras gruesas de la cola.La pieza central de la
cola tiene la estructura característica de un flagelo, que contiene un centro

Fig.4-16: El desarrollo de las espermátidas a través de la fase de Golgi, la fase de

casquete, la fase acrosómica y la fase de maduración. Modificado de Liebich
(2004).

axonema que consta de dos microtúbulos centrales y nueve dobletes periféricos.

El axonema está rodeado por las nueve fibras gruesas, que, a su vez, están
rodeadas por una hélice de mitocondrias alargadas. En rumiantes, la hélice
mitocondrial incluye alrededor de 40 vueltas. Un engrosamiento en forma de anillo
de la membrana plasmática de la pieza central, el anillo, marca el límite entre la
pieza central y la pieza principal de la cola. La pieza principal de la cola es la
porción más larga. Contiene el axonema rodeado por las nueve fibras gruesas. La
hélice mitocondrial ya no está presente, y las fibras gruesas están rodeadas por
nervios semicirculares de proteínas estructurales que se han fusionado con dos de
las fibras gruesas para formar la vaina fibrosa. la cola está marcada por el final de
la vaina fibrosa. Proximalmente, la pieza terminal todavía contiene el axonema,
pero distalmente los dobletes de micro-túbulos periféricos se reducen en singletes
que terminan en varios niveles. Los espermatozoides son transportados por
contracciones peristálticas de los túbulos seminíferos y los conductos
subsiguientes y, en el conducto epididimario, adquieren motilidad y capacidad
fecundante.

Fig4-17: La estructura del espermatozoide de toro. La cabeza (I) está conectada a

la pieza central (III) por el cuello (II). La pieza intermedia se continúa en la pieza
principal (IV) y la pieza final (V). La cabeza presenta un núcleo (1) con cromatina
compacta y la porción anterior del núcleo está cubierta por el acrosoma (2) con
membranas acrosómicas internas y externas ubicadas dentro de la membrana
plasmática (3). Una placa basal (4) conecta la cabeza al cuello, que contiene un
centríolo proximal (5) y un centríolo distal que se extiende hacia el axonema
ubicado centralmente en la pieza central y la pieza principal de la cola que consta
de dos centrales (6) y 9 dobletes periféricos (7) de microtúbulos. La pieza
intermedia presenta 9 fibras gruesas (8) rodeadas por una hélice mitocondrial (9).
En la pieza final, el axonema se pierde gradualmente. 10: segmento ecuatorial de
la cabeza; 11: Vaina fibrosa. Cortesía de Sinowatz y Rüsse (2007).

Recuadro 4-1 Regulación molecular del desarrollo de la línea germinal

En cuanto a las tres capas germinales principales, la especificación de la línea
germinal ocurre durante el proceso de gastrulación. Al menos en ratones, la
especificación se inicia mediante señales locales que se originan fuera del
embrión propiamente dicho. Estos incluyen las proteínas morfogenéticas óseas
(BMP) 4 y 8b que actúan a través de la vía Smad. Las células del epiblasto que
responden inician entonces la expresión de fragilis / Ifitm3 y, a partir de esta
población de células del epiblasto especificadas, se reclutan células precursoras
restringidas en la línea germinal. Un regulador transcripcional clave durante este
proceso es Blimp1 / Prdm1. Las funciones relacionadas con Blimp1 incluyen la
represión de los programas somáticos incipientes dentro de las células epiblasto
gastruladoras, un sello distintivo es la regulación a la baja de la expresión del gen
Hox. Otros genes relacionados con la especificación de la línea germinal incluyen
Stella y c-kit, este último sirve como receptor para el ligando del factor / kit de
células madre que se expresa en las células que recubren la ruta del transporte de
células germinales a la gónada en desarrollo. Junto con la represión del destino de
las células somáticas, los precursores de la línea germinal mantienen la expresión
de genes asociados a la pluripotencia, incluidos Oct4, Sox2 y Nanog, y muestran
modificaciones epigenéticas sustanciales. Estos últimos incluyen la desmetilación
global del ADN a medida que las células germinales pueblan la cresta genital
seguida de metilación de novo y adquisición de improntas específicas del sexo
durante la gametogénesis subsiguiente (véase el capítulo 2, figura 2-3). En el
embrión femenino, las células germinales entran en la meiosis al principio del
desarrollo ovárico. Los marcadores moleculares expresados durante este período
de desarrollo incluyen Stra8 y SCP3, este último una proteína del complejo
sinaptonémico involucrado en el apareamiento de cromosomas homólogos.
Aparentemente, la entrada en la meiosis provoca la pérdida de pluripotencia en las
células germinales. Los ovocitos guían el desarrollo gonadal temprano. La
foliculogénesis se inicia mediante la expresión del factor de transcripción Figα, un
factor específico de las células germinales femeninas y esencial para la
producción de proteínas de la zona pelúcida, por ejemplo. El desarrollo folicular
adicional depende de una gran cantidad de factores tanto endocrinos como
producidos localmente. En contraste con la situación en el embrión femenino, la
presencia de células germinales aparentemente no es necesaria para el desarrollo
de los testículos. En cambio, la diferenciación de la gónada está controlada por el
linaje celular de Sertoli inducido por la expresión del Srygene ligado a Y (región
determinante del sexo del cromosoma Y) en las células somáticas de la cresta
genital. Sox9, Fgf9 y Dax1 se encuentran entre los genes expresados después de
la expresión inicial de Sry. Al llegar a la cresta genital, se evita que las células
germinales masculinas entren en la meiosis. En cambio, entran en un estado de
detención mitótica cuando han alcanzado un número apropiado específico de la
especie.

RESUMEN
Las células germinales primordiales migran desde la pared del saco vitelino hasta
la gónada indiferente en desarrollo donde proliferan por mitosis. Las células
germinales primordiales se asocian con células somáticas y se convierten en
ovogonias y espermatogonias. Posteriormente, inician la gametogénesis que
incluye la meiosis y la citodiferenciación de los gametos. La meiosis proporciona a
los gametos el número de cromosomas haploides (la mitad del diploide) y la
recombinación, mientras que la citodiferenciación da como resultado la
reestructuración celular en las formas características de los dos gametos, el
ovocito y el espermatozoide. En la hembra, las ovogonias forman ovocitos
primarios que entran en la meiosis I pero se detienen en la etapa de diploteno de
la profase. Un ovocito primario rodeado por sus células somáticas (células
foliculares) constituye un folículo de dial primario, y este tipo de folículo constituye
el grupo de folículos en reposo a partir del cual se reclutan los folículos para el
crecimiento a través de las etapas primaria, secundaria y terciaria. El ovocito
primario no reanuda la meiosis y progresa a través de su maduración nuclear
hasta la metafase de la meiosis II hasta después de la pubertad, poco antes de la
ovulación. Paralelamente, el ovocito completa una maduración citoplasmática. En
el macho, las espermatogonias están asociadas con células somáticas en
cordones de células sólidas que son los progenitores de los túbulos seminíferos.
La espermatogénesis comienza después de la pubertad e incluye
espermatogénesis, meiosis y espermiogénesis. Spermacytogene-sis incluye varias
divisiones mitóticas de espermatogonias que se dividen en espermatocitos
primarios. Mediante las dos divisiones de la meiosis, los espermatocitos primarios
producen espermatocitos secundarios haploides y luego espermatides. La
espermiogénesis es el proceso de reestructuración de las espermátidas en
espermatozoides.