Universidad Santo Tomás

Departamento de Ciencias Básicas

Bioquímica – BIO-005

REPORTE LABORATORIO N°2:

pH - Titulación de aminoácidos

Integrantes:

Sección:

Objetivo General: ___________________________________________________

Objetivo Especifico: _________________________________________________

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1. Determinación de la curva de titulación para un aminoácido.

a) Mida con probeta 50 mL de una solución de histidina 0,05M pH=2. Posteriormente, transfiéralos
a un matraz Erlenmeyer 250 mL limpio.
b) A la solución dispuesta en el matraz, adicione 10 gotas de azul de timol y mida el pH, utilizando
pHmetro. Registre el valor y el color de la solución en la Tabla 2.
c) Llene una bureta de 50 mL con solución patrón de NaOH 0,1 M.
d) Incorpore una alícuota de 5 mL de NaOH a la solución de histidina en el matraz, luego, mida el pH
con pHmetro. Registre el valor y el color de la solución en la Tabla 2.
e) Repita adición de NaOH hasta completar los 50 mL de solución patrón. Registre el valor y color de
cada medición en la Tabla 2, y determine la concentración de OH - añadidos al matraz en cada
punto de adición.

RESULTADOS I

Tabla 1: (agregue su descripción) ______________________________________________________

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Volumen Color
[OH-] (M) pH
NaOH (mL) solución
0
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
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RESULTADOS II

1. Construya un gráfico de dispersión de puntos, con la curva de titulación del aminoácido,

utilizando como variable dependiente (Y)_________________ y variable independiente
(X)___________________.

Gráfico 1: (agregue su descripción) ____________________________________________________

______________________________________________________________________________
______________________________________________________________________________

Analice y explique cada zona de amortiguación y punto de inflexión de la curva obtenida.

Determine donde se encuentra el punto isoeléctrico (pI).
Modificaciones de protocolo y apuntes

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CUESTIONARIO

1. Defina los conceptos de Ka, pKa y Kw.

2. Explique químicamente la relación existente entre el pKa de un ácido y el pH al que este se

encuentra.
3. Explique la importancia de las soluciones buffer en la fisiología humana.

4. Indique los pares ácido–base conjugados con los que se trabajará en el presente práctico.

5. Identifique los grupos funcionales protonables de la glicina, histidina y glutamato.

6. Indique la importancia, en relación a su carrera, del buffer fosfato.

7. Interprete la curva de titulación para los aminoácidos alanina y glutamato.

8. Para preparar una solución con el fármaco L1.1, es necesario utilizar concentraciones muy bajas
debido a la poca solubilidad del compuesto en agua. Sabiendo que el fármaco posee un grupo
carboxilo en su estructura (pKa COOH= 4), explique si en su preparación ud utilizaría un tampón
fosfato (pH 7,2) o un tampón acetato (pH 4).