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GUÍA

1. Defina:
Oxidación: es el proceso mediante el cual átomos traspasan
electrones a otro átomo o molécula,(pérdida de electrones). La
oxidación es movimiento, es cambio, es liberación de energía.
Reducción: es el proceso electroquímico por el cual un átomo o ion
gana uno o varios electrones

Energía libre (G): es la porción de la energía total del sistema que


es capaz de realizar trabajo útil. Los cambios en la energía libre se
simbolizan como ΔG y representa la energía que queda disponible
para trabajo químico útil:

ΔG = ΔH - T ΔS

en donde H es el contenido de calor; T es la temperatura y S es la


entropía del sistema.

Compuesto rico en energía: es aquel que cuando se rompe sus


enlaces “ricos en energía”, sus productos adquieren formas más
estables que el compuesto original.

Potencial estándar de reducción (∆E°): es la medida de afinidad


por los electrones.
2. Qué implica una reacción con:
∆G: negativo: es un proceso que transcurre de manera espontánea
hacia el equilibrio en la dirección descrita, debido en parte a un
aumento de la entropía o desorden del sistema. La reacción es
exergónica. Ya que implica liberación de energía.
∆G positivo: es un proceso que transcurre de manera espontánea en
la dirección inversa de la que esta descrita, debe aplicársele energía
procedente de cualquier otra fuente para que pueda discurrir hacia el
equilibrio. La reacción es endergónica.
∆G= 0: el proceso se encuentra en equilibrio y no existe un flujo neto
en una u otra dirección de la reacción.
3. Cuánta energía se libera al hidrolizarse el ATP en ADP?
Al hidrolizarse cada fosfato del ATP libera mucha energía, unas
12 kcal/mol en las condiciones celulares, y en condiciones
experimentales, unas 7,3 kcal/mol.

4. Mencione dos compuestos con enlaces “rico-energéticos”


mayores que el ATP.
1,3 difosfoglicerato y el fosfoenolpiruvato .Esto no estoy muy segura,
porque el libro dice que pueden transferir su fosfato de elevada
energía.
5. Si se tiene un par redox ( A y B), en donde el ∆E° para A=
0.17v y para B= -0,32v, n=2. Indique el ∆G para esa reacción.
-

Sería suficiente esta energía para fosforilar un ADP y


sintetizar ATP?
Respuesta:
∆G = -n*F*∆E° donde: n = 2, F= constante de Faraday 96,5 KJ/mol
∆E° para A = -0.17v
∆G = -2*96.5 KJ/vmol * - 0.17 v 32.81 KJ/mol
∆E° para B = -0.32v
∆G = -2*96.5 KJ/vmol * - 0.32 v 61.76 KJ/mol
Aceptor – donador 32.81 – 61.76 = -28.95 KJ/mol
No es suficiente porque se necesita -35.7 KJ/mol para sintetizar un
ATP.

6. Esquematice la cadena respiratoria en la membrana interna


de la mitocondria, indique: los integrantes de los complejos
proteicos, los sitios del transporte de protones, los sitios de
ingreso de los electrones por NADH y FADH2, el espacio
intermembranal, la matriz mitocondrial.
En la membrana mitocondrial interna se encuentran las proteínas
transportadoras, principalmente los citocromos, que forman la cadena
respiratoria. Estas proteínas se ensamblan en cinco complejos
multiproteícos, denominados I, II, III, IV y V.
Complejo I, NADH-deshidrogenasa, Complejo II, Succinato
NADH-coenzima Q reductasa o deshidrogenasa o Succinato-
NADH-ubiquinona oxidoreductasa coenzima Q reductasa

RECIBE LOS ELECTRONES DE LA RECIBE LOS ELECTRONES DE LA


OXIDACIÓN DEL NADH Y LOS PASA A LA OXIDACIÓN DEL FADH2 Y LOS PASA A LA
COENZIMA Q, LA CUAL SE DESPLAZA COENZIMA Q.
LIBREMENTE A TRAVÉS DE LA
MEMBRANA INTERNA MITOCONDRIAL.

Complejo III, Citocromo c-coenzima Complejo IV o Citocromo oxidasa


Q oxidoreductasa o Complejo
citocromo bc1 Acopla la oxidación del citocromo c con
la reducción del oxígeno molecular a
Recibe los electrones de la reoxidación agua.
del coenzima Q y los transfiere al
citocromo c, en transportador
electrónico proteico que también puede
desplazarse por la membrana

Las reacciones globales de los complejos I, II, III y IV son exergónicas


y la energía liberada en ellas crea un gradiente de protones a través
de la membrana interna mitocondrial al resultar los protones
bombeados al espacio intermembrana. Este gradiente de protones
libera la energía suficiente para que tenga lugar la síntesis de ATP por
la ATP sintasa.

Complejo V o ATP sintasa

Permite el retorno de los protones al espacio de la matriz


mitocondrial a través de un canal específico. La energía
liberada por este proceso exergónico impulsa la síntesis
endergónica de ATP a partir de ADP y Pi
7. Cuál es el % de eficiencia de la cadena respiratoria?
Porqué el NADH no entrega directamente los electrones al O2
sin tener que pasar por la cadena respiratoria?
Respuesta:
8. Cómo se forma la fuerza protón-motriz y cuál es su
importancia?
Respuesta:

las mitocondrias pueden bombear protones desde la matriz hasta el


espacio intermembrana. En las mitocondrias el valor de pH en el
exterior es menor al de la matriz. Este gradiente de pH genera
también un potencial eléctrico debido al movimiento neto de
protones con carga positiva hacia el exterior a través de la membrana
externa. El gradiente de pH y el potencial de membrana contribuyen
ambos a producir un gradiente electroquímico de H+ denominado
fuerza protón motriz. Es decir, en la mitocondria hay cargas positivas
en el espacio intermembrana y cargas negativas en la matriz
mitocondrial, esta diferencia de cargas que hay a través de la
membrana es una fuerza que mueve los protones a querer volver a
entrar a la mitocondria.

9. Cuál es la función del complejo Fo-F1? Porqué se dice que


la fosforilación oxidativa está acoplada a la cadena
respiratoria?
Respuesta:
Es un complejo proteico, los protones solo pueden entrar por ahí. Fo
es una proteína integral de membrana, atraviesa la membrana de
lado a lado. F1 tiene actividad enzimática, la cual es de ATPsintasa,
generalmente se dice que es una ATPasa, fosforila un ADP para
sintetizar ATP.
Esta acoplada porque es necesaria la cadena respiratoria para que se
dé la fosforilación oxidativa ya que si no hay transporte de electrones
hacia el oxígeno, no va a ver transporte de protones hacia el espacio
intermembranal. Cada 4 protones que pasan por el complejo Fo-F1 se
sintetiza un ATP

10. Cuántos ATP se sintetizan por cada NADH que entrega sus
electrones a cadena respiratoria y cuántos por cada FADH2?
Respuesta:
Por cada NADH: 10 protones, 2.5 ATP
Por cada FADH2: : 6 protones, 1.5 ATP
11. Cómo se regula la velocidad del transporte de electrones
en la cadena respiratoria?
Respuesta:
La velocidad depende de las concentraciones de ATP y ADP. La misma
concentración de ATP y ADP y la velocidad de transporte de e- hacia
el oxígeno es un mecanismo clave en la regulación de la síntesis de
ATP. Asimismo el transporte de protones para que se de la fuerza
protón motriz y así estos ingresen hacia la formación de ATP depende
la concentración de ATP y ADP. Si hay mucho ATP se hace más lento o
disminuye el paso de e- por la cadena respiratoria.
Se puede medir el consumo de oxígeno, la formación de agua o la
síntesis de ATP para saber cuál es la velocidad de transporte de e-. Es
entonces esa relación de ATP –ADP la que regula la velocidad con la
que se da el transporte de e- y la cantidad de fuerza protón motriz
para la síntesis de ATP. Si hay poco ATP y mucho ADP (porque el ATP
se degrada) se internaliza una señal y aumenta la velocidad de
transporte de e-.Nunca se va a tener un exceso de ATP o de
nucleótidos en grandes cantidades porque siempre se está nivelando
y disminuyendo cuando se necesita.

12. Cuál es la diferencia entre un inhibidor y un desacoplante


de la cadena respiratoria?
Respuesta:
Un inhibidor son sustancias que bloquean el paso de los e-. Un
desacoplante sería el que no permite el acoplamiento (una cosa no se
puede dar sin la otra).

13. Cuál es el efecto sobre: a) consumo de O 2; b) síntesis de


H2O: c) síntesis de ATP de los siguientes compuestos:
a. Rotenona:
La rotenona es un compuesto producido por plantas tóxico que inhibe
el paso de los e- del complejo I al complejo Q. Si se mide consumo de
oxígeno en presencia y en ausencia de rotenona se ve que no se
inhibe del todo porque todavía entraba FADH2 al complejo II. La
formación de agua disminuye y la síntesis de ATP disminuye al igual
que la del oxígeno.

b. Antimicina A:
La antimicina A es otro compuesto producido por ciertos hongos e
inhibe el complejo III (entre el citocromo B y el C1), lo cual bloquea el
consumo de oxígeno, se bloquea el paso de e-; la síntesis de ATP se
detiene. No hay paso de protones tampoco. Por lo tanto se bloque el
consumo de O2, síntesis de H2O y síntesis de ATP.

c. Azida de Sodio:
Actúan entre el complejo IV y la entrega de los e- al oxígeno. No se
forma agua directamente. Todo se bloquea porque los complejos se
quedan con los e-. Son muy tóxicos, no sólo afecta la respiración
celular sino que desplaza el oxígeno en la hemoglobina y se une al
grupo hem. No hay síntesis de ATP, consumo de O2 ni producción de
agua.

d. 2,4 dinitrofenol:
Es un desacoplante de la cadena respiratoria. Si no hay fuerza protón
motriz no hay síntesis de ATP porque los e- no van a querer entrar. Se
dice que este compuesto adelgaza porque transporta protones del
espacio intermembranal hacia la matriz mitocondrial. Ese gradiente
se disipa, ya no hay cambio de pH ni diferencia de cargas. Si no hay
gradiente y lo protones no entran por F0 y F1 se diminuye la
concentración de ATP, aumenta la cadena respiratoria, los e- vienen
del metabolismo de carbohidratos y de los ácidos grasos y las
personas se enflaquecen. Empezaron a morir ciertas personas porque
había aumentos drásticos de temperatura. Esto comprobó que la
fosforilación oxidativa está acoplada a la cadena respiratoria.

e. Oligomicina: es un componente que bloquea el ingreso de


protones y la síntesis de ATP, la cadena de paso de e- podría
aumentar pero llega un momento en el que se bloquea porque
no pueden pasar los e- al oxígeno.

14. Cuáles traslocasas son indispensables para que se realice


la fosforilación oxidativa? Qué tipo de transporte realizan?
Respuesta:
La síntesis continuada de ATP en la matriz mitocondrial requiere que
el ADP citosólico formado durante las reacciones que consumen
energía sea transportado de nuevo a través de la membrana interna a
la matriz, en donde se convierte en ATP. De modo parecido, el ATP
recién sintetizado se ha de transportar hacia el citosol a través de la
membrana interna para responder a las necesidades energéticas de
la célula. Este intercambio de nucleótidos de Adenina, que son
moléculas hidrofílicas muy cargadas esta catalizado por una
nucleótido de adenina translocasa muy específica localizada en la
membrana interna. Se sugiere que la enzima esta alternativamente
de cara a la matriz o de cara al espacio intermembrana durante el
proceso de transporte. La traslocasa favorece el movimiento hacia
fuera del ATP y hacia adentro de ADP. (antiporte). Una segunda
traslocasa es la fosfato traslocasa, que transporta fosfato citosólico
al interior de la matriz junto con un protón. Este cotrasnporte paralelo
también necesita el gradiente de protones ya que transporta fosfato y
protones a la matriz. Este transporte de ADP y fosfato requiere una
fracción significativa de la energía presente en el gradiente
electroquímico producido durante la transferencia electrónica. Así, la
fuerza protón motriz proporciona energía para la síntesis de ATP por la
ATP sintasa así como para la captación de los sustratos
necesarios.(simporte)
Las proteínas translocasas que son muy importantes para el
mantenimiento de la materia prima. Si el ADP se une al P para formar
ATP necesito ambos componentes; de nada me sirve sintetizar ATP si
ese ATP se queda ahí y no va al citoplasma. Mecanismo que saca el
ATP y mete el ADP es un mecanismo antiporte. También necesitamos
grupos fosfato que van a favor del gradiente de protones y es un
mecanismo simporte. En la matriz mitocondrial es donde se dan la
mayoría de oxidación de los compuestos.

15. Qué es la UCP-1, dónde se encuentra, cómo se activa y por


qué su activación produce calor?
Respuesta:

Las proteínas desacoplantes (UCP, Uncoupling Carrier Protein) son


miembros de la superfamilia de proteínas transportadoras de la
mitocondria. Se encuentran en la membrana interna de la
mitocondria y actúan en la cadena respiratoria desacoplando la
síntesis de ATP, produciendo en su defecto liberación de calor.

UCP1 (termogenina) presente en tejido adiposo pardo (TAP), fue la


primera descripta en la década del ´70 luego de numerosos estudios
acerca de la baja eficiencia energética de la gran cantidad de
mitocondrias presentes en los adipocitos del TAP, se descubre que
cumplen un rol importante en la producción de calor (termogénesis).
Su función esta relacionada entonces, con la termogénesis adaptativa
y la regulación del peso. Es activada en respuesta al frío y la
sobrealimentación. Y disminuye su activación en respuesta al ayuno.

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