INVESTIGACIÓN DE BIOLOGÍA:

COMPARACIÓN DEL ÍNDICE MITÓTICO Y DE FASES EN MUESTRAS DE

LA RAÍZ DE DOS VARIEDADES DE ALLIUM CEPA Y UNA DE ALLIUM
FISTULOSUM

1. INTRODUCCIÓN

Desde que formo parte del programa del diploma he podido profundizar en
muchos cursos y estudiarlos en un nivel más avanzado, gracias a esto, he
desarrollado un interés hacia las ciencias naturales que fue de mucha
importancia al momento de elegir la carrera que estudiaré en el futuro, esta
hace un importante uso de la biología, química y física.

Uno de mis cursos favoritos es la biología, y una rama importante de esta es la

botánica, esta es de mucha importancia ya que la agricultura es una de
nuestras principales fuentes de suministro alimenticio y lleva siendo estudiada
desde hace muchos años. Resulta necesario estudiar y comprender a las
plantas para que la industria de la agricultura pueda trabajar efectivamente con
ellas, mejorando la cantidad y calidad de los productos.

En este trabajo también se busca comprender a las plantas, pero en una menor
escala. Siempre me he visto interesado por la gran cantidad de especies y
variedades similares que existen para un mismo tipo de planta. ¿Qué tan
similares son realmente? Esta investigación se centra en la observación de
células de las raíces de diferentes tipos de cebollas, con el propósito de
comparar qué tanto se da la mitosis en cada una de estas y además analizar
qué tan semejantes son entre ellas para este aspecto. Esto me lleva a la
pregunta: ¿En qué medida se asemeja el índice mitótico y de fases entre dos
variedades de Allium cepa y una de Allium fistulosum?
 2. FUNDAMENTO TEÓRICO

2.1. Mitosis (Clegg, 2015):

Se deben crear nuevas células ya sea para reemplazar las células que han
muerto o para el crecimiento de un organismo. El proceso de división de las
células eucariotas se conoce como mitosis, esta es la segunda etapa del ciclo
celular. Hay cuatro etapas distintas en la mitosis y el proceso es continuo:

Profase: Los cromosomas se condensan, desaparece la membrana nuclear y

los centrosomas migran a los polos formando las fibras del huso mitótico.

Metafase: Los cromosomas se alinean en la placa metáfasica, cada uno unido

a una fibra del huso mitótico.

Anafase: Las cromátides hermanas de cada cromosoma son separadas por el

huso y son atraídas hacia los polos de la célula.

Telofase: Los microtúbulos del huso mitótico desaparecen, los cromosomas se

dispersan, aparece otra vez la membrana celular y el citoplasma se divide
equitativamente.

Imagen N°1: Roca, A. (s.f.). Práctica 2.- Ciclo celular en células vegetales. Recuperado el 29 de
setiembre de 2019 de: https://www.unioviedo.es/A.Roca/citogenetica/2CICLO_CELULAR.pdf
2.2. Allium cepa:

Conocida comúnmente como cebolla, es una planta de la familia de las

liliáceas, es herbácea y monocotiledónea. Posee un sistema de raíces
normalmente sin pelos, un tallo corto en forma de disco, hojas cerosas
compuestas por una lámina y una vaina, y un bulbo que consiste en un tallo
corto envuelto de hojas gruesas y carnosas. El uso más importante de la
cebolla depende del bulbo, este se utiliza como alimento y condimento.
Además, a algunas partes de esta planta se les son atribuidas propiedades
medicinales (Fornaris, 1999).

Posee una variedad de primavera-verano llamada cebolla blanca de España,

se le fue dado el nombre por el color de su bulbo, es una de las variedades
más conocidas y posee un tamaño algo mayor al promedio del de las otras
variedades (Infoagro, s.f.).

2.3. Allium fistulosum:

También llamada cebolleta, cebollín o cebolla china. Es una especie común

dentro de las familias de hortalizas con bulbo “Allium”. Estas plantas
desarrollan tallos largos con hojas verdes erectas, huecas y tubulares,
características de las monocotiledóneas. Esta planta desarrolla un alargado
bulbo blanco más pequeño y diferente en forma al de una cebolla (Leyva,
2018).

2.4. Orceína:

La orceína acética y el método del aplastamiento “squash”, han sido utilizados

generalmente para la observación de cromosomas en las células de las plantas
(Noguchi y Tanaka, 1981). La orceína es un tinte utilizado en la microscopía
para observación de cromosomas (La Cour, 1941)
 3. METODOLOGÍA

Lo primero que se necesitan son las raíces de las plantas a estudiar.

3.1. Protocolo 1: Preparación de las plantas para el desarrollo de raíces

Materiales

 Bulbo de cebolla común o morada (Allium cepa)

 Bulbo de cebolla blanca (Variedad de Allium cepa)
 Bulbo de cebolla china (Allium fistulosum)
 Palillos de madera
 Vaso de precipitado
 Agua

Procedimiento

a) Se llena un vaso de precipitado con agua.

b) Se introducen palillos de madera en el bulbo de las cebollas a la misma
altura.
c) Se colocan las cebollas encima del vaso de precipitado de manera que
se sujete con los palillos de madera y que la parte inferior del bulbo se
sumerja bajo la superficie del agua.

Para poder calcular el índice mitótico o de las fases en las células de la raíz de
las plantas, primero se necesita observar las células en el microscopio tiñendo
sus cromosomas con orceína de tal forma que se puedan identificar las fases
en las que se encuentran. Para esto se esperó 3 días a que las raíces de cada
tipo de cebolla se desarrollaran y se siguió el siguiente protocolo:

3.2. Protocolo 2: Tinción de los cromosomas (Adaptado de Flores, 2015)

Materiales
  Raíces de bulbos de cebolla morada, cebolla blanca y cebolla china,
habiéndose desarrollado por 3 días.
 Orceína acética
 Pinzas
 Un mechero
 Un bisturí
 Una luna de reloj
 Gotero
 Portaobjetos
 Cubreobjetos

Procedimiento

a) Se cortó aproximadamente de 0.1 a 0.2 cm ± 0.05 del ápice de las

raíces haciendo uso del bisturí hasta obtener 4 muestras por cada tipo
de cebolla.
b) Cada conjunto de muestras se colocó en una luna de reloj diferente.
c) Se eligió el primer tipo de cebolla para trabajar, en este caso la cebolla
morada, con un gotero se añadió orceína acética sobre las 4 muestras.
d) Con ayuda de unas pinzas se sostuvo por 1 minuto la luna de reloj sobre
un mechero, con el fin de que la orceína penetre en todas las células de
las muestras.
e) Se deja enfriar y luego se colocan las muestras en los portaobjetos
cubriéndolas con el cubreobjetos.
f) Se realiza el aplastado de las muestras con el dedo pulgar para
proceder con la observación de las células.
g) Cuando se acabó con la observación de muestras de la cebolla morada
se repite el proceso desde el paso c para las muestras de los otros 2
tipos de cebollas con el propósito de realizar cada análisis con una
muestra recién preparada de células.

Después de que se realizó la tinción de las células, se colocó cada muestra en

el microscopio y con un aumento de x100 se buscó el campo en el que se
encontraba una mayor cantidad de células en fase de mitosis, la punta de la
raíz. En esa zona se cambió el aumento a x400 y se contabilizaron las células
en diferentes fases del ciclo celular observadas para ese campo, de esta
manera se extrajeron datos para un campo de células por cada muestra.

4. OBTENCIÓN DE DATOS

4.1. Datos cualitativos:

Al realizar la tinción con orceína, los cromosomas de las células fueron

coloreados de color rojo púrpura, gracias a esto es posible identificar las fases
de la mitosis en las que estas se encuentran. La identificación de cada fase de
la mitosis se pudo llevar a cabo en base al conocimiento teórico que se tiene
sobre la disposición de los cromosomas para cada etapa, esta se muestra en la
Imagen N°1 (ver fundamento teórico) y resulta útil para justificar que células se
pueden considerar de una determinada fase.

4.2. Datos cuantitativos:

Los datos registrados de cada muestra sobre la cantidad de células totales, en

mitosis y en cada fase mitótica para cada muestra se ordenaron en las tablas
N°1, 2 y 3. Estas son células observadas en campos de x400 de aumento, las
cuales corresponden a aproximadamente 0.4 mm de diámetro.

Tabla N°1: Mitosis en las células de la raíz de la cebolla morada

Muestra 1 2 3 4 Total

Células en profase 86 56 120 118 380

Células en metafase 1 4 5 6 16

Células en anafase 2 6 1 8 17

Células en telofase 3 15 16 18 52
 Células en mitosis 92 81 142 150 465

Células totales del campo 254 240 295 320 1109

Tabla N°2: Mitosis en las células de la raíz de la cebolla blanca

Muestra 5 6 7 8 Total

Células en profase 60 102 72 68 302

Células en metafase 5 4 3 2 14

Células en anafase 2 1 4 3 10

Células en telofase 11 4 8 8 31

Células en mitosis 78 111 87 81 357

Células totales del campo 150 180 120 165 615

Tabla N°3: Mitosis en las células de la raíz de la cebolla china

Muestra 9 10 11 12 Total

Células en profase 85 96 90 70 341

Células en metafase 6 5 5 6 22

Células en anafase 3 4 7 6 20

Células en telofase 7 7 9 2 25

Células en mitosis 101 112 111 84 408

Células totales del campo 280 196 220 145 841

5. PROCESAMIENTO DE DATOS

Para el propósito de esta investigación, ahora se hallará el índice mitótico y los

índices de fase para cada muestra. Las fórmulas empleadas para calcular
dichos valores son:

Número de células en mitosis

Índice mitótico ( % )= x 100
Número total de células
 Número de células en una fase determinada
Índice de fase ( % ) = x 100
Número de células en mitosis

A continuación, se muestran las tablas N°4, 5 y 6 con los datos de índices

mitóticos y de fase para todas las muestras.

Tabla N°4: Índices mitóticos y de fases para las células de la raíz

de la cebolla morada (%)
Prome
Muestra 1 2 3 4
dio
% Índice de fase: profase 93.5 69.1 84.5 78.7 81.4

% Índice de fase: metafase 1.09 4.94 3.52 4.00 3.39

% Índice de fase: anafase 2.17 7.41 0.704 5.33 3.90

% Índice de fase: telofase 3.26 18.5 11.3 12.0 11.3

% Índice mitótico 36.2 33.8 48.1 46.9 41.2

Tabla N°5: Índices mitóticos y de fases para las células de la raíz

de la cebolla blanca (%)
Prome
Muestra 1 2 3 4
dio
% Índice de fase: profase 76.9 91.9 82.8 84.0 83.9

% Índice de fase: metafase 6.41 3.60 3.45 2.47 3.98

% Índice de fase: anafase 2.56 0.90 4.60 3.70 2.94

% Índice de fase: telofase 14.1 3.60 9.20 9.88 9.19

% Índice mitótico 52.0 61.7 72.5 49.1 58.8

 Tabla N°6: Índices mitóticos y de fases para las células de la raíz
de la cebolla china (%)
Prome
Muestra 1 2 3 4
dio
% Índice de fase: profase 84.2 85.7 81.1 83.3 83.6

% Índice de fase: metafase 5.94 4.46 4.50 7.14 5.51

% Índice de fase: anafase 2.97 3.57 6.31 7.14 5.00

% Índice de fase: telofase 6.93 6.25 8.11 2.38 5.92

% Índice mitótico 36.1 57.1 50.5 57.9 50.4

A continuación, se realizó el gráfico N°1 donde se representa la información de

los promedios obtenidos en los índices de las tablas N°4, 5 y 6, este resulta útil
para comparar u analizar los valores obtenidos entre la cebolla morada, blanca
y china.

Gráfico N°1: Índice mitótico y de fases promedio de

células en la raíz de diferentes tipos de cebollas
90.0
81.4583.8883.57
80.0
70.0
60.0
58.81
50.40
50.0
41.25
(%)

40.0
30.0
20.0
11.269.19
10.0 3.39 3.98 5.51 3.90 2.94 5.00 5.92
0.0
% Índice de % Índice de % Índice de % Índice de % Índice
fase: profase fase: metafase fase: anafase fase: telofase mitótico

Cebolla morada Cebolla blanca Cebolla china

 6. ANÁLISIS Y DISCUSIÓN DE RESULTADOS

Se analizará la información resumida en el gráfico N°1 comparando y

contrastando los valores de los índices entre las raíces de los 3 tipos de
cebollas.

6.1. Índice profásico:

 Más de un 80% de las células en mitosis se encontraban en profase,

esto probablemente se deba a que esta es la etapa de la mitosis de
mayor duración.
 La cebolla morada, blanca y china tienen valores muy similares en
cuanto al índice de profase, la cebolla blanca presenta el mayor
porcentaje por una diferencia muy pequeña (83.9% de las células en
mitosis).

6.2. Índice metafásico:

 Pocas células se encontraban en metafase, menos de un 6% de las

células en mitosis para todos los tipos de cebolla.
 La cebolla china posee el mayor porcentaje de células en metafase
(5.51% de las células en mitosis).

6.3. Índice anafásico:

 La anafase fue la etapa menos común.

 La cebolla china posee el mayor porcentaje de células en anafase (5%
de las células en mitosis)

6.4. Índice telofásico:

 La telofase fue la segunda fase más común, más existe una gran
diferencia con la profase.
 La cebolla morada posee el mayor porcentaje de células en telofase
(11.3% de las células en mitosis)
6.5. Índice mitótico:

 El tipo de cebolla con el mayor índice mitótico es la cebolla blanca,

seguido por la cebolla china, la cebolla morada tuvo el menor índice
mitótico. Las diferencias son más significativas que en los índices de
fase.
 Para todas las cebollas, el índice mitótico tiende a estar alrededor del
50%, lo cual significa que aproximadamente la mitad de células estaban
en mitosis y que todas las muestras tienen un índice similar.

7. CONCLUSIONES

En conclusión, el desarrollo de las raíces de la cebolla morada, blanca y china

poseen muchas semejanzas en cuanto a su índice mitótico y de fases de la
mitosis. En estos tres tipos de cebollas el mayor porcentaje de células en
mitosis se encontraban en la etapa de profase, debido a que esta es la fase de
mayor duración. Asimismo, en todas las cebollas el índice de fases para la
metafase, anafase y telofase toman valores similares y conforman el menor
porcentaje de células en mitosis. Los índices mitóticos muestran resultados
algo similares, representando alrededor de la mitad de las células totales. Sin
embargo, entre las diferencias notables, el índice mitótico de la cebolla blanca
fue mayor en las muestras de la raíz de cebolla blanca, mientras que en la
cebolla morada hubo el menor porcentaje. Cabe resaltar que esta investigación
podría ser ampliada con el empleo de una mayor cantidad de muestras para
obtener valores más significativos, además se podrían evaluar los índices
mitóticos de las cebollas bajo distintas condiciones. Se podría mejorar este
trabajo evaluando distintos métodos de tinción de cromosomas, este es un
paso muy importante ya que si estos no fueron coloreados correctamente
algunas células podrían no ser perceptibles.
 8. REFERENCIAS

Clegg, C. (2015). Biología. Barcelona, España: Vicens Vives.

Flores, A. (2015). Informe: Ciclo Celular. Recuperado el 30 de setiembre de

2019 de: https://es.scribd.com/doc/268431754/Indice-mitotico-en-Cebolla

Fornaris, G. (2012). Conjunto Tecnológico para la Producción de Cebolla.

Características de la planta. Estación Experimental Agrícola.
Recuperado el 30 de setiembre de 2019 de:
https://www.uprm.edu/eea/wp-content/uploads/sites/177/2016/04/2.-
CEBOLLA-CARACTERISTICAS-DE-LA-PLANTA-G.-Fornaris-v2012.pdf

Infoagro (s.f.). El cultivo de la cebolla. Recuperado el 30 de setiembre de 2019

de: https://www.infoagro.com/hortalizas/cebolla.htm

La Cour, L. (1941). Acetic-orcein: a new stain-fixative for chromosomes. Stain

Technology, 16 (4), 169-174.

Noguchi, J. y Tanaka, R. (1981). C-banding after aceto-orcein staining for plant

chromosomes. Recuperado el 30 de setiembre de 2019 de:
https://www.jstage.jst.go.jp/article/ggs1921/56/5/56_5_529/_pdf

Roca, A. (s.f.). Práctica 2.- Ciclo celular en células vegetales. Recuperado el 29

de setiembre de 2019 de:
https://www.unioviedo.es/A.Roca/citogenetica/2CICLO_CELULAR.pdf
“Confirmo que soy el autor de este trabajo y que es la versión final. He
citado debidamente las palabras o ideas de otras personas, se hayan
expresado estas de manera escrita, oral o visual”