“AÑO DE LA UNIDAD, LA PAZ Y EL DESARROLLO”

Instituto de Educación Superior Tecnológica Privado

MICROBIOLOGÍA
INTREGRANTES

 VENTURA GRADO JHOSELYN

 BACA GARCIA YESENIA
 OLIVARES AVILA STEFFANY
 VEREAO CASTRO ANGUELINA
 ROQUE PONTE MARIA
 FLORES VASQUEZ MILAGROS
 PINEDO ESPINOZA LIZBETH
 ANCAJIMA DE LA CRUZ
 SARAVIA ROJAS DANNA
MILENE
 CHAUCA CARRION JAIR
 SILVESTRE DOMINGUEZ KEREN
 ALMENDRAS CHAVES DANNA
 MENDES RODRUIGUES STEVEN
 ALVA MERCADO GRABIEL
 TIRADO HUARIPATA
 SANDOVAL QUISPE
JHONATAN
ALEXANDRA

Profesor(a):
Lic. Felipe Pacherres Quispe
Ciclo/ turno:
IV ciclo – turno noche
Curso:
Muestras Biológicas

Chimbote, agosto de 2023

Tabla de contenido
Presentación..................................................................................................................................3
Índice de marco teórico...............................................................................................................4
1.1 Microbios y la enfermedad.............................................................................................4
1.2 Bacteriología(I).................................................................................................................4
1.3 Bacteriología(II)................................................................................................................4
1.4 Bacteriología(III)...............................................................................................................4
1.5 Micología...........................................................................................................................4
1.6 Virología............................................................................................................................4
1.7 Parasitología.....................................................................................................................4
1.8 Pruebas inmunológicas...................................................................................................4
1.9 Técnicas genéticas..........................................................................................................4
1.10 Epidemiologia microbiana..............................................................................................4
1.11 Seguridad biológica en los laboratorios de microbiología clínica..............................4
1.12 Diagnostico etimológico..................................................................................................4
1.13 Infecciones urinarias.......................................................................................................4
1.14 Enfermedades de transmisión sexual...........................................................................4
1.15 Enteritis.............................................................................................................................4
1.16 Infecciones del sistema nervioso...................................................................................4
1.17 Infecciones respiratorias.................................................................................................4
1.18 Infecciones piógenas y necrotizantes...........................................................................4
1.19 Septicemia........................................................................................................................4
1.20 Hepatitis............................................................................................................................4
1.21 Mecanismo de defensa...................................................................................................4
Marco Teórico................................................................................................................................5
Referencias bibliográficas........................................................................................................30
 Presentación

El presente trabajo de investigación acerca de microbiología rama esencial de la

biología que nos ayudara a conocer más sobre el estudio de los microorganismos.
Es importante para el desarrollo profesional de un enfermero y/o enfermera pues
las enfermedades causadas por virus, bacterias y otros tipos de microorganismos
son algunas de las más frecuentes en hospitales y centros de atención primaria.

Este trabajo está dirigido a todo el público ya que los datos obtenidos son de los
libros y ayudaran a todas las personas a conocer sobre las técnicas
microbiológicas.

El esfuerzo se debe únicamente a la labor de todos los integrantes de este grupo,

siempre con el propósito de superarnos y aprender más sobre cada tema.

A vuestra disposición el presente informe para su respectiva ejecución y

evaluación.
Índice de marco teórico
1.1 Microbios y la enfermedad
1.2 Bacteriología(I)
1.3 Bacteriología (II)
1.4 Bacteriología (III)
1.5 Micología
1.6 Virología
1.7 Parasitología
1.8 Pruebas inmunológicas
1.9 Técnicas genéticas
1.10 Epidemiologia microbiana
1.11 Seguridad biológica en los laboratorios de microbiología clínica
1.12 Diagnostico etimológico
1.13 Infecciones urinarias
1.14 Enfermedades de transmisión sexual
1.15 Enteritis
1.16 Infecciones del sistema nervioso
1.17 Infecciones respiratorias
1.18 Infecciones piógenas y necrotizantes
1.19 Septicemia
1.20 Hepatitis
1.21 Mecanismo de defensa
 Marco Teórico

La Microbiología es la ciencia que estudia los microorganismos, bacterias, hongos,

protistas y parásitos y otros agentes como virus, viroides y priones.
1.1 Microbios y la enfermedad

1.1.1 Características de los seres vivos

Los hombres poseemos una idea intuitiva de los seres vivos de crecer, reproducirse
y morir.
Los seres vivos están formados por células; pluricelulares, como las plantas y
animales y unicelulares como las bacterias o los protozoos, los cuales pudieron ser
observados luego de la introducción del microscopio en el siglo xvii.
El resto de los organismos vivos, tanto los unicelulares como los pluricelulares,
están formados por células eucariota.

1.1.2 Células procariotas (las bacterias)

Son evolutivamente más antiguas y no han sido capaces de asociarse para formar
organismos pluricelulares, por lo que sólo se hallan en la naturaleza como seres
unicelulares.
Están formadas por un citoplasma limitado, aquí se efectúa la síntesis proteica y el
material genético, formado por ácido desoxirribonucleico (DNA), se halla muy
compactado y carece de membrana que delimite un núcleo.

1.1.3 Células eucariotas

Las células eucariotas son de mayor tamaño, entre 5 y 30 micras, son

estructuralmente más complejas que las procariotas.

No se sabe cómo eran las células eucariotas primitivas (protocucariotas), pero un

hecho fundamental para su evolución fue la adquisición en su citoplasma de las
mitocondrias y los cloroplastos.
Las células protoeucariotas ancestrales se dotaron así de unas eficaces máquinas
para la obtención de energía gracias a la respiración aerobia que desarrollan las
mitocondrias y a la fotosíntesis propia de los cloroplastosl.

1.1.4 Principales síndromes infecciosos

  Rinitis
 Faringitis
 Mononucleosis
 Infecciones al pulmón
 Uretritis
 Vaginitis
 Enteritis
 Meningitis
 Infecciones oseas y articulares
 Peritonitis
 Septicemia

1.1.5 Diagnóstico y tratamiento

El diagnóstico etiológico de una enfermedad infecciosa, es decir, la identificación

objetiva del microorganismo que la está causando puede realizarse mediante
métodos directos que permiten la detección del agente causal en el lugar donde está
produciendo la infección por observación microscópica, por cultivo, en el que se
constatará el crecimiento del patógeno, mediante la detección de antígenos
específicos y de fragmentos del genoma propios del microorganismo (DNA o
RNA).
1.2 Bacteriología(I)

1.2.1 Concepto
Son microorganismos que pueden tener diferentes formas. Pueden ser esféricas,
alargadas o espirales. Existen bacterias perjudiciales, llamadas patogénicas, las
cuales causan enfermedades; pero también hay enfermedades buenas.
El diagnóstico en bacteriología: incluye el estudio del patrón de sensibilidad
antibiótica. El diagnóstico indirecto implica la demostración de la huella que el
agente infeccioso ha dejado por su contacto con el sistema inmune.

1.2.2 El microscopio
Es una herramienta que permite observar objetos que son demasiado pequeños para
ser observados a simple vista. El tipo más común fue y el primero que fue inventado
es el microscopio óptico.
1.2.3 El Asa bacteriológica
Asa de platino o también llamada asa de kolle es un instrumento de laboratorio que
consta de una base que puede estar hecha de platino, acero, aluminio y un filamento
que puede ser de nicromo, wolframio o platino que termina o en un arito de 5mm o
en punta.
1.2.4 Observación microscópica
Nos ofrece una gran cantidad de información sobre la fisiología y organización de
las células y tejidos de nuestro cuerpo humano. Esta sigue siendo hoy día una de las
técnicas más poderosas disponibles para el diagnóstico de múltiples enfermedades.
Técnicas y medios de cultivo:
 Cultivo de garganta
 Cultivo de orina
 Cultivo de esputo
 Cultivo de sangre
 Cultivo de heces
 Cultivo de una herida
1.2.5 Medios de cultivo
 Agar
 Peptonas
 Agentes reductores
 Agentes selectivos

1.3 Bacteriología(II)
1.3.1 Identificación de las bacterias
 Las bacterias se clasifican en dos grupos, aerobias(viven y crecen siempre y
cuando exista la presencia de oxigeno) un tipo de ellas son las aerobias
estrictas como por ejemplo las pseudomonas y las anaerobias( viven y
crecen sin presencia del oxigeno) tenemos a las anaerobias facultativas como
las salmonelas.
 Para la iniciación de la identificación de una bacteria que crecen por medio
de aerobiosis, se realiza una extensión de una colonia en un porta objetos
para poceder a la tinción de Gram, de este modo identificaremos la
clasificación bacteriana por su morfología y apetencia tintórea: 1-. Cocos
grampositivos 2-. Cocos gramnegativos 3-. Bacilos grampostivos y 4-.
Bacilos gramnegativos.
 Aerobiosis y Anaerobiosis.

1.3.2 Pruebas rápidas

Algunas pruebas metabólicas son pruebas rápidas, evaluando la presencia de una
enzima preformada. Esta se enfrenta una solución del reactivo a suspensión de la
bacteria; por ejemplo: la prueba de catalasa y la oxidasa son rapidaz. Para realizarlas
se pone en un portaobjetos con una gota de agua oxigenada diluida.

1.3.3 Pruebas convencionales

 Se practican cultivando las bacterias en medios de identificación que
contienen el sustrato a metabolizar(18-24 horas) de incubación nos permite
revelar la reacción a través del cambio del Ph.
 Otro método de identificación bacterial es el auxonograma. Este se basa en
utilizar un sustrato para el crecimiento bacteriano. La prueba se lee como
‘’Crecimiento’’ o ‘’ Ausencia de crecimiento’’.
 Tambien sirve de ayuda la identificación por temperatura optima de
crecimiento.

1.3.3.1 Identificación de cocos grampositivos

Hay tres géneros de cocos grampostivos de gran interés: staphylococcus,
streptococcus y Enterococcus. En la tinción de Gram se caracteres son diferenciales
ya que los estafilococos se agrupan en racimos, y los estreptococos en cadenas.

1.3.3.2 Identificación de cocos gramnegativos

Los géneros de mayor interés son dos: Neisseria y Moraxella.
El género Neisseria incluye especies de la faringe como N. sicca, N. flavescens. Y
dos especies de gran importancia como son el N. meningitidis(Meningococo) y N.
gonorrhoeae(Gonococo).

1.3.3.3 Identificación de bacilos grampositivos

 Bacilo grampositivo aerobios más significativo es el Corynebacterium que incluye
varias especies comensales de la piel y las mucosas responsables de ciertas
infecciones oportunistas.

1.3.3.4 Identificación de bacilos gramnegativos

La familia Enterobacteriaceae está formada por bacilos gramnegativos aerobios y

anaerobios facultativos que fomentan la glucosa.
Habitan como comensales en el tubo digestivo del hombre y de otros animales de
sangre caliente.

1.4 Bacteriología(III)

1.4.1 concepto
 Las principales bacterias de interés en medicina se pueden dividir en dos grupos. En
el primero se incluyen las bacterias que pueden observarse por examen
microscópico y aislarse por cultivo.
1.4.1.1 Bacterias anaeróbicas
Las bacterias anaerobias estrictas sólo crecen en ausencia de oxígeno, que es letal
para ellas. Dentro de las bacterias anaerobias, existen numerosas especies de cocos
y bacilos grampositivos y gramnegativos.

1.4.1.2 Infecciones por bacterias anaeróbicas más frecuentes

 Infecciones generalmente polimicrobianas1:

 Flemones peri y paradentales
 Absceso del suelo de la boca
 Absceso pulmonar
 Absceso periesofágico
 Peritonitis difusa (origen intestinal)
 Abscesos peritoneales (absceso subfrénico, periapendicular, etc.)
 Pelviperitonitis
 Infección de la herida quirúrgica en cirugía cérvico-facial, abdominal y
ginecológica

1.4.1.3 Infecciones monomicrobianas toxigénicas

 Gangrena gaseosa (Clostridium perfringens)

 Colitis pseudomembranosa (Clostridium. difficile)
 Tétanos (Clostridium tetani)
 Botulismo (Clostridium botulinum)

1.4.2 diagnostico
Para el diagnóstico de las infecciones causadas por micobacterias, se sigue el mismo
procedimiento que para el de otras bacterias, examen directo, cultivo e
identificación, además del estudio de la sensibilidad a los fármacos antituberculosos
cuando está indicado.
El diagnóstico se ve influido por dos características de estas bacterias: la lentitud de
su crecimiento y el alto contenido lipídico de su pared.
El diagnóstico se ve influido por dos características de estas bacterias: la lentitud de
su crecimiento y el alto contenido lipídico de su pared

1.5 Micología

1.5.1 concepto
Los hongos están formados por células eucariotas, los hongos pueden ser
unicelulares o pluricelulares.
1.5.2 Clasificación
La clasificación de los hongos es compleja, variada y llena de controversias pues
pretende ordenar un grupo de microorganismos muy diversos.

1.5.3 Infecciones fúngicas

Aunque la mayoría de los hongos se encuentran como saprofitos en el medio
ambiente y en los vegetales, desempeñando un papel fundamental en la naturaleza
al reciclar la materia orgánica, algunos pueden causar patología al hombre, ya sea
produciendo cuadros alérgicos, por la inhalación de esporas (rinitis, asma, alveolitis,
neumonitis), intoxicaciones por la producción de diversas sustancias nocivas4 o
infecciones, dada la capacidad que tienen algunas especies fúngicas de colonizar,
invadir y multiplicarse en diferentes órganos o tejidos causando micosis, ya sea en
el huésped previamente sano (hongos patógenos primarios) o en el huésped con
diferentes grados de disminución de los mecanismos de defensa (hongos
oportunistas).

1.5.4 Técnicas en micología

Para el diagnóstico de las infecciones fúngicas se procede a partir de las muestras

clínicas de modo parecido al utilizado para el diagnóstico de las infecciones
bacteriana. El examen directo, así como las técnicas de cultivo, posee gran utilidad,
por lo que se emplean sistemáticamente.Los cultivos de los productos en los que se
sospecha la presencia de hong filamentosos y dimórficos deben realizarse en
condiciones de seguridad12, sembrándose
en tubos y no en placas de Petri.

1.5.5 Muestras clínicas

Para el diagnóstico de las mucositis candidósicas, las muestras de exudado bucal,
faríngeo o vaginal se tomarán con escobillones con medio de transporte tipo Stuart.
No hay que olvidar que, con frecuencia, en pacientes con granulopenia o sida, estas
infecciones pueden ser mixtas y estar asociadas a bacterias y virus como el del
herpes simple, de modo que debe proveerse una recogida adecuada a estos
microbios.

1.6 Virología

1.6.1 concepto
Los virus son microorganismos infecciosos que constan de un segmento de
ácido nucleico (ADN o ARN) rodeado por una cubierta proteica. Por lo que
sólo se propagan en el interior de las células porque carecen de
 mecanismos propios para la obtención de energía y para la síntesis
proteica. Los que se multiplican en células procariotas (bacterias) se
denominan bacteriófagos (coloquialmente, fagos); los otros se multiplican
en células eucariotas (protistas, vegetales, fúngicas, animales).

1.6.1.1 Principales virus de interés en medicina

 El virus de la parotiditis causa una infección febril de las vías respiratorias, seguida
de diseminación hemática, afectando a las parótidas, que aparecen aumentadas de
tamaño, testículos, páncreas y sistema nervioso central, causando una
meningoencefalitis de buen pronóstico.
 El virus del sarampión, una a dos semanas después de la infección, causa un cuadro
febril con afectación de las vías respiratorias altas y fotofobia, apareciendo lesiones
papulares blanquecinas características en la mucosa bucal (manchas de Koplic).
 Los virus de la familia H erpesviridae persisten en latencia toda la vida después de
la primoinfección, siendo frecuente su reactivación.
 La varicela se caracteriza por ser una enfermedad febril, en ocasiones grave, con
lesiones cutáneas (vesículas y pústulas) en diversos estadios simultáneos de
desarrollo, causada por el virus de la varicela-zoster (Human herpesvirus 3; HHV-
3).
 El virus de Epstein-Barr (HHV-4) se ha considerado el agente causal prototipo de la
mononucleosis infecciosa, llamada enfermedad del beso por su mecanismo de
transmisión.
 El virus B19 causa en los niños un exantema característico que se inicia en las
mejillas, pudiendo extenderse a brazos y piernas (quinta enfermedad).

1.6.1.2 Técnicas de diagnostico

 Microscopìa óptica: Las tinciones citológicas convencionales, como la
hematoxilina-eosina, permiten la observación de los cuerpos de inclusión en las
células de las muestras clínicas.
 Microscopìa de fluorescencia: La utilización de anticuerpos marcados con
fluoresceína dirigidos contra los antígenos de un virus permite observar mediante el
microscopio de fluorescencia las células de los tejidos infectadas con el virus.
 Microscopia electrónica: La disposición de microscopios electrónicos de manejo
relativamente sencillo ha permitido el diagnóstico rápido de infecciones vesiculares
como el herpes, la varicela, y, sobre todo, de las infecciones intestinales por
rotavirus, calicivirus y otros virus enteropatógenos.

1.6.1.3 Técnicas de diagnóstico

La técnica de látex se utiliza para la detección de rotavirus y adenovirus en las
heces. La técnica de EIA, aplicada sobre membrana o en micropocillos con diversos
 niveles de automatización, se utiliza para la detección de un gran número de virus,
como el rotavirus, calicivirus, astrovirus, adenovirus, virus respiratorio sincitial,
virus de la gripe, virus de la hepatitis B o virus de la inmunodeficiencia humana, ya
que son técnicas sencillas, con una metodología homogénea que evita la
complejidad del exam en directo y del cultivo celular.

1.6.2 Diagnostico

Para el diagnóstico virológico han sido las serológicas, mediante pruebas de fijación
del complemento, aglutinación pasiva y, posteriormente, de enzimoinmunoanálisis.
Estas pruebas aportan resultados tardíos al requerir dos sueros, uno obtenido en la
fase precoz de la enfermedad y otro en el período de convalecencia, que deben
procesarse en paralelo para demostrar un incremento del título en el segundo suero
de cuatro veces o más respecto al primero.

1.7 Parasitología
1.7.1 Concepto
Ser vivo que se aprovecha de otro superior para alojarse y nutrirse.

1.7.2 Diagnóstico
Sanguíneas, fecales y otros.

1.7.3 Clasificación
Protozoos Helmintos
(Unicelulares eucariotas ) (Pluricelulares)
 - Obtiene sus nutrientes orgánicos
por absorción o fagocitosis.
- Son fácil de visualizar mediante el
microscopio óptico.
Se clasifican:
 Las amebas: Se transmite a través
de sus formas quísticas por vía
feco-oral causando una
enterocolitis invasora con clínica
variable, la diarrea se acompaña de
moco y sangre por las ulceraciones
de la mucosa intestinal. Este
protozoo puede alcanzar el hígado
a través de la vena porta formando
abscesos.
 Los flagelados: se transmite
mediante ingestión de quistes por
vía feco oral Trichomonas
vaginalis, es un flagelado que
causa vaginitis, y uretritis en el
varón, se multiplica por división
simple y se transmite por contacto
directo sexual, por lo que carece de
forma quística.
 Los aplicomplexa: Entre los
apicomplexa — que son los únicos
protozoos de interés en medicina,
con una fase de reproducción
sexual— se hallan Toxoplasma
gondii, Cryptosporidium,
Cyclospora, Isospora y las cuatro
especies de Plasmodium patógenas
para el hombre.
1.8 Pruebas inmunológicas
1.8.1 Respuesta inmunitaria
La respuesta inmunitaria constituye un mecanismo de defensa anti infecciosa de los
vertebrados que se desencadena frente a las proteínas o polisacáridos microbianos,
que son reconocidos como extraños (antígenos).
- Se divide en dos grupos: los
platelmintos (gusanos planos) y los
nematodos (gusanos redondos)
- Se producen sexualmente
poniendo huevos que producen
larvas.
Se clasifican:
 Los platelmintos: son vermes
muy primitivos; tienen el
cuerpo aplanado, algunos
carecen de tubo digestivo y
cuando existe es ciego. Son
hermafroditas, salvo escasas
excepciones. Algunos son de
vida libre, pero la mayoría son
parásitos de los vertebrados.
 Los nematodos: son gusanos
redondos, de tamaño muy
variable (de mm a cm), que
pueden tener vida libre o ser
parásitos de otros
invertebrados y vertebrados,
incluyendo el hombre. Tienen
el cuerpo recubierto por una
cutícula, un tubo digestivo
completo con boca y ano,
sistema excretor y sistema
nervioso. Presentan separación
de sexos con diferencias
morfológicas entre ambos,
siendo las hembras de mayor
tamaño que los machos.
 Las inmunoglobulinas están formadas por dos cadenas pesadas y dos ligeras, que
conforman una estructura de tres ramas, semejante a una Y; las dos ramas que se
unen al antiguo son iguales entre sí y la tercera es diferente.
1.8.2 Detección de antígenos microbianos
La detección del microorganismo causante de una infección puede hacerse
por examen microscópico y por cultivo, pero también detectando antígenos
específicos del microorganismo mediante pruebas inmunológicas. Algunas
técnicas para la detección de antígeno se han mostrado muy útiles para el
diagnóstico, bien como técnicas rápidas, que después son confirmadas por
otras, o incluso como técnicas de referencia por su elevada eficacia.
1.8.3 Diagnostico serológico
Las pruebas serológicas constituyen un método de diagnóstico indirecto al
detectar en el suero del paciente los anticuerpos formados frente al
microorganismo causante de la infección.

1.8.4 Pruebas para la detección de anticuerpos

1.8.4.1 Prueba de aglutinación
En estas pruebas se utilizan antígenos particulados; es decir, el antígeno
forma parte de la superficie de microorganismos de gran tamaño (bacterias
y protozoos). El antígeno se prepara como una suspensión del
microorganismo, la cual tiene un aspecto lechoso y homogéneo.
1.8.4.2 Pruebas serológicas
Las pruebas serológicas más utilizadas son las de aglutinación,
inmunofluorescencia (IF) y enzimo inmunoanálisis (EIA).

1.9 Técnicas genéticas

1.9.1 Concepto
El conjunto del DNA de una célula es su genoma y puede estar formado por
una única pieza, como sucede en la mayoría de las bacterias, o por varios
fragmentos que constituyen los cromosomas, como en las células
eucariotas.
1.9.2 Técnicas de hibridación
 Una particularidad del DNA consiste en que cuando se calienta por encima
de los 90° C, las dos cadenas se separan porque se neutralizan la fuerza
de unión entre las bases. Este fenómeno desnaturalización, cuando
desciende otra vez la temperatura, las bases vuelven a aparecerse de
modo que se reemplazan con toda exactitud los fragmentos homólogos.
1.9.2.1 Marcado de las sondas
Las sondas se marcan con diferentes sustancias para detectar cuando
hibridan con su diana. Existe numerosísimas variantes y métodos diferentes
de marcado
1.9.2.2 Hidratación en solución
En el comercio algunas pruebas de hibridación están disponible bajo
formatos en solución, en los que la hibridación se produce rápidamente
(Una hora o menos).
En estas condiciones, la prueba resulta más práctica y sencilla que las
realizadas sobre membrana.
1.9.2.3 Hidratación sobre fase solida
Después del lisar los microorganismos de una muestra clínica o un cultivo,
se extrae DNA que se desnaturaliza por el calor depositándose una gota
sobre una pequeña membrana de nilón o nitrocelulosa, la muestra
depositada se absorbe y fija superficie (aspiración al vació, UV, etc.), La
reacción de hibridación suele ser muy lenta y suele requerir una noche.
1.9.2.4 Hidratación in situ
Una sonda también puede hibridar con su DNA o RNA complementario en
un corte histológico, emitiendo la señal correspondiente, y localizando por
tanto al microorganismo en el contexto de un tejido.
1.10

Epidemiologia microbiana

1.10.1 concepto
En los laboratorios de microbiología clínica los microorganismos suelen
identificarse a nivel de especie, sensibilidad a los microbianos, resulta
 eficiente, en la mayoría de los casos, para orientar el tratamiento de la
infección y establecer las medidas de profilaxis adecuada.

1.10.2 Marcadores fenotípicos

 Biotipo
 Serotipo
 Fagotipo
 Antibiotipo

1.10.3 Electroforesis
Incluye un conjunto de variantes técnicas que permiten que permiten
separar moléculas en función de su tamaño y su carga eléctrica al circular
por el seno de la malla microscópica de un gel repleta de absorbentes.
 Electroforesis de proteínas: La Electroforesis en geles de
poliacrilamida, permite separar las proteínas presentes en una
muestra en función de su peso molecular(tamaño). Perfiles
electroforéticos de proteínas totales o de envoltura. Para la
realización de esta técnica, se procede a la lisis bacteriana y a la
extracción de las proteínas que se desnaturalizan y se someten a la
Electroforesis

 Electroforesis de DNA: La electroforesis en geles de agarosa

permite la separación de los fragmentos de DNA de distintos
tamaños y el cálculo de su peso molecular.

1.10.4 Análisis del ADN plasmídico

El análisis plasmídico sólo se utiliza para el estudio y comparación de bacterias
1.10.5 Análisis del ADN cromosómico
Para el análisis del DNA cromosómico con fines epidemiológicos se utilizan tres
tipos de enfoques generales

1.11 Seguridad biológica en los laboratorios de microbiología clínica

1.11.1 concepto
El personal que trabaja en los laboratorios de microbiología corre riesgo de
infección, por lo que debe adoptar un conjunto de normas de seguridad que
sirven para reducir a un nivel acatablemente y rente a la manipulación de
todo el material peligroso.
1.11.2 Clasificación de los microrganismos
1.11.2.1 grupo 1
Microorganismos que es improbable que causen enfermedad en
trabajadores sanos.
(Escherichia coli, Staphylococcus epidermidis, Lactobacillus bulgaricus,
Streptococcus lactis, S. cremoris, Streptomyces spp, Saccharomyces
cerevisiae, Penicillium roqueforti y otros). Algunos de ellos son de interés
industrial.
1.11.2.2 Grupo 2
Microorganismos que causan enfermedad de buen pronóstico, frente a los
que existe tratamiento y que en general no se transmiten por vía aérea y no
es fácil su difusión en la comunidad.
 Bordetella pertusas
 Clostridium botulinum
 Parvovirus B19
 Virus de la hepatitis A
 Virus de la gripe
 Virus del sarampión
 Virus de las paperas
 Virus de la rubéola
1.11.2.3 Grupo 3
Causan infecciones graves, algunas de transmisión aérea, con riesgo
variable de transmitirse a la comunidad. Se posee terapéutica, aunque de
eficacia variable.
 Blastomyces desmentíais
 Virus de la encefalitis de
 Echinococcus
 Brucella
 Coccidioides immitis
 Virus de la encefalitis equina
 Leishmaniasis brasilienses
 Escherichio col
 Francisella tularensis
 tuberculosis
 Virus de la hepatitis D
 Virus de la fiebre amarilla
 Virus de la inmunodeficiencia
1.11.2.4 Grupo 4
Causan infecciones graves o muy graves, muchas de transmisión aérea
que pueden pasar a la comunidad y frente a las que no hay terapias
eficaces.
 Virus de la viruela (V)
 Virus de la fiebre hemorrágica de Crimea (Congo)
 Virus de Marburg
 Virus bolo
1.12 Diagnostico etimológico

1.12.1 Concepto
En la etiología, hay que destacar que los microorganismos causantes de un
proceso infeccioso como neumonía, meningitis, enteritis y otros pueden
variar según la edad del paciente, la época del año, la profesión, el área
geográfica y en las infecciones oportunistas dependiendo de los factores
predisponentes.
1.12.2 Solicitud de análisis
Entre los factores cruciales de esta etapa, hay que señalar la obtención de
la muestra en las condiciones apropiadas según las especificaciones del
laboratorio, la exposición a agentes infecciosos o viajes a áreas endémicas.
1.12.3 Toma de muestras
Fundamental que la persona que efectúa la toma de la muestra conozca el
método de recogida, el volumen recomendable y la necesidad o no de
introducir el material obtenido en un medio de transporte.
1.12.4 Evaluación y procesamiento de muestras
De acuerdo a las características de la muestra. Por ejemplo, si se sospecha
de una infección bacteriana, se pueden utilizar medios de cultivo selectivos
para identificar y aislar las bacterias causantes.
Además, es importante tener en cuenta el tiempo de incubación necesario
para cada tipo de muestra y el tipo de microorganismos que se espera
encontrar. Una vez que las muestras se han procesado adecuadamente, se
lleva a cabo el análisis microbiológico. Esto implica la identificación de los
microorganismos presentes en la muestra, ya sea mediante pruebas
bioquímicas, serológicas o moleculares. También se pueden realizar
pruebas de sensibilidad a los antibióticos para determinar qué
medicamentos son efectivos contra los microorganismos encontrados.

1.13 Infecciones urinarias

1.13.1 concepto
Las infecciones del tracto urinario están causadas en su mayoría por
bacterias de la flora intestinal que, ascendiendo por la uretra, alcanzan la
vejiga urinaria y en algunos casos progresan afectando a los uréteres y los
riñones.
Las infecciones de la vejiga urinaria, denominadas cistitis, dan lugar a un
síndrome caracterizado por micción dolorosa y frecuente (disuria y
polaquiuria) con sensación
continua de necesidad de orinar (tenesmo) y escasa sintomatología
general, ya que no suelen ocasionar fiebre o astenia intensa. Las
infecciones que afectan a los uréteres y riñones (pielonefritis) se
 manifiestan por fiebre, dolor lumbar y afectación del estado general,
asociadas a disuria, polaquiuria y tenesmo urinario cuando
existe una cistitis concomitante.
1.13.2 Toma de muestras
En la mujer, para evitar al máximo la contaminación de la orina por la flora
comensal de la vagina, debe efectuarse una limpieza cuidadosa de los
genitales externos con un jabón neutro, aclarando bien con agua y sin
utilizar antisépticos; limpieza que también se recomienda para el glande en
el varón. El paciente debe iniciar la micción y, sin interrumpirla, recoger la
orina de la mitad de la micción en un frasco estéril, lo que permite que la
primera parte del chorro urinario elimine al máximo por mecanismo de
arrastre la flora normal de la uretra distal.
1.13.3 Examen directo
El sedimento de 10 ml de la orina centrifugada (3.000 rpm/15 minutos) se
examina en fresco, disponiendo una gota del mismo entre porta y cubre y
observándola a 400 aumentos. Tras la eliminación del cubreobjetos, esta
misma muestra convenientemente secada y fijada puede teñirse por el
método de Gram para la observación detallada
de las bacterias.

1.14 Enfermedades de transmisión sexual

1.14.1 Concepto
Existe un conjunto de microorganismo causantes de enfermedades
infecciosas de aparato genital que se transmite por contacto sexual. Estas
enfermedades de transmisión sexual se manifiestan típicamente por dos
cuadros clínicos diferentes, 1.la exudación o supuración y 2.la formación de
vesículas o ulceras. En la mujer puede producirse sudoración en la vulva y
vagina, en el cérvix uterino o en la uretra y aun que puede predominar en
una de estas localizaciones suelen estar afectadas simultáneamente.
1.14.2 Etiología y clínica
 Los agentes que con mayor frecuencia vulvovaginitis inflamatoria exudativa
son las cándidas y las tricomonas. En las candidiasis se observa una
secreción blanca, cremosa como yogur en la vulva y vagina y en el cérvix
es amarronada y espumosa. Estas infecciones producen intensos pruritos
vulvovaginales.
La ulcera sifilítica (chancro), que es indolora, puede localizarse en cualquier
lugar de los genitales, pero también en lugares diferentes del aparato
genital, como en la boca o el recto por la actividad sexual que tiene
contacto con esta zona.
1.14.3 Toma de muestras
El exudado vaginal puede tomarse con asa bacteriológica o con escobillón,
Para tomar las muestras uretrales debe utilizarse un escobillón fino y
flexible, específico para es menester. Las muestras endocervicales deben
tomarse también con un escobillón flexible ayudados por un especulo sin
lubricante.
1.14.4 Examen directo
El examen microscópico en fresco del exudado vaginal permite observar
con elevada sensibilidad las tricomonas, las levaduras y las clue- cells de la
vaginosis.
Cultivo: Si es posible, se efectuará inmediatamente después de la toma de
muestras, sembrando el exudado, el líquido vesicular o el material de la
base de la ulcera en los medios de cultivo adecuado.

1.15 Enteritis

1.15.1 Concepto
Virus con capacidad enteropatógena causan infecciones intestinales,
denominadas enteritis cuyos síntomas son la diarrea cuando la diarrea es
intensa produce deshidratación trastornos electrolíticos, que afecta en niños
pequeños, ancianos y personas desnutridas con un pronóstico grave.
En las enteritis causadas por bacterias invasoras, como las salmonelas, los
campilobacter, las shigelas y las yersinias, las heces diarreicas pueden
 presentar sangre y leucocitos, y el cuadro clínico se acompaña de dolora
bdominal y fiebre.En las enteritis toxigénicas, como las causadas por Vibrio
cholerae O I y 0 1 3 9 o Escherichia coli enterotoxigénica, predomina un
cuadro de diarrea líquida abundante.
1.15.2 Toma de muestras
Las muestras para el estudio de las gastroenteritis son las heces. El
volumen recomendado para los estudios convencionales oscila entre 5 y 10
ml de heces líquidas.
Para el diagnóstico de las enteritis aparecidas en la comunidad debe
emplearse siempre medios selectivos para el aislamiento de las salmonelas
y campilobacter, ya que estos dos microorganismos son los responsables
de la mayoría de las enteritis bacterianas.

1.15.3 Examen directo

Debe practicarse una tinción de Gram del sedimento del LCR centrifugado
para observar la posible presencia de bacterias. En ocasiones se observan
precipitados que pueden confundirse con bacterias, por lo que es útil
realizar una tinción con azul de metileno, colorante en el que raramente se
forman precipitados.

1.15.4 Técnicas moleculares

Las técnicas de detección de antígeno se em plean
habitualmente para la detección de rotavirus, adenovirus serotipos 40 y 41,
norovirus y astrovirus. Las más utilizadas son la aglutinación facilitada
mediante partículas de látex y el enzim oinm unoanálisis. Las pruebas de
detección de antígeno, por ser rápidas y prácticas, se utilizan para la
detección de las toxinas (A y A+B) de C.
1.16 Infecciones del sistema nervioso

1.16.1 Concepto
Las infecciones del sistema nervioso central más frecuentes y relevantes
son las meningitis, las encefalitis y los abscesos cerebrales. Las meningitis
son infecciones de las leptomeninges, la aracnoides y la piamadre, que
difunden al líquido cefalorraquídeo (LCR) del espacio subaracnoidco y de
 los ventrículos cerebrales. Su pronóstico y tratamiento depende del agente
causal por lo que es fundamental el diagnóstico etiológico.
1.16.2 Toma de muestras
La muestra clínica y el procedimiento de su recogida, así como su
transporte al laboratorio varía según el tipo de infección; existen excelentes
revisiones generales sobre este aspecto.
El LCR de un paciente con sospecha de meningitis es una muestra clínica
prioritaria en un laboratorio de microbiología y debe procesarse de manera
inmediata.
1.16.3 Estudio biológico del LCR
El estudio del número y tipo de leucocitos y la cuantificación de la glucosa y las
proteínas del LCR ayuda a orientar el diagnóstico etiológico de las meningitis.
En las infecciones bacterianas aparece un gran número de leucocitos
polimorfonucleares con tasas muy altas de proteínas y la glucosa suele estar
muy disminuida.
1.16.4 Procesamiento microbiológico
Examen directo Debe practicarse una tinción de Gram del sedimento del
LCR centrifugado para observar la posible presencia de bacterias. En
ocasiones se observan precipitados que pueden confundirse con bacterias,
por lo que es útil realizar una tinción con azul de metileno, colorante en el
que raramente se forman precipitados.

1.17 Infecciones respiratorias

1.17.1 Concepto
Las infecciones agudas respiratorias son causadas por un virus y son
benignas y auto limitadas por lo que no necesitan diagnostico o tratamiento
clínico estas son: rinitis, faringitis, la epiglotitis y la traqueo bronquitis.
1.17.2 Estudio microbiológico
La toma de muestra de la conjuntiva y de la faringe se utiliza un escobillón
con un medio de transporte como el de Stuart o Amies, estas muestras se
procesan rápidamente. Además de estudios bacteriológicos también se
efectúan para en los estudios virológicos no se efectúan rápidamente al
llegar a laboratorio así que se transfiere el escobillón para virus de tipo
Hanks.
1.17.3 Infecciones pulmonares
Para que se produzca una infección pulmonar los microorganismos deben
alcanzar el pulmón atreves de la vía respiratoria o por vía hemática a partir
de un foco séptico distante. En su mayoría se producen por el prime
mecanismo.
 Pacientes intubados
 Pacientes postoperados
 Pacientes granulapenicos
 Pacientes con SIDA
1.17.4 Toma de muestras
Para comprender los métodos utilizados para el diagnóstico etilogicode la
neumonía y la interpretación de los resultados es básico recordar que hay
dos tipos de resultados básicos:
 Los patógenos que no forman parte de la flora normal, como M,
tuberculosis, pneumopltilia,P,jirovcci, y los virus respiratorios.
 Los que se hallan en las vías respiratoria formando parte de la
flora comensal normal o telúrica, como el neumococo o H
influenzae.
Cultivo: Los esputos para examen microscópico y cultivo deberían lavarse en
suero fisiológico estéril dispuesto en una placa de Petri para seleccionar las partes
más purulentas, que son las que deberían procesarse. Los medios a utilizar para
los cultivos bacterianos y fúngicos son medios enriquecidos, selectivos y
diferenciales, dependiendo de la sospecha etiológica.
1.17.5 Diagnostico serológico
Tradicionalmente el diagnóstico de las infecciones causadas por
micoplasma, clamidia, coxiela y virus respiratorios se ha efectuado por
serología. El diagnóstico de la legionelosis suele hacerse por detección de
antígeno (orina) y cultivo, pero en ocasiones sólo se obtiene un resultado
positivo por serología.
1.18 Infecciones piógenas y necrotizantes

1.18.1 concepto
Son infecciones causadas por bacterias y hongos que dan lugar a procesos
exudativos, supurados o necrotizantes.
1.18.2 Infecciones cutáneas
 Las infecciones estafilocócicas se inician, que es una lesión piógena que
puede extenderse localmente produciendo un pequeño absceso (ántrax). A
veces estas lesiones están causadas por pseudomonas (foliculitis de las
piscinas o tras depilación con cera contaminada).
1.18.3 Toma de muestras
Si la lesión es purulenta o exudativa, las muestras se toman con escobillón
con medio de transporte tipo Amies. Si la lesión es seca y escamosa, como
en algunas dermatofitosis, debe rasparse con un bisturí estéril para recoger
las escamas; si están afectados los cabellos y las unas, han de cortarse o
rasparse; estas muestras deben depositarse en una placa de Petri.
1.18.4 Examen directo
Para el examen de los hongos filamentosos (dermatofitos) se deposita en
una porta una gota de solución de potasa y en ella se suspenden
las escamas, dejando reposar unos minutos para facilitar su disgregación.
1.18.5 Osteomielitis y artritis
Las infecciones de los huesos y articulaciones pueden producirse como
consecuencia de una diseminación hematógena desde un foco distante y
en estos casos son mono microbianas, En los lactantes están causadas
principalmente por estreptococo.
1.18.6 Tratamiento empírico
Si la infección está causada exclusivamente por bacterias anaerobias, tanto
si es mono microbiano como polimicrobiana, debe administrarse un
antibiótico empíricamente activo frente a ellas como la amoxicilina con
ácido clavulánico, un carbapenémico, el metronidazol.

1.19 Septicemia

1.19.1 concepto
En nuestro medio suele denominarse septicemia a la invasión persistente
del torrente circulatorio por bacterias u hongos que da lugar a
 manifestaciones clínicas de infección sistémica, como fiebre, taquicardia,
leucocitosis y otras. El diagnóstico etiológico de las septicemias se efectúa
mediante el cultivo de la sangre (hemocultivo).

1.19.2 Examen directo

En las bacteriemias y fungemias, el examen directo de la sangre no es una
técnica útil para el diagnóstico, debido a que el escaso número de
microorganismos circulantes no permite su visualización.
El examen directo de una muestra de sangre es adecuado sólo para el
diagnóstico de las fiebres recurrentes causadas por borrelias y Bartonella
bacilliformis, que es la única bartonella que puede detectarse en la sangre
intraeritrocitariamemte.

1.19.3 Hemocultivo
 Las bacteriemias y fungemias se diagnostican por hemocultivo, que
consiste en el cultivo de una muestra de sangre en medios
adecuados para recuperar las bacterias y los hongos que son
capaces de crecer en medios artificiales.
 Para realizar un hemocultivo en un adulto se extrae al paciente entre
10 y 20 ml de sangre sin anticoagulante y se inocula en dos frascos
con 50 ml de caldo de cultivo, uno de los cuales tiene atmósfera
aerobia y el otro anaerobia para permitir el crecimiento de los
respectivos microorganismos.
 La extracción debe hacerse mediante una técnica rigurosamente
aséptica para evitar contaminaciones.

1.19.4 Detección de antígeno y técnicas de ampliación en la sangre
Las técnicas de detección de antígeno en la sangre se han utilizado para la
detección de criptococo tanto con fines de diagnóstico como para seguir la
evolución del proceso (sepsis por criptococo). No hay que olvidar que se
utilizan técnicas de detección de antígeno en muestras de sangre para el
diagnóstico de la hepatitis B (HBsAg, HBeAg), en las infecciones sistémicas
por citomegalovirus y en la infección por el virus de la inmunodeficiencia
humana (HIV).

1.20 Hepatitis

1.20.1 concepto
- Son infecciones víricas sistemáticas afectan al hígado.
 - La mononucleosis infecciosa (virus de Epstein-Barr) que causa una
hepatitis leve durante la fase aguda.
1.20.1.1 Virus de hepatitis A
Es una enfermedad benigna y autolimitada que tiene un periodo de incubación de
3 a 6 semanas, no causan hepatitis crónica, en raras ocasiones causan una
hepatitis fulminante, la tasa de mortalidad se acerca a 0,1% la vía de transmisión
es por fecal-oral (agua o alimentos contaminados) se puede detectar en el suero y
la saliva es transitoria, la transmisión hematógena de este virus se produce solo
en raras ocasiones .El anticuerpo IgM especifico frente al VHA y viene seguida
IgG anti-VHA.
1.20.1.2 Virus de hepatitis E
Este virus produce hepatitis aguda con recuperación y desaparición de virus,
hepatitis crónica no progresiva, enfermedades progresivas que terminan en
cirrosis VHB es un precursor importante del desarrollo carcinoma hepatocelular
tiene lugar en los niños perinatalmente y más baja cuando se infecta en los
adultos. Modo de transmisión de VHB es por parenteral, contacto sexual, perinatal
o sustancias por vía endovenosa (compartiendo agujas y jeringuillas) mayormente
afecta los adultos.
1.20.1.3 Virus de hepatitis B
El número de pacientes con infección crónica continuará aumentando como
consecuencia de la persistencia potencial de la infección por el VHC durante toda
la vida y la mayor parte infectados con este virus y la cirrosis aparecerá finalmente
en el 20-30% de los sujetos con infección crónica.
- Abuso de sustancias por vía endovenosa50%
- Múltiples parejas sexuales36%
- Lesión por pinchazo con una aguja 10%
1.20.1.4 Virus de hepatitis D
Es un virus único de ARN que depende de su ciclo vital sobre un VHB. El virus de
VHD surge de lo siguiente:
coinfección aguda se produce después de la exposición al suero que contiene
VHD y VHB simultáneamente.
Infección latente independiente de virus colaboradores, se observa en el trasplante
de hígado.

1.20.1.5 Virus de hepatitis C

Es un virus de RNA que es semejante a la hepatitis A, la infección es asintomática
afecta a mujeres embarazadas durante el tercer trimestre y es elevada en
mortalidad vía de transmisión fecal-oral

1.20.1.6 Virus de hepatitis G

En 1995 se clono un flavivirus que tenia algunos similitudes con el VHC y se
denomina virus de la hepatitis G . el VHG se transmite por sangre o derivados
contaminados y el mediante el contacto sexual que este virus se replica en la
medula ósea y el bazo, esta infección doble tiene un cierto efecto protector frente
a la enfermedad por el VIH.

1.21 Mecanismo de defensa

1.21.1 concepto
Ni los microbios comensales, ni los patógenos pueden atravesar la piel, los
microbios comensales tampoco pueden atravesar la mucosa, algunos
 órganos como el pulmón, el riñón, el útero, el hígado, el páncreas,
glándulas salivales y otro están en contacto con el exterior atreves de sus
vías, existen sistemas de defensa fisiológica.
La permeabilidad de esas vías el flujo ininterrumpido de las secreciones
(orina, saliva, bilis, etc.)
Los microbios atraviesan las mucosas atreves de los conductos naturales,
se multiplican en el espacio intersticial de los tejidos.

Factores predisponentes Localización de la infección

Factores locales
Ruptura de la barrera cutaneomucosa
Heridas traumáticas
Incisiones quirúrgicas
Catéteres intravasculares
Sepsis
Sonda o litiasis urinaria
cistitis o pielonefritris)
Traqueotomía, intubación endotraqueal
Quemaduras
Derivaciones del sistema nervioso central
Diálisis peritoneal y hemodiálisis
Cuerpos extraños
Prótesis (articulares, valvulares)
persistente
Marcapasos
Cirugía contaminada
Orofaríngea/Intestinal/Genital
intervenida
En la zona lesionada
En la zona de la incisión
En la vena donde está insertado (flebitis).
En la vía urinaria (infección del tracto urinario:
En el pulmón (neumonía)
En la zona quemada
En las meninges
En el peritoneo
En la prótesis y su contigüidad
Las endocarditis protésicas causan bacteriemia
En el marcapasos y tejidos circundantes
En la proximidad de la zona
 Referencias bibliográficas

 Microbiología clínica/guillen Prats-Buenos Aires; Madrid Panamericana,

[2005]

 2006, EDITORIAL MÉDICA PANAMERICANA, S. A. Alberto Alcocer, 24 -

28036 Madrid.
 http://www .m edicapanam ericana.com
 57777.pdf