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Introduccion 1
Introduccion 1
2015
6. EVALUACIÓN
• 2º unidades 5-6
Química analítica
*
APXS en la superficie de Marte
https://www.youtube.com/watch?v=0hL4UroL0JE
https://www.youtube.com/watch?v=egzoVxHFK8g
*
Metodología
1) Método colorimétrico: el As se
destila como AsH3 (AOAC).
2) Muestra representativa: Tejido de
los riñones.
3) Disolución: La muestra se calcina
a 555 0C. El As2O3 se diluye con
HCl para formar H3AsO4.
4) Formación de AsH3.
Dietiltiocarbamato
Cuantificación del analito (colorimetría)
El método científico aplicado al análisis químico
Siglo XIX: Análisis clásico cualitativo de iones
• Se basa en que es posible separar en grupos a los cationes y aniones existentes
en una muestra líquida (mediante la adición de determinados reactivos
(denominados de grupo) y posteriormente, identificar los iones de cada grupo con la
ayuda de reactivos específicos.
• En este esquema los cationes se dividen en cinco grupos (los 4 que aparecen como
precipitados y el quinto queda en la disolución final).
Muestra + reactivo → Precipitado + disolución
Clasificación de los cationes en grupos
Disolución + H2S
Grupo II: Bi, Cd, Cu, Hg, Pd, Os, Pd, Rh, Ru
(Precipitado: CdS, CuS, HgS, PdS, etc.)
Disolución + (NH4)2S
Grupo III: Co, Ni, Tl, Fe, Cr, Mn, Zn, Al, Be, Ti, Zr,
U, Ce, In, Th, Nb, Sc, Ta
(Precipitado: CoS, NiS, FeS, etc.)
www.youtube.com/watch?v=9nYpjtRx0Zs
www.youtube.com/watch?v=iC4tfkbF5hQ www.youtube.com/watch?v=iC4tfkbF5hQ
Cromatograma de una mezcla compleja de hidrocarburos
Cromatogramas de muestras complejas
Compuestos orgánicos clorados y bromados
Compuestos orgánicos volátiles
• Cromatografía liquida (HPLC)
http://www.youtube.com/watch?v=wYEDJu0pJy4, http://www.youtube.com/watch?v=zVC_BttoOKE
Fases estacionarias para HPLC
Separación de ácidos
nucleicos
Cromatografía por exclusión de tamaño
tamaño
Cromatografía con fluidos supercríticos
• La densidad característica de un fluido supercrítico se encuentra entre la de un gas y
un líquido, pero más cercana a la de un líquido. En la región supercrítica, la densidad
de un fluido supercrítico aumenta con el aumento de la presión (a temperatura
constante). Cuando la presión es constante, la densidad del material disminuye con
el aumento de la temperatura. El efecto de disolución de un fluido supercrítico
depende de su valor de densidad.
• Los fluidos supercríticos también son mejores portadores que los gases gracias a su
mayor densidad. Por lo tanto, la densidad es un parámetro esencial para las técnicas
analíticas que utilizan fluidos supercríticos como solventes.
Temperatur
Presión
Solvente a crítica
crítica (bar)
(°C)
Fragmentos de ADN teñidos en bromuro de Proteínas teñidas con Coomassie tras una
etidio tras una electroforesis en un gel de electroforesis desnaturalizante en geles de
agarosa. poliacrilamida.
– Electrodo de Severinghaus
• pH: concentración de H+
• Acidosis respiratoria
• PCO2 arterial mayor que el rango normal
• Causada por: Hipoventilación resultante de:
•Paro cardíaco
•Enfermedad pulmonar obstructiva crónica
•Sobredosis de drogas
pH: Sangre arterial 7,35 – 7,45
E0
Absorción molecular
• Espectros más complejos, más estados de energía (espectros
de bandas)
Espectros moleculares IR
Espectros Microondas (rotacionales)
Miniaturización de los instrumentos
(avances de la electrónica y los computadores en los últimos 30 años)
Indicadores Portátiles
Multifunción y DATA
LOGGERS de gran
precisión. Modelos para
Presión, Temperatura,
Humedad, pH y Redox,
Conductividad, concentración
de compuestos en química
clínica.
Química clínica
i-STAT 1 Blood
Analyzer
StatStrip Glusose Lactate Plus The Cholestech
Urometer
Analyzer LDX System
Etapas del proceso analítico
Etapas del proceso analítico
1) Definición del problema
Tipo de análisis:
a) Recolección de la muestra
b) Cantidad de muestra
c) Sensibilidad del método
d) Precisión y exactitud
e) Separación preliminar (eliminación de interferencias)
a) Tiempo
b) Costo
c) Complejidad de las mediciones
Composición:
Ejemplos:
b) Cantidad de muestra:
c) Muestras sólidas:
* Análisis sobre base seca: secado a 110 ºC por 1-2 horas, enfriar y pesar.
* Disolución de la muestra sólida seca.
Tipos de muestras
a) Muestras inorgánicas (sólidos):
• Disolución con ácidos fuertes, agentes acomplejantes,
agentes oxidantes.
b) Muestras Orgánicas:
• Análisis de los componentes inorgánicos (e.g trazas de
metales):
• Análisis de las cenizas (combustión a 500-700 ºC),
disolución con ácidos fuertes.
• Digestión con agentes oxidantes (destrucción del material
orgánico)
• Precipitación de proteínas.
• Análisis de los componentes orgánicos: extracción del
componente orgánico con solventes, diálisis, precipitación,
destilación, etc.
d) Acondicionamiento de la muestra para el análisis:
* Ajuste del pH.
• Composición de la sangre
1) Elementos celulares: Eritrocitos, leucocitos, plaquetas
• Análisis de sangre
Centrifugación o - Células
Sangre
Adición de acido
tricloacetico - Plasma
Coagulación:
eliminación
del fibrinógeno
Suero
(mayoría de los análisis)
Análisis de fluidos biológicos
• Sangre y orina se colectan después de ayuno de 8-10 horas (análisis de glucosa y
colesterol)
Análisis de suero:
• Na+, K+, Ca+2, Mg+2, Cl-, HCO3-
Separación de las células evitando la hemólisis (contaminación
del suero con materiales intracelulares como K+, Fe+3·, Mg+2,
Zn+2, urea , proteínas, etc.).
• Las muestras de sangre deben ser centrifugadas
inmediatamente para separar el suero o plasma de las
células.
Análisis clínicos en
suero y sangre
Composición elemental
17%
1.5%
13.8%
Tipos de Análisis
Clínicos en suero
y sangre
• Inmunoensayos
Conjunto de técnicas analíticas de laboratorio que usan complejos inmunes, es decir los
resultantes de la conjugación de anticuerpos y antígenos. Se usa para la medición
una molécula como marcador que hace parte de la reacción con el complejo inmune en la
prueba o ensayo químico.
La técnica se basan en la gran especificidad y afinidad de los anticuerpos por sus antígenos
específicos.
El acoplamiento estructural entre las macromoléculas se realiza gracias a varias fuerzas débiles
que disminuyen con la distancia, como los puentes de hidrogeno, fuerzas de Van Der Waals,
interacciones electrostáticas e hidrofobicas. El reconocimiento Ag-Ac es una reacción de
complementariedad, por lo que se efectúa a través de múltiples enlaces no covalentes entre
una parte del antígeno y los aminoácidos del sitio de unión del anticuerpo. La reacción se
caracteriza por su especificidad, rapidez, espontaneidad y reversibilidad.
Su gran sensibilidad y especificidad permite la cuantificación de compuestos presentes en
líquidos orgánicos en concentración reducida, del orden de ng/mL o de pg/mL.
El desarrollo del inmunoensayo ha tenido gran impacto en el campo del diagnostico médico
mediante pruebas de laboratorio o química clínica.
http://www.youtube.com/watch?v=HEY3dUh2dTM
http://www.youtube.com/watch?v=sUtIOzlz6_k
http://www.youtube.com/watch?v=2uLMTyUSds0
Los anticuerpos o inmunoglobulinas,
(Ig) son glicoproteinas del tipo g-globulina.
Pueden encontrarse de forma soluble en la
sangre u otros fluidos corporales de los
vertebrados, y son empleados por el
sistema inmunologico para identificar y
neutralizar elementos extraños tales como
bacterias, virus o parásitos.
• La aparición de hCG en orina y/o suero, luego de la concepción y su subsecuente incremento rápido en
concentración durante el crecimiento gestacional incipiente, lo hace un excelente indicador para la detección
temprana del embarazo. La prueba de embarazo hCG TEST (orina/suero), es una prueba cualitativa rápida,
que detecta la presencia de hCG en una muestra de orina o suero, con una sensibilidad de 20 mUI/ml.
• Las muestras positivas reaccionan con el conjugado específico de anticuerpos hCG-coloreados, para formar
una línea en la región de la prueba de la membrana. Para efectos de control del procedimiento, siempre
aparecerá una línea de color en la región de control.
• Catt, K.J./ Dfan, M.L., and Vaitukaitis, J.l., J. Clin. Endocrinal. Metab.,
40, 537 (1975).
Lenton, E.A., Neal, L.M., Sulaiman,R., Fertility & Sterility 37, 773 (1982).
4) Separación del analito de las interferencias
Los métodos de separación mas comunes: Precipitación, extracción con solventes,
destilación, diálisis, cromatografía.
5) Proceso de medición
Criterios para la selección del método: Cantidad de analito, precisión, exactitud,
selectividad, sensibilidad, costo y rapidez.
Tipos de análisis:
1) Métodos Clásicos:
• Análisis Gravimétrico:
a) separación selectiva del analito mediante precipitación o volatilización
b) medición no selectiva del peso del precipitado.
• Análisis Volumétrico:
El analito reacciona con un volumen medido de un reactivo de
concentración conocida.
2) Métodos Instrumentales mas utilizados:
• En general los métodos clásicos son mas precisos (< 1%), pero los
métodos instrumentales son mas sensibles, selectivos, rápidos y pueden ser
automatizados para analizar varios analitos a la vez.
La definición del kilo había dependido hasta ahora del cilindro metálico denominado
"Gran K", cuyo original se conserva desde 1889 en la Oficina Internacional de Pesos y
Medidas (BIPM) en Sevres, a pocos kilómetros al oeste de París. No obstante, los
científicos constataron que la masa de este prototipo internacional había variado, de
forma muy ligera, en comparación con otras seis copias realizadas a finales del siglo
XIX de este mismo cilindro, compuesto a través de platino e iridio.
Diferencia entre masa y peso: (p = gm)
• Masa es una medida invariable de un objeto. Cantidad de materia.
• Por ejemplo, un crisol pesa menos en Denver que en Atlantic City (ambas
ciudades se encuentran aproximadamente en la misma latitud) porque la fuerza de
atracción entre el crisol y la Tierra es menor en la mayor altitud de Denver. De
manera similar, el crisol pesa más en Seattle que en Panamá (ambas ciudades al
nivel del mar) porque la Tierra es de alguna manera aplanada en los polos y la
fuerza de atracción aumenta significativamente con la latitud.
• Sin embargo, la masa del crisol permanece constante sin importar el lugar o la
ubicación donde se mida.
• Un análisis químico está siempre basado sobre la masa, de tal manera que los
resultados no dependerán del sitio donde se realice. Debe utilizarse una balanza
para comparar la masa de un objeto con la masa de una o más masas estándares.
Debido a que g afecta a ambas masas de la misma forma, la masa del objeto
problema es idéntica a las masas estándares con las cuales es comparado.
Diferencia entre masa y peso: (p = gm)
• Masa es una medida invariable de un objeto. Cantidad de materia.
• Por ejemplo, un crisol pesa menos en Denver que en Atlantic City (ambas
ciudades se encuentran aproximadamente en la misma latitud) porque la fuerza de
atracción entre el crisol y la Tierra es menor en la mayor altitud de Denver. De
manera similar, el crisol pesa más en Seattle que en Panamá (ambas ciudades al
nivel del mar) porque la Tierra es de alguna manera aplanada en los polos y la
fuerza de atracción aumenta significativamente con la latitud.
• Sin embargo, la masa del crisol permanece constante sin importar el lugar o la
ubicación donde se mida.
• Un análisis químico está siempre basado sobre la masa, de tal manera que los
resultados no dependerán del sitio donde se realice. Debe utilizarse una balanza
para comparar la masa de un objeto con la masa de una o más masas estándares.
Debido a que g afecta a ambas masas de la misma forma, la masa del objeto
problema es idéntica a las masas estándares con las cuales es comparado.
Cantidad de materia
• Definición actual: El mol es la cantidad de sustancia de un sistema que contiene
tantas entidades elementales como átomos hay en 0,012 kilogramos de carbono-
12. Cuando el mol es empleado, las entidades elementales deben ser
especificadas, y estas pueden ser átomos, moléculas, iones, electrones, u otras
partículas o grupos de tales partículas.
https://oar.ptb.de/files/download/59e08f5d4c91849c2260b8f2
Esfera de silicio enriquecido en 28Si
interrelaciones entre las Unidades Básicas del sistema