Examen 2. Biología Molecular. 14 de marzo de 2022.

1. Explique detalladamente el experimento que demostró que el proceso de

replicación del DNA ocurre por un mecanismo semi-conservativo.
2. Dibuje las DOS horquillas de replicación que derivan de una burbuja de
replicación. Señale con claridad las CUATRO cadenas en síntesis y dibuje
una punta de flecha en el extremo 3´ de cada una. También califique cada
una de las cuatro cadenas en síntesis como cadena “líder” o “retrasada”.
3. En relación a los orígenes de replicación, indique: a) El número de orígenes
de replicación necesarios para la duplicación del genoma bacteriano y del
genoma humano, b) DOS características de los orígenes de replicación en
la levadura Saccharomyces cerevisiae, c) En que fase del ciclo celular se
forma y en que fase se inicia la actividad del complejo pre-replicativo en la
levadura S. cerevisiae y en células humanas, d) Indique el nombre de
CUATRO proteínas necesarias para su formación y/o que formen parte del
complejo pre-replicativo.
4. Indique: a) dos diferencias en la forma en que se sintetizan las cadenas
líder y retrasada durante la replicación del DNA, b) qué extremo de una
cadena en crecimiento, 5´ o 3´, puede extender la DNA polimerasa, c) dos
requisitos absolutos que debe cumplir la cadena molde o templado para
que pueda ser un sustrato de la DNA polimerasa, d) debido a que la DNA
polimerasa puede elongar solamente un extremo de la cadena de DNA, las
dos enzimas que extienden las cadenas líder y retrasada deberían avanzar
en direcciones opuestas pero esto no es así, sino que ambas avanzan en la
misma dirección, explique la razón.
5. Indique el nombre de: a) la proteína que va rompiendo los puentes de
hidrógeno que normalmente mantienen unidas las dos cadenas de DNA
durante la replicación, b) cual es la topología (arreglo) de esta proteína
cuando está unida al DNA y como alcanza dicho estado, c) la proteína que
mantiene unida a la DNA polimerasa al DNA durante la replicación.
6. Señale la función de las siguientes enzimas durante la replicación del DNA:
a) proteínas desestabilizadoras de la doble hélice, b) DNA primasa, c)
RNAsa H, d) DNA ligasa.
7. Explique todos los pasos de una reacción de la polimerasa en cadena o pcr,
indicando que evento ocurre en cada paso. Señale que tienen de especial
las DNA polimerasas que se utilizan en la reacción de pcr.
8. Explique con detalle las dos etapas del método de secuenciación de
Sanger.
9. Explique con detalle todos los pasos necesarios para la replicación de los
telómeros en las células que poseen la enzima telomerasa.
10. Provea: a) el nombre de DOS tipos celulares en el ser humano adulto que
expresan la enzima telomerasa y DOS tipos celulares que NO expresan
esta enzima; b) indique los componentes individuales de la holoenzima
telomerasa, c) indique también qué consecuencias tiene para la replicación
de los telómeros el hecho de que la telomerasa no se exprese en un tipo
celular que se divide, como los fibroblastos, d) indique la razón por la que el
ratón knockout para la telomerasa no mostró inicialmente ningún fenotipo.