APL 1.3 Manual de Procedimientos Sección Bioquimica V1 2019

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
SECCIÓN
BIOQUÍMICA
HRLBO
Código: SGC-MP-BIOQ APL1.3
Fecha: 21 de enero 2019

MANUAL DE PROCEDIMIENTOS Versión: 1
SECCIÓN BIOQUIMICA Vigencia: 21 de enero de 2024
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Contenido
1 INTRODUCCIÓN ........................................................................................................ 5
2 OBJETIVO ................................................................................................................ 5
3 ALCANCE ................................................................................................................. 5
4 ORGANIZACIÓN DE LA SECCIÓN ................................................................................ 5
4.1 Funciones y responsabilidades del personal ........................................................... 5
4.1.1 Profesional 1: Química y Gases ...................................................................... 6
4.1.2 Profesional 2: Hormonas, Marcadores tumorales y Hb Glicosilada ....................... 6
4.1.3 Profesional Encargado de Sección: ................................................................. 7
4.1.4 Técnico de laboratorio: ................................................................................. 8
4.1.5 Personal administrativo y de Servicio .............................................................. 8
4.2 Usuarios: .......................................................................................................... 8
4.3 Flujo de muestras: ............................................................................................. 9
4.3.1 Muestras de Servicios de Hospitalizados: ........................................................ 9
4.3.2 Muestras de Pacientes Ambulatorios (Policlínico de Especialidades) .................... 9
4.3.3 Muestras de Hospitales de la red, Consultorios y otros Centros externos ............. 9
5 CARTERA DE EXÁMENES DE LA SECCIÓN ..................................................................... 9
5.1 Área Química ..................................................................................................... 9
5.2 Gases y electrolitos .......................................................................................... 10
5.3 Estudio de líquidos biológicos ............................................................................. 10
5.4 Área inmunología ............................................................................................. 10
5.5 Marcadores de Sepsis ....................................................................................... 10
5.6 Marcadores de Infarto Agudo al Miocardio ........................................................... 10
5.7 Hormonas ....................................................................................................... 10
5.8 Marcadores tumorales ....................................................................................... 10
6 HORARIO DE RECEPCIÓN DE EXÁMENES ................................................................... 11
7 CONTENEDORES ..................................................................................................... 11
8 CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS .................................................................... 11
9 TIEMPOS DE RESPUESTA ......................................................................................... 12
10 INDICADORES DE TIEMPO DE RESPUESTA ............................................................. 13
11 CALIBRACIONES, CONTROLES Y REQUISITOS DE CALIDAD ...................................... 17
11.1 CALIBRACIÓN DE PRUEBAS: .............................................................................. 17
11.2 CONTROL DE CALIDAD EN LA SECCION: ............................................................. 17
11.2.1 Control de calidad interno ........................................................................... 18
11.2.2 Control de Calidad Externo .......................................................................... 22
11.2.3 Requisitos de calidad .................................................................................. 22
12 EQUIPAMIENTO DE LA SECCIÓN ........................................................................... 25
12.1 Equipos automatizados en comodato: ................................................................. 25
12.2 Manuales de Operación e Instructivos ................................................................. 25
12.3 Programas de Mantención por Servicio Técnico .................................................... 25
12.4 Mantenimiento diario, semanal y mensual por usuario. ......................................... 25
12.5 Equipos fuera de uso ........................................................................................ 26
13 PROCESAMIENTO DE MUESTRAS ........................................................................... 26
14 VALIDACIÓN DE RESULTADOS .............................................................................. 27
15 PROCEDIMIENTOS TÉCNICAS EQUIPO AU 680 ........................................................ 28
15.1 QUÍMICA CLÍNICA ............................................................................................ 28
PROCEDIMIENTO ACIDO URICO .................................................................................. 28
MANUAL DE PROCEDIMIENTOS BIOQUÍMICA
Calidad y Seguridad del Paciente Hospital Regional LBO


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PROCEDIMIENTO ALBUMINA ....................................................................................... 30

PROCEDIMIENTO AMILASA ......................................................................................... 32
PROCEDIMIENTO ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST) ............................................. 34
PROCEDIMIENTO ALANINA AMINOTRANSFERASA (ALT) .................................................. 36
PROCEDIMIENTO BILIRRUBINA TOTAL ......................................................................... 38
PROCEDIMIENTO BILIRRUBINA DIRECTA ...................................................................... 40
PROCEDIMIENTO CALCIO ........................................................................................... 42
PROCEDIMIENTO COLESTEROL .................................................................................... 44
PROCEDIMIENTO CREATININA .................................................................................... 46
PROCEDIMIENTO COLINESTERASA .............................................................................. 48
PROCEDIMIENTO CREATINQUINASA TOTAL .................................................................. 50
PROCEDIMIENTO CREATINQUINASA FRACCIÓN MIOCÁRDICA (CK MB) ............................ 52
PROCEDIMIENTO AMONIO .......................................................................................... 54
PROCEDIMIENTO FOSFATASA ALCALINA ...................................................................... 56
PROCEDIMIENTO GAMMA GLUTAMIL TRANSPEPTIDASA .................................................. 58
PROCEDIMIENTO GLUCOSA ........................................................................................ 60
PROCEDIMIENTO FOSFORO INORGANICO ..................................................................... 62
PROCEDIMIENTO LDH ................................................................................................ 64
PROCEDIMIENTO LACTATO ......................................................................................... 66
PROCEDIMIENTO LIPASA ............................................................................................ 68
PROCEDIMIENTO MAGNESIO....................................................................................... 70
PROCEDIMIENTO NITROGENO UREICO ......................................................................... 72
PROCEDIMIENTO PROTEINAS TOTALES ........................................................................ 74
PROCEDIMIENTO PROCALCITONINA ............................................................................. 76
16.2 PROCEDIMIENTOS TÉCNICAS NIVELES PLASMÁTICOS DE DROGAS ........................ 78
PROCEDIMIENTO CARBAMAZEPINA .............................................................................. 78
PROCEDIMIENTO FENOBARBITAL ................................................................................ 81
PROCEDIMIENTO FENITOINA ...................................................................................... 84
PROCEDIMIENTO ACIDO VALPROICO ........................................................................... 87
PROCEDIMIENTO LITIO .............................................................................................. 90
16.3 PROCEDIMIENTOS TÉCNICOS HORMONAS, MARCADORES TUMORALES Y ............... 93
PROCEDIMIENTO BHCG-BETA ..................................................................................... 93
PROCEDIMIENTO ESTRADIOL ...................................................................................... 95
PROCEDIMIENTO HORMONA FOLICULO ESTIMULANTE (FSH) .......................................... 97
PROCEDIMIENTO HORMONA LUTEINIZANTE HUMANA (hLH) ........................................... 99
PROCEDIMIENTO PROLACTINA .................................................................................. 102
PROCEDIMIENTO PSA LIBRE ..................................................................................... 104
PROCEDIMIENTO PSA TOTAL..................................................................................... 106
PROCEDIMIENTO T3 TOTAL ...................................................................................... 108
PROCEDIMIENTO T4 LIBRE ....................................................................................... 110
PROCEDIMIENTO T4 TOTAL ...................................................................................... 112
PROCEDIMIENTO TROPONINA I ................................................................................. 115
PROCEDIMIENTO ANTÍGENO DEL CÁNCER 15-3 (CA 15-3) ............................................ 118
PROCEDIMIENTO ANTÍGENO DEL CÁNCER 19-9 (CA 19-9) ............................................ 121
PROCEDIMIENTO ANTÍGENO DEL CÁNCER 125 (CA 125) .............................................. 124
PROCEDIMIENTO ANTÍGENO CARCINOEMBRIÓNICO (CEA) ........................................... 126
PROCEDIMIENTO ALFAFETOPROTEÍNA (AFP) ............................................................... 128
PROCEDIMIENTO VITAMINA B12 ............................................................................... 130


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PROCEDIMIENTO CORTISOL ..................................................................................... 133

PROCEDIMIENTO FERRITINA ..................................................................................... 136
PROCEDIMIENTO TSH .............................................................................................. 138
PROCEDIMIENTO INSULINA ULTRASENSIBLE .............................................................. 140
PROCEDIMIENTO PTH INTACTA ................................................................................. 142
PROCEDIMIENTO ALFAFETOPROTEINAS (AFP) ............................................................. 144
16.4 PROCEDIMIENTO HB GLICOSILADA-EQUIPO D10 ............................................... 146
16.5 PROCEDIMIENTO GASES ARTERIALESGASES ARTERIALES .................................. 150
16.6 PROCEDIMIENTOS ESTUDIO LIQUIDOS BIOLOGICOS ......................................... 152
PROCEDIMIENTO: CITOQUÍMICO LÍQUIDO PLEURAL y OTROS LÍQUIDOS SEROSOS ........ 152
PROCEDIMIENTO: CITOQUÍMICO DE LCR ................................................................... 158
PROCEDIMIENTO: LÍQUIDO ASCÍTICO ....................................................................... 161
PROCEDIMIENTO: LÍQUIDO ARTICULAR (SINOVIAL) .................................................... 164
18 REGISTROS ...................................................................................................... 168
19 CONTROL DE CAMBIOS ...................................................................................... 168
20 BIBLIOGRAFÍA .................................................................................................. 168
21 ANEXOS ........................................................................................................... 169


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1 INTRODUCCIÓN
El Laboratorio Clínico constituye un apoyo primordial al diagnóstico médico ya que los
análisis que se realizan son un aporte al diagnóstico médico y ayudan a confirmar o
descartar patologías que requieren administración de tratamientos específicos a los
pacientes.
Por la importancia que tiene alcanzar un trabajo estandarizado y de calidad, es
indispensable contar con un manual cuyo contenido se presente de forma sencilla y
práctica, que sea de fácil aplicación por el personal que desarrolla estas actividades
diariamente.
Se espera que el presente Manual sea una guía efectiva y útil para todo el personal que
trabaja en la Sección, que les ayude a tener un conocimiento real del alcance de sus
responsabilidades, funciones, ámbito de competencia, relaciones y comunicaciones
dentro y fuera de la unidad.
2 OBJETIVO
Proporcionar al Laboratorio de Química Clínica del HRLBO, un instrumento que facilite
el desarrollo adecuado, sistematizado y estandarizado de los procedimientos técnicos
que se realizan en la Sección.
3 ALCANCE
Profesionales Bioquímicos, Tecnólogos Médicos y Técnicos de Laboratorio que se
desempeñen en la Sección Bioquímica del Laboratorio HRLBO.
Pacientes usuarios del Laboratorio HRLBO, provenientes de Servicios Clínicos del
Hospital, Policlínicos de especialidades, Hospitales de la red, Consultorios de la VI
Región.
4 ORGANIZACIÓN DE LA SECCIÓN
4.1 Funciones y responsabilidades del personal
En el Laboratorio de Bioquímica y Hormonas desempeñan funciones 2 profesionales
(Bioquímicos y/o Tecnólogos Médicos), los cuales se distribuyen en 2 puestos de
trabajo con las funciones y responsabilidades que se describen a continuación.
Cada profesional permanece en su función por un período de 1 mes y luego rota al
otro puesto de trabajo.
La sección cuenta con 1 técnico de laboratorio, que apoya en las tareas de su
competencia y realiza preparación de muestras para derivaciones.


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4.1.1 Profesional 1: Química y Gases

 Realizar mantenimientos diarios del equipo de Química según protocolo del
equipo. Consignar en el software de mantenimiento lo realizado y qué queda
pendiente del Mantenimiento usuario (equipo AU680).
 Realizar mantenimientos diarios del equipo de Gases según protocolo del equipo
y registrar.
 Evaluar volúmenes de reactivos de equipos para el uso diario; reemplazar los
que sea necesario.
 Realizar mantenimientos semanales y mensuales de equipos si corresponde.
Registrar.
 Procesar controles de calidad según instructivo del equipamiento.
 Registrar resultados de controles en sistema informático de calidad y analizar
que no haya violación a reglas de Westgard asociadas a cada técnica. Si esto
ocurre, realizar medidas correctivas, repetir control y registrar en software.
 Cuando se verifique que todas las técnicas se encuentran bajo control, el equipo
está en condiciones de ser usado.
 Revisar las muestras llegadas a la sección, para detectar causales de rechazo
(hemólisis, muestra insuficiente, etc.). Procesar dando prioridad a muestras con
analitos poco estables (amonio, lactato, gases), muestras urgentes, muestras
de pacientes hospitalizados, teniendo en cuenta los tiempos de respuesta
establecidos.
 Validación de resultados de exámenes procesados.
 Informar Valores críticos de acuerdo con “Protocolo de Notificación de Valores
Críticos”, del Hospital.
 El profesional debe cumplir y hacer cumplir la normativa interna de bioseguridad
al personal de su dependencia
 Al término del mes, entregar informe resumen de control de calidad interno.
 Análisis de control externo si corresponde.
 Otras tareas administrativas inherentes a su sección que le sean encomendadas
por la jefatura.
4.1.2 Profesional 2: Hormonas, Marcadores tumorales y Hb Glicosilada

 Puesta en marcha de equipos a su cargo. Realizar mantenimiento de usuario,
procesamiento de controles, calibraciones, evaluación de controles y registros.
 Llenar documento Check list, que acredite que el mantenimiento ha sido
realizado. En los equipos que tienen incorporado al software la aplicación de
mantenimiento se debe consignar en ésta lo realizado y qué queda pendiente.
 Controlar equipos según procedimiento control interno.


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 Evaluar resultados de controles internos según protocolo de controles internos y

establecer las acciones correctivas que corresponda.
 Registrar controles internos según protocolo.
 Consignar en los equipos que lo permiten, las acciones correctivas realizadas.
 Desarrollar labor asistencial que asegure tiempos de respuestas adecuados para
los exámenes que se realicen en la sección.
 Revisar muestras para detectar causas de rechazo.
 Realizar sus tareas específicas de acuerdo a los procedimientos, técnicas,
métodos analíticos y protocolos de análisis previamente aprobados.
 Validación de resultados de exámenes procesados.
 Informar Valores críticos de acuerdo con “Protocolo de Notificación de Valores
Críticos”, del Hospital.
 El profesional debe cumplir y hacer cumplir la normativa interna de bioseguridad
al personal de su dependencia
 Al término del mes, entregar informe resumen de control de calidad interno.
 Análisis de control externo si corresponde.
 Otras tareas administrativas inherentes a su sección que le sean encomendadas
por la jefatura.
4.1.3 Profesional Encargado de Sección:

 Debe realizar labor asistencial en uno de los puestos de trabajo de la Sección
descritos anteriormente y velar por el cumplimiento de tiempos de respuesta
adecuados para los exámenes que se realicen en la sección.
 Tiene la responsabilidad de dirigir la sección, revisar todas las actividades
relacionadas a los análisis clínicos que se realizan en la sección y realizar una
correcta gestión de calidad según lo indican las normas locales vigentes.
 Debe asegurar que en el trabajo de su sección se utilicen apropiadamente las
técnicas de laboratorio, métodos analíticos y los procedimientos de trabajo, así
como los protocolos previamente aprobados de forma de asegurar la calidad,
integridad y confiabilidad de los resultados.
 Establecer los procedimientos adecuados para asegurar el control de la calidad
de las operaciones y establecer las acciones correctivas que corresponda.
 Asegurar que el registro de datos y resultados de los análisis se realizan de
conformidad con las buenas prácticas de laboratorio, y que se pueden verificar
la identidad del personal que intervino en cada caso.
 Velar porque se cumplan en su sección, las condiciones exigidas de seguridad y
bioseguridad para el trabajo.


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 Velar por el adecuado abastecimiento y dotación del stock de insumos y

reactivos realizando pedido mensual con especificaciones técnicas claras y
considerando existencias y consumo estimado.
 En caso de fallas de equipos en la sección, gestionar la rápida resolución del
problema coordinando con servicios técnicos de las empresas. Además, definir
cuál será el equipo de respaldo para el turno mientras se resuelve lo anterior.
 Supervisión de la notificación oportuna de Valores críticos de acuerdo al
“Protocolo de Notificación de Valores Críticos” del Hospital.
 Otras que se le asignen en forma específica inherentes a su cargo.
4.1.4 Técnico de laboratorio:

 Realizar tareas específicas de acuerdo a los procedimientos de trabajo,
técnicas, métodos analíticos y protocolos de análisis designados por los
profesionales de la Sección.
 Cumplir con las normas del reglamento interno y de bioseguridad del
laboratorio.
 Verificar causas de posibles rechazos de muestras y comunicarlo al profesional.
 Comunicarse con los servicios clínicos cuando se deba avisar algún rechazo de
muestras y registrar en formulario existente para esos fines.
 Avisar valores críticos cuando le sea delegado y completar registros.
 Preparar las muestras de derivación, revisar formularios y órdenes con
profesional designado, dejándolas listas para su envío.
 Cualquier situación especial, debe comunicárselo a los Profesionales
responsables de la sección.
 Cumplir con otras labores que le sean encomendadas por el Profesional
responsable.
 Ante cualquier situación especial, debe comunicárselo a los Profesionales
responsables de la sección.
 Mantener ordenado y limpio su puesto de trabajo y la Sección en general.
4.1.5 Personal administrativo y de Servicio

Este personal tiene funciones compartidas con el resto de las Secciones del
Laboratorio.
4.2 Usuarios:
El Laboratorio de Bioquímica Clínica del HRLBO recibe muestras de todos los servicios
del Hospital Regional como también de pacientes del Policlínico de Especialidades,
atendidos en la Toma de Muestras del Laboratorio Clínico.


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Así mismo presta servicios a toda la Red de Hospitales y Consultorios de la Región de

O’Higgins.
4.3 Flujo de muestras:

4.3.1 Muestras de Servicios de Hospitalizados:
Estas muestras son tomadas directamente en los Servicios Clínicos y enviadas al
Laboratorio con su respectiva Orden de Examen, vía correo neumático. Aquí son
ingresados al Sistema Informático DNLab y etiquetados con Códigos de Barras.
Posteriormente son trasladadas al área preanalítica donde son centrifugadas y
cargadas a Equipo pre analítico, para la realización de alícuotas y carga a racks de
equipo, quedando listas para ser trasladadas o retiradas por personal del área analítica
correspondiente.
SE EXCEPTÚA DE ENVÍO POR CORREO NEUMÁTICO LAS MUESTRAS DE LÍQUIDOS
BIOLÓGICOS.
4.3.2 Muestras de Pacientes Ambulatorios (Policlínico de Especialidades)

Estas muestras son obtenidas e ingresadas al LIS en la Sala de Toma de Muestras.
Posteriormente son enviadas a Recepción Central del Laboratorio vía correo
neumático. Allí se realiza el Check In a cada una de las muestras para confirmar su
recepción. Sigue el proceso igual al anterior.
4.3.3 Muestras de Hospitales de la red, Consultorios y otros Centros externos

Estas muestras son obtenidas en el Centro respectivo y recepcionadas en Toma de
Muestras, donde son revisadas e ingresadas al LIS, etiquetadas con Códigos de Barras
y enviadas a Recepción central del Laboratorio vía correo neumático donde se realiza
el Check In a las muestras para confirmar su recepción. El resto del proceso es igual a
los anteriores.
5 CARTERA DE EXÁMENES DE LA SECCIÓN

5.1 Área Química
Glucosa: en plasma y orina, Creatinina: en suero y orina, Bilirrubina Total,
Bilirrubina Directa, Bilirrubina Indirecta, Fosfatasas Alcalinas, Transaminasas GOT y
GPT, Gamma Glutamil Transpeptidasa (GGT), Nitrógeno ureico, Proteínas totales,
Albúmina, Calcio total, Magnesio, Amilasa en plasma y orina, Proteinuria aislada,
LDH en plasma y líquido pleural, Lactato en plasma y LCR, Amonio, Lipasa.


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Perfiles:
- Perfil bioquímico: incluye glucosa, bilirrubina total, GOT, Fosfatasas
alcalinas, Colesterol, Triglicéridos, Magnesio, Acido Úrico, BUN, Fosforo,
Calcio, Albumina.
- Perfil lipídico: incluye Colesterol total, Colesterol HDL, Colesterol LDL,
Triglicéridos.
- Perfil o Prueba hepática: incluye Bilirrubina total, bilirrubina directa e
indirecta, transaminasas GOT y GPT, Fosfatasas alcalinas, gama GT y Tiempo
de protrombina que se procesa en Hematología.
- Perfil proteico o Proteínas totales y fraccionadas: incluye proteínas
totales, albúmina, globulinas, índice A/G
5.2 Gases y electrolitos

Gases en sangre arterial y venosa, Sodio, Potasio, Cloro y Calcio Iónico en sangre
total, Cooximetría.
5.3 Estudio de líquidos biológicos

Líquido Cefalorraquídeo, Liquido Pleural, Liquido Ascítico, Liquido Pericárdico,
Liquido Articular, otros Líquidos serosos.
5.4 Área inmunología

Proteína C Reactiva
5.5 Marcadores de Sepsis

Procalcitonina, PCR.
5.6 Marcadores de Infarto Agudo al Miocardio

Creatínquinasa Total, Creatínquinasa fracción MB, Troponina I
5.7 Hormonas
Estradiol, Prolactina, H. Estimulante del Folículo, H. Luteinizante, TSH,
Triyodotironina (T3), Tiroxina (T4), Tiroxina Libre (T4 libre), Insulina, Cortisol,
Gonadotropina Coriónica Subunidad β
5.8 Marcadores tumorales

Antígeno prostático total (PSA T), Antígeno prostático libre (PSA L),
Alfafetoproteínas, CEA, CA 15-3, CA 19-9, CA 125.


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6 HORARIO DE RECEPCIÓN DE EXÁMENES

El horario de funcionamiento de la Sección es de lunes a viernes de 8:00 a 16:50 hrs.
La recepción de muestras es hasta las 16:00 hrs. Posterior a ese horario, las muestras
son ingresadas al Laboratorio de Urgencia o refrigeradas para ser procesadas al día
siguiente cuando la técnica no se realiza en turno.
7 CONTENEDORES
Contenedores se describen detalladamente en Manual de Toma de muestras del
Laboratorio.
En general:
Glucosa: tubo gris con anticoagulante Fluoruro de sodio/EDTA.
Todas las técnicas que requieren suero (área química, hormonas, PCR,
Marcadores tumorales): tubo amarillo con gel.
Gases: jeringa heparinizada con tapón hermético.
Orina: frasco plástico tapa rosca.
LCR: tubo tapa blanca sin anticoagulante
Otros líquidos: tubo verde con heparina + tubo lila.
8 CRITERIOS DE RECHAZO DE MUESTRAS

Las muestras con causales de rechazo, se dejarán identificadas pegando su etiqueta
en registro de rechazos. Se debe indicar la causal del rechazo y cuando las muestras
sean de servicios de hospitalización, se llamará al servicio para comunicar el rechazo,
registrando todos los datos de la planilla.
Posteriormente los rechazos deben ser validados por el profesional de la Sección.
Algunas causales de rechazo:
 Muestra derramada
 Muestra insuficiente
 Muestra lipémica
 Muestra mal rotulada
 Muestra mal tomada
 Muestra sin rotular
 No llega muestra
 Muestra coagulada
 Muestra hemolizada
 Orden enmendada


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*NINGUNA MUESTRA RECHAZADA EN EL LABORATORIO SE DEVUELVE AL SERVICIO

DE ORIGEN*
9 TIEMPOS DE RESPUESTA
El Tiempo de Respuesta para exámenes solicitados a la Sección Bioquímica se
especifican en la tabla a continuación.
MARCADORES HB LÍQ.
SERVICIO QCA HORMONAS GASES TUM. GLICADA BIOL.
Pacientes
Hospitalizados 3 hrs 4 hrs 1 hora 4 hrs 3 hrs 3 hrs
HRLBO
Policlínico 72 hrs 72 hrs N/A

72 hrs 72 hrs 1 hora
Especialidades
Hospitales Red
72 hrs 72 hrs N/A 72 hrs 72 hrs N/A
O’Higgins


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10 INDICADORES DE TIEMPO DE RESPUESTA
1.-FICHA INDICADOR QUIMICA APL 1.3
% de exámenes de pacientes hospitalizados (química) del

Título
laboratorio de bioquímica entregados antes de 3 horas.
Tipo Proceso
N° de exámenes de química, con prestaciones

Numerador informadas antes de 3 horas, de pacientes hospitalizados
en el periodo
N° total de exámenes de química de pacientes

Denominador
hospitalizados en el periodo
Fuente de Datos Sistema informático del laboratorio
Umbral de
>80 %
Cumplimiento
Periodicidad Mensual
Responsable Encargado de sección/Encargado de Calidad
Observaciones


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2.-FICHA INDICADOR A1C APL 1.3
% de exámenes de pacientes hospitalizados (A1C) del

Título
laboratorio de bioquímica entregados antes de 3 horas.
Tipo Proceso
N° de exámenes de A1C, con prestaciones informadas

Numerador antes de 3 horas, de pacientes hospitalizados en el
periodo
N° total de exámenes de A1C de pacientes hospitalizados

Denominador
en el periodo
Umbral de
>80 %
Cumplimiento
Observaciones


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3.-FICHA INDICADOR GASES APL 1.3
% de exámenes de pacientes hospitalizados (Gases) del

Título
laboratorio de bioquímica entregados antes de 1 hora.
Tipo Proceso
N° de exámenes de gases, con prestaciones informadas

Numerador antes de 1 hora, de pacientes hospitalizados en el
periodo
N° total de exámenes de gases de pacientes

Denominador
Umbral de
>80 %
Cumplimiento
Observaciones


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4.-FICHA INDICADOR HORMONAS APL 1.3
% de exámenes de pacientes hospitalizados (hormonas)

Título del laboratorio de bioquímica entregados antes de 4
horas.
Tipo Proceso
N° de exámenes de hormonas, con prestaciones

Numerador informadas antes de 4 hora, de pacientes hospitalizados
en el periodo
N° total de exámenes de gases de pacientes

Denominador
Umbral de
>80 %
Cumplimiento
Observaciones


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11 CALIBRACIONES, CONTROLES Y REQUISITOS DE CALIDAD

11.1 CALIBRACIÓN DE PRUEBAS:
Las calibraciones se llevarán a cabo según varios criterios:
 Cuando hay cambios de lote de reactivo: el equipo al detectar nuevo lote de un
reactivo, obliga que éste sea calibrado.
 Cuando hay caducidad de la curva de calibración: En la programación de cada
técnica se define las horas de vigencia de las curvas de calibración. Al caducar
éstas, los equipos bloquean la técnica hasta que se recalibre o se omita la
calibración.
 Cuando se obtienen valores de controles fuera del rango permitido y solo
después de haber descartado todas las otras causas de error.
 Si la calibración de cualquier técnica caduca durante el día, calibrar con el
calibrador.
 Se recomienda revisar el factor obtenido en la calibración anterior de la técnica
revisando en Historial de calibraciones. Buscar la fecha en que se hizo la
calibración, ver Detalles y comparar Factor obtenido con el de fechas anteriores.
 El Factor no debe tener mucha variación con los anteriores.
 Después de la calibración, siempre se debe controlar la técnica con los controles
correspondientes.
11.2 CONTROL DE CALIDAD EN LA SECCION:

El Control de calidad implica un conjunto de medidas encaminadas a lograr
confiabilidad de los resultados analíticos y tiene como propósito garantizar que los
resultados obtenidos sean acordes al estado de salud del paciente. El control de
calidad tiene como objetivo fundamental asegurar la coherencia de los resultados
obtenidos diariamente y el cumplimiento de los criterios establecidos.
a. OBJETIVO
Describir y estandarizar las diferentes etapas del control de calidad en la Sección y
establecer criterios para el manejo de este ante incumplimientos y aplicación de
medidas correctivas.
b. ALCANCE
Profesionales que se desempeñan en la Sección Bioquímica en cualquiera de sus áreas.
c. RESPONSABLES
Profesionales área Química Clínica
Profesionales área Hormonas


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Profesionales área Gases

Profesionales área Hb glicosilada
Encargado de calidad Laboratorio
d. REFERENCIAS
Software de Calidad UNITY REAL TIME
“Guía técnica para control de calidad de mediciones cuantitativas en el Laboratorio
clínico”-ISP
e. DEFINICIONES
BQ: Bioquímicos.
TENS: Técnicos de Enfermería de Nivel Superior
ISP: Instituto de Salud Pública.
QCI: Control de Calidad Interno.
QCE: Control de Calidad Externo
TENDENCIA: tipo de error sistemático, definida como un incremento o disminución
gradual, con frecuencia sutil, de los valores de control y posiblemente de los
valores de pacientes.
CORRIDA ANALÍTICA: Intervalo (período menor a 24 horas o número de muestras)
para el cual se espera que la precisión y la exactitud del método sean estables.
f. DESARROLLO:
Se hace uso de materiales de control valorados sobre el cual se realiza una serie
de determinaciones al comienzo de cada corrida analítica. También debe realizarse
cada vez que un instrumento recibe intervención de servicio técnico, cada vez que se
cambia un lote de reactivos, cada vez que se prepara un nuevo lote, tras cada
calibración, y cada vez que un resultado parezca inapropiado.
11.2.1 Control de calidad interno

El manejo del control de calidad se realiza con los mismos criterios en todas las áreas
del Laboratorio de Bioquímica.
La totalidad de las técnicas realizadas en la Sección Bioquímica (en equipo AU680,
Access II, D10 y Gases), se controlan diariamente al inicio de la jornada, luego de
realizar mantención diaria a los equipos, considerándose como corrida analítica el
período de 24 horas.
Se utiliza material control de dos o tres niveles (normal y patológico).


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Cada material control cuenta con instructivo de preparación, forma de alicuotado,

almacenamiento y uso (Anexo 20.6).
Gráfica de Levey-Jennings
Esta gráfica carta control es utilizada para detectar errores aleatorios y sistemáticos.
Debe usarse materiales control cuya matriz sea similar al líquido biológico en estudio,
incluidos en cada corrida analítica. La concentración de los analitos contenidos en el
control, en lo posible debe estar comprendida en el intervalo de referencia biológico y
bajo o sobre este.
Con cada uno de los controles obtener 20 datos en no menos de 14 corridas,
(idealmente en 20), obtener media aritmética(x), desviación estándar (s) y coeficiente
de variación (CV); se construye una gráfica de Levey-Jennings, considerando los
límites de control:
x + 1s
x + 2s, límite de precaución o alerta;
x + 3s, límite de rechazo.
Esta gráfica se debe construir antes del término del lote anterior (iniciar 20 días
antes). Cuando no se cuenta con el nuevo lote con anticipación, usar la media del
inserto durante la valoración y heredar el coeficiente de variación del lote anterior.
Reglas de Westgard
Para aceptar o rechazar los puntos de cada nivel de control se utilizan las reglas de
Westgard.
Se describen reglas básicas, que están incorporadas como reglas de decisión en
algunos equipos.
12s: Es una regla de advertencia que se viola cuando una sola observación de control
está fuera de los límites ± 2s. Esta regla advierte que puede estar presente un error
aleatorio o un error sistemático.
13s: Esta regla identifica un error aleatorio inaceptable o posiblemente el inicio de un
error sistemático grande. Cualquier resultado de control de calidad fuera de ±3s viola
esta regla.
22s: Esta regla identifica solamente error sistemático. Los criterios de violación de esta
regla son: dos resultados de control de calidad consecutivos, mayores a 2s y del
mismo lado de la media.
R4s: esta regla identifica solamente un error aleatorio y se aplica únicamente dentro de
la corrida actual. Cuando hay una diferencia de 4S entre los valores de control dentro


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de una sola corrida, se viola la regla para error aleatorio.

31s: los criterios que deben cumplirse para violar esta regla son: tres resultados
consecutivos, mayores a 1s, dentro del mismo lado de la media.
41s: los criterios que deben cumplirse para violar esta regla son: cuatro resultados
consecutivos, mayores a 1s, del mismo lado de la media. Es un indicador de error
sistemático.
10x: estas reglas son violadas cuando hay: 10 resultados de control del mismo lado
de la media, independientemente de la desviación estándar específica en la que se
localizan éstos. Es un indicador de error sistemático.
En la sección, se utiliza el software de control de calidad Unity para establecer las
reglas para cada analito.
Planificación para aplicación de reglas Westgard:

a) En UNITY  Asesor Westgard  Diseñar Reglas de QC.
b) Generar Reglas  Avanzado.
 Medidos por serie : Selección Manual
 Rango de datos: Rango de fechas igual al de la planilla de análisis de datos.
 Selección de lote: Por rendimiento, Usar nivel con error total máximo.
 Grupo: Definido por usuario  Aplicar sesgos calculados anteriormente por
analito*1.
e) Aplicar  Aceptar
f) Luego el Asesor Westgard nos sugerirá Reglas Westgard a aplicar.
g) Aplicar reglas de acuerdo a sugerencias de Asesor Westgard y de acuerdo a análisis
de Carta Normalizada OPSpec que nos entrega el sistema, siguiendo las siguientes
recomendaciones:
 Elegir menos reglas por sobre más reglas
 Menos N por sobre más N
 Probabilidad de detección error (Ped) > 90%
 Probabilidad de falso rechazo (Pfr) < 5%
h) En caso de no contar con un grupo par comparativo, aplicar reglas de Westgard

básicas que permitan evaluar Error Sistemático y Error Aleatorio según el analito que se
desea controlar.
Recomendaciones:
Utilizar como base cinco reglas control: 13S, 22S, R4S, 41S, 10X, salvo que por análisis
de desempeño se demuestre la utilización de reglas diferentes.


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Cada regla tiene una probabilidad de detectar el error (Pde) y una probabilidad de falso
rechazo (Pfr). Se recomienda seleccionar reglas con probabilidad de detección de error
elevada, eliminar reglas operativas con probabilidad de falsas alarmas superior al 5% y
elegir al menos una regla que detecte el error sistemático y otra para error aleatorio. Tabla
Nº 1
Aplicar reglas a los resultados del material control en la carta control de Levey-Jennings y
decidir si la corrida analítica se acepta (en control) o se rechaza (fuera de control).
Tabla N°1: Reglas de Westgard y el tipo de error al que se asocia:
Evaluación de los resultados del control

 Los controles son evaluados mediante el uso del software de calidad Unity Real
Time.
 La evaluación del control se debe realizar siempre antes del procesamiento de las
muestras.
 Para ello, los resultados deben ser ingresados al software de calidad
interlaboratorios Unity Real time, que permite comparar con otros laboratorios que
utilizan un mismo material de control en la misma prueba, misma metodología y
mismo modelo de equipo (grupo par).
 Inspeccionar la carta control analizando si están presentes las reglas de rechazo
antes descritas. Si alguna de ellas está presente se determina el tipo de error
(sistemático o aleatorio) que afecta a la técnica y se buscan potenciales causas.


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Causas de error sistemático:

Cambios de n° de lote de reactivos o controles.
Deterioro de controles (ver fecha de preparación)
Deterioro de reactivos (ver caducidad de reactivos a bordo)
Almacenamiento inadecuado de reactivos o controles.
Pipeteo inadecuado de controles o reactivos (desgaste de teflones, otros).
Cambios en la temperatura de incubación.
Causas de error aleatorio:

Burbujas en reactivos o vías transportadoras.
Mezcla inadecuada de reactivos.
Voltaje inestable.
Deterioro de la calidad del agua.
Error de operador
La técnica es considerada fuera de rango y se rechaza cuando una de las mediciones

del control incumple alguna de las reglas de rechazo definida según su requisito de
calidad.
Siempre debe realizarse una acción correctiva y documentarla.
De no lograrse una pronta solución, proceder a procesar las muestras en equipos de
respaldo para evitar retrasar la entrega de resultados.
11.2.2 Control de Calidad Externo

 El Laboratorio clínico se encuentra adscrito al control externo del Instituto de Salud
Pública.
 A la Sección bioquímica aplican los Programas de Química Clínica, Inmunología,
orina cuantitativa y marcadores tumorales.
 Al momento de recibir la muestra enviada por el ISP para realizar el control
externo, proceder según Protocolo.
 Cuando se reciba el resultado, este debe ser evaluado por los profesionales de la
Sección como indica el protocolo “Recepción, distribución, procesamiento, envío y
evaluación PEEC”
11.2.3 Requisitos de calidad

Los requisitos de calidad de los diferentes analitos que se procesan en la sección se
encuentran descritos en parrilla resumen de datos en software Unity Real Time.


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La parrilla de análisis de datos debe ser impresa a fin de mes y evaluada por los
profesionales de la Sección. Conservar en archivador, con las observaciones que sean
pertinentes.
Se adjunta listado con requisitos de calidad de los analitos de la Sección.
ANALITO ETA % FUENTE SELECCIÓN ETA
Ácido Láctico 45,6 BV Min bias/ Min imprecision
Acido Urico 17 CLIA
Ácido Valproíco (Depakene) 25 CLIA
Adenosin deaminasa (ADA) 25 BV Min bias/ Min imprecision
AFP 21,9 BV Des bias/ Des imprecision
Albúmina 10 CLIA
Amilasa 30 CLIA
Amonio 29,6 BV Des bias/ Des imprecision
Bilirrubina Directa/BC (DBIL) 44,5 BV Des bias/ Des imprecision
Bilirrubina Total/TBIL 45,01 CLIA
CA 125 35,4 BV Des bias/ Des imprecision
CA 15-3 20,8 BV Des bias/ Des imprecision
CA 19-9 46,2 BV Des bias/ Des imprecision
Calcio 13,94 CLIA
Calcio 10,91 CLIA
Carbamazepina (Tegretol) 25 CLIA
CEA (Antígeno carcinoembrionario) 24,7 BV Des bias/ Des imprecision
CK (Creatin Kinasa) 30 CLIA
CK-MB Activity 27,1 GOST
Cloruro 5 CLIA
Colesterol, HDL 30 CLIA
Colesterol, Total 10 CLIA
Colinesterasa 14,7 BV Min bias/ Min imprecision
Cortisol 25 CLIA
Creatinina 15 CLIA
Estradiol, E2 40,7 BV Min bias/ Min imprecision
Factor Reumatoide 9,92 CLIA
Fenitoína (Dilantina) 25 CLIA
Fenobarbital 20 CLIA
Ferritina 25,3 BV Min bias/ Min imprecision
Fosfatasa Alcalina 30 CLIA
Fósforo 22,1 BV Des bias/ Des imprecision


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FSH 21,2 BV Des bias/ Des imprecision

GGT (Gamma Glutamiltransferasa) 33,2 BV Min bias/ Min imprecision
GOT (ASAT/AST) 20 CLIA
Glucosa 10 CLIA
ANALITO ETA % FUENTE SELECCIÓN ETA
GPT (ALAT/ALT) 20 CLIA
hCG 18,62 CLIA
Hemoglobina A1c (NGSP) 10 RiliBAK
Hierro 20 CLIA
Insulina 32,9 BV Des bias/ Des imprecision
LD (Lactato Deshidrogenasa) 20 CLIA
LH 27,9 BV Des bias/ Des imprecision
Litio 47,56 CLIA
Magnesio 25 CLIA
Microalbumin (Urine) 41,2 BV Des bias/ Des imprecision
pCO2 8,62 BV Min bias/ Min imprecision
PCR (Proteína C-Reactiva) 28,3 BV Opt bias/ Opt imprecision
pH 5,84 BV Min bias/ Min imprecision
pO2 3s
Potasio 1,55 CLIA
Procalcitonina 3s
Prolactina 29,4 BV Des bias/ Des imprecision
Proteínas Totales, Orina/LCR 20 BV Opt bias/ Opt imprecision
Proteínas Totales, Suero 10 CLIA
PSA, Libre 62,63 RCPA
PSA, Total 33,6 BV Des bias/ Des imprecision
PTH, Intacta 30,2 BV Des bias/ Des imprecision
Saturación O2 3s
Sodio 2,8 CLIA
T3 Total 27,52 CLIA
T4 Libre 20,17 CLIA
T4 Total 20 CLIA
Transferrina 5,68 BV Min bias/ Min imprecision
Triglicéridos 25 CLIA
Troponina-I 41,9 BV Min bias/ Min imprecision
TSH 25,31 RCPA
Urea Nitrogenada 9,92 CLIA


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Vitamina B12 28,36 IPH Belgium
12 EQUIPAMIENTO DE LA SECCIÓN
12.1 Equipos automatizados en comodato:
 1 Multianalizador de Química AU 680 (Beckman Coulter), N° serie 2015104385,
Empresa Galénica.
 2 equipos de Quimioluminiscencia Access2 (Beckman Coulter), N°s Serie 511046
y 800446, Empresa Galénica.
 1 analizador de HPLC D10 (BioRad), N° serie: DJ5J031017, Empresa Galénica.
 1 analizador de Gases Cobas b221 (Roche), N° serie:18100, Empresa Roche
En caso de presentarse problemas técnicos con alguno de los equipos o por
mantenciones preventivas muy prolongadas, se usarán los equipos AU680 y Cobas
b221 de la sección de Urgencia y el equipo Access2 de la sección de Serología.
12.2 Manuales de Operación e Instructivos

Cada equipo cuenta con Manuales otorgado por el fabricante y guías rápidas de uso,
las que describen de manera fácil los pasos a seguir para el manejo de los equipos
(21.1 Instructivo de operación Equipo AU680, 21.2 Instructivo de Equipo Access 2,
21.3 Instructivo de operación Equipo D10, 21.4 Instructivo de operación Equipo Cobas
b221) y los mantenimientos que debe realizar el usuario.
12.3 Programas de Mantención por Servicio Técnico

Los equipos cuentan con una ficha técnica que contiene sus datos generales, e indican
periodicidad del mantenimiento preventivo que realizará el Servicio Técnico de la
empresa respectiva.
El encargado de Sección es responsable de obtener los programas de mantención
preventiva anual y exigir el cumplimiento de las fechas y la entrega de documentos
(orden de trabajo y Check list firmadas por el técnico y por quien recibe el equipo).
La Orden de Trabajo entregada por el Técnico debe ser archivada en carpeta del
equipo o guardada digitalmente. Enviar copia a Coordinadora del Laboratorio.
12.4 Mantenimiento diario, semanal y mensual por usuario.

Mantenimientos por usuario se indican en el menú de los equipos.
Equipo AU 680: Se describe Guia rápida de operación de Equipo AU680 en Anexo 21.1
del presente Manual.


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Equipo Access 2 posee un instructivo de mantenimiento diario y semanal que deberá

servir de pauta a los profesionales operadores del equipo para su realización.
Instructivo se describe en Anexo 21.2 del presente Manual.
Equipo D10: Realizar mantenimiento usuario de acuerdo a lo indicado por el fabricante
y descrito en Manual del equipo.
Ver Guía rápida de usuario de Equipo D10 en Anexo 21.3
Equipo de gases: Realizar mantenimiento usuario de acuerdo a lo indicado por el
fabricante y descrito en Manual del equipo.
Ver Guía rápida de usuario Equipo Cobas b221 en Anexo 21.4.
12.5 Equipos fuera de uso

Cuando un equipo está fuera de servicio o no operativo es importante señalar
claramente esta condición utilizando un letrero con la reseña «FUERA DE
SERVICIO».
En el caso de nuevos instrumentos y nuevos equipos, estos deben ser instalados y
calibrados por el distribuidor y se debe dejar por escrito un informe de la visita el cual
pasará a formar parte del expediente. Cuando un equipo se encuentre en etapa de
validación, sin insumos u otro que lo mantiene fuera de funcionamiento, debe
señalarse esta condición con un letrero visible que lo indique.
13 PROCESAMIENTO DE MUESTRAS
 Las muestras llegadas desde los Servicios Clínicos del Hospital a Recepción del
Laboratorio con su respectiva orden médica, son ingresadas al Sistema informático
y etiquetadas.
 Son centrifugan a 3000 rpm por 10 minutos e ingresadas al Equipo pre analítico
para generación de las alícuotas necesarias y carga de los racks.
 Si se detecta una causal de rechazo se debe informar al Profesional de la
Subsección. Posteriormente informar al Servicio de origen y completar registros.
 El Profesional responsable en la Sección, debe volver a revisar el tipo de tubo,
condiciones de la muestra y concordancia en datos demográficos, antes de cargar
al equipo.
 Con el equipo con las mantenciones diarias realizadas y con el control de calidad
aceptado para todos los analitos, cargar las muestras.
Se describe en forma resumida operación de equipos en Guías rápidas de
operación, en Anexos 21.1, 21.2, 21.3, 21.4 presente manual.


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14 VALIDACIÓN DE RESULTADOS
 Los equipos se encuentran conectados al Sistema Informático de Laboratorio (LIS)
por lo que los resultados de los análisis se transmiten directamente al folio del
paciente.
 El Profesional que valida debe revisar coincidencia en la información demográfica del
paciente desplegado en pantalla al digitar el folio.
 Verificar resultados históricos del paciente y compararlos con el valor actual,
evaluando que haya coherencia entre ambos valores.
 Validar resultados y emitir informe.
 No olvidar informar valores críticos si los hay y completar registros de acuerdo con
protocolo institucional.


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15 PROCEDIMIENTOS TÉCNICAS EQUIPO AU 680

15.1 QUÍMICA CLÍNICA
PROCEDIMIENTO ACIDO URICO

1. FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de ácido úrico
en suero, plasma heparinizado y orina humanas
2. RESUMEN Y EXPLICACION DEL ENSAYO

Las mediciones de ácido úrico se utilizan en el diagnóstico y tratamiento de numerosos
trastornos renales y metabólicos, entre los que se incluyen insuficiencia renal, gota,
leucemia, psoriasis, inanición y otras enfermedades debilitantes, así como para
pacientes que toman medicamentos citotóxicos.
3. PRINCIPIOS BIOLOGICOS DEL FUNCIONAMIENTO

El nivel de ácido úrico se puede determinar por medición directa, por medición del
oxígeno consumido o por medición del peróxido de hidrógeno producido por la
reacción de la uricasa. Distintos métodos utilizan reacciones enzimáticas combinadas
para detectar el peróxido de hidrógeno producido en la reacción de la uricasa.
La uricasa convierte al ácido úrico en alantoína y peróxido de hidrógeno. El peróxido
de hidrógeno reacciona con la 4-aminoantipirina (4-AAP) en presencia de N,N-bis(4-
sulfobutil)-3,5-dimetilanilina y sal disódica (MADB) para producir un cromóforo que se
somete a una lectura bicromáticamente a 660/800 nm. La cantidad de tinte generado
es proporcional a la concentración de ácido úrico de la muestra.
4.-PREPARACION DEL REACTIVO

Los reactivos de ácido úrico están listos para utilizarse. No precisa preparación.
5.-ALMACENAMIENTO DE REACTIVOS
Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8°C, los reactivos permanecerán estables
hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta.


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Los reactivos sin abrir son estables durante 30 días al almacenarse en el

compartimento refrigerado del analizador.
6.- RECOGIDA Y MANEJO DE LAS MUESTRAS

-Muestras adecuadas: Se recomienda utilizar muestras de suero o plasma
heparinizado libres de hemólisis. Se recomienda la recogida de las muestras de orina
en 24 horas.
-Almacenamiento de las muestras: El ácido úrico en el suero es estable entre 3 y 5
días a 2 – 8°C, y durante seis meses congelado a ≤ -20°C.
No se recomienda utilizar plasma de fluoruro, oxalato o EDTA con los métodos de
uricasa.
El ácido úrico en la orina normalmente es estable durante aproximadamente 3 días a
temperatura ambiente de 15 – 25°C, siempre que no haya crecimiento bacteriano que
lo destruya.
7.-CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DEL FUNCIONAMIENTO

Linealidad: El procedimiento de ácido úrico es lineal de 1,5 a 30,0 mg/dL para
mediciones de suero y de 1,0 a 100 mg/dL para mediciones de orina.
Límite de detección: El mínimo nivel detectable significa el mínimo nivel cuantificable
de ácido úrico que se distingue de cero. Se calcula como el promedio absoluto más
tres desviaciones estándar de 20 réplicas de una muestra libre de analitos.
Sustancias interferentes:
 Bilirrubina: sin interferencia significativa hasta 40 mg/dL de bilirrubina
 Hemólisis: sin interferencia significativa hasta 500 mg/dL de hemolizado
 Lipidemia: sin interferencia significativa hasta 1.000 mg/dL


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PROCEDIMIENTO ALBUMINA
1.-FINALIDAD DE USO
El ensayo Albumina se utiliza para la determinación cuantitativa de albumina en suero
humano.
2.-RESUMEN Y EXPLICACION DEL ENSAYO

Las mediciones de seroalbúmina se utilizan para el diagnóstico de una diversidad de
enfermedades. Los niveles elevados de albumina normalmente son el resultado de la
deshidratación. Es posible encontrar niveles inferiores en diversos procesos patológicos
incluyendo enfermedad renal, hepática, infecciones, quemaduras y cáncer.
3.-PRINCIPIOS BIOLOGICOS DEL PROCEDIMIENTO

En un pH de 4.2 el verde de bromocresol reacciona con la albumina para formar un
complejo verde intenso. La absorbancia del complejo formado por la albumina y el
verde de bromocresol se mide bicromáticamente a 600 y 800 nm y es proporcional a
la concentración de albumina en la muestra.
Metodología: Verde de bromocresol

El reactivo de albúmina está listo para utilizarse. No precisa preparación.
5.-ALMACENAMIENTO DE LOS REACTIVOS

Los reactivos que no se hayan abierto permanecen estables hasta la fecha de
caducidad si se almacenan entre 2 y 25 ° C. Debe evitarse la contaminación o
deterioro después de la apertura.
6.-RECOGIDA Y MANEJO DE LAS MUESTRAS

-Muestras adecuadas: Con esta técnica se pueden utilizar muestras de suero y plasma.
 Suero: utilice suero recogido en tubos plásticos con o sin barrera de gel.
 Plasma: debe utilizarse plasma recogido en tubos plásticos heparinizados.


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-Almacenamiento de las muestras: La albumina es estable en suero durante un mes

refrigerada (2-8 ° C).

Linealidad: El ensayo Albumina es lineal hasta 6.0 g/dl.
Límite de detección: El límite de detección para el ensayo Albumina es de 1.5 g/dl.
Sustancias interferentes: No deben utilizarse muestras hemolizadas, ya que los
eritrocitos contienen hasta tres veces la cantidad presente en el plasma.
 Bilirrubina: Interferencia insignificante hasta 2 mg/dL de Bilirrubina no
conjugada.
 Lipemia: Interferencia insignificante hasta 50 mg/dL
 Sin interferencia de piruvato hasta 0.01 mg/dL (0.75 mmol/L).
 Sin interferencia de ALT hasta 2400 U/L.


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PROCEDIMIENTO AMILASA
1.-FINALIDAD DE USO
El ensayo Amilasa se utiliza para determinación cuantitativa de alfa amilasa en sueros
y orinas humanos.

La alfa amilasa se encuentra principalmente en el páncreas y las glándulas salivales.
Diversos procesos patológicos pueden ocasionar la liberación de mayor cantidad de
amilasa en la sangre, como así mismo, se han encontrado niveles inferiores o
menores.

Este proceso utiliza 2-cloro-4-nitrofenol-alfa-D-maltotriosida (CNPG3) como sustrato;
el cual reacciona directamente con la alfa amilasa y no necesita de enzimas auxiliares.
La liberación de 2-cloro-4-nitrofenol (CNF) del sustrato y el aumento resultante de la
absorbancia a 410/480 nm, es directamente proporcional a la actividad le la alfa
amilasa en la muestra.
Metodología: 2-cloro-4-nitrofenol-alfa-D-maltotriosida.

El reactivo de amilasa está listo para utilizarse. No precisa preparación.

caducidad si se almacenan a una temperatura entre 2 ° C y 8° C.

- Muestras adecuadas: Con esta técnica se pueden utilizar muestras de suero o plasma
libres de hemolisis y orina.
 Suero: utilice suero recogido en tubos plásticos con o sin barrera de gel.


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 Plasma: debe utilizarse plasma recogido en tubos de plástico. Los

anticoagulantes aceptables son heparina de litio y heparina sódica.
 Orina: utilice receptáculos de plástico con tapa hermética para recoger muestras
de orina.
-Almacenamiento de las muestras
 Suero y plasma: antes del análisis las muestras deben alcanzar la temperatura
ambiente.
 La amilasa es estable en suero durante una semana a temperatura ambiente
(15-25 ° C) Y durante un mes refrigerada (2-8 ° C).
 Orina: Un pH acido puede hacer la enzima menos estable.

Linealidad: El ensayo Amilasa es lineal hasta 2200 U/l en muestras de suero o plasma.
En muestras de orina es lineal hasta 1500 U/l.
Límite de detección: El límite de detección para el ensayo Amilasa es 10 U/l.


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PROCEDIMIENTO ASPARTATO AMINOTRANSFERASA (AST)
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de la actividad
de aspartato aminotransferasa en suero humano en analizadores BECKMAN COULTER
AU.

GOT (transaminasa glutamico-oxalacetica) es un nombre alternativo para la enzima
conocida internacionalmente como AST (aspartato aminotransferasa) por las normas
de la IFCC (federación internacional de química clínica y laboratorio clínico).
AST es uno de los grupos de enzimas que catalizan la interconversión de aminoácidos
y cetoácidos mediante la transmisión de grupos amino. Las transaminasas están muy
repartidas por los tejidos corporales, pero existen cantidades significativas en el
corazón y el hígado. Las cantidades menores también se encuentran en músculos
esqueléticos, riñones, páncreas, bazo, pulmones y cerebro. La lesión en estos tejidos
deriva en una liberación de la enzima AST a la circulación general.
Después de un infarto de miocardio, la AST en suero comienza a aumentar de 6 a 8
horas después de la aparición del dolor, alcanzando su máximo en 18 o 24 horas y
volviendo a los valores normales el cuarto o el quinto día. Los valores de suero pueden
aumentar hasta 15 o 20 veces más de los niveles normales y el incremento es
aproximadamente proporcional al grado de daño del tejido.

Este procedimiento AST utiliza una modificación de la metodología recomendada por el
IFCC. En este método, el aspartato aminotransferasa (AST) cataliza la transaminación
del aspartato y del alfa-oxoglutarato, formando l-glutamato y oxalacetato. El
oxalacetato se reduce a l-malato mediante malato deshidrogenasa, mientras que el
NADH se convierte simultáneamente en NAD+.
El descenso en absorbancia debido al consumo de NADH es de 340 nm y es
proporcional a la actividad AST de la muestra.


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Metodología: I.F.C.C sin piridoxal fosfato

Los reactivos de AST están listos para utilizarse. No precisa preparación.

Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8°C, los reactivos permanecerán estables
Los reactivos sin abrir son estables durante 30 dias al almacenarse en el

-Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero o plasma heparinizado,
libres de hemólisis.
-Almacenamiento de las muestras: El AST en suero es estable durante un día si se
almacena a 15-25 c, durante cuatro semanas si se almacena a 2-8 c y durante un año
o más a < -20 c.

Linealidad: El proceso AST es lineal de 3 a 1000u/l. Las muestras que superen el límite
mayor de linealidad deberían diluirse y repetirse. Las muestras pueden diluirse,
repetirse y multiplicarse mediante el factor de dilución automáticamente al utilizar
repetir automáticamente la serie.
Límite detección: El límite de detección para aspartato aminotransferasa es 3.0 U/L.
Sustancias interferentes: La concentración de AST en glóbulos rojos es
aproximadamente 15 veces mayor que en el suero normal, por ello debe evitarse la
hemolisis.
 Bilirrubina: sin interferencia significativa hasta 40 mg/dl
 Lipemia: sin interferencia significativa hasta 300 mg/dl


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PROCEDIMIENTO ALANINA AMINOTRANSFERASA (ALT)
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivos de sistema utilizados para determinar la medición cuantitativa de la
actividad alanina aminotransferasa en plasma y suero humanos en analizadores
Beckman Coulter AU.
2.-RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO

Las mediciones de alanina aminotransferasa (ALT) son útiles para el diagnóstico y el
tratamiento de ciertas enfermedades hepáticas (por ejemplo, hepatitis vírica y cirrosis)
y enfermedades cardiacas.
ALT es una enzima involucrada en el metabolismo aminoácido y, por ello, se encuentra
en muchos tejidos. Los niveles más altos de ALT se encuentran en los tejidos del
hígado y de los riñones. La destrucción de tejido lleva a la liberación de la enzima
intracelular en la circulación de la sangre. Ciertas enfermedades del hígado, como la
hepatitis, la mononucleosis y la cirrosis, presentan elevadísimas concentraciones de
ALT en el suero. Estos altos niveles de ALT no se observan normalmente en otros
procesos de enfermedades como, por ejemplo, en el infarto de miocardio, por lo que la
ALT se considera un indicador específico de enfermedades hepáticas.
3.-PRINCIPIOS BIOLÓGICOS DEL PROCEDIMIENTO

Este proceso para ALT utiliza una modificación de la metodología recomendada por la
IFCC (Federación Internacional de Química Clínica y Laboratorio Clínico). ALT
transfiere el grupo amino de alanina a α-oxoglutarato para formar piruvato y
glutamato. La reacción catalizada del piruvato con el NADH, catalizada por la lactato
deshidrogenasa (LD), produce lactato y NAD+. La pérdida de absorbencia atribuible al
consumo del NADH, cuantificada en 340 nm, es proporcional a la actividad de la ALT
de la muestra.
Metodología: I.F.C.C sin piridoxal fosfato.



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Los reactivos de ALT están listos para utilizarse. No precisa preparación.

 Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8°C, los reactivos permanecerán
estables hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta.
 Los reactivos sin abrir son estables durante 30 días al almacenarse en el

libres de hemólisis. Los niveles ligeros de hemólisis no afectarán significativamente los
resultados ya que los eritrocitos contienen hasta 3 y 5 veces más ALT que el suero. El
suero debería separarse de los glóbulos rojos lo antes posible después de obtener la
muestra.
-Almacenamiento de las muestras: ALT es estable en suero durante 3 días cuando se
almacena a 2 – 8°C o más de 3 días si se almacena congelado a <-20°C.
7.-CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DEL FUNCIONAMIENTO

Linealidad: El proceso ALT es lineal hasta 500 U/L. Las muestras que superen el límite
mayor de linealidad pueden diluirse, repetirse y multiplicarse mediante el factor de
dilución automáticamente.
Límite de detección. El límite de detección de la técnica es 3 U/L.
 Lipidemia: sin interferencia significativa hasta 300 mg/dL
 Piruvato: sin interferencia significativa hasta 1 mmol/L de piruvato


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PROCEDIMIENTO BILIRRUBINA TOTAL
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de bilirrubina
total en suero y plasma humanos.

La medición de los niveles de bilirrubina, un componente orgánico formado durante la
destrucción normal y anormal de glóbulos rojos, se usa en el diagnóstico y tratamiento
de enfermedades hepáticas, hemolíticas, hematológicas, incluidas la hepatitis y
bloqueo de la vesícula biliar.
3.-PRINCIPIOS BIOLOGICOS DEL FUNCIONAMIENTO

La bilirrubina total en suero está compuesta por bilirrubina directa (conjugada) e
indirecta (no conjugada). Este reactivo de bilirrubina total es una variación del
método clásico. Una sal de diazonio, 3,5-
(DPD), reacciona con la bilirrubina para formar azobilirrubina que se absorbe a
570/660 nm. La cafeína y un surfactante se usan como aceleradores de reacción.
La absorbencia a 570/660 nm es proporcional a la concentración de bilirrubina de la
muestra. Se realizó un blanco de suero separado para eliminar interferencias
endógenas de suero.

Los reactivos de Bilirrubina total están listos para utilizarse. No precisa preparación.

 Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8°C, los reactivos permanecerán estables
compartimento refrigerado de los analizadores.


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 Protéjase de la luz.

-Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero, plasma heparinizado o
EDTA. Las muestras deben protegerse de la luz
La exposición a la luz solar directa puede disminuir la bilirrubina en muestras en un
50% en una hora. Si se protege correctamente de la luz, la bilirrubina en suero es
estable durante 3 días al almacenarla a 2 – 8°C o durante tres meses cuando se
almacena a ≤ -20.

Linealidad: El procedimiento de bilirrubina total es lineal de 0 a 30 mg/dL. Las
muestras que excedan el límite superior de linealidad deben diluirse y repetirse.
 Hemólisis: sin interferencia significativa hasta 500 mg/dL de hemolizado.


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PROCEDIMIENTO BILIRRUBINA DIRECTA
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de bilirrubina
directa en suero y plasma humanos.

La bilirrubina es un producto final del catabolismo de la hemoglobina. Se conjuga con
ácido glucurónico en el hígado y la forma de conjugación se extrae de la circulación
por excreción en la bilis. La forma conjugada (directa) y no conjugada (indirecta) de
bilirrubina circulan ligadas de forma flexible a la albúmina.
La medición de bilirrubina directa es útil en la medición de trastornos hepáticos. El
incremento en el total de bilirrubina asociado a la ictericia obstructiva se debe
principalmente a la fracción directa. La bilirrubina directa e indirecta aumenta en el
suero con hepatitis. En un paciente recién nacido con ictericia hemolítica e ictericia
neonatal, el incremento total en la bilirrubina se debe principalmente a la fracción de
bilirrubina indirecta. Dicha ictericia podría estar causada por el Rh, ABO u otras
incompatibilidades de grupos sanguíneos, por la inmadurez hepática o por los defectos
hereditarios en la conjugación de la bilirrubina.

Este reactivo de bilirrubina directo utiliza una variación del método clásico. La
bilirrubina directa (conjugada) se acopla con una sal de diazonio de 3,5-dicloroanilina
(DPD) en un medio ácido para formar azobilirrubina.
La bilirrubina directa en suero es directamente proporcional al color desarrollado de
azobilirrubina que se mide bicromáticamente en 570/660 nm.

Los reactivos de Bilirrubina directa están listos para utilizarse. No precisa
preparación.
 Protéjase de la luz.


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libres de hemólisis. Proteger las muestras de la luz y analizar lo antes posible.
-Almacenamiento de las muestras: La exposición a la luz solar directa puede disminuir
la bilirrubina en muestras un 50% en una hora. Si se protege correctamente de la luz,
la bilirrubina en suero es estable hasta durante 3 días a 2 – 8°C y durante
aproximadamente tres meses si se almacena a ≤ -20°C.

Linealidad: El procedimiento de bilirrubina directa es lineal de 0 a 10 mg/dL. Las
muestras que excedan el límite superior de linealidad deben diluirse y repetirse


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PROCEDIMIENTO CALCIO
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de
concentraciones de calcio en suero, plasma y orina humanos.

La cuantificación del calcio se utiliza en el diagnóstico y tratamiento de la enfermedad
paratiroidea, diversas osteopatías, nefropatía crónica y tetania (contracciones o
espasmos musculares intermitentes).
Aunque más del 99% del calcio del cuerpo está en los huesos y en los dientes, lo más
importante clínicamente es el calcio presente en la sangre.
Los huesos sirven como reservorio para mantener una constancia relativa de calcio en
suero liberando calcio cuando es necesario para evitar la hipocalcemia y retener calcio
para prevenir altos niveles de calcio sérico. La conservación y liberación de calcio de
los huesos está controlada por la hormona paratiroidea.
Los iones de calcio (equivalentes al 50% del total de calcio), son importantes para la
transmisión de los impulsos nerviosos, como coadyuvante de varias reacciones
enzimáticas, en el mantenimiento de la contractilidad muscular normal y en la
coagulación.

Este procedimientode calcio se basa en la reacción de los iones de calcio (Ca2+) con reactivo Arsen
El magnesio no interfiere significativamente en la medición del calcio con Arsenazo III.
Con este método, la absorbencia del complejo Ca-Arsenazo III se cuantifica
bicromáticamente a 660/700 nm. El aumento de la absorbencia resultante de la
mezcla de la reacción es directamente proporcional a la concentración de calcio en la
muestra.

Los reactivos están listos para utilizarse. No precisa preparación.
 Los reactivos sin abrir (rutinarios) son estables durante 90 días al almacenarse en
el compartimento refrigerado del analizador.


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libres de hemólisis. El suero y el plasma deberían separarse de los glóbulos rojos lo
antes posible.
La orina debería recogerse en un periodo de 24 horas. Previo al análisis, acidificar la
muestra de orina a un pH < 2 con HCI 6 N. Las muestras con un pH de orina inferior
a 1,5 pueden originar una desviación negativa.
-Almacenamiento de las muestras: El calcio en suero es estable aproximadamente 22
días bajo refrigeración (2 – 8°C) y hasta un año congelado (≤ -20°C). El calcio
urinario es estable 5 semanas refrigerado (2 – 8°C) y 6 meses congelado (≤ -20°C).

Linealidad: El proceso de calcio es lineal de 4,0 a 18,0 mg/dL para mediciones de
suero y a 0,1 a 40,0 mg/dL para mediciones de orina. Las muestras que excedan el
límite superior de linealidad deben diluirse y repetirse.
Sustancias interferentes: Bilirrubina: sin interferencia significativa hasta 40 mg/dL de
bilirrubina; Hemólisis: sin interferencia significativa hasta 500 mg/dL de hemolizado;
Lipidemia: sin interferencia significativa hasta 1.000 mg/dl


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PROCEDIMIENTO COLESTEROL
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de
concentraciones de colesterol en suero humano en los analizadores Beckman Coulter
AU.

Las mediciones de colesterol se usan principalmente en el diagnóstico y el tratamiento
de trastornos relacionados con el colesterol en la sangre y con trastornos del
metabolismo de los lípidos y las lipoproteínas.
Los análisis de colesterol sérico total han sido útiles en el diagnóstico de
hiperlipoproteinemia, ateroesclerosis y enfermedades hepáticas y de tiroides.1 El
colesterol HDL y total, en conjunto con la medición de triglicéridos, proporciona
información valiosa para evitar una enfermedad cardiaca coronaria.

Los ésteres de colesterol en suero son hidrolizados por el colesterol esterasa (CHE). El
colesterol libre resultante se oxida con oxidasa de colesterol (CHO) y se transforma en
coleste-4-en-3-ona produciéndose simultáneamente peróxido de hidrógeno (H202) que
se combina oxidativamente con 4-aminoantipirina y fenol en presencia de peroxidasa
para dar lugar a un cromóforo. El colorante que se forma puede cuantificarse
espectrofotométricamente a 540/600 nm.

Los reactivos de colesterol toral están listos para utilizarse. No precisa preparación.

 Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8°C , los reactivos permanecerán

-Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero y EDTA o plasma
heparinizado, libres de hemólisis. Separe el suero de los glóbulos sanguíneos lo antes
posible. No se recomienda utilizar el plasma con anticoagulantes como el oxalato,
citrato o Cloruro.


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-Almacenamiento de las muestras: El colesterol total en suero es estable durante 7

días almacenado a 2 – 8°C y 3 meses almacenado a ≤ -20°C.

Linealidad: El procedimiento de colesterol es lineal de 25 a 700 mg/dL. Las muestras
que excedan el límite superior de linealidad deben diluirse y repetirse
 Ascorbato: sin interferencia significativa hasta 3 mg/dL de ascorbato


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PROCEDIMIENTO CREATININA
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de creatinina en
suero y orina humanos.

Las mediciones de creatinina se utilizan en el diagnóstico y tratamiento de trastornos
renales. Las mediciones de creatinina en suero demuestran la utilidad en la evaluación
de la función glomerular del riñón y en la monitorización de diálisis renal. Sin
embargo, la concentración de suero no es sensible al deterioro renal incipiente y
responde con mayor lentitud que el nitrógeno ureico sanguíneo (BUN) a la hemodiálisis
durante el tratamiento de la insuficiencia renal.
La creatinina sérica fluctúa en función de la edad, el peso corporal y el sexo del
individuo. Puede escasear en individuos de poca masa muscular, pacientes
caquécticos, amputados y personas de edad avanzada. Una concentración de
creatinina sérica que habitualmente se consideraría normal no descarta la presencia de
una insuficiencia renal.

Este procedimiento de creatinina es una modificación cinética del procedimiento de
Jaffe, en el que la creatinina reacciona con el ácido pícrico en un pH alcalino para
formar un compuesto amarillo anaranjado.
La velocidad del cambio de la absorbancia a 520/800 nm es proporcional a la
concentración de creatinina en la muestra.

Los reactivos de creatinina están listos para utilizarse. No precisa preparación.
compartimento refrigerado del analizador. Reactivo 1 es ligeramente sensible.
Almacenar en la oscuridad antes de colocarlo en el instrumento.


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-Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero o heparinizadas libres de
hemólisis y deben separarse de los glóbulos rojos lo antes posible. Las muestras de
orina deben recogerse en un contenedor limpio.
-Almacenamiento de las muestras: La creatinina en suero es estable durante 7 días a
2 – 8°C y por tiempo indefinido si se congela (≤ -20°C). La creatinina en la orina es
estable durante 6 días a 4 – 8°C.

Linealidad: El proceso de creatinina es lineal de 0,2 a 25,0 mg/dL para mediciones de
suero y de 1 a 300 mg/dL para mediciones de orina. Las muestras que excedan el
límite superior de linealidad deben diluirse y repetirse.
Bilirrubina: sin interferencia significativa hasta 20 mg/dL de bilirrubina
Hemólisis: sin interferencia significativa hasta 500 mg/dL de hemolizado
Lipidemia: sin interferencia significativa hasta 700 mg/dL
Proteína: interferencia inferior al 20% entre 3 y 12 g/dL de proteína


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PROCEDIMIENTO COLINESTERASA
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de colinesterasa
en suero y plasma humanos en los analizadores Beckman Coulter AU.

Las mediciones de colinesterasa en suero se han utilizado para evaluar la función del
hígado e investigar la sucesión de variantes de la enzima colinesterasa. También es
útil para predecir las vulnerabilidades para prolongar la apnea después de administrar
succinilcolina y para monitorizar la exposición excesiva a insecticidas
organofosforados.

La colinesterasa sirve de catalizador para la hidrólisis de butiriltiocolina a butirato y
tiocolina. La tiocolina reduce el hexacianoferrato amarillo (III) a hexacianoferrato
incoloro (II). La disminución de la absorbancia a 410 nm es directamente proporcional
a la actividad de la colinesterasa en la muestra.

-Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero, plasma heparinizado o
EDTA
-Almacenamiento de las muestras: La colinesterasa es estable en suero durante 7 días
almacenada a 2 – 8°C y durante 6 meses congelada (≤ -70°C).

El reactivo colinesterasa está listo para utilizarse. No precisa preparación.
6.-ALMACENAMIENTO DEL REACTIVO

 Los envases de reactivos sin abrir son estables durante 30 días al almacenarse en
el compartimento refrigerado de los analizadores Beckman Coulter AU.
 Proteger de la luz el Reactivo 1.

Linealidad: El proceso de colinesterasa es lineal de 1 a 15 kU/L. Las muestras que
superen el límite mayor de linealidad deberían diluirse y repetirse.


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Lipidemia: sin interferencia significativa hasta 1.000 mg/dL


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PROCEDIMIENTO CREATINQUINASA TOTAL
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de creatina
quinasa en suero y plasma humanos en los analizadores Beckman Coulter AU.

Las mediciones de creatina quinasa se utilizan en el diagnóstico y tratamiento de
infarto de miocardio y enfermedades musculares, como la distrofia muscular de
Duchenne progresiva.
La creatina quinasa (CK) es una enzima que se encuentra principalmente en los
músculos esqueléticos, músculos cardiacos y en el tejido cerebral. Los niveles elevados
de CK se asocian con el infarto de miocardio y con varios trastornos musculares. En el
infarto de miocardio, los mayores niveles de CK se dan de 24 a 36 horas después de la
aparición del dolor de pecho y, dependiendo de la extensión del daño, puede alcanzar
niveles 10 veces por encima de lo normal. En el síndrome de Reye, el incremento
puede multiplicarse por 70 debido a una encefalopatía grave.

Este procedimiento es una modificación del método de IFCC. La CK cataliza
reversiblemente la transferencia de un grupo fosfato entre el fosfato de creatina y el
difosfato de adenosina (ADP) para obtener creatina y trifosfato de adenosina (ATP), el
que sirve para producir 6-fosfato de glucosa y difosfato de adenosina (ADP) a partir de
la glucosa. La tasa de aumento de la absorbancia a 340/660 nm por causa de la
formación de NADPH, es directamente proporcional a la actividad de la CK de la
muestra.

Reactivo1: Está conformado por 2 reactivos (R1/1 y R1/2) que deben unirse
completamente. Para garantizarlo, verter una pequeña cantidad de R1/1 al frasco R1/2
y mezclar cuidadosamente. Luego transferir el contenido completo dentro del R1/1
restante. Mezclar por inversión suave e introducirlo al equipo.
Reactivo 2: Este reactivo está listo para su uso y puede colocarse directamente en el
instrumento. No precisa preparación.



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-Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero y plasma heparinizado libres
de hemólisis. Quite el suero de los glóbulos lo antes posible para minimizar la
hemólisis y la contaminación de los glóbulos rojos con adenilato cinasa. Las muestras
de plasma pueden producir ocasionalmente reacciones de velocidad imprevisible y
resultados erróneos demasiado bajos. No es recomendable utilizar plasma que
contenga EDTA, oxalato ni citrato.
-Almacenamiento de las muestras: Proteger las muestras de la luz para conseguir la
mayor estabilidad. La CK es estable en el suero durante 4 horas a 15 – 25°C, de 8 a
12 horas a 2 – 8°C o durante un mes a ≤ -20°C.

Linealidad: El proceso CK es lineal de 10 a 2.000 U/L. Las muestras que superen el
límite mayor de linealidad se diluyen automáticamente por el equipo.


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PROCEDIMIENTO CREATINQUINASA FRACCIÓN MIOCÁRDICA (CK MB)
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de la isoenzima
Creatínquinasa MB en suero y plasma humanos en los analizadores Beckman Coulter
AU.

Los valores de Creatínquinasa se utilizan en el diagnóstico y tratamiento de los infartos
de miocardio y de miopatías, como la distrofia muscular progresiva tipo Duchenne.
La creatina quinasa es una enzima dimérica compuesta por dos subunidades
asociadas: M y B, para formar las isoenzimas CK-MM, CK-MB y CK-BB. Después de un
infarto de miocardio, el nivel de CK-MM aumenta y alcanza su máximo entre 18-30
horas. El aumento es similar al de la actividad CK total. La CK-MB también aumenta
después de un infarto de miocardio; sin embargo, alcanza su máximo hasta 12 horas
ante que la CK-MM, convirtiéndolo en un indicador anticipado el infarto de miocardio.
El uso de la CK total y la CK-MB en el diagnóstico del infarto de miocardio es la
aplicación de medición de CK más importante de la química clínica.

Este procedimiento de CK es una modificación del método de IFCC. El reactivo R1
contiene un anticuerpo que se une a la subunidad M de CK en la muestra de suero,
inhibiendo de ese modo la actividad de la subunidad M. La subunidad B de la enzima
queda libre para actuar sobre el sustrato presente en el reactivo R2.
La tasa de aumento de la absorbancia, situada en 340/660 nm por causa de la
formación de NADPH, es directamente proporcional a la actividad de la CK-MB de la
muestra.

Reactivo1: Está conformado por 2 reactivos (R1/1 y R1/2) que deben unirse
completamente. Para garantizarlo, verter una pequeña cantidad de R1/1 al frasco R1/2
y mezclar cuidadosamente. Luego transferir el contenido completo dentro del R1/1
restante. Mezclar por inversión suave e introducirlo al equipo.
Reactivo 2: Este reactivo está listo para su uso y puede colocarse directamente en el
instrumento. No precisa preparación.


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Muestras adecuadas: plasma heparinizado o suero tubo amarillo con gel libre de
hemólisis.
Almacenamiento: Proteger las muestras de la luz para conseguir la mayor estabilidad.
La CK MB es estable en el suero durante 4 horas a 15 - 25°C, de 8 a 12 horas a 2 -
8°C o durante un mes a ≤ -20°C.

Linealidad: El proceso CK-MB es lineal de 10 a 2.000 U/L. Las muestras que superen el
Interferencias:
 Hemólisis: Se debe evitar el adenilato cinasa de los glóbulos rojos, porque puede
reaccionar con el reactivo y producir resultados falsos.


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PROCEDIMIENTO AMONIO
1.-FINALIDAD DE USO
El ensayo Amonio se utiliza para la determinación cuantitativa de las concentraciones
de amoniaco o amonio (NH3) en plasma humano.

El amoniaco, derivado del catabolismo de los aminoácidos y de la acción de las
bacterias intestinales sobre la proteína dietética, se convierte en urea en los
hepatocitos del hígado, pasando a ser no toxico. La concentración de amoniaco, se
mantiene baja en circunstancias normales. El exceso, puede tener un efecto toxico en
el sistema nervioso central, con alteraciones neurológicas. Diversos procesos
patológicos pueden ocasionar la liberación de mayor cantidad de amoniaco en la
sangre.

Para medir la concentración de amoniaco plasmático, se realiza un proceso enzimático
directo, donde la enzima glutamato deshidrogenasa (GLDH), cataliza la hidrolisis del
amonio, alfa cetoglutarato y nicotinamida adenina dinucleótido (NADH), para producir
glutamato, nicotinamida adenina dinucleótido reducido y agua. El reactivo contiene
LDH en exceso para reducir rápidamente el piruvato endógeno, de modo que no
interfiera con el sistema de análisis. El reactivo de amoniaco incorpora un proceso de
estabilización que hace que el reactivo seas estable en la fase liquida.
Metodología: glutamato deshidrogenasa.
4.- PREPARACIÓN DE REACTIVO:

El reactivo amonio está listo para utilizarse. No precisa preparación.
5.-ALMACENAMIENTO DE LOS REACTIVO

Los reactivos y el calibrador sin abrir, son estables hasta la fecha de caducidad si se
almacenan a una temperatura entre 2 °C y 8° C. La estabilidad de los reactivos es de
14 días si se almacenan destapados en el sistema.

-Muestras adecuadas: Con esta técnica solo se pueden utilizar muestras de
plasma.
 Se recomienda recoger el plasma humano en EDTA, en tubo plástico tapa lila.


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 De ser posible, el tubo de recogida debe colocarse inmediatamente en hielo,

centrifugar en frío en cuanto sea posible, luego separar el plasma y almacenar
en refrigerador hasta su análisis.
-Almacenamiento de las muestras:
 Antes del análisis las muestras deben alcanzar la temperatura ambiente.
 Las muestras de amoniaco son estables durante 3 horas entre 2 °C y 4° C.
También durante 24 horas a -20 °C.

Linealidad: El ensayo de amonio es lineal desde 10 a 600 μmol/L. Muestras con
concentraciones de amonio mayores a 600 μmol/L generan una alerta y se pueden
diluir con el protocolo de dilución automática o con el procedimiento de dilución
manual.
Límite de detección: El límite de detección para el ensayo Amonio es 10 umol/l o 17
ug/dl.
Sustancias interferentes No deben utilizarse muestras hemolizadas, ya que los
eritrocitos contienen hasta tres veces la cantidad presente en el plasma.
 Bilirrubina: Interferencia insignificante hasta 2 mg/dL de Bilirrubina no
conjugada.
 Lipemia: Interferencia insignificante hasta 50 mg/dL
 Sin interferencia de ALT hasta 2400 U/L.


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PROCEDIMIENTO FOSFATASA ALCALINA
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de fosfatasa
alcalina en plasma y suero humanos en los analizadores Beckman Coulter AU.
2.-RESUMEN Y EXPLICACION
Las mediciones de suero de fosfatasa alcalina (ALP) se utilizan para el diagnóstico de
trastornos hepatobiliares y enfermedades de los huesos asociadas con un incremento
de la actividad osteoblástica. Ciertas condiciones como la enfermedad de Hodgkin,
insuficiencia cardiaca congestiva y colitis ulcerosa provocarán un aumento de los
niveles de fosfatasa alcalina. Los aumentos no patológicos pueden observarse en el
tercer trimestre de embarazo.

Este procedimiento de ALP ha sido formulado por recomendación de AACC (Asociación
Americana de Química Clínica) e IFCC (Federación Internacional de Química Clínica y
Laboratorio Clínico).
La actividad de la fosfatasa alcalina se determina midiendo la velocidad de
transformación del p-nitrofenilfosfato (p-NFF) en la presencia de 2-amio-2-metil-1-
propanol (AMP) con pH 10,4. La velocidad de transformación en la absorbancia como
consecuencia de la formación de p-NF se cuantifica bicromáticamente a 410/480 nm y
es directamente proporcional a la actividad de la fosfatasa alcalina en la muestra.
Metodología: I.F.C.C. / p-nitrofenil fosfato.

El reactivo de fosfatasa alcalina está listo para utilizarse. No precisa preparación.

compartimento refrigerado del analizador. Sustituya el vial del reactivo una vez
que los valores de control de calidad hayan variado más de un 10%.


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libres de hemólisis. El suero debería separarse de las células transcurridas dos horas a
partir de la obtención de la muestra. Evite el uso del plasma con EDTA u oxalato.
-Almacenamiento de las muestras: La fosfatasa alcalina en suero es estable durante 4
días al almacenarse refrigerada (2 – 8°C). Debe almacenarse congelada (-20°C)
después de este tiempo.

Linealidad: El proceso ALP es lineal hasta 1.500 U/L. Las muestras que superen el
límite mayor de linealidad deberían diluirse y repetirse.
Límite de detección: El límite de detección de la técnica es 5 U/L
Sustancias interferentes Los resultados de laboratorio muestran que las siguientes
sustancias interfieren con la medición de la fosfatasa alcalina: citrato, oxalato,
fluoruro, EDTA, glicina, monoetanolamina y altas concentraciones de fosfato y cloruro.


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PROCEDIMIENTO GAMMA GLUTAMIL TRANSPEPTIDASA
1.-FINALIDAD DE USO
El ensayo Gamma glutamil transpeptidasa (GGT) se utiliza para la determinación
cuantitativa de GGT en suero humano.

Las mediciones de gamma glutamil transpeptidasa se utilizan en el diagnóstico y
tratamiento de enfermedades hepáticas como la cirrosis alcohólica y tumores de
hígado primarios y secundarios.
La gamma glutamil transpeptidasa (GGT), también denominada GGTP, se encuentra
en todos los tipos de enfermedades hepáticas. Es más sensible que la fosfatasa
alcalina, las transaminasas y la leucina aminopeptidasa (LAP) para detectar ictericia
obstructiva, colangitis y colecistitis. Los niveles de GGT aumentan prematuramente en
enfermedades hepáticas. Se observan aumentos moderados en la hepatitis infecciosa.
Sin embargo, los niveles elevados de GGT también se han observado en el alcoholismo
crónico, la diabetes y ciertos trastornos neurológicos.

La
GGT cataliza la transferencia del grupo gamma-glutamílico desde el sustrato, gamma-
glutamil-3-carboxilo-4-nitroanilida a la glicilglicina, produciendo 5-amino-2-
nitrobenzoato. El cambio de absorbancia a 410/480 nm, debido a la formación de 5-
amino-2-nitrobenzoato, es directamente proporcional a la actividad de la GGT de la
muestra.

Los reactivos de GGT están listos para utilizarse. No precisa preparación.


-Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero libres de hemólisis. Si se
utiliza el plasma, el anticoagulante recomendado es EDTA. El plasma heparinizado se


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vuelve turbio en la reacción de la mezcla; citrato, oxalato y fluoruro bajan la actividad

de un 10% a un 15%.
Almacenamiento de las muestras:
La GGT en suero es estable durante 1 mes a 2 – 8°C y 1 año a ≤ -20°C.

Linealidad: El proceso de GGT es lineal de 3 a 1.200 U/L. Las muestras que superen el
Interferencias: Se ha descubierto que algunos medicamentos antiepilépticos (fenitoína,
barbitúricos) pueden provocar valores falsamente elevados de GGT. Grandes ingestas
de alcohol justo antes de la recogida de la muestra pueden elevar erróneamente la
GGT en suero.
 Hemólisis: Sin interferencia significativa hasta 350 mg/dL de hemolizado
 Lipemia: sin interferencia significativa hasta 1.000 mg/dL


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PROCEDIMIENTO GLUCOSA
1.-FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de glucosa en
suero, plasma, orina y fluidos cerebroespinales humanos en los analizadores Beckman
Coulter AU.
2.-RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO

Los niveles de glucosa en suero pueden ser anormalmente altos (hiperglucemia) o
anormalmente bajos (hipoglucemia).
Las mediciones de glucosa se usan en el diagnóstico y tratamiento de trastornos del
metabolismo de los carbohidratos incluyendo la diabetes mellitus, hipoglucemia
neonatal e hipoglucemia idiopática, y del carcinoma de islotes pancreáticos.
La glucosa no está presente en la orina de pacientes normales.
Las mediciones de la glucosa en LCR ayudan a distinguir la meningitis bacteriana de la
viral ya que el valor de la glucosa es anormalmente bajo en la meningitis bacteriana y
en la meningitis tuberculosa (inferior al 40% a 45% de glucosa en suero analizado
simultáneamente), y es normal en la enfermedad viral.
3.-PRINCIPIOS BIOLÓGICOS DEL PROCEDIMIENTO

En este procedimiento de Beckman Coulter, la glucosa se fosforila con hexocinasa (HK)
en presencia de trifosfato de adenosina (ATP) e iones de magnesio para producir
glucosa-6-fosfato (G-6-P) y difosfato de adenosina (ADP). Tras múltiples reacciones
químicas, se produce un aumento de la absorbancia a 340/380 nm que es proporcional
a la cantidad de glucosa contenida en la muestra.
Metodología: hexocinasa G-6-PDH.

Los reactivos de glucosa están listos para utilizarse. No precisa preparación.

 INDICIOS DE DETERIORO: Los signos visibles de crecimiento microbiano,
turbidez, precipitado o cualquier cambio en el color del reactivo pueden indicar
degradación y justifican la interrupción del uso.


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Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero o plasma (EDTA, heparina o
fluoruro sódico) en ayunas, libres de hemólisis. Si la muestra no fue tomada con
fluoruro-EDTA (tubo gris), separar los glóbulos rojos rápidamente para minimizar la
pérdida de glucosa a través de la glucólisis.
Se recomienda recoger muestras de orina frescas.
Almacenamiento de las muestras: Las muestras de plasma conservado con fluoruro
son estables durante 24 horas a 15 – 25°C. Las muestras de orina deben mantenerse
a 2 – 8°C y deben ser analizadas lo antes posible.
7.-CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DEL FUNCIONAMIENTO

Linealidad: El proceso es lineal de 10 a 800 mg/dL Las muestras que excedan el límite
superior de linealidad deben diluirse y repetirse.


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PROCEDIMIENTO FOSFORO INORGANICO
1. FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de fósforo
inorgánico en suero y orina humanos.

Las mediciones de fósforo inorgánico se utilizan en el diagnóstico y el tratamiento de
varios trastornos incluyendo la glándula paratiroidea, las enfermedades de los riñones
y el desequilibrio de vitamina D.
La metodología usada ofrece la ventaja de trabajar en un medio levemente ácido,
permitiendo así una mayor especificidad al trabajar con mezclas de fosfatos y ésteres
de fosfato. La absorbancia de la reacción se mide a en 340 nm y no en la previamente
recomendada de 650 a 750 nm. lo que aumenta la sensibilidad del método.

Este método de fósforo inorgánico se basa en que el fosfato inorgánico reacciona con
el molibdato para formar un compuesto eterpoliácido. El empleo de un tensioactivo
hace innecesaria la preparación de un filtrado aproteínico. La absorbencia de 340/380
nm es directamente proporcional al nivel de fósforo inorgánico de la muestra.
4. PREPARACION DEL REACTIVO

Los reactivos están listos para utilizarse. No precisa preparación.
5. ALMACENAMIENTO DE REACTIVOS
1. Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8°C, los reactivos sin abrir permanecerán
2. Los reactivos sin abrir son estables durante 30 días al almacenarse en el
6. RECOGIDA Y MANEJO DE LAS MUESTRAS

Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero libres de hemólisis. Separe el
suero del coágulo lo antes posible para minimizar la hemólisis.
Se recomienda la recogida de las muestras de orina en 24 horas. Las muestras de
orina deben prediluirse manualmente 1:10 con agua antes del análisis en el AU600.
NOTA: existe una variación diurna en la excreción de fosfato en la orina, con el punto
máximo durante la tarde.


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EDTA, fluoruro, oxalato o citrato no deben utilizarse cuando se mide fósforo

inorgánico.
Las muestras de suero son estables durante 8 horas almacenadas a temperatura
ambiente (15 – 25°C) o más de una semana almacenadas a 2 – 8°C.6
La orina puede contener grandes cantidades de fosfatos orgánicos, que pueden
fosfato de la orina es estable durante más de 6 meses.

Linealidad: El proceso de fósforo inorgánico es lineal de 1,0 a 20,0 mg/dL para
mediciones de suero y de 10 a 200 mg/dL para mediciones de orina (prediluida). Las
muestras que excedan el límite superior de linealidad deben diluirse y repetirse.
Hemólisis*: interferencia no significativa inferior al 10% hasta 350 mg/dL de
hemolizado
Lipidemia: interferencia no significativa inferior al 10% hasta 900 mg/dL


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PROCEDIMIENTO LDH
1. FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de actividad de
lactato deshidrogenasa en suero humano

Los niveles altos de lactato deshidrogenasa (LD) en suero son provocados por un
infarto de miocardio, enfermedades hepáticas, anemias perniciosas y megaloblásticas,
embolias pulmonares, tumores y distrofias musculares.1 Un análisis combinado de
isoenzimas LD y CK (creatina quinasa) proporciona un diagnóstico definitivo de infarto
de miocardio grave.
3. PRINCIPIOS BIOLÓGICOS DEL FUNCIONAMIENTO

El procedimiento de LDH utiliza una modificación del método de Wacker y col., que
utiliza la reacción del lactato al piruvato. El lactato y el NAD se convierten en piruvato
y NADH catalizado por LD. NADH absorbe fuertemente la luz a 340 nm, mientras que
el NAD no. La velocidad del cambio de la absorbencia a 340 nm es proporcional a la
actividad de LDH en la muestra.

Los reactivos de LDH están listos para utilizarse. No precisa preparación.
 Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8°C, los reactivos sin abrir
permanecerán estables hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta.
compartimento refrigerado del analizador AU5800.

libres de hemólisis. Quitar el suero del coágulo lo antes posible para minimizar la
hemólisis.5 Los anticoagulantes de citrato y oxalato interfieren con el ensayo
-Almacenamiento de las muestras: Se recomienda no refrigerar o congelar las
muestras y realizar los análisis lo antes posible manteniendo las muestras a
temperatura ambiente (15 – 25°C).


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Linealidad: El proceso de LD es lineal de 25 a 1.200 U/L. Las muestras que superen el
límite mayor de linealidad deberían diluirse y repetirse
Hemólisis: una hemólisis mínima causa aumentos significativos en el LD debido a los
altos niveles de esta enzima en los glóbulos rojos.


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PROCEDIMIENTO LACTATO
1. FINALIDAD DE USO
El ensayo Lactato se utiliza para la determinación cuantitativa de lactato en plasma y
líquidos cefalorraquídeos (LCR) en humanos.

El lactato es el producto final obtenido de la glucólisis anaerobia. Esta sustancia se
obtiene predominantemente del musculo esquelético blanco, del cerebro, de la piel, de
la medula renal y de los eritrocitos. La deshidrogenasa láctica cataliza la reducción de
piruvato en lactato. Diversos procesos patológicos pueden ocasionar la mayor cantidad
de lactato en la sangre y LCR.
3. PRINCIPIOS BIOLOGICOS DEL PROCEDIMIENTO

El lactato se oxida y se convierte en piruvato y peróxido de hidrogeno mediante la
lactato oxidasa (LOD). La reacción de peroxidasa (POD), el peróxido de hidrogeno, la
4-aminoantipirina y un donante de hidrogeno (TOOS), generan un producto coloreado,
que se mide mediante espectrometría y cuya intensidad es proporcional a la
concentración de lactato presente en la muestra a analizar.
Metodología: lactato oxidasa, peroxidasa.

R1: Disuelva el contenido de un vial de liofilizado R1 con el contenido de un vial de
amortiguador R1. Invierta el contenido con cuidado para mezclarlo y colóquelo en el
instrumento.
5. ALMACENAMIENTO DE LOS REACTIVOS

caducidad si se almacenan entre 2 y 8° C.

Muestras adecuadas:
Plasma: debe utilizarse plasma recogido en tubos de plástico con anticoagulante de
oxalato potásico-fluoruro sódico (tubo gris).
Líquido cefalorraquídeo: la muestra debe recolectar en tubo plástico sin aditivos.
Almacenamiento de las muestras
Plasma con fluoruro, separado de los glóbulos rojos: estables hasta 14 días si son
almacenados a 2-8°C.


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LCR: las muestras pueden conservarse durante un periodo máximo de 24 horas a una
temperatura de 2-8° C.
7. CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DEL FUNCIONAMIENTO

Linealidad: El ensayo Lactato es lineal de 2 hasta 90 mg/dl. Las muestras que
presentan concentraciones en plasma superiores a 90 mg/dl deben repetirse diluidas
según el protocolo de dilución automático o en forma manual.
Sustancias interferentes
 Bilirrubina: Interferencia inferior al 10 % o 2,2 mg/dL con hasta 8 mg/dL de
bilirrubina
 Hemólisis: Interferencia inferior al 10 % hasta 500 mg/dL de hemolizado
 Lipidemia: Interferencia inferior al 10 % hasta 1000 mg/dL


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PROCEDIMIENTO LIPASA
1. FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de lipasa en
suero humano.

Las mediciones de lipasa en suero se utilizan para el diagnóstico y tratamiento de
pancreatitis aguda o daños pancreáticos.

El procedimiento de lipasa se basa en un método colorimétrico. La lipasa pancreática
hidroliza los ésteres de la larga cadena de ácidos grasos de sus triglicéridos. La
actividad enzimática requiere la presencia de colipasa. El 1,2-diglicérido se hidroliza en
2-monoglicérido y ácido graso. A continuación, se mide el 2-monoglicérido mediante
reacciones enzimáticas combinadas catalizadas por lipasa monoglicérido (MGLP),
glicerol-cinasa (GK), oxidasa de glicerolfosfato (GPO) y peroxidasa (POD).

 Reactivo operante R1: Añada lentamente el contenido del amortiguador R1 en la
botella que contiene liofilizado R1. Mezcle hasta que el liofilizado esté
completamente disuelto. Vuelva a introducir la solución operante en la botella
del amortiguador R1.
 R2: Listo para usar. No precisa preparación.
 Calibrador de lipasa: añada 3,0 mL de agua desionizada al calibrador de lipasa,
mezcle hasta que esté completamente disuelto.
 Si no se abren, los reactivos permanecerán estables hasta su fecha de
caducidad cuando se almacenan entre 2 y 8°C.
 El calibrador reconstituido de lipasa es estable durante 60 días almacenado a 2
– 8°C si no está contaminado.
6.- RECOGIDA Y MANEJO DE LAS MUESTRAS

-Muestras adecuadas: Se recomiendan muestras de suero libres de hemólisis.
También puede utilizarse plasma heparinizado.


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-Almacenamiento de las muestras: La actividad de lipasa es estable durante varias

semanas almacenada a 2 – 8°C o por tiempo indefinido si se congela (≤ -20°C).

Linealidad: El procedimiento de lipasa es lineal de 3 a 600 U/L. Las muestras que
excedan el límite superior de linealidad deben diluirse y repetirse


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PROCEDIMIENTO MAGNESIO
1. FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de magnesio en
suero, plasma y orina humanos.

Las cuantificaciones del magnesio se utilizan para diagnosticar y tratar la
hipomagnesemia (anormalmente bajo) y la hipermagnesemia (anormalmente alto).
El magnesio es el principal catión intracelular después del potasio por su
concentración. Se sabe poco acerca de los factores que regulan los niveles del
magnesio en plasma. Se cree que la glándula paratiroidea puede estar involucrada. Los
iones del magnesio sirven como activadores de un número de sistemas de enzimas
importantes involucrados en la transferencia y la hidrólisis de grupos de fosfato, como
la hexocinasa, la fosfatasa alcalina, la fosfatasa de ácido prostático y la creatina
quinasa.
Los niveles bajos de magnesio en suero se han observado en caso de diabetes,
alcoholismo, diuresis, hipertiroidismo, hipoparatiroidismo, mala absorción,
hiperalimentación, infarto de miocardio, fallo cardiaco congestivo y cirrosis. Se han
detectado altos niveles de magnesio en suero en casos de insuficiencia renal,
deshidratación, acidosis diabética grave y melasma suprarrenal.

Este procedimiento de magnesio utiliza un método directo en el que el magnesio forma
un compuesto de color con xilidil azul en una solución fuertemente básica, en la que se
elimina la interferencia del calcio. El color generado se mide bicromáticamente en
520/800 nm y es proporcional a la concentración de magnesio.

El reactivo de magnesio está listo para utilizarse. No precisa preparación.
 Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8°C, los reactivos sin abrir permanecerán


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libres de hemólisis. Debe evitarse el uso de anticoagulantes que unen el magnesio,
como EDTA, oxalato y citrato. Se recomienda recoger muestras de orina nuevas y
aleatorias
-Almacenamiento de las muestras: El magnesio en suero es estable durante una
semana entre 2 y 8°C. La orina debe acidificarse hasta un pH 1 con HCI concentrado.
Si se forma un precipitado, remueva, mezcle, acidifique y caliéntelo a 60°C para
redisolver.
7. CARACTERISTICAS ESPECIFICAS DEL FUNCIONAMIENTO

Linealidad: El proceso de magnesio es lineal de 0,5 a 8,0 mg/dL para mediciones de
suero y hasta 10 mg/dL para mediciones de orina. Las muestras que excedan el límite
superior de linealidad deben diluirse y repetirse.
Calcio: sin interferencia significativa hasta 30 mg/dL de calcio


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PROCEDIMIENTO NITROGENO UREICO
1. FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de nitrógeno
ureico en suero y orina humanos en los analizadores Beckman Coulter AU.
2. RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO

Las mediciones de nitrógeno ureico se utilizan en el diagnóstico y tratamiento de
algunos trastornos renales y metabólicos. El nitrógeno ureico constituye
aproximadamente el 75% de la fracción total de nitrógeno no proteico (NNP) en
sangre. Se sintetiza en el hígado a partir del amoníaco producido como resultado de la
desaminación de proteínas. El filtrado de urea de la sangre a la orina a través de los
glomérulos renales es el método principal para eliminar el excedente de nitrógeno del
cuerpo.
3. PRINCIPIOS BIOLÓGICOS DEL PROCEDIMIENTO

El procedimiento para la determinación del nitrógeno ureico se basa en una adaptación
de un método enzimático en el cual la urea se hidroliza enzimáticamente gracias a la
ureasa para dar lugar a amoníaco y dióxido de carbono. El amoníaco y el α-
oxoglutarato se convierten en glutamato en una reacción catalizada por la enzima L-
glutamato deshidrogenasa (GLDH). Al mismo tiempo, un equivalente molar de NADH
reducido se oxida. Se oxidan dos moléculas de NADH por cada molécula de urea que
se hidroliza. La velocidad de transformación en absorbencia a 340 nm, debido a la
desaparición de NADH, es directamente proporcional a la concentración de BUN en la
muestra.
Metodología: Método enzimático Uricasa / peroxidasa / 4-aminoantipirina / TBHB.

Los reactivos de nitrógeno ureico están listos para utilizarse. No precisa preparación.

 Si no se abren y se almacenan entre 2 y 8°C, los reactivos sin abrir
permanecerán estables hasta la fecha de caducidad impresa en la etiqueta.
compartimento refrigerado del analizador AU680.


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Muestras adecuadas
Suero. Si es necesario utilizar plasma, se recomienda usar anticoagulantes sin iones
de amonio como EDTA y heparina de litio o sodio.
Almacenamiento de las muestras
Si se retrasa el análisis, la muestra debe congelarse o mantenerse refrigerada. Estable
varios días a 2 – 8°C y entre 2 y 3 meses si se congela a ≤ -20°C. 1
Las muestras de orina deben mantenerse a 2 – 8°C hasta que se realice el análisis.
Las muestras de orina se pueden conservar manteniendo el pH en menos de 4.6.
7. CARACTERÍSTICAS ESPECÍFICAS DEL FUNCIONAMIENTO

Linealidad: El proceso de nitrógeno ureico es lineal de 2 a 130 mg/dL para mediciones
de suero y de 20 a 1.300 mg/dL para mediciones de orina. Las muestras que excedan
el límite superior de linealidad deben diluirse y repetirse.


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PROCEDIMIENTO PROTEINAS TOTALES
1. FINALIDAD DE USO
Reactivo de sistema utilizado para determinar la medición cuantitativa de proteína
total en suero humano en los analizadores Beckman Coulter AU.
2. RESUMEN Y EXPLICACIÓN DEL ENSAYO

Las cuantificaciones de la proteína total permiten diagnosticar y tratar diversas
enfermedades que involucran el hígado, los riñones o la médula, así como otros
trastornos metabólicos y nutricionales.
La seroproteína total es la suma de todas las proteínas en circulación y constituye uno
de los componentes principales de la sangre. Normalmente resulta de utilidad para
interpretar la significación de la concentración proteínica total y disponer de un mayor
conocimiento específico de fracciones individuales como las albúminas y globulinas.
3. PRINCIPIOS BIOLÓGICOS DEL PROCEDIMIENTO

Este procedimiento de proteína total se basa en que los iones cúpricos en una solución
alcalina reaccionan con proteínas y polipéptidos que contienen al menos dos enlaces
peptídicos para generar un compuesto de color violáceo. La absorbancia de este
compuesto a 540/660 nm es directamente proporcional a la concentración proteínica
de la muestra.
MÉTODO: Biuret

Los reactivos de proteínas totales están listos para uso. No precisa preparación.

Si no se abren y se almacenan entre 2 y 25°C, los reactivos sin abrir permanecerán
Los reactivos sin abrir son estables durante 30 días al almacenarse en el

La proteína total es estable en suero durante 24 hrs a temperatura ambiente (15 –
25°C) y durante un mes refrigerada (2 – 8°C).


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Linealidad: El procedimiento de proteína total es lineal de 3 a 12 g/dL para mediciones
de suero. Las muestras que excedan el límite superior de linealidad deben diluirse y
repetirse. Las muestras pueden diluirse, repetirse y multiplicarse mediante el factor de
dilución automáticamente.
Sustancias interferentes: Se recomiendan muestras de suero libres de hemólisis. No se
recomienda el plasma ya que se añadirá fibrinógeno a la proteína medida. Si se utiliza
el plasma, el anticoagulante recomendado es heparina.


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PROCEDIMIENTO PROCALCITONINA
1. FINALIDAD DE USO
El ensayo de procalcitonina se utiliza para la determinación cuantitativa de
procalcitonina en muestras de suero o plasma con EDTA o heparina de litio.

La procalcitonina es un aminoácido proteico, la prohormona de calcitonina.
Considerada hormonalmente activa la calcitonina es producida exclusivamente en las
células C de la glándula tiroides después de un proceso proteolítico intracelular
especifico de la prohormona procalcitonina.
La procalcitonina se ubica uniformemente y se expresa en múltiples tejidos en todo el
cuerpo en respuesta a la sepsis. En condiciones saludables, los niveles de PCT en la
circulación son muy bajos (<0.05 ng/ml).
Los niveles circulantes elevados de PCT son importantes indicadores de respuesta a
infecciones microbianas y una herramienta poderosa en la detección temprana de
sepsis.
3. PRINCIPIOS BIOLOGICOS DEL PROCEDIMIENTO

La determinación de la procalcitonina está basada en una prueba inmunoturbidimetrica
de un látex mejorado. El grado de turbidez causado por la aglutinación puede ser
medido ópticamente y es proporcional a la cantidad de PCT en la muestra. El equipo
calcula la concentración de PCT de la muestra por interpolación de la curva de
calibración de seis puntos.
MÉTODO: látex inmunoturbidimetrico

Los reactivos de PCT están listos para uso. No precisa preparación.

Los reactivos son estables entre 2-8 c hasta la fecha de expiración.
No mezclar los reactivos de diferentes lotes y no congelar.

La determinación de procalcitonina esta formulada para usar con suero o plasma
(EDTA o heparina de litio).


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Los valores de PCT medidos en sangre arterial son cerca del 4% más alto que de
sangre venosa. La PCT aumenta cerca de 3 horas después de una infección bacteriana.
Se alcanzan máximos valores después de 6-12 horas con una vida media de 25 a 30
horas.
Las muestras deben ser mantenidas a 4ºC. Mantenidas a -20ºC son estables por 6
meses.
Las muestras turbias deben aclararse por centrifugación.

Linealidad:
El proceso es lineal de 0,15-50 ng/ml. Valores bajo 0,15 ng/ml, deben informarse
como < 0,15 ng/ml. Las muestras que superen el límite mayor de linealidad se diluyen
automáticamente por el equipo.
 Bilirrubina: sin interferencia significativa hasta 40 mg/dl
 Hemoglobina: sin interferencia significativa hasta 400 mg/dl
 Triglicéridos: sin interferencia significativa hasta 1000 mg/dl


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16.2 PROCEDIMIENTOS TÉCNICAS NIVELES PLASMÁTICOS DE DROGAS
PROCEDIMIENTO CARBAMAZEPINA
Resumen y explicación del análisis

La carbamazepina es un anticonvulsivo utilizado principalmente en el tratamiento de la
neuralgia del trigémino, todas las formas de epilepsia parcial, las convulsiones
tónicoclónicas generalizadas y las convulsiones parciales simples y complejas.2-4 Para
suprimir las convulsiones es fundamental conseguir la concentración sérica eficaz de
carbamazepina. No obstante, las concentraciones séricas de carbamazepina sólo
muestran una relación moderada con la dosis,5,6 debido a las diferencias individuales
en absorción, metabolismo y aclaramiento. Además, la administración concomitante de
otros fármacos antiepilépticos puede aumentar considerablemente las concentraciones
séricas de carbamazepina.
La toxicidad de la carbamazepina asociada a tratamientos puede o no estar
relacionada con la dosis. Sin embargo, los síntomas relacionados con el sistema
nervioso central, tales como vértigo, mareo y diplopía, se relacionan con la dosis en
los tratamientos crónicos. Combinada con otra información clínica, la determinación de
las concentraciones de carbamazepina ofrece al médico un medio eficaz para ajustar la
dosificación y obtener el efecto terapéutico óptimo al tiempo que se evitan las
concentraciones subterapéuticas y tóxicas del fármaco.
El análisis de Carbamazepina es por método enzimoinmunoanálisis.
Este análisis se basa en la enzima bacteriana -galactosidasa, que se ha preparado
genéticamente dividiéndola en dos fragmentos inactivos. Estos fragmentos se vuelven
a asociar espontáneamente para formar una enzima totalmente activa que, en el
formato del análisis, descompone un sustrato y genera un cambio de color que puede
medirse mediante espectrofotometría.
En el análisis, el analito de la muestra compite con el analito conjugado con un
fragmento inactivo de -galactosidasa por los lugares de unión de los anticuerpos. Si la
muestra contiene analito, éste se fija al anticuerpo y deja libres los fragmentos
enzimáticos inactivos, que forman enzimas activas. Si la muestra no contiene analito,
el anticuerpo se fija al analito conjugado en el fragmento inactivo e inhibe la
recombinación de los fragmentos de -galactosidasa inactivos, impidiendo la formación
de una enzima activa. La cantidad de enzima activa formada y el cambio de
absorbencia resultante son directamente proporcionales a la cantidad de droga que
contenga la muestra.


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Preparación y almacenamiento de los reactivos

Extraiga el kit del almacenamiento refrigerado inmediatamente antes de preparar las
soluciones.
Prepare las soluciones en el orden siguiente para reducir el riesgo de una posible
contaminación.
Solución de donante enzimático R2: conecte el frasco 2a (reactivo de DE) al frasco

2 (tampón de reconstitución de DE) utilizando uno de los adaptadores incluidos.
Mezcle los líquidos mediante una suave inversión y asegúrese de que todo el material
liofilizado del frasco 2a pasa al frasco 2. Evite la formación de espuma. Separe el
frasco 2a y el adaptador del frasco 2 y deséchelos. Tape el frasco 2 y déjelo reposar
unos 5 minutos a entre 15 y 25°C. Mezcle de nuevo. Anote la fecha de la
reconstitución en la etiqueta del frasco. Coloque el frasco directamente en el
compartimiento de reactivos del analizador o en el almacenamiento refrigerado y
déjelo reposar 30 minutos antes de utilizarlo.
Solución de aceptor enzimático R1: conecte el frasco 1a (reactivo de AE) al frasco

1 (tampón de reconstitución de AE) utilizando uno de los adaptadores incluidos. Mezcle
los líquidos mediante una suave inversión y asegúrese de que todo el material
NOTA 1: los componentes suministrados en este kit están concebidos para utilizarse
como una unidad integral. No mezcle componentes de lotes diferentes.
NOTA 2: para evitar la contaminación cruzada de los reactivos, no intercambie los
tapones de los frascos de reactivo. La solución R2 (donante enzimático) debe tener un
color amarillo naranja. Un color rojo o rojo púrpura indica que el reactivo está
contaminado y debe desecharse.
NOTA 3: antes de realizar el análisis, las soluciones R1 y R2 deben estar a la
temperatura de almacenamiento del compartimiento de reactivos del analizador. Para
obtener más información, consulte la hoja de aplicaciones específica del analizador.


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NOTA 4: para garantizar la estabilidad de la solución de AE reconstituido, evite la

exposición continuada y prolongada a luz brillante.
Almacene los reactivos a entre 2 y 8°C. NO LOS CONGELE. Para determinar la
estabilidad de los componentes sin abrir, consulte la fecha de caducidad en las
etiquetas de la caja o del frasco.
Solución R1: 60 días refrigerada en el analizador o a entre 2 y 8°C.
Recogida y manipulación de muestras

El análisis CEDIA Carbamazepina II requiere muestras de suero o plasma (heparina de
sodio o litio; ácido edético [EDTA] con sodio). Algunos tubos de separación de gel
pueden no ser adecuados para el uso con ensayos de farmacovigilancia; consulte la
información suministrada por el fabricante del tubo. Las muestras pueden almacenarse
a entre 2 y 8°C durante una semana, o a -20°C durante cuatro semanas. Evite la
congelación y descongelación repetida de las muestras. Centrifugue las muestras que
contengan precipitado antes de realizar el análisis. La uniformidad en la sincronización
de la recogida de muestras tras la administración de la última dosis de fármaco
mejorará la seguridad y la eficacia del anticonvulsivo.
Limitaciones
El rendimiento del análisis CEDIA Carbamazepina II sólo se ha determinado con suero
y plasma humanos, y no se ha verificado con otros líquidos corporales.
La incidencia de pacientes que tienen anticuerpos anti- -galactosidasa de E. coli es
bajísima. No obstante, con algunas muestras que contengan dichos anticuerpos
pueden obtenerse resultados artificialmente altos que no se ajusten al perfil clínico.


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PROCEDIMIENTO FENOBARBITAL

El fenobarbital se ha recetado frecuentemente para el tratamiento de la epilepsia,
sobre todo para evitar las crisis motrices o sensoriales focales y las del gran mal. Tras
dosis orales de entre 2 y 3 mg/kg, el fenobarbital se absorbe casi completamente y
alcanza las concentraciones máximas entre las 12 y las 18 horas. Aproximadamente
entre un 40 y un 50% del fenobarbital en circulación está unido a proteínas
plasmáticas con constantes de asociación relativamente bajas. La principal vía
metabólica del fenobarbital es la hidroxilación del anillo fenilo a p-hidroxifenobarbital,
que no tiene actividad hipnótica y que posteriormente se excreta en la orina a partes
iguales en forma libre y en forma conjugada con ácido glucurónico. Por lo general, las
concentraciones de fenobarbital de 15-40 µg/mL se consideran dentro del rango
terapéutico para la máxima prevención de las crisis.
La necesidad de la vigilancia de las concentraciones de fenobarbital se debe al
estrecho rango terapéutico y a la amplia variabilidad individual de las velocidades de
absorción, el metabolismo y el aclaramiento del fármaco. La toxicidad del tratamiento
7
con fenobarbital incluye sedación, nistagmo, ataxia, excitación paradójica, discrasia

sanguínea (lo que incluye defectos de la coagulación en recién nacidos de madres a las
que se ha administrado el fármaco durante el embarazo), cambios hepáticos no
específicos, erupciones cutáneas (que incluyen formas exfoliativas graves),
osteomalacia, síndrome de hombro y mano, y coma. Combinada con otra información
clínica, la vigilancia de las concentraciones séricas o plasmáticas de fenobarbital ofrece
a los médicos un medio esencial para ajustar la dosificación y conseguir un efecto
terapéutico óptimo, al tiempo que se evitan las concentraciones tanto subterapéuticas
como nocivas del fármaco.
El análisis CEDIA Fenobarbital II emplea la tecnología del ADN recombinante para
producir un sistema único y homogéneo de enzimoinmunoanálisis.


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El análisis emplea el formato de desplazamiento para mejorar la sensibilidad y la

precisión mediante la reducción del ruido de fondo y el aumento concomitante de la
relación señal-ruido. En el análisis, el fenobarbital de la muestra desplaza una fracción
del complejo conjugado de DE del anticuerpo-fenobarbital. Posteriormente, se añade
el reactivo de AE y se incuban los reactantes para permitir la complementación con el
conjugado DE libre-fenobarbital.
La cantidad de enzima activa formada y el cambio de absorbencia resultante son
directamente proporcionales a la cantidad de analito que contenga la muestra.

Consulte las excepciones (si las hay) de las siguientes instrucciones en la hoja de
aplicaciones. Extraiga el kit del almacenamiento refrigerado (entre 2 y 8°C)
inmediatamente antes de preparar las soluciones.
Prepare las soluciones en el orden siguiente para reducir el riesgo de una posible
contaminación:

reconstitución en la etiqueta del frasco.
reconstitución en la etiqueta del frasco.
tapones de los frascos de reactivo. La solución R1 debe presentar un color amarillo
naranja. Un color rojo o rojo púrpura indica que el reactivo está contaminado y debe
desecharse.


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Almacene los reactivos a entre 2 y 8°C. NO LOS CONGELE. Para determinar la
estabilidad de los componentes sin abrir, consulte la fecha de caducidad en las
etiquetas de la caja o del frasco.


El análisis CEDIA Fenobarbital II requiere muestras de suero o plasma (heparina de
sodio o litio; ácido edético [EDTA] con sodio). Debe tenerse cuidado para mantener la
integridad química de la muestra de suero o plasma desde el momento de la recogida
hasta el del análisis. Tape las muestras, almacénelas a entre 2 y 8°C y analícelas en
las 24 horas posteriores a la recogida. Si el análisis no puede realizarse en las 24
horas posteriores a la recogida, o si la muestra debe enviarse a algún sitio, tape la
muestra y manténgala congelada. Almacene las muestras a -20°C y analícelas en las 2
semanas posteriores. Para proteger la integridad de la muestra, no induzca la
formación de espuma y evite las congelaciones y descongelaciones repetidas.
Centrifugue las muestras que contengan partículas.
Algunas concentraciones terapéuticas del fármaco disminuyen cuando la muestra se
almacena en un tubo separador durante un período prolongado de tiempo (más de dos
horas).
Limitaciones
El rendimiento del análisis CEDIA Fenobarbital II sólo se ha determinado con suero y
plasma humanos tratados con heparina de sodio o litio, o con ácido edético (EDTA)
con sodio.
pueden obtenerse resultados artificialmente altos que no se ajusten al perfil clínico. En
esos casos, consulte con el servicio de asistencia técnica al cliente.


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PROCEDIMIENTO FENITOINA

La fenitoína (difenilhidantoína o Dilantin) es uno de los anticonvulsivos más recetados
para el tratamiento de la epilepsia, sobre todo para las convulsiones tonicoclónicas
generalizadas, las crisis focales corticales y la epilepsia del lóbulo temporal.
Se considera que el rango terapéutico de las concentraciones séricas de fenitoína para
suprimir al máximo las crisis es de 10 a 20 μg/mL en adultos y de 6 a 14 μg/mL en
pacientes pediátricos. La toxicidad de la fenitoína está relacionada a menudo con la
dosis, y afecta principalmente al sistema nervioso central. La vigilancia de las
concentraciones séricas de fenitoína es fundamental durante el tratamiento, ya que
ofrece al médico un índice que le permite ajustar la dosificación para conseguir un
efecto terapéutico óptimo y evitar las concentraciones tanto subterapéuticas como
tóxicas del fármaco.
El análisis CEDIA Fenitoína II emplea la tecnología del ADN recombinante para
absorbencia resultante son directamente proporcionales a la cantidad de fármaco que
Reactivos


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Tampón de reconstitución de AE: contiene MOPS (ácido 3-[N-morfolino] propano

ulfónico), 35 mg/L de anticuerpos monoclonales antifenitoína, sales de tampón y
conservante.
1a Reactivo de AE: contiene 0,171 g/L de aceptor enzimático, agente liberador,

detergente, sales de tampón y conservante.
Tampón de reconstitución de DE: contiene MOPS (ácido 3-[N-morfolino]
propanosulfónico), sales de tampón y conservante.
2a Reactivo de DE: contiene 19 μg/L de donante enzimático conjugado con fenitoína,

1,64 g/L de rojo de clorofenol- -D-galactopiranósido, sales de tampón, estabilizador y
conservante.

soluciones. Prepare las soluciones en el orden siguiente para reducir el riesgo de una
posible contaminación.

unos 5 minutos a temperatura ambiente (entre 15 y 25°C). Mezcle de nuevo. Anote la
fecha de la reconstitución en la etiqueta del frasco. Coloque la botella directamente en
el compartimento para reactivos del analizador o en el lugar de almacenamiento
refrigerado (a 2-8 °C) y déjela reposar 24 horas antes de su uso.
reconstitución en la etiqueta del frasco. Coloque la botella directamente en el
compartimento para reactivos del analizador o en el lugar de almacenamiento
refrigerado (a 2-8 °C) y déjela reposar 24 horas antes de su uso.


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temperatura de almacenamiento del compartimiento de reactivos del analizador.
Consulte las instrucciones de aplicación específicas de cada analizador para obtener
información adicional.
NOTA 4: para garantizar la estabilidad del reactivo de AE reconstituido, evite la
Almacene los reactivos a entre 2 y 8°C.
NO LOS CONGELE. Para determinar la estabilidad de los componentes sin abrir,
consulte la fecha de caducidad en las etiquetas de la caja o del frasco.


Las muestras de suero o plasma (heparina de sodio o de litio; ácido edético [EDTA]
con sodio) son adecuadas para utilizarse en el análisis. No induzca la formación de
espuma y evite las congelaciones y descongelaciones repetidas para mantener la
integridad de la muestra desde el momento de la recogida hasta el del análisis.
Centrifugue las muestras que contengan partículas. Tape las muestras, almacénelas a
entre 2 y 8°C y analícelas en la semana posterior; si la muestra debe enviarse a algún
sitio, tápela y manténgala congelada. Almacene las muestras a -20°C y analícelas en
las 4 semanas posteriores. Manipule todas las muestras de pacientes como si
pudieran ser infecciosas.
Limitaciones
pueden obtenerse resultados de fenitoína artificialmente altos que no se ajusten al
perfil clínico.
Como en todos los análisis que emplean anticuerpos de ratón, existe la posibilidad de
que los anticuerpos antirratón humanos (HAMA) de la muestra interfieran y hagan que
se obtengan resultados falsos demasiado altos.


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PROCEDIMIENTO ACIDO VALPROICO

El ácido valproico (VPA; ácido 2-propilpentanoico; Depakene ) es un anticonvulsivo
®
empleado principalmente para el tratamiento de convulsiones generalizadas primarias

y secundarias, pero también es efectivo contra las crisis de ausencia.
A concentraciones terapéuticas, más del 90% del VPA de la circulación está unida a
proteínas plasmáticas; principalmente albúmina. 6
El VPA tiene las menores reacciones adversas de todos los antiepilépticos de uso
común. Los efectos secundarios más frecuentes son trastornos gastrointestinales,
7,8
tales como náuseas y vómitos.

La farmacocinética del VPA es muy variable, y depende de la forma del fármaco y de la
vía de administración, así como de las variaciones individuales en volumen de
distribución, metabolismo y aclaramiento. La vigilancia de las concentraciones de
9,10
VPA durante el tratamiento es esencial para ofrecer al médico una indicación para el
ajuste de la dosificación.
El análisis CEDIA Ácido valproico II emplea la tecnología del ADN recombinante para
genéticamente dividiéndola en dos fragmentos inactivos: un aceptor enzimático (AE) y
un donante enzimático (DE). Estos fragmentos se vuelven a asociar espontáneamente
para formar una enzima totalmente activa que, en el formato del análisis, descompone
un sustrato y genera un cambio de color que puede medirse mediante
espectrofotometría.


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absorbencia resultante son directamente proporcionales a la cantidad de fármaco que

Reactivos
Tampón de reconstitución de AE: contiene N-(2-hidroxietil) piperazina-N’-(2-ácido
etanosulfónico), estabilizador y conservante (13 mL).
1a Reactivo de AE: contiene 0,25 g/L de aceptor enzimático, 24 mg/L de anticuerpos

monoclonales anti-VPA, BSA, salicilato sódico, sales de tampón y conservante.
Tampón de reconstitución de DE: contiene N-(2-hidroxietil) piperazina-N’-(2-ácido
etanosulfónico), estabilizadores y conservante (11 mL).
2a Reactivo de DE: contiene 40 µg/L de donante enzimático conjugado con VPA, 2,4
g/L de rojo de clorofenol- -D-galactopiranósido, 27 ml/L de anticuerpos antirratón de
cabra, sales de tampón, estabilizador y conservante.

soluciones. Prepare las soluciones en el orden siguiente para reducir el riesgo de una
posible contaminación.



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Almacene los reactivos a entre 2 y 8°C. NO LOS CONGELE. Para determinar la estabilidad
de los componentes sin abrir, consulte la fecha de caducidad en las etiquetas de la
caja o del frasco.


Las muestras de suero o plasma (heparina de sodio o de litio; ácido edético [EDTA]
con sodio) son adecuadas para utilizarse en el análisis. No induzca la formación de
espuma y evite las congelaciones y descongelaciones repetidas para mantener la
integridad de la muestra desde el momento de la recogida hasta el del análisis.
Centrifugue las muestras que contengan partículas. Tape las muestras, almacénelas a
entre 2 y 8°C y analícelas en la semana posterior a la recogida. Si el análisis no puede
realizarse en la semana posterior a la recogida, o si la muestra debe enviarse a algún
sitio, tape la muestra y manténgala congelada. Almacene las muestras a -20°C y
analícelas en las 4 semanas posteriores. Manipule todas las muestras de
pacientes como si pudieran ser infecciosas.


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PROCEDIMIENTO LITIO

El litio es muy utilizado en el tratamiento de psicosis maniacodepresivas. Administrado
como carbonato de litio, se absorbe completamente en el tubo digestivo; los niveles
máximos en suero se producen entre 2 y 4 horas después de una dosis oral. La
semivida en suero es de 48 a 72 horas y se elimina por los riñones (su excreción va en
paralelo a la del sodio). El tiempo de eliminación se puede alargar en caso de
disminución de la función renal.
El litio actúa mejorando la asimilación de neurotransmisores que producen un efecto
sedante en el sistema nervioso central. Las concentraciones de litio en suero se
analizan esencialmente para garantizar el cumplimiento y evitar toxicidades.
Entre los primeros síntomas de intoxicación se encuentran apatía, debilidad,
somnolencia, letargo, disfasia, temblores irregulares, convulsiones mioclónicas,
debilidad muscular y ataxia. Los niveles superiores a 1,5 mmol/l (12 horas después de
una dosis) indican un riesgo significativo de intoxicación.
Metodología
El litio se puede determinar mediante espectrofotometría de absorción atómica,
fotometría de emisión de llama o electrodos selectivos a iones. Estos métodos
requieren instrumentos específicos y, con frecuencia, exclusivos para un fin.
El reactivo de litio Infinity es un método espectrofotométrico que puede adaptarse con
facilidad a analizadores automatizados de química clínica. El litio presente en la
muestra reacciona con un compuesto de porfirina sustituida en un pH alcalino,
produciendo un cambio en la absorbancia directamente proporcional a la
concentración de litio en la muestra.
Preparación de los reactivos

El reactivo y el patrón se suministran listos para su uso.
Estabilidad y almacenamiento
Los reactivos y el patrón sin abrir son estables hasta la fecha de caducidad, siempre
que se conserven entre 2 y 8 °C.


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Una vez abiertos, los reactivos y el patrón son estables en las botellas proporcionadas
hasta la fecha de caducidad indicada, siempre que permanezcan tapados cuando no
estén en uso y almacenados entre 2 y 8 °C. Si se almacena en el sistema, el reactivo
es estable durante 2 semanas.
Indicaciones de deterioro del reactivo

• Turbidez;
• Incapacidad de recuperar los valores de control en el rango asignado; y/o
• El color del reactivo es violeta claro.
•
Obtención y preparación de muestras
Se recomienda usar una concentración de litio en suero 12 horas después de la
administración de la dosis para evaluar la idoneidad de la terapia. La máxima
concentración se alcanza entre 2 y 4 horas después de la dosis oral.
Utilice únicamente suero o plasma con AEDT. El suero o plasma con AEDT deberá
separarse de las células si se prevé un almacenamiento durante más de 4 horas.
Para analizadores sin dilución automática, las muestras, controles y calibradores
deberán prediluirse a 1:10 con agua destilada o desionizada [1 parte de muestra y 9
partes de agua].
Almacenamiento y estabilidad de las muestras:

Las muestras son estables durante una semana entre 2 y 8 °C o > 1 año 4 a -20 °C.
Limitaciones
El reactivo es sensible a la luz y absorbe el dióxido de carbono de la atmósfera. Se
recomienda almacenar el reactivo tapado y en un envase oscuro si no va a usarse
durante un periodo de tiempo prolongado (por ejemplo, de noche).
Sustancias interferentes
Se realizaron estudios para determinar el nivel de interferencia de otros cationes
normalmente presentes en suero, en presencia de una concentración de litio de
aproximadamente 1 mmol/l, y se obtuvieron los siguientes resultados:
Sodio: Hasta 200 mmol/l
Potasio: Hasta 8,00 mmol/l
Calcio: Hasta 4,00 mmol/l (16 mg/dl)
Magnesio: Hasta 2,00 mmol/l (4,86 mg/dl)
Hierro: Hasta 200 µmol/l (1,117 µg/dl)
Zinc: Hasta 250 µmol/l (1,625 µg/dl)


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Cobre: Hasta 250 µmol/l (1,588 µg/dl)

Con este método, no se observaron interferencias significativas (desviaciones <5 % de
la concentración asignada de litio).
Se realizaron estudios para determinar el nivel de interferencia de bilirrubina, lipidemia
(triglicérido) y hemoglobina en presencia de una concentración de litio de
aproximadamente 1 mmol/l, y se obtuvieron los siguientes resultados:
Bilirrubina libre: interferencia inferior al 10 % a 45 mg/dl
Bilirrubina conjugada: interferencia inferior al 10 % a 45 mg/dl
Lipidemia: interferencia inferior al 10 % a 2000 mg/dl
Hemoglobina: interferencia inferior al 5 % a 2 g/l


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16.3 PROCEDIMIENTOS TÉCNICOS HORMONAS, MARCADORES TUMORALES Y

OTROS- EQUIPO ACCESS 2
PROCEDIMIENTO BHCG-BETA
El ensayo Access Total βhCG inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de βhCG total en
suero y plasma humanos.
Resumen y explicación
La gonadotrofina coriónica humana (hCG) es una hormona glucoproteínica, producida
por la placenta, que estructuralmente se asemeja a las hormonas hipofisarias FSH,
TSH y LH. La subunidad alfa (PM 15 000–20 000 daltons) es común a todas estas
hormonas, pero las subunidades beta difieren y les confieren especificidad
inmunológica y biológica. Durante un embarazo normal, el valor de la hCG es de
aproximadamente 50 mIU/mL (IU/L) en la semana después de la concepción,
doblándose cada 1,5–3 días durante las primeras seis semanas.
Los niveles continúan elevándose hasta el final del primer trimestre para, a partir de
ahí, descender gradualmente a un nivel inferior durante el resto del embarazo.
Después del parto, la hCG vuelve a < 5 mIU/mL (IU/L) y generalmente es indetectable
en los primeros días del postparto. La hormona es un excelente marcador del
embarazo. Los niveles de las mujeres sanas, no embarazadas, oscilan entre bajos (< 5
mIU/mL [IU/L]) e indetectables.
Información sobre el reactivo:

• Se suministra listo para utilizar.
• Permanece estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta si se
almacena a una temperatura de 2 a 10 °C.
Recogida y preparación de las muestras

 Las muestras recomendadas son suero y plasma (heparina).
• Conservar las muestras cerradas herméticamente a temperatura ambiente (de 15 a
30 °C) durante un período no superior a ocho horas.
• Si el ensayo no se realizara dentro de las ocho horas siguientes, refrigerar las
muestras a una temperatura de 2 a 8 °C.


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• Si el ensayo no se realizara dentro de las 48 horas siguientes, o para el transporte

de las muestras, congelar a una temperatura de -20 °C o inferior.
• Descongelar las muestras una sola vez.
 Las muestras congeladas pueden ser almacenadas hasta seis meses.
Detalles de la calibración
Para todos los ensayos es necesaria una curva de calibración activa. Para el ensayo
Access Total βhCG, se requiere realizar la calibración cada 28 días.
Limitaciones del procedimiento

Las muestras pueden medirse con precisión dentro del rango analítico comprendido
entre el límite inferior de detección y el mayor valor del calibrador, aproximadamente
0,5–1000 mIU/mL [IU/L]
Las muestras que contengan entre 1000-200 000 mIU/mL, el equipo automáticamente
lo diluye y el sistema lo multiplica por el factor de dilución definido en su software y
calcula los resultados finales del ensayo.
Las muestras que contienen > 1000 mIU/mL pueden procesarse también a través de
diluciones previas fuera del equipo.


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PROCEDIMIENTO ESTRADIOL
El ensayo Access Estradiol es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de estradiol en suero
y plasma.
El estradiol (17β-estradiol, 1,3,5 (10) - Estratrien - 3,17β - diol) es un estrógeno
natural con una masa molecular de 272,3 daltons. La mayor parte del estradiol
circulante está unido a proteínas. Se estima que solo el 1–3% del estradiol esta libre
(no unido). En mujeres no gestantes, el estradiol es secretado por los ovarios y el
cuerpo lúteo. Los niveles de estradiol están en su nivel más bajo en la fase folicular
temprana y aumentan en fase folicular tardía, alcanzando el máximo justo antes del
aumento en hLH (hormona luteinizante humana) iniciándose la ovulación. Al aumentar
la hLH, los niveles de estradiol disminuyen antes de aumentar de nuevo en la fase
lútea. El estradiol y la progesterona (secretada por el cuerpo lúteo) estimulan el
crecimiento del endometrio en preparación para la implantación de un ovulo
fertilizado. Si no se produce la concepción, disminuye la secreción de estradiol y
progesterona por el cuerpo lúteo, iniciándose la menstruación. Los niveles de estradiol
se utilizan para controlar el estado ovulatorio. Dado que las concentraciones de
estradiol reflejan la maduración folicular, la medición de estradiol se emplea como una
herramienta en la evaluación del desarrollo sexual, la etiología de la amenorrea, las
causas de infertilidad y la menopausia.

• Debe conservarse en posición vertical y refrigerado a una temperatura de 2 a 10 °C.
• Permanece estable a una temperatura de 2 a 10 °C durante 14 días después del uso
inicial.



Página: 96 de 200
 Conservar las muestras cerradas herméticamente a temperatura ambiente (de 15 a

30 °C) durante un periodo no superior a ocho horas.
 Si el ensayo no se realizara dentro de las ocho horas siguientes, refrigerar las
muestras a una temperatura 2 a 8°C.
 Si el ensayo no se realizara dentro de las 48 horas siguientes, o para el transporte
de las muestras, congelar a una temperatura de -20°C o inferior.
Access Estradiol, se requiere realizar la calibración cada 14 días.

entre el límite inferior de detección y el mayor valor del calibrador (aproximadamente
20–4800 pg/mL [73–17 621 pmol/L]).
Si una muestra contiene una cantidad inferior al limite inferior de detección del
ensayo, se deben informar los resultados como inferiores a ese valor (es decir, < 20
pg/mL [< 73 pmol/L]).
Si una muestra contiene una cantidad superior al valor establecido del mayor
calibrador Access Estradiol Calibrator (S5), debe informarse del resultado como
superior a ese valor (es decir, > 4800 pg/mL). O bien, diluya un volumen de muestra
con un volumen de Access Estradiol Calibrator S0 (cero) que también está disponible
como calibrador Access Estradiol Calibrator S0.
Los valores de estradiol en mujeres embarazadas pueden verse afectados por niveles
elevados de estriol, como los presentes en el segundo y tercer trimestre del embarazo.
Especificidad analítica/Interferencias
Las muestras de suero que contengan hasta 10 mg/dL de Bilirrubina, las muestras
hemolizadas que contengan hasta 1 g/dL de hemoglobina y las muestras lipemicas que
contengan el equivalente a 1800 mg/dL de triglicéridos no afectan a la concentración
de estradiol ensayado utilizando una muestra de suero que contenga
aproximadamente 1089 pg/mL de estradiol.


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PROCEDIMIENTO HORMONA FOLICULO ESTIMULANTE (FSH)
El ensayo Access hFSH es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de hormona
estimulante del foliculo (FSH) en suero y plasma humanos.
La hormona estimulante del folículo humana (hFSH, follitropina), está compuesta por
dos subunidades de glicoproteína distintas asociadas por una unión no covalente
denominadas subunidades alfa y beta. Son las diferencias en la subunidad beta de
estas glicoproteínas las que contribuyen a la especificidad inmunológica y fisiológica de
las mismas. En la mujer, hFSH estimula el crecimiento del folículo, y conjuntamente
con hLH, estimula la secreción de estrógenos y la ovulación. Tras la ovulación, se cree
que hFSH y hLH son las responsables de la transformación del folículo roto en el
cuerpo lúteo y de influir en la secreción de progesterona de las células luteales. Las
células gonadotrópicas del lóbulo anterior de la glándula pituitaria secretan la hormona
FSH humana como respuesta a la hormona de liberación de gonadotropina (GnRH)
secretada por el hipotálamo basal medial. Tanto la hormona hFSH como la hLH se
secretan por pulsos. El estradiol y la progesterona regulan los niveles de hFSH
circulantes. En un ciclo menstrual normal se observa un pico débil de hFSH hacia el
final de la fase luteal (que muy probablemente ha sido activado por una caída de los
niveles de estradiol y progesterona lo que elimina el efecto de feedback negativo). Ello
provoca el inicio del crecimiento y maduración de los folículos del ovario. Entonces, los
niveles de hFSH bajan y permanecen bajos a lo largo de toda la fase folicular (debido
al feedback negativo provocado por el estradiol y la progesterona que se producen en
el folículo en desarrollo). A mitad del ciclo, GnRH provoca una subida de los niveles de
hFSH. La función de esta activación repentina de hFSH a mitad del ciclo se desconoce.
Tras esta subida, la hormona hFSH se suprime durante la fase luteal por el feedback
negativo que ejerce el estradiol. Ya finalizando el ciclo menstrual, una pequeña subida
de los niveles de hFSH produce el inicio de la maduración del folículo del siguiente
ciclo.

•Se suministra listo para utilizar.


Página: 98 de 200
•Debe conservarse en posición vertical y refrigerado, a una temperatura de 2 a 10

°C.
•Permanece estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta si se almacena
a una temperatura de 2 a 10 °C.
•Permanece estable a una temperatura de 2 a 10 °C durante 28 días después del uso
inicial.
Las muestras recomendadas son suero y plasma (heparina).
•Antes de transcurridas dos horas desde el centrifugado, transferir al menos 500 μL de
muestra sin células a una probeta de conservación. Inmediatamente después, cerrar la
probeta herméticamente.
•Conservar las muestras cerradas herméticamente a temperatura ambiente (de 15 a
•Si el ensayo no se realizara dentro de las ocho horas siguientes, refrigerar las
•Si el ensayo no se realizara dentro de las 48 horas siguientes, o para el transporte de
las muestras, congelar a una temperatura de ‐20 °C o inferior.
Access hFSH, se requiere realizar la calibración cada 28 días.

Las muestras pueden determinarse con precisión dentro del rango analítico
comprendido entre el límite inferior de detección y el valor máximo del calibrador
aproximadamente 0,2–200 mIU/mL
Si una muestra contiene una cantidad inferior al límite inferior de detección del
ensayo, se deben informar los resultados como inferiores a ese valor [es decir, < 0,2
mIU/mL .
calibrador Access hFSH Calibrator (S5), debe informarse del resultado como superior a
ese valor [es decir, > 200 mIU/mL
Especificidad analítica / Interferencias

Las muestras que contienen hasta 10 mg/dL de bilirrubina, las muestras lipémicas que
contengan el equivalente a 1800 mg/dL de triglicéridos y las muestras hemolizadas
que contengan más de 1 g/dL de hemoglobina no afectarán a la hFSH en varones
(mIU/mL) .


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PROCEDIMIENTO HORMONA LUTEINIZANTE HUMANA (hLH)
El ensayo Access hLH es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

luteinizate (LH) en suero y plasma humanos.
La hormona luteinizante humana (hLH) está compuesta por dos subunidades de
glicoproteína distintas asociadas por una unión no covalente, denominadas alfa y beta.
Se ha comunicado que la hLH de peso molecular 28 500 daltons contiene en la
subunidad alfa dos cadenas de carbohidratos unidas por un enlace amino y en la
subunidad beta un oligosacárido unido a una asparagina. La estructura de la
subunidad alfa es similar a la de las glicoproteínas hLH, hCG, hFSH y hTSH. Son las
diferencias que presenta la subunidad beta de estas glicoproteínas las que contribuyen
a la especificidad inmunológica y fisiológica de estas hormonas. En la mujer, hLH
estimula la maduración final del folículo, la rotura folicular y la ovulación. La hormona
LH humana es secretada por las células gonadotrópicas del lóbulo anterior de la
glándula pituitaria como respuesta a la hormona de liberación de la gonadotropina
(GnRH) secretada por el hipotálamo medial basal. A lo largo de un ciclo menstrual
normal, el feedback negativo que ejerce el estradiol suprime la secreción de hLH en la
fase folicular. Al mismo tiempo que se desarrolla el folículo (en respuesta a la hormona
hFSH), la producción de estradiol se ve aumentada lo cual activa un aumento en GnRH
y una sensibilidad aumentada de la pituitaria a la hormona GnRH. El aumento de
GnRH produce como resultado un aumento de hLH en la preovulación (mitad del ciclo)
y la ovulación. Tras este aumento, progesterona y estradiol ejercen un feedback
negativo sobre hLH, que se suprime durante la fase luteal. Se observan variaciones en
la duración de los ciclos de mujeres de menstruación normal debido a variaciones en la
duración de la fase folicular. En la mujer menopaúsica, los niveles de hLH se elevan
como respuesta a una producción disminuida de estrógenos y progestógenos del
ovario, lo cual elimina el mecanismo de feedback negativo de la glándula pituitaria.


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Como consecuencia, los ciclos de menstruación y de ovulación disminuyen y

finalmente cesan.

 Se suministra listo para utilizar.
• Debe conservarse en posición vertical y en refrigerado, a una temperatura de 2 a 10
°C.
inicial.
Recogida y preparación de muestras

• Permitir que las muestras de suero se coagulen completamente antes de su
centrifugado.
de las muestras, congelar a una temperatura de ‐20 °C o inferior.
Se recomienda que las muestras congeladas pueden ser almacenadas hasta seis
meses.
La unidad de medida predeterminada de los resultados de las muestras es mIU/mL.
Para modificar las unidades de notificación de los resultados al Sistema Internacional
de Unidades (unidades SI), IU/L, consulte los manuales del sistema correspondientes
o el sistema de ayuda para obtener instrucciones detalladas. Para convertir
manualmente las concentraciones al sistema internacional, multiplicar mIU/mL por el
factor de multiplicación 1.
Access hLH, se requiere realizar la calibración cada 28 días.


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 Las muestras pueden medirse con precisión dentro del rango analítico
comprendido entre el límite inferior de detección y el mayor valor del calibrador
(aproximadamente 0,2–250 mIU/mL).
• Si una muestra contiene una cantidad inferior al límite inferior de detección del
ensayo, se deben informar los resultados como inferiores a ese valor (es decir < 0,2
mIU/mL.
• Si una muestra contiene una cantidad superior al valor establecido del mayor
Access hLH Calibrator (S5), debe informarse del resultado como superior a ese valor
(es decir, > 250 mIU/mL). O bien, diluya un volumen de muestra con un volumen de
Access hLH Calibrator S0 (cero) o con diluyente de muestras Access Sample Diluent A.
En los ensayos en los que se utilizan anticuerpos existe la posibilidad de que se
produzcan interferencias debido a la presencia de anticuerpos heterófilos en la
muestra del paciente cuidadosamente los resultados de los pacientes que se sospeche
que puedan tener esos anticuerpos.
Se añadieron agentes interferentes a las muestras con concentraciones de hLH de
aproximadamente 25 mIU/mL. No se halló una interferencia significativa (< 10%
sesgo) para las siguientes sustancias interferentes a las concentraciones indicadas: Se
añadieron hCG, hFSH, hTSH y βhLH a muestras con concentraciones de hLH
aproximadas de 22 mIU/mL. Para las siguientes sustancias no se halló reactividad
cruzada significativa (< 10% sesgo) a las concentraciones indicadas.


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PROCEDIMIENTO PROLACTINA
El ensayo Access Prolactin es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de prolactina (PRL)
en suero y plasma humanos (heparina) utilizando Sistemas de Inmunoensayo Access.
La prolactina es un polipéptido de cadena sencilla compuesto por 198 aminoácidos con
tres puentes disulfuro intracatenarios y peso molecular de aproximadamente 22 500
daltons. La prolactina es secretada por las células anteriores de la glándula pituitaria.
La secreción de prolactina se controla desde el hipotálamo principalmente a través de
la liberación del factor inhibidor de prolactina (dopamina) y del factor liberador de
prolactina (serotonina). La hormona liberadora de tirotropina (TRH) estimula la
secreción de PRL y es útil como test de provocación para evaluar las reservas de PRL
así como la secreción anormal de PRL desde la glándula pituitaria. La principal función
fisiológica de PRL es la de estimular y mantener la lactancia en las mujeres. En
mujeres normales, los niveles de PRL en suero oscilan generalmente dentro del rango
1-25 ng/mL (μg/L) mientras que en hombres normales estos niveles oscilan
normalmente en el rango de 1-20 ng/mL (μg/L). La secreción normal de prolactina
varía en función del tiempo lo que hace que los niveles de PRL en suero son de 2-3
veces superiores durante la noche que durante el día. La vida media biológica de la
PRL es de aproximadamente 20-50 minutos. Los niveles de PRL en suero durante la
menstruación son variables y generalmente se producen ligeros aumentos durante la
mitad del ciclo.3 Los niveles de prolactina en individuos normales tienden a aumentar
en respuesta a estímulos fisiológicos como son el sueño, el ejercicio, la estimulación
del pezón, las relaciones sexuales, la hipoglicemia, el embarazo y el stress quirúrgico.
La prolactina es secretada por la glándula pituitaria anterior y es necesaria para el
desarrollo normal del pecho y para la lactancia en las mujeres normalidad.


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El ensayo Access Prolactin es un ensayo inmunoenzimático de un paso simultáneo

(“sandwich”).
Obtención y preparación de especímenes

centrifugado.
• Separe físicamente el suero o el plasma lo antes posible para que no entren en
contacto con las células.
30°C) durante un período no superior a ocho horas.
muestras a una temperatura de 2 a 8°C.
Información sobre el reactivo

• Debe conservarse en posición vertical y en frigorífico, a una temperatura de 2 a
10°C.
Calibración
Access Prolactin, se requiere realizar la calibración cada 28 días.
Limitaciones
0,25-200 ng/mL).
 Si una muestra contiene una cantidad inferior al límite inferior de detección del
ensayo, se deben informar los resultados como inferiores a ese valor (es decir, <
0,25 ng/mL
calibrador Access Prolactin Calibrator , debe informarse el resultado como superior a
ese valor (es decir, >200 ng/mL [μg/L]). O bien, diluya un volumen de muestra con 9
volúmenes de Access Prolactin Calibrator S0 (cero) o con diluyente de muestras
Access Sample Diluent A.


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muestra del paciente. Esos anticuerpos que crean interferencias pueden causar
resultados erróneos. Evaluar cuidadosamente los resultados de los pacientes que se
sospeche que puedan tener esos anticuerpos.
PROCEDIMIENTO PSA LIBRE
El ensayo Access Hybritech free PSA sólo debe utilizarse conjuntamente con el ensayo
Hybritech (total) PSA para calcular la proporción de PSA libre respecto al PSA total
(porcentaje de PSA libre).
Resumen
El antígeno específico de la próstata fue identificado y purificado por Wang y cols. en
1979.3 Las células epiteliales de la próstata producen PSA, una proteasa serina, y lo
producen tanto las células benignas como las malignas. Las alteraciones en la
arquitectura de la próstata producidas por trauma o enfermedades pueden producir un
“escape” de PSA al torrente sanguíneo. El PSA existe principalmente en tres formas en
suero. Se cree que una forma de PSA está recubierta por el inhibidor de la proteasa
alfa-2 macroglobulina 5 y se ha demostrado que carece de inmunoreactividad. Una
segunda forma crea un complejo con otro inhibidor de la proteasa, alfa-1
antiquimiotripsina (ACT). La tercera forma de PSA no forma complejos con un
inhibidor de la proteasa y se denomina PSA libre. Estas dos últimas formas son
detectables inmunologicamente con ensayos de PSA comercialmente disponibles y se
las denomina colectivamente PSA total.
Informes previos han demostrado que la medición de las formas de PSA es útil en la
diferenciación del cáncer de la próstata de las afecciones prostáticas benignas. En
pacientes con concentraciones elevadas de PSA, los hombres con cáncer de próstata
tienden a presentar porcentajes de PSA libre (PSA libre/PSA total) inferiores a los de
los hombres con enfermedades benignas. Esta diferencia en la distribución de valores
del porcentaje de PSA libre en hombres con y sin cáncer puede ser útil a fin de
seleccionar valores de corte para tomar la decisión de realizar una biopsia,
manteniendo una sensibilidad del 90% al 95%, y eliminando la necesidad de realizar
una biopsia en el 20% a 30% de los casos de hombres con enfermedades benignas.


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El ensayo Access Hybritech free PSA es un ensayo inmunoenzimático de dos posiciones

(“sandwich”).

• Debe conservarse en posición vertical y en frigorífico, a una temperatura de 2 a 10
°C.
inicial.
Recogida y preparación de las muestras:

El suero la muestra recomendada para el ensayo Access Hybritech free PSA. Las
muestras de plasma no deben utilizarse.
Sólo se debe utilizar sangre extraída con una técnica médica aceptable en un tubo de
ensayo sin anticoagulantes. Las muestras se deben recoger evitando la hemolisis.
La muestra se debe coagular completamente y separar el suero por centrifugación. Las
muestras se deben procesar (centrifugar) y refrigerar dentro de las 3 horas siguientes
a la extracción de sangre.
Si la muestra de suero se va a ensayar dentro de las 24 horas siguientes a la
recolección, la muestra se debe almacenar en un refrigerador de 2 a 8 °C. Las
muestras a conservar durante más tiempo (hasta 5 meses) se deben congelar a -20
°C o menos. 7. Las muestras de suero turbias o que contengan partículas se deben
centrifugar antes de ensayarlas.
La unidad de medida predeterminada de los resultados de las muestras es ng/mL.
Access Hybritech free PSA, se requiere realizar la calibración cada 28 días.

0,005–20 ng/mL para la calibración Hybritech o 0,005–16 ng/mL para la calibración
OMS).


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0,005 ng/mL tanto para la calibración Hybritech como para la calibración OMS).
calibrador Access Hybritech free PSA Calibrator (S5), debe informarse del resultado
como superior a ese valor (es decir, > 20 ng/mL para la calibración Hybritech o > 16
ng/mL para la calibración OMS).
muestra del paciente
PROCEDIMIENTO PSA TOTAL
Una prueba fiable para detectar el cáncer de próstata en sus primeros estadíos,
cuando el tumor se limita a la glándula y puede proporcionarse un tratamiento eficaz,
puede ser de gran valor para el médico. Históricamente, la mayoría de los cánceres de
próstata, en el momento de efectuar el diagnóstico, se han extendido más allá de la
glándula. El examen mediante tacto rectal (TR) es una técnica comúnmente utilizada
para la detección del cáncer de próstata; no obstante, el TR tal como se realiza
generalmente en la práctica médica, no detecta un número significativo de cánceres,
incluyendo muchos tumores limitados a la glándula. Además, el PSA puede servir
como marcador de precisión para vigilar los avances en el estadío clínico en pacientes
no tratados, así como para evaluar la respuesta a la terapia. Por tanto, las mediciones
en serie de las concentraciones de PSA pueden constituir un instrumento importante el
seguimiento de pacientes con cáncer de próstata y para determinar la eficacia
potencial y real de la cirugía u otras terapias.
El ensayo Access Hybritech PSA es un ensayo inmunoenzimático de dos posiciones
("sandwich").

Se suministra listo para utilizar.
Debe conservarse en posición vertical y en frigorífico, a una temperatura de 2 a 10 °C.
Conservar en frigorífico de 2 a 10 °C durante un mínimo de dos horas antes de utilizar
en el instrumento.
Permanece estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta si se almacena
a una temperatura de 2 a 10 °C.


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Permanece estable a una temperatura de 2 a 10 °C durante 28 días después del uso

inicial.

La muestra recomendada es suero. Las muestras de plasma no deben utilizarse.
Sólo se debe utilizar sangre extraída con una técnica médica aceptable en un tubo de
ensayo sin anticoagulantes. Las muestras se deben recoger evitando la hemolisis.
La muestra se debe coagular completamente y separar el suero por centrifugación.
Si las muestras van a utilizarse para ensayar el PSA libre, se deben procesar
(centrifugar) y refrigerar dentro de las 3 horas siguientes a la extracción de sangre. Si
la muestra de suero se va a ensayar dentro de las 24 horas siguientes a la recolección,
la muestra se debe almacenar en un refrigerador de 2 a 8 °C. Las muestras a
conservar durante más tiempo (hasta 5 meses) se deben congelar a -20 °C o menos.
La unidad de medida predeterminada de los resultados de las muestras es ng/mL.
Access Hybritech PSA, se requiere realizar la calibración cada 28 días.

0,008–150 ng/mL para la calibración Hybritech o 0,008–121 ng/mL para la calibración
OMS).
0,008 ng/mL tanto para la calibración Hybritech como para la calibración OMS).
calibrador Access Hybritech PSA Calibrator (S5), debe informarse del resultado como
superior a ese valor (es decir, > 150 ng/mL para la calibración Hybritech o >121
ng/mL para la calibración OMS). O bien, diluya un volumen de muestra con 4 ó 9
volúmenes de diluyente de muestras Access Hybritech PSA Sample Diluent o de
Tampón de Lavado II.


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PROCEDIMIENTO T3 TOTAL
El ensayo Access Total T3 es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de triyodotironina en
suero y plasma humanos utilizando Sistemas de Inmunoensayo Access.
Las concentraciones de hormonas tiroideas y el grado de sus efectos biológicos están
controlados por el eje hipotálamo-hipofisario-tiroideo. La hormona liberadora de
tirotropina (TRH o TRF) se libera en el hipotálamo como respuesta a las
concentraciones circulantes de hormonas tiroideas libres.
La TRH viaja desde el hipotálamo a la adenohipófisis (pituitaria anterior) a través del
sistema portal donde se inicia una cascada de sucesos intracelular que da finalmente
lugar a la producción y liberación de la Hormona Estimuladora del Tiroides (hTSH o
tirotropina). El órgano diana de la hTSH es la glándula tiroidea donde se une a su
receptor y provoca su respuesta a través de un sistema de segundos mensajeros del
adenilato ciclasa. La respuesta de la glándula tiroidea a la estimulación de hTSH
consiste en la síntesis, almacenaje, secreción y metabolismo de la tetrayodotironina
(T4) y de la triyodotironina (T3).

°C.
• Conservar en frigorífico de 2 a 10 °C durante un mínimo de dos horas antes de
utilizar en el instrumento.


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inicial.

 La muestra recomendada es suero plasma (heparina).
centrifugado.
Access Total T3, se requiere realizar la calibración cada 14 días.

 Las muestras pueden medirse con precisión dentro del rango analítico comprendido
entre el límite inferior de detección y el mayor valor del calibrador
[aproximadamente 0,1 a 8,0 ng/mL (0,2–12,3 nmol/L)].
ensayo, se deben informar los resultados como inferiores a ese valor [es decir, < 0,1
ng/mL (< 0,2 nmol/L)].
• Si una muestra contiene una cantidad superior al valor establecido del mayor Access
Total T3 Calibrator (S5) diluya un volumen de muestra.

Las muestras que contengan más de 10 mg/dL de bilirrubina, las muestras lipémicas
que contengan el equivalente a 1800 mg/dL de trioleína o hasta 400 mg/dL de
colesterol y las muestras hemolizadas que contengan hasta 10 g/L) de hemoglobina no
afectar a la concentración de T3 total analizada. Además, las concentraciones de
proteína total que oscilen de 5,0 a 9,0 g/dL (50 a 90 g/L) no afectan a la
concentración de T3 total analizada.


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PROCEDIMIENTO T4 LIBRE
El ensayo Access Free T4 es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de tiroxina en suero
y plasma humanos (heparina) utilizando Sistemas de Inmunoensayo Access.
El eje hipotálamo‐hipofisario‐tiroideo controla la síntesis, liberación y acción de las
hormonas tiroideas. La hormona liberadora de tirotrofina (TRH) secretada por el
hipotálamo estimula la síntesis y liberación de tirotrofina u hormona liberadora del
tiroides (TSH). A su vez, la TSH estimula la síntesis, almacenamiento, secreción y
metabolismo de tiroxina (T4) y triyodotironina (T3). En la sangre se encuentran tanto
las formas libres como fijada de T4 y T3. Más del 99% de la T4 y T3 circulan en la
sangre unidas a proteínas portadoras, quedando menos del 1% sin unir. Este nivel de
hormona unida o libre se correlaciona con el estado funcional del tiroides en la
mayoría de los individuos. La T4 libre y la T3 libre regulan el crecimiento y desarrollo
normal manteniendo la temperatura corporal y estimulando la termogénesis. Además,
la T4 libre y la T3 libre afectan todos los aspectos del metabolismo de los hidratos de
carbono, así como ciertas áreas del metabolismo de lípidos y vitaminas.
El ensayo Access Free T4 es un ensayo inmunoenzimático de dos pasos.

°C.


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inicial.

Permitir que las muestras de suero se coagulen completamente antes de su
centrifugado.
Conservar las muestras cerradas herméticamente a temperatura ambiente (de 15 a 30
°C) durante un período no superior a ocho horas.
Si el ensayo no se realizara dentro de las ocho horas siguientes, refrigerar las
Si el ensayo no se realizara dentro de las 48 horas siguientes, o para el transporte de
las muestras, congelar a una temperatura de ‐20 °C o inferior.
Descongelar las muestras una sola vez.
Para todos los ensayos es necesaria un punto de calibración activa. Para el ensayo
Access Free T4, se requiere realizar la calibración cada 28 días.

0,25–6,0 ng/dL).
ensayo, se deben informar los resultados como inferiores a ese valor (es decir, < 0,25
ng/dL ).
Si una muestra contiene una cantidad superior al valor establecido del mayor Access
Free T4 Calibrator (S5), debe informarse del resultado como superior a ese valor (es
decir, > 6,0 ng/dL).
LAS MUESTRAS NO SE PUEDEN DILUIR PARA LA DETERMINACION DE T4

LIBRE.
Las muestras que contienen hasta 10 mg/dL de bilirrubina, muestras lipémicas que
contienen el equivalente a 1800 mg/dL de trioleína, y muestras hemolizadas que


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contienen hasta 10 g/L de hemoglobina, no afectan a la concentración de la T4 Libre

analizado.
PROCEDIMIENTO T4 TOTAL
El ensayo Access Total T4 es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de tiroxina total (T4)
en suero y plasma humanos utilizando Sistemas de Inmunoensayo Access.
El eje hipotálamo-hipofisario-tiroideo controla la síntesis, liberación y acción de la
hormona tiroides. La hormona liberadora de tirotrofina (TRH) secretada por el
hipotálamo estimula la síntesis y liberación de tirotrofina u hormona liberadora del
tiroides (TSH). A su vez, la TSH estimula la síntesis, almacenamiento, secreción y
metabolismo de tiroxina (T4) y triyodotironina (T3).
Los rasgos esenciales de la elaboración y almacenamiento de las hormonas tiroideas
son: captación de yodo, yodación de los residuos tiroideos en la molécula de
tiroglobulina, acoplamiento de las monoyodotirosinas (MIT) y diyodotirosinas (DIT)
para formar T4 y T3; almacenamiento de las tironinas como tiroglobulina en la
glándula tiroides y liberación de la hormona tiroides en la circulación sanguínea. Una
vez liberadas en la circulación, la mayor parte de T4 y T3 se fijan a proteínas
portadoras.
La mayor afinidad de fijación de ambas hormonas es hacia la globulina fijadora de
tiroxina (TBG) y, en menor grado, a la prealbúmina (TPBA). Como resultado, el
99,97% de la T4 circulante y el 99,7% de la T3 circulante se unen dejando solamente
pequeñas porciones sin unir. La T4 y la T3 regulan el crecimiento y desarrollo normal.
Mantienen la temperatura corporal, estimulan la termogénesis y afectan a todos los


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aspectos del metabolismo de los hidratos de carbono así como a ciertas áreas del
metabolismo de lípidos y vitaminas.
La importancia clínica de la determinación de la T4 total está en el diagnóstico y
confirmación de los trastornos de la glándula tiroides. La enfermedad de Graves,
tiroiditis subaguda, ganglios tóxicos o hipertiroidismo secundario (hipofisario)
producen niveles elevados de T4. Los niveles reducidos aparecen primordialmente en
enfermedades hipotiroideas como la tiroiditis de Hashimoto y el hipo-tiroidismo
neonatal o hipotiroidismo secundario debido a defectos en el eje hipotalámico-
hipofisario.
El ensayo Access Total T4 es un ensayo inmunoenzimático de unión competitiva.

°C.
• Permanece estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta cuando si se
almacena de a una temperatura 2 a 10 °C.
• Estable de 2 a 10 °C durante 14 días después del uso inicial.

. Las muestras recomendadas son suero y plasma (heparina).
centrifugado.
Access Total T4, se requiere realizar la calibración cada 21 días.
Incluya diariamente materiales de control de calidad existentes en el mercado que
abarquen al menos dos niveles de concentración de compuesto.


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Las muestras se pueden medir con exactitud dentro del intervalo analítico, entre el
limite inferior de detección y el valor del calibrador más alto (aproximadamente 0,50–
30,0 μg/dL [6,4–386 nmol/L].
μg/dL [< 6,4 nmol/L]).
Total T4 Calibrator (S5), debe informarse del resultado como superior a ese valor (es
decir, > 30,0 μg/dL [> 386 nmol/L]).
El estado tiroideo no debe evaluarse en función de los resultados de una única prueba
de tiroxina. La evaluación completa del estado de la glándula tiroides debe incluir
pruebas adicionales de la función tiroidea, la evaluación de auto–anticuerpos tiroideos
y la evaluación clínica del médico.
En caso de embarazo, los resultados de Access Total T4 pueden ser incorrectos, es
decir, pueden ser unos resultados bajos falsos. Este ensayo no debe usarse como
único marcador para evaluar la enfermedad tiroidea durante el embarazo.

Las muestras que contienen hasta 10 mg/dL de bilirrubina, muestras lipémicas que
contienen el equivalente a 1800 mg/dL de trioleína, y muestras hemolizadas que
contienen hasta 5 g/L de hemoglobina, no afectan la concentración de tiroxina
ensayada.


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PROCEDIMIENTO TROPONINA I
El reactivo Access AccuTnI+3 Reagent es un inmunoensayo quimioluminiscente de

partículas paramagnéticas para la determinación cuantitativa de alta sensibilidad de
los niveles de troponina cardíaca I (cTnI) en suero y plasma humanos usando el
sistema Access 2 Immunoassay System como corroboración del diagnóstico de infarto
de miocardio.
Resumen
Las troponinas (I, C y T) son miembros de un complejo de proteínas que modulan la
interacción mediada por calcio entre la actina y la miosina de las células musculares.
La nomenclatura de estas diferentes proteínas del complejo de troponina se debe a
sus respectivas funciones en la contracción muscular. La troponina T ancla el complejo
de troponina a la tropomiosina del filamento fino, mientras que la troponina I inhibe la
actomiosina ATPasa y la troponina C es una subunidad de unión al calcio.
Se han identificado tres isotipos de troponina I (TnI):
Uno asociado al musculoesquelético de contracción rápida, uno asociado al músculo
esquelético de contracción lenta y uno al músculo cardíaco.
Las dos isoformas de contracción lenta y rápida tienen un peso molecular similar de
aproximadamente 20 000 dalton(Da) cada una. La isoforma de TnI específica cardíaca
(cTnI) tiene un peso molecular de aproximadamente 24 000Da y contiene una cola
postraduccional de 31 aminoácidos en el extremo N terminal de la molécula. Esta


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secuencia y la disimilitud del 42% y del 45% con las secuencias de las otras dos
isoformas han hecho posible la generación de anticuerpos monoclonales altamente
específicos sin reactividad cruzada con otras formas de TnI no cardíacas. Debido a su
elevada especificidad de tejido, la cTnI es un marcador cardíaco específico altamente
sensible del daño miocárdico. El ensayo Access AccuTnI+3 utiliza anticuerpos
monoclonales específicamente dirigidos contra la troponina cardíaca humana I.
En el infarto de miocardio (IM), los niveles de cTnI aumentan en las horas posteriores
a la aparición de los síntomas cardíacos, alcanzando un máximo a las 12-16 horas,
pudiendo permanecer elevada durante 4-9 días después del IM.
El ensayo Access AccuTnI+3 es un ensayo inmunoenzimático de dos posiciones
(“sandwich”).

Se prefieren las muestras de suero y de plasma con heparina de litio. Las muestras de
suero y plasma (heparina y EDTA) son muestras aceptables
centrifugado. El tiempo de coagulación puede estar prolongado en las muestras de
suero debido al estado clínico del paciente o en pacientes que reciben tratamiento
anticoagulante.
30 °C) durante un período no superior a dos horas.
• Las muestras deberían centrifugarse, separarse físicamente de las células y
refrigerarse lo antes posible.
• En el caso del plasma, evitar transferir material desde la capa de
leucocitos/plaquetas situada justo por encima de los eritrocitos. Si se utiliza un rotor
de ángulo rojo para la centrifugación, debe procederse con precaución para evitar
resuspender las plaquetas.
• Las muestras de suero o plasma turbias que contienen partículas en suspensión
deben transferirse desde el tubo original y volver a centrifugar antes del ensayo. Un
muestra (tubo original) que contiene un dispositivo independiente (barrera de gel)
nunca debe centrifugarse de nuevo.
• Observar las recomendaciones de centrifugado del fabricante del tubo de recogida de
muestras sanguíneas.
• Las muestras deben conservarse durante seis meses a -20°C.
Descongelar las muestras una sola vez y centrifugar todas las muestras descongeladas
antes del análisis. No descongelar en un baño de agua.


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10°C.
• Conservar en frigorífico de 2 a 10°C durante un mínimo de dos horas antes de
almacena a una temperatura de 2 a 10°C.
• Permanece estable a una temperatura de 2 a 10°C durante 56 días después del uso
inicial.
Información sobre la calibración

Analizar el calibrador Access AccuTnI+3 Calibrator S0 y S1 por cuadruplicado y el
Calibrator S2-S5 por duplicado.
Access AccuTnI+3, se requiere realizar la calibración cada 56 días.
Limitaciones
La temperatura ambiente del laboratorio debe mantenerse entre 18°C y 28°C mientras
se realiza el análisis de la muestra del paciente. Este ensayo emplea un algoritmo para
corregir las fluctuaciones en la temperatura del laboratorio que podrían afectar a la
exactitud de los resultados de la prueba de la troponina.
Las muestras se pueden medir con exactitud dentro del intervalo analítico del ensayo
(aproximadamente 0,01-100 ng/mL [μg/L]. No diluir las muestras del paciente
En la muestra del paciente pueden existir otras posibles interferencias que podrían
causar resultados erróneos en los inmunoensayos. Algunos ejemplos que han sido
documentados en la bibliografía son el factor reumatoide, la fosfatasa alcalina
endógena, la fibrina, y proteínas capaces de unirse a la fosfatasa alcalina. Los agentes
fibrinolíticos activan proteasas que pueden influir en las mediciones de las proteínas,
incluida la troponina.


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PROCEDIMIENTO ANTÍGENO DEL CÁNCER 15-3 (CA 15-3)
Resumen
El antígeno CA 15-3 es un epítopo de una gran glucoproteína de la clase de las
mucinas que es producto de MUC1. Las mucinas, presentes en el epitelio glandular
normal de diversos órganos, tienen como función proteger y lubricar las células
circundantes. En el cáncer de mama, la MUC1 sufre una glicosilación aberrante, es
sobreexpresada y liberada a la circulación. Una vez en ella, puede ser detectada a
niveles de concentración elevados. En numerosos pacientes con carcinoma de mama
epitelial las concentraciones de antígeno CA 15-3 son elevadas. Asimismo, pueden
presentarse concentraciones elevadas de CA 15-3 en pacientes con cánceres de
pulmón, ovario, páncreas o cáncer colorrectal así como en otras afecciones benignas
como la enfermedad benigna de la mama o del hígado, en la cirrosis y en la hepatitis.
En Estados Unidos el cáncer de mama es una causa principal de muerte por cáncer en
mujeres después del cáncer de pulmón. En el mundo, el cáncer de mama se ha
convertido en uno de los cánceres más extendidos y afecta a 1 de cada 10 mujeres. El
antígeno CA 15-3 ha llegado a convertirse en un marcador universal para el cáncer de
mama y ha demostrado ser más sensible que el antígeno carcioembrionario (CEA) en
la detección de recurrencias del cáncer de mama. La elevación de las concentraciones
de antígeno CA 15-3 puede ser un indicio de progresión de la enfermedad del mismo
modo que la disminución de las concentraciones de antígeno puede estar asociada a


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regresión de la enfermedad. No se recomienda la utilización del ensayo Access BR

Monitor como herramienta de cribado. La obtención de un valor inferior al límite
establecido por el valor de corte no es indicio de ausencia de cáncer de mama. Deben
considerarse también otros métodos y procedimientos aceptables desde el punto de
vista médico para la monitorización y el diagnóstico y tratamiento adecuados de los
pacientes.
El ensayo Access BR Monitor es un ensayo inmunoenzimático de dos posiciones
(“sandwich”).

 Evitar el análisis de muestras lipémicas y/o hemolizadas.

°C.
inicial.
Calibración
Access BR Monitor, se requiere realizar la calibración cada 56 días.
Limitaciones


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0,5–1000 U/mL).
U/mL).
calibrador Access BR Monitor Calibrator (S5), debe informarse el resultado como
superior a ese valor (es decir, las Instrucciones de uso del instrumento >1000 U/mL).
O bien, diluya un volumen de muestra con nueve volúmenes del diluyente de muestras
Access Sample Diluent A.
Las concentraciones de antígeno CA 15-3 en suero o plasma no deben interpretarse
como pruebas absolutas de presencia o ausencia de cáncer. Pueden observarse
concentraciones elevadas en el suero o plasma de pacientes con afecciones benignas,
embarazo u otros trastornos no cancerosos así como en el cáncer de mama y otras
enfermedades malignas. El ensayo Access BR Monitor no debe utilizarse como prueba
de cribado de cáncer.
Especificidad analítica / interferencias

Las muestras que contengan hasta 500 mg/dL de hemoglobina, 40 mg/dL de
bilirrubina, 3000 mg/dL de triglicéridos (triolean) o 6 g/dL de proteína (seroalbúmina
humana) no afectan a la concentración de antígeno CA 15-3 analizada.


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PROCEDIMIENTO ANTÍGENO DEL CÁNCER 19-9 (CA 19-9)
El ensayo Access GI Monitor es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de antígeno CA 19-9
en suero y plasma humanos utilizando Sistemas de Inmunoensayo Access.
Resumen
El antígeno CA 19-9, mucina asociada al grupo sanguíneo Lewis, es un antígeno
asociado a tumores sintetizado por las células de los conductillos biliares y las células
pancreáticas normales humanas y por los epitelios del colon, endometrio y salivar. Por
lo general, en la sangre de sujetos normales o sujetos con afecciones benignas existe
únicamente una pequeña cantidad de antígeno CA 19-9 presente. El antígeno CA 19-9
inicialmente encontrado en pacientes con cáncer colorrectal ha sido identificado
también en pacientes con cánceres de páncreas, del conducto biliar, hepatocelulares,
de estómago y de esófago. Entre las enfermedades no cancerosas en las que se
pueden presentar concentraciones elevadas de antígeno CA 19-9 están la cirrosis, la
colangitis, la hepatitis, la pancreatitis y enfermedades gastrointestinales no malignas.
Las concentraciones de antígeno CA 19-9 pueden monitorizar la respuesta a la terapia.
La presencia de niveles continuamente elevados de antígeno CA 19-9 puede estar
asociada a progresión de la enfermedad. Las concentraciones de antígeno CA 19-9


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continuamente elevadas pueden ser indicio de una escasa respuesta a la terapia

mientras que las concentraciones de antígeno CA 19-9 en disminución pueden ser
indicio de respuesta positiva a la terapia. No se recomienda la utilización del ensayo
Access GI Monitor como herramienta de cribado. Un valor inferior al valor de corte no
es indicio de ausencia de la enfermedad. Es preciso también recurrir a otras pruebas y
procedimientos clínicamente aceptables para llevar a cabo un control de la enfermedad
y proporcionar un tratamiento adecuado a los pacientes.
El ensayo Access GI Monitor es un ensayo inmunoenzimático de dos posiciones
(“sandwich”).

centrifugado.
Evitar el análisis de muestras lipémicas y/o hemolizadas.

°C.
inicial.
Calibración


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Access GI Monitor, se requiere realizar la calibración cada 56 días.
Limitaciones
Los resultados del ensayo Access GI Monitor deben interpretarse a la luz del cuadro
clínico total del paciente.
Las concentraciones de antígeno CA 19-9 en suero o plasma no deben interpretarse
como pruebas absolutas de presencia o ausencia de cáncer. Pueden observarse
concentraciones elevadas en el suero o plasma de pacientes con afecciones benignas o
en otros trastornos no cancerosos, así como en cáncer de páncreas y otras
enfermedades malignas. El ensayo Access GI Monitor no debe utilizarse como prueba
de cribado de cáncer.
0,8-2000 U/mL).
U/mL)
calibrador Access GI Monitor Calibrator (S5), debe informarse el resultado como
superior a ese valor (es decir, > 2000 U/mL). O bien, diluya un volumen de muestra
con nueve volúmenes del diluyente de muestras Access Sample Diluent A.

Las muestras que contienen hasta 50 mg/dL de hemoglobina, 60 mg/dL de bilirrubina,
1000 mg/dL de triglicéridos (trioleína) o 9 g/dL de proteina (seroalbúmina humana) no
afectan a la concentración de antígeno CA 19-9 analizado.


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PROCEDIMIENTO ANTÍGENO DEL CÁNCER 125 (CA 125)
El antígeno CA 125 es un epítopo de una gran glicoproteína similar a la mucina (PM~
1000 kDa)1 que puede encontrarse en concentraciones elevadas en determinados
cánceres de ovario. El CA 125 no tiene una función conocida. El cáncer ovárico es uno
de los tipos de cáncer ginecológico más frecuente, y la cuarta causa más frecuente de
muerte por cáncer en mujeres. El cáncer ovárico en sus etapas más tempranas y
curables, tiende a ser asintomático y numerosos pacientes presentan la enfermedad
extendida en el momento de su descubrimiento. Algunos factores pronóstico
favorables son: la edad joven, etapas tempranas de la enfermedad, tumor bien
diferenciado, y volumen de enfermedad reducido previo a intervención quirúrgica. Las
concentraciones de antígeno CA 125 no tienen un valor pronóstico demostrado cuando
se utilizan para pruebas de screening o en el momento del diagnóstico. Sin embargo,
las concentraciones de antígeno CA 125 si están relacionadas con el estado del
paciente tras el tratamiento inicial.
El ensayo Access OV Monitor es un ensayo inmunoenzimático de dos posiciones
(“sandwich”).


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centrifugado.

°C.
inicial.
Calibración
Access OV Monitor, se requiere realizar la calibración cada 28 días.
Limitaciones
entre el límite inferior de detección y el mayor valor del calibrador aproximadamente
0,5 U/mL y 5000 U/mL.
U/mL).


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OV Monitor Calibrator (S5), debe informarse del resultado como superior a ese valor
(es decir, > 5000 U/mL). O bien, diluya un volumen de muestra con 9 ó 19 volúmenes
de Access OV Monitor Calibrator S0 (cero) o con diluyente de muestras Access Sample
Diluent A.
OV Monitor en suero o plasma no deben interpretarse como prueba absoluta de la
presencia o ausencia de cáncer. Pueden observarse concentraciones elevadas en el
suero o plasma de pacientes con estados benignos o con otros trastornos no
cancerosos, así como en el cáncer ovárico y otras enfermedades metastásicas. El
ensayo Access OV Monitor no debe utilizarse como prueba de screening de cáncer.
Imprecisión
Este ensayo muestra una imprecisión total inferior al 10 % en todo el rango del
ensayo.

Las muestras que contienen hasta 1000 mg/dL de hemoglobina, 20 mg/dL de
bilirrubina, 1800 mg/dL de triglicéridos (trioleína) y concentraciones de proteína
comprendidas entre 5,0 y 9,0 g/dL (seroalbúmina humana) no afectan a la
concentración de antígeno CA 125 analizado.
PROCEDIMIENTO ANTÍGENO CARCINOEMBRIÓNICO (CEA)
El ensayo Access CEA es un inmunoensayo quimioluminiscente con partículas

paramagnéticas para la detección cuantitativa de niveles de antígeno
carcinoembriónico (CEA) en suero humano, utilizando el Sistemas de Inmunoensayo
Access. El CEA medido mediante el Sistemas de Inmunoensayo Access se utiliza como
ayuda para el tratamiento de pacientes con cáncer en los que se han observado
cambios en las concentraciones de CEA.
Resumen
El antígeno carcinoembriónico (CEA), descrito por primera vez por Gold y Freedman en
1965, se aisló de extractos de tejido maligno de adenocarcinomas de colon y tracto
digestivo de fetos normales. Se considera uno de los antígenos asociados a tumores
humanos sobre el que más se ha investigado. CEA es un grupo inmunológicamente
heterogéneo de glicoproteínas, con un peso molecular de aproximadamente 200 000
daltons, que contiene de 50 a 85% de carbohidratos en peso.


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CEA forma parte de la superfamilia de la inmunoglobulina y, aparentemente, realiza

funciones como molécula de adhesión intercelular. Asimismo, se han descubierto
moléculas relacionadas estructuralmente con la de CEA (como, por ejemplo, NCA,
NCA-2 y NFA) en tejidos sanos de adulto.
La medida de CEA en suero ha demostrado ventajas sustanciales en la prognosis y
seguimiento de pacientes con tumores malignos, en particular, cáncer colorectal. Las
medidas en serie pueden utilizarse para el seguimiento de pacientes con progresión,
regresión o recurrencia de cáncer tras su tratamiento. La elevación persistente de CEA
tras el tratamiento terapéutico o la intervención quirúrgica indica enfermedad residual
o recurrencia de la misma, mientras que la disminución de los niveles a los rangos
normales indica que la intervención ha tenido éxito.
El ensayo Access CEA es un ensayo inmunoenzimático en dos lugares (sandwich) en el
que se utilizan dos anticuerpos monoclonales de ratón anti-CEA (MAb) que reaccionan
con diferentes epítopos de CEA.

 La muestra recomendada es suero.
 Permitir que las muestras de suero se coagulen completamente antes de su
centrifugado.

 Debe conservarse en posición vertical y en frigorífico, a una temperatura de 2 a 10
°C.
 Conservar en frigorífico de 2 a 10°C durante un mínimo de dos horas antes de
 Permanece estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta si se
 Permanece estable a una temperatura de 2 a 10 °C durante 28 días después del
uso inicial.


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Calibración
Access CEA, se requiere realizar la calibración cada 28 días.
Limitaciones
Las muestras pueden medirse con exactitud dentro del rango comunicable del límite
inferior de detección y el valor más alto del calibrador (aproximadamente 0,1-1000
ng/mL). Si una muestra contiene más del valor declarado del calibrador Access CEA
Calibrator (S5) más elevado, comunicar el resultado como superior a ese valor (es
decir, > 1000 ng/mL). Alternativamente, diluir un volumen de muestra con nueve
volúmenes de calibrador Access CEA Calibrator S0 (cero) o el diluyente de muestras
Access CEA Diluent. Después de ensayar la muestra diluida, multiplicar el valor
calculado por un factor de dilución de diez (10). Si una muestra contiene una cantidad
menor que el límite inferior de detección para el ensayo, comunicar los resultados
como menores que el límite inferior de detección (< 0,1 ng/mL).
El ensayo Access CEA no debe utilizarse para el diagnóstico o despistaje de cáncer.
Interferencias
La hemoglobina, triglicéridos, la bilirrubina, la seroalbúmina humana y el factor
reumatoide, probados en concentraciones de 500 mg/dL, 1800 mg/dL, 30 mg/dL, 5
g/dL y 500 IU/mL, no interfieren con el ensayo Access CEA.
PROCEDIMIENTO ALFAFETOPROTEÍNA (AFP)
El ensayo Access AFP es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de alfa-fetoproteína
(AFP) en suero humano utilizando Sistemas de Inmunoensayo Access. Es una ayuda
en el manejo de pacientes con tumores productores de AFP.
Resumen
Alfa-fetoproteína (AFP) es una glucoproteína de cadena única, con una masa molecular
de 70 000 daltons. AFP es muy similar a la albúmina, y juntas, ambas proteínas
constituyen las dos proteínas principales en la circulación fetal. La producción de AFP
tiene lugar principalmente en el hígado fetal y el saco embrionario, y en menor grado
en otros órganos. AFP se detecta en la circulación fetal a los 30 días de la concepción.
Tras alcanzar una concentración máxima a las 13 semanas de gestación, los niveles
disminuyen gradualmente hasta el nacimiento. A los dos años de edad, sólo pueden
detectarse trazas de AFP en personas normales. Los niveles elevados de AFP
reaparecen en adultos con determinadas enfermedades malignas y en el embarazo.


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El ensayo Access AFP es un ensayo inmunoenzimático de dos posiciones ("sandwich").

La muestra recomendada es suero.
 Permitir que las muestras de suero se coagulen completamente antes de su
centrifugado.
 Descongelar las muestras una sola vez.

 Debe conservarse en posición vertical y en frigorífico, a una temperatura de 2 a
10°C.
 Conservar en frigorífico de 2 a 10°C durante un mínimo de dos horas antes de
 Permanece estable hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta si se
 Permanece estable a una temperatura de 2 a 10°C durante 28 días después del
uso inicial.
Calibración
Access AFP, se requiere realizar la calibración cada 28 días.
Limitaciones
0,5–3000 ng/mL [0,41–2478 IU/mL]). El intervalo analítico del ensayo Dil-AFP es de
2700 ng/mL a aproximadamente 51 000 ng/mL.
ng/mL [< 0,41 IU/mL]).


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En el Analizador de inmunoensayo Access no está disponible el ensayo Dil-AFP.

Las muestras que contienen hasta 25 mg/dL (427 μmol/L) de bilirrubina, las muestras
lipémicas que contengan el equivalente a 520 mg/dL de triglicéridos, 560 mg/dL de
fosfolípidos, 380 μEq/L de ácidos grasos libres y las muestras hemolizadas que
contengan hasta 1200 mg/dL (12 g/L) de hemoglobina no afectan la concentración de
AFP analizado.
Además, las muestras con 0,6 g/dL (6 g/L) de albúmina bovina añadida a la albúmina
endógena de las muestras no afectan a la concentración de Access AFP analizado.
PROCEDIMIENTO VITAMINA B12
El ensayo Access Vitamin B12 es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de

partículas paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de
vitamina B12 en suero y plasma (heparina) humanos utilizando Sistemas de
Inmunoensayo Access.
Se conocen con el nombre de Vitamina B12 todas aquellas sustancias que pertenecen
al grupo de las denominadas cobalaminas. Se componen de un sistema de cuatro
anillos de pirrol que rodean a un átomo de cobalto central y que difieren en cuanto a
los grupos laterales que se unen al átomo de cobalto. La metilcobalamina es la forma
predominante en suero mientras que la forma celular predominante es la 5'
desoxiadenosilcobalamina. La cianocobalamina (PM 1355) es la forma más estable y es
utilizada como compuesto de referencia para medir concentraciones de cobalamina en
suero.


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La causa más común es un defecto en la secreción del factor intrínseco que provoca
una absorción defectuosa de la vitamina B12 procedente de los alimentos. Este estado
se denomina anemia perniciosa y es más frecuente en las personas mayores de 50
años. Otras causas de deficiencia en vitamina B12 son la gastrectomía, malabsorción
debida a resecciones quirúrgicas y diversas enfermedades bacterianas o inflamatorias
que afectan al intestino delgado. La cantidad de vitamina B12 absorbida es
directamente proporcional a la longitud de intestino funcional. La deficiencia en
vitamina B12 debida a un consumo dietético insuficiente es muy poco frecuente y tan
sólo se produce tras años de abstinencia de todos los productos de origen animal.
Se han asociado niveles elevados de vitamina B12 al embarazo, a la utilización de
anticonceptivos orales y a enfermedades mieloproliferativas como la leucemia crónica
granulocítica. No se ha determinado que un nivel elevado de vitamina B12, por sí sólo,
ocasione enfermedades clínicas.
El ensayo de vitamina B12 Access es un ensayo inmunoenzimático de unión
competitiva.
Muestra
Permitir que las muestras de suero se coagulen completamente antes de su
centrifugado.
Separe físicamente el suero o el plasma lo antes posible para que no entren en
muestras a una temperatura de 2 a 8 °C. Si el ensayo no se realizara dentro de las 24
horas siguientes, o para el transporte de las muestras, congelar a una temperatura de
-20 °C o inferior.

°C.
almacena a una temperatura de


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2 a 10 °C.
inicial.
Calibración
Access Vitamin B12, se requiere realizar la calibración cada 21 días.
Limitaciones
50-1500 pg/mL [37-1107 pmol/L]).
ensayo, se deben informar los resultados como inferiores a ese valor (es decir, < 50
pg/mL [< 37 pmol/L]).
calibrador Access Vitamin B12 Calibrator (S5), debe informarse del resultado como
superior a ese valor (es decir, > 1500 pg/Ml [> 1107 pmol/L]). O bien, diluya un
volumen de muestra con 4 volúmenes de calibrador Access Vitamin B12 Calibrator S0
(cero) o bien, diluya un volumen de muestra con 4 volúmenes de diluyente de
muestras Access Sample.

Las muestras que contienen hasta 10 mg/dL (171 μmol/L) de bilirrubina, 9 g/dL (90
g/L) de proteína total, y las muestras lipémicas que contienen el equivalente a 1800
mg/dL (20,32 mmol/L) de triglicéridos no afectan a la concentración de vitamina B12
ensayada.


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PROCEDIMIENTO CORTISOL
El ensayo Access Cortisol es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de cortisol en suero,
plasma (heparina, EDTA) y orina humanos utilizando Sistemas de Inmunoensayo
Access.
El cortisol es el principal glucocorticoide producido y segregado por la corteza
suprarrenal. Afecta
(a) al metabolismo de proteínas, grasas e hidratos de carbono,
(b) al mantenimiento de la integridad muscular y miocárdica, y
(c) a la supresión de las actividades inflamatoria y alérgica.
Las alteraciones anormales en los niveles de cortisol se producen debido a un
disfunción hipotalámica, hipofisaria o suprarrenal. Si estos trastornos no se
diagnostican ni se tratan, pueden conducir a un desequilibrio metabólico severo que


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puede representar una amenaza para la vida. La medición del cortisol sérico o
plasmático —utilizando los niveles matutinos y vespertinos y/o pruebas de esfuerzo
como la estimulación de la ACTH o la supresión de la dexametasona— facilita el
diagnóstico de enfermedades relacionadas con la glándula suprarrenal. En el Síndrome
de Cushing se encuentran niveles de cortisol en exceso (hiperfunción cortico adrenal),
mientras que, en la Enfermedad de Addison, los niveles de cortisol se encuentran
disminuidos (insuficiencia cortico adrenal).
El cortisol ligado a proteínas se encuentra protegido del metabolismo hepático. El
cortisol no ligado (o libre) en suero, es metabolizado por el hígado, transformándose
en una amplia gama de formas o metabolitos. Muchas de estas formas (formas
conjugadas, glocorónidas o sulfatadas) son hidrosolubles y por tanto, eliminadas
rápidamente a través de la orina. Una pequeña cantidad (<100 μg/24 horas) de
cortisol y otros metabolitos extraíbles son también eliminados a través de la orina.
El ensayo de cortisol Access es un ensayo inmunoenzimático de unión competitiva.

1. Las muestras recomendadas son suero, plasma (heparina, EDTA) y orina.
2. Para la manipulación, proceso y conservación de las muestras de sangre deben
cumplirse las siguientes recomendaciones:
las muestras, congelar a una temperatura de -20 °C o inferior.
Para muestras de orina, recoger la orina de 24 horas en un envase con 10 gm de ácido
bórico como conservante. Anotar el volumen total de orina. Recoger una alícuota de
10 mL de la muestra bien mezclada para realizar el ensayo. Si la muestra de orina
tiene aspecto turbio o presenta precipitados, centrifugar la muestra a 700 x g durante
5 minutos y usar el sobrenadante para realizar el ensayo. Analizar las muestras de
orina directamente o realizar un procedimiento de extracción antes de su análisis.

°C.


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inicial.
Calibración
Access Cortisol, se requiere realizar la calibración cada 28 días.
Limitaciones
1. Las muestras pueden medirse con precisión dentro del rango analítico comprendido
0,4–60,0 μg/dL [11–1655 nmol/L]).
μg/dL [< 11 nmol/L]).
calibrador Access Cortisol Calibrator (S5), debe informarse del resultado como superior
a ese valor (es decir, > 60,0 μg/dL [> 1655 nmol/L]). O bien, diluya un volumen de
muestra con un volumen de calibrador Access Cortisol Calibrator S0 (cero) que
también está disponible como Access Cortisol Calibrator S0 Cat. Núm 33606. Consulte
los manuales del sistema correspondientes o el sistema de ayuda para obtener
instrucciones sobre la introducción de una dilución de la muestra en una solicitud de
test. El sistema informa los resultados ajustados para la dilución.

Las muestras que contienen hasta 10 mg/dL (171 μmol/L) de bilirrubina, muestras
hemolizadas que contienen hasta 500 mg/dL de hemoglobina, y las muestras
lipemicas que contienen el equivalente a 1800 mg/dL (20,32 mmol/L) de triglicéridos,
no afectan a la concentración del cortisol ensayado.


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PROCEDIMIENTO FERRITINA
El ensayo Access Ferritin es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de ferritina en suero
y plasma (heparina) humanos utilizando Sistemas de Inmunoensayo Access.
La ferritina es una proteína esférica de gran tamaño compuesta por 24 subunidades
unidas por enlaces no covalentes, cuyo peso molecular es de aproximadamente 450
000. Las subunidades forman una cubierta que rodean un núcleo central que contiene
cantidades variables de hidroxifosfato férrico. Una molécula de ferritina puede fijar
entre 4000 y 5000 átomos de hierro, lo que convierte a la ferritina en la principal
proteína almacenadora de hierro en el organismo.


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Se encuentra principalmente en el citoplasma de las células del sistema

reticuloendotelial, y anteriormente se creía que, en situaciones normales, la ferritina
no aparecía en el plasma ni en el líquido extracelular. Sin embargo, el desarrollo por
Addison y otros en 1972, de una técnica inmunorradiométrica sensible resultó en el
descubrimiento de que la ferritina está presente en todos los sueros humanos
normales.4 A través de éste y otros trabajos, se determinó que la concentración de
ferritina era directamente proporcional a las reservas de hierro totales del organismo,
con lo que los niveles de ferritina se convirtieron en una herramienta diagnóstica
común en la evaluación de los niveles de hierro.
Muestra
Reactivos
°C.
inicial.
Calibración
Access Ferritin, se requiere realizar la calibración cada 28 días.
Limitaciones


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0,2-1500 ng/mL [μg/L]).
ensayo, se debe informar los resultados como inferiores a ese valor (es decir, < 0,2
ng/mL [μg/L]).
PROCEDIMIENTO TSH
El ensayo Access TSH (3.er IS) es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de

partículas paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de
hormona tiroideoestimulante humana (tirotropina, TSH, hTSH) en suero y plasma
humanos utilizando los sistemas de inmunoensayo de Access. Este ensayo puede
ofrecer resultados de la TSH
de 3.ª generación.
La hormona tiroideoestimulante humana es una hormona glicoproteica que consta de
dos subunidades no ligadas de forma covalente: una subunidad α, que es casi idéntica


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a las subunidades α de hormona luteinizante (hLH) humana, la hormona

foliculoestimulante (hFSH) humana y la gonadotropina coriónica humana (hCG) y una
subunidad β, responsable de la especificidad inmunológica y biológica.
La TSH liberada de la hipófisis anterior es la principal reguladora de la función tiroidea,
estimulando la síntesis y liberación de las hormonas tiroideas tiroxina (T4) y
triyodotironina (T3). La T3 y la T4 regulan los procesos bioquímicos esenciales para el
metabolismo normal. La síntesis y secreción de la TSH se estimulan mediante la
hormona liberadora
de tirotropina (TRH), producida por el hipotálamo como respuesta a niveles bajos de
T3 y T4 circulante. En contraste, los niveles elevados de T3 y T4 suprimen la
producción de TSH. En conjunto, este sistema de respuesta negativa se denomina
como el eje hipotálamo-hipófisis-tiroides. Cualquier alteración de la función del eje
puede influir en los niveles en circulación de TSH, T4 y T3.
Muestra
1. Suero (gel y no gel) y plasma (heparina de litio) son las muestras recomendadas.
- Los tubos de no anticoagulados que contienen un separador de gel se deben
almacenar en posición vertical tan pronto como finalice la mezcla.
• Separe físicamente el suero o el plasma de las células lo antes posible. Cierre el tubo
de muestra de forma hermética e inmediata.
• Se deben almacenar las muestras herméticamente cerradas a temperatura ambiente
(15 ºC a 30 °C) durante un periodo de tiempo de hasta 18 horas.
• Si el ensayo no se realizara dentro de las 18 horas siguientes, refrigerar las
• Si el ensayo no se realizara dentro de siete días, se debe congelar a una
temperatura de –20 °C o inferior.
• Las muestras congeladas se pueden almacenar hasta un máximo de 90 días antes de
realizar las pruebas.
• No descongele las muestras más de dos veces.

°C.
almacena a una temperatura de


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2 a 10 °C.
inicial.
Calibración
Se requiere una curva de calibración activa para todas las pruebas. Para el ensayo
Access TSH (3.er IS) se requiere calibración cada 28 días.
Limitaciones
entre el Límite de detección (LD) y el mayor valor del calibrador (aproximadamente
entre 0,005 y 50,0 μUI/mL [mUI/L]).
0,005 μUI/mL [mUI/L]).
• Si una muestra contiene más del valor indicado del calibrador más alto Access TSH
(3er IS) (S5), informe de que el resultado es superior a ese valor (es decir, > 50,0
μUI/mL [mUI/L]). De manera alternativa, diluya un volumen de muestra con 9
volúmenes de tampón de lavado II Access o tampón de lavado II UniCel DxI.
PROCEDIMIENTO INSULINA ULTRASENSIBLE
El ensayo Access Ultrasensitive Insulin es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de

partículas paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de insulina
en suero y plasma humanos (EDTA) utilizando Sistemas de
Inmunoensayo Access.
La insulina es una hormona secretada por las células beta del páncreas. La insulina
regula la incorporación y utilización de la glucosa, y también interviene en la
regulación de la síntesis de proteínas y el almacenamiento de los triglicéridos.


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Un aumento en la cantidad de glucosa en circulación estimula la secreción de insulina.

A su vez, la insulina estimula la incorporación de la glucosa en los tejidos e inhibe la
degradación del glucógeno en el hígado.
Cuando el nivel de glucosa vuelve a los valores basales, también lo hace la insulina.
Uno de los principales usos clínicos de la insulina es el diagnóstico y manejo de la
diabetes mellitus, una afección que aparece cuando la glucosa no se incorpora
adecuadamente a los tejidos. El resultado es hiperglucemia crónica.
El ensayo de insulina ultrasensible Access es un ensayo inmunoenzimático simultáneo
en un solo paso (“sándwich”).
Muestra
Los tipos de muestras recomendados son suero y plasma (EDTA) y no deben
intercambiarse.
No utilizar muestras hemolizadas, ya que la hemólisis libera enzimas que degradan la
insulina.

°C.
inicial.
Calibración
Access Ultrasensitive Insulin, se requiere realizar la calibración cada 28 días.


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Limitaciones
0,03-300 μUI/mL [0,21-2100 pmol/L]).
μUI/mL [< 0,21 pmol/L]).
Ultrasensitive Insulin Calibrator (S5), debe informarse del resultado como superior a
ese valor (es decir, > 300 μUI/mL [> 2100 pmol/L]). O bien, diluya un volumen de
muestra con 9 volúmenes de Access Ultrasensitive Insulin Calibrator S0 (cero) o con
diluyente de muestras Access Sample Diluent A.
Los pacientes tratados con insulina tienen predisposición a desarrollar anticuerpos
anti-insulina. Esos anticuerpos pueden interferir con el ensayo.
PROCEDIMIENTO PTH INTACTA
El ensayo Access Intact PTH es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paratiroidea intacta (paratirina, PTH) en suero y plasma humanos utilizando Sistemas
de Inmunoensayo Access. Su empleo está indicado para facilitar el diagnóstico de
hiperparatiroidismo, hipoparatiroidismo e hipercalcemia de origen tumoral, y puede
utilizarse en intervenciones médicas. Los resultados del ensayo deben utilizarse junto
con otros resultados clínicos para facilitar la toma de decisiones del médico sobre
tratamientos individuales de pacientes.


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La hormona paratiroidea (PTH) es sintetizada en las células principales de las
glándulas paratiroideas y almacenada en el interior de gránulos de secreción de tipo
neuroendocrino densos a la espera de su secreción. La PTH intacta es un polipéptido
de 84 aminoácidos de 9,43 kilodaltons de peso molecular. Una vez secretado, sufre
una rápida proteolisis y da lugar a la formación de varios fragmentos C-terminales
circulantes. Algunos de estos fragmentos vuelven a entrar en el torrente sanguíneo y
son depurados principalmente mediante filtración glomerular, una importante vía de
aclaramiento de PTH. El péptido intacto y biológicamente activo tiene una semivida en
la circulación inferior a 5 minutos.
La PTH desempeña un papel fundamental en el mantenimiento de la homeostasis del
calcio y su medida facilita el diagnóstico de los trastornos relacionados con el calcio.
Muestra
Las muestras recomendadas son suero y plasma (heparina y EDTA).
 Para muestras de plasma (heparina y EDTA):
- Conservar las muestras cerradas herméticamente a temperatura ambiente (de 15 a
- Si el ensayo no va a completarse en 8 horas, refrigerar las muestras a entre 2 y 8ºC
durante un periodo de tiempo no superior a 48 horas.
- Si el ensayo no va a completarse en 48 horas, o para transportar las muestras,
congelar las muestras a una temperatura de -20 °C o inferior durante un periodo de
tiempo no superior a 6 meses.
 Para muestras de suero:
- Almacenar las muestras herméticamente cerradas a temperatura ambiente (15 a 30
°C) durante un periodo de tiempo no superior a 4 horas.
- Si el ensayo no va a completarse en 4 horas, refrigerar las muestras a entre 2 y 8 °C
durante un periodo de tiempo no superior a 8 horas.
- Si el ensayo no va a completarse en 8 horas, o para transportar las muestras,
congelar las muestras a una temperatura de -20 °C o inferior durante un periodo de
tiempo no superior a 6 meses.

°C.


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inicial.
Calibración
Access Intact PTH, se requiere realizar la calibración cada 28 días.
Limitaciones
3500 pg/mL [371 pmol/L]).
• Si una muestra contiene menos que la sensibilidad analítica para el ensayo, informe
de que los resultados son inferiores a ese valor (es decir, 1 pg/mL [< 0,1 pmol/L]).
calibrador Access Intact PTH Calibrator (S5), debe informarse el resultado como
superior a ese valor (es decir, > 3500 pg/mL [> 371 pmol/L]). O bien, diluya un
volumen de muestra con nueve volúmenes del diluyente de muestras Access Sample
Diluent A.
PROCEDIMIENTO ALFAFETOPROTEINAS (AFP)
El ensayo Access AFP es un inmunoensayo de quimioluminiscencia de partículas

paramagnéticas para la determinación cuantitativa de los niveles de alfa-fetoproteína
(AFP) en suero humano utilizando Sistemas de Inmunoensayo Access. Es una ayuda
en el manejo de pacientes con tumores productores de AFP.
Resumen
Alfa-fetoproteína (AFP) es una glucoproteína de cadena única, con una masa molecular
de 70 000 daltons. AFP es muy similar a la albúmina, y juntas, ambas proteínas
constituyen las dos proteínas principales en la circulación fetal. La producción de AFP


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tiene lugar principalmente en el hígado fetal y el saco embrionario, y en menor grado

en otros órganos. AFP se detecta en la circulación fetal a los 30 días de la concepción.
Tras alcanzar una concentración máxima a las 13 semanas de gestación, los niveles
disminuyen gradualmente hasta el nacimiento. A los dos años de edad, sólo pueden
detectarse trazas de AFP en personas normales. Los niveles elevados de AFP
reaparecen en adultos con determinadas enfermedades malignas y en el embarazo.
El ensayo Access AFP es un ensayo inmunoenzimático de dos posiciones ("sandwich").

La muestra recomendada es suero.
centrifugado.

10°C.
• Conservar en frigorífico de 2 a 10°C durante un mínimo de dos horas antes de
• Permanece estable a una temperatura de 2 a 10°C durante 28 días después del uso
inicial.
Calibración
Access AFP, se requiere realizar la calibración cada 28 días.
Limitaciones


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0,5–3000 ng/mL [0,41–2478 IU/mL]).
ng/mL [< 0,41 IU/mL]).

Las muestras que contienen hasta 25 mg/dL (427 μmol/L) de bilirrubina, las muestras
lipémicas que contengan el equivalente a 520 mg/dL de triglicéridos, 560 mg/dL de
fosfolípidos, 380 μEq/L de ácidos grasos libres y las muestras hemolizadas que
contengan hasta 1200 mg/dL (12 g/L) de hemoglobina no afectan la concentración de
AFP analizado.
16.4 PROCEDIMIENTO HB GLICOSILADA-EQUIPO D10
Uso previsto
Short Program (Programa corto):
El Bio-Rad D-10 Dual Program ha sido diseñado para la determinación porcentual de
los niveles de hemoglobina A 1c en sangre humana utilizando la cromatografía líquida
de alta resolución por intercambio iónico (HPLC).
Extended Program (Programa ampliado):
El Bio-Rad D-10 Dual Program ha sido diseñado para la determinación porcentual de
los niveles de hemoglobina A2, F y A 1c, así como para la detección de variantes
anormales de hemoglobinas en sangre humana utilizando la cromatografía líquida de
alta resolución por intercambio iónico (HPLC).


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El Bio-Rad D-10 Dual Program ha sido diseñado para uso exclusivamente profesional.
Para uso en diagnóstico in vitro.
Resumen y descripción de la prueba

El D-10 Dual Program se compone de dos programas distintos.
Short Program:
Un programa de 3 minutos que permite determinar el porcentaje de área de HbA 1c
únicamente. Este programa requiere el uso del Dual Program Calibrator/Diluent Set.
Extended Program:
Un programa ampliado de 6,5 minutos que permite determinar el porcentaje de área
de hemoglobinas A2, F y A1c. Este programa requiere el uso
del Dual Program Calibrator/Diluent Set.
El usuario puede alternar entre ambos programas sin cambiar los tampones ni el
cartucho y sin volver a
acondicionar el sistema.
Hemoglobina A1c:
La diabetes mellitus es una enfermedad que se caracteriza por hiperglucemia a causa
de la incapacidad del organismo de utilizar la glucosa en la sangre para producir
energía. En la diabetes Tipo 1, el páncreas no fabrica insulina y, por tanto, la glucosa
en la sangre no puede entrar en las células para ser utilizada como energía. En la
diabetes Tipo 2, el páncreas no fabrica suficiente insulina o el organismo es incapaz de
utilizarla correctamente.
Las complicaciones de la diabetes, que afectan a los ojos, los riñones,
los nervios y los grandes vasos sanguíneos (arterias) del corazón, el cerebro y las
extremidades, son
comunes a ambas formas de diabetes.
La diabetes mellitus afecta a más del 5% de la población mundial.
La terapia para la diabetes exige el mantenimiento a largo plazo de un nivel de
glucosa en sangre que sea lo más cercano posible al normal, a fin de minimizar el
riesgo de complicaciones vasculares a largo plazo.
Una simple medida de la glucosa en sangre en ayunas es una indicación del estado del
paciente en las
horas previas, pero puede no ser representativa del verdadero estado de la regulación
de la glucosa en sangre.
Un índice preciso de la concentración media de glucosa en sangre puede establecerse
mediante la medida de los niveles de hemoglobina A1c (HbA1c) cada dos o tres
meses.
La glicohemoglobina HbA1c se forma en dos pasos durante el proceso de glicosilación
no enzimática de la hemoglobina A (HbA). El primer paso es la formación de una
aldimina inestable (Hb A1 lábil o pre-Hb A1c), en una reacción reversible entre el
grupo carbonilo de la glucosa y el N-terminal del aminoácido valina de la cadena ß de


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hemoglobina. La formación de la Hb A1c lábil es directamente proporcional a la

glucemia.
Durante la circulación de los glóbulos rojos, parte de la Hb A1c lábil se transforma
(Reagrupamiento de Amadori) en una cetoamina estable, HbA 1c.
El nivel de HbA 1c es proporcional tanto a la concentración media de glucosa, como a
la vida de los glóbulos rojos en circulación. Por consiguiente, la medición de HbA 1c ha
sido aceptada para el control clínico de la diabetes mediante supervisión rutinaria.
Los métodos para determinar el nivel de HbA 1c incluyen la electroforesis, el
inmunoensayo y la cromatografía.
La determinación de HbA1c con el D-10 Dual Program ha sido optimizada para eliminar
interferencias procedentes de variantes de la hemoglobina, A1c lábil y hemoglobina
carbamilada. Para obtener más información, consulte los apartados.
Limitaciones del procedimiento y Características de funcionamiento
Hemoglobinas A 2 y F:
Una talasemia de aparición frecuente, la beta-talasemia (talasemia ß), se encuentra
a menudo en el estado heterocigótico como talasemia ß menor o rasgo de talasemia ß.
La sangre de un adulto contiene principalmente hemoglobina A (HbA), un pequeño
porcentaje de hemoglobina A2 (HbA 2) y trazas de hemoglobina fetal (HbF). Los
portadores de talasemia ß suelen tener niveles de HbA 2 entre 4 y 9% y de HbF entre
1 y 5%.
El ensayo del D-10 Dual Program HbA 2/F/A 1c puede utilizarse para el screening de
talasemia ß mediante la cuantificación de HbA 2 y HbF.
Las variantes de hemoglobina más frecuentes son las hemoglobinas S, E, C y D.
La presunta identificación de estas variantes de hemoglobina se efectúa utilizando
intervalos de tiempo de retención, como el “intervalo S” y el “intervalo C”.
La determinación definitiva de las variantes concretas según su tiempo de elución se
deja al criterio experto del usuario. Para lograr una confirmación positiva de una
variante de hemoglobina concreta, es necesario utilizar métodos de separación
alternativos.
Principio del procedimiento
El D-10 Dual Program está basado en la separación cromatográfica de los analitos
mediante principios de cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) por intercambio
iónico. Las muestras se diluyen automáticamente en D-10 y se inyectan en el cartucho
de análisis. El D-10 crea un gradiente de tampones programado de fuerza iónica
creciente en el cartucho, donde las hemoglobinas se separan en función de sus
interacciones iónicas con el material del cartucho. Después, las hemoglobinas así
separadas atraviesan la célula de flujo del fotómetro, donde se miden los cambios de
absorbancia a 415 nm.
El software de D-10 procesa los datos reunidos en cada análisis. Se utilizan dos niveles
de calibración para determinar cuantitativamente los valores de HbA 2/F/A1c. Para
cada muestra se genera un informe y un cromatograma. La zona de A1c se calcula


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utilizando un algoritmo de Gauss modificado exponencialmente que excluye los picos

de A1c lábil y hemoglobina carbamilada de los picos de A 1c.
Toma y manipulación de muestras

Tipo de muestra: Sangre.
Precauciones para la toma de muestras

Todo material de origen humano debe ser considerado potencialmente infeccioso y
manipularse de acuerdo con los procedimientos habituales de seguridad biológica.
Aditivos y conservantes de las muestras

Las muestras de sangre deben recogerse en un tubo con vacío que contenga EDTA.
Almacenamiento de las muestras Las muestras de sangre pueden almacenarse un
máximo de 4 días a una temperatura entre 2 y 8°C.
Preparación de las muestras

Antes del ensayo, permita que los tubos de muestra alcancen la temperatura ambiente
(entre 15 y 30°C). Las muestras permanecerán estables a temperatura ambiente
durante 1 día. No es necesario preparar la muestra. No es necesario mezclar los tubos
antes de cargarlos. Los tubos se introducen en la gradilla destinada a tal fin y se
colocan en el D-10. Asegúrese de que los códigos de barras de las muestras estén
mirando hacia la parte posterior del instrumento.
Utilice las gradillas especiales para tubos de 12, 13 y 14 mm de diámetro. Retire todos
los adaptadores de gradilla para tubos de 16 mm de diámetro. Pueden utilizarse tubos
con una altura entre 75 y 100 mm.
Si la muestra se encuentra en un tipo o tamaño de tubo que no es el normal, o si hay
menos de 2,0 mL de muestra en el tubo, es preciso diluirla previamente. Para hacerlo,
introduzca con una pipeta 1,5 mL de una solución de lavado/diluyente en un vial de
1,5 mL etiquetado, y después 5 μL de la muestra de sangre. Tape el vial de la muestra
y mézclela bien. Utilice un adaptador especial para viales de 1,5 mL.
Signos de inestabilidad o deterioro de los reactivos

Si los reactivos se han congelado durante el transporte, mezcle el contenido de cada
botella invirtiéndola con suavidad antes de instalarla en el instrumento.
Almacene todos los reactivos a la temperatura indicada en la etiqueta y no los use
después de la fecha de caducidad.
No emplee el material reconstituido (calibrador, cebador) después de la fecha de
caducidad del reactivo reconstituido.
No utilice reactivos que muestren signos de decoloración, turbidez o precipitado.
No utilice ningún reactivo cuyo envase muestre señales de fuga.
No utilice el calibrador o el cebador de sangre si el liofilizado es color marrón o el vial
está roto. Si el material liofilizado contiene material insoluble, deséchelo y reconstituya
un nuevo vial.


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El D-10 Dual Extended Program proporciona una determinación del porcentaje de área
de las hemoglobinas A2, F y A1c, así como la separación cualitativa de hemoglobinas
normales y variantes anormales de aparición habitual. También puede producirse la
elución de otras variantes de aparición menos frecuente dentro de los intervalos
establecidos para la identificación de analitos.
Para lograr una confirmación positiva de una variante de hemoglobina concreta, es
necesario utilizar métodos de separación alternativos.
•Si la muestra contiene más de un 16,5% de HbF, puede producirse la elución de HbF
en el intervalo A 1c/CHb o A1c y no se informará de la presencia de HbF. En las
muestras con resultados de HbA 1c superiores a 18,4%, debe comprobarse la posible
presencia de interferencia de variantes de hemoglobina.
•La presencia de A1c superior a 2,6% puede afectar negativamente a la cuantificación
de hemoglobina F.
•Una anemia ferropénica concurrente puede enmascarar niveles elevados de HbA 2.
A fin de confirmar en laboratorio un diagnóstico de rasgo de talasemia ß, los niveles de
HbA 2 deben considerarse en combinación con los antecedentes familiares y los datos
de laboratorio, como el hierro sérico y la capacidad de fijación de hierro, la morfología
de los glóbulos rojos, el hematocrito de la hemoglobina y el volumen corpuscular
medio.
•Se ha observado la coelución de las hemoglobinas D y E con la HbA 2. En las
muestras con niveles de HbA 2 superiores a 10%, debe comprobarse la posible
presencia de interferencia de variantes de hemoglobina.
•Para la completa elución de la hemoglobina E (HbE) en el sistema es necesario un
diseño determinado de válvula de inyección. Si sospecha que existen muestras de HbE
en su población de pacientes o tiene alguna duda sobre la configuración de su sistema,
solicite asistencia técnica a su oficina regional de Bio-Rad. Los resultados de HbF y
HbA
1c no se ven afectados por la configuración de la válvula de inyección.
•Las muestras neonatales deben analizarse con el Bio-Rad VARIANTSickle Cell Short
Program para identificar variantes anormales de hemoglobina en los recién nacidos
16.5 PROCEDIMIENTO GASES ARTERIALESGASES ARTERIALES
Introducción
El mantenimiento de la homeostasis ácido base es una función vital de los seres vivos.
El análisis de los gases en sangre arterial es una medida útil en la evaluación de la
función respiratoria y del equilibrio ácido base. Es un elemento valioso para seguir la
evolución de un paciente y tomar importantes decisiones como pueden ser la
intubación endotraqueal, la asistencia ventilatoria, y el manejo adecuado de los
problemas metabólicos.


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Está indicado para:

-Evaluar la ventilación alveolar (pCO2), el equilibrio ácido base (pCO2 y pH) y la
oxigenación (pO2 y Saturación de O2).
- Cuantificar la respuesta del paciente a las intervenciones terapéuticas
(oxigenoterapia, ventilación mecánica) y/o evaluación de diagnósticos.
-Realizar el seguimiento de la severidad y evolución de la severidad de la enfermedad
pulmonar.
Objetivos
Estandarizar el proceso de medición de las muestras para gasometría llegadas al
Laboratorio de Bioquímica y Urgencia, para lograr resultados representativos y evitar
mediciones en las que factores pre analíticos o analíticos, alteren los resultados del
análisis.
Muestra
Muestra arterial o venosa tomada en jeringa heparinizada, cerrada herméticamente.
Se debe enviar inmediatamente al Laboratorio y procesar antes de 30 minutos si llega
a temperatura ambiente.
Desarrollo
 Antes de llevar a cabo el muestreo para análisis de Gases en sangre, se debe
considerar que los parámetros a medir son lábiles, en particular la pO2.
 La sangre es un medio vivo, la cual consume uno de los parámetros a ser
medidos, genera otro y se vuelve ácida.
 Las mediciones de gases en sangre son de carácter urgente, con frecuencia de
importancia vital para evaluar el estado de oxigenación y de regulación ácido
base, la implantación rápida de un tratamiento apropiado o una modificación al
tratamiento actual.
 Las recomendaciones de conservación y temperatura indican que la demora en
el análisis no debe exceder a los 30 minutos de la extracción, conservado a
temperatura ambiente.
 Con Equipo operativo (mantenimiento y controles OK) y teniendo la precaución
de usar los elementos de protección personal apropiados (guantes y pechera),
proceder de la siguiente manera:
 Homogeneizar suavemente la muestra haciéndola rodar entre ambas manos.
 En la pantalla del equipo en modo LISTO, seleccionar o deshabilitar la selección
de los parámetros deseados.


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 Asegurarse de que la zona de acceso del equipo, disco transparente llamado

T&D, esté completamente abierto y el puerto de entrada esté visible.
 Retirar tapa de la jeringa, eliminar la(s) primeras gotas en recipiente destinado
para ello y
colocar dispositivo atrapa coágulos (Clot Catcher), para evitar que se tape el
equipo.
 Insertar la jeringa rápidamente en el puerto de entrada del equipo.
 Inyectar la muestra lentamente, hasta que suene la señal acústica y aparezca el
mensaje “Extraer el contenedor de la muestra”. Sin pulsar ninguna tecla, retirar
la jeringa.
 Se recomienda rechazar muestras con coágulos visibles o con burbujas.
 Con la muestra visible en el capilar del equipo, acercar el Scanner (pistola) al
código de barras que identifica la muestra.
 Retirar informe impreso entregado por el Equipo y validarlo en Sistema Dnlab.
 No olvidar revisar si contiene resultados con valores Críticos. Si es así, proceder
de acuerdo con “Protocolo de Notificación de Valores Críticos” definido por la
Institución.
 Emitir informe.
16.6 PROCEDIMIENTOS ESTUDIO LIQUIDOS BIOLOGICOS

PROCEDIMIENTO: CITOQUÍMICO LÍQUIDO PLEURAL y OTROS LÍQUIDOS
SEROSOS
1. Objetivo
Estandarizar el análisis físico-químico de muestras de líquido pleural y otros líquidos
serosos, recibidos en el Laboratorio de Urgencia del Hospital Rancagua, definiendo los
analitos a medir que permitan aplicar criterios existentes, para diferenciar exudados
de trasudado, y ser un apoyo real y oportuno al diagnóstico clínico.


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2. Campo de aplicación y alcance

 Profesionales Sección Laboratorio de Bioquímica.
 Pacientes del HRR
3. Fundamento
La función del líquido pleural (LP) es prevenir la fricción contra la pared torácica
cuando los pulmones se inflan y desinflan con la respiración.
La formación de LP está determinada por 4 factores:
a.- permeabilidad de los capilares en la membrana parietal.

b.- presión hidrostática en los capilares.
c.- presión oncótica intracapilar.
d.- absorción del fluido por el sistema linfático.
El derrame pleural se define como la acumulación patológica de líquido en el espacio

pleural; es el resultado de un desequilibrio entre la formación y la reabsorción de
líquido a este nivel.
La mayoría de las veces se produce por enfermedad pleural o pulmonar, pero es una
manifestación frecuente de enfermedades sistémicas. Las posibilidades etiológicas son
múltiples y aunque algunas de ellas son fáciles de diagnosticar, otras exigen técnicas
diagnósticas complejas para lograr certeza en el diagnóstico.
Los derrames pleurales (DP) se dividen en trasudados y exudados.
Los trasudados son DP sin afectación directa de la pleura y se producen por aumento
de la presión hidrostática capilar de los capilares de la pleura, por disminución
de la presión oncótica plasmática o por dificultad del drenaje linfático pulmonar, como
sucede por ejemplo en las atelectasias pulmonares. Otras causas de derrames
trasudativos son la falla cardíaca congestiva, cirrosis, síndrome nefrótico, embolía
pulmonar.
Los exudados son los DP que tienen afectación directa de la pleura y se produce por
aumento de la permeabilidad de los capilares o por disminución del aclaramiento
linfático.
Causas de derrames exudativos son la neumonía, cáncer, embolía entre otras.
Mediante el análisis del líquido pleural se pueden separar prácticamente todos los
exudados de los trasudados.
En el año 1972 Light utilizando la medición de LDH y proteínas postuló los que se
conocen como CRITERIOS DE LIGHT, que permiten lograr la diferenciación con una
sensibilidad de un 98% y una especificidad de un 80%.


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Los líquidos serosos en general, son líquidos corporales que derivan del plasma y se
encuentran en la cavidad pleural, pericárdica y peritoneal.
Son ultrafiltrados del plasma que derivan de la abundante red capilar de la membrana
serosa. Su formación es similar a la del líquido extravascular en cualquier otra parte
del organismo, y en ella intervienen la presión hidrostática, la presión coloidosmótica y
la permeabilidad capilar.
En condiciones fisiológicas, hay una pequeña cantidad de líquido en cada una de estas
cavidades corporales que permite el movimiento de las vísceras en cada espacio
potencial.
4. Referencias
-Apuntes Curso post título “Actualización en el análisis de Líquidos biológicos”- Escuela
de Tecnología Médica Universidad de Chile/ Santiago.
-Principios de urgencias, emergencias y cuidados críticos - Capítulo 2.6 Patología
pleural/ UNI Net
-Química clínica 2004; 23(3) 141-145
5. Terminología
 LP: Líquido pleural
 DP: Derrame pleural
 HRLBO: Hospital Regional Libertador Bernardo O´Higgins
 Toracocentesis: técnica realizada por el médico que consiste en que una vez
localizado el derrame pleural, pinchar a través del espacio intercostal por el borde
superior de la costilla inferior, para obtención de una muestra para estudio.
6. Materiales, insumos y equipos
Muestra
 Debe ser obtenida por el Médico (técnica de toracentesis en caso de líquido
pleural).
 Obtener muestras suficientes para estudio bioquímico, citológico, microbiológico,
y determinación de pH en los tubos que se describen de
acuerdo a lo que se especifique en la orden:
 Recuento celular total y diferencial: Tubo lila EDTA.
 Análisis químico: Tubo verde heparinizado.
 Cultivo corriente: Frasco de hemocultivo


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 Gram y otras tinciones: tobo rojo sin anticoagulante o tubo Selectra preparado en
el laboratorio local con tapa blanca.
 ADA: Tubo rojo.
 pH: debe asegurarse la extracción y el mantenimiento de la muestra en
condiciones anaeróbicas (jeringa sellada herméticamente)
Materiales:
 Copas Equipo Architect o tubo verde con heparina compatible con gradilla del
Equipo.
 Reactivos para los distintos analitos a medir según solicitud médica:
 Glucosa
 Proteínas Totales, método Biuret
 Albúmina
 LDH
 Colesterol
 Triglicéridos
 Cámara de Neubauer doble espejo.
 Reactivo HAYEM
Equipos:
-Multianalizador de Química
-Contador hematológico XN 1000
- Microscopio
7. Desarrollo
Exámen físico:
Consiste en la evaluación visual del aspecto, color o cualquier otra característica que
presente el líquido. Ejemplo. Hemorrágico, con coágulos, lechoso, etc.
Examen citológico:
Una vez realizada la revisión de las características físicas del líquido en estudio y antes
de centrifugar, realizar el examen citológico. Para ello, preparar contador hematológico
en el canal de Líquidos biológicos. Controlar la muestra llegada en tubo lila bien
homogeneizada, analizarla pasándola por el equipo en modo manual.
Evaluar los resultados y adoptar el criterio de teñir un frotis cuando exista mucha
diferencia entre el recuento total de células contadas por el equipo (TC-BF), versus el
total de leucocitos + glóbulos rojos (WBC-BF+RBC-BF).


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La tinción se realiza haciendo un frotis del sedimento de la muestra previamente

centrifugada. En horario hábil puede solicitarse realizar la tinción a Hematología.
Está disponible tinción rápida. (Ver instructivo).
Obtenido el recuento, centrifugar para medir los analitos de química.
Exámen químico:
Se procesa con el líquido centrifugado en Equipo Química.
Se ingresa en forma manual al equipo. Si el médico no solicita ningún analito en
especial, medir glucosa y proteínas (TP No LCR).
Se recomienda solicitar una muestra de sangre del paciente para poder aplicar
criterios de Light correctamente.
Glucosa: Concentraciones menores a 60mg/dl se asocian a neumonías y procesos

malignos. De manera menos frecuente se asocia a hemotorax, tuberculosis, pleuritis
reumatoidea.
Proteínas: Necesario para determinar criterios de Light.
LDH: Su valor se correlaciona con el grado de inflamación pleural, necesario para

determinar criterios de Light.
Colesterol: Suele ser mayor de 60 mg/dl en los exudados y menor en los trasudados.
Cuando la relación colesterol pleural/colesterol es mayor de 0.3 mejora la
discriminación entre exudados y trasudados.
pH: La medición se realiza con el equipo de medición de gases en sangre. Tiene

utilidad cuando se sospecha de neumonía o afección maligna. (pH <7.2 es indicación
para realizar drenaje del fluido).
Amilasa: Útil en efusiones producidas por rotura esofágica y enfermedad pancreática.

Triglicéridos: Se justifica cuando hay quilotorax (ruptura de conducto torácico,
neoplasias y linfomas).
Bilirrubina: Una relación de bilirrubina pleura/bilirrubina suero mayor de 0.6 indicaría

que estamos ante un exudado y cuando es menor sería un trasudado.
8. Control de calidad


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Se realiza control de calidad diario a equipo química y Contador hematológico por los
profesionales responsables de dichos equipos.
9. Interpretación de resultados
SENSIBILIDAD DE TEST PARA EXUDADOS DE TRANSUDADOS.

CRITERIOS DE LIGHT
TEST SENSIBILIDAD PARA ESPECIFICIDAD PARA

EXUDADOS EXUDADOS
CRITERIOS DE LIGHT (uno o 98% 83%
más de los siguientes tres:
1.Proporción de nivel de 86% 84%
proteínas de L. Pleural versus
nivel de proteínas en suero >0.5
2.Proporción de nivel de LDH de 90% 82%
L.Pleural versus nivel de LDH en
suero >0.6
3. Nivel de LDH de L. Pleural es 82% 89%
> en dos tercios al límite
superior de nivel normal de LDH
en suero.
Colesterol de L.P. > 60 mgrs./dl 54% 92%
Colesterol de L.P.> 43 mgrs/dl 75% 80%
Relación entre nivel de Colesterol 89% 81%
de L.P y suero >0.3
Nivel de albúmina en suero 87% 92%
menos albúmina de L.P < o =
1.2 g/dl
10. Valores de referencia
Trasudado Exudado
Densidad 1,008-1,015 Superior a 1,018
Proteínas <2,5 g/100 ml >3 g/100 ml


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Prueba de Rivalta Negativa Positiva
Abundantes,
Células Escasas, endoteliales linfocitos o
polinucleares
Coagulación
Nunca Frecuente
espontánea
LDH Liq.Pleu /LDH
<0,6 >0,6
suero
>2/3 al límite
< 2/3 al límite
superior de
LDH Liq.Pleu superior de
normalidad del
normalidad del suero
suero
Proteínas Liq.Pleu / <0,5 >0,5
Proteínas suero
Bilirrubina Liq.Pleu /
<0,6 >0,6
Bilirrubina
Colesterol Liq.Pleu /
<0,3 >0,3
Colesterol
Albúmina suero /
>12 g/L <12g/L
Albúmina Liq.Pleu
PROCEDIMIENTO: CITOQUÍMICO DE LCR
1. Objetivo
Estandarizar el análisis de los diferentes parámetros (físicos, químicos y citológicos) en
el estudio del LCR, para obtener un informe que contenga los parámetros necesarios
para lograr las mejores decisiones médicas y ser un real aporte al diagnóstico.


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2. Campo de aplicación y alcance

Profesionales Sección Laboratorio de Bioquímica.
Pacientes del HRR
3. Fundamento
El LCR es estéril, se forma a partir del plasma por ultrafiltración originada en los
plexos coroideos de los ventrículos, en cantidad de 500 mL diarios y el volumen total
es de 150 mL por existir un rápido recambio constante.
La importancia fisiológica del LCR es:
-Ser almohada hidráulica para El encéfalo.
-Medio interno que participa en la regulación de los procesos de absorción de
nutrientes.
-Mantiene el equilibrio osmótico y oncótico.
-Posee cualidades de defensa.
4. Obtención de la muestra
La muestra es obtenida por el Médico mediante punción lumbar.
Volumen Adultos: 3-5 ml.
Volumen Pediátrico: 1-3 ml.
5. Almacenamiento y estabilidad
Almacenar la muestra en frasco estéril.
La muestra es estable por 24 horas entre 2-8ºC.
Limitación de la técnica: Una punción traumática (contaminada con sangre) dificulta la
interpretación.
6.-Valor de referencia:
Ex. Físico Normal: Color Incoloro
Aspecto: Transparente (agua de roca)
Coágulo de fibrina: Negativo
Ex. Físico Patológico:
Aspecto Patología
Opalescente, ligeramente Meningitis tuberculosa


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amarillo con coágulo fino

Opalescente o purulento,
ligeramente amarillo con Meningitis piógena aguda
coágulo burdo.
Ligeramente amarillo, es
transparente u opalescente Poliomielitis anterior aguda
con coágulo fino.
Hemático, purulento, en Meningoencefalitis amebiana
ocasiones turbio. primaria
Generalmente transparente,
Tumor de cérebro o medula
pero puede ser xantocrómico
espinal
Xantocrómico Toxoplasmosis
Químico: Glucosa: 60 - 70% del valor en sangre

Proteínas adultos: 15 - 45 g/dl
Proteínas prematuros: Hasta 40 g/dl
Proteínas primer año: 30 - 100 g/dl
Proteínas ancianos: 30 - 60 g/dl
Prueba de Pandy: Negativo
Cloruro (NaCl): 700 - 750 mg/dl
LDH: 10% de la concentración sérica
Citológico: Recuento de leucocitos: 0 - 5/mm3 PMN <25%

Recuento de eritrocitos y morfología: 0/mm3
7.- Desarrollo
La muestra debe ser recolectada en tubo sin anticoagulante, transparente que permita
observar sus características.
Realizar examen físico de la muestra observando el color y el aspecto.
Importante recordar que la condición de Xantocromía se observa con el líquido post
centrifugado contrastando con un fondo blanco. Informar en cruces +, ++ o +++.
El desarrollo de las mediciones químicas, se realizan en equipo química con muestra
centrifugada. Ingresar petición en modo Manual.


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Es importante que el tubo donde se recolecta la muestra no contenga anticoagulante

ni activador de la coagulación. Esto altera la medición de las proteínas.
Se recomienda tubo del tipo Selectra.
Si no hay petición del Médico de medir algún analito en especial, se procesa Glucosa y
Proteínas totales por Método turbidimétrico.
EL LCR a diferencia de los demás líquidos, la mayor parte de las veces tiene poca
celularidad. Es por esto que en aquellas muestras transparentes e incoloras se sugiere
hacer el recuento de leucocitos en cámara de Neubauer (menor costo y menor
complejidad).
PROCEDIMIENTO: LÍQUIDO ASCÍTICO

1. Objetivo
Estandarizar el análisis de los diferentes parámetros (físicos, químicos y citológicos) en
el estudio del Líquido ascítico, para obtener un informe que contenga los parámetros


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necesarios para lograr las mejores decisiones médicas y ser un real aporte al
diagnóstico.
2. Campo de aplicación y alcance:

Pacientes del HRR
3. Fundamento
La acumulación de líquido peritoneal se conoce como ascitis, el estudio del líquido
obtenido por punción ayuda a determinar la etiología. Es importante determinar si se
trata de un exudado o trasudado, que aclara la etiología del proceso.
En las ascitis el líquido acumulado puede presentar, según la patología, diversos
aspectos. En la peritonitis infecciosa presenta un aspecto turbio o purulento. Puede ser
hemorrágico en neoplasias, tuberculosis, pancreatitis y traumatismos. En la
obstrucción linfática por trauma, neoplasias, tuberculosis y anormalidades congénitas
es quiloso.
La causa más frecuente de ascitis es la hipertensión portal, debida a variadas causas
como Cirrosis hepática, Insuficiencia cardíaca, Trombosis portal, Hepatitis alcohólica,
Metástasis hepática, etc.
FORMULA GASA= ALBÚMINA PLASMÁTICA G/DL – (menos) ALBÚMINA L. ASCÍTICO

G/DL
GRADIENTE ≥1.1 G/DL SUGIERE HIPERTENSIÓN PORTAL (puede ser aplicado en la

discriminación de exudado y trasudado GASA ≥1.1)
4. Muestra:
Debe ser obtenida por punción y realizada por el Médico. (Tubo verde + tubo lila para
citoquímico).
5. Almacenamiento y estabilidad:
Almacenar la muestra en frasco estéril. La muestra es estable por 24 horas entre 2-
8ºC.
6. Limitación de la técnica:
En muestras coaguladas no es posible realizar conteo celular.


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7. VALORES DE REFERENCIA:
Físico: Color: Levemente amarillento
Aspecto: Transparente
Citológico: Recuento de leucocitos: < 500/mm3 PMN: < 25%

Recuento de eritrocitos y morfología: < 10,000/mm3
Químico: Glucosa: 60 mg/dl

Proteínas: 2.5 g/dl
Prueba de Rivalta: Negativa
Características del líquido ascítico: es serofibrinoso, de color cítrico, su principal

componente es la albúmina, también se encuentra en menores cantidades globulina,
glucosa, creatinina, urea, ácido úrico.
Gradiente
Proteína
albúmina Leucocitos/μ
Causa Aspecto s Otros datos
plasma l
(g/dl)
/ascitis
Claro.
Amarillo < 300,
< 2,5 (80 LDH < 60 %
Cirrosis pálido o > 1,1 predominio
%) plasma
intenso si linfocitario
hay ictericia.
Variable:
Variable en LDH > 60 %
pajizo,
Neoplasia > 2,5 g/dl < 1,1 cantidad plasma
hemático,
y tipo celular Citología
quiloso…
Variable:
Peritonitis opalino,
bacteriana turbio, raras < 2,5 g/dl > 1,1 > 250 PMN PH < 7,35
espontánea veces
purulento
Proteína Gradiente
Leucocitos/μ
Causa Aspecto s albúmina Otros datos
l
(g/dl) plasma


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/ascitis
> 250 PMN

Peritonitis Turbio o
> 2,5 g/dl < 1,1 (generalmente Flora múltiple
secundaria purulento
> 10.000)
ADA> 45
U.I./ml
Variable: > 1,1 (puede
> 1000. Cultivos
Peritonitis pajizo, ser
> 2,5 g/dl Predominio específicos
tuberculosa quiloso o menor en
linfocitario ADN
hemorrágico cirróticos)
micobacterian
o
Insuficienci < 1000,
Claro,
a > 1,1 abundan
amarillo > 2,5 g/dl
cardiaca (inconstante) células
pálido
congestiva mesoteliales
Turbio o
hemorrágico Variable en
Amilasa y
Pancreatitis . > 2,5 g/dl < 1,1 cantidad
lipasa
Raras veces y tipo celular
quiloso
8. Desarrollo
La muestra debe ser recolectada en tubo verde con heparina para examen
fisicoquímico y en tubo lila para el recuento de leucocitos.
Realizar examen físico de la muestra observando el color y el aspecto.
El desarrollo de las mediciones químicas, se realizan en equipo química con muestra
centrifugada. Ingresar petición en modo Manual.
Si no hay petición del Médico de medir algún analito en especial, se procesa Glucosa y
Proteínas totales por Método Biuret (Proteínas totales).
Hacer el recuento de leucocitos automatizado.
Un parámetro muy útil en el examen de líquido ascítico es la Gradiente de Albúmina
Suero- L. Ascítico (GASA), para determinar una de las causas más frecuentes de la
ascitis que es la hipertensión portal.
PROCEDIMIENTO: LÍQUIDO ARTICULAR (SINOVIAL)


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1. Objetivo
Estandarizar el análisis en los diferentes parámetros (físicos, químicos y citológicos) en
el estudio del Líquido articular, para obtener un informe que contenga los parámetros
necesarios para lograr las mejores decisiones médicas y ser un real aporte al
diagnóstico.
2. Campo de aplicación y alcance:

Pacientes del HRR
3. Fundamento
En las articulaciones existe el líquido sinovial que es un trasudado del plasma, cuya
función principal es servir de lubricante a la articulación. Es más abundante en
articulaciones grandes como rodillas, hombro, caderas, codos, muñecas y tobillos,
donde es factible extraerlo por punción o inyectar medicamentos antiinflamatorios por
lo general corticosteroides. El líquido sinovial es una extensión del líquido intersticial y
no un producto de secreción. El estudio de líquido sinovial constituye uno de los
exámenes más útiles para el diagnóstico y pronóstico de enfermedades reumatoides.
4. Muestra:
Debe ser obtenida por punción y realizada por el Médico.
Recolectar en tubo verde y lila para citoquímico.
5. Almacenamiento y estabilidad:
Almacenar la muestra en frasco estéril. La muestra es estable por 24 horas entre 2-
8ºC.
6. Limitación de la técnica:
Si la muestra está coagulada no puede realizarse recuento diferencial. No se debe
puncionar la articulación si existen infecciones cutáneas o heridas en el área de la
punción, por el riesgo de sepsis.
7. Valores de referencia:
Físico Color: Amarillo Claro
Aspecto: Transparente
Citológico Recuento de leucocitos: 50-200/mm3 PMN: < 25%



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Recuento de eritrocitos y morfología: 0/mm3
Químico Glucosa: 95 - 98% Valor en sangre

Proteínas: 1 - 3 g/dl
Prueba de Rivalta: Negativa
Proteína Eritrocitos Leucocitos

Causa Aspecto Otros
(g/dl) (mm3) (mm3)
< 250
Cirrosis Color pajizo < 2,5 Bajo
Color pajizo,
>1000(>
hemorrágico, +Citología
Neoplasia > 2,5 Aumento 50%linfocitos)
mucinoso o
quiloso
Peritonitis Turbio o +Gram
> 2,5 Bajo > 250 PMN
bacteriana purulento +Cultivo
Claro,
> 1000 +Tinción
Peritonitis hemorrágico
> 2,5 Elevado (> 70% AAR
tuberculosa o quiloso en
linfocitos) +Cultivo
ocasiones
Insuficiencia <1000
cardiaca Color pajizo Variable Bajo (mesotelial)
congestiva
Turbio < 2,5 Aumento
Pancreatitis hemorrágico Variable Variable de
o quiloso amilasa
TINCIÓN RÁPIDA PANÓPTICO (METÓDO ROMANOWSKY).


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1.- Reactivos listos para el uso.

2.- Realización extensión fina de la muestra y secar al aire.
3.- Disponer en 3 contenedores (frasco boca ancha), cada uno de los colorantes (1,
2 y 3).
4.- Sumergir el portaobjetos con la muestra durante 5 segundos en la disolución
colorante N°1 (5 inmersiones de 1 segundo), escurrir.
5.- Sumergir a continuación otros 5 segundos (5 inmersiones de 1 segundo), en la
disolución colorante N°2. Escurrir.
6.- Sumergir finalmente otros 5 segundos (5 inmersiones de 1 segundo), en la
disolución colorante N°3. Escurrir.
7.- Lavar con agua de la llave y dejar secar.
8.- Leer con lente inmersión, verificar si hay presencia de otras células no
leucocitos.


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18 REGISTROS
 Reportes de controles se conservan por 3 años.

 Las medidas correctivas deben registrarse en el software de calidad UNITY.
 Planilla de Rechazos conservar por 6 meses.
 Informes de pacientes se respaldan en LIS del Laboratorio.
19 CONTROL DE CAMBIOS
Fecha Tipo de cambio Aprobación

Se libera para su
01/09/2015 uso Versión 0 Jefe de Laboratorio
Actualización de
21/01/2019 técnicas. Jefe de Laboratorio
Se libera para su
uso.
Versión 1
20 BIBLIOGRAFÍA
 Manuales de Equipos
 Insertos de técnicas
INSERTOS ORIGINALES DE CALIBRADORES, CONTROLES Y REACTIVOS EN

USO SE DEJAN EN CARPETA UBICADA EN LA SECCIÓN BIOQUÍMICA


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21 ANEXOS
21.1 Instructivo de operación Equipo AU680
21.2 Instructivo de Equipo Access 2
21.3 Instructivo de operación Equipo D10
21.4 Instructivo de operación Equipo Cobas b221
21.5 Listado calibradores y controles en uso
21.6 Instructivo de preparación de controles


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ANEXO 21.1.-INSTRUCTIVO DE OPERACIÓN DE EQUIPO AU680
La operación del Equipo multianalizador de Química AU 680 se encuentra explicado

en el Manual de Usuario incorporado en el software del equipo. En la pantalla
principal del equipo al presionar el ícono y luego MANUAL DE USUARIO, se
despliega el menú del Manual. En cada uno de los computadores de la sección
estará disponible una copia del Manual de Usuario del AU680 para consultar.
Inicio Diario:
Los pasos del Inicio Diario son los siguientes:
1. Encendido del Sistema
2. Creación de un nuevo Índice
3. Realización del mantenimiento diario
4. Inspección del estado del analizador
5. Supervisión del estado del reactivo
6. Calibración de pruebas
7. Realización del Control de Calidad
8. Inicio del análisis
El procedimiento de Inicio Diario se encuentra detallado en el Manual de Usuario
en el capítulo 2 pagina 2-1.
Desde la pantalla Principal del equipo, presionando el icono (Menú Usuario)

se encuentran los botones directos para efectuar el inicio diario del equipo.
Encendido del Equipo

Pulse el botón verde ON (ENCENDIDO) situado en la parte frontal del analizador.
El ordenador carga el software e inicializa el sistema. El sistema pasa al modo
Warm up (Calentamiento) durante aproximadamente 20 minutos y, a
continuación, pasa al modo Standby (En espera).
Si el sistema se apagó sin un comando Fin del proceso, el sistema muestra el
cuadro de diálogo System Start (Iniciar sistema). Haga clic en OK.
Mantenimiento del Equipo

Al inicio de la jornada se debe realizar las acciones de mantención y preparación
del equipo AU680, para luego realizar el proceso de Control de Calidad. Es


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importante verificar la calidad del agua del Equipo de Osmosis reversa (indicador
bajo 0,5 Ω).
1. En la pantalla "Inicio" del sistema AU680, seleccione:
Menú> Mantenimiento> Mantenimiento del usuario> Mantenimiento del
analizador> Mantenimiento
Para mostrar la pantalla "Mantenimiento del analizador: ficha Mantenimiento"
(ver imagen a continuación)
2. Seleccione la tarea de mantenimiento realizada en la lista que aparece.
3. Toque Update (actualizar). Aparece un cuadro de diálogo para solicitar al

operador que confirme el resultado de la actualización de la fecha de ejecución.
4. Toque Aceptar. De esta forma, se introduce automáticamente la fecha actual

en la tarea de mantenimiento y se fija la fecha de la próxima.


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El mantenimiento del Equipo AU680 se encuentra explicado en las Instrucciones

de Uso pagina 2-4. Además, las Mantenciones Diarias, Semanal, Trimestral y
Semestral están ampliamente detallados en el Manual de Usuario en el capítulo 8
apartados del 8.3 al 8.7
Comprobación de Reactivos
1. En la pantalla "Inicio" del sistema AU680, seleccione

>Menú > Rutinario> Reactivo> Gestión de reactivos> Principal
Se mostrará la pantalla "Gestión de reactivos - ficha Principal" (ver imagen a
continuación)


Página: 173 de 200
3. ToqueComprobación de reactivos. Aparecerá el cuadro de diálogo

"Comprobación de reactivos".
4. Seleccione Comprobar todas posiciones
5. Seleccione Leer ID de reactivo
6. Toque Iniciar. Se inicia la comprobación de los reactivos y se muestra

"Comprobando" en la pantalla. Una vez realizada la comprobación, se mostrará
"Comprobación de reactivos finalizada".
7. Confirme el estado de colocación de los frascos de reactivos, las cantidades

restantes de reactivos, etc.


Página: 174 de 200
Nota: El color de fondo de las columnas "Estado R1" y "Estado R2" indica un
estado de error del tipo "No quedan reactivos", "No hay frascos", etc., para R1 y
R2. Si aparece una indicación en rojo o amarillo, confirme la pantalla "Gestión de
reactivos: Detalles".)
Para obtener información detallada sobre la pantalla "Estado del analizador",
consulte "Comprobación del estado del analizador" en la página 6-4 de la sección
"6.2 Seguimiento del análisis".
8. Si no quedan reactivos, frascos, etc., añada un frasco de reactivo.

En el Manual de Usuario página 5.29 indica como efectuar el cambio y carga de
reactivos. Posteriormente repita la comprobación de los reactivos.
Calibración de pruebas

Menú>Rutinario>Petición de rack>Calibración


Página: 175 de 200
Se mostrará la pantalla "Petición de rack: Calibración" (ver imagen).
Esquema para acceder a pantalla de Petición de Calibración
2. Seleccione el tipo de muestra que se va a analizar en la lista desplegable "Tipo".

Aparecerá una lista de los elementos de calibración registrados.
3. En caso de seleccionar elementos de un perfil, realice una de las siguientes

operaciones:
- Toque Perfil para abrir la ventana de perfiles y seleccione un perfil.
- Utilice el teclado para acceder al espacio que hay al lado de Perfil y pulse Intro.
Se muestran además los elementos de calibración registrados en cada perfil.
4. Para que el sistema evalúe automáticamente los elementos de calibración

seleccionados, toque Petición CAL autom. /QC (F3).


Página: 176 de 200
El sistema evalúa automáticamente a partir de los resultados de la comprobación

de los reactivos. El color de visualización del elemento cambiará en la lista de
elementos de calibración. Si esta configuración es correcta, continúe con el paso 6.
5. Para cambiar un elemento de calibración, toque la columna "CAL" o "BR" en la

lista de elementos y, a continuación, añada o cambie según sea necesario.
• Si se toca la columna "BR", sólo se ejecuta "Blanco reactivos".
• Si se toca la columna "CAL", se ejecutan "Calibración" y "Blanco reactivos".
6. Si se va a realizar el control de calidad del elemento de calibración seleccionado

al mismo tiempo, toque Petición de QC idéntica (F4).
7. Toque Salir (F2) para cancelar o Entrada (F1) para registrar el contenido
configurado.
Aparece de nuevo la pantalla de referencia.
Procesamiento del control de calidad


Página: 177 de 200
Esquema para acceder a pantalla de Petición de Control de Calidad
Para realizar un análisis de control de calidad, siga estos pasos:

Menú>Rutinario>Petición de rack> QC para que se muestre la pantalla
"Petición de rack: QC".
2. Seleccione el tipo de muestra que se va a analizar en la lista desplegable

"Tipo". Aparecerá una lista de los elementos de control de calidad
registrados.
En caso de seleccionar elementos de un perfil, realice una de las siguientes
operaciones:


Página: 178 de 200
- Toque Perfil para abrir la ventana de perfiles y seleccione un perfil

- Utilice el teclado para acceder al espacio que hay al lado de Perfil y pulse
Intro.
-Se muestran además los elementos de control de calidad registrados para cada
perfil.
3. Toque los elementos para los que se va a realizar el control de calidad y

realice las adiciones o cambios correspondientes.
4. Toque Entrada de inicio (F1) y registre el contenido configurado.

A continuación, confirme la colocación de las muestras para control de calidad.
5. Toque Mostrar conjunto QC (F6).

Aparecerá la ventana "Posición de los controles".
6. Confirme el número de los racks verdes, la colocación y la muestra para

control de calidad colocada.
(Para análisis con ID de código de barras, se puede colocar en cualquier posición.)
Confirme el ID.
7. Toque Cerrar.
La ventana se cerrará.
Carga de muestras a Equipo AU680
1. Verificar que datos de la etiqueta concuerden con los del tubo.
2. Verificar que el tubo sea el correcto de acuerdo al examen solicitado. (Tubo

verde con heparina sódica o de litio, fluoruro/EDTA o EDTA).
3. Verificar que la muestra no tenga causales de rechazo como hemólisis, lipemia o

ictericia ni mala rotulación.
4. Colocar gradilla en el Gestor de muestras del equipo, en el sector disponible

indicado con luz verde.
5. Del tubo verde o amarillo se realizan la mayoría de los analitos, por lo que no es
necesario colocar más de uno.


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6. Cuando el resultado excede el rango de linealidad del equipo, éste realiza

automáticamente las diluciones necesarias ya que se encuentran configurados los
criterios de re-análisis.
7. Si se utiliza el protocolo de dilución automática, el sistema realiza una dilución

de la muestra y corrige automáticamente el valor multiplicando el resultado por el
factor de dilución correspondiente.
8. Cuando sea necesario, las diluciones manuales se deben realizar de la siguiente

manera:
-Utilizar solución salina (NaCl entre 0,85% o 0,90%) para diluir la muestra.
-Introducir el factor de dilución en la pantalla de peticiones de pacientes (Opciones
de ensayo).
El sistema utiliza este factor de dilución para corregir el valor de manera
automática multiplicando el resultado por el factor introducido.
-Si no se introduce el factor de dilución, se debe multiplicar el resultado por el
factor de dilución correspondiente antes de informar dicho resultado.
9. Una vez que el Equipo libera el resultado, revisarlo, comparar con histórico,
validar y emitir informe.
ANEXO 21.2.- GUÍA DE OPERACIÓN EQUIPO ACCESS 2
A. OPERACIÓN DEL EQUIPO



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La operación del Equipo Access2 se encuentra explicado en las INSTRUCCIONES

DE USO el que se encuentra una copia en cada ordenador de la sección.
En cada pantalla del equipo Access2 se encuentra el ícono . A través de él se

accede a un menú especifico de la pantalla en que se encuentre (Administración de
Muestras, Suministros, etc.).
Previo a manipular el equipo Access2 es necesario familiarizarse con las
indicaciones y señales que presenta en pantalla el equipo. Estas se encuentran
detalladas en las Instrucciones de Uso pagina 1-3.
B. INICIO DIARIO
Estos procedimientos confirman que el sistema tiene los suministros suficientes,
reactivos calibrados y equipo en condiciones para procesar las muestras de
pacientes e incluyen pasos de mantenimiento y procedimientos de control de
calidad para garantizar un rendimiento óptimo continuado.
El Inicio Diario consta de los siguientes pasos:
1. Encendido del Sistema
2. Cebado de líquidos
3. Realización del mantenimiento diario
4. Chequeo del estado del reactivo y Suministros
5. Calibración de pruebas
6. Procesamiento del Control de Calidad
7. Inicio del análisis
C. ENCENDIDO DEL SISTEMA

En condiciones de trabajo normal el equipo debe estar permanentemente
encendido. Estando el equipo apagado pulse el BOTÓN DE ENCENDIDO del PC
situado en la parte frontal del Ordenador. El ordenador carga el software e
inicializa el sistema.
Inmediatamente después encender el equipo analizador pulsando el Switch
ubicado al costado derecho (visto frontalmente).
El analizador comenzará el proceso de Inicialización en donde chequea el estado
gral del equipo y posiciona todos los módulos en la posición inicial.
Antes de proseguir, espere hasta que el sistema se encuentre en el modo Listo y
no aparezca ningún mensaje en el área de Modo de sistema.
Si falla la inicialización, revise el Registro de eventos y solucione el problema
según cualquier evento de error producido con fecha y hora similares a la del
intento de inicialización.


Página: 181 de 200
Durante el procesamiento es probable que sea necesario reiniciar el sistema.

El proceso de Apagado y Reinicio se encuentra detallado en las Instrucciones
de Uso en la página 2-1.
D. MANTENIMIENTO DEL EQUIPO

Al inicio de la jornada se debe realizar las acciones de mantención y preparación
del equipo Access2.
El mantenimiento diario consta de lo siguiente:
1. Comprobación del estado del sistema:
- Verificar que el equipo se encuentre en modo LISTO, o si esta en modo
PROCESANDO esperar a que termine el proceso. De estar en modo NO LISTO
verificar las causas.
2. Inspección del Módulo de líquidos y de Suministros:
- Verificar cantidad suficiente Wash Buffer y Bidón de residuos Líquidos.
- Verificar la pantalla Suministros la cantidad suficiente de RV y Bolsa de residuos
de RV.
3. Limpieza de Sondas del carrusel de lavado y Pipeta de muestras:
- Levantar tapa frontal superior y con una tórula humedecida limpiar el exterior de
las sondas de aspiración del carrusel de lavado
- Limpiar el exterior de la Pipeta y el receptáculo de lavado ubicado directamente
bajo ésta.
4. Cebar sustrato:
- Desde el menú Diagnostico pulsar Cebado de Líquidos.
5. Ejecución de rutina de Limpieza diaria
- Programar la gradilla de Mantenimiento y cargarla.
El mantenimiento del Equipo Access2 se encuentra explicado en las
Instrucciones de Uso pagina 6-1 y 6-2.
Nota: Cada vez que el equipo Access 2 se utiliza para procesar el ensayo de Vitamina
B12, deberá ejecutar la rutina de Limpieza especial al final de cada día o cada vez que
el instrumento no vaya a procesar muestras durante 8 o más horas. Para más
información sobre la realización de la rutina de Limpieza especial, consulte la Ayuda
del sistema.
Si el instrumento no se utiliza para analizar ensayos cada día, es importante realizar
un mantenimiento diario planificado para garantizar que el sistema estará listo cuando
sea necesario.
E. COMPROBACION DE REACTIVOS Y SUMINISTROS
La verificación de Suministros y reactivos se efectúa a través de la pantalla de
SUMINISTROS. En ella se debe chequear:


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- Cartuchos de reactivos cargados y su contenido restante

- Calibración de los reactivos
- Vigencia de reactivos y calibraciones
- Stock de RV, Sustrato y Bolsa de desechos de RV
La verificación de Suministros y Reactivos y la carga de estos se encuentra explicado

y detallado en las Instrucciones de Uso páginas 3-1 a 3-8.
F. CALIBRACION DE PRUEBAS
- > Menú Principal (F9) > Calibración (F5) > Configuración del calibrador
(F5)
Luego escanear los códigos de barra incluidos en la caja de calibrador respectiva.

a) Para solicitar la calibración:
> Menú Principal (F9) > Administrador de Muestras (F1)
Ingresar el número del rack de copas a usar (Rack de muestra 2500-2599).
> Solicitud de Análisis (F3)
> Solicitud de Calibración (F6)
Seleccionar el Conjunto de Calibración desde el listado desplegado.
El sistema ingresa el número de lote del conjunto de calibración, los niveles de
calibrador y el número de lote del paquete de reactivo.
Cargar en copas de 0,5ul 300ul de cada nivel de calibrador. Disponer las copas
según nivel en la gradilla tal cual lo indica en pantalla
> Cargar una gradilla (F1)
> Procesar
Cada prueba posee su calibrador respectivo, la estabilidad y modo de

almacenamiento varía según Calibrador, verificar esta información en el Manual de
manejo de Calibradores.
G. CONTROL DE CALIDAD


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La totalidad de las técnicas realizadas en el Access2 se controlan diariamente al

inicio de la jornada. En Anexo 4 se describen los controles usados para cada
técnica y el número de Niveles en uso.
Evaluar controles y adoptar medidas correctivas en caso de controles fuera de
rango.
Para realizar un análisis de control de calidad, siga estos pasos:

> Menú Principal (F9) > Administrar Muestras (F1)
Ingrese la identificación de la gradilla y oprima [Enter]
> Solicitud de Análisis (F3) > Solicitud de QC (F5)
Seleccione un control de calidad de uno o varios niveles
> Aceptar (F1) > Cargar Gradilla (F1)
Agregar muestras a la gradilla y cargar
> Procesar
ANEXO 21.3.- INSTRUCTIVO DE OPERACIÓN D10


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Las indicaciones de operación del equipo se encuentran en el Manual de

Instrucciones del equipo el cual se encuentra impreso en la Sección.
INICIO DIARIO
La rutina de trabajo diario del equipo es la que sigue:
 Comprobar de que está instalado el método correcto

 Comprobar los niveles de Tampones de elución y de Lavado
 Comprobar las fechas de caducidad de los y el número de lote
 Comprobar el recuento de inyecciones y el número de lote del cartucho
 Comprobar de la presión de la bomba con la bomba en funcionamiento
 Comprobar fugas durante la comprobación de la presión
 Comprobar tanque de residuo externo
 Dar Inicio (Start Up) al equipo
MANTENIMIENTO DEL EQUIPO

La mantención del Equipo D10 es completamente automática. El equipo estando
en modo Standby se debe pulsar el botón Start Up. El equipo comenzará con el
cebado del sistema y la verificación de las condiciones de trabajo, temperatura y
flujo de las soluciones.
Este proceso dura alrededor de 5 minutos. Posterior esto el equipo estará en
condiciones operativas.
CALIBRACION
La calibración se lleva a cabo en los siguientes casos:
- Obtención de resultados de Control de Calidad fuera de rango.
- Nuevo lote de Kit
- Intervención profunda del equipo
Para llevar a cabo la calibración el equipo debe estar en modo Standby.
Colocar lo siguiente en una gradilla de muestras:



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POSICIÓN ETIQUETA DE REACTIVO

-
ADAPTADOR
1 Calibrador 1 Calibrador HbA1 nivel 1
2 Calibrador 2 Calibrador HbA1 nivel 2
3 A1c Low Control Control nivel 1
4 A1c High Control Control nivel 2
5 - 10 N/A Muestras de Pacientes
Asegúrese de que los códigos de barra estén orientados hacia la parte trasera de la
gradilla.
- Compruebe que la casilla Stop if calibration fails esta seleccionada en la

pantalla SETTING/Alert Setting, de lo contrario, la serie continuara después de
que se haya producido un error de calibración, utilizando la última pendiente e
intersección aceptables.
- Inserte la gradilla por la puerta correspondiente

- Cuando la gradilla este cargada, vaya a pantalla RUN
- Si es necesario, escriba las identificaciones de muestra correspondientes a los
códigos de barras que faltan utilizando el teclado de la pantalla RUN/Edit. Pulse
Done.
- Pulse Start
- El informe de calibración se imprime una vez terminado el análisis. En el Inserto
del Calibrador se indican los rangos aceptables de pendiente e intersección.
- Pulse Eject para extraer la gradilla procesada
TIPO DE MUESTRAS Y PROCESAMIENTO

Las muestras a procesar en el equipo D10 deben recogerse en tubos con vacío que
contengan EDTA.
Si la muestra viene en un tipo de tubo que no es el indicado o si no llega a los 2ml,
se debe pre-diluir 1:300 en un vial de 1,5ml de tapa lila (5ul de muestra en 1.5ml
de Solución Lavado/Diluyente) previo al análisis.
Colocar lo siguiente en una gradilla de muestras:


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POSICIÓN ETIQUETA DE REACTIVO

ADAPTADOR
1 A1c Low Control Control nivel 1*
2 A1c High Control Control nivel 2*
3 - 10 N/A Muestras de Pacientes
Se deben incluir controles en la serie al menos una vez cada 24hrs

** Las muestras de pacientes prediluidas se colocan en adaptadores de viales
sin códigos de barra
- Insertar la gradilla por la puerta correspondiente

- Una vez la gradilla este cargada ir a la pantalla RUN
- Si es necesario, escriba las identificaciones de muestra correspondientes a los
códigos de barras que faltan utilizando el teclado de la pantalla RUN/Edit.
Pulse Done.
- Pulse Start
- Pulse Eject para extraer la gradilla procesada
EJECUCION DEL CONTROL DE CALIDAD

La ejecución del control de calidad se realiza al inicio de la jornada de trabajo.
El material de control es el Lyphochek Diabetes Control (2 niveles) el que viene
liofilizado. Las indicaciones de preparación se encuentran en el Manual de manejo
de Calibradores. Este material una vez preparado, se diluye y se alícuota para
almacenarlo congelado (-20°C).
Previo a procesar muestras de la rutina diaria se debe ejecutar el Control de
Calidad.
- Se sacan 2 alícuotas congeladas, una por cada nivel, y se mantienen en
refrigeración por 15 minutos. Posteriormente se mantienen a temperatura
ambiente por otros 15 minutos.


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- Las alícuotas se ubican en los adaptadores con código de barra específico para
cada nivel.
- Se cargan en una gradilla de muestras y se introducen en el equipo.
- Presionar Start para comenzar
Una vez obtenidos los resultados estos se deben registrar en el sistema de gestión
de control de calidad Unity,
5.5.1 CARGA AUTOMÁTICA

> Menú Principal (F9) > Administrador de muestras (F1)
Colocar la(s) muestra(s) en la gradilla
> Cargar gradilla (F1)
Cargar gradilla y seleccionar HECHO F1
Las solicitudes de pruebas de cada muestra se descargarán directamente desde
LIS
Verificar muestra descargada e información de la prueba, y hacer los cambios
necesarios
> Procesar
5.5.2 CARGA MANUAL

> Menú Principal (F9) > Administrador de muestras (F1)
Ingrese la ID de gradilla o selecciones el botón de la gradilla de la lista NO
INCORPORADO
> Solicitud de Análisis (F3)
Ingrese la ID de muestra, solicitudes de análisis e información de la muestra
Colocar las muestras en las gradillas
> Cargar gradilla (F1)
Cargar gradilla y seleccionar Finalizado (F1)
> Procesar
Nota: Para minimizar la evaporación de la muestra, asegúrese de que el tubo una

vez destapado sea cargado en el equipo en menos de una hora. Así mismo
asegúrese de que la muestra cargada en el equipo sea transferida a los RV dentro
de las dos horas a partir de su carga. Evite sobrecargar el equipo con muestras
para que la permanencia de éstas al interior del equipo sea la menor posible.


Página: 188 de 200
ANEXO 20.4.- INSTRUCTIVO DE OPERACIÓN COBAS b221 GASES
MANTENIMIENTO
Diario
 Verificar niveles de llenado diariamente.
 Controlar el papel de la impresora.
 Limpiar superficies
Semanal
 Limpiar puerto de entrada y pantalla semanalmente.
 Limpiar el disco T&D.
Mensual
 Cambiar el filtro de aire mensualmente.
Calibración
Calibraciones automáticas programadas; en el caso de necesitar una calibración no

programada, presionar SISTEMA, en el menú CALIBRACIONES, seleccionar analitos a
calibrar y el tipo de calibración (1 punto, 2 puntos o general), presionar INICIO.
Registros
 Reportes diarios de controles de equipos serán conservados en la sección

respectiva por tres meses debido a que se trata de papel termo sensible, que se
borra con el tiempo.
 En caso de controles fuera de rango registrar en software de calidad UNITY.


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Instrucciones Abreviadas Cobas b 221


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ANEXO 20.5. - LISTADO DE CALIBRADORES Y CONTROLES POR TÉCNICA

AU680
NIVELES
ANALITO CALIBRADOR CONTROL DE
CONTROL
SUERO
Lyophilized Chemistry
Albumina Assayed Chemistry 1–2
Calibrator
Adenosin Deaminasa
ADA
CalIbrator
Ácido Úrico Assayed Chemistry
Calibrator
Amilasa Assayed Chemistry 1–2
Ethanol/Ammonia
Amonio Ammonia Standar 1–2
Control
Bilirrubina Total y Lyophilized Chemistry
Assayed Chemistry 1–2
Directa Calibrator
Calcio
Calibrator
Cardiac Markers Plus
CKMB – CK Total 1–2
Control
Colesterol Total Assayed Chemistry
Calibrator
Colesterol HDL HDL Colesterol Cal Assayed Chemistry
Creatinina Assayed Chemistry 1–2
Calibrator
Fosfatasa Alcalina Assayed Chemistry 1–2
Calibrator
GGT Assayed Chemistry 1–2
Calibrator
Glucosa Assayed Chemistry 1–2
Calibrator
GOT Assayed Chemistry 1–2
Calibrator


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GPT Assayed Chemistry 1–2
Calibrator
Hierro Assayed Chemistry
Calibrator
Lactato Assayed Chemistry 1–2
Lipasa 1–2
Litio Lithium Standard Assayed Chemistry

Magnesio Assayed Chemistry
Calibrator
Inmunology Plus
PCR 1–2
Control
Proteínas liq. Biol
y orinas (u pro)
Proteínas no LCR 1–2
Proteínas Totales Assayed Chemistry 1–2
Calibrator
Diazyme Procalcitonin Cal.
Procalcitonina
Set
Transferrina Assayed Chemistry
Calibrator
Trigliceridos Assayed Chemistry
Calibrator
Carbamazepina CEDIA Core TDM Multi-Cal Assayed Chemistry
Fenobarbital CEDIA Core TDM Multi-Cal Assayed Chemistry
Fenitoina CEDIA Core TDM Multi-Cal Assayed Chemistry
Ac. Valproico CEDIA Core TDM Multi-Cal Assayed Chemistry
ORINA
Micro Albúmina Microalbumin Calibrator Urine Chemistry 1–2
Ácido Úrico Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2
Amilasa Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2
Calcio Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2


Página: 197 de 200
Creatinina Urine Creatinine Calibrator Urine Chemistry 1–2
Cloruro Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2
Glucosa Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2
Fosforo Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2
Nitrógeno Ureico Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2
Magnesio Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2
Potasio Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2
Proteínas Totales Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2
Sodio Liquid Urine Chemistry Cal Urine Chemistry 1–2


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ANEXO 20.6 -PREPARACION Y ALMACENAMIENTO MATERIALES DE

CONTROL
Las soluciones Control son preparadas según necesidad y son de uso compartido
entre los equipos de Química y Urgencia.
i. LIPHOCHEK ASSAY CHEMISTRY, BIORAD
PRESENTACION
Este producto se suministra liofilizado. Este producto permanecerá estable hasta
la fecha de caducidad, siempre que este almacenado sin abrir a una temperatura
entre 2 y 8°C. Una vez reconstituido y almacenado entre -10 y -20°C todos lo
analitos permanecerán estables por 30 días.
PREPARACION
- Utilizando la micropipeta de 1000µl de uso exclusivo para controles y
calibradores reconstituya cada vial con 5,0ml de agua destilada de ampollas.
- Vuelva a tapar el vial y déjelo reposar durante 20 minutos girándolo en círculos
de vez en cuando. Inmediatamente antes de alicuotar gire el vial en círculos varias
veces (al menos 10) para garantizar su homogeneidad.
-
ALMACENAMIENTO
- Dispense alícuotas de 350 µl en microtubos 1.5ml con tapa (Eppendorf) con
rótulos que indiquen número de lote, nivel de control y fecha de reconstitución.
- Deposite las alícuotas en el contenedor de controles y almacene alícuotas en el
congelador (-10 a -20 °C) protegidas de la luz.
-
ANALISIS
- Lleve la alícuota congelada al contenedor de controles ubicado en refrigerador,
el cual, se encuentra a una temperatura entre 2 a 8 °C y manténgalo ahí durante
15 minutos protegido de la luz.
- Posteriormente ponga la alícuota a utilizar en el contenedor de controles a
temperatura ambiente (18 a 25 °C) protegida de la luz por 15 minutos.
- Luego de transcurrido este tiempo homogenizar la alícuota 5 veces con pipeta
Pasteur teniendo precaución de no generar burbujas.
- Terminado este proceso analizar el material de control en el equipo
automatizado correspondiente y registrar datos en la plataforma UNITY.


Página: 199 de 200
ii. LIQUICHEK URINE CHEMISTRY CONTROL, BIORAD
PRESENTACION
Este producto se suministra listo para su uso. Este producto permanecerá estable
hasta la fecha de caducidad, siempre que este almacenado sin abrir a una
temperatura entre 2 y 8 °C. Una vez abierto y almacenado entre -10 y -20°C
todos lo analitos permanecerán estables por 30 días.
ALMACENAMIENTO
- Dispense alícuotas de 200µl en microtubos 1,5ml con tapa (Eppendorf) con
congelador (-10 a -20°C) protegidas de la luz.
-
ANALISIS
el cual, se encuentra a una temperatura entre 2 a 8°C y manténgalo ahí durante
temperatura ambiente (18 a 25°C) protegida de la luz por 15 minutos.
iii. LIQUICHEK CARDIAC MARKERS PLUS CONTROL
PRESENTACION:
Este producto se encuentra congelado (-20 , listo para su uso una vez
descongelado. Este producto permanecerá estable hasta la fecha de caducidad,
siempre que este almacenado sin abrir a una temperatura entre 2 y 8 °C. Una vez
abierto y almacenado entre -10 y -20°C todos lo analitos permanecerán estables
por 30 días.
ALMACENAMIENTO:
- Dispense alícuotas de 100 µl en microtubos 1,5ml con tapa (Eppendorf) con


Página: 200 de 200

congelador (-10 a -20°C) protegidas de la luz.
ANALISIS:
Terminado este proceso analizar el material de control en el equipo automatizado
correspondiente y registrar datos en la plataforma UNITY.
iv. LIQUICHECK THERAPEUTIC DRUG MONITORING (TDM)
PRESENTACION:
Este producto se encuentra congelado (-20 , listo para su uso una vez
descongelado. Este producto permanecerá estable hasta la fecha de caducidad,
siempre que este almacenado sin abrir a una temperatura entre 2 y 8°C. Una vez
reconstituido y almacenado entre -10 y -20°C todos lo analitos permanecerán
estables por 30 días.
PREPARACION Y ALICUOTADO DE MATERIAL DE CONTROL:

Utilizando una micropipeta de 1000 ul reconstituya cada vial con 5.0 ml de agua
destilada de ampollas Vuelva a tapar el vial y déjelo reposar durante 15 minutos
girándolo en círculos de vez en cuando Inmediatamente antes de alicuotar gire el
vial en círculos varias veces (al menos 10) para garantizar su homogeneidad.
Dispense alícuotas de 200 ul en microtubos (eppendorf) con rótulos que indiquen
número de lote, nivel de control y fecha de reconstitución.
Deposite las alícuotas en el contenedor de controles y almacene alícuotas en el
refrigerador (2 a 8 °C) protegidas de la luz.
ANALISIS DE MATERIAL DE CONTROL:

Lleve alícuota a utilizar al contenedor de controles a temperatura ambiente (18 a
25 °C) protegida de la luz por 15 minutos.
Luego de transcurrido este tiempo homogenizar la alícuota 5 veces con pipeta


Página: 201 de 200
Terminado este proceso analizar el material de control en el equipo automatizado

correspondiente y registrar datos en la plataforma UNITY.
v. INMUNOLOGY PLUS CONTROL
PRESENTACIÓN:
Este producto se suministra listo para su uso. Este producto permanecerá estable
hasta la fecha de caducidad, siempre que este almacenado sin abrir a una
temperatura entre 2 y 8 °C. Una vez abierto y almacenado entre -10 y -20°C
todos lo analitos permanecerán estables por 30 días.
ALMACENAMIENTO:
- Dispense alícuotas de 100µl en microtubos 1,5ml con tapa (Eppendorf) con
congelador (-10 a -20°C) protegidas de la luz
ANÁLISIS:
-
vi. PCT CONTROL
PRESENTACION:


Página: 202 de 200
PREPARACION:
ALMACENAMIENTO:
ANALISIS:
vii. ADA CONTROL
PRESENTACION:
PREPARACION:


Página: 203 de 200

ALMACENAMIENTO:
ANALISIS:
REFERENCIAS
 Insertos de los Reactivos
 Manual de Uso Equipo AU 680
Se dejan para consulta la totalidad de los insertos de técnicas, controles y

calibradores en uso en carpeta en sección Bioquímica.

APL 1.3 Manual de Procedimientos Sección Bioquimica V1 2019

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