0020766682322c501V10.
NH3L
Ammonia
Información de pedido
20766682 322 Ammonia 150 tests
20751995 190 Ammonia/Ethanol/CO2 Calibrator (2 x 4 mL)
20752401 190 Ammonia/Ethanol/CO2 Control Normal (5 x 4 mL)
20753009 190 Ammonia/Ethanol/CO2 Control Abnormal (5 x 4 mL)
Español
Información del sistema
Analizadores cobas c 311/501:
NH3L: ACN 478
Analizadores cobas c 502:
NH3L: ACN 8478
Uso previsto
Test enzimático in vitro para la determinación cuantitativa de amoníaco en
plasma humano en los sistemas Roche/Hitachi cobas c.
Características1
El amoníaco se genera principalmente en el tracto gastrointestinal por el
metabolismo de los compuestos nitrogenados. Un exceso de amoníaco
puede ser tóxico para el sistema nervioso central. La síntesis de la urea en
el ciclo de Krebs‑Henseleit constituye un medio de eliminación del
amoníaco por su metabolización a urea en el hígado.
La hiperamonemia en lactantes puede ser consecuencia de deficiencias
congénitas de las enzimas del ciclo de la urea o adquirirse como resultado
de enfermedades hepáticas agudas (como el síndrome de Reye) o
crónicas (como la cirrosis). En los adultos, la determinación de
concentraciones elevadas de amoníaco pueden contribuir al diagnóstico de
la insuficiencia o encefalopatía hepáticas como consecuencia de
hepatopatías avanzadas tales como la hepatitis vírica o la cirrosis.
Principio del test
Método enzimático con glutamato deshidrogenasa.2
La glutamato-deshidrogenasa (GLDH) cataliza la aminación reductora del
2‑oxoglutarato con NH4+ y NADPH para formar glutamato y NADP+.
GLDH
NH4+ + 2‑oxoglutarato + NADPH L‑glutamato + NADP+ + H2O
La concentración del NADP+
formado es directamente proporcional a la
concentración de amoníaco. Se determina midiendo la reducción de la
absorbancia.
Reactivos - Soluciones de trabajo
R1 Tampón BICINa): 330 mmol/L, pH 8.3; GLDH (microbiana):
≥ 234 µkat/L; 2‑oxoglutarato: 50 mmol/L; detergente; conservante;
estabilizador no reactivo
R3 NADPH: ≥ 1.0 mmol/L; conservante; tampón no reactivo
a) BICIN = N,N‑bis(2‑hidroxietil‑glicina)
R1 está en la posición A y R3 está en la posición B.
Medidas de precaución y advertencias
Producto sanitario para diagnóstico in vitro.
Observe las medidas de precaución habituales para la manipulación de
reactivos.
Elimine los residuos según las normas locales vigentes.
Ficha de datos de seguridad a la disposición del usuario profesional que la
solicite.
Para los EE.UU.: uso exclusivamente bajo prescripción.
Preparación de los reactivos
Desenroscar solamente la tapa R3 de color gris con la herramienta para
abrir/cerrar (No. del GMMI 04857933‑190). Guardar la tapa a rosca
evitando cualquier tipo de contaminación. Dejar el casete de reactivo en un
ambiente libre de humo de tabaco, de limpiadores que contienen amoníaco
y de cualquier tipo de gases de escape. Durante el almacenamiento a
temperatura ambiente, asegurar que el casete no puede caerse. El casete
no debe cubrirse al almacenarlo a temperatura ambiente. Proteger el
2016-06, V 10.0 Español
Analizadores adecuados para el cobas c pack
ID del
Roche/Hitachi cobas c 311, cobas c 501/502
sistema 07 6668 2
Código 688
Código 100
Código 101
casete de cualquier tipo de suciedad. Proteger el casete abierto de la luz
solar (no conservarlo en una ventana). Al cabo de un almacenamiento de
24 horas, cerrar el frasco R3 con la misma tapa gris. Mezclar el casete
cuidadosamente evitando la formación de espuma. Colocar el casete en el
analizador.
Conservación y estabilidad
NH3L
Sin abrir, a 2‑8 °C: véase la fecha de
caducidad impresa
en la etiqueta del
cobas c pack.
En uso y refrigerado en el analizador: 8 semanas
Obtención y preparación de las muestras
Emplear únicamente tubos o recipientes adecuados para recoger y
preparar las muestras.
Sólo se han analizado y encontrado aptos los tipos de muestras aquí
mencionados.
Plasma tratado con EDTA dipotásico.
No usar plasma preparado con otros anticoagulantes.
No usar suero porque durante la coagulación puede formarse amoníaco.
Los tipos de muestra aquí indicados fueron analizados con tubos de
recogida de muestras seleccionados, comercializados en el momento de
efectuar el análisis, lo cual significa que no fueron analizados todos los
tubos de todos los fabricantes. Los sistemas de recogida de muestras de
diversos fabricantes pueden contener diferentes materiales que, en ciertos
casos, pueden llegar a afectar los resultados de los análisis. Si las
muestras se procesan en tubos primarios (sistemas de recogida de
muestras), seguir las instrucciones del fabricante de tubos.
Recoger la sangre en ayunas de una vena sin estasis. El paciente no debe
fumar antes de extraer la muestra. Llenar los tubos completamente y
conservar permanentemente bien cerrados. Colocar inmediatamente en
hielo y centrifugar, preferentemente a 4 °C. Realizar el test dentro de
20‑30 minutos tras la venopunción o congelar el plasma separado
inmediatamente.
In vitro, las concentraciones de amoníaco pueden aumentar debido a la
descomposición de componentes del plasma que contienen nitrógeno. Una
fuente conocida de formación de amoníaco a temperaturas superiores a
‑38 °C es la actividad aumentada de la γ‑glutamiltransferasa que origina la
descomposición de la glutamina.3
Evitar la contaminación de las muestras con amoníaco proveniente del
humo de cigarrillo, del ajetreo en el laboratorio o en la habitación del
paciente, de recipientes de vidrio o del agua.
Centrifugar las muestras que contienen precipitado antes de realizar el
ensayo.
Estabilidad en 3 semanas a -38 °C3
plasma:
Material suministrado
Consultar la sección "Reactivos - Soluciones de trabajo" en cuanto a los
reactivos suministrados.
Material requerido adicionalmente (no suministrado)
▪ Consultar la sección “Información de pedido”
▪ Equipo usual de laboratorio
Realización del test
Para garantizar el funcionamiento óptimo del test, observe las instrucciones
de la presente metódica referentes al analizador empleado. Consulte el
1/3
0020766682322c501V10.0

NH3L
Ammonia

manual del operador apropiado para obtener las instrucciones de ensayo Trazabilidad: El presente método ha sido estandarizado frente a un
específicas del analizador. estándar primario.
Roche no se responsabiliza del funcionamiento de las aplicaciones no Control de calidad
validadas por la empresa. En su caso, el usuario se hace cargo de su Efectuar el control de calidad con los controles indicados en la sección
definición. “Información de pedido”.
Aplicación para plasma Adicionalmente pueden emplearse otros controles apropiados.
Definición del test en el analizador cobas c 311 Adaptar los intervalos y límites de control a los requisitos individuales del
laboratorio. Los resultados deben estar dentro de los límites definidos.
Tipo de medición 2 puntos Cada laboratorio debería establecer medidas correctivas a seguir en caso
finales de que los valores se sitúen fuera de los límites definidos.
Tiempo de reacción/ Puntos 10 / 25‑57 Deben cumplirse las regulaciones gubernamentales y las normas locales
de medición de control de calidad vigentes.
Longitud de onda (sub/princ) 700/340 nm Cálculo
Los analizadores Roche/Hitachi cobas c calculan automáticamente la
Dirección de reacción Disminución concentración de analito de cada muestra.
Unidades µmol/L (µg/dL)
Factor de conversión: µmol/L x 1.703 = µg/dL
Pipeteo de reactivo Diluyente
(H2O) Limitaciones del análisis - interferencias
Criterio: Recuperación dentro de ± 10 % de los valores iniciales con una
R1 40 µL 32 µL concentración de amoníaco de 50 µmol/L (85 µg/dL).
R3 20 µL 20 µL Ictericia:4 Sin interferencias significativas hasta un índice I de 10 para la
Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra bilirrubina conjugada y de 30 para la bilirrubina sin conjugar (concentración
de la bilirrubina conjugada: aproximadamente 171 µmol/L o 10 mg/dL;
Muestra Diluyente concentración de la bilirrubina sin conjugar: aproximadamente 513 µmol/L o
(H2O) 30 mg/dL).
Normal 20 µL – – Hemólisis:4 Sin interferencias significativas hasta un índice H de 200
(concentración de hemoglobina: aproximadamente 124.2 µmol/L o
Disminuido 10 µL – – 200 mg/dL). La contaminación con eritrocitos provoca resultados elevados
siendo mayor la concentración de analito en éstos que en el plasma
Aumentado 20 µL – – normal. La magnitud de la interferencia depende del contenido de analito
en los eritrocitos lisados.
Definición del test en los analizadores cobas c 501/502
Lipemia (nativa):4 Sin interferencias significativas hasta el índice L de 50.
Tipo de medición 2 puntos No existe una correlación satisfactoria entre el índice L (correspondiente a
finales la turbidez) y la concentración de triglicéridos.
Tiempo de reacción/ Puntos 10 / 36‑70 γ‑globulina: la γ‑globulina aumenta significativamente la concentración
de medición aparente de amoníaco a partir de una concentración de 3 g/dL añadida a
una mezcla de plasma humano.
Longitud de onda (sub/princ) 700/340 nm Fármacos: No se han registrado interferencias con paneles de fármacos de
Dirección de reacción Disminución uso común en concentraciones terapéuticas.5,6
Unidades µmol/L (µg/dL) Excepciones: En concentraciones terapéuticas, la cefoxitina provoca
valores de amoníaco artificialmente altos e Intralipid provoca resultados
Pipeteo de reactivo Diluyente artificialmente bajos.
(H2O) En concentraciones fisiológicas, la sulfasalazina y la sulfapiridina
R1 40 µL 32 µL plasmáticas pueden llevar a resultados falsos. En concentraciones
terapéuticas, la temozolomida puede provocar resultados erróneos.
R3 20 µL 20 µL En casos muy raros pueden obtenerse resultados falsos debidos a la
Volúmenes de muestra Muestra Dilución de muestra gammapatía, particularmente del tipo IgM (macroglobulinemia de
Waldenström).7
Muestra Diluyente
Para el diagnóstico, los resultados del test siempre deben interpretarse
(H2O) teniendo en cuenta la anamnesis del paciente, el análisis clínico así como
Normal 20 µL – – los resultados de otros exámenes.
Disminuido 10 µL – – ACCIÓN REQUERIDA
Programación de lavado especial: Se requieren ciclos de lavado especial
Aumentado 20 µL – – en caso de combinar ciertas pruebas en los sistemas Roche/Hitachi
cobas c. La lista de las contaminaciones por arrastre también puede
Calibración encontrarse en la versión más actual de la metódica NaOHD-SMS-
SmpCln1+2-SCCS. Para mayor información consulte el manual del
Calibradores S1: H2O operador. Analizador cobas c 502: Todos los pasos de lavado necesarios
S2: Calibrador Ammonia/Ethanol/CO2 para evitar la contaminación por arrastre están disponibles a través de
cobas link de modo que no se requiere la entrada manual de los datos.
Modo de calibración Lineal
En caso de que sea necesario, implemente el lavado especial
Intervalo de calibraciones Calibración a 2 puntos destinado a evitar la contaminación por arrastre antes de comunicar
los resultados del test.
- después de cambiar el cobas c pack
Límites e intervalos
- calibración automática del blanco cada
3 días Intervalo de medición
10‑700 µmol/L (17‑1192 µg/dL)
- si fuera necesario según los
Determinar las muestras con concentraciones superiores a través de la
procedimientos de control de calidad función de repetición. En este caso, las muestras se diluyen a 1:2. Los

2/3 2016-06, V 10.0 Español

0020766682322c501V10.0

NH3L
Ammonia

resultados de las muestras diluidas por la función de repetición se 3 Da Fonseca-Wollheim F. Deamidation of glutamine by increased
multiplican automáticamente por 2. plasma γ-glutamyltransferase is a source of rapid ammonia formation in
Límites inferiores de medición blood and plasma specimens. Clin Chem 1990;36:1479-1482.
Límite de detección inferior del test 4 Glick MR, Ryder KW, Jackson SA. Graphical Comparisons of
Interferences in Clinical Chemistry Instrumentation. Clin Chem
10 µmol/L (17 µg/dL) 1986;32:470-475.
El límite de detección inferior equivale a la menor concentración medible de
analito que puede distinguirse de cero. Se calcula como el valor situado a 5 Breuer J. Report on the Symposium “Drug effects in Clinical Chemistry
3 desviaciones estándar por encima del estándar más bajo Methods”. Eur J Clin Chem Clin Biochem 1996;34:385-386.
(estándar 1 + 3 DE, repetibilidad, n = 21). 6 Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry:
recommendation of drugs and their concentrations to be used in drug
Valores teóricos interference studies. Ann Clin Biochem 2001;38:376-385.
Plasma con EDTA8 7 Bakker AJ, Mücke M. Gammopathy interference in clinical chemistry
Mujeres 11‑51 µmol/L (18.7‑86.9 µg/dL) assays: mechanisms, detection and prevention.
Clin Chem Lab Med 2007;45(9):1240-1243.
Hombres 16‑60 µmol/L (27.2‑102 µg/dL) 8 Da Fonseca-Wollheim F. Direkte Plasmaammoniakbestimmung ohne
Cada laboratorio debería comprobar si los intervalos de referencia pueden Enteiweissung. Z Klin Chem Klin Biochem 1973;11:426-431.
aplicarse a su grupo de pacientes y, en caso necesario, establecer sus 9 Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure
propios valores. for method transformation. Application of linear regression procedures
Datos específicos de funcionamiento del test for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin
A continuación, se indican los datos representativos de funcionamiento de Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11):783-790.
los analizadores. Los resultados de cada laboratorio en particular pueden En la presente metódica se emplea como separador decimal un punto para
diferir de estos valores. distinguir la parte entera de la parte fraccionaria de un número decimal. No
se utilizan separadores de millares.
Precisión
La precisión se determinó empleando muestras humanas y controles según Símbolos
un protocolo interno con repetibilidad (n = 21) y precisión intermedia Roche Diagnostics emplea los siguientes símbolos y signos adicionalmente
(3 alícuotas por serie, 1 serie por día, 21 días). Se han obtenido los a los indicados en la norma ISO 15223‑1.
siguientes resultados:
Contenido del estuche
Repetibilidad Media DE CV
Volumen tras reconstitución o mezcla
µmol/L (µg/dL) µmol/L (µg/dL) %
GTIN Número Global de Artículo Comercial
AEC Control N 60.7 (103) 1.4 (2) 2.3
La barra del margen indica suplementos, eliminaciones o cambios.
AEC Control A 202 (344) 2 (3) 0.8
© 2016, Roche Diagnostics
Plasma humano 1 28.6 (48.7) 2.5 (4.3) 8.8
Plasma humano 2 585 (996) 1 (2) 0.2

Precisión intermedia Media DE CV Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim

www.roche.com
µmol/L (µg/dL) µmol/L (µg/dL) % Distribuido en los EE.UU. por:
Roche Diagnostics, Indianapolis, IN, EE.UU.
AEC Control N 56.9 (97.1) 2.8 (4.8) 4.9 Apoyo técnico al cliente estadounidense 1-800-428-2336
AEC Control A 203 (346) 4 (7) 1.8
AEC Control N dil. 1:2 28.1 (47.7) 2.6 (4.4) 9.4
AEC Calibrator 318 (542) 5 (9) 1.5
Comparación de métodos
Se han comparado los valores de amoníaco en muestras de plasma
humano obtenidos en un analizador Roche/Hitachi cobas c 501 (y) con los
obtenidos con el reactivo correspondiente en un analizador Roche/Hitachi
917/MODULAR P (x).
Número de muestras (n) = 171
Passing/Bablok9 Regresión lineal
y = 0.996x + 5.11 µmol/L y = 1.007x + 4.06 µmol/L
τ = 0.970 r = 0.999
Las concentraciones de las muestras se situaron entre 18.1 y 444 µmol/L
(30.8-756 µg/dL).
Referencias bibliográficas
1 Balistreri WF, Rej R. Liver function. In: Burtis CA, Ashwood ER, eds.
Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry. 4th ed.Philadelphia: WB
Saunders 1996;539-568.
2 Van Anken HC, Schiphorst ME. A kinetic determination of ammonia in
plasma. Clin Chim Acta 1974;56:151-157.

2016-06, V 10.0 Español 3/3