4 Parcial Bioquimica - Tema I Metabolismo de los Nucleotidos

Los nucleotidos son las moleculas que conforman a los acidos nucleicos
• La estructura de los nucleotidos se componen de 3 elementos:
1 Azucar de 5 Carbonos
-En el ADN se llama Desoxirribosa
-En el ARN se llama Ribosa
2 Base nitrogenada
-Purinas: Adenina y Guanina "Agua pura"
-Pirimidinas: Timina, Citosina y Uracilo
Nota: Timina no hay en el ARN y Uracilo solo presente en el ARN
3 Grupos Fosfatos
Nota: Un NUCLEOSIDO es una molecula que se compone de 2 Elementos:
Azucar de 5 Carbonos y Una Base nitrogenada
Sintesis de nucleotidos purinicos
El anillo de purina se forma principalmente en el Higado
• Los sustratos para la formacion del anillo de purina son:
1 Aminoacidos
-Glicina, Glutamina y Aspartato
2 CO2
3 N10 – Formiltetrahidrofolato
Estas 3 Moleculas son las fuentes de carbono para la formacion de los anillos de
purina
-La principal enzima alosterica de la sintesis de nucleotidos purinicos es:
Glutamina: Fosforribosilpirofosfato amidotransferasa (GPAT)
-Es inhibida por: AMP y GMP
El AMP y GMP son los productos finales de la sintesis de nucleotidos purinicos
-El AMP necesita para su sintesis: Aspartato y GTP
-EL GMP necesita para su sintesis: Glutamina y ATP
El IMP (mononucleotido de inosina monofosfato) es el nucleotido de
purinico "madre" porque da origen al AMP y GMP

Inhibidores sinteticos de la sintesis de purinas

1 Sulfonamidas (Antibioticos)
-Analogos estructurales del acido Para-Aminobenzoico (PABA)
-Inhibe a la enzima: GAR Formiltransferasa
2 Metotrexato
-Analogo estructural del Acido Folico
-Inhibe a la enzima: Dihidrofolato reductasa
-Se utiliza para tratamiento de cancer de rapido crecimiento (Antineoplasico)
3 Acido micofenolico
-Es un farmaco inhibidor reversible de la enzima: Inosina monofosfato
desihidrogenasa
-Priva a las celulas T y B de acidos nucleicos
-Es un inmunosupresor que se usa para evitar el rechazo de injertos y organos

Via de rescate de purinas

-Son aquellas bases purinicas que se obtienen del recambio de acidos nucleicos y
de los que se obtienen de la dieta
-La ADENOSINA es el unico nucleosido de purina que se rescata
-En esta via existen principalmente 2 enzimas:
1 Adenosina Fosforribosiltransferasa
2 Hipoxantina – guanina fosforribosiltransferasa
Sindrome de Lesch Nyhan
-Trastorno ligado al cromosoma X
-Es una causa hereditaria de HIPERURICEMIA
-Enzima deficiente: Hipoxantina – guanina fosforribosiltrasnferasa
CC
1 Urolitiasis (Litos de acido urico en riñones)
2 Artritis gotosa (Depositos de cristales de urato en articulaciones y tejidos
blandos)
3 Hiperuricemia
4 Disfuncion motora, deficit cognitivo y trastornos del comportamiento
(Automutilacion: se muerde los dedos y los labios hasta sangrarse)
Sintesis de Desoxirribonucleotidos
La principal enzima alosterica encargada de la sintesis de los
desoxirribonucleotidos: Ribonucleotido Reductasa
• La Ribonucleotido reductasa:
1 Utiliza la coenzima TIORREDOXINA
2 Es Inhibida por los dATP
3 Es Activada por ATP
4 Es inhibida por el farmaco HIDROXIUREA
Nota: La hidroxiurea es un agente antineoplasico, se utiliza en el tratamiento de
melanoma, anemia de celulas falciformes y funciona como antipaludico
Degradacion de los nucleotidos de purina
-Las enzimas pancreaticas Ribonucleasas y Desoxirribonucleasas, degradan el ADN
Y ARN para obtener Oligonucleotidos
La Fosfodiesterasas pancreaticas degradan oligonucleotidos y los convierten en
mononucleotidos
• El ACIDO URICO es el producto final de la degradacion de las bases PURINAS
Formacion de acido urico y enfermedades asociadas
-El Acido urico es el producto final del catabolismo de las purinas
-Se sintetizan en los Enterocitos
-Se excreta en la Orina
GOTA
• Es una patologia que se presenta debido a los elevados niveles de acido urico
en sangre (Hiperuricemia)
CC
1 Podagra (Hinchazon, rigidez y dolor del dedo "gordo" del pie
2 Cristales de urato en las articulaciones
TX
• Ataque Agudo: AINES (Prednisona o colchicina)
• ALOPURINOL: Es un analogo estructural de la hipoxantina que inhibe la
enzima Xantina Oxidasa

Deficiencia de Adenosina desaminasa

En esta deficiencia hay una acomulacion de Adenosina, esto tiene como
consecuencia que no se de el desarrollo de los linfocitos
• Se presenta la Enfermedad de Inmunodeficiencia combinada grave (SCID)
donde existe una disminucion de celulas T, B y NK
• El TX es transplante de medula osea y terapia de reemplazo enzimatico
Sintesis y Degradacion de las PIRIMIDINAS
Las fuentes de atomos de carbono para la sintesis del anillo de pirimidinas son:
1 Glutamina y Aspartato 2 CO2
La enzima alosterica mas importante de la sintesis de pirimidinas es:
Carbamoil Fosfato Sintetasa II
• El UTP (Trifosfato de uridina) es el producto final de la via de las pirimidinas
Notas:
• El 5 Fluorouracilo es un farmaco antineoplasico que inhibe a la enzima Timidilato
Sintasa
• El ACICLOVIR es un farmaco analogo de purinas que se utiliza para tratar
infecciones del Virus herpes
• El AZT (Zidovudina o Azidotimidina) es un farmaco analogo de pirimidinas, que se
utiliza en el tratamiendo del VIH
Tema II – Estructura, Replicacion y Reparacion del ADN
Los ACIDOS NUCLEICOS son biomoleculas compuestas de nucleotidos, Estos son:
• ADN y ARN
El Dogma central de la biologia molecular es:

ADN Replicacion
Transcripcion

ARN
Traduccion

PROTEINAS
Estructura del ADN
Polimero de desoxirribonucleotidos unidos por enlances Covalentes Fosfodiester
• 3–5
Es una Doble Helice con un Eje Helicoidal
• Los helices estan emparejados de manera antiparalela (3 – 5) (5 – 3)
• En las helices del ADN, las Pentosas se localizan en la parte Externa de las
cadenas y las Bases Nitrogenadas en la parte Interna
La doble helice tiene 2 surcos:
1 Surco Mayor (Ancho)
2 Surco Menor (Estrecho)
Los surcos del ADN proporcionan un acceso para la union de las proteinas
reguladoras a las secuencias de reconocimiento del ADN
Nota: La DACTOMICINA (Actinomicina D) es un farmaco que se une al Surco
Menor, ejerciendo Citotoxico que interfiere en las sintesis de ADN y ARN, ATNSCO
• Las bases nitrogenadas en el interior de las helices se emparejan de forma
complementaria, se aparean de la siguiente manera:

ADENINA Timina

GUANINA Citosina

Puentes de hidrogeno
Formas estructurales de la doble helice de ADN
1 Forma B
-Es la forma mas abundante en el ADN
-Es una helice DEXTROGIRA (gira hacia la derecha)
-Tiene 10 pares de bases por vuelta
2 Forma A
-Es una helice DEXTROGIRA
-Tiene 11 pares de bases por vuelta
3 Forma Z
-Es una helice LEVOGIRA
-Tiene 12 pares de bases por vuelta
Notas:
• Las celulas procariotas (bacterias) tienen ADN circular
• Los plasmidos son moleculas circulares de ADN extracromosomico que
puede dar resistencia a los antibioticos y facilitar la transferencia de
informacion genetica
Etapas en la replicacion del ADN en PROCARIOTAS
Replicacion:
• Es el proceso donde el ADN se duplica
• Las enzimas que llevan a cabo este proceso son las ADN Polimerasas, estas
enzimas utilizan como cofactor al Magnesio (MG)
Pasos de la replicacion
Paso 1: Separacion de las cadenas de ADN
-En las celulas procariotas solo existe un sitio de replicacion, conocido como
Origen de replicacion (ORI)
-Actua la proteina AdnA que inicia la replicacion al unirse al sitio Ori y su fusion
ocasiona la separacion de las cadenas
Paso 2: Formacion de la Horquilla de replicacion
-Se da a medida que se separa las dos cadenas de ADN
• En este paso actuan las HELICASAS: son enzimas que se unen al
ADN monocatenario y forzan la separacion de las cadenas de ADN estas
enzimas requieren ATP
• Las Proteinas de union al ADN monocatenario son las que mantienen
separadas a las cadenas de ADN monocatenarios y protegen al
ADN monocatenario de las nucleasas
La separacion de las dos hebras de ADN genera un proceso denominado:
SUPERENROLLAMIENTO el cual impide que continue la duplicacion del ADN, para
revertir este proceso se necesitan de las enzimas:
• Topoisomerasas
-Son las enzimas responsables de eliminar los superenrollamientos de la helice
Existen 2 tipos:
Topoisomerasas tipo I: solo pueden cortar y resellar una cadena de ADN
-No requieren ATP
Topoisomerasas tipo II:
-Pueden cortar y resellar ambas cadenas de ADN
-Requieren de ATP
Inhibidores de las Topoisomerasas
1 Camptotecinas
-Inhiben a las Topoisomerasas tipo I
-Funcionan como farmacos antineoplasicos
2 Etoposido
-Inhiben a las Topoisomerasas tipo II
-Funcionan como farmacos antineoplasicos
3 Fluoroquinolonas (Ciprofloxacion, levofloxacino)
-inhiben a la ADN girasa (Topoisomerasa Tipo II Bacteriana)
-Funciona como un ANTIBIOTICO
Paso 3: Actua la ADN polimerasa donde copia a la hebra con direccion 3 – 5
• Existen 2 tipos de cadenas en la replicacion
1 Cadena Adelantada: se copia en direccion de la horquilla de replicacion y se
sintetiza de forma continua
2 Cadena Retrasada: se copia en direccion opuesta a la horquilla de replicacion y
se sintetiza de forma discontinua, por lo cual se dejan espacion vacios en la
cadena y estos espacios son rellenados por fragmentos cortos de
ADN denominados fragmentos de OKASAKI
Paso 4: La ADN polimerasa inicia la sintesis de las cadenas de ADN
• Para que la ADN pueda iniciar la sintesis de la cadena de ADN , necesita de un
INICIADOR (Primer) el cual es un fragmento de ARN unido al ADN
• El PRIMOSOMA es un complejo proteico que genera el ARN iniciador e inicia la
formacion de los fragmentos de OKASAKI
• La PRIMASA es una ARN polimerasa que sintetiza el fragmento de ARN
complementario al primer
Paso 5 Se lleva a cabo la sintesis y elongacion de la cadena de ADN por accion de
la ADN Polimerasa III
• Existen 3 tipos de ADN polimerasas procariotas
ADN Polimerasa I:
-Es la encargada de eliminar el ARN iniciador (Primer)
-Rellena los huecos generados durante la reparacion del ADN
ADN Polimerasa III:
-Es la encargada de sintetizar y elongar la cadena de ADN en una direccion 5 – 3
Paso 6 Formacion del enlace fosfodiester final y se da la terminacion
-El enlace fosfodiester es formado por la enzima ADN Ligasa
Replicacion del ADN en Eucariotas
-Son procesos similares pero existen diferencias, estas son:
1 La replicacion del ADN en Eucariotas tiene multiples sitios de replicacion
2 La RNasa H y la Endonucleasa colgajo 1 (FEN1) son las que eliminan el fragmento
corto de ARN Iniciador
3 Existe una sola ADN polimerasa compuesta de diferentes subunidades, estas son:
Pol Alfa
• Tiene actividad de primasa
• Sintetiza el ARN iniciador (Primer)
Pol Beta
• Es la encargada de rellenar el hueco de las reparaciones del ADN
Pol S (Delta)
• Es la encargada de formar los fragmentos de Okazaki
Pol E (Epsilon)
• Es la encargada de elongar la cadena de ADN
Pol J (Gama)
• Es la encargada de replicar el ADN mitocondrial

Ciclo celular Eucariota

El ciclo celular se divide en 4 etapas:
1 G1
2 Fase S (Sintesis de ADN, se lleva a cabo la replicacion)
3 G2
4 Mitosis
-Las proteinas que controlan el proceso del ciclo celular son las CICLINAS y
CINASAS dependientes de ciclinas (CDK)
Notas:
-Los TELOMEROS considerados como relojes mitoticos, mantienen la integridad del
cromosoma evitando que sean degradados por las Nucleasas
-La Telomerasa es la enzima que mantiene la longitud de los Telomeros, actua
como una transcriptasa inversa, es decir una enzima que utiliza una plantilla de
ARN para sintetizar ADN
-Algunos virus como el VIH y elementos como los transposonos (Genes saltarines)
utilizan transcriptasas inversas
Inhibicion de la replicacion de ADN por analogos de nucleosidos
1 Arabinosido de Citosina (Citabarina o araC)
• Se utiliza en la quimioterapia anticancerosa
2 Arabinosido de Adenina (Vidarabina o araA)
• Se utiliza como un Antiviral
Organizacion del ADN eucariota
1 Nivel de Organizacion: CROMATINA
• La cromatina es ADN asociado a proteinas, existen 2 tipos de cromatina:
Eucromatina: Es transcripcionalmente ACTIVA, se encuentra RELAJADA
Heterocromatina: Es transcripcionalmente INACTIVA y se encuentra condensada

2 Nivel NUCLEOSOMAS
• Los nucleosomas son ADN asociado a un octamero de proteinas denominadas
HISTONAS, existen 5 tipos de histonas
H1 Es la encarga de conectar a los nucleosomas
H2A, H2B, H3 y H4 Forma PARTE del NUCLEOSOMA
• Las Histonas son proteinas basicas ricas en aminoacidos: LISINA y ARGININA
3 Nivel: Nucleofilamento
• Un nucleofilamento se forma cuando se condensan muchos nucleosomas
4 Nivel: Fibra 30 nm

Reparacion del ADN

• Las proteinas MUT (en las celulas procariotas) son responsables de la
reparacion de errores de emparejamiento de bases
• La Proteina UvrABC es la encargada de la escision y reparacion de los
dimeros de pirimidinas
• La Mutacion de las proteinas encargadas de la reparacion de los apareamientos
erroneos en los seres humanos se relaciona con el Cancer Colorrectal
hereditario no poliposico, conocido como Sindrome de Lynch
• La Radiacion UV puede causar union covalente de 2 pirimidinas,
generando dimeros de pirimidinas
• El Xeroderma pigmentoso es una enfermedad donde existen mutaciones en la
proteina UvrABC dando como resultado la acomulacion de mutaciones en la
piel generando asi desde una edad temprana diversos cancer de piel en las
personas
Tema III Estructura, sintesis y procesamiento de ARN
Transcripcion
-Es el proceso de copiado donde el ADN sirve de plantilla para la sintesis de ARN
• Existen 3 tipos de ARN
1 ARN ribosomico (ARNr)
• Es el mas abundante
• Su funcion es formar a los ribosomas
• Dependiendo del tipo de celula existen diferentes ARNr:
Procariotas: ARNr 5S, 16S, 23S
Eucariotas: ARNr: 5S, 5.8S, 18S, 28S
2 ARN Transferencia (ARNt)
• Es el ARN mas pequeño
• Existe al menos un tipo de especifico para cada uno de los 20 aminoacidos
• Sirve como una molecula adaptadora que transporta su aminoacido especifico
3 ARN Mensajero (ARNm)
• Es el ARN mas Heterogeneo (de mayor diversidad o tipos)
• Su funcion es transportar la informacion genetica del ADN para usarse en la
sintesis de proteinas
• Existen 2 tipos de ARNm, estos son:
1 Policistronico
-Es un ARNm de celulas procariotas (Bacterias) que contiene la informacion de
varios genes
2 Monocistronico
-Es un ARNm de celulas eucariotas, contiene la informacion de un solo gen

Transcripcion de los genes procariotas

La transcripcion la realiza la enzima ARN Polimerasa
-En las celulas procariotas solo existe una sola ARN Polimerasa que tiene varias
subunidades
-La transcripcion se da en 3 etapas:
1 Iniciacion
• En esta etapa la Holoenzima de la ARN polimerasa se une a la region del ADN
llamada PROMOTOR es reconocido por el factor Sigma
• El promotor en las procariotas contiene la caja Pribnow
2 Elongacion
• Se lleva a cabo la sintesis de ARN
3 Terminacion
• Se lleva a cabo la liberacion del ARN sintetizado
Nota: la RIFAMPICINA es un antibiotico que se utiliza en el tratamiento de
tuberculosis, inhibe la iniciacion de la transcripcion uniendose a la subunidad
beta de la ARN polimerasa procariota

Transcripcion de Genes en las celulas Eucariotas

La transcripcion en las celulas eucariotas es mas compleja y requiere de diferentes
ARN polimerasas, estas son:
1 ARN pol I: Sintetiza el ARNr 28s, 18s, 5.8s
2 ARN pol II: Sintetiza el ARNm, esta es inhibida por la Amanitina
3 ARN pol III: Sintetiza el ARNt y ARNr 5S
Notas:
• La caja TATA o de Hogness es la secuencia promotora en la transcripcion en
Eucariotas
• El TFLLF es el principal factor de transcripcion que contiene una proteina de
union a la caja tata
• Los potenciadores son secuencias de ADN que aumenta la tasa de iniciacion
de la transcripcion por la ARN pol II
Modificaciones postranscripcionales del ARNm
-El ARNm sufre 3 modificaciones postranscripcionales
1 Adicion de la caperuza
• La caperuza es una 7 metilguanosina unida al extremo 5' terminal
• Tiene como funcion estabilizar el ARNm, facilitar su salida del nucleo y permite
el inicio eficiente de la traduccion
2 Adicion de una cola de poli A
• Es una estructura compuesta de adeninas
• Sus funciones son estabilizar el ARNm, facilita su salida del nucleo y permite
una adecuada traduccion
• Se agrega en el extremo 3´ terminal
3 Corte y empalme
• Es el proceso donde se da la eliminacion de los Intrones y se unen las
secuencias restantes denominadas exones
Tema IV Sintesis de Proteinas
• La TRADUCCION es el proceso donde se da la sintesis de proteinas
• El codigo genetico se lee mediante CODONES, los cuales son tripletes de bases
nitrogenadas
• Existen 64 codones de los cuales:
61 codifican para aminoacidos
3 codones de TERMINACION o FINALIZACION (stop) estos son:
UAG UAA UGA
Nota: Existe un codon de inicio el cual es AUG codifica para el
aminoacido METIONINA
Las caracteristicas del codigo genetico son:
1 Universalidad (Universal)
• Su especificidad se ha conservado en todas las especies
2 Especificidad
• Un codon siempre codificara para el mismo aminoacido
3 Degeneracion
• Existe mas de un codon que codifica para un mismo aminoacido
4 Ausencia de superposicion y de comas
• Los codones no se superponen, ni existen comas ni puntuacion entre codones

Alteracion de la secuencia de los nucleotidos

• Las alteraciones en la secuencia de nucleotidos ocacionan Mutaciones, estas
son:
1 Mutacion Puntual
Es Aquella donde solo existe el cambio de UNA sola base nucleotida
Existen 3 tipos de mutacion puntual:
1.1 Mutacion Silenciosa
• Es aquella donde la base nucleotidica cambiada da como resultado un codon
que codifica para el mismo aminoacido
1.2 Mutacion de Contrasentido
• Es aquella donde la base nucleotidica cambiada da como resultado un codon
que codifica para otro aminoacido
1.3 Mutacion sin Sentido
• Es aquella donde la base nucleotidica cambiada da como resultado un codon
de terminacion lo cual dara como consecuencia una proteina truncada

2 Mutacion por expancion de REPETICION de TRIPLETES

• Se da por repeticion de una secuencia de 3 bases en tandem
• Las enfermedades causadas por esta mutacion son:
1 Enfermedad de Huntington
2 Sindrome de X Fragil
3 Distrofia Miotonica

3 Mutacion del sitio de corte y empalme

• Se da por alteraciones en la eliminacion de los Intrones en el ARNm
• La Distrofia muscular de DUCHENNE, es una enfermedad causada por esta
mutacion

4 Mutaciones del marco de lectura

• Se presenta por añadir o quitar nucleotidos a la region codificadora de un
ARNm
• La Fibrosis quistica es un ejemplo de esta mutacion
Componentes para llevar a cabo la traduccion
1 Aminoacidos
2 ARNt
• Tiene un sitio de union para un aminoacido especifico en su extremo 3´ y tiene
un anticodon que se acopla al codon especifico
3 Aminoacil ARNt Sintetasa
• Son enzimas que tienen como funcion reconocer y unir a los aminoacidos con
sus respectivos ARNt
4 ARNm
5 Ribosomas
• Organelo donde se lleva a cabo la sintesis de proteinas
• Se compone de 2 subunidades:
1 Subunidad Grande: Cataliza la formacion de los enlaces peptidicos
2 Subunidad Pequeña: Une al ARNm y determina la exactitud de la Traduccion
asegurando del correcto apareamiento (emparejando) del codon del ARNm y el
Anticodon
• El Ribosoma tiene 3 sitios de union:
Sitio A: Se une con un aminoacil-ARNt entrante
Sitio P: Es el que se encuentra ocupado por el Peptidil-ARNt que transporta la
cadena de aminoacidos que ya se ha sintetizado
Sitio E: Se une el ARNt vacio que esta a punto de salir del ribosoma

Etapas en la Traduccion
La traduccion se da en 3 etapas:
1 Iniciacion
• Se reconoce el codon de inicio AUG
• Existen 2 mecanismos mediante el cual el ribosoma reconoce el codon de inicio
1 Secuencia de Shine – Dalgamo PROCARIOTAS
2 Caperuza 5´ Prima EUCARIOTAS

2 Elongacion
• Consiste en la elongacion de aminoacidos, en esta etapa se lleva a cabo la
formacion del enlace peptidico por accion de la PeptidilTransferasa
3 Terminacion
• Se da cuando en el sitio A aparece uno de los 3 codones de terminacion
Modificaciones cotraduccionales y postraduccionales
Las modificaciones cotraduccionales son aquellas cuando la cadena polipeptidica
se encuentra unida al ribosoma
-Las modificaciones postraduccionales son aquellas que se presentan una vez que
concluyo la sintesis de la cadena polipeptidica
Las principales modificaciones postraduccionales son:
1 Fosforilacion – Agregar Grupos Fosfato
2 Glucosilacion – Agregar Monosacaridos
3 Hidroxilacion – Agregar Hidroxilos
Farmacos que actuan a nivel de la sintesis de proteinas
1 Estreptomicina
• Interfiere en la INICIACION de la sintesis de proteinas
• Se une a la subunidad 30S
• Se utiliza como antibiotico
2 Tetraciclinas
• Inhibe la ELONGACION
• Bloquean el acceso del aminoacil ARN transferencia al Sitio A
• Se une a la subunidad 30S
• Se utiliza como un Antibiotico
3 Puromicina
• Es un analogo estructural del aminoacil-ARN de transferencia y acepta un
peptido del sitio P
• Inhibe la ELONGACION y terminacion prematura en Procariotas y Eucariotas
4 Cloranfenicol
• Inhibe la peptidiltransferasa procariota
• Sus niveles elevados pueden inhibir la sintesis de proteinas mitocondriales
• Antibiotico
5 Eritromicina
• Se une a la subunidad 50S con lo cual inhibe la translocacion
• Se utiliza como Antibiotico
Tema V Regulacion de la Expresion Genica
La Expresion Genica es el proceso de multiples etapas que dan lugar a la
produccion de un producto funcional del gen ya sea una proteina o un ARN
• El principal sitio de regulacion genica es la TRANSCRIPCION
La regulacion o control de la transcripcion esta dada por:
1 Secuencias reguladoras de ADN
2 Moleculas reguladoras
3 Genes constitutivos
-Son los genes que se codifican CONSTANTEMENTE
-Se les conoce como genes de mantenimiento
-Codifican productos necesarios para las funciones celulares basicas
4 Genes regulados
-Son los genes que se expresan en ciertas condiciones y pueden expresarse en -
-todas o en un solo tipo de celulas
Regulacion de la Expresion genica en Procariotas
El modelo genetico del OPERON permite comprender como tiene lugar la
regulacion de la expresion genica en bacterias
El Operon es un grupo de genes organizados secuencialmente junto con los
elementos reguladores que determinan su transcripcion
Los principales elementos de un operon son:
1 Genes estructurales
2 Promotor:
• Es una region reguladora presente en el ADN cercana al sitio de inicio de la
transcripcion de un gen, en donde se inicia la sintesis del ARN
3 Operador: Se localiza entre el promotor y los genes estructurales
4 Gen Regulador
5 Proteina Reguladora 6 inductor
Operon Lactosa
-Se abrevia como opero LAC, es un sistema indusible conformado por genes que
codifican para el catabolismo de la lactosa
-Los genes estructurales del operon lactosa son:
1 GEN Z (Lac Z): Codifica para la enzima beta galactosidasa
2 GEN Y (Lac Y): Codifica para la enzima Galactosido permeable
3 GEN A (Laca): codifica para la enzima Tiogalactosido Transcetilasa
La regulacion del operon lactosa se da en 3 modos:
1 Modo Activado:
• La GLUCOSA debe estar AUSENTE
• la LACTOSA debe de estar PRESENTE
2 Modo Desactivado:
• GLUCOSA PRESENTE LACTOSA AUSENTE
3 Modo NO Inducido
• GLUCOSA PRESENTE
• LACTOSA PRESENTE
Operon triptofano
• Es un sistema represible ya que el aminoacido Triptofano (Correpresor) impide la
expresion de los genes necesarios para su sintesis
• En AUSENCIA de triptofanos o de niveles muy bajos se transcriben los genes del
operon triptofano
• La Ausencia lo Activa, la Presencia lo Inhibe
Regulacion de la Expresion Genica en Eucariotas
Existen diferentes sistemas debido a su complejidad, estos son:
1 Sistema de Respuesta Hormonal
Este sistema se regula a nivel de receptores de tipo:
1.1 Receptores de la Superficie Celular: Insulina y Glucagon
1.2 Receptores Intracelulares (Citoplasmaticos o nuclares): Hormonas Esteroideas
(Cortisol, Aldosterona, Testosterona)
2 Procesamiento y Utilizacion de ARNm
2.1 Edicion del ARNm: Este sistema tiene como ejemplo la sintesis de la
Apoproteina B (Apo B)
2.2 Estabilidad del ARNm: Este sistema da como resultado la Regulacion del
Metabolismo del Hierro y el proceso del Silenciamiento del Gen por el ARN de
interferencia (ARNi)
• El ARNi despempeña una funcion clave en procesos como la proliferacion,
diferenciacion y apoptosis celular
3 Regulacion a traves de modificaciones en el ADN
La ACETILACION y FOSFORILACION de las histonas, DISMINUYE la fuerza de
asociacion que tienen con el ADN (Se encuentra relajado) favoreciendo la
Transcripcion
-La METILACION causa que los genes NO se transcriban, es decir, los genes menos
metilados son transcripcionalmente ACTIVOS
4 Organizacion del ADN
-Un ejemplo de este sistema es el proceso por el cual los linfocitos B producen las
Inmunoglobulinas (Anticuerpos)
5 Elementos moviles de ADN (Transposones)
-TIenen el potencial de alterar la expresion genica, causando enfermedades como:
1 Hemofilia
2 Distrofia muscular de Duchenne
3 Persistencia a Antibioticos
Intensivo 4 Parcial Bioquimica
Dia 1 Metabolismo de Nucleotidos y ADN
1 Los nucleotidos son moleculas que conforman a los acidos nucleicos (ADN
y ARN)
2 Los nucleotidos se componen de 3 elementos:
• Base Nitrogenada existen 2 tipos:
Purinas: Adenina y Guanina
Pirimidinas: Timina, Citosina y Uracilo
• Timina no hay en el ARN, Uracilo solo presente en el ARN
3 Los nucleosidos solo se componen de 2 elementos: Azucar de 5 carbonos y Base
nitrogenada
4 La sintesis de purinas utiliza como fuente de carbono:
Aminoacidos: Glicina, Glutamina y Aspartato CO2 N10 -
Formiltetrahidrofolato
5 La principal enzima en la sintesis de purinas: Glutamina Fosforribosilpirofosfato
Amidotransferasa
6 Esta enzima cataliza la reaccion:
Fosforribosilpirofosfato ------------> 5 Fosforribosilamina
7 El AMP y GMP inhiben a la GPAT
8 El IMP es el nucleotido purinico MADRE que da origen al AMP y GMP
9 El AMP requiere para su sintesis el ASPARTATO, el GMP requiere para su sintesis
la GLUTAMINA
10 La SULFONAMIDAS son analogos estructurales del acido PABA
11 EL METOTREXATO es un analogo del acido folico, inhibe la enzima
Dihidrofolato reductasa y antineoplasico
12 El Acido Micofenolico es un inhibidor irreversible de la enzima Inosina
Monofosfato desihidrogenasa, sirve para evitar el rechazo de injertos
(Inmunosupresor)
13 Las enzimas ribonucleasas y desoxirribonucleasas son responsables de
hidrolizar el ARN y ADN provenientes de la dieta, estas enzimas son secretadas por
el pancreas
14 El sindrome de Lesch Nyhan se caracteriza:
1 Px con trastorno psicomotor
2 Desnutricion
3 Tofos gotosos
4 Rigidez articular
5 Conductas agresivas
6 Automutilacion
15 Este sindrome se debe a la cantidad excesiva de acido urico producto de la
incapacidad de utilizar la Hipoxantina o guanina
16 La via metabolica alterada en este sindrome es el Rescate de purinas y la
enzima que se encuentra deficiente: Hipoxantina Guanina Fosforribosiltransferasa
17 La enzima ribonucleotido reductasa es la principal de la sintesis de
Desoxirribonucleotidos
18 El Acido urico es el producto final de la degradacion de las bases purinas
19 EL ALLOPURINOL es un farmaco que se utiliza en el tratamiento de la GOTA, es
un analogo estructural de la hipoxantina, que inhibe a la enzima: Xantina Oxidasa
20 La DEFICIENCIA de la enzima ADENOSINA DESAMINASA causa una
inmunodeficiencia combinada grave
21 Las fuentes de carbono para la sintesis de pirimidinas son principalmente:
Glutamina y Aspartato
22 La enzima mas importante de la sintesis de pirimidinas: Carbamoil fosfato
sintetaza II
23 El UTP es el producto final de las vias de las pirimidinas
24 El 5 Fluorouracilo inhibe la enzima Timidilato sintasa, sirve como agente
Antineoplasico
25 El dogma central de la biologia molecular:
ADN ---> ARN ---> PROTEINAS
26 El ADN tiene una estructura de doble helice, sus hebras son antiparalelas y
tienen surcos que proporcionan accesos para la union de proteinas reguladoras
27 La DACTINOMICINA (Actinomicina D) se une al surco menor, interfiere en la
sintesis de ADN y ARN
28 Las bases nitrogenadas se aparean de la siguiente manera:
ADN A – T G – C ARN A – U
29 En la REPLICACION del ADN en PROCARIOTAS solo tiene un sitio de replicacion
30 La Replicacion es un proceso donde el ADN se duplica
31 La enzima que lleva a cabo la replicacion del ADN es la polimerasa de ADN
32 La ADN polimerasa III es la encargada de la sintesis y elongacion de la cadena
de ADN
33 La ADN polimerasa I es la encargada de eliminar el ARN inciador de rellenar los
huecos que se generan durante la reparacion del ADN
34 La topoisomerasas son las enzimas responsables de eliminar los
superenrrollamientos de la helice del ADN
35 Las camptotecinas son farmacos que inhiben a la topoisomerasa tipo I
36 El Etoposido es un farmaco que inhibe a la topoisomerasa tipo II
37 La fluoroquinolona inhibe a la ADN Girasa
38 El primosoma sintetiza el PRIMER y los fragmentos de okasaki
39 La primasa sintetiza el fragmento de ARN complementario al primer
40 La ADNLigasa es la enzima que forma al enlace fosfodiester al final en la
replicacion del ADNN
41 La Pol S sintetiza los fragmentos de okasaki
1 El aminoacil ARNt sintetasa son enzimas que tienen como funcion reconocer y
unir los aminoacidos con su respectivo ARNt
2 La secuencia en Procariotas que es reconocida al inicio de la traduccion es Shine
– Dalgarno y en Eucariotas es la caperuza 5'
3 La enzima Peptidil transferasa es la encargada de sintetizar el enlace peptidico
4 El cloranfenicol inhibe a la peptidil transferasa procariota, niveles elevados de
este farmaco inhiben la sintesis de proteinas mitocondriales
5 La Eritromicina se una a la Sub unidad 50S inhibe la translocacion de la
traduccion
Dia 3 Expresion genica y Biotecnologia
1 La regulacion de la expresion genica tiene lugar principalmente a nivel de la
TRANSCRIPCION
2 La modificacion de los niveles de Acetilacion de las histonas es un ejemplo de
epigenetica
3 Los genes CONSTITUTIVOS (de mantenimiento) son aquellos que se expresan de
forma continua
4 Los genes regulados se expresan en ciertas condiciones
5 El operon lactosa presenta 3 estados:
ACTIVADA: Glucosa Ausente, Lactosa Presente
INACTIVADA: Glucosa Presente, Lactosa Ausente
MODO NO INDUCIDO: Glucosa y Lactosa presentes
6 El Operon triptofano es un sistema REPRESIBLE ya que el aminoacido
TRIPTOFANO impide la expresion de este operon y su ausencia activa al operon
7 La expresion genica es el proceso de multiples etapas que se lleva a cabo para
producir el producto de un gen
8 Un operon es un grupo de genes organizados secuencialmente junto con los
elementos reguladores que determinan su transcripcion
9 El promotor es una region reguladora en el ADN cercana al sitio de inicio de la
transcripcion de un gen, en donde se inicia la sintesis de ARN
10 La edicion del ARNm, es un sistema que da origen a la Apoproteina B (ApoB)
11 La estabilidad del ARNm es un sistema que lleva a cabo la regulacion del
metabolismo del hierro
12 El ARNi (ARN de interferencia) despempeña una funcion clave en procesos
como la proliferacion, diferenciacion y apoptosis celular
13 La organizacion del ADN es el sistema por el cual los linfocitos B producen las
inmunoglobulinas o anticuerpos
14 El GENOMA es el conjunto de todos los genes del material genetico
15 El PROTEOMA es el conjunto total de las PROTEINAS que se expresan en el
ADN
16 El proyecto de genoma humano se pudo llevar a cabo devida a 3 tecnicas:
• Endonucleasas de restriccion
-Son enzimas bacterianas, que escinden (Cortan) el ADN de doble cadena en
fragmentos pequeños de 4 a 8 pares de bases
• Clonacion
.Es el proceso por el cual se introduce una molecula de ADN extraño de la celula
que se esta replicando
-Para llevar a cabo este proceso se requiere de VECTORES los cuales son moleculas
de ADN a las cuales se le une el fragmento de ADN que se va a clonar
-Los principales vectores son: Plasmidos y Bacteriofagos
• Sondas
-Es un fragmento corto de ADN o ARN monocatenario marcado con un Isotopo
radioactivo o con una molecula como la BIOTINA B7 o un tinte floresente
-Las sondas se utiliza en un proceso llamado DETECCION o HIBRIDACION
-Las sondas biotiniladas se utilizan en la tecnica FISH
-Las sondas de oligonucleotidos se utilizan para detectar cambios de una sola
base, se utiliza para detectar la mutacion de la ANEMIA DREPANOSITICA
17 En las celulas que podemos extraer una muestra de ADN son Leucocitos y
Linfocitos
18 Las Genotecas son conjuntos de fragmentos de ADN de restriccion clonados de
un organismo
19 Tecnicas de deteccion de secuencias especificas:
1 Southern Blot:
-Metodo de deteccion de secuencias de ADN
2 Northern Blot:
-Metodo de deteccion de secuencias de ARN
3 Westhern Blot:
-Metodo de deteccion de proteinas Prueba confirmatoria de VIH
4 Elisa
Primer prueba utilizada en el tamisaje del VIH
5 PCR (Reaccion de cadena de polimerasa)
• Es un metodo que permite la amplificacion in vitro de millones de copias de un
gen o de material genetico
• Los elementos necesarios para llevar a cabo la PCR son
1 AND polimerasa termoestable 2 Primer 3 Nucleotidos
• La PCR se utiliza para:
-Detectar secuencias de ADN virales, la PCR es la prueba mas precoz para la
deteccion de VIH
-Se utiliza para diagnostico prenatal y deteccion de fibrosis quistica
20 Los microarreglos de ADN contienen miles de secuencias de ADN
monocatenario en un area, se pueden utilizar para subclasificar y optimizar el
tratamiento del cancer de mama
Polimorfismo de la longitud de los fragmentos de restriccion (PLFR)
21 Un POLIMORFISMO es una variacion de secuencias en un locus determinado
(Alelo) que se da en mas del 1 % de la poblacion
22 La PLFR es una variante genetica que puede examinarse al cortar el ADN en
fragmentos de restriccion, sirven para:
1 Los PLFR de tipo NVRT (numero variable de repeticiones en tandem) estos se
utilizan en casos FORENSES y casos de PARTENIDAD
2 Los PLFR sirven para el diagnostico de: Drepanocitosis dx directo y Fenilcetonuria
Dx Indirecto
23 La TERAPIA GENICA tiene como principal funcion tratar enfermedades al
insertar el ADN normal clonado de un gen, en algunas enfermedades causadas por
mutacion. Un ejemplo donde se utilizo de manera exitosa la terapia genica es en la
enfermedad de inmunodeficiencia combinada grave
• Hidroxiurea: Es un agente neoplasico, se utiliza en el tratamiento de Melanoma
y anemia de celulas falciformes, y es antipaludico
• ALOPURINOL: Es un analogo estructural de la hipoxantina que inhibe a la
enzima Xantina oxidasa Xantina Oxidasa
• 5 Fluorouracilo: inhibe a la enzima Timidilato Sintasa
• ACICLOVIR: Analogo de purinas que se utiliza para tratar infecciones del Virus
Herpes
• AZT: analogo de pirimidinas, que se utiliza en el tratamiendo del VIH
• DACTOMICINA Farmaco que se une al surco menor, inhibiendo la sintesis de
ADN y ARN
• RIFAMPICINA:se utiliza en el tratamiento de tuberculosis, inhibe la iniciacion d
e la transcripcion uniendose a la subunidad beta de
la ARN polimerasa procariota