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PRACTICAS

INTERACCIÓN DE LA LUZ SOBRE LA GERMINACIÓN EN SEMILLAS DE


LECHUGA (LACTUCA SATIVA, VAR. XXXX)
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1. INTRODUCCIÓN

El crecimiento y desarrollo vegetal lo constituye una sucesión encadenada de procesos


controlados por factores génicos, hormonales y medioambientales.

La luz (entendiendo por luz al conjunto de radiaciones electromagnéticas con efectos


fisiológicos, es decir, que tienen influencia conocida en el crecimiento y desarrollo vegetal-
y que abarcan la región del visible y ciertas longitudes infrarrojas y ultravioletas próximas)
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es uno de los factores ambientales fundamentales para el desarrollo de los seres autótrofos.
No obstante, su importancia para las plantas no solo se limita a la captación y transducción
de energía mediante la fotosíntesis. Las plantas son también capaces de captar señales
lumínicas y por diversos mecanismos responder biológicamente a estas variaciones de luz
del medio, con cambios en el valor adaptativo que abarcan las diferentes fases del ciclo
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biológico (germinación, desarrollo vegetativo, dormición, floración...) Por este mecanismo,


las plantas son sensibles para detectar y transducir internamente las variaciones cualitativas
de intensidad, dirección y duración de la luz.

Todos estos fenómenos no son producidos en igual medida por todos los tipos de luz (al
decir luz en realidad hablamos del conjunto de longitudes de onda del espectro
electromagnético1) sino que algunas radiaciones concretas tienen un efecto notable en un
proceso determinado, mientras que otras tienen poco o ningún efecto.
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Espectro electromagnético
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Los diferentes tipos de radiación electromagnética se pueden clasificar según sea su longitud de
onda, así podemos obtener un espectro electromagnético formado por las diferentes longitudes de
onda de la radiación electromagnética, que van desde los 10 -16 m hasta los 104 m. De todas estas
longitudes de onda sólo las comprendidas entre 380 y 775 nm (región visible) pueden ser percibidas
por el ojo humano: ese conjunto de radiaciones es el que denominamos luz en el lenguaje coloquial.
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Asignatura Botánica y Fisiología Vegetal Dpto. Biología Vegetal


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2. OBJETIVOS
El objetivo principal es observar y evaluar el efecto que tienen sobre la germinación las
diferentes fuentes de luz (POLICROMATICA, AZUL, ROJO, ROJO LEJANO…).
Cómo objetivos transversales:
Responsabilidad en la fiabilidad de los resultados
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Importancia de las condiciones ambientales en la experimentación


Reforzar conocimientos sobre: Semilla, Germinación, Espectro electromagnético…
3. MATERIAL BIOLÓGICO
Una semilla es el producto de la fecundación del óvulo por los gametos masculinos y su
germinación es un proceso indispensable para su perpetuación en el tiempo como especie.
Para que se produzca la germinación deben existir factores abióticos que son específico
para cada tipo de semillas, estos son: Agua, se señala como el factor más importante para
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que ocurra la germinación; Oxígeno, disponible tanto del agua como del ambiente gaseoso;
Temperatura específica dependiendo del hábitat donde se encuentra la planta y Luz
considerado como un factor que puede incidir de forma más o menos pronunciada en la
germinación dependiendo del tipo de semillas.
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T. Coronado y C. Fernandini
Universidad de Concepción
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Diagrama de una semilla de Lactuca sativa

La lechuga es una hortaliza de gran importancia a nivel mundial por ser poco laborioso su
cultivo. Es una especie de estación fría cuyo desarrollo ocurre alrededor de los 15 a 18º C.
Aunque la luz no es un factor determinante en la germinación, se considera de acuerdo con
la bibliografía, un promotor que induce a la semilla a finalizar el estado de latencia.
Por ello los estudios realizados con semillas de lechuga (en realidad es un fruto denominado
cipsela2), es un buen material para determinar el papel que cumple la luz en la germinación.
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Sabemos que la estructura encargada de captar la luz es el Fitocromo3, el cual es una


glicoproteína conjugada con un cromóforo azul llamado Fitocromobilina (Taiz y Zeiger 2010,
5ª ed.; Azcón-Bieto y Talón 2008, 2ª ed.).
Su forma activa es inducida con longitudes de onda de luz roja (650 – 680 nm) y su forma
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inactiva es inducida por la acción de longitudes de onda de rojo lejano (710-740 nm). Estos
dos mecanismos se encuentran en equilibrio, dependiendo de la luz que este incidiendo.
(2).- Cipsela: fruto seco, indehiscente y con una sola semilla, es decir, como el aquenio, pero procedente de la
maduración de un ovario ínfero, por lo que se trata en realidad de un fruto complejo.

(3)TEXTO Repaso del concepto y funciones de los Fitocromos (sobre el texto pinchar a la vez las teclas –
Ctrl + Enter)
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MATERIAL DE LABORATORIO.- Cada Grupo ha de contar con:

85 semillas de lechuga variedad XX gr (costo: XX€)


4 Placas Petri plásticas (costo: XX€)
3 pliegos de Papel de Filtro (costo: XX€)
1 Pinzas (costo: XX€)
200 ml Agua destilada estéril (costo: XX€)
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100 ml Etanol acuoso al 70%.


1 colador (costo: XX€).
1 Pipeta de 5 ml (costo: XX€).
1 Propipeta (costo: XX€)
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1 pliego de papel celofán: rojo, azul… (costo: XX€)


1 pliego Papel-Aluminio domestico (costo: XX€)
1 Probeta de 10 ml (costo: XX€)
Costo TOTAL:
• Para VER la Ficha de Seguridad del Etanol
• Para VER la Ficha de Seguridad del Agua destilada
(sobre el texto pinchar a la vez las teclas – Ctrl + Enter)

(3).- Las Fichas de Seguridad (FDS) constituyen un sistema básico y complementario del etiquetado, 3
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que recogen aspectos preventivos y/o de emergencia a tener en cuenta. El responsable de la


comercialización de un producto químico debe facilitar al destinatario profesional la FDS de forma
gratuita y con la primera entrega así como las posteriores modificaciones.
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3. METODO

Una vez el grupo ha leído y entendido la práctica, procederemos como sigue:

1º.- Organizar las actividades a realizar y asignar a cada miembro del grupo la responsabilidad de
las diferentes tareas. Plasmar el organigrama resultante en el cuaderno de laboratorio.

2º.- Comprobar inventario del material de laboratorio asignado al grupo. Ante cualquier incidencia
anotarla en el formulario que se entregara en el laboratorio para ello.
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3º.- Limpiar el material de laboratorio (agua y jabón, aclarar con abundante agua del grifo y
finalmente pasar por agua destilada), las Placas Petri han de ser lavadas por 2ª vez con alcohol
etílico/agua (70%, v/v) y luego volver a aclararlas con agua destilada. Tras lo cual dejaremos
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secar o secamos con papel de laboratorio (¡NO USAR PAPEL DE FILTRO!).

4º.- Organizar el puesto de trabajo de acuerdo al orden de las labores a realizar.

5º.- Preparar:

Discos de Papel de Filtro para colocar en las Placas Petri. Se pondrán dos discos por placa.

Preparar 2 sobres de papel de aluminio (marcados y pesados) para obtener el peso seco.
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Preparar los sobres de papel celofán y Aluminio para metre la Placas Petri en ellos (1/placa).

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6º.- Seleccionar las semillas: separaremos y eliminaremos las semillas que muestren daños,
manchas…En el cuaderno de laboratorio hemos de reflejar el nº de semillas descartadas por
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los diferentes motivos, porcentaje de descarte en función del número de semillas que se
entrego al grupo. Finalmente, las semillas aptas se repartirán en tantos grupos como
condiciones vamos a ensayar, teniendo en cuenta el material necesario para el peso Seco.
Las semillas han de escogerse aleatoriamente.

7º.- Toma de datos iniciales a las semillas:

a) PESO: se pesaran las 100 semillas en grupos de 10 para obtener el peso medio… (En el
seminario final de las prácticas se trabajara con los datos, su representación y discusión).
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b) MEDIDAS: seleccionaremos aleatoriamente 15 semillas para la toma de datos de medida,


los datos se tomaran mediante un programa de análisis de imagen acoplado a una lupa
binocular.
c) PESO SECO: se tomaran 10 semillas en dos grupos de 5 semillas:
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a. 5 semillas se usaran para obtener el Peso Fresco y Seco inicial


b. 5 semillas se usaran para obtener el Peso Fresco y Seco tras la imbibición

8º.- Ensayos de Germinación de las semillas:

a) Limpieza y saneamiento superficial de las semillas:


I. Lavar el resto de las semillas en agua jabonosa con tres gotas de lejía durante 3
min. Para eliminar impurezas ambientales y permeabilizar capas grasas.
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II. Aclarar en agua corriente 6 min., para ello nos ayudaremos de un colador

III.
domestico.
Saneamiento superficial y permeabilización de superficies grasas y céreas 4
mediante inmersión de 20 seg. en una solución acuosa de etanol a 70%.
IV. Aclarar 2 veces con agua destilada estéril, para ello nos ayudaremos del colador
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domestico.
b) Separaremos aleatoriamente las semillas en 4 grupos de 15 semillas y las sembraremos
en las placas de petri a las que hemos añadido dos discos de papel de filtro y XX ml de
agua destilada estéril.

c) Siembra: ponga las semillas de Lactuca sativa (lechuga) sobre placas Petri con papel
filtro embebido con agua destilada (las semillas deben estar casi flotando) y separadas
entre sí todo lo posible.
d) Ensayos: aplique los siguientes tratamientos:
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I. Aplique a placa luz Blanca o poli cromática (placa sin envoltura o con
envoltura de celofán incoloro)
II. Aplique a placa luz Roja (placa envuelta en papel celofán rojo)
III. Aplique a placa luz Rojo Lejano (placa envuelta en papel de aluminio)
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IV. Aplique a placa luz Azul o Verde o Amarillo…(placa envuelta en papel celofán
del color elegido)
(Nota: Envuelva las placas Petri con las semillas de lechuga según corresponda.)

9º.- Valores y Resultados:

Valores.-
Peso fresco y seco inicial
Peso fresco y seco tras 1h de imbibición
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Medidas: Largo y ancho

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Germinación.-

Anote el Número de semillas germinadas de acuerdo con el siguiente cronograma:

Medida de la radícula
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Medida de la
parte aérea

En cada tratamiento. Ver Nº de semillas germinadas a las 24 h, porcentaje de germinación y


semillas no germinadas. Tamaño de la radícula en las semillas germinadas
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En cada tratamiento. Ver Nº de semillas germinadas a las 48 h, porcentaje de germinación y


semillas no germinadas. Tamaño de la radícula en las semillas germinadas

En cada tratamiento. Ver Nº de semillas germinadas a las 72 h, porcentaje de germinación y


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semillas no germinadas. Tamaño de la radícula en las semillas germinadas

En cada tratamiento. Ver Nº de semillas germinadas a los 7 días, porcentaje de germinación


y semillas no germinadas. Tamaño de la radícula en las semillas germinadas

En cada tratamiento. Calcular la relación entre la parte aérea (hipocotilo) y la radicular de


semillas germinadas a los 7 días. 5
En cada tratamiento. Ver Nº de semillas germinadas a los 14 días, porcentaje de
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germinación y semillas no germinadas. Tamaño de la radícula y de la parte aérea


(hipocotilo) en las semillas germinadas. Calcular la relación entre la parte aérea y la
radicular
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Represente gráficamente los resultados.

10. DISCUSIÓN Y CONCLUSIONES

Intente explicar los resultados observados apoyándose en la literatura y fuentes documentales


recomendadas o disponibles.
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