Prueba Rápida de FOB Recoger las heces en un recipiente de recolección de muestras, limpio y seco. Se 4.
uestras, limpio y seco. Se 4. Se requieren otras pruebas clínicas disponibles si se obtienen resultados dudosos.
en Casete (Heces)
Instructivo de Uso
REF. OFOB-C61
Prueba rápida de un solo paso para la detección cualitativa de sangre humana en
heces. Solo para uso diagnostico profesional in vitro.
USO PREVISTO
La Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) es un inmunoensayo cromatográfico rápido
para la detección cualitativa de sangre humana oculta en muestras de heces.
RESUMEN
Varias enfermedades pueden causar sangre oculta en heces, también conocido como
Sangre Oculta en Heces, FOB (por sus siglas en inglés), Sangre Humana Oculta o
Hemoglobina Humana. En etapas tempranas los problemas gastrointestinales como el
cáncer de colon, las úlceras, los pólipos, la colitis, la diverticulitis y fisuras pueden no
presentar ningún síntoma visible, solo sangre oculta. Los métodos tradicionales basados
en la prueba de guayaco carecen de sensibilidad y especificidad, y además tienen
restricciones en la dieta antes de la prueba.1, 2
La Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) es una prueba rápida para detectar
cualitativamente niveles bajos de sangre oculta en heces. La prueba utiliza un ensayo
tipo sándwich de doble de anticuerpo para detectar de manera selectiva la Sangre Oculta
en Heces a 50ng/ml o más, o 6μg/g de heces. Además, a diferencia de las pruebas de
guayaco, la precisión de la prueba no se ve afectada por la dieta de los pacientes.
PRINCIPIO
La Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) es un inmunoensayo cualitativo de flujo
lateral que sirve para la detección de Sangre Oculta en Heces. La membrana se recubre
previamente con un anticuerpo anti hemoglobina en la línea de la zona de prueba.
Durante la prueba, la muestra reacciona con partículas cubiertas con anticuerpo-
hemoglobina. La mezcla migra hacia arriba en la membrana cromatográficamente por
acción capilar para reaccionar con el anticuerpo de la prueba y genera una línea de color.
La presencia de una línea de color en la zona de prueba indica un resultado positivo,
mientras que su ausencia indica un resultado negativo. Como control de procedimiento,
siempre aparecerá una línea roja en la zona de control, indicando que se ha añadido el
volumen adecuado de muestra y se ha producido la absorción de la membrana.
REACTIVOS
La prueba contiene partículas de anticuerpos anti hemoglobina cubierto en la membrana.
PRECAUCIONES
• Solo para uso profesional de diagnóstico in vitro. No utilizar la prueba después de la
fecha de expiración.
• La prueba debe permanecer en el sobre sellado hasta su uso.
• No comer, beber o fumar en la zona en que se manipulan las muestras y los kits de
prueba.
• Manipular todas las muestras como si contuvieran agentes infecciosos. Observar las
precauciones establecidas frente a peligros microbiológicos durante todos los
procedimientos y siga los procedimientos estándares para la adecuada eliminación de
las muestras.
• Utilizar ropa protectora como batas de laboratorio, guantes desechables y protección
para los ojos cuando se estén analizando las pruebas.
• Las pruebas utilizadas deben desecharse de acuerdo con las regulaciones locales.
• La humedad y la temperatura pueden afectar de forma perjudicial los resultados.
ALMACENAMIENTO Y ESTABILIDAD
El kit se puede almacenar a temperatura ambiente o refrigerado (de 2 a 30°C). La prueba
en casete está segura hasta la fecha de caducidad impresa en el sobre. La prueba debe
permanecer dentro del sobre sellado hasta su uso. NO CONGELAR. No utilizar después
de la fecha de caducidad.
OBTENCIÓN Y PREPARACIÓN DE LA MUESTRA
• Las muestras no deben obtenerse durante o dentro de los tres días del periodo
menstrual, o si el paciente sufre de sangrado de hemorroides o sangre en orina.
• El alcohol, la aspirina y otros medicamentos administrados en exceso pueden causar
irritación gastro intestinal causando un sangrado oculto. Estas sustancias deben ser
descontinuadas al menos 48 horas antes de la prueba.
• No se necesita ninguna restricción de dieta antes de usar la Prueba Rápida de FOB en
Casete (Heces).
MATERIALES
Materiales suministrados
●Casetes de Prueba ●Instructivo de Uso
●Tubos de Recolección de Muestras con Buffer de Extracción
Materiales requeridos, pero no suministrados
●Recipientes para obtención de muestra ●Cronómetro
INSTRUCCIONES DE USO
Permita que el casete de prueba, el tubo de recolección de muestras, la muestra y/o
los controles alcancen la temperatura ambiente (de 15 a 30°C) antes del análisis.
1. Para recoger muestras fecales:
obtendrán mejores resultados si se utiliza la prueba dentro de las 6 horas después de VALORES ESPERADOS
la obtención de muestras. La muestra recogida puede almacenarse por 3 días de 2- La Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) se ha comparado con otras pruebas
8°C si no se analiza dentro de las 6 horas. rápidas comerciales líderes en el mercado. La correlación de estos dos sistemas es del
2. Para procesar las muestras fecales: 98.3%.
Desenroscar la tapa del tubo de recolección de muestras, luego pinchar aleatoriamente CARACTERÍSTICAS DE EJECUCIÓN
con el aplicador en tres sitios diferentes de la muestra fecal. No sacar por montos la Exactitud
muestra fecal. Se ha comparado la Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) con una prueba rápida
Enrosque la tapa y asegúrela sobre el tubo de recolección de muestra, luego agite líder en el mercado utilizando muestras clínicas.
vigorosamente el tubo de recolección de muestra para mezclar la muestra y el buffer Método Otra Prueba Rápida Resultados
de extracción. Las muestras preparadas en el tubo de recolección de muestras pueden Prueba Rápida Resultados Positivo Negativo Total
almacenarse por 6 meses a -20°C si no se analiza dentro de 1 hora después de la de FOB en Positivo 210 6 216
preparación. Casete (Heces) Negativo 12 850 862
3. Poner el sobre a temperatura ambiente antes de abrirlo. Retirar el casete de prueba Resultados Total 222 856 1078
del sobre de aluminio y utilícelo lo antes posible. Se obtendrán mejores resultados si
se realiza la prueba inmediatamente después de abrir el sobre. Sensibilidad relativa: 210/222=94.6% (95%CI*: 90.7%~97.2%);
4. Mantener el tubo de recolección de muestras hacia arriba y abrir la tapa del tubo de Especificidad relativa: 850/856=99.3% (95%CI*: 98.5%~99.7%);
recolección de muestras. Invierta el tubo de recolección de muestra y transferir 2 gotas Exactitud relativa: (210+850) / (210+6+12+850) =98.3% (95%CI*: 97.4%~99.0%).
completas de la muestra extraída (aproximadamente 80 μL) al pozo de la muestra (S) *Intervalos de confianza
del casete de prueba, luego active el cronómetro. Evitar las burbujas de aire en el pozo Sensibilidad
de la muestra (S). Vea la siguiente ilustración. La Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) se puede detectar a niveles de sangre
5. Leer los resultados a los 5 minutos. No leer los resultados después de 10 minutos. oculta humana tan bajos como 50 ng/ml o 6 μg/g.
Precisión
Intraensayo
La precisión intraensayo se ha determinado empleando 15 réplicas de tres muestras:
50ng/ml, 100ng/ml y 10μg/ml positivos. Las muestras se identificaron correctamente el
>99% de los casos.
Interensayo
La precisión interensayo se ha determinado mediante 15 ensayos independientes en las
mismas tres muestras: 50ng/ml, 100ng/ml y 10μg/ml positivos. Se probaron 3 lotes
diferentes de la Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) utilizando estas muestras. Las
muestras se identificaron correctamente el >99% de los casos.
Reacción cruzada
La Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) es específica para hemoglobina humana.
Las muestras conteniendo las siguientes substancias se diluyeron en el buffer de
extracción a la concentración de 1.0 mg/ml, y analizadas en ambos controles positivo y
negativo sin efecto en los resultados de la prueba: hemoglobina de bovino, hemoglobina
de pollo, hemoglobina de Puerco, hemoglobina de cabra, hemoglobina de caballo,
hemoglobina de conejo y hemoglobina de pavo.
BIBLIOGRAFÍA
1. Simon JB. Occult Blood Screening for Colorectal Carcinoma: A Critical
Review,Gastroenterology, 1985; 88: 820.
2. Blebea J, Mcpherson RA. False-Positive Guaiac Testing With Iodine, Arch PatholLab
Med, 1985;109:437-40.
INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
(Consulte la ilustración anterior)
POSITIVO:* Aparecerán dos líneas de color. Una línea debe estar en la zona de control
(C) y otra línea de color, en la línea de zona de prueba (T).
*NOTA: La intensidad del color de la línea en la zona de prueba (T) puede variar
dependiendo de la concentración de la sangre oculta fecal presente en la muestra. Por lo
tanto, cualquier tonalidad del color en la zona de la prueba (T) debe ser considerarse
positiva.
NEGATIVO: Aparece una línea de color en la zona de control (C). No aparece ninguna
línea en la zona de prueba (T).
NO VÁLIDO: No aparece la línea de control. Un volumen de muestra insuficiente o una
técnica incorrecta del procedimiento son los principales motivos de invalidación de la
prueba. Revise el procedimiento y repita la prueba con un nuevo casete. Si el problema
persiste, interrumpa inmediatamente el uso del kit de prueba y comuníquese con su
distribuidor local.
CONTROL DE CALIDAD Fabricado para Mont Group SAC
En la prueba se incluye un control del procedimiento. La aparición de una línea roja en la
zona de control (C) se considera control de procedimiento interno. Esto confirma el uso
de volumen suficiente de muestra, una adecuada absorción de la membrana y técnicas
procesales correctas. Los estándares de control no se suministran con este kit de prueba;
Número: RP5089501
sin embargo, se recomienda que se realicen análisis de control positivos y negativos
Fecha efectiva: 09-10-2013
como buena práctica de laboratorio para confirmar el procedimiento de la prueba y
verificar un rendimiento adecuado de prueba.
LIMITACIONES
1. La Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) está destinada únicamente para
diagnóstico in vitro.
2. La Prueba Rápida de FOB en Casete (Heces) solo indicará la presencia de sangre en
la muestra de heces y no indica necesariamente un sangrado colorrectal.
3. Al igual que todas las pruebas de diagnóstico, deberán estudiarse todos los resultados
junto con la información clínica disponible para el médico.