MUESTREO, SIEMBRA E

INOCULACIÓN DE
MICROORGANISMOS
OBJETIVO
Conocer:
• Técnicas de muestreo.
• Procesamiento de muestras en el laboratorio.
• INTRODUCCIÓN
• MUESTREO
 SUELO
Collection and Storage Specifications for a
Quality Assurance Project Plan (QAPP)

Sampling strategies: Number and type of

samples, locations, depths, times, intervals.

Sampling methods: Specific techniques and

equipment to be used.

Sample storage: Types of containers,

preservation methods, maximum holding times.
Materiales
 Lavar el sinfín con agua, luego
enjuagar con etanol al 75% o
blanqueador al 10%, y finalmente
enjuagar con agua estéril.

Las muestras debe almacenarse en hielo hasta que se procese y analice.

 Subsuelo

Con perforación rotatoria. Ya sea aire o un fluido

Diagrama de una barrena de vástago hueco. Se utiliza
a menudo llamado lodo de perforación, es
para desplazar los recortes del pozo hacia la superficie.
forzado a bajar el taladro vástago para
Los núcleos intactos se cortan automáticamente para
desplazar los cortes del pozo hacia el exterior
eliminar el material exterior contaminado, dejando un
del taladro y hacia arriba a la superficie.
núcleo estéril interno.
Ilustra la perforación rotativa de lodo.
Procesamiento y almacenamiento de muestra
• Los análisis microbianos deben realizarse lo
antes posible después de la recolección de un
suelo.
• Generalmente requiere tamizar a través de una
malla de 2 mm.
• Almacenamiento a corto plazo debe ser a 4°C
antes del análisis.
• Almacenamiento hasta 21 días parece dejar la
mayoría de las propiedades microbianas del
suelo sin cambios (Wollum, 1994).
Procesamiento de muestras de suelo y
sedimentos

Menos del 1% de las bacterias del suelo es fácilmente cultivable (Amann et al., 1995).
Procesamiento de muestras de suelo para
hifas fúngicas y esporas
• Medio de cultivo.
• Metodología de lavado de suelos. Esto
implica saturar pequeños volúmenes de
suelo con agua estéril.
• Se extiende una película de agua estéril y
se examina en un microscopio.
• Para las esporas son determinadas por
pases sucesivos en tamices. Cualquier
colonia de hongos que surja será debido a
la presencia de esporas.
Procesamiento de lodos, suelos y
sedimentos para Virus

La Agencia de Protección Ambiental de EE. UU.

 AGUA

• Se han desarrollado estrategias para permitir la

concentración de los microbios dentro de una
muestra de agua.
• La detección de virus se puede realizar mediante
cultivo celular o métodos moleculares como la
PCR.
• Pueden ser inhibidos por la presencia de
sustancias tóxicas en el agua.
• Los tipos de agua analizada incluyen agua potable,
aguas superficiales subterráneas y frescas, aguas
marinas y aguas residuales.
Procedimiento
de detección y
muestreo de
virus en agua
 Procesamiento de muestras de agua para
detección de bacterias

• Las bacterias son recolectadas y enumeradas por

dos diferentes procedimientos: la filtración por
membrana y número más probable (MPN).
Procesamiento
de muestras de
agua para
detección
de parásitos
protozoarios
 AIRE

El impulsor en el derecha es el clásico

impulsor AGI-30. Las flechas indican la
dirección del aire.
fluir. Las partículas en el aire quedan
atrapadas dentro de la matriz líquida.
Representación esquemática (six Andersen) muestreador
de aire de impactación. Etapa 1. Las partículas más
pequeñas, que carecen del potencial de impacto suficiente,
siguen la corriente de aire a los niveles subsiguientes.
 Filtración y sedimentación

• El muestreo de filtro requiere una fuente de vacío y

implica el paso de aire a través de un filtro, donde las
partículas quedan atrapadas.

• El muestreo de sedimentacion.( simple y rentable)

• Abriendo una placa de agar y exponiéndolo al viento,
asentamiento por gravedad y otras fuerzas
deposicionales.
• Baja eficiencia.
• Dificultad en la prueba de microorganismos múltiples.
Técnicas de muestreo

Muestra de agua
• https://www.youtube.com/watch?v=uT8yz--PCJg

Muestra de suelo
https://www.youtube.com/watch?v=b4z32msv1y8

Muestreo de aire
https://www.youtube.com/watch?v=3kp6GmjkDy4
• PREPARACIÓN MATERIALES
PARA TOMA DE MUESTRA
INVESTIGACIONES
• PRACTICA
Toma de muestra

Procesamiento de la muestra