Universidad de Panamá

Facultad de Ciencias Naturales, Exactas y Tecnología

Microbiología y Parasitología

Introducción a la Virología
MP407

Parte I. Investigue y desarrolle:

1. Investigue técnicas ambientales para la toma de muestras virológicas en agua, suelo
y aire.

Desarrollo:

Aire
La mayoría de las técnicas de toma de muestra en aire dependen del diámetro aerodinámico
equivalente de las partículas aerotransportadas, de sus propiedades de adhesión, del
movimiento browniano, de los gradientes térmicos y de la inercia de las partículas. Dentro
de estas técnicas se encuentran:
 Sedimentación
Este método consiste en que las partículas aerotransportadas son recogidas sobre una
superficie adherente por su capacidad de sedimentar por gravedad (agar en una placa Petri o
recubriendo un portaobjetos, placas de contacto denominadas RODAC, etc).
 Impactación
Este método consiste en aspirar cierto volumen de aire por una bomba de aspiración que
forma parte de los equipos de toma de muestra. Así, el aire aspirado pasa a través de un
orificio de entrada siendo dirigido a la superficie del medio de cultivo, pudiendo tratarse
éste de medio agar sobre una placa Petri, placa RODAC o un portaobjetos. Dicho orificio
puede consistir en una rendija o en un cabezal con un elevado número de orificios de igual
diámetro. La materia particulada con suficiente momento de inercia abandona la corriente
de aire e impacta sobre la superficie del medio de cultivo.
 Centrifugación
Este método es considerado una variación del método por impactación, la cual consiste en
el uso de la fuerza centrífuga para ayudar a la separación de la materia particulada de la
corriente de aire de aspiración. Se basa en la creación de un remolino en el cual el material
particulado, con suficiente inercia, deja la corriente de aire aspirada para impactar sobre la
superficie del medio de cultivo de recogida.
 Borboteo
Este método consiste en forzar el aire aspirado a pasar a través de un volumen conocido de
solución captadora (suero salino, agua de peptona con agentes humectantes, medios
líquidos). El material particulado abandona la corriente de aire por disolución en la solución
captadora o por impactación en la misma, quedando así retenidas en dicho medio.
 Filtración
Este método consiste en forzar al aire aspirado a pasar a través de un medio de filtración,
filtros o soportes de toma de muestra, medio donde quedan depositadas las partículas
aerotransportadas. El filtro más utilizado es el filtro de membrana de policarbonato.

Agua
 Toma de muestras desde un puente
Primero se retirará el tapón recubierto de una capa de aluminio teniendo cuidado de no
tocar el interior del recipiente o el interior del tapón, el cual deberá: 1. Ser mantenido con
una mano libre o 2. Dejarse apoyado en una superficie firme tras darle la vuelta de forma
que pueda evitarse la contaminación de su parte interior.
Luego se deberá hacer descender el recipiente a la superficie del agua, con precaución para
evitar provocar desprendimientos de cualquier tipo. Sin llegar a sumergir la boca del
recipiente, deberá hacerse descender el equipo o recipiente unos 15 centímetros en el agua.
La corriente reorientará el equipo o recipiente de manera que el recipiente estará aguas
arriba del operador. Rápidamente deberá hacerse descender el equipo o recipiente unos 0,5
m para sumergirlo completamente.
En último lugar, el recipiente volverá a cerrarse con su tapa cubierta de papel de aluminio.
 Toma de muestras en el curso del agua
Se agarrará la base del recipiente de toma de muestras y se retirará su tapón. A
continuación, se invertirá el recipiente y en dirección contraria a la corriente (aguas arriba
de la posición del técnico) se sumergirá la botella en el agua unos 15 cm para a
continuación dirigir la boca del recipiente hacia la superficie del agua. Se dejará el tiempo
suficiente para que se llene y a continuación se sacará del curso de agua, para luego cerrar
el recipiente con la tapa cubierta de papel de aluminio.
Tanto la Toma de muestras desde la orilla y la Toma de muestras desde una embarcación se
realizan de la misma manera que la toma de muestras anteriores.
 Toma de muestras desde aguas subterráneas
Las instalaciones para la toma de muestra de aguas subterráneas están compuestas
típicamente por tubos de acceso para dispositivos de muestreo portátiles o directamente
entierran los dispositivos de muestreo “in situ”. Dentro del agua subterránea, la toma de
muestra podrá hacerse en la zona saturada o en la zona insaturada.

Suelo
 Barrenas pequeñas
La utilización de barrenas de pequeño tamaño puede realizarse mediante ejecución manual
o por medio de un motor.
Las técnicas manuales de barrenado se utilizan habitualmente para la toma de muestra en
suelos homogéneos y son aquellas que toman un cilindro de suelo de muestra, por ejemplo,
suelos agrícolas, siendo más fáciles de utilizar en suelos arenosos sin obstáculos como las
piedras.
Las técnicas con barrenas a motor disminuyen el trabajo necesario para realizar la toma de
muestra, teniendo la misma base metodológica.
 Sondeos
Los sondeos pueden realizarse mediante distintas técnicas como las siguientes:
Perforación por percusión: Con un cable ligero y utilizando generalmente un anillo móvil
con cabestrante accionado por un motor diésel y una grúa trípode. Esta técnica suele
emplearse para estudios geotécnicos, pudiéndose llevar a cabo sondeos profundos
superiores a 20 m de profundidad.
Perforación por rotación: Mediante la rotación de una cabeza cortante en el extremo de un
eje que penetra en el suelo mientras gira. El lubricante eleva el residuo desde la cabeza
cortante hasta la parte superior del sondeo formado y expele el material a nivel del suelo,
con el consiguiente riesgo de contaminación.
Barrena mecánica: El método para hacer el sondeo es introducir la cabeza cortante,
aproximadamente 1 m en el suelo, retirar la cabeza del orificio y separar los residuos.
Donde un motor hace girar la barrena con una gran fuerza descendente. La cabeza cortante
consta de una o más espirales a 360º, habitualmente con una pequeña separación para
prevenir que el suelo caiga fuera de la barrena cuando se extrae del sondeo.
 Sondas y dispositivos de toma de muestra controlados
Estos sistemas consisten en un tubo hueco con o sin un cono director, o una barra sólida
que se introduce en el suelo, utilizando energía hidráulica o fuerza mecánica. Se utilizan
habitualmente para recoger muestras a diferentes profundidades, y poder penetrar
rápidamente hasta la profundidad donde ha de tomarse la muestra o en aquellos casos en
que se necesite obtener un cilindro continuo.
 Excavaciones (pozos de ensayo)
Para excavar pozos de ensayo de hasta unos 2 m por excavación manual, pueden utilizarse
palas mecánicas, picos y horquillas, y si solamente se necesita un número pequeño de estas
excavaciones, ésta puede ser la técnica más sencilla para la toma de muestras. El pozo de
ensayo debería tener una superficie plana de aproximadamente 1 m x 1 m para permitir una
fácil recogida del suelo o de las muestras, y para la grabación del perfil del suelo.

INFOGRAFÍA
Galan-Madruga, D., Diaz-Lopez, G., Sanchez Iñigo, F. J., Aguayo Balsas, S. M., Lucena-
Lozano, M. A., & Fernandez-Patier, R. (2018). Metodología para la Toma de Muestra de
Microorganismos Altamente Patógenos en las Matrices Ambientales Aire, Agua y
Suelo/Sedimento. Instituto de Salud Carlos III (ISCIII). Centro Nacional de Sanidad
Ambiental (CNSA).