HEMOGLOBIN

Hemoglobina
Drabkin. Colorimétrico

Determinación cuantitativa de hemoglobina 3. Pipetear:

IVD A) MÉTODO MACRO
Conservar a 2-8ºC Blanco Patrón Muestra
RT (mL) 5,0 5,0 5,0
PRINCIPIO DEL MÉTODO Calibrador (L) -- 20 --
La hemoglobina es oxidada por la acción del ferricianuro a Muestra (L) -- -- 20
metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en B) MÉTODO MICRO
cianmetahemoglobina. Blanco Patrón Muestra
La intensidad del color formado es proporcional a la concentración de RT (mL) 2,5 2,5 2,5
hemoglobina presente en la muestra ensayada1,2. -- 10 --
Calibrador (L)
SIGNIFICADO CLÍNICO Muestra (L) -- -- 10
La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, otorga el color
rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada 4. Mezclar e incubar 3 minutos a temperatura ambiente (15-25ºC).
del transporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones a los 5. Leer la absorbancia (A) del calibrador y la muestra, frente al Blanco
tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los de reactivo.
niveles normales indica anemia que puede obedecer a diferentes
causas: anemia primaria, cáncer, embarazo, enfermedades renales o CÁLCULOS
hemorragias. - Con factor2:
Si el nivel de hemoglobina es alto puede deberse a cardiopatías, (A) Muestra x 36,77 = g/dL de hemoglobina en la muestra
deshidratación o estancia en lugares de gran altitud1,5,6.
El diagnostico clínico debe realizarse teniendo en cuenta todos los - Con Patrón:
datos clínicos y de laboratorio. ( A) Muestra  ( A) Blanco
x 15 (Conc. Patrón) = g/dL de hemoglobina en la
( A) Patrón  ( A) Blanco
REACTIVOS muestra
Ferricianuro de potasio 0,60 mmol/L
HEMOGLOBIN
Cianuro de potasio 77 mmol/L CONTROL DE CALIDAD
50x
Dihidrogeno fosfato de potasio 2 mmol/L Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
Opcional
HEMOGLOBIN CAL Patrón de Hemoglobina 15 g/dL VALORES DE REFERENCIA1
Ref.1001232 Origen animal Hombres 14 - 18 g/dL  8,7 - 11,2 mmol/L
Mujeres 12 - 16 g/dL  7,5 - 9,9 mmol/L
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
PRECAUCIONES
establezca sus propios valores de referencia.
R: H301+H311+H331-Tóxico en caso de ingestión, contacto con la piel
o inhalación. H412-Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos CARACTERÍSTICAS DEL MÉTODO
nocivos duraderos.
Rango de medida: Desde el limite de detección de 0,108 g/dL hasta el limite
CAL: H412-Nocivo para los organismos acuáticos, con efectos nocivos
de linealidad de 20 g/dL.
duraderos.
Si la concentración de la muestra es superior al limite de linealidad, diluir 1/2
Seguir los consejos de prudencia indicados en la FDS y etiqueta del
con ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
producto.
Precisión:
Intraserie (n= 20) Interserie (n= 20)
PREPARACIÓN
Media (g/dL) 8,00 15,2 7,81 15,1
Reactivo de trabajo (RT):
- Para 5 mL 4,9 mL agua destilada + 2 gotas de Reactivo SD 0,29 0,33 0,19 0,26
- Para 250 mL 245 mL agua destilada + 1 frasco (5 mL) de Reactivo CV (%) 3,59 2,19 2,51 1,74
Mezclar bien. Sensibilidad analítica: 1 g/dL = 0,027 A.
Estabilidad: 2 meses en nevera a 2-8ºC, protegido de la luz. Exactitud: Los reactivos de SPINREACT no muestran diferencias
sistemáticas significativas cuando se comparan con otros reactivos
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD comerciales.
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de Las características del método pueden variar según el analizador utilizado.
caducidad indicada en la etiqueta del vial, cuando se mantienen los
viales bien cerrados a 2-8ºC, protegidos de la luz y se evita la INTERFERENCIAS
contaminación durante su uso. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
No usar reactivos fuera de la fecha indicada. determinación de la hemoglobina3,4.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
BIBLIOGRAFÍA
- Presencia de partículas y turbidez.
1. Franco R S. Hemoglobin. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St
- Absorbancia (A) del Blanco a 540 nm  0,012. Louis. Toronto. Princeton 1984; 1294-1296 and 418.
2. Van Kampen EJ et al. Standarization of hemoglobinometry Clin. Chim
MATERIAL ADICIONAL 1961;6: 438-544.
- Espectrofotómetro o analizador para lecturas a 540 nm. 3. Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz. 4. Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
- Equipamiento habitual de laboratorio. 5. Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
6. Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.
MUESTRAS
Sangre capilar o venosa1. PRESENTACIÓN
Usar anticoagulantes como EDTA, heparina u oxalato.
Estabilidad de la muestra: 1 semana a 2-8ºC. Ref: 1001230 R:4 x 5 mL
Cont.
Ref: 1001230S . R:4 x 5 mL, CAL: 1 x 1 mL
PROCEDIMIENTO Ref: 1001231 R:4 x 50 mL, CAL: 1 x 1 mL
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .540 nm
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 1 cm paso de luz
Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15-25ºC
2. Ajustar el espectrofotómetro a cero frente a agua destilada.
BSIS20-E 06/09/16 IMPORTADORES EXCLUSIVOS: LAB CENTER DE MEXICO S.A. DE C.V.
TEL : 01 (55) 5360-6772 Y 01 800 500 SPIN (7746)
www.spinreact.com.mx asesoriatecnica@spinreact.com.mx

C Método colorimétrico para la determinación de
SIGNIFICACION CLINICA
Las proteínas son compuestos orgánicos macromoleculares,
ampliamente distribuidos en el organismo. La albúmina es el
principal contribuyente de las proteínas totales plasmáticas.
Entre sus múltiples funciones se pueden mencionar:
- transporte de una amplia variedad de sustancias como
hormonas esteroides, ácidos grasos, bilirrubina, catecola-
minas, que en forma libre son insolubles en medio acuoso;
- mantenimiento de la presión coloidosmótica, que estaría re-
lacionado con su bajo peso molecular y su gran carga neta.
Los aumentos anormales de albúmina son ocasionales y se
relacionan casi siempre con la deshidratación que provoca
la reducción en el contenido del agua plasmática.
La hipoalbuminemia ocurre en condiciones patológicas tales
como pérdida excesiva de proteínas en el síndrome nefrótico,
desnutrición, infecciones prolongadas, quemaduras severas.
Otras causas son disminución en la síntesis por una dieta
deficiente, enfermedad hepática o malabsorción.
FUNDAMENTOS DEL METODO
La albúmina reacciona específicamente (sin separación
previa) con la forma aniónica de la 3,3',5,5'-tetrabromo
cresolsulfon ftaleína (BCG). El aumento de absorbancia a
625 nm respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a
la cantidad de albúmina presente en la muestra.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: solución de BCG 0,3 mmol/l, buffer acetato
0,1 mol/l y polioxietilén lauril éter 0,9 g/l.
REACTIVOS NO PROVISTOS
Calibrador A plus / Proti 2 Suero Patrón de Wiener lab.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivo Provisto: listo para usar.
PRECAUCIONES
El reactivo es para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de química clínica.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivo Provisto: es estable a temperatura ambiente hasta
la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Albúmina
AA
albúmina en suero
MUESTRA
Suero
a) Recolección: debe obtenerse suero libre de hemólisis.
b) Aditivos: no se requieren.
c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
interferencias por bilirrubina hasta 200 mg/l, triglicéridos
hasta 9 g/l y hemoglobina hasta 700 mg/dl.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: si no
se procesa inmediatamente el suero puede conservarse 3
días en refrigerador (2-10oC) o una semana en congelador (-4oC).
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
- Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 625 nm en espectrofotómetro o en
fotocolorímetro con filtro rojo (620-650 nm)
- Temperatura de reacción: 15-28oC
- Tiempo de reacción: 10 minutos
- Volumen de muestra: 10 ul
- Volumen de Reactivo A: 2,5 ml
- Volumen final de reacción: 2,51 ml
PROCEDIMIENTO
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D
(Desconocido), colocar:
B S D
Calibrador / Suero Patrón - 10 ul -
Muestra - - 10 ul
Reactivo A 2,5 ml 2,5 ml 2,5 ml
Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28oC
durante 10 minutos. Leer en espectrofotómetro a 625 nm
o en fotocolorímetro con filtro rojo (620-650 nm) llevando
a cero con el Blanco de Reactivo.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
El color es estable 20 minutos por lo que la absorbancia
debe ser leída dentro de ese lapso.
CALCULO DE LOS RESULTADOS basado en el mismo principio, obteniéndose el siguiente
Albúmina (g/dl)* coeficiente de correlación:
Albúmina (g/dl) = D x f f= r = 0.9942, pendiente b = 0,9933, intersección a = 0,0999
S
*Concentración de albúmina en el Calibrador A plus o en PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
el Suero Patrón Para las instrucciones de programación consulte el manual
del usuario del analizador en uso.
Albúmina (g/dl) Para la calibración, se puede utilizar Calibrador A plus de
Relación A/G =
Prot. tot. (g/dl) - Alb. (g/dl) Wiener lab.

METODO DE CONTROL DE CALIDAD PRESENTACION

Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - 6 x 60 ml (Cód. 1009300).
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas - 6 x 60 ml (Cód. 1009601).
de albúmina, con cada determinación. - 6 x 60 ml (Cód. 1009905).
- 6 x 120 ml (Cód. 1690008).
VALORES DE REFERENCIA - 8 x 50 ml (Cód. 1009240).
Se determinó el contenido de albúmina en suero de personas - 2 x 40 ml (Cód. 1009801).
sanas, de ambos sexos, con alimentación mixta normal y
edades entre 17 y 40 años. BIBLIOGRAFIA
Se obtuvieron los siguientes rangos: - Doumas, B.T.; Watson, W.A. & Biggs, H.G. - Clin. Chim.
Albúmina: 3,5 a 4,8 g/dl Acta 31/1:87 (1971).
Relación A/G: 1,2 a 2,2 - Pastewka, J.W. & Ness, A.T. - Clin. Chim. Acta 12:523
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios (1965).
valores de referencia. - Rodkey, F.L. - Clin. Chem. 11/4:478 (1965).
- Watson, D. & Nankiville D.D. - Clin. Chim. Acta 9/4:359
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI (1964).
Albúmina (g/dl) x 10 = Albúmina (g/l) - Kachmar, J.F. - “Fundamentals of Clinical Chemistry”. Tietz,
Saunders, pág. 210 (1970).
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO - Rojkín, M.L.; Olguín de Mariani, M.C.; Drappo, G.A. y Sosa,
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA. C.F. - Bioq. Clin. VIII/4:241 (1974).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
PERFORMANCE AACC Press, 4th ed., 2001.
Los ensayos fueron realizados en analizador automático - Webster, D.- Clin. Chim. Acta 53/1:109 (1974).
Express Plus(*). - NCCLS document "Evaluation of Precision Performance of
a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento Clinical Chemistry Devices", EP5-A (1999).
EP5A del NCCLS (National Committee on Clinical Laboratory
Standards), se obtuvo lo siguiente:
Precisión intraensayo (n = 20)
Nivel D.S. C.V.
3,47 g/dl ± 0,073 g/dl 2,10 %
2,70 g/dl ± 0,067 g/dl 2,48 %
5,23 g/dl ± 0,117 g/dl 2,23 %

Precisión total (n = 20)

Nivel D.S. C.V.
3,43 g/dl ± 0,137 g/dl 3,99 %
2,80 g/dl ± 0,100 g/dl 3,57 %
b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
albúmina a distintas muestras se obtuvo una recuperación
entre 98 y 100 %.
c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado
y de la longitud de onda. De acuerdo con la sensibilidad
requerida para un ∆A mínimo de 0,001, el menor cambio de
concentración detectable será de 0,01 g/dl.
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 7 g/dl.
e) Correlación: se determinó el valor de albúmina en 123
muestras con Albúmina AA de Wiener lab. y un kit comercial

(*)
Marca registrada de Ciba Corning Diagnostics
Símbolos
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.

C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
M Elaborado por:

P Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo

V Uso diagnóstico "in vitro"

Corrosivo / Cáustico

X Contenido suficiente para <n> ensayos

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

 No congelar
Calibr. Calibrador

b Control

F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Wiener lab.
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 1623/96 - PM-1102-150 2000 Rosario - Argentina

C Método colorimétrico para la determinación de calcio
SIGNIFICACION CLINICA
El calcio es esencial en la mayoría de las reacciones de la
coagulación sanguínea y en la regulación de la excitabilidad
de las fibras musculares. Su concentración en suero y orina
está regulada por la acción de factores tales como niveles de
parathormona, vitamina D y fósforo, observándose fluctua-
ciones fisiológicas debidas a edad, sexo, embarazo, actividad
física, cambios estacionales (por acción de la luz solar).
La hipercalcemia está relacionada con distintas patologías:
hiperparatiroidismo, neoplasias óseas, intoxicaciones con
vitamina D. La hipocalcemia se asocia con desórdenes
tales como hipoparatiroidismo, deficiencia de vitamina D,
malabsorción.
FUNDAMENTOS DEL METODO
El calcio reacciona con la o-cresolftaleín complexona (o-
CPC) a pH alcalino, dando un complejo de color magenta
que se mide fotocolorimétricamente a 570 nm.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: solución de o-cresolftaleín complexona y
8-hidroxiquinolina.
B. Reactivo B: solución de aminometil propanol (AMP).
S. Standard: solución de calcio 10 mg/dl.
Concentraciones finales
o-Cresolftaleín complexona............................... 0,08 mmol/l
8-Hidroxiquinolina................................................... 4 mmol/l
AMP........................................................................ 3,5 mol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS
- Calibrador A plus de Wiener lab.
- Agua destilada o desionizada.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivos Provistos: listos para usar.
Standard: cada vez que se use, transferir una cantidad en
exceso a un tubo limpio y pipetear de allí el volumen nece-
sario, descartando el sobrenadante.
Reactivo único (premezclado): según el número de
muestras a ensayar, mezclar partes iguales de Reactivo A
y Reactivo B.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
No ingerir. Evitar el contacto con la piel y los ojos. En caso
de derrame o salpicaduras, lavar con abundante agua la
zona afectada.
864113524 / 00 p. 1/12
Ca-Color
AA
en suero, plasma heparinizado y orina
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: estables a temperatura ambiente (me-
nor a 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Reactivo único (premezclado): en refrigerador (2-10oC)
es estable 4 días a partir del momento de su preparación.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
Absorbancias altas de los Blancos son indicio de conta-
minación con calcio. Desechar cuando las mismas sean
superiores a 0,600 D.O.
MUESTRA
Suero, plasma heparinizado u orina
a) Recolección:
- Suero o plasma: obtener de la manera usual.
- Orina: recolectar orina de 24 horas sobre 20 ml de ácido clor-
hídrico al 50%. Llevar a 2 litros con agua y homogeneizar.
b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, se debe usar hepa-
rina como anticoagulante. Si la muestra a emplear es orina,
se debe acidificar con ácido clorhídrico al 50% durante su
recolección.
c) Sustancias interferentes conocidas: los anticoagulan-
tes distintos de la heparina, complejan al calcio produciendo
resultados erróneos. No interfieren: bilirrubina hasta 20 mg/dl
(200 mg/l), triglicéridos hasta 680 mg/dl (6,8 g/dl), hemoglo-
bina hasta 94 mg/dl y magnesio hasta 9,9 mg/dl.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
muestra debe ser preferentemente fresca. Puede conservar-
se una semana en refrigerador (2-10oC) o más de 5 meses
en el congelador, sin agregado de conservadores.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 570 nm en espectrofotómetro o 560-
590 nm en fotocolorímetro con filtro rojo.
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (15-25oC).
- Tiempo de reacción: 5 minutos
- Volumen de muestra: 50 ul
- Volumen final de reacción: 2,05 ml
PROCEDIMIENTO
I- TECNICA CON REACTIVOS SEPARADOS
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D
(Desconocido) colocar:
B S D
Agua destilada 50 ul - -
Standard - 50 ul -
Muestra - - 50 ul
Reactivo A 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml
Reactivo B 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml
Mezclar, incubar 5 minutos a temperatura ambiente
(15-25oC) y leer la absorbancia en espectrofotómetro a
570 nm o en fotocolorímetro con filtro rojo (560-590 nm).
Microtécnica
Seguir el procedimiento indicado en la Técnica I) pero
usando 25 ul de Muestra, 0,5 ml de Reactivo A y 0,5 ml
de Reactivo B.
II- TECNICA CON REACTIVO UNICO (PREMEZCLADO)
En tres tubos marcados B (Blanco), S (Standard) y D
(Desconocido) colocar:
B S D
Agua destilada 50 ul - -
Standard - 50 ul -
Muestra - - 50 ul
Reactivo único 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml
Mezclar, incubar 5 minutos a temperatura ambiente
(15-25oC) y leer la absorbancia en espectrofotómetro a
570 nm o en fotocolorímetro con filtro rojo (560-590 nm).
Microtécnica
Seguir el procedimiento indicado en la Técnica II) pero
usando 25 ul de Muestra y 1 ml de Reactivo único.
En caso de muestras lipémicas o hemolizadas es ne-
cesario procesar un Blanco de Muestra de la siguiente
manera: mezclar 50 ul de muestra con 2 ml de agua
destilada. Medir la absorbancia llevando el aparato a
cero con agua destilada. Restar esta absorbancia de
la obtenida inicialmente y utilizar esta diferencia para
los cálculos.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
El color de reacción final es estable 20 minutos, por lo que
la absorbancia debe ser leída dentro de este lapso.
(*)
Marca registrada de Ciba Corning Diagnostics 864113524 / 00 p. 2/12
CALCULO DE LOS RESULTADOS
10 mg/dl
1) Calcio sérico (mg/dl) = D x f f=
S
D
2) Calcio urinario (mg/24 hs) = x conc. S x 10 x V
S
donde:
10 = factor de conversión de mg/dl a mg/l
V = volumen de la diuresis en litros/24 hs
Ejemplo:
Absorbancia del Standard = 1,050
Absorbancia de la muestra de orina = 0,933
Concentración del Standard = 10 mg/dl
Volumen de orina de 24 hs = 1,27 litros
0,933
Calcio urinario = x 10 x 10 x 1,27 = 113 mg/24 hs
1,050
CONVERSION DE UNIDADES
Ca (mg/dl) = Ca (mmol/l) x 4
Ca (mmol/l) = Ca (mg/dl) x 0,25
Ca (mg/dl) = Ca (mEq/l) x 2
Ca (mEq/l) = Ca (mg/dl) x 0,5
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un
material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con
concentraciones conocidas de calcio, con cada determinación.
VALORES DE REFERENCIA
Suero: 8,5 - 10,5 mg/dl
Orina: hasta 300 mg/24 hs (para una dieta normal)
En una población de 120 individuos sanos, provenientes de
la ciudad de Rosario (Argentina), de ambos sexos (entre 20 y
45 años), con una ingesta restringida en calcio, se encontró
que el 95% de los resultados cubrieron el siguiente rango:
Orina: 60 - 200 mg/24 hs
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Contaminaciones: el material a utilizar debe estar riguro-
samente limpio, libre de calcio y de toda traza de anticoa-
gulante. Para ello se recomienda lavar con detergentes no
iónicos (Noión de Wiener lab.) o ácidos minerales diluidos,
efectuando varios enjuagues con agua destilada.
PERFORMANCE
Los ensayos fueron realizados en analizador Express Plus(*)
Si se usa el procedimiento manual, se debe validar que se
obtenga una performance similar a la siguiente:
a) Reproducibilidad:
Intraensayo
Muestra Nivel D.S. C.V.
Suero nivel normal 9,4 mg/dl ± 0,12 mg/dl 1,28 %
Suero nivel alto 12,0 mg/dl ± 0,16 mg/dl 1,30 %
 Muestra Nivel D.S. C.V. SÍMBOLOS
Orina nivel normal 118 mg/24 hs ± 1,26 mg/24 hs 1,06 % Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Orina nivel alto 349 mg/24 hs ± 2,38 mg/24 hs 0,68 % reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Interensayo
Este producto cumple con los requerimientos previstos
Muestra Nivel
Suero nivel normal 9,8 mg/dl
Suero nivel alto 12,7 mg/dl
D.S.
± 0,17 mg/dl
± 0,22 mg/dl
C.V.
1,74 %
1,70 %
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"

Muestra Nivel D.S. C.V. P Representante autorizado en la Comunidad Europea

Orina nivel normal 121 mg/24 hs ± 3,01 mg/24 hs 2,50 %
Orina nivel alto 351 mg/24 hs ± 4,69 mg/24 hs 1,34 %
V Uso diagnóstico "in vitro"

b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 20 mg/dl. Para X Contenido suficiente para <n> ensayos
valores superiores, repetir la determinación empleando 25 ul
de Muestra o muestra diluida al 1:2 con solución fisiológica H Fecha de caducidad
y multiplicar por 2 el resultado obtenido.
c) Correlación: l Límite de temperatura (conservar a)
- Suero y plasma: se determinó el valor de calcio en 143
muestras, utilizando Ca-color AA de Wiener lab. y otro kit  No congelar

comercial basado en el mismo principio, obteniéndose el Riesgo biológico

siguiente coeficiente de correlación: F
r = 0,9963, pendiente b = 1,0185, intersección a = 0,0362 Volumen después de la reconstitución
- Orina: se determinó el valor de calcio en 69 muestras,
utilizando Ca-color AA de Wiener lab. y otro kit comercial Cont. Contenido
basado en el mismo principio, obteniéndose el siguiente
coeficiente de correlación: g Número de lote
r = 0,9943, pendiente b = 1,0207, intersección a = 2,5116
Elaborado por:
d) Sensibilidad: basada en una lectura mínima del instru- M
mento de 0,001 D.O. el mínimo cambio de concentración
Nocivo
detectable en estas condiciones será aproximadamente
0,01 mg/dl.
Corrosivo / Cáustico
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Consultar las instrucciones de programación en el Manual Irritante
del Usuario del analizador en uso.
Para la calibración, se puede utilizar un calibrador con base i Consultar instrucciones de uso
de suero (Calibrador A plus de Wiener lab.).
Calibr. Calibrador

PRESENTACION b Control
- 4 x 50 ml (Cód. 1152002).
b Control Positivo
BIBLIOGRAFIA
- Martinek, R.G. - J. Am. Med. Techn. 33:416 (1971). c Control Negativo
- Rojkín, M. y Mariani, M. de - Bioquím. Clín. VII/4:405 (1973).
- Lorenzo, L.E. ; Drappo, G.A. - 1o Congreso Argentino de h Número de catálogo
Osteología y Metabolismo Mineral - Rosario (1984).
- Drappo, G.; Lorenzo, L.; - Revista ABA 239:230 (1979).
- Connerty, H.V.; Briggs, A.R. - Am. J. Clin. Path. 45:290
(1966).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001.
- Burtis C., Ashwood, E. - Tietz Texbook of Clinical Chemistry,
WB Saunders Co., 3º ed, 1999.
- Tietz N.W. - Fundamentals of Clinical Chemistry - W.B.
Saunders Co., Philadelphia; 1982.

864113524 / 00 p. 3/12

C Método colorimétrico direto para a determinação de
SIGNIFICADO CLÍNICO
O cálcio é um elemento muito importante na maioria das
reações da coagulação sanguínea e na regulação da exita-
bilidade das fibras musculares. Sua concentração em soro
e urina está regulada pela ação de fatores tais como níveis
de para-thôrmonio, vitamina D e fósforo; observando-se
variações fisiológicas devidas a idade, sexo, gravidez, ativi-
dade física, mudanças de estação (pela ação da luz solar).
A hipercalcemia está relacionada com diferentes patologias:
hiperparatiroidismo, neoplasias ósseas, intoxicação com vita-
mina D. A hipocalcemia associa-se com alterações tais como
hipoparatiroidismo, deficiência de vitamina D, má-absorção.
FUNDAMENTOS DO MÉTODO
O cálcio reage com a o-cresolftalein complexona (o-CPC) a
pH alcalino produzindo um complexo cor vermelho escuro
que se medi em fotocolorímetro a 570 nm.
REAGENTES FORNECIDOS
A. Reagente A: solução de o-cresolftalein complexona e
8-hidroxiquinolina.
B. Reactivo B: solução de aminometil propanol (AMP).
S. Padrão: solução de cálcio 10 mg/dl.
Concentrações finais
o-cresolftalein complexona................................ 0,08 mmol/l
8-Hidroxiquinolina................................................... 4 mmol/l
AMP........................................................................ 3,5 mol/l
REAGENTES NÃO FORNECIDOS
- Calibrador A plus da Wiener lab.
- Água destilada ou desionizada.
INSTRUÇÕES DE USO
Reagentes Fornecidos: prontos para uso.
Padrão: toda vez que seja utilizado, transferir uma quantida-
de em excesso a um tubo limpo, pipetar o volume necessário
e descartar o sobrenadante.
Reagente único (pre-misturado): segundo o número de
amostras a ensaiar, misturar partes iguais de Reagente A
e Reagente B.
PRECAUÇÕES
Os reagentes são para uso diagnóstico "in vitro".
Não ingerir. Evitar o contato com a pele e os olhos. Caso
de se produzir derrames ou salpicaduras, lave-se com
abundante água a zona afetada.
Utilizar os reagentes observando as precauções habituais
864113524 / 00 p. 4/12
Ca-Color
AA
cálcio em soro, plasma heparinizado e urina
de trabalho no laboratório de análises clínicas.
Todos os reagentes e as amostras devem ser descartadas
conforme à regulação local vigente.
ESTABILIDADE E INSTRUÇÕES DE
ARMAZENAMENTO
Reagentes Fornecidos: estáveis sob temperatura ambiente
(< 25oC) até a data do vencimento indicada na embalagem.
Reagente único (pre-misturado): sob refrigeração (2-10oC)
é estável 4 dias a contar do momento da sua preparação.
INDÍCIOS DE INSTABILIDADE OU DETERIORAÇÃO
DOS REAGENTES
Absorbâncias altas dos Brancos são indícios de conta-
minação com cálcio. Descartar quando as leituras sejam
superiores a 0,600 D.O.
AMOSTRAS
Soro, plasma heparinizado ou urina
a) Coleta:
- Soro ou plasma: obter da maneira habitual.
- Urina: coletar urina de 24 horas sobre 20 ml de ácido clo-
rídrico ao 50%. Levar a 2 litros com água e homogeneizar.
b) Aditivos: no caso de usar plasma deve-se utilizar hepa-
rina como anticoagulante.
Se a amostra a empregar for urina, deve-se misturar com
ácido clorídrico ao 50% durante sua obtenção.
c) Substâncias interferentes conhecidas: os anticoa-
gulantes diferentes da heparina, comprometem ao cálcio
produzindo resultados errôneos. Não interferem: bilirrubina
até 20 mg/dl (200 mg/l), triglicerídeos até 680 mg/dl (6,8 g/dl),
hemoglobina até 94 mg/dl, nem magnésio até 9,9 mg/dl.
Referência bibliográfica de Young para efeitos de drogas
neste método.
d) Estabilidade e instruções de armazenamento: a
amostra deve ser fresca. Pode ser conservada durante
uma semana sob refrigeração (2-10oC) ou mais de 5 meses
congelada, sem acrescentar conservantes.
MATERIAL NECESSÁRIO ( não fornecido)
- Espectrofotômetro ou fotocolorímetro.
- Micropipetas ou pipetas para medir os volumes indicados.
- Tubos ou cubas espectrofotométricas.
CONDIÇÕES DE REAÇÃO
- Comprimento de onda: 570 nm em espectrofotômetro ou
560-590 nm em fotocolorímetro com filtro vermelho.
- Temperatura de reação: temperatura ambiente (15-25oC).
- Tempo de reação: 5 minutos CÁLCULOS DOS RESULTADOS
- Volume de amostra: 50 ul 10 mg/dl
- Volume final de reação: 2,05 ml 1) Cálcio sérico (mg/dl) = D x f f=
P
D
PROCEDIMENTO 2) Cálcio urinário (mg/24 hs) = x conc. P x 10 x V
P
I- TÉCNICA COM REAGENTES POR SEPARADO onde:
Em três tubos marcados B (Branco), P (Padrão) e D 10 = fator de conversão de mg/dl a mg/l
(Desconhecido) colocar: V = volume da diurese em litros/24 hs
B P D Exemplo:
Absorbância do Padrão = 1,050
Água destilada 50 ul - - Absorbância da amostra de urina = 0,933
Tampão - 50 ml - Concentração do Padrão = 10 mg/dl
Volume de urina de 24 hs = 1,27 litros
Amostra - - 50 ul
0,933
Reagente A 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml Cálcio urinário = x 10 x 10 x 1,27 = 113 mg/24 hs
Reagente B 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml 1,050

Misturar, incubar 5 minutos a temperatura ambiente CONVERSÃO DE UNIDADES

(15-25oC) e ler a absorbância em espectrofotômetro
a 570 nm ou em fotocolorímetro com filtro vermelho
(560-590 nm).
Microtécnica
Seguir o procedimento indicado na Técnica I), utilizando
25 ul de Amostra, 0,5 ml de Reagente A e 0,5 ml de
Reagente B.
II- TÉCNICA COM REAGENTE ÚNICO (PRE-MISTURADO)
Em três tubos marcados B (Branco), P (Padrão) e D
(Desconhecido) colocar:
B P D
Água destilada 50 ul - -
Tampão - 50 ul -
Amostra - - 50 ul
Reagente único 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml
Misturar, incubar 5 minutos a temperatura ambiente
(15-25oC) e ler a absorbância em espectrofotômetro
a 570 nm ou em fotocolorímetro com filtro vermelho
(560-590 nm).
Microtécnica
Seguir o procedimento indicado na Técnica II), utilizando
25 ul de Amostra e 1 ml de Reagente único.
No caso de amostras lipêmicas ou com hemólise será
necessário processar um branco de amostra da seguin-
te forma: misturar 50 ul de amostra com 2 ml de água
destilada. Medir a absorbância levando o aparelho a
zero com água destilada. Diminuir esta absorbância da
obtida inicialmente e utilizar a diferença para os cálculos.
ESTABILIDADE DA MISTURA DE REAÇÃO FINAL
A cor de reação final é estável 20 minutos, pelo que a ab-
sorbância deve ser lida dentro deste tempo.
Ca (mg/dl) = Ca (mmol/l) x 4
Ca (mmol/l) = Ca (mg/dl) x 0,25
Ca (mg/dl) = Ca (mEq/l) x 2
Ca (mEq/l) = Ca (mg/dl) x 0,5
MÉTODO DE CONTROLE DE QUALIDADE
Se a amostra a ensaiar for soro, processar 2 níveis de um ma-
terial de controle de qualidade (Standatrol S-E 2 niveles) com
concentrações conhecidas de cálcio, com cada determinação.
VALORES DE REFERÊNCIA
Soro: 8,5 - 10,5 mg/dl
Urina: até 300 mg/24 hs (com dieta normal)
Em uma população de 120 indivíduos sadios, provenientes da
cidade de Rosario (Argentina), pertencentes a ambos sexos
(entre 20 e 45 anos), com uma dieta livre de cálcio, encontrou-
se que o 95% dos resultados cobriram a seguinte faixa:
Urina: 60 - 200 mg/24 hs
Recomenda-se que cada laboratório estabeleça seus pró-
prios valores de referência.
LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO
Vide Substâncias interferentes conhecidas em AMOSTRA.
Contaminações: o material a ser utilizado deve ficar rigorosa-
mente limpo, livre de cálcio e de todo resto de anticoagulante.
Recomenda-se lavar com detergentes não iônicos (Noion
de Wiener lab.) ou ácidos minerais diluídos, enxugando
finalmente com água destilada.
DESEMPENHO
Os ensaios foram realizados no analisador Express Plus(*)
Se se utiliza o procedimento manual, deve-se validar que
seja obtida uma performance semelhante à seguinte:
a) Reprodutibilidade:
Intra-ensaio
Amostra Nível D.P. C.V.
Soro nível normal 9,4 mg/dl ± 0,12 mg/dl 1,28 %
Soro nível alto 12,0 mg/dl ± 0,16 mg/dl 1,30 %

(*)
Marca registrada da Ciba Corning Diagnostics 864113524 / 00 p. 5/12
 Amostra Nível D.P. C.V. SÍMBOLOS
Urina nível normal 118 mg/24 hs ± 1,26 mg/24 hs 1,06 % Os seguintes símbolos são utilizados nos kits de reagentes
Urina nível alto 349 mg/24 hs ± 2,38 mg/24 hs 0,68 % para diagnóstico da Wiener lab.
Inter-ensaio
Este produto preenche os requisitos da Diretiva Europeia
Amostra Nível
Soro nível normal 9,8 mg/dl
Soro nível alto 12,7 mg/dl
D.P.
± 0,17 mg/dl
± 0,22 mg/dl
C.V.
1,74 %
1,70 %
C 98/79 CE para dispositivos médicos de diagnóstico "in
vitro"

Amostra Nível D.P. C.V.

P Representante autorizado na Comunidade Europeia
Urina nível normal 121 mg/24 hs ± 3,01 mg/24 hs 2,50 %
Urina nível alto 351 mg/24 hs ± 4,69 mg/24 hs 1,34 %
V Uso médico-diagnóstico "in vitro"

b) Linearidade: a reação é linear até 20 mg/dl. Para valores X Conteúdo suficiente para <n> testes
acima, repetir a determinação utilizando 25 ul de Amostra
ou amostra diluída 1:2 com solução fisiológica e multiplicar H Data de validade
por 2 o resultado obtido.
c) Correlação: l Limite de temperatura (conservar a)
- Soro e plasma: o valor de cálcio foi determinado em 143
amostras, utilizando Ca-color AA da Wiener lab. e outro  Não congelar

kit comercial baseado no mesmo princípio, obtendo-se o Risco biológico

seguinte coeficiente de correlação: F
r = 0,9963, pendente b = 1,0185, interseção a = 0,0362 Volume após a reconstituição
- Urina: o valor de cálcio foi determinado em 69 amostras,
utilizando Ca-color AA da Wiener lab. e outro kit comercial Cont. Conteúdo
baseado no mesmo princípio, obtendo-se o seguinte coefi-
ciente de correlação: g Número de lote
r = 0,9943, pendente b = 1,0207, interseção a = 2,5116
Elaborado por:
d) Sensibilidade: baseada em uma leitura mínima do anali- M
sador de 0,001 D.O. a mínima mudança de concentração de-
Nocivo
tectável nestas condições será aproximadamente 0,01 mg/dl.
Corrosivo / Caústico
PARÂMETROS PARA ANALISADORES AUTOMÁTICOS
Consultar as instruções de programação no Manual de Uso
do analisador a utilizar. Irritante
Para a calibração pode-se utilizar um calibrador baseado
em soro (Calibrador A plus da Wiener lab.). i Consultar as instruções de uso

Calibr. Calibrador
APRESENTAÇÃO
- 4 x 50 ml (Cód. 1152002). b Controle

REFERÊNCIA b Controle Positivo

- Martinek, R.G. - J. Am. Med. Techn. 33:416 (1971).
- Rojkín, M. y Mariani, M.C. de - Bioquím. Clín. VII/4:405 c Controle Negativo
(1973).
- Lorenzo, L.E. ; Drappo, G.A. - 1o Congreso Argentino de h Número de catálogo
Osteología y Metabolismo Mineral - Rosario (1984).
- Drappo, G.; Lorenzo, L.; - Revista ABA 239:230 (1979).
- Connerty, H.V.; Briggs, A.R. - Am. J. Clin. Path. 45:290
(1966).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001.
- Burtis C., Ashwood, E. - Tietz Texbook of Clinical Chemistry,
WB Saunders Co., 3rd ed, 1999.
- Tietz N.W. - Fundamentals of Clinical Chemistry - W.B.
Saunders Co., Philadelphia; 1982.

864113524 / 00 p. 6/12

C Direct colorimetric method for the determination of
SUMMARY
Calcium is an essential element in most blood clotting re-
actions and in the regulation of muscle fibers excitability.
Calcium concentration in serum and urine is regulated by
the action of factors such as parathormone levels, vitamin
D and phosphorous. Physiological fluctuations are due to
age, sex, pregnancy, physical activity, seasonal changes
(sunlight incidence).
Hypercalcemia is related to different diseases: hyperparathy-
roidism, bone neoplasias, vitamin D poisoning. Hypocalcemia
is associated to disorders such as hypoparathyroidism,
vitamin D deficiency, malabsorption, etc.
PRINCIPLE
Calcium reacts with o-Cresolphtalein complexone (o-CPC)
at alkaline pH, yielding a magenta colored complex, which
is photocolorimetrically measured at 570 nm.
PROVIDED REAGENTS
A. Reagent A: o-Cresolphtalein complexone solution and
8-Hydroxyquinoline.
B. Reagent B: aminomethyl propanol solution (AMP).
S. Standard: 10 mg/dl calcium solution.
Final concentrations
o-Cresolphtalein complexone............................ 0.08 mmol/l
8-Hydroxyquinoline................................................. 4 mmol/l
AMP........................................................................ 3.5 mol/l
NON-PROVIDED REAGENTS
- Wiener lab.'s Calibrador A plus.
- Distilled or dionized water.
INSTRUCTIONS FOR USE
Provided Reagents: ready to use.
Standard: whenever used, transfer an excess amount to a
clean test tube and pipette the necessary volume, discarding
the supernatant.
Monoreagent (premixed): mix equal parts of Reagent A and
Reagent B, according to the number of samples to be assayed.
WARNINGS
Reagents are for "in vitro" diagnostic use.
Do not ingest. Avoid contact with skin and eyes. If spilt or
splash, thoroughly wash affected area with water.
Use the reagents according to the working procedures for
clinical laboratories.
The reagents and samples should be discarded according
to the local regulations in force.
864113524 / 00 p. 7/12
Ca-Color
AA
calcium in serum, heparinized plasma and urine
STABILITY AND STORAGE INSTRUCTIONS
Provided Reagents: stable at room temperature (lower than
25oC) until the expiration date shown on the box.
Monoreagent (premixed): stable 4 days in refrigerator (2-10oC).
INSTABILITY OR DETERIORATION OF REAGENTS
High Blank absorbances indicate calcium contamination.
Discard when they reach 0.600 O.D. or more.
SAMPLE
Serum, heparinized plasma or urine
a) Collection: obtein serum or plasma in the usual way. In case
of urine, collect 24 hours urine over 20 ml 50% hydrochloric acid.
Bring the sample volume to 2 liters with water. Homogenize.
b) Additives: if plasma is used as sample, heparin should be
used as anticoagulant. If urine is used as sample, it should
be acidified with 50% hydrochloric acid during collection.
c) Known interfering substances: anticoagulants other
than heparin, bind to the calcium yielding a complex, thus
giving erroneous results.
No interferences are observed from: bilirubin up to 20 mg/dl
(200 mg/l), triglycerides up to 680 mg/dl (6.8 g/l), hemoglobin
up to 94 mg/dl and magnesium up to 9.9 mg/dl.
See Young, D.S. in References for effect of drugs on the
present method.
c) Stability and storage instructions: sample should be pref-
erably fresh. Sample may be kept for one week in refrigerator
(2-10oC) or over 5 months in freezer without any preservatives.
REQUIRED MATERIAL (non-provided)
- Spectrophotometer or photocolorimeter.
- Micropipettes or pipettes for measuring the stated volumes.
- Test tubes or spectrophotometric cuvettes.
ASSAY CONDITIONS
- Wavelength: 570 nm in spectrophotometer or 560-590 nm
in photocolorimeter with red filter.
- Reaction temperature: room temperature (15-25oC).
- Reaction time: 5 minutes
- Sample volume: 50 ul
- Final reaction volume: 2.05 ml
PROCEDURE
I- SEPARATE REAGENTS TECHNIQUE
In three test tubes labeled B (Blank), S (Standard) and
U (Unknown) place:

B S U
Distilled water 50 ul - -
Standard - 50 ul -
Sample - - 50 ul
Reagent A 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
Reagent B 1.0 ml 1.0 ml 1.0 ml
Mix, incubate 5 minutes at room temperature (15-25oC)
and read absorbance in spectrophotometer at 570 nm or
in photocolorimeter with red filter (560-590 nm).
Microtechnique
Follow the procedure indicated in Technique I using 25 ul
Sample, 0.5 ml Reagent A and 0.5 ml Reagent B.
II- MONOREAGENT TECHNIQUE (PREMIXED)
In three test tubes labeled B (Blank), S (Standard) and
U (Unknown) place:
B S U
Distilled water 50 ul - -
Standard - 50 ul -
Sample - - 50 ul
Monoreagent 2.0 ml 2.0 ml 2.0 ml
Mix, incubate 5 minutes at room temperature (15-25oC)
and read absorbance in spectrophotometer at 570 nm or
in photocolorimeter with red filter (560-590 nm).
Microtechnique
Follow the procedure indicated in Technique II using 25 ul
Sample, 1 ml Monoreagent.
For lipemic or hemolyzed samples it is necessary to
process a Sample Blank as follows: mix 50 ul sample
with 2 ml distilled water. Measure absorbance setting
the instrument to zero O.D. with distilled water. Subtract
absorbance from the initially obtained and use this differ-
ence for calculations.
STABILITY OF FINAL REACTION
Final reaction color is stable for 20 minutes, therefore absor-
bance should be read within that period.
CALCULATIONS
10 mg/dl
1) Serum calcium (mg/dl) = U x f f=
S Normal Level Urine 118 ± 1.26 1.06 %
U
2) Urinary calcium (mg/24 hs) = x S conc. x 10 x V
S Sample Mean (mg/dl) S.D. (mg/dl) C.V.
where:
10 = factor to convert mg/dl to mg/l
V = diuresis volume in liters/24 hours
Example:
Absorbance of Standard = 1.050
864113524 / 00 p. 8/12
Absorbance of Urine = 0.933
Concentration of Standard = 10 mg/dl
24 hr. Urine volume = 1.27 liters
0.933
Urinary calcium = x 10 x 10 x 1.27 = 113 mg/24 hours
1.050
UNITS CONVERSION
Ca (mg/dl) = Ca (mmol/l) x 4
Ca (mmol/l) = Ca (mg(dl) x 0.25
Ca (mg/dl) = Ca (mEq/l) x 2
Ca (mEq/l) = Ca (mg/dl) x 0.5
QUALITY CONTROL METHOD
Each time the test is run, analyze two levels of a quality
control material (Standatrol S-E 2 niveles) with known
calcium concentration.
REFERENCE VALUES
Serum: 8.5 - 10.5 mg/dl
Urine: up to 300 mg/24 hs (normal diet)
In a population including 120 healthy individuals from Rosario
(Argentina) of both sexes (between 20-45 years old) with a
calcium-free diet, was obtained the following result in the
95% of the results:
Urine: 60 - 200 mg/24 hs
It is recommended that each laboratory establishes its own
reference values.
PROCEDURE LIMITATIONS
See Known Interfering Substances under SAMPLE.
Contamination: glassware should be thoroughly clean, free
from calcium or any trace of anticoagulant. It is recommended
to wash glassware with non-ionic detergents (Wiener lab’s
Noion) or diluted mineral acids, rinsing several times with
distilled water.
PERFORMANCE
The assays were performed in an Express plus analyzer(*). If
using the kit with manual procedure, user must validate that
similar performance to that stated below is obtained.
a) Reproducibility:
Intra-assay
Sample Mean (mg/dl) S.D. (mg/dl) C.V.
Normal Level Serum 9.4 ± 0.12 1.28 %
High Level Serum 12.0 ± 0.16 1.30 %
Sample Mean (mg/24 hs) S.D. (mg/24 hs) C.V.
High Level Urine 349 ± 2.38 0.68 %
Inter-assay
Normal Level Serum 9.8 ± 0.17 1.74 %
High Level Serum 12.7 ± 0.22 1.70 %
Sample Mean (mg/24 hs) S.D. (mg/24 hs) C.V.
Normal Level Urine 121 ± 3.01 2.50 %
High Level Urine 351 ± 4.69 1.34 %
(*)
TM Ciba Corning Diagnostics
b) Linearity: reaction is linear up to 20 mg/dl. For higher
values, repeat testing using 25 ul Sample or 1:2 diluted
sample with saline multiplying final result by 2.
c) Correlation:
- Serum and plasma: calcium values of 143 specimens were
determined using Wiener lab.'s Ca-Color AA kit and a
commercial kit based on the same principle. The correla-
SYMBOLS
The following symbols are used in the packaging for Wiener
lab. diagnostic reagents kits.
This product fulfills the requirements of the European
C Directive 98/79 EC for "in vitro" diagnostic medical devices

tion coefficient was:

r = 0.9963, slope b = 1.0185 and intercept a= -0.0362 P Authorized representative in the European Community
- Urine: calcium values of 69 specimens were determined
using Wiener lab.'s Ca-Color AA kit and a commercial kit
V "In vitro" diagnostic medical device

based on the same principle. The correlation coefficient Contains sufficient for <n> tests
was:
X
r = 0.9943, slope b = 1.0207 and intercept a = 2.5116 Use by
H
d) Sensitivity: based of an instrument resolution of A = 0.001,
Wiener lab. calcium procedure has a sensitivity of 0.01 mg/dl.
l Temperature limitation (store at)

PARAMETERS FOR AUTOANALYZERS  Do not freeze

For programming instructions check the user’s manual of
the autoanalyzer in use. F Biological risks
For calibration, it can be used a serum based calibrator
Volume after reconstitution
(Wiener lab.'s Calibrador A plus).
Cont. Contents
WIENER LAB. PROVIDES
- 4 x 50 ml (Cat. 1152002).
g Batch code

REFERENCES M Manufactured by:

- Martinek, R.G. - J. Am. Med. Techn. 33:416 (1971).
- Rojkín, M. y Mariani, M. de - Bioquím. Clín. VII/4:405 (1973). Harmful
- Lorenzo, L.E. ; Drappo, G.A. - 1o Congreso Argentino de
Osteología y Metabolismo Mineral - Rosario (1984). Corrosive / Caustic
- Drappo, G.; Lorenzo, L.; - Revista ABA 239:230 (1979).
- Connerty, H.V.; Briggs, A.R. - Am. J. Clin. Path. 45:290 Irritant
(1966).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", i Consult instructions for use
AACC Press, 4th ed., 2001.
- Burtis C., Ashwood, E. - Tietz Texbook of Clinical Chemistry, Calibr. Calibrator
WB Saunders Co., 3º ed, 1999.
- Tietz N.W. - Fundamentals of Clinical Chemistry - W.B. b Control
Saunders Co., Philadelphia; 1982.
b Positive Control

c Negative Control

h Catalog number

864113524 / 00 p. 9/12

C Bezpośrednia metoda kolorymetryczna do oznaczenia poziomu
wapnia w surowicy krwi, osoczu heparynizowanym i moczu
Nr kat. 1152002
WSTĘP
Wapń jest niezbędnym minerałem w większości pro-
cesów krzepnięcia oraz regulacji pobudliwości włókien
mięśniowych. Poziom stężenia wapnia w surowicy i w
moczu jest uwarunkowany przez takie czynniki jak: poziom
parathormonu, witaminy D i poziom fosforu.
Fizjologiczna zmienność poziomu wapnia związana jest
z wiekiem, płcią, aktywnością fizyczną oraz porami roku
(wpływ światła słonecznego).
Hiperkalcemia jest związana z różnymi stanami chorobowy-
mi: nadczynnością przytarczyc, chorobami nowotworowymi
kości, zatruciem witaminą D.
Hipokalcemia jest związana z takimi chorobami jak:
niedoczynność tarczycy, niedoborem witaminy D, zespołami
złego wchłaniania i in.
ZASADA DZIAŁANIA
Wapń reaguje z o-krezoloftaleiną w pH zasadowym dając
kompleks karmazynowy, z pomiarem fotokolorymetrycznym
przy długości fali 570 nm.
DOSTARCZANE ODCZYNNIKI
A. Odczynnik A: roztwór kompleksu o-krezoloftaleiny i
8-hydroksychinoliny.
B. Odczynnik B: roztwór propanolu aminometylowego (AMP).
S. Próba wzorcowa: roztwór wapnia w stężeniu 10 mg/dl.
Końcowe stężenia
o-krezoloftaleina................................................ 0,08 mmol/l
8-hydroksychinolina................................................ 4 mmol/l
AMP........................................................................ 3,5 mol/l
NIEDOSTARCZANE ODCZYNNIKI
- Wiener lab. Calibrador A plus.
- Woda demineralizowana lub destylowana
INSTRUKCJA UŻYCIA
Dostarczone odczynniki: gotowe do użycia.
Próba wzorcowa: przed zastosowaniem przenieść nadmiar
do czystej probówki i pipetą odmierzyć niezbędną objętość,
zostawiając nadsącz.
Monoodczynnik (wymieszany wstępnie): zmieszać równe
części Odczynnika A i Odczynnika B, zgodnie z ilością próbek
do oznaczenia.
OSTRZEŻENIA
Odczynniki wyłącznie do użycia in vitro.
Nie spożywać. Unikać kontaktu z oczami i skórą. Jeśli
zostaną rozbite odczynniki lub rozlane spłukać obficie wodą.
864113524 / 00 p. 10/12
Ca-Color
AA
Stosować odczynniki zgodnie z procedurami dla laboratoriów
klinicznych.
Odczynniki i materiał badany powinni być odrzucone zgodnie
z lokalnymi przepisami.
TRWAŁOŚĆ I WARUNKI PRZECHOWYWANIA
Dostarczone odczynniki: trwałe w temperaturze pokojowej
(poniżej 25oC) do końca daty ważności umieszczonej na
opakowaniu.
Monoodczynnik (wymieszany wstępnie): trwałość do 4 dni
przy przechowywaniu w lodówce (2-10oC).
BRAK TRWAŁOŚCI I POGORSZENIE JAKOŚCI
ODCZYNNIKÓW
Wysokie wartości absorbancji próbki ślepej wskazuje na
zanieczyszczenie wapniem. Nie stosować gdy wartości
osiągają powyżej 0,600 O.D. lub więcej.
MATERIAŁ BADANY
Surowica, heparynizowane osocze lub mocz
a) Pobranie: pobrać surowicę lub osocze w tradycyjny
sposób. W przypadku moczu - dobowa zbiórka na 20 ml
roztworu 50% kwasu wodorochlorowego. Dopełnić słoik do
objętości 2 litrów wodą. Wymieszać w celu homogenizacji.
b) Substancje dodatkowe: jeśli materiałem do badania
jest osocze należy dodać antykoagulantu. Jeżeli mocz jest
materiałem, powinien zostać zakwaszony 50% kwasem
wodorochlorowym.
c) Znane interakcje: inne antykoagulanty (poza heparyną)
tworzą kompleksy z wapniem co daje nieprawidłowe wyniki.
Nie obserwowano interakcji z bilirubiną do 20 mg/dl (200 mg/l),
trójglicerydami do 680 mg/dl (6,8 g/l), hemoglobiną do poziomu
94 mg/dl oraz z magnezem do poziomu 9,9 mg/dl.
Sprawdź źródło: Young, D.S. w sprawie wpływu leków w
tej metodzie.
d) Trwałość i instrukcja przechowywania: materiał powi-
nien być świeży. Przechowywanie możliwe do tygodnia w lo-
dówce w temp. 2-10oC, lub powyżej 5 miesięcy w zamrażarce
bez żadnych utrwalaczy.
WYMAGANE MATERIAŁY I SPRZĘT (niedostarczane)
- Spektrofotometr lub fotokolorymetr.
- Mikropipety lub pipety do pomiaru objętości.
- Probówki do badań lub kuwety spektrofotometryczne.
WARUNKI DLA PRZEPROWADZENIA TESTU
- Długość fali: 570 nm w spektrofotometrze lub 560-590 nm
w fotokolorymetrze z czerwonym filtrem.
- Temperatura reakcji: pokojowa 15-25oC OBLICZENIA
- Czas reakcji: 5 min. 1) Wapń w surowicy (mg/dl) = U x f
- Objętość próbki: 50 ul
10 mg/dl
- Objętość końcowej reakcji: 2,05 ml
f=
S
PROCEDURA U
I - TECHNIKA Z ODDZIELNYMI ODCZYNNIKAMI 2) Wapń w moczu (mg/24godz.) = x S conc. x 10 x V
W trzech próbkach do fotokolorymetru oznaczonych B S
(ślepa), S (wzorcowa), U (badana) umieścić:
gdzie: 10 = współczynnik konwersji mg/dl na mg/l
B S U V= objętość diurezy w litrach/24godz.
Woda destylowana 50 ml - - Przykład:
Próba wzorcowa - 50 ml - Absorbancja próbki wzorcowej S = 1,050
Absorbancja moczu = 0,933
Materiał - - 50 ml
Stężenie próbki wzorcowej = 10 mg/dl
Odczynnik A 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml Dobowa zbiórka moczu = 1,27 litrów
Odczynnik B 1,0 ml 1,0 ml 1,0 ml
0,933
Wymieszać. Inkubować probówki w temp. pomiędzy 15 Wapń w moczu = x 10 x 10 x 1,27 = 113 mg/24 godz.
a 25oC w ciągu 5 min. Odczytywać wyniki w spektrofoto- 1,050
metrze przy długości fal 570 nm lub w fotokolorymetrze z
czerwonym filtrem w przedziale długości fal 560-590 nm. KONWERSJA JEDNOSTEK SI
Mikrotechnika Ca (mg/dl) = Ca (mmol/l) x 4
Postępować jak w procedurze I używając 25 ul materiału Ca (mmol/l) = Ca (mg(dl) x 0,25
oraz 0,5 ml Odczynnika A i 0,5 ml Odczynnika B. Ca (mg/dl) = Ca (mEq/l) x 2
Ca (mEq/l) = Ca (mg/dl) x 0,5
II - TECHNIKA Z MONOODCZYNNIKIEM
W trzech próbkach do fotokolorymetru oznaczonych B METODA KONTROLI JAKOŚCI
(ślepa), S (wzorcowa), U (badana) umieścić: W trakcie przeprowadzania badania za każdym razem należy
przeprowadzać analizę jakości na dwóch poziomach (Wiener
B S U lab. Standatrol S-E 2 niveles) ze znanym stężeniem wapnia.
Woda destylowana 50 ml - -
WARTOŚCI REFERENCYJNE
Próba wzorcowa - 50 ml -
Surowica: 8,5 - 10,5 mg/dl
Materiał - - 50 ml Mocz: do 300 mg/24 godz. (przy normalnej diecie)
Monoodczynnik 2,0 ml 2,0 ml 2,0 ml W populacji zdrowej (120 osób) Rosario (Argentyna) obu
Wymieszać. Inkubować probówki w temp. pomiędzy 15 a płci (między 20-45 rż) przy diecie wolnej od wapnia ustalono
25oC w ciągu 5 min. Odczytywać w spektrofotometrze przy następujące wyniki u 95%.
długości fal 570 nm lub w fotokolorymetrze z czerwonym Mocz: 60 - 200 mg/24 godz.
filtrem w przedziale długości fal 560-590 nm. Zaleca się dla każdego laboratorium ustalenie własnych
wartości referencyjnych.
Mikrotechnika
Postępować jak w procedurze II używając 25 ul materiału
oraz 1 ml Monoodczynnika. OGRANICZENIA PROCEDURY
Zobacz ZNANE INTERAKCJE w rozdziale MATERIAŁ.
Gdy próbka jest shemolizowana lub o dużej zawartości Zanieczyszczenie: szkło laboratoryjne powinno być
lipidów niezbędne jest przygotowanie ślepej próby w dobrze umyte, wolne od wapnia jakichkolwiek śladów
następujący sposób: zmieszać 50 ul materiału z 2 ml des- antykoagulantu. Zaleca się mycie szkła laboratoryjne-
tylowanej wody. Dokonać pomiaru absorbancji ustawiając go niejonowymi detergentami (Wiener lab’s Noion) lub
na zero OD na wodzie destylowanej. Odjąć absorbancję rozcieńczonymi kwasami mineralnymi, spłukiwać kilka
z otrzymanej początkowo próbki i zastosować różnicę razy wodą destylowaną.
do obliczeń.
CHARAKTERYSTYKA TESTU
Badania zostały wykonane w analizatorze Express plus(*).
TRWAŁOŚĆ REAKCJI KOŃCOWEJ Jeżeli zestaw ma mieć zastosowanie do ręcznej procedury,
Kolor końcowej reakcji jest stabilny przez 20 min. Odczyt laborant musi ocenić i porównać aby otrzymane winniki byli
powinien nastąpić w/w okresie. podobne do naznaczonych poniżej:
864113524 / 00 p. 11/12 (*)
Jest znakiem towarowym firmy Ciba Corning Diagnostics
a) Powtarzalność Oznaczenia
Trakcie badania Następujące symbole są zastosowane na opakowaniach
zestawów odczynników diagnostycznych.
Materiał Średnia S.D. C.V.
Ten produkt spełnia wymagania Dyrektywy Europej-

C
(mg/dl) (mg/dl) (%)
Surowica, prawidłowy poziom 9.4 ± 0.12 1.28 skiej 98/79 EC dla wyrobów medycznych używanych
Surowica, wysoki poziom 12.0 ± 0.16 1.30 do diagnozy "in vitro"

Materiał Średnia S.D. C.V. PAutoryzowany przedstawiciel we Wspólnocie Europejskiej

(mg/24 hs) mg/24godz (%)
Mocz, prawidłowy poziom 118 ± 1.26 1.06 V Wyrób do diagnostyki "in vitro"
Mocz, wysoki poziom 349 ± 2.38 0.68
X Zawartość wystarczająca dla <n> badań
Pomiędzy badaniami
H Użyć przed
Materiał Średnia S.D. C.V.
(mg/dl) (mg/dl) (%) Ograniczenie dopuszczalnych temperatur
Surowica, prawidłowy poziom 9.8 ± 0.17 1.74
l
Surowica,wysoki poziom 12.7 ± 0.22 1.70  Nie zamrażać
Materiał Średnia S.D. C.V.
(mg/24 hs) mg/24godz (%) F Ryzyko biologiczne
Surowica, prawidłowy poziom 121 ± 3.01 2.50
Surowica,wysoki poziom 351 ± 4.69 1.34 Objętość po rozpuszczeniu

b) Linijność: reakcja jest linijna do 20 mg/dl. Dla wyższych Cont. Zawartość

wartości należy powtórzyć badania używając 25 ul materiału
lub rozcieńczenie materiału badanego 1:2 z solą fizjologiczną
a następnie pomnożyć wyniki razy 2.
g numer serii

c) Korelacja: M Wytwórca
- Surowica i osocze: wartości wapnia w 143 próbek zostały
określone przy zastosowaniu zestawu Ca-Color AA Wiener lab. Substancja szkodliwa
oraz podobnego zestawu dostępnego na rynku działającego na
tej samej zasadzie. Współczynnik korelacji wynosił: Substancja żrące
r = 0,9963, slope b = 1,0185 and intercept a = 0,0362
- Mocz: wartości wapnia 69 próbek zostały określone przy Substancja drażniąca
zastosowaniu zestawu Ca-Color AA Wiener lab. oraz po-
dobnego zestawu dostępnego na rynku działającego na tej i Przed użyciem zapoznać się z instrukcją
samej zasadzie. Współczynnik korelacji wynosił:
r = 0,9943, slope b = 1,0207 and intercept a = 2,5116 Calibr. Kalibrator
d) Czułość: w oparciu o rozdzielczość urządzenia A = 0,001,
czułość badania poziomu wapnia Wiener lab. wynosi 0,01 mg/dl. b Próba kontrolna

PARAMETRY DLA ANALIZATORÓW AUTOMATYCZNYCH b Próba kontrolna dodatnia

Należy zapoznać się z instrukcją obsługi celem progra-
mowania analizatorów automatycznych. Dla kalibracji można
c Próba kontrolna ujemna

zastosować Wiener lab. Calibrador A plus. h Numer katalogowy

WIENER LAB. DOSTARCZA

- 4 x 50 ml (Nr kat. 1152002).

ŹRÓDŁA
- Martinek, R.G. - J. Am. Med. Techn. 33:416 (1971).
- Rojkín, M. y Mariani, M. de - Bioquím. Clín. VII/4:405 (1973).
- Lorenzo, L.E. ; Drappo, G.A. - 1o Congreso Argentino de
Osteología y Metabolismo Mineral - Rosario (1984).
- Drappo, G.; Lorenzo, L.; - Revista ABA 239:230 (1979).
- Connerty, H.V.; Briggs, A.R. - Am. J. Clin. Path. 45:290 (1966).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001. M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
- Burtis C., Ashwood, E. - Tietz Texbook of Clinical Chemistry, Riobamba 2944
WB Saunders Co., 3º ed, 1999. 2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
- Tietz N.W. - Fundamentals of Clinical Chemistry - W.B. Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Saunders Co., Philadelphia; 1982. Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 2529/98 2000 Rosario - Argentina
864113524 / 00 p. 12/12 UR190627

C Para la determinación de glucosa en suero, plasma,
SIGNIFICACION CLINICA
La patología más común relacionada con el metabolismo de
los hidratos de carbono es la diabetes mellitus.
El diagnóstico precoz y el control de los pacientes diabéticos,
tienen por objeto evitar la cetoacidosis y las complicaciones
resultantes de la hiperglicemia, mediante el tratamiento
adecuado.
Dado que existen múltiples factores causales de hiper o
hipoglicemia, debe considerarse en cada caso la condición
fisiológica y/o la patología presente en el paciente.
FUNDAMENTOS DEL METODO
El esquema de reacción es el siguiente:
GOD
glucosa + O2 + H2O ácido glucónico + H2O2
POD
2 H2O2 + 4-AF + 4-hidroxibenzoato quinonimina roja
REACTIVOS PROVISTOS
S. Standard: solución de glucosa 100 mg/dl (1 g/l).
A. Reactivo A: viales conteniendo glucosa oxidasa (GOD),
peroxidasa (POD) y 4-aminofenazona (4-AF).
B. Reactivo B: buffer fosfatos pH 7,0 conteniendo 4-hidroxi-
benzoato.
Concentraciones finales
GOD (microbiana)................................................. ≥ 10 kU/l
POD (rábano).......................................................... ≥ 1 kU/l
4-AF..................................................................... 0,5 mmol/l
Fosfatos................................................. 100 mmol/l, pH 7,0
4-Hidroxibenzoato................................................ 12 mmol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS
Calibrador A plus de Wiener lab.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Standard: listo para usar.
Reactivo de Trabajo: reconstituir el contenido de un vial de
Reactivo A con una parte de Reactivo B. Transferir al frasco
de Reactivo B, enjuagando varias veces el vial con el mismo.
Mezclar hasta disolución completa. Homogeneizar y fechar.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de química clínica.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
870570000 / 01 p. 1/6
Glicemia
enzimática AA
orina o líquido cefalorraquídeo
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No man-
tener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados.
Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) es estable
60 días a partir de la fecha de su preparación.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar un
ligero color rosado que no afecta su funcionamiento siempre
que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones
y un Standard por lo menos una vez por semana. Desechar
cuando las lecturas del Blanco sean superiores a 0,160 D.O.
MUESTRA
Suero, plasma, orina o líquido cefalorraquídeo (LCR)
a) Recolección:
- Suero o plasma: se debe obtener suero de la manera usual
o plasma recolectado con anticoagulantes comunes.
- Orina: si se trata de una muestra aislada, utilizar prefe-
rentemente orina fresca. En caso de no poder realizar
el ensayo de forma inmediata, conservar la muestra en
refrigerador (2-10oC). Puede realizarse el ensayo en orina
de 24 horas. En este caso, recolectar la muestra en un
recipiente oscuro conteniendo 5 ml de ácido acético glacial
y conservarlo en hielo.
- LCR: en caso de utilizar LCR, el ensayo debe realizarse en
forma inmediata a la obtención de la muestra.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea plas-
ma, se recomienda el uso de heparina o Anticoagulante G
(EDTA/fluoruro) para su obtención.
c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
interferencias por: bilirrubina hasta 10 mg/dl, triglicéridos
hasta 500 mg/dl, ni hemoglobina hasta 350 mg/dl. El ácido
ascórbico interfiere en la determinación en orina en cualquier
concentración.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
destrucción enzimática de la glucosa sanguínea (glucólisis)
por hematíes y leucocitos es proporcional a la temperatura a
la que se conserva la sangre, siendo máxima a 37oC. Este
proceso no se inhibe aún en estado de congelación, por lo
que la sangre debe centrifugarse dentro de las 2 horas de la
extracción. El sobrenadante límpido se transfiere a otro tubo
para su con­servación. De esta forma la glucosa es estable
4 horas a tem­peratura ambiente o 24 horas refrigerada. En
caso de no poder procesarse la muestra de la forma indi-
cada, deberá adicionarse un conservador en el momento
de la extracción.
El LCR puede contaminarse con bacterias y otras células
por lo que la determinación debe realizarse de inmediato.
En caso de no poder procesarse de esta manera, centrifugar
el LCR y conservarlo 3 días a 2-10oC o 5 horas a 20-25oC.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
- Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
indicados.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
- Baño de agua a 37oC.
- Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm).
- Temperatura de reacción: 37oC
- Tiempo de reacción: 5 minutos
- Volumen de muestra: 10 ul
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 1 ml
- Volumen final de reacción: 1,01 ml
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden variar-
se proporcionalmente (Ej.: 20 ul Muestra + 2 ml Rvo. de
Trabajo).
PROCEDIMIENTO
En tres tubos marcados B (Blanco) S (Standard) y D
(Desconocido) colocar:
B S D
Standard - 10 ul -
Muestra - - 10 ul
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml
Incubar 5 minutos en baño de agua a 37 C o 25 minutos
o
a 15-25oC. Luego leer en espectrofotómetro a 505 nm o
en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm) llevando
el aparato a cero con el blanco.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
El color de reacción final es estable 30 minutos, por lo que
la absorbancia debe ser leída dentro de este lapso.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
100 mg/dl
glucosa (mg/dl) = D x f f=
S c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 500 mg/dl. Para
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
de glucosa, con cada determinación.
(*)
Marca registrada de Ciba Corning Diagnostics
VALORES DE REFERENCIA
Se analizaron con Glicemia enzimática AA, 120 muestras
de individuos en ayunas, de ambos sexos, con edades com-
prendidas entre 20 y 45 años, provenientes de la ciudad de
Rosario (Argentina), sin síntomas de diabetes o cualquier
otra enfermedad aparente. Se encontró que el 95% de los
resultados cubrieron el siguiente rango:
Suero o plasma: 70 a 110 mg/dl
En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango
de referencia:
Suero o plasma
Adultos: 74 - 106 mg/dl (4,11 - 5,89 mmol/l)
Niños: 60 - 100 mg/dl (3,33 - 5,55 mmol/l)
Neonatos: 1 día: 40 - 60 mg/dl (2,22 - 3,33 mmol/l)
mayor a 1 día: 50 - 80 mg/dl (2,78 - 4,44 mmol/l)
Orina aislada fresca
1 - 15 mg/dl (0,06 - 0,83 mmol/l)
Orina de 24 horas
< 0,5 g/24 hs (< 2,78 mmol/24 hs)
LCR
Niños: 60 - 80 mg/dl (3,33 - 4,44 mmol/l)
Adultos: 40 - 70 mg/dl (2,22 - 3,89 mmol/l)
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia, teniendo en cuenta sexo, edad hábitos
alimenticios y otros factores.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
Glucosa (mg/dl) x 0,0555 = Glucosa (mmol/l)
Glucosa (g/24 horas) x 55,5 = Glucosa (mmol/24 hs)
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
PERFORMANCE
Los ensayos fueron realizados en analizador automático
Express Plus(*).
a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
muestras en 5 días diferentes se obtuvo:
Precisión intraensayo (n = 20)
Nivel D.S. C.V.
90,7 mg/dl ± 1,26 mg/dl 1,39 %
278 mg/dl ± 3,08 mg/dl 1,11 %
Precisión interensayo (n = 20)
Nivel D.S. C.V.
90,1 mg/dl ± 1,73 mg/dl 1,92 %
299 mg/dl ± 4,86 mg/dl 1,62 %
b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de
glucosa a distintos sueros, se obtuvo una recuperación
entre 99 y 101%.
valores superiores, diluir la muestra con solución salina
y repetir el ensayo, multiplicando el resultado final por el
factor de dilución.
d) Correlación: se determinó el valor de glucosa en 154 mues-
tras de suero en un rango comprendido entre 23 y 503 mg/dl,
870570000 / 01 p. 2/6
con Glicemia enzimática AA de Wiener lab. y un kit comercial
basado en el mismo principio, obteniéndose el siguiente coefi-
ciente de correlación:
r = 0,9997; pendiente b = 1,0257; intersección a = 1,9485
e) Sensibilidad: el mínimo límite de detección es 0,54 mg/dl
y la sensibilidad analítica es de 4,2 mg/dl.
SIMBOLOS
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Este producto cumple con los requerimientos previstos
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"

PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS P Representante autorizado en la Comunidad Europea

Para las instrucciones de programación debe consultarse el
Manual del Usuario del Analizador en uso. V Uso diagnóstico "in vitro"
Para la calibración, se puede utilizar un calibrador con base
X Contenido suficiente para <n> ensayos
de suero (Calibrador A plus de Wiener lab.).
H Fecha de caducidad
PRESENTACION
- 1 x 250 ml (Cód. 1400106). l Límite de temperatura (conservar a)
- 4 x 250 ml (Cód. 1400107).
 No congelar
BIBLIOGRAFIA
- Henry, R.J. et.al. - Clinical Chemistry, Principles and F Riesgo biológico
Techniques, 2nd. ed., Harper and Row Pub. Inc. N.Y. p.
1288 (1974). Volumen después de la reconstitución
- Lott, J.A. and Turner, K. - Clin. Chem. 21:1754-1760 (1975).
Cont. Contenido
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969).
- Ziegenhorn, J. - J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 15/1:13 g Número de lote
(1977).
- Caraway - Stand. Meth. Clin. Chem. 4:240 (1963). M Elaborado por:
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001. Xn
Nocivo
- Burtis - Ashwood. Tietz Fundamentals of Clinical Chemistry,
W.B. Saunders Co., fifth edition, United States of America, Corrosivo / Caústico
2001.
Xi
Irritante

i Consultar instrucciones de uso

Calibr. Calibrador

b Control

b Control Positivo

c Control Negativo

h Número de catálogo

MWiener Laboratorios S.A.I.C.

Wiener lab.
Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 1978/97 2000 Rosario - Argentina
870570000 / 01 p. 3/6

C cinética AA
SIGNIFICACION CLINICA
La creatinina, compuesto sumamente difusible, se elimina
del organismo casi exclusivamente por filtración renal. Su
determinación en suero, así como la depuración de creati-
nina endógena constituyen parámetros importantes para el
diagnóstico de diversas afecciones renales.
FUNDAMENTOS DEL METODO
La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de
Jaffe) produciendo un cromógeno rojo. La velocidad de esta
reacción, bajo condiciones controladas, es una medida de
la concentración de creatinina de la muestra puesto que
se comporta como una reacción cinética de primer orden
para la creatinina. Por otra parte, se ha demostrado que los
cromógenos no-creatinina que interfieren en la mayor parte
de las técnicas convencionales, reaccionan dentro de los 30
segundos de iniciada la reacción. De manera que entre los 30
segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reacción,
el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: solución de ácido pícrico 12,7 mmol/l y lau-
rilsulfato de sodio 8,4 mmol/l.
B. Reactivo B: solución de borato 53 mmol/l e hidróxido de
sodio 970 mmol/l.
S. Standard*: solución de creatinina 20 mg/l.
REACTIVOS NO PROVISTOS
Calibrador A plus de Wiener lab.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivo A: listo para usar. A baja temperatura puede pre-
sentar turbidez o sedimento. En tal caso, colocar en baño
de agua a 37oC unos minutos antes de usar.
Reactivo B: listo para usar.
Reactivo de Trabajo: de acuerdo al volumen de trabajo,
mezclar cuatro partes de Reactivo A y una parte de Reacti-
vo B. Rotular y fechar. A baja temperatura puede presentar
turbidez o sedimento. En tal caso, colocar en baño de agua
a 37oC unos minutos antes de usar.
PRECAUCIONES
El kit es para uso diagnóstico "in vitro".
Reactivo B: corrosivo. H315 + H320: Provoca irritación
cutánea y ocular. H314: Provoca quemaduras graves en la
piel y lesiones oculares graves. P262: Evitar el contacto con
los ojos, la piel o la ropa. P305 + P351 + P338: EN CASO DE
CONTACTO CON LOS OJOS: Enjuagar cuidadosamente con
* No provisto en todas las presentaciones
LINEA LIQUIDA
Creatinina
Método cinético para la determinación de creatinina
en suero, plasma u orina
agua durante varios minutos. Quitar las lentes de contacto,
si lleva y resulta fácil. Seguir enjuagando. P302 + P352:
EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con agua
y jabón abundantes. P280: Llevar guantes/prendas/gafas/
máscara de protección.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente
(menor a 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Reactivo de Trabajo: premezclado y en envase plástico, es
estable una semana a temperatura ambiente. En analizadores
automáticos que emplean Reactivo de Trabajo único (premezcla-
do), referirse a las adaptaciones específicas de cada analizador.
Evitar la exposición prolongada al aire, manteniendo el frasco
bien tapado cuando no sea utilizado.
MUESTRA
Suero, plasma u orina
a) Recolección: el suero o plasma se deben obtener de la
manera usual.
Puede emplearse también orina de 2 horas o de 24 horas.
Su recolección debe efectuarse en un recipiente perfecta-
mente limpio que se mantendrá en el refrigerador (2-10oC)
durante el tiempo de la recolección. Medir la diuresis, tomar
una alícuota y efectuar una dilución 1:50 de la misma en
agua destilada. En caso de que la diuresis sea de 2 horas,
multiplicar el volumen medido por 12 para calcular la cantidad
de creatinina eliminada durante 24 horas.
b) Aditivos: en caso de utilizar plasma, recogerlo únicamen-
te con heparina o EDTA.
c) Sustancias interferentes conocidas: cuando la mues-
tra es suero o plasma, no se observan interferencias por
hemoglobina hasta 0,78 g/dl (7,8 g/l), triglicéridos hasta
1.700 mg/dl (17 g/l) ni bilirrubina hasta 24 mg/dl (240 mg/l);
cuando la muestra es orina, no se observan interferencias
por proteínas hasta 500 mg/dl (5 g/l), ácido ascórbico hasta
100 mg/dl (1 g/l) ni cetonas hasta 4 mmol/l.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el
suero o plasma debe ser separado de los glóbulos rojos
antes de las dos horas de la extracción. Conservados en
refrigerador (2-10oC) su estabilidad es de 3 días.
La orina puede mantenerse hasta 4 días en refrigerador (2-
10oC) sin agregado de conservantes.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro capaz de leer a 500 ± 10 nm.
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Cubetas espectrofotométricas.
- Baño de agua a 25oC.
- Cronómetro.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 500 nm
- Temperatura de reacción: 25oC
El control de la temperatura no es crítico, pudiendo oscilar
entre 22 y 28oC. Ver Limitaciones del Procedimiento.
- Volumen de muestra: 0,2 ml
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 1,2 ml
- Volumen final de reacción: 1,4 ml
PROCEDIMIENTO
I- TECNICA PARA SUERO O PLASMA
Equilibrar el Reactivo de Trabajo a la temperatura de reac-
ción (25oC). Antes de agregar la muestra, llevar el aparato a
cero con agua destilada. En dos cubetas espectrofotomé-
tricas marcadas S (Standard) y D (Desconocido), colocar:
S D
Reactivo de Trabajo 1,2 ml 1,2 ml
Standard 0,2 ml -
Muestra - 0,2 ml
Mezclar inmediatamente, iniciando al mismo tiempo el
cronómetro y proseguir la incubación. A los 30 segundos
exactos medir la absorbancia (S1 y D1) y continuar la
incubación. Medir nuevamente la absorbancia (S2 y D2)
a los 5 minutos (4 minutos 30 segundos después de la
primera lectura).
II- TECNICA PARA ORINA
Recolectar y preparar la muestra como se describió en
“Recolección”, efectuando una dilución 1:50 de la misma
en agua desionizada. Aplicar luego la técnica I.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
1) Creatinina en suero (mg/l) = (D2 - D1) x f
20 mg/l
f=
S2 - S1
D2 - D1
2) Creatinina en orina (g/24 hs) = x V
S2 - S1
siendo:
V = volumen de la diuresis expresado en litros/24 hs
La fórmula surge de:
D2 - D1
Creatinina en orina (g/24 hs) = x 0,020 g/l x 50 x V
S2 - S1
donde:
0,020 g/l = concentración del Standard
50 = factor de dilución
Para expresar la creatinina en orina en “mg/Kg/24 hs”:
Creatinina en orina (g/24 hs) x 1000 mg/g
Peso del paciente (Kg)
3) Depuración de Creatinina Endógena (D.C.E.):
Creatinina en orina (g/24 hs)
D.C.E. ml/min = x 694 ml/min
Creatinina en suero (mg/l)
donde:
g/24 hs 1.000 mg x 1.000 ml 1.000.000 ml
694 ml/min = = =
mg/l 1 mg x 1.440 min 1.440 min
Para expresar D.C.E. en “ml/min/1,73 m2”:
D.C.E. (ml/min) x 1,73
Superficie corporal del paciente (m2)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
de creatinina, con cada determinación.
VALORES DE REFERENCIA
Suero o plasma:
Hombre: 7 - 13 mg/l
Mujer: 6 - 11 mg/l
Orina:
Hombre: 14 - 26 mg/Kg/24 hs
Mujer: 11 - 20 mg/Kg/24 hs
D.C.E.:
Hombre: 94 - 140 ml/min/1,73 m2
Mujer: 72 - 110 ml/min/1,73 m2
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
Creatinina (mg/l) x 8,84 = Creatinina (umol/l)
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Otras causas de resultados erróneos son:
- Temperatura: si bien la temperatura de reacción admite
una variación entre 22 y 28oC, una diferencia entre la
temperatura de incubación del Standard respecto de las
muestras disminuye la precisión del método.
- Tiempo de lectura: ligeras variaciones en la medición del
tiempo afectan notablemente la exactitud del método. Las
lecturas deberán realizarse exactamente a los 30 segundos
luego de haber mezclado la muestra con el reactivo y a los 5
minutos (4 minutos 30 segundos luego de la primera lectura).
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento
EP15-A del CLSI (ex-NCCLS), se obtuvo lo siguiente: SIMBOLOS
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
Precisión intraensayo (n = 20)
reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Nivel D.S. C.V.
Este producto cumple con los requerimientos previstos

Suero
7,1 mg/l
14,7 mg/l
54,9 mg/l
± 0,27 mg/l
± 0,32 mg/l
± 1,09 mg/l
3,8 %
2,2 %
2,0 %
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"

P Representante autorizado en la Comunidad Europea

440 mg/l ± 9,35 mg/l 2,1 %
Orina 2.620 mg/l ± 62,4 mg/l 2,4 % V Uso diagnóstico "in vitro"
5.060 mg/l ± 136 mg/l 2,7 %
Precisión total (n = 20)
X Contenido suficiente para <n> ensayos

Nivel D.S. C.V. H Fecha de caducidad

7,1 mg/l ± 0,30 mg/l 4,3 %
Suero 14,7 mg/l ± 0,48 mg/l 3,3 % l Límite de temperatura (conservar a)

54,9 mg/l ± 1,47 mg/l 2,7 %

 No congelar

440 mg/l ± 20,5 mg/l 4,6 % Riesgo biológico

Orina 2.620 mg/l ± 119 mg/l 4,5 % F
5.060 mg/l ± 177 mg/l 3,5 % Volumen después de la reconstitución

b) Linealidad: la reacción es lineal hasta 90 mg/l de crea- Cont. Contenido

tinina. Para valores superiores, diluir la muestra 1:2 ó 1:4
con solución salina y repetir la determinación. Corregir los
cálculos multiplicando por el factor de dilución empleado.
g Número de lote

c) Límite de detección: el mí­ni­mo cam­bio de concentración M Elaborado por:

de­tec­ta­ble es 4,5 mg/l.
Nocivo
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Para las instrucciones de programación debe consultarse el Corrosivo / Cáustico
Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la calibra-
ción, debe usarse Calibrador A plus de Wiener lab. Irritante

PRESENTACION i Consultar instrucciones de uso

- 250 ml (2 x 100 ml Reactivo A + 2 x 25 ml Reactivo B)
Calibr. Calibrador
(Cód. 1260360)
- 200 ml (4 x 40 ml Reactivo A + 2 x 20 ml Reactivo B)
(Cód. 1009329) b Control

- 200 ml (4 x 40 ml Reactivo A + 2 x 20 ml Reactivo B)

(Cód. 1009254)
b Control Positivo

- 300 ml (4 x 60 ml Reactivo A + 3 x 20 ml Reactivo B) c Control Negativo

(Cód. 1009611)
- 300 ml (4 x 60 ml Reactivo A + 3 x 20 ml Reactivo B) h Número de catálogo
(Cód. 1009906)
- 100 ml (4 x 20 ml Reactivo A + 2 x 10 ml Reactivo B)
(Cód. 1009810)

BIBLIOGRAFIA
- Owen, J.A.; et al. - Biochem. J. 58:426 (1954).
- Henry, R.J. et al. - Clinical Chemistry, Principles and Tech-
nics, 2nd ed., Harper and Row Publishers Inc., N.Y. (1974).
- Butler, A.R. - J. Chem. Soc. (Perkin Trans. II), 853 (1975).
- Labbé, D et al. - Ann. Biol. Clin. 54:285 (1996).
- Burtis, CA; Ashwood, ER - Tietz Fundamentals of Clin. M Wiener Laboratorios S.A.I.C.
Chem., 5th ed., 2001. Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
AACC Press, 5th ed., 2000. Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- Producto Autorizado A.N.M.A.T.
NCCLS) - Protocol EP15-A, 2001 / EP 17A, 2004. PM-1102-14 2000 Rosario - Argentina
 Bilirrubina Directa
C Método DPD para la determinación de bilirrubina
SIGNIFICACION CLINICA
La bilirrubina, compuesto de degradación de la hemoglobina,
es captada por el hígado para su conjugación y excreción
en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones
biliares pueden provocar hiperbilirrubinemias.
La eritroblastosis fetal o anemia hemolítica del recién nacido
es una patología provocada por incompatibilidad materno-
fetal en la que se produce una destrucción excesiva de
glóbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de la
bilirrubina sérica con el consecuente riesgo de difusión del
pigmento al sistema nervioso central, por lo que la determi-
nación de la bilirrubina en estos niños recién nacidos resulta
sumamente importante.
FUNDAMENTOS DEL METODO
La bilirrubina directa reacciona con la sal de diclorofenil-
diazonio (DPD) formando un azocompuesto de color rojo
en solución ácida.
REACTIVOS PROVISTOS
A. Reactivo A: viales conteniendo sal de diclorofenildia-
zonio.
B. Reactivo B: solución acuosa conteniendo ácido sulfá-
mico 90 mmol/l.
C. Reactivo C (Reactivo para Blanco de Muestra): solución
acuosa conteniendo ácido sulfámico 90 mmol/l.
Concentraciones finales
ácido sulfámico..................................................... 90 mmol/l
cloruro de sodio..........................................................6,6 g/l
diclorofenildiazonio.............................................. 0,1 mmol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS
Calibrador A plus de Wiener lab.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivos B y C: listos para usar.
Reactivo de Trabajo: reconstituir cada frasco de Reactivo
A con 10 ml de Reactivo B. Tapar y agitar hasta disolución
completa. Homogeneizar y fechar.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Los Reactivos B y C son irritantes. H315 + H320: Provoca
irritación cutánea y ocular. P262: Evitar el contacto con los
ojos, la piel o la ropa. P305 + P351 + P338: EN CASO DE
CONTACTO CON LOS OJOS: Enjuagar cuidadosamente
con agua durante varios minutos. Quitar las lentes de
contacto, si lleva y resulta fácil. Seguir enjuagando. P302 +
861258510 / 00 p. 1/6
AA
directa en suero o plasma
P352: EN CASO DE CONTACTO CON LA PIEL: Lavar con
agua y jabón abundantes. Utilizar los reactivos guardando
las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de
análisis clínicos. Todos los reactivos y las muestras deben
descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
Lecturas del blanco de Reactivos superiores a 0,100 D.O. a
546 nm, son indicio de deterioro de los reactivos. Desechar.
La turbidez indica deterioro de los reactivos. En tal caso,
desechar.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC)
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Reactivo de Trabajo: estable 21 días en refrigerador (2-10oC).
MUESTRA
Suero o plasma
a) Recolección: obtener de la manera habitual. Proteger de
la luz natural o artificial envolviendo el tubo con papel negro.
b) Aditivos: en caso de que la muestra sea plasma, debe
usarse heparina para su obtención.
c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
interferencias por hemoglobina hasta 180 mg/dl, triglicéridos
hasta 550 mg/dl (5,50 g/l), ni heparina hasta 20 U/ml.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no
efectuarse el ensayo en el momento, la muestra puede
conservarse hasta 48 horas en refrigerador (2-10oC) y la
sangre entera no más de 24 horas en refrigerador (2-10oC)
o 12 horas a temperatura ambiente (menor de 25oC).
La acción de la luz es capaz de destruir hasta un 50% de la
bilirrubina presente en la muestra, por lo que debe protegerse
cuidadosamente.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados
- Tubos o cubetas espectrofotométricas
- Cronómetro
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 546 nm en espectrofotómetro o 520-550 nm
 en fotocolorímetro con filtro verde. (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
- Temperatura de reacción: temperatura ambiente (< 25oC) de bilirrubina directa, con cada determinación.
- Tiempo de reacción: 10 minutos
- Volumen de muestra: 40 ul VALORES DE REFERENCIA
- Volumen final de reacción: 0,54 ml Bilirrubina directa en suero o plasma:
Adultos: hasta 2 mg/l
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
PROCEDIMIENTO valores de referencia.
En 4 tubos marcados BC (Blanco de Calibrador), C (Ca-
librador), BD (Blanco de Desconocido) y D (Desconocido), CONVERSION DE UNIDADES
colocar: Bilirrubina (mg/l) = Bilirrubina (mg/dl) x 10
B C C BD D Bilirrubina (mg/dl) x 17,1 = Bilirrubina (umol/l)
Reactivo C 0,5 ml - 0,5 ml - LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Reactivo B - 0,4 ml - 0,4 ml Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
La acción de la luz, tanto sobre los sueros como sobre las
Calibrador 40 ul 40 ul - -
soluciones standard, es capaz de destruir en una hora hasta
Muestra - - 40 ul 40 ul el 50% de la bilirrubina presente.
Reactivo de Trabajo - 0,1 ml - 0,1 ml
PERFORMANCE
Mezclar e incubar 10 minutos a temperatura ambiente Los ensayos fueron realizados en analizador automático Ex-
(menor a 25oC). Leer en espectrofotómetro a 546 nm o press Plus(*). Si se usa el procedimiento manual, se debe va-
en fotocolorímetro con filtro verde (520-550 nm), llevando lidar que se obtenga una performance similar a la siguiente:
a cero el aparato con el Blanco de Reactivo (BR). a) Reproducibilidad: aplicando el protocolo EP5-A del CLSI
Se pueden aumentar proporcionalmente los volúmenes. (ex NCCLS), se obtuvieron los siguientes resultados:
Nota: procesar un Blanco de Reactivos (BR) por cada serie Precisión intraensayo
de determinaciones mezclando 0,4 ml de Reactivo B +
Nivel D.S. C.V.
40 ul de agua destilada + 0,1 ml de Reactivo de Trabajo.
1,4 mg/l ± 0,05 mg/l 4,03 %
18,0 mg/l ± 0,24 mg/l 1,33 %
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL Precisión total
La absorbancia debe ser leída a los 10 minutos exactos.
Nivel D.S. C.V.
1,4 mg/l ± 0,06 mg/l 5,09 %
CALCULO DE LOS RESULTADOS
18,0 mg/l ± 0,36 mg/l 2,00 %
Bilirrubina directa (mg/l) = (D - BD) x f
b) Linealidad: aplicando el protocolo EP6-P, se obtuvo
donde: una linealidad de 140 mg/l. Para valores superiores, repetir
X* mg/l la determinación empleando muestra diluida 1:2 ó 1:4 con
f= solución fisiológica, multiplicando el resultado obtenido por
C - BC
2 ó 4 según el caso.
* concentración de bilirrubina directa en el Calibrador A c) Sensibilidad analítica: 1,1 mg/l.
plus de Wiener lab.
Ejemplo: PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
BC = 0,008 Para las instrucciones de programación consulte el manual
C = 0,135 del usuario del analizador en uso.
BD = 0,009 Para la calibración debe emplearse Calibrador A plus de
D = 0,029 Wiener lab.
X = 23,9 mg/l El equipo provee Reactivo para Blanco de Muestra (Reactivo
23,9 mg/l C) que sólo es requerido en algunos analizadores automá-
f = = 188,2 mg/l ticos. En el resto de los analizadores este Reactivo no es
0,135 - 0,008 necesario.
Bilirrubina directa (mg/l) = (0,029 - 0,009) x 188,2 = 3,8 mg/l Para mayor información referirse al manual de adaptaciones
También se puede emplear el factor colorimétrico (f) calcula- de Reactivos Wiener lab. de su analizador.
do usando Bilirrubina Standard de Wiener lab. en la técnica
de Bilirrubina Total AA de Wiener lab. (método DPD). PRESENTACION
200 ml (Cód. 1009306): - 4 viales Reactivo A
METODO DE CONTROL DE CALIDAD - 4 x 10 ml Reactivo B
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad - 4 x 40 ml Reactivo C

(*)
Marca registrada de Ciba Corning Diagnostics 861258510 / 00 p. 2/6
200 ml (Cód. 1120006): - 4 viales Reactivo A SIMBOLOS
- 4 x 50 ml Reactivo B Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
- 2 x 100 ml Reactivo C reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
BIBLIOGRAFIA Este producto cumple con los requerimientos previstos
- Bartels, H. and Boehmer, M. - Z. Klin. Chem. Klin. Biochem.
(1971).
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"

- Colombo, J.; Peheim, E.; Kyburz, S. and Hoffman - Clin.

Chim. Acta 51/2:217 (1974).
P Representante autorizado en la Comunidad Europea
- Botwell, J. H. - Clin. Chem. 10/3:197 (1964). V Uso diagnóstico "in vitro"
- Watson, D. - Clin. Chem. 7/6:603 (1961).
- Ichida, T. and Nobuoka, M. - Clin. Chim. Acta 19/2:249 X Contenido suficiente para <n> ensayos
(1968).
- Rand and Di Pascua - Clin. Chem. 8/6 (1962). H Fecha de caducidad
- Zaroda, R. - Am. J. Clin. Path. 45/1:70 (1996).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests", l Límite de temperatura (conservar a)
AACC Press, 3rd ed. (1990).
- Tietz Textbook of Clinical Chemistry - Saunders Co., 3rd  No congelar
ed. (1999).
F Riesgo biológico
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex-NC-
CLS). Document “Evaluation of the Linearity of Quantitative Volumen después de la reconstitución
Analytical Methods“, EP6-P (1986).
- CLSI: Clinical and Laboratory Standards Institute (ex- Cont. Contenido
NCCLS). Document “Evaluation of Precision Performance
of Clinical Laboratory Devices“, EP5-A (1999). g Número de lote

M Elaborado por:

Nocivo

Corrosivo / Cáustico

Irritante

i Consultar instrucciones de uso

Calibr. Calibrador

b Control

b Control Positivo

c Control Negativo

h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944

Wiener lab.
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 4100/00 2000 Rosario - Argentina
861258510 / 00 p. 3/6 UR170516

C enzimático AA
SIGNIFICACION CLINICA
La determinación de colesterol en forma aislada tiene utilidad
diagnóstica limitada. Sin embargo, su concentración varía
de manera más o menos predecible en un gran número de
condiciones clínicas. Se ha visto que el colesterol es uno
de los factores contribuyentes a la formación de ateromas
dado que las complicaciones arterioscleróticas prevalecen
en individuos hiper­colesterolémicos.
Diversos estudios epidemiológicos han permitido observar
además, que el riesgo de contraer enfermedad cardíaca
coronaria (ECC) para los individuos varones de más de 40
años con colesterolemia menor o igual a 2,10 g/l es 3 veces
menor que entre individuos con más de 2,30 g/l y 6 veces
menor que entre individuos con más de 2,60 g/l.
FUNDAMENTOS DEL METODO
La secuencia reaccional es la siguiente:
CHE
ésteres del colesterol colesterol + ácidos grasos
CHOD
colesterol + O2 colesten-3-ona + H2O2
POD
H2O2 + 4-AF + aceptor quinonimina roja
REACTIVOS PROVISTOS
S. Standard: solución de colesterol 2 g/l. Ver LIMITACIONES
DEL PROCEDIMIENTO.
A Reactivo A: viales con colesterol esterasa (CHE), colesterol
oxidasa (CHOD), peroxidasa (POD) y 4-aminofenazona (4-AF).
B. Reactivo B: solución de buffer Good pH 6,8, conteniendo
fenol y colato de sodio.
Concentraciones finales
CHE........................................................................ ≥100 U/l
CHOD.................................................................... ≥ 100 U/l
POD..................................................................... ≥ 1000 U/l
4-AF..................................................................... 0,2 mmol/l
Good........................................................ 50 mmol/l; pH 6,8
Fenol.................................................................... 15 mmol/l
Colato de sodio................................................... 0,2 mmol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS
Calibrador A plus de Wiener lab.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Reactivo de Trabajo: reconstituir el contenido de un vial de
Reactivo A con una parte de Reactivo B. Transferir al frasco
de Reactivo B, enjuagando varias veces el vial con el mismo.
Mezclar hasta disolución completa. Homogeneizar y fechar.
870360022 / 00 p. 1/9
Colestat
Método enzimático para la determinación de colesterol
en suero o plasma
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) es estable 60
días a partir del momento de su preparación.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. son indicio de
deterioro de los reactivos. En tal caso desechar.
MUESTRA
Suero o plasma
a) Recolección: se debe obtener de la manera usual.
b)  Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
plasma, se recomienda únicamente el uso de heparina como
anticoagulante para su obtención.
c) Sustancias interferentes conocidas:
- Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfie-
ren en la determinación.
- Los sueros con hemólisis visible o intensa producen valores
falsamente aumentados por lo que no deben ser usados.
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 80 mg/l,
ácido ascórbico hasta 75 mg/l, ácido úrico hasta 200 mg/l,
ni hemólisis ligera.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: el coles-
terol en suero es estable por lo menos 1 semana en refrigerador
y 2 meses en congelador, sin agregado de conservantes.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro.
- Micropipetas y pipetas para medir los volúmenes indicados.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
- Baño de agua a 37oC.
- Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en foto­
 co­lo­rímetro con filtro verde (490-530 nm).
- Temperatura de reacción: 37oC
- Tiempo de reacción: 5 minutos
- Volumen de muestra: 10 ul
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 1 ml
- Volumen final de reacción: 1,01 ml
Los volúmenes de Muestra y Reactivo pueden variarse
proporcionalmente (Ej.: 20 ul de Muestra + 2 ml de Reactivo
de Trabajo o 50 ul + 5 ml).
PROCEDIMIENTO
En tres tubos o cubetas espec­trofo­tométricas marcadas
B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar:
B S D
Standard - 10 ul -
Muestra - - 10 ul
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml
Incubar 5 minutos en baño de agua a 37oC o 20 minutos a
temperatura ambiente (25oC). Leer en espectrofotómetro a
505 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm),
llevando el aparato a cero con el Blanco.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
El color de reacción final es estable 30 minutos, por lo que la
absorbancia debe ser leída dentro de este lapso.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
2,00 g/l
colesterol (g/l) = D x f donde f =
S - 4 x 100 ml (Cód. 1220001).
CONVERSION DE UNIDADES
colesterol (g/l) = colesterol (mg/dl) x 0,01
colesterol (mmol/l) = colesterol (g/l) x 2,59
colesterol (g/l) = colesterol (mmol/l) x 0,39
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
de colesterol, con cada determinación.
VALORES DE REFERENCIA
El panel de expertos del National Cholesterol Education
Pro-gram (NCEP) provee los siguientes valores de co-
lesterol:
Deseable: < 2,00 g/l
Moderadamente alto: 2,00 - 2,39 g/l
Elevado: ≥ 2,40 g/l
No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca
sus propios intervalos o valores de referencia.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
870360022 / 00 p. 2/9
- Los reductores disminuyen la respuesta de color mientras
que los oxidantes colorean el Reactivo aumentando los
Blancos.
- Los detergentes, metales pesados y cianuros son inhibi-
dores enzimáticos.
- No emplear el Standard en analizador automático debido
a la distinta tensión superficial con respecto al suero, dada
por el disolvente empleado en su preparación.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando replicados de las mismas
muestras en 10 días diferentes, se obtuvo:
Nivel D.S. C.V.
1,24 g/l ± 0,043 g/l 3,49 %
3,31 g/l ± 0,115 g/l 3,48 %
b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de co-
lesterol a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
98 y 101%, para todo nivel de colesterol entre 1,90 y 4,79 g/l.
c) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
Para una lectura de 0,001 D.O., el cambio mínimo de con-
centración detectable será aproximadamente de 0,0063 g/l.
d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 5 g/l. Para valores
superiores, diluir 1/2 con el Blanco y repetir la lectura multi-
plicando el resultado final por 2.
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Para las instrucciones de programación debe consultarse el
Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la calibra-
ción debe emplearse Calibrador A plus de Wiener lab., de
acuerdo a los requerimientos del analizador.
PRESENTACION
- 1 x 100 ml (Cód. 1220110).
Empleando los reactivos Colestat enzimático AA junto con
HDL Colesterol Reactivo Precipitante, HDL Colesterol FT
y LDL Colesterol Reactivo Precipitante (provistos separa-
damente por Wiener lab.) es posible determinar el colesterol
ligado a las lipoproteínas de alta densidad (HDL colesterol) y
a las lipoproteínas de baja densidad (LDL colesterol).
BIBLIOGRAFIA
- Abell, L.L. et al. - J. Biol. Chem. 195:357 (1952).
- Allain, C.C. et al.. - Clin. Chem. 20:470 (1974).
- American Health Foundation - Position statement on diet
and coronary heart disease - pág. 255 (1972).
- I.F.C.C. - Clin. Chim. Acta 87/3:459 F (1978).
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969).
- Coniglio R.I. - Acta Bioq. Clin. Latinoam. XXIII/2:201 (1989).
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program -
JAMA 285/19:2486 (2001).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001.
Símbolos
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.

C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
M Elaborado por:

P
Xn

Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo

V Uso diagnóstico "in vitro"

Corrosivo / Caústico

X Contenido suficiente para <n> ensayos

Xi

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

 No congelar
Calibr. Calibrador

b Control

F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 2086/97 2000 Rosario - Argentina
870360022 / 00 p. 3/9 UR120327

C GPO/PAP AA
Método enzimático para la determinación de triglicéridos
SIG­NI­FI­CA­CION CLI­NI­CA
Los triglicéridos son lípidos absorbidos en la dieta y también
producidos en forma endógena a partir de los carbohidratos.
Su medición es importante en el diagnóstico y manejo de las
hiperlipidemias. Estas enfermedades pueden tener origen
genético o ser secundarias a otras tales como nefrosis,
dia­betes mellitus y disfunciones endócrinas. El aumento de
triglicéridos se ha identificado como un factor de riesgo en
enfermedades ateroscleróticas.
FUN­DA­MEN­TOS DEL ME­TO­DO
El esquema de reacción es el siguiente:
lipoprotein lipasa
triglicéridos glicerol + ácidos grasos
glicerol kinasa
glicerol + ATP glicerol-1-P + ADP
GPO
glicerol-1-fosfato + O2 H2O2 + dihidroxiacetonafosfato
POD
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol quinonimina roja
RE­AC­TI­VOS PRO­VIS­TOS
A. Reactivo A: viales conteniendo lipoprotein lipasa, glicerol
kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa (GPO), peroxidasa
(POD), adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF).
B. Reactivo B: so­lu­ción de buf­fer Good con­te­nien­do clo-
rofenol, pH 7,5.
S. Standard: solución de glicerol 2,26 mmol/l (equivale a
2 g/l de trioleína).
Con­centra­cio­nes fi­na­les
Good........................................................ 50 mmol/l; pH 7,5
clorofenol................................................................ 2 mmol/l
lipoprotein lipasa................................................... ≥ 800 U/l
GK......................................................................... ≥ 500 U/l
GPO.................................................................... ≥ 1500 U/l
POD....................................................................... ≥ 900 U/l
ATP......................................................................... 2 mmol/l
4-AF..................................................................... 0,4 mmol/l
RE­AC­TI­VOS NO PRO­VIS­TOS
Calibrador A plus de Wiener lab. cuando se emplea la
técnica automática.
INS­TRUC­CIO­NES PA­RA SU USO
Standard: lis­to pa­ra usar.
Reactivo de Trabajo:
- 5/10 x 20 ml: agregar 20 ml de Reactivo B a un vial de
Reactivo A. Mezclar hasta disolución completa. Homoge-
870920022 / 00 p. 1/9
TG Color
en suero o plasma
neizar y fechar.
-  4 x 50 ml: reconstituir el contenido de un vial de Reactivo A
con una porción de Reactivo B y luego transferir al frasco de
Reactivo B enjuagando varias veces. Homogeneizar y fechar.
PRE­CAU­CIO­NES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ES­TA­BI­LI­DAD E INS­TRUC­CIO­NES DE
AL­MA­CE­NA­MIEN­TO
Re­ac­ti­vos Pro­vis­tos: son es­ta­bles en re­fri­ge­ra­dor (2-10oC)
has­ta la fe­cha de ven­ci­mien­to in­di­ca­da en la ca­ja. No man-
tener a temperaturas elevadas durante lapsos pro­longados.
Reactivo de Trabajo: es estable 30 días en refrigerador
(2-10oC).
IN­DI­CIOS DE INES­TA­BI­LI­DAD O DE­TE­RIO­RO DE LOS
RE­AC­TI­VOS
El Reactivo de Trabajo puede presentar una coloración
rosada que no afecta su funcionamiento.
Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. o lecturas del
Standard anormalmente bajas, son indicios de deterioro del
Reactivo. En tal caso, desechar.
MUES­TRA
Suero o plasma
a)  Re­co­lec­ción: previo ayuno de 12 a 14 horas, obtener
suero o plasma. Separar de los glóbulos rojos dentro de las
2 horas de extracción.
b) Adi­ti­vos: en caso de emplear plasma, se recomienda
el uso de Anticoagulante W o heparina para su obtención.
c)  Sus­tan­cias in­ter­fe­ren­tes co­no­ci­das: los sue­ros con
he­mó­li­sis intensa o marcadamente ictéri­cos producen resul-
tados erróneos, por lo que no deben ser usados.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Es­ta­bi­li­dad e ins­truc­cio­nes de al­ma­ce­na­mien­to: los
triglicéridos en suero son estables 3 días en refrigerador
(2-10oC). No congelar.
MA­TE­RIAL RE­QUE­RI­DO (no pro­vis­to)
- Es­pec­tro­fo­tó­me­tro o fotocolorímetro.
- Mi­cro­pi­pe­tas y pi­pe­tas para me­dir los vo­lú­me­nes in­di­ca­dos.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas.
- Ba­ño de agua a 37oC.
- Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCION
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o 490-
530 nm en fotocolorímetro con filtro verde.
- Temperatura de reacción: 37oC
- Tiempo de reacción: 5 minutos
- Volumen de muestra: 10 ul
- Volumen de reactivo: 1 ml
- Volumen final de reacción: 1,01 ml
PROCEDIMIENTO
Homogeneizar la muestra antes de usar, especialmente
frente a sueros lechosos.
En tres tubos o cubetas espectrofotométricas marcadas
B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido) colocar:
B S D
Muestra - - 10 ul
Standard - 10 ul -
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml
Mez­clar, incubar 5 minutos a 37oC o 20 minutos a tempe-
ratura ambiente (18-25oC). Enfriar y leer en espectrofotó-
metro a 505 nm o en fotocolorímetro con filtro verde (490-
530 nm) llevando el aparato a cero con agua destilada.
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
El color de reacción final es estable 60 minutos, por lo que la
absorbancia debe ser leída dentro de este lapso.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
Corregir las lecturas con el Blanco de reactivos y usar las
lecturas corregidas para los cálculos.
2 g/l
TG g/l = D x factor factor =
S - 10 x 20 ml (Cód. 1780101).
CONVERSION DE UNIDADES
Triglicéridos (g/l) = 0,01 x Triglicéridos (mg/dl)
Triglicéridos (mg/dl) x 0,0113 = Triglicéridos (mmol/l)
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
(Stan-datrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas
de triglicéridos, con cada determinación.
VALORES DE REFERENCIA
El panel de expertos del National Cholesterol Education Pro-
gram (NCEP) provee los siguientes valores de Triglicéridos:
Deseable: < 1,50 g/l
Moderadamente elevado a elevado: 1,50 - 1,99 g/l
Elevado: 2,00 - 4,99 g/l
Muy elevado: ≥ 5,00 g/l
870920022 / 00 p. 2/9
No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca
sus propios intervalos o valores de referencia.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Los reductores disminuyen la respuesta de color, mientras
que los oxidantes colorean el Reactivo aumentando los
Blancos.
Las contaminaciones con glicerol producen resultados
falsamente aumentados.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
cados de las mismas muestras en 10 días diferentes, se
obtuvieron los siguientes datos:
Nivel D.S. C.V.
1,14 g/l ± 0,021 g/l 1,82 %
7,41 g/l ± 0,074 g/l 2,11 %
b)  Recuperación: agregando cantidades conocidas de
trioleína a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
99,2 y 100,7% para todo el rango de linealidad del método.
c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 10 g/l de triglicé-
ridos. Para valores superiores, repetir la determinación con
muestra diluida 1:2 con solución fisiológica. Multiplicar el
resultado obtenido por la dilución efectuada.
d) Límite de detección: depende del fotómetro empleado.
En espectrofotómetros, el cambio mínimo de concentración
detectable en las condiciones de reacción descriptas, para
una variación de absorbancia de 0,001 D.O. será aproxima-
damente de 0,008 g/l.
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Para las instrucciones de programación debe consultarse
el Manual del Usuario del Analizador en uso.
Para la calibración debe emplearse Calibrador A plus de
Wiener lab., de acuerdo a los requerimientos del analizador.
PRESENTACION
- 5 x 20 ml (Cód. 1780107).
- 4 x 50 ml (Cód. 1780105).
BIBLIOGRAFIA
- Fossati, P - Clin. Chem. 28/10:2077 (1982).
- McGowan, M.W.; et al - Clin. Chem. 29/3: 538 (1983).
- Tietz, N.W. - Fundamentals of Clin. Chem. - W.B., Saunders
Co. - Philadelphia, Pa. (1970), pág. 329.
- Expert Panel of National Cholesterol Education Program
- JAMA 285/19:2486 (2001).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001.
Símbolos
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.

C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
M Elaborado por:

P
Xn

Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo

V Uso diagnóstico "in vitro"

Corrosivo / Caústico

X Contenido suficiente para <n> ensayos

Xi

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

 No congelar
Calibr. Calibrador

b Control

F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 2085/97 2000 Rosario - Argentina
870920022 / 00 p. 3/9 UR120607
 GOT(AST)
C Método UV optimizado (IFCC) para la determinación de aspartato
SIG­NI­FI­CA­CION CLI­NI­CA
La as­par­ta­to ami­no­trans­fe­ra­sa es una en­zi­ma bi­lo­cu­lar
(ci­to­plas­má­ti­ca y mi­to­con­drial) am­plia­men­te di­fun­di­da. Se
en­cuen­tra en ma­yor con­cen­tra­ción en hí­ga­do y co­ra­zón.
Cual­quier al­te­ra­ción de es­tos te­ji­dos pro­du­ce un au­men­to
en los ni­ve­les de AST cir­cu­lan­te.
En el in­far­to agu­do de mio­car­dio, se ob­ser­va un au­men­to
mo­de­ra­do de la en­zi­ma a las 6 u 8 ho­ras de ocu­rri­do el epi­
so­dio, al­can­za ni­ve­les má­xi­mos al­re­de­dor de las 48 ho­ras y
re­tor­na a la nor­ma­li­dad en­tre el 4º y el 6º día.
En pa­cien­tes con afec­cio­nes he­pá­ti­cas se ob­ser­van las
ma­yo­res ele­va­cio­nes de AST, so­bre to­do en los ca­sos de
he­pa­ti­tis con ne­cro­sis.
La de­ter­mi­na­ción de AST ad­quie­re im­por­tan­cia diag­nós­ti­ca
cuan­do sus va­lo­res se com­pa­ran con los de otras en­zi­mas
de si­mi­lar ori­gen ti­su­lar, es de­cir que per­mi­te com­ple­tar el
per­fil en­zi­má­ti­co de ór­ga­nos ta­les co­mo co­ra­zón e hí­ga­do.
FUN­DA­MEN­TOS DEL ME­TO­DO
Ba­sa­do en el si­guien­te es­que­ma re­ac­cio­nan­te:
GOT
L-as­par­ta­to + 2-oxo­glu­ta­ra­to oxa­la­ce­ta­to + L-glu­ta­ma­to
MDH
oxa­la­ce­ta­to + NADH + H+ L-ma­la­to + NAD+
RE­AC­TI­VOS PRO­VIS­TOS
A. Reactivo A: viales conteniendo 2-oxoglutarato, nico­
tinamida adenina dinucleótido reducido (NADH), malato
deshidrogenasa (MDH) y lactato deshidrogenasa (LDH).
B. Reactivo B: so­lu­ción de buf­fer TRIS pH 7,8 (a 30oC)
con­L-aspartato.
Con­cen­tra­cio­nes fi­na­les (se­gún IFCC y SSCC)
TRIS.......................................... 80 mmol/l; pH 7,8 (a 30oC)
L-aspartato......................................................... 240 mmol/l
NADH................................................................ 0,18 mmol/l
MDH...................................................................... ≥ 420 U/l
LDH....................................................................... ≥ 600 U/l
2-oxo­glu­ta­ra­to...................................................... 12 mmol/l
INS­TRUC­CIO­NES PA­RA SU USO
Reactivo B: lis­to pa­ra usar.
Reactivo A; preparación: agre­gar 20 ml de Reactivo B a un
frasco de Reactivo A. Ta­par, agi­tar has­ta di­so­lu­ción com­
ple­ta y fechar.
PRE­CAU­CIO­NES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vi­tro".
El Reactivo B con­tie­ne azi­da.
870580000 / 00 p. 1/6
AA
aminotransferasa (GOT/AST) en suero o plasma
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ES­TA­BI­LI­DAD E INS­TRUC­CIO­NES DE
AL­MA­CE­NA­MIEN­TO
Re­ac­ti­vos Pro­vis­tos: son es­ta­bles en re­fri­ge­ra­dor (2-10oC)
has­ta la fe­cha de ven­ci­mien­to in­di­ca­da en la ca­ja.
Reactivo A re­cons­ti­tui­do: estable 30 días en re­fri­ge­ra­dor
(2-10oC) o 3 días a temperatura ambiente a par­tir del mo­
men­to de su re­cons­ti­tu­ción.
IN­DI­CIOS DE INES­TA­BI­LI­DAD O DE­TE­RIO­RO DE LOS
RE­AC­TI­VOS
Cuan­do el es­pec­tro­fo­tó­me­tro ha si­do lle­va­do a ce­ro con agua
des­ti­la­da, lec­tu­ras de ab­sor­ban­cia del Reactivo A re­cons­ti­
tui­do in­fe­rio­res a 0,800 D.O. o su­pe­rio­res a 1,800 D.O. (a
340 nm) son in­di­cio de de­te­rio­ro del mis­mo.
MUES­TRA
Suero o plasma
a) Re­co­lec­ción: se de­be ob­te­ner de la ma­ne­ra usual.
b) Adi­ti­vos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma,
se debe usar heparina como anticoagulante.
c) Sus­tan­cias in­ter­fe­ren­tes co­no­ci­das:
- Las mues­tras pro­ve­nien­tes de pa­cien­tes he­mo­dia­li­za­dos
o con hi­po­vi­ta­mi­no­sis o pa­to­lo­gí­as aso­cia­das con de­fi­
cien­cia de pi­ri­do­xal fos­fa­to pro­du­cen va­lo­res fal­sa­men­te
dis­mi­nui­dos.
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 60 mg/l,
triglicéridos hasta 5,5 g/l y hemoglobina hasta 0,14 g/dl.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Es­ta­bi­li­dad e ins­truc­cio­nes de al­ma­ce­na­mien­to: la
GOT en sue­ro es es­ta­ble has­ta 3 dí­as en re­fri­ge­ra­dor, sin
agre­ga­do de con­ser­va­ntes. No con­ge­lar.
MA­TE­RIAL RE­QUE­RI­DO (no pro­vis­to)
- Es­pec­tro­fo­tó­me­tro.
- Mi­cro­pi­pe­tas y pi­pe­tas para medir los vo­lú­me­nes in­di­ca­dos.
- Ba­ño de agua a la tem­pe­ra­tu­ra in­di­ca­da en el pro­ce­di­
mien­to.
- Cro­nó­me­tro.
CONDICIONES DE REACCION
(Disminución de absorbancia)
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366).
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VA­LO­RES
DE RE­FE­REN­CIA co­rres­pon­dien­tes a ca­da tem­pe­ra­tu­ra.
- Tiempo de reacción: 4 minutos.
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo A reconstituido
se pueden reducir proporcionalmente, sin que varíen los
factores de cálculo correspondientes.
PROCEDIMIENTO
A) 30 ó 37oC
I- MACROTECNICA
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar:
Reactivo A reconstituido 2 ml
Muestra 200 ul
Mez­clar in­me­dia­ta­men­te y dis­pa­rar si­mul­tá­ne­a­men­te el
cro­nó­me­tro. Lue­go de 1 minuto re­gis­trar la ab­sor­ban­cia
ini­cial (ver LI­MI­TA­CIO­NES DEL PRO­CE­DI­MIEN­TO) y
lue­go a los 1, 2 y 3 mi­nu­tos de la pri­me­ra lec­tu­ra. De­
ter­mi­nar la di­fe­ren­cia pro­me­dio de absor­ban­cia/min (∆A/
min), res­tan­do ca­da lec­tu­ra de la an­te­rior y pro­me­dian­do
los va­lo­res. Uti­li­zar es­te pro­me­dio pa­ra los cál­cu­los.
II- MICROTECNICA
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar:
Reactivo A reconstituido 1 ml
Muestra 100 ul
Mez­clar in­me­dia­ta­men­te. Continuar de modo similar al
descripto en el procedimiento (A-I).
B) 25oC
MACROTECNICA
Em­ple­ar 500 ul de Mues­tra. Luego de agregar la muestra
mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el
cronómetro. Luego de 3 minutos registrar la absorbancia
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO).
Continuar de modo similar al descripto en A-I.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
GOT (U/l) = ∆A/min x factor
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo corres­
pondiente de acuerdo a la temperatura de reacción seleccio­
nada (30-37oC o 25oC), como se indica en la siguiente tabla:
Temperat. fi­sio­ló­gi­ca, co­rri­gien­do con­se­cuen­te­men­te los re­sultados.
30-37oC 25oC
Long. onda
340 nm 1.740 791
334 nm 1.780 809
366 nm 3.207 1.453
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
(Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
GOT, con cada determinación.
870580000 / 00 p. 2/6
VALORES DE REFERENCIA
Temperatura 25oC 30oC* 37oC*
Hombres hasta 18 U/l hasta 25 U/l hasta 38 U/l
Mujeres hasta 15 U/l hasta 21 U/l hasta 32 U/l
* Calculados
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
GOT (U/l) x 0,017 = GOT (ukat/l)
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
- Ab­sor­ban­cia ini­cial ba­ja: cuan­do una vez agre­ga­do el sue­ro
la pri­me­ra lec­tu­ra (tiem­po 0) es in­fe­rior a 0,800 D.O., es­tan­do
el Reactivo A (sus­tra­to) en con­di­cio­nes, in­di­ca una mues­tra
con muy al­ta ac­ti­vi­dad de GOT (que con­su­me el NADH aún
an­tes de es­ta lec­tu­ra) o con una con­cen­tra­ción de ce­to­á­ci­dos
en­dó­ge­nos par­ti­cu­lar­men­te ele­va­da. En es­te ca­so, re­pe­tir la
de­ter­mi­na­ción con mues­tra di­lui­da con so­lu­ción fi­sio­ló­gi­ca y
mul­ti­pli­car el re­sul­ta­do por la di­lu­ción efec­tua­da.
- La humectación es causa de deterioro del Reactivo A.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando de acuerdo al documento
EP5A del NCCLS (National Committee on Clinical Laboratory
Standards), se obtuvo lo siguiente:
Precisión intraensayo (n = 20)
Nivel D.S. C.V.
37 U/l ± 1,6 U/l 4,4 %
180 U/l ± 2,4 U/l 1,3 %
Precisión total (n = 20)
Nivel D.S. C.V.
37 U/l ± 1,8 U/l 4,9 %
180 U/l ± 2,8 U/l 1,6 %
b) Sensibilidad: depende del fotómetro empleado y de la
longitud de onda. En espectrofotómetros con cubetas de
caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A/min de 0,001
el mínimo cambio de actividad detectable será de 1,8 U/l (a
340 nm y 30 ó 37oC).
c) Ran­go di­ná­mi­co: el ran­go útil de lec­tu­ra se ex­tien­de
has­ta 0,200 ∆A/min (a 340 nm). Si la ∆A/min es su­pe­rior a
0,200 (a 340-334 nm) o 0,100 (a 366 nm) se de­be re­pe­tir la
de­ter­mi­na­ción con mues­tra di­lui­da (1:5 ó 1:10) con so­lu­ción
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Para las instrucciones de programación consulte el manual
del usuario del analizador en uso.
PRESENTACION
- 10 x 20 ml (200 ml Reactivo B) (Cód. 1751302).
BIBLIOGRAFIA
- IFCC - Clin. Chim. Acta 70/2:F19 (1976).
- SSCC - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974).
- DGKC - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001.
- "Tietz textbook of Clinical Chemistry" - Burtis and Ashwood
Editors, 3rd. Ed. - Saunders Co., 1999.
- Wallnöfer, H.; Schmidt, E.; Schmidt, FW - Synopsis der
leberkrankheiten. Stuttgart: Georg Thieme Verlag, 1974.
- Thefeld, W. et al. - Dtsch. Med. Wschr. 99:343 (1974).
- Dufour D.R; Lott J.A.; Nolte F.S.; Gretch D.R.; Koff R.S.
and Seeff L.B. - Clin. Chem. 46/12:2027 (2000).
- NCCLS document "Evaluation of Precision Performance of
Clinical Chemistry Devices", EP5-A (1999).
SIMBOLOS
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Este producto cumple con los requerimientos previstos
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"
P Representante autorizado en la Comunidad Europea
V Uso diagnóstico "in vitro"
X Contenido suficiente para <n> ensayos
H Fecha de caducidad

l Límite de temperatura (conservar a)

 No congelar

F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

Cont. Contenido

g Número de lote

M Elaborado por:

Xn
Nocivo

Corrosivo / Caústico

Xi
Irritante

i Consultar instrucciones de uso

Calibr. Calibrador

b Control

b Control Positivo

c Control Negativo

h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944

Wiener lab.
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Disp. Nº: 6911/97 - 954/02 - 3480/13 2000 Rosario - Argentina
870580000 / 00 p. 3/6 UR110912
 GPT(ALT)
C Método UV optimizado (IFCC) para la determinación de
SIG­NI­FI­CA­CION CLI­NI­CA
La alanina aminotransferasa (ALT o GPT) es una enzima
unilocular (citoplasmática) cuya mayor actividad se localiza
en el tejido hepático. La destrucción o cambio de permeabi-
lidad de las membranas celulares provoca la liberación de
ALT a la circulación sanguínea.
Los mayores aumentos de actividad ALT en suero, se produ-
cen como consecuencia de alteraciones hepáticas.
En el caso de hepatitis virales, el aumento de ALT precede
a la aparición de ictericia, alcanzando un máximo luego de
la observación de dicho síntoma. Si los valores permane-
cen elevados luego de 6 semanas, debe pensarse en la
posibilidad de una hepatitis activa o en el comienzo de una
hepatitis crónica, por lo que es de utilidad las determinacio-
nes seriadas de la enzima.
La determinación de ALT adquiere importancia diagnóstica
cuando sus valores se comparan con los de otras enzimas
de similar origen tisular, permitiendo así completar el perfil
enzimático de órganos como el hígado.
FUN­DA­MEN­TOS DEL ME­TO­DO
Ba­sa­do en el si­guien­te es­que­ma re­ac­cio­nan­te:
GPT
L-alanina + 2-oxo­glu­ta­ra­to piruvato + L-glu­ta­ma­to
LDH
piruvato + NADH + H+ L-lactato + NAD+
RE­AC­TI­VOS PRO­VIS­TOS
A. Reactivo A: viales conteniendo 2-oxoglutarato, nico-
tinamida adenina dinucleótido reducido (NADH) y lactato
deshidrogenasa (LDH).
B. Reactivo B: so­lu­ción de buf­fer TRIS pH 7,5 (a 30oC)
con­te­nien­do L-alanina.
Con­cen­tra­cio­nes fi­na­les (se­gún IFCC y SSCC)
TRIS........................................ 100 mmol/l; pH 7,5 (a 30oC)
L-alanina............................................................. 500 mmol/l
NADH................................................................ 0,18 mmol/l
LDH.................................................................... ≥ 1.200 U/l
2-oxo­glu­ta­ra­to...................................................... 15 mmol/l
INS­TRUC­CIO­NES PA­RA SU USO
Reactivo B: lis­to pa­ra usar.
Reactivo A; preparación: agre­gar 20 ml de Reactivo B
a un frasco de Reactivo A. Ta­par, agi­tar has­ta di­so­lu­ción
com­ple­ta y fechar.
PRE­CAU­CIO­NES
Los re­ac­ti­vos son pa­ra uso diagnóstico "in vi­tro".
870600000 / 00 p. 1/6
AA
alanina aminotransferasa (GPT/ALT) en suero o plasma
El Reactivo B con­tie­ne azi­da.
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de análisis clínicos.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ES­TA­BI­LI­DAD E INS­TRUC­CIO­NES DE
AL­MA­CE­NA­MIEN­TO
Re­ac­ti­vos Pro­vis­tos: son es­ta­bles en re­fri­ge­ra­dor (2-10oC)
has­ta la fe­cha de ven­ci­mien­to in­di­ca­da en la ca­ja.
Reactivo A re­cons­ti­tui­do: estable 30 días en refrigerador
(2-10oC) o 3 días a temperatura ambiente a partir del mo-
mento de su reconstitución.
IN­DI­CIOS DE INES­TA­BI­LI­DAD O DE­TE­RIO­RO DE LOS
RE­AC­TI­VOS
Cuan­do el es­pec­tro­fo­tó­me­tro ha si­do lle­va­do a ce­ro con agua
des­ti­la­da, lec­tu­ras de ab­sor­ban­cia del Reactivo A re­cons­ti­
tui­do in­fe­rio­res a 0,800 D.O. o su­pe­rio­res a 1,800 D.O. (a
340 nm) son in­di­cio de de­te­rio­ro del mis­mo.
MUES­TRA
Suero o plasma
a) Re­co­lec­ción: se de­be ob­te­ner de la ma­ne­ra usual.
b) Adi­ti­vos: en caso de que la muestra a utilizar sea plasma,
se debe usar heparina como anticoagulante.
c) Sus­tan­cias in­ter­fe­ren­tes co­no­ci­das:
- Las muestras con he­mó­li­sis vi­si­ble o in­ten­sa pro­du­cen
va­lo­res fal­sa­men­te au­men­ta­dos por lo que no de­ben ser
usa­dos.
- Las mues­tras de pa­cien­tes he­mo­dia­li­za­dos o con hi­po­vi­
ta­mi­no­sis u otras pa­to­lo­gí­as aso­cia­das con de­fi­cien­cia de
pi­ri­do­xal fos­fa­to pro­du­cen va­lo­res fal­sa­men­te dis­mi­nui­dos.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Es­ta­bi­li­dad e ins­truc­cio­nes de al­ma­ce­na­mien­to: la
GPT en sue­ro es es­ta­ble has­ta 3 dí­as en re­fri­ge­ra­dor (2-
10oC), sin agre­ga­do de con­ser­va­ntes. No con­ge­lar.
MA­TE­RIAL RE­QUE­RI­DO (no pro­vis­to)
- Es­pec­tro­fo­tó­me­tro.
- Mi­cro­pi­pe­tas y pi­pe­tas para me­dir los vo­lú­me­nes in­di­ca­dos.
- Ba­ño de agua a la tem­pe­ra­tu­ra in­di­ca­da en el pro­ce­di­
mien­to a seguir.
- Cro­nó­me­tro.
CONDICIONES DE REACCION
(Disminución de absorbancia)
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366).
- Temperatura de reacción: 25, 30 ó 37oC. Ver los VA­LO­RES
DE RE­FE­REN­CIA co­rres­pon­dien­tes a ca­da tem­pe­ra­tu­ra.
- Tiempo de reacción: 4 minutos.
Volúmenes de Muestra y de Reactivo A reconstituido: pueden
reducirse proporcionalmente, sin que varíen los factores de
cálculo correspondientes.
PROCEDIMIENTO
A) 30 ó 37oC
I- MACROTECNICA
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar:
Reactivo A reconstituido 2 ml
Muestra 200 ul
Mez­clar in­me­dia­ta­men­te y dis­pa­rar si­mul­tá­ne­a­men­te el
cro­nó­me­tro. Lue­go de 1 minuto re­gis­trar la ab­sor­ban­cia ini­
cial (ver LI­MI­TA­CIO­NES DEL PRO­CE­DI­MIEN­TO) y lue­go,
a los 1, 2 y 3 mi­nu­tos de la pri­me­ra lec­tu­ra. De­ter­mi­nar la
di­fe­ren­cia pro­me­dio de absor­ban­cia/min (∆A/min), res­tan­
do ca­da lec­tu­ra de la an­te­rior y pro­me­dian­do los va­lo­res.
Uti­li­zar es­te pro­me­dio pa­ra los cál­cu­los.
II- MICROTECNICA
En una cubeta mantenida a 30-37oC, colocar:
Reactivo A reconstituido 1 ml
Muestra 100 ul
Mezclar inmediatamente. Continuar de modo similar al
descripto en el procedimiento anterior (A-I).
B) 25 C
o
MACROTECNICA
Em­ple­ar 500 ul de Mues­tra. Luego de agregar la muestra
mezclar inmediatamente y disparar simultáneamente el
cronómetro. Luego de 3 minutos registrar la absorbancia
inicial (ver LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO). Con-
tinuar de modo similar al descripto en el procedimiento A-I.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
GPT (U/l) = ∆A/min x factor
En cada caso deberá emplearse el factor de cálculo corres-
pondiente de acuerdo a la temperatura de reacción seleccio-
nada (30-37oC o 25oC), como se indica en la siguiente tabla:
Temperat. - 10 x 20 ml (200 ml Reactivo B) (Cód. 1761302).
30-37oC 25oC
Long. onda
340 nm 1.740 791
334 nm 1.780 809
366 nm 3.207 1.453
METODO DE CONTROL DE CALIDAD
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad
(Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de
GPT, con cada determinación.
870600000 / 00 p. 2/6
VALORES DE REFERENCIA
Temperatura 25oC 30oC* 37oC*
Hombres hasta 22 U/l hasta 29 U/l hasta 41 U/l
Mujeres hasta 17 U/l hasta 22 U/l hasta 31 U/l
* Calculados
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia.
CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
GPT (U/l) x 0,017 = GPT (ukat/l)
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
Ab­sor­ban­cia ini­cial ba­ja: cuan­do una vez agre­ga­do el sue­ro
la pri­me­ra lec­tu­ra (tiem­po 0) es in­fe­rior a 0,800 D.O., es­tan­do
el Reactivo A (sus­tra­to) en con­di­cio­nes, in­di­ca una mues­tra
con muy al­ta ac­ti­vi­dad de GPT (que con­su­me el NADH aún
an­tes de es­ta lec­tu­ra) o con una con­cen­tra­ción de ce­to­á­ci­dos
en­dó­ge­nos par­ti­cu­lar­men­te ele­va­da. En es­te ca­so, re­pe­tir la
de­ter­mi­na­ción con mues­tra di­lui­da con so­lu­ción fi­sio­ló­gi­ca y
mul­ti­pli­car el re­sul­ta­do por la di­lu­ción efectua­da.
La humectación es causa de deterioro del Reactivo A.
PERFORMANCE
a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente repli-
cados de una misma muestra, se obtiene:
Nivel D.S. C.V.
19,8 U/l ± 1,11 U/l 5,63 %
118 U/l ± 2,02 U/l 1,71 %
b) Límite de detección: depende del fotómetro empleado y de
la longitud de onda. De acuerdo a la sensibilidad requerida, en
espectrofotómetros con cubetas de caras paralelas de 1 cm de
espesor, reproducibilidad ± 2 nm, luz espuria ≤ 0,5% y semiancho
de banda ≤ 8 nm, para un ∆A/min de 0,001 el mínimo cambio
de actividad detectable será de 1,8 U/l (a 340 nm y 30 ó 37oC).
c) Ran­go di­ná­mi­co: el ran­go útil de lec­tu­ra se ex­tien­de
has­ta 0,200 ∆A/min (a 340 nm). Si la ∆A/min es su­pe­rior a
0,200 (a 340-334 nm) o 0,100 (a 366 nm) se de­be re­pe­tir la
de­ter­mi­na­ción con mues­tra di­lui­da (1:5 ó 1:10) con so­lu­ción
fi­sio­ló­gi­ca, co­rri­gien­do con­se­cuen­te­men­te los re­sultados.
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Para las instrucciones de programación consulte el manual
del usuario del analizador en uso.
PRESENTACION
BIBLIOGRAFIA
- I.F.C.C. - Clin. Chim. Acta 105:147 F (1980).
- S.S.C.C. - Scand. J. Clin. Lab. Invest. 33:291 (1974).
- D.G.K.C. - Z. Klin. Chem. 10:281 (1972).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001.
Símbolos
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de reactivos para diagnóstico de Wiener lab.

C
Este producto cumple con los requerimientos
previstos por la Directiva Europea 98/79 CE de
productos sanitarios para el diagnóstico "in vitro"
M Elaborado por:

P
Xn

Representante autorizado en la Comunidad

Europea Nocivo

V Uso diagnóstico "in vitro"

Corrosivo / Caústico

X Contenido suficiente para <n> ensayos

Xi

Irritante

H Fecha de caducidad

i Consultar instrucciones de uso

l Límite de temperatura (conservar a)

 No congelar
Calibr. Calibrador

b Control

F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

b Control Positivo

Cont. Contenido c Control Negativo

g Número de lote h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Wiener lab.
Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Disp. Nº: 5888/97-908/02-3425/13 2000 Rosario - Argentina
870600000 / 00 p. 3/6 UR110914

C cinética AA
Para la determinación de urea en suero, plasma u orina
SIGNIFICACION CLINICA
La urea constituye la fracción de nitrógeno no proteico más
importante en la mayoría de los líquidos biológicos. En el
hombre es el principal producto final del metabolismo pro-
teico. Se produce en el hígado y es excretada por la orina
a través de los riñones.
Una elevación de la concentración sérica de urea, se inter-
preta generalmente como una posible disfunción renal. Sin
embargo, no debe dejarse de lado el hecho de que los valo-
res séricos de urea se encuentran íntimamente relacionados
con la dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier
alteración en estas variables se traducirá en un cambio de
la concentración de urea en suero.
FUNDAMENTOS DEL METODO
Basado en el siguiente esquema reaccionante:
ureasa
urea + H2O 2 NH3 + CO2
GlDH
NH3 + NADH + H+ + 2-oxoglutarato l-glutamato +
NAD+ + H2O
REACTIVOS PROVISTOS
S. Standard: solución de urea 0,60 g/l (28,04 mg/dl de BUN).
A. Reactivo A: viales conteniendo 2-oxoglutarato, NADH,
ureasa y glutamato deshidrogenasa (GlDH).
B. Reactivo B: solución de buffer Goods pH 7,8 ± 0,1.
Concentraciones finales
2-Oxoglutarato..................................................... 7,5 mmol/l
NADH............................................................... 0,28 mmol/l
Ureasa (Jack bean)............................................. ≥ 4000 U/l
GlDH (microbiana)................................................. ≥ 400 U/l
Goods................................................................. 100 mmol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS
Calibrador A plus de Wiener lab.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Standard : listo para usar.
Reactivo de Trabajo:
- 4 x 50 ml: disolver el contenido de un vial de Reactivo A en
un frasco de Reactivo B. Enjuagar varias veces el vial con
Reactivo B. Mezclar suavemente por inversión hasta diso-
lución completa, evitando la formación de espuma. Fechar.
- 10 x 20 ml: disolver el contenido de un vial de Reactivo A
con 20 ml de Reactivo B. Mezclar suavemente por inver-
sión hasta disolución completa, evitando la formación de
espuma. Fechar.
870980022 / 00 p. 1/9
Urea
PRECAUCIONES
Los Reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de química clínica.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC)
hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) es estable
30 días a partir del momento de su preparación.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
Cuando el espectrofotómetro ha sido llevado a cero con
agua, lecturas de Absorbancia del Reactivo de Trabajo
inferiores a 1,000 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro
del mismo, por lo que debe descartarse.
MUESTRA
Suero, plasma u orina
a) Recolección: obtener suero de la manera usual o plasma
recolectado con anticoagulantes comunes. Separar de los
glóbulos rojos dentro de las 24 horas de obtenida.
Si la muestra es orina, utilizar preferentemente fresca.
b) Aditivos: en caso de que la muestra a emplear sea
plasma, se recomienda el uso de heparina o EDTA (Anti-
coagulante W de Wiener lab.) para su obtención. No utilizar
heparinato de amonio.
c) Sustancias interferentes conocidas: no se observan
interferencias por bilirrubina hasta 150 mg/l, hemoglobina
hasta 350 mg/dl, ni triglicéridos hasta 7 g/l.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
d) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: la
urea en suero es estable 7 días a 20-25oC o a 2-10oC o 1
año a -20oC, sin agregado de conservantes. En orina es
estable 2 días a 20-25oC, 7 días a 2-10oC o 4 semanas a
-20oC sin agregado de conservantes.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro.
- Micropipetas y pipetas capaces de medir los volúmenes
indicados.
- Cubetas espectrofotométricas.
- Cronómetro.
CONDICIONES DE REACCION
(disminución de la absorbancia)
- Longitud de onda: 340 nm (Hg 334 ó 366)
- Temperatura de reacción: 37oC
- Tiempo de reacción: 2 minutos
- Volumen de muestra: 10 ul
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 1 ml
- Volumen final de la reacción: 1,01 ml
Se pueden alterar proporcionalmente los volúmenes de
muestra y de reactivo a fin de acomodarlo a los requerimien-
tos de los distintos espectrofotómetros.
PROCEDIMIENTO
Equilibrar los reactivos a la temperatura de trabajo antes
de agregar la muestra.
Llevar a cero el espectrofotómetro con agua destilada.
En una cubeta mantenida a la temperatura de trabajo,
colocar:
Reactivo de Trabajo 1 ml
Muestra o Standard 10 ul
Mezclar inmediatamente (sin invertir) y disparar simul-
táneamente un cronómetro. A los 60 segundos exactos
medir la absorbancia (D1 o S1 ) y continuar la incubación.
Medir nuevamente la absorbancia (D2 o S2 ) a los 120
segundos (60 segundos después de la 1° lectura). De-
terminar la diferencia de absorbancia (∆A). Utilizar esta
diferencia para los cálculos.
y con una dieta mixta corriente, se excretan unos 30 g en
24 horas, con oscilaciones comprendidas entre 20 g y 40 g.
En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango
de referencia:
Suero o plasma: 13 - 43 mg/dl (2,1 - 7,1 mmol/l)
Orina: 26 - 43 g/24 hs (0,43 - 0,72 mol/24 horas)
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
valores de referencia.
CONVERSION DE UNIDADES
Urea (g/l) x 46,7 = BUN (mg/dl)
Urea (mg/dl) x 0,1665 = Urea (mmol/l)
Urea (mg/dl) x 0,467 = BUN (mg/dl)
BUN (mg/dl) x 2,14 = Urea (mg/dl)
Urea (g/24 hs) x 0,0167 = Urea (mol/24 hs)
Para convertir valores de urea (en g/l) a valores de BUN (en
mg/dl), se debe utilizar el siguiente factor de conversión:
1 1000
factor = x = 46,7
2,14 10
donde:
1/2,14 = factor de conversión entre la urea y el nitrógeno
ureico en sangre (BUN)
1000 = factor de conversión entre gramo y miligramo
1/10 = factor de conversión entre litro y decilitro
Ejemplo:
0,50 g/l de urea x 46,7 = 23,4 mg/dl de BUN

TECNICA EN ORINA LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

Utilizar la misma técnica diluyendo la orina convenien- Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
temente con agua o solución fisiológica. Para el cálculo Para preservar la integridad de los reactivos debe emplearse
de los resultados, multiplicar por el factor de dilución material volumétrico perfectamente limpio y seco.
utilizado.
PERFORMANCE
Los ensayos fueron realizados en analizador automático
CALCULO DE LOS RESULTADOS Ex-press Plus(*).
0,60 g/l a) Reproducibilidad: procesando simultáneamente 20
Urea (g/l) = f x (D1 - D2 ) f= replicados de una misma muestra, se obtiene:
(S1 - S2)
Precisión intraensayo
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Nivel D.S. C.V.
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad 0,283 g/l ± 0,0057 g/l 2,01 %
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas 1,13 g/l ± 0,0136 g/l 1,20 %
de urea, con cada determinación. Precisión intraensayo
Nivel D.S. C.V.
VALORES DE REFERENCIA
0,28 g/l ± 0,0066 g/l 2,36 %
Suero o plasma
1,13 g/l ± 0,0148 g/l 1,31 %
0,10 - 0,50 g/l como urea (4,7 - 23,4 mg/dl como BUN)
b) Sensibilidad: la sensibilidad analítica de Urea UV cinética
Este rango se obtuvo de 120 muestras de individuos en
ayunas, pertenecientes a ambos sexos, con edades com- AA es de 0,071 g/l (7,1 mg/dl) de urea o 3,32 mg/dl de BUN
prendidas entre 20 y 45 años, provenientes de la ciudad de y el límite de detección es 0,0383 g/l (3,83 mg/dl) de urea o
Rosario (Argentina), sin síntomas de disfunción renal u otra 1,79 mg/dl de BUN.
enfermedad aparente. c) Linealidad: la reacción es lineal hasta 3 g/l (300 mg/dl)
de urea y hasta 140 mg/dl de BUN. Para valores superiores,
Orina diluir la muestra original 1:2 con agua destilada y repetir la
Normalmente, la eliminación de urea está sujeta a grandes determinación. Corregir los cálculos multiplicando el resultado
variaciones dependientes de la dieta. Por término medio, por el factor de dilución empleado.
(*)
Marca registrada de Ciba Corning Diagnostics 870980022 / 00 p. 2/9
d) Correlación: se determinó el valor de urea en 158
muestras usando Urea UV cinética AA y otro kit comercial
basado en el mismo principio. El coeficiente de correlación
obtenido fue el siguiente:
r = 0.9995; pendiente b = 1,0093; intersección a = - 0,0985
PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS
Para las instrucciones de programación consulte el manual
del usuario del analizador en uso. Para la calibración, se
puede utilizar Calibrador A plus de Wiener lab.
SIMBOLOS
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Este producto cumple con los requerimientos previstos
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"
P Representante autorizado en la Comunidad Europea
V Uso diagnóstico "in vitro"

X Contenido suficiente para <n> ensayos

PRESENTACION
- 10 x 20 ml (Cód. 1810322). Fecha de caducidad
H
- 4 x 50 ml (Cód. 1810323).
l Límite de temperatura (conservar a)
BIBLIOGRAFIA
- Searcy, R.L. - "Diagnostic Biochemistry" McGraw-Hill, New  No congelar
York, NY 1969.
- Talke, H.; Schubert, G.E. - Klin Wochschr 43:174, 1965.. F Riesgo biológico
- Tiffany, T.O.; Jansen, J.M.; Burtis, C.A.; Overton, J.B.; Scott,
C.D. - Clin. Chem. 18:829, 1972. Volumen después de la reconstitución
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001. Cont. Contenido
- Faulkner, W.R.; King, J.W. - "Fundamentals of Clinical Che-
mistry". Tietz NW (Ed) W.B. Saunders Co. Philadelphia g Número de lote
Chap 12:718, 1970.
M Elaborado por:
- Tietz Fundamentals of clinical chemistry - Burtis, C., Ash-
wood, E. (5º Edition) WB Saunders, 2001. Xn
Nocivo

Corrosivo / Caústico

Xi
Irritante

i Consultar instrucciones de uso

Calibr. Calibrador

b Control

b Control Positivo

c Control Negativo

h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 1864/97 2000 Rosario - Argentina
870980022 / 00 p. 3/9 UR120607

C Para la determinación de ácido úrico en suero, plasma u orina
SIGNIFICACION CLINICA
El ácido úrico es un metabolito de las purinas, ácidos nu-
cleicos y nucleoproteínas.
Habitualmente la concentración de ácido úrico en suero
varía de un individuo a otro de acuerdo a diversos factores
tales como: sexo, dieta, origen étnico, constitución genética,
embarazo.
Niveles anormales de ácido úrico en suero son índice de
desorden en el metabolismo de las sustancias que lo originan
o de defectos en su eliminación.
FUNDAMENTOS DEL METODO
El esquema de reacción es el siguiente:
UOD
ácido úrico + 2 H2O + O2 alantoína + H2O2 + CO2
POD
2 H2O2 + 4-AF + 3,5-DHS quinonimina roja
REACTIVOS PROVISTOS
S. Standard: solución de ácido úrico 10 mg/dl.
A. Reactivo A: viales conteniendo uricasa (UOD), peroxida-
sa (POD), 4-aminofenazona (4-AF) y ferrocianuro de potasio.
B. Reactivo B: solución de diclorohidroxibenceno sulfónico
(DHS) en buffer fosfatos pH 7,4.
Concentraciones finales
UOD...................................................................... ≥ 100 U/l
POD...................................................................... ≥ 600 U/l
4-AF................................................................... 0,10 mmol/l
Ferrocianuro de potasio.......................................... 6 umol/l
DHS..................................................................... 2,0 mmol/l
REACTIVOS NO PROVISTOS
Calibrador A plus de Wiener lab.
INSTRUCCIONES PARA SU USO
Standard: listo para usar.
Reactivo de Trabajo: disolver el contenido de un vial de
Reactivo A en un frasco de Reactivo B. Enjuagar varias veces
el vial con Reactivo B. Mezclar hasta disolución completa.
Homogeneizar y fechar.
PRECAUCIONES
Los reactivos son para uso diagnóstico "in vitro".
Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales
de trabajo en el laboratorio de química clínica.
Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de
acuerdo a la normativa local vigente.
871010022 / 00 p. 1/9
Uricostat
enzimático AA
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE
ALMACENAMIENTO
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-
10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja.
No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos
prolongados.
Reactivo de Trabajo: en refrigerador (2-10oC) es estable 1
mes a partir de la fecha de su preparación.
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS
REACTIVOS
Durante el uso, el Reactivo de Trabajo puede desarrollar un
ligero color rosado que no afecta el funcionamiento siempre
que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones
y un Standard periódicamente. Desechar cuando las lecturas
del Blanco sean superiores a 0,160 D.O. o las lecturas del
Standard sean anormalmente bajas.
MUESTRA
Suero, plasma u orina
a) Recolección: se debe obtener suero o plasma de la
manera usual. Separar el coágulo lo antes posible, dentro
de las dos horas posteriores a la recolección. Si la muestra
es orina, utilizar preferentemente fresca.
b) Sustancias interferentes conocidas:
- Medicamentos: las sustancias fuertemente reductoras, tales
como el ácido ascórbico (vitamina C), la Buscapina (butil
bromuro de hioscina), etc. en dosis elevadas interfieren.
Por tal razón debe suspenderse la medicación, siempre que
sea posible, 24 hs antes de la toma de muestra.
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 120 mg/l,
triglicéridos hasta 840 mg/dl ni hemoglobina hasta 180 mg/dl.
Referirse a la bibliografía de Young para los efectos de las
drogas en el presente método.
c) Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: las
muestras deben ser preferentemente frescas. En caso de no
procesarlas en el momento, las muestras de suero o plasma,
pueden conservarse 3 días a 20-25oC, 7 días a 2-10oC o 6
meses a -20oC sin agregado de conservantes. Las muestras
de orina pueden conservarse 4 días a 20-25oC a pH > 8. No
refrigerar ni congelar.
MATERIAL REQUERIDO (no provisto)
- Espectrofotómetro o fotocolorímetro.
- Material volumétrico adecuado.
- Tubos o cubetas espectrofotométricas de caras paralelas.
- Baño de agua a 37oC.
- Reloj o timer.
CONDICIONES DE REACCION Suero o plasma
- Longitud de onda: 505 nm en espectrofotómetro o en Hombres: 3,5-7,2 mg/dl
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm). Mujeres: 2,6-6,0 mg/dl
- Temperatura de reacción: 37oC o 18-25oC Orina
- Tiempo de reacción: 5 minutos a 37oC o 20 minutos a 250 a 750 mg/24 horas
18-25oC Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios
- Volumen de muestra: 20 ul intervalos o valores de referencia, teniendo en cuenta la
- Volumen de Reactivo de Trabajo: 1 ml edad, sexo, hábitos alimenticios y demás factores.
- Volumen final de la reacción: 1,02 ml
Los volúmenes de Muestra y de Reactivo pueden disminuirse CONVERSION DE UNIDADES AL SISTEMA SI
o aumentarse proporcionalmente (Ej: 50 ul de Muestra + 2,5 ml Acido úrico (mg/dl) x 0,059 = Acido úrico (mmol/l)
de Reactivo de Trabajo o 100 ul + 5 ml). Acido úrico (mg/24 hs) x 0,0059 = Acido úrico (mmol/24 hs)

LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO

PROCEDIMIENTO Ver Sustancias interferentes conocidas en MUESTRA.
En tres tubos o cubetas espectrofotométricas mar- Otras causas de resultados erróneos son:
cadas B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), Contaminaciones: los reductores disminuyen la respuesta
colocar: de color, mientras que los oxidantes colorean el Reactivo
B S D aumentando los Blancos.
Los detergentes, metales pesados y cianuros son inhibidores
Standard - 20 ul -
enzimáticos.
Muestra - - 20 ul
Reactivo de Trabajo 1 ml 1 ml 1 ml PERFORMANCE
Los ensayos fueron realizados en analizador automático
Mezclar suavemente e incubar 5 minutos en baño de agua Ex-press Plus(*).
a 37oC o 20 minutos a temperatura ambiente (18-25oC). a) Reproducibilidad: se obtuvieron los siguientes datos:
Retirar, enfriar y leer en espectrofotómetro a 505 nm o en
fotocolorímetro con filtro verde (490-530 nm), llevando el Precisión intraensayo (n = 20)
aparato a cero con el Blanco. Nivel D.S. C.V.
5,4 mg/dl ± 0,094 mg/dl 1,75 %
TECNICA EN ORINA 9,6 mg/dl ± 0,170 mg/dl 1,78 %
Utilizar la misma técnica diluyendo la orina 1/10 con agua
o solución fisiológica. Para el cálculo de los resultados, Precisión interensayo (n = 30)
multiplicar por el factor de dilución utilizado. Nivel D.S. C.V.
5,61 mg/dl ± 0,146 mg/dl 2,61 %
9,69 mg/dl ± 0,232 mg/dl 2,39 %
ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION FINAL
El color de reacción final es estable 30 minutos, por lo que b) Recuperación: agregando cantidades conocidas de ácido
la absorbancia debe ser leída dentro de ese lapso. úrico a distintos sueros, se obtuvo una recuperación entre
97 y 101%, para un nivel de uricemia de 10 mg/dl.
CALCULO DE LOS RESULTADOS c) Sensibilidad: el mínimo límite de detección es 0,040 mg/dl
y la sensibilidad analítica es de 0,473 mg/dl.
10 mg/dl d) Linealidad: la reacción es lineal hasta 20 mg/dl. Para va-
ácido úrico (mg/dl) = D x f donde f = lores superiores, repetir la determinación empleando la mitad
S del volumen de muestras y multiplicar el resultado final por 2.
e) Correlación: se determinó el valor de ácido úrico en 107
METODO DE CONTROL DE CALIDAD muestras, utilizando Uricostat enzimático AA de Wiener
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad lab. y otro kit comercial basado en el mismo principio, obte-
(Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas niéndose el siguiente coeficiente de correlación:
de ácido úrico, con cada determinación. r = 0,9961; pendiente b = 1,0321; intersección a = - 0,0427

VALORES DE REFERENCIA PARAMETROS PARA ANALIZADORES AUTOMATICOS

En adultos normales, con ingesta normal de proteínas, se Para las instrucciones de programación debe consultarse
observan los siguientes rangos de valores: el Manual del Usuario del Analizador en uso. Para la cali-
bración, se puede utilizar Calibrador A plus de Wiener lab.
Hombres: 2,5-6,0 mg/dl
Mujeres: 2,0-5,0 mg/dl
PRESENTACION
En la literatura (Tietz, N.W.) se menciona el siguiente rango - 2 x 50 ml (Cód. 1840106).
de referencia: - 4 x 50 ml (Cód. 1840105).

(*)
Marca registrada de Ciba Corning Diagnostics 871010022 / 00 p. 2/9
BIBLIOGRAFIA
- Chu, S.Y. - Can. J. Med. Technol. 40/5:154 (1978).
- Day, J.H. - La Prensa Médica Argentina Vol. 58 Nº 15:786
(1971).
- Donadon, V.; Barbieri, E.; Menin, A.; Canterin, A. - LAB Vol.
III Nº 4:473 (1976).
- International Federation of Clinical Chemistry - Clin. Chim.
Acta 87/3:459 F (1978).
- Trinder, P. - Ann. Clin. Biochem. 6/24 (1969).
- Young, D.S. - "Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests",
AACC Press, 4th ed., 2001.
- Henry, R. J. - Clinical Chemistry, Principles and Technics;
Harper & Row, publisher; 1964.
- Tietz Fundamentals of clinical chemistry - Burtis, C., Ash-
wood, E. (5º Edition) WB Saunders, 2001.
SIMBOLOS
Los siguientes símbolos se utilizan en todos los kits de
reactivos para diagnóstico de Wiener lab.
Este producto cumple con los requerimientos previstos
C por la Directiva Europea 98/79 CE de productos sanitarios
para el diagnóstico "in vitro"
P Representante autorizado en la Comunidad Europea
V Uso diagnóstico "in vitro"
X Contenido suficiente para <n> ensayos
H Fecha de caducidad
l Límite de temperatura (conservar a)

 No congelar

F Riesgo biológico

Volumen después de la reconstitución

Cont. Contenido

g Número de lote

M Elaborado por:

Xn
Nocivo

Corrosivo / Caústico

Xi
Irritante

i Consultar instrucciones de uso

Calibr. Calibrador

b Control

b Control Positivo

c Control Negativo

h Número de catálogo

M Wiener Laboratorios S.A.I.C.

Riobamba 2944
2000 - Rosario - Argentina

Wiener lab.
http://www.wiener-lab.com.ar
Dir. Téc.: Viviana E. Cétola
Bioquímica
Producto Autorizado A.N.M.A.T.
Cert. Nº: 2150/97 2000 Rosario - Argentina
871010022 / 00 p. 3/9 UR120514