Universidad de Santander

Bioquímica II

Taller Carbohidratos II

El principal objetivo de este taller es aprender a determina hemoglobina glicosilada, en muestras

de pacientes, teniendo en cuenta criterios de calidad, a través de la técnica de medición
espectrofotométrica.

Según la técnica de hemoglobina glicosilada, HbA1c – Turbidimetric de la casa comercial

- LINEAR.
1. Describa el fundamento de la técnica.

El método utiliza la
La hemoglobina total y la
reacción antígeno- El anticuerpo monoclonal
HbA1c compiten por la
anticuerpo para la anti-HbA1c humana
adsorción a partículas de
determinación directa de la (R2a)
latex (R1)
hemoglobina A1c (HbA1c)

La cantidad de aglutinación La presencia del anticuerpo

formada es proporcional a la policlonal de cabra anti-IgG de se une al complejo de
concentración de HbA1c en la ratón (R2b) causa la latex-HbA1c
muestra y puede ser medida por aglutinación de las partículas de
turbidimetria. látex (complejos)

2. Que tipo de muestra se usa para el procesamiento de la hemoglobina glicosilada.

El tipo de muestra

Sangre total
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3. Cuál es el procedimiento a seguir para el análisis – seleccione un solo sistema de

análisis.
PROCEDIMIENTO

Preincubar reactive Ajustar a 0 el

de trabajo, muestras fotometro con agua
y contoles a 37°C destilada
Sistema 3-Reactivos

Reactivo (R1) 750 µL

Muestra /
Calibrador / Control /
Agua (Blanco) 20 µL

Añadir Reactivo (R2a)

Mezclar e incubar 2mn
250 µL

Mezclar e incubar 3 Añadir reactive (R2b)

mn 125 µL

Mezclar e incubar Leer absorbancia (A)

exactamente 2 mn
a 660nm

4. La concentración de HbA1c de la muestra se calcula por interpolación de su valor

en la curva. Antes de realizar el cálculo de los pacientes es importante realizar una
curva con los calibradores de la técnica. Por lo que los valores de absorbancias
que se entregan en el cuadro siguiente deben ser presentados en papel
milimetrado frente a las concentraciones de HbA1c de los calibradores
(CONCENTRATIONS ACCORDING TO DCCT/NGSP CONCENTRACIONES
CONFORME A LA DCCT/NGSP), revisar inserto de los calibradores.

Calibrador Absorbancias % calibrador

1 0.600 5.08%
2 0.699 8,39%
3 1.150 11.50%
4 1.318 14.70%
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5 Determinar la concentración de hemoglobina glicosilada en % si una muestra

procesada en el laboratorio da una absorbancia de 0.750 – realice el reporte.

y=0,0896 x +0,0428
0,750=0,0896 x+ 0,0428
(0,750−0,0428)=0,0896 x
(0,750−0,0428)
x= =7,89 %
0,0896

El porcentaje de Hemoglobina Glicosilada es de 7,89%

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macdir
Calle 36 #48-19 Cabecera NIT: 800.934.567-8
Macdirlab2016@gmail.com Teléfono: 6443522 Cel: 3163828906
BACTERIOLOGAS: DIANA ROMERO DAZA, MARIA ALEJANDRA CASAÑAS
Nombre: Ana lucia García Daza CC: 28013837 Edad: 40 A
Género: F Tel: 3163452312
Muestra: SUERO Particular
Código de muestra:8095
Fecha de recepción y procesamiento: Prueba realizar:
11-03-20 HbA1c

RESULTADO
QUIMICA

HbA1c 7.89% IR 4 – 6 %
Bacterióloga Bacterióloga
Diana Romero María Alejandra Casañas
ANALISIS:

6.Si se dice que la hemoglobina glicosilada me da el reporte de la glucosa en sangre de

los últimos 120 días, que utilidad diagnostica tiene en pacientes diabéticos pero con
anemia hemolítica.

La hemoglobina glucosilada (HbA1c) se utiliza como una prueba alternativa a la

concentración de glucosa para el diagnóstico de la diabetes tipo 2 o para la identificación
de personas con alto riesgo de desarrollar la enfermedad. La HbA1c, no se recomienda
realizar en pacientes con anemia ya que esta condición puede afectar el resultado; en el
caso de la anemia hemolítica, esta genera incremento del número de reticulocitos en la
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circulación general, lo que implica que estas células presenten menor exposición a la
glucemia y disminuyan los niveles de glicación, favoreciendo una reducción de HbA1c, es
decir,  puede causar valores bajos de HbA1c en comparación con las mediciones de
glucosa y esto al momento de realizar el examen, puede conducer a un mal diagnóstico
de la diabetes.
Los niveles de HbA1c dependen de:
1)La HbA1c en los reticulocitos cuando son liberados de la médula ósea.
2) La tasa de síntesis o de glicación en relación al envejecimiento del hematíe y a la
concentración de glucosa.
3) la sobrevida del eritrocito circulante.
La HbA1c total está en función de una media de valores de Hb glicada, que surge de un
rango en hematíes que contienen niveles muy bajos (reticulocitos) hasta
aproximadamente el doble de la media para los más “ancianos”.(60) Las modificaciones
en la sobrevida eritrocitaria pueden generar cambios en los niveles de HbA1c, existiendo
variabilidad interindividual aún en individuos sin enfermedades.
BIBLIOGRAFÍA
M, Guillermo; E, Alicia. (2018). Hemoglobina glicada (HbA1c). Utilidad y limitaciones en
pacientes con enfermedad renal cronica. Articulo de revición. Centro de enfermedades
renales e hypertension arterial (CEREHA), Buenos Aires, Argentina. Rev Nefrol Dial
Traspl. 2019; 38 (1): 65 – 83. Tomado de: file:///C:/Users/Maria
%20Alejandra/Downloads/300-1138-1-PB.pdf