Manual de Bioquimi

NORMAS Y PROCEDIMIENTOS
GENERALES DEL ÁREA DE BIOQUÍMICA

I. EQUIPO CB 400i
PROCEDIMIENTOS BÁSICOS PARA EL MANTENIMIENTO Y PROCESAMIENTO EN EL

EQUIPO
- El equipo CB 400i siempre debe estar prendido las 24 horas.
- Para comenzar a trabajar con el quipo CB 400i, verificar los contenedores tanto de agua
destilada como de desecho; el agua destilada debe estar lleno lo suficiente para el día de
trabajo y el de desecho completamente vacío.
- Par iniciar el procedimiento de muestras para bioquímica, se procede primero a realizar un

lavado general, para lo cual vamos a la pantalla principal en la parte superior, donde
ubicamos el icono de Utilidades del Analizador, escogiendo la opción de lavado extra de
cubetas; siendo necesario para este lavado que el contenedor de la posición 39 esté
completamente lleno con la solución desproteinizante, demorando un promedio de 15
minutos. Luego de eso realizar 2 lavados con agua destilada y por último un Cero con
agua.
- Verificar después del lavado, que los contenedores de reactivos este completamente llenos
lo suficiente para el día de trabajo.
- Imprimir los resultados del día anterior, uno para archivar los Resultados por paciente, y
otro por test para hacer la producción del día anterior. Luego de esto, archivar los
resultados para que quede en limpio el módulo de resultados para tener listo para solo
tener en bandeja lo que se procese en el día.
- A la medida que se van haciendo los pasos anteriores, se saca de la refrigeradora de la

parte de arriba, un juego de controles, uno CN (Control Normal), y otro CP (Control
Patológico), se deja atemperar por un intervalo entre 15 a 20 minutos y listo para usar para
controlar.
- Se procede a realizar el control de las pruebas. Se coloca el CN en la posición interna del

rotor de muestra, posición 11, y el CP en la posición 12. Se seleccionan los controles a
controlar. OJO: Se calibra diariamente todos, excepto (Calcio – LDH – Amilasa, estos son
condicionales a la demanda de la prueba del día); en cuanto al PTU, tiene su propio control
posición 14 y 15 respectivamente, y también es condicional según demanda. PCR, tiene un
control único y va en la posición 16 del equipo y solo se controla 2 vez a la semana, por ser
estable el reactivo. En el caso de Ferritina también tiene controles propios y solo se pasa
una vez a la semana. Todos los demás analitos se controlan diariamente.
- En cuanto a la calibración, solo procede si el reactivo se ha cambiado de lote que estaba

en uso, algunas alteraciones en los resultados de los controles, o según los resultados de
los pacientes hagan ameritar una calibración de la prueba.
- Cuando haya terminado el ciclo de control, verificar los resultados, procurando que estén
en la media estimada para cada uno. Excepción de la creatinina, ya que es preferible que
tenga una tendencia hacia arriba, cercana al límite superior en los controles, ya que eso
asegura la calidad de los resultados de los pacientes. Verificar que todos los resultados de
los controles tengan “corchetes”, esto indica en el quipo, validez en el resultado del control.
- Imprimir los controles del día y las calibraciones que se hicieron, junto con la transmisión
óptica del equipo.
- Después de todo esto, el equipo está listo para poder procesar las muestras
- Para ingresar una muestra al equipo, se va a la pantalla y se selecciona. Insertar

Rutina/STAT, y luego colocar código, Apellidos y Nombres, sexo, tipo de muestra, alguna
nota si es urgente o emergencia, y seleccionar la prueba en el panel de pruebas y/o
perfiles, verificar todo, y dar guardar. Después de esto el equipo automáticamente asignará
una posición, la que esté más inmediatamente libre a la muestra que hemos ingresado.
- Colocar el tubo, siempre asegurándonos que la muestra no tenga fibrina, y se aconseja

pasar un tip para retirar cualquier resto de fibrina.
- El resultado saldrá automáticamente impreso. Verificar la correlación de los resultados
- Para muestras que soliciten perfil diabético, o perfil lipídico, o riesgo coronario, los
triglicéridos si salen mayor de 400 mg/dl, no cumplen la norma para hacer la fórmula de
Friedewald. Lo cual se colocará en el resultado en LDL y VLDL: “No Detectable
Indirectamente”.
PROCEDIMIENTO DE METODOLOGÍA ESPECÍFICA PARA LOS EXÁMENES DE QUÍMICA

CLÍNICA
FINALIDAD
El presente manual de procedimientos describe, detallada y específicamente cada examen de

química clínica:
1. Generalidad
2. Indicaciones
3. Modalidad de solicitud
4. Preparación del paciente
5. Conservación de la muestra
6. Verificación de la muestra
7. Centrifugación
8. Método de determinación
9. Interferencias
10. Valores de referencia
11. Criterio de validación
12. Modo de escribir los resultados
Los valores referenciales, constituyen una guía para el médico, por lo tanto, no hacen el
diagnóstico del paciente, el que debe ser realizado sobre la base de criterios clínicos, los
exámenes son como su nombre lo indica “exámenes auxiliares”.
Deben tomarse como referencia los valores referenciales expresados en la hoja de los resultados,
los que podrían variar respecto de los consignados en este manual en razón a los cambios que se
producen eventualmente por los reactivos usados.
Cualquier duda o inquietud relativa a lo indicado en el presente manual, debe ser comunicada al
médico encargado responsable del laboratorio.
17. Centrifugación
- Suero: Poner el tubo primario en la centrifuga de modo contrapesado, centrifugar a 4000

r.p.m. por 10 minutos. Verificar la idoneidad del suero: ictericia, presencia de coágulos,
filamentos de fibrina, turbidez.
Método colorimétrico
La albúmina reacciona específicamente (sin separación previa) con la forma aniónica de la

3,3',5,5'-tetrabromo cresolsulfon ftaleína (BCG). El aumento de absorbancia a 625nm respecto del
Blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albúmina presente en la muestra.
Materiales
- Guantes descartables no estériles

- Copa Selectra
- Punta de pipeta 20 - 200 ul
Equipos
- Centrífuga
- Analizador Bioquímico CB400i
- Pipeta automática 20 - 200 ul
Procedimiento
Ingresar en el equipo los datos del paciente de la siguiente manera:
- Ir a la parte de Insertar Rutina/STAT y luego colocar Nueva Muestra

- Saldrá una ventana para colocar el Código del Paciente, los apellidos y nombres, el sexo,
el tiempo de muestra (sangre u orina), y notas adicionales.
- Luego seleccionar la prueba ALB y colocar guardar
- Automáticamente el equipo seleccionará la posición dentro del rotor de muestras más
inmediatamente accesible. Verificar por favor que esté vacía.
- Colocar el tubo de la muestra, asegurándose previamente que está libre de hilos o
fragmentos de fibrina, de lo contrario, colocar en una copa selectra para evitar el riesgo de
que la aguja del equipo choque o coja la fibrina.
- Finalmente le damos salir, para salir de la ventana de muestras y en la parte izquierda de
la pantalla del equipo hay unas opciones, hacer clic en la función que dice Analizar todos
los pacientes pendientes.
- Automáticamente el equipo va a procesar el analito
- La impresión del resultado es de manera automática.
Control de Calidad
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con

concentraciones conocidas de albumina sérica. Válido para todas las pruebas procesadas durante
todo el día.
Notas sobre el método:
Linealidad
La reacción es lineal hasta 7 g/dl. Para valores superiores, repetir la determinación, el equipo
diluirá según programación de la prueba.
Sensibilidad
Basada en una lectura mínima del instrumento de 0,001 D.O. De acuerdo con la sensibilidad
requerida para un ∆A mínimo de 0,001, el menor cambio de concentración detectable será de 0,01
g/dl.
9. Interferencias
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 200 mg/l, triglicéridos hasta 9 g/l y hemoglobina
hasta 700 mg/dl.
10. Valores de referencias
Suero: 3.5 – 5.5 g/dl
11. Criterios de validación
- Confrontar con la funcionalidad del riñón: creatinina, urea, potasio, densidad urinaria.
- Confrontar con funcionalidad del hígado: transaminasas, G.G.T, Fosfatasa alcalina, LDH.
- Confrontar con parámetros del equilibrio electrolíticos: sodio, cloro, potasio.
- Controlar sexo y eventual estado de embarazo.
- Controlar parámetros de inflamación: VSG, PCR, biometría hemática completa.
12. Reporte de resultados
Se reporta el resultado con dos cifras decimales, tal como se observa en el resultado del equipo.
1.3 AMILASA
1. Generalidades
La amilasa es una enzima que cataliza la división de 1,4 – alfa-glicósido en lo interno de la

molécula de los polisacáridos de los vegetales y animales, provocando la despolimerización del
almidón a dextrina, y del glicógeno, a azúcar sencillo (glucosa). La amilasa se produce en el
páncreas y las glándulas salivales, y en pequeña concentración, en el hígado, el riñón y las
trompas de Falopio, y es eliminada por el riñón. Se puede distinguir amilasa pancreática
(isoamilasa P) y amilasa extrapancreática (isoamilasa S).
2. Indicaciones
La determinación de la amilasa es de importancia fundamental en el diagnóstico de las

enfermedades pancreáticas. La amilasa es útil en el diagnóstico para el control de la pancreatitis
aguda. En estas enfermedades, la amilasa sérica sube en casi la totalidad de los pacientes, 5 - 6
horas después de la sintomatología clínica. Puede añadir valores de 10 - 30 veces mayor de los
valores normales. Parece que la amilasa sube más en correlación con el edema, en vez que en
relación con la necrosis pancreática. La amilasa puede aumentar también en otras enfermedades
pancreáticas: neoplasia del páncreas, neoplasia de la papila de Vater.
Rutina – Urgencia – Emergencia
Ayuno 8 a 12 horas de preferencia.
- Suero o plasma: Las muestras deben ser preferentemente frescas. En suero la amilasa es
estable durante una semana a temperatura ambiente (si se evita la contaminación
bacteriana) o varios meses refrigerada.
Verificar en Toma de muestra paciente y código correcto. Verificación en el área de análisis, con
boleta de pago.
7. Centrifugación
8. Método de determinación:
Método cinético- colorimétrico
La α-amilasa hidroliza el sustrato definido 2-cloro-p-nitrofenilα-D-maltotriósido (CNP-G3) para

liberar 2-cloro-p-nitrofenol (CNP), formándose 2-cloro-nitrofenil-α-D-maltósido (CNPG2),
maltotriosa (G3) y glucosa. El CNP absorbe a 405nm y la velocidad de aparición del color es
directamente proporcional a la actividad enzimática.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba AML y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de amilasa sérica. Válido para todas las pruebas procesadas durante
todo el día.

Linealidad
La reacción es lineal hasta 2000 U/l. Para valores superiores, repetir la determinación, el equipo
Sensibilidad
En espectrofotómetro a 405 nm con cubetas de caras paralelas de 1 cm de espesor, para un
∆A/min de 0,001 el mínimo cambio de actividad detectable será de 4 U/l (a 37º C).
9. Interferencias
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 22 mg/dl (220 mg/l), hemoglobina hasta 180
mg/dl, triglicéridos hasta 1400 mg/dl (14 g/l), ni heparina hasta 50 U/ml.
10. Valor de referencia
Suero: 0 – 125 U/l
- Confrontar con lipasa, calcio, funcionalidad del hígado.

- Controlar parámetros de procesos inflamatorios.
- Controlar glucosa y metabolismo glucídico.
Se reporta el resultado sin cifras decimales, tal como se observa en el resultado del equipo.
1.4 BILIRRUBINA TOTAL
1. Generalidades
La bilirrubina se forma en el sistema retículo endotelial por la apertura del núcleo tetrapirrólico en el
70–90%, y el 10-30%, en la médula ósea. La bilirrubina se origina por degradación de los grupos
hemo producido para la síntesis de hemoglobina, o desde la misma hemoglobina derivada de la
hemólisis intramedular de los eritrocitos. Se forma en pequeña parte desde la mioglobulina. La
cantidad producida es derivada en la sangre, donde se liga con la albúmina y después es
capturada desde el hepatocito. En el interior del hepatocito, se liga con ácido glucurónico, y
después es excretada en el canal biliar y, desde aquí, se encuentra con la bilis en el intestino. En el
intestino, la bilirrubina conjugada es reducida por la flora bacteriana a bilinógeno. Una parte del
bilinógeno es eliminada en las heces (estercobilinógeno), otra es reabsorbida por vía portal desde
el hígado y nuevamente es excretada con la bilis (bilinógeno). Una parte del bilinógeno huye de la
captación del hígado, y es eliminada por el riñón (urobilinógeno).
En la determinación de la bilirrubina, se puede evidenciar:

- Una fracción directa, correspondiente a bilirrubina conjugada (glucuronada).
- Una fracción indirecta, correspondiente a la forma no conjugada libre.
- La bilirrubina total, correspondiente a la suma de las dos fracciones.
2. Indicaciones
La determinación de la bilirrubina es un elemento fundamental para el diagnóstico de las patologías

ictéricas del hígado. Se distinguen tres tipos de ictericia:
Prehepático o hemolítico: Debido al aumento de la cantidad de bilirrubina que llega al hígado por
fenómenos de hemólisis. En este caso, la fracción aumentada es la indirecta. La patología
fundamental es la anemia hemolítica hereditaria (drepanocítica, talasemia etc.) y la anemia
adquirida (infecciosas, parasitarias, tóxicas, venenos vegetales o animales, etc.), y anemia
hemolítica inmunológica del neonato.
Posthepático obstructivo: Debido a un obstáculo orgánico y/o funcional al flujo de la bilis. En estos
casos, la fracción que aumenta es la bilirrubina directa; sólo en un segundo tiempo, para el daño
del hepatocito puede aumentar la fracción indirecta. La obstrucción puede ser provocada desde
litiasis, parasitosis, patología tumoral intrínseca al hígado, o extrínseca, por compresión externa
(pancreática, etc.).
Hepatocelular: Debido a lesiones hepatocelulares, el hígado no es capaz de capturar la bilirrubina y

conjugarla con ácido glucorónico. En este caso, puede aumentar la fracción directa e indirecta. Las
causas pueden ser: infecciosas degenerativas, autoinmune, tóxica, tumoral.
- Suero o plasma: La muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no efectuarse

el ensayo en el momento, la muestra puede conservarse hasta 48 horas en refrigerador (2
– 10º C). La acción de la luz es capaz de destruir hasta un 50% de la bilirrubina presente
en la muestra, por lo que debe protegerse cuidadosamente.
boleta de pago.
7. Centrifugación

Método con sal de diclorofenildiazonio (DPD)
La bilirrubina indirecta, unida a la albúmina, es liberada por un tensioactivo. La bilirrubina total

reacciona con la sal de diclorofenildiazonio (DPD) formando un azocompuesto de color rojo en
solución ácida.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba BTL y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de bilirrubina total. Válido para todas las pruebas procesadas durante
todo el día.

Linealidad
La reacción es lineal hasta 25 mg/dl. Para valores superiores, repetir la determinación, el equipo
Sensibilidad
Depende del fotómetro empleado y de la longitud de onda. En espectrofotómetros con cubetas de
caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A de 0,001 el mínimo cambio de concentración
detectable será de 0,031 mg/dl.
9. Interferencias
No se observan interferencias por hemólisis hasta una concentración de hemoglobina de 500 mg/dl
(0,5 g/dl) ni lipemia hasta una concentración de 500 mg/dl (5 g/l) de triglicéridos. No obstante,
muestras hiperlipémicas o con hemólisis moderada pueden conducir a resultados erróneos.
- Adultos: 0.00 – 1.00 mg/dl.

- Neonatos de 24 horas: 1.40 – 8.70 mg/dl.
- Neonatos de 48 horas: 3.40 – 11.5 mg/dl.
- Neonatos del 3º al 5º día: 1.50 – 12.0 mg/dl.
- Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas, G.G.T, TP, Colinesterasa,

Urobilinógeno, análisis de hepatitis A, B, C y delta).
- Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus.
- Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G.G.T.).
- Controlar Hemograma Competo y hierro.
- Controlar enzimas cardíacas.
- Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia).
BILIRRUBINA DIRECTA
1. Generalidades
Referirse a BILIRRUBINA TOTAL
2. Indicaciones
Referirse a BILIRRUBINA TOTAL
- Suero o plasma: La muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no efectuarse

el ensayo en el momento, la muestra puede conservarse hasta 48 horas en refrigerador (2
– 10º C). La acción de la luz es capaz de destruir hasta un 50% de la bilirrubina presente
en la muestra, por lo que debe protegerse cuidadosamente.
boleta de pago.
7. Centrifugación

Método con sal de diclorofenildiazonio (DPD)
La bilirrubina directa reacciona con la sal de diclorofenildiazonio (DPD) formando un azocompuesto

de color rojo en solución ácida.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba BDL y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de bilirrubina directa. Válido para todas las pruebas procesadas
durante todo el día.
Linealidad
Sensibilidad
caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A de 0,001 el mínimo cambio de concentración
detectable será de 0,012 mg/dl
9. Interferencias
- Muestras con hemólisis producen valores falsamente disminuidos.
- No se observan interferencias por lipemia hasta 5 g/l (500 mg/dl) de triglicéridos. Sin
embargo, muestras hiperlipémicas producen resultados erróneos.
- Adultos: 0.00 - 0.20 mg/dl.
- Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas, G.G.T, TP, Colinesterasa,

Urobilinógeno, análisis de hepatitis A, B, C y delta).
- Controlar parámetros para mononucleosis y citomegalovirus.
- Controlar parámetros de estasis biliar (fosfatasa alcalina y G.G.T.).
- Controlar Hemograma Competo y hierro.
- Controlar enzimas cardíacas.
- Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia).
CALCIO
1. Generalidades
El calcio sérico representa aproximadamente el 1% del calcio total del organismo, la mayor parte
del cual está contenida en los huesos y en los dientes. El calcio sérico se encuentra en equilibrio
dinámico con los líquidos extracelulares. En el suero, el calcio está presente en formas distintas: el
35-45%, ligado a las proteínas; el 5-6%, ligado a ácidos débiles y no disociable (citrato); y el
restante, como calcio ionizado, muy importante como regulador en la excitación neuromuscular y
de la permeabilidad celular. El calcio cataliza también muchas reacciones enzimáticas e interviene
en la coagulación de la sangre. El calcio ligado a las proteínas y el no disociable son
biológicamente inactivos. La absorción se realiza primero en el tracto del intestino delgado, en
particular para la acción de la vitamina D, del pH intestinal y en relación con fosfato en la dieta. Es
eliminado con las heces y la orina.
2. Indicaciones
La determinación se utiliza en el monitoreo del metabolismo del calcio. Se distinguen:

- Hipocalcemia debida a: Hipofuncionalidad de las paratiroides, escasa absorción por
disminución de vitamina D, cirugía intestinal, pancreatitis, cirrosis, alcoholismo,
insuficiencia crónica del riñón.
- Hipercalcemia debida a: Hiperparatiroidismo, aumentada destrucción de los huesos,
metástasis de los huesos, neoplasia de la mama, neoplasia de la próstata y de la tiroides,
osteoporosis, leucemia, linfoma, morbo de Paget, aumentada absorción intestinal,
gravidez.
- Suero o plasma heparinizado: Rutina – Urgencia – Emergencia

- Orina: Rutina
- Suero o plasma heparinizado: La muestra debe ser preferentemente fresca. Puede

conservarse una semana en refrigerador (2 - 10º C) o más de 5 meses en el congelador,
sin agregado de conservadores.
- Orina 24h: Recolectar orina de 24 horas sobre 20 ml de ácido clorhídrico al 50%.
boleta de pago.
7. Centrifugación
- Suero o plasma: Poner el tubo primario en la centrifuga de modo contrapesado,

centrifugar a 4000 r.p.m. por 10 minutos. Verificar la idoneidad del suero o plasma:
ictericia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez.
- Orina 24h: Medir el volumen urinario, colocar la orina en un tubo 12 x 75mm y centrifugar a
3500 r.p.m. por 5 minutos. Valorar la turbidez o transparencia del sobrenadante.
El calcio reacciona con arsenazo III dando un complejo de color azul que se mide
fotocolorimétricamente a 650nm.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

el tiempo de muestra (sangre u orina), y notas adicionales. Allí debemos colocar si es
sangre u orina, si en caso fuera orina de 24h, se abrirá un cuadrito debajo para colocar el
volumen, colocar el volumen en litros, por ejemplo, si hemos medido 2500ml de orina, en
ese cuadrito colocamos 2.5.
- Luego seleccionar la prueba CAL y colocar guardar
- En caso de Suero o plasma, colocar el tubo de la muestra, asegurándose previamente
que está libre de hilos o fragmentos de fibrina, de lo contrario, colocar en una copa selectra
para evitar el riesgo de que la aguja del equipo choque o coja la fibrina.
- En caso de orina 24h, colocar en una copa selectra, 500ul del sobrenadante, y luego
colocar en la posición indicada.
Control de Calidad

concentraciones conocidas de calcio sérico. Válido para todas las pruebas procesadas durante
todo el día.
Linealidad
Sensibilidad
La mínima concentración de calcio detectable por este método es de 2,5 mg/dl.
9. Interferencias
Los anticoagulantes distintos de la heparina, complejan al calcio produciendo resultados erróneos.
No interfieren: bilirrubina hasta 20 mg/dl, hemoglobina hasta 350 mg/dl, magnesio hasta 10 mg/dl,
ni triglicéridos hasta 500 mg/dl.
- Suero o plasma heparinizado: 8.5 - 10.5 mg/dl.

- Orina 24h: 100 – 300 mg/24h
- Comparar con otros parámetros del metabolismo: fósforo.

- Comparar con parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio y cloro).
- Comparar con parámetros de funcionalidad paratiroidea y tiroidea.
- Comparar con parámetros de funcionalidad pancreática (amilasa, lipasa).
- Controlar parámetros de funcionalidad de riñón (creatinina, depuración de la creatinina,
proteinuria y densidad urinaria).
- Controlar edad del paciente y eventual estado de gravidez.
- Controlar eventual terapia diurética.
- Suero o plasma: Se reporta el resultado con una cifra decimal, tal como se observa en el
resultado del equipo.
- Orina 24h: Se reporta el resultado sin cifras decimales, tal como se observa en el
COLESTEROL TOTAL
1. Generalidades
El colesterol es un esteroide sintetizado en muchos tejidos, especialmente en el hígado, la corteza

supra-renal, en la pared intestinal, en las gónadas y la aorta. El colesterol origina ¼ de la
alimentación y ¾ de la síntesis endógena. Un aumento en la dieta de colesterol disminuye la cuota
endógena. La cuota de colesterol intestinal está controlada por la concentración en el intestino de
las sales biliares. El colesterol, en relación con la alimentación, es esterificado desde las células
intestinales. La cuota endógena es esterificada desde el hígado.
El significado del colesterol en cada una de sus fracciones es diferente:
VLDL (Lipoproteínas de muy alta densidad): incierto (utilización directa con los tejidos periféricos).
LDL (Lipoproteínas de alta densidad): medio de transporte a las células.
HDL (Lipoproteínas de baja densidad): aporte desde las células.
2. Indicaciones
La determinación del colesterol se hace en la patología del metabolismo lipídico y lipoprotéico. El

colesterol circula en parte libre y en parte esterificado con ácidos grasos. La esterificación se
cumple en el hígado.
- El aumento del colesterol se encuentra en algunas enfermedades hereditarias y en la

alimentación no adecuada, en el hipotiroidismo, en el síndrome nefrótico, en la enfermedad
de Cushing, en la diabetes mellitus, en la pancreatitis, en la glicogenosis tipo I, III, VI, y
también en las glomerulonefritis.
- La disminución del colesterol se encuentra en el déficit de alfa lipoproteína, en la

insuficiencia hepática, hipertiroidismo, caquexia, mala nutrición, uremia, septicemia,
enfermedad de Addison.
Ayuno estricto 8 a 12 horas. Solo ingerir alimento ligero en la noche anterior. No tomar alcohol al
menos 72 horas antes de la toma de muestra.
- Suero o plasma: La muestra debe ser preferentemente fresca. El colesterol en suero es

estable por lo menos 1 semana en refrigerador y 2 meses en congelador, sin agregado de
conservantes.
boleta de pago.
7. Centrifugación

centrifugar a 4000 r.p.m. por 10 minutos. Verificar la idoneidad del suero: ictericia,
presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez.
Método enzimático colorimétrico (CHOD-POD)
La secuencia reaccional es la siguiente:
Esteres del colesterol ---Colesterol esterasa---> colesterol + ácidos grasos

Colesterol + O2 ---Colesterol oxidasa (CHOD)---> colesten-3-ona + H2O2
H2O2 + 4-aminofenazona (4-AF) + aceptor ---peroxidasa (POD)---> quinonimina roja
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba COL y colocar guardar
- Automáticamente el equipo va a procesar el analito.
Control de Calidad

concentraciones conocidas de colesterol total. Válido para todas las pruebas procesadas durante
todo el día.
Linealidad
Sensibilidad
Depende del fotómetro empleado. Para una lectura de 0,001 D.O., el cambio mínimo de
concentración detectable será aproximadamente de 0,63 mg/dl.
9. Interferencias
- Excepto la heparina, los anticoagulantes comunes interfieren en la determinación.

- Los sueros con hemólisis visible o intensa producen valores falsamente aumentados por lo
que no deben ser usados.
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 8 mg/dl, ácido ascórbico hasta 7.5
mg/dl, ácido úrico hasta 20 mg/dl, ni hemólisis ligera.
Deseable: < 200 mg/dl

Moderadamente alto: 200 - 239 mg/dl
Elevado: ≥ 240 mg/dl
- Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (triglicéridos, colesterol HDL, VLDL,
apolipoproteínas).
- Controlar parámetros del metabolismo glucídico, de la funcionalidad del riñón,
funcionalidad del hígado (GGT en alcoholismo) y la funcionalidad tiroidea.
COLESTEROL HDL
1. Generalidades
Las lipoproteínas plasmáticas son partículas esféricas que contienen cantidades variables de
colesterol, triglicéridos, fosfolípidos y proteínas. Los fosfolípidos, el colesterol libre y las proteínas
constituyen la superficie externa de la partícula lipoprotéica, mientras que su core contiene en
mayor proporción colesterol esterificado y triglicéridos. Estas partículas solubilizan y transportan el
colesterol en el torrente sanguíneo. La proporción relativa de proteína y lípido determina la
densidad de estas lipoproteínas y provee las bases sobre las cuales establecer una clasificación.
Estas clases son: quilomicrones, lipoproteínas de muy baja densidad (VLDL - Very Low Density
Lipoproteins), lipoproteínas de baja densidad (LDL - Low Density Lipoproteins) y lipoproteínas de
alta densidad (HDL - High Density Lipoproteins). Numerosos estudios clínicos han demostrado que
las diferentes clases de lipoproteínas tienen distintos y variados efectos en el riesgo de enfermedad
coronaria.
La función principal de las HDL en el metabolismo lipídico es la captación y transporte de colesterol

desde los tejidos periféricos al hígado en un proceso conocido como transporte reverso de
colesterol (mecanismo cardioprotectivo).
2. Indicaciones
El control del colesterol HDL es importante en la determinación del diagnóstico del riesgo de
aterosclerosis. El aumento de la concentración del colesterol HDL tiene un efecto protector en las
cardiopatías coronarias, mientras la disminución en particular con un aumento de los triglicéridos
puede comportar un aumento del riesgo de enfermedad cardiovascular. El HDL-colesterol bajo,
está asociado con un alto riesgo de enfermedad cardíaca. Por este motivo la determinación de
HDL-colesterol es una herramienta útil en la identificación de individuos de alto riesgo.
Las indicaciones principales son: diagnóstico de riesgo aterosclerótico, en el diagnóstico de la

disfunción del metabolismo lipídico y lipoprotéico.
Ayuno estricto 8 a 12 horas. Solo ingerir alimento ligero en la noche anterior. No tomar alcohol al
menos 72 horas antes de la toma de muestra.
- Suero o plasma: La muestra debe ser preferentemente fresca. Centrifugar y separar el

suero del coágulo dentro de las 3 horas posteriores a la extracción. De no procesar las
muestras inmediatamente, las mismas pueden ser conservadas durante 1 semana en
refrigerador (2 – 10º C)
boleta de pago.
7. Centrifugación

El presente, es un método homogéneo que emplea dos reactivos. En la primera etapa de la

reacción, se solubiliza y consume el colesterol libre o unido a proteínas distintas de la HDL en una
reacción que involucra a colesterol oxidasa (CHO), peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-
fopropil)- 3-toluidina disódica (TOOS) dando lugar a un producto no coloreado. En una segunda
etapa, un detergente solubiliza específicamente las HDL. El HDL-colesterol es liberado para
reaccionar con colesterol esterasa (CHE), colesterol oxidasa y TOOS, dando un producto
coloreado.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba HDL y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de HDL colesterol. Válido para todas las pruebas procesadas durante
todo el día.
Linealidad
Sensibilidad
La mínima concentración cuantificable de HDL colesterol es de 4 mg/dl.
9. Interferencias
- No se observan interferencias por ácido ascórbico hasta 100 mg/dl, hemoglobina hasta 1
g/dl, bilirrubina hasta 60 mg/dl, ni triglicéridos hasta 1200 mg/dl.
- No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato.
- No exponer los reactivos a la luz.
- Conservar los reactivos de acuerdo a las instrucciones.
- En caso de muestras con concentraciones de triglicéridos mayores a 1200 mg/dl, diluir las
mismas con solución fisiológica.
Los valores esperados de HDL colesterol son los siguientes:
Varones: 30 - 70 mg/dl
Mujeres: 30 - 85 mg/dl
El panel de expertos del National Cholesterol Education Program (NCEP) provee los siguientes
valores de HDL colesterol: 40 - 60 mg/dl. Valores mayores de 40 mg/dl se consideran
recomendables y los que se encuentren por encima de 60 mg/dl se han considerado como
protectivos. Por el contrario, valores de HDL colesterol por debajo de 40 mg/dl se consideran como
índice significativo de riesgo de enfermedad cardíaca coronaria.
- Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (triglicéridos, colesterol, VLDL,

apolipoproteínas).
- Controlar parámetros del metabolismo glucídico, de la funcionalidad del riñón,
funcionalidad del hígado (GGT en alcoholismo) y la funcionalidad tiroidea.
CREATININA
1. Generalidades
La creatinina es una sustancia que deriva del metabolismo muscular (músculo estriado, liso y
cardíaco) de la creatina y representa el subproducto de excreción. La producción de creatinina es
independiente de la dieta y del ejercicio muscular; sin embargo, es proporcional dentro de ciertos
límites a la masa muscular. Se libera de los glomérulos y no es reabsorbida por los túbulos, de los
cuales puede ser excretada, especialmente cuando se aumenta la concentración hemática. El
aumento de la creatinina en el suero empieza a ser evidente cuando el filtrado glomerular es por
debajo de 60 ml por minuto.
2. Indicaciones
La determinación de la creatinina es utilizada en el diagnóstico de las enfermedades renales

agudas o crónicas, y también para el monitoreo de la diálisis renal. El aumento de la creatinina es
un índice de la insuficiencia glomerular en cuanto ésta es eliminada por filtración glomerular.
Mientras la uremia en la sangre puede ser controlada a través de una oportuna dieta, la creatinina
se correlaciona casi exclusivamente a la eficiencia de la filtración glomerular. La creatinina
representa el índice más fiel de la insuficiencia renal.
- Suero o plasma: Las muestras deben ser preferentemente frescas. Debe ser separado de
los glóbulos rojos antes de las dos horas de la extracción. Conservados en refrigerador (2
– 10º C) su estabilidad es de 3 días.
- Orina: Puede mantenerse hasta 4 días en refrigerador (2 – 10º C) sin agregado de

conservantes.
boleta de pago.
7. Centrifugación

- Orina: Colocar la muestra en un tubo 12 x 75mm y centrifugar a 3500 r.p.m. por 5 minutos.
Valorar la turbidez o transparencia del sobrenadante.
Método cinético enzimático
La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de Jaffe) produciendo un cromógeno rojo.
La velocidad de esta reacción, bajo condiciones controladas, es una medida de la concentración de
creatinina de la muestra puesto que se comporta como una reacción cinética de primer orden para
la creatinina. Por otra parte, se ha demostrado que los cromógenos no-creatinina que interfieren en
la mayor parte de las técnicas convencionales, reaccionan dentro de los 30 segundos de iniciada la
reacción. De manera que, entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reacción,
el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

el tiempo de muestra (sangre u orina), y notas adicionales. Allí debemos colocar si es
sangre u orina, si en caso fuera orina simple solo marcar orina y nada más.
- Luego seleccionar la prueba CRE y colocar guardar
- En caso de Suero o plasma, colocar el tubo de la muestra, asegurándose previamente
que está libre de hilos o fragmentos de fibrina, de lo contrario, colocar en una copa selectra
para evitar el riesgo de que la aguja del equipo choque o coja la fibrina.
- En caso de orina simple, colocar en una copa selectra, 500ul del sobrenadante, y luego
colocar en la posición indicada.
Control de Calidad
concentraciones conocidas creatinina. Válido para todas las pruebas procesadas durante todo el
día.
Linealidad
Sensibilidad
El mínimo cambio de concentración detectable es 0.45 mg/dl.
9. Interferencias
- Suero o plasma: No se observan interferencias por hemoglobina hasta 0,78 g/dl,

triglicéridos hasta 1700 mg/dl ni bilirrubina hasta 24 mg/dl
- Orina: No se observan interferencias por proteínas hasta 500 mg/dl, ácido ascórbico hasta
100 mg/dl ni cetonas hasta 4 mmol/l.
- Suero o plasma:
Hombre: 0.7 – 1.3 mg/dl
Mujer: 0.6 – 1.1 mg/dl
Niños: 0.3 – 0.7 mg/dl
- Orina simple:
28.0 – 217 mg/dl
- Orina 24h:
Hombre: 14 - 26 mg/Kg/24 hs
Mujer: 11 - 20 mg/Kg/24 hs
- Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, potasio, proteínas, densidad urinaria).

- Confrontar parámetros de equilibrio electrolíticos (sodio, potasio, cloro).
- Controlar sexo y edad del paciente y también eventual estado de embarazo.
- Controlar parámetros del metabolismo muscular (CPK, míoglobulina).
- Suero o plasma: Se reporta el resultado con dos cifras decimales, tal como se observa en
el resultado del equipo.
- Orina simple: Se reporta el resultado con una cifra decimal, tal como se observa en el
- Orina 24h: Se reporta el resultado sin cifras decimales, tal como se observa en el
DEPURACIÓN DE CREATININA (ACLARAMIENTO)
1. Generalidades
La cantidad de creatinina excretada con la orina está en relación con la filtración glomerular. La
creatinina es una sustancia que deriva del metabolismo muscular (músculo estriado, liso y
cardíaco) de la creatina, y representa el subproducto de excreción. La producción de creatinina es
independiente de la dieta y del ejercicio muscular; sin embargo, es proporcional, dentro de algunos
límites, a la masa muscular. Se libera desde los glomérulos y no es reabsorbida por los túbulos, de
los cuales puede ser excretada, especialmente cuando se aumenta la concentración hemática. El
aumento de la creatinina en el suero empieza a ser evidente cuando el filtrado glomerular es por
debajo de 60 ml por minuto.
La medida de la cantidad de creatinina en la orina, producida en un determinado período de

tiempo, simultáneamente a la medida de la concentración plasmática, lleva al cálculo el
aclaramiento de la creatinina (volumen del plasma en ml que es depurado de la creatinina en un
minuto de tiempo).
2. Indicaciones
La estrecha correlación entre la velocidad de filtración glomerular y el valor de la creatinina

plasmática, y el hecho que la concentración de la creatinina hemática no es influenciada por la
dieta, hacen de la creatinina, en particular el aclaramiento de la creatinina, un índice de
funcionalidad renal muy sensible y seguramente más significativo que la urea. El aclaramiento de la
creatinina se modifica en relación con la enfermedad renal (glomerulonefritis agudas o crónicas,
riñón policístico, obstrucción de la vía renal).
Rutina
- Ayuno 8 a 12 horas de preferencia.

- Recoger la orina de 24 horas con el siguiente procedimiento:
 Para la recolección de orina de 24 horas, se tiene que utilizar un frasco de 2.5 - 3.0
litros, de boca ancha, con tapón de rosca, de preferencia uno sin uso previo o en
su defecto de agua mineral. NUNCA usar frasco de desinfectante, suavizante,
bebidas gaseosas, jugos o refrescos, etc.
 Indicar al paciente CLARAMENTE que debe recolectar toda su orina desde la
segunda orina de la mañana del día que comienza, hasta la última orina de la
mañana del día siguiente. En todo momento debe estar el frasco con la muestra
refrigerada (2 – 8ºC), de preferencia.
- Al finalizar la recolección de orina, ésta debe ser enviada inmediatamente al laboratorio.
- Cuando se entrega la muestra de orina, es necesario efectuar la toma de muestra de
sangre.
- Preguntar o mejor aún tomar el peso y la talla del paciente, estos datos SON CRUCIALES,
para los cálculos del resultado final.
- Suero o plasma: Las muestras deben ser preferentemente frescas. Debe ser separado de
los glóbulos rojos antes de las dos horas de la extracción. Conservados en refrigerador (2
– 10º C) su estabilidad es de 3 días.
- Orina: Puede mantenerse hasta 4 días en refrigerador (2 – 10º C) sin agregado de

conservantes.
boleta de pago.
7. Centrifugación

centrifugar a 4000 r.p.m. por 10 minutos. Verificar la idoneidad del suero o plasma:
ictericia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina, turbidez.
- Orina 24h: Medir el volumen urinario, colocar la orina en un tubo 12 x 75mm y centrifugar a
3500 r.p.m. por 5 minutos. Valorar la turbidez o transparencia del sobrenadante.
Método cinético
La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción de Jaffe) produciendo un cromógeno rojo.
La velocidad de esta reacción, bajo condiciones controladas, es una medida de la concentración de
creatinina de la muestra puesto que se comporta como una reacción cinética de primer orden para
la creatinina. Por otra parte, se ha demostrado que los cromógenos no-creatinina que interfieren en
la mayor parte de las técnicas convencionales, reaccionan dentro de los 30 segundos de iniciada la
reacción. De manera que, entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores al inicio de la reacción,
el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento
Creatinina sérica:
Procedimiento habitual de creatinina. Ver CREATININA.
Creatinina de 24h:

el tiempo de muestra (sangre u orina), y notas adicionales. Allí debemos colocar en el tipo
de muestra: orina. No colocar volumen.
- Luego seleccionar la prueba CRE y colocar guardar
- Colocar en una copa selectra, 500ul del sobrenadante, y luego colocar en la posición
indicada.
- Como sugerencia en el cuadro de Notas, se le puede colocar que es Depuración de
creatinina y el volumen respectivo.
Datos y Cálculos
- Datos:
Volumen Total de la Muestra (VT)
Peso y Talla del paciente
Creatinina sérica (CS)
Creatinuria (Resultado del equipo) (RE)
- Cálculos:
Volumen por minuto (VM)= VT/1440
Creatinina en orina 24h= [RE (mg/dl) x VT (dl)] / peso (K)
Depuración de Creatinina (DC):

Para los cálculos accedemos a la siguiente página web:
http://www.semergencantabria.org/calc/ajcalc.htm
O hacer los siguientes cálculos:

DC= [RE/CS] x VM x Superficie corporal (m2)
Control de Calidad

concentraciones conocidas creatinina. Válido para todas las pruebas procesadas durante todo el
día.
Linealidad
Sensibilidad
El mínimo cambio de concentración detectable es 0.45 mg/dl.
9. Interferencias
- Suero o plasma: No se observan interferencias por hemoglobina hasta 0,78 g/dl,

triglicéridos hasta 1700 mg/dl ni bilirrubina hasta 24 mg/dl
- Orina: No se observan interferencias por proteínas hasta 500 mg/dl, ácido ascórbico hasta
100 mg/dl ni cetonas hasta 4 mmol/l.
- Creatinina sérica:
Hombre: 0.7 – 1.3 mg/dl
Mujer: 0.6 – 1.1 mg/dl
Niños: 0.3 – 0.7 mg/dl
- Creatinina en Orina 24h:

Hombre: 14 - 26 mg/Kg/24 hs
Mujer: 11 - 20 mg/Kg/24 hs
- Depuración de Creatinina:
Hombre: 94 - 140 ml/min/1,73 m2
Mujer: 72 - 110 ml/min/1,73 m2

- Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, potasio, proteínas, densidad urinaria).
- Controlar parámetros del metabolismo muscular (CPK, míoglobulina).
- Creatinina sérica: Se reporta el resultado con dos cifras decimales, tal como se observa
en el resultado del equipo.
- Creatinina en orina 24h: Se reporta el resultado sin cifras decimales, tal como se observa
en el resultado del equipo.
- Depuración de Creatinina: Se reporta el resultado sin cifras decimales o en su defecto

con una cifra decimal, tal como se observa en el resultado del equipo.
FERRITINA
8. Generalidades
La ferritina es la principal proteína almacenadora, transportadora y liberadora de forma controlada

de hierro. La proteína se produce por casi todos los organismos vivos, incluyendo las archaea,
bacterias, algas, plantas superiores y animales vertebrados. En los humanos, actúa como un
amortiguador contra la deficiencia y la sobrecarga de hierro.
La ferritina se encuentra en la mayoría de los tejidos como una proteína citosólica, pero pequeñas
cantidades son secretadas en el suero sanguíneo, donde funciona como un portador de hierro. La
ferritina plasmática de la sangre, es también un marcador indirecto de la cantidad total de hierro
almacenado en el cuerpo; por lo tanto, la ferritina sérica se utiliza como prueba de diagnóstico para
la anemia por deficiencia de hierro.
La importancia fundamental de la ferritina es la de poder mantener almacenado el hierro en los

depósitos. El hierro iónico no unido es tóxico y el hierro es esencial para la vida y debe ser
conservado. Por lo tanto, el poder ser almacenado en los tejidos no solo evita su toxicidad, sino
que puede ser utilizado cuando el organismo lo requiera. Ahora bien, la ferritina en los tejidos está
completamente saturada con hierro, permitiendo de esta manera que hierro libre pueda ser
incorporado inmediatamente.
2. Indicaciones
La concentración plasmática de ferritina disminuye rápidamente ante una deficiencia de hierro. Un

aumento en la concentración de ferritina sérica se produce por un gran número de enfermedades
crónicas. Estas enfermedades incluyen infecciones crónicas, trastornos inflamatorios crónicos
como artritis reumatoide o enfermedad renal, enfermedad de Gaucher y numerosos tipos de
tumores malignos, especialmente linfomas, leucemias, cáncer de mama y neuroblastoma. También
se produce un aumento de la concentración plasmática de ferritina en la hepatitis viral o luego de
lesiones hepáticas tóxicas como resultado de la liberación de ferritina de las células dañadas del
hígado. La concentración plasmática de ferritina también se incrementa con el aumento de los
depósitos de hierro, como se observa en los pacientes con hemosiderosis o hemocromatosis.
Además del uso de ferritina como parámetro del metabolismo del hierro, su determinación también
ganó importancia como marcador tumoral para control y seguimiento de fármacos terapéuticos.
- Suero o plasma: Utilizar preferentemente suero fresco. Si la prueba no puede llevarse a

cabo en el día, el suero puede almacenarse durante 1 semana a 2-10ºC. Si se almacena
durante un período más prolongado, la muestra debe ser congelada.
boleta de pago.
7. Centrifugación
Poner el tubo primario en la centrifuga de modo contrapesado, centrifugar a 4000 r.p.m. por 10
minutos. Verificar la idoneidad del suero: ictericia, presencia de coágulos, filamentos de fibrina,
turbidez.
Método inmunoturbidimétrico
La ferritina presente en la muestra reacciona con las partículas de látex sensibilizadas con
anticuerpos anti-ferritina humana produciendo aglutinación. La turbidez causada por la aglutinación
es proporcional a la concentración de ferritina en la muestra y puede ser medida
espectrofotométricamente.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba FERR y colocar guardar.
fragmentos de fibrina, de lo contrario, colocar en una copa Selectra para evitar el riesgo de
Control de Calidad
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Control inmunológico nivel 1 Turbitest AA -

Control inmunológico nivel 2 Turbitest AA) con concentraciones conocidas de ferritina. Válido para
todas las pruebas procesadas durante todo el día.
Linealidad
Hasta 500 ng/ml
Límite de detección
5 ng/ml.
Efecto prozona
No se observa efecto prozona hasta una concentración de ferritina hasta 4000 ng/ml.
9. Interferencias
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 20 mg/dl ni hemoglobina hasta 0,5 g/dl. Se
observa una interferencia máxima por lipemia de hasta un 10 % con muestras de 1000 mg/dl de
triglicéridos.
Hombres : 30 - 300 ng/ml

Mujeres < 50 años : 15 - 160 ng/ml
Mujeres > 50 años : 20 - 300 ng/ml
Niños y adolescentes: 15 - 120 ng/ml
- Controlar y valorar el valor de otros resultados, principalmente de Dímero D, PCR y VSG

- Confrontar los valores de leucocitos y diferenciación leucocitaria.
- Controlar eventual estado infeccioso o inflamatorio.
- Controlar biometría hemática completa.
FOSFATASA ALCALINA
1. Generalidades
La fosfatasa alcalina es un grupo de enzimas que cataliza la hidrólisis del ligamiento estérico, entre
álcali y ácido fosfórico, con liberación de fosfato inorgánico. La fosfatasa alcalina se encuentra en
muchos tejidos: huesos, mucosa intestinal, hígado, bazo, pulmones, tiroides, etc. La fosfatasa
alcalina en el plasma se encuentra constituida por algunas isoenzimas producidas por el hígado,
tejido del hueso y la mucosa intestinal. La isoenzima de origen hepático constituye la principal
fracción de la fosfatasa alcalina en adultos; en los niños, se evidencia la producida en los huesos.
El valor de la fosfatasa alcalina en el plasma es diferente con la edad: en el nacimiento, los valores
son iguales a los de adultos; después aumentan el doble valor, hasta los 10 años; se mantienen
estos valores elevados entre 11 y 16 años, y después vuelven a los valores de los adultos. En los
hombres, la fosfatasa alcalina es mayor que en las mujeres.
2. Indicaciones
El aumento de la fosfatasa alcalina se encuentra en:

- Enfermedad del hígado por un aumento de la fracción hepática o de la fracción de los
huesos por obstrucción de la vía biliares.
- Hepatopatías celulares.
- Hepatopatía obstructiva.
- Enfermedad ósea por un aumento de la fracción ósea, debido a la incrementada actividad
de los osteoblastos (raquitismo, enfermedad de Paget, hiperparatiroidismo, osteomalacia,
neoplasia del tejido óseo, trauma o fracturas ósea).
-
La disminución de la fosfatasa alcalina se origina en la disminución del magnesio, porque éste es el
ión necesario para la actividad de la fosfatasa alcalina.
Ayuno 8 a 12 horas de preferencia
- Suero: Emplear suero preferentemente fresco. En caso de no efectuarse el ensayo dentro

de las 6 horas posteriores a su obtención, la muestra debe conservarse congelada (-20ºC).
NO emplear plasma citratado ni con EDTA.
boleta de pago.
7. Centrifugación

Método cinético optimizado
La fosfatasa alcalina (ALP o monoéster ortofosfórico fosfohidrolasa, EC. 3.1.3.1.) hidroliza al p-

nitrofenilfosfato (p-NFF), que es incoloro, produciendo fosfato y p-nitrofenol a pH alcalino. La
velocidad de aparición del anión p-nitrofenolato (amarillo) a 405 nm, es proporcional a la actividad
enzimática de la muestra.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba FAL y colocar guardar
Control de Calidad
concentraciones conocidas de Fosfatasa alcalina. Válido para todas las pruebas procesadas
Linealidad
Sensibilidad
El mínimo cambio de actividad detectable de Fosfatasa alcalina que puede distinguirse de cero es
de 18 U/l.
9. Interferencias
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 16 mg/dl, lípidos hasta 1000 mg/dl de
triglicéridos, ni heparina hasta 50 UI/ml. - Hemólisis moderadas (hasta 200 mg/dl) no producen
interferencias, pero hemólisis muy intensas pueden producir variaciones en los resultados.
Los anticoagulantes comunes (tales como EDTA disódico, oxalato, citrato o fluoruro) producen
inhibición de la actividad de fosfatasa alcalina.
El reactivo puede colorearse en presencia de trazas de soluciones de limpieza a base de

hipoclorito. Asegurarse de enjuagar abundantemente con agua desmineralizada todo el material
que pueda estar en contacto con hipoclorito, incluyendo las agujas y conexiones de los
analizadores, cuando se emplea la técnica automática.
Adultos (20 a 60 años) : 65 – 300 U/l

Niños y adolescentes (< 18 años aprox.): < 645 U/l
Debido al proceso osteoclástico, la isoenzima ósea se encuentra aumentada en la niñez y

adolescencia (hasta los 18 años, aproximadamente) proporcionando valores de fosfatasa
alcalina más elevados que en los adultos.
- Controlar la edad del paciente.

- Confrontar con funcionalidad del hígado (transaminasa, TP, colinesterasa).
- Confrontar con parámetros de estasis biliares (bilirrubina, GGT).
- Confrontar con parámetros del metabolismo óseo: (calcio, fósforo).
- Confrontar el valor del magnesio.
- Controlar eventual estado tóxico (alcoholismo).
- Controlar los parámetros de hepatitis.
GAMMA GLUTAMIL TRANSFERASA (TRANSPEPTIDASA) (GGT)
1. Generalidades
La gamma glutamil transferasa (GGT) cataliza el transporte del grupo gamma glutamínico. La GGT
está presente en muchos tejidos (hígado, riñón, páncreas, pulmón, bazo, intestino y tiroides). En el
suero, está presente tres isoenzimas que migran de modo distinto en la electroforesis. La GGT
también se encuentra en la orina, donde su concentración es más elevada que en el suero.
2. Indicaciones
Un aumento de la GGT se encuentra en todas las enfermedades del hígado y de las vías biliares.
El aumento más alto se encuentra en la obstrucción de las vías biliares. La determinación es
importante en el diagnóstico de la metástasis hepática. Se usa también en el diagnóstico para
identificar el alcoholismo, para el monitoreo de la abstención del alcohol en la terapia de
desintoxicación, en las enfermedades del hígado. Parece que el aumento de la GGT en las
enfermedades hepáticas está en relación con una aumentada síntesis de la enzima a nivel
hepático.

- Suero o plasma: la γ-GT en suero es estable hasta 2 semanas en refrigerador (2 – 10º C)

y hasta 6 meses congelada (- 20º C).
boleta de pago.
7. Centrifugación

Método cinético (Szasz modificado)
La γ-glutamil transferasa es una carboxipeptidasa que cataliza la siguiente reacción:
L-γ-glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + glicilglicina --- γ-GT- L-γ-glutamilglicilglicina + 5-amino-2-

nitrobenzoato
Materiales

- Copa Selectra
- Punta de pipeta 20 – 200 ul
Equipos
- Centrífuga
- Pipeta automática 20 – 200 ul
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba GGT y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de γ-glutamil transferasa. Válido para todas las pruebas procesadas
Linealidad
Sensibilidad
caras paralelas de 1 cm de espesor, para un ∆A/min de 0,001 el mínimo cambio de actividad
detectable será 1 U/l.
8. Interferencias
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 28 mg/dl, triglicéridos hasta 540 mg/dl ni
hemoglobina hasta 0,39 g/dl.
Varones: 11 – 50 U/l
Mujeres: 7 – 32 U/l
- Confrontar con analitos de funcionalidad hepática.

- Confrontar con parámetros de estasis biliar (bilirrubina, fosfatasa alcalina).
- Controlar eventual estado tóxico (alcoholismo).
- Controlar eventual absorción de terapia con antibióticos.
- Controlar parámetros serológicos para la mononucleosis infecciosa y el citomegalovirus.
GLUCOSA
8. Generalidades
La glucosa es el carbohidrato más importante presente en la sangre. La oxidación de la glucosa es

la principal fuente de energía para las células del organismo. La contribución dela glucosa con la
dieta se hace fundamentalmente bajo la forma de polisacárido y almidón. Dos enzimas —la ptialina
salival y la amilasa pancreática— los dividen en monosacáridos. Bajo esta forma, son absorbidos y
entregados al hígado, el cual los transforma en glucosa. La glucosa no utilizada inmediatamente es
polimerizada a glicógeno, se conserva en el hígado y en los tejidos musculares y/o se transforma
en ácidos grasos que se acumulan como grasas.
Muchas hormonas intervienen en el metabolismo glucídico. La insulina promueve la utilización de

la glucosa, facilitando el pasaje entre las células, y también la fosforilación y la polimerización a
glicógeno. El glucagón y la adrenalina promueven la glicogenólisis hepática; los corticoides y ACTH
favorecen la glicogénesis; la somatropina inhibe la fosforilación de la glucosa. Todas estas
hormonas mantienen la concentración de glucosa entre los límites precisos.
2. Indicaciones
La determinación de glucosa se usa en el diagnóstico y control de la enfermedad del metabolismo

de los carbohidratos, como diabetes mellitus en sus diferentes formas, hipoglicemias neonatales,
etc. La diabetes puede ser primaria o secundaria en relación con enfermedades del páncreas;
endógenas, hormonales; puede ser insulinoresistente por reducida tolerancia a los carbohidratos.
Modificaciones de la glucosa se pueden encontrar en la pancreatitis, la disfunción de la tiroides, en
el traumatismo craneal, en accidente cerebro vascular y en el infarto del miocardio. Puede existir
exceso de consumo de glucosas en el trabajo muscular, como en la hiperpirexia y en la
tirotoxicosis.
Ayuno estricto 8 a 12 horas. Solo ingerir alimento ligero en la noche anterior.
- Suero o plasma: La destrucción enzimática de la glucosa sanguínea (glucólisis) por

hematíes y leucocitos es proporcional a la temperatura a la que se conserva la sangre,
siendo máxima a 37º C. Este proceso no se inhibe aún en estado de congelación, por lo
que la sangre debe centrifugarse dentro de las 2 horas de la extracción. El sobrenadante
límpido se transfiere a otro tubo para su conservación. De esta forma la glucosa es estable
4 horas a temperatura ambiente o 24 horas refrigerada. En caso de no poder procesarse la
muestra de la forma indicada, deberá adicionarse un conservador en el momento de la
extracción.
boleta de pago.
7. Centrifugación

Método enzimático colorimétrico
El esquema de reacción es el siguiente:
Glucosa + O2 + H2O ---GOD---> ácido glucónico + H2O2
2 H2O2 + 4-AF + 4-hidroxibenzoato ---POD---> quinonimina roja
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba GLUL y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de Glucosa. Válido para todas las pruebas procesadas durante todo el
día.
Linealidad
Sensibilidad
El mínimo límite de detección es 0,54 mg/dl y la sensibilidad analítica es de 4,2 mg/dl.
9. Interferencias
No se observan interferencias por: bilirrubina hasta 10 mg/dl, triglicéridos hasta 500 mg/dl y
hemoglobina hasta 350 mg/dl.
Suero o plasma: 70 – 110 mg/dl
- Controlar el examen de orina para eventual presencia de glucosa y/o cuerpos cetónicos.
- Controlar parámetros del metabolismo glucósido (hemoglobina glicosilada, insulinemia).
- Controlar eventual parámetros de funcionalidad tiroidea y suprarrenal.
- Controlar parámetros del metabolismo lipídico y el valor del ácido úrico.
- Controlar electrolitos (sodio, potasio, cloro, magnesio).
- Confrontar con analitos de funcionalidad hepática.
LACTATO DESHIDROGENASA (LDH)
1. Generalidades
Las deshidrogenasas lácticas son enzimas catalíticas del metabolismo intermedio de gran
importancia, las cuales catalizan la dehidrogenación del ácido láctico con formación de ácido
pirúvico.
Las LDH son enzimas intracelulares citoplasmáticas, que tienen difusión y están contenidas en
concentraciones elevadas en el músculo esquelético, en el hígado, en el cerebro, en el corazón, en
el riñón, en el páncreas, en los pulmones y en los eritrocitos.
Se conocen cinco isoenzimas:

 LDH-1 18-33 %: miocardio, eritrocitos, cerebro, músculos y riñón.
 LDH-2 24-40 %: miocardio, eritrocitos, cerebro, músculos y riñón.
 LDH-3 18-30 %: riñón y cerebro.
 LDH-4 6-16 %: hígado, músculos, riñón y pulmón.
 LDH-5 2-13 %: hígado, músculo, riñón y pulmón.
2. Indicaciones
La determinación del LDH en el suero está indicada en el monitoreo del infarto del miocardio. Se
encuentra presente en estos pacientes, en cantidad inclusive, 10 veces superior a los valores
normales; permanece elevado por un largo período, ofreciendo así la posibilidad de hacer el
diagnóstico del infarto, también si es de pequeña entidad. El primer aumento de los valores se
tiene después de 6-12 horas. Los valores máximos se añaden después de 24-60 horas, y los
valores regresan a la normalidad después de 7–15 días.
La LDH también se emplea en el diagnóstico y monitoreo de enfermedades del hígado (hepatitis

viral, cirrosis, carcinoma metastásico). Un aumento de la actividad de la LDH se encuentra en
algunas hemopatías (anemia perniciosa, crisis hemolítica, etc.), en las neoplasias malignas, en
caso de enfermedad reumática, en las leucemias agudas y crónicas, en el infarto cerebral, en el
linfoma maligno y en la pericarditis tuberculosa. Es muy importante el diagnóstico de la LDH en el
derrame seroso: si su nivel es bajo, el derrame es seguramente de origen inflamatorio; si su nivel
es elevado, es de naturaleza neoplásica.
- Suero o plasma: La muestra debe ser preferentemente fresca. La LDH es estable hasta
24 horas en refrigerador. No congelar.
boleta de pago.
7. Centrifugación
turbidez.
Método UV optimizado (SFBC)
Basado en el siguiente esquema de reacción:
Piruvato + NADH + H+ ---LDH---> L-lactato + NAD+
Las concentraciones del ensayo están optimizadas de acuerdo a la Sociedad Francesa de Biología
Clínica (SFBC).
Materiales
- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba LDH y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de Deshidrogenasa láctica (LDH). Válido para todas las pruebas
procesadas durante todo el día.
Linealidad
Sensibilidad
La mínima actividad cuantificable de lactato deshidrogenasa es 24 U/l.
9. Interferencias
No se observan interferencias por triglicéridos hasta 570 mg/dl, bilirrubina hasta 18 mg/dl,
hemoglobina hasta 180 mg/dl (en muestras con niveles normales de LDH) o hasta 350 mg/dl (en
muestras con niveles elevados de LDH), ni heparina hasta 50 UI/ml.
LDH: 230 - 460 U/l

- Controlar el valor de otras enzimas de los parámetros cardíacos (CPK, TGO, mioglobina,
CK-MB, CK–MB masa, troponina).
- Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (TGP, GGT, TP, Colinesterasa,
electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).
- Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia, Colinesterasa).
- Controlar parámetros tumorales.
- Confrontar con pruebas de funcionalidad musculares (CPK, aldolasa).
- Suero o plasma: La muestra debe ser preferentemente fresca. Las muestras pueden
conservarse durante 2 meses en heladera (2 - 10ºC) o 3 años congelada (a -20ºC). Evitar
los congelamientos y descongelamientos repetidos.
boleta de pago.
7. Centrifugación
turbidez.
Método inmunoturbidimétrico con látex
La PCR presente en la muestra, es capaz de aglutinar las partículas de látex recubiertas con
anticuerpos anti- PCR. La turbidez causada por la aglutinación de las partículas de látex es
proporcional a la concentración de PCR en la muestra y puede ser medida
espectrofotométricamente.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba PCR y colocar guardar
Control de Calidad
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (PCR control N Turbitest AA) con
concentraciones conocidas de PCR. Válido para todas las pruebas procesadas durante todo el día.
Rango de medición
Corresponde al intervalo de valores exactamente cuantificables y se extiende de 0.3 mg/l al último
punto de calibración (aproximadamente 100 mg/l PCR).
Límite de detección
Es la mínima cantidad del analito capaz de ser detectada como una muestra distinta de cero y
corresponde a la concentración 0.1 mg/l de PCR.
Efecto prozona
No se evidencia efecto prozona hasta 1000 mg/l PCR.
9. Interferencias
- No emplear muestras hemolizadas, lipémicas o contaminadas.

- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 25 mg/dl, triglicéridos hasta 3000 mg/dl,
hemoglobina hasta 1 g/dl y factor reumatoide hasta 500 UI/ml.
LDH: 0 – 5 mg/l
- Controlar y valorar el valor de otros reactantes de fase aguda y analitos como VSG, Ácido
úrico, factor reumatoideo, etc.
- Confrontar los valores de leucocitos y diferenciación leucocitaria.
- Controlar eventual estado infeccioso o inflamatorio.
PROTEINAS TOTALES
1. Generalidades
Las proteínas son sustancias orgánicas de elevado peso molecular, formadas de numerosos
aminoácidos unidos con enlace peptídico. La secuencia de los aminoácidos en la cadena interna, y
el número de las cadenas determinan la estructura primaria de las proteínas. La síntesis proteica
se da en el citoplasma celular sobre la superficie de los ribosomas. Los aminoácidos están
activados enzimáticamente en presencia de ATP. Las proteínas introducidas con los alimentos,
después de un proceso de hidrólisis gástrica e intestinal, se dividen en aminoácidos y son
absorbidos como tales.
Las funciones principales de las proteínas son:

- Nutritiva (asimilable a la fracción albumínica).
- Función tapón (proteínas/proteinatos).
- Coagulación y fibrinólisis.
- Inmunitaria.
- Transporte.
- Mantenimiento de la presión osmótica.
- Hormonales.
- Enzimáticas.
- Inhibición de las enzimas.
En relación con las características generales de solubilidad, las proteínas se fraccionan en

albúmina (hidrosoluble) y globulinas (solubles en solución salina). Las proteínas séricas constituyen
una solución coloidal estable. La disminución de la albúmina por debajo del 50.0% del total y un
aumento de las fracciones globulínicas causan una progresiva disminución de la estabilidad
coloidal del suero. Las proteínas plasmáticas son sintetizadas en el hígado, excepto las
inmunoglobulinas de origen plasmacelular y algunos componentes del complemento de origen
macrofágico y de lipoproteínas de origen intestinal, endotelial. El plasma tiene un significado
completamente diferente del suero, por la presencia del fibrinógeno. Con la electroforesis se
pueden separar distintos componentes proteicos como: Albúmina, alfa1, alfa2, beta y gamma
globulina.
2. Indicaciones
La determinación de las proteínas es útil en el diagnóstico y monitoreo de muchas enfermedades

del hígado, del riñón, de la medula ósea, de algunas enfermedades metabólicas, y de errores en la
alimentación.
Se puede verificar:
- Una disminución de la síntesis (hepatopatías graves, cirrosis con disminución de las
albúminas y aumento de las globulinas).
- Disminución del aporte dietético y mala absorción.
- Disminución por pérdidas de causas endógenas (hemorragias, diarrea masiva,
- enfermedad nefrótica, etc.) y exógena (quemaduras, hemorragias traumáticas).
- Disminución por hipercatabolismo (hipertiroidismo, neoplasia, síndrome de Cushing).
Las proteínas se pueden encontrar aumentadas en:
- Deshidratación grave.
- Mieloma múltiple.
- Displasia por hiperproducción proteica.
- Suero: Si no se procesa inmediatamente el suero puede conservarse hasta 3 días en

refrigerador (2 – 10º C) o una semana en congelador.
boleta de pago.
7. Centrifugación
turbidez.
Los enlaces peptídicos de las proteínas reaccionan con el ión cúprico en medio alcalino, para dar
un complejo color violeta con máximo de absorción a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la
concentración de proteínas totales en la muestra.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba PT y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de proteínas totales. Válido para todas las pruebas procesadas durante
todo el día.
Linealidad
La reacción es lineal hasta 17 g/dl. Para valores superiores, repetir la determinación, el equipo
Sensibilidad
Depende del fotómetro empleado y de la longitud de onda. De acuerdo con la sensibilidad
requerida para un ∆A mínimo de 0,001, el menor cambio de concentración detectable será de 0,01
g/dl.
9. Interferencias
No se observa interferencia por bilirrubina hasta 10 mg/dl, ni hemólisis ligera y en ningún caso se
presenta turbiedad por quilomicrones.
Puede usarse plasma como muestra, pero el resultado de la proteinemia estará incrementado en
0,2 g/dl debido a la presencia de fibrinógeno, que no está considerado dentro de la definición de
Proteínas Totales.
Proteínas Totales: 6.00 – 8.00 g/dl

- Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (TGP, GGT, TP, Colinesterasa,

electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).
- Confrontar con funcionalidad del riñón (creatinina, urea, potasio, densidad urinaria).
- Confrontar con parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio, cloro).
- Controlar posible estado de embarazo.
- Controlar parámetros de funcionalidad muscular y cardíaca (CPK, aldolasa).
- Controlar parámetros inflamatorios (VSG, PCR, biometría hemática completa).
PROTEINURIA 24H
1. Generalidades
Una cantidad de proteínas plasmáticas de pequeño peso molecular son filtradas normalmente en
forma libre a través del glomérulo renal y luego son, en parte, reabsorbidas por los túbulos renales.
Hay condiciones fisiológicas o benignas donde se puede observar un aumento en la excreción

urinaria de proteínas como en el ejercicio violento, fiebre, hipotermia, embarazo.
2. Indicaciones
La medición de las proteínas urinarias es importante en la detección de patología renal. La

proteinuria en la enfermedad renal puede resultar de una disfunción glomerular o tubular.
En el primer caso se da por un aumento en el pasaje a través de los capilares del glomérulo y
caracterizada por la pérdida de proteínas plasmáticas de igual o mayor tamaño.
En el segundo caso se da por una disminución en la capacidad de reabsorción de proteínas por los
túbulos. Entre las patologías en las que se produce un aumento en la excreción de proteínas
urinarias se encuentran: síndrome nefrítico, síndrome nefrótico, hipergammaglobulinemia
monoclonal, nefropatía diabética, infecciones del tracto urinario.
Rutina
- Recoger la orina de 24 horas con el siguiente procedimiento:

Para la recolección de orina de 24 horas, se tiene que utilizar un frasco de 2.5 - 3.0 litros,
de boca ancha, con tapón de rosca, de preferencia uno sin uso previo o en su defecto de
agua mineral. NUNCA usar frasco de desinfectante, suavizante, bebidas gaseosas, jugos o
refrescos, etc.
Indicar al paciente CLARAMENTE que debe recolectar toda su orina desde la segunda
orina de la mañana del día que comienza, hasta la última orina de la mañana del día
siguiente. En todo momento debe estar el frasco con la muestra refrigerada (2 – 8ºC), de
preferencia.
Al finalizar la recolección de orina, ésta debe ser enviada inmediatamente al laboratorio.
La orina puede conservarse refrigerada (2 – 10º C) hasta 8 días o congelada (-20º C) hasta 3
meses.
boleta de pago.
7. Centrifugación
Medir el volumen urinario, colocar la orina en un tubo 12 x 75mm y centrifugar a 3500 r.p.m. por 5
minutos. Valorar la turbidez o transparencia del sobrenadante.
Las proteínas presentes en la muestra reaccionan en medio ácido con el complejo Rojo de
Pirogalol-Molibdato originando un nuevo complejo coloreado que se cuantifica
espectrofotométricamente a 600 nm.
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

el tiempo de muestra (sangre u orina), y notas adicionales. Allí debemos colocar en el tipo
de muestra: orina. Colocar el volumen en litros, por ejemplo, si hemos medido 2500ml de
orina, en ese cuadrito colocamos 2.5.
- Luego seleccionar la prueba PTU y colocar guardar
- Colocar en una copa selectra, 500ul del sobrenadante, y luego colocar en la posición
indicada.
- Como sugerencia en el cuadro de Notas, se le puede colocar que es Proteinuria 24h y el
volumen respectivo.
Control de Calidad
Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Proti U/LCR control 2 niveles) con
concentraciones conocidas de proteínas urinarias. Válido para todas las proteinurias procesadas
Linealidad
La reacción es lineal hasta 150 mg/dl de proteínas.
Sensibilidad
En espectrofotómetro a 600 nm, un Standard de 100 mg/dl proporciona una lectura de
aproximadamente 0,200 D.O., lo que significa que para 0,001 D.O. el mínimo cambio de actividad
detectable será de 0,5 mg/dl.
9. Interferencias
- Los conservantes para orina tales como ácido clorhídrico, ácido benzoico o timol pueden
ser causas de resultados falsamente disminuidos.
- Orina de marcada turbidez, indican proliferación bacteriana, lo que cual aumenta el riesgo
de disminución de proteínas en la muestra. Evitar recibir muestras turbias.
- No se debe exponer el Reactivo A a la luz directa.
- Orina de 24 horas : 30 - 140 mg/24h (hasta 160 mg/24h en embarazadas)
- Orina ocasional : 25 mg/dl
- Confrontar parámetros de funcionalidad renal (urea, creatinina, proteínas totales y

fraccionadas, densidad urinaria).
TRANSAMINASA (TGO-AST)
1. Generalidades
La transaminasa glutámica oxalacética (TGO) o aspartato aminotransferasa pertenece al grupo de

las transaminasas, las cuales catalizan la transformación de los aminoácidos a los respectivos
alfaceto-ácidos, a través de la transferencia del grupo amino y viceversa. La AST está presente en
cantidad elevada en muchos tejidos con localización celular en las mitocondrias y en el citoplasma.
Los tejidos más ricos de AST son: corazón, hígado, músculo, riñón, cerebro, páncreas, eritrocitos,
leucocitos, pulmón y bazo.
2. Indicaciones
La determinación de la AST en el suero está indicada para seguir los fenómenos lesivos de las
células. Si la concentración de la enzima en el suero es moderada, ésta proviene del citoplasma y,
en menor medida, de las mitocondrias; si la concentración de la enzima está elevada en relación
con fenómenos lesivos y necróticos de la célula, proviene en mayor medida de las mitocondrias.
Los valores más elevados de la AST se relacionan con los procesos necróticos del órgano: infarto
del miocardio, hepatopatía, distrofia muscular. La determinación de la AST es útil en presencia de
un informe dudoso de electrocardiograma. La AST puede aumentar también en el infarto pulmonar,
en la pancreatitis aguda, en las hepatitis, en el envenenamiento por hongos (Amanita falloide), o
por la absorción de algunos fármacos (isoniazide, rifampicina, algunos antibióticos).
- Suero o plasma: La GOT en suero es estable hasta 3 días en refrigerador, sin agregado
de conservantes. No congelar.
boleta de pago.
7. Centrifugación
turbidez.
Método UV optimizado (IFCC)

Basado en el siguiente esquema reaccionante:
L-aspartato + 2-oxoglutarato ---GOT---> oxalacetato + L-glutamato
Oxalacetato + NADH + H+ ---MDH---> L-malato + NAD+
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba GOT y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de GOT (AST). Válido para todas las pruebas procesadas durante todo
el día.
Rango dinámico
El rango útil de lectura se extiende hasta 0,345 ∆A/min (a 340 nm)
Sensibilidad
El mínimo cambio de actividad detectable de GOT que puede distinguirse de cero es de 6 U/l.
9. Interferencias
- Las muestras provenientes de pacientes hemodializados o con hipovitaminosis o
patologías asociadas con deficiencia de piridoxal fosfato producen valores falsamente
disminuidos.
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 30 mg/dl, ni triglicéridos hasta 500
mg/dl. La hemoglobina interfiere significativamente aumentando los resultados debido a la
presencia de GOT en los eritrocitos.
- Controlar el valor de otras enzimas de los parámetros cardíacos (CPK, mioglobina, CK-MB,
CK–MB masa, troponina).
- Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (ALT, GGT, TP, Colinesterasa,
- electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).
- Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia, Colinesterasa).
TRANSAMINASA (TGP-ALT)
1. Generalidades
La transaminasa glutámica pirúvica o alanina aminotransferasa pertenece al grupo de aquellas

transaminasas que catalizan la transformación de los aminoácidos a los respectivos alfacetoácidos,
a través de la transferencia de un grupo amino y viceversa.
La ALT está presente en cantidad elevada en el hígado, y en pequeña cantidad en el músculo, en

el corazón y en el riñón. La localización es en el citoplasma. En el daño celular leve, los valores de
la ALT son más elevados que la AST y viceversa. La ALT permanece mayor tiempo aumentada
con respecto a la AST.
2. Indicaciones
La determinación de la ALT está relacionada con las enfermedades del hígado. La ALT se
encuentra muy elevada en las diferentes hepatitis virales (A, B, C, delta, E) con valores 20-50
veces más elevados con respecto a los valores de referencia. La ALT aumenta también en la
mononucleosis infecciosa y citomegalovirus. Se puede verificar leve aumento de ALT en las
miopatías, colagenopatía, hemopatía y pancreopatía.
Es útil el reporte de AST/ALT:

- En la obstrucción extrahepática, el aumento principal es el de la ALT.
- En la cirrosis, neoplasia del hígado, ictero hemolítico; en la hepatitis alcohólica, el aumento
de la ALT es inferior a la AST.
- Suero o plasma: La GPT en suero es estable hasta 3 días en refrigerador, sin agregado
de conservantes. No congelar.
boleta de pago.
7. Centrifugación
turbidez.
L-alanina + 2-oxoglutarato ---GPT---> piruvato + L-glutamato
piruvato + NADH + H+ ---LDH---> L-lactato + NAD+
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba GPT y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de GPT (ALT). Válido para todas las pruebas procesadas durante todo
el día.
Rango dinámico
El rango útil de lectura se extiende hasta 0,345 ∆A/min (a 340 nm)
Sensibilidad
El mínimo cambio de actividad detectable de GPT que puede distinguirse de cero es de 2 U/l.
9. Interferencias
- Las muestras provenientes de pacientes hemodializados o con hipovitaminosis o

patologías asociadas con deficiencia de piridoxal fosfato producen valores falsamente
disminuidos.
- No se observan interferencias por bilirrubina hasta 25 mg/dl, ni triglicéridos hasta 1000
mg/dl. La hemoglobina interfiere significativamente aumentando los resultados, a partir de
hemólisis moderada, debido a la presencia de GPT en los eritrocitos.
- Confrontar con analitos de funcionalidad hepática (AST, GGT, TP, colinesterasa,

- electroforesis de proteína, parámetros de hepatitis A, B, C).
- Controlar eventual estado tóxico (alcoholemia, colinesterasa).
- Controlar parámetros serológicos para la mononucleosis infecciosa y para citomegalovirus.
- Controlar parámetros de las enzimas cardíacas (CPK, mioglobina, CK-MB, CK–MB masa,
troponina).

TRIGLICÉRIDOS
1. Generalidades
Los triglicéridos están compuestos de un alcohol trivalente (glicerol) y de tres cadenas largas de
ácidos grasos. Son absorbidos, una parte, con la alimentación y, la otra parte, es sintetizada desde
el hígado. Los triglicéridos alimenticios son transportados por los quilomicrones, mientras el
transporte de la cantidad endógena a los tejidos se hace con las VLDL. Los triglicéridos son
utilizados en los tejidos con la intervención de la lipasa lipoprotéica. El 95.0% del tejido adiposo
está constituido por triglicéridos.
2. Indicaciones
La determinación de los triglicéridos se emplea en los distintos dismetabolismos: alterado

metabolismo lipídico, diabetes mellitus, síndrome nefrótico y muchas enfermedades endógenas.
Se puede encontrar hipertrigliceridemia por:

- Falta de lipasa proteica.
- Exógena: ingesta excesiva de alcohol, glúcidos (H de C) y lípidos (grasas).
- Endógena (congénita).
Ayuno estricto 8 a 12 horas. Solo ingerir alimento ligero en la noche anterior. No consumir alcohol,
al menos 72 horas antes de la toma de muestra.
- Suero o plasma: Los triglicéridos en suero son estables 3 días en refrigerador (2 – 10º C).
No congelar.
boleta de pago.
7. Centrifugación
turbidez.
Método enzimático colorimétrico
El esquema de reacción es el siguiente:

Triglicéridos ---lipoprotein lipasa---> glicerol + ácidos grasos
Glicerol + ATP ---glicerol kinasa---> glicerol-1-P + ADP
Glicerol-1-fosfato + O2 ---GOD---> H2O2 + dihidroxiacetonafosfato
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol ---POD---> quinonimina roja
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba TG y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de triglicéridos. Válido para todas las pruebas procesadas durante todo
el día.
Linealidad
Sensibilidad
Depende del fotómetro empleado. En espectrofotómetros, el cambio mínimo de concentración

detectable en las condiciones de reacción descriptas, para una variación de absorbancia de 0,001
D.O. será aproximadamente de 0,009 g/l.
9. Interferencias
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 15 mg/dl; hemólisis marcadas no interfieren en

la determinación
Deseable : 150 mg/dl

Moderadamente elevado a elevado : 150 - 199 mg/dl
Elevado : 200 - 499 mg/dl
Muy elevado : ≥ 500 mg/dl
- Observar el aspecto del suero (aspecto lipémico, cuando los triglicéridos están mayores de
300 mg/dl).
- Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (colesterol, HDL, LDL, apolipoproteína).
- Controlar los parámetros del metabolismo glucídico.
- Controlar los parámetros de la funcionalidad del riñón (urea, potasio, proteínas, densidad
urinaria).
- Controlar la funcionalidad hepática (particularmente la GGT, por toxicidad alcohólica).
- Controlar la funcionalidad tiroidea (en el hipotiroidismo > triglicéridos y colesterol).
UREA
1. Generalidad
Las sustancias nitrogenadas de la sangre se dividen en dos fracciones: nitrógeno proteico y

nitrógeno no proteico. El nitrógeno no proteico comprende diferentes sustancias: urea,
aminoácidos, ácido úrico, creatinina, amonio, polipéptidos, purinas, nucleótidos, fenol e indol.
La urea representa la fracción principal, y sus valores se identifican con los del nitrógeno no
proteico. La urea es producida desde el hígado, después de la desaminación oxidativa de los
aminoácidos. En condiciones normales, la intensidad del catabolismo se adapta a la contribución
exógena y, por tanto, la cantidad de nitrógeno excretada es la misma a la de origen catabólico, la
cual corresponde a la cantidad exógena. La urea contenida en el plasma es filtrada desde los
glomérulos del riñón, y es reabsorbida por los túbulos en el 40.0%. El grado de absorción varía con
la cantidad de agua reabsorbida. La urea es muy soluble, el 90.0% se excreta a través de la vía
urinaria, y el restante 10.0% por vía extrarenal (sudor, heces).
2. Indicaciones
La determinación de la urea representa el diagnóstico más común para la valoración de la

funcionalidad renal.
En el diagnóstico diferencial se emplea (con la determinación de la creatinina) en:
- Hiperuremia prerenal: deshidratación (disminuida absorción o excesiva pérdida de agua),
insuficiencia cardiaca, excesivo catabolismo proteico.
- Hiperuremia renal: alteraciones de la filtración glomerular y/o de la absorción tubular
(glomérulo nefritis, riñón policístico, necrosis tubular, nefrosclerosis), alteración del flujo
sanguíneo renal por enfermedad intrínseca del riñón.
- Hiperuremia post-renal: obstrucción de las vías urinarias (cálculos, hipertrofia prostática,
neoplasia).
- Suero o plasma: La urea en suero es estable 7 días a 20 – 25º C o a 2 – 10º C o 1 año a -

20º C, sin agregado de conservantes.
boleta de pago.
7. Centrifugación
turbidez.
Urea + H2O ---ureasa---> 2 NH3 + CO2
NH3 + NADH + H+ + 2-oxoglutarato ---GLDH---> L-glutamato + NAD+ + H2O
Materiales

- Copa Selectra
Equipos
- Centrífuga
Procedimiento

- Luego seleccionar la prueba UREA y colocar guardar
Control de Calidad

concentraciones conocidas de Urea. Válido para todas las pruebas procesadas durante todo el día.
Linealidad
La reacción es lineal hasta 300 mg/dl de urea.
Sensibilidad
La sensibilidad analítica es 7,1 mg/dl de urea y el límite de detección es 3,83 mg/dl de urea.
9. Interferencias
No se observan interferencias por bilirrubina hasta 150 mg/l, hemoglobina hasta 350 mg/dl y
triglicéridos hasta 700 mg/dl.
Urea sérica o plasmática: 10 – 50 mg/dl
- Confrontar los parámetros de la funcionalidad del riñón (creatinina, aclaramiento de la

creatinina, proteínas urinarias, densidad urinaria).
- Confrontar parámetros del equilibrio electrolítico (sodio, potasio, cloro).
- Confrontar parámetros de funcionalidad hepática (AST, ALT, GGT).
- Controlar parámetros metabólicos (glucosa, ácido úrico).
- Controlar los parámetros del metabolismo lipídico (colesterol, HDL, LDL, apolipoproteína).
- Controlar eventual estado de embarazo.
- Confrontar con funcionalidad sobrerenal.

ANALIZADOR A1CARE
Hemoglobina Glicosilada (HbA1C)
Importancia Clínica
La Hemoglobina Glicosilada (HbA1c), resulta de la unión no enzimática de la glucosa a la

hemoglobina, y por tanto expresa las glicemias durante la vida media del eritrocito (12 semanas / 3
meses aproximadamente), y se ha constituido en la práctica clínica como el principal método para
evaluar el control de los pacientes con Diabetes. La HbA1c permite valorar el control glucémico sin
ayunas, en cualquier momento del día, presenta baja variabilidad biológica, no se altera con el
estrés y no presenta inestabilidad de la muestra.
Principio de Reacción
EL nivel de HbA1C sobre el total de hemoglobina es determinado ópticamente a través de una

serie de reacciones bioquímicas y enzimáticas. Como consecuencia de eso, ocurre un cambio de
color como resultado durante una reacción en cadena, la concentración HbA1C es cuantificada
usando el cambio de color. El nivel total de hemoglobina es medido usando un método de
metahemoglobina en el mismo cartucho de medición. Todas las mediciones y cálculos son
realizados automáticamente por el Analizador A1Care.
Equipo: A1Care Analyzer
El analizador A1Care es un dispositivo que

está diseñado por punto de atención (POC, por
sus siglas en inglés) para medir
cuantitativamente la Hemoglobina glicosilada
(HbA1C) en sangre entera y reporta los
resultados de la prueba como una proporción
de HbA1C a hemoglobina total del paciente,
expresándose EN % o mmol/mol. Le medición
de la HbA1C se utiliza para supervisar el
control de glucosa a largo plazo en pacientes
con diabetes mellitus. Nuestro analizador
puede realizar sólo una prueba por vez.
Especificaciones
 Sangre venosa anticoagulada con EDTA tomada dentro de las 48h.

 Principio de reacción: Reacción enzimática que produce cambio de color.
 Volumen mínimo de muestra que requiere el equipo: 2,5ul de sangre entera.
 Duración de la prueba: 4 minutos con 20 segundos.
Reactivo
Cartucho A1Care HbA1C. El cartucho contiene un
tampón de lisis y dos reactivos (A Y B) en diferentes
puntos del cartucho. El reactivo está listo para su
uso sin ninguna preparación adicional requerida.
Debe estar en almacenamiento en un rango de
temperatura de 1º a 30º C, no se sugiere congelar.
Puede cambiar de lote según fabricación, pero eso
no es problema al momento del proceso, el equipo
automáticamente va a leer el lote correspondiente al
momento del proceso. Dentro del kit del cartucho
también viene un aplicador, el cual tiene un capilar
para absorber la muestra y una punta para romper
el tampón de lisis.
Muestra
Sangre entera anticoagulada con EDTA (Tubo tapa lila).

Se puede refrigerar la muestra si no se va a procesar en el momento, duración máxima de 2º a 8º
hasta 48 horas
*Evitar las muestras muy diluidas (Hemoglobina muy baja).
Material auxiliar requerido
 Micropipeta automática (de 5 ó 10ul como mínimo)

 Slide para muestra
Procesamiento de las muestras
1. Encender el equipo con el botón de encendido en la parte posterior del mismo. Duración
del encendido aproximadamente 10 minutos.
2. Al inicio de cada semana, realizar el control electrónico y posteriormente el control óptico.
Para hacer determinados controles ir a la pantalla, dar click en Configuración > Prueba
de funcionamiento > CC Electrónico > Ejecutar. Después que haya terminado el control
electrónico, retroceder al menú de atrás y colocar CC Óptico > Ejecutar y va a pedir los
Cartuchos ópticos A y B respectivamente aproximadamente cada 20 segundos. Cuando
ambos controles aprueben se puede seguir con el proceso normal de muestras
3. Alistar las muestras a correr, rotulándolas numéricamente.
4. Colocar un slide de cartulina para dispensar las muestras a procesar.
5. Destapar con cuidado el tubo de muestra y absorber con pipeta automática 5 a 10ul de
sangre entera anticoagulada. Depositar en el slide.
6. En el equipo, en la pantalla de inicio, hacer click en Ejecutar/Iniciar, y se va a ir
preparando el equipo para el proceso.
7. Sacar un cartucho de prueba y con el aplicador correspondiente absorber por contacto
directo con la gota de muestra la cantidad suficiente de sangre
8. Colocar el aplicador dentro del cartucho de la manera que se presenta en la imagen,
presionando con firmeza hacia abajo para romper el sello del tampón y salga todo el
contenido del mismo.
9. Se
aconseja
coger
los
extremos del cartucho y no la parte lisa del cuerpo del mismo, ya que la lectura se genera
se produce en uno de los puntos del cuerpo del cartucho.
10. Inmediatamente el equipo va a pedir que se escanee el código de barras del cartucho de
prueba, en la rendija de escaneo. Solo es ingresar y retirar. OJO: El código de barras
siempre tiene que estar “mirando” para la parte izquierda del operador, tal como se
muestra en la imagen.
11. Saldrá ahora una pantalla donde nos dice que se abra la puerta del compartimento, para lo
cual hacemos presión en la puerta de arriba del equipo, y colocamos el cartucho
verticalmente tal y cual lo hemos escaneado, o sea “mirando” hacia la izquierda, y
haciendo una presión firme sobre el cartucho hacia abajo. Luego cerramos la puerta.
12. El proceso de la prueba estará en marcha y su duración es 4 minutos con 20 segundos.

13. De una vez que haya terminado el tiempo de proceso, automáticamente saldrá el
resultado, como se aprecia en la imagen.
14. En la misma pantalla del resultado, hay un espacio donde dice ID del paciente, allí
podemos hacer click y nos da la oportunidad de colocar el código interno del laboratorio y
los apellidos y nombres del paciente para la identificación.
15. Después de haber identificado la muestra, si hay una nueva muestra colocaremos
“siguiente muestra”, si no hay una muestra por procesar, solo colocamos “inicio”. En
cualquier caso, retirar el cartucho, jalándolo hacia arriba con fuerza, y luego cerrando la
tapa.
16. Si
seleccionamos “siguiente muestra” el equipo nuevamente se preparará para iniciar un

nuevo ciclo de proceso; si le dimos “inicio” nos llevará a la pantalla de inicio del equipo.
17. Copiar los resultados en el cuaderno y cargar en el sistema de resultados.
18. Cuando ya no haya muestras por procesar, se apagará el equipo, haciendo click en el
icono del extremo superior derecho, y colocando apagar el equipo, unos segundos más y
nos dirá en la pantalla que podemos apagar el quipo, eso significa que podemos apagarlo
con el botón que está en la parte de atrás. Nunca pagar de frente el equipo con ese botón,
ni mucho menos desenchufar directamente.
Notas:
 Cuando se dispense la muestra en el slide, no esperar mucho tiempo para ser procesada,
por que corre el riesgo de secarse la muestra y hay el riesgo que solo absorba plasma y o
una cantidad mínima de muestra debido a la desecación. Se aconseja procesar una
muestra por vez.
 Cualquier problema que se presente con el equipo revisar el Manual del operador A1Care
Analyzer.
Bibliografía
- Manual del operador Tri-stat analizador

- Inserto de Cartucho A1Care HbA1C
- Descripción de propiedades del equipo y cartucho en: https://i-sens.com/es/diagnostico-en-
el-punto-de-atencion-poc/#product-02
ANALIZADOR DE GASES Y ELECTROLITOS
EasySTAT
Importancia clínica
La gasometría arterial (GA) es una técnica de medición respiratoria invasiva que permite, en una
muestra de sangre arterial, determinar el pH, las presiones arteriales de oxígeno y dióxido de
carbono y la concentración de bicarbonato.
La valoración objetiva de la función respiratoria de pacientes constituye una práctica habitual en el

procedimiento diagnóstico de urgencia. Ello, junto con los datos que aporta acerca del equilibrio
ácido-básico, hace de esta técnica una de las exploraciones complementarias más frecuentemente
solicitadas, que además es barata y de fácil interpretación. Se realiza en una muestra de sangre
arterial; no obstante, en circunstancias especiales, también se puede realizar en sangre venosa
periférica o sangre venosa mezclada.
La GA proporciona mediciones directas de iones hidrógeno (pH), presión parcial de oxígeno (PO 2),
presión parcial de dióxido de carbono (PCO 2) y saturación arterial de oxígeno (SaO 2). La
concentración de bicarbonato y el exceso de base efectivo no son medidos de manera directa, son
valores calculados. En analizadores de gases también tenemos el análisis de electrolitos e iones
de calcio, por ejemplo.
Los electrólitos son minerales presentes en la sangre y otros líquidos corporales que llevan una
carga eléctrica. Los electrolitos afectan la cantidad de agua en el cuerpo, la acidez de la sangre (el
pH), la actividad muscular y otros procesos importantes. Perdemos electrólitos cuando sudamos
debemos reponerlos
tomando líquidos.
Indicaciones
Como se ha mencionado previamente, las aplicaciones esenciales de la gasometría arterial

incluyen la evaluación de la difusión de gases en la sangre y el equilibrio ácido-base en el líquido
extracelular. En líneas generales, es de gran utilidad para conocer el origen de una insuficiencia
respiratoria. Una insuficiencia respiratoria puede producirse por una hipoventilación como
consecuencia de un fallo en el aparato de la respiración; una alteración de la relación ventilación-
perfusión (V/Q), es decir, el cociente que mide el renovado de aire con cada inspiración y
espiración y la difusión de gases dentro de la barrera hematogaseosa, que puede alcanzar valores
más altos o más bajos de lo normal; o, por último, por un “shunt” o cortocircuito en la
vascularización de los alveolos, que consiste en o bien una comunicación directa arteria-vena sin
renovado gaseoso o bien en la perfusión de un alveolo no ventilado.
Con estos datos, es posible diagnosticar ciertos problemas de salud, destacando la Enfermedad
Pulmonar Obstructiva Crónica (EPOC), la hipertensión pulmonar, el Síndrome hepatopulmonar y la
hipoxia neonatal.
La GA es el estándar de oro para diagnosticar anormalidades en el intercambio gaseoso y del

equilibrio ácido-base. La GA es de utilidad en la evaluación de pacientes críticamente enfermos o
pacientes estables con enfermedades respiratorias crónicas. En este último grupo es
especialmente útil para analizar la necesidad de prescribir oxígeno suplementario o ventilación no
invasiva en caso de insuficiencia respiratoria crónica. La GA también ayuda en el seguimiento de
pacientes que han recibido intervenciones de diversas índoles, farmacológicas y no
farmacológicas, para conocer el efecto de las mismas.
En cuanto a los electrolitos. Existen algunos trastornos en los que uno o más electrolitos se
encuentran alterados. El médico suele valorar el perfil electrolítico de una manera global, pero
prestando especial atención a las concentraciones de sodio y de potasio. Las personas que sufren
enfermedades renales, por ejemplo, pueden retener un exceso de fluido en el organismo y diluir las
concentraciones de sodio y de cloruro, de manera que se encuentran por debajo del rango de
normalidad. Por el contrario, quienes sufren una importante pérdida de fluidos (deshidratación)
pueden tener concentraciones elevadas de sodio, potasio y cloruro. Los electrolitos pueden verse
afectados también en algunos tipos de insuficiencia cardiaca, en problemas nerviosos y/o
musculares y en la diabetes.
El conocimiento de qué electrolito se encuentra en desequilibrio ayuda al médico a determinar la

causa y el tratamiento para restablecer el equilibrio. Si no se trata, el desequilibrio electrolítico
puede conducir a mareos, calambres, pulso irregular e incluso la muerte.
Modalidad de solicitud

Preparación del paciente y datos adicionales
Para hacer la gasometría arterial de forma correcta y obtener unos valores fiables, se han de tomar
una serie de precauciones:
- El paciente ha de estar en reposo como mínimo unos 10 minutos, sentado o tumbado. De

lo contrario, obtendremos unos valores erróneos en la PO 2 arterial como consecuencia de
la mayor demanda de oxígeno que tiene lugar en los tejidos tras realizar un esfuerzo.
- El paciente ha de estar dentro de unas condiciones basales que no influyan en los
resultados de la gasometría. Para ello, no ha de tomar ciertos medicamentos ni haber
fumado el mismo día de la prueba.
- Se ha de conocer la administración del litraje de oxigeno (l/min) que recibe el paciente o la
fracción de oxígeno del aire inspirado (FiO 2). Generalmente inspiramos aire con un 21% de
oxígeno aproximadamente, pero algunos pacientes pueden estar siendo tratados con
oxígeno hiperbárico (100% de oxígeno) o con cualquier otra fracción, lo que provocará
cambios en la interpretación de los resultados.
- Se ha de hacer la gasometría a una temperatura conocida y ambiental, puesto que
cambios en la misma pueden alterar el grado de solubilidad del oxígeno en sangre y
podemos medir un valor ficticio.
- Conocer el dispositivo con el cual se le está administrando oxigenación, sea puntas
nasales, mascarilla simple, mascarilla con reinhalador, etc.
Conservación de la muestra
Si tras extraer la muestra se observan burbujas de aire en el interior de la muestra, se deben

extraer inmediatamente, con la jeringa en posición vertical. Tras ello hay que sellar la jeringa con
un tapón y agitarla para disolver la heparina. Si esto no se hace correctamente se formarán
microcoágulos que pueden hacer variar los resultados.
Una vez obtenida la muestra debe mantenerse en condiciones estricta de anaerobiosis, hasta que
se lleve a cabo el análisis. Entre la extracción y su análisis no deben pasar más de 10-15 minutos.
Si se prevé que el tiempo será superior, la muestra debe guardarse en hielo triturado. Con ello se
enlentece el metabolismo eritrocitario y se evita la disminución de la pO 2 y el aumento de la pCO 2,
que se producen con el paso del tiempo en condiciones de temperatura ambiental. Este artefacto
puede ser importante en pacientes con Leucemia y Trombocitosis.
Verificación de la muestra
- Verificar en Toma de muestra paciente y código correcto.

- Verificación en el área de análisis, con boleta de pago.
- Verificar el color de la muestra que debe ser un rojo brillante.
- Verificar volumen de la muestra (rechazar muestras menores o iguales a 0,5cc)
- Verificar la presencia de burbujas en la muestra.
Analizador EasySTAT
El analizador EasyStat mide pH, PCO 2, PO2, NA+, K+, CA++, Cl- y Hct y calcula otros parámetros
adicionales. Los parámetros de paciente, incluyendo FIO 2, ID de paciente, temperatura del
paciente, %FIO2 y otra información puede ser ingresada usando el teclado digital e integrándolos
con los resultados del paciente. La medición y resultados calculados se despliegan e imprimen.
Calibradores líquidos vienen empacados en un conveniente modulo único de reactivos.

Todos los componentes del analizador fueron combinados en simples módulos que son fácilmente
accesibles por el usuario. Adicionalmente, sencillos menús guían al usuario a través de la
operación del analizador. El formato compacto y diseño modular de EasyStat reduce
significativamente el mantenimiento y espacio requeridos. Los electrodos desechables y el módulo
de reactivos aseguran una operación a bajo costo por muestra.
Mantenimiento del equipo
- El equipo por defecto va a tener calibraciones automáticas aproximadamente cada 8 horas.

- Cada inicio de día de labores, pasar la solución de lavado.
- Ir al Menú de Inicio (tecla 0) y seleccionar la opción 4 (Lavado diario), levantar el
muestreador, haciendo un movimiento hacia arriba y luego hacia atrás, dejando ver la
sonda de aspiración, y luego colocar la solución de lavado en la sonda. Presionar la tecla
YES, para absorber la solución.
- Verificar que absorba el equipo la solución.
- Sonará un pequeño pitillo de alerta que debemos quitar la solución de lavado y bajar el
muestreador, así hagámoslo. Verificar que el muestreador esté correctamente cerrado.
- Iniciará el lavado y por defecto la calibración.
- El ciclo de mantenimiento (lavado-calibración) dura aproximadamente unos 10min.
- Verificar en el transcurso de la calibración la aparición de alguna alerta en el equipo, como
error en la calibración, aire en algunos de los calibradores, ruido, etc.
- De darse estos errores verificar primeramente la idoneidad de la válvula y la bomba y luego
verificar flujos, accediendo al segundo menú con la tecla 5 y siguiendo las opciones del
equipo.
- Verificar al finalizar la calibración las pendientes de los electrodos. Si vemos algún
parámetro observado, repetir la calibración. Si persiste el error, llamar al soporte técnico
del equipo.
Control de Calidad
Se manejan 3 niveles de control de calidad (nivel 1 – nivel 2 – nivel 3)

Antes de pasar los controles, verificar que el lote del control esté ingresado en el equipo, de lo
contrario, hacerlo y colocar los valores asignados para dicho lote de control.
Para pasar un control, hacemos lo siguiente:

- Ir al Menú de Inicio (tecla 0) y luego la opción 2 (CC QC) y seleccionamos el nivel de
control deseado.
- Cogemos una ampolla del control del nivel a pasar de la caja y homogenizamos la muestra
10 veces como mínimo, asegurándonos que reamente se ha homogenizado la muestra.
- Luego con cuidado rompemos la ampolla y rápidamente procedemos a pasar el control,
levantando el muestreador hacia arriba y hacia atrás, colocando el control en sonda y
luego presionando la tecla YES, y al sonar el pitillo retirar el control y bajar el muestreador
correctamente cerrado.
- Recordar que lo hacemos rápido ya que estamos controlando gases y electrolitos y es
crucial que no se alteren los parámetros por el contacto con el medio ambiente externo.
- Verificar el resultado del control, cuidando que no salga un asterisco que indica una
alteración del valor del control.
- Si hay un valor observado, pasar por segunda vez el control que ya se abrió. NO pasar por
tercera vez, preferible sacar otra ampolla de control.
- Repetir estos pasos para todos los controles.
Procesamiento de muestras:
Electrolitos – Bicarbonato sérico – Calcio iónico
- Primeramente, verificar la idoneidad del suero, básicamente la ausencia de fibrina, es

importante esto para no tener problemas en el procesamiento de la muestra.
- El equipo debe estar en la pantalla de procesamiento, si no lo está ir con la tecla 0 al Menú
de Inicio y luego la opción 1 Analizar muestra.
- Levantar el muestreador siempre hacia arriba y hacia atrás y debe salir la sonda
- Colocar la muestra en la sonda (verificando que tenga contacto con el suero, no al ras de
la superficie del volumen de muestra si no asegurarnos que al momento de aspirar no
tenga la opción de entrar aire) y luego presionar YES, y bajar el muestreador
- Saldrá en la pantalla unas opciones para colocar los datos del paciente.
- Ingresar el código, por ejemplo :00218214
- Como la muestra es suero, preservar la temperatura y FiO 2 en 37º y 21% respectivamente
y modificar el tipo de muestra a Venosa con la tecla No.
- Luego confirmar el análisis con la tecla YES.
- Verificar el resultado de los analitos procesados que estén dentro de los valores
referenciales establecidos. Si el operador lo desea o ve por conveniente, o si ocurrió algún
error en el procesamiento de la muestra, puede repetir la prueba siguiendo los mismos
pasos.
Gases arteriales
- Primeramente, verificar la idoneidad de la muestra, básicamente la ausencia de coágulos y
burbujas en la jeringa, es importante esto para no tener problemas en el procesamiento de
la muestra y a su vez preservar la operatividad del equipo. Además, verificar el color de la
muestra que debe ser un rojo brillante, y también el volumen de la muestra que NO debe
ser menos de 0,5cc.
- Pedir al tomador de muestra que proporcione los datos del paciente, indicando la
temperatura actual del paciente, litraje de oxigeno que está recibiendo y el dispositivo que
está utilizando (puntas nasales, mascarilla simple o mascarilla con reinhalador, etc.).
- Antes de procesar la muestra, calcular el valor de FiO 2, para lo cual dejo la tabla que se
usa en el laboratorio de conversión de litraje a FiO2 según el dispositivo utilizado.
Homogenizar correctamente la muestra, rotando la jeringa entre las manos, bien llegue la
muestra, para asegurarnos que haya una correcta homogenización con el anticoagulante y
evitar la sedimentación hemática.
- El tiempo de rotación de la muestra dependerá cuan pronto haya llegado al área de
proceso desde que se tomó la muestra. En todo momento se debe asegurar la correcta
homogenización de la muestra.
- El equipo debe estar en la pantalla de procesamiento, si no lo está ir con la tecla 0 al Menú
de Inicio y luego la opción 1 Analizar muestra.
- Levantar el muestreador siempre hacia arriba y hacia atrás y debe salir la sonda
- Antes de colocar la muestra, verificar la ausencia de coágulos, y burbujas, dejando caer
una gota de sangre, eliminándola de la boquilla de la jeringa, hacerlo de manera rápida
para evitar exposición prolongada de la muestra al medio ambiente externo.
- Colocar la muestra en la sonda (verificando que tenga contacto con la sangre, no al ras de
la superficie del volumen de muestra si no asegurarnos que al momento de aspirar no
tenga la opción de entrar aire) y luego presionar YES, y bajar el muestreador
- Saldrá en la pantalla unas opciones para colocar los datos del paciente.
- Ingresar el código, por ejemplo :00218214
- Colocar la temperatura actual del paciente y el FiO 2 calculado y modificar el tipo de
muestra a Arterial con la tecla No. No olvidar esto último, ya que si colocamos las otras
opciones el equipo no leerá correctamente los parámetros y nuestro procesamiento será
en vano.
- Luego confirmar el análisis con la tecla YES.
- Verificar el resultado de los analitos procesados que estén dentro de los valores
referenciales establecidos. Si el operador lo desea o ve por conveniente, o si ocurrió algún
error en el procesamiento de la muestra, puede repetir la prueba siguiendo los mismos
pasos.
- Verificar el resultado sobretodo de Saturación de O2, que es el parámetro base para indicar
si nuestra muestra ha sido adecuada o no. En paciente normales si valor es de 92 – 98 %.
Valores más bajos, sin sospecha clínica, volver a tomar la muestra.

Manual de Bioquimi

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NORMAS Y PROCEDIMIENTOS

GENERALES DEL ÁREA DE BIOQUÍMICA

PROCEDIMIENTOS BÁSICOS PARA EL MANTENIMIENTO Y PROCESAMIENTO EN EL

- El equipo CB 400i siempre debe estar prendido las 24 horas.

- Par iniciar el procedimiento de muestras para bioquímica, se procede primero a realizar un

- A la medida que se van haciendo los pasos anteriores, se saca de la refrigeradora de la

- Se procede a realizar el control de las pruebas. Se coloca el CN en la posición interna del

- En cuanto a la calibración, solo procede si el reactivo se ha cambiado de lote que estaba

- Para ingresar una muestra al equipo, se va a la pantalla y se selecciona. Insertar

- Colocar el tubo, siempre asegurándonos que la muestra no tenga fibrina, y se aconseja

- El resultado saldrá automáticamente impreso. Verificar la correlación de los resultados

PROCEDIMIENTO DE METODOLOGÍA ESPECÍFICA PARA LOS EXÁMENES DE QUÍMICA

El presente manual de procedimientos describe, detallada y específicamente cada examen de

- Suero: Poner el tubo primario en la centrifuga de modo contrapesado, centrifugar a 4000

La albúmina reacciona específicamente (sin separación previa) con la forma aniónica de la

- Guantes descartables no estériles

Ingresar en el equipo los datos del paciente de la siguiente manera:

- Ir a la parte de Insertar Rutina/STAT y luego colocar Nueva Muestra

Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con

Notas sobre el método:

10. Valores de referencias

Suero: 3.5 – 5.5 g/dl

11. Criterios de validación

12. Reporte de resultados

La amilasa es una enzima que cataliza la división de 1,4 – alfa-glicósido en lo interno de la

La determinación de la amilasa es de importancia fundamental en el diagnóstico de las

Rutina – Urgencia – Emergencia

4. Preparación del paciente

Ayuno 8 a 12 horas de preferencia.

Método cinético- colorimétrico

La α-amilasa hidroliza el sustrato definido 2-cloro-p-nitrofenilα-D-maltotriósido (CNP-G3) para

- Guantes descartables no estériles

Ingresar en el equipo los datos del paciente de la siguiente manera:

- Ir a la parte de Insertar Rutina/STAT y luego colocar Nueva Muestra

Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con

Notas sobre el método:

10. Valor de referencia

Suero: 0 – 125 U/l

11. Criterio de validación

- Confrontar con lipasa, calcio, funcionalidad del hígado.

12. Reporte de resultados

1.4 BILIRRUBINA TOTAL

En la determinación de la bilirrubina, se puede evidenciar:

La determinación de la bilirrubina es un elemento fundamental para el diagnóstico de las patologías

Hepatocelular: Debido a lesiones hepatocelulares, el hígado no es capaz de capturar la bilirrubina y

Rutina – Urgencia – Emergencia

4. Preparación del paciente

Ayuno 8 a 12 horas de preferencia.

- Suero o plasma: La muestra debe ser preferentemente fresca. En caso de no efectuarse

- Suero: Poner el tubo primario en la centrifuga de modo contrapesado, centrifugar a 4000

Método con sal de diclorofenildiazonio (DPD)

La bilirrubina indirecta, unida a la albúmina, es liberada por un tensioactivo. La bilirrubina total

- Guantes descartables no estériles

Ingresar en el equipo los datos del paciente de la siguiente manera:

- Ir a la parte de Insertar Rutina/STAT y luego colocar Nueva Muestra

Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con

Notas sobre el método:

10. Valor de referencia

- Adultos: 0.00 – 1.00 mg/dl.

11. Criterio de validación

- Confrontar con funcionalidad hepática (transaminasas, G.G.T, TP, Colinesterasa,

12. Reporte de resultados

Referirse a BILIRRUBINA TOTAL