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MÉTODOS PARA EL ESTUDIO DEL MEDIO NATURAL

Estima de la abundancia de
fitoplancton y zooplancton.

fitoplancton (cel/ml)
zooplancton (ind/L)

Pirámide trófica
acuática pelágica
http://www4.tecnun.es/asignaturas/Ecologia/Hipertexto/ 1
04Ecosis/120ProSec.htm
Fitoplancton
Clorofíceas (algas verdes)

Monoraphidium Chlorella Scenedesmus


Staurastrum
Pediastrum

Dinoflagelados Criptofíceas Cianobacterias

Anabaena Microcystis
Cryptomonas
Ceratium
(Longitud >100 µm)

Aphanizomenon
Zooplancton
Copépodos Cladóceros Rotíferos
Daphnia Keratella
(pulga de quadrata
agua)

Brachionus
plicatilis

nauplius

Ciclópido Calanoide Bosmina sp. Synchaeta


pectinata

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Ceriodaphnia sp.
Recuento de fitoplancton
Para el análisis de la composición del fitoplancton se utiliza
el método de Utermöhl con microscopio invertido.

El análisis cuantitativo comprende los siguientes


procedimientos:
1. Calibración del equipo
2. Concentración o dilución de la muestra fijada con lugol.
3. Identificación taxonómica
4. Recuento de células (cel/ml)

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Recuento de fitoplancton.
1. Calibración del equipo.
• Es necesario realizarlas sólo una vez.
• Conocer con exactitud el volumen de la columna de
sedimentación (5, 10, 25, 50 o 100 ml).
• Calcular el área del cristal de la cámara (530.93 mm2).
• Calibrar para cada uno de los objetivos el micrómetro
y la cuadrícula de recuento (área del campo ocular). Se
hace con portaobjetos micrométrico graduado (e.g.,
100 µm divididas en 10 divisiones de 10 µm cada una).

Objetivo Área del campo (mm2)


10x 2.7465
40X 0.1713 5
Recuento de fitoplancton.
2. Concentración/dilución de la muestra

Técnica de
sedimentación
(Utermöhl 1930s)

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Recuento de fitoplancton.
3. Identificación taxonómica
Microscopio invertido: La fuente de luz y el condensador
están sobre la plataforma apuntando hacia abajo. Los
objetivos están debajo de la plataforma apuntando hacia
arriba.

El microscopio invertido
permite observar organismos o
tejidos en cultivo sin una
preparación previa.
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Recuento de fitoplancton.
3. Identificación taxonómica
• Se observa la cámara con un objetivo de pocos aumentos. Si no se
ha conseguido una distribución uniforme, hay que preparar una
nueva submuestra.
• Antes de empezar los recuentos debe hacer un inventario de los
taxones presentes explorando la muestra a varios aumentos.
• La identificación de los taxones se realiza con el apoyo de claves y
guías ya elaboradas, hasta el nivel taxonómico mas preciso posible
(género o especie).
• Se recomienda realizar dibujos y fotografías, de utilidad como
colección de referencia, que serán consultados con un especialista
para identificar el género y especie.
• El trabajo de identificación y recuento sólo puede realizarlo
personal especializado (con entrenamientos de varios años).
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Recuento de fitoplancton.
4. Recuento de células (cel/ml)
• Los organismos de mayor tamaño (e.g. colonias de
cianobacterias) se cuentan a menos aumentos (40x10x)
haciendo un recuento de toda la cámara.
• Los taxones de menor tamaño (<20 µm) se cuentan a
muchos aumentos (100x10x) en campos elegidos al
azar. Se usa aceite de inmersión.
• ¿Cuantos campos se deben contar? El objetivo es contar
de 50 a 100 campos de forma que tras el recuento total
se consigan al menos 400 células.

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Recuento de fitoplancton.
4. Recuento de células (cel/ml)

cel/ml = (nº cel contadas / nº campos ) · (AU / Acampo) · d/ V(ml)

AU: Área de la cámara Utermöhl (530. 93 mm2)


Acampo: Área del campo óptico según el objetivo.
V (ml): Volumen de muestra sedimentada.
d: factor de dilución.

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Recuento de zooplancton
(ind/L)
• Concentrar o diluir la muestra de zooplancton según el
grado trófico del ecosistema. La regla general es contar al
menos 400 organismos en toda la cámara.
• Generalmente se cuenta la cámara completa con los
objetivos de 10x (cladóceros y copépodos) y 40x
(rotíferos).
• Los resultados, para cada uno de los taxones, se expresan
en nº ind/L, según la siguiente fórmula:
ind/L = [nº ind. contados /vol. Concentrado (L)] · d

donde d = factor de dilución


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