Evaluación preliminar de estrategias

biotecnológicas para el manejo de la

cancrosis de los cítricos (Xanthomonas
axonopodis pv. citri) en limonero.

Filippone1, M.P; Sendín1, L. N.; Villa4, P.; Ramallo1, J., Marano2, M. R.; Vojnov3, A y
Castagnaro1, P.

1
Estació
Estaci n Experimental Agroindustrial Obispo Colombres,
ón Colombres, Tucumá
Tucumán, Argentina. 2IBR-IBR- Depto.
Depto.
Microbiologí
Microbiología. Fac.
Fac. de Cs.
Cs. Bioquí
Bioquímicas y Farmacé U.N.R. Rosario, Argentina, Fundació
Farmacéuticas. U.N.R. 3
Fundación Instituto
Leloir,
Leloir, Instituto de Investigaciones Bioquí
Bioquímicas-
micas-Facultad de Ciencias Exactas y Naturales (UBA), Buenos
Aires Argentina. 4 Instituto Cubano de Investigaciones de los Derivados de la Cañ Caña de Azú
Azúcar
(ICIDCA), La Habana, Cuba.Cuba.
Cancrosis tipo A (B y C: aurantifolii o
suramericana)
Agente causal: Xanthomonas axonopodis pv
citri
Tratamiento químico.
Fuentes de resistencia.
B y C: rango de hospedantes limitado. Sintomatología
similar.
Antecedentes y conformación del grupo de
trabajo:
La Fragarina 1 como compuesto antimicrobiano y como
molécula señal.
Los extractos de hojas de frutilla conservan esta doble
propiedad: actividad “in vitro”, su utilización en
poscosecha y como inductores de la respuesta
defensiva.
La protección cruzada y la caracterización del “poder
inductor” o “elicitor”.
La caracterización de mutantes en Xanthomonas
campestris pv campestris (Xcc) y la confluencia entre
los grupos: proyecto dirigido por el Dr. Vojnov. Mutante
Xcc 8557 en Nicotiana benthamiana.
 Caracterización y evaluación de compuestos,
formulaciones y microorganismos para inducir
la respuesta defensiva:

OBJETIVOS:
1- Evaluación de la capacidad protectora de dos productos comerciales:

a- BTH (ácido benzo (1,2,3) tiazol–2carboxitioico-S-metil ester), compuesto

de Syngenta que induce los mecanismos de defensa vegetal de manera
análoga al ácido salicílico.

b- Gluticid: producto obtenido en Cuba (ICIDCA) a partir de Pseudomonas

aeruginosa, cepa PSS, que contiene metabolitos activos contra
fitopatógenos.

2- Obtención y caracterización de una mutante no patogénica de Xcc, en su

capacidad de inducir la respuesta defensiva contra Xac.
Mediante ensayos de actividad antimicrobiana “in vitro”, se
determinó que:

1- El Gluticid no inhibe el crecimiento de Xac aún en

concentraciones sustancialmente mayores a las usadas en
ensayos in vivo (5.000ppm).

2- La mutante de Xcc 8557 no produce inhibición sobre Xac en

ensayos por estrías cruzadas.
 ENSAYO 1

Evaluación de bioproductos: BTH y GLUTICID

Xac
BTH 1.5 mM DO 0.1
o Gluticid 500ppm

15 días
 A

Figura 1. Efecto de los tratamientos con (A) Gluticid y con (B) BTH sobre el
desarrollo de los síntomas de la cancrosis en hojas de limonero a los 15 días de
la inoculación con Xanthomonas axonopodis pv. citri (Xac). En (C) se muestra los
síntomas en una hoja de las plantas controles (pulverizadas con agua).
 El grupo de genes rpf regula factores de
virulencia a través de Factores Difusibles

rpfA rpfB rpfF rpfC rpfH rpfG lysU prfB rpfD recJ rpfE greA

Aconitasa
Reguladores de
Factores Dos componentes
difusibles
tRNA lisil Procesamiento
sintetasa de mRNA
Regulatory complexity in Xanthomonas campestris
DSF? Environmental
Stimulus?

OM

IM RpfH
H
DSF RpfC
RpfG
D
D P
H

+
-
eng
rpfF rpfB Virulence genes
gum prt
DSF Biosynthetic genes
+/-
Other Regulatory Genes (clp, rpfA, rpfD, rpfE, rpfI, rpfN)
 ENSAYO 2

- Evaluación de agentes de biocontrol

Xanthomonas campestris pv campestris (Xcc)

Rol de DSF en la interacción entre la bacteria y la planta:

los DSF regulan la producción de factores requeridos para la
patogenicidad de la bacteria

EPS glucano DSF Síntomas

wt +++ +++ + +++
8523 + + - +
8557 + + ++++ -
8397 - +++ + -

los DSF interfieren en ciclo de patogénesis de Xac?

1- COINOCULACIÓN de Xcc 8557 y Xac

CARA ABAXIAL DE LA HOJA

Xcc 8557 Xac

+
Xac Xcc 8557 + Xac
 Hospedante: Limonero
Variedad: Lisboa limoneira 8A

Xac Xac

8557
8557
+ Xac
+ Xac

Figura 2. Inhibición del desarrollo de los síntomas de la cancrosis por efecto de la

mutante de Xcc 8557. En el lado derecho de las hojas de plantas de limonero se
realizaron 3 coinfiltraciones con la mutante y la bacteria patógena (Xac) y, en el
lado izquierdo se realizaron 2 infiltraciones solamente con Xac.
 EEAOC-INSIBIO (Conicet/UNT)

Dr. Atilio P. Castagnaro

PICT\02-10740 Dr. Juan C. Diaz Ricci
Ing.Agr. M. Paula Filippone
Lic. Gabriel R. Vellicce
Ing. Agr. Sergio M. Salazar
Bioq. Alicia Mamaní
Bioq. Marta Ontivero
Bioq. Ursula Tonello
Lic. Marta Arias
Ing. Agr. Gustavo Martínez
Ing. Agr. Gabriela García
Ing. Agr. Hugo Lázaro
Ing. Agr. Cecilia Lemme
Sra. M. Mercedes Zavaleta
Lic. Lorena Sendin

Seccion Fitopatologia
Ing. Agr. Jacqueline Ramallo

Fundacion Instituto Leloir

Dr. Adrian Alberto Vojnov

Instituto de Biologia Molecular de

Rosario
Dra. Maria Rosa Marano