VIH 1/2/O Tri-line • Toque la sangre con el extremo del tubo capilar y espere hasta que llegue INTERPRETACIÓN
pilar y espere hasta que llegue INTERPRETACIÓN DE LOS RESULTADOS
Dispositivo de detección rápida del virus de la
TM
inmunodeficiencia humana
(para sangre completa/suero/plasma)
Prospecto
Español
Prueba rápida para la detección cualitativa de anticuerpos frente al virus de la inmunodeficiencia
humana (VIH) de tipo 1, tipo 2 y subtipo O en sangre completa, suero o plasma.
Sólo para uso diagnóstico profesional in vitro.
USO PREVISTO
El dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para
sangre completa/suero/plasma) es un inmunoensayo cromatográfico rápido para la detección
cualitativa de anticuerpos frente a VIH-1, VIH-2 y subtipo O en sangre completa, suero o plasma
como ayuda para el diagnóstico de la infección por VIH. Este producto no debe utilizarse en el
análisis de sangre procedente de donaciones.
RESUMEN
El VIH es el agente etiológico del síndrome de inmunodeficiencia adquirida (SIDA). El virión está
rodeado por una envoltura lipídica que deriva de la membrana de la célula hospedadora. La envoltura
contiene varias glucoproteínas víricas. Cada virus contiene dos copias de ARN genómico de sentido
positivo. El VIH-1 se ha aislado de pacientes con SIDA y de complejos relacionados con el SIDA, así
como a partir de personas sanas con riesgo potencial elevado de desarrollar SIDA1. El VIH-1 consta
de subtipo M y subtipo O. En 1990 se reconocieron por primera vez cepas de VIH-1 muy divergentes
que se agruparon de forma provisional como Subtipo O, ya que esta variedad tiene marcadores
glucoproteicos similares a VIH-1 aunque con una ligera variación con el marcador proteico. Aunque
raramente en comparación con VIH-1 y VIH-2, las infecciones causadas por el subtipo O se han
identificado hasta el momento en África (Camerún), Francia y Alemania. El VIH-2 se ha aislado de
pacientes con SIDA del oeste de África y de individuos asintomáticos seropositivos2. VIH-1, VIH-2 y
el subtipo O inducen todo ellos respuestas inmunes3. La detección de anticuerpos anti-VIH en suero,
plasma o sangre completa es la forma más eficaz y frecuente de determinar si un individuo ha estado
expuesto al VIH y para analizar la presencia del virus en sangre y hemoderivados4. A pesar de las
diferencias en sus características biológicas, actividades serológicas y secuencias genómicas, VIH-1,
VIH-2 y el subtipo O muestran una fuerte reactividad antigénica cruzada5,6. La mayoría de los sueros
VIH-2 positivos pueden identificarse usando pruebas serológicas basadas en VIH-1.
El dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para
sangre completa/suero/plasma) es una prueba rápida para detectar de forma cualitativa la presencia de
anticuerpos frente a VIH-1, VIH-2 y/o el subtipo O en muestras de sangre completa, suero o plasma.
PRINCIPIO
El dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para
sangre completa/suero/plasma) es un inmunoensayo cualitativo de membranas para la detección de
anticuerpos anti-VIH-1, VIH-2 y el subtipo O en sangre completa, suero o plasma. La membrana se
cubre previamente con antígenos recombinantes de VIH en las zonas de las líneas de prueba T1 y T2.
La línea de prueba T1 se cubre previamente con antígenos de VIH-1 y subtipo O y la línea de prueba
T2 se cubre previamente con antígenos de VIH-2. Durante el análisis, la muestra de sangre completa,
suero o plasma reacciona con la mezcla de antígenos de la envoltura y el núcleo del VIH-1 y el
antígeno de la envoltura de VIH-2 que recubre las partículas coloreadas en la tira reactiva. A
continuación, la mezcla migra hacia la membrana cromatográficamente por capilaridad y reacciona
con el antígeno recombinante de HIV sobre la membrana en la zona de la línea de prueba. Si la
muestra contiene anticuerpos frente a VIH-1 y/o el subtipo O, o frente a VIH-2, aparecerá una línea
coloreada en la zona de la línea de prueba; si la muestra contiene anticuerpos frente a VIH-1 y/o el
subtipo O y frente a VIH-2, aparecerán dos líneas coloreadas en la zona de la línea de prueba. Ambas
indican un resultado positivo. Si la muestra no contiene anticuerpos frente a VIH-1, subtipo O y/o
VIH-2, no aparecerán líneas coloreadas en la zona de la línea de prueba, lo que indica un resultado
negativo. Como control del procedimiento, siempre aparecerá una línea coloreada en la zona de la
línea de control que indicará que se ha aplicado un volumen de muestra adecuado y que la membrana
ha absorbido la muestra.
CONSERVACIÓN Y ESTABILIDAD
Conservar dentro del envase sellado a temperatura ambiente o refrigerado (2 – 30 °C). El dispositivo de
detección es estable hasta la fecha de caducidad impresa en el envase sellado. El tampón es estable hasta la
fecha de caducidad si se conserva tal como se indica. El dispositivo de detección debe permanecer dentro
del envase sellado hasta su uso. NO CONGELAR. No lo utilice después de la fecha de caducidad.
PRECAUCIONES
• Sólo para diagnóstico profesional in vitro. No utilizar después de la fecha de caducidad.
• Cada dispositivo es de un solo uso.
• Utilice ropa protectora como batas de laboratorio, guantes desechables y gafas de protección
cuando se estén analizando las muestras.
• No coma, beba o fume en la zona en que se manipulan los kits o las muestras.
• Manipule todas las muestras como si contuvieran agentes infecciosos. Siga las medidas de
precaución establecidas frente a peligros microbiológicos durante el análisis, así como los
procedimientos estándar para la adecuada eliminación de las muestras.
• El análisis utilizado deberá desecharse según la legislación local.
• La humedad y la temperatura pueden afectar de forma perjudicial a los resultados.
• No utilizar el dispositivo si está dañado.
RECOGIDA, PREPARACIÓN Y CONSERVACIÓN DE MUESTRAS
• El dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line
(para sangre completa/suero/plasma) puede utilizarse con muestras de sangre completa
(procedente de venopunción o punción digital), suero o plasma.
• Para sangre completa y plasma obtenidos mediante venopunción: se debe utilizar K2EDTA y
heparina sódica como anticoagulante. No se han probado otros anticoagulantes y podrían arrojar
resultados incorrectos.
• Para extraer muestras de sangre completa por punción digital:
• Lávese las manos con jabón y agua templada o límpielas con una gasa con alcohol. Deje que
se seque.
• Masajee la mano sin tocar la zona de punción frotándose la mano hacia la punta del dedo del
dedo corazón o anular.
• Realice la punción de la piel con una lanceta estéril nueva para cada persona. No extraiga la
primera gota de sangre.
• Frote la mano con suavidad desde la muñeca hacia la palma y hasta el dedo para formar una
gota de sangre redonda en la zona de punción.
• Añada la muestra de sangre completa obtenida por punción digital al dispositivo de detección
usando un tubo capilar:
aproximadamente a 50 µl. Evite la formación de burbujas de aire. (Consulte la ilustración anterior)
• Coloque la perilla en el extremo superior del tubo capilar, a continuación apriete la perilla
para aplicar la sangre completa al pocillo de la muestra (S) del dispositivo de detección. POSITIVO:* aparecen dos o tres líneas diferentes coloreadas. Debería aparecer siempre una línea en
• Añada la muestra de sangre completa obtenida por punción digital al dispositivo de detección la zona de la línea de control (C) y una línea coloreada o dos en las zonas de la línea de prueba (T1 y/o T2).
usando gotas suspendidas: *NOTA: la intensidad del color en las zonas de la línea de prueba (T1 y T2) variará dependiendo de
la concentración de anticuerpos anti-VIH presentes en la muestra. Por tanto, cualquier tono de color
• Coloque el dedo del paciente de modo que la gota de sangre esté justo encima del pocillo
de la muestra (S) del dispositivo de detección. en la zona de la línea de detección (T1 y/o T2) se debe considerar positivo.
• Deje que 2 gotas suspendidas de sangre completa obtenida por punción digital caigan en el NEGATIVO: aparece una línea coloreada en la zona de control (C). No aparece ninguna línea
pocillo de la muestra (S) del dispositivo de detección, o mueva el dedo del paciente de coloreada en las zonas de la línea de prueba (T1 y T2).
manera que la gota suspendida toque el centro del pocillo de la muestra (S). Evite que el
dedo toque directamente el pocillo de la muestra (S). NO VÁLIDO: no aparece la línea de control. Un volumen de muestra insuficiente o una técnica
• Separe el suero o el plasma de la sangre lo antes posible para evitar hemólisis. Utilice solo incorrecta del procedimiento suelen ser los principales motivos de invalidación del análisis. Compruebe el
muestras transparentes, no hemolizadas. procedimiento y repita el análisis con un nuevo dispositivo de detección. Si el problema persiste,
• El análisis deberá realizarse inmediatamente después de la extracción de muestras. No deje las interrumpa inmediatamente el uso del kit de análisis y póngase en contacto con el distribuidor local.
muestras a temperatura ambiente durante un periodo de tiempo prolongado. Las muestras de suero y CONTROL DE CALIDAD
plasma se pueden conservar a 2-8 °C hasta 3 días y a -20 °C hasta 6 meses. Las muestras de sangre En el análisis se incluye un control del procedimiento. La aparición de una línea en la zona de control
completa obtenidas por venopunción deberán conservarse a una temperatura de 2 a 8 °C si el análisis (C) es un procedimiento de control interno. Confirma que el volumen de muestra es suficiente, que la
se va a realizar en el plazo de 2 días desde la extracción. No congelar las muestras de sangre completa. membrana ha absorbido la muestra adecuadamente y que la técnica del procedimiento es la correcta.
Las muestras de sangre completa obtenidas mediante punción digital deberán analizarse de inmediato. Los estándares de control no se suministran con este kit; sin embargo, es necesario que se realicen
• Deje que las muestras alcancen la temperatura ambiente antes de analizarlas. Las muestras
análisis de control positivos y negativos con cada análisis para confirmar el procedimiento del análisis
congeladas deben descongelarse por completo y mezclarse bien antes de analizarlas. Las muestras y garantizar un rendimiento adecuado.
no se deben congelar y descongelar repetidamente.
• Si las muestras deben transportarse, deberán embalarse de acuerdo con la normativa estatal en LIMITACIONES
materia de transporte de agentes etiológicos. 1. El dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line
(para sangre completa/suero/plasma) está destinado únicamente al diagnóstico in vitro. Este
MATERIALES
análisis debe usarse para la detección de anticuerpos frente a VIH en muestras de sangre completa,
Materiales suministrados suero o plasma. Ni el valor cuantitativo ni la tasa de aumento de la concentración de anticuerpo
• Dispositivos de detección (antígenos de VIH-1 (grupo M y grupo O) y de VIH-2 que recubren la VIH podrán determinarse mediante este análisis cualitativo.
nitrocelulosa y están conjugados con partículas de látex sintético de color rojo sobre la almohadilla 2. El dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line
de marcado) (para sangre completa/suero/plasma) sólo indicará la presencia de anticuerpos anti-VIH en la
• Tampón (PBS pH 7,4; caseína al 0,5%; azida sódica al 0,02%; sulfato de kanamicina al 0,025%) muestra y no deberá utilizarse como único factor para determinar el diagnóstico de infección por
• Cuentagotas • Prospecto • Secante VIH-1, VIH-2 y/o subtipo O.
Materiales necesarios no suministrados 3. Para su confirmación, deben realizarse análisis adicionales de las muestras, como ELISA y/o
• Recipiente para la obtención de la muestra • Lancetas estériles (solo para muestras de sangre análisis por inmunotransferencia.
completa obtenidas por punción digital) 4. Al igual que todos los análisis diagnósticos, deberán estudiarse todos los resultados junto con el
• Centrífuga • Cronómetro resto de información clínica disponible.
• Tubos capilares heparinizados y perillas dispensadoras (solo para muestras de sangre completa 5. Los resultados no deben utilizarse para determinar el serotipo de las infecciones por VIH.
obtenidas por punción digital) 6. Debido a la posibilidad de reactividad cruzada, la aparición de líneas en T1 y T2 no indica
• Controles externos necesariamente una coinfección por VIH-1, VIH-2 y subtipo O, ni puede esto identificar el isotipo.
INSTRUCCIONES DE USO 7. Los anticoagulantes recomendados son EDTA K2 y heparina sódica para sangre venosa completa.
No se han evaluado otros anticoagulantes con esta prueba.
Deje que el dispositivo de detección, la muestra, el tampón y/o los controles alcancen la
VALORES PREVISTOS
temperatura ambiente (15-30 °C) antes del análisis.
1. Extraiga el dispositivo de detección del envase y utilícelo a la mayor brevedad posible. Se El dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para
obtendrán mejores resultados si la prueba se realiza en un periodo de una hora. sangre completa/suero/plasma) se ha comparado con las principales pruebas comerciales de ELISA
2. Coloque el dispositivo de detección en una superficie nivelada y limpia. y/o inmunotransferencias para VIH. La correlación entre estos dos sistemas es del 99,7%.
Para muestras de suero o plasma: mantenga el cuentagotas en posición vertical y transfiera 1 gota de
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO
suero o plasma (aproximadamente 25 µl) al pocillo de la muestra (S) del dispositivo de detección; a Sensibilidad relativa
continuación añada 1 gota de tampón (aproximadamente 40 µl) y ponga en macha el cronómetro.
Consulte la ilustración que aparece más abajo. Se han analizado un total de 606 muestras positivas para VIH usando el dispositivo de detección
Para muestras de sangre completa obtenidas por venopunción: mantenga el cuentagotas en posición rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para sangre
vertical y transfiera 2 gotas de sangre completa (aproximadamente 50 µl) al pocillo de la muestra (S) completa/suero/plasma) y una prueba disponible en el mercado (Tabla 1). La sensibilidad relativa del
del dispositivo de detección; a continuación añada 2 gota de tampón (aproximadamente 80 µl) y análisis es >99% (intervalo de confianza del 95% : 99,4 – 100%).
ponga en marcha el cronómetro. Consulte la ilustración que aparece más abajo.
Para muestras de sangre completa obtenidas por punción digital: Tabla 1: sensibilidad del dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana
• Si se usa un tubo capilar: llene el tubo capilar y transfiera aproximadamente 50 µl de VIH 1/2/O Tri-line (para sangre completa/suero/plasma)
sangre completa de punción digital al pocillo de la muestra (S) del dispositivo de detección;
Número de Positivos en VIH 1/2/O Positivos en la
a continuación añada 2 gotas de tampón (aproximadamente 80 µl) y ponga en marcha el Tipo de
Población muestras prueba disponible
cronómetro. Consulte la ilustración que aparece más abajo. muestra Tri-line
analizadas en el mercado
• Si se usan gotas suspendidas: deje que 2 gotas suspendidas de sangre completa obtenida VIH-1 Suero 400 400/400 (100%) 400/400 (100%)
por punción digital (aproximadamente 50 µl) caigan en el centro del pocillo de la muestra (S) VIH-2 Suero 160 160/160 (100%) 160/160 (100%)
del dispositivo de detección; añada a continuación 2 gotas de tampón (aproximadamente VIH-1 Serotipos A-K Plasma 43 43/43 (100%) 43/43 (100%)
80 µl) y ponga en marcha el cronómetro. Consulte la ilustración que aparece más abajo. VIH-1 Subtipo O Plasma 3 3/3 (100%) 3/3 (100%)
3. Espere hasta que aparezcan las líneas coloreadas. Lea los resultados transcurridos 10 minutos. Total 606 606/606 (100%) 606/606 (100%)
No interprete los resultados después de 20 minutos.
Se han analizado 32 paneles de seroconversión en comparación con la prueba disponible en el
mercado. Cada panel está formado por muestras secuenciales obtenidas de un único individuo durante
la seroconversión. Los 32 paneles de seroconversión constaban de 191 muestras. Los resultados de
este estudio se muestran en la tabla 2. El dispositivo VIH 1/2/O Tri-line detectó anticuerpos en la
misma sangre (25 paneles) o en una sangre anterior (3 paneles) que la prueba disponible en el
mercado en 28 de los 32 paneles. Hubo dos paneles que el dispositivo VIH 1/2/O Tri-line detectó una
muestra después que la prueba disponible en el mercado. La última muestra de la serie solo fue
detectada por el VIH 1/2/O Tri-line en dos paneles.
Se han analizado un total de 42 muestras de seroconversión anteriores con el dispositivo de detección
rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para sangre
completa/suero/plasma) y con la prueba disponible en el mercado. Los resultados son conformes a las
últimas innovaciones del sector.
Se han analizado un total de 50 muestras positivas nuevas usando el dispositivo de detección rápida
del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para sangre completa/suero/plasma) y
una prueba disponible en el mercado (Tabla 2).
Tabla 2: comparación del dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana
VIH 1/2/O Tri-line (para sangre completa/suero/plasma) en muestras nuevas con una prueba
disponible en el mercado
Número de Positivos en la
Positivos en VIH
Tipo de muestra muestras prueba disponible
1/2/O Tri-line
analizadas en el mercado
Sangre completa 50 50/50 (100%) 50/50 (100%)
 Especificidad relativa 6. Greenberg AE, Wiktor SZ, DeCock KM, Smith P, Jaffe HW and Dondero TJ Jr. HIV-2 and
Se han analizado un total de 1.511 muestras negativas para VIH usando el dispositivo de detección natural protection against HIV-1 infection. Science (1996) 272:1959-1960.
rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para sangre 7. References for external control vendors: hytest@hytest.fi, rkormind@hemabio.com,
completa/suero/plasma) y una prueba disponible en el mercado (Tabla 3). La especificidad relativa de www.seracare.com
la prueba es del 99% (intervalo de confianza del 95%: 98,0 - 99,2%). 8. Louie B, Pandori MW, Wong E, Klausner JD, Liska S. Use of an acute seroconversion panel to
evaluate a third-generation enzyme-linked immunoassay for detection of human immunodefiency
Tabla 3: especificidad del dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana virus-specific antibodies relative to multiple other assays. Journal of Clinical Microbiology. (2006)
VIH 1/2/O Tri-line (para sangre completa/suero/plasma) 44(5):1856-8.
Número de Negativos en la 9. Beelaert G, Vercauteren G, Fransen K, Mangelschots M, De Rooy M, Garcie-Ribas S, van der
Muestras Negativos en VIH prueba Groen G. Comparative evaluation of eight commercial enzyme linked immunosorbent assays and
Población muestras disponible en
analizadas 1/2/O Tri-line 14 simple assays for detection of antibodies to HIV. Journal of Virological Methods. (2002)
analizadas el mercado
105(2): 197-206.
Negativo Suero/plasma 200 190/200 (95%) 180/200 (90%) 10. Kwon JA, Yoon SY, Lee CK, Lim CS, Lee KN, Sung HJ, Brennan CA, Devare SG. Performance
clínico evaluation of three automated human immunodeficiency virus antigen-antibody combination
Sustancias immunoassays. Journal of Virological Methods. (2006) 133(1): 20-26.
potencialmente Plasma 100 91/100 (91%) 81/100 (81%)
interferentes
Centros de Índice de Símbolos
donación de Suero 1.000 1.000/1.000 (100%) 997/1.000 (99%) Consulte las Representante
sangre Pruebas por kit
instrucciones de uso autorizado
Mujeres Solo para uso de
Suero 211 211/211 (100%) 209/211 (99%) Caducidad No reutilizar
embarazadas diagnóstico in vitro
Total 1.511 1.492/1.511 (99%) 1.467/1.511 (97%)
Almacenar entre Número de lote REF Nº de referencia
Sangre completa frente a suero frente a plasma 2-30°C
Se analizaron un total de 50 muestras de sangre completa seronegativas con su suero y plasma
correspondientes procedentes de China y 50 muestras de sangre completas seronegativas con su
plasma correspondiente procedentes de Europa usando el dispositivo de detección rápida del virus de
la inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para sangre completa/suero/plasma) (Tabla 4). Se
obtuvo una muy buena correlación de resultados entre las muestras de sangre completa, suero y
plasma con muestras VIH negativas. Abon Biopharm (Hangzhou) Co., Ltd.
#198 12th Street East, Wellkang Ltd
0459 Suite B, 29 Harley Street
Tabla 4: comparación de la especificidad del dispositivo de detección rápida del virus de la Hangzhou Economic & Technological
inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para sangre completa/suero/plasma) en muestras de Development Area, LONDON, W1G 9QR, U.K.
sangre completa seronegativas y suero y plasma correspondientes Hangzhou, 310018, P.R.China
Tipo de muestra Número de muestras Negativos en VIH 1/2/O
analizadas Tri-line
Suero 50 50/50 (100%)
Plasma 100 100/100 (100%)
Sangre completa 100 100/100 (100%) Número: 1156047201
Fecha efectiva: 2012-01-11
Se analizaron un total de 50 muestras seropositivas procedentes de Europa (sangre completa con su
plasma correspondiente) y 26 muestras seropositivas procedentes de China (sangre completa, suero y
plasma) usando el dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH
1/2/O Tri-line (para sangre completa/suero/plasma) (Tabla 5). Se obtuvo una muy buena correlación
de resultados entre las muestras de sangre completa y sus plasmas correspondientes con muestras VIH
positivas.

Tabla 5: comparación de la sensibilidad del dispositivo de detección rápida del virus de la

inmunodeficiencia humana VIH 1/2/O Tri-line (para sangre completa/suero/plasma) en muestras de
sangre completa seropositivas y con su suero y plasma correspondiente
Positivos en la
Número de muestras Positivos en VIH
Tipo de muestra prueba disponible en
analizadas 1/2/O Tri-line el mercado
Suero 26 26/26 (100%) 26/26 (100%)
Plasma 76 76/76 (100%) 76/76 (100%)
Sangre completa 76 76/76 (100%) 76/76 (100%)
Precisión
Intraensayo
La precisión intraanálisis se ha determinado usando 10 replicados de cuatro muestras: una negativa,
una positiva baja, una positiva media y una positiva alta. Los valores negativo, positivo bajo, positivo
medio y positivo alto se identificaron correctamente más del 99% de las veces.
Interensayo
La precisión entre análisis se determinó mediante 10 ensayos independientes en las mismas cuatro
muestras: una negativa, una positiva baja, una positiva media y una positiva alta. Se han analizado tres
lotes diferentes del dispositivo de detección rápida del virus de la inmunodeficiencia humana VIH
1/2/O Tri-line (para sangre completa/suero/plasma) usando las muestras negativa, positiva baja,
positiva media y positiva alta. Las muestras se identificaron correctamente más del 99% de las veces.
CARACTERÍSTICAS DE RENDIMIENTO
Reacción cruzada
No se observó reactividad cruzada cuando se analizaron muestras positivas para otras enfermedades
como hepatitis C, sífilis, mononucleosis infecciosa, CMV, H. pylori y toxoplasmosis. Se observó una
cierta reacción cruzada con muestras positivas para IgM frente al EBV, HBsAg, malaria y factor
reumatoide.
Sustancias interferentes
No se observaron interferencias en muestras con altas concentraciones de hemoglobina (hemolítica),
bilirrubina (ictérica), ácido oxálico, ácido ascórbico, ácido gentísico, acetaminofeno, ácido
acetosalicílico, cafeína, ácido úrico y metanol.
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