Morfología de los fitopatógenos fungosos Sclerotinia sclerotiorum

(Lib.) de Bary en lechuga (Lactuca sativa) , Slerotinea minor

Jagger, Botrytis cinérea Pers. en fresa (Fragaria) y Rhizopus
stolonifer Ehrenb.: Fr.

Resumen:
Cada año hay grandes pérdidas a nivel mundial causadas por diferentes fitopatógenos, para
poder hacer frente a esta situación es necesario conocer al fitopatógeno. En esta práctica se
observan las características morfológicas de los fitopatógenos Sclerotinia sclerotiorum,
Slerotinea minor, Rhizopus stolonifer y Botrytis cinerea, así como la sintomatología que
causa Sclerotinia sclerotiorum en lechuga (Lactuca sativa), Botrytis cinerea en fresa
(Fragaria)

Introducción:
Los hongos del género Sclerotinia, en particular S. sclerotiorum y S.minor ocasionan
pudrición blanda o caída de la lechuga, tal como lo dice Subbarao, 2002 citado por
Romero, J. 2015. La planta se puede enfermar en cualquier etapa de desarrollo, y también
durante el transporte y almacenamiento (George N.Agrios, 2004). De igual manera Botrytis
cinérea es un hongo fitopatógeno causante de la enfermedad conocida como podredumbre
gris, la cual afecata a un gran número de cultivo impotantes economicamente, (Reino J.
2004). Por su parte, el genero Rhizopuz esta compuesto por diferentes especies, entre ellas
destacan Rhizopus stolonifer, el causante de provocar enfermedades de postcosecha
ocasionando pudrición blanca de la fruta y hortalizas provocando grandes pérdidas
económicas. Debido a las grandes perdidas que produce cada uno de dichos patógenos es
de gran importancia su estudios, es por ello que este trabajo se realizo con el objetivo de
identificación y caracterización morfológica de S. sclerotiorum, S.minor , Rhizopus sp.y
Botrytis sp.

MATERIALES Y MÉTODOS:

Material vegetal

Se utilizaron ejemplares de lechugas (lactuca sativa) infectadas con sclerotinia

sclrerotiorum. Tambien, se utilizaron fresas Fregaria infectadas con Botrytis cinerea.

Material Fungico
Cultivos en placas petri de Sclerotinea minor y Rhizopus stolonifer

Materiales de laboratorio
Microscopio
Portaobjetos
Cubreobjetos
Azul de metileno
Lanceta
Preparación para el microscopio:

Para la preparación de la muestra de Slerotinea sclerotiorum se colocó una pequeña gota de

azul de metileno al porta objetos, posterior a eso, se tomó una pequeña cantidad de micelio
que sobresalía de las partes afectadas de la lechuga con una lanceta previamente
desinfectada con alcohol y en la llama del mechero, cuando el micelio ya este sobre la gota
de azul de metileno, colocamos un cubreobjetos. Para Botrytis cinerea se hace exactamente
lo mismo, pero en este caso, el micelio sobre la fresa es de un color grisacio, finalemte para
Sclerotinea minor y Rhizopus stolonifer la muestra es recogida de un cultivo del hongo.

RESULTASOD Y DISCUSIÓN

Taxon del hongo Sclerotinia sclerotiorum y Slerotinia minor causantes de la pudrición

blanca en Lactuca sativa

Dominio ________ Eukaryota

Regno__________ Fungi
Phylum ____________ Ascomycota
Subphylum________Pezizomycotina
Classe ______________ Leotiomycetes
Ordine___________ Helotiales
Familia______________ Sclerotiniaceae
Género _________ Sclerotinia
Especie______ Sclerotinia sclerotiorum y Slerotinia minor

Ubicación taxonómica tomada de EPPO

Características:

Sclerotinia sclerotiorum y Slerotinia minor son hongos omnívoros, pertenecientes a los

ascomicetos, causantes de la pudrición blanca, una de las enfermedades más extendidas y
peligrosas de las distintas plantas cultivadas, esta fue descubierta por primera vez en 1837
por Libert, (Walker, 1975). Estos hongos puede sobrevivir en el suelo y en residuos del
cultivo, bajo sus estructuras de esclerocios (estructura de resistencia), una vez dadas las
condiciones propicias para que estos hongos se desarrolle, los esclerocios empezaran con el
proceso de germinación que se puede presentarse de dos formas; Carpogénica y
Micelogenica, como se muestra en la figura 1, (A y B).

A) Carpogénica: Produce apotecios los cuales forman ascosporas que se trasportan a

través del viento hacia plantas susceptibles Figura 1, (A). Los apotecios son de color
negros y son estructuras que tienien una forma de copa (C) y ahí, se encuentran las
ascas, una especie de bolsa que libera las ascosporas (D). Figura 1. Finalmente, la
ascosporas germinan, y empieza a infectar a la planta, hasta que el hongo entra
formar esclerocios.
 B) Miceliogénica, en la cual el esclerocio produce un micelio que ataca las partes de la
planta que están en contacto con la superficie del suelo (B), (Berlín, 1998 citado por
Romero, J. 2015), Figura 1.

Figura 1. Ciclo Biologico de Sclerotinia sclerotiorum y Slerotinia minor.

La infeccion inicia desde las hojas más viejas donde por contacto las hijas se dibide de
forma dicotomicamente fomando una masa de hifa, estas se adiheren por sustancias
mucilaginosas a la superficie del tejido vegetal y por presión mecanica y secreción de
enzimas penetran la cutícula y la epidermis, (Smith, A, 2007).

Las lechugas proporcionadas por la Dra. Dina, ya pesentaba una notable sintomatologia. El
primer sintoma que sale a la vista es la pudrion que va desde las hojas más supeficiales
hacia las interiores, esta pudrición en etapa temprana comienza como una zona humeda.
Los signos que presentaba nuestra muestra (lechuga) eran micelio abundante de color
blanco el la parte del tallo(A). Figura 2.
 A

Figura 2. Fotografias tomadas a la muestra de laboratorio.

En la observación al microscopio de Sclerotinia sclerotiorum notamos la presencia de hifas

ramificadas, hialinas y tabicada, tenia un grosor considerable a diferencia de otras hifas
Figura 3. En compracion con Slerotinia minor, presento hifas hialinas, delgas en
comparación con Sclerotinia sclerotiorumm no tabicadas y ramificadas. Figura 4.

Figura 4

Figura 3 B
A

Figura 3. (A) Fotografía propia de hifas de S. sclerotiorum tomadas en microscopio. Hifas

de S. sclerotiorum,(Web), B). Figura 4. Fotografía propia de Slerotinia minor.

Cada especie tiene características morfológicas de los esclerocios, como la forma y el

tamaño. La principal característica de S. minor son: esclerocios redondos con un diámetro
de 0.5 a 2mm (A)y ascosporas tetranucleadas (Smith, A, 2007). Los esclerocios se forman
lateralmente en las hifas y en estas hay cuatro cromosomas haploides, Figura 5.

Sclerotinia sclerotiorum presenta esclerocios irregulares de 2- 20 x 3 – 7 mm (B), estos se

forman en posición terminal en las hifas y tienen 8 cromosomas haploides. Cada esclerocio
puede germinar carpogénicamente y producir más de dos apotecios (D) a diferencia S.
minor ya que rara vez tiene germinación carpogénica y produce apotecios (C) Figura 5.
 Figura 5. A y C Esclerocios y germinación
miceligénica de S. minor, y B y D: esclerocios y
germinación de S. sclerotiorum.

Botrytis cinerea

El hongo Botrytis cinerea es un hongo que se desarrolla rápidamente y ataca a las verduras,
plantas ornamentales, frutales, vid y frutas y hortalizas en fase de postcosecha.

Taxón de Botrytis cinérea.

Reino___ Hongos
Filo_____ Ascomicota
Subphylum_______ Pezizomycotina
Clase_________ Leotiomycetes
Orden _________ Helotiales
Familia ___________Sclerotiniaceae
Género___________ Botrytis
Especie______________ B. cinerea

Ubicación taxonómica de botrytis. (EPPO)

Ciclo biológico

Es un hongo Deuteromicetes, que se reproduce por vía asexual mediante la producción de

conidias. También, se clasifica como un hongo imperfecto, debido a la ausencia o falta de
conocimiento de una fase sexual de reproducción.

El Botrytis sclerotiorum produce abundante micelio gris y varios conidióforos largos y

ramificados, las células redondeadas producen racimos de conidios ovoides, unicelulares,
incolos o de color gris. En condiciones ambientales desfavorables se conserva en forma de
esclerocios y, en condiciones favorables, el hongo produce una capa de hifas en los tejidos
afectados, luego produce conos hidrófobos que se liberan al aire y se difunden por el
viento. Las conidias una vez que llegan al hospedador se fijan a la superficie vegetal y
producen túbulos germinativos de los cuales salen hifas que penetran en el vegetal y forman
un moho gris en la parte infectada. Pero en algunos casos dichos esclerocios germinan
produciendo apotecios. (George N.Agrios, 2004) Figura 6.

Figura 6. Ciclo de Botrytis cinerea en la fresa. Las fuentes de inóculo de B. cinerea

incluyen hojas infectadas y esclerocios. Representación de las infecciones primarias de las
flores y las infecciones secundarias de las frutas.

Sintomatología

La sintomatología varía dependiendo de la parte afectada de la planta y el estado

fisiológico, Las hojas nuevas, recientemente expandidas, se infectan sin mostrar síntomas
debido a que el hongo permanece inactivo (latente) en estos tejidos. Cuando las hojas
infectadas maduran, al iniciar la senescencia, el hongo puede activarse y producir una
cubierta aterciopelada gris en las partes muertas de la hoja. Además, B. cinerea puede
infectar las flores y causar su pudrición. Las flores sintomáticas muestran lesiones de color
café́ en los pétalos y en el receptáculo (la parte central, pequeña y verde, de la flor que
eventualmente se desarrolla en fruta), y en los sépalos (Figuras 7 ). Si el moho gris continúa
desarrollándose en la flor, el patógeno matará al pedúnculo (el tallo verde en el que se
apoya la fruta) (Figura 7), causando la marchitez y muerte tanto de la flor entera como de la
fruta inmadura. (Koike, S., 2016)
Figura 7. Flores, con tejidos descoloridos y de color café, infectados con Botrytis cinerea.

La infección se puede dar tanto en campo como en el almacenaje, empieza cuando se dan
las condiciones de humedad y temperatura para que el hongo se desarrolle. Durate estra
práctica se utilizó frasas que provenian de empaque, los sintomas que presentaba el
material vegetal fuero: Tipo polvo en el furto (conidias) de color gris, presentaban
pudrición, perdida de turgencia del fruto y tejido blando. También, es común que presente
manchas color marrón claro, zonas acuosas. Figura 8. Certis Belchim, 2023.

Figura 8
Observación en micorscopio: Al hacer la preparación y mirarla en el micrsocopio, vimos
micelio, el cual es el conjunto de hifas, esta eran tabicados, hialinas y ramificadas de
manera irregula.
Los conidióforos o macroconidióforos se originan principalmente de la masa hifal, aunque
también pueden hacerlo a partir de los esclerocios. Romero A.et al, 2018. Los conidioforos
que presentaba la preparación eran grises y ramificados. Figura 9.
Figura 9. Fotografia de Biblioteca Digital. Conifioforo y conidios visto desde el
microscopio.

Los conidios o macroconidios constituyen la principal estructura de dispersión del hongo

así como, una de las estructuras de resistencia que presenta B. cinerea. Romero A. et al,
2018. Los conidios son esporas asexuales del hongos, estos son pequeños, redondos a
ovalados y se encuentran ubicadas en el extremo del conidioforo. Figura 9.

Aunque no vimos esclerocios en la práctica es fundamnetal conocerlos, debida a que ellos

son las principales estructuras de resistencia de B. cinerea. Son órganos pluricelulares, de
morfología plano-convexa, cuyas dimensiones oscilan entre 1-5 mm de sección transversal
y 1-15 mm de sección longitudinal, dependiendo de las condiciones de cultivo B. cinerea
Figura 10.

Fifura 10. Micelio y esclerocio.

Rizopus

Reino ___________Hongos
Phylum ____________Zygomycota
Clase __________________Mucoromycotina
Pedir  ______________________Mucorales
Familia _______________________Mucoraceae
Género ___________________________Rhizopus

Ubicación taxonomica de Rhizopus spp. EPPO, 2002. (Codigo EPPO RIZPAR).

Las especies de Rhizopus producen esporas asexuales y sexuales. En Rhizopus, el

esporangio es soportado por una gran columela apofisada, y el esporangióforo asoma entre
rizpodes distintivos. Zigosporas negras se producen después de dos fusiones compatibles
de micelios durante la reproducción sexual. Y hacen colonias que pueden ser genéticamente
diferentes de sus padres. (Naturalista s/f.)

Las características más importantes para identificar morfológicamente a los hongos son las
esporas (forma, tamaño y color) y los cuerpos fructíferos (N, Agrios, 2001).
Cuando la preparacion se vio en el microscopios notamos las siguientes caracteristicas
morfologicas: Presentaban micelio hialino, cenocitico. Los esporangióforos eran largos y
sin ramificar. Tambien, presentaban estolones y rizoides. Por su parte los esporangios son
hialinos, esfericos y algunos de ellos se encontraban abiertos liberando esporangiósporas,
tambien era facil ver la columela. Figura 11.

Figura 11. Rizopus visto desde el microscopio. Fotografia porpia.

El genero Rizopus un género de mohos que incluyen especies cosmopolitas de hongos
filamentosos hallados en el suelo, degradando frutos y vegetale. En este genero se
encuentran especies fitopatogenas, al analizar las caractéristicas morfologicas vistas en la
clase podemos comprarlo y ver cual especie es la que se acerca más. En este caso debido a
que el hongo presenta estolones, esporangióforos no ramificados y rizoides podemos decir
que se trata de Rhizopus stolonifer.
Bibliografia:

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Asturiana. Recuperado de: http://www.serida.org/pdfs/3814.pdf
(Eppo global database, https://gd.eppo.int/taxon/SCLESC)
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sclerotiorum en presencia de bicarbonato de potasi. Recuperado de:
https://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0185-33092018000300363
Smith A. 2007. Caracterización, análisis y manejo integrado del Moho Blanco (Sclerotinia
minor Jagger y S. Sclerotiorum (Lib.) de Bray) en lechuga. Recuperado de:
https://repository.javeriana.edu.co/bitstream/handle/10554/8318/tesis292.pdf?
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Sclerotinia sclerotiorum. s/f. Podredumbre blanca recuperado de:
https://www.mapa.gob.es/ministerio/pags/plataforma_conocimiento/fichas/pdf/fd_262.pdf
Koike, S. 2016. El Moho Gris, o Pudrición de fresa. Recuperado de:
https://ucanr.edu/blogs/fresamora/blogfiles/37849.pdf
Romero A.et al, 2018. Botrytis, biología del patógeno: la base de un control químico
eficiente. Recuperado de: https://www.syngentaornamentales.co/news/articulo/botrytis-
biologia-del-patogeno-la-base-de-un-control-quimico-eficiente
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Levia. M. 2019. Agresividad diferencial entre aislados de Botrytis cinerea Pers en
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