Calidad y Seguridad en el Laboratorio PROBLEMAS U.T.

PROBLEMA 1

Se desea realizar la validación de un procedimiento interno para la determinación de

nitratos en agua de red.
Se dispone de un extracto de un documento sobre requisitos legales, exigible a los métodos de
análisis de agua de red ( Anexo I ).
Se dispone de tres materiales de referencia de aguas, similares a las de la red. Los extractos de
los certificados de dichos materiales se presentan en el Anexo II.
El Laboratorio dispone de un método para la determinación de la concentración de nitratos
mediante la utilización de espectrofotometría UV-Vis, y de datos del control de dicho
procedimiento que venía realizando sobre los materiales de referencia ( Anexo III ).

Establecer el proceso de validación y decidir si el método es apto para el uso previsto.

ANEXO I
DOCUMENTO: DIRECTIVA AGUA RED
MÉTODO: DETERMINACIÓN DE NITRATOS
REQUISITOS: VALOR PARAMÉTRICO: 50 ppm
EXACTITUD: 10 %
PRECISIÓN: 10 % ( REPRODUCIBILIDAD INTRALABORATORIO )
LÍMITE DE DETECCIÓN: 5 % DEL VALOR PARAMÉTRICO

ANEXO II
EXTRACTO CERTIFICADOS MATERIALES DE REFERENCIA
REFERENCIA CONTENIDO EN NITRATO INCERTIDUMBRE (K=2)
1228 5,00 ppm ± 0,08 ppm
1240 20,6 ppm ± 0,2 ppm
1270 50,2 ppm ± 0,4 ppm
NOTA: Los certificados incluyen todos los datos adicionales necesarios para ser
considerados adecuados, como por ejemplo: Nombre del certificador, sistema de
obtención del valor de la propiedad, incertidumbre, caducidad, instrucciones de manejo y
conservación.

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DATOS DE CONTROL: MÉTODO DE DETERMINACIÓN DE NITRATOS

FECHA BLANCO PATRÓN 1 PATRÓN 2 PATRÓN 3
1/01/08 0,37 5,25 50,4
15/01/08 0,42 4,79 20,8
30/01/08 0,41 5,1 50,8
15/02/08 0,38 20,3 49,6
1/03/08 0,43 4,96 21,1
30/03/08 0,37 5,2 49,8
15/04/08 0,39 20,2 50,5
30/04/08 0,47 5,14 20,3
15/05/08 0,40 5,22 52,1
1/06/08 0,41
15/06/08 0,39 4,85 21,3
1/07/08 0,38 22,5 51,6
15/07/08 0,44 5,16 52,4
1/09/08 0,41 4,89 21,2 49,7
30/09/08 0,40 5,34 20,8 50,9
15/10/08 0,39 5,12 22,4 48,8
1/11/08 0,40 20,2 51,4

SOLUCIÓN
En base a los datos disponibles se puede plantear la validación teniendo en cuenta que:
1) Existen datos legislativos que nos permiten definir requisitos.
2) Disponemos de materiales de referencia en el rango bajo, medio y alto.
3) Se han realizado suficientes ensayos en condiciones de reproducibilidad.

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Como se dispone de datos legislativos (se definen los requisitos de validación) será preciso
calcular la exactitud y la precisión del método con los datos experimentales obtenidos para cada uno
de los patrones.

E = 100 x {( VR – Vm ) / VR } P = 100 x ( S / Vm ) siendo Vm valor medio experimental

patrón 5.00 ppm 20.6 ppm 50.2 ppm

n 12 11 12
Vm 5.09 21.01 50.67
S 0.17 0.82 1.08
E (%) 1.80 1.99 0.94
P (%) 3.34 3.90 2.13

Para los tres rangos de concentración del patrón se cumple que, tanto para la exactitud como para
la precisión, sus valores son inferiores al 10 % que marcan los requisitos de validación; por tanto, el
método cumple estos dos requisitos de validación.

Para el límite de detección se utiliza la fórmula: LD = 3 σblanco

σblanco = 0.02596 ≈ 0.026

LD = 3 σblanco = 3 * 0.02596 = 0.078 ppm

Requisito de validación: LD = (5 * 50 ) / 100 = 2.5 ppm

Como LD experimental (0.078 ppm) < LD validación (2.5 ppm) → CUMPLE especificación.

Por tanto, el MÉTODO ES VÁLIDO

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PROBLEMA 2: Un laboratorio desea validar un método de determinación del grado

alcohólico en vinos, obteniendo al mismo tiempo la incertidumbre de dicho procedimiento.
Para ello, cuenta con un material de referencia cuyos datos se encuentran en el ANEXO I.
En el laboratorio se realizan 10 series de determinaciones sobre el material de referencia, en días
diferentes y por el mismo analista, con tres repeticiones de cada serie en el mismo día. Los datos se
presentan tabulados en el ANEXO II.
El Laboratorio considera que las muestras que recibe son más heterogéneas que el material de
referencia, y realiza series de 5 repeticiones (distintos días, distintos analistas) sobre 6 muestras que
representan el universo de muestras recibidas. Los datos se presentan tabulados en el ANEXO III.
Estimar la incertidumbre de medida, cuando se realice el ensayo, teniendo en cuenta que el
resultado se obtiene como media de dos determinaciones analizadas por distintos analistas.

ANEXO I
MATERIAL DE REFERENCIA VALOR 10,25 % I = 0,04 ( k = 2 )

ANEXO II
DÍAS R1 R2 R3 MEDIA DESV. EST.
1 10.25 10.24 10.23 10.24 0.01
2 10.24 10.25 10.26 10.25 0.01
3 10.25 10.24 10.23 10.24 0.01
4 10.22 10.21 10.22 10.22 0.01
5 10.21 10.22 10.23 10.22 0.01
6 10.24 10.25 10.28 10.26 0.02
7 10.25 10.25 10.27 10.26 0.01
8 10.24 10.23 10.25 10.24 0.01
9 10.23 10.24 10.26 10.24 0.02
10 10.22 10.21 10.25 10.23 0.02

ANEXO III
MUESTRA RD1 RD2 RD3 RD4 RD5 MEDIA Sm
VINO
1 11.80 11.85 11.85 11.90 11.90 11.86 0.04
2 11.20 11.00 11.20 11.10 11.00 11.10 0.10
3 11.60 11.70 11.55 11.60 11.65 11.62 0.06
4 11.50 11.50 11.55 11.45 11.40 11.48 0.06
5 11.20 11.25 11.30 11.25 11.20 11.24 0.04
6 11.70 11.75 11.65 11.80 11.85 11.75 0.08

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PROBLEMA Nº 2 U.T. 5

VALIDACIÓN MÉTODO DETERMINACIÓN GRADO ALCOHÓLICO EN VINOS

MATERIAL REFERENCIA ( ANEXO I )

Valor (%) 10,25

U (%) ± 0,04 K = 2

MEDIDAS MATERIAL DE REFERENCIA ( ANEXO II )

DIA % Des. Est. S^2

1 10,24 0,0100 0,0001
2 10,25 0,0100 0,0001
3 10,24 0,0100 0,0001
4 10,22 0,0100 0,0001
5 10,22 0,0100 0,0001
6 10,26 0,0200 0,0004
7 10,26 0,0100 0,0001
8 10,24 0,0100 0,0001
9 10,24 0,0200 0,0004
10 10,23 0,0200 0,0004
Media 10,24 0,0130

Datos = 10 W= 1 t tabulada = 2,24

MEDIDAS MUESTRAS CONOCIDAS ( ANEXO III )

Des.
Muestra % Est. S^2
1 11,86 0,04 0,0016
2 11,1 0,1 0,01
3 11,62 0,06 0,0036
4 11,48 0,06 0,0036
5 11,24 0,04 0,0016
6 11,75 0,08 0,0064
Media 11,50833

REPLICAS MUESTRAS DESCONOCIDAS = 2

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1) Verificar la trazabilidad de las medidas, comparando el valor del Índice de compatibilidad con el
valor de referencia ( IC = 2 )
2) Calcular todas las incertidumbres.

V p  Vm
IC =
INDICE DE COMPATIBILIDAD
U 2
MR  U mMR
2


I.C. = 0,49 DECISIÓN: TRAZABLE

S MR
INCERTIDUMBRE DE PRECISIÓN Up = siendo n = nº réplicas
n
muestra problema
Uprec ^2 = 0,0000845 Uprec. = 0,0092 %

INCERTIDUMBRE DE TRAZABILIDAD
Utrazab = U 2
MR  U mMR
2


Utrazab.^2 = 4,1690E-04 Utrazab = 0,0204 %

I MR
UMR = 0,0200 % UMR =
k
UMR^2 = 0,0004
S MR
UmMR = 
UmMR = 0,0041 % N

UmMR^2 = 1,6900E-05

INCERTIDUMBRE PROCESO Uproceso =

S i
2

Uproceso^2 = 0,0045 Uproceso = 0,0668 %

INCERTIDUMBRE COMBINADA

Ucomb. = U 2
prec  U traz
2
 U proc
2

Ucombinada^2 = 4,9681E-03

Ucombinada = 0,07 %

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PROBLEMA 3: Se desea validar un método para determinación de clenbuterol en carne de

animales, obteniendo al mismo tiempo la incertidumbre de dicho procedimiento.
Para ello, cuenta con un material de referencia certificado ( ANEXO I ).
En el laboratorio se realizan 10 series de determinaciones sobre el MRC, por distintos analistas y
equipos, en diferentes series cada día. Los datos se presentan en el ANEXO II.
El Laboratorio considera que las muestras que recibe son más heterogéneas que el material de
referencia, y realiza 3 análisis (mismo analista, mismo equipo) sobre cada una de las 6 muestras
que representan el universo de muestras recibidas. Los datos, referidos a las media de los tres
análisis (en g/Kg ) y su Desviación estándar se presentan tabulados en el ANEXO III.
Estimar la incertidumbre expandida de medida, cuando se realice el ensayo, teniendo en
cuenta que el resultado se obtiene al analizar una única muestra problema.

ANEXO I
MRC CLEMBUTEROL EN HÍGADO LIOFILIZADO 1,21 ± 0,11 g/Kg ( k = 2,2 )

ANEXO II (en g/Kg)

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 media S
1,21 1,28 1,32 1,34 1,36 1,19 1,25 1,30 1,26 1,22 1,27 0,057

ANEXO III (en g/Kg)

1 2 3 4 5 6 Muestra
1,05 1,08 1,01 1,17 1,22 1,12 media
0,05 0,03 0,07 0,04 0,06 0,07 S

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PROBLEMA Nº 3 U.T. 5

VALIDACIÓN MÉTODO DETERMINACIÓN CLEMBUTEROL EN CARNES

MATERIAL REFERENCIA ( ANEXO I )

µg/Kq 1,21
U
(µg/Kq)
± 0,11 K = 2,2

MEDIDAS MATERIAL DE REFERENCIA ( ANEXO II )

DIA µg/Kq Des. Est.

1 1,21
2 1,28
3 1,32
4 1,34
5 1,36
6 1,19
7 1,25
8 1,3
9 1,26
10 1,22
Media 1,27 0,0570

Datos = 10 W= 1

MEDIDAS MUESTRAS CONOCIDAS ( ANEXO III )

Des.
Muestra µg/Kq Est. S^2
1 1,05 0,05 0,0025
2 1,08 0,03 0,0009
3 1,01 0,07 0,0049
4 1,17 0,04 0,0016
5 1,22 0,06 0,0036
6 1,12 0,07 0,0049
Media 1,11

REPLICAS MUESTRAS DESCONOCIDAS = 1

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INDICE DE COMPATIBILIDAD

I.C. = 1,19

DECISIÓN : TRAZABLE

INCERTIDUMBRE DE PRECISIÓN Uprec. = 0,057 µg/Kq

Up^2 = 0,003249

INCERTIDUMBRE DE TRAZABILIDAD Utrazab. = 0,053 µg/Kq

UMR = 0,050 µg/Kq

UMR^2 = 0,003

UmMR = 0,018 µg/Kq

UmMR^2 = 3,2490E-04

Utrazab.^2 = 2,8249E-03

INCERTIDUMBRE PROCESO Uproceso = 0,055 µg/Kq

Uproceso^2 = 0,0031

INCERTIDUMBRE COMBINADA

Ucombinada^2 = 9,1406E-03

Ucombinada = 0,096 µg/Kq

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PROBLEMA 4 : Un laboratorio necesita validar un método para determinar el contenido

de un pesticida (pendimentalin) en muestras de agua potable.
Se han revisado las legislaciones existentes comprobando que, en general, sería necesario
determinar dicho compuesto en aguas naturales en un rango de valores comprendido entre 0,05 ppm
y 1 ppm.
Para ello, se utilizará una recta de calibrado única que irá de 1 a 20 ppm, y un sistema de
extracción en fase sólida que permitirá aumentar el contenido de pendimentalín en el extracto
aproximadamente 20 veces.
La legislación vigente exige que haya una recuperación superior al 80 % y un C.V. < 20 %.
Para la realización de los ensayos se parte de una muestra de agua embotellada que se considera
que no contiene pendimentalín y se realiza la calibración por el procedimiento de adicción estándar
en el rango bajo (0,05 ppm), medio (0,4 ppm) y alto (1 ppm), obteniéndose los resultados que se
presentan en la TABLA 1.
(No se realiza la verificación de la linealidad de la recta, al considerar que cumple los requisitos).
Las adicciones se realizan con material volumétrico calibrado y realizando la composición de
incertidumbres. Las incertidumbres combinadas correspondientes a cada adición son:
0,0015 ppm ; 0,008 ppm ; 0,01 ppm.
Las repeticiones han sido obtenidas en condiciones de reproducibilidad en días distintos y por
analistas distintos, así como con rectas diferentes.

TABLA 1: DATOS INICIALES ANÁLISIS PESTICIDA

MUESTRA ADICIÓN 1 ADICIÓN 2 ADICIÓN 3
DÍA Sin adicionar 0,05 ppm 0,4 ppm 1 ppm
1 0,04 0,065 0,365 0,870
2 0,035 0,058 0,366 0,894
3 0,042 0,071 0,359 0,829
4 0,038 0,068 0,378 0,872
5 0,036 0,056 0,392 0,839
6 0,037 0,066 0,359 0,862
7 0,032 0,059 0,364 0,855
8 0,046 0,074 0,368 0,866
9 0,031 0,059 0,372 0,862
10 0,046 0,071 0,367 0,848

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Como conocemos de la cantidad añadida cada día y el valor que se obtiene al analizar la muestra sin
añadir y después de añadir, podemos construir una tabla de resultados donde se refleje el valor de la
diferencia entre el resultado sin ser muestra añadida y el resultado después de la adición.

0.05 ppm 0.4 ppm 1 ppm

1 0.025 0.0325 0.830
2 0.023 0.331 0.859
3 0.029 0.317 0.787
4 0.030 0.340 0.834
5 0.020 0.356 0.803
6 0.029 0.322 0.825
7 0.027 0.332 0.823
8 0.028 0.322 0.820
9 0.028 0.341 0.831
10 0.025 0.321 0.802
Vm 0.026 0.331 0.821
S 0.003 0.012 0.020

A continuación se calcula la recuperación y el coeficiente de variación:

RECUPERACIÓN = (Valor obtenido / Valor referencia) x 100 C.V. = ( S / Vm ) x 100

0.05 ppm 0.4 ppm 1 ppm

RECUPERACIÓN 52.20 82.70 82.10
C.V. 11.49 3.63 2.44
I.C. 15.93 8.63 17.90

A la vista de los resultados obtenidos se observa que el método no es válido para valores bajos de
concentración (0.05 ppm) porque no cumple el criterio de resuperación superior al 80 %.

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PROBLEMA 5

Un laboratorio desea validar un método para la determinación de grasa para el rango

comprendido entre 2 y 5 % materia grasa.

Para ello, participa en una serie de ejercicios de intercomparación para estos parámetros, de los
que se dispone de los datos que se adjuntan en la TABLA 1.

Para parámetros agroalimentarios, la exactitud se expresa como recuperación.

De los datos disponibles en la bibliografía se deduce que los requisitos establecidos son:

RECUPERACIÓN ≥ 99 % PRECISIÓN ≤ 5 % (referida a la REC,)

TABLA 1 : DETERMINACIÓN MATERIA GRASA EN LECHE

% materia grasa Sr N Valor referencia Sd N Z
1 3,562 0,004 2 3,555 0,012 16 0,514
2 4,264 0,001 2 4,262 0,011 16 0,150
3 4,402 0,000 2 4,407 0,015 16 -0,335
4 2,917 0,011 2 2,938 0,014 15 -1,500
5 4,457 0,003 2 4,440 0,016 13 1,214
6 2,497 0,004 2 2,355 0,013 13 0,307
7 3,734 0,001 2 3,750 0,013 14 -1,173
8 3,047 0,001 2 3,038 0,014 12 0,661
9 3,365 0,019 2 3,391 0,017 15 -1,913
10 2,601 0,013 2 2,581 0,017 14 1,362
NOTA: El valor de referencia es la media de los valores obtenidos por todos los laboratorios participantes.

Aplicar el test t de Student para verificar si existen o no diferencias significativas.

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Al tratarse de un ejercicio de intercomparación (interlaboratorio), y dado que el valor que se

toma como referencia es la media de los valores obtenidos por todos los laboratorios participantes,
lo primero que debemos hacer es calcular los errores entre los valores de referencia y los valores
obtenidos por el laboratorio que desea validar el método ( Diferencia = Error = Vref - Vmuestra ).
Posteriormente se calcula el valor medio de las diferencias de las 10 muestras y su desviación
estándar.
Para la aplicación de la t-Student se toma como incremento el valor medio de las diferencias, así
como su desviación estándar:

= (0.0129 * 3.1623)/0.0480 = 0.85

ttab (n = 10) (95%) = 2,262  tcal (0.85) < ttab (2.262)  No hay diferencia significativa.

Muestra V lab. V ref. Diferencia % Error Recuperación

1 3,562 3,555 -0,007 -0,1969 100,20
2 4,264 4,262 -0,002 -0,0469 100,05
3 4,402 4,407 0,005 0,1135 99,89
4 2,917 2,938 0,021 0,7148 99,29
5 4,457 4,44 -0,017 -0,3829 100,38
6 2,497 2,355 -0,142 -6,0297 106,03
7 3,734 3,75 0,016 0,4267 99,57
8 3,047 3,038 -0,009 -0,2962 100,30
9 3,365 3,391 0,026 0,7667 99,23
10 2,601 2,581 -0,02 -0,7749 100,77

V medio = -0,0129 -0,5706 100,57

S = 0,0480 1,9797

Diferencia = V ref - V lab.

% Error = (Dif,/V ref),*100
Recuperación = 100 - % error

La RECUPERACIÓN se expresa como: RECUP. = 100 - Error (%) = 100 -(- 0.5706) = 100.57 %
La PRECISIÓN viene marcada por la desviación estándar relativa = 1.98 %

Como RECUPERACIÓN ( 100.57) > 99 %

Como PRECISIÓN (1.98 %) < 5%
Por tanto, EL MÉTODO ESTÁ VALIDADO
NOTA: Podemos calcular el valor de las diferencias de las 10 muestras con una media aritmética, a pesar de
ser muestras diferentes, porque al calcular la diferencia se elimina el problema de ser muestras diferentes.

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PROBLEMA 6

Se desea estimar la incertidumbre para la determinación de extracto seco en una muestra

cuyo resultado de análisis (12,000 %) ha sido obtenido mediante una única repetición.

El método de determinación de extracto seco ha sido validado a partir de ejercicios de

intercomparación (Tabla 1).

La exactitud y precisión del extracto seco se expresan en función de los parámetros de validación
RECUPERACIÓN Y PRECISIÓN (Tabla 2).

TABLA 1 : DETERMINACIÓN DE EXTRACTO SECO

Ensayo Dato Lab. Sr N Valor ref. Sd N Valor Z Di Ei
D=VR-V (VR-V/VR)100
1 11,781 0,005 2 11,809 0,035 16 -0,392 0,028 0,2371
2 12,459 0,001 2 12,473 0,037 18 -0,195 0,014 0,1122
3 12,215 0,028 2 12,180 0,041 14 0,480 -0,035 -0,2874
4 11,055 0,006 2 11,047 0,050 16 0,094 -0,008 -0,0724
5 12,966 0,001 2 13,019 0,010 17 -0,731 0,053 0,4071
6 11,666 0,003 2 11,688 0,013 17 -0,309 0,022 0,1882
7 13,182 0,001 2 13,066 0,030 14 1,608 -0,166 -0,8878
8 12,690 0,002 2 12,672 0,028 13 0,240 -0,018 -0,1420
9 11,664 0,017 2 11,687 0,038 15 -0,328 0,023 0,1968
10 11,409 0,028 2 11,447 0,043 17 -0,537 0,038 0,3320
S 0.3822
Media 0.00838

TABLA 2 : PARÁMETROS DE VALIDACIÓN

Recuperación (%) Expresada como promedio de las exactitudes Ei 99,99
Precisión R (%) Expresada como desviación de las exactitudes 0,38

Rec = (100 – Em)

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En primer lugar podemos verificar que con los datos obtenidos el método está validado. Para ello,
calculamos:
Em = (Suma Ei) / 10 = 0.0084 Recuperación = 100 - Em = 100 - 0.0084 = 99.9916 %
Desviación estándar relativa = 0.3822

Para el cálculo de las incertidumbres debemos calcular la incertidumbre de precisión, la de

trazabilidad y la del proceso (también denominada de reproducibilidad), y después sumarlas
cuadráticamente.

Incertidumbre de precisión
Como material de referencia se utilizan los datos del interlaboratorio, por tanto, la desviación
estándar será ponderada, ya que partimos de diferentes materiales de referencia, y se realiza una
única repetición de la muestra problema.

= 0,0346 % Up2 = 0,0012 % 2

Incertidumbre de trazabilidad
Sólo disponemos de datos de las medidas sobre el material de referencia, y no existe certificado
del mismo, de ahí que se proceda a calcular la incertidumbre de cada una de las muestras patrón de
referencia y después se determine la media ponderada de dichas incertidumbres, con lo que se
obtiene la incertidumbre del material de referencia.

Posteriormente se suman cuadraticamente:

.  U MR  U mMR  7,89E-05 + 0,00012 = 1,99E-04 %

2 2 2 2
U traz

U trazabilidad = 0,0141 %

Todas estas operaciones se incluyen en la siguiente tabla:

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ENSAYO Sd Sd^2 N Ui Ui^2

1 0,035 0,00123 16 8,75E-03 7,66E-05
2 0,037 0,00137 18 8,72E-03 7,61E-05
3 0,041 0,00168 14 1,10E-02 1,20E-04
4 0,05 0,00250 16 1,25E-02 1,56E-04
5 0,01 0,00010 17 2,43E-03 5,88E-06
6 0,013 0,00017 17 3,15E-03 9,94E-06
7 0,03 0,00090 14 8,02E-03 6,43E-05
8 0,028 0,00078 13 7,77E-03 6,03E-05
9 0,038 0,00144 15 9,81E-03 9,63E-05
10 0,043 0,00185 15 1,11E-02 1,23E-04

SUMA Sd^2 = 0,01202 SUMA = 7,89E-04

SUMA Sd^2 / 10
Sp^2 = = 0,0012 UMR^2 = SUMA / 10

Sp = 0,0347 UMR^2 = 7,89E-05

UmMR^2 = (w * (Sp/raiz n))^2 = 0,0038

Incertidumbre del proceso (reproducibilidad)

Se calcula la media ponderada de las desviaciones estándar de las medidas del laboratorio (Sr)

Ensayo 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
Sr 0,005 0,001 0,028 0,006 0,001 0,003 0,001 0,002 0,017 0,028
Sr^2 2,5E-05 1E-06 0,0008 4E-05 1E-06 9E-06 1E-06 4E-06 0,0003 0,0008

U reprod .   S 2
/ 10
.   S r / 10
2 2 r
U reprod 0,00019 2
= %
Finalmente, se suman cuadráticamente estas tres incertidumbres:

U2comb. = U2p + U2traz. + U2repr. = 1.589 * 10-3 Ucomb. = 0.0398 %

Y la incertidumbre expandida será:

Uexpandida = Ucombinada * k ( normalmente k = 2 )

Por tanto: Uexpandida = 0.0398 * 2 = 0.0797 % ~ 0.080 %

El resultado del análisis será: 12.000 ± 0.080 %

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PROBLEMA 7

Calcular el valor (en ppm) de un patrón preparado a partir de un material de referencia

por pesada y disolución, con expresión del resultado final con su incertidumbre asociada.

Para ello, se parte de un patrón sólido de 98% riqueza en peso, se pesan 0,1 g. del mismo, se
disuelven y se aforan a 100 mL.

La tolerancia del material volumétrico es 0,08 mL.

La incertidumbre asociada a la pesada se ha calculado, siendo su valor 3,25 x 10-4 g.

SOLUCIÓN:

Se aplica la fórmula:

Upesada = 3.25 * 10-4 g.

Cantidad pesada = 0.100 g.

Volumen matraz = 100 mL

Tolerancia matraz = 0.08 mL
Umaterial volumetrico = 0.08 / (raiz 3) = 0.046 mL

UMATERIAL REFERENCIA = (100 - % pureza) / (raiz 3)

CMR = Pureza MR = 98 %
UMR = (100 - 98 ) / (raiz 3) = 2 / (raiz 3) = 1.155 %

Cpatrón = 0.1 g. / 100 mL = 1000 ppm Al ser del 98 % → Cpatrón = 980 ppm

Ucombinada = RAIZ { 9802 * [ (1.115/98)2 + (0.046/100)2 + (3.25 * 10-4/0.100)2]} = 11.985 ppm

Uexpandida = U * k = 11.985 * 2 = 23.97 ppm

RESULTADO = 980 ± 24 ppm

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PROBLEMA 8

Calcular la incertidumbre que lleva asociada la preparación de un patrón de 500,0 ppm.

Para ello, pesamos 0,500 g. y lo aforamos a 1 litro.

La incertidumbre de la balanza utilizada es de I = ± 0,1 mg. para k = 2 (sólo se considera esta
incertidumbre).
El matraz de 1 litro utilizado es de clase A, con una tolerancia de ± 0,3 mL a 20 ºC.

SOLUCIÓN:

Se aplica la fórmula:

No proporciona datos del material de referencia → No se utiliza

Upesada = I / k = 0.1 / 2 = 0.05 mg

Cantidad pesada = 500 mg.

Volumen matraz = 1000 mL

Tolerancia matraz = 0.3 mL
Umaterial volumetrico = 0.3 / (raiz 3) = 0.173 mL

Por tanto: Upatrón2 = 5002 * [(0.05 / 500)2 + (0.173 / 1000)2] = 10-2 ppm2

Upatrón = RAIZ (10-2) = 10-1 ppm

Uexpandida = U * k = 10-1 * 2 = 0.2 ppm

RESULTADO = 500.0 ± 0.2 ppm

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PROBLEMA 9: APLICACIÓN DE LA HOJA DE CÁLCULO EXCEL

Se desea calcular la concentración de un determinado compuesto. Para ello, se preparan 5
patrones de concentraciones crecientes y se inyectan en un equipo de GC, obteniéndose los datos:
Conc. Patrón 0,352 0,803 1,08 1,38 1,75
Area pico 1,09 1,78 2,60 3,03 4,01

A continuación, se inyecta la muestra problema y se obtiene un área de pico de 2,65

Realizar:

1. La representación gráfica de la recta de calibración, ajustada por mínimos cuadrados.

2. Calcular la pendiente, la ordenada en el origen, el coeficiente de correlación, la desviación
estándar de la pendiente y la desviación estándar de la ordenada en el origen.
3. Calcular la concentración de la muestra problema.
Y-Yc (Y-Yc)^2 X-Xm (X-Xm)^2 X^2
0,0967 0,0093503477 Xm -0,721 0,519841 0,123904
-0,1570 0,024656298 1,073 -0,27 0,0729 0,644809
0,0834 0,006947632 0,007 4,9E-05 1,1664
-0,1144 0,013087245 n-2 0,307 0,094249 1,9044
0,0914 0,008349042 3 0,677 0,458329 3,0625

 0,062390565  1,145368 6,902013

SD^2
0,020796855
Sxx = 1,145368
SD
0,144211147
Syy = 5,07748
SDA^2
0,01815735638
Sxy = 2,39669
SDA
0,134749235
m= 2,09
SDB^2
0,025064462
Sres = 0,14421
SDB
0,158317598
Sm = 0,1347

Sc = 0,733373939

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Punto Valor X Valor Y valor XY Valor XX Valor YY Y corregido

1 0,352 1,09 0,38368 0,123904 1,1881 0,993302804
2 0,803 1,78 1,42934 0,644809 3,1684 1,937023241
3 1,08 2,60 2,808 1,1664 6,76 2,516647546
4 1,38 3,03 4,1814 1,9044 9,1809 3,1443995
5 1,75 4,0100 7,0175 3,0625 16,0801 3,918626909
6
7
8
9
10

Nº  X Y  XY  XX  YY Pendiente 2,09

5 5,365 12,51 15,81992 6,902013 36,3775
 X)^2 Y)^2 Ordenada 0,26
28,7832 156,5001
Correlación 0,99384
Problema Solución
2,65 1,14 SDresidual 0,14421

SDm 0,1347

SDB 0,2

Recta de calibrado Valor Y

Y corregido

4,50

4,00

3,50
Valoares de Y (unidades)

3,00

2,50

2,00

1,50

1,00

0,50

0,00
0 0,2 0,4 0,6 0,8 1 1,2 1,4 1,6 1,8 2

Valores de X (unidades)

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PROBLEMA 10

Se pretende obtener el contenido de un elemento (X) en un material. Para ello, se dispone

de un material de referencia certificado con un contenido de elemento X de 93,2 % y una
incertidumbre de ±0,5 % (k=2).

El material de referencia certificado se somete a 10 series de 3 análisis, en días diferentes, con

diferentes analistas, diferentes equipos y condiciones instrumentales. Los resultados son:

SERIE R1 R2 R3 MEDIA DESV. EST.

1 93.2 93.5 93.4 93.37 0.15
2 93.4 93.6 93.1 93.37 0.25
3 93.3 93.1 93.0 93.13 0.15
4 93.0 92.8 93.1 92.97 0.15
5 93.4 93.0 92.8 93.07 0.30
6 93.6 93.1 93.0 93.23 0.32
7 93.7 93.5 93.3 93.50 0.20
8 93.1 92.7 92.9 92.90 0.20
9 93.2 93.1 93.0 93.10 0.10
10 93.5 93.4 93.6 93.50 0.10

Posteriormente se han analizado varias muestras del tipo habitual por quintuplicado, en las
mismas condiciones que los patrones, obteniéndose los siguientes resultados:

Muestra R1 R2 R3 R4 R5 MEDIA S
1 90.4 91.1 91.6 90.5 90.0 90.72 0.63
2 92.7 91.8 93.1 92.4 90.9 92.18 0.86
3 95.3 94.6 95.2 94.1 93.7 94.58 0.69
4 93.2 94.6 93.5 94.6 92.8 93.74 0.82
5 93.3 95.4 94.7 92.9 95.6 94.38 1.22
6 92.8 91.7 91.9 93.6 90.9 92.18 1.04

Obtener la incertidumbre de medida en un ensayo habitual, si el número de repeticiones de

dicho ensayo es 2.

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SOLUCIÓN:

INDICE DE COMPATIBILIDAD V p  Vm
IC = = 0.054
U 2
MR  U mMR
2


S MR
INCERTIDUMBRE DE PRECISIÓN Up = siendo n = nº réplicas
n
muestra problema
Uprec. = 0.13576 %

INCERTIDUMBRE DE TRAZABILIDAD
Utrazab = U 2
MR  U mMR
2


Utrazab.^2 = 0.06618 Utrazab = 0,25726 %

I MR
UMR = 0,25 % UMR =
k
UMR^2 = 0,0625
S MR
UmMR = 
UmMR = 0,0607 % N

UmMR^2 = 3,6845E-03

INCERTIDUMBRE PROCESO Uproceso =

S i
2

Uproceso^2 = 0,8092 Uproceso = 0,8995 %

INCERTIDUMBRE COMBINADA

Ucomb. = U 2
prec  U traz
2
 U proc
2

Ucombinada^2 = 0.8938

Ucombinada = 0,94 %

Uexpandida = Ucombinada * 2 = 1.89 %

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PROBLEMA 11

Determinar el contenido de oro (%) de una muestra geológica con la técnica de A.A.

Para ello, se parte de una disolución patrón de oro de 1.000,0 ± 1,0 ppm, y a partir de ella se
preparan 4 patrones de 0 ; 1,0 ; 2,0 ; 5,0 ppm de oro que se miden en el equipo de A.A. con los
siguientes resultados:
MUESTRA CONCENTRACIÓN (ppm) ABSORBANCIA (u.a.)
BLANCO 0 -0,001
PATRÓN 1 1,0 0,056
PATRÓN 2 2,0 0,096
PATRÓN 3 5,0 0,243

Con estos valores se construye la recta de calibrado, y se obtienen los siguientes parámetros:
Pendiente = 0,0482 Ordenada en el origen = 0,00120
Desviación estándar de la pendiente = 0,0013
Desviación estándar de la ordenada en el origen = 0,0036

A continuación se procede a pesar 3 muestras de 5,000 gramos cada una en una balanza analítica
(sus características se detallan al final), se disuelven y se enrasan a 100 mL, para posteriormente
proceder a realizar la medida de su absorbancia en el equipo de A.A., con los siguientes resultados:

MUESTRA 1 : 0,156 u.abs. MUESTRA 2 : 0,156 u.abs. MUESTRA 3 : 0,162 u.abs.

La balanza utilizada tiene las siguientes características:

- Resolución = - 0,0001 g. - Exactitud = ± 0,0005 g.
- Calibrada con patrón de incertidumbre = ± 0,0007 (k=2)

El material volumétrico utilizado tiene las siguientes características:

- Matraz aforado de 1.000 mL Tolerancia = ± 5
- Matraz aforado de 100 mL Tolerancia = ± 0,5
- Pipeta aforada doble enrase 5 mL Tolerancia = ± 0,05
- Pipeta aforada doble enrase 2 mL Tolerancia = ± 0,02
- Pipeta aforada doble enrase 1 mL Tolerancia = ± 0,01

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SOLUCIÓN:
1) Calcular la concentración de oro en la muestra (resultado analítico).
2) Calcular la incertidumbre del resultado:
2.1. Incertidumbre en la medida de la masa.
2.2. Incertidumbre en la medida del volumen.
2.3. Incertidumbre en la determinación de la concentración:
2.3.1. Incertidumbre de los patrones utilizados en la recta de calibrado.
2.3.2. Incertidumbre del ajuste de la recta de calibrado.
2.3.3. Incertidumbre de la repetibilidad de la señal del equipo
NOTA: Los puntos 2.3.2. y 2.3.3. se engloban en una única fórmula que se denomina
incertidumbre del proceso de medida.
2.3.4. Sumar cuadraticamente las incertidumbres de los patrones y la incertidumbre del
proceso de medida.
3) Sumar las incertidumbres calculadas (al tener unidades diferentes se debe calcular la
incertidumbre relativa y después calcular la incertidumbre absoluta).
4) Expresar el resultado final con su incertidumbre.

CÁLCULOS:
1) Para calcular la concentración de la muestra se debe utilizar la ecuación de la recta de calibrado,
de la que conocemos su pendiente y su ordenada en el origen.
Y=b+m*X  X = ( Y – b ) / m = ( 0.158 – 0.00120 ) / 0.0482 = 3,25 ppm
siendo Y = ∑ yi / n = ( 0.156 + 0.156 + 0.162 ) / 3 = 0.158
El valor obtenido de la recta de calibrado es 3.25 ppm, pero la muestra pesada se ha diluido en
100 mL para interpolar en la recta, y por tanto el valor real de la muestra habrá que referirlo a los
100 mL y no a 1.000 mL como expresa la recta (multiplicar por el factor de dilución 100/1000):
C = 3.25 * 0.1 = 0,325 mg (cantidad de oro en los 100 mL en que se disuelto la muestra.)

Por tanto, el valor real de la concentración de oro ( % ), referido al peso de muestra ( 5 g.) será:
% oro = ( 0.325 mg / 5000 mg ) * 100 = 6,5 * 10-3 % oro

2) Procedemos a calcular todas las incertidumbres:

2.1. Incertidumbre en la medida de la masa: Se utiliza la fórmula de cálculo de la incertidumbre
de la balanza: (Ub)2 = (Ucalibración)2 + (Uderiva)2 + (Uresolución)2

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(Ucalibración)2 = ( 0.0007 / 2 )2 = 1.225 * 10-7

(Uderiva)2 = ( 0.0005 / √3 )2 = 8.33 * 10-8

(Uresolución)2 = ( 0.0001 / 2√3 )2 = 8.33 * 10-10

(Ubalanza)2 = 1.225 * 10-7 + 8.33 * 10-8 + 8.33 * 10-10 = 2.066 * 10-7 (gramos)2

2.2. Incertidumbre en la medida del volumen (matraz de 100 mL):

(Uvolumen)2 = ( tolerancia / √3 )2 = ( 0.5 / √3 )2 = 2.887 * 10-1 (mL)2

2.3.1. Incertidumbre de los patrones de calibración. Se realiza la simplificación de considerar

únicamente la incertidumbre del patrón mayor:
(Upatrón)2 = C2patrón * [ (UMR / CMR)2 + (UVi / Vi)2 + (UVf / Vf )2 ]

UMR = Icertificado / k = 1 / 1 = 1 ppm // CMR = 1000 ppm

Para preparar el patrón de 5 ppm a partir del Material de Referencia de 1000 ppm será
preciso tomar 5 mL del MR (volumen inicial) y aforar a 1000 mL (volumen final). Por tanto:

Uvolumen inicial = tolerancia pipeta 5 mL / √3 = 0.05 / √3 = 5.7735 * 10-3 mL

Uvolumen final = tolerancia matraz 1000 mL / √3 = 5 / √3 = 2.887 * 10-3 mL

Por tanto, la incertidumbre del patrón de 5 ppm será:

(Upatrón)2 = 52 *[(1/1000)2+(0.05/√3/5)2+(5/√3/1000)2] = 25*4.2667*10-5 = 1.067 * 10-5 (ppm)2

2.3.2. y 2.3.3. Incertidumbre del proceso de medida:

(Uproceso)2 = (UY/m)2 + Ub/m)2 +[(Um)2 * (Y-b)2/m4] = (UY/m)2 + Ub/m)2 +[(Um)2 * (X2/m2)]

UY = w * (SY/√n) = 2.3 * [(3.46 * 10-3)/√3] = 4.5945 * 10-3 (u.a.)

Se utilizan 3 muestras (n =3 → w = 2.3)

Ub = w * (Sb/√n) = 1.7 * [(0.0036/√4)] = 3.06 * 10-3 (u.a.)

Se utilizan 4 puntos en la recta (n = 4 → w = 1.7)

Um = w * (Sm/√n) = 1.7 * [(0.0013/√4)] = 1.105 * 10-3 (u.a.)

Se utilizan 4 puntos en la recta (n = 4 → w = 1.7)

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Sustituyendo en la fórmula:

(Uproceso)2 = (4.5945 *10-3/0.0482)2 + (3.06*10-3/0.0482)2 + [(1.105*10-3)2 *(3.25/0.0482)2] (ppm)2

(Uproceso)2 = 0.01868 (ppm)2

2.3.4. La incertidumbre en la determinación de la concentración será:

(Uconcentración)2 = (Upatrón)2 + (Uproceso)2 = 1.067 * 10-5 + 0.01868 = 0.0187 (ppm)2

Finalmente se procede a sumar todas las incertidumbres, pero en forma relativa por no tener todas
las mismas unidades:

2 2 2
 U masa   U volumen   U concnetración 
URELATIVA =      
 masa   volumen  concentración 

2
 2.066  10  7   2.887  10 1   0.0187 
URELATIVA =         = 1.770  10 3 = 0.0421
52  3.25 
2
   100 

UABSOLUTA = Valor muestra * URELATIVA = 6.5 * 10-3 * 0.0421 = 2.7 * 10-4 = 0.3 * 10-3 %

RESULTADO ANÁLISIS: ( 6.5 ± 0.3 ) * 10-3 % ORO

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PROBLEMA 12

Determinar el contenido en sodio de un agua potable, así como la precisión de dicho análisis.
Para ello, se mide directamente la concentración sobre la muestra de agua utilizando la técnica de
ICP, realizando tres réplicas y obteniendo como resultado 45,88 ppm de Na (se corresponde con
una señal de 98796 mv y desviación estándar de 0.00297 mv) al extrapolar en la recta de calibrado
obtenida con los siguientes datos:
Sodio (ppm) 0 10 50 100
Señal (mv) 202 19408 105406 218654
De la representación gráfica de dichos datos se obtiene:
Pendiente = 2190.8
Ordenada en el origen = - 1714.6
Coeficiente de correlación 0 0.9998
Desviación estándar de la ordenada en el origen = 1731.7
Desviación estándar de la pendiente = 30.8537
Se utiliza un MRC de 1000 ± 10 ppm y k = 2
El material volumétrico utilizado tiene una tolerancia de ± 0.08 mL.

SOLUCIÓN
En este caso concreto tomamos directamente la muestra, por tanto no hay ni pesada ni disolución,
lo que implica que no hay incertidumbres de estas operaciones.
El proceso se reduce a calcular la incertidumbre en la determinación de la concentración, que
como hemos visto se compone de:
1.- Incertidumbre de los patrones utilizados en la recta de calibrado.
2.- Incertidumbre del ajuste de la recta de calibrado.
3.- Incertidumbre de la repetibilidad de la señal del equipo
NOTA: Los puntos 2 y 3 se engloban en una única fórmula que se denomina
incertidumbre del proceso de medida.
4.- Sumar cuadraticamente las incertidumbres de los patrones y la incertidumbre del
proceso de medida.

Finalmente, se expresa el resultado con su incertidumbre.

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CÁLCULOS
1.- Incertidumbre de los patrones de calibración. Se realiza la simplificación de considerar
únicamente la incertidumbre del patrón mayor:
(Upatrón)2 = C2patrón * [ (UMR / CMR)2 + (UVi / Vi)2 + (UVf / Vf )2 ]

UMR = Icertificado / k = 10 / 2 = 5 ppm // CMR = 1000 ppm

Para preparar el patrón de 100 ppm a partir del Material de Referencia de 1000 ppm será preciso
tomar 10 mL del MR (volumen inicial) y aforar a 100 mL (volumen final). Por tanto:

Uvolumen inicial = tolerancia pipeta 10 mL / √3 = 0.08 / √3 = 0.0462 mL

Uvolumen final = tolerancia matraz 100 mL / √3 = 0.08 / √3 = 0.0462 mL

Por tanto, la incertidumbre del patrón de 100 ppm será:

(Upatrón)2 =1002 *[(5/1000)2+(0.08/√3/10)2+(0.08/√3/100)2] =10000*4.6513*10-5 = 0.46513 (ppm)2

2.- Incertidumbre del proceso de medida:

(Uproceso)2 = (UY/m)2 + Ub/m)2 +[(Um)2 * (Y-b)2/m4] = (UY/m)2 + Ub/m)2 +[(Um)2 * (X2/m2)]

UY = w * (SY/√n) = 2.3 * (0.00297)/√3 = 3.9439 * 10-3 (mv) [ 3 muestras (n =3 → w = 2.3) ]

Ub = w * (Sb/√n) = 1.7 * (1731.7/√4) = 1471.945 (mv) [ 4 puntos en la recta (n = 4 → w = 1.7) ]

Um = w * (Sm/√n) = 1.7 * (30.8537/√4) = 26.2256 (mv) [ 4 puntos en la recta (n = 4 → w = 1.7) ]

Sustituyendo en la fórmula:

(Uproceso)2 = (3.9439 *10-3/2190.8)2 + (1471.945/2190.8)2 + [(26.2256)2 *(45.88/2190.8)2] (ppm)2

(Uproceso)2 = 0.748617 (ppm)2

La incertidumbre en la determinación de la concentración será:

(Uconcentración)2 = (Upatrón)2 + (Uproceso)2 = 0.46513 + 0.748617 = 1.21375 (ppm)2

Uconcentración = 1.1017 ppm

RESULTADO ANÁLISIS: 46 ± 1 ppm
PRECISIÓN: 100 – [100 * (SY/Y)] = 100 –[100 * (0.00297/45.88)] = 99.99 %

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Valor Valor
Punto X Valor Y valor XY XX Valor YY Y corregido
1 0 202,00 0 0 40804 -1714,629032
2 10 19408,00 194080 100 376670464 20193,40323
3 50 105406,00 5270300 2500 1,111E+10 107825,5323
4 100 218654,00 21865400 10000 4,781E+10 217365,6935
5
6
7
8
9
10

Nº  X Y  XY  XX  YY Pendiente 2190,80

4 160 343670 27329780 12600 5,9297E+10
 X)^2 Y)^2 Ordenada -1714,63
25600 1,1811E+11
Correlación 0,99980
Problema Solución
98796 45,88 SD 2429,42328

SDm 30,8537

SDB 1731,7

Recta de calibrado Valor Y

Y corregido

250000,00

200000,00
Valoares de Y (unidades)

150000,00

100000,00

50000,00

0,00
0 20 40 60 80 100 120

-50000,00

Valores de X (unidades)

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PROPUESTA DE EJERCICIOS COMPLEMENTARIOS

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