INFORME DE

PRÁCTICAS

ALUMNOS:
ARCE MARZANO, YOMARA
CABALLERO AIRAMPO, JEFFERSON
CAHUANA FLORES, JOSUE
MEZARINA AUCCAYLLA, JOHANA
VILLANUEVA BELLIDO, ISABEL

MÉTDOS Y TÉCNICAS EN MICOLOGÍA Y VIROLOGÍA

PROFESOR: MELODY MAYANGA BADAJOS
ÍNDICE 2
INTRODUCCIÓN 3
MARCO TEÓRICO 4
- MATERIALES 4
- PROCEDIMIENTO 6
- RESULTADOS 7
- MÉTODOS 8
CONCLUSIONES 9
CUESTIONARIO 10
CONCLUSIONES 11
BIBLIOGRAFÍA 12
 El cultivo de hongos es una técnica importante utilizada
en la microbiología para identificar y caracterizar los
hongos presentes en muestras ambientales, alimentarias
y clínicas. Uno de los medios de cultivo más comunes
para el aislamiento de hongos es el agar Sabouraud, que
contiene una fuente de carbono (dextrosa) y un pH ácido,
lo que lo hace selectivo para los hongos y poco favorable
para el crecimiento de bacterias.
En este informe se describen los detalles del
procedimiento de cultivo, incluyendo la preparación del
medio de cultivo, la técnica de siembra utilizada y las
condiciones de incubación.
En resumen, este informe práctico de cultivo de hongos
en agar de Sabouraud proporciona información sobre el
método de cultivo utilizado. La utilización del agar de
Sabouraud permite el crecimiento y aislamiento de una
amplia variedad de hongos y la técnica de siembra en
superficie facilita la observación y el conteo de colonias
fúngicas.
 Materiales

Asa de siembra y mango:

sirve para recoger muestras y llevarlas a
cultivar en el agar.

Placa Petri:
sirve para guardar los cultivos

Agar Sabouraud:
empleado para el crecimiento de los
hongos

Tubo de ensayo:
recipiente en donde se cultivará

Mechero:
sirve para esterilizar el asa de siembra,
preparar el medio de cultivo y
protegernos en el área de microbiología

Pinzas
sostiene el beaker
 Corta uñas:
sirve para la extracción de muestra en
uñas

Frasco estéril:
reserva la muestra

Matraz:
sirve para poder esterilizar el medio de
cultivo

Beaker:
sirve para preparar el medio de cultivo

Bisturí:
sirve para la obtención de muestras
escamosas

Varilla:
sirve para agitar el medio y disolverlo
1) Nos colocaremos los Epps requeridos.
2) Esterilizar los materiales a 121°C durante 15 min.
3) Introducimos 4 gr de agar Sabouraud al vaso Erlenmeyer que
contiene 100 mL de agua destilada.
4) Hacemos la disolución con la ayuda de la varilla de vidrio y
empezamos a calentar con la ayuda del mechero hasta que hierva.
5) Dejar que el agar de Sabouraud se enfríe hasta
aproximadamente 45-50 °C.
6) Dispensar en placas y tubos de ensayo.
7) Con la ayuda de un asa de siembra, calentándolo al rojo vivo
recogemos la muestra de uña que se desea cultivar.
8) Hacer una dilución en agua destilada y luego sembrar una
pequeña cantidad del cultivo en la superficie del agar de
Sabouraud.
9) Distribuir uniformemente el cultivo sobre la superficie del agar de
Sabouraud mediante el asa de siembra.
10) Repetir el proceso de siembra con diferentes diluciones del
cultivo para obtener una placa de Petri con colonias separadas y
bien definidas.
11) Tapar la placa con una tapa estéril para evitar la entrada de
contaminantes.
En los resultados, todos los medios de cultivo están perfectamente
estériles para evitar la aparición de formas de vida que puedan
impedir el crecimiento microbiano.

Por otro lado, realizamos en el laboratorio la preparación de medio

de cultivo, en este caso nos tocó Agar Sabouraud.
Después que el agar se llegó a solidificar, empezamos a esterilizar
el asa de siembra en el mechero y obtenemos un parte madura del
micelio onicomicosis e inoculamos superficialmente sobre el medio
de cultivo en placa (máximo tres inoculaciones) cerramos la placa y
esterilizamos nuevamente el asa de siembra para posteriormente
también usar el mismo método de medio de cultivo en los tubos de
ensayo, para esto se llegara a introducir de forma diagonal la
muestra onicomicosis (máximo dos inoculaciones).
Finalmente se llega a incubar a temperatura ambiente 4-7 días.
El método utilizado es el agar Sabouraud, con el fin de cultivar
hongos de muestras ambientales, alimentarias y clínicas tal como se
indica en los párrafos anteriores, ya que esta ayuda al crecimiento
de los mismos. En la práctica, es la solución más utilizada y rápida
para el cultivo y crecimiento de organismos fúngicos.

A este método se le adiciona la toma de muestra de extracción de

escamas y uñas, que luego fueron sembradas en agar Sabouraud
para observar qué tipo de hongo es el que crece y en base a eso
observar detalladamente su morfología ya sea macroscópica y
microscópicamente.

El método más rápido y correcto de inocular escamas o uñas es con

el asa de siembra, el cual se calentó en el mechero (hasta que torne
un color rojo intenso) para después humedecer un poco en el agar
Sabouraud para terminar sembrando con mucha paciencia cada
muestra.
1. ¿Por qué se agregan antibióticos a los agares para el aislamiento de
hongos?

Los antibióticos se utilizan para evitar el crecimiento de bacterias que pueden

competir con los hongos por los nutrientes en el medio de cultivo. Algunos antibióticos
pueden inhibir el crecimiento de ciertos tipos de hongos, lo que permite seleccionar
ciertos tipos de hongos en particular y también pueden utilizarse para evitar la
contaminación de hongos por otros microorganismos que pueden estar presentes en
el medio ambiente.

2. ¿Qué compuestos cree, son importantes para el crecimiento de los hongos?

Los hongos obtienen energía y carbono de los compuestos orgánicos, como los
azúcares y los lípidos. Necesitan una variedad de minerales para su crecimiento y
metabolismo. Los minerales importantes incluyen calcio, magnesio, hierro y fósforo y
las fuentes de nitrógeno pueden incluir nitratos, amoníaco y compuestos orgánicos,
como los aminoácidos.

3. ¿Qué tipo de micelios se observan en los cultivos?

En los cultivos de hongos se pueden observar diferentes tipos de micelios, que

incluyen el micelio vegetativo, el micelio aéreo, el micelio rizomorfo y el micelio de
anastomosis. Cada tipo de micelio tiene una estructura y una función diferentes en el
crecimiento y la supervivencia del hongo.
4. Elabore un flujograma sobre el cultivo de dermatofitos.
En conclusión, para los cultivos de hongos se utilizó el agar
Sabouraud con la ayuda de diversos insumos, dependiendo de
las características y necesidades del hongo se utilizó
compuestos importantes para su crecimiento, como el arroz,
papa, zanahoria, etc.

Se preparó diversos medios de cultivo, donde el agar

Sabouraud simple fue el rápido de hacer, a comparación de los
agares compuestos con papa, zanahoria; debido a la
consistencia del insumo, fuimos obligándonos a maximizar el
procedimiento por medio de trituraciones y más cocción, para
que se desprendan los nutrientes al momento de colar y separar
el bagazo.

Llegados a tener todo listo se colocó el agar en las placas Petri

y tubos de vidrio en una pequeña porción, para que el agar se
logre secar con más rapidez, logre tener una consistencia más
templada, y colocar el hongo obtenido de las uñas ya sea del
pie o de la mano, como también de la piel.

Siempre llevando siempre al hongo a lo más profundo del medio

del cultivo y dejando espacio suficiente para que más de un
hongo pueda crecer en un solo medio de cultivo, evitando así
que deje de crecer y mejorando la producción para analizar en 3
a 4 semanas en la incubadora aproximadamente, para cuando
ya se hayan desarrollado para llevarlo a analizar.
1. Uso Medio utilizado para el aislamiento, identificación y conservación
de hongos patógenos y saprófitos. También es útil para el cultivo de
levaduras [Internet]. Britanialab.com. [citado el 7 de marzo de 2023].
Disponible en:
https://www.britanialab.com/back/public/upload/productos/upl_5af08a08a
7afe.pdf

2. de Hongos A/. MPELA. SABOURAUD AGAR – 64494 [Internet]. Bio-

rad.com. [citado el 7 de marzo de 2023]. Disponible en:
https://commerce.bio-
rad.com/webroot/web/pdf/inserts/CDG/es/56524_2019_07_ES.pdf