Unidad 4 Inocuidad

Benemérita Universidad Autónoma de Puebla
Facultad de Ciencias Químicas

Licenciatura en Químico Farmacobiólogo
Inocuidad Microbiana de los Alimentos
Rosamaria Cesar Sanchez
CLASIFICACIÓN DE LOS MICROORGANISMOS
DE INTERÉS SANITARIO
® Deterioradores. Son aquellos que causan deterioro en el color,
sabor, aroma y textura de los alimentos; estos microorganismos por lo
general no causan enfermedades.
® Proteolíticas. Son microorganismos que descomponen las proteínas,
especialmente en la leche y los productos lácteos, causando olores y
sabores no deseados, cambiando su textura.
® Lipolíticas. Se encuentran especialmente en los productos lácteos y
descomponen la grasa de la leche, causando olores y sabores no
deseados. Los microorganismos lipolíticos causan deterioro y pérdida de
calidad en la leche y productos lácteos como la mantequilla, crema,
margarina y queso.
® Gasógenos. Microorganismos responsables de deterioro diferentes de
levaduras.
® Termofílico: se aplica a organismos vivos que pueden soportar
condiciones extremas de temperatura relativamente altas, por encima de
los 45ºC.
® Halofílico. Es el adjetivo que se aplica a los organismos que viven en
ambientes con presencia de gran cantidad de sales.
® Psicrofílico. Aquellos que su temperatura de crecimiento es de 15°C o
menos
® Productores de viscosidad. Leuconostoc, Lactobacillus, E. coli,
Enterobacter, proteus, Bacillus, Clostridium, hacen viscosos a los
alimentos.
® Láctica. Constituyen un grupo heterogéneo de microorganismos que se
caracterizan por la producción de ácido láctico a partir de la fermentación
de carbohidratos. Son cocos o bacilos Gram positivos, no forman esporas,
inmóviles, anaerobios o microaerófilos y son oxidasa y catalasa negativos,
de importancia tenemos a Leuconostoc, Lactobacillus
Streptococcus,Pediococcus
® Sacarolitícas. Estas bacterias hidrolizan los disacáridos o polisacáridos a
carbohidratos más sencillos, existe un grupo reducido de bacterias
amiloliticas (poseen una amilasa para llevar a cabo la hidrólisis extracelular
del almidón) entre esas bacterias tenemos Bacillus subtilis y Clostridium
butyricum, dañan jarabes, mermeladas etc.
® Pectinolíticas. Estas bacterias están presentes en las frutas y hortalizas y
pueden generar el ablandamiento del fruto y/o la pérdida de la capacidad de
gelificación de los zumos. Entre estas tenemos las bacterias pertenecientes
a los géneros Erwinia, Bacillus, Clostridium, Aeromonas, Arthrobacter y
Flavobacterium.
® Osmofílicias. Son microorganismos adaptados a ambientes con altas
presiones osmóticas, tales como altas concentraciones de azúcar. Los
osmófilos son similares a los organismos halófilos (amantes de la sal)
debido a que un aspecto crítico de ambos tipos de ambiente es su baja
actividad de agua, ejemplo Leuconostoc.
® Productoras de ácido. Las homofermentadoras como Lactococcus,
Streptococcus, Pedicococcus, Vagococcus y algunos Lactobacillus poseen
la enzima aldolasa y producen ácido láctico como el producto principal de la
fermentación de la glucosa utilizando la vía de glucólisis, los géneros
bacterianos con capacidad de producir ácidos orgánicos que solubilizan
fosfato se tienen: Pseudomonas, Rhizobium, Burkholderia, Achromobacter,
Agrobacterium, Aereobacter, Flavobacterium, Yarowia, Streptosporangium
y Erwinia.
® Indicadores. Se refiere a un organismo o grupo de organismos, que
reflejan la condición microbiológica general de un alimento, un equipo o un
entorno de producción. Su presencia no proporciona información sobre la
posible presencia o ausencia de un patógeno específico ni aporta una
evaluación del riesgo potencial para la salud pública.
® Halotolerante. Es la adaptación por osmorregulación de los organismos
vivos a condiciones de alta salinidad. Las especies halotolerantes tienden a
vivir en zonas como los lagos hipersalinos, dunas costeras, desiertos
salinos, mares de sal interiores y manantiales, al 15% (w/v) de NaCl (2,5 M)
son considerados halotolerantes extremos.
® Halofílicos. Necesitan ciertas concentraciones de NaCl para crecer.
Moderadamente halófilos (5 – 20% NaCl), halófilos extremos (20 – 30% de
NaCl), escasamente halófilas ( 2 -5% de NaCl).
® Halotrófico. Requiere 17 -25% de sal para crecer.
® Psicrofílicos. Capaces de desarrollarse a 0°C o menos, Pseudomonas,
Flavobacterium, Alcaligenes, Micrococcus, lactobacillus, Enterobacter,
Arthrobacter.
® Psicotrófico. Aquellos microorganismos que crecen a temperaturas entre
15 a 20 °C.
® Termodúrico. Toleran los tratamientos térmicos aplicados durante el
proceso industrial de la leche, sobreviven a la pasteurización y pueden
causar deterioro en la calidad de los productos manufacturados.
® Termofílicos. Son bacterias que pueden crecer a altas temperaturas (45°C
como mínimo y 55°C o más) y causan la fermentación acida en algunos
alimentos enlatados. Tenemos como ejemplo al Clostridium
Thermosaccharolyticum que produce alteraciones gaseosas y Lactobacillus
Thermophilus que es un microorganismo ácido láctico.
TIPO DE EJEMPLOS
MICROOGANISMO
DETERIORADORE o Pseudomonas (Carne de res y de ave)
S o Moraxella (Agua)
o Acinetobacter (Carne de res)
o Flavobacterium psychrophilum (Pescado y agua fría)
o Rhizopus orizae (Tomate)
o Aspergillus flavus (Cereales y cacahuates)
o Penicillium (Cítricos)
o Zygosacharomyces bailii (Jarabes, jamones y jaleas)
o Rhizopus (Pan)
o Aspergillus (Tortilla)
INDICADORES o Cedecea
o Citrobacter
o Enterobacter
o Escherichia
o Hafnia
o Klebsiella
o Kluyvera
o Morganella
o Proteus
o Rahnella
o Salmonella
o Serratia
o Shigella
o Yersinia
PATOGENOS o Salmonella thiphy (Carne, huevo)
o Shigella disenteriae (Verduras)
o Yersinia enterocolítica (Leches, mariscos, helados)
o Escherichia coli (Carne, agua)
o Vibrio cholerae (Mariscos, agua)
o Campylobacter jejuni (Pollos rostizados y asados)
o Clostridium botulinum (Alimentos enlatados)
o Bacillus cereus (Arroz cocido)
o Listeria monocytogenes (Ensaladas y productos cárnicos)
o Staphylococcus aureus (Alimentos crudos o cocinados de
origen animal)
UTILES PARA EL o Lactobacillus bulgaricus (Alimentos probióticos)
HOMBRE o Sacharomyces cereviceae (Pan, cerveza y vino)
o Lactobacillus plantarum (Alimentos probióticos)
o Lactococcus lactis (Manteca y queso)
o Pediococcus cerevisiae (Cerveza)
o Streptococcus termophilus (Yogurth)
o Penicillium roqueforti (Queso roquefort)
® Analiza la ubicación de los microorganismos en diferentes alimentos y

bebidas
Los microorganismos indicadores permiten un enfoque de prevención de riesgos,
puesto que advierten manejo inadecuado y/o contaminación.
Los principales microorganismos indicadores en alimentos son:
o Indicadores de condiciones de manejo o de eficiencia de proceso:
 Mesófilos aerobios (o cuenta total)
 Cuenta de hongos y levaduras
 Cuenta de coliformes totales
o Indicadores de contaminación fecal:

 Coliformes fecales
 E. coli
 Enterococos
 Cl. Perfringens
La selección de indicadores en un alimento depende fundamentalmente de los
riesgos implicados y de lo que se requiera saber para liberar, controlar o mejorar el
alimento, manteniendo el enfoque preventivo. Las características que tienen los
indicadores mencionados y su utilidad se indican a continuación:
o Mesófilos aerobios (o cuenta total): Esta determinación indica el grado
de contaminación de una muestra y las condiciones que han favorecido o
reducido la carga microbiana. No se aplica a alimentos fermentados, y
puede dar escasa información sobre el manejo del alimento cuando este es
poco favorable para el desarrollo microbiano, por ejemplo, por su pH o aw,
Este grupo es un indicador importante en alimentos frescos, refrigerados y
congelados, lácteos y alimentos listos para consumir. Se lleva a cabo a
partir de diluciones decimales de la muestra, las cuales se inoculan en
placas vertidas de agar triptona glucosa extracto o agar cuenta estándar.
Las placas se incuban en condiciones de aerobiosis, a 35°C, durante 24 a
48 horas.
o Cuenta de hongos y levaduras: Los hongos y las levaduras se encuentran
ampliamente distribuidos en el ambiente, por lo cual son frecuentes en la
microbiota habitual de muchos alimentos; se dispersan fácilmente por el
aire y el polvo. Ciertas especies de hongos y levaduras son útiles en la
elaboración de algunos alimentos; sin embargo, también pueden ser
causantes de la descomposición. Debido a su crecimiento lento y a su baja
competitividad, los hongos y levaduras se manifiestan en los alimentos
donde las condiciones no favorecen el crecimiento bacteriano, por ejemplo:
pH ácido, baja humedad, alto contenido en sales o carbohidratos, baja
temperatura de almacenamiento, presencia de antibióticos u otros
antibacterianos. Como grupo indicador son útiles para evidenciar grado
general de contaminación en alimentos con estas características o cuando
los mesófilos aerobios no son útiles, como en alimentos fermentados.
También son indicadores del riesgo de desarrollo de hongos toxigénicos en
alimentos como frutos secos, especias, cereales y otros granos, así como
sus derivados. Se lleva a cabo a partir de diluciones decimales de la
muestra, las cuales se inoculan en placas vertidas de papa dextrosa agar
(PDA) y agar extracto de malta (AEM) acidificados con ácido tartárico, para
favorecer a los hongos y levaduras e inhibir bacterias.
o Cuenta de coliformes totales: Actualmente, se consideran un excelente
indicador de la eficiencia de los procesos de limpieza y desinfección, así
como de calidad sanitaria en agua, vegetales y diversos productos
procesados. Su determinación se basa generalmente en la capacidad de
fermentar lactosa. Se pueden utilizar los métodos del número más probable
(NMP o MPN, por sus siglas en inglés), el cual es un método estadístico en
tres etapas y permite el hallazgo de cantidades muy bajas de coliformes.
También se pueden detectar por cuenta en placa utilizando agar bilis-rojo
violeta (ABRV o RVBA, por sus siglas en inglés), en el cual las colonias
fermentadoras de lactosa causan el vire del indicador; pueden detectarse
por filtración en membrana (Millipore) e incubación en medios adecuados,
por métodos rápidos como Petrifilm y reacciones cromogénicas o
fluorogénicas.
o Coliformes fecales: Dentro del grupo coliforme, los de origen fecal son
capaces de fermentar la lactosa también a 44.5°C; se consideran el
indicador más adecuado de contaminación con heces de animales y
humanos, por ejemplo, en pescados y mariscos, carnes, leche, entre otros.
La determinación se hace a partir de la segunda etapa (confirmativa) del
método de NMP, cultivando en caldo lactosado con incubación a 44.5°C.
o E. coli: Se considera indicador de contaminación fecal reciente, humana o
animal, en productos como agua embotellada, leche y jugos, alimentos
infantiles y alimentos procesados, en general. Se caracteriza por ser
coliforme termotolerante (fermenta lactosa a 44.5°C) que produce indol a
partir de triptofano y produce glucuronidasa, características que se usan
para su identificación en laboratorio, generalmente en la etapa final del
NMP o de alguno de los otros métodos, incluyendo Petrifilm.
o Enterococos: Los estreptococos de origen fecal o enterococos también
son un indicador de contaminación fecal, debido a su abundancia en el
tracto digestivo de animales y humanos. Se consideran indicadores en
alimentos procesados, como lácteos y cárnicos, en los cuales E. coli puede
no sobrevivir. Se determinan mediante métodos sencillos, generalmente
con tecnologías de sustratos específicos.
o Clostridium Perfringens: Las esporas de Clostridium perfringens son muy
resistentes a los desinfectantes, siempre están presentes en aguas negras,
pero no se multiplican en el sedimento por lo cual se le considera un buen
indicador cuando se sospecha de contaminación con protozoarios o virus,
que generalmente no tienen relación con el hallazgo de coliformes o
enterococos. Son buenos indicadores en trabajos de seguimiento o para
relacionarlos con contaminación fecal en peritajes; también se considera un
indicador útil en aguas tropicales, donde la supervivencia de otros como E.
coli y Enterococcus puede disminuir. La determinación de Clostridium
pefringens como indicador se hace por cuenta en placas vertidas de agar
triptona-sulfito-cicloserina (TSC) con yema de huevo, incubadas en
anaerobiosis (Gas-Pack o similar).
® Analiza e identifica las características de los microorganismos

deterioradores
Entre los efectos deterioradores del alimento como productos resultantes de
microorganismos se encuentran, en mayor parte, la producción de ácido láctico,
ácido acético, gas hidrógeno y dióxido de carbono, causando sabores agrios y
empaques que se inflan.
Como productos menores se encuentran tioles, esteres, aminas y peróxidos
causando olores negativos, defectos de sabores y cambios en la coloración.
Entre las enzimas producidas por microorganismos deterioradores se pueden
enlistar las proteasas, lipasas y amilasas que al final de la historia causan cambios
estructurales y de sabor.
Según Casaburi, “los ácidos grasos volátiles y las cetonas contribuyen con notas
grasosas/gamosas/de queso/lácteas; aldehídos con su olor a grasa/hierba
considerados frescos y agradables a niveles bajos, pero desagradables y rancios
cuando aumentan las concentraciones; alcoholes y ésteres con sus matices
etéreos/afrutados/dulces; Compuestos de benceno, azufre y terpeno con
reminiscencias de plástico, repollo y olor floral/cítrico, respectivamente. El
equilibrio entre estos compuestos genera agradables y típicos aromas a carnes y
productos cárnicos; por otro lado, un desequilibriocrea mal olor y mal sabor.
® Analiza e identifica las características de los microorganismos indicadores
 Microorganismos aerobios mesófilos: En este grupo se incluyen todos los
microorganismos, capaces de desarrollar en presencia de oxígeno a una
temperatura comprendida entre 20°C y 45°C con una óptima entre 30ºC y
40ºC.
El recuento de microorganismos aerobios mesófilos, en condiciones
establecidas, estima la microflora total sin especificar tipos de
microorganismos. Refleja la calidad sanitaria de los productos analizados,
indicando además de las condiciones higiénicas de la materia prima, la
forma como fueron manipulados durante su elaboración. Un recuento bajo
de aerobios mesófilos no implica o no asegura la ausencia de patógenos o
sus toxinas, de la misma manera un recuento elevado no significa
presencia de flora patógena. Ahora bien, salvo en alimentos obtenidos por
fermentación, no son recomendables recuentos elevados. Un recuento
elevado puede significar:
o Excesiva contaminación de la materia prima. - Deficiente
manipulación durante el proceso de elaboración.
o La posibilidad de que existan patógenos, pues estos son mesófilos.
o La inmediata alteración del producto.
En el uso o la interpretación del recuento de microorganismo aerobios
mesófilos hay ciertos factores que deben ser tenidos en cuenta: Este
recuento es sólo de microorganismos vivos.
La utilidad del indicador depende de la historia del producto y el momento
de la toma de muestra. En alimentos perecederos manipulados
correctamente pueden desarrollar recuentos elevados y perder calidad si
son almacenados por un período de tiempo prolongado. En este caso, el
recuento no se encontraría elevado por la condición de higiene del
producto, sino por la vida útil del mismo.
Los procedimientos que sufre el alimento en su elaboración, por ejemplo,
un proceso térmico, pueden enmascarar productos con altos recuentos o
condiciones deficientes de higiene. Además, el almacenamiento prolongado
en congelación o con pH bajo puede producir una disminución del recuento.
El recuento de mesófilos nos indica las condiciones higiénico-sanitarias de
algunos alimentos pero no tiene significado sanitario en otros productos que
han sido madurados con bacterias (por ejemplo quesos) o alimentos que
dentro de su formulación tienen conservadores.
 Mohos y levaduras: Los hongos son miembros del reino vegetal que
no están diferenciados en raíces, tallos y hojas; carecen del
pigmento fotosintético verde, la clorofila. Presenta múltiples formas,
incluidos setas, mohos y levaduras. Comúnmente se da el nombre
de moho a ciertos hongos multicelulares filamentosos, dotados de un
micelio verdadero, microscópicos, y cuyo crecimiento en los
alimentos se conoce fácilmente por su aspecto aterciopelado o
algodonoso. Los hongos son microorganismos aerobios estrictos,
eucarióticos, característicamente miceliares, y heterótrofos con
nutrición por absorción, desarrollan en un rango de pH de 2 a 9,
temperaturas entre 10 a 35ºC y pueden crecer en condiciones de
actividad de agua (aw) relativamente bajas (<0.85) aun que las
levaduras generalmente requieren una mayor actividad de agua.
Asimismo las levaduras son hongos que crecen generalmente en
forma de agregados sueltos de células independientes que pueden
ser globosas, ovoides, periformes, alargadas o casi cilíndricas, en
algunos casos forman cadenas de células alargadas, adheridas en
forma de micelio por lo que se les denomina pseudomicelio, cuando
crecen sobre medio solidos forman colonias de aspecto
característico que recuerdan colonias bacterianas, la importancia de
su presencia en los alimentos esta determinada por la capacidad de
producir diferentes grados de deterioro y descomposición , pueden
producir toxinas que no se destruyen durante el procesamientos de
los alimentos responsables de intoxicación, también relacionados
con reacciones alérgicas e infecciones en la población
inmunocomprometida en ancianos y niños.
 Anaerobios sulfitos reductores: Los anaerobios sulfito-reductores
constituyen un grupo bacteriano asociado al género Clostridium. Se
caracterizan por ser organismos Gram positivos, anaeróbicos,
formadores de esporas que tienen la propiedad de reducir el ion
sulfito a sulfuro en presencia del citrato férrico u otra sal de metales
pesados, formando colonias negras características. Generalmente,
las células vegetativas tienen forma de bacilos, pudiendo variar
desde bacilos cocoides cortos a largos bacilos filamentosos. Pueden
aparecer sueltos, en parejas o en cadenas. La mayoría son móviles
por flagelos peritricos, (con la excepción de C. perfringens) son de
tamaño variable midiendo 0.3 – 2.0 μm de diámetro y 1.5 - 20 μm de
longitud. Las esporas pueden ser central, subterminal y terminal,
resistentes al calor. Son Gram positivos en cultivos jóvenes, pero se
decoloran en los envejecidos. A pesar de ser bacterias anaerobias
obligadas, no todos tienen la misma sensibilidad al oxígeno. Crecen
a temperatura de 37ºC, la actividad acuosa (aw) mínima para su
desarrollo es 0.95 (1) y a un pH entre 7 y 7.4, de modo que son
fácilmente inactivadas a pH ácido o básico, como el ácido estomacal,
el de limpiadores y desinfectantes como el cloro e incluso el pH de
ácidos orgánicos. Los Clostridium no tienen un sistema citocromo
completo y por lo tanto son oxidasa negativa. La mayoría de las
cepas son catalasa y superóxidodismutasa (SOD) negativa, aunque
se han reportado pequeñas cantidades de actividad para algunas
especies. Clostridium spp. tienen diversas vías metabólicas y pueden
ser sacarolíticos, proteolíticos, ambos o ninguno. Los productos
finales del metabolismo fermentativo son mezclas de ácidos y
alcoholes, una característica que se puede utilizar para fines de
identificación en el laboratorio. Las exotoxinas extracelulares y
enzimas producidas por Clostridium son los principales factores de
virulencia. Los Clostridium producen una mayor diversidad de toxinas
que cualquier otro género de bacterias.
Las especies del género Clostridium comúnmente asociadas a
enfermedades transmitidas por los alimentos (ETA) son: Clostridium
botulinum cuya toxina afecta al sistema nervioso, causando la
toxiinfección llamada botulismo y Clostridium perfringens cuya
enterotoxina afecta al sistema digestivo. La intoxicación por C.
perfringens es generalmente breve, autolimitada y rara vez es mortal.
Sin embargo, las neurotoxinas de C. botulinum se encuentran entre
los más tóxicos de sustancias que se producen naturalmente y causa
graves enfermedades, a veces mortales, con síntomas persistentes
durante varios meses. En los alimentos, recuentos elevados de los
anaerobios sulfitoreductores pueden indicar la existencia de éstos
patógenos. Además, evidencian una posible deficiencia en las
buenas prácticas de fabricación a lo largo del proceso de
transformación, o materia prima de baja calidad. Debido a las
características que poseen los anaerobios sulfitoreductores se
suelen usar como indicadores de la calidad higiénica del agua y de
los alimentos.
La detección y el recuento se realiza utilizando medios de cultivo que
en su fórmula contienen sulfito de sodio, sobre el cual estos
microorganismos, ejercen su acción reductora transformándolo en
sulfuro que al actuar sobre el hierro forma sulfuro de hierro. La
presencia de sulfuro de hierro se pone de manifiesto por la aparición
del color negro de las colonias. El cultivo de los Clostridium exige
una atmosfera exenta de oxígeno, lo que se consigue:
- Con la regeneración de los medios de cultivo antes de ser
sembrados. Por el cultivo en anaerobiosis - Mediante jarras para
anaerobiosis
- Por la obturación del medio sembrado con una capa de parafina
estéril
- Por la siembra en profundidad del medio Para obtener únicamente
las formas esporuladas de Clostridium sulfito reductores, se
aprovecha su termorresistencia, calentando a 80ºC el producto, la
suspensión madre o las diluciones decimales. De esta manera, se
destruyen las formas vegetativas.
® Analiza e identifica las características de los microorganismos útiles
para el hombre
La biotecnología alimentaria tradicional utiliza ampliamente los microorganismos,
que intervienen en diferentes etapas de las producción del alimento. Son
esenciales para la producción de muchos alimentos, como el vino, la cerveza,
panificados, productos lácteos, entre otros. En muchos de estos productos los
microorganismos hacen su función durante el proceso de producción.
A lo largo del tiempo se han seleccionado las mejores cepas de microorganismos
y se han desarrollado grandes industrias en base a ellos. Tanto las levaduras
como las bacterias deben cumplir varias características para su uso en industria
alimentaria:
 Tamaño de célula pequeño para facilitar el intercambio de sustancias con el
entorno, permitiendo una elevada tasa metabólica.
 Producir la sustancia de interés.
 Estar disponible en cultivo puro.
 Ser genéticamente estable.
 Crecer en cultivos a gran escala.
 Crecer rápidamente y obtener el producto deseado en un corto periodo de
tiempo.
 No ser patógeno.
 Medio de cultivo patógeno disponible en grandes cantidades y ser
relativamente barato.
La fermentación es un proceso microbiano a gran escala que se realiza por los
microorganismos, tanto en condiciones aerobias (presencia de oxígeno) como
anaerobias (ausencia de oxígeno). Genera un producto final ácido láctico
(fermentación láctica por bacterias ácido-lácticas) o etanol (fermentación
alcohólica por levaduras).
La producción del alcohol a nivel industrial y las bebidas alcohólicas se lleva a
cabo a través de la fermentación a gran escala de las levaduras responsables:
 Para la producción del vino se fermenta el zumo de uvas. Se utiliza
Saccharomyces ellipsoideus.
 Para la sidra se fermenta el zumo de manzana. Se usan cepas de
Saccharomyces cerevisiae como uvarum y S. cerevisiae además de
Saccharomyces fragilis (responsable de la producción de pectinasa que
tiene un papel sobre el jugo clarificando la sidra).
 Para la elaboración de la cerveza se fermentan los cereales malteados. Las
levaduras que se utilizan se denominan Saccharomyces carlsbergensis y
Saccharomyces cerevisiae.
Las bacterias ácido lácticas (BAL) son microorganismos utilizados en la
fermentación de los productos lácteos como son el yogur, el queso, kéfir y la
mantequilla.
La acción de estas bacterias desencadena un proceso microbiano por el que la
lactosa (el azúcar de la leche) se transforma en ácido láctico. Una vez se va
acumulando el ácido láctico, la estructura de las proteínas de la leche se va
cuajando, dando el mismo resultado en la textura del producto. Dependiendo de la
temperatura y la composición de la leche se aporta unas cualidades diferentes
particulares a los diferentes productos.
BIBLIOGRAFIA
 https://higieneambiental.com/indicadores-microbiologicos-higiene-en-la-
industria-alimentaria
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http://ve.scielo.org/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1315-
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 https://www.um.es/web/innovacion/plataformas/ocw/listado-de-cursos/
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 Mireya del Pilar Arcos Pulido / Sara Lilia Ávila de Navia / Sandra Mónica
Estupiñán Torres / Aura Cristina Gómez Prieto INDICADORES
MICROBIOLÓGICOS DE CONTAMINACIÓN DE LAS FUENTES DE
AGUA. Nova, julio-diciembre, año/vol. 3, número 004 Universidad Colegio
Mayor de Cundinamarca Bogotá, Colombia pp. 69-79
https://www.redalyc.org/pdf/411/41130408.pdf
 ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO DE LOS ALIMENTOS METODOLOGÍA
ANALÍTICA OFICIAL MICROORGANISMOS INDICADORES VOLUMEN 3
http://www.anmat.gov.ar/renaloa/docs/analisis_microbiologico_de_los_alime
ntos_vol_iii.pdf

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