DEPARTAMENTO DE BIOLOGÍA Y QUÍMICA

GRUPO DE INVESTIGACIÓN DE PRODUCTOS NATURALES

LABORATORIO DE PRODUCTOS NATURALES
“DR. ALFREDO NICOLÁS USUBILLAGA DEL HIERRO”

PRÁCTICA N° 1
DETERMINACIÓN DE LA CONCENTRACIÓN DE HIERRO EN UNA TABLETA
VITAMÍNICA

Integrante:
Cabrita, Jesús
C.I: 29.994.004
Tutor: Peña, Alexis

Trujillo, junio de 2022

 Introducción

La energía cinética que poseen las ondas electromagnéticas de luz visible,

rayos ultravioleta e infrarrojos; se conoce como energía radiante. La misma se

caracteriza por propagarse en el vacío sin necesidad de soporte material alguno, y

se describe por unidades llamadas fotones. Salvo raras excepciones, toda

sustancia es capaz de emitir y absorber esta energía, incluyendo aquellas que

presentan transparencia como el agua. Existen técnicas de medición cuantitativa

de las propiedades ópticas (absorbancia) de las sustancias en dicha gama de

longitudes de onda, como la espectrofotometría; que permite además estimar la

concentración de un analito en una solución (Iwaya & Wakui, 2022).

El principio es la medición de la intensidad de la luz cuando un haz de la misma

atraviesa la solución; al encontrarse el fotón con una de las moléculas y ser

absorbido, la misma pasa de un estado fundamental a uno excitado (en la región

visible 400-800 nm, en especial), reduciendo así el número de fotones del haz que

llegan al detector. De tal forma que, se encuentra delimitado en la Ley de Lambert-

Bert, la cual establece que factores como la concentración y absortividad de una

solución y el espesor de la celda influyen en la absorbancia.

Con el presente informe, se buscó determinar la concentración del hierro en

una tableta vitamínica con base a un análisis de una solución stock de Sulfato

Ferroso Amoniacal y posterior relación con la muestra. En vista de la importancia

de las implicaciones de una alta cantidad de hierro a consumir, lo cual podría

traducirse en potenciales radicales libres dañinos para los tejidos (Abbaspour,

Hurrell, & Kelishadi, 2014).

 Parte experimental
Metodología

Figura 1 y 2. Procedimiento de la determinación de hierro en una tableta vitamínica de sulfato

ferroso utilizando patrones de Sulfato Ferroso Amoniacal Hexahidratado, en equipo de
espectrofotometría.
Cálculos

Figura 3. Determinación del Sulfato Ferroso Amoniacal teórico necesario (g) para la preparación de
la solución madre stock de 30 ppm de Fe2+; y por relación de equivalencia, con base a lo
experimental, de la masa (mg) y concentración (ppm) de Fe 2+ en solución.

Nota: Cabe destacar que se utilizó SFA hexahidratado (P.M: 392,14 g/mol), al 99% pureza. El peso
experimental resultó ser de 22,6 mg y el volumen de disolución de 0,1 L.

Figura 4. Determinación de las concentraciones (ppm) de los patrones a establecer en la curva de

calibración.
 Resultados
Tabla 1. Absorbancias obtenidas en relación a la concentración de hierro en disolución del
patrón (y del equivalente en volumen del añadido de la solución madre).

Patrón Vs (L) [Fe2+] (ppm) Absorbancia

1 1x10-3 1,304 0,1416
2 2x10-3 2,608 0,248
3 3x10-3 3,912 0,369
4 4x10-3 5,216 0,4613
Fuente: Datos obtenidos experimentalmente; Figura 4.

Absorbancia vs Concentración
0.5
0.45
f(x) = 0.082829754601227 x + 0.0349500000000001
0.4 R² = 0.997546834612964
Absorbancia

0.35
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
1 1.5 2 2.5 3 3.5 4 4.5 5 5.5

[Patrón] ppm

Absorbancia vs Concentracion: Patrones

Lineal

Gráfico 1. Curva de calibración Absorbancia vs Concentración (ppm) de patrones de Fe 2+.

 Cálculos:

Figura 5. Determinación de la concentración teórica de Fe 2+ en la solución final (dilución)

 Nota: En la respectiva caja de la tableta vitamínica se indica que el sulfato ferroso presente se
encuentra en su forma monohidratada (FeSO4XH2O), cuya masa molecular es de 169,92 g/mol.

Figura 6. Determinación de la concentración experimental de Fe 2+ tanto en la solución final y la

madre (factor de dilución).

Tabla 2. Comparación de las concentraciones de Fe2+ en disolución final (marcha de

dilución): teórica y experimental; con base al error relativo.

[Fe2+] (ppm)
Muestra Absorbancia Error relativo
Experimental Teórica (%)
Tableta 0,3123 3,349 4,9435 32,2
vitamínica
Fuentes: Datos obtenidos experimentalmente; Figuras 5 y 6.

 Cálculos:

Figura 7. Determinación de la masa equivalente de FeSO 4xH2O y de Fe presente

experimentalmente en la muestra de tableta.

Tabla 3. Comparación de la cantidad de FeSO4xH2O en la muestra de tableta: reportado

por el fabricante y experimental; con base al error relativo.

Muestra [FeSO4xH2O] (mg) [Fe2+] (mg) Error

Reportado Experimental Equivalente Experimental relativo
en caja caja (%)
Tableta 300 203,21 98,87 66,98 32,2
vitamínica
Fuente: Datos obtenidos experimentalmente; Figura 7.
 Discusión de resultados

En primera instancia, cabe señalar que se obtuvo un comportamiento casi

ideal de la ley de Lambert—Beer al darse un cuadrado de coeficiente de

correlación de 0,9975 en la curva de calibración (gráfico 1). Esto, en otras

palabras, es indicio de que los resultados experimentales poseen una conducta

directamente proporcional en cuanto a concentración y absorbancia del analito Fe

en los patrones a lo largo de la sucesión en X; cumpliéndose el principio de la ley.

Ahora bien, considerando esto anterior se puede esperar que la concentración

experimental sea, en cierto grado, precisa con respecto a la determinada en teoría

(exacta). No obstante, hubo un margen de error mayor al 5%, lo cual puede

apreciarse en las tablas No. 2 y 3. Esta primera fue de 3,349 ppm, en comparación

a los 4,9435 ppm equivalentes del reportado por el fabricante. Tomando en cuenta

los factores de dilución, la concentración de FeSO 4xH2O (principio activo) en la

muestra de tableta real habría sido de 203,21 mg, frente a un 300 mg reportado;

habiendo un error relativo de 32,2%.

Una de las posibles causas podría ser la homogeneidad de las tabletas, se

desconoce la distribución real del analito a lo largo de la unidad; por lo tanto,

podría haber generado variaciones en la cantidad experimental obtenida. De tal

forma que, durante el tratamiento de la muestra, tanto el filtrado (carbón activo) y

el trasvasado habrían sido factores significativos. Por otro lado, hay que

considerar el rol de la matriz, según Gert (2020) “los efectos de la matriz se

observan como una pérdida de respuesta, lo que da lugar a una subestimación de

la cantidad de analito, o como un aumento de la respuesta, lo que produce un

resultado sobreestimado” (párr. 1).

Asimismo, la sensibilidad de la solución final con o-fenaltrolina e hidroquinona

es también de relevancia, pese a prepararse la solución patrón respectiva minutos

antes de su análisis, al realizarse la medida 3 veces es probable que se

promoviera por la luz la ruptura de enlaces del complejo en ese lapso de tiempo

en algún grado.

Conclusiones

Se obtuvo un aumento proporcional de la absorbancia con respecto a la

concentración de las soluciones patrones (gráfico 1).

La solución para el barrido permitió verificar la longitud de onda ideal para el

metal expresada en la guía de 510 nm, al ser próximo en el valor 511 nm (figura

8).

Se comprobó que el carbón activo elimina las impurezas coloreadas, al

presenciarse la desaparición del color rojo intenso de la recubierta de la tableta

vitamínica de sulfato ferroso (figura 9 y 10).

El ácido clorhídrico a temperatura ambiente estabiliza al Fe 2+; sin embargo, a

la respectiva concentración y calentamiento habría actuado como agente oxidante.

Siendo la hidroquinona esencial para una reducción del Fe 3+ al analito respectivo,

observándose así solo soluciones de complejo rojo intenso y no leve (figura 11).

Se determinó que la tableta contenía 203,21 mg de FeSO 4xH2O frente a un 300

mg indicado en la caja; existiendo un error relativo de 32,2% de contenido.

 Es necesario aplicar adición estándar con el fin de determinar una cantidad

más acertada del analito en la muestra de tableta, con el fin de minimizar la

posible influencia enorme de la matriz en los resultados. Por lo tanto, el presente

método resultó inexacto por dicho motivo, así como también por la sensibilidad del

complejo rojo de o-fenaltrolina en las medidas del promedio de absorbancia y la

dudosa distribución del analito en la unidad de la tableta.

 Anexos

Figura 8. Impresión del barrido realizado para verificar el máximo de absorción.

Nota: Se ajustó el cero con la longitud de onda de 510 nm para las medidas de la muestra y
patrones por sugerencia del tutor presente.

Figura 9. Disolución de la tableta en 25 ml de HCl en caliente, previo al carbón activo.

Figura 10. Disolución de la tableta en 25 ml de HCl en caliente, posterior a la adición del carbón
activo.

Figura 11. Disoluciones del blanco, patrones (1,304; 2,608; 3,912 y 5,216 ppm) y la muestra
analizada.
 Referencias

Abbaspour, N., Hurrell, R., & Kelishadi, R. (19 de Febrero de 2014). Revisión
sobre el hierro y su importancia para la salud humana. J Res Med Sci, 165-
174.
Gert. (17 de Agosto de 2020). Batavia Biosciences. Obtenido de ¿Qué importancia
tiene el efecto matriz en el análisis de muestras de bioprocesos?:
https://www.bataviabiosciences.com/matrix-effect/#:~:text=The%20matrix
%20effect%20is%20the%20effect%20on%20an,an%20increase%20in
%20response%2C%20producing%20an%20overestimated%20result.
Iwaya, Y., & Wakui, T. (2022). Introducción al espectrofotómetro UV-Vis-NIR
modelo UH4150AD. Obtenido de
https://www.hitachi-hightech.com/global/sinews/technical_explanation/
080302/