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Laboratorio Rev. 0
05-DICIEMBRE-2022 1 de 69
Control de la emisión
Elaboró: Revisó: Autorizó:
Nombre Biol. Exp. Adán Serafín Q.F.B Elena Mendoza Dra. Rosa María Cortez
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Cargo-puesto Analista Encargado de laboratorio Responsable sanitario
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Fecha 05-diciembre-2022 05-diciembre-2022 05-diciembre-2022
MANUAL DE MANEJO DE EQUIPOS GDM-MA-05
Laboratorio Rev. 0
05-DICIEMBRE-2022 2 de 69
Índice Pág.
1. Importancia………………………………………………………………………. 5
2. Objetivo del manual……………………………………………………………. 5
3. Alcance………………………………………………………………………… 5
… 6
4. Normas y políticas de operación……………………………………………… 7
5. Manejo de equipos……………………………………………………………… 7
5.1 Termociclador Bio-rad CFX Opus 96…………………………………… 7
5.1.1 Procedimiento de uso……………………………………………... 12
5.1.2 Cuidados especiales………………………………………………. 12
5.1.3 Mantenimiento preventivo………………………………………… 13
5.2 Microcentrífuga refrigerada Sorvall Legend Micro 21R………………… 13
5.2.1 Procedimiento de uso……………………………………………... 13
5.2.2 Cuidados especiales………………………………………………. 14
5.2.3 Mantenimiento preventivo………………………………………… 14
5.3 Campana de flujo laminar ESCO…………………………………………. 14
5.3.1 Procedimiento de uso……………………………………………... 15
5.3.2 Cuidados especiales………………………………………………. 15
5.3.3 Mantenimiento preventivo………………………………………… 15
5.4 Congelador biomédico Haier……………………………………………… 16
5.4.1 Procedimiento de uso……………………………………………... 16
5.4.2 Cuidados especiales………………………………………………. 16
5.4.3 Mantenimiento preventivo………………………………………… 16
5.5 Centrifuga de placas de PCR……………………………………………... 17
5.5.1 Procedimiento de uso……………………………………………... 17
5.5.2 Cuidados especiales………………………………………………. 17
5.5.3 Mantenimiento preventivo………………………………………… 17
5.6 Robot de extracción de ácidos nucleicos Zybio EX3000………………. 18
5.61.1 Procedimiento de uso……………………………………………... 18
5.61.2 Cuidados especiales……………………………………………… 19
5.61.3 Mantenimiento preventivo………………………………………… 19
5.7 Refrigerador farmacéutico Haier…………………………………………. 19
5.7.1 Procedimiento de uso……………………………………………... 19
5.7.2 Cuidados especiales………………………………………………. 20
5.7.3 Mantenimiento preventivo………………………………………… 20
5.8 Termociclador MIC…………………………………………………………. 20
5.8.1 Procedimiento de uso……………………………………………... 24
5.8.2 Cuidados especiales………………………………………………. 24
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1. Importancia
El conocimiento de los equipos es uno de los elementos esenciales del sistema de gestión
de calidad. En el laboratorio, es necesaria una adecuada gestión de los equipos para
garantizar la exactitud, la fiabilidad y la puntualidad de los análisis.
Los beneficios de un buen programa de gestión de los equipos son muchos, entre ellos:
3. Alcance
A nivel externo no aplica.
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5. Manejo de equipos
El manejo de equipos dentro del laboratorio es fundamental para la adecuada obtención
de resultados, con el fin de que el usuario comprenda y tenga en cuenta las necesidades
de cada equipo, se creó el manual de equipos de laboratorio el cual consta de: las
recomendaciones de mantenimiento, uso y prevenciones, que los fabricantes señalan. En
caso de existir algún mantenimiento especializado el manual señalara que solo se puede
hacer por personal capacitado o certificado.
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Selecciona la opción “Edit plate” para introducir los códigos de identificación de las
muestras. Al terminar selecciona Save changes y da click en la ventana Next.
Para abrir la compuerta del termociclador, selecciona la casilla “open lid”, introduce
la placa de PCR preparada de acuerdo con el PNO09, selecciona “close lid” y
selecciona “start Run”.
Espera durante una hora y treinta minutos para poder leer los resultados
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plástico desechables y
una disolución de etanol
al 95%. Enjuague
siempre los pasillos con
agua para eliminar todo
rastro de alcohol.
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mantenimiento
1.0 Exterior 1.1 Con un paño y Semanal
detergente de pH neutro,
limpia el exterior
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Seleccione “Assays”
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Figura 16. Selección del protocolo para utilizar
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Figura 17. Selección del botón “Samples” para ingreso de los folios de las muestras.
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El proceso de muestras en el MIC tiene una duración de una hora treinta minutos.
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PPCR0015
PCR0007
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Para el ajuste del volumen a valor bajo gira el anillo de ajuste en sentido horario.
El volumen ajustado aparece en el indicador del volumen
Para el ajuste del volumen a valor alto gira el anillo de ajuste en sentido contrario.
El volumen ajustado aparece en el indicador del volumen
Lee el volumen de arriba hacia abajo. La posición decimal se encuentra debajo del
guion de separación
Coloque una punta en la pipeta, presionando firmemente la pipeta contra la punta.
Presiona el botón de pipeteo hasta el primer tope
Sumerge la punta de pipeta en perpendicular en el líquido
Mantén la profundidad de inmersión y deja que el botón de pipeteo se deslice
lentamente hacia atrás. El líquido se aspira en la punta de pipeta
Retira la punta de pipeta del líquido
Presiona el botón de pipeteo hasta el segundo tope
Mantén el botón de pipeteo presionado y limpie la punta de la pipeta en la pared
del recipiente
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Antes de iniciar los procedimientos dentro del área de trabajo, activa la luz UV
durante 15 minutos para desinfectar
Levanta la compuerta que da acceso al área de trabajo de la campana de
bioseguridad
Enciende el ventilador y las luces de. Asegura que la entrada y salida de la
campana no tenga obstrucciones
Espera 3 minutos a que el indicador de la corriente de aire se estabilice en la zona
central de la pantalla
Dentro de la campana se deben seccionar espacios bien definidos, los cuales
serán, área limpia, sucia y con virus.
En este punto se puede empezar a realizar el trabajo. El analista en turno deberá
portar el EPP en todo momento para evitar contaminación
Al terminar el trabajo, retira el material utilizado y deja el equipo operando durante
2 o 3 minutos más para que este realice una purga
Repite el limpiado de las superficies con alcohol al 70%
Apaga los ventiladores y la luz dentro de la campana, cierra la compuerta y vuelve
a encender la función de luz UV durante 15 minutos
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Abra el compartimiento del batería empujando la tapa hacia abajo como indica la
flecha. Retire la tira de seguridad de la batería y junto con la cubierta protectora de
la pantalla LCD.
Seleccione las unidades de temperatura con el selector situado en la parte
posterior del instrumento.
la pantalla superior indica la temperatura ambiente y la inferior la que se relaciona
con la sonda.
Indicadores de los valores máximos y mínimos
A. presione una vez el botón MAX/MIN. En la pantalla aparecerá el
valor mas alto medido desde la ultima vez que se oprima el botón
reset.
B. oprima de nuevo el botón MAX/MIN mostrara el valor mas bajo
medido desde la última vez que se oprimió el botón reset.
C. Oprima de nuevo el botón MAX/MIN para regresar a operación
normal.
Restablecer (borrar) la memoria MAX/MIN.
A. Oprima y sostenga el botón "reset” durante un segundo en modo de indicar
MAX/MIN para borrar la memoria y empezar a registrar nuevos datos.
5.14.2 Cuidados especiales
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productos de limpieza.
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5.17 Microcentrífuga
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Establecer un blanco:
A. Subir el brazo del pedestal superior y limpiar con una toalla los pedestales.
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Limpiar equipo:
D. Subir el brazo del pedestal superior y limpiar con una toalla los pedestales.
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5.0 Descontaminar de 5.1 Levantar el brazo del pedestal Después del uso
pedestales. 5.2. Agregar 3 µl de hipoclorito de sodio de muestras que
al 0.5% en el pedestal inferior. contengan material
5.3 Bajar el brazo y esperar 3 min. peligroso.
5.4 Levantar el brazo y limpiar con una Antes de
toalla los pedestales. mantenimiento
5.5 Agregar 3 µl de agua desionizada correctivo
en el pedestal inferior.
5.6 Bajar el brazo y esperar 3 min.
5.7 Levantar el brazo y limpiar con una
toalla los pedestales.
6.0 Descontaminar 6.1 Humedecer un paño suave con Después del uso
superficie externa hipoclorito de sodio al 0.5% y frotar con de muestras que
cuidado las superficies externas. contengan material
6.2 Utilizar un paño con agua peligroso.
desionizada para para eliminar el Antes de
hipoclorito de sodio al 0.5%. mantenimiento
correctivo
pedestales
Prueba de intensidad
Verificación del rendimiento
Prueba de imagen del
pedestal
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5.20 Refrigerador
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5.21 Congelador
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5.22 HybriSpot 12
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Utilice el botón "ENTER” para seleccionar el procedimiento o para dar paso a la siguiente
fase del proceso, El botón de más (+) se utiliza para adelantar a la siguiente opción en el
menú y el botón de menos (-) para regresar a la opción anterior, el botón “WHAS” se
utiliza en el lavado automatizado, el botón “PUMP” enciende la bomba para el lavado de
pozos de vacío, el botón “cancel” tiene la función de cancelar un paso o parte del proceso.
Los botones que contiene le símbolo de un “termómetro” funciona para aumentar o
disminuir la temperatura en un proceso, se controla mediante los botones de + o -. El
botón con reloj de arena tiene la función de aumentar o disminuir el tiempo en el proceso,
para modificar el tiempo se usan los botones + o -, una vez seleccionado el nuevo
parámetro oprima “enter”
el hybrispot12 ya tiene precargados algunos protocolos listos para usarse, para ingresar a
ellos al encender el hybrispot 12 oprima “enter” en la pantalla apareces la pantalla “modo
selec” y solo dos opciones para elegir modo manual (se usa para limpiar los pozos de
vacío) y modos “wizard” (aquí se encuentran los programas precargados VPH, AMR, BNS,
CNV, RES, SEP, STD, ZOO) seleccione el protocolo deseado con los botones + y -, de clic en
enter al estar en el que desee.
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Control de la emisión
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preventivo general,
proporcionado por la
empresa.
Control de la emisión
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5.24 NanoPhotometer np 80
Procedimiento de uso
Control de la emisión
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Una vez elegido el material genético a cuantificar, establezca un blanco eón agua libre
de ARNasa.
Abra la tapa y con la luz laser del nanoPhotometer deposite de 1 a 2 ul de la muestra
en el centro de la luz.
Control de la emisión
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limpies perfectamente el área de donde se depositó la muestra con una toalla libre de
pelusas.
Coloque 2 ul de muestra a cuantificar, cierre la tapa y dele clic en “muestra” a
continuación el nanodrop leerá la cantidad de material genético en la muestra.
Repita el mismo proceso de limpieza del área donde se depositó la muestra y agregue
una nueva muestra.
En la pantalla oprima HOME y diríjase a la esquina inferior derecha para apagar el
equipo.
1. Limpie el are del óptico con un paño libre de pelusas y agua destilada
2. Limpie la superficie y alrededor del tochscren con el sanitizante en turno
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3. No limpie la pantalla toch con algún agente abrasivo de limpieza ya que puede
dañarla.
Cuidados especiales
Mantenimiento preventivo
Procedimiento de uso
al terminar de usar el microscopio gire con el revolver los objetivos hasta llegar al menor
(4X).
limpie el objetivo de haber usado aceite de inmersión con una mezcla de acetona-alcohol
(7:3) o xilol esto con el papel seda para limpiar el objetivo del aceite de inmersión.
No abuse de la limpieza con xilol y alcohol acetona ya que puede dañar el objetivo o
aflojarlo.
Siempre que termine de usar el microscopio limpie con una franela que no deje pelusa y
cubra con su funda, enrolle el cable de carga eléctrica.
Cuidados especiales
Control de la emisión
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Procedimiento de uso
Botón
“open lid”
posicione el rotor de tubos procurando que las muescas del motor concuerden con las
señaladas en el rotor, hasta que escuche un “click”
Si necesita remover el rotor, en la parte superior del rotor se encuentran dos manijas las
cuales debe precionar al mismo tiempo para loberar el rotor del motor.
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Una vez balanceado el rotor es necesario cerrar adecuadamente las capsulas del carrusel,
baje la tapa cuidadosamente y espere unos segundos para que la centrifuga cierre
automáticamente.
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6. Glosario
Blanco: Una muestra que no contienen el analito a medir o analizar de interés.
CalRed 610: fluoroforo con una longitud de onda de 610 nm usado para acoplarse al gen
RNasa P.
Fam: fluoroforo con longitud de onda de 490 nm que ayuda a identificar en una muestra la
detección del gen RdRp
Fluroforo: compuesto químico que emite una longitud de onda especifica, conjugado a
una sonda complementaria de ARN O ADN.
Filtro HEPA:de l inglés High Efficiency Particulate Air, filtro físico que evita la propagación
de bacterias y virus a través del aire.
Centrifuga: máquina de rotación usada para separa en sus diferentes faces las muestras,
en función de la densidad de sus componentes.
CN: control negativo, agua libre de nucleasas.
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CP: control positivo, clona de una muestra investigada la cual se conoce sus
características y comportamiento, usada para dar valides en el diagnóstico.
Folio: número único de identificación intento asignado a una muestra especifica.
Logix Smart COVID-19: Kit de diagnóstico molecular in vitro utilizo para la detección de
SARS Cov-2
Micropipetas: su función es medir líquidos de baja densidad de aproximadamente 1 a
1000 microlitros
PNOs: Proceso Normalizado Operativo
PCR: técnica molecular denominada Reacción en Cadena de la Polimerasa, usada para
amplificar segmentos específicos de ARN o ADN.
pH: potencial de hidrogeno mide la concentración de iones de hidrogeno (H°) en una
sustancia.
Rotor: Es el componente de un instrumento eléctrico que permite un movimiento giratorio
RPBI: residuos Peligrosos Biológicos-Infecciosos
Termociclador: instrumento de biología molecular que realiza por medio ciclos de
temperatura la reacción en cadena de la polimerasa.
VPH: virus del papiloma humano
Microscopio: su función es amplificar los objetos de dimensiones extremadamente
pequeñas al ojo humano.
RPM: Revoluciones por minuto
Espray: líquido que acumula presión en un recipiente.
Objetivos: en el microscopio son los responsables de amplificar en diferentes rangos las
imágenes que se observan. Contiene lentes que hacen más nítida la resolución de una
imagen.
7. Bibliografía
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CFX OPUS 96 AND CFX OPUS 384 REAL-TIME PCR SYSTEMS. Safety and Regulatory
Compliance Guide
LabGarde ES Energy saver class ll. type A2 laminar flow biosafety cabinet. Modelos NU
540-300/400/500/600 Bench7Console. Manual de operación, OCTUBRE 2014, revisión
3serie 1.
Legend Micro 17/17R 21/21R. Instructions for use. Octubre 21, 2016
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