RESUMEN

Los experimentos se realizaron con lima 'Tahiti' (Citrus latifolia Tan.) árboles con el
fin(objetivo) de definir las condiciones necesarias para inducir floración. Estrés hídrico cíclico o
continuo durante 4 a 5 semanas inducido floración. Estrés hídrico moderado (-2,25
meppascales, mediodía) o severo (-3,5 megapascales, mediodía) medido por la presión del
xilema de la hoja potencial, por tan solo 2 semanas indujo la floración, pero la respuesta fue
más significativa en árboles severamente estresados. Baja temperatura (18°C día/10°C noche)
indujo una respuesta de floración dependiente del tiempo muy parecida de estrés hídrico
moderado. Presión de xilema de hoja significativamente negativa los potenciales en
comparación con los controles se encontraron solo bajo estrés hídrico tratamiento, lo que
sugiere que un evento común relacionado con el estrés, separado de El bajo potencial hídrico
de la planta está involucrado en la inducción floral. Se indujo la floración de esquejes
inmaduros sin hojas de árboles maduros cultivados en el campo mediante tratamiento de
estrés hídrico, lo que sugiere que las hojas no son esenciales para un respuesta inductiva de la
flor.

lima 'Tahití',Citrus latifoliaTan., es un triploide estéril (tipo de planta y floración) que se

propaga vegetativamente evitando así un período juvenil que es común a muchas especies de
árboles. Las flores se producen y fructifican y maduran en esquejes con raíces frondosas, así
como en plantas propagadas por acodo aéreo. Este hábito inusual (habito de reproducción)
hace que la lima 'Tahiti' sea adecuada como planta de prueba para estudiar la floración en los
árboles (20). La floración en cítricos puede ser inducida por una temperatura más baja (4, 10,
14-16, 20) o estrés hídrico (3, 11, 18, 20) e inhibida por la aplicación de giberelina (5, 6, 9, 12,
13, 18) . La regulación de la floración por estrés hídrico no es común en los árboles y
generalmente se reporta que es efectiva en especies tropicales y subtropicales (1-3, 18).Sin
embargo, los estudios se han realizado en diversas condiciones de campo y no son descriptivos
(2) en el sentido de que los estudios no definen la relación cuantitativa entre el estrés y la
respuesta de floración. Estas mismas deficiencias son verdadero para estudios que involucran
la regulación de baja temperatura de la flor inducción.

En nuestro esfuerzo por comprender el control químico de la floración en lima 'Tahití' nos
pareció importante manipular la floración en pequeños árboles en contenedores y tener más
de un método de inducción floral a nuestro alcance. Al utilizar varios tratamientos inductivos
florales, esperamos determinar si un evento regulador o señal controla la inducción de flores.
Este reporte describe la relación cuantitativa entre baja temperatura y estrés hídrico en
inducción floral.

MATERIALES Y METODOS

Material vegetal: En la mayoría de los experimentos utilizamos en lima 'Tahiti' de 1 a 2 años

propagados por acodo aéreo o por injerto (propagación de las plantas de ensayo) de yemas
sobre Citrus macrophylla Wester. (portainjerto)rizoma. Los árboles se extendían en de 0,5 a
1,0 m de altura y se cultivaron en invernadero bajo las condiciones de cultivo del sur de Florida
en plástico negro de 16 cm macetas en una mezcla de 1 turba: 1 perlita: 1 arena, (sustrato de
maceta) y fertilizado regularmente con un fertilizante soluble NPK 20:20:20 más
micronutrientes. En otros experimentos, se obtuvieron esquejes de tilos 'Tahití' de 18 años de
edad sobre portainjertos de limón rugoso (Citrusjambhiri Lush.) en suelo de piedra caliza de
Rockdale en Homestead Tropical Research y Centro Educativo. Los esquejes se seleccionaron
recortando el crecimiento inmaduro de la temporada actual, que en su mayoría tenía hojas
inmaduras completamente expandidas, pero no endurecidas, y se recortaron cerca de la base
bajo el agua. Se quitaron las hojas para que de 5 a 8 nodos y de 2 a 4 o ninguna hoja,
dependiendo del tratamiento. Los recortes con un extremo se clavaron en vermiculita y se
colocado en el invernadero o en otro banco bajo nebulización intermitente.

Tratamientos de estrés hídrico: El estrés hídrico de los árboles era continua o cíclica. El estrés
hídrico continuo se estableció sellando la maceta, el suelo y las raíces en una bolsa de plástico
con solo el tallo y las hojas expuestos al medio ambiente y reteniendo el agua. La pérdida de
agua por transpiración de cada árbol contenido se determinó mediante el control de la
disminución de peso diaria. Los tilos(limas) transpiraban aproximadamente 140 ml de agua/d.
A partir de estos las mediciones 67% de la cantidad de agua perdida por día se añadieron de
nuevo al árbol diariamente para que el estrés pudiera imponerse gradualmente y caída de
hojas minimizada. Cuando todas las hojas se marchitaron y las hojas maduras tenían un
potencial de presión del xilema de al menos -3.5 MPa (estrés severo según lo definido por
Syvertsen, [21]), se agregaron 100 ml de agua por día para tach para reemplazar
aproximadamente agua transpiracional perdida y para mantener estos árboles bajo constante
estrés. Adición de 100 ml de agua por día al suelo brevemente saturado suelo hasta que drenó
a capacidad de campo. En términos absolutos, el estrés hídrico continuo puede no definir con
precisión esta secuencia de eventos, pero el estrés hídrico continuo describe mejor nuestras
observaciones con respecto al estado del agua de estos árboles.

El estrés hídrico se logró estresando cada árbol hasta el punto de marchitámiento como se
indicó anteriormente y luego rellenando el recipiente hasta la cavidad completa, lo que
establece el suelo a capacidad de campo. El ciclo seco (marchitamiento), húmedo (suelo del
contenedor a capacidad de campo) o estrés continuo se continuó durante la duración de cada
experimento. Los árboles de control y tratamiento se preacondicionaron durante al menos un
mes mediante el mantenimiento del suelo del contenedor a capacidad de campo mediante la
aplicación de agua dos veces al día mediante riego automático por goteo. Los potenciales de
presión del xilema foliar se midieron antes del amanecer y al mediodía por el técnica de
bomba de presión (equipo de medición de contenido de agua en la hoja)(19). Se quitaron las
hojas en el zona de abscisión del limbo del pecíolo de cada hoja, y medidas se realizaron
dentro de los 30 s de la eliminación de las hojas. Presión del xilema de la hoja Se realizaron
mediciones de potencial a intervalos semanales en el experimentos de curso de tiempo, y dos
hojas por árbol (10 hojas / tratamiento) se midieron antes del amanecer y al mediodía. Sólo
dos Se usaron hojas de cada árbol para maximizar el número de hojas que quedan en los
árboles estresados y mantener la uniformidad de tratamiento.

Baja temperaturaTratos. Experimentos en cámara de crecimiento se realizaron a

temperaturas de 18/10'C (día/noche) con fotoperíodos de 12 h a un flujo de fotones que
oscilaba entre 350 y 850 pE/m-2 s. Antes de colocar el árbol tach en la cámara de crecimiento,
aproximadamente la mitad de todos los vértices de las ramas, incluidas 2 o 3 hojas y nudos, se
cortaron (4). Los controles se trataron de la misma manera y se cultivaron en el invernadero en
condiciones del sur de Florida (17) y temperaturas de 29/24"C (día/noche). En estos
experimentos, el "total de brotes producidos" representa la suma de brotes vegetativos,
mixtos y generativos. Estos tres tipos de brotes se definen aquí como se han definido
anteriormente (6, 12, 14). Brevemente, los brotes vegetativos solo tienen hojas, los brotes
mixtos tienen hojas y flores, y los brotes generativos solo tienen flores. Las tablas se han
obtenido de al menos menos dos experimentos repetidos en todos los casos
 RESULTADOS Y DISCUSION

El estrés hídrico continuo o cíclico durante 4 a 5 semanas (desde el inicio de la aplicación

reducida de agua hasta la restauración del riego diario a la capacidad de campo del suelo del
contenedor) dio como resultado la inducción de flores de lima 'Tahiti' (Tabla I). El estrés hídrico
continuo y cíclico dio como resultado una mayor producción total de brotes, así como un
número significativamente mayor de flores que los controles. Después de que estos árboles
terminaron de florecer, se quitaron las flores y los frutos. Se permitió que los árboles
reanudaran la actividad vegetativa.gfOWth durante un período de 2 meses bajo condiciones
de cultivo controladas en invernadero. Los mismos árboles fueron inducidos a florecer por
segunda vez mediante el procedimiento anterior. La justificación para usar los mismos árboles
en el experimento 2 fue que la reinducción de flores en la misma población de árboles
mediante el mismo tratamiento debería indicar que nuestros tratamientos fueron realmente
efectivos, ya que la floración intensa en los brotes subsiguientes no ocurre en los cítricos
cultivados en invernadero. . Los resultados del segundo experimento fueron similares a los del
primero. El estrés hídrico continuo y cíclico dio como resultado que los árboles produjeran más
brotes y flores en total que los controles, que produjeron solo números aleatorios e
insignificantes de brotes y flores en flor. Se produjeron más flores/plantas en el estrés
continuo que en el cíclico del experimento 1, pero no en el experimento 2. No se encontraron
diferencias significativas entre el estrés continuo o cíclico con respecto a los brotes por planta,
el tipo de brote o las flores por planta, pero el estrés continuo generalmente resultó en un
mayor número de brotes totales por planta y flores por planta. De hecho, siempre que la
severidad del estrés resultara en un marchitamiento prolongado o un potencial de presión del
xilema de la hoja de -3.5 MPa durante 4 a 5 semanas, la respuesta inductiva de la flor fue
similar y significativamente diferente a la de los controles. Por lo tanto, se utilizó la condición
de tensión continua porque era fácil de producir y permitía la uniformidad de siempre que la
severidad del estrés resulte en un marchitamiento prolongado o un potencial de presión del
xilema de la hoja de -3.5 MPa durante 4 a 5 semanas, la respuesta inductiva de la flor fue
similar y significativamente diferente a la de los controles. Por lo tanto, se utilizó la condición
de tensión continua porque era fácil de producir y permitía la uniformidad de siempre que la
severidad del estrés resulte en un marchitamiento prolongado o un potencial de presión del
xilema de la hoja de -3.5 MPa durante 4 a 5 semanas, la respuesta inductiva de la flor fue
similar y significativamente diferente a la de los controles. Por lo tanto, se utilizó la condición
de tensión continua porque era fácil de producir y permitía la uniformidad de tratamiento

El experimento anterior, que se había realizado en dos épocas diferentes del año, incluida la
época en la que el tilo 'Tahiti' normalmente no florece, indicó que la reducción podría inducirse
en árboles de tilo en contenedores mediante un período de estrés hídrico que dura de 4 a 5
semanas. período. Para definir más claramente la duración y la gravedad del estrés hídrico
necesario para inducir la floración, se midieron los potenciales de presión del xilema de la hoja
a intervalos semanales durante un período de 4 a 5 semanas en una población de árboles que
estaban estresados. La Tabla II muestra el nivel de estrés moderado mantenido por encima de
los controles antes del amanecer y al mediodía para cada intervalo de tiempo medido.
Definimos niveles moderados de estrés (-2.1 a -3.0 MPa) como aquellos niveles intermedios
entre control y estrés severo (-3.5 MPa, [21]). Los potenciales de presión del xilema de la hoja
del mediodía fueron generalmente más bajos y las mediciones menos variables que las del
preamanecer, excepto en la semana 5, donde el estrés del preamanecer fue tan grande como
el del mediodía. La variabilidad entre árboles y los cambios climáticos diarios fueron
presumiblemente responsables de la variabilidad en las mediciones del potencial de presión.
(resultados de la tabla II) Los árboles de control produjeron el menor número de brotes/planta
y esos brotes fueron vegetativos. Se produjeron más brotes/planta como resultado del estrés
hídrico y los números generalmente aumentaron en árboles expuestos a mayores
duraciones.La floración se indujo después de 2 semanas de estrés. Los brotes de floración del
pemento y el número de flores por planta aumentaron con el tiempo bajo estrés. El mayor
porcentaje de brotes florales y flores por planta se encontró después de 5 semanas de estrés
hídrico.

Aparentemente, niveles moderados de estrés pueden inducir la floración en un período de

tiempo relativamente corto (2 semanas), pero la respuesta inductiva es mucho mayor después
de un período prolongado (5 días húmedos). En un experimento similar, los árboles de tilo
'Tahiti' fueron severamente estresados como lo indican los potenciales de presión del xilema
de la hoja que oscilan entre -3,25 y -3,67 MPa (Tabla III). Los potenciales de presión del xilema
de la hoja antes del amanecer y al mediodía fueron significativamente diferentes de los
controles en el momento medido ench. Las mediciones de estrés antes del amanecer y al
mediodía fueron significativamente diferentes entre sí a las 2 semanas, pero, además, los
potenciales de presión no fueron diferentes entre sí y prevaleció un nivel constante de estrés
hídrico en estos árboles durante todo el experimento. A estos niveles de estrés severo, se
mantuvo un potencial de presión del xilema foliar menos variable que los medidos para estrés
moderado (Tabla II), lo que indica que el control del estrés (potencial hídrico) se obtuvo bajo
condiciones severas de estrés hídrico. Como en el experimento anterior, los árboles de control
mostraron muy pocos brotes, y los brotes producidos fueron vegetativos. (resultados de la
tabla III) Por otro lado, el estrés hídrico severo en comparación con el estrés hídrico
moderado resultó en un mayor número de brotes y flores por planta, así como un mayor
porcentaje de brotes en flor en todos los intervalos de tiempo medidos. Las tendencias de
floración entre árboles con estrés hídrico moderado y severo fueron diferentes a lo largo del
tiempo, conseveramente árboles con estrés hídrico que producen el mismo número de flores y
brotes en flor en cada intervalo de tiempo medido. En condiciones de estrés hídrico
moderado, la duración del estrés hídrico fue un factor que regulaba la respuesta inductiva de
la flor. La respuesta de floración parece depender del tiempo cuando está regulada por niveles
moderados de estrés hídrico, pero en algún momento se alcanza la inducción floral de manera
más inmediata bajo condiciones de estrés hídrico más severo.

Similar al estrés hídrico, estrés por baja temperatura 18/10'C (día/noche) se llevaron a cabo
experimentos con tilos 'Tahití' en contenedores que crecían en la cámara de crecimiento como
se informó anteriormente (4, 10, 14). Los potenciales de presión del xilema foliar no difirieron
significativamente entre sí antes del amanecer excepto en el intervalo de tiempo de 4 semanas
(Tabla IV). Sin embargo, al mediodía, los árboles de control que crecían en el invernadero
tenían potenciales de presión negativa significativamente mayores en todos los intervalos
medidos. (resultados de la tabla IV)Los árboles de control, al igual que en los experimentos
previos de estrés hídrico, produjeron muy pocos brotes por planta, y los producidos fueron
vegetativos (Cuadros III y V). Se indujo la floración en los árboles después de haber estado en
la cámara de crecimiento por tan solo 2gracias,pero la respuesta no fue tan grande como la de
severamente agua estresado árboles dentro del mismo período de tiempo (Tabla V).(efecto de
la temperatura tabla V) El estrés por baja temperatura de la cámara de crecimiento resultó en
una respuesta inductiva de la flor similar a la del estrés hídrico moderado, pero
aparentemente no a través de una reducción común en el potencial de presión del xilema de la
hoja. Una señal diferente, mediada por un mecanismo común, puede estar regulando la
inducción floral. El estrés hídrico severo en lugar del estrés por baja temperatura produjo
consistentemente la mayor cantidad de flores y brotes florales. La inducción floral describe
mejor la respuesta floral observada después del estrés hídrico y de baja temperatura. Esta
creencia se basa en los resultados obtenidos de otros experimentos que se presentarán en
otro lugar (SM Southwick, TL Davenport,

Se llevó a cabo un experimento final para determinar si el estrés hídrico induciría la floración
en esquejes que se habían obtenido de árboles que crecen en el campo. Esquejes ("Materiales
y Métodos")(tabla VI) se separaron en dos poblaciones: las que tenían hojas y las que con las
hojas quitadas. De cada población se colocó un juego en el invernadero y se deja secar como
resultado de ser regado sólo ocasionalmente (estrés hídrico), y se puso otro conjunto en un
banco diferente bajo niebla intermitente (sin tensión) para prevenir la desecación (8). Durante
el período en el invernadero antes de la producción de flores, todas las hojas, excepto la
mayoría im maduras, marchitas y abscisas. Después de transcurridos 33 d, esos esquejes que
habían sido colocados en el invernadero (desecado), tanto frondosos como aquellos a los que
se les quitaron las hojas, produjeron flores (Cuadro VI). El mayor número de brotes, flores y
floración. los brotes se produjeron en esquejes que inicialmente habían dado hojas.

Sin embargo, aquellos esquejes a los que se les quitó las hojas manualmente produjeron
brotes tanto vegetativos como florales. Ya que Para estos experimentos se seleccionaron
esquejes frondosos inmaduros, es improbable que estuviera presente un mensaje floral
previamente almacenado.(resultados de tabla VI) Además, las flores producidas en esquejes
sin hojas sugieren que no es esencial que las hojas estén presentes para la inducción floral y
que la percepción de las señales de floración ocurre dentro del brote, o como muy
probablemente en el brote mismo. Aunque se ha especulado que las raíces de los cítricos
pueden producir una sustancia o sustancias que pueden transportarse brotar y ejercer control
sobre la brotación y la floración (7), estos esquejes inmaduros nunca florecen en el campo
mientras están adheridos al árbol hasta que pasan por un período de maduración o
posiblemente un evento de congelación (FS Davies, comunicación personal). Los recortes que
se colocaron en el lecho de niebla no produjeron brotes o flores. Por lo tanto, después del
mismo período de 33 d, estos Los esquejes se retiraron del lecho de niebla y se colocaron en
un campo abierto.

banco en el invernadero, y después de otras 5 semanas esos esquejes teniendo hojas produjo
brotes vegetativos y florales como un resultado del estrés hídrico (Cuadro VI). Esquejes sin
hojas que había sido colocado en el lecho de niebla no produjo nuevos brotes y finalmente
murió.En conclusión, los tilos 'Tahití' preacondicionados en contenedor la capacidad de campo
del suelo durante aproximadamente 1 mes puede ser severamente riega estresado por un
período de tan solo 2 semanas y flor consistente respuestas inductivas obtenidas. La respuesta
floral parece ser dependiente del tiempo en condiciones de estrés hídrico moderado y baja
temperatura. Sin embargo, la inducción floral de baja temperatura en comparación con el
estrés hídrico no está mediada por un disminución común en el potencial de presión del xilema
de la hoja. Inmaduro, los esquejes sin hojas pueden producir brotes florales bajo estrés hídrico
condiciones, lo que indica que las hojas no son esenciales para la flor inducción en cal 'Tahiti'.