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Ahuanary Reyes, J.; Curo Fernandez, H.; Huauya Pariona, B.

;
Bioquímica Ambiental Rosales Rojas, N.; Tuso Camaticona, L.; Vera Muñoz, Y.
Prof. Julio Cesar Bracho Pérez Universidad Nacional Tecnológica de Lima Sur

Introducción El reactivo lugol (yodo-yoduro) es un compuesto de


El almidón constituye la mayor parte de la dieta yodo y yoduro de potasio disueltos en agua destilada.
humana para la mayoría de la gente en el mundo, así Sirve para el reconocimiento del almidón ya que las
como para otros animales. Proporciona unidades de unidades de amilosa forman un complejo en el que
glucosa, molécula base del metabolismo celular. Por rodean una cadena de seis moléculas de yodo y se
este motivo, para utilizar el carbono y la energía produce una coloración que puede ser azul intensa
almacenados en el almidón, el sistema digestivo púrpura y rojiza, dependiendo del grado de hidrólisis de
humano, con la ayuda de las enzimas amilasas, primero almidón.
debe romper el polímero a azucares asimilables más
pequeños, que eventualmente queda convertido a
Materiales y métodos
unidades básicas de glucosa.
Lo que llamamos almidón no es realmente un
polisacárido, sino la mezcla de dos, la amilosa y la
Reacción de Benedict
amilopectina. Ambos están formados por unidades de
glucosa, en el caso de la amilosa unidas entre ellas por
En soluciones alcalinas el cobre es reducido por
enlaces a 1-4 lo que da lugar a una cadena lineal. En el
azucares dejando un grupo aldehído libre, formando un
caso de la amilopectina, aparecen ramificaciones
oxido cuproso que se tiñe. El reactivo de Benedict está
debidas a enlaces a 1-6.
formado por sulfato de cobre, carbonato de sodio y
EL almidón sufre hidrólisis por acción de la
citrato de sodio. El citrato forma iones con cobre
amilasa, esta puede ser alfa amilasa o beta amilasa, en
difícilmente solubles en agua, evitando la precipitación
el caso de la primera la hidrólisis produce
de carbonatos de cobre en soluciones alcalinas.
principalmente dextrina y en menor proporción la alfa
maltosa. La beta maltosa procude alfa maltosa
totalmente debido a que actúa desde el extremo no
reductor de la cadena, catalizando la hidrólisis del
Prueba de Benedict
segundo enlace α-1,4, rompiendo dos unidades de
glucosa (maltosa) a la vez.
En los tubos de ensayo vierta 1 ml de las
Los reactivos fehling en el almidón llevan a
muestras correspondiente y aplique tres gotas del
cabo una reacción negativa, se debe a la poca presencia
reactivo de Benedict, mezclar cuidosamente coloque
de OH hemiacetálicos en una molécula que puede
los tubos por tres minutos en baño de maría en
llegar a contener más de cien mil unidades de glucosa.
ebullición, retire, deje enfriar y observar.
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Prof. Julio Cesar Bracho Pérez Universidad Nacional Tecnológica de Lima Sur

es positivo, esto se debe a la presencia de carbonilos


Reacción de Lugol que le da un carácter reductor (un grupo aldehído pasa a
un ácido, reduciéndose a sal cúprica de cobre (II), en
Esta prueba plantea la reacción de medio alcalino, a óxido de cobre (I)). Otro carbohidrato
identificación de polisacáridos como el almidón, una viene a ser la fructosa, la cual igualmente viene a ser
solución de yodo-di-yodo disuelto en una solución positiva ya que, al ser un compuesto no reductor,
acuosa de yoduro de potasio forma complejos contiene un grupo cetona, que puede enolizarse a la
coloreados por adsorción los polisacáridos, con el forma aldehído dando lugar a un falso positivo.
almidón reacciona para dar una coloración azulada o Continuamente, otro carbohidrato como la
negra gracias a la formación de hélices donde la cadena lactosa da positivo a la prueba Fehling A y Fehling B
lineal del almidón se une con las moléculas de yodo. debido a la presencia de grupos carbonilos más
expuestos que le dan carácter reductor. Se observa un
Prueba de Lugol precipitado rojo ladrillo (óxido de cobre). Igualmente,
la celulosa vire a ser positivo un azúcar no reductor,
Vierta 1ml de las muestras correspondientes en dado que no tiene grupo aldehídos libres de los cuales
los tubos de ensayo y aplique tres gotas de Lugol, el grupo OH (-) se oxida al reaccionar con el ion
mezclar cuidadosamente y anote resultados. cúprico (2+), que finalmente mostrarán una reacción
Resultados y discusiones positiva al virar el color del reactivo de Fehling,
Tras los procesos de experimentación con los además de evidenciarse precipitaciones en el fondo del
diversos carbohidratos, entre los cuales solo fueron tubo. Por último, el almidón viene a ser el único
seleccionados 6 y a su vez se implementaron como carbohidrato que dio un resultado negativo se dio
muestras, en la cual podemos afirmar que la prueba negativo porque en los enlaces se juntan los carbonos
realizada en el primer carbohidrato (sacarosa) viene a anoméricos, lo que impide que se oxiden en la reacción
ser positiva, es por ende que se hace la prueba para la y por tanto no da positivo.
identificación de azúcares reductores, la presencia del
aldehído y dé positivo. En la práctica realizada no
reaccionó tan violentamente como otras soluciones,
pero se podía identificar un precipitado en la base del
tubo de ensayo.
Respecto a la glucosa, el resultado viene a ser
positivo ya que obtuvo un color rojo, indicador de que
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- En este caso la hidrólisis, tomando como


referencia nuestra experiencia, puede llevarse a cabo
por acción de un ácido a temperatura elevada.

Laboratorio N°4. Mesa 3_ Identificación de soluciones reductoras y no reductoras.

Resultados y Discusión
- La sacarosa no hidrolizada al someterse a la Conclusión
reacción de Fehling da un resultado negativo debido a Teniendo en cuanto el procedimiento dado en el
que es un disacárido formado por glucosa y fructosa, es laboratorio el cual nos permitió identificar, deducir,
decir la asociación de una molécula de alfa-D- para su posterior análisis de manera minuciosa sobre
glucopiranosa y una molécula de beta-D- los carbohidratos, el cual se determinaba mediante la
fructofuranosa. utilización de los reactivos de Fehling A y B,
- Que se unen por medio de sus carbonos carbohidratos, se pudo superponer una lista de
anoméricos por esta razón no puede actuar como procedimientos que cumplieran con el objetivo de
reductor. Es decir, no posee sus carbonos anoméricos identificar los azúcares reductores y no reductores de
libres. las distintas soluciones, las cuales indicaban que si se
- Mediante los resultados obtenidos al hidrolizar tomaba la muestra de color rojo ladrillo oscuro
la sacarosa obtenemos una azúcar invertida que es una resultaba indicar que era un azúcar reductor, por lo cual
mezcla de glucosa + fructosa. la muestra daba un resultado positivo mientras que si se
- Y al someter esta mezcla a la reacción de obtenía un color azul se relacionaba a un resultado
Fehling existe un resultado positivo ya que los dos negativo, por ende este indicaba que era un azúcar no
glúcidos son reductores. Como podemos observar en reductor.
las imágenes ya que presenta un precipitado amarillo al Para obtener estos resultados se dieron a cabo
realizar la reacción. distintas pruebas con la finalidad de obtener la premisa
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Prof. Julio Cesar Bracho Pérez Universidad Nacional Tecnológica de Lima Sur

del experimento, la cual era identificar si las soluciones


eran reductoras o no, dado que, para una mayor
efectividad en cuanto a la prueba, se deben aplicar
distintos métodos para lograr un resultado conciso y
fiable para la prueba.
Es por ello que es de relevante importancia
realizar la parte experimental para estos análisis
abordados por la Bioquímica, debido a que nos otorgan
mayor conocimiento y aprendizaje en cuanto a los
diferentes compuestos, sus aplicaciones, la forma de
identificación y el estudio de estos, aplicando
adicionalmente los temas de bioseguridad que es muy
importante para evitar todo tipo de peligro abordando
de manera adecuada y responsable, dado que estos
conocimientos serán indispensables para desarrollarnos
y tener las practicas base necesarias para nuestra campo
laboral en nuestra carrera profesional.

Referencias

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