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enet1ca
Un enfoque conceptual
 , •
Un enfoque conceptual
5.ª EDICIÓN

Benjamin A. Pierce
Profesor de Biología
Titular de la Cátedra
Lillian Nelson Pratt
Southwestern University

e panamericana
_,,___. EDITORIAL M!=DICA•s...___
)

BUENOS AIRES - BOGOTÁ - CARACAS - MADRID - MÉXICO - PORTO ALEGRE

e-mail: info@medicapanamericana.com
www.medicapanamericana.com
A mis padres, Rush y Amanda Pierce; a mis hijos,
Sarah Pierce Dumas y Michael Pierce; y a mi
compañera, amiga y alma gemela genética
durante 33 años, Mar/ene Tyrre/1
Título del original en inglés
Genetics. A Conceptual Approach. Fifth edition.

First published in the United Sta tes by W.H. Freeman and Company, New York.
Copyright © 2014 by W.H. Free1nan and Con1pany. All rights reserved.

Publicado originalmente en Estados Unidos de América por W.H. Freeman and Company, Nueva York.
© 2014 W.H. Freeman and Company. Todos los derechos reservados.

© Gestora de Derechos Autorales, S. L. Madrid, España.

Traducción de Editorial Médica Panan1ericana efectuada por Adriana Morando y Gabriela López.

l.a edición (versión in1presa)

España, septienwre 2015

Los editores han hecho todos los esfuerzos para localizar a los poseedores del copyright del material fuente utilizado. Si inadvertidamente hubieran
omitido alguno, con gusto harán los arreglos necesarios en la primera oportunjdad que se les presente para tal fin.
Gracias por comprar el original. Este libro es producto del esfuerzo de profesionales como usted, o de sus profesores, si usted es estudiante. Tenga en cuenta
que fotocopiarlo es una falta de respeto hacia ellos y un robo de sus derechos intelectuales .
Las ciencias de la salud están en permanente cambio. A medida que las nuevas investigaciones y la experiencia clínica ampüan nuestro conocimiento,
se requieren modificaciones en las modalidades terapéuticas y en los tratamjentos farmacológicos. Los autores de esta obra han verificado toda la infonnación con
fuentes confiables para asegurarse de que ésta sea completa y acorde con los estándares aceptados en el momento de la publicación. Sin embargo, en vista de la
posibilidad de un error humano o de cambios en las ciencias de la salud, ni Los autores , ni la editorial o cualquier otra persona implicada en la preparación o la
publicación de este trabajo, garantizan que la totalidad de la información aquí contenida sea exacta o completa y no se responsabilizan por errores u omjsiones o por
los resultados obtenidos del uso de esta información. Se aconseja a los lectores confinnarla con otras fuentes. Por ejemplo, y en particular, se recomienda a los
lectores revisar el prospecto de cada fármaco que planean administrar para cerciorarse de que la información contenida en este libro sea correcta y que no se hayan
producido can1bios en las dosis sugeridas o en las contraindicaciones para su administración. Esta recon1endación cobra especial importancia con relación a
fármacos nuevos o de uso infrecuente.
ESPAÑA

e panamericana )
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ISBN: 978-84-9835-733-2 (Versión electrónica)

ISBN: 978-84-9835-392- 1 (Versión impresa)

Todos los derechos reservados. Este libro o cualquiera de sus partes no podrán ser reproducidos ni archivados en sistemas recuperables, ni
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La versión electrónica de esta 5ª edición se publicó en el mes de septiembre de 2015.

Prefacio

Todavía recuerdo el entusiasmo que sentí cuando asistí a mi prilner curso de genéti-
ca. Sentía curiosidad por los principios de la herencia, que permiten predecir cómo
será una descendencia aun antes del nacimiento. Quedé fascinado al descubrir que
estos principios se basan en la quín1ica de una magnífica molécula llamada DNA. Y
me cautivó ver que la genética es la base del proceso de la evolución, responsable de
la inagotable diversidad y belleza de la vida. Estos elementos de la genética todavía
me impresionan y entusiasman hoy en día. U na de las grandes cosas de enseñar gené-
tica es la posibilidad de transmitir ese entusiasmo a los estudiantes.
Hace veintitrés años comencé a escribir un nuevo libro de genética. Mi idea era
crear un libro que transmitiera la excitación de la genética, que motivara a los estu-
diantes y que se enfocara en conceptos y resolución de proble.mas. Esos fueron los
objetivos originales de la prünera edición de Genética: un erifoque conceptual, y
siguen siendo las características básicas de esta nueva quinta edición del libro.
En este libro, he intentado compartir parte de lo que he aprendido en 111is 33 años de
enseñanza de la genética. Proporciono consejo y aliento en temas en los que los estu-
diantes suelen presentar dificultades, y cuento historias de personas, lugares y expe1i-
mentos de genética (pasados y presentes) para que el te1na siga siendo relevante, inte-
resante y vigente. Mi propósito es ayudar a aprender los detalles, los conceptos y las
aptitudes necesaiios para resolver proble1nas y, a la vez, alentar al lector a reconocer la
elegancia y la belleza de este extenso paisaje.
En Southwestern University la puerta de mi oficina está siempre abierta, y los alum-
nos acuden con frecuencia a plantear sus propios enfoques respecto del aprendizaje, de lo que han leído
sobre genética, y de sus experiencias, preocupaciones y logros. Aprendo tanto de ellos con10 ellos de mí, y
me encantaiia estai· en contacto con ustedes por correo electrónico (pierce@southwestern.edu), por telé-
fono (512-863-1974) o personahnente (Southwestern University, Georgetown, Texas).

Ben Pierce
PROFESOR DE BIOLOGÍA Y
TITULAR DE LA CATEDRA LILLIAN NELSON PRATT
SOUTHWESTERN UN!VERSITY
 Presentación de la obra
Los principales objetivos de Genética: un enfoque conceptual siempre han sido ayudar a los estudiantes a
descubrir y establecer relaciones entre los principales conceptos de la genética. En las cuatro ediciones pre-
vias de este libro, el estilo de redacción accesible, las ilustraciones simples e instructivas y las características
pedagógicas útiles en todo el libro han servido para que los estudiantes adquieran un conocimiento más com-
pleto de la genética.

Características distintivas
■ Conceptos clave e interrelaciones En todo el libro he incluido elementos que ayudan a los estudian-
tes a enfocarse en los conceptos unportantes de cada tema.
■ Recuadros de conceptos a lo largo de cada capítulo resumen los
CONCEPTOS pLLntos fundamentales de la sección precedente. Las Evaluaciones
Moléculas de RNA b<ateoano que 100 ~ddas yprocesadas 1n1c1an
de conceptos permiten que los estudiantes evalúen rápidamente su
el sileooamiento del RNA Los SIRNA o los mRNA 1esu1t.antes se com• comprensión del material que acaban de leer. Las evaluaciones de
binan con prote!nas para formar comple¡os QUe se unen asecueooas concepto tienen formato de opción múltiple y de respuesta corta
complementanas del mRNA o el DNA los siRNA ylos m1RNA afectan
la expresion gén(a por esOSIÓ(I de mRNA, 111h1bioonde la 11aducoon, ■ Las secciones Interrelación de conceptos comparan y contrastan
mod,ficaoon de la estructula de la cromatina o deseocadenam~nto procesos o integran ideas de secciones y capítulos para ayudar a
de la degradaoOI' de RNA
los estudiantes a advertir cómo se relacionan entre sí diferentes
3 EVALUAOON DE CONCEPTOS 5 temas de genética. Todos los conceptos importantes se enumeran
en el Resumen de conceptos al final de cada capítulo.
En el s1lenoamiemo del RNA, ¿a qué parte de las moléailas de RNA
■ Accesibilidad El estilo de redacción coloquial de este libro siempre
que controlarl ~en unirse los s!RNA y los miRNA?
a 5' UTII ha sido una de las características favoritas tanto para los estudiantes
b Segmento que codifKa aminoácidos como para los docentes. Además de guiar a los estudiantes a través de
e Cola de pol.<A) 3'. cada concepto importante de la genética, les presento el tema con una
d 3'UTR historia introductoria. Estos relatos contienen ejemplos pertinentes
de la enfermedad o de otros fenómenos biológicos que sirven de ejem-
plo a los estudiantes sobre qué aprenderán en el capítulo. Más de un
tercio de las historias introductorias de esta edición son nuevas.
■ Planificación simple y clara de las ilustraciones Las figuras atractivas e instructivas han probado ser un
elemento de aprendizaje eficaz para los estudiantes en las cuatro ediciones anteriores y siguen siendo una
característica de la nueva edición. Cada figura se diseñó de manera cuidadosa para destacar los puntos princi-
pales y para guiar al lector a través de experimentos y procesos. La mayoría de las figuras incluyen un texto
que orienta a los estudiantes sobre la presentación gráfica. Las ilustraciones de experimentos refuerzan el méto-
do científico al proponer primero una hipótesis, señalar después los métodos y resultados, y finalizar con una
conclusión que refuerza los conceptos explicados en el texto.
Cuando esca probabilidad es menor de 0.05. los científicos acep-
tan que el auu no es el responsable de la d~viación y que existe ■ Énfasis en la resolución de problemas Algo que he aprendido en mis 33
una diferencia significativa. t...1 expresión diferencia si,:11ificatiw1
quiere decir que algún factor distinto del azar es responsable de años de docencia es que los estudiantes aprenden genética en forma óptima a tra-
que los valore:.. observados sean diferente~ de los esperados. vés de la resolución de problemas. Trabajar con un ejemplo, ecuación o experi-
Respecto de nuestros gatitos. quizi1 uno de los genotipos expcri-
men1ó mayor tasa de mortalidad ante. de que la prog~nie fuero mento ayuda a los estudiantes a considerar los conceptos de la sección y refuer-
contablliLada o quizá hubo otro factor que sesgó la~ proporcio- za las ideas explicadas en el texto. En el libro, ayudo a los estudiantes a desaiTo-
nes observadas.
Al degir 0.05 como valor límite, los científicos e han puesto llar aptitudes pai·a la resolución de problemas de diversas maneras. La nueva
de acuerdo en occptnr que. aunque obrcngamos una probahilidnd
de. por ejemplo. O.O 1. aún ex:i,1e un IC,l de probabilidad de que
diagramación de Problemas resueltos (véase Contenido nuevo y reorganiza-
Jas diforencin, entre los valores observado~ y los espcmdos se do en la p. xix) guía apicación y Preguntas de desafío. Algunas de estas pregun-
deban solo al :uar. En la ílgura 3-14. se ilu~Lm el cjlculo del valor
de Ji-cuadrado. C"1NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 38
tas se inspiran en eje1nplos de artículos publicados y están marcadas con un ícono
de Análisis de datos.
X PRESENTACIÓN DE lA OBRA

Contenido nuevo y reorganizado

La quinta edición considera descubri1nientos recientes en genética, que corresponden a nuestro conoci-
miento siempre cambiante de la herencia, el carácter molecular de la información genética, la epigenética
y la evolución genética.
NUEVO capítulo de Epigenética Un nuevo capítulo de epigenética (Capítulo 21) integra y amplía el
material que en la edición previa estaba repartido en varios capítulos. Ahora, discusiones más breves de epi-
genética figuran en esos capítulos separados (5, 11, 17, 22 y 23).

En esta edición, el Capítulo 11 trata sobre Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos (trata-
do antes en el Capítulo 21 ).
Los Capítulos 8 y 9 (Sistemas genéticos bacterianos y virales, y Variación cromosóm.ica de la edición
previa) se han invertido, de 1n anera que la variación cromosó1nica sigue ahora al Capítulo 7 (Li ga1niento,
recombinación y mapeo de genes eucariontes).

Otros contenidos nuevos y actualizados son los siguientes:

■ Nueva sección de genética molecular "El carácter molecular
de los alelos" (Capítulo 3)
■ Nueva sección sobre probabilidad condicional (Capítulo 3)
■ Sección exhaustivamente revisada sobre Determinación del
sexo en la Drosophila melanogaster (Capítulo 4)
■ Sección exhaustivamente revisada sobre Compensación de la
dosis (Capítulo 4)
■ Sección significativamente ampliada sobre reordenam.iento de
los cromosomas (Capítulo 8)
■ Análisis ampliado del descubrimiento de la estructura del
DNA, incluida la contribución de Franklin (Capítulo 10)
■ Nuevo análisis sobre el origen evolutivo de los intrones
(Capítulo 14)
■ Nueva sección sobre RNA de CRISPR (Capítulo 14)
■ Nueva sección: Los RNA no codificantes largos regulan la
expresión génica (Capítulo 14)
■ Nuevo análisis sobre degradación no-go (Capítulo 15)
■ Nueva sección sobre intensificadores bacterianos (Capítulo 16)
■ Análisis actualizado y ampliado de los cambios de la estruc-
tura de la cromatina (Capítulo 17)
■ Nueva sección sobre inmunoprecipitación de la cromatina
(Capítulo 17)
■ Nueva sección sobre secuenciación Ilumina (Capítulo 19)
■ Sección revisada sobre huella genética del DNA (Capítulo 19)
■ Análisis actualizado y ampliado de estudios de asociación en
todo el genoma (Capítulo 20)
■ Sección actualizada y ampliada de metagenómica (Capítulo 20)
■ Nueva sección: Comparación del desarrollo en D1vsophila y
flores (Capítulo 22)
■ Nueva sección sobre evolución a través de cambios de la regu-
lación génica (Capítulo 26)

■ Los problemas resueltos guían a los

estud:iantes a través de conceptos cuanti- PROBLEMAS RESUELTOS

tativos difíciles de una manera fácil de Pn>bktma

seguir, y presenta una Estrategia de
solución y Pasos de la solució n para
cada problema resuelto. Los globos con
indicios recuerdan a los estudiantes pun-
tos fundamentales o los remiten a una
parte específica del texto para repasar.
¡,Cu..J -.en• el cfa:10 de u1111 mut...:m que uu.wra que l.i.> ¡,rolelllol.> de umóo ~ pohlAI no fueran fun<:,onalc,'
Estrategia de solución P11sos de la solucion
¿Que lnfonnadón sa requfue e.n ru •~= al pmblema7 El RNAmcnw¡,-ro pu~ "-'l tre¡!1'Ji1ado lli.'S<k d
Una dcd4radÑ1 '1(11,rt el efü,CI) ~ un.1 muw.:ión <Jll< chmi11<► curemos·• el C~lí<DIO V n II tr.11·é,i U<! e...:"oón inlCf • -..-
,oi.,.r ,_,
lo
1,, función de la pr'<'ltdnil ik 1111i,1n ,, l)l>lill\). ru lA de¡;ru,J;a;,ón do:,;dc el ~n,,11111 S' "-'11º'= lla ch• .o1ttu 11 ..,.,,
m11lil,.;1u11 Jc:J tuqucle 5' y. por lo ~nu.il, os prcnJ,. dad•· "'"'"
¿Qu4 lnfonM<lón se propomona P,,tll ,-sol•er • u.i ¡,.-.- el kUl1'U11lt'nlo de Lt col.J Jc: p.1li(A) La,,
J)!obltmil7 pro(Clna> de""'""' a pnl1(A).,.. "'"'" ~ 1~ (ul.a de pnh(t\l)
ILt~ un.t mut.11:ión ,de:! !:•n que ccxhlia l.a prolClru de C'Vll.M 'lll"..., - · · ~r lo LllllO, '" ~de ~t.!> ptl)ICÍ·
un1tm II p<1h(A). nJ• en la rol• de poli(A) pmlCJ;C al a>qucl<' .5•. que, impide la
dcpnda:lón del RNA. S1 el ~n de las pmteína> de unloo 11
• La rnur,,ck>n de1emúna que IJ pMclnu J.. unicln a Jl\lhl M ('(llilAI prc."'nw-• una murxldft que """"ir:, 11 pmducc:,6n de,
nn SC'a f1111Ctooal prulán.l., de unidu J polr!A) no fu~~onalt'.111> pru<cirl.l) rw
Para obtener ayud,I con ene problema, repase: "" unilÍllll a I• c.ufa di: pollf,A). u roJ,, pn:s.,ntil!Í.l IIOOl'tli-
mlc:n10 ~111\1.-.: cluuinJria cl l''""lud• S') ,e tk~nl<lólfÍ.I
O.,pmd.1d6n del RNA en la !icttidn 17.¡ oon maynr fJt'1I ,da! el RNA l:l re<ulludo fínaJ <cría me"°"
Ailtclótl o~ la .:Ul.i de J)<)ll(Al l!O la S....:l~Óll J4.l lc~p. U ) mRNA ) • por <'Oml!!\llffllC. m,,,nos sinle~li plll4C1Cl&.

lntrodu«ión 4 . ~Qut! ,álllbl(h"' produ«JI en w. nlruclur.t dé la crotn.ttiM y

l. ¡Cuán <imilim,~ <M lo< scnom:t< de kK ,eres humano« y Jo,
chin1pancé<? ~Qu.! cambio, @i:Mlte<>< rodrian <cr ~fl<.'"'-'·
l>Jc_, de la1 srnndc~ dlfcrcnd3, cn 1., .ll)l.llomí•. l.• fi<lnlc1111&)
I• cooduw ele seres humnn0< y th1mpana.~? - - ~ -
qué papel de,cmpdan en l.1 •~ulodéln ~e""'" eu,Jmmtc·>
5. ¿Qu.' e, ti ((\diiO de hi,l(Jlllh?
6. ¿Olmo se, uuli1J1 I;, inmnnoprc:c,p1111Cidn de la cmm.\nna pana
Jc1c:nniror 111.~ "'C1C.' de: la 1nnd1fiou:1on.:., de hl\Ul-
 •
PRESENTACIÓN DE LA OBRA XI

■ Los NUEVOS problemas de final del capítulo basados en figuras aportan un aspecto visual a la
resolución de problemas, vinculan estrechamente a los estudiantes con las figuras de cada capítulo y
los ayudan a evaluar su comprensión y conceptos y procesos clave.

■ NUEVAS Historias introductorias Cada capítulo comienza con

17
una breve historia introductoria que ilustra la relevancia de un Control de la expresión génica
concepto genético que los estudiantes aprenderán en ese capítulo. en eucariontes
Estas historias (una característica favorita de ediciones previas)
permiten que los estudiantes vislumbren lo que sucede actualmen- DilMndu ~tbJ que nos h -
hUIT!anos
te en el campo de la genética y ayudan a interesar al lector en el
111.,-«1.. _o..i..o.r..poúold,.. ...
capítulo. Entre los nuevos temas introductorios figuran "El miste- tOHtm..... aunpam.a• • m..atro~ ~
«-'-•[rada, ....., wtnc-.lf...-. Ln L. a...--i11111hd•l t.aJ
~iJ!9t..,. "•¡.1W•~i\•dt,Cfllf' ...__-,,-o¡,wirruc -.num.--
rio de las huellas dactilares desaparecidas", "Constn1cción de una n"1\.i.Jll>ad lhltll¡.,ut'ld. L\WC111.iol hWI kalill 1,111( 1P;
..,...,_.,.•.,.> i.,, ,"""_..4i..,¡.._ peo,;.,...
IIICffle: 1.1.k'(: taiu ' • T ruJlme.. dt- - - . 111■ mc:'fO ,-p.,
mejor banana", "Diferencias genéticas que nos hacen humanos" y ~L'ft~ltai:1npot"ooJ-Ylt\tl \11i1tt1lh&,p "-'tefb.
tlufflil1t-jft,, 1 kn -.hlm("lhd\ lJ1fü:tt11 ctt irRI ffM c.-,..,._
~al',.,.~ww•:-n,~.t,;limlcJ...-u• ~~)
"¿Cómo pudo afectar su salud la dieta de su abuelo?". Los proble- 4'.1#,flho, .,.,; f \ w ~ lw, ~~J ~,,.,ri,
l.; (".!•~uthk- l111 u"""'"-' --~.t-. l,i J"C'l1 ~ rl ,,►
•"'" lll .,.,..;bli-.lil. 1t..""" 4K"••"-'• ~ ,IJIW,.,,,. >1~ r.._. . . •
mas de fi nal del capítulo consideran específicamente conceptos ,c,,t.11 -...n,,
d ~ ' ñ U \.'\'ttt.,..,~,_..,
~
m.1,ddOJt.-lc tk- wruTIP..-ddd e~.> In
analizados en la mayoría de las historias introductorias, tanto las ,O'ICI ...ll\llll,_ftl. .,_Cllr.lll.'1fff1ila,.dit -NJI.)
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Materiales complementarios en el sitio web

E l sitio web complementario de esta nueva edición de Genética: un enfoque conceptual ofrece, a estu-
diantes y docentes, valiosos materiales para el aprendizaje y la enseñanza de esta asignatura que se descri-
ben a continuación:

Estudiantes
■ Las animaciones/simulaciones actualizadas ayudan a los estudiantes a comprender procesos
clave de la genética reseñándolos paso por paso. Todas las ru1iinaciones y simulaciones incluyen ahora
preguntas de evaluación al frnal, para ayudar a los estudiantes a evaluar si comprendieron el concepto
o la técnica que observaron.
■ Preguntas de autoevaluación: preguntas sobre los temas del libro en opción múltiple con sus respuestas.

Docentes
■ Todas las figuras y cuadros del libro.
■ Preguntas de diferentes tipos con soluciones:
- de opción múltiple por objetivos docentes
- de opción múltiple con pistas para resol ver por los alumnos
- de razonamiento.

Los docentes tienen acceso también a todos los materiales para los estudiantes. El acceso a este sitio es
n1ediru1te registro y requiere la validación de la actividad docente en una institución educativa.

Agradecimientos
Estoy en deuda con muchas personas que me brindaron ayuda con esta edición y con las anteriores de
Genética: un enfoque conceptual. Aprendí mucho de mis profesores de genética: Ray Canham, que fue el
primero en presentarme la genética y que me infundió un amor por el tema para toda la vida, y Jeff Mitton,
quien 1ne enseñó el arte de la investigación genética. He aprendido de los nules de estudiantes de genéti-
ca que han llenado mis clases en los últimos 33 años, primero en el Connecticut College, después en la
Baylor Urúversity y, ahora, en la Southwestern University. Su inteligencia, entusiasmo, curiosidad y humor
xii PRESENTACIÓN DE LA OBRA

han sido una fuente de n1otivación y placer durante toda mi vida profesional. También he aprendido de estu-
diantes de todo el mundo que han utilizado ediciones previas de este libro y han tenido la amabilidad de
compartir conmigo (a través de co1Teos electrónicos y llamadas telefónicas) sus opiniones sobre el libro y
cómo pod1ia ser mejorado.
Agradezco a los maravillosos colegas que me rodean todos los días en la Southwestern University y c uya
amistad, consejo y buen humor sostienen mi trabajo. L as clases pequeñas, la estrecha interacción entre los
estudiantes y el cuerpo docente, y la integración de la enseñanza y la investigación han hecho que el traba-
jo en la Southwestern University resulte personal y profesionalmente gratificante. Agradezco a James Hunt,
preboste de la Southwestern University y decano de Brown College, por su ayuda para crear el ambiente
académico contenedor y por su constante amistad y compañerismo.
Escribir un texto de ciencia moderno requiere un esfuerzo de equipo y he sido bendecido con un equipo
notable en W H. Freeman and Company, Life Sciences Publisher. Susan Wínslow ha sido mí adalid del
libro durante muchos años; valoro su creatividad, conocimientos y apoyo. Lauren Schultz, Editor principal
de adquisiciones para el equipo de Ciencias de la Salud, fue un maravilloso pastor del proyecto y aportó
ideas, aliento y apoyo durante todo el proyecto. He disfrutado con la Editora de contenidos Anna Bristow,
mi compañera cotidiana en la creación de esta edición de Genética. Anna es una 1nagní:fica editora, con
sobresalientes aptitudes organizativas y siempre está atenta a los detalles; mantuvo en curso el proyecto y
contribuyó a esta edición de innumerables maneras.
La editora principal del proyecto, Georgia Lee Hadler de W. H. Freen1an, manejó en forma experta la
producción de esta quinta e dición, así como las ediciones anteriores. Su dedicación a la excelencia en todas
las fase del proceso de producción ha sido un factor importante para convertir este libro en un éxito. Jeanine
Fu1ino se desempeñó como correctora y aportó valiosas sugerencias editoriales. Agradezco a Dragonfly
Media Group por crear y revisar las ilustraciones del libro, y a Matthew McAdams por coordinar el pro-
graina de ilustraciones. Mi agradecin1iento a Paul Rohloff de W. H. Freeman y a Assunta Petrone de
codeMantra por coordinar las fases de composición y producción. Diane Blume elaboró el diseño del libro
y la tapa para esta edición. Agradezco a Christine Buese y a Jacqui Wong por la búsqueda de fotos. Allison
Michael, Elaine Palucki, Alexi Garrett, Adam Feil y Chris Efstratiou desarrollaron los excelentes 1nedios y
suplementos que acompañan al libro. Les agradezco a Jung Choi y a Mark McCallu1n por esc1ibir las solu-
ciones para los nuevos problemas del final de capítulo. Joseph Ahlander, Ellen France, Robert Fowler,
Brian Kreiser, Joshua Loomis, A1ny McMillan, Marcie Moehnke, Douglas Thrower y Daniel Williams ela-
boraron y revisaron las preguntas de evaluación.
Hago extensivo mi agradecimiento al personal de W. H. Freeman: representantes de ventas, gerentes
regionales y especialistas en ventas regionales ( que presentan mi libro a instructores de genética de todo el
mundo). Fue muy grato conocerlos y tratar con muchos de ellos. Su trabajo arduo y eficiente ha hecho que
Genética: un enfoque conceptual sea un éxito.
Muchos col egas se han desempeñado como revisores ofreciéndome amablemente su pericia técnica y
experiencia docente. Les agradezco profundamente su ayuda, y cualquier error pasado por alto es de mi
absoluta responsabilidad.
Marlene Tyrrell, mi esposa y mejor amiga durante 33 años, y nuestros hijos y sus cónyuges, Sarah, Matt,
Michael y Amber, son la fuente de amor, apoyo e incentivo en todo lo que hago.

Mi gratitud pai·a los revisores de esta nueva edición de Genética: un enfoque conceptual.

Alny Abdulovic-Cui Jeanne Andreoli Keith Barlow Edward Berger

Augusta State University Matygrove College Guilford Technical Comn1unity Darmouth College
Jaseph Ahlander Anthany Arrnent College Laura Bermingham
Northeastern State Univer:úty Central State University Philip Barnes University of Vermont
David Aiella Minaa Askari Connecticut College Aimee Bernard
Austin College Pellissippi State Co1n1nunity Christine Beatl)' University of Colorado Denver
Prestan Aldrich College Benedictine University lndrani Base
Benedictine University Andrea Bailey Jahn Belate Western Carolina Vniversity
Kirk Anders Brookhaven Community College Syracuse University Jahn Brave1man
Gonzaga University Paul W. Bates Spencer Bensan Saint Joseph 's University
University of Minnesota Duluth University of Maryland

David Buchanan S teven W. Gorsich
North Dakota Sta.te University Central Michigan University
Gerald L. Buldak Anjali Gray
Loyola University Ch.icago Lourdes University
Alyssa C. Bumbaugh Bradley Hersh
Penn State University Allegheny College
Maria V. Cattell Debra Hinson
University of Colorado Dallas Baptist University
Richard Duhrkopf Peter Hoffman
Baylor University
Notre Dame of Ma.ryland
University
Joel Chandlee
Margaret Hollings,vo1th
Universiry of Rhode Jsland
University - Buffalo
Henry Cbang
Carina Endres Howell
Purdue University
Lock Ha.ven University
Cynthia Church
Metropolitan Sta.te University of Li Huang
Denver Montana State University
Sarah Crawford Mary Huff
Southern Connecticut State Bellannine University
Universi/)1
Colin Hughes
Marilyn Cruz-Alvarez
Florida Atlantic University
Florida Gu(f Coast University
Jeffrey Rugues
Sandra Davis Millikin University
University of lndianapolis
Cristina Tftode
Sarwan Dhir
Rowan University
Fort Va/ley State University
Jeba Inbarasu
David Donnell Metropolitan Com.m.u nity
The Citadel College, South Ornaha Canipus
Chuanguang Du Diana Tvankovic
Mon.tclair State Universily Anderson University
Cheryld L. Emmons A aron J ohnson
Alfred University University of Colorado School
of Medicine
William E ttjnger
David H . Kass
Gonzaga University
Sarah Evans Eastern Medicine University
Friends U,úversity Todd Kelson
Víctor Fet Brighan1 Young University -
ldaho
Marshall University
Cathy Silver Key
Ted Fickel
North Carolina Central
A,nerican Jewish University
University
Robert G. Fowler Christopher Korey
San lose State University
College of Charleston
Thomas Fowler
Margaret J. Kovach
Southern lllinois University
University of Tennessee -
Edwardsville Chattanooga
Eruson Frowlks
Brian Kreiser
Hc11npton University
University of Southern
Denm s Frisby Mississippi
Cameron University Tim Kroft
Laura Frost Auburn University -
Montgom.ery
Point Park University
J. Yvette Gardner Mary Rose Lamb
University of Puget Sound
Clayton Sta.te University
Willia1n Gilliland Melanie Lee-Brown
DePaul University Guilford College
Elliott S. Goldstein Aime Levesque
Arizona. Sta.te University University of Hartford
• ••
PRESENTACIÓN DE LA OBRA XIII
Joshua Loomis Stephanie Schroeder
Nova Southwestern University Webster University
Shawn M acauley Rodn ey Scott
Muskegon Com.niunity College Wheaton College
Williarn Mackay Rebecca Seipelt-Thiemann
Edinboro University of Middle Tennessee State
Pennsylvania University
Cindy S. Malone Barkur S. Shastry
California State University - Oakland University
Northridge Mark Sbotwell
Teresa McElhinny Slippe1y Rock University
Michigan Sta.te University Wendy Shuttlewo1th
Amy McMillan Lewis/Clark State College
SUNY Buffalo State Agnes Southgate
Steven Mezik College of Charleston
Herkilner County Conununity
Walter Sotero
College
University of Central Florida
Brook Milligan
Ron Stroh111eyer
New Mexico Sta.te University
Northwest Nazarene University
Marcie Moehnke
David Thompson-Jaeger
Baylor University
Christian Brothers University
Charles Molnar
Douglas Thrower
Can1osun College
University of Cal(fornia. - Santa
Jessica L.Moore Barbara
Western Carolina University Kathleen Toedt
Sarah Mordan-McCon1bs Housatonic Co,nmunity College
Franklin College of Indiana
Cynthia van Golen
Ashley Moni s Delaware State University
Middle Tennessee State Nanette van Loon
University
Borough of Manhattan
Cam Muir Conimunity College
University of Hawa.ii - Hilo Sara Volk
Karolina Mukhtar Texas State Vniversity
University of Alabama - La urence von Kaln1
Birmingham
University of Central Florida
Elbert Myles
Erik Vollbrecht
Tennessee State Uni versity
lowa State University
Todd Nickle
Alan Waldman
Mount Royal University
University of South Carolina
John Niedzwiecki
Daniel Williams
Belrnont University
Winston-Salern State University
Selene Nikrudo
Ljse D. Wilson
University of Central Missouri
Siena College
Margaret Olney
Kathleen Wood
Saint Marin's University
University of Mary hardin-
Sally Pasion Baylor
San Francisco State University
Lev Ya1npolsky
Ann Paterson
East Tennessee State University
Willia,ns Baptist College
Malcolm Zellars
Helen Piontkivska Georgia Sta.te University
Ke11 State University Ming Zbeng
Uwe Pott Gordon College
Vniversity of Wisconsin - Green
Bay
Michael Lee Robinson
Mia,ni University
Charles Sackerson
California Sta.te Un.iversity
 Índice resumido

1. Introducción a la genética 1
2. Cromosomas y reproducción celular 17
3. Principios básicos de la herencia 45
4. Determinación del sexo y características ligadas al sexo 77
S. Extensiones y modificaciones de los principios básicos 103
6. Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas 139
7. Ligamiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 165
8. Variación cromosómica 209
9. Sistemas genéticos bacterianos y virales 241
10. DNA: la naturaleza química del gen 277
11. Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 299
12. Replicación y recombinación del DNA 325
13. Transcripción 357
14. Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 383
15. El código genético y la traducción 411
16. Control de expresión génica en las bacterias 443
17. Control de la expresión génica en eucariontes 473
18. Mutaciones génicas y reparación del DNA 493
19. Análisis genético molecular y biotecnología 535
20. Genómica y proteómica 579
21. Epigenética 613
22. Genética del desarrollo e inmunogenética 633
23. Genética del cáncer 661
24. Genética cuantitativa 683
25. Genética poblacional 715
26. Genética evolutiva 743

Guía de referencia para organismos genéticos modelo A1

 Índice

Caita del autor XV

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Recuento
Prefacio XVI
de cromosomas y moléculas de DNA 27

Capítulo 1 Introducción a la genética 1 2.3 La reproducción sexual produce variación

genética mediante el proceso de meiosis 27
Albinismo en los hopis 1
Meiosis 28
1.1 La genética es importante para los Fuentes de vari ación genética en la meiosis 31
individuos, para la sociedad y para el estudio
de la biología 2 INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Comparación
El papel de la genética en la bi ología 4 entre la mitosis y la meiosis 33
Diversidad genética y evolución 4
Divisiones de la genética 5 Separación de las cromátidas hermanas y los cromo-
Organismos genéticos modelo 5 somas homólogos 33
Meiosis en los ciclos vitales de animales y plantas 35
1.2 Los seres humanos han utilizado la genética
durante miles de años 7
La antigua utili zación y comprensión de la herencia 7
Capítulo 3 Principios básicos de la
El surgimiento de la cienc ia de la genética 9 herencia 45
El futuro de la genética 10
La genética del cabello pelirrojo 45
1.3 Se necesitan unos pocos conceptos
fundamentales para comenzar nuestro viaje 3.1 Gregor Mendel descubrió los principios
por la genética 11 básicos de la herencia 46
El éxito de M endel 47
Terminología genética 48
Capítulo 2 Cromosomas y 3.2 Los cruzamientos monohíbridos revelan el
reproducción celular 17 principio de segregación y el concepto
de dominancia 49
El acertijo de los hombres ciegos 16
Qué revelan los cruzamientos monohíb1idos 50
2.1 Las células procariontes y eucariontes difieren
en una serie de características genéticas 18 INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Relación de los
cruzamientos genéticos con la meiosis 52
2.2 La reproducción de la célula requiere la copia
del material genético, la separación de las
El carácter molecular de los alelos 53
copias y la división celular 20
Predicc ión de los resultados de cn1zamientos
Reproducción de la célula procarionte 20 genéticos 53
Reproducción de la célula eucaiionte 20 Cruzamiento de prueba 57
El ciclo celular y la mitosis 23 Símbolos genéticos 58
Co nsecuencias genéticas de] cic lo celular 26
xviii fNDICE

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Proporciones INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Reconocimiento

en los cruzamientos simples 58 de la herencia ligada al sexo 92

3.3 Los cruzamientos dihíbridos revelan el 4.3 La compensación de la dosis iguala la

principio de la distribución o selección cantidad de proteína producida por los
independiente 59 genes ligados al cromosoma X y autosómicos
Cruzamientos ctihíbridos 59 en algunos animales 92
Principio de la ctistribución o selección Hipótesis de Lyon 93
independiente 59 Mecanismo de desactivación aleatoria del
Relación entre el principio de la distribución o cromosoma X 94
selección independiente y la meiosis 60
Aplicación de la probabilidad y el diagrama Capítulo 5 Extensiones y
ramificado a los cru zamientos dihíbridos 61
Cruzamiento dilnbrido de prueba 62 modificaciones de los principios
3.4 Las proporciones observadas de la progenie básicos 103
pueden desviarse por azar de las La extraña genética de los caracoles
proporciones esperadas 64
zurdos 103
Prueba de la bondad del aj uste de Ji cuadrado 64
5.1 Factores adicionales en un solo locus
Capítulo 4 Determinación del pueden incidir en los resultados de los
cruzamientos genéticos 104
sexo y características ligadas al Tipos de dominanc ia 104
sexo 77 Penetrancia y expresividad 107
Alelos letales 107
El extraño caso del sexo del
Alelos múltiples 108
ornitorrinco 77
5.2 La interacción génica tiene lugar cuando los
4.1 El sexo es determinado por una serie de genes de múltiples locus determinan un
mecanismos diferentes 78 único fenotipo 100
Sistemas cro1nosómicos de dete1minación deJ sexo 79 Interacción génica que produce nuevos fe notipos 110
Determinación génica del sexo 81 Interacción génica con epistasia 111
Determinación ambiental del sexo 81
Determinación del sexo en Drosophila INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Interpretación
melanogaster 82 de las proporciones producidas por interacción
Determinación del sexo en seres humanos 83 génica 115
4.2 Los genes de los cromosomas sexuales
Complementación: determinación de si las
determinan las características ligadas
mutaciones se encuentran en el mismo locus o en
al sexo 85
diferentes locus 117
Ojos blancos ligados al cromosoma X en La genética compleja del color del pelaje en los
Drosophila 85 perros 117
Falta de disyunción y teoría cromosómica de la
herencia 86
5.3 El sexo influye de diversas maneras en la
Daltonismo ligado al cromosoma X en seres
herencia y la expresión de genes 119
humanos 88
Símbolos para genes ligados al cromosoma X 89 Características influidas o limitadas por el sexo 119
Características ligadas al cromosoma Z 89 Herencia citoplasmática 12 1
Carac te1ísticas ligadas al cromosoma Y 90 Efecto genético materno 123
Impronta genómica 124
 •
INDICE XIX

5.4 La anticipación es la expresión más intensa o Capítulo 7 Ligamiento,

más temprana de rasgos en las
generaciones sucesivas 126
recombinación y mapeo de genes
5.5 Efectos ambientales pueden influir en la
eucariontes 165
expresión de un genotipo 126 Genes ligados y calvicie 165
Efectos ambientales sobre el fenotipo 127
7.1 Los genes ligados no se segregan de
Herencia de características continuas 127
manera independiente 166
7.2 Los genes ligados se segregan juntos y el
Capítulo 6 Análisis de árboles
entrecruzamiento produce recombinación
genealógicos, aplicaciones y entre ellos 167
pruebas genéticas 139 Notación para cruza,nientos con ligamiento 168
Comparación entre ligamiento completo y segrega-
El misterio de las huellas dactilares ción independiente 168
desaparecidas 139 Entrecruzamiento con genes ligados 170
6.1 El estudio de la genética en seres humanos Cálculo de la frecuencia de recombinación 171
se ve limitado por las características Acoplamiento y repulsión 172
especiales de la biología y la cultura
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Relación entre
humana 140
segregación independiente, ligamiento y
6.2 Los genetistas suelen usar árboles entrecruzamiento 173
genealógicos para estudiar la herencia de
características en los seres humanos 141 Evidencia de la base física de la recombinación 174
Súnbolos usados en los árboles genealógicos 141 Predicción de los resultados de cruzamientos con
Análisis de árboles genealógicos 141 genes ligados 175
Rasgos autosómicos recesivos 142 Pruebas de segregación independiente 176
Rasgos autosómicos dominantes 143 Mapeo de genes con frecuencias de
Rasgos recesivos ligados al cromosoma X 143 recombinación 178
Rasgos dominantes ligados al cromosoma X 145 Construcción de un 1napa genético mediante
Rasgos ligados al cromosoma Y 146 cruzamientos de prueba de dos puntos 179
6.3 El estudio de gemelos y de adopciones puede 7 .3 Puede utilizarse un cruzamiento de prueba
ayudar a evaluar la importancia de los genes de tres puntos para mapear tres genes
y el ambiente 147 ligados 180
Tipos de gemelos 147 Construcción de un mapa genético con cruzamiento
Concordancia en gemelos 148 de prue ba de tres puntos 181
Estudio de asma en gemelos 149
Estuclios de adopción 150 INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Pasos para
seguir en el cruzamiento de prueba de tres
6.4 El asesoramiento genético y las pruebas puntos 186
genéticas proporcionan información a
aquellos preocupados por enfermedades Efecto de entrecruzamientos múltiples 188
y rasgos genéticos 150 Mapeo de genes humanos 189
Asesorainiento genético 151 Mapeo con marcadores moleculares 190
Pruebas genéticas 152 Los genes se pueden localizar con estudios de asocia-
Interpretación de las pruebas ge néticas 156 ción en todo el geno1na 191
Pruebas genéticas directas para el consumidor 156 7 .4 Los métodos de mapeo físico se utilizan
Discriminación genética y privacidad 156 para determinar las posiciones físicas de
los genes en cromosomas particulares 192
Hibridación de células somáticas 192
XX fNDICE

Mapeo por deleción 194 Genoma bacteriano 244

Mapeo físicos de cromosomas a través del análisis Plásmidos 245
molecular 195 9.2 Las bacterias intercambian genes mediante
7.5 Las frecuencias de recombinación muestran conjugación, transformación y
gran variación 195 transducción 247
Conjugación 247
Trasferencia génica natural y resistencia a los
Capítulo 8 Variación cromosómica antibióticos 254
209 Transfor1nación de bacte1ias 254
Secuencias de los genomas bacterianos 256
Construcción de una mejor banana 209 Trasferencia génica horizontal 256
8.1 Las mutaciones cromosómicas comprenden 9.3 Los virus son sistemas de replicación
reordenamientos, aneuploidías y simples pasibles de análisis genético 257
poliploidías 210 Técnicas para el estudio de bacteriófagos 257
Morfolog.ía de los cromoso.mas 210 Transducción: u so de fagos para el 1napeo de genes
Tipos de mutaciones cromosómicas 211 bacterianos 258
8.2 Los reordenamientos cromosómicos
modifican la estructura de los c INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Tres métodos
romosomas 212 de mapeo de genes bacterianos 261

Duplicaciones 212
Mapeo génico en fagos 261
Deleciones 214
Análisis estructural detallado de los genes
Inversiones 216
de los bacteriófagos 263
Translocaciones 2 19
Sitios frágiles 221
Virus RNA 265
Virus de la inmunodeficiencia humana y sida 267
Variaciones del número de copias 222
Gripe 268
8.3 La aneuploidía es un aumento o una
disminución del número de cromosomas
de un individuo 222
Capítulo 10 DNA: la naturaleza
Tipos de aneuploidía 222 química del gen 277
Efectos de la aneuploidJa 223 Caminatas por el Ártico y DNA
Aneuploidía en seres humanos 224
Disonúa uní parental 227
antiguo 278
Mosaicismo 228 10.1 El material genético tiene varias
8.4 La poliploidía es la presencia de más de características clave 278
dos juegos de cromosomas 228 10.2 Toda la información genética está
Au topoliploidía 228 codificada en la estructura del DNA o
AlopoliploidJa 229 del RNA 278
Significación de la poliploidJa 232 Primeros estudios del DNA 278
DNA como fuente de información genética 280
Capítulo 9 Sistemas genéticos Descubrimiento de Watso n y Crick de la estructura
bacterianos y virales 241 tridimensional del DNA 283
RNA con10 material genético 285
La vida en un mundo bacteriano 241 10.3 El DNA consiste en dos cadenas
9.1 El análisis genético de bacterias requiere complementarias y antiparalelas de
métodos especiales 242 nucleótidos que forman una doble hélice 286
Diversidad bacteriana 242 Estructura primaria del DNA 286
Técnica para el estudio de las bacterias 243 E structuras secundarias del DNA 289
 •
INDICE XXI

12.1 La información genética se debe copiar

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Implicaciones
genéticas de la estructura del DNA 290 con exactitud cada vez que se divide
una célula 326

10.4 Se pueden formar estructuras especiales 12.2 La replicación del DNA tiene lugar de
en el DNA y el RNA 291 una manera semiconservadora 326
Experimento de Meselson y Stahl 327
Modos de replicación 329
Capítulo 11 Estructura cromosómica Requerimientos de la replicación 332
Dirección de la replicación 332
y DNA de los orgánulos 299
Telómeros y adversidad en la INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: La dirección
infancia 299 de la síntesis en diferentes modelos de
replicación 334
11.1 Grandes cantidades de DNA son
empaquetadas en una célula 300 12.3 La replicación bacteriana requiere un gran
Superenrollamiento 300 número de enzimas y proteínas 334
El cromosoma bacteriano 301 Iniciación 334
Cromosomas eucariontes 302 Desenrollamiento 334
Cambios en la est1uctura de la cromatina 304 Elongación 336
11.2 Los cromosomas eucariontes tienen Terminación 339
centrómeros y telómeros 306 Fidelidad de la replicación del DNA 339
Estructura de los cent:rómeros 306
Estructura de los telómeros 306 INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Reglas
básicas de la replicación 340
11.3 El DNA eucarionte contiene varias
clases de variación de secuencias 308
12.4 La replicación del DNA eucarionte es
Desnaturalización y renaturalización del DNA 308
similar a la replicación bacteriana, pero
Tipos de secuencias de DNA en los eucariontes 308
difiere en varios aspectos 340
11.4 El DNA de los orgánulos tiene
Orígenes eucariontes 340
características singulares 309 El permiso de replicación del DNA 341
Estructura de las mitocondrias y los Desenrollamiento 341
cloroplastos 309 DNA polimerasas eucariontes 341
Teoría endosimbiótica 3 1O Ensamblaje de los nucleosomas 342
Herencia uniparental de rasgos codificados Lugar de la replicación dentro del núcleo 343
por orgánulos 311 La síntesis de DNA y el ciclo celular 343
El genoma 1nitocondrial 314 Replicación de los extremos de los cromosomas 344
Evolución del DNA mitocondrial 3 16 Replicación en archaea 346
El daño del DNA mitocondrial se asocia
con envejecimiento 3 16 12.5 La recombinación se produce mediante
El genoma de los cloroplastos 3 17 la rotura, la alineación y la reparación
A lo largo de la evolución, la información de las cadenas de DNA 335
genética se ha desplazado entre los geno.mas Modelos de recombinación 347
nuclear, mitocondrial y de los cloroplastos 3 18 Enzimas requeridas para la recombinación 348
Conversión génica 349

Capítulo 12 Replicación y
recombinación del DNA 325 Capítulo 13 Transcripción 357
Topoisomerasa, replicación y cáncer 325 Intoxicación por Amanita phalloides 357
xxii fNDICE

13.1 El RNA, una cadena simple de Procesamiento del pre-mRNA 388

ribonucleótidos, participa en diversas Adición del casquete 5' 388
funciones celulares 358 Adición de la cola de poli(A) 389
Un mundo temprano de RNA 358 Corte y empalme del RNA 390
Estructura del RNA 358 Vías de procesamiento alternativas 393
Clases de RNA 359 Edición del RNA 395
13.2 La transcripción es la síntesis de una
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Estructura
molécula de RNA a partir de un molde
de los genes eucariontes y procesamiento
de DNA 360 del pre-mRNA 396
El molde 361
El sustrato para la transcripción 363 14.3 Los RNA de transferencia, que se unen a
El aparato de transcripción 363 aminoácidos, son modificados después
13.3 La transcripción en las bacterias consiste de la transcripción en células bacterianas
en iniciación, elongación y terminación 365 y eucariontes 397
Iniciación 365 Estructura del RNA de transferencia 398
Elongación 367 Estructura y procesamiento de los genes de
Terminación 368 1 RNA de transferencia 399
14.4 El RNA ribosómico, un componente del
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Reglas básicas
ribosoma, también es procesado después
de la transcripción 369
de la transcripción 400
Estructura del ribosoma 400
13.4 La transcripción en eucariontes es similar a
Estructura y procesamiento de los genes de
la transcripción en bacterias, pero tiene
RNA ribosó111ico 401
algunas diferencias importantes 370
14.5 Las moléculas de RNA pequeñas
Transcripción y estructura de los nucleosomas 370
participan en diversas funciones 402
Promotores 370
Iniciación 371 Interferencia por RNA 402
Elongación 373 RNA de interferencia pequeños y micro-RNA 403
Terminación 373 RNA de interacción con Pi wi 404
RNA de CRISPR 404
13.5 La transcripción en archaea es más
similar a la transcripción en eucariontes 14.6 Los RNA no codificantes largos regulan la
que a la transcripción en eubacterias 374 expresión génica 405

Capítulo 14 Moléculas de RNA Capítulo 15 El código genético

y procesamiento del RNA 383 y la traducción 411
Una enfermedad Real 383 Huteritas, ribosomas y síndrome de
Bowen-Conradi 411
14.1 Muchos genes tienen estructuras
complejas 384 15.1 Muchos genes codifican proteínas 412
Organización de los genes 384 Hipótesis de un gen, una enzima
Intrones 385 Estructura y función de las proteínas 415
Revisión del concepto de gen 387 15.2 El código genético determina cómo la
14.2 Los RNA mensajeros, que codifican las secuencia de nucleótidos especifica la
secuencias de aminoácidos de las secuencia de aminoácidos de una
proteínas, son modificados después proteína 417
de la transcripción en eucariontes 387 Violación del código genético 418
Estructura del RNA mensajero 387 Degeneración del código 420
 •••
INDICE XXIII

Marco de lectura y codones de iniciación 421 16.3 Algunos operones regulan la transcripción
Codones de terminación 422 mediante atenuación, la terminación
La universalidad del código 422 prematura de la transcripción 460
Atenuación del operón trp de E. coli 460
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Características ¿Por qué hay atenuación en el operón trp? 464
del código genético 422
16.4 Moléculas de RNA controlan la expresión
de algunos genes bacterianos 464
15.3 Los aminoácidos son ensamblados en una
RNA antisentido 464
proteína a través de la traducción 422
Interruptores ribosómicos 464
La unión de amjnoácidos a RNA de
Represión mediada por RNA a través de
transferencia 4 23 ribozimas 466
Iniciación de la traducción 424
@oog~fu 426
Ter1ninación 427 Capítulo 17 Control de la expresión
génica en eucariontes 473
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Comparación
de la traducción bacteriana y eucarionte 430
Diferencias genéticas que nos hacen
humanos 473
15.5 Otras propiedades del RNA y los ribosomas 17.1 Las células eucariontes y las bacterias
que influyen en la síntesis de proteínas 430 tienen muchas características de regulación
Estructura tridimensional del ribosoma 430 génica en común, pero difieren en varios
Polirribosomas 431 aspectos importantes 474
Vigilancia del RNA .mensajero 431
17.2 Los cambios de la estructura de la
Plegamiento y modificaciones postraducción
cromatina afectan la expresión génica 474
de las proteínas 433
Traducción y antibióticos 433 Hipersensibilidad a la DNasa I 475
Remodelación de la cromatina 475
Modificación de las histonas 475
Capítulo 16 Control de la expresión Metilación del DNA 478

génica en las bacterias 443 17.3 La iniciación de la transcripción es regulada

por factores de transcripción y proteínas
Operones y la célula ruidosa 444 reguladoras 479
Activadores y coactivadores de la transcripción 479
16.1 La regulación de la expresión génica
Represores de la transcripción 481
es crucial para todos los organismos 444
Intensificadores y aisladores 481
Genes y elementos reguladores 445
Regulación del atascamiento de la transcripción
Niveles de regulación génica 445
y la elongación 482
Proteínas de uruón a DNA 446
Regulación génica coordinada 482
16.2 Los operones controlan la transcripción
17.4 Algunos genes son regulados por
en las células bacterianas 447 procesamiento y degradación del RNA 483
Estructura de los operones 447
Regulación génica mediada por corte y
Control negativo y positivo: operones
empalme del RNA 483
inducibles y reprimibles 448
Degradación del RNA 484
El operón lac de E. coli 450
Mutaciones de lac 453 17 .5 La interferencia por RNA es un mecanismo
Control positivo y represión por catabolitos 457 importante de regulación génica 485
El operón trp de E. coli 458 RNA de interferencia pequeños y micro-RNA 485
Intensificadores bacterianos 460 Mecanismos de regulación génica mediante
interferencia por RNA 486
xxiv fNDICE

Control del desarrollo por interferencia del 18.5 Los cambios del DNA se reparan mediante
RNA 487 una serie de vías 520
17.6 Algunos genes son regulados por procesos Reparación de los errores de apareamiento 520
que afectan la traducción o por Reparación directa 522
modificaciones de proteínas 487 Reparación por escisión de bases 522
Reparación por escisión de nucleótidos 523
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Comparación
del control génico bacteriano y eucarionte 488 INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Vía básica
de reparación del DNA 524

Capítulo 18 Mutaciones génicas Reparación de roturas bicatenarias 524

y reparación del DNA 493 DNA polimerasas translesión 524
Enfermedades genéticas y reparación defectuosa
Una mosca sin corazón 493 del DNA 525
18.1 Las mutaciones son alteraciones
hereditarias de la secuencia del DNA 494 Capítulo 19 Análisis genético
La importancia de las mutaciones 494 molecular y biotecnología 535
Categorías de mutaciones 494
Tipos de mutaciones génicas 495 Ayudando a los ciegos a ver 535
Efectos fenotípicos de las mutaciones 497
19.1 Las técnicas de genética molecular
Mutaciones represoras 498
revolucionaron la biología 536
Tasas de mutación 502
La revolución de la genética 1nolecular 536
18.2 Las mutaciones son causadas Trabajo a nivel molecular 536
potencialmente por una serie de factores
19.2 Las técnicas moleculares se usan para
diferentes 503
aislar, recombinar y amplificar genes 537
Errores de replicación espontáneos 503
Corte y unión de fragmentos de DNA 537
Cambios químicos espontáneos 504
Visualización de fragmentos de DNA 539
Mutaciones químicamente inducidas 506
Radiación 508 Localización de fragmentos de DNA con
transferencia de Southern y sondas 540
18.3 Las mutaciones son foco de intenso Clonación de genes 541
estudio por genetistas 509 Aplicación: ingeniería genética de plantas
Detección de mutaciones con la prueba con pesticidas 545
de Ames 509 Amplificación de fragmentos de DNA con
Exposición a radiación en seres humanos 51 O la reacción en cadena de la polimerasa 546
18.4 Los elementos transponibles causan 19.3 Las técnicas moleculares pueden
mutaciones 511 utilizarse para hallar genes de interés 549
Características generales de los elementos Geno tecas 549
transponi bles 5 11 Hibridació n in situ 552
Transposición 512 Clonación posicional 552
Efectos mutágenos de la transposición 513 Aplicación: aislamiento del gen de la fibrosis
Elementos transponibles en las bacterias 514 quística 553
Elementos transponibles en los eucariontes 515
19.4 Las secuencias de DNA se pueden
determinar y analizar 555
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Tipos de
elementos transponibles 519 Polimorfismos de longitud de los fragn1entos
de restricción 555
Elementos transponibles que han desempeñado un Secuenciación del DNA 556
papel importante en la evolución del genoma 520 Tecnologías de secuenciación de próxima
. ,,
generac1on 559
 INDICE XXV

Huellas genéticas de DNA 561 20.3 La genómica comparada estudia cómo

Aplicación: identificación de personas que evolucionan los genomas 596
murieron en el derrumbe del World Genomas de procariontes 596
Trade Center 562 Genomas de eucariontes 598
19.5 Las técnicas moleculares se utilizan Genómica comparada de Drosophila 601
cada vez más para analizar la función El genoma humano 60 l
de los genes 563 20.4 La proteómica analiza el conjunto de
Genética directa e inversa 5 63 todas las proteínas halladas en una
Creación de mutaciones aleatorias 564 célula 603
Mutagénesis dirigida al sitio 564 Determinación de las proteínas celulares 603
Animales transgénicos 565 Captura por afinidad 604
Ratones con desactivación génica 5 66 Micromatrices de proteínas 604
Silenciamiento de genes con RNAi 567 Proteómica estructural 604
Aplicación: uso de RNAi para tratar
enfermedades humanas 568
Capítulo 21 Epigenética 613
19.6 La biotecnología aprovecha las
posibilidades de la genética molecular 569 ¿Cómo pudo afectar su salud la
Productos farmacéuticos 569 dieta de su abuelo? 613
Bacterias especializadas 569 21.1 ¿Qué es la epigenética? 614
Productos para la agricultura 569
Pruebas genéticas 570 21.2 Varios procesos moleculares inducen
Terapia génica 571 cambios epigenéticos 615
Metilación del DNA 615
Capítulo 20 Genómica y Modificaciones de histonas 617
Efectos epigenéticos por 1noléculas de RNA 618
proteómica 579
21.3 Los procesos epigenéticos causan un
Decodificando de la danza de la conjunto diverso de efectos 619
abeja: el genoma de Apis mellifera 579 Para1nutación 619
Epigenética conductual 621
20.1 La genómica estructural determina las
Efectos epigenéticos de agentes quúnicos
secuencias de DNA de genomas enteros 580
ainbientales 623
Mapas genéticos 580 Efectos epigenéticos transgeneracionales sobre el
Mapas físicos 581 metabolismo 623
Secuenciación de un genoma completo 582 Efectos epigenéticos en gemelos monocigóticos 623
El Proyecto Genoma Humano 5 83 Desactivación del cromosoma X 624
Polimorfismos de nucleótido único 587 Cambios epigenéticos asociados con la
Variaciones del número de copias 588 diferenciación celular 625
Sitios de secuencia etiquetada 589 Impronta genómica 626
Bioinformática 589
21 .4 El epigenoma 627
Metagenómica 590
Biología sintética 591
20.2 La genómica funcional determina la Capítulo 22 Genética del
función de los genes aplicando
enfoques basados en el genoma 591
desarrollo e inmunogenética 633
Predicción de la función a partir de la secuencia 591 El origen de los espinosos sin
•
Expresión de genes y micromatrices 592 espinas 633
Expresión génica y secuencias indicadoras 595
Mutagénesis en todo el genoma 595 22.1 El desarrollo se produce mediante la
determinación celular 634
xxvi fNDICE

Experimentos de clonación en plantas 635 Oncogenes y genes supresores de tun1ores 666

Experimentos de clonación en animales 635 Mutaciones de genes que controlan el ciclo de
división celular 668
22.2 La formación de patrones en Drosphila Genes de reparación del DNA 672
sirve como modelo del control genético Genes que regulan la telomerasa 672
del desarrollo 636 Genes que promueven la vascularización y la
El desarrollo de la mosca de la fruta 636 diseminación de tumores 672
Micro-RNA y cáncer 673
Genes de polaridad del huevo 637
Proyectos de genoma de cáncer 674
Genes de segmentación 640
Genes homeóticos en Drosophila 641 23.3 Los cambios epigenéticos suelen
• ,
Genes con caja homeótica en otros organismos 642 asociarse con cancer 674
23.4 El cáncer colorrectal surge por mutación
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: El control
secuencial de una serie de genes 675
del desarrollo 643
23.5 Los cambios de la estructura y el
Cambios epigenéticos del desarrollo 643 número de cromosomas suelen asociarse
,
22.3 Los genes controlan el desarrollo de con cancer 676
las flores y las plantas 644
23.6 Los virus se asocian con algunos
Anatomía de las flores 644 ,
canceres 678
Control genético del desarrollo de las flores 644

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Comparación

del desarrollo en Drosphila y flores 646 Capítulo 24 Genética cuantitativa 683
Aceite de maíz y genética
22.4 La muerte celular programada es una
parte integral del desarrollo 646
cuantitativa 683
22.5 El estudio del desarrollo revela patrones 24.1 Las características cuantitativas varían
y procesos de evolución 647 continuamente y muchas son influenciadas
por alelos de múltiples locus 684
22.6 El desarrollo de la inmunidad se produce
mediante reordenamiento genético 649
Relación entre genotipo y fenotipo 685
Tipos de características cuantitativas 686
Organización del sistema inmunitario 650 Herencia poligénica 686
Estructura de las inmunoglobulinas 651
Color del grano de trigo 687
Generación de la diversidad de anticuerpos 652 Determinación del número de genes para una
Diversidad de receptores de linfocitos T 653
característica poligénica 688
Genes del complejo mayor de
histocompatibilidad 654 24.2 Se requieren métodos estadísticos para
Genes y trasplante de órganos 654 analizar las características cuantitativas 689
Distribuciones 689
Capítulo 23 Genética del cáncer 661 Muestras y poblaciones 690
Media 690
Pal/adin y la diseminación del cáncer 661 Varianza y desviación estándar 691
23.1 El cáncer es un grupo de enfermedades Co1relación 692
caracterizadas por proliferación celular 662 Regresión 693
Aplicación de la estadística al estudio de un
Formación de tumores 662
característica poligénica 695
Cáncer co1no enfermedad genética 663
Papel de los factores ambientales en el cáncer 665 24.3 La heredabilidad se usa para estimar
23.2 Las mutaciones de una serie de tipos la proporción de variación de un rasgo
diferentes de genes contribuyen al cáncer 666 que es genético 696
 ••
INDICE XXVII

Variación fenotípica 696 Capítulo 26 Genética evolutiva 743

Tipos de heredabilidad 698
Cálculo de la heredabilidad 698 Genes de la degustación en simios
Limitaciones de la heredabilidad 700 escupidores 743
Localización de los genes que afectan
características cuantitativas 702 26.1 La evolución se produce por cambios
genéticos dentro de poblaciones 744
24.4 Los rasgos genéticamente variables
cambian en respuesta a la selección 704 26.2 Numerosas poblaciones naturales contienen
Predicción de la respuesta a la selección 705 altos niveles de variación genética 745
Límites de la respuesta a la selección 706 Variación molecular 745
Respuestas correlacionadas 707 Variación de las proteínas 746
Variación de la secuencia del DNA 747
Capítulo 25 Genética 26.3 Las nuevas especies surgen por
evolución del aislamiento reproductivo 749
poblacional 715
El concepto de especie biológica 7 49
Rescate genético del carnero salvaje 715 Mecanismos de aislamiento reproductivo 7 50
Modos de especiación 7 51
25.1 Las frecuencias genotípicas y alélicas
Diferenciación genética asociada con la
se utilizan para describir el conjunto . . ,,
espec1ac1on 755
génico de una población 716
Cálculo de las frecuencias genotípicas 7 17 26.4 La historia evolutiva de un grupo de
organismos puede reconstruirse estudiando
Cálculo de las frecuencias alélicas 717
los cambios de las características
25.2 La ley de Hardy-Weinberg describe el homólogas 756
efecto de la reproducción sobre las
Alineación de las secuencias homólogas 757
frecuencias genotípicas y alélicas 719
Construcción de árboles filogenéticos 758
Frecuencias genotípicas en el equilibrio de
Hardy-Wei nberg 719 26.5 Los patrones de evolución son revelados
por los cambios moleculares 758
Examen más exhaustivo de la ley de
Hardy-Weinberg 720 Tasas de evolución molecular 759
Implicaciones de la ley de Hardy-Weinberg 720 El reloj molecular 760
Extensiones de la ley de Hardy-Weinberg 721 Evolución por cambios de la regulación génica 761
Investigación de las proporciones de Evolución del genoma 762
Hardy-Weinberg 721
Estimación de las frecuencias alélicas con la Guía de referencia para organismos
ley de Hardy-Weinberg 723
genéticos modelo A1
25.3 El apareamiento no aleatorio afecta La mosca de la fruta Drosophila melanogaster A2
las frecuencias genotípicas de una La bacteria Escherichia coli A4
población 723 El nematodo Caenorhabditis elegans A6
25.4 Varias fuerzas evolutivas pueden provocar La planta Arabidopsis thaliana A8
cambios de las frecuencias alélicas 726 El ratón Mus musculus Al0
Mutación 726 La levadura Saccharomyces cerevisiae A12
Migración 727
Deriva genética 728 Glosario B1
Selección natural 731
Respuestas a las preguntas y los
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS: Efectos problemas seleccionados C1
generales de las fuerzas que cambian las
frecuencias alélicas 736 Índice analítico D1
 1
Introducción a la genética

Albinismo en los hopis

Elevada trescientos 1netros por encima del desierto, Black Mesa

(meseta negra) domina el horizonte del Desierto Encantado y es
un punto de referencia familiar para los que viajan a través del
noreste de Atizona. Black Mesa no solo es una característica
geológica prominente, sino que también es, más significativa-
mente, el hogar ancestral de los nativos hopi de los Estados
Unidos. Las estribaciones de la meseta se adentran en el desier-
to, y a lo largo o en la parte superior de cada una de ellas hay
un pueblo hopi. La mayoría de los pueblos son bastante peque-
ños y tienen solo algunas docenas de habitantes, pero son increí-
blemente antiguos. Uno de los pueblos, Oraibi, ha existido en
Black Mesa desde 1150 d.C. y representa el asentamiento ocu-
pado de manera continua más antiguo de América del Norte.
En los años 1900, Ales Hrdlieka, un antropólogo y médico
que trabajaba para el American Museum of Natural History
(Museo Estadounidense de Historia Natural), visitó los pueblos
hopi de Black Mesa e informó un descubrimiento sorprendente.
Entre los hopis había 11 personas blancas, no de origen caucá-
sico sino realmente nativos estadounidenses hopis de piel blan-
ca. Estas personas tenían un trastorno genético conocido con10
albinismo (fig. 1-1).
El albinismo se debe a un defecto de una de las enzimas
requeridas para producir melanina, el pigmento que oscurece la
piel, el pelo y los ojos. Las personas con albinismo no producen
melanina o solo lo hacen en pequeñas cantidades y, en conse-
Pueblo hopi de Black Mesa. El albinismo, un trastorno genético, aparece con
cuencia, tienen pelo blanco, piel clara y falta de pigmento en el
gran frecuencia entre los hopis y ocupa un lugar especial en la cultura hopi.
(Ansel Adams/National Park Archives at College Park MD).
iris de los ojos. Normalmente, la melanina protege el DNA de
las células cutáneas de los efectos lesivos de la radiación ultra-
violeta de la luz solar, y la presencia de melanina en el ojo en
desarrollo es esencial para una visión correcta.
La base genética del albinisn10 fue descrita por primera vez por el 1nédico inglés Archibald
Garrod, quien reconoció, en 1908, que el trastorno se heredaba como un rasgo autosómico
recesivo, lo que significa q¡ue una persona debe recibir dos copias de una 1nutación albina
(una de cada progenitor) para presentar albinismo. En los últimos años, se ha dilucidado
el carácter molecular de las mutaciones de provocan este trastorno. En los seres humanos , el
albinismo es causado por defectos de cualquiera de varios genes diferentes que controlan la
síntesis y el altnacenan1iento de melanina; cada gen puede presentar 1nuchos tipos distintos de
mutación, cualquiera de los cuales puede causar albinismo. La for1na de albinismo con más
probabilidades de ser hallada en los hopis es el albinismo oculocutáneo (afecta los ojos y la
piel) tipo II, debido a un defecto del gen OCA2 del cromosoma 15.
Los hopis no son los únicos que tienen albinos entre los miembros de su tribu. Se observa
albinismo en casi todos los grupos étnicos humanos, y se lo describe en escritos antiguos; es
1
2 CAPITULO 1

Figura 1-1 . Albinismo en nativos esta-
dounidenses hopis. En esta fotografía,
tomada aproximadamente en 1900, la niña
hopi del centro presenta albinismo. (The
Field Museum/Charles Carpenter).
probable que haya estado presente desde los comienzos de la humanidad. Los que es sin-
gular acerca de los hopis es la alta frecuencia de este trastorno en su población. En la
mayoría de los grupos humanos, el albinismo es raro y solo afecta a alrededor de 1 cada
20 000 p ersonas. En los pueblos de Black Mesa, alcanza una frecuencia de 1 cada 200,
relación cien veces mayor que la observada en la mayo1ia de las otras poblaciones.
¿Por qué es tan frecUJente el albinis1no entre los hopis? La respuesta a esta pregunta no
se conoce totaltnente, pero los genetistas que han estudiado el albinismo en ellos especu-
lan que la alta frecuencia del gen albino se asocia con el lugar especial que ocupó el albi-
nismo en la cultura hopi. Durante gran parte de su historia, los hopis consideraron que los
miembros de su tribu con albinismo eran importantes y especiales. Se los consideraba lin-
dos, limpios e inteligentes. Tener muchos albinos en un pueblo se consideraba un buen
signo, un símbolo de que las personas del pueblo tenían sangre bopi pa1ticularmente pura.
Los albinos actuaban e11 ceremonias hopis y ocupaban posiciones de liderazgo dentro de la
tribu, a menudo como jefes, curanderos y líderes religiosos.
Asimismo, los hopis albinos recibían trato especial en las actividades coti dianas.
Durante siglos, los hopis cultivaron pequeñas extensiones al pie de Black Mesa. Todos
los días durante la estación de crecimiento, los hombres de la tribu caminaban hasta la
base de Black Mesa y pasaban gran parte del día bajo la brillante luz solar del sudoeste
cuidando de su maíz y sus verduras. Los albinos, por la escasa o nula nJelanina de su
piel, son muy susceptibles a las quemaduras solares y tienen mayor incidencia de cáncer
de piel cuando se exponen al sol. Además, muchos no ven bien con luz solar brill ante.
Por lo tanto, los varones hopis con albinismo eran eximidos de esta tarea masculina
habitual y se les permitía per1nanecer en el pueblo con las mujeres de la tribu realizando
otras tareas.
Durante toda la estación de crecinuento, los ho1nbres albinos eran los únicos 1nie1nbros
mascLtlinos de la tribu que estaban en el pueblo durante el día con las mujeres, por lo que
presentaban una ventaja de apareamiento que ayudó a di seminar el gen albino. Además,
la consideración especial dada a los bopis albinos les perntitió esquivar los efectos pro-
blemáticos del albinismo (mayor incidencia de cáncer de piel y mala visión). Es probable
q ue el pequeño tamaño de la tribu hopi también desempeñara un papel al posibilitar el
aumento de la frecuencia del gen albino. Independientemente de los factores que induje-
ron la alta incidencia die albi11ismo, los hopis sin duda respetaban y valoraban a los
miembros de su tribu q ue tenían este rasgo particular. Lamentablemente, los individuos
con trastornos genéticos suelen ser objeto de discriminación y prejuicio en muchas socie-
dades. INTENTE

L a genética es uno de los campos de la ciencia que avanza con

mayor rapidez, y se publican nuevos descubrimientos im-
portantes todos los meses. Mire casi cualquier periódico o revista
de noticias impo1tante y es probable que encuentre artículos rela-
cionados con la genética: otro genoma completado, como el de la
mariposa monarca; el descubrüniento de genes que influyen en
enfermedades importantes, como la esclerosis múltiple, la depre-
sión y el cáncer; un informe sobre análisis del DNA de animales
extintos hace mucho tiempo, como el del mamut lanudo; y la
identificación de genes que inciden en la pigmentación de la piel,
la talla y la capacidad de aprendizaje de los seres humanos. Aun
en tre los avisos publicitarios, es probable que haya algunos sobre
pruebas genéticas para detenninar la ascendencia de una persona,
la pate1nidad y la susceptibilidad a enfer1nedades y trastornos.
Estos nuevos hallazgos y aplicaciones de la genética suelen tener
implicaciones económicas y éticas importantes, lo que torna rele-
vante, opo1iuno e interesan te el estudio de la genética.
Este capítulo es una introducción a la genética y repasa algunos
conceptos que puede haber tratado brevemente en un curso de
biología. Comenzamos por considerar la importancia de la gené-
tica para cada uno de nosotros, para la sociedad en general y para
los estudiantes de biología. Después, analizaremos la historia de
la genética y cómo se desarroll ó el ca,npo como un todo. La parte
final del capítulo presenta algunos términos y principios funda-
mentales de la genética que se utilizan durante todo el libro.
1.1 La genética es importante
para los individuos, para la sociedad
y para el estudio de la biología
El albinismo entre los hopis ilustra el importante papel que desem-
peñan los genes en nuestras vidas. Este único defecto genético,
entre los 20 000 genes que tienen los seres humanos, cambia total-
mente la vida de un hopi que lo tenga. Modifica su ocupación, su
papel en la sociedad y las relaciones con otros miembros de la tiibu.
Todos tenemos genes que influyen en nuestras vidas de maneras
significativas. Los genes inciden en nuestra estatura, peso, color de
ojos y pigmentación de la piel. Afectan nuestra susceptibilidad a
muchas enfer1nedades y trastornos (fig.1-2), e incluso contribuyen
con nuestra inteligencia y nuestra personalidad. Los genes son fun-
damentales para ser quiénes somos y qué somos.
Si bien la ciencia de la genética es relativainente nueva en com-
paración con otras como la astronon1ía y la química, las personas
 Introducción a la genética 3

(a) (b)
--
-
-
--
-
--
--
-
-- Figura 1-3. En la Revolución Verde, se usaron técnicas genéticas para

-
Cromosoma 5
desarrollar nuevas cepas de cultivos de alto rendimiento. (Izquierda)
Normal Borlaug, un pionero en el desarrollo de nuevas variedades de trigo
que llevó a la Revolución Verde. Borlaug recibió el premio Nobel de la Paz
en 1970. (Derecha) Planta de arroz moderna de alto rendimiento (izquier-
da) y planta de arroz tradicional (derecha). (Izquierda: Bettmann/Corbis.
Figura 1-2. Los genes influyen en la susceptibilidad a muchas enfer- Derecha: IRRI).
medades y trastornos. (a) Radiografía de la mano de una persona con
displasia diastrófica (abajo), un trastorno de crecimiento hereditario que
causa incurvación de los huesos, miembros cortos y deformidades de las
medio de bacterias y otras células manipuladas genéticainente
manos, en comparación con una radiografía de una mano normal (arriba).
(b) Este trastorno se debe a un defecto del gen SLC26A2 del cromosoma 5.
(fig. 1-4). Asimismo, se ha recurrido a la genética para producir
(Parte a: [arriba] Biophoto Associates/Science Source/Photo Researchers; bacterias que extraen minerales de las menas, degradan productos
[abajo] de Johanna Hastbacka y cols., Ce//, 78(6) pp. 1073-1087, 1994. químicos tóxicos e inhiben la forn1ación de escarcha nociva sobre
© 1994 Elsevier. Cortesía del Prof. Eric Lander, Whitehead lnstitute, M IT). las plantas de cultivo.
La genética tan1bién tiene un papel crucial en la medicina. Los
médicos reconocen que muchas enfermedades y trastornos tienen
un componente hereditario, incluidos trastornos genéticos rru·os
han co1nprendido el carácter hereditario de los rasgos y han prac- como la anemia drepanocítica y la enfermedad de Huntington, así
ticado la genética durante miles de años. La mejora de la agricul- como muchas enfermedades comunes, como el asma, la diabetes
tura co1nenzó cuando la gente empezó a aplicar principios gené- y la hipertensión. Los avances de la gené6ca han aportado cono-
ticos al cultivo de plantas y a la domesticación de animales. Hoy
en día, los principales cultivos y animales empleados en la agri-
cultura son bastante distintos de sus progenitores silvestres y han
sufrido extensas modificaciones genéticas que aun1entan su ren-
dimiento y proporcionan muchos rasgos convenientes, como
resistencia a enfermedades y plagas, cualidades nutricionaJes es-
peciales y características que facilitan la cosecha. La Revolución
Verde, que expandió la producción de alimentos en todo el mundo
entre las décadas de 1950 y 1960, se basó mucho en la aplicación
de la genética (fig. 1-3). En la actualidad, el maíz, la soja y otros
cultivos manipulados genéticamente representan una proporción
significativa del total de alimentos producidos en todo el mundo.
La industri a faimacéutica es otra área en la que la genética
desempeña un papel importante. Muchos fármacos y aditivos de
alimentos son sintetizados a partir de hongos y bacterias que hai1
sido 1nanipulados genéticamente para convertirlos en productores
eficientes de estas sustancias. La industria de la biotecnología
emplea técnicas de genética molecular pai·a desrurollar y producir
en masa sustancias de valor comercial. Ahora, se producen co- Figura 1-4. La industria de la biotecnología aplica métodos de biolo-
mercialmente hormonas de crecimiento, insulina, factores de coa- gía molecular para producir sustancias de valor económico. (Andrew
gulación, enzimas, antibióticos, vacunas y n1uchos agentes por Brookes/Corbis).
4 CAPITULO 1
cimientos importantes sobre el carácter de enfermedades como el
cáncer y han contiibuido al desarrollo de pruebas diagnósticas,
incluidas las que identifican patógenos y genes defectuosos. En la
actualidad, se ha administrado terapia génica (la modificación
directa de los genes para tratar enfermedades humanas) a nliles de
pacientes, aunque su uso todavía es experimental y está lunítado
al tratamiento de unos pocos trastornos.
El papel de la genética en la biología
Si bien el conocimiento de la genética es importante para todas
las personas, es crucial para el estudiante de biología. La genéti-
ca proporciona uno de los principios unificadores de la biología:
todos los organismos utilizan sistemas genéticos que tienen una
serie de características en común. También apuntala el estudio de
muchas otras disciplinas biológicas. Por ejemplo, la evolución es
el cambio genético que tiene lugar con el transcurso del tie1npo;
por consiguiente, su estudio exige un conocilniento de la genéti-
ca. La biología del desarrollo se basa fuertemente en la genética:
los tejidos y los órganos se desarroJlan a través de la expresión
regulada de genes (fig. 1-5). Aun campos como la taxonomía, la
ecología y el comportamiento animal utilizan cada vez más 1néto-
dos genéticos. El estudio de casi cualquier campo de la biología
o la medicina es inco1npleto sin un conocimiento acabado de los
genes y los 1nétodos genéticos.
Diversidad genética y evolución
La vida sobre la Tierra existe en una impresionante diversidad de
fon11as y características en casi todo 1nedioan1biente concebible.
A.simismo, la vida se caracteriza por la adaptación: muchos orga-
nismos están exquisitamente adaptados al medio en el que se
hallan. La histo1ia de la vida es una crónica del surgimiento de
nuevas formas de vida, la desaparición de antiguas forn1as y el
cambio de las existentes.
Pese a su tremenda diversidad, los organismos vivientes tienen
una característica en común: todos utilizan sis temas genéticos
similares. El conj unto completo de instrucciones genéticas para
cualquier organismo constituye su genoma, y todos los genomas
están codificados en ácidos nucleicos: DNA o RNA. El sistema de
codificación de la información genética tan1bién es con1ún a todas
las fonnas de vida: las instrucciones genéticas tienen el mismo
Figura 1-5. La clave del desarrollo reside en la regulación de la
expresión génica. Este embrión temprano de mosca de la fruta ilustra la
expresión localizada del gen engrailed, que ayuda a determinar el desarro-
llo de los segmentos corporales en la mosca adulta. (Stephen Paddock).
formato y, con raras excepciones, las palabras del código son
idénticas. De modo similar, el proceso mediante el cual se copia
y se decodifica la información genética es notablemente similar
en todas las formas de vida. Estas características co1nunes de la
herencia sugieren que toda la vida en la Tien·a evolucionó a par-
tir del .mismo antepasado primordial que apareció hace unos 3500
a 4000 1nillones de años. EJ biólogo Richard Dawkins describe la
vida como un río de DNA que corre a través del tiempo conectan-
do todos los organismos pasados y presentes.
Que todos los organismos tengan sistemas genéticos similares
implica que el estudio de los genes de un organisn10 revela prin-
cipios aplicables a otros organismos. Las investigaciones sobre
cómo se copia (replica) el DNA bacteriano, por ejemplo, aporta
info rm ación ap li cable a la replicación del DNA humano.
Asimis1no, implica que los genes funcionarán en células extrañas,
lo que hace posible la ingeniería genética. Lamentablemente,
estos sistemas genéticos similares ta1nbién son la base de enfer-
medades como el sida (síndrome de inmunodeficiencia adquiri-
da), en la que genes vu·ales pueden funcionar (a veces con alar-
mante eficiencia) en células hu1nanas.
La diversidad y la adaptación de la vida son productos de la evo-
lución, que es un simple cambio genético a través del tiempo. La
evolución es un proceso de dos pasos: pri1nero, surgen diferencias
hereditarias al azar, y después, la proporción de individuos con
diferencias particulares aun1enta o dis1ninuye. Por lo tanto, la
variación genética es la base de todo cambio evol utivo y es, en últi-
ma instancia, la base de toda la vida tal como la conocemos.
Además, ahora se utilizan de manera sisten1ática técnicas de gené-
tica molecular para descifrar las relaciones evolutivas entre orga-
nismos; por ejemplo, el análisis reciente de DNA aislado de fósi-
les de Neanderthal ha aportado nueva información respecto de la
relación entre neandertales y seres humanos modernos, lo que
demuestra que los neandertales y los antepasados de los seres
humanos modernos probablemente se cruzaron hace alrededor de
30 000 a 40 000 años. La genética, el estudio de la variación gené-
tica, es crucial para la comprensión del pasado, el presente y el
futuro de la vida. n 1NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 17
CONCEPTOS
La herencia afecta muchas de nuestras características físicas, así como
nuestra susceptibi lidad a muchas enfermedades y trastornos. La ge-
nética contribuye a avances de la agricultura, la industria farmacéuti-
ca y la medicina, y es fundamental para la biología moderna. Todos
los organismos utilizan sistemas genéticos similares, y la variación
genética es la base de la diversidad de la vida.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
¿ Cuáles son algunas de las consecuencias de que todos los organ is-
mos tengan sistemas genéticos similares?
a. Que todas las formas de vida están genéticamente relacionadas
b. Que los hallazgos de la investigación sobre un organismo con fre-
cuencia pueden aplicarse a otros organismos
c. Que los genes de un organismo a menudo pueden existir y prospe-
rar en otro organismo
d. Todas las anteriores

Divisiones de la genética
El estudio de la genética comprende tres subdisciplinas importan-
tes: genética de transmisión, genética molecular y genética pobla-
cional (fig. 1-6). La genética de transmisión, conocida también
como genética clásica, incluye los principios básicos de la heren-
cia y el modo de transmisión de los rasgos de una generación a la
siguiente. Esta área considera la relación entre cromosomas y
herencia, la disposición de los genes en los cromosomas y el
mapeo génico. Aquí, la atención se centra en el organismo indivi-
dual: cómo hereda su con1posición genética y cómo transmite sus
genes a la siguiente generación.
La genética molecular se ocupa del carácter químico del gen
propiamente dicho: cómo se codifica, se replica y se expresa la
información genética. Inclu ye los procesos celulares de replica-
ción, transcripción y traducción (por los que la información gené-
tica es transferida de una molécula a otra) y la regulación génica
(los procesos que controlan la expresión de la información gené-
tica). El foco de la genética n1olecular es el gen, su estructura,
organización y fu nción.
La genética poblacional explora l.a composición genética de
grupos de individuos de la misma especie (poblaciones) y cómo
cambia esa composición con el tiempo y la geografía. Como la
evolución es cambio genético, la genética poblacional es funda-
mentalmente el estudi o de la evolución. El foco de la genética
poblacional es el grupo de genes hallados en una población.
(a) (b)
Genética de Genética
transmisión molecular
Genética
poblacional
(c)
Figura 1-6. La genética puede subdividirse en tres campos interrela-
cionados. (Arriba izquierda: Juniors Bildarchive/Alamy. Arriba derecha:
Martin McCarthy/Getty lmages. Abajo: Stuart Wilson/Science Source).
Introducción a la genética S
La división de.l estudio de la genética en estos tres grupos es
conveniente y tradi cional, pero debemos reconocer que los cam-
pos se superponen y que cada subdivisión mayor puede dividirse
una vez más, además, en una serie de campos más especializa-
dos, como genética cromosó1nica, genética bioquímica, genética
cuantitativa, etc. Alternativamente, la genética puede subdividir-
se por organismo (genética de la 1nosca de la fruta, del maíz o
de las bacterias), y es posible estudiar cada uno de estos orga-
nismos por genética de transmisión, molecular y de poblacio-
nes. La genética moderna es un campo sumamente amplio que
incluye varias subdisciplinas y especializaciones interrelaciona-
das. n 1NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 18
Organismos genéticos modelo
A través de los años , se han llevado a cabo estudios genéticos en
miles de especies diferentes, incluidos casi todos los grupos
i1nportantes de bacterias, hongos, protistas, plantas y ani1nales.
No obstante, unas pocas especies han surgido como organismos
genéticos modelo, organismos que presentan características que
los vuelven particularmente útiles para el análisis genético y
sobre los cuales se ha acumulado una enorme cantidad de infor-
mación genética. Seis organisn1os modelo que han sido objeto de
estudio genético intensivo son la Drosophila melanogaster, una
1nosca de la fruta; la bactelia Escherichia coli, presente en el
intestino de seres humanos y otros mamíferos; el Caenorha.bditis
elegans, un nematodo; la Arabidopsis thaliana, una planta crucí-
fera; el Mus musculus, el ratón casero; y el Saccharomyces cere-
visiae, la levadura de cerveza (fig. 1-7). Estas especies son los
organis1nos de elección para muchos genetistas, y sus genomas
fueron secuenciados como parte del Proyecto Genoma Humano
(véase Cap. 20). Los ciclos vitales y las características genéticas
de estos organismos genéticos modelo se describen con más deta-
lle en la Guía de referencia para organismos genéticos modelo, al
fmal de este libro (pp. Al-A13). Esta Guía de referencia será un
recurso útil cuando usted encuentre estos organis1nos a lo largo
del libro.
A primera vista, este grupo de c1iaturas modestas, y a veces
poco valoradas, parecerían candidatas improbables a organismos
modelo. Sin embargo, todas tienen ciclos vitales y rasgos que las
vuelven particularmente adecuadas para el estudio genético, co-
mo un breve tiempo de generación, nú111eros grandes pero mane-
jables de progenie, adaptabilidad a un medio de laborato1io y la
posibi)jdad de ser alojados y propagados de manera económica.
Otras especies que suelen ser objeto de investigación genética y
que se consideran modelos genéticos son el Neurospora crassa
(moho del pan), el Zea mays (maíz), el Danio rerio (pez cebra) y
la Xenopus laevis (rana con uñas). Si bien no suelen ser conside-
rados un modelo genético, los seres hu1nanos también han sido
sometidos a investigación genética intensiva; en el Capítulo 6, se
evalúan técnicas especiales para el análisis genético de seres
humanos.
El uso del pez cebra para identificar genes que influyen en la
pigmentación de la piel de seres humanos ilustra el valor de los
organismos genéticos modelo. Durante muchos años , los genetis-
tas han reconocido que las diferencias de pigmentación entre gru-
pos étnicos humanos son de origen genético (fig. 1-Sa), pero se
desconocían en gran medida los genes responsables de estas dife-
rencias. El pez cebra se ha convertido en un modelo importante
6 CAPITULO 1

(a) (b) (c)

Drosophi/a melanogaster Escherichia co/i Caenorhabditis e/egans

M osca de la f ruta (pp. A2-A3) Bacteria (pp. A 4-AS) Nematodo (pp. A6-A7)

Figura 1-7. Los organismos genéticos modelo son especies con características que los tornan útiles para
el análisis genético. (Parte a: SPUPhoto Researchers. Parte b: Pasieka/Photo Researchers, lnc. Parte e: Sindair
Stammers/Photo Researchers, lnc. Parte d: Peggy Greb/ARS USDA. Parte e: Joel Page/AP. Parte f : Biophoto
Associates/Photo Researchers, lnc.).

en estudios genéticos debido a que es un vertebrado pequeño que
genera 1nucha descendencia y es fácil de criar en el laboratorio.
El pez cebra .mutante deno1ninado dorado tiene pigmentación
clara porgue sus cél ulas tienen .m enor cantidad de estructuras
denominadas melanosomas, que además son más pequeñas y con-
tienen pigmento menos denso (fig. 1-8b).
Keith Cheng y cols. postularon que la piel clara en los seres
humanos podría deberse a una mutación similar a la mutación
dorada del pez cebra. Aprovechando la facilidad con que se
puede manipular el pez cebra en el laboratorio, aislaron y secuen-
ciaron el gen responsable de la mutación dorada y observaron
que codifica una proteína que interviene en la captación de calcio
por los melanosomas. Después, buscaron en una base de datos de
todos los genes humanos conocidos y hallaron un gen similar
deno1ni nado SLC24A5, que codifica la misma función en las célu-
las humanas. Al examinar poblaciones humanas, observaron que
los europeos de piel clara suelen tener una forma de este gen,
1nientras que los africanos, los asiáticos del este y los nativos
ameticanos tienen, en general, una forma diferente del gen.
Muchos otros genes también influyen en la pigmentación de los
seres humanos, co1no ilustran las mutaciones del gen OCA2, que
provoca albinismo entre los nativos estadounidenses hopi (anali-
zado en la introducción de este capítulo). No obstante, el
SLC24A5 parece ser responsable del 24-38% de las diferencias de
pigmentación entre africanos y europeos. Este ejemplo ilustra el
poder de los organismos modelo en la investigación genética. Sin
embargo, no debemos olvidar que todos los organismos tienen
características únicas y que en ocasiones la genética de los mode-
los no refleja con exactitud los sistemas genéticos de otros orga-
nismos.

(a)

Figura 1-8. El pez cebra, un organismo

genético modelo, ha sido decisivo para
ayudar a identificar genes que codifican
diferencias de pigmentación entre seres
humanos. (a) Los grupos étnicos humanos
(b) difieren en el grado de pigmentación de la
piel. (b) La mutación dorada del pez cebra es
causada por un gen que controla la cantidad
de pigmento melanina de los melanosomas.
(Parte a: PhotoDisc/Getty lmages. Parte b:
Keith Cheng/Jake Gittlen, Cancer Research
Foundation, Pennsylvania State College of
Pez cebra normal M UJta nte dorado Medicine).
 Introducción a la genética 7

(d) (e) (f)

A rbidopsis thaliana Mus musculus Saccahromyces cerevisiae

Planta crucífera (pp. A8-A9) Rató n casero (pp. A 1O-A 11) Levadura de cerveza (pp. A 12-A 13)

CONCEPTOS 1.2 Los seres humanos han utilizado

Las t res divisiones principa les de la genética son la genética de trans-
misión, la genética molecular y la genética poblacional. La genética
de t ransmisión exa mina los principios de la herencia; la genética mo-
lecular considera el gen y los procesos celulares que permiten la
transferencia y la expresión de la información genética; la genética
poblacional estudia la composición genética de grupos de organis-
mos y la manera en que esta composición ca mbia según la geogra-
fía y el transcurso del tiempo. Los organismos genéticos m odelo son
especies que han recibido especial atención en la investigación gené-
tica; tienen ca racterísticas que los tornan útiles para el aná lisis ge-
nético.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿Sería el cabal lo un buen organismo genético modelo? ¿Por qué o
por qué no?
la genética durante miles de años
Si bien la ciencia de la genética es joven (casi totalmente un pro-
ducto de los últimos 100 años más o menos), sus principios se han
utilizado durante miles de años.
La antigua utilización y comprensión
de la herencia
La primera evidencia de que la gente conocía y aplicaba los prin-
cipios de la herencia desde épocas antiguas corresponde al culti -
vo de plantas y la domesticación de animales, que comenzó hace
alrededor de 1O 000 a 12 000 años en Oriente Medio. Los prime-
ros organismos utilizados fueron el trigo, los guisantes, las lente-
jas, la cebada, el pen·o, las cabras y las ovejas (fig. 1-9a). Hace
4000 años, ya se empleaban técnicas genéticas complejas en
Oriente MecLio. Los asirios y los babilonjos desarroll aron varios

(a)

Figura 1-9. Los seres humanos de la antigüedad aplicaban técnicas genéticas en la agricultura. (a) El
trigo moderno, con semillas más grandes y más numerosas, que no se dispersan antes de la cosecha, se obtuvo
cruzando por lo menos tres especies silvestres diferentes. (b) Bajorrelieve asirio que muestra la polinización artifi-
cial de palmeras datileras, en la época del rey Assurnasirpalli 11, quien gobernó desde 883 hasta 859 s.c. (Parte
a: Scott Bauer/ARS/USDA. Parte b: Lower registry: © The Metropolitan Museum of Art. Fuente de la imagen:
Art Resource, NY).
8 CAPITULO 1
cientos de variedades de palmeras de dátiles que diferían entama-
ño, color, sabor y tie1npo de maduración
, del fruto (fig. 1-9b). En
el mismo período, culturas de Asia, Africa y América desarrolla-
ron otros cultivos y domesticaron animales.
Escritos antiguos den1uestran que los seres humanos primiti-
vos también eran conscientes de su propia herencia. Escrituras
sagradas hindúes de hace 2000 años atribuyen muchos rasgos al
padre y sugieren que las diferencias entre hermanos dependen
de la madre. El Talmud, el libro judío de leyes religiosas basa-
do en tradiciones orales que data de miles de años, presenta un
conocimiento asombrosamente preciso de la herencia de la
hemofilia. Afirma que si una mujer tiene dos hijos que mueren
por he1norragia después de la circuncisión, no se debe ci rcunci-
dar a ningún otro hijo ni a los hijos de sus hermanas. El conse-
jo se corresponde en forma precisa con el patrón de herencia
ligada al cromosoma X de la hemofilia (analizado con mayor
detalle en el Cap. 6) .
Los antiguos griegos consideraron de manera cuidadosa la
reproducción y la herencia humana. Los :filósofos griegos elabo-
raron el concepto de pangénesis, según el cual determinadas par-
tículas, denominadas más tarde gémulas, transportaban informa-
ción de diversas partes del cuerpo a los órganos reproductores,
desde los que pasaban al embrión en el momento de la concep-
ción (fig. 1-10). El concepto de pangénesis, aunque incorrecto,
tuvo gran influencia y persistió hasta fines del siglo XIX.
La pangénesis llevó a los antiguos griegos a postular el concep-
to de herencia de las características adquiridas, que proponía
que los rasgos adquiridos durante la vida de una persona se incor-
(a) Concepto de pangénesis (b) Teoría del plasma germinal
=--s~e-:c
g-ru-n"Ta
Según el concepto de
f pangénesis, la información
genética de diferentes
/ partes del cuerpo .. .
t)+ .. ~
.. viaja hasta los
ganas reproductores ...
í ~ -.que es transferido "\
( ... donde es transferida
y
a los gametos.
L_
\ Espermatozoide
Cigoto
óvulo
poraban a su información hereditaria y se trans.mitían a la descen-
dencia; por ejemplo, las personas que desa1Tollaban habi1idad
musical por estudio diligente tendrían hijos con habilidad musical
innata. El concepto de herencia de características adquiridas ya
no se acepta, pero siguió siendo popular durante el siglo XX.
Si bien los antiguos romanos contribuyeron poco al conoci-
miento de la herencia humana, desruTollaron con éxito una serie
de técnicas para la cruza de animales y plantas; las técnicas se
basaban en ensayo y error, más que en cualquier concepto gene-
ral de herencia. En los siguientes 1000 años, se sumó escasa
información nueva al conocimiento de la genética.
Otros avances en nuestro conocimiento de la herencia se produ-
jeron dLu-ante el siglo xvrr. Los fabricantes holandeses de lentes
comenzaron a ensa1nblar microscopios simples a fines del siglo
XVT, lo que permitió a Robert Hooke (1635-1703) descubrir las
células en 1665. Los microscopios proporcionaron a los naturalis-
tas nuevas e interesantes vistas de la vida, y quizás el excesivo
entusiasmo por este nuevo mundo de lo muy pequeño dio origen
a la idea de preformacionismo. De acuerdo con dicha idea, den-
tro del óvulo o el espermatozoide existía un adulto en miniatura
totalmente formado, un homúnculo, que solo crecía durante el
curso del desarrollo (fig. 1-11). El preformacionismo implicaba
que todos los rasgos se heredaban de un solo progenitor: del pa-
dre, si el homúnculo estaba en el espermatozoide, o de la madre,
si estaba en el óvuJ o. Si bien 1nuchas observaciones sugerían que
la descendencia tenía una mezcla de rasgos de ambos padres, el
preformacionismo continuó siendo un concepto popular durante
gran parte de los siglos XVII y xvm.
.,...-,-
te-:-o,:-:rcrta:--:y~
e r:p"CT":""
a.,,..
sm ,.,..,..
a......
germinal, el tejido de la
línea germinal de los
ór anos re roductores ...
. .. contiene un conjunto
completo de información
genética ...
directamente a los
gametos.
~----~
.,, Espermatozoide
Cigoto
Óvulo
Figura 1-10. Pangénesis, un concepto tem-
prano de la herencia, en comparación con la
teoría moderna del plasma germinal.

Figura 1-11. Los preformacionistas de los siglos xvn y xvm creían que
el espermatozoide o el óvulo contenían humanos totalmente forma-
dos (el homúnculo). Aquí se muestra un dibujo de un homúnculo en el
interior de un espermatozoide. (Science Source).
Otro concepto temprano de la herencia fue la herencia combi-
nada, que postulaba que la descendencia es una combinación o
mezcla de los rasgos parentales. Esta idea sugería la combinación
del 1naterial genético en sí mismo, como se mezclan los pig1n en-
tos azul y a1narillo para lograr pintura verde. Una vez combinadas,
las diferencias genéticas no se podían separar en generaciones
futuras, igual que Ja pintura verde no se puede separar en pig1nen-
tos azul y amarill o. De hecho, algunos rasgos parecen mostrar
herencia combinada; sin embargo, hoy en día saben1os que los
genes individuales no se combinan.
El surgimiento de la ciencia de la genética
En 1676, Nehemi ah Grew (1641-1712) informó que las plantas se
reproducían sexualmente usando polen de células sexuales mas-
culinas. Con esta información, una serie de botánicos comenzó a
experimentar con cruces de plantas y creación de luoridos, inclui-
do Gregor M endel (1822-1884; fig. 1-12), quien descubrió los
principios básicos de la herencia. Las conclusiones de Mendel,
que no fueron muy conocidas en la comunidad científica durante
35 años, sentaron las bases de nuestra comprensión moderna de
la herencia, y por lo general, es reconocido en la actualidad como
el padre de la genética.
Los avances de la citología (el estudio de las células) durante el
sig lo XIX ejercieron una gran influencia sobre la genética. Robert
Brown ( 1773-1858) describió el núcleo celular en 1833. Basán-
dose en eJ trabajo de otros, Matthias Jacob Schleiden ( 1804-188 1)
y Theodor Schwann ( 1810-1822) postularon el concepto de la
Introducción a la genética 9
teoría celular en 1839. Según esta teoría, todas las formas de
vida están compuestas por células, y la célula es la unidad funda-
mental de estructura y función de los organismos vivientes. Los
biólogos interesados en la herencia comenzaron a examinar las
células para observar qué sucedía durante el curso de la reproduc-
ción celular. Walther Flemming (1843-1905) obser vó la división
de los cromoso1nas en 1879 y publicó una magnífica descripción
de la mitosis. En 1855, los biólogos reconocieron, en general, que
el núcleo contenía la información hereditaria.
Charles Darwin (1809- 1822), uno de los biólogos más influ-
yentes del siglo XIX, expuso la teoría de la evolución a través de
la selección natural y publicó sus ideas en On the Origin of
Species (El origen de las especies) en 1859. Daiwin reconoció
que la herencia era fundamental para la evolución y llevó a cabo
cruzamientos genéticos extensos con palomas y otros organis-
mos. Sin embargo, nunca comprendió el carácter de la herencia,
y esta falta de comprensión fue una omisión importante en su teo-
ría de la evolución.
En la últüna mitad del siglo XIX, los citólogos demostraron que
el núcleo desempeñaba un papel en la fecundación. Cerca del
f111al del siglo XIX, AugustWeismann (1834-19 14) sepultó la idea
de la herencia de características adquirid as. Les cortó la cola a
ratones durante 22 generaciones consecutivas y mostró que la
cola de los descendientes seguía siendo larga. Weismann propuso
la teoría del plasma germinal, que sostiene que las células de los
órganos reproductores contienen un conjunto completo de infor-
mación genética que se transmite al óvu lo y al espermatozoide
(véase fig. 1-l0b).
Figura 1-12. Gregor Mendel fue el padre de la genética moderna.
Mendel descubrió por primera vez los principios de la herencia al cruzar
diferentes variedades de plantas de guisantes y anal izando la transmisión
de rasgos a las generaciones siguientes. (Hulton Archives/Getty lmages).
10 CAPITULO 1

t L /\\A,\ l\l A f\J \lJ \O"~V'JII XY V ' - ~

El año 1900 marcó un hito en la hi storia de la genética. Se
redescubrió la publicación fundamental de Gregor Mendel de rc.1.G'\GGJ\GC \TC CCT O: CTCCC'AJGG CA T TGC CTCTT OOG GCC
1866 sobre experimentos con plantas de guisantes, que reveló los 30 140 150 160 170
principios de la herencia, considerados con mayor detalle en el
Capítulo 3 . Se reconoció la significación de estas conclusiones,
I
"
y otros biólogos come nzaron a realizar de in1nediato estudios
genéticos similares en ratones, pollos y otros organismos. Los ~
v \rv V~ " ~ \
resultados de estas investigaciones demostraron que numerosos
rasgos seguían, de hecho, las reglas de Mendel. El cuadro 1-1
-~ "
~

- ... - ...~ -~ ""'~ ~

'
~ '- ,1\ ~
"' '
resume algunos de los primeros conceptos sobre la herencia. G!CAC CAAGGC CCA O:ACCT CCACTCT GCACAC GTAGA TGC TG 1
Tras la aceptación de la teoría de la herencia de Mendel, en 250 260 270 280 291
1902, Walter Sutton (1877-1916) postuló que los genes, las uni-
dades de la herencia, se localizan en los cromosomas. En 19 l O,
~ •
Thomas Hunt Morgan (1866-1945) descubrió el primer mutante
genético de las moscas de la fruta y utilizó estos organismos para
'
\~ ~ '\.
.,,
~

~ "
"
~ '\
~

~ ' '\
desentrañar muchos detalles de la genética de transmisión.
\ "' ' ' " '
RonaldA. Fisher ( 1890-1945), John B . S. Haldane (1892-1964) y }GOC CAGGC GGCCCCT G \ACTCT OOGGT TCCA TT CCTCAC CT <
Sewall Wright ( 1889-1988) sentaron las bases de la genética .'"'
poblacional en la década de 1930 al integrar la genética n1ende-
Figura 1-13. El genoma humano fue secuenciado por completo en
liana y la teoría de la evolución. 2003. Cromatografía de un pequeño fragmento del genoma humano.
En la década de 1940, los genetistas comenzaron a utilizar bac- (Science Museum/SSPL).
terias y virus; la reproducción rápida y los sistemas genéticos
simples de estos organismos permitieron el estudio detallado de
la organización y la estructura de los genes. Aproximadamente en
esta misma época, se acumu ló evidencia de que el DNA era el Francis Crick (1916-2004), junto con Maurice Wílkins (1926-
depósito de infor1nación genética. James Watson (n. 1928) y 2004) y Rosalind Franklin ( 1920-1958), describieron la estructu-
ra tridimensional del DNA en 1953, lo que marcó el comienzo de
la era de la genética molecular.
En 1966, se había dilucidado la estructura química del DNA y el
Cuadro 1-1 Primeros conceptos sobre la herencia sistema por el que determina la secuencia de aininoácidos de las
proteínas . Los avances de la genética molecular llevaron a los pri-
Correcto o meros experin1entos de DNA reco111binante en 1973, que provoca-
Concepto Proponía incorrecto ron otra revolución en la investigación genética. E n 1977, Walter
Gilbert (n. 1932) y Frederik Sanger (n. 1918) desarrollaron méto-
Pangénesis La información genética viaja Incorrecto
dos para secuenciai· el DNA. En 1983, Kary Mullís (n. 1944) y
de diferentes partes del
otros desai-rollai·on la reacción en cadena de la polimerasa, una téc-
cuerpo a los órganos
nica para amplificai· rápidamente cantidades muy pequeñas de
reproductores.
DNA. En los Estados Unidos, se utilizó por primera vez terapia
Herencia de Los rasgos adquiridos se incor- Incorrecto gén ica en 1990 para tratar a seres humanos, y se lanzó el Proyecto
características poran a la información heredi- Genoma Humano. En 1995, se determinó la primera secuencia
adqu iridas taria. completa de DNA de un organismo de vida libre, la bacteria Hae-
mophilus i11fiuenzae, y un año después, se informó la primera se-
Preformacionismo En las células sexuales, reside Incorrecto cuencia completa de un organismo eucarionte (levadura). En 2000,
un organismo en miniatura, y se publicó un borrador del genon1a hun1a110 (véase Cap. 20), y la
todos los rasgos se heredan secuencia de completó esencialmente en 2003, lo que inauguró
de uno de los progenitores. una nueva era de la genética (fig. 1-13). En la actualidad, se están
Herencia Los genes se combinan y se Incorrecto
secuenciando, analizando y comparando los genomas de numero-
combinada mezclan. sos orgamsmos. IJiÑTENTE RESOLVER LOS PROBLEMAS 22 Y 23

Teorfa del plasma Todas las células contienen un Correcto

germinal juego completo de informa-
ción genética.
Teoría celular Todas las formas vivientes
están compuestas por célu las,
y las células solo se originan
de células.
Herencia Los rasgos se heredan según
mendeliana principios definidos.
El futuro de la genética
Hoy en día, se realizan numerosos avai1ces en genética, que con-
Correcto
tinúa a la vanguardia de la investigación biológica. Se están utili-
zando nuevos métodos rápidos para la secuenciación del DNA a
fin de secuenciar los genomas de nu1nerosas especies, de frutillas
a mariposas y elefantes. Recientemente, se e1npleai·on estos méto-
Correcto dos para reconstruir todo el genoma de un feto nonato a partir de
DNA fetal circulante en sangre materna, lo que ofrece la posibili-
dad de realizar pruebas genéticas pre natales no invasivas. El aná-

lis is de DNA de huesos antiguos demuestra que varias especies
diferentes de seres humanos deambularon por la Tie1Ta solo
30 000 años atrás. Se están utilizando técnicas genéticas moder-
nas y poderosas para identificar genes que influyen en caracterís-
ticas importantes desde el punto de vista de la agricultura y la
ganadería, como el tamaño del ganado, la don1esticación de
pollos, la velocidad de los caballos de carrera y la forma de la
hoja del maíz. En la actualidad , el análisis de DNA suele utilizar-
se para identificar y condenar a criminales o para probar la ino-
cencia de sospechosos.
Estudios genéticos de infarto de miocardio (ataque cardíaco) en
seres humanos ilustran el poder de los nuevos métodos para iden-
tificar y anaJi zar genes. D esde hace tiempo , los médicos han reco-
nocido que los ataques cardíacos se dan e n familias, pero hasta
hace poco ha sido difícil hallar genes específicos que contribuyan
a un mayor riesgo de ataque cardíaco. En 2009, un equipo inter-
nacional de genetistas examinó el DNA de 26 000 personas de 10
países para detectar diferencias de un solo nucleótido en el DNA
(deno1ninados polin1orfis1nos de nucleótido único, SNP, single
nucleotide polimorphisni) que podrían asociarse con un mayor
tiesgo de ataque cardíaco. Este esn1dio y otros similares identifi-
caron varios genes nuevos que inciden en el riesgo de coronario-
patía e infartos tempranos. Estos hallazgos pueden posibilitar la
detección de p ersonas predispuestas a infartos, lo que per1nitiría
intervención temprana capaz, quizás, de prevenir un ataque. Los
análisis de SNP están ayudando a localizar genes que afectan todo
tipo de rasgos, desde color de los ojos y la talla hasta el glauco-
ma y el cáncer.
La información acerca de diferencias de secuencias entre orga-
nismos también es una fuente de nuevos conocimientos acerca de
la evolución. Por ejemplo, los científicos analizaron hace poco
secuencias de DNA de 26 genes para construir un árbol evolutivo
completo de los mamíferos. El árbol. revela muchas característi-
cas interesantes de la evolución de estos animales. Una de estas
revelaciones es que los mamíferos marinos (ballenas, delfrnes y
marsop as) están relacionados muy estrech amente con los hipopó-
tamos .
.En Los últin1os años, los científicos han descubierto que altera-
ciones del DNA y la estructura cromosómica que no involucran la
secuencia de b ases desempeñan un papel importante en la expre-
sión génica. Estas alteraciones, denominadas cambios epigenéti-
cos, afectan nuestro aspecto, comportamiento y salud, y en la
acrualidad son objeto de intensa investigación. Otros estudios
demuestran que el RNA es clave en muchos aspectos de la fun-
ción de los genes. El descubrimie nto a fines de 1990 de pequeñas
moléculas de RNA llevó a reconocer que estas moléculas desem-
peñan un papel central en la expresión génica y el desarrollo.
Nuevos microchips genéticos que analizan simultáneamente
miles de moléculas de RNA están aportando información acerca
de las actividades de miles de genes en una célula dada, lo que
pe1mite contar con un cuadro detall ado de cómo responden las
célul as a señales externas, agresiones ambientales y enfermeda-
des como el cáncer. En el campo de la proteómica, están empleán-
dose programas informáticos potentes para modelar la estructura
y la función de proteínas a p artir de información sobre la se-
cuencia del DNA. Toda esta información nos permite una mayor
compresión de nu1nerosos procesos biológicos y relaciones evo-
lutivas. El aluvión de nueva información genética exige el de-
sarrollo continuo de programas informáticos complejos para
almacenar, recuperar, comparar y analizar datos genéticos, y ha
Introducción a la genética 11
dado origen al campo de la bioinformática, una fusión de la bio-
logía molecular y la informática.
A medida que el costo de la secuenciación se vuelve más ase-
quible, los objetivos de la secuenciación del DNA dejarán de ser
los genomas de diversas especies p ara centrarse en las diferen-
cias individuales dentro de Las especies. En un futuro no dema-
siado distante , es probable q ue cada persona tenga una copia de
la secuencia de todo su genoma que pueda servir para ayudar a
evaluar el riesgo de adquirir diversas enfermedades y a ajustar su
tratamiento en caso de que aparezcan. La utilización de la gené-
tica en la agricultura continuará mej orando la productividad de
los cultivos y animales do1nésticos, lo que ayudará a alimentar a
la futura población mundial. Esta constante ampliación del
alcance de la genética plantea problemas éticos, sociales y eco-
/ .
nom1 cos.
Esta breve reseña de la historia de la genética no pretende ser
exhaustiva; 1nás bien, est á destinada a reflejar el ritmo acelerado
de los avances en genética. En los próximos capítulos, aprendere-
1nos más sobre los experitnentos y Los científicos que ayudaron a
modelar la disciplina de la genética.
CONCEPTOS
Los seres humanos aplicaron por primera vez la genética al cultivo de
plantas y la domesticación de animales hace alrededor de 10.000 a
12.000 años. Los avances en hibridación de plantas y citología de los
siglos xvm y x1x sentaron las bases del campo de la genética actual.
Tras el redescubrimiento del trabajo de Mendel en 1900, la ciencia de
la genética se desarrolló rápidamente y, en la actualidad, es una de las
áreas más activas de la ciencia.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿ Cómo contribuyeron los avances del siglo x1x en citología a nuestro
conocimiento moderno de la genética?
1.3 Se necesitan unos pocos conceptos
fundamentales para comenzar nuestro
viaje por la genética
Sin duda, usted aprendió algunos principios genéticos en otras
clases de biología. D ediquemos algunos momentos a repasar al-
gunos conceptos fundamentales.
LAS CÉLULAS PERTENECEN A DOS TIPOS BÁSICOS: EUCARIONTES Y
PROCARIONTES Desde el punto de vista estructural, las células son
de dos tipos básicos, pero evolutivamente la historia es más com.-
pleja (véase Cap. 2) . Las células procariontes carecen de mem-
brana nuclear y, en general, no tienen orgánulos celulares limita-
dos por membranas, mientras que las células eucariontes son más
complej as, tienen un núcleo y orgánulos limitados por membra-
na, corno cloroplastos y mitocondrias.
EL GEN ES LA UNIDAD FUNDAMENTAL DE LA HERENCIA A menudo,
la manera precisa de definir un gen varía según el contexto bioló-
12 CAPITULO 1

gico. En el nivel más simple, podemos pensar que un gen es una Secuencia que codifica un rasgo
unidad de información que codifica una característica genética. ~--~A----~
r '
Ampliaremos esta defmición a medida que aprendamos más acer- DNA
ca de qué son los genes y cómo funcionan.

LOS GENES SE PRESENTAN EN MÚLTIPLES FORMAS DENOMINADAS Proteína

ALELOS Un gen que especifica una característica puede existir en
varias formas denominadas alelos. Por ejen1plo, en los gatos, un
gen para el color del manto puede existir como un alelo que codi-
fica pelaje negro o un alelo que codifica pelaje anaranjado.

LOS GENES CONFIEREN FENOTIPOS Uno de los conceptos más im-

portantes de la genética es la distinción entre rasgos y genes. Los
rasgos no se heredan directamente. Más bien, se heredan los
genes que, junto con factores a mbie ntales, determinan la expre-
sión de los rasgos. La información genética que posee un organis-
mo individual es su genotipo; el rasgo es su fenotipo. Por ejen1-
plo, el albinismo observado en algunos hopis es un fenotipo, y la
infonnación de los genes OCA2 que causa albinisn10 es el geno-
tipo.
EL DNA Y EL RNA TRANSPORTAN LA INFORMACIÓN GENÉTICA La in-
formación genética está codificada en la estructura 1nolecular de
los ácidos nucleicos, que son de dos tipos: ácido desoxirribonu-
cleico (DNA) y ácido ribonucleico (RNA). Los ácidos nucleicos
son polímeros formados por unidades repetitivas llamadas nu-
cleótidos; cada nucleótido está compuesto por un azúcar, un fos-
fato y una base nitrogenada. L as bases nitrogenadas del DNA son
de cuatro tipos: adenina (A), citosina (C), guanina (G) y timina
(T). La secuencia de tres bases codifica la infor1nación genética.
El DNA está formado por dos cadenas nucleotídicas comple1nen-
tarias. La mayoría de los organ is1nos transportan su información
genética en el DNA, pero algunos virus la transportan en el RNA.
Las cuatro bases nitrogenadas del RNA son adenina, citosina,
guanina y uracilo (U).
LOS GENES SE LOCALIZAN EN LOS CROMOSOMAS Los vehículos de
infonnación genética dentro de una célula son los cromoso1nas
(fig. 1-14), form.ados por DNA y proteínas asociadas. Las células
de cada especie tienen un número característico de cromosomas;
por ejemplo, las células bacterianas suelen tener un solo cromo-
so1na; las células humanas , 46; las células de paloma, 80. Cada
cron1osoma transporta una gran cantidad de genes.
LOS CROMOSOMAS SE SEPARAN MEDIANTE LOS PROCESOS DE MITO-
SIS Y MEIOSIS Los procesos de mitosis y meiosis garantizan que
exista un conjunto completo de cromosomas en cada célula resul-
tante de la división celular. La mitosis es la separación de los cro-
mosomas en la división de las células somáticas (no sexuales). La
meiosis es el apareanliento y separación de los cron1osomas en la
divis ión de las células sexuales para producir gametos (células
reproductoras).
Cromosoma
Figura 1-14. Los genes se encuentran en los cromosomas.
LA INFORMACIÓN GENÉTICA SE TRANSFIERE DEL DNA AL RNA A LA
PROTEÍNA Muchos genes codifican características especificando
la estructura de las proteínas. La información genética se transfie-
re, primero, del DNA al RNA, y después, el RNA se traduce a la
secuencia de aminoácidos de una proteína.
LAS MUTACIONES SON CAMBIOS PERMANENTES DE LA INFORMA-
CIÓN GENÉTICA QUE PUEDEN SER TRANSMITIDOS DE CÉLULA A
CÉLULA o DEL PROGENITOR A LA DESCENDENCIA Las mutaciones
gé nicas afectan la inforn1ación gen ética de un único gen; las
mutaciones cromosómicas modifican el número o la estructura
de los cromosomas y, por consiguiente, s uelen afectar a muchos
genes.
ALGUNOS RASGOS SON AFECTADOS POR MÚLTIPLES FACTORES Al-
gunos rasgos son afectados por múltiples genes que interactúan
de maneras con1plejas con factores ambientales. Por ejemplo, la
estatura humana es influida por 111uchos genes, así co1no por fac-
tores a mbientales, por ejemplo, la nutrición.
LA EVOLUCIÓN ES CAMBIO GENÉTICO La evolución puede conside-
rarse como un proceso de dos pasos: primero, surge la variación
genética, y segundo, algunas variaciones genéticas aumentan de
frecuencia, mientras que otras variantes disminuyen de frecuen-
cia. n 1NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 24

RESUMEN DE CONCEPTOS
■ La genética es central para la vida de toda persona; influye en
sus características físicas, personalidad, inteligencia y suscep-
tibilidad a varias enfermedades.
■ La genética desempeña papeles importantes en la agricultura,
la industria farmacéutica y la medicina. Es básica para el estu-
dio de la biología.
■ Todos los organismos utilizan sistemas genéticos similares. La
variación genética es la base de la evolución y es crucial para
comprender toda la vida.
■ En lineas generales, el estudio de la genética puede dividirse
en genética de transmisión, genética molecular y genética
poblacional.
■ Los organismos genéticos modelo son especies sobre las que
existe mucha información genética, porque tienen característi-
cas que las vuelven particularmente pasibles de análisis gené-
tico.
■ El uso de la genética por los seres humanos comenzó con el
cultivo de plantas y la domesticación de anünales.
■ Los antiguos griegos desarrollaron los conceptos de pangéne-
sis y herencia de las características adquiridas, que más ade-
lante fueron refutados. Los antiguos romanos desaiTollaron
medidas prácticas para la cruza de plantas y animales.
■ El preformacionismo sugería que una persona hereda todos
sus rasgos de uno de los progenitores. La herencia combinada
TÉRMINOS IMPORTANTES
genética molecular (p. 5) genoma (p. 4)
genética poblacional (p. 5) herencia de características
genética de transmisión adquiridas (p. 8)
(p. 5) herencia con1binada (p. 9)
l. d
2. No, porque es costoso alojar, alimentar y reproducir a los
caballos, tienen escasa descendencia y su tiempo de genera-
ción es demasiado prolongado.
Las respuestas de las preguntas y los problemas precedidos por
un asterisco se pueden hallar al final del libro.
Sección 1.1
*1. ¿Cómo contribuyó la cultura de los hopis a la alta inciden-
cia de albini smo entre los miembros de la tribu hopi ?
Introducción a la genética 13
postul.aba que la descendencia tenía una mezcla de los rasgos
parentales. Más adelante, se observó que estas ideas eran
incorrectas.
■ Gregor Mendel, al estudiar la descendencia de cruzamientos
entre variedades de guisantes, descubrió los principios de la
berencia. Los avances de Ja citología en el siglo XIX llevaron a
comprender que el núcleo de la célula es el sitio de la heren-
cia.
■ En 1900, se redescubrieron los principios de la h erencia, de
M endel. A principios de la década de 1930, se estableció la
genética poblacional, seguida de cerca por la genética bioquí-
mica, y la genética bacteriana y viral. En 1953, se descubrió
la estructura del DNA, lo que estimuló el surgimiento de la
genética moleculai·.
■ Hay dos tipos básicos de células: procariontes y eucariontes.
■ Los genes que determinan un rasgo se denominan genotipo; el
rasgo que producen es el feno tipo.
■ Los genes se localizan en los cromosomas, compuestos por
ácidos nucleicos y proteínas, y que se reparten entre .l as célu-
las hija a través del proceso de mitosis y meiosis.
■ La información genética se expresa mediante la transferencia
de información del DNA al RNA a proteínas.
■ La evolución requiere el cambio genético de las poblaciones.
organismo genético modelo teoría celular (p. 9)
(p. 5) teoría del plasma gernlÍnal
pangénesis (p. 8) (p. 9)
preforn1acionismo (p. 8)
3. Los avances de la citología durante el siglo XIX permitieron
identificar partes de la célula, como el núcleo y los cron1oso-
mas. La teoría celular centró la atención de los biólogos en la
célula, lo que finalmente llevó a la conclusión de que el
núcleo contiene la información hereditaria.
2. Mencione algunas de las formas en las que la genética es
importante para todos nosotros.
3. Dé por lo menos tres ejemplos del papel de la genética en la
sociedad actual.
4. Explique sucintamente por qué la genética es crucial para la
biología moderna.
14 CAPITULO 1
5. Enumere las tres subdisciplinas tradicionales de la genética
y resuma lo que abarca cada una.
6. ¿ Cuáles son algunas de las características de los organismos
genéticos modelo que Jos vuelven útiles para estudios gené-
ticos?
Sección 1.2
7. ¿Cuándo y dónde apareció por primera vez la agricultura?
¿Qué papel desempeñó la genética en el desarrollo de los pri-
meros cultivos de plantas y la domesticación de animales?
8. Reseñe el concepto de pangénesis y explique cómo difiere
de la teoría del pl asma germinal.
9. ¿Qué postula el concepto de la herencia de caracteristicas
adquiridas y cómo se relaciona con el concepto de pangénesis?
10. ¿Qué es el preformacionismo? ¿Qué decía acerca de cómo
se heredaban los rasgos?
11. Defina herencia combinada y compárela con el preforma-
c10111smo.
Sección 1.1
*17. ¿Cuál es la relación entre genética y evolución?
*18. Para cada uno de los siguientes temas, indique si está cen-
trado en la genética de transmisión, la genética molecular
o la genética poblacional.
a. Análisis de pedigríes para determinar la probabilidad
de que alguien herede un rasgo.
b. Estudio de personas de una pequeña isla para determi-
nar por qué una forma genética de asma es prevalente
en ese lugar.
c. Efecto del apareamiento no aleatorio sobre la distribu-
ción de genotipos en un grupo de anünales.
d. Examen de las secuencias de nucleótidos halladas en
los extremos de los cromoso1nas.
e. Mecanismos que garantizan un alto grado de precisión
en la replicación del DNA.
f. E studio de cómo los rasgos de la herencia codificados
por genes de Jos cromoso1nas sexuales (rasgos ligados
al sexo) difiere n de la herencia de rasgos codificados
por genes de los cromoso1nas no sexuales (rasgos auto-
só1nicos).
19. Describa algunas de las maneras en las que su propia com-
posición genética lo afecta como persona. Sea lo más
específico posible.
20. Describa por lo menos un rasgo que parece darse en su
familia (aparece en múltiples nli.e mbros de la famili a).
¿Este rasgo se da en su familia porque es un rasgo heredi-
12. ¿Cómo contribuyeron los avances de la botánica de los
siglos XVII y XVIII al surgimiento de la genética mode1na?
13. Enumere algunos avances de la genética logrados en el
siglo xx.
14. Explique en forma sucinta la contribución de cada una de
las siguientes personas al estudio de la genética.
a. Matthias Schleiden y Theodor Schwann
b. August Weismann
c. Gregor M endel
d. James Watson y Francis Crick
e. Kary Mullis
Sección 1.3
15. ¿ Cuáles son los dos tipos básicos de células (desde una
perspectiva estructural) y cómo difieren?
16. Reseñe las relaciones entre genes, DNA y cromosomas.
tario o porque es causado por factores ambientales que
son comunes a los miembros de la fanulia? ¿Cómo podría
distinguir entre estas posibilidades?
Sección 1.2
*21. Se dice que la genética es, a la vez, una ciencia muy anti-
gua y una ciencia muy joven. Explique lo que significa
esta afirmación.
*22. Haga coincidir la descripción (a a el) con la teoría o el
concepto correcto enumerados a continu ación.
Preformacionismo
Pangénesis
Teoría del plasma germinal
Herencia de características adquiridas
a. Cada célula reproductora contiene un conjunto comple-
to de información genética.
b. Todos los rasgos se heredan de un progenitor.
c. E s posible alterar la información genética mediante el
uso de una característica.
d. Las células de diferentes tejidos contienen distinta
infor1nación genética.
*23. Compare y contraste las siguientes ideas acerca de la
herencia.
a. Pangénesis y herencia combinada.
b. Preformacionismo y herencia combinada.
c. Herencia de características adquiridas y nuestra teoría
moderna de la herencia.

Sección 1.3
*24. Compare y contraste los siguientes términos:
a. Células procariontes y eucru.iontes
b. Gen y alelo
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Introducción
*25. El tipo de albinismo que aparece con alta frecuencia entre
los nativos estadounidenses hopi (analizado en la introduc-
ción de este capítulo) es muy probablemente un albinismo
oculocutáneo de tipo II, secundario a un defecto del gen
OCA2 del cromosoma 15. Realice alguna investigación en
Internet para determinar cómo difiere el fenotipo de esta
clase de albinismo de los fenotipos de las otras fonnas de
albinismo en seres humanos, y los genes mutados que cau-
san estos fenotipos. Pista: visite en línea el sitio web He-
rencia mendeliana en el hombre
(http://www. ncbi.nhn.nih. gov/ 01nim/) y busque la base de
datos de albinismo.
Sección 1.1
26. En la actualidad, sabemos mucho acerca de la genética de
los seres humanos, y ellos son el foco de numerosos estu-
dios genéticos. ¿ Cuáles son algunas de las razones por las
que el estudio genético intensivo se ha centrado en los seres
humanos?
Sección 1.3
*27. Suponga que existe vida en otro lugar del universo. Todas
las formas de vida deben contener algún tipo de informa-
ción genética, pero los genomas extraten·estres podrían no
estar formados por ácidos nucleicos ni tener las nlismas
características que las observadas en los genomas de las
formas de vida de la Tierra. ¿ Cuáles podrían ser las carac-
te1ísticas com Ltnes de todos Los genomas, sin importar
dónde existan?
Introducción a la genética 15
c. Genotipo y fenotipo
d. DNAyRNA
e. DNA y cromosoma
28. Elija alguno de los problemas éticos o sociales de las par-
tes a a e y dé su opinión sobre el te1na. Para inforn1ación
de base, podría leer uno de los artículos sobre éti ca marca-
dos con Ltn asterisco en la sección Lecturas recomendadas
para el Capítulo 1 en http://courses.bfwpub.com/pierce5e.
a. ¿Se debe utilizar la composición genética de una perso-
na a fin de determinar su elegibilidad para seguros de
vida?
b. ¿Las compañías de biotecnología deben estru.· autoriza-
das a patentar genes secuenciados en forma reciente?
c. ¿Se debe utilizar terapia génica en personas?
d. ¿Se debe tener acceso a pruebas genéticas de trastornos
hereditarios para los que no hay trata1niento ni cura?
29. Una mujer de 45 años es sometida a pruebas genéticas y
descubre que tiene un alto riesgo de presentar cáncer de
colon y enfermedad de Alzhein1er. Como sus hijos tienen
50% de sus genes, también pueden presentar 1nayor riesgo
de estas enfermedades. ¿Tiene la obligación moral o legal
de informar a sus hijos y a otros familiares cercanos los
resultados de sus estudios genéticos?
30. Suponga que usted pudiera realizarse un estudio genético
a los 18 años de ed ad para determinar su susceptibilidad a
una enfermedad genética que no aparece hasta la madurez
y para La que no hay tratamiento.
a. ¿ Cuáles serían algunas de las posibles razones para rea-
lizar dicha prueba genética y algunas de las posibles
razones para no hacerlo?
b. Personalmente, ¿desearía que lo estudiaran? Explique
su razonruniento.
 2
Cromosomas y reproducción celular

El acertijo de los hombres ciegos

En un acertijo conocido, dos hombres ciegos entran por casuali-

dad en un almacén al mismo tiempo, se diligen al mismo mos-
trador y ambos solicitan cinco pares de medias, cada par de un
color diferente. El vendedor está tan aturdido por esta extraña
coincidencia que coloca los diez pares (dos pares negros, dos
pares azules, dos pares gri ses, dos pares man·ones y dos pares
verdes) en una única bolsa de compras y le da la bolsa con los
diez pares a uno de los hombres ciegos y una bolsa vacía al
otro. Los dos hombres ciegos se encuentran afuera, en la calle,
donde descubren que una de las bolsas contiene los diez pares
de medias. ¿De qué fo rma los dos hombres ciegos, sin ver y sin
ning una ayuda exterior, seleccionan las medias para que cada
hombre vuelva a su casa con exactamente cinco pares de
medias de distinto color? ¿Puede usted encontrar una solución
al acertijo?
Por una interesante coincidencia, las células tienen el mismo
dile1na que los hombres ciegos del acertijo. La 1nayoría de los
organismos tienen dos conjuntos de información genética, uno
heredado de cada progenitor. Antes de la división celular, se
replica el DNA de cada cromoso1na. Después de la replicación,
existen dos copias de cada cromosoma, llainadas cromátidas
hermanas. Al fmal de la división celular, es fundamental que
cada una de las dos células nuevas reciba una copia comp leta
Cromosomas en mitosis (azul), el proceso por el cual cada célula nueva
del material genético, al igual que cada hombre ciego debe lle-
recibe una copia completa del material genético. (Cortesía de Julie
Canman y Ted Salman).
gar a su hogar con un conj unto completo de medias.
La solución del acertijo es simple. Las n1edias se venden de
a pares; las dos medias de un par suelen estar unidas por un
hilo. Al retirar un par de la bolsa, cada uno de los hombres
toma una media diferente del par y tira en direcciones opuestas. Con las medias estiradas, uno
de los hombres puede tomar una navaja y cortar el hilo que une el par. Después, cada uno de
los hon1bres deposita su única media en su bolsa. Al fi nal del proceso, la bolsa de cada hom-
bre contendrá exactamente dos medias negras , dos medias azules, dos medias g1ises, dos
medias marrones y dos medias verdes. *
Cabe destacar que las células emplean una solución sünilar para separar sus cromosomas en
nuevas células hijas. Como aprenderemos en este capítulo, los cromosomas repJjcados se ali-
nean en el centro de una célula que va a sufrir una división y, al igual que las in edias del acer-
tij o, las cromátidas hermanas de cada cromosoma son traccionadas en direcciones opuestas.
En forma similar al hilo que conecta las dos medias de un par, una molécula denominada
cohesina mantiene urudas las cromátidas hermanas hasta que son cortadas por una navaja
molecular llrunada separasa. Los dos cromoso111as resultantes se separan y la célula se divide,
lo que garantiza que un conjunto completo de cro1nosomas se deposite en cada célula.

*La analogía está adaptada de K. Nasmyth. Disseminating lhe genome: joining, resolving, and separaling sister chro-
matids during mitosis and meiosis. Annual Review of Genetics 35:673-745; 2001.
17
18 CAPITULO 2

En esta analogía, los hombres ciegos y las células difieren en un aspecto crucial: si los hombres cie-
gos cometen un error, uno termina con una media extra y el otro, con una medi a menos, pero no ocurre
gran daño. No se puede decir lo rrrismo respecto de las células humanas. Los errores en la separación
de los cromosomas, que producen células con demasiados cromosomas o con muy pocos, a menudo
son catastróficos y provocan cáncer, aborto o (en algunos casos) un niño con graves discapacidades.

E n este capítulo se explora el proceso de la reproducción celu-

lar y la forma en que se transmite un conjunto completo de
información genética a las células nuevas. En las células procarion-
tes, este proceso es simple porque, en general, estas células tienen
un solo cromosoma. En las células eucariontes, se deben copiar y
distribuir en cada una de las células nuevas múltiples cromosomas,
lo que toma más compleja la reproducción celular. En los eucarion-
tes, la división celular tiene lugar mediante la mitosis y la meiosis,
procesos que sirven de base a gran parte de la genética.
Comprender la mitosis y la meiosis requiere algo más que el
simple hecho de memorizar la secuencia de sucesos que tienen
lugar en cada etapa, aunque estos sucesos sean importantes. La
clave es entender cómo se distribuye la información genética
durante la reproducción celular a través de una interacción diná-
mica entre la síntesis de DNA, el movimiento cromosómico y la
división celular. Estos procesos determinan la transmisión de la in-
fo rmación genética, y son la base de las similitudes y las diferen-
cias existentes entre los progenitores y los hij os.
2.1 Las células procariontes y eucariontes
difieren en una serie de características
genéticas
Tradicionalmente, los biólogos clasifican a todos los organi smos
vivientes en dos grupos principales: los procariontes y los euca-

Procarionte Eucarionte
Célula animal , Célula vegetal
~ Pared celular Nuceo
1

~ .::.::;:::;,,...-j Membrana Envoltura nuclear

plasmática ' Retículo
~ -=--7' Ribosomas . endoplasmático
Ribosomas
DNA

• ·.
"7 M~~~~~~,¡~~
Cloroplasto ~ _
<

____ . / Aparato de Golgi / :J

Eu bacteria
Membrana plasmática

Pared celular

Células rocariontes Células eucariontes

Núcleo Ausente Presente
Diámetro celular Relativamente pequeño, de 1 a 1O µm Relativamente grande, de 1O a 100 µm
Genoma Por lo general, una molécula de DNA circular Múltiples moléculas de DNA lineal
DNA No hay complejos con histonas en las Complejos con histonas
eubacterias; algunas histonas en archaea

Cantidad de DNA Relativamente pequeña Relativamente grande

Orgánulos
limitados por
membranas Ausentes Presentes

Figura 2-1. Las células procariontes y eucariontes difieren en estructura. (Fotografías [de izquierda a derecha]
Dr. Gary D. Gaugler/Newscom; Dr. Kari Lounatmaa/Science Source; W. Baumeister/Science Photo Library/Photo
Researchers; G. Murti/Phototake; Biophoto Associates/Photo Researchers).
 Cromosomas y reproducción celu lar 19

riontes (fig. 2-1). Un procarionte es un organismo unicelular con (a)

una estructura celular bastante simple. Un eucarionte tiene una
estructura celular compartimentada, dividida por membranas
intracelulares; los eucariontes pueden ser unicelulares o multice- DNA
lulares.
La investigación indica que no es tan simple dividir a los seres I
vivos en dos grupos principaJ es, procariontes y eucariontes. Si
bien son similares en su estructura celular, los procariontes inclu - Cromatina
yen por lo menos dos tipos de bacterias fundamentalmente distin-
tas: las eubacterias (bacte1ias verdaderas) y las archaea (arque-
obacterias). El análisis de las secuencias equivalentes de DNA
revela que la relación entre las eubacterias y las archaea es tan
lejana como la observada entre ell as y los eucariontes. Pese a que (b)
la estructura celular de las eubacteri as y las archaea es sin1.il ar,
algunos procesos genéticos de las archaea (p. ej. , la transcripción)
son similares a los de los eucariontes, y en realidad, desde el
punto de vista evolutivo, las archa.ea podrían estar más cerca de
los eucariontes que de las eubacterias. Por consiguiente, desde
una perspectiva evolutiva, existen tres grupos principales de orga-
nismos: eubacterias, archaea y eucari ontes. En este libro, se utili-
zará con frec uencia la distinción entre procaiiontes y eucari ontes,
pero también se destacarán diferencias importantes entre eubacte-
1ias y archaea.
Desde el punto de vista de la genética, una diferencia importan-
te entre las célul as procai·iontes y las eucai·iontes es que estas últi-
mas tienen una envoltura nuclear que rodea el material genético
para formar un núcleo y separa el DNA del resto del contenido
celular. En las células procariontes, el material genético está en
estrecho contacto con otros componentes de la célula, una propie-
dad que tiene consecuencias itnportantes para la 1nanera en que se Figura 2-3. Los cromosomas eucariontes están formados por DNA e
controlan los genes (fig. 2-2). histonas. (a) El DNA se envuelve en las histonas para form ar cromatina, el
Otra diferencia funda1nental entre los procariontes y los eu- material que compone los cromosomas. (b) Cromosoma eucarionte. (Parte
cai·iontes corresponde al empaquetamiento del DNA. En los euca- b: Biophot o Associates/Science Source).
riontes, el DNA presenta una estrecha asociación con una clase de
proteínas, las histonas, pai·a formai· cromosomas densamente
empaquetados (fig. 2-3). Este complejo de DNA e histonas se
denomina cromatina, que es el material que forma los cromoso-
mas eucariontes. Las histonas li1ni tan el acceso de enziinas y DNA se adapte al núcleo. El DNA eucarionte se debe separar de
otras proteínas que copian y leen el DNA, pero penniten que el las hi stonas antes de que sea posible acceder a su infonnación
genética. Las archaea también tienen algunas histonas que forman
complejos con el DNA, pero la estructura de su cromatina es dife-
rente de la hallada en los eucariontes. En cambio, las eubacterias
no tienen histonas, de manera que el DNA no g uarda la disposi-
ción n1uy ordenada y densamente con1pacta que se o bserva en las
células eucariontes. Por lo tanto, el copiado y la lectura del DNA
son procesos más simples en las eubacte1ias.
Por lo general, los genes de las células procariontes se encuen-
tran en una sola molécula de DNA circular: el cromosoma de una
célula procai·ionte. En las células eucariontes, los genes se locali-
zan en múltiples moléculas de DNA (1n últiples cromosomas),
habi tua lmente lineales. Por lo tanto, las células eucariontes re-
quieren mecanismos que garanticen la transmisión de una copia
de cada cromosoma a cada célula nueva. De todos modos, esta
generalización (un útúco cromoso111a circular en los procaiiontes
y múltiples cromosomas lineales en los eucariontes) no siempre
es válida. Algunas bacterias tienen más de un cromosoma, y s ue-
len hallarse genes bacterianos importantes en otras molécul as de
Figura 2-2 . El DNA procarionte (mostrado en rojo) no está rodeado DNA denominadas p lásmidos (véase Cap. 9). Además, en algu-
de una membrana nuclear ni forma complejos con histonas. (A. B. nos eucariontes, ciertos genes se localizan en moléculas de DNA
Dowsett/Science Photo Library/Photo Researchers). circular que se encuentran fu era del núcleo (véase Cap. 11).
20 CAPITULO 2
CONCEPTOS
Los organismos se clasifican en procariontes o eucariontes, y los pro-
cariontes incluyen las archaea y las eubacterias. Un procarionte es un
organismo unicelular que carece de núcleo, su DNA no forma com-
plejos con histonas y su genoma suele ser un cromosoma único. Los
eucariontes son un icelulares o multicelulares, sus células tienen un
núcleo, su DNA forma complejos con histonas y sus genomas consis-
ten en múltiples cromosomas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
Enumere varias características que las eubacterias y las archaea tienen
en común y qué las distingue de los eucariont es.
Los virus no son procariontes ni eucariontes porque no tienen
una estructura celular. En realidad, son estructuras simples com-
puestas por una cubierta proteica externa que rodea al ácido
nucleico (DNA o RNA; fig. 2-4). Los virus tampoco son formas
de vida primitivas: pueden reproducirse solo dentro de células
virus está 1 Cuando las células procariontes se reproducen, se rep)jca el cromo-
formado por una
cub;erta pro~
ubierta proteica
viral
.. .que rodea un fragmento de
ácido nucleico, en este caso,
l DNA. J Al igual que la reproducción de la célula procarionte, la de la
Figura 2-4. Un virus es una estructura replicativa simple formada por
proteína y ácido nucleico. La microfotografía muestra adenovirus.
(BSIP/Science Source).
huésped, lo que significa que deben haber evolucionado después
de las células, no antes. Además, los virus no son un grupo defi-
nido desde el punto de vista evolutivo, sino que están más estre-
chamente asociados con sus huéspedes: los genes de un virus
vegetal son más parecidos a los de una célula vegetal que a los de
virus animales, lo que sugiere que los virus evolucionaron a par-
tir de sus huéspedes. La estrecha relación entre los genes del virus
y del huésped hace que los vin1s sean útiles para el estudio de la
genética de los organismos huésped.
2.2 La reproducción de la célula requiere
la copia del material genético, la separación
de las copias y la división celular
Para que cualquier célula se reproduzca de manera exitosa, deben
producirse tres eventos fundamentales: 1) se debe copiar su infor-
mación genética, 2) se deben separar las copias de información
genética y 3) se debe dividir la célula. Toda reproducción celular
incluye estos tres eventos, pero los procesos que conducen a ellos
son disti ntos en las células procariontes y eucariontes, debido a
sus diferencias estructurales.
Reproducción de la célula procarionte
soma circular de la bacteria, y la célula se divide por un proceso
denonlinado fisión binaria (fig. 2-5), Por lo general, la replicación
se inicia en un sitio específico del cromosoma bacteriano, lla111ado
origen de replicación. En un proceso que no se conoce totalmente,
los orígenes de dos cro1nosomas recién replicados se separan y se
dirigen hacia los extremos opuestos de la célula. Por Jo menos en
algunas bacterias, ciertas proteínas se unen cerca de los orígenes de
replicación y anclan los nuevos cromosomas a la membrana plas-
mática en los extremos opuestos de la célula. Por último, se forma
una nueva pared celular entre los dos cromoson1as, lo que produce
dos células, cada una con una copia idéntica deJ cromoso1na. En
condiciones óptimas, algunas células bacterianas se dividen cada
20 minutos. A esta velocidad, una sola bacteria podría producir mil
millones de descendientes en tan solo 10 horas.
Reproducción de la célula eucarionte
célula eucarionte requiere los procesos de replicación del DNA,
separación de las copias y división del citoplasma. Sin embargo,
la presencia de 1núltiples moléculas de DNA exige un mecanisn10
más co1nplejo para garantizar que solo ll egue una copia de cada
molécula a cada una de las célul as nuevas.
Los cromosomas eucari ontes están separados del citoplasma
por la envoltura nuclear. El núcleo tiene un andamjaje interno
muy organizado denominado 1natriz nuclear. Esta matriz está for-
mada por una red de fibras proteicas que mantiene relaciones
espaciales precisas entre los componentes nucleares e interviene
en la replicación del DNA, la expresión géruca y la modificación
de los productos géni cos antes de que estos abandonen el núcleo.
A continuación, analizare1nos con mayor detalle la estructura de
los cromosomas eucariontes.
 Cromosomas y reproducción celular 21

(a) En la 1nayoría de las células eucariontes, hay dos juegos de cro-

Una célula procarionte
contiene un único mosomas como consecuencia de la reproducción sexual: un j uego
cromosoma circular. se hereda del padre y el otro, de la madre. Cada cromosoma de un
juego tiene un cromosoma co1Tespondiente en el otro juego y, jun-
Bacteria - ~ tos, constituyen un par homólogo (fig. 2-6). Por ejemplo, las célu-
las humanas tienen 46 cron1oson1as, que representan 23 pares
DNA
homólogos.
Por lo general, los dos cromosomas de un par homólogo tienen
Cuando el cromosoma se repl i ~ estructura y tamaño similares, y cada Lmo contiene información
los orígenes se segregan a lad~;, 1
Origen de genética para el mismo grupo de características hereditarias (los
opuestos.
replicación cromosomas sexuales, que se analizarán en el Cap. 4, son una
excepción). Por ejen1plo, si un gen de un determinado cromoso-
rigen de
n1a codifica una característica como el color del cabello, otra
replicación
cop ia del gen (cada copia se denomjna alelo) en la misma posi-
ción del homólogo de ese cromosoma también codifica el color
del cabello. Sin embargo, no es necesario que estos dos alelos
sean idénticos: uno puede codificar cabello pelirrojo, y el otro
flos orígenes se fijan a --,
~ados opuestos de la célula.
cabello rubio. Las células que tienen dos conj untos de informa-
ción genética son diploides. La ploidía de la célula s uele indicar
------.-v---------JL
.. cuántos conjuntos de información genética posee esa célula. Las
células reproductoras (como óvulos, espermatozoides y esporas),
e incluso célul as no reproductoras de algunos organismos euca-
riontes, pueden contener un solo juego de cromoso1nas y se deno-
mman haploides. Las células de algunos organismos contienen
La célula se divide. Cada célula más de dos conjun tos de información genética y, por lo tanto, se
nueva t iene una copia idéntica llaman poliploides (véase Cap. 8).
del cromosoma original.

CONCEPTOS
Las células se reproducen mediante la copia y la separación de su
información genética, seguida de la división. Como los eucariontes
(b) tienen múltiples cromosomas, existen mecanismos para garantizar
que cada célula nueva reciba una copia de cada cromosoma. La
mayoría de las células eucariontes son diploides, y sus dos juegos de
cromosomas se pueden ordenar en pares homólogos. Las célu las
haploides contienen un solo juego de cromosomas.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2

Las células diploides tienen

a. dos cromosomas
b . dos juegos de cromosomas
c. un juego de cromosomas
d. dos pares de cromosomas homólogos

Figura 2-5. Las células procariontes se reproducen por fisión binaria.

(a) Proceso de fisión binaria . (b) Microfotografía que muestra una célula
bacteriana durante la fisión binaria. (Parte b: Lee D. Simon/Photo
Researchers).
CROMOSOMAS EUCARIONTES Cada especie eucarionte tiene un
número característico de cromosomas por célula: las patatas
tienen 48 cromosomas, las moscas de la fruta 8, los seres huma-
nos 46. No parece haber ninguna relación especial entre la
complejidad de un organismo y la cantidad de cromosomas por
célula.
ESTRUCTURA CROMOSÓMICA Los cromosomas de las células eu-
cariontes son más grandes y más complejos que los hallados en
las células procaiiontes, pero no obstante, cada cromosoma no
replicado está co1npuesto por una sola molécula de DNA. Pese a
ser lineales, las moléculas de DNA de los cromosomas eucarion-
tes están muy plegadas y condensadas; si se las estirara, algunos
cromosomas hu manos medirían varios centímetros de longitud
(mi les de veces más largos que el espacio que abarca un núcleo
típico). Para empaquetar un DNA tan largo en este volumen
pequeño, cada molécula de DNA se enrolla alrededor de histonas
22 CAPITULO 2

Un organismo diploide tiene

dos conjuntos de cromosomas
fLos seres humanos tienen organizados como pares
23 pares de cromosomas.
(a) L_ (b) hom~ --~--
_ _..A_______
11 JJ
·:·: ,~¡

11 J_,; '·:
.....
r '

''
17 ·":.1

1 2 3 4 5

il JI ••
•• JI >I
,.
6 7 8 9 10 11 12
Figura 2-6. Las células eucariontes diploides tienen dos jue-
.,
•• :1 Alelo A V Alelo a
gos de cromosomas. (a) Un juego de cromosomas de una célula
humana femenina. Cada par de cromosomas se híbrida con una

.,
13

19
14

20
15

•• ••
21
16

22
17 18

¡ Estas dos versiones de un: : ]

gen codif ican un rasgo como
sonda de color singular que le da un color distinto. (b) Los cromo-
somas están present es en pares homólogos, que consisten en cro-
mosomas similares en cuanto a tamaño y estructura y que contie-
nen información para las mismas características. (Parte a: cortesía
1
L el color de pelo. de los Dres. Thomas Ried y Evelin Schrock).

de modo compacto para constituir el cromosoma en forma de bas-
tón. La mayoría de las veces, los cromosomas son delgados y difí-
ciles de observar, pero antes de la división celular se condensan
aún más para formar estructuras gruesas que se observan fácil-
mente; por lo general, los cro1noso1nas se estudian en esta etapa.
Un cromosoma funcional tiene tres ele1n entos esenciales: un
centrómero, un par de telómeros y orígenes de replicación. El
centrómero es el punto de fijación para los microtúbulos del huso
Oos filamentos responsables de movilizar los cromosomas duran-
te la división celular; fig. 2-7). El centrómero se visualiza como
una región estrechada. Antes de la división celular, un complejo
proteico deno1n inado cinetocoro se ensambla en el centró1n ero;
más tarde, los microtúbul os del huso se unirán al cinetocoro. Los
cromosomas que carecen de centrómero no pueden ser arrastra-
dos a los núcleos recién formados; estos cromosomas se pierden,
a menudo con consecuencias catastróficas para la célula. Sobre la
base de la localización del centrómero, los cromosomas se clasi-
fican en cuatro tipos: metacéntricos, submetacéntlicos, acrocén-
tricos y telocéntricos (fig. 2-8).
Los telómeros son los extremos naturales, las puntas, de los
cromosomas Lineales (véase fig. 2-7). Así como las puntas plásti-
cas protegen los cordones de los zapatos, los telómeros protegen
y estabilizan los extremos del cromosoma. Si un cromosoma se
rompe y produce nuevos extremos, se degrada en los extremos
recién rotos. Los telómeros confieren estabilidad al cromosoma.
La investigación muestra que los teló1neros también participan en
limitar la división celular y pueden desempeñar papeles importan-
tes en el envejecimiento y el cáncer (se analiza en Cap. 12).

A veces, un cromosoma ... otras veces, está

está formado por una f armado por dos
sola cromátida ... cromátidas (hermanas).
Submetacéntríco
Los telómeros son los extremos J
estables de los cromosomas.
Telómero

Centrómero Ci n etocoro

Dos
cromátidas '"'..
(hermanas)
-
M icrotúbulos
7 Telocént rico

del huso
Telómero
El centrómero es una región 1
'--y--) ------v , estrechada del cromosoma
Un
cromosoma
Un
cromosoma
donde se forman los
cinetocoros y se fijan los
microtúbulos del huso.
J Acrocéntríco

Figura 2-8. Existen cuatro tipos principales de cromosomas eucarion-

Figura 2-7. Cada cromosoma eucarionte tiene un centrómero y teló- tes según la posición del centróm ero. (M icrofotografía de Don W.
meros. Fawcett/Science Source).
 Cromosomas y reproducción celu lar 23

Los orígenes de replicación son los sitios en los que se inicia
la síntesis de DNA; no es fácil observarlos por 1nicroscopia. En el
Capítulo 12, se analizarán en forma más detallada su estructura
y función. Durante la preparación para la división celular, cada
cro1nosoma se replica y produce una copia de sí nusmo, como ya
se n1encionó. Estas dos copias inicialmente idénticas, deno1nina-
das cromátidas hermanas, quedan unidas en el centrómero
(véase fig. 2-7). Cada cromátida hermana está formada por una
sola molécula de DNA.
CONCEPTOS
Las cromátidas hermanas son copias de un cromosoma que se man-
tienen unidas en el centrómero. Los cromosomas funcionales contie-
nen centrómeros, telómeros y orígenes de replicación. El cinetocoro
es el punto de fijación para los microtúbulos del huso; los telómeros
son los extremos que estabilizan el cromosoma; los orígenes de repli-
cación son sitios donde se inicia la síntesis de DNA .
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿ Cuál sería el resultado si un cromosoma no tuviese cinetocoro?
El ciclo celu lar y la mitosis
El ciclo celular es la hlstoria de vida de una célula, las etapas que
atraviesa de una división celular a la siguiente (fig. 2-9). Este pro-
ceso es crucial para la genética, porque, a través del ciclo celular,
se transmiten las instrucciones genéticas para todas las caracterís-
ticas de las célu las progenitoras a las células hjjas. Después de
que una célula se ha dividido y se han producido dos células nue-
vas, se inicia un nuevo ciclo celular. Cada célula nueva metaboli-
za, crece y se desarrolla. Al final de su ciclo, la célula se divide
para producir dos células que, después, pueden presentar ciclos
celulares adicionales. La progresión a través del ciclo celular está
regulada en puntos de transición clave denominados puntos de
control , que permiten o impiden la progresión de la célula a la
siguiente etapa. Los puntos de control garantizan que todos los
componentes celulares estén presentes y funcionen correctamen-
te, y son necesarios para evitar la proliferación de células con cro-
mosomas dañados o ausentes. Los defectos de los puntos de con-
trol pueden inducir crecimiento celular no regulado, co1no se
observa en algunos cánceres . En el Capítulo 23, se analizará la
base molecular de estos puntos de control.
El ciclo celular consta de dos fases principales. La primera es
la interfase, el período entre las divisiones celulares en el que la
célula crece, se desarrolla y se prepara para la división. La segun-
da es la fase M (mitótica), el período de división celular activa.
La fase M incluye la mitosis, el proceso de división nuclear, y la
citocinesis o división citoplasmática. Analicemos mejor los deta-
lles de la interfase y la fase M.
INTERFASE Es el período prolongado de crecimiento y desan·ollo
entre las di visiones celulares. Aunque puede observarse escasa
actividad con un 1nicroscopio óptico, la célula está bastante ocu-
pada: se está sintetizando DNA, se están produciendo proteínas y
RNA, y están ocurriendo cientos de reacciones bioquímicas nece-
sruias para las funciones celulares. Además del crecimiento y el
desa1Tollo, la inte1f ase incluye varios puntos de control.
Por convención, la interfase se divide en tres fases: 0 1, S y G2
(véase 6.g. 2-9). La interfase comienza con 0 1 (del inglés, gap 1).

Durante G 1, la
l célula crece.

Punto de control
de ensamblaje as células pueden
~ la fase M, se producen de l huso Citocinesis
la mitosis y la citocinesis ing resar en GO, una
(división celular). ~::;--, fase sin división.
¡,,e,
Punto de control G2/M ~',e

, espués del punto

-1
::
:::::::::===--"'-
- . .
~
_ ~ -Fa_s_e_M_:_ ~
división nuclear __-Punto de control G1/S
de control G2/M, la y celular
célula puede dividir. !

espués del punto

~ de control G1/S, la
célula está obligada
Interfase:
a dividirse.
En G2, la célula se
prepara para la crecimiento
L mitosis. celular

Figura 2-9. El ciclo celular consiste en la interfase y la fase M.

24 CAPITULO 2
Durante G 1' la célula crece y se sintetizan las proteínas requeridas
para la división celular; esta fase suele durar varias horas. Cerca
del final de G 1 un punto crítico, denominado punto de control
G 1/S, mantiene· a la célula en G 1 hasta que esta tenga todas las
enzimas necesarias para la replicación del DNA. Una vez supera-
do este punto de control, la célula está obligada a dividirse.
Antes de alcanzar el punto de control G 1/S, las células pueden
salir del ciclo celular activo en respuesta a señales reguladoras y
pasar a una fase en la que no hay división, denominada G0 , que es
un estado estable durante el cual las células mantienen , en general,
un tamaño constante. Las células pueden permanecer en G0 por un
período prolongado, incluso indefinidamente, o pueden reingresar
en G 1 y el ciclo celular activo. Muchas células nunca ingresan en
G 0, sino que cumplen ciclos celulares en forma continua.
Después de G 1 , la célula ingresa en la fase S (de síntesis de
DNA) en la que se duplica cada cromosoma. Si bien la célula está
obligada a dividirse después de pasado el punto de control G 1/S ,
debe haber síntesis de DNA antes de que la célula pueda proceder
a la 1nítosis. Si se bloquea la síntesis de DNA (por fár1nacos o por
una mutación), la célula no podrá presentar mitosis. Antes de la fa-
se S, cada cromosoma no está replicado; después de la fase S, ca-
da cromosoma está compuesto por dos cromátidas (véase fig. 2-7).
Después de la fase S, la célula ingresa en G 2 (gap 2). En esta
fase, se producen varios eventos bioquúnícos adicionales requeri-
dos para la división celular. Cerca del final de G2 , se alcanza el
importante punto de control G2/M. Este punto de control solo se
supera si el DNA de la célula se ha replicado por completo y no
está dañado. El DNA no replicado o dañado puede inhibir la acti-
vación de algunas proteínas que son necesa1ias para que se pro-
duzca la mitosis. Tras haber pasado el punto de control G 2/M, la
célula está preparada para dividirse e ingresar en la fase M. Si
bien la duración de la interfase varía entre los distintos tipos celu-
lares, una célula de mamífero típica en división pasa alrededor de
10 horas e n G 1, 9 horas en S y 4 horas en G 2 (véase fig. 2-9).
Durante toda la interfase, los cromosomas están relajados, pero
de ninguna manera desenrollados, y no es posible visualizar cada
cromosoma individual con un rnicroscopio. Esta condición se
modifica de manera sustancial cuando finaliza la interfase y la
célul a ingresa en la fase M (mitótica).
FASE M Es la parte del ciclo celular en la que las copias de los cro-
mosomas de la célula (cromátidas hermanas) se separan y la célu-
la se divide. La separación de las crornátidas hermanas en la fase
M es un proceso crucial que provee un conjunto completo de
información genética a cada una de las células resultantes. Por lo
general, los biólogos dividen la fase M en seis etapas: las cinco
etapas de la mitosis (profase, prometafase, metafase, anafase y
telofase) , ilustradas e n la figura 2-10, y la citocinesis. Es impor-
tante recordar que la fase M es un proceso continuo y que su divi-
sión en seis etapas es algo arbitraria.
Profase. Cuando una célul.a ingresa en la profase, es posible
visualizar los cromosomas con un microscopio óptico. Como el
cromosoma se duplicó en la fase S precedente, cada cromoson1a
tiene dos cron1átidas unidas en el centrómero. Se forrna el huso
rnitótico, una matriz organizada de microtúbulos que m.o viliza los
cromosomas durante la mitosis. En las células animales, el huso
se 01igina a partir de un par de centrosomas que migran a los
lados opuestos de la célula. Dentro de cada centrosoma hay un
orgánulo especial, el centríolo , que también está compuesto por
microtúbulos. Algunas células vegetales no tienen centrosomas ni
centríolos, pero sí husos mitóticos .
Prometafase. La desintegración de la membrana nuclear
marca el comienzo de la prometafase. Los n1icrotúbulos del huso,
que hasta ahora han per111anecido fuera del núcleo, ingresan en la
región nuclear. Están compuestos por subunidades de una proteí-
na denominada tubulina (fig. 2-11). Durante la prometafase, los
rnicrotúbulos incorporan y pierden moléculas de tubulina, lo que
hace que presenten ciclos repetidos de crecimiento y contracción.
Cuando el extremo de un microtúbulo encuentra un cinetocoro, el
rnícrotúbulo se estabiliza. Finalmente, cada cromosoma se une a
n1 icrotúbulos de polos opuestos del huso: para cada cro1noso1na,
un microtúbulo de uno de .los centroso1nas se fija al cinetocoro de
una de las cromátidas hermanas; luego, un microtúbulo del cen-
trosoma opuesto se une a la otra cromátida hermana, lo que ancla
el cromosoma a ambos centrosomas. Esta disposición se conoce
como biorientación del cron1osoma.
Metafase. Durante la metafase, los cromosomas se ubican en
un solo plano, la placa metafásica, entre los dos centrosomas. Los
centrosomas, ahora en extremos opuestos de la célula con microtú-
bulos que irradian hacia afuera y se encuentran en la mitad de la
célula, están centrados en los polos del huso. Un punto de control
del ensa111blaje del huso garantiza que cada cro1nosoma se alinee en
la placa 1netafásica y se una a fibras del huso de polos opuestos.
El pasaje de una célula por el punto de control del e nsamblaje
del huso depende de la tensión generada en el cinetocoro a medi-
da que las dos cromátidas conjuntas son traccionadas en direccio-
nes opuestas por las fibras del huso. Se requiere esta tensión para
que la célula pase a través del punto de control del ensamblaje del
huso. Si un microtúbulo se une a un a cromátida pero no a la otra,
no se genera tensión y la célula no puede progresar a la siguiente
etapa del ciclo celular. El punto de control del ensamblaje del
huso puede detectar incluso un único par de cromosomas que no
está con·ectainente unido a rnicrotúbulos. Las células con defec-
tos de su punto de control del ensamblaje del huso ilustran la
i1nportancia de este punto de control; estas células suelen dar por
resultado números anormales de cromosomas.
Anafase. Una vez pasado el punto de control del ensamblaje
del huso, se rompe la conexión entre las cromátidas hermanas, y
estas se separan. Esta sepai·ación de las cromátidas marca el co-
mienzo de la anafase, durante la cual los cro1nosomas migran
hacia polos opuestos del huso. El movimiento de los cromosomas
se debe al desensamblaje de moléculas de tubulina tanto e n el
extremo del cinetocoro ( denominado extremo +) como en el extre-
mo del huso (denominado extremo-) de la fibra del huso (véase
fig. 2-11). Proteínas especiales denominadas motores moleculares
desensamblan las moléculas de tubulina del huso y generan fuer-
zas que traccionan el cromosoma hacia el polo del huso.
Telofase. Después de la separación de las cromátidas, cada
una es considerada un cro1nosoma distinto. La telofase es señala-
da por la llegada de los cromosomas a los polos del huso. Vuelve
a fo1n1arse la membrana nucleai· alrededor de cada juego de cro-
mosomas, lo que produce dos núcleos distintos dentro de la célu-
la. Los cromosomas se relajan y se alargan, y vuelven a desapa-
recer de la vista. En muchas célu las, la división del citoplasma
(citocinesis) se produce simultáneamente con la telofase.
 Interfase Profase Prometafase

Membrana
Núcleo Centrosomas Huso en nuclear en vías

¡f de desintegración

- Centrosoma

.. ..
Envoltura
/ Huso
un cromosoma
mitótico
nuclear

~
.....__~ Está presente la membrana .___,,, Los cromosomas se condensan. Cada .....___, Se desintegra la membrana nuclear.
nuclear, y los cromosomas están cromosoma tiene dos cromátidas. Se Los microtúbulos del huso se unen
relajados. forma el huso mitótico. a las cromátidas.

Telofase Anafase Metafase

Placa metafásica
Cromosomas 1

hijos
r::, ' Polo
del huso

?~6. - ¡
1l~ ~ f

1
1

Los cromosomas llegan a los polos Se separan las cromátidas Los cromosomas se
del huso. Vuelve a f armarse la hermanas y migran hacia alinean en la placa
membrana nuclear y los polos opuestos. metafásica.
l cromosomas se relajan.

Figura 2-10. El ciclo celular se divide e n etapas. (Fotograf ías de Conly L. Rieder/Biological Phato Service). 25
26 CAPITULO 2

' Los microtúbulos del huso genéticas. Las células hijas resultantes son genéticamente idénti-
Subunidades están formados por cas entre sí y con su célula progenitora, porque la síntesis de DNA
de tubulina subunidades de tubulina.
en la fase S crea una copia exacta de cada molécula de DNA, lo
que da origen a dos cromátidas hermanas genéticamente idénticas.
Después, la mitosis garantiza que una de las dos cromátidas her-
n1anas de cada cromosoma replicado pase a cada célula nueva.
Otro resultado ilnportante del ciclo celular, desde la perspecti-
va genética, es que cada una de las células producidas contiene un
complemento completo de cromosomas: no hay ninguna reduc-
ción ni ningún aumento del número de cromosomas. Asimismo,
cada célula contiene alrededor de la mitad del citoplasma y del
contenido de orgánulos de la célula parental original, pero ningún
Centrosoma
n1ecanismo preciso análogo a la mitosis asegura que la división
A de los orgánulos sea uniforme. En consecuencia, no todas las
células resultantes del ciclo celular tienen un contenido citoplas-
mático idéntico.

Los microtúbulos se 7
alargan y se acortan en
CONCEPTOS

Cromosoma los extremos © y 8 .
Figura 2-11. Los microtúbulos están compuestos por subunidades de
tubulina. Cada microtúbulo tiene su extremo positivo (+) en el cinetocoro
y su extremo negativo (-) en el centrómero.
El cuadro 2-1 resume las principales características del ciclo
celular. Puede observar el ciclo celular en movimiento en la
Animación 2-1. Esta animación interactiva le permite determi-
nar qué sucede cuando fallan diferentes procesos del ciclo.
n 1NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 23
Consecuencias genéticas del ciclo celular
¿Cuáles son los resultados importantes desde el punto de vista
genético del ciclo celular? A partir de una sola célula, el ciclo celu-
lar produce dos células que contienen las 1nismas instrucciones
Las fases del ciclo celular activo son la interfase y la fase M. La inter-
fase comprende G 1, S y G2 . En G 1 , la célula crece y se prepara para la
división celular; en la fase S, se sintetiza DNA; en G2, se producen
otros eventos bioquímicos necesarios para la división celular. Algunas
células ingresan en una fase quiescente denominada G0 . La fase M
incluye la mitosis y la citocinesis, y se divide en profase, prometafase,
metafase, anafase y telofase. El ciclo celular produce dos célu las
genéticamente idénticas, cada una de las cuales contiene un comple-
mento completo de cromosomas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
¿ Cuál es el orden correcto de las etapas del ciclo celular?
a. G 1, S, profase, metafase, anafase
b. S, G 1, profase, metafase, anafase
c. Profase, S, G 1, metafase, anafase
d. S, G 1, anafase, profase, metafase

Cuadro 2-1 Características del ciclo celular

Etapa Principales características
Fase G0 Período estable sin división, de duración variable.
Interfase
Crecimiento y desarrollo de la célu la; punto de control G,JS.
Fase S Síntesis de DNA.
Preparación para la división; punto de control G/M.
Fase M
Profase Se condensan los cromosomas y se forma el huso mitótico.
Prometafase Se desintegra la envoltura nuclear, y los microtúbu los del huso se fijan a los cinetocoros.
Metafase Se alinean los cromosomas en la placa metafásica; punto de control del ensamblaje del huso.
Anafase Se separan las cromátidas hermanas y se convierten en cromosomas individuales que migran hacia los polos del huso.
Telofase Los cromosomas llegan a los polos del huso, se vuelve a formar la envoltura nuclear, y se relajan los cromosomas condensados.
Citocinesis Se divide el citoplasma; en las células vegetales, se forma la pared celu lar.

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Recuento de cromosomas y moléculas de DNA
Las relaciones entre cromosomas, cromátidas y moléculas de DNA sue-
len causar confusión. En ciertos momentos, los cromosomas no están
replicados; en otros, cada uno posee dos cromátidas (véase fig. 2-7).
En ocasiones, los cromosomas están compuestos por una sola
molécula de DNA, mientras que otras veces están formados por dos mo-
léculas de DNA. ¿ Cómo podemos rastrear el número de estas estruc-
turas durante el ciclo celular?
Hay dos reglas simples para contar cromosomas y moléculas de
DNA: 1) para determinar el número de cromosomas, cuente el núme-
ro de centrómeros funcionales; 2) para determinar el número de
moléculas de DNA, determine primero si hay cromátidas hermanas. Si
hay cromátidas hermanas, el cromosoma se ha replicado, y el núme-
ro de moléculas de DNA es el doble del número de cromosomas. Si
no hay cromátidas hermanas, el cromosoma no se ha replicado, y el
número de moléculas de DNA es igual al número de cromosomas.
Examinemos una célula hipotética que atraviesa el ciclo celular
(fig. 2-12). Al comienzo de Gl' esta célula diploide tiene dos juegos
completos de cromosomas, para un total de cuatro cromosomas.
Ninguno de los cromosomas se ha replicado, por lo que cada uno está
formado por una sola molécula de DNA; por consiguiente, hay cuatro
moléculas de DNA en la célula durante G1 . En la fase S, se copia cada
molécula de DNA. Las dos moléculas de DNA resultantes se combinan
con histonas y otras protefnas para formar las cromátidas hermanas.
Aunque la cantidad de DNA se duplica en la fase S, el número de cro-
mosomas se mantiene estable porque las cromátidas hermanas están
unidas y comparten un solo centrómero funcional. Al final de la fase S,
esta célula todavía contiene cuatro cromosomas, cada uno con dos cro-
mátidas hermanas; de manera que hay 4 x 2 =8 moléculas de DNA.
Durante la profase, la prometafase y la metafase, la célula tiene
cuatro cromosomas y ocho moléculas de DNA. Sin embargo, en la
Profase y
G1 s G2
prometafase
Número de
cromosomas 4 4 4 4
por célula
Número de
moléculas de
4 4-8 8 8
DNA por célula
Figura 2- 12. Los números de cromosomas y de moléculas de DNA cambian en el curso del ciclo celular. El
número de cromosomas por célula es igual al número de centrómeros funcionales. El número de moléculas de DNA
por célula es igual al número de cromosomas cuando estos no están replicados (no hay cromátidas hermanas) y duplica
el número de cromosomas cuando hay cromátidas hermanas.
Cromosomas y reproducción celular 27
anafase se separan las cromátidas hermanas. Ahora, cada una tiene
su propio centrómero funcional, por lo que se considera que cada una
es un cromosoma independiente. Hasta la citocinesis, la célula contie-
ne ocho cromosomas no replicados; por lo tanto, todavía hay ocho
moléculas de DNA presentes. Después de la citocinesis, los ocho cro-
mosomas (y las ocho moléculas de DNA) se distribuyen de manera
equivalente entre las dos células; así, cada célula nueva contiene cua-
tro cromosomas y cuatro moléculas de DNA, el número presente al
comienzo del ciclo celular.
En resumen, el número de cromosomas solo aumenta en la ana-
fase, cuando se separan las dos cromátidas de un cromosoma y se
convierten en cromosomas distintos. El número de cromosomas
solo disminuye mediante citocinesis. El número de moléculas de
DNA aumenta solo en la fase S y disminuye solo por citocinesis.
" INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 26
2.3 La reproducción sexual produce variación
genética mediante el proceso de meiosis
Si toda la reproducción se lograra a través de la mitosis, la vida
sería bastante aburrida, porque la mitosis produce solo progenie
genéticamente idéntica. Si solo existiera la mitosis, usted, sus
hijos, sus padres, sus her1nanos y hermanas, sus prünos y 1;1ucha
gente que ni siquiera conoce serian clones, copias de otro. Unica-
mente una mutación ocasional introduciría alguna variabilidad
genética. Todos los organismos se reprodujeron de esta manera
durante los primeros 2000 millones de años de existencia de la
Tierra (y todavía es la manera en que algunos organis1nos se repro-
ducen hoy en día). Entonces, hace alrededor de 1500 a 2000 millo-
nes de años, surgió algo notable: células que producen descenden-
cia genéticamente variable a través de la reproducción sexual.
Telofase
Metafase Anafase
y citocinesis
4 8 4
8 8 4
28 CAPITULO 2

MEIOSIS 1 MEIOSIS 11 Meiosis

n
División División
reductora equilibrada
2n
n
n dos procesos di stintos: n1eiosis I y meiosis II, cada una de las
Figura 2-13. La meiosis consiste en dos divisiones celulares. En esta
ilustración, la célula original es 2n = 4. Después de dos divisiones meióticas,
cada célula resultante es 1n = 2.
La evolución de la reproducción sexual es uno de los eventos
más significativos en la historia de la vida. Como se analizará en
los Capítulos 24-25, el 1itmo de la evolución depende del grado
de vaii ación genética presente. Al mezclai· la información genéti-
ca de ambos progenitores, la reproducción sexual aumenta n1ucho
el grado de variación genética y permite una evolución acelerada.
La mayor parte de la inmensa diversidad de la vida sobre la Tierra
es un resultado directo de la reproducción sexual.
La reproducción sexual consiste en dos procesos. El p1imero es
la meiosis, que da origen a gametos en los que el número de cro-
mosomas se reduce a la mitad. El segundo proceso es la fecunda-
ción, en la que dos gametos haploides se fusionan y restablecen
el número de cromosomas a su valor diploide original.
En ocasiones, se confunden las palabras mitosis y meiosis. Ambas
suenan en forma parecida y ambas se refieren a la división de los
cromosomas y la citocinesis. Pero no se engañe. Los resultados de
la mitosis y la meiosis son radicalmente distintos, y varios even-
tos singulares con iln portai1tes consecuencias genéticas solo se
producen durante la meiosis.
¿En qué difiere la meiosis de la mitosis? La mitosis consiste en
una sola división nuclear y suele acompañai·se de una sola divi-
sión celular. Por el contrario, la meiosis consiste en dos divisio-
nes. Después de la mitosis, el número de cromosomas de las célu-
las recién formadas es el 111ismo que el de las células originales,
mientras que la meiosis determina una reducción a la müad del
número de cromosomas en las células recién formadas. Por últi-
mo, la mitosis produce células genéticamente idénticas, en tanto
que la meiosis produce células variables desde el punto de vista
genético. Veamos có1no surgen estas diferencias.
Al igual que la mitosis, la 1neiosis es precedida de una etapa de
interfase, que incluye las fases 0 1, S y 0 2 . La meiosis consiste en
cuales incluye una división celular. La primera división, que se
produce al final de la meiosis I, se denomina división reductora,
porque se reduce a la mitad el número de cromosomas por célula
(fig. 2-13). La segunda división, que se produce al final de la
1neiosis Il, se denomina a veces división equilibrada. Los eventos
de la meiosis II son similares a l os de la mitosis. Sin embargo, la
meiosis II difiere de la mitosis en que el número de cromosomas
ya ha disminuido a la mitad en la meiosis I y la célula no comien-
za con la misma cantidad de cro1noson1as, como lo hace en la
mitosis (véase fig. 2-13).
MEIOSIS I Durante la interfase, los cromosomas están relajados y
se visualizan como cromatina difusa. La profase I es una etapa
prolongada, que se divide en cinco subetapas (fig. 2-14). En la
leptotena, los cromosomas se contraen y se tornan visibles. En
la cigotena, los cromosomas continúan condensándose; los cro-
mosomas homólogos se aparean y co1nienza la sinapsis, una aso-
ciación de apareamiento muy estrecha. Cada par homólogo de
cromosomas de una sinapsis está formado por cuatro cromátidas,

Entrecruzamiento

- - - - - - - - - - • Par de cromosomas ► Complejo ------,► Quiasmas -----------+-

leptotena Cigotena 1 -- sinaptonémico

Paquitena
--....
Diplotena Diacinesis
omplejo Bivalente
inaptonémico o tétrada
/ -
/ /
Quiasmas

Figura 2-14. El entrecruzamiento se produce en la profase l.

 Cromosomas y reproducción celular 29

y se denomina bivalente o tétrada. En la paquitena, el cromoso-
ma se vuelve más corto y más grueso, y se desan·olla un comple-
jo sinaptonémico de tres partes entre los cromosomas homólogos.
La función del complejo sinaptonémico no es clara, pero los cro-
moso1nas de muchas células con deficiencia de este cornplejo no
se separan de .manera correcta.
En la profase I, se produce el entrecruzamiento, en que el
que los cromosomas homólogos intercambian información
genética. El entrecruzan1iento genera variación genética (véase
Fuentes de variación genética en la meiosis, más adelante en
este mismo capítulo) y es esencial para la alineación y separa-
ción correcta de los cromosomas homólogos. Los centrómeros
de los cromosomas apareados se separan en la diplotena; los dos
homólogos permanecen unidos en cada quíasma, que es el resul-
tado del entrecruzamiento. Cerca del final de la profase I, se
rompe la membrana nuclear y se forma el huso, lo que prepara
la escena para la metafase I. La figura 2-15 ilustra las etapas de
la meiosis.
La metafase I se inicia cuando los pares de cromosomas homó-
logos se alinean a lo largo de la placa metafásica (véase fig. 2-15).
Un microtúbulo de un polo se une a un cromosoma de un par
homólogo, y un microtúbulo del otro polo se une al otro miembro
del par. La separación de los cromosomas homólogos n1arca la
anafase l. Los dos cromosomas de un par hom6go son tracciona-
dos hacia polos opuestos. Si bien los cromoson1as ho1nólogos se
separan, las cromátidas hermanas continúan unidas y migranjun-
tas. En la telofase I, los cro1nosomas llegan a los polos del huso
y se divide el citoplasma.
MEIOSIS II El período entre la meíosis I y la meiosis II es la ínter-
cinesis, en la cual vuelve a formarse la membrana nuclear alrede-
dor de los crornosomas agrupados en cada polo, se ro1npe el huso
y se relajan los cromosomas. Después, estas células ingresan en
la profase 11, durante la cual se revierten los fenómenos de la
intercinesis: vuelven a condensarse los cromosomas, se forma
otra vez el huso y se ro1npe nuevan1ente la envoltura nuclear. En
la intercinesis de algunos tipos celulares, los cromosomas perma-
necen condensados y no se ron1pe el huso. Estas cél ulas pasan
directamente de la intercinesis a la metafase 11, que es similar a
la metafase de la mitosis: los cromosomas individuales se alinean
en la placa metafásica y las cromátidas hermanas enfrentan polos
opuestos.
En la anafase 11, se separan los cinetocoros de las cro1nátidas
hermanas, que son traccionadas hacia polos opuestos. Ahora,
cada cromátida es un cro.mosoma distinto. En la telofase 11, los
cromosomas llegan a los polos del huso, y se divide el citoplas-
ma. Los cromosomas se relajan y dejan de ser visibles.
El cuadro 2-2 resume los principales eventos de la meiosis.
Para examinar los detalles de la meiosis y las consecuencias de su
fracaso, mire la Animación 2-2. A

Cuadro 2-2 Principales eventos de cada etapa de la meiosis

Etapa Principales características

Meiosis 1

Profase 1 Se condensan los cromosomas, los cromosomas homólogos forman sinapsis, tiene lugar el entrecruzamiento, se rompe la
envoltura nuclear y se forma el huso mitótico.

Metafase 1 Se alinean los pares de cromosomas homólogos en la placa metafásica.

Anafase 1 Se separa los dos cromosomas (cada uno con dos cromátidas) de cada par homólogo y migran hacia los polos opuestos.

Telofase 1 Los cromosomas llegan a los polos del huso.

Citocinesis Se divide el citoplasma para formar dos células, cada una de las cuales tiene la mitad del número original de cromosomas.

lntercinesis En algunos tipos de células, el huso se rompe, los cromosomas se relajan, y se vuelve a formar la envoltura nuclear, pero no se
produce síntesis de DNA.

Meiosis 11

Profase 11* Se condensan los cromosomas, se forma el huso, y se desintegra la envoltura nuclear.

Metafase 11 Los cromosomas individuales se alinean en la placa metafásica.

Anafase 11 Se separan las cromátidas hermanas y migran como cromosomas individuales hacia los polos del huso.

Telofase 11 Los cromosomas llegan a los polos del huso; se rompe el huso, y se vuelve a formar la envoltura nuclear.

Citocinesis Se divide el citoplasma.

*Solo en las células en las que se ha roto el huso los cromosomas se han relajado, y se ha vuelto a formar la envoltura nuclear en la telofase l. Otras células proceden
directamente a la metafase II después de la citocinesis.
 Meiosis 1

Mitad de la profase 1 Profase I tardía Profase I tardía

Pares dé
homólogos
Quiasmas

. ,1V -...
1· )''
\

Los cromosomas comienzan a {ii aparean los cromosomas homólogos] Se produce el entrecruzamiento y
condensarse y se forma el huso. se rompe la membrana nuclear.

Meiosis 11

Profase 11 Metafase 11 Anafase 11

Placa met afásica

,.-
Vuelven a condensarse los cromosomas . .___,
\..__
- - -'Los cromosomas individuales se Se separan las cromátidas
alinean en el plano ecuatorial. hermanas y migran hacia polos
opuestos.

Figura 2-15. La meiosis se divide en etapas. (Fotografía de C. A. Hasenkampf/Biological Photo Service).

CONCEPTOS ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5

La meiosis consiste en dos procesos distintos: meiosis I y meiosis 11.
La meiosis I es la división reductora, en la que se separan los cro-
mosomas homólogos y se reduce a la mitad el número de cromo-
somas. En la meiosis 11 (la división equilibrada), se separan las cro-
mátidas.
¿ Cuál de los siguientes eventos se produce en la metafase 17
a. Entrecruzamiento
b. Contracción de los cromosomas
c. Alineación de los cromosomas homólogos en la placa metafásica
d. Alineación de los cromosomas individuales en la placa metafásica

30
 Cromosomas y reproducción celular 31

Metafase 1 Anafase 1 Telofase 1

Placa
metafásica

- - ~ Los pares de cromosomas homólogos ...__.,,. ------l Se separan los cromosomas homólogos -------1 Los cromosomas llegan a los polos 1---

se alinean en la placa metafásica. y migran hacia polos opuestos. del huso y se divide el citoplasma.

Telofase 11 1 Productos J

,,
...
-,,, q),)
- -... Los cromosomas llegan a los polos 1-__,,
del huso y se divide el citoplasma.

Fuentes de variación genética en la meiosis ENTRECRUZAMIENTO El entrecruzamiento, que se produce en la

¿Cuáles son las consecuencias generales de la meiosis? Primero,
la 1neiosis comprende dos divisiones; por consiguiente, cada célu-
la original produce cuatro células (hay excepciones a esta genera-
lización, como por ejemplo, en muchos animales hembra; véase
fig. 2-20b). Segundo, el número de cromosomas se reduce a la
mitad, de 1nanera que las células producidas por la meiosis son
haploides. Tercero, las células generadas por 1neiosis son genéti-
camente distintas entre sí y respecto de la célula progenitora. Las
diferencias genéticas entre las células se deben a dos procesos pri-
vativos de la meiosis: el entrecruzamiento y la separación aleato-
ria de cromosomas homólogos.
profase I, hace referencia al intercan1bio de n1aterial genético
entre cromátidas no hermanas (cromátidas de diferentes cromoso-
mas homólogos). La evidencia proveniente de la levadura sugiere
que el entrecruzamiento se inicia en la cigotena y que no se com-
pleta hasta casi el final de la profase I (véase fig. 2-14). En otros
organismos, el entrecruzamiento se inicia después de la forma-
ción del complejo sinaptonémico, y en otros no hay con1plejo
sinaptonémico.
Una vez producido el entrecruzamiento, las cromátidas herma-
nas ya no son idénticas. El entrecruzamiento es la base de la
recombinación intracromosómica, que crea nuevas combinacio-
nes de alelos en una cromátida. Para comprender cómo causa
32 CAPITULO 2
Un cromosoma ... y el cromosoma l)La replicación del l '
posee los alelos homólogo posee DNA en la fase S
A y B... los alelos a y b. produce cromátidas
hermanas idénticas.
'/
(a) (b)
A a A A
Síntesis Entre-cru-
de DNA zamiento 1--♦ ,
B b B B
Figura 2-16. El entrecruzamiento causa variación genética.
variación genética el entrecruzamiento, considere dos pares de
alelos, que abreviaremos Aa y Bb. Asu1na que un cromosoma
tiene los alelos A y .B y que su homólogo tiene los alelos a y b
(fig. 2-16a). Cuando se replica el DNA en la fase S, se duplica
cada cromosoma y, por lo tanto, las cromátidas hermanas resul-
tantes son idénticas (fig. 2-16b).
En el proceso de entrecruzamiento, hay rupturas de las cadenas
de DNA, que se reparan de manera tal que se intercan1bian segmen-
tos de cron1átidas no hennanas (fi.g. 2-16c). La base molecular de
este proceso se describirá con n1ayor detalle en el Capítulo 12.
Aquí, lo importante es que, una vez que se ha producido el entre-
cruzamiento, las dos cromátidas hermanas ya no son idénticas:
una cromátida tiene los alelos A y B, mientras que su cromátida
hermana (la que experimentó el entrecruzamiento) tiene los ale-
los a y B. D e modo similar, una cromátida del otro cromosoma
tiene los alelos a y b, y la otra tiene los alelos A y b. Ahora, cada
una de las cuatro cromátidas posee una combinación singular de
alelos: A B, a B, A b y a b. Finalmente, los dos cromosomas
homólogos se separan y cada uno se dirige a una célula diferente.
En la meiosis II, se separan las dos cromátidas de cada cromoso-
ma y, por lo tanto, cada una de las cuatro células resultantes de la
meiosis contiene una con1binación diferente de alelos (fi.g. 2-16d).
Usted puede observar cómo influye el e ntrecruzamiento en la
variación genética en la Animación 2-3.
SEPARACIÓN ALEATORIA DE CROMOSOMAS HOMÓLOGOS El
segundo proceso de la 1neiosis que contribuye a la variación gené-
tica es la distribuc ión al azar de los cromosomas en la anafase I
después de su alineación aleatoria en la metafase l. Para ilustrar
el proceso, considere una célula con tres pares de cromosomas I,
II y m (fi.g. 2 -17a). Un cromosoma de cada par es de origen
1naterno (Im, II01 y III01); el otro es de origen paterno (Ip, Ilp y IIIp).
Los pares de cron10s0111as se alinean en el centro de la célula
durante la metafase I , y en la anafase I se separan los cromosomas
de cada par homólogo.
La aljneación y la separación de cada par de homólogos se pro-
ducen al azar y no depende de la forma en que se alinean y se
separan otros pares de cromosomas (fi.g. 2-17b). Podría darse la
(d)
Durante el entrecruzamiento Después de la meiosis 1 A
en la profase 1, se y 11, cada una de las
intercambian segmentos de células resultantes tiene
cromátidas no hermanas. una combinación única B
de alelos.
aª
(c)
B
A
a .,
casualidad de que todos los cron1oso1nas 1naternos migraran hacia
un lado y todos los cromosomas p aternos hacia el otro. D espués
de la división, una célula contendría los cron1oson1as I , ~ 1 y
• m
J\
IIIm, y la otra, I , y II~. Alternativamente, los cromosomas Im,
Ilm y III podríful migrar hacia un lado, y los cromosomas IP, l\
y Illm, liacia el otro. Las diferentes migraciones producirían dis-
tintas combinaciones de cromosomas en las células resultantes
(fig. 2-17c). Existen cuatro formas en las que una célula diploide
con tres pares de cromosomas puede dividirse, lo que produce un
total de ocho combinaciones diferentes de cro1nosomas en los
gam.e tos. Por lo general, el número de combinaciones posibles es
2n, donde n equivale al número de pares homólogos. A medida
que aumenta el número de pares de cromosomas, hay un incre-
mento muy grande y rápido de la cantidad de combinaciones. En
los seres humanos, que tienen 23 pares de cromosomas, hay 233 u
8 388 608 diferentes combinaciones de cromosomas posibles a
partir de la separación aleatoria de los cromosomas homólogos.
Usted puede explorar la distribución aleatoria de cromosomas
viendo la Animación 2-3. Las consecuencias genéticas de este
proceso, denominado segregación independiente, se analizará con
mayor detalle en el Capítulo 3 .
En resun1en, el entrecruzamiento n1ezcla los alelos del misrrw
cromosoma y da lugar a nuevas combinaciones, mientras que la
distribución aleatoria de los cromoson1as n1atemos y paternos mez-
cla los alelos de diferentes cromosomas y da lugar a nuevas combi-
naciones. En conj unto, estos dos procesos son capaces de causar
un enonne grado de variación genética entre las células resultan-
tes de la meiosis. 1!1NTENTE RESOLVER LOS PROBLEMAS 33 Y 34
'
CONCEPTOS
Los dos mecanismos que producen variación genética en la meiosis
son el entrecruzamiento y la distribución aleatoria de cromosomas
maternos y paternos.
 Cromosomas y reproducción celu lar 33

(a) (b) (c)

Gametos
______ A..___ __
I IEsta célula tiene t ~ Uno de cada par es r ,
pares de cromosomas de origen materno
homólogos. ______ __, (lm, llm, lllm) ...
2 X lm ll m lllm

lm u ~ llp 2 X lp llp ll lp
'/J
-
Replicación
del DNA i"""-1►
llm
-
1
lllp /
llp
l p\ lp 2 X lm llm lllp

_][
~ yel otro es
l paterno (lp, llp, lllp). j 2 X lp llp lllm

' Hay cuatro maneras

posibles de alineación
1 de los tres pares en la
L metafase l. 2 X lm llp lllp

2 X lp llm lllm

2 X lm llp lllm

llp i H"m
lllm n lllp 2 X lp llm lllp

Figura 2- 17. La variación genética se produce mediante la Conclusión: exist en ocho diferentes combinaciones posibles
distribución aleatoria de cromosomas en la meiosis. En este de cromosomas en los gametos, lo que depende de cómo se
ej emplo, la célula posee t res pares de cromosomas homólogos. alinean y separan los cromosomas durante la meiosis I y 11.

paternos (en la anafase 1). Normalmente, no existen procesos equiva-

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Comparación entre la mitosis y la meiosis
Ahora que hemos exam inado los detal les de la mitosis y la meiosis,
compa remos los dos procesos (fig. 2-18 y cuadro 2-3). Tanto en la
mitosis como en la meiosis, los cromosomas se contraen y se tornan
visibles; ambos procesos incluyen la migración de los cromosomas
hacia los polos del huso, y ambos se acompañan de división celular.
Más allá de est as similitudes, los procesos son bastante distintos.
La mitosis implica una sola división celular y, por lo general, produ-
ce dos célu las hijas. La meiosis, en cambio, comprende dos divisiones
celulares y suele produci r cuatro células hijas. En las células diploides,
los cromoso mas homólogos están present es antes de la meiosis y de
la mitosis, pero el aparea miento de homólogos solo tiene lugar en la
meIos1s.
Otra diferencia es que, en la meiosis, el número de cromosomas se
reduce a la mitad como consecuencia de la separación de los pares
homólogos en la anafase 1, mientras que en la mitosis no hay reduc-
ción de cromosomas. Además, la meiosis se caracteriza por dos pro-
cesos que producen variación genética: el entrecruzamiento (en la
profase 1) y la distribución aleatoria de los cromosomas maternos y
lentes en la mitosis.
Asimismo, la mitosis y la meiosis se diferencian en el comporta-
miento de los cromosomas durante la metafase y la anafase . En la
metaf ase I de la meiosis, los que se alinean en la placa metafásica son
los pares de cromosomas homólogos, mientras que en la metafase de
la mitosis (y en la metafase II de la meiosis), los que se alinean en la
placa metafásica son los cromosomas individuales. En la anafase I de
la meiosis, se separan los cromosomas apareados, y cada uno de los
cromosomas que migra hacia polos opuestos del huso tiene dos cro-
mátidas un idas en el centrómero. En cambio, en la anafase de la
mitosis (y en la anafase II de la meiosis), se separaran cromátidas her-
manas, y cada cromosoma que migra hacia un polo del huso no está
replicado. ►
Separación de las cromátidas hermanas
y los cromosomas homólogos
En los últimos años se han identificado algunas de las moléculas
requeridas para la unión y separación de las cromátidas y los ero-
34 CAPITULO 2

Mitosis

1 Anafase Dos células hijas,

cada una 2n

'\~1'~\)~~jt
2n
---.
Se separan las
cromátidas.:.._J
Meiosis

fc°é lula progenitora (2ri)' ( Profase 1 Metafase 1 Anafase 1

f~
,.
---'------1►► ifl \;~

Se produce el Se alinean los pares de cromosomas Se separan los pares

entrecruzamiento.J homólogos en la placa metafásica. de cromosomas.

lntercinesis Metafase 11 ~ atro células hijas,

cada unan

[ Se alinean los cromosomas "' Se separan las

individuales. ----' _cromátidas.
Figura 2-18. Comparación entre la mitosis y la meiosis.

Cuadro 2-3 Comparación de la mitosis, la meiosis I y la mosomas homólogos. La cohesina, una proteína que mantiene
meiosis 11 unidas las cromátidas, es clave para el comportamiento de los cro-
mosomas en la mitosis y la meiosis (fig. 2-19a) . Las cromátidas
Evento Mitosis Meiosis 1 Meiosis 11 hermanas se mantienen unidas por la cohesina, que se establece
División celular Sí Sí Sí
en la fase S y persiste durante la fase G 2 y la mitosis temprana. En
la anafase de la mitosis, la cohesina es degradada en toda la lon-
Reducción de No Sí No gitud del cromosoma por una enzima denominada separasa, lo
cromosomas que permite la separación de las cromátidas hermanas.
Como hemos visto, la mitosis y la meiosis se diferencian sobre
Variación No Sí No todo en el con1portamiento de los cromosomas durante la anafase
genética (véase fig. 2-18). ¿Por qué los homólogos se separan en la a.nafa.-
Entrecruzamiento No Sí No se I de la meiosis, mientras que las cromátidas se separan en la
anafase de la mitosis y en la anafase II de la meiosis? Es importan-
Distribución No Sí No te destacar que las formas de cohesina utilizadas en la mitosis y la
aleatoria de meiosis son diferentes. Al comienzo de la meiosis, la cohesina
cromosomas específica de la meiosis se encuentra a lo largo de toda la longitud
maternos y de los brazos del cromosoma (fig. 2-19b). La cohesina también
paternos actúa sobre los brazos de los cromoson1as ho1nólogos en los quías-
mas y mantiene a los dos homólogos unidos en sus extremos.
Metafase Se alinean los Se alinean Se alinean
En la anafase I, se degrada la cohesina ubicada a lo largo de los
cromosomas los pares los cromo-
brazos del cromosoma, lo que pemlite que se separen los dos ho-
individuales homólogos somas indi-
mólogos. En cambio, la cohesina del centrómero está protegida
viduales
por una proteína denonúnada shugoshina, que significa "espílitu
Anafase Se separan las Se separan los Se separan guardián" en j aponés. Dada la acción protectora de la shugoshina,
cromátidas cromosomas las cromáti- la cohesina centromérica se mantiene intacta e in1pide la separa-
homólogos das ción de las dos cromátidas hem1anas durante la anafase I de la
meiosis. Más adelante, la shugoshina es degradada. Al final de
 Cromosomas y reproducción celu lar 35

(a) Mitosis
,---
... y la cohesina mantiene g La degradación de la cohesina
hermanos se orientan juntas las cromátidas permite que se separen las
hacia diferentes oles ... l hermanas. L cromátidas hermanas.

T
Fi bras d el huso ~ Co hesina
\
Degradación
del a
Cromátida -----i cohesina

Met afase Anafase

(b) Meiosis

8 La cohesina a lo largo de los

brazos del cromosoma
8
r
La degradación de la cohesina a lo
largo de los brazos del cromosoma
• . .. pero la cohesina del
centrómero es protegida
gsedegrada la shugoshina. Se
degrada la cohesina de los
l
mantiene juntos a los permite que los homólogos se
por la shugoshina. centrómeros, lo que permite
homólogos en los quiasmas. se aren ... la separación de las cromátidas.

Q uiasma -

Degradación d e Degrad ación de

la cohesina a lo la cohesina
largo de los centro m érica
b razos
Shugoshina

1 Metaf ase 1 Anafase 1 Anafase 11

Figura 2-19. La cohesina controla la separación de las cromátidas y los cromosomas durante la mitosis y la meiosis.

la metafase Il, se degrada la cohesina centromérica, que ya no está
protegída por la shugoshina, lo que posibili ta que las cromátidas
hermanas se separen durante la anafase Il, al igual que lo hacen en
la mitosis (fig. 2-19b). IJINTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 30
Meiosis en los ciclos vitales de animales
y plantas
El resultado global de la meiosis son cuatro células haploides
genéticamente variables. Veamos ahora cómo participa la meiosis
en el ciclo vital de un animal y una planta multicelulares.

CONCEPTOS MEIOSIS EN ANIMALES La producción de gametos en un ani-

La cohesina mantiene unidas a las cromátidas hermanas durante la
primera parte de la mitosis. En la anafase, la cohesina se degrada, lo
que perm ite la separación de las cromátidas hermanas. En la meiosis,
la cohesina de los centrómeros está protegida durante la anafase 1, de
manera que durante la meiosis I se separan los cromosomas homólo-
gos pero no las cromátidas. La degradación de la cohesina centromé-
rica permite que las cromát idas hermanas se separen durante la ana-
f ase II de la meiosis.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
¿ Cómo af ecta la shugoshina a las cromátidas durante la meiosis I y la
meiosis 117
mal macho, un proceso denominado espermatogénesis, tiene
lugar en los testículos. Allí, las células germinales diploides se
dividen por mitosis para producir células diploides llamadas
espermatogonias (fig. 2-20a). Cada espermatogonia puede pre-
sentar ciclos repetidos de mitosis, que dan origen a muchas otras
espermatogonias. Alternativamente, una espern1atogonia puede
iniciar la meiosis e ingresar en la profase l. Esta célula, denomi-
nada ahora espermatocito primario, todavía es dipl oide, porque
los cromosomas homólogos aún no se han separado. Cada esper-
matocito primario completa la 1neiosis I para dar origen a dos
espermatocitos secundarios haploides que después experim.e n-
tarán la meiosis Il, con la consiguiente producción de dos esper-
mátidas haploides. Por lo tanto, cada espermatocito primario
genera un total de cuatro espermátidas haploides, que maduran y
se convierten en espermatozoides.
36 CAPITULO 2
(a) Gametogénesis masculina (espermatogénesis)
Las espermatogonias de los
testículos pueden presentar ciclos
repetidos de mitosis, lo que produce
más espermatogonias.
Espermatogonia (2n)
Una espermatogonia puede ingresar en
la profase I y convertirse en un esperma-
tocito primario.
- Espermatocito primario (2n)
Cada espermatocito primario 7
completa la meiosis I y produce dos
espermatocitos secundarios ...
Espermatocitos secundarios (1 n)
-- r
Ovocito secundario (1 n)
... que después presentan meiosis 11
para producir dos espermátidas
haploides cada uno.
Espermátidas (1 n)
Maduración Las espermátidas maduran
a espermatozoides.
Espermatozoide
Cigoto (2n)
Figura 2-20. Formación de gametos en animales.
La producción de gametos en un animal hembra, denominada
ovogénesis, comienza en forma muy sinnlar a la espermatogénesis.
Dentro de los ovarios, las células germinales primordiales diploi-
des se dividen por nntosis para producir ovogonias (fig. 2-20b).
Al igual que las esper1natogonias, las ovogonias pueden presen-
tar ciclos repetidos de mitosis o bien entrar en la meiosis. Una vez
en la profase I, estas células, aún diploides, se denominan ovoci-
tos primarios. Cada ovocito primario completa la meiosis I y se
divide.
En este momento, el proceso de ovogénesis co1nienza a diferen-
ciarse del proceso de espern1atogénesis. En la ovogénesis, la cito-
cinesis es desigual: la mayor parte del citoplasma es asignada a
una de las dos célul as haploides, el ovocito secundario. La célu-
la más pequeña, que contie ne la mitad de los cromosomas pero
solo una pequeña parte del citoplasma, se denomina primer cor-
púsculo polar y puede seguir dividiéndose o no. El ovocito se-
cundario con1pleta la meiosis II, y también en este caso la citoci-
nesis es desigual: la mayor parte del citoplasma pasa a una de las
células. La célula más grande, que adquiere la mayoría del cito-
plasma, es el óvulo, eJ gameto femenino 1naduro. La célula más
pequeña es el segundo corpúsculo polar. Solo el óvulo puede ser
fecundado, y los corpúsculos polares suelen desintegrarse. En
(b) Gametogénesis femenina (ovogénesis)
f Las ovogonias de los ovarios pueden 1
presentar ciclos repetidos de mitosis
que producen más ovogonias o ... __J
e
..__
Ovogonia (2n)
Sngresar en la profase I y
convertirse en ovocitos primarios.
Ovocito primario (2n)
fCada ovocito primario completa la meiosis
1 y produce un ovocito secundario grande
y un corpúsculo polar más pequeño, que
se desintegra.
Primer corpúsculo polar
El ovocito secundario completa la meiosis 11,
lo que produce un óvulo y un segundo
[corpúsculo polar, que también se desintegra.
óvulo (1n) Segundo corpúsculo polar
En algunos animales, la meiosis 11 tiene
lugar después de que el espermatozoide
~ penetrado en el ovocito secundario.
En la fecundación, se fusionan
un espermatozoide y un óvulo
para producir un cigoto diploide.
consecuencia, la ovogénesis produce un solo gameto maduro a
partir de cada ovocito primario.
En los mamíferos, la ovogénesis difiere de la espermatogénesis
en otro aspecto. En el macho, la formación de espermatozoides es
continua durante toda su vida reproductiva adulta. En cambio, la
formación de gametos feme ninos suele ser un proceso discontinuo,
que puede ocurrir durante un período de años. La ovogénesis
comienza antes del nacimiento; durante este período, las ovogonias
inician la meiosis y dan origen a los ovocitos primarios. Después,
se detiene la meiosis en la profase l. Una hembra nace con ovoci-
tos pritnaii os detenidos en la profase l . En los seres humanos, este
período de animación suspendida puede durai· de 30 a 40 años.
Antes de la ovulación, las concentraciones crecientes de hormonas
estimul an a uno o más de los ovocitos primarios para que reco-
miencen la meiosis. Se completa la primera división de la meiosis,
y un ovocito secundario es ovulado desde el ovario. En los seres
hu1nanos y muchas otras esp ecies, la segunda división de la 1neio-
sis se pospone hasta el contacto con el espermatozoide. Cuando el
espermatozoide atraviesa la capa externa del ovocito secundario, se
produce la segunda división meiótica, se expulsa el segundo cor-
púsculo polar del óvulo y se fusionan los núcleos del espermatozoi-
de y el óvulo recién formado, lo que da origen al cigoto.
 Cromosomas y reproducción celu lar 37

CONCEPTOS
En los testículos, una espermatogonia d iploide ingresa en meiosis y
produce un total de cuatro célu las espermáticas haploides. En los ova-
rios, una ovogon ia diploide entra en meiosis y produce un único óvu lo
grande y corpúscu los polares más pequeños que norma lmente se
desintegran .
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
Un espermatocito secundario tiene 12 cromosomas. ¿ Cuántos cro-
mosomas se hallarán en el espermatocito primario que le dio origen?
a. 6 c. 18
b. 12 d.24
MEIOSIS EN LAS PLANTAS La mayoría de las plantas tienen un
ciclo vital complejo que incluye dos estructuras distintas (gene-
raciones): un esporo:fito n1ulticelular diploide y un gametofito mul-
ticelular haploide. Estas dos generaciones se alternan; el esporofita
produce esporas haploides a través de la meiosis, y el gametofi-
to produce gametos haploides a través de la mitosis (fig. 2-21) . A
veces, este tipo de ciclo vital se deno1nina alternancia de genera-
ciones. En este ciclo, los productos in1nedíatos de la meiosis se
denominan esporas, no ga1netos; las esporas sufren una o más
divisiones mitóticas para producir gametos. Si bien los términos
empleados para este proceso son algo diferentes de los que sue-
len utilizarse respecto de animales (y respecto de algunos de los
empleados hasta ahora en este capítulo), los procesos en plantas
y animales son básicamente iguales: en a1n bos, la meiosis deter-
mina una reducción del número de cromosomas, lo que produce
células haploides.
En las plantas que dan flores, el esporofito es, sin duda, la parte
vegetativa de la planta; el gametofito consiste solo en algunas
células haploides dentro del esporofi ta . La flor, que fo rma parte
del esporofito, contiene las estructuras reproductoras. En algunas
plantas , se hallan estructuras reproductoras masculinas y femeni-
nas en la misma flor; en otras, estas estructuras se localizan en
flores diferentes. En cualquiera de los casos, la parte masculina de
la flor, el estan1bre, contiene células reproductoras diploides lla-
madas microsporocitos, cada una de las cuales entra en meiosis
para producir cuatro microsporas haploides (fig. 2-22a). Cada
microspora se divide por mitosis y produce un grano de polen
inmaduro fo1mado por dos núcleos haploides. Uno de estos
núcleos, denominado núcleo del tubo, dirige el crecimiento de un
tubo polínico. El otro, denominado núcleo generativo, se divide
por mitosis para producir dos células espennáticas. El grru10 de
polen, con sus dos núcleos hapl oides, es el gametofi to masculino.
La parte femenina de la flor, el ovario, contiene células diploides
denominadas megasporocitos, cada una de las cuales experimenta
meiosis para producir cuatro megasporas haploides (fig. 2-22b),
de las cuales solo una sobrevive. El núcleo de la megaspora sobre-
viviente se divide tres veces por 1nitosis, lo que produce un total de
ocho núcleos haploides que forman el gametofito femenino: el saco
embrionario. Después, Ja división del citoplasma produce células
independientes, una de las cuales se convierte en el huevo.
Cuando la planta florece, los estambres se abren y liberan gra-
nos de polen . El polen se deposita en el estigma de una flor, una
plataforma pegajosa situada en la parte superior de un tallo largo
deno.minado estilo. En Ja base del estilo está el ovario. Si un grano
de polen germina, se forma un tubo que crece a lo lru·go del esti-
lo hasta el ovario. L as dos células espermáticas descienden por
este tubo e ingresan en el saco embrionario (fig. 2-22c). Una de
las células espermáticas fecunda la célula huevo y da origen a un
cigoto diploide, que se desarrolla para convertirse en un embrión.
L a otra célula espermática se f usiona con los dos núcleos encerra-
dos en una sola célula, lo que da origen a un endospermo 3n (tri -
ploide), que almacena material nutritivo que será utilizado más
adelante por la planta embrionaria. Estos dos eventos de fecunda-
ción se denominan fecundación doble.

ravés de la ~itosisj el
oto se convierte en el
porofito diploide.

... que se fusionan

durante la fecundación 'Mitosis

para formar un cigoto

diploide.
@agoto
Estructura diploide (2n)
multicelular: el esporofito
Meiosis

A través de la mitosis, Estructura haploide (1n)

los gametofitos multicelular: el gametofito
producen gametos
haploides ... Espo ras

O Gameto ® ~
través de la meiosis, el
esporofito diploide (2n)
produce esporas haploides Figura 2-21. Las plantas alternan entre etapas

----------------------l
(1 n), que se convierten en de vida diploides y haploides (femenino, o;
el gametofito. masculino, o ).
38 CAPITULO 2

(a) (b)

M icrosporocito Megasporocito • En el ovario, los

(diploide) Flor (diploide) megasporocitos
diploides presentan
En el estambre, los
me1os1s ...
microsporocitos diploides Diploide, 2n
presentan meiosis ...
Meiosis . ,- ....
. . .para producir cuatro
Haploide, 1n
... para producir cuatro
microsporas haploides. Cuatro microsporas
Cuatro megasporas
(haploides)
J
•
megasporas haploides,
pero sobrevive una sola. )
(haploides)
Solo una
Cada una se divide por sobrevive
mitosis para producir un
1 grano de polen con dos
a megaspora que 1
L.!!úcleos haploides. Núcleo generat ivo
haploi de 2 núcleos @ sobrevive se divide tres
veces por mitosis ... _J
' El núcleo del tubo dirige
el crecimiento del un Grano de polen
tubo polínico.
Núcleo del
tubo haploide 4 núcleos í-:')
lS

Tubo polínico 8 núcleos

i • .. .para producir ocho
núcleos haploides.

El núcleo generativo se • 1 citoplasmase divide,

divide por mitosis para Dos células espermát icas lo que produce células
producir dos células r----=-- haploides independientes ...
espermáticas.
División del
Núcleo del tubo -....
citoplasma - - ,-
...una de las cuales se

.. e--- convierte en el huevo .

~ ;~~rionario

... y los otros núcleos se

mJ- La fecundación doble

reparten en distintas
células. ---~)
(c) tiene lugar cuando las
dos células espermáticas
de un grano de polen
Endospermo ingresan en el saco
(triploide, 3n) embrionario.
-
• La otra célu la espermática
Una célula espermática
fertiliza la célula huevo,
se fusiona con la célula lo que produce un cigoto
binucleada para formar un diploide.
endospermo triploide.
Embrión dip loide, 2n

Figura 2-22. Reproducción sexual de las plantas con flores.


CONCEPTOS
En el estambre de una planta que da flores, la meiosis produce
microsporas haploides que se dividen por mitosis pa ra producir célu-
las espermáticas haploides en un grano de polen. Dentro del ovario,
la meiosis produce cuatro megasporas haploides, de las cuales solo
una se divide tres veces por mitosis para producir ocho núcleos
haploides. Después de la polinización, una célula espermática fecun-
da la célu la huevo, lo que produce un cigoto diploide; la otra se fusio-
na con dos núcleos para formar el endospermo.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
¿ Qué estructura es diploide?
a. Microspora b. Megaspora c. Huevo d. M icrosporocito
RESUMEN DE CONCEPTOS
■ Una célula procarionte posee una estructura simple, sin envol-
tura nuclear y, por lo general, un único cromosoma circular.
Una célula eucarionte tiene una estructura más compleja, con
un núcleo y múltiples cro1nosomas lineales compuestos por
con1plejos de DNA e histonas.
■ La reproducción de las células requiere la copia del material
genético, Ja separación de las copias y la división celul ar.
■ En una célula procarionte, se replica e.l único cromosoma,
cada copia migra hacia lados opuestos de la célula y esta se
divide. En las células eucariontes, la reproducción es más
compleja que en las procariontes, y exige 111itosis y meiosis
para garantizar que un conjunto completo de información
genética se transfiera a cada célula nueva.
■ En las células eucariontes, los cromosomas suelen hallarse en
pares ho1nólogos. Cada cromosoma funcional está fonnado
por un centrómero, telómeros y múltiples orígenes de replica-
ción. Después de que se ha copiado un cromosoma, las dos
copias permanecen unidas en el centró mero y forman las cro-
1nátidas herinanas.
■ El ciclo celular consiste en las etapas que atraviesa la célula
eucarionte entre las divisiones celulares. Estas etapas son
1) interfase, en la que la célula crece y se prepara para la divi-
sión, y 2) la fase M, en la que tiene lugar la divi sión nuclear y
celular. La fase M consiste en 1) mitosis, el proceso de divi-
sión nuclear, y 2) citocinesis, la división del citoplasma.
■ La progresión a través del ciclo celular cuenta con puntos de
control que regulan el ciclo celular permitiendo o impidiendo
que la célula proceda a la siguiente etapa.
■ Por lo general, la mitosis produce dos células genéticamente
idénticas.
TÉRMINOS IMPORTANTES
anafase (p. 24) citocinesis (p. 23)
anafase I (p. 29) cohesina (p. 33)
anafase II (p. 29) cromátida hermana (p. 23)
archaea (p. 19) cromatina 8p. 18)
bivalente (p. 29) diploide (p. 21)
ciclo celular (p. 23) entrecruzamiento (p. 29)
Cromosomas y reproducción celular 39
Hemos analizado el papel de la meiosis en el ciclo sexual de
dos organi smos, un anitnal multicelular típico y una planta que
da flores. Estos ciclos son solo dos de las numerosas variacio-
nes halladas en organismos eucariontes. Si bien los eventos
celulares que producen células reproductoras en plantas y ani-
n1ales difieren en el número de divisiones celulares, la cantidad
de gametos haploides producidos y eJ tainaño relativo de los
productos finales, el resultado global es el mismo: la meiosis da
origen a células haploides genéticamente variables, que luego se
fusionan durante la fecu ndación para producir progenie diploide.
~ INTENTE RESOLVER LOS PROBLEMAS 36 Y 38
■ La reproducción sexual produce progenie variable desde el
punto de vista genético y pennite que se acelere la evolución.
Incluye la meiosis, en la que se producen células sexuales ha-
ploides, y la fecundación, la fusión de las células sexuales. La
ineiosis consta de dos divisiones celulares. En la meiosis I, se
produce el entrecruzamiento y la separación de los cromoso-
mas homólogos. En la meiosis II, se separan las cromátidas.
■ El resultado habitual de la meiosis es la producción de cuatro
células haploides genéticamente variables. La variación gené-
tica de la meiosis se produce por entrecruzamiento y por dis-
tribución aleatoria de los cromosomas maternos y paternos.
■ La cohesina mantiene juntas las cromátidas hermanas. En la
metafase de la mitosis y en la metafase II de la meiosis, la
degradación de la cohesina permite que se separen las cromá-
tidas hermanas. En la meiosis I, la cohesina cen tromérica per-
manece intacta y mantiene unidas las cromátidas hermanas, de
manera que en la anafase I se separan los cromosomas homó-
logos pero no las cro1nátidas hermanas.
■ En los animales, una espermatogonia diploide presenta meiosis
para producir cuatro células espennáticas haploides. ·una ovo-
goni a diploide presenta meiosis para producir un óvulo haploi-
de grande y uno o más corpúsculos polares más pequeños.
■ En. las plantes, un microsporocíto diploide del estambre pre-
senta meiosis para producir cuatro granos de polen, cada uno
de los cuales contiene dos células espermáticas. En el ovario,
el megasporocito diploide entra en 1neiosis para producir ocho
núcleos haploides, uno de los cuales forma el huevo. Durante
la polinización, una célul a espermática fecunda la célula
huevo, y la otra se fusiona con dos núcleos haploides para for-
mar un endospermo 3n.
espermátida (p. 36) eubacteria (p. 19)
espermatocito primario (p. 35) eucarionte (p. 19)
espermatocito secundario fase M (mitótica) (p. 23)
(p. 35) fecundación (p. 28)
espermatogénesis (p. 35) haploide (p. 21)
espermatogonia (p. 35) histona (p. 19)
40 CAPITULO 2

intercinesis (p. 29) microsporocito (p. 37) par homólogo (p. 2 1) recombinación (p. 32)
interfase (p. 23) mitosis (p. 23) poliploide (p. 2 1) segundo corpúsculo polar (p. 36)
megaspora (p.37) núcleo (p. 19) primer corpúsculo polar (p. 36) sinapsis (p. 29)
1negasporocito (p. 37) origen de replicación (p. 23) procruionte (p. 19) telofase (p. 26)
meiosis (p. 28) ovocito prima1io (p. 36) p rofase (p. 24) telofase I (p. 29)
metafase (p. 24) ovocito secundario (p. 36) profase I (p. 28) telofase II (p. 29)
metafase I (p. 29) ovogénesis (p. 36) pr ofase II (p. 29) telón1ero (p. 22)
metafase II (p. 29) ovogonia (p. 36) pro1netafase (p. 24) tétrada (p. 29)
microspora (p. 37) óvulo (p. 36) punto de control (p. 23) vi.rus (p. 20)

l. La eubacterias y las archaea son procariontes. Difieren de los 4. a

eucariontes en que no tienen núcleo, tienen un genoma que
suele estar formado por un único cromosoma circular y una
pequeña cantidad de DNA.
2. b
3. El cinetocoro es el punto en el que los microtúbulos del huso
se unen al cromoso1na. Si faltaran los cinetocoros, los micro-
túbulos del huso no se unirían al cromoso1na, y este no sería
traccionado hacia el núcleo, por lo que faltaria un cromoso-
ma en las células resultantes.
5. c
6. Durante la anafase I, la sbugoshina protege a la cohesina cen-
tromérica de la acción de la separasa; por consiguiente, la
cohesina permanece intacta, y las cromátidas her1nanas se
mantienen juntas. Después, hay degradación de la shugoshi-
na, de manera que la cohesina centromérica es degradada en
la anafase II, y se separan las cromátidas.
7. d
8. d

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
Una estudiante examina un corte fino de la punta de la raíz de Lma cebolla y registra el número de célu-
las que hay en cada etapa del ciclo celular. Observa 94 células en interfase, 14 células en profase,
3 células en prometafase, 3 células en metafase, 5 células en anafase y 1 célula en telofase. Si un ciclo
celular completo en la punta de la raíz de una cebolla requiere 22 horas, ¿cuál es la duración prome-
dio de cada etapa deJ ciclo? Asuma que todas las células se encuentran en el ciclo activo (no en G 0).

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? PASO 1 Calcule la proporción de células en cada etapa
La duración promedio de cada etapa del ciclo celular. La proporción de células en cada etapa es igual al número de
células halladas en esa etapa dividido por el nún1ero de células
¿Qué información se proporciona para resolver el proble- examinadas:
ma? Pista: el total de
■ El número de células en diferentes etapas del ciclo celular.
Interfase 94/120 = 0,783 todas las proporciones
Profase 14
/120 = 0,1 17 debe ser igual a 1.
■ Un ciclo celular completo requiere 22 horas. Prometafase 3h20 = 0,025
Metafase 3
/120 = 0,025
Para obtener ayuda con este problema, repase: Anafase 5/120 = 0,042
Telofase 1/120 = 0,008
E l ciclo celular y la mitosis en la Sección 2.2.

Pasos de la solución PASO 2 Determine la duración promedio de cada etapa

Para deter.minru· la duración promedio de cada etapa, multipli-

Este problema se resuelve en dos pasos. Primero, calculamos
las proporciones de células de cada estadio del ciclo celular, que la proporción de células de cada etapa por el tiempo
que corresponden a la cantidad de tiempo que permanece una requerido para el ciclo celular con1pleto.
Pista: el tiempo total
célula promedio en cada etapa. Por ejemplo, si las células Interfase 0,783 x 22 horas= 17,23 horas de todas las etapas
transcu1Ten el 90% de su tiempo en interfase, en cualquier Profase O, 117 x 22 horas= 2,57 horas debe ser igual a 22 h.
momento dado, el 90% de las células estará en interfase. El Prometafase 0,025 x 22 horas = 0,55 horas
segundo paso es convertir las proporciones en períodos de Metafase 0,025 x 22 horas = 0,55 horas
tiempo, Jo que se realiza mu]tipJi cando las p roporciones por el Anafase 0,042 x 22 horas =0,92 horas
tiempo total del ciclo celulru· (22 horas). Telofase 0,008 x 22 horas= 0, 18 horas

Problema 2
Una célula en G 1 de la interfase tiene ocho cromosomas. ¿Cuántos cromoso.mas y moléculas de
DNA se encontrarán por célula a medida que esta célula progrese a través de los siguientes esta-
dios: G2, metafase de la mitosis, anafase de la mitosis, después de la citocinesis de la nútosis,
metafase I de la meiosis, metafase II de la meiosis y después de la citocinesis de la meiosis II?
Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Los núm.e ros de cro1noso1nas y moléculas de DNA presentes
por célula en diferentes etapas del ciclo celular y la meiosis.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
■ Una célula en G 1 tiene ocho cromosomas.
■ Diferentes etapas del ciclo celular y la meiosis.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Interrelación de conceptos: Recuento de cromosomas y molé-
culas de DNA en la Sección 2.2.
Pasos de la solución
Recuerde las reglas para contar cromoso1nas y moléculas de
DNA: 1) para determinar el número de cron1osomas, cuente el
número de centrómeros funcionales; 2) para determinar el
número de moléculas de DNA, corrobore si existen cromáti-
das hermanas. Si hay cromátidas hermanas, el número de cro-
mosomas es 2 x la cantidad de cromosomas. Si
Pista: estas dos reglas los ci-omosomas no están replicados (no contie-
son importantes para
responder la pregunta.
nen cro1nátidas hermanas), eJ nú1nero de 1nolé-
culas de DNA es igual a Ja cantidad de cromo-
somas. Piense cuidadosamente cuándo y cómo
cambia el número de cromoson1as y de moléculas de DNA en
el curso de la mitosis y de la meiosis.
El número de moléculas de DNA aumenta solo en la fase S,
cuando se replica el DNA; el nú1nero de mo léculas de DNA
solo di sminuye cuando se divide Ja célula. El número de cro-
mosomas solo aumenta cuando se separan las cromátidas
Recuerde: el número
hermanas en la anafase de la n1itosis y en la
de cromosomas solo anafase II de la meiosis ( en Ja anafase I de la
aumenta cuando se 1neiosis, se separan los cromosomas homólo-
separan las aomátidas.
El número de moléculas gos, no las cromátidas).
de DNA solo aumenta Al igual que el número de moléculas de
en la fase S. DNA, el número de cromosomas se reduce solo
por división de la célula.
Ahora apliquemos estos p1incipios al problema. Una célu la
en G 1 tiene 8 cromosomas y no hay cromátidas hermanas
presentes; por cons iguiente, en Gl' hay 8 moléculas de DNA.
El DNA se replica en la fase S, y ahora cada cromoso,na está
formado por dos cromátidas, de manera que en G2 hay 2 x 8
= 16 moléculas de DNA por célula. Sin embargo, las dos
copias de cada molécula de DNA p ermanecen unidas en el
centrómero, así que todavía hay solo 8 cromosomas presen-
tes. Cuando la célula pasa a través de la pi-ofase y la n1etafase
del ciclo celular, el número de cromosomas y el número de
moléculas de DNA sigue siendo igual ; por lo tanto, en la
metafase hay 16 moléculas de DNA y 8 cromosomas. En la
Cromosomas y reproducción celular 41
anafase, se separan las cromátidas, y cada una se convierte en
un cromosoma independiente; en este momento, el número de
cromosomas aumenta de 8 a 16. E ste aumento es transitorio y
persiste solo hasta que la célula se divide en Ja telofase o des-
pués de esta. El número de moléculas de DNA sigue siendo
de 16 en la anafase. El número de moléculas de DNA y cro-
mosomas por célula se reduce por citocinesis después de la
telofase, porque los 16 cromosomas y moléculas de DNA se
distribuyen ahora entre dos células. Por lo tanto, después de
la citocinesis, cada célula tiene 8 moléculas de DNA y 8 cro-
mosomas, el mismo número que había al comienzo del ciclo
cel ular.
Ahora, examinemos el número de moléculas de DNA y cro-
moson1as en el curso de la meiosis. En G 1, hay 8 cromosomas
y 8 moléculas de DNA. El nú1nero de n1oléculas de DNA
aumenta a 16 en la fase S, pero el número de cromosomas se
1nantiene en 8 (cada cromoso Lna tiene dos cro1nátidas). Por lo
tanto, la célula ingresa en la metafase I con 16 molécul as de
DNA y 8 cromosomas. En la anafase I de la meiosis, se sepa-
ran los cromosomas homólogos, pero el número de cromoso-
mas continúa siendo 8. Después de la citocinesis, los 8 cromo-
somas originales se distribuyen entre dos células, de manera
que el número por célula desciende a 4 (cada uno con dos cro-
1nátidas). Las 16 moléculas de DNA originales también se dis-
tribuyen entre las dos células, de manera que la cantidad de
moléculas de DNA por célula es 8. En la intercinesis, no hay
síntesis de DNA, y cada célula aún mantiene 4 cromosomas y
8 moléculas de DNA durante la metafase II. En la anafase II,
se separan las dos cro1nátidas de cada cr0Lnoson1a, lo que
aumenta en forma transitoria el número de cromosomas por
célula a 8, mientras que el nún1ero de moléculas de DNA
por cél ula se mantiene en 8. Después de la citocinesis, los cro-
mosomas y las moléculas de DNA vuelven a distribuirse entre
dos células, lo que determina 4 cromosomas y 4 moléculas de
DNA por célula. Estos resultados se resumen en el siguiente
cuadro:
Número de Número de
cromosomas moléculas de
Etapa por célula DNA por célula
Gl 8 8
Gz 8 16
Metafase de la mitosis 8 16
Anafase de la mitosis 16 16
Tras la citocinesis de La mitosis 8 8
Metafase I de la 1neiosis 8 16
Metafase TI de la meiosis 4 8
Tras la citocinesis de la meiosis II 4 4
42 CAPITULO 2
Sección 2.1
l . ¿ Cuáles son las diferencias genéticas entre las células proca-
r iontes y e ucariontes?
2. ¿Por qué los virus que infectan células de mamíferos son úti-
les para estudiar la genética de los mamíferos?
Sección 2.2
3. Enumere tres eventos fundamentales que deben suceder en
la reproducción celular.
4. Resefíe el proceso por el que se reproducen las células
eucaiiontes.
S. Nombre tres elementos estructurales esenciales de un cro-
m osoma eucarionte funcional y describa sus funciones.
6. Esquematice e identifique cuatro tipos diferentes de cromo-
somas respecto de la posición del centrómero.
7. Enumere las etapas de la interfase y los principales eventos
que tienen lugar en cada etapa.
8. ¿ Qué son los puntos de control? Enumere algunos de los
puntos de contro l i1nportantes del ciclo celular.
9. Enumere las etapas de la mitosis y los principales eventos
que tienen lugar en cada etapa.
10. Describa sucintamente cómo migran los cromosomas hacia
los polos del huso durante la anafase.
Introducción
*20. Responda las siguientes preguntas respecto del acertijo de
los hombres ciegos presentado al comienzo del capítulo.
a. ¿Qué representan las dos medias de un par en el ciclo
celular?
b. En el acertijo, cada hombre ciego compra sus propios
pares de medias, pero el e1npleado coloca todos los
pares e n una bolsa. Por lo tanto, hay dos pares de
medias de cada color en la bolsa (dos pares negros, dos
pares azules, dos pares grises, etc.). ¿Qué representan
los dos pares (cuatro medias en total) de cada color?
c. En el ciclo celular, ¿ cuál es el hilo que conecta las dos
inedias de un par?
d. En el ciclo celular, ¿cuál es la navaja molecular que corta
el hilo que mantiene j untas las dos mecti as de un par?
e. ¿ Qué cumple en el acertijo la misma función que las
fibras de] huso?
f. ¿Qué sucedería si un hombre no tomara su media de un
par particular y cómo se relaciona esto con los eventos
del ciclo celular?
Sección 2.1
21. Una célula tiene un cromosoma circular y carece de mem-
brana nuclear. Su D NA fortna complejos con algunas histo-
11 . ¿ Cuáles son los resultados genéticamente importantes del
ciclo celular y la mitosis?
12. ¿Por qué las dos células producidas por el ciclo celular son
genéticamen te idénticas?
Sección 2.3
13. ¿Cuáles son las etapas de la meiosis y qué eventos impor-
tantes se producen en cada etapa?
14. ¿Cuáles son los principales resultados de la meiosis?
15. ¿Qué dos procesos privativos de la meíosis son responsables
de la variación genética? ¿En qué momento de la meiosis
tienen lugar estos procesos?
16. Enumere algunas similitudes y diferencias entre mitosis y
1neiosis. ¿Qué diferencias considera usted que son las más
importantes y por qué?
17. Explique sucintamente por qué las cromátidas hermanas se
1nantienen juntas e n la anafase I pero se separan en la ana-
fase II de la meiosis
18. Reseñe los procesos de espermatogénesis y ovogénesis en
animales.
19. Reseñe los procesos de formación de gametos masculinos y
de gametos femeninos en las plantas.
nas. ¿Esta célula pertenece a una e ubacteria, archaea o a un
e ucarionte? Explique su razonainiento.
Sección 2.2
22. Una determinada especie tiene tres pares de cromosomas:
un par acrocéntrico , un par metacéntrico y un pai· subme-
tacéntrico. Dibuje una célula de esta especie como se vería
en la metafase de la nutosis.
*23. Un biólogo examina una serie de células y cuenta 160
células en interfase, 20 en profase, 6 en prometafase, 2 en
metafase, 7 en anafase y 5 en telofase. Si el ciclo celular
completo requiere 24 horas, ¿cuál es la duración promedio
de la fase M en estas células? ¿De la metafase?
Sección 2.3
24. Una determinada especie tiene tres pares de cromosomas:
un par acrocéntrico y dos pares n1etacéntricos. Dibuje una
célula de esta especie como se vería e n las siguientes eta-
pas de la meiosis.
a. Metafase I
b. Anafase I
c. Metafase II
d. Anafase II

25. Construya un cuadro similar al de la figura 2-12 para las
diferentes etapas de la meiosis e indique el número de cro-
mosomas por células y el número de moléculas de DNA
por célula para una célula que comienza con 4 cromoso-
mas (dos pares ho1nólogos) en 0 1. Incluya en su cuadro las
siguientes etapas: G 1, S, G2 , profase l , metafase l , anafase
l , telofase l (después de la citocinesis), profase n, metafase
n, anafase n y telofase II (después de la citocinesis).
*26. Una célula en G 1 de la interfase tiene 12 cromosomas.
¿Cuántos cro1noso1nas y moléculas de DNA se hallarán
por célula cuando esta célula original progrese a las
siguientes etapas?
a. G2 de la interfase
b. Metafase l de la meiosis
c. Profase de la mitosis
d. Anafase l de la meiosis
e. Anafase n de la meiosis
f. Profase ll de la meiosis
g. Después de la citocinesis que sigue a la mitosis
h. Después de la citocinesis que sigue a la meiosis II
27. ¿En qué se parecen los eventos que se produce en la
espermatogénesis y en la ovogénesis? ¿En qué difieren?
*28. Todas las células siguientes, mostradas en distintas etapas
de la mitosis y la meiosis, provienen de la misma rara
especie de planta:
a. ¿Cuál es el número diploide de cromosomas de esta
planta?
b. Indique los nombres de cada etapa de la mitosis o de la
meiosis mostrada
c. Indique el número de cromosomas y el número de
moléculas de DNA por célula presentes en cada etapa.
*29. Se mide la cantidad de DNA por célula de una especie
particular en células halladas en distintas etapas de la
meiosis y se obtienen las siguientes cantidades:
Cantidad de DNA por célula
_ _ 3,7 pg _ _ 7,3 pg _ 14,6 pg
Combine las cantidades de DNA previas con las etapas
correspondientes del ciclo celular (de a a/). Puede utilizar
1nás de una etapa para cada cantidad de DNA.
Etapas de la meiosis
a. 0 1
b. Profase 1
c. G2
d. Después de la telofase II y la citocinesis
Cromosomas y reproducción celular 43
e. Anafase l
f. Metafase II
*30. ¿Cómo afectaría cada uno de los siguientes eventos el
resultado de la mitosis o la meiosis?
a. No se sintetiza cohesina mitótica al comienzo de la
mitosis.
b. La shugoshina está ausente durante la meiosis.
c. La shugoshina no se degrada después de la anafase l de
la meiosis.
d. La separasa es defectuosa.
*31. Una célula en profase II de la meiosis contiene 12 cromo-
somas. ¿Cuántas cromátidas habría en una célula del
mismo organismo si esn1viera en la profase de la mitosis?
¿En la profase l de la meiosis?
32. Una célula tiene 8 cromosomas en la G 1 de la interfase.
Dibuje un esquema de esta célula con sus cro1nosomas en
las sigui entes etapas. Indique cuántas moléculas de DNA
habrá en cada una de ellas.
a. Metafase de la mitosis
h. Anafase de la mitosis
c. Anafase II de la meiosis
d. Diplotena de la meiosis I
*33. La mosca de la fruta Drosophila melanogaster (izquierda)
tiene cuatro pares de cron1osomas, mientras que la mosca
doméstica Musca domestica (derecha) tiene seis pares de
cromosomas. ¿En qué especie esperaría observar mayor
variedad genética en la progenie de un cruzamiento?
Explique su respuesta.
(Hermann Eisenbeiss, Materz Mali/iStockphoto).
*34. Una célula tiene dos pares de cromosomas submetacéntri-
cos, que denominaremos 18 , l b, fi.i y Ilb (los cromosomas Iª
y lb son homólogos, y los cromosomas nay nbtambién).
El alelo M se localiza en el brazo largo del cro1n osoma 18 ,
y el alelo m se localiza en la misn1a posición del cromoso-
ma lb. El alelo P se localiza en el brazo corto del cromosoma
la, y el alelo p se localiza en la misma posición del cromo-
soma lb. El alelo R se localiza en el cromoson1a na, y el
alelo r se localiza en la misma posición del cromosoma nb.
a. Dibuje estos cromosomas e identifique los genes M, m,
P, p, R y r como aparecerían en la metafase l de la
meiosis. Asuma que no hay entrecruzamiento.
b. Tomando en cuenta la separación aleatoria de los cro-
mosomas durante la anafase I, dibuje los cromoson1as
(con los genes identificados) presentes en todos los
posibles tipos de gametos que podrían resultar de la
meiosis de esta célula. Asuma que no hay entrecruza-
miento.
44 CAPITULO 2

35. Un caballo tiene 64 cromosomas, y un burro, 62. Un cru- 37. Indique si cada una de las siguientes células es haploide o
zamiento entre una yegua y un burro 111acho produce una diploide.
mula, que suele ser estéril. ¿Cuántos cromosomas tiene
una mula? ¿Puede pensar en alguna de las razones por las
Tipo celular ¿Haploide o diploide?
cuales la mayoría de las mulas son estériles?
Microspora
*36. Las células somáticas normales de los caballos tienen 64
cromosomas (2n = 64). ¿Cuántos cromosomas y cuántas Espermatocito primario
moléculas de DNA habrá en los siguientes tipos de células Microsporocito
del caballo? Prin1er corpúscu lo polar
Ovogonia
Espermátida
Megaspora
Óvulo
Ovocito secundario
Espermatogonia

*38. Un ovocito primario se divide para dar origen a un ovocito

Tipo celular
a. Espermatogonia
b. Primer corpúsculo polar
c. Ovocito primario
d. Espermatocito secundario
secundario y un prin1er corpúsculo polar. Después, el ovo-
cito secundario se divide para dar origen a un óvulo y un
Número Número segundo corpúsculo polar.
de de moléculas a. ¿La información genética hallada en el primer corpúsculo
cromosomas deDNA polar es idéntica a la del ovocito secundario? Explique
su respuesta.
b. ¿La información genética hallada en el segundo corpúsculo
polar es idéntica a la del óvillo? Explique su respuesta.

PREGUNTAS DE DESAFÍO

Sección 2.3
39. Del 80 al 90% de las anormalidades cromosómicas huma-
nas más comunes se deben a que los cro1nosomas no se
dividen correctarnente durante la ovogénesis. ¿Puede pen-
sar en alguna razón por la que la falla de división de los
cromosomas sea más frecuente en la ga1netogénesis fe me-
nina que en la masculina?
40. En promedio, ¿qué proporción del genoma de los siguien-
tes pares de humanos serían exactamente
, iguales si no se
produjera entrecruzamiento? (Unicamente a los fines de
esta pregunta, ignoraremos el caso especial de los cromo-
somas sexuales X e Y, y as umiremos que todos los genes
se localizan en cron1osomas no sexuaJes).
a. Padre e hijo
b. Madre e hij o
c. Dos hermanos (la descendencia que tiene los dos mis-
1nos progenitores biológicos)
d. He1manastros (la descendencia que tiene un único pro-
genitor biológico en común)
e. Tío y sobrina
f. Abuelo y nieto
*41. Las abejas hembra son diploides, y las abejas macho,
haploides. Los machos haploides producen espermatozoi-
des y pueden aparearse de manera exitosa con hembras
diploides. Los huevos fecundados se desarrollan para con-
vertirse en hembras, y los huevos no fecundados se desa-
rrollan para convertirse en machos. ¿Cómo piensa que el
proceso de producción de espermatozoides de las abejas
macho difiere de la producción de espermatozoides en
otros animales?
 3
Principios básicos de la herencia

La genética del cabello pelirrojo

Debido a su color exótico o a su 01iginalidad, el cabello pelirro-

jo ha sido objeto de fascinación para histo1iadores, poetas, artis-
tas y científicos. Los historiadores destacaron especialmente
que Boudica, la reina celta que Lideró una sublevación contra eJ
Imperio Romano, tenía una "gran masa de cabello pelin·ojo" .
Los p1imeros artistas del cristianismo a menudo retrataron a
María Magdalena como a una llamativa pelirroja (aunque no
hay ninguna mención de su cabello pelin·ojo en la Biblia), y el
famoso artista Botticelli pintó a la diosa Venus como una belle-
za pelirroja en su obra 1naestra El nacimiento de Venus. La
reina Elizabeth I de Inglaten·a tenía cabello pelirrojo rizado;
dw:ante su reinado, el cabello de ese color estaba de moda en la
sociedad londinense.
En gran medida, el color del cabello se debe a la presencia de
un pigmento denominado melanina que se presenta en dos for-
mas: eumelanina, que es negro o marrón, y feomelanina, que es
roja o amarilla. El color de cabello de una persona depende de
dos factores: 1) la cantidad de melanina producida (más melani-
na determina cabello 1nás oscuro, y menos melanina, cabello
El cabello pelirrojo es causado por mutaciones recesivas del gen del más claro) y 2) las cantidades relativas de eumelanina y feome-
receptor de melacortina- 1. (BestPhotoStudio/Shutterstock). lanina (más eumelanina produce cabello negro o castaño; 1nás
feomelanina produce cabello rojo o rubio). El color del cabello
no es so lo una curiosidad académica ; la melanina protege con-
tra los efectos nocivos de la luz solar, y las personas peli rrojas suelen tener piel clara y ser
particularmente susceptibles al cáncer de piel.
Desde hace tiempo, la herencia del cabello pelirrojo ha sido tema de debate científico. En
1909, Charles y Gertrude Davenport especularon sobre la herencia del color de cabello en
seres humanos. Charles Davenport fue uno de los primeros entusiastas de la genética, sobre
todo de la herencia en seres humanos, y fue eJ primer director del Laboratorio de Biología de
Cold Spring Harbor, Nueva York. Más adelante, se convirtió en uno de los principales defen-
sores de la eugénica, un movimiento (hoy desacreditado) que propugnaba el mejoramiento de
la raza humana a través de la genética. El estudio de los Davenport se basaba en historias
familiares enviadas por aficionados sin preparación y que presentaban fallas metodológicas,
pero sus resultados sugirieron que el cabello pelirrojo era recesivo respecto del negro y el cas-
taño, lo que implicaba que una persona debía heredar dos copias de un gen de codificación de
cabello pelirrojo (uno de cada progenitor) para tener este color de cabello. La investigación
ulterior contradijo esta conclusión inicial y sugirió que el cabeUo pelirrojo se heredaba como
un rasgo dominante, y que una persona sería pelirroja aunque tuviera una sola copia del gen
de cabello pelin·ojo. La controversia acerca de si el color de cabello pelin·ojo era un rasgo
dominante o recesivo, o incluso si dependía de con1binaciones de varios genes diferentes, con-
tinuó durante muchos años.
En 1993, científicos que estaban investigando un gen que influye en el color del pelaje de
los ratones descubrieron el gen que codifica el receptor de melanocortina-1. Este receptor,
cuando está activado, aumenta la producción de eumelanina negra y reduce la de feomelanina
roja, lo que determina pelaje negro o marrón. Poco después, se localizó el mismo gen del
45
46 CAPITULO 3

receptor de melanocortina-1 (MClR) en el cromoso1na humano 16 y se lo analizó. Cuando este

gen está mutado en seres humanos, causa cabello pelirrojo. La mayoría de los pelirrojos tienen dos
copias defectuosas del gen MCJR , lo que significa que el rasgo es recesivo (como postularon ori-
ginalmente los Davenport en 1909). Sin embargo, del 10 al 20% de los pelirrojos tiene solo una
copia mutante de MClR , lo que con1plica la interpretación recesiva del cabello pelirrojo (las per-
sonas con una sola copia mutante del gen tienen cabello pelirrojo más claro que aquellos que
albergan dos copias mutantes). El ti po y la frecuencia de mutaciones del gen MCI R varía amplia-
mente en poblaciones humanas, lo que explica las diferencias étnicas en la preponderancia de
cabello pelirrojo: en aquellos de ascendencia africana y asiática, las mutaciones del gen de cabello
pelirrojo son infrecuentes, mientras que casi el 40% de las personas de la parte norte del Reino
Unido presentan por lo menos una copia mutante del gen de cabello pelirrojo.
Los seres humanos modernos no son los únicos pelirrojos. Análisis de DNA de huesos antiguos
ínctican que algunos neandertales también presentaban una mutación del gen MClR que casi sin
duda determinó cabelJ o pelirrojo, pero esa mutación es distinta de las observadas en seres hu1na-
nos modernos.

E ste capítulo considera los principios de la herencia: cómo se

transmiten los genes (p. ej ., el del receptor de melanocorti-
na-1 ) de una generación a otra y cómo influyen algunos factores,
docencia, y el abad del monasterio Io recomendó para que prosi-
guiera sus estudios en la Universidad de Viena ( Universitat 'Men),
a la que asistió desde 1851 hasta 1853. Allá, Mendel se inscribió
como la dominancia, en esa herencia. Gregor Mendel fue quien en el recién inaugurado Instituto de Física y realizó cursos de
expuso por primera vez los principios de la herencia, de n1anera matemática, química, entomología, paleontología, botánica y
que comenzamos este capítulo exanunando sus logros científicos. fisiología vegetal. Es probable que Mendel aprendiera allí el
Después, analizan1os los cruzanuentos genéticos silnples, aque- método científico, que más tarde aplicaría de 1nanera tan exitosa
Uos en los que se estudia una sola caracte1istica. Consideraremos a sus expe1imentos de genética. Después de dos años de estudios
algunas técnicas para predecir el resultado de cruzamientos gené- en Viena, Mendel regresión a Brno, donde enseñó en la escuela y
ticos y luego estudiaremos cruzamientos en los que se analizan comenzó su trabajo experimental con plantas de guisantes. Llevó
dos o 1nás características. Veremos cómo se aplican los principios a cabo experimentos de reproducción desde 1856 hasta 1863 y
de la herencia a cruzamientos genéticos simples; las proporciones presentó públicamente s us resultados en reuniones de la
de descendencia que estos producen son la clave para co1npren-
der cruzamientos más complejos. El capítulo finaliza con una dis-
cusión sobre las pruebas estadísticas empleadas para analizar cru-
zamientos.
A lo largo de todo el capítulo, se entrelazan una serie de con-
ceptos: los principios de Mendel de la segregación y la distJibu-
ción o selección independiente, la probabilidad y el comporta-
mi ento de los cromosomas. En principio, podría parecer que estos
conceptos no están relacionados, pero en realidad son diferentes
aspectos del mismo fenómeno, porque los genes que presentan
segregación y distribución o selección independiente están locali-
zados en cromosomas. Este capítulo tiene por objeto estudiar
estos diferentes conceptos y esclarecer sus relaciones.

3.1 Gregor Mendel descubrió los principios

básicos de la herencia
En 1909, cuando los Davenport especularon acerca de la herencia
del cabello pelin·ojo, el conocimiento de los principios básicos de
la herencia recién se estaba difundiendo entre los biólogos.
Sorprendentemente, Gregor Mendel (1822-1884; fig. 3-1) los
había descubierto alrededor de 44 años antes.
Mendel nació en lo que al1ora for1na parte de la República
Checa. Aunque sus padres eran simples granj eros con escaso
dinero, recibió una sólida educación y fue admitido en el monas-
terio agustino de Brno en septiembre de 1843. Después de gra- Figura 3-1 . Gregor Johann Mendel, al experimentar con guisantes,
duarse del seminario, Mendel fue ordenado sacerdote y asignado descubrió por primera vez los principios de la herencia. (James King-
a un puesto docente en una escuela local. Se distinguió en la Holmes/Photo Researchers).

Natur.forschenden Vereines Brno (Sociedad de Ciencias Naturales
de Brno) en 1865. El artículo de Mendel sobre estas conferencias
se publicó en 1866. Sin embargo, pese al difundido interés por la
herencia, el efecto de su investigación en la comunidad científica
fue mínimo. En aquel momento, nadie pareció advertir que
Mendel había descubierto los principios básicos de la herencia.
En 1868, fue elegido abad de s u monaste1io, y eJ aumento de
los deberes administrativos puso fin a su actividad docente y, por
último, a sus expe1imentos de genética. Murió a los 61 años, el 6
de enero de 1884, sin haber sido reconocido por su contribución
a la genética.
La significación del descubrimiento de Mendel no se reconoció
hasta 1900, cuando tres botánicos (Hugo de Vries, Erich von
Tschermeak-Seysenegg y Carl s Correns) comenzaron a realizar,
en forma independiente, experimentos similares con plantas y lle-
garon a conclusiones semejantes a las de Mendel. Al hallar el ar-
tículo de Mendel, interpretaron sus resultados de acuerdo con sus
principios y llan1aron la atención sobre su trabajo pionero.
El éxito de Mendel
El enfoque de Mendel para el estudio de la herencia fue eficaz por
varias razones. La principal fue su elección del sujeto experünen-
tal, la planta de guisantes Pisum sativum (fig. 3-2), que ofrecía
ventajas claras para la investigación genética. La planta es fácil de
cultivar, y Mendel tenía eJ jardín y el invernadero del monasterio
a su disposición. En comparación con algunas otras plantas, los
guisantes crecen con relativa rapidez y completan toda una gene-
ración en una sola estación de crecimiento. Para los estándares
actuales, una generación por año parece tremendamente lenta
(las moscas de la fruta completan una generación en 2 semanas,
Color de la semilla Forma de la semilla
(endospermo)
Amarillo Verde Lisa ~ugosa
---:;4-- -----
Color de - Forma de
la vaina la vaina
Verde Inflada
Figura 3-2. Mendel usó la planta de guisantes Pisum sativum en sus estudios de herencia. Examinó siete características
que aparecían en las semillas y en las plantas que crecían de estas semillas. (Fotografía de Charles Stirling/Alamy).
Principios básicos de la herencia 47
y las bacterias, en 20 minutos) pero MendeJ no tenía la presión de
publicar con rapidez y podía controlar la herencia de característi-
cas individuales durante varias generaciones. Si hubiera elegido
trabajar con un organismo con un tiempo de generación más pro-
longado (p. ej., caballos) quizás no habría descubierto nunca la
base de la herencia. Asimismo, las plantas de guisantes producen
tnucha descendencia, sus se1nil1as, lo que per1nitió que Mendel
detectara proporciones matemáticas significativas en los rasgos
que observaba en la progenie.
El gran número de variedades de guisantes de las que dispuso
Mendel tan1bién fue crucial, porque estas variedades dife1ian en
diversos rasgos y eran genéticamente puras. Por lo tanto, Mendel
pudo co.1nenzar con plantas de composición genética variable
conocida.
Gran parte del éxito de Mendel puede atribuirse a las siete
características que eligió para el estudio (véase fig. 3-2). Evitó las
caracte1isticas que presentaban un rango de variación; en ca1nbio,
se centró en aquellas que existían en dos for1nas fáciles de distin-
guir, cubiertas de las semillas blancas o grises, semillas lisas o
rugosas y vainas infladas o contraídas.
Por último, M endel tuvo éxito porque adoptó un enfoque
experimental e interpretó sus resultados utilizando las matemá-
ticas. A diferencia de muchos investigadores anteriores que solo
describieron los resultados de los cruzamientos, M endel formu-
ló hipótesis basándose en sus observaciones iniciales y después
realizó cruzamientos adicionales para investigar sus hipótesis.
Confeccionó registros cuidadosos de los individuos de la pro-
genie que tenían cada tipo de rasgo y calculó las proporciones
de los diferentes tipos. Era experto en observar patrones con
detalle y era paciente y perseverante; realizó sus experimen-
tos durante 10 años antes de tratar de escribir sus resultados.
l!iÑTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 13
- 1
..
olor de la cubierta Posición de las flores Longitud
e la semilla del tallo
'
Axial (a lo
Gris Blanco largo del
tallo) "
Terminal
(en el
extremo
del tallo)
Contraída Bajo Alto
48 CAPITULO 3

CONCEPTOS Los genes existen en

diferentes versiones
denominadas alelos.
Gregor Mendel expuso los principios básicos de la herencia y publicó
sus hallazgos en 1866. Gran parte del éxito de Mendel puede atri-
buirse a las siete características que estudió.
Un alelo codifica ... y un alelo diferente
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1 semillas lisas ... _
codifica semillas rugosas. _,

¿ Cuál de los siguientes factores no contribuyó al éxito de Mendel en

su estudio de la herencia?
AleloR
a. La utilización de plantas de guisante
b. Su estudio de los cromosomas de las plantas Diferentes alelos de un gen particular
ocupan el mismo locus en cromosomas
c. Su adopción de un enfoque experimental homólogos.
d. Su aplicación de la matemática
Figura 3-3. En cada locus, un organismo diploide tiene dos alelos
localizados en diferentes cromosomas homólogos. Los alelos aquí
identif icados hacen referencia a rasgos estudiados por Mendel.

Terminología genética

Antes de examinar los cruzamientos de Mendel y las conclusio- L os genes suelen presentarse en diferentes versiones denomina-
nes que extrajo de ellos, será útil repasar algunos términos e1n- das alelos (fig. 3-3). En los cruzamientos de M endel, la fom1a de
pleados con frec uencia en genética (cuadro 3-1). El término gen la semilla es taba detenninada por un gen que existe co1no dos ale-
es una palabra que Mendel nunca conoció. No fue acuñado hasta los diferentes: un alelo codifica se1nillas lisas, y el otro, semillas
1909, cuando el genetista danés Wilhelm Johannsen lo utilizó por rugosas. Todos los alelos de cualquier gen particular se localiL:'lll
primera vez. La definición de gen varía según el contexto de uso; en un lugar específico de un cromosoma denominado locus de ese
por lo tanto, su definición cambiará a medida que exploremos gen. (En español el plural de locus es invariable, locus, como
diferentes aspectos de la herencia. Para nuestro uso actual en el lupus, roncus o virus, a diferencia de lo que ocurre en otros idio-
contexto de cruzamientos genéticos, definiremos gen como un mas que usan la palabra loci.) Por consiguiente, existe un lugar
factor hereditario que determina una característica. específico (un locus) en un cro1noso1na de una planta de guisan-
tes donde se determina la forma de la semilla. Este locus podría
estar ocupado por un alelo par a semillas lisas o uno para semillas
rugosas. Utilizaremos el término alelo para referimos a una ver-
sión específica de un gen, y el término gen para referirnos de
Cuadro 3-1 Resumen de términos genéticos importantes
manera más general a cualquier alelo de un locus.
Término Definición El genotipo es el conjunto de alelos que tiene un organismo.
Un organismo diploide con un genotipo que consiste en dos ale-
Gen Factor hereditario (región de DNA) que los idénticos es homocigótico para ese locus. Uno que tiene un
ayuda a determinar una característica genotipo formado por dos alelos diferentes es heterocigótico para
el locus.
Alelo Una de dos o más formas alternativas
Otro término importante es fenotipo, que es la n1anifestación o
de un gen
aparición de una característica. Un fenotipo puede referirse a
Locus Lugar específico de un cromosoma ocu- cualquier tipo de caracterfstica: física, fisiológica, bioquímica o
pado por un alelo conductual. Por lo tanto, la condición de tener semill as lisas es un
fenotipo, un peso corporal de 50 kilogramos (50 kg) es un fenoti-
Genotipo Conjunto de alelos de un organismo po y presentar anemia drepanocítica es un fenotipo. En este libro,
individual los términos característica y carácter se refieren a una particula-
Het erocigot o Organismo ind ividual que tiene dos ale-
ridad general, como el color de ojos; los términos rasgo y fenoti-
po se refieren a manifestaciones específicas de esa característica,
los diferentes en un locus
como ojos azules o marrones.
Homocigoto Organismo individual que tiene dos ale- Un determinado fenotipo surge de un genotipo que se desarro-
los iguales en un locus lla en un medio particular. El genotipo determina el potencial de
desarrollo y establece ciertos límites o fronteras para ese desarro-
Fenotipo o rasgo Aparición o manifestación de una llo. Los efectos de otros genes y de factores ambientales deter1ni-
característica nan cómo se desairolla el fenotipo dentro de esos límites, y el
Característica o carácter At ributo o característica que t iene un equilibrio entre estos efectos varía entre las distintas característi-
organismo cas. En algunas características, la diferencia entre los fenotipos
depende principalmente de diferencias del genotipo. En los gui-
 Principios básicos de la herencia 49

santes de Mendel, por ejemplo, el genotipo, no el ambiente, deter- Experimento

minó en gran medida la forma de las semillas. En otras caracte-
Pregunta: cuando se cruzan guisantes con dos rasgos
1ísticas, las diferencias ambientales son más importantes. La altu-
diferent es (semillas lisas y rugosas), ¿su progenie mostrará
ra alcanzada por un roble en la madurez es un fenotipo que está uno de esos rasgos, los dos o un rasgo intermedio?
muy influenciado por factores a1nbientales, como la disponibili-
dad de agua, luz solar y nutrientes. No obstante, el genotipo del
árbol unpone, de todos ,nodos, algunos lí1nites a su altura: un
roble nunca crecerá para alcanzar 300 metros (casi 1000 pies) de
altura, no importa cuánta luz solar, agua y fertilizante se le pro-
Para cruzar las
vea. Por lo tanto, au n la altura de un roble está determinada, en diferentes
cierto grado, por genes. E n n1uchas características, tanto los genes variedades de
como el ambiente son Ílnportantes para deter1ninar diferencias guisantes, Mendel
extrajo las anteras
fenotípicas.
de las flores para
Un concepto obvio pero importante es que solo se heredan los prevenir la
alelos del genotipo. Aunque el fenotipo está determinado, por lo ~ Flor autofecundación ...
menos en cierta medida, por el genotipo, los organismos no trans- X g ...y espolvoreó los
O Flor
miten sus fenotipos a la siguiente generación. La distinción entre 1 estigmas con polen
genotipo y fenotipo es uno de los principios más ünportantes de Cruzamiento 1 de una planta
la genética 1noderna. La siguiente sección describe la observación l diferente.
cuidadosa de Mendel de los fenotipos a lo largo de varias genera- + 1polen fecundó los
óvulos, que se
ciones de experimentos de reproducción. Estos experimentos le
permitieron deducir no solo los genotipos de plantas individuales,
~e~~~~,.,,_ -==~ desarrollaron para
convertirse en sem illas.
sino también las reglas que rigen su herencia. , Las semillas
crecieron para
convertirse en
lantas.

CONCEPTOS
Generación P Semillas lisas
Semillas rugosas
Cada fenotipo es el resu ltado de un genotipo que se desarrolla den- homocigóticas homocigóticas
tro de un ambiente específico. Se heredan los alelos del genotipo, no
el fenotipo. X
■ Mendel cruzó
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2 dos variedades
Cruzamiento 1
i- -~=:::::. . homocigóticas
¿Cuá l es la diferencia entre un locus y un alelo? ¿Y entre genotipo y de guisantes.

fenotipo?
Generación F
1

X
3.2 Los cruzamientos monohíbridos • Todas las semillas F1
revelan el principio de-segregación fueron lisas. Mendel
Auto-fecun- permitió la autofecun-
y el concepto de dominancia dación dación de las plantas
que crecieron a partir
Mendel comenzó con 34 variedades de guisantes e invirtió 2 de estas semillas.
años seleccionando las variedades que usaría en sus experimen-
Resultados
tos. Verificó que cada variedad fuera genéticamente pura (homo-
cigótica para cada uno de los rasgos que eligió para estudiar) cul- Generación F Fracción de semillas
2
tivando las plantas durante dos generaciones y confirmando que de Ia progenie ■ --•-3A-:ii -de
- ,a-s------..l
toda la descendencia fuera igual a sus progenitores. Después, semiUas F
2
realizó una serie de cruzan1ientos entre las distintas variedades. 5474 semi llas lisas ¼ liso fu eron lisas y
Aunque los guisantes suelen autofecundarse (cada planta se ~ ¼ fueron
rugosas, una
cruza consigo misma), Mendel efectuó cruzamientos entre dife-
rentes plantas abriendo los capullos antes de que las anteras
1850 semillas rugosas ¼ rugoso l relación 3:1. ,

(órganos sexuales 111asculinos) estuvieran totalmente desarrolla-

das , extrayendo las anteras y, después, pulverizando los estigmas
(órganos sexuales femeninos) con polen de las anteras de una
planta diferente (fig. 3-4).
Mendel comenzó por estudiar los cruzamientos monohíbri-
dos, es decir, aquellos entre progenitores que diferían en una sola
Conclusión: los rasgos de las plantas progenitoras no se
mezclan. Aunque las plantas F presentan el f en otipo de un
1
progenitor, se t ransmiten ambos rasgos a la progenie F con
2
una relación 3: 1.
Figura 3-4. Mendel llevó a cabo cruzamientos monohíbridos.
50 CAPITULO 3

característíca. E n un experimento, cruzó una planta de guisantes Mendel cruzó una planta homocigóti-
genéticamente pura (homocigótica) para semillas lisas con una ca para semillas lisas (RR) con una
planta homocigótica para semillas
genéticamente pura para semillas rugosas (véase fig. 3-4). Esta rugosas (rr)
primera generación de un cruzamiento es la generación P (a)
(parental).
Generación P Semillas lisas Sem illas
Después de cruzar las dos variedades en la generación P,
homocigóticas rugosas
Mendel observó la descendencia resultante del cruzamiento. E n homocigóticas
relación con las características de la semilla, por ejemplo la
fo1ma, el fenotipo se desarrolla apenas la semilla madura, porque X
los rasgos de la semilla están determinados por el embrión recién RR rr
formado dentro de ella. Para las características asociadas con la '
Formación de gametos 1Formación de gametos!
propia planta, por ejemplo el largo del tallo, el fenotipo no se
desarrolla hasta que la planta brota de la semi ll a. Por lo tanto, t)Los dos alelos de cada 1 ¡
para observar estas caracte1isticas, .M.e ndel debía esperar hasta la planta se separaron al :::-=,- Gametos 0
primavera siguiente, plantar las semillas y observar los fenotipos formarse los gametos;

de las plantas germinadas a partir de estas. I ~-n alelo fue hacia

La descendencia de los progenitores de la generación P es la
~ da gameto. _ __,J Fecunaación

generación F1 (filial). Cuando M endel examinó la F 1 de este cru- (b)

za1niento, observó que las semillas expresaban solo uno de los
( Generación F1
fenotipos presentes en la generación parental: todas las semillas
Semillas lisas
eran lisas (F1). Realizó 60 de estos cruzainientos y obtuvo siem-
pre este resultado. Además, reali zó cruzamientos recíprocos: en Los gametos se
fusionaron para producir
uno de los cruza1nientos, el polen (gameto masculino) provenía
de una planta de semillas lisas, y en su cruzamiento recíproco, se
plantas F1 heterocigóticas
que tenían semillas lisas,
r=====--- Rr
porque liso es dominante
ton1ó polen de una plai1ta de seinillas rugosas. Estos cruza1nien- sobre rugoso.
tos recíprocos dieron el mismo resultado: todas las semillas de la 1Formación de gametos
F 1 fueron lisas. 1
Mendel no se conformó con el análisis de las senúllas produci-
das por estos cruzamientos monohíbridos. En la prin1avera , Mendel permitió la Gametos
siguiente, plantó las se1n illas F 1, cultivó las plantas que brotaron autofecundación de F
1
y dejó que se autofecundaran, lo que produjo una segunda gene- para producir la F . ,,
ración, la generación F 2 (segunda generación filial). Los dos
rasgos de la generación P aparecieron en la generación F2; (c)
Mendel contó 5474 semillas lisas y 1850 semillas rugosas en la F neración F2
Liso Liso Rugoso
F 2 (véase fig. 3-4). Advirtió que el número de semillas lisas y ¾ liso
rugosas representaba una proporción aproximada de 3 a 1; es ¼ rugoso
decir, que alrededor de 3/4 de las semillas de F 2 eran lisas, y¼ de .A ¼ RR ¼ Rr ¼ rR
las semillas eran rugosas. Realizó cruza1nientos monohíbridos , ..que apareció en
una proporción 3:1
para las siete características que estudió en la planta de guisantes, de liso respecto de
Formación de gameto
y en todos los cruzamientos obtuvo el mismo resultado: todas las rugoso.
F 1 se asemejaban a solo uno de los dos progenitores, pero ambos
rasgos parentales aparecían en la F 2 en una proporción aproxima- Gametos® @ 0 0 \Ji) 0 0
da de 3: l. , Mendel también
1 ,. permitió la autofecun
Autofecundación
\._ dación de F .,.
Qué revelan los cruzamientos (d)
monohíbridos Generación F3
Liso
----~A
r
Liso
~---
Rugoso
\ - '
Rugoso
Primero, Mendel pensó que, si bien las plantas F 1 presentaban el ... para Liso
fenotipo de solo uno de los progenitores, debían heredar factores producir
genéticos de a1nbos progenitores, porque transmitían an1bos feno- semillas F , RR RR rr rr
3
tipos a la generación F 2. La presencia de semillas lisas y rugosas RrrR
en las plantas F 2 solo podía explicarse si las plantas F I tenían los
factores genéticos tanto lisos co1no n 1gosos que habían heredado Los guisantes lisos Las plantas
homocigóticos Los guisantes rugosos
de la generación P. Concluyó en que, por lo tanto, cada planta heterocigóticas
homocigóticos
produjeron plantas produjeron semillas
poseía dos factores genéticos que codificaban una caracte1istica. solo con guisantes lisas y rugosas en una produjeron plantas solo
Los factores genéticos (ahora denominados alelos) que descu- lisos. proporción de 3: 1. con guisantes rugosos.
brió Mendel se designan, por convención, con letras; el alelo para
semillas lisas suele representarse con R, y el alelo pai·a semillas Figura 3-5. Los cruzamientos monohíbridos de Mendel revelaron el
1ugosas, con r. Las plantas de la generación P del cruzamiento de principio de la segregación y el concepto de dominancia.
 Principios básicos de la herencia 51

Mendel tenían dos alelos idénticos: RR en el progenjtor de semj- Comparación de los principios de la
ll as lisas y rr en el progenitor de semillas rugosas (fig. 3-Sa). segregación y la distribución o selección
La segunda conclusión que extrajo Mendel de sus cruzamientos independiente
monohfbridos fue que los dos alelos de cada planta se separaban
al formarse los gametos, y que cada alelo iba a un gameto dife- Etapa de la
rente. Cuando dos ga1netos (uno de cada progerutor) se unían para Principio Observación meiosis*
formar el cigoto, el alelo 1naterno y eJ paterno se juntaban para pro-
Segregación 1. Cada organismo indi- Antes de la
ducir el genotipo de la descendencia. Por consiguiente, las plantas
(primera ley vidua l tiene dos alelos meiosis
de la F 1 de Mendel heredaban un alelo R de la planta de semillas
de Mendel) que codifican un rasgo
lisas y un alelo r de la planta de semillas rugosas (fig. 3-Sb). Sin
2. Los alelos se separan Anafase 1
embargo, solo el rasgo codificado por el alelo liso (R) se observa-
cuando se forman los
ba en la F 1: toda la progenie F 1 tenía semillas lisas. Mendel
gametos
llamó dominantes a aquellos rasgos que aparecían sin modifi-
3. Los alelos se separa n Anafase 1
carse en la descendencia F 1 heterocigótica y recesivos a aquellos
en proporciones
que desaparecfan. A menudo, los alelos para rasgos dominantes
iguales
se simbolizan con letras mayúsculas (p. ej., R), mientras que los
alelos para rasgos recesivos suelen simbolizarse con letras
Distribución o Alelos de locus diferentes Anafase 1
minúsculas (p. ej., r). Cuando los alelos dominantes y recesivos
selección indepen- se separan independien-
están juntos, el alelo recesivo se encuentra erunascarado o su-
diente (segunda temente
primido. E ste concepto de dominancia fue la tercera conclusión
ley de Mendel)
importante que Mendel extrajo de sus cruzamientos monobí-
bridos.
*Se asume que no se produce entrecruzamiento . Si hay entrecruzamiento, la
La cuarta conclusión fue que los dos alelos de una planta indi- segregación y la distribución o selección independiente también pueden tener
vidual se separan con igual probabilidad para ingresar en los lugar en la anafase 11 de la meiosis.
gametos. Cuando las plantas de la F 1 heterocigótica (con genoti-
po Rr) producían los gametos, la mitad de los gametos recibían el
alelo R para semillas lisas, y la otra mitad, el alelo r para semillas
rugosas. Luego, los gametos se apareaban al azar para formar los cigóticas (Rr), de manera que produjeron 1/4 de semillas RR
siguientes genotipos en proporciones equivalentes en la F 2: RR, (lisas), 1/2 Rr (lisas) y 1/4 rr (rugosas), lo que determinó una pro-
Rr, rR, rr (fig. 3-Sc). Como liso (R) es dominante respecto de porción de 3:1 de semillas lisas respecto de rugosas en la gene-
rugoso (r), en la F 2 aparecían tres semillas lisas (RR., Rr, rR) por ración F 3. Alrededor de 1/3 de las plantas cultivadas a partir de
cada semilla rugosa (rr). Esta re.lación 3: l de progenie lisa res- semi ll as lisas fueron del segundo tipo, produjeron solo el rasgo
pecto de ru gosa que Mendel observó en la F 2 solo podía obtener- de semillas lisas en la F 3. Estas plai1tas eran homocigóticas para
se si los dos alelos de un genotipo se separaban para ingresar en el alelo liso (RR) y, por lo tanto, solo podían producir descenden-
los gam etos con igual probabilidad. cia lisa en la generación F 3. Mendel plantó las semillas obtenidas
Las conclusiones que extrajo Mendel sobre la herencia a partir de la F 3 y llevó a cabo tres ciclos más de autofecundación. En
de los cruzamientos monohíbridos se han desaiTollo y f orrnaliza- cada generación, 2/1 de las plantas crecidas de semillas lisas pro-
do mejor en el principio de la segregación y el concepto de domi- ducían descendencia con semillas lisas y rugosas, mientras que
nancia. El principio de la segregación (primera ley de Mendel, 1/3 producía solo descendencia con semillas lisas. Estos resulta-
véase cuadro 3-2) afirma que cada organismo diploide tiene dos dos son por completo consistentes con el principio de la segrega-
. ~

alelos pai·a una cai·acterística determinada. Estos dos alelos se ClOn.

segregan (separan) cuando se forman los gametos, y un alelo va
hacia cada gameto. Más aún, los dos alelos se segregan en los
gametos en proporciones iguales. El concepto de dominancia
establece que, cuando hay dos alelos diferentes en un genotipo, CONCEPTOS
solo se observa el rasgo codificado por uno de ellos (el alelo
"dominante") en el fenotipo. El principio de la segregación afirma que cada organismo individual
Mendel conf1rmó estos principios al permitir que sus plantas F 2 tiene dos alelos que pueden cod ificar una característica . Estos alelos
se autofecundaran para producir la generación F 3. Observó que se segregan cuando se forman los gametos y un alelo va hacia cada
las plantas derivadas de las se1nillas rugosas (las que presentabai1 gameto. El concepto de dominancia establece que, cuando los dos
el rasgo recesivo, rr) producían LLna F3 en la que todas las plantas alelos de un genotipo son diferentes, solo se observa el rasgo codifi-
tenían semillas rugosas. Como estas plantas de semillas rugosas cado por uno de ellos, el alelo "dominante".
eran homocigóticas para los alelos rugosos (rr), solo podfan
transmitir a su progenie el alelo rugoso (fig. 3-5d). ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
Las plantas que crecieron de semillas lisas -el rasgo do1ninan-
te- cayeron en dos tipos (véase fig. 3-5c). En la autofecundación, ¿ Cómo supo Mendel que cada una de sus plantas de guisantes tenía
alrededor de 2/3 de estas plantas produjeron semillas tanto redon- dos alelos que codificaban una característica?
das como rugosas en la generación F 3. Estas plantas eran hetero-
52 CAPITULO 3

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Relación de los cruzamientos genéticos con la meiosis
Hemos visto cómo los resultados de los cruzamientos monohíbridos se
explican mediante el principio de la segregación de Mendel. Muchos
estudiantes se entretienen dilucidando cruzamientos genéticos, pero
se frustran ante el carácter abstracto de los símbolos. Quizá usted sien-
ta lo mismo con respecto a este punto . Tal vez se pregunte: "¿ Qué
representan en rea lidad estos símbolos? ¿ Qué sign ifica el genotipo RR
en relación con la biología de un organismo?". Las respuestas a estas
preguntas se ha llan en la relación entre los símbolos abst ractos de los
cruzam ientos, y la estructura y el comportamiento de los cromosomas,
los depositarios de la información genética (véase Cap. 2).
En 1900, cuando se redescubrió el trabajo de Mendel y los bió logos
comenzaron a aplicar sus principios de la herencia, la relación entre los
genes y los cromosomas todavía no era clara. La teoría de que los ge-
nes se localizan en los cromosomas (teoría cromosómica de la he-
rencia) f ue postulada a principios del siglo x1x por Walter Sutton, un
est udiante graduado de la Columbia University. Mediante el estud io
cuidadoso de la meiosis en insectos, Sutton documentó que cada par
de cromosomas homólogos está formado por un cromosoma materno
y uno paterno. Al mostrar que estos pares se seg regan independient e-
mente en los gametos durante la meiosis, concluyó que este proceso

(a)

Los dos alelos del genotipo Rr R r

se localizan en cromosomas
homólogos ...

___,__
Repli cación
_,

fi S...dequelasemeiosis.
replican e
_n- la_f_as_e_d'í. cromosómica

'--

R R r

En la profase I de la meiosis,
puede haber, o no, entrecru-
zamiento.
Prof ase 1
Ausencia de entrecruzamiento Entrecruzamiento

(b) (c)

R Rr

ó"Eri 1a anafase 1, se separan los

cromosomas homólogos.
Anafase 1 Anafase 1
i no se ha producido
entrecruzamiento, las dos
cromátidas de cada
R r cromosoma son idénticas y
se segregan en la anafase 11.

1:jsi ha habido entrecru- -✓

Anafase 11 Anafase 11 zamiento, las dos cromátidas Anafase 11 Anafase 11
ya no son idénticas, y los
diferentes alelos se segregan 1
en la anafase 11. _ _ __,~

R R ,. ,. R r R r

Figura 3-6. Resultados de la segregación secundaria a la separación de cromosomas homólogos durante la meiosis.

es la base biológica de los principios de la herencia de Mendel.
Aproximadamente en la misma época, el citólogo y embriólogo ale-
mán Theodor Boveri llegó a conclusiones similares.
Los símbolos empleados en los cruzamientos genéticos, como R y
r, son solo notaciones taquigráficas para secuencias particulares de
DNA de los cromosomas que codifican fenotipos particulares. Los dos
alelos de un genotipo se encuentran en cromosomas diferentes pero
homólogos. Un cromosoma de cada par homólogo se hereda de la
madre, y el otro se hereda del padre. En la fase S de la interfase meió-
t ica, se replica cada cromosoma, lo que produce dos copias de cada
alelo, una en cada cromátida (fig. 3-6a). Los cromosomas homólo-
gos se segregan en la anafase 1, y de esta manera se separan los dos
alelos diferentes (fig . 3-6b y e). La segregación cromosómica es la
base del principio de segregación. En la anafase II de la meiosis, se
separan las dos cromátidas diferentes de cada cromosoma replicado;
as!, cada gameto resultante de la meiosis lleva un único alelo en cada
locus, como predice el principio de segregación de Mendel.
Si en la profase I de la meiosis ha habido un entrecruzamiento, las
dos cromátidas de cada cromosoma replicado ya no son idénticas, y
en la anafase I y la anafase II se produce la segregación de alelos dife-
rentes (véase fig. 3-6c). Sin embargo, Mendel no conocía la existen-
cia de los cromosomas; formuló sus principios de la herencia basán-
dose por entero en los resultados de los cruzam ientos que llevó a
cabo. No obstante, no debemos olvidar que estos principios funcio-
nan porque se basan en el comportamiento de los cromosomas
durante la meiosis. L.::►..!!!::!!:::!!:!::!!:!.!:!~2::!:!::!:!~:!!!:!!=!=!:::~~2..J
El carácter molecular de los alelos
Dediquemos un momento a considerar con mayor detalle qué es
con exactitud un alelo y cómo determina el fenotipo. Si bien
Mendel no tenía información acerca del carácter físico de los fac-
tores genéticos de sus cruzamientos, ahora los genetistas moder-
nos han determinado la base molecular de estos factores y la
manera en que codifican un rasgo como guisantes rugosos.
.L os alelos, como R y r que codifican los gu isantes lisos y rugo-
sos, suelen representar secuencias específicas de DNA. El locus
que determina si un guisante es liso o rugoso es una secuencia de
DNA del cromosoma 5 del guisante que codifica una proteína
denominada isoforma 1 de la enzima ranlificadora del almidón
(SBEI). El alelo R, que produce semillas lisas en plantas de gui-
santes, codifica una forma funcional normal de SBEI. Esta enzi-
ma convierte una forma lineal de almidón en otra muy ramifica-
da. El alelo r, que codifica semillas rugosas, es una secuencia de
DNA que contiene una mutación o en·or; codifica una forma no
activa de la enzima que no produce la forma ramificada del almi-
dón e induce acumulación de sacarosa dentro del guisante r r.
Como el guisante rr contiene una gran cantidad de sacarosa, la
semilla en desan:oll o absorbe agua y se hincha. Más tarde, el gui-
sante pierde agua a medida que maduTa. Dado que los guisantes
rr absorbieron más agua y se expandieron más durante el desarro-
llo, pierden una mayor cantidad de agua durante la 1naduración y,
después, adquieren un aspecto ajado o rugoso. El alelo r para
semillas rugosas es recesivo, porque la presencia de un solo alelo
R en el heterocigoto codifica suficiente SBEI para producir almi-
dón ramificado y semillas lisas.
La investigación ha revelado que eJ alelo r contiene unos 800
pares de bases extra que alteran la secuencia de codificación nor-
Principios básicos de la herencia 53
mal deJ gen. El DNA extra parece provenir de un elemento trans-
ponible, un tipo de secuencia de DNA que tiene la capacidad de
movilizarse de un lugar del genoma a otro, lo que se analizará
mejor en el capítulo 18.
Predicción de los resultados
de cruzamientos genéticos
Uno de los objetivos de Mendel al llevar a cabo sus experimentos
con plantas de guisantes fue desarrollar una manera de predecir el
resultado del cruzamiento entre plantas con diferentes fenotipos.
En esta sección, usted aprenderá, primero, un método abreviado,
simple, para predecir los resultados de cruzamientos genéticos (el
cuadrado de Punnett), y después aprenderá a aplicar la probabili-
dad para predecir los resultados de cruzamientos.
CUADRADO DE PUNNETT En 1917, el genetístainglés Reginald
C. Punnett desarrolló el cuadrado de Punnett. Para ilustrarlo, exa-
minemos otro cruzamiento realizado por Mendel. AJ cru zar dos
variedades de guisantes de diferente altura, Mendel estableció
que alto (T) era do1ninante sobre bajo (t). Investigó su teoría con-
cerniente a la herencia de rasgos dominantes cruzando una plan-
ta F 1 alta heterocigótica (Tt) con la variedad parental homocigó-
tica (tt). Este tipo de c1u zainiento entre un genotipo F 1 y uno u
otro de los genotipos parentales se denomina cruzamiento retró-
grado.
Para predecir los tipos de descendencia originados por el cru-
zamiento retrógrado, determinarnos primero qué gametos serán
producidos por cada progenitor (fig. 3-7a). El principio de la
segregación nos enseña que los dos alelos de cada progenitor se
separan y q ue un alelo se dirige a cada gameto. Todos los game-
tos de la planta homocigótica baja tt recibirán un solo alelo bajo
(t). En este cruzamiento, la planta alta es heterocigótica (Tt), de
manera que el 50% de sus gametos recibirán un alelo alto (T) y el
otro 50% recibirá un alelo bajo (t).
Para construir un cuadrado de Punnet, se dibuja una grilla y
se colocan los gametos producidos por un progenitor a lo largo del
borde superior, y los gametos producidos por el otro progenitor a
lo largo de] borde izquierdo en sentido descendente (fig. 3-7b).
Cada celda (un bloque dentro del cuadrado de Punnett) contiene
un alelo de cada uno de los gametos correspondientes, lo que
genera el genotipo de la progenie producida por la fusión de esos
gametos. En la celda superior de la izquierda del cuadrado de
Punnet de la figura 3-7b, un gameto que contiene T de las plan-
tas altas se une con un gameto que contiene t de la planta baja, lo
que da el genotipo de la progenie (Tt). Es útil escribir el fenotipo
expresado por cada genotipo; aquí, la progenie será alta, porque
el alelo alto es dorninante respecto del alelo bajo. Este proceso se
repite para todas las celdas del cuadrado de Punnett.
Si1nple1nente contando, podemos dete1minar los tipos de pro-
genie producidos y sus proporciones. En la figura 3-7b, dos cel-
das contienen progenie alta (Tt) y dos celdas contienen progenie
baja (tt); por consiguiente, la proporción genotípica esperada para
este cruzanliento es 2 Tt a 2 tt (una proporción 1: 1). Otra manera
de expresar este resultado es decir que espera1110s que la 1/2 de la
progenie tenga genotipo Tt (y fenotipo alto) y la 1/2 de la proge-
nie tenga genotipo tt (y fenotipo bajo). En este cruzamiento, la
proporción genotípica y la fenotípica son iguales, pero no siem-
pre el resultado debe ser así. Intente co111pletar un cuadrado de
54 CAPITULO 3

LA PROBABILIDAD COMO HERRAMIENTA DE LA GENÉTICA

Otro método para detern1inar el resultado de un cruzamiento
(a) genético es aplicar las reglas de probabilidad, como hizo Mendel
con sus cruzamientos. La probabilidad expresa la posibilidad de
Generación P que ocurra un determinado suceso, dividido por el nú1nero total
de resultados posibles. Es el número de veces que ocurre un even-
to particular dividido por el nú1nero total de resultados posibles.
Por ejemplo, un mazo de 52 cartas contiene un solo rey de cora-
zones. L a probabilidad de extraer una carta del mazo al azar y
sacar el rey de corazones es de 1/s2, porque solo hay una carta que
es el rey de corazones (un evento) y hay 52 cartas que se pueden
extraer del mazo (52 resultados posibles). La probabilidad de
extraer una carta y obtener un as es de 4/s2, porque hay cuatro car-
Tt
tas que son ases (cuatro eventos) de un total de 52 cartas (resulta-
Gametos •
®([J
dos posibles). La probabilidad se puede expresar como una frac-
ción (4/s2 en este caso) o como un número decimal (0,077 en este
caso).
Fecundación La probabilidad de un evento particular puede determinarse
conociendo algo acerca de cómo y con qué frecuencia tiene lugar
(b)
el evento. Por ejemplo, sabemos que la probabilidad de tirar un
Generación F
1
dado de seis caras y que salga un cuatro es 4/ 6, porque el dado
tiene seis caras y todas ellas tienen igual probabilidad de quedar
ftJ ~ hacia arriba. Entonces, en este caso, comprender la naturaleza del
Tt Tt
,,
.} evento (la for1na del dado arrojado) permite determinar la proba-
bilidad. En otros casos, para determinar esa probabilidad se
V ~
requieren numerosas observaciones. Cuando el servicio meteoro-
Alto ~f-- Alto .. lógico anuncia que existe un 40% de probabilidad de lluvias en un
ft tt día determinado, esa probabilidad se calculó sobre la base de la
'/ )
observación de numerosos días de condiciones atmosféricas simi-
'---' lares en los que llovió el 40% de las veces. En este caso, la pro-
Bajo :-t Bajo babilidad se ha determinado en forma empú·ica (por observación).

LA REGLA DE LA MULTIPLICACIÓN Dos reglas de probabilidad

Conclusión: proporción genotípica 1 Tt : 1 tt
proporción fenotípica 1 alto : 1 bajo
Figura 3-7. El cuadrado de Punnett puede utilizarse para determinar
los resultados de un cruzamiento genético.
Punnett para el cruzamiento en el que plantas F 1 de semillas lisas
de la figura 3-5 se autofecundan (debe obtener una proporción
fenotípica de 3 lisas a 1 rugosa, y una relación genotípica de 1 RR
a 2 Rr a 1 rr).
CONCEPTOS
El cuadrado de Punnett es un método simple para predecir las pro-
porciones genotfpicas y fenotípicas de la progenie de un cruzamien-
to genético.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
Si se realiza un cruzamiento retrógrado entre una planta F1 represen-
tada en la figura 3-5 y el progenitor de semillas lisas, ¿ qué propor-
ción de la progenie tendrá sem illas rugosas? (Utilice un cuad rado de
Punnett).
a. 3/4 c. ¼
b. 1/z d. o
son útiles para predecir las proporciones de descendencia produ-
cida en cruzamientos genéticos. La primera es la regla de la mul-
tiplicación, que afirma que la probabilidad de que dos o más
eventos independientes ocun·an de manera simultánea se calcula
multiplicando sus probabilidades independientes.
Para ilustrar el uso de la regla de la multiplicación, utilizare1nos
de nuevo el ejemplo de tirar el dado. La probabilidad de arrojar
un dado y obtener un cuatro es 1/ 6. Para calcular la probabilidad
de arrojar el dado dos veces y obtener un cuatro las dos veces,
podemos aplicar la regla de la multiplicación. La probabilidad
de obtener un cuatro en el primer tiro es 1/6, y la probabilidad de
obtener un cuatro en el segundo tiro es 1/6; por lo tanto, la pro-
babilidad de obtener un cuatro en ambos tiros es 1/6 x 1/6 = 1136
(fig. 3-Sa). El indicador clave para aplicar la regla de la multipli-
cación es la conjunción y; en el ejemplo que acabamos de consi-
derar, quisimos averiguar la probabilidad de obtener un cuatro en
el pri1ner tiro y un cuatro en el segundo tiro.
Para que la regla de la multiplicación sea válida, los eventos
cuya probabilidad conj unta se quiere calcular deben ser indepen-
dientes: el resultado de uno no debe influir en el resultado del
otro. Por ejen1plo, el número que sale en el primer tiro del dado
no ejerce ninguna influencia sobre el que sale en el segundo tiro,
de manera que estos eventos son independientes. En crunbio, si
deseamos conocer la probabilidad de ser golpeados en la cabeza
por un martillo y de ir al hospital ese mismo día, no podtíamos
aplicar simplemente la regla de la multiplicación y multiplicar los
dos eventos juntos, porque ellos no son independientes: sin duda,
 Principios básicos de la herencia 55

recibir un golpe en la cabeza con un martillo influye en La proba- (a) La regla de la multiplicación
bilidad de ir al hospital.
lí5iusted tira un dado... )
REGLA DE LA ADICIÓN La segunda regla de probabilidad que se
utiliza con frecuencia en genética es la regla de la adición, que
afirma que la probabilidad de uno de dos eventos 1nutua1nente
r
, / g ... en un gran número de tiradas
~ de muestra, en promedio, una
excluyentes se calcula sumando las probabilidades de estos even- Tirada 1
tos. Consideremos esta regla en términos concretos. Para calcular
la probabilidad de tirar un dado una sola vez y obtener un tres o
un cuatro, aplicaríamos la regla de la adición y sumaríamos la
,

\0
~

r
de cada seis veces saldrá un cuatro ...

probabilidad de obtener un tres ( 1/6) a la probabilidad de obtener

un cuatro (tainbién, 1/6) o 1/6 + 1/6 = 2/6 = 1/3 (fig. 3-Sb). El indi-
cador clave pai·a aplicar la regla de la ad ición es la conjunción o. 11-..de manera que la probabilidad
Para que la regla de la adición sea válida, los eventos cuya pro- de que salga un cuatro en
babilidad se calcula deben ser mutuamente excluyentes, lo que cualquier tirada es 1/6···
significa que un evento descruta la posibilidad de que ocurra el , Si usted vuelve j ·
otro evento. Por ejemplo, usted no puede arrojar un solo dado tirar el dado, ...
solo una vez y obtener tanto un tres como un cuatro, porque solo
una cara del dado puede quedar hacia arriba. Estos eventos son
... su probabilidad de que
mutuamente excluyentes. Tirada 2
salga cuatro vuelve a ser 116 ...

~e
~
CONCEPTOS
La regla de la mu ltiplicación afirma que la probabilidad de que ocu-
• ... de manera que la probabilidad de que salga
rran en forma simu ltánea dos o más eventos independientes se ca l-
un cuatro en la primera tirada y la segunda
cu la multiplicando sus probabilidad independientes. La regla de la tirada es 116 x 116 = 1136_
adición afirma que la probabilidad de que ocurra cua lquiera de dos o
más eventos mutuamente excluyentes se calcula sumando sus proba-
(b) La regla de la adición
bilidades.
Si usted tira un dado, .. .
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5 ,
... en promedio, una de cada
Si la probabilidad de tener sangre de tipo A es 1/s
y la probabilidad seis veces, saldrá un tres ...
de tener sangre de tipo O es ½, ¿cuál es la probabilidad de tener
sangre de tipo A o de tipo O?
a. 5/s c. 1/,o
íl . . y una de cada seis
veces, saldrá un cuatro.

b. ½ d. 1h6

@~ decir, la probabilidad de sacar un 1

APLICACIÓN DE LA PROBABILIDAD A LOS CRUZAMIENTOS GE-
NÉTICOS Las reglas de probabilidad de la multiplicación y la
l tres o un cuatro es 116 + 116 = 216 = 113 .
1
adición pueden utilizarse en lugar del cuadrado de Punnett para
predecir los rasgos de la progenie esperada de un cruzamiento Figura 3-8. Las reglas de la multiplicación y de la adición pueden uti-
genético. En primer término, consideremos un cruzamiento entre lizarse para determinar la probabilidad de combinaciones de eventos.
las plantas de guisantes heterocigóticas para el locus que determi-
na la altura, Tt x Tt. La mitad de los gametos producidos por cada
una de las plantas llevará el alelo T, en tanto que la otra mitad lle- re calcular la probabilidad de recibir un alelo T del priiner proge-
vará el alelo t; por lo tanto, la probabilidad pru·a cada tipo de nitor y un alelo T del segundo progenitor: dos eventos indepen-
gameto es ½. dientes. Los cuatro tipos de progenie de este cruzamiento y sus
Es posible combinar los gametos de los dos progenitores de probabilidades asociadas son las siguientes:
cuatro maneras diferentes para producir la descendencia. Si apli-
ca1nos la regla de la multiplicación, podemos determinar la pro- 1T (gameto T y gameto 1) l/2 X l/2 = l/4 alto
babilidad para cada tipo posible. Por ejemplo, para calcular la Tt (gameto T y gameto t) 1/2 X l/2 = 1/4 alto
probabilidad de obtener descendientes IT, multiplicamos la pro-
babilidad de recibir un alelo T del primer progenitor ( 1/2) por la tT (gameto t y garneto n 1/2 X 1/2 =¼ alto
de recibir un alelo T del segundo progenitor (½). En este caso, tt (gameto t y gameto t) 1/2 X 1/2 =¼ bajo
corresponde utilizar la regla de la n1ultiplicación porque se quie-
56 CAPITULO 3

Observe que existen dos formas de generar una progenie hetero-

cigótica: un heterocigoto puede recibir un alelo T del prin1er pro-
genitor y un alelo t del segundo progenitor, o recibir un alelo t del
primer progenitor y un alelo T del segundo progenitor.
Después de determinar las probabilidades de obtener cada tipo
de progenie, podemos utilizar la regla de la adición para estable-
cer las proporciones :fenotípicas resultantes. Debido a la dominan-
cia, una planta alta puede tener el genotipo TT, Tt o tT; entonces,
si aplicamos la regla de la adición, podemos calcular la probabi-
lidad de la progenie alta, que será 1/ 4 + ¼ + 1/4 :._ 3/4 Dado que un
único genotipo (tt) codifica el fenotipo bajo, la probabilidad de
obtener una progenie baja es de ¼.
Hasta ahora he1nos presentado dos métodos para resolver los
cruzamientos genéticos: el cuadrado de Punnett y el método de
las probabilidades. En este punto, usted debe estar preguntándose:
"¿Cuál es el sentido de hacer cálculos de probabilidad? E l cuadra-
do de Punnett es n1ás sencillo y rápido". Este es así para cruza-
mientos monohíbridos sin1ples, pero para analizar cruzamientos
más complejos de genes ubicados en dos o más locus, el n1étodo
de las probabilidades es n1ás claro y más rápido que el cuadrado
de Punnett.
Figura 3-9. El albinismo en seres humanos suele heredarse como un
PROBABILIDAD CONDICIONAL Hasta el momento, hemos recu- rasgo recesivo. (Richard Dranitzker/5S/Photo Researchers).
1Tido a la probabilidad para predecir las chances de que se pro-
duzcan ciertos tipos de progenie teniendo en cuenta solo los
genotipos de los progenitores. En ocasiones, tenemos informa-
ción adicional que modifica o "condiciona" la probabilidad, una Suponga que ahora nos preguntamos cuál es la probabilidad
situación denominada probabilidad condicional. Por ejemplo, de que esta pareja tenga tres hijos, uno con albinismo y dos con
asuma que cruzamos dos plantas de guisantes heterocigóticas (Tt pigmentación normal. Esta situación es más complicada. El pri-
x Tt) y obtenemos una progenie alta. ¿Cuál es la probabilidad de mer hijo podría tener albinismo, mientras que el segundo y el
que esta planta alta sea heterocigótica (Tt)? Usted podría asumir tercero podrían no estar afectados; la probabilidad de esta
que la probabilidad sería 1/2, la probabilidad de obtener una pro- secuencia de eventos es¼ x 3/4 x 3/4 = 9/64. Alternativamente, el
genie heterocigótica en un cruzamiento entre dos heterocigotos. primero y el tercer hijo podrían tener pigmentación normal,
Sin embargo, en este caso contamos con cierta información adi- mientras que el segundo podría presentar albinismo; la probabi-
cional (el fenotipo de la planta de la progenie) que modifica la lidad de esta secuencia es 3/4 x 1/4 x 3/4 = 9/64. Por último, los pri-
probabilidad. Cuando se cruzan dos individuos heterocigóticos, meros dos hijos podrían tener pigmentación normal, y el terce-
esperamos que la progenie sea ¼ IT, 1/ 2 Tt y ¼ tt. Sabemos que ro, albinismo; la probabilidad de esta secuencia es 3/4 x 3/4 x 1/4
la progenie en cuestión es alta, de manera que podemos eli1ni nar = 9/64. Dado que la primera secuencia o la segunda o la tercera
la posibilidad de que su genotipo sea tt. La progenie alta debe producen un hijo con albinismo y dos con pigmentación normal,
tener genotipo TI' o genotipo Tt, y en un cruzamiento entre dos aplicamos la regla de la adición y sumamos las probabilidades
heterocigotos, estos ocurren en una proporción 1:2. Por lo tanto, 9/64 + 9/64 + 9/64 = 27/64.
la probabilidad de que una progenie alta sea heterocigótica (Tt) es Si deseamos conocer la probabilidad de que esta pareja tenga
dos de tres, o 2/ 3. cinco hijos, dos con albinismo y tres con pigmentación normal, se
vuelve 111ás difícil deducir todas las diferentes combinaciones de
LA EXPANSIÓN BINOMIAL Y LA PROBABILIDAD Cuando se apli- hijos y sus probabilidades. Esta tarea puede simplificarse si apli-
ca 1a probabili dad, es importante reconocer que puede haber camos la expansión binomial.
varias maneras diferentes en las que puede ocun·ir un conjunto de El binomio toma la forma (p + q)n, donde p equivale a la pro-
eventos. Considere dos progenitores heterocigóticos para albinis- babilidad de un evento, q equivale a la probabilidad del evento
mo, un trastorno recesivo en los seres hurnanos que causa menor alternativo, y n equivale al número de veces que ocwre el evento.
pigmentación de la piel, el cabello y los ojos (fig. 3-9; véase tam- Para deducir la probabilidad de que dos de cinco hijos tengan
bién la introducción del cap. 1). Cuando se aparean dos progeni- albinismo:
tores heterocigóticos para albinismo (Aa x aa), la probabilidad de
que tengan un hijo con albinismo (aa) es de 1/4, y la probabilidad p = probabilidad de un hijo de tener albinismo (1/4)
de tener un hijo con pigmentación normal (AA o Aa) es de 3/4.
Suponga que deseamos conocer la probabilidad de esta pareja de q = probabilidad de un hijo de tener pigmentación nonnal (3/4}
tener tres hijos con albinismo. En este caso, hay solo una manera
en la que puede suceder esto: su primer hijo tiene albinismo y su El binomio para esta situación es (p + q)5 , porque hay cinco hijos
segundo hijo tiene albinismo y s u tercer hijo tiene albinismo. en la famili a (n = 5). La expansión es la siguiente:
Aquí, simplemente aplicamos la regla de la multiplicación: 1/4 x
l/4 X l/4 = 1/64.
 Principios básicos de la herencia 57

Cada uno de los términos de la expansión expresa la probabilidad Cuadro 3-3 Triángulo de Pascal
de una combinación particular de rasgos en los niños. E l primer
término de la expansión (p 5) equivale a la probabilidad de que los Los números de cada fila representan los coeficientes de cada térmi-
cinco hijos tengan albinismo, dado que p es la probabilidad de no de la expansión binomial (p + q)n.
tenerlo. El segundo término (5 p 4q) equivale a la probabilidad
de tener cuatro hijos con albinismo y uno con pigmentación nor- n Coeficientes
mal, el tercer término (I Op 3q2 ) equivaJe a la probabilidad de tener
tres hijos con albinismo y dos con pigmentación normal, y así 1 1
sucesivamente. 2 1 1
Para obtener la probabilidad de cualquier combinación de even-
3 1 2 1
tos, insertamos los valores de p y q; entonces, la probabilidad de
tener dos de cinco hijos con albinismo es: 4 1 3 3 1
5 1 4 6 4 1
6 1 5 10 10 5 1
Utilizando los otros términos de la expansión, podemos determi- 1 6 15 20 15 6 1
nar con facilidad la probabilidad de c ualquier combinación dese-
ada de albinismo y pigmentación. Nota: cada número del triángulo, excepto los 1, es igual a la suma de los dos
¿Cómo expandünos el binomio en este ej en1plo? Por lo gene- números ubicados directamente por encima de él.
ral, la expansión de c ualquier binomio ((p + q)n consiste en una
serie den+ l términos. En el ejemplo a nterior, n = 5, entonces
n + l = 6 términos: p5 , 5p4q, IOp 3q2 , IOp2q3, 5pq4 y q5 . Para escri- Cuadro 3-4 Coeficientes y términos para la expansión
bir estos términos, primero hay que deter1ninar sus exponentes. El binomial (p + q)" para n + 1 a 5
exp onente de p en el primer término siempre comienza con la
n Expansión binomial
potencia del binomio, es decir n. En nuestro ejemplo, n = 5, de
manera que el primer ténnino es p 5 . El exponente de p disminu- 1 a+b
ye en 1 e n cada término sucesivo; entonces, e l exponente de p es
4 en el segundo término (p4 ), 3 en el tercer término (p3), y así 2 a2 + 2ab + b 2
sucesivamente. El exp one nte de q es cero en el primer tér1nino 3 al + 3a 2b + 3ab2 + b3
(sin q) y va au1nentando de a uno en cada término sucesivo; en
nuestro ejemplo, aumenta hasta 5. 4 a 4 + 4a 3b + 6a2b 2 + 4ab 3 + b 4
El. sigui ente paso es detenninar el coeficiente de cada ténnino. 5 a5 + 5a 4b + 1Oa 3b2 + 1Oa 2b3 + 5ab4 + b5
El coefi ciente del primer térmjno es 1; por consiguiente, en nues-
tro ejemplo, queda Ip 5 o simplemente p 5• El coeficiente del segun-
do término es siempre igual a la potencia del binomio (n), en nues-
tro ejemplo este valor es 5 y el término queda 5p4q. Para obtener nifica factorial y co1Tesponde al producto de todos los enteros de
el coeficiente del tercer término, se debe mirar el término prece- na l. En este ejemplo, n = 5, de manera que n! = 5 x 4 x 3 x 2 x
dente; multiplicar el coeficiente (en nuestro ej emplo por 5) por el 1. Aplicando esta fórmul a para calcular la probabilidad de que
exponente de p en ese término (4) y, luego, dividirlo por e l núme- dos de los cinco hijos tengan albinismo, obtenemos:
ro de términos (en este caso es 2, por ser el segundo término).
Entonces, el coeficiente del tercer término de nuestro ejemplo es 5! (l/ 4)2 (3/4)3
(5 x 4)/2 = 2º/2 = 10, y el término queda 10p3q2. Se debe seguir el P=------
mismo procedilniento para obtener cada tér1nino sucesivo. Los 2 !3 !
coeficientes par a los ténninos en la expansión binonual también
pueden detenninarse a partir del triángulo de Pascal (cuadro 3-3). 5x4x3x2xl
Los exponentes y coeficientes para cada término en las primeras 5
expansiones binomiales se muestran en el cuadro 3-4. 2xlx3x2x l
Otra manera de determinar la probabilidad de una combinación
particular de eventos es utilizar la siguiente fórn1ula: Este valor es el misn10 que el obtenido con la expansión binomial.
n 1NTENTE RESOLVER LOS PROBLEMAS 25, 26 Y 27
ni psqt
P = -- -
s!t! Cruzamiento de prueba

donde p equivale a la probabilidad total de un evento X con la
probabilidad p de ocurrir s veces y de un evento Y con probabi-
lidad q de ocurrir t veces. En nuestro ejemplo del albinismo, el
evento X sería la aparicjón de un hijo con aJbinismo ( 1/4), y
el evento Y sería la aparición de un hijo con pigmentación normal
(3/4); s equivaldría al número de hijos con albinismo (2) y t, al
número de hijos con pigmentación normal (3). El símbolo ! sig-
Una he1Tan1ienta útil para analizar los cruzalnientos genéticos es
el cruzamiento de prueba, en el que un individuo de genotipo
desconocido se cruza con otro individuo de genotipo homocigóti-
co recesivo para el rasgo en cuestión. La figura 3-7 ilustra un cru-
zamiento de prueba (en este caso, también es un cruzamiento
retrógrado). El cruzamiento de prueba investiga o revela el geno-
tipo del primer individuo.
 58 CAPITULO 3

Suponga que le entregar on una planta de guj santes altas sin njn- INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
guna información sobre sus progenitores. Como la altura es un
rasgo dominante en los gtü santes, su planta podría ser homocigó- Proporciones en los cruzamientos simples
tica (IT) o heterocigótica (Tt), pero usted no sabe cuál de las
opciones es correcta. Podría determinar su genotipo realizando un Ahora que tenemos cierta experiencia en los cruzamientos genéticos,
podemos revisar las proporciones en las que aparece la progenie de
cruzamiento de prueba. Si la planta fuera homocigótica (IT), un
los cruzamientos simples, en los que se considera un solo locus y un
cruzamie nto de prueba produciría toda la progerue alta (IT x tt ➔
alelo es dominante sobre el otro. Conocer estas proporciones y los
todos Tt); si la planta fuera heterocigótica (Tt), la mitad de la pro-
genotipos parentales que las producen nos permitirá analizar con
genie sería alta, y la mitad, baj a (Tt x tt ➔ ½ Tt y ½ tt). Cuando
rapidez cruzam ientos simples sin recurrir a un cuadrado de Punnett.
se practica un cruzamiento de prueba, cualquier alelo recesivo del Más adelante, utilizaremos estas proporciones para resolver cruza-
genotipo desconocido se expresa en la progenie, porque se aparea- mientos más complicados que incluyen varios locus.
rá con un alelo recesivo del progenitor homocigótico recesivo. Solo hay que conocer tres proporciones fenotípicas (cuadro 3-5).
n 1NTENTE RESOLVER LOS PROBLEMAS 18 Y 21 En un cruzamiento simple, aparece la proporción 3:1 cuando los dos
progenitores son heterocigóticos para el alelo dominante (Aa x Aa).
La segunda proporción fenotípica es la proporción 1: 1, que resulta
del apareamiento de un progen itor heterocigótico con un progen itor
CONCEPTOS
' homocigótico. En este cruzamiento, el progenitor homocigótico
debe tener dos alelos recesivos (Aa x aa) para obtener una propor-
La expansión binomial puede utilizarse para determinar la probabi li-
ción 1: 1, porque un cruzamiento entre un progenitor dominante
dad de un conjunto particular de eventos. Un cruzamiento de prue-
homocigótico y un progenitor heterocigótico (AA x Aa) produce des-
ba es un cruzamiento entre un individuo con un genotipo descono- cendencia que solo muestra el rasgo dominante.
cido y uno con un genotipo homocigótico recesivo. El resultado de La tercera proporción fenotípica no es en realidad una proporción:
un cruzamiento de prueba puede revelar el genotipo desconocido. toda la descendencia tiene el mismo fenotipo (progenie uniforme).
Varias combinaciones de progenitores pueden producir este resultados
(véase cuadro 3-5). Un cruzamiento entre dos progenitores homocigó-
ticos cualesquiera -entre dos homocigóticos iguales (AA x AA o aa x
Símbolos genéticos aa) o entre dos homocigóticos diferentes (AA x aa)- produce progenie
en la que todos tienen el mismo fenotipo. La progenie de un único
Como ya hemos visto, los cruzarruentos genéticos suelen repre-
fenotipo también puede resultar de un cruzamiento entre un progeni-
sentarse con símbolos para designar los diferentes alelos. En
tor dominante homocigoto y un progenitor heterocigoto (AA x Aa).
general, los genetistas que trabajan con un organismo p articular
determinan los símbolos utilizados para los alelos y, por lo tanto,
no existe rungún siste1na universal para designar símbolos. En las
plantas, a menudo se utilizan las letras minúsculas para designar Proporciones fenotípicas para cruzamientos
los alelos recesivos y las mayúsculas para los alelos dorrunantes. genéticos simples (cruzamientos para un solo
Es posible usar dos o más letras para un mismo alelo : el alelo locus) con dominancia
recesivo que da forma de corazón a las hojas del pepino se desig-
na hl, y el alelo recesivo que da forma anormal a la cabeza del Proporción Genotipos de Genotipos de
espermatozoide del ratón se designa azh. fenotípica los progenitores la progenie
En los animales, el alelo común para una característica -deno1ni- 3:1 Aa xAa ¾A_: ¼aa
nado tipo silvestre porque es el alelo más frecuente en la naturale-
za- suele simbolizarse con una o más letras y un signo más(+). Por 1: 1 Aa xaa 1/2 Aa : ,/i aa
lo general, la letra o las letras elegidas se basan en el fenotipo Progenie uniforme AAxAA Todos AA
mutante (inusual). Por eje1nplo, el alelo recesivo que produce ojos aa X aa Todos aa
an1arillos en la mosca de la fruta oriental se representa por ye, AA xaa Todos Aa
mientras que el alelo para el color de ojos de tipo silvestre se repre- AAxAa Todos A -
senta ye+. A veces, en el alelo silvestre no se colocan las letras, y se
lo representa solo por un signo más. En ocasiones, se agregan supe-
ríndices y subíndices para distinguir entre los genes: Lfr1 y Lfr2
representan alelos mutantes dornmantes en diferentes locus que Proporciones genotípicas para cruzamientos ge-
producen hojas de márgenes lacerados en la planta de amapola; ElR Cuadro 3-6
néticos simples (cruzamientos para un solo locus)
representa un alelo de las cabras que lünita la longitud de las orejas.
Para d istinguir los alelos, se puede usar una barra oblicua. Por Proporción Genotipos de los Genotipos de la
ejemplo, el genotipo de una cabra heterocigótica para orejas cor- genotípica progenitores progenie
tas se podría escribir Et+/EZR o, simplemente, +/E[R_Si se presen-
1:2: 1 Aa xAa ¼AA: 1/2 Aa: ¼ aa
tan j untos genotipos de más de un locus, se los separa con un
espacio. Por ejen1plo, una cabra heterocigótica para un par de ale- 1: 1 Aa xaa ½Aa : ½aa
los que producen orejas cortas y heterocigótica para otro par de AaxAA ½Aa : ½AA
alelos que producen bocio se puede designar por E[+/ElR G/g. A
Progenie uni- AAxAA Todos AA
veces es útil indicar la posibilidad de varios genotipos. Una línea
forme aa xaa Todos aa
en un genotipo, como A _ indica que cualquier alelo es posible. En
AA xaa Todos Aa
este caso, A_ podría incluir tanto genotipos AA como A a.
 Principios básicos de la herencia 59

Si estamos interesados en las proporciones de genotipos, en lugar
de en las proporciones de fenotipos, solo es preciso recordar tres
resultados (cuadro 3-6): la proporción 1:2: 1, producida por un cru-
zamiento entre dos heterocigotos; la relación 1: 1, producida por un
cruzam iento entre un heterocigoto y un homocigoto; y la progenie
uniforme, producida por un cruzamiento entre dos homocigotos.
Estas relaciones fenotípicas y genotípicas simples, y los genotipos
parentales que las producen, son fundamentales para comprender
los cruzamientos para un locus único y, como se verá en la siguiente
sección, para múltiples locus.
do estos dos alelos se separan, su separación es independiente de
la separación de los alelos de otros locus.
Veamos cómo el principio de la distribución o selección inde-
pendiente explica los resultados obtenidos por Mendel en su cru-
zamiento dihl'b1ido. Cada planta tiene dos alelos que codifican
cada característica; por consiguiente, las plantas parentales deben
haber tenido genotipos RR YYy rryy (fig. 3-l0a). El principio de
Experimento
Pregunta: ¿los alelos que codifican rasgos diferentes se
separan en forma indepe ndiente?

3.3 Los cruzamientos dihíbridos revelan (a)

el principio de la distribución o selección Métodos rcieneración P

Semillas lisas, Semillas rugosas,
independiente amarillas verdes

Ahora, extenderemos el principio de la segregación de Mendel a X

cruzamientos más complejos que incluyen alelos de múltiples RRYY rr yy
Iocus. Comprender el carácter de estos cn1zamientos requerirá un
+ ♦
principio adicional, el principio de la distribución o selección Gametos RY ry
independiente.

Cruzamientos dihíbridos
l Fecundación

(b)
/"
Generación F1 Semillas lisas,
Además de su trabajo con cruzamientos 1nonohfbridos, Mendel amarillas
cruzó variedades de guisantes que diferian en dos caracteristicas:
un cruzami~nto dilnorido. Por ejemplo, tenía una variedad ho-
Rr Yy
mocigótica de guisante con semillas lisas y amaiillas; otra varie-
dad homocigótica con semillas rugosas y verdes. Cuando cruzó l
ambas variedades, las semillas de toda la progenie F 1 eran redon- ♦ ♦ ♦
das y amarillas. Después, autofencundó la F 1 y obtuvo la siguien- Gametos RY 1)' Ry rY

te progenie en la F 2: 315 semi11as lisas, amarillas; 101 semillas

rugosas, amarillas; 108 semillas lisas, verdes; y 32 semillas rugo-
sas, verdes. Mendel reconoció que estos resultados aparecfan en
L_ Autofecundación

(e)
una proporción de alrededor de 9:3:3: 1; es decir, 9/ 16 de las semi-
Resultados
llas de la progenie eran lisas y amarillas, 3/t6 eran rugosas y ama- ( Generación F2
tillas, 3116 eran lisas y verdes, y 1h6 eran rugosas y verdes. RY ry Ry rY
RRYY R Yy Rr YY
RY
Principio de la distribución o selección
independiente Rr Yy -,. yy .,. Yy
I)'

Mendel llevó a cabo una serie de cruzamientos dihíbridos para

pares de caracteristicas y siempre obtuvo una proporción 9:3:3: 1
Ry
en la F2 . Esta proporción es perlectamente coherente respecto de
la segregación y la dominancia si agregamos un tercer principio, Rr YY
que Mendel reconoció en los cruzamientos dilu'bridos: el princi- rY
pio de la distribución o selección independiente (segunda ley de
Mendel). Este principio afinna que los alelos de diferentes locus Proporción fenotípica
se separan en forma independiente entre sf (véase cuadro 3-2). 9 lisas, amarillas: 3 lisas, verdes: 3
Un error frecuente consiste es pensar que el principio de la
segregación y el de la distribución o selección independiente ha- --- rugosas, amarillas: 1 rugosa, verde

Conclusión: el alelo que codifica el color se separó indepen-

cen referencia a dos procesos distintos. En realidad, el principio
de la distribución o selección independiente es una extensión del
principio de la segregación. Este último afirma que los dos alelos
de un locus se separan cuando se forman los gametos; el princi-
pio de la distribución o selección independiente afirma que, cuan-
dientemente del alelo que codifica la forma de la semilla, lo
que produjo una proporción 9 : 3 : 3 : 1 en la progenie F2.
Figura 3-10. Los cruzamientos dihíbridos de Mendel revelaron el
principio de la distribución o selección independiente.
60 CAPITULO 3

la segregación indica que los alelos de cada locus se separan, y un
alelo de cada locus ingresa en cada gameto. Por lo tanto, los
gametos producidos por el progenitor liso, amarillo, contienen
alelos RY, mientras que los gainetos producidos por el progenitor
1ugoso, verde, contienen alelos ry. Estos dos tipos de gametos se
fusionan para producir la F 1, toda con genotipo Rr Yy. Corno liso
es do1ninante sobre rugoso y ainarillo es dominante sobre verde,
el fenotipo de la F 1 será liso y amarillo.
Cuando Mendel autofecundó las plantas F 1 para producir la F 2 ,
se separai·on los alelos de cada locus e ingresó uno en cada game-
to. En este evento es donde cobra importancia el principio de la
distribución o selección independiente. Cada par de alelos puede
separarse de dos maneras: l ) R se separa con Yy r se separa con
y para producir gametos RY o ry, o 2) R se separa con y y r se
separa con Y para producir gametos Ry y rY. El principio de la
distribución o selección independiente nos dice que los alelos de
cada locus se separan en forma independiente; por lo tanto, se
producen ambas clases de separación por igual, y se producen en
proporciones equivalentes los cuatro tipos de gametos (RY, ry, Ry
y rY) (fig. 3-l0b). Cuando estos cuatro tipos de gametos se com-
binan para producir la generación F 2 , la progenie consiste en 9/16
semillas lisas y amarillas, 3/16 rugosas y amai·illas, 3/16 rugosas y
verdes y 1-/16 rugosas y verdes, lo que determina una proporción
fenotípica 9:3:3: l (fig. 3-l0c).
Relación entre el principio de la distribución
o selección independiente y la meiosis
Una particularidad importante del p1incipio de la distribución o
selección independiente es que se aplica a características codifi-
cadas por locus ubicados en diferentes cromosomas porque, al
igual que el principio de la segregación, se basa por entero en el
comportamiento de los cromosomas durante la meiosis. Cada par
de cromosomas homólogos se separa independientemente de
todos los demás pares en la anafase I de la meiosis (fig. 3-11); por

R r Figura 3-11. El principio de la distribución o

0 Esta célula contiene dos y y selección independiente se debe a la separa-
pares de cromosomas
ción independiente de los cromosomas
homólogos.
1 durante la anafase I de la meiosis.

1
Replicación
cromosómica

'
RR rr
YY

fl En 1a anaf ase Ide 1a me1os1s, cada 1

par de cromosomas homólogos se
separa en forma independiente; ... 1 Anafase 1 1

• ' . • ' .
RR rr RR ,. r
yy YY yy yy

K K
Anafase 11 Anafase 11 Anafase 11 Anafase 11

R
y R
y r ,. R R ,. y
,. y
y y y y

1 1 1 1
J
.¡. de manera que los genes localizados en diferentes pares de cromosomas
se segregan independientemente, lo que produce distintas combinaciones J

de alelos en los gametos.

 Principios básicos de la herencia 61

lo tanto, los genes locali zados en diferentes pares de homólogos Liso, amarillo Liso, amarillo
se segregarán en forma independiente. Los genes que están loca- X
lizados en el mismo cromosoma migrarán juntos durante la ana-
fase I de la meiosis y llegarán al mismo destino: dentro del mismo Rr Yy RrYy
gameto (a menos que se produzca entrecn1zamiento). Sin embar- .El cruzamiento dihíbrido se ]
go, los genes localizados en el 1nis mo cromoso1na no se segregan descompone en dos
cruzamientos monohlbridos ...
en forma independiente (a menos que estén localizados lo sufi- (a)
'r
cientemente lejos para que se produzca entrecru zamiento en cada Proporciones Proporciones Proporciones
división meiótica, como se analizará de manera exhaustiva en el esperadas para esperadas para esperadas
el primer carácter el segundo carácter para ambos
cap. 7). (forma} (color) caracteres

Rr X Rr Yy X Yy G rYy X RrY))
CONCEPTOS
ruzamiento ruzamiento fl...y se determina la
=:::;::=-;~---- probabilidad de cada
El principio de la distribución o selección independiente afirma que ___..,...::::::-,r-r-~~ carácter.
los genes que codifican diferentes características se segregan de ¾R_ (' ¾Y_
manera independiente entre sí cuando se forman los gametos, debi- Liso Amarillo
do a la separación independiente de los cromosomas homólogos
durante la meiosis. En cambio, los genes que se localizan juntos en
el mismo cromosoma no se segregan independientemente.
l
¼rr
Rugoso ® ¼yy
Verde

Después, se combinan los caracteres individuales y las . I

~r:•y
_
(b) probabilidades asociadas usando el método ramificado_:_J
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6

¿ Cómo se relacionan los principios de la distribución o selección inde-

pendiente y de la segregación, y en qué difieren?
n
., f
3t4R_
➔/
~
r •
Amarillo
~ R_ Y_
¾ x ¾ = 9/16
Liso, amarillo
Liso
~► ¼ yy
Verde
■ -+-•I ¾x¼=3/16R_ yy

l Liso, verde

Aplicación de la probabilidad y el diagrama ¾Y_ ,.,. y

ramificado a los cruzamientos dihíbridos
Cuando los genes de dos locus se separan de manera independien-
te, un cruzamiento dihfbrido puede considerarse como dos cruza-
mientos monohfbridos. Estudiemos el cruzamiento dihfbrido de
Mendel (Rr Yy x Rr Yy) considerando cada característica por sepa-
rado (fig. 3-12a). Si consideramos solo la forma de las semi-
llas, el cruzamiento fue Rr x Rr, que determina una proporción
fenotípica (progenie 3/4 lisa y ¼ rugosa, véase cuadro 3-5). A
continuación, consideremos la otra caracterfstica, el color de la
semilla. El cruzamiento fue Yy X Yy, que produce una proporción
fenotípica 3: 1 (progenie con 3/4 de semillas amarillas y 1/4 de
semillas verdes).
Ahora, podemos combinar estas proporciones 111onohíbridas
aplicando la regla de la multiplicación para obtener la proporción
de progenie con diferentes combinaciones de forma y color de las
semillas. La proporción de progenie con semillas lisas y amarillas
es 3/4 (la probabilidad de semi11a lisa) x 3/4 (la probabilidad de
semilla amarilla)= 9/16. La proporción de la progenie con semillas
lisas y verdes es de 3/4 x 1/4 = 3/t6; la proporción de la progenie con
semillas rugosas y amari llas es de ¼ x 3/4 = 3/16; y la proporción
de progenie con semillas rugosas y verdes es de 1/4 x 1/4 = 1/J6.
Los diagramas ramificados son una manera cómoda de organi-
zar todas las con1binaciones de características (fig. 3-12b). En la
pritnera columna, enu1nere las proporciones de los fenotipos para
una característica (en este caso, 3/4 lisa y¼ rugosa). En la segun-
da columna, enumere las proporciones de los feno tipos para la
segunda característica (3/4 amarilla y ¼ verde), al lado de cada
uno de los fenotipos de la primera columna: coloque 3/4 amarilla
y 1/4 verde al lado del fenotipo liso y de nuevo al lado del fenoti-
...+-1► Amarillo ----+--1-.►[ ¼ X3/4 : 3/ 16
Rugoso, amarillo
¼rr l{.)r..~~
Rugoso ~Y
'+---► ¼ yy 1 rr yy
Verde --f..... ¼ X¼: 1/16 '
Rugoso, verde
Figura 3-12. Se puede emplear un diag rama ramificado para deter-
minar los f enotipos y las proporciones esperadas de la descendencia
de un cruzamiento dihíbrido (Rr Yy x Rr Yy).
po rugoso. Trace líneas entre los fenotipos de la primera colu1nna
y cada uno de los fenotipos de la segunda columna. Ahora, siga
cada rama del diagrama y multiplique las probabilidades para
cada rasgo a lo largo de esa rama. Una rama conduce de liso a
amarillo, lo que da origen a una progenie lisa y amarilla. Otra
rama conduce de liso a verde, lo que da origen a progenie lisa y
verde, y así sucesiva1nente. La probabilidad de obtener una pro-
genie con determinada combinación de rasgos se calcula median-
te la regla de la n1ultiplicación: la probabilidad de sen1illas lisas
(3/4) y amarillas (3/4) es de 3/4 x 3/4 = 9/t6. La ventaja del diagra-
ma ramificado es que ayuda a tener en cuenta todas las combina-
ciones posibles de rasgos que pueden aparecer en la progenie.
Puede ser empleado para determinar proporciones fenotípicas o
genotípicas para cualquier número de características.
Aplicar la probabilidad es mucho más rápido que recurrir al
cuadrado de Punnett en cruzamientos que involucran múltiples
locus. Las proporciones genotfpicas y fenotípicas se pueden
deducir rápidamente con1binando, n1ediante la regla de la multi-
62 CAPITULO 3

plicación, las proporciones simples de los cuadros 3-5 y 3-6. El Liso, amarillo Rugoso, verde
método de probabilidad es particularme nte efi ciente si necesita- X
mos conocer la probabilidad de solo un fenotipo o genotipo par- RrYy rryy
ticular de la progenie de un cruzamiento. Suponga que necesita-
mos conocer la probabilidad de obtener el genotipo Rr yy en la F2 Proporciones Proporciones Proporciones
del cruzamiento dihíbrido de la figura 3-10. La probabilidad de esperadas para esperadas para esperadas para
obtener e l genotipo Rr en un cruzanuento de Rr x Rr es de 1/ 2 y el primer carácter el segundo carácter ambos caracteres
1/ 4 (véase cuadro 3-6). Con la regla de la multiplicación, halla-

mos que la probabilidad de obtener Rr yy es de 1/2 x 1/4 = 1/&.

Para ilustrar la ventaj a del método de la probabilidad, considere
(forma)

Rr X rr Yy
(color)

X yy e Rr Yy X rr yy )

el cruzamiento Aa B b ce Dd Ee x Aa Bb Ce dd Ee. Suponga que Cruzamiento Cruzamiento

deseamos conocer la probabilidad de obtener descendencia con el
genotipo aa bb ce dd ee. Si usára1nos un cuadrado de Pw1nett para
determjnar esta probabilidad, podríamos estar trabajando en la
½Rr
Liso
½ ,.,.
o ½Yy
Amarillo

~
½ yy
solución durante meses. Sin embargo, podemos calcular con rapi-
Rugoso Verde
dez la probabilidad de obtener este único genotipo descomponien- '-

do el cruzamiento en una serie de cruzamientos de un solo locus:

-► ½Yy -+-<► R.r Yy
Cruzamiento Amarillo ½x½=¼
de la progenie
Aa x Aa
Genotipo

ªª
Probabilidad
¼
½Rr
Liso e ½yy
Liso, amarillo

-+-!► Rr yy
Bbx Bb bb ¼ '--'► Verde ½ x ½=¼
Liso, verde
ce x Ce ce l/2
Ddx dd dd l/2
Y2 Yy rr Yy
EexEe ee l/4 r--► Amarillo -+-s►
½x½ =¼
Rugoso, amarillo
-
½ rr .ú~i\
\~../
Ahora, es fácil calcular la probabilidad de que un descendiente de Rugoso - ·
½yy rr yy •
este cruzamiento tenga el genotipo aa bb ce dd ee utilizando la ¡ Verde
'--'► -+-1►
½x½=¼ ,
regla de la multiplicación: 1/4 x 1/4 x 1/2 x ½ x 1/4 = 1/255. Este ~ ugoso, verde
cálculo asume que estos cinco locus se segregan independiente- _J "-
mente. Figura 3-13. Se puede utilizar un diagrama ramificado para determi-
Ahora que usted ha adquirido cierta experiencia e n trabajar con nar los fenotipos y las proporciones esperadas de la descendencia
cruzamientos genéticos, explore los principios de M endel crean- de un cruzamiento de prueba dihíbrido (Rr Yy x rr yy).
do algunos de sus propios cruzamientos en la Animación 3-1.

amarilla es de 1/2 (la probabilidad de lisa) x 1/2 (la probabilidad de

CONCEPTOS amaii lla) = ¼. En la descendencia, aparecen cuatro combinacio-
nes de rasgos con las siguientes proporciones: 1/4 Rr Yy, lisas y
Un cruzamiento que incluye varias características se puede trabajar amarillas; Rr yy, lisas y verdes; 1/4 rr Yy, rugosas amarillas; y ¼
descomponiéndolo en cruzamientos de un solo locus y aplicando la rr yy, rugosas verdes.
regla de la multiplicación para determinar las proporciones de las
combinaciones de características (siempre que los genes se segre-
guen de manera independiente).

Los principios de la segregación y de la distribución o selección

Cruzamiento dihíbrido de prueba
Vamos a practicar el uso del diagra1na ramificado determinando
los tipos y las proporciones de fenotipos en un cruzamjento dihí-
brido de prueba entre las plantas F I de semillas lisas y amarillas
(Rr Yy) obtenidas por Mendel en su cruzamiento dihfbrido y las
plantas de semillas rugosas y verdes ilustradas en la figura 3-13.
Descomponga el cru zamiento en una serie de cruzamientos de un
solo locus. El cruzamiento Rr x rr da origen a una progerue 1/2
lisa (Rr) y 1/2 rugosa (rr). El cruzamiento Yy x yy da origen a una
progenie ½ amarilla (Yy) y 1/2 verde (yy). Aplicando la regla de
la multiplicación, hallan1os que la proporción de progenie lisa y
independiente son importantes no solo porque explican cómo fun-
ciona la herencia, sino tan1bién porque proporcionan los medios
para predecir e l resu ltado de cruzamientos genéticos. Este poder
de predicción ha convertido a la genética en una herramienta pode-
rosa e n la agricultura y otros campos, y la capacidad de aplicar los
principios de la herencia es una habilidad importante para todos
los estudiantes de genética. La práctica con problemas genéticos
es esencial para dominar los principios básicos de la herencia ; nin-
gún grado de lectura ni memorización puede reemplazar la expe-
riencia obtenida solucionando problemas específicos de genética.
A usted le pueden resultar difíciles los problemas genéticos si
no está seguro por dónde e1npezar o cómo organizar la solución
de un problen1a. En genética, cada problema es diferente, de ma-

nera que no es pos ible apli car ninguna seri e común de pasos a
todos los p roble mas genéticos. Se debe e mplear la lógica y el sen-
tido con1ún para analizar un problema y llegar a una solución. No
obstante, ciertos pasos pueden facilitar el proceso, y la resolución
del problema siguiente servirá para ilustrar estos pasos.
En los ratones, el pelaje de color negro (B ) es dominante res-
pecto del color marrón (b), y un patrón liso (S) es do1ninante
respecto del moteado blanco (s). Tanto el color como el moteado
están controlados por genes que se segregan de manera indepen-
diente. Se cruza un ratón negro moteado, homocigótico, con un
ratón marrón liso, homocigótico. Todos los ratones de F 1 son
negros y lisos. Después, se realiza un cruzamiento de prueba apa-
reando los ratones de F 1 con ratones marrones moteados.
a. Indique los genotipos de los progenitores y los ratones F 1.
b. Indique los genotipos y fenotipos, junto con las proporciones
esperadas, de la progenie prevista a partir del cruzamiento de
prueba.
Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Primero, determine qué pregunta o preguntas formul a e] proble-
ma. ¿Pregunta por genotipos, proporciones genotípicas o pro-
porciones fenotípicas? Este problema le pide que indique los
genotipos de los progenitores y de la F1, los genotipos y fenoti-
pos esperados de la progenie del cruzamiento de prueba y sus
proporciones esperadas.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
A continu ación, determine qué información necesaria para resol-
ver el problema se proporciona. Este problema suministra infor-
mación importante acerca de las relaciones de dominancia de las
características y de Los genes que codifican los rasgos.
■ negro es dominante respecto de marrón.
■ liso es dominante sobre moteado blanco.
■ los genes de las dos características se segregan indepen-
dientemente.
■ los símbolos para los diferentes alelos: B para negro, b para
marrón, S para liso y s para moteado.
A m enudo, es útil anotar los símbolos al comienzo de la solución:
B-negro S- liso
b- marrón s-moteado
A continu ación, escriba Los cruzamientos dados en el problema.
p Homocigoto, X Ho1nocigoto,
negro, n1oteado marrón, liso
l negro, 111oteado
Negro, liso
Cruzamiento Negro, liso x MaiTón, moteado
de prueba
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Si necesita ayuda para resolver este proble ma, repase las seccio-
nes del capítulo que cubren la información relevante. Para este
problema, repase las Secciones 3.2 y 3.3.
Principios básicos de la herencia 63
Pasos de la solución
PASO 1 Anote cualquier información genética que pueda
determinarse a partir de los fenotipos solos.
A partir de los fenotipos y de la afmnación de que son homoci-
góticos, usted sabe que los ratones de la generación P deben ser
BB ss y bb SS. Los ratones de la F 1 son negros y lisos, ambos
rasgos do1ninantes; por consiguiente, los ratones de la F 1 deben
tener por lo menos un a lelo negro (B ) y un alelo li so (S). E n este
punto, usted no puede estar seguro acerca de los otros alelos, así
que represente e] genotipo de la F1 como B_ S_, donde _ signifi-
ca que cualquier alelo es posible. Los ratones marrones motea-
dos del cruzanuento de prueba deben ser bb ss, porque tanto el
1nai-rón como el 1noteado son rasgos recesivos, que solo se
expresarán en presencia de dos alelos recesivos. Registre estos
genotipos en los cruzamientos que escribió en el paso 2:
p Homocigoto, X Hornocigoto,
negro, moteado marrón, liso
BB SS bb SS
l
Negro, liso
B_S_
Cruzamiento Negro , liso X Marrón, moteado
de prueba B_S_ bb SS
PASO 2 Descomponga el problema en partes más pequeñas.
Primero, determi ne el fenotipo de la F 1. Después de haber deter-
minado este genotipo, usted puede predecir los resultados del
cruzamiento de prueba y determinar los genotipos y fenotipos
de la progenie del cruzamiento de prueba. Segundo, como este
cruzamiento incluye dos locus que se segregan de manera inde-
pendiente, es posible descomponerlo en dos cruzamientos de un
solo locus: uno para el color del manto y otro para e l moteado.
Tercero, utilice un diagrama ramificado para determjnar la pro-
porción de progenie del cruzamiento de prueba con diferentes
combinaciones de los dos rasgos.
PASO 3 Resuelva las diferentes partes del problema.
Comience por determinar el genotipo de la progenie F 1. La pri-
mera ley de Mendel indica que los dos ale los de un locus se
separan y que uno ingresa en cada gameto. Por lo tanto, los
gametos producidos por el progenitor negro, moteado, contienen
B s, y los gametos producidos por el progenitor marrón, liso,
contienen , b S, que se combinan para producir progenie F 1 con
el genotipo Bb Ss:
p Hornocigoto, X Homocigoto,
mai-rón, liso
BB SS bb SS
Gametos bS
Bs
BbSs
64 CAPITULO 3

Utilice el genotipo de F 1 p ara resolver el cruzamiento de prue- de Mendel de la segregación, la distribución o selección indepen-
ba (Bb Ss x bb ss) descomponiéndolo en dos cruzamientos de diente y la dominancia. Sin embargo, las proporciones de los
un solo locu s. P ri1nero, considere el cruzamiento para e l color genotipos y los fenotipos realmente observadas pueden desviarse
del 1nanto: Bb x bb. Cualquier cruzan1iento entre un genotipo de las esperadas.
heterocigótíco y uno homocigótico recesivo produce una propor- Por ejemplo, en las cucarachas alemanas, el rasgo de color del
ción fenotípica 1: 1 de la progenie (véase cuadro 3-5): cuerpo marrón (Y) es dominante sobre el color del cuerpo amari-
llo (y). Si cruzamos una cucaracha heterocigótica marrón (Yy) con
Bbxbb una cucaracha amarilla (yy), esperamos una proporción 1: 1 de
J, matTón y amarill o en la progenie. Por lo tanto, entre 40 individuos
1/2
de l a progenie, esperamos encontrar 20 matTones y 20 amarillos.
Bb negro No o bstante, los núm eros observados podrían desviarse de los
1
/2 bb marrón esperados; de hecho, podría1nos hallar 22 descendientes marrones
y 18 amarillos.
A continuación, reabce el cruzamiento para el moteado: Ss x ss. E l azai· desempeña un papel crucia l en los cruza1nientos gené-
Este cruzamiento también se produce entre un genotipo hetero- ticos, com o cuando se lanza una moneda. Al lanzar una moneda,
cigótico y uno homoci gótico recesivo, y producirá una progenie se espera una proporción 1: 1: 1/2 caras y 1/2 cecas. Si se lanza una
1/ 2 lisa (Ss) y 1/2 moteada (ss) (véase cuadro 3-5). moneda 1000 veces, es probable que la proporción de cai·as y
cecas obtenidas sea 1nuy cercana a la proporción l : 1 esperada. En
Ss x ss cambio, si usted lanza la moneda 1O veces, la proporción de caras
J, y cecas podría ser bastante diferente de 1: 1. Pod1ía obtener con
facilidad 6 caras y 4 secas o 3 caras y 7 secas, sol o por azar. Hasta
1
/2 Ss liso es posible obtener 1O caras y O secas. L o nlismo ocurre en los cru-
1
12 ss moteado zamientos genéticos. P odemos esperar 20 cucai·achas marrones y
20 amarillas, pero como resultado del azar, podrían aparecer 22
Por último, determine las proporciones de la progenie con matTones y 18 an1arillas .
com binaciones de estas características utilizando el diagrama
ramificado: Prueba de bondad del ajuste de Ji-cuadrado
/ Ss liso Bb Ss negro, liso Si usted espera una proporción de cucarachas marrones y a1nari-
½ Bb negro \ . ½x ½=¼ llas de 1: l pero el ctuzamiento produce 22 cucarachas marrones y
18 amarillas, es probable que no se sorprenda dem asiado, aunque
½ ss moteado _ _ Bb ss negro , moteado
no haya habido una proporción l : 1 perfecta. E n este caso, parece
½ x½= ¼ razonable suponer que el azar produjo la desviación entre las pro-
½ Ss liso - - bb Ss man·ón, liso porcio nes esperadas y las observadas. P ero si usted observara 25
½ x ½ ='/4 cucarachas matTones y 15 amai·illas, ¿la proporción sería aún de
½ bbmarrón < 1: 1? Algo diferente del azai· podría haber causado l a desviació n.
½ ss moteado _ _ bb ss marrón, moteado Quizá la herencia de esa característica sea m ás con1plicada de lo
½ x ½=¼ que se creía o quizá una parte de la progenie amari lla 1nurió antes
de ser contabi lizada. Es evidente que necesitamos algún medio
PASO 4 Controle todo el trabajo. para evaluar cuán posible es que el azar sea el responsable de la
desviación entre los números observados y los esperados.
Com o último paso, vuelva a leer el problen1a y controle si sus res-
Para evaluar el efecto del azar en las desviaciones ocurridas
puestas son consistentes con la información provista. Usted ha
entre los valores observados y los esperados, se utiliza una prue-
usado los genotipos BB ss en la generación P. ¿Estos genotipos
ba estadística denonúnada prueba de bondad del ajuste de
codifican los fenotipos presentados en el problema? ¿Los fenoti-
Ji-cuadrado (x2 o chi-cuadrado). Esta prueba proporciona in-
pos de la progenie F 1 son consistentes con los genotipos que usted
formació n acerca de cuán con·ectan1ente se ajustan los valores
asignó? L as respuestas son consistentes con la información.
observados a los valores esperados. Antes de aprender a calcular
la Ji-cuadrado, es importante comprender qué indica y qué no
► Ahora que hemos solucionado juntos un problema de genética, trate indica esta prueba acerca de un cruzamiento genético.
de hacerlo por sí mismo en el Problema 33 al final de este capítulo. La prueba de Ji-cuadrado no puede decin10s si el cruzamiento
genético se ha realizado en forn1a correcta, si los resultados son
con·ectos ni si hemos elegido la explicación correcta para esos
resultados. Lo que sí p uede indicat-nos es la probabilidad de que
3.4 Las proporciones observadas la diferencia entre los valores observados y los esperados se deba
de la progenie pueden desviase al azat·. Es decir, indica la probabilidad de q ue sea únican1ente el
por azar de las proporciones esperadas azar el que haya causado la desviación en tre los valores espera-
dos y los observados.
Cuando se cruzan dos individuos de genotipo conocido, se espe- Si en la progenie de un cruzamiento genético esperábamos 20
ra que en la progenie existan ciertas proporciones de genotipos y cucarachas matTones y 20 amarillas y obtuvimos 25 cucarachas
fenotipos; estas proporciones esperadas se basan en los principios matTones y 15 an1arillas, la prueba de Ji-cuadrado nos da la pro-
 Principios básicos de la herencia 65

babjlidad de que la desviación de la proporción esperada de 20:20
se deba solo al azar. Esta hipótesis de que solo el azar es respon-
sable de cualquier desviación entre los valores observados y espe-
rados se denomina a veces hipótesis nula. Cuando la probabilidad
calculada mediante la prueba de Ji-cuadrado es alta, asumimos
que solo el azar produjo Ja diferencia (la hipótesis nula es verda-
dera). Cuando Ja probabilidad es baja, asumitnos que otro fac tor
distinto del azar (algún factor significati vo) produjo la desviación
(la hipótesis nula es falsa).
Para utilizar la prueba de bondad del ajuste de Ji-cuadrado,
debemos determinar primero cuáles son los resultados espera-
dos. La prueba de Ji-cuadrado siempre se debe aplicar a números
de la progenie, nunca a proporciones ni a porcentajes.
Consideremos un locus del color de] manto de los gatos domés-
ticos, para el cual el color negro (B) es dominante sobre el gris
(b). Si cruzamos dos gatos negros heterocigóticos (Bb x Bb),
esperaría1nos una proporción de gatitos negros y grises de 3: 1.
Una serie de cruzamientos de este tipo produjo un total de 50 ga-
titos, 30 negros y 20 grises. Estos números son nuestros valores
observados. Podemos obtener los valores esperados multiplican-
do las proporciones esperadas por el número total de la progenie
observada. En este caso, el número esperado de gatitos negros
sería 3/4 x 50 = 37,5, y el número esperado de gatitos grises sería
1/4 x 50 = 12,5. El valor de Ji-cuadrado (X 2) se calcula mediante
la siguiente fór1nula:
(observado - esperado)2
x2 =: E - - - - - - - - - -
esperado
en la que :E representa la su111atoria. Se calcula la sumatoria de
todos los cuadrados de las diferencias entre observado y espera-
do y se divide por los valores esperados. Para calcular el valor de
x2 para los gatitos negros y grises, en primer lugar deberíamos
restar el número de gatitos negros observado del número de gati-
tos negros esperado (30 - 37 ,5 = - 7,5) y elevar este número al
cuadrado: -7,52 = 56,25. Luego, dividimos este resultado por el
número de gatitos negros esperados: 56,25/37,5 = 1,5.
Repetimos los cálculos para el número de gatitos grises espera-
dos: (20 - 12,5)2/12,5 = 4,5. Para obtener el valor global de Ji-
cuadrado, sumamos los valores (observados - esperados)2/espe-
rados: 1,5 + 4,5 = 6.
El siguiente paso consiste en determinar la probabilidad aso-
ciada con este va lor de Ji-cuadrado calculado, que es la proba-
bilidad de que la desviación entre los valores esperados y los
observados se deba al azar. Este paso requiere la comparación
del valor calculado de Ji-cuadrado (6) con los valores teóricos
que tienen los mismos grados de liberada en una tabla de Ji-cua-
drado. Los grados de libertad representan el número de formas en
las cuales las clases esperadas son libres para variar. En la prueba
de bondad del ajuste de Ji-cuadrado, los grados de libertad son
iguales a n- 1, donde n es el nú1nero de fenotipos diferentes espe-
rados. Aquí, perde1nos un grado de libertad porque el número
total de progenie esperado debe ser igual al número total de pro-
genie observada. En nuestro ejemplo, tenemos dos feno tipos
esperados (negro y gris), entonces n = 2, y los grados de liber-
tad son 2 - 1 = 1.
Ahora que ya hemos calculado el valor de Ji-cuadrado y hemos
obtenido los grados de libertad asociados, podemos hallar la pro-

Cuadro 3-7 Valores críticos de la distribución x2

p

df 0,995 0,975 0,9 0,5 o, 1 0,05* 0,025 0,01 0,005

1 0,000 0,000 0,016 0,455 2,706 3,841 5,024 6,635 7,879

2 0,010 0,051 0,211 1,386 4,605 5,991 7,378 9,21 O 10,597

3 0,072 0,216 0,584 2,366 6,251 7,815 9,348 11,345 12,838
4 0,207 0,484 1,064 3,357 7,779 9,488 11,143 13,277 14,860
5 0,412 0,831 1,61 O 4,351 9,236 11,070 12,832 15,086 16,750

6 0,676 1,237 2,204 5,348 10,645 12,592 14,449 16,812 18,548

7 0,989 1,690 2,833 6,346 12,017 14,067 16,013 18,475 20,278

8 1,344 2,180 3,490 7,344 13,362 15,507 17,535 20,090 2 1,955

9 1,735 2,700 4,168 8,343 14,684 16,919 19,023 21,666 23,589
10 2,156 3,247 4,865 9,342 15,987 18,307 20,483 23,209 25,188

11 2,603 3,816 5,578 10,341 17,275 19,675 21,920 24,725 26,757

12 3,074 4,404 6,304 11,340 18,549 21,026 23,337 26,217 28,300

13 3,565 5,009 7,042 12,340 19,812 22,362 24,736 27,688 29,819

14 4,075 5,629 7,790 13,339 21,064 23,685 26,119 29,141 31,319

15 4,601 6,262 8,547 14,339 22,307 24,996 27,488 30,578 32,801

P, probabilidad; df, grados de libertad.

*La mayoría de los científicos asumen que, cuando P < 0,05, existe una diferencia significativa entre los valores observados y esperados en la prueba de Ji al cuadrado.
66 CAPITULO 3

habilidad 1nediante una tabla de Ji-cuadrado (cuadro 3-7). Los Generación P

grados de libertad se indican en la columna de la izquierda, y las
probabilidades, en la parte superior de la tabla; en el cuerpo de la Flores Flores
X
tabla, se indican los valores de Ji-cuadrado asociados con estas púrpuras blancas
probabilidades. P1imero, identifique la fila con·espondiente a los
grados de libertad apropiados; en nuestro ejemplo con 1 grado de Cruzamiento
libertad, es la primera fila de la tabl a. Después, debe encontrar a
lo largo de esa fila el valor teórico que n1ejor coincida con nues-
tro valor de Ji-cuadrado calculado (6). Los valores teóricos de Ji- Generación F1 Una planta con flores
cuadrado aumentan de izquierda a derecha a lo largo de la fila, y púrpuras se cruza con una
Flores planta con flores blancas, y
los valores de las probabilidad disminuyen en ese mismo sentido.
Nuestro valor de Ji-cuadrado de 6 se ubica entre el valor de 5,024
asociado con una probabilidad de 0,025 y el valor de 6,635 aso-
púrpuras la F1 se autofecunda ...
~-
utofecundación
ciado con una probabilidad de 0,0 1.
. ..para producir 1OS
Por consiguiente, la probabilidad asociada con nuestro valor de descendientes F2 con
Ji-cuadrado es menor de 0,025 y es mayor de 0,01 . Esto significa Generación F2 flores púrpuras y 45 con
que existe una probabilidad menor del 2,5 % de que la desviación 105 púrpuras flores blancas (una
obtenida entre los valores observados y esperados de gatitos 45 blancas aparente relación 3: 1).
negros y g1ises se deba aJ azar.
La mayoría de los científicos utilizan un nivel de probabi li dad r -
Fenotipo Observado Esperado
de 0 ,05 como valor límite : si la probabilidad de que el azar sea
el responsable de la desviación observada es igual o m ayor a Púrpura 105 :f4 X 150 = 112,5
0,05, suponen que las diferencias observadas son aleatorias. Blanca 45 ~ X 150= 37,5
Cuando esta probabilidad es n1enor de 0,05, los científicos acep-
tan que el azar no es el responsable de la desviación y que existe
una diferencia significativa. La expresión diferencia significativa
"'
~
Total

2
150
'
Los valores esperados se
obtienen multiplicando
la proporción esperada
quiere decir que algún factor di stinto del azar es responsable de x2 = S (O-E)
E por el total ...
que los valores observados sean diferentes de los esperados.
Respecto de nuestros gatitos, quizá uno de los genotipos expe1i - (105- 112,5)2 (45-37,5) 2
xz = +
112,5 37,5 1
mentó m ayor tasa de mortalidad antes de que la progenie fu era ... y después se calcula el
contabilizada o quizá hubo otro factor que sesgó las proporcio- = 56,25 56,25 [ valor de Ji al cuadrado.
nes observadas.
x2
112,5 + 37,5
A l elegir 0 ,05 como valor límite, los científicos se han puesto x2 = 0,5 + 1,5 = 2,0
'- ,.
de acuerdo en aceptar que, aunque obtengamos una probabilidad La probabilidad asociada con
de, por ejemplo, 0,01 , aún existe un 1% de probabilidad de que r el valor de Ji al cuadrado
las diferencias entre los valores observados y los esperados se Grados de libertad n -1 = calculado es de O, 10 a 0,50, lo
deban solo al azar. En la figura 3-14, se ilustra el cálculo del valor Grados de libertad= 2-1 1 = que indica una alta probabilidad
de Ji-cuadrado. n 1NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 38 Probabilidad (a partir del de que la diferencia entre los
Cuadro 3-5) 0.1 < P < 0.5 valores observados y esperados
'- se deba al azar.
"-
j
ÍConclusión: ninguna diferencia significativaJ
[ entre los valores observados y esperados.

CONCEPTOS Figura 3-14. Se utiliza una prueba de Ji al cuadrado para determinar

Las diferencias entre las proporciones observadas y esperadas pueden
surg ir por azar. La prueba de bondad del ajuste de Ji-cuadrado puede
usarse pa ra eva luar si es probable que las desviaciones entre los
números observados y esperados se deban al azar o a algún otro fac-
tor sign ificativo.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
Se real izó una prueba de Ji-cuadrado para comparar la progenie
observada y esperada, y la probabilidad asociada con el valor de Ji-
cuadrado calcu lado es de O, 72. ¿ Qué representa esta probabil idad?
la probabilidad de que la diferencia entre los valores observados y
esperados se deba al azar.
a. Probabilidad de que se hayan obten ido los resu ltados correctos
b. Probabilidad de obtener los números observados
c. Probabilidad de que la diferencia entre los números observados y
esperados sea significativa
d. Probabilidad de que la diferencia entre los números observados y
esperados pueda deberse al aza r
 Principios básicos de la herencia 67

RESUMEN DE CONCEPTOS

■ Gregor Mendel descubrió los principios de la herencia. Su
éxito puede atribuirse a la elección de la planta de guisantes
como organismo de experimentación, la utilización de carac-
terísticas con fenotipos escasos y fáciles de distinguir, su
enfoque experimental, la aplicación de las matemáticas para la
interpretación de los resultados y la cuidadosa atención a los
detalles.
■ Los genes son factores heredados que detenninan una caracte-
rística. Las formas alternativas de un gen se denominan alelos.
Los alelos se localizan en un sitio específico, llamado locus,
de un cromosoma, y el conjunto de genes de un organismo es
su genotipo. El fenotipo es la manifestación o aparición de
una característica y puede hacer referencia a características
físicas, bioquúnicas o conductuales. Solo se hereda el genoti-
po, no el fenotipo.
■ El princípío de la segregación afirma que un organismo
diploide tiene dos alelos que codifican un rasgo, y que estos
dos alelos se separan en proporciones iguales cuando se for-
man los gametos.
■ El concepto de dominancia indica que, cuando hay dos alelos
diferen tes en un heterocigoto, solo el rasgo de uno de ellos, el
alelo dominante, se observa en el fenotipo. Se dice que el otro
alelo es recesivo.
■ Los dos alelos de un genotipo se localizan en cromosomas
homólogos. La separación de los cromosomas homólogos en
la anafase I de la meiosis determina la segregación de los
alelos.
■ La probabilidad es la posibilidad de que ocurra un evento par-
ticular. La regla de la multiplicación afirma que la probabili-
dad de que dos o más eventos independientes ocun·an en
forma simultánea se calcula multiplicando las probabilidades
de los eventos independientes. La regla de la adición afirma
que la probabilidad de que ocurra cualquiera de dos o más
eventos mutuamente excluyentes se calcula stunando las pro-
babilidades de los eventos.
■ La expansión binomial puede utilizarse para determinar la
probabilidad de una combinación particular de eventos.
■ Un cruzamiento de prueba revela el genotipo (homocigótico o
heterocigótico) de un organismo que tiene un rasgo dominan-
te, y consiste en cruzar a ese individuo con uno que presenta
el genotipo recesivo homocigótico.
■ El principio de la distribución o selección independiente afir-
ma que los genes que codifican características diferentes se
segregan de manera independiente cuando se forman los
gametos. La distribución o selección independiente se basa en
la separación aleatoria de los pares de cromosomas homólo-
gos durante la anafase I de la meiosis; tiene lugar cuando los
genes que codifican las dos características se localizan en
diferentes pares de cromosomas.
■ Las proporciones observadas de la progenie de un cruzamiento
genético pueden ser diferentes de las proporciones esperadas de-
bido al azar. Puede utilizarse la prueba de bondad del ajuste de
Ji-cuadrado para detenninar la probabilidad de que una diferen-
cia entre los valores observados y los esperados se deba al azar.

TÉRMINOS IMPORTANTES

alelo (p. 48) cruzamiento retrógrado genotipo probabilidad (p. 54)

bondad del ajuste de Ji-cua-
drado (p.64)
concepto de dominancia
(p. 51)
cruzamiento de prueba (p. 57)
cruzamiento dihíbrido (p. 59)
c1uzamiento monoh.fbrido
(p. 49)
cruzan1iento recíproco (p. 50)
(p. 53)
cuadrado de Punnett (p. 53)
dominante (p. 51)
gen (p. 48)
generación F 1 (primera gene-
ración fili al) (p. 50)
generación F2 (segunda gene-
ración filial) (p. 50)
generación P (parental) (p. 49)
heterocigoto (p. 48)
h.omocigoto (p. 48)
locus (p. 48)
principio de la segregación
(primera ley de Mendel)
(p. 5 1)
principio de la distribución o
selección independiente (se-
gunda ley de Mendel) (p. 59)
probabilidad condicional
(p. 56)
recesivo (p. 51)
regla de la adición (p. 55)
regla de la multiplicación
(p. 54)
teoría cromosómica de la
herencia (p. 52)
tipo silvestre (p. 58)

l. b
2. Un locus es un lugar de un cromosoma donde se localiza
información genética que codifica una característica. Un alelo
es una versión de un gen que codifica un rasgo. Un genotipo
es eJ conj unto de alelos de tLn organismo, y un feno tipo es la
manifestación o aparición de una característica.
3. Porque los rasgos de ambos alelos aparecieron en la progenie
Fz.
4. d
5. a
6. Tanto el principio de la segregación como el principio de la
distribución o selección independiente hacen referencia a
la separación de alelos durante la anafase I de la n1eiosis. El
pri ncipio de la segregación afirma que estos alelos se sepa-
ran , y el principio de la di stribución o selección independien-
te afirma que se separan independientemente de los alelos
localizados en otros locus.
7. d
 68 CAPITULO 3

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
En los conejos, el p elo corto (S) es dominante sobre e l pelo largo (s). Se llevan a cabo los sig uientes
cruzamientos que producen las progenies que se muestran a continuación. Enumere todos los posibles
genotipos de los progenitores en cada cruzamiento.

Progenitores Progenie
a. corto x corto 4 cortos y 2 largos
b. corto x corto 8 cortos
c. corto x largo 12 cortos
d. corto x largo 3 cortos y 1 largo
e. largo x largo 2 largos

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Todos los genotipos posibles de los progenitores en cada cru-
zamiento.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
■ El pelo corto es dominante sobre el pelo largo.
■ Los fenotipos de los progenitores de cada cruzamiento.
■ Los fenotipos y la progenie de cada cruzamiento
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Interrelación de conceptos: Proporciones en cruzamientos
simples , en la Sección 3.2.
tico (SS). Si ambos progenitores fueran heterocigóticos,
esperaría1nos que ¼ de la progenie f uera de pelo largo (ss),
pero no observamos ningún descendiente de p elo largo. El
otro progenitor podría ser homocigótico (SS) o heterocigóti-
co (Ss); en tanto que un progenitor sea bomocigótico, toda la
descendencia será de pelo corto . Desde el pun to de vista teó-
rjco, es posible, aunque improbable, que ambos progenitores
sean heterocigóticos (Ss x Ss). Si ambos fueran heterocigóti-
cos, esp eraríam os que dos de los ocho descendientes fueran
de p elo largo. Si bien no se o bserva progenie de pelo largo,
es posibl e que solo por azar no haya nacido ning ún conejo
de peJo largo en la progenie de 8 1niembros de este cruza-
·miento.

c. corto x largo 12 cortos

Pasos de la solución
El progenitor de p elo corto podría ser SS o Ss. El progenitor
Nota: el problema En este problema, es útil reunir, primero, tanta infor- de pelo largo debe ser ss. Si el progen itor de pelo corto fuera
pregunta por todos mación acerca de los genotipos de los progenitores heterocigótico (Ss), se esperaría que la mitad de la descenden-
los genotipos posibles
de los padres.
como sea posible sobre la base de su fenotipo. D es- cia fu era de pelo largo, pero no observamos progenie de p elo
pués, se pueden observar los tipos de progenie que largo. Por lo tanto , lo más probable es que este progenitor sea
producen para obtener l a información que nos falta. homocigótico (SS). En teoría es posible, pero improbable, que
el progenitor sea heterocigótico y que solo por azar no se haya
a. corto x corto 4 cortos y 2 largos producido progenie de pelo largo.

Nota: cuando ambos Como el pelo corto es dominante sobre el pelo largo, d. corto x largo 3 cortos y 1 largo
progenitores con
heterocigóticos (5s x
un conejo de pelo corto podría ser SS o Ss. Los dos
Ss), esperamos obser- descendientes de pelo largo deben ser ho1nocigóticos Sobre la base de su fenotipo, el progenitor de p elo corto
var una proporción (ss), porque el pelo largo es recesivo y solo aparecerá podría ser homocigótico (SS) o heterocigótico (Ss), pero la
3:1 en la progenie.
pero solo por azar la
en el fenotipo c uando ambos ale los presentes sean pa- presencia de un descendiente de peJo largo nos dice que el
progenie mostró una ra pelo largo. D ado que cada progenitor aporta uno de progenitor de pelo corto debe ser heterocigótico (Ss). El pro-
proporción 4:2 . los dos alelos hallados en la progenie, cada progenitor genitor de pelo largo debe ser ho mocigótico (ss).
debe tener e l alelo s y, por consiguiente, debe ser Ss.
e. largo x largo 2 largos
b. corto x corto 8 cortos
Como el pelo largo es recesivo, ambos progenitores deben ser
Los progenitores de p e lo corto podrían ser SS o Ss. Los ocho homocigóticos para un alelo de pelo largo (ss).
descendientes son de pelo corto (S_); por lo tanto, es proba-
ble que por lo me nos uno de los progenitores sea homocigó-
 Principios básicos de la herencia 69

Problema 2
En los gatos, el color negro del manto es dominante sobre el gris. Una gata negra cuya madre es
gris se aparea con un macho gris. Si esta hembra tiene una camada de seis gatitos, ¿cuál es la pro-
babilidad de que tres sean negros y tres sean grises?

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Por consiguiente, el cruza1niento es:

La probabilidad de que en una camada de seis gatitos tres sean
negros y tres sean grises. Gg X gg
Hembra negra Macho gris
¿Qué información se proporciona para resolver el proble-
ma?
1 +
/ 2 Gg negro
Recuerde: se puede
utilizar la expansión
■ Negro es dominante sobre gris. 1 binomial para deter•
/2 gg gris
minar la probabilidad
■ La madre de la camada es negra y su madre es gris. de diferentes combi-
■ El padre de la camada es gris. naciones de rasgos en
la progenie de un cru-
Podemos usar la expansión binomial para detern1i- zamiento.
Para obtener ayuda con este problema, repase: nar la probabilidad de obtener tres gatitos negros y
La expansión binomial y la probabilidad, en la Sección 3.2. tres grises en una camada de seis. Llamemos pala
probabilidad de que un gatito sea negro y q a la
probabilidad de que un gatito sea gris. El binomio
Pasos de la solución es (p + q)6 , cuya expansión es la siguiente: Pista: véase la explica-
ción sobre la manera
de expandir el binomio
Como negro (G) es dominante sobre gris (g), un en las pp. 56-57.
Pista: podemos deter- gato negro puede ser homocigótico (GG) o hete-
minar el genotipo de los rocigótico (Gg). En este problema, la hembra
padres de la hembra a
partir de su fenotipo y el
negra debe ser heterocigótica (Gg), porque su El término 20p3q 3 indica la probabilidad de obtener tres gati-
fenotipo de su madre. madre es gris (gg), y ella debe heredar uno de los tos negros y tres grises en una camada de seis. Las probabili-
alelos de su madre. El macho gris es bomocigóti- dades de p y q son, en ambos casos, de 1/ 2, de manera que la
co (gg), porque gris es recesivo. probabilidad global es 20( 1/2)3( 1/2)3 = 20/64 = 5/16.

Problema 3
En el maíz, los granos púrpuras son don1inantes sobre los granos amarillos, y los granos henchi-
dos son dominantes sobre los encogidos. Se cruza una planta de maíz de granos púrpuras y hen-
chidos con una de granos amarillos y encogidos, y se obtiene la s:Ílguiente progenie:

púrpuras, henchidos 112

púrpuras, encogidos 103
a111arillos, henchidos 91
amarillos, encogidos 94

¿Cuáles son los genotipos n1ás probables de los progenitores y de la progenie? Investigue su
hipótesis genética 1nediante una prueba de Ji-cuadrado.

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? ■ Los fenotipos de los progenitores.

Los genotipos de los progenitores y de la progenje. Una prue- ■ Los fenotipos y los números de la diferente progenie del
ba de Ji-cuadrado para comparar los resultados observados y cruzamiento.
esperados.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema? Para obtener ayuda con este problema, repase:
Secciones 3.3 y 3.4.
■ Los granos púrpuras son dominantes sobre los granos
an1ruillos, y los granos henchidos son dominantes sobre
los granos encogidos.
 70 CAPITULO 3

'

Pasos de la solución

L a mejor manera de co1nenzar a resolver este problema con- l: 1: 1: l esperada para este cruzamiento. Si la probabilidad de
siste en desco.mponer este cruzamiento en c1uzamientos sim- que la difeTencía entre lo observado y lo esperado se deba al
ples para una sola característica (el color de la semilla o su azar es baja, la progenie no tiene la proporción esperada, y
forma) . algún otro factor significativo debe de ser responsable de la
desviación.
P púrpura x amarillo henchido x encogido Los números observados y esperados son los siguientes:
F1 112 + 103 = 215 púrpuras 112 + 91 = 203 henchidos
Fenotipo Observado Esperado
91 + 94 = 185 amarillos 103 + 94 = 197 encogidos
púrpura, henchido 112 1/ 4 X 400 = 100
Pista: una buena estra-
tegia en un cruzamiento En este cruzarrliento, púrpura x amarillo produce púrpura, encogido 103 1
/4 X 400 = 100
que implica múltiples alrededor de 1/ 2 púrpura y 1/2 amarillo. El cruza-
características consiste amarillo, h enchido 91 1/4 X 400 = 100
miento entre un beterocigoto y un homocigoto
en analizar los resulta-
dos para cada caracterís- suele producir una proporción de 1: 1. Como el amarillo, e ncogido 94 1
/4 X 400 = 100 Pista: véase la figura
tica por separado. pú1-pura es dominante, el progenitor pú1-pura debe 3-13 para obtener
ayuda sobre cómo
ser heterocigótico (Pp), y el progenitor amarillo, efectuar una prueba
Para determinar la probabilidad de que la diferencia
horr1ocigótico (pp). La p1·ogenie púrpura producida por este de Ji-cuadrado.
entre lo observado y lo esp erado se deba al azar, cal-
cruzamiento debe ser heterocigótica (Pp) y la progenie amari.-
culamos un valor de Ji-c uadrado mediante la fórmula
lla, homocigótica (pp).
Ahora, examinaremos la otra característica.
x2 = l: [(observado - esperado)2/esperado]:
H enchido x encogido produce 1/ 2 henchido y 1/2
Recuerde: la regla de
la multiplicación afirma
encogido, o una proporción de 1:1 , y por lo tanto, (112 -100)2 (103 -100)2 (91- 100)2 (94 - 100)2
que la probabilidad de estos fenotipos también son producidos por un x2= + + +
que ocurran en forma cruzamiento entre un heterocigoto (Ff) y un 100 100 100 100
simultánea dos o más
eventos independientes homocigoto (ff>; la progenie de granos henchidos
se calcula multiplicando será heterocigótica (Ff) y la de granos encogidos, 122 32 92 62
sus probabilidades inde-
homocigótica (jJ).
- + + + +
pendientes. 100 100 100 100
Ahora, combinemos los dos cruzamientos y uti-
licemos la regla de la multiplicación para obtener 144 9 81 36
los genotipos g lobales y las proporciones de cada - + + + +
geno tipo: 100 100 100 100

= 1,44 + 0,99 + 0,81 + 0,36 = 2,70

P Púrpura, henchido x amarillo, encogido
PpFf ppff Ahora que conocemos el valor de Ji-cuadrado, debemos deter-
F 1 Pp Ff = 1/ 2 púrpura x 1/2 henchido = 1/ 4 púrpura, henchido minar la probabilidad de este valor se de ba al azar. Para obtener
Pp jf = 112 púrpura x 1
/2 encogido = 1/4 púrpura, encogido esta probabilidad, p1imero calculamos los grados de libertad,
1/2 1/2 1/4 que para una prueba de la bondad del aj uste de Ji-c uadrado
pp Ff = amarillo x henchido= amarillo, henchido
son n - 1, donde n equivale al número de clases fenotípicas
pp jf = 1/2 amarillo x 1/2 encogido = 1
/4 amarillo, encogido esperadas . En este caso, hay cuatro clases fenotípicas espera-
das, de manera que los grados de libertad son 4 - ] = 3 .
Ahora, debemos buscar el valor de Ji-cuadrado en una tabla de
Nuestra expli cación genética predice que, de este cruzamie n- Ji-cuadrado (véase cuadro 3-7). Seleccionamos la fila que
to, deberíamos observar ¼ de progenie de granos púrpuras y co1Tesponde a tres grados de libe1tad y buscamos a lo largo de
bencbjdos; 1/4 de progenie de granos púrpuras y encogidos; ella para encontrar nuestro valor calculado de Ji-c uadrado. El
1 1 valor calc ulado de Ji-c uadrado de 2,7 se encuentra entre 2,366
/4 de progenie de granos amarillos y henchidos; /4 de pro-
genie de granos amarillos y encogidos. Se produjo un total (una probabilidad de 0,5) y 6,251 (una probabilidad de 0 ,J ) .
de 400 descendientes, por lo tanto se espera 1/4 x 400 = 100 Por consiguiente, la probabilidad (P ) asociada con el valor de
de cada fenotipo. Los números observados no se ajustan Ji-cuadrado es 0,5 < P < 0 ,1. Esta es la probabilidad de que la
exactamente a los esperados. ¿Podría deberse al azar la dife- diferencia entre lo observado y los esperado se deba al azar,
rencia entre lo que observamos y lo que esperamos? Si la que en este caso es relativan1ente alta, de manera que es pro-
probabilidad de que el azar solo sea responsable de la dife- bable que el azar sea responsable de la desviación. Podemos
rencia entre lo observado y lo esperado es alta, presumire- concluir en que la progenie sí aparece en la proporción 1: 1: 1: 1
mos que la progenie se ha producido con la proporción prevista por nuestra explicación genética.

Sección 3.1
l. ¿Por qué fue tan exitoso el enfoque de Mendel para el estu-
dio de la herencia?
2. ¿ Cuál es la diferencia entre genotipo y fenotipo?
Sección 3.2
3. ¿Cuál es el principio de la segregación? ¿Por qué es impor-
tante?
4. ¿En qué difieren los principios de Mendel de los del concep-
to de herencia combinada analizado en el capítulo 1?
5. ¿Qué es el concepto de dominancia?
6. ¿Qué son la regla de la adición y de la multiplicación, y
cuándo deben aplicarse?
7. Indique las proporciones fenotípicas que pueden aparecer
en la progenie de cruzamientos simples y los genotipos
Introducción
12. En la introducción del capítulo, se analizó la herencia del
cabello pelirrojo. En el pasado, a veces se consideró que el
cabello pelirrojo era un rasgo recesivo en los seres humanos
y, otras veces, se consideró que era un rasgo dominante.
¿Qué caracte,i sticas de herencia se esperaría que presentara
eJ cabello pelirrojo co1no rasgo recesivo? ¿Qué característi-
cas se esperaría que presentara si fuera un rasgo dominante?
Sección 3.1
*13. ¿Qué características de un organismo lo tomarían adecuado
para estudios de los principios de la herencia? ¿Puede nom-
brar varios organismos que tengan estas características?
Sección 3.2
14. En los pepinos, el color naranja del fruto (R) es dominante
sobre eJ color crema (r). Se cn1za una planta de pepinos
homocigótica para el color naranj a con una planta homo-
cigótica para el color crema. Se entrecruza la F 1 para pro-
ducir la F2_
a. Mencione los genotipos y fenotipos de los progenito-
res, la F 1 y la F2 .
b. Mencione los genotipos y fenotipos de la descendencia
de un cruzanú ento retrógrado entre la F 1 y un progeni-
tor de frutos naranja.
c. Mencione los genotipos y fenotipos de un cruzamiento
retrógrado entre la F 1 y el progenitor de frutos crema.
15. La figura 1-1 (p. 2) muestra tres niñas, una de las cuales
presenta albinismo. ¿Podrían ser hermanas las tres niñas
mostradas en la fotografía? ¿Por qué o por qué no?
Principios básicos de la herencia 71
de los progenitores qu e pueden dar origen a cada pro-
porción.
8. ¿Qué es la teoría cromosómica de la herencia? ¿Por qué fue
importante?
Sección 3.3
9. ¿Qué es el principio de la distribución o selección indepen-
diente? ¿Cómo se relaciona con el principio de la segregación?
10. ¿En qué fases de la mitosis y la meiosis tienen lugar la
segregación y la distribución o selección independiente?
Sección 3.4
11. ¿Cómo se utiliza la prueba de bondad del ajuste de Ji-cua-
drado para analizar cruzamientos genéticos? ¿Qué indica la
probabilidad asociada con un valor de Ji-cuadrado acerca de
los resultados de un cruzamiento?
16. W. McKay cruzó una planta de melón que producía semi-
f:;."ll~s de color haban~ c~n una planta que producía semillas
º' ºA'º' roJas y obtuvo los s1gu1 entes resultados (J. W. McKay.
1936, Journal of Heredity 27: 110-112).
Cruzamiento Fl F2
color habano o x rojo o 13 semillas color 93 semillas color
habano habano, 24 rojas
a. Explique la herencia de las semillas de color habano y
rojas en esta planta.
b. Asígnele símbolos a los alelos de este cruzamiento e
indique los genotipos de todas las plantas individuales.
*17. El manto de color blanco (w) de los cobayos es recesivo
Je.•"'" respecto del negro (W). En 1909, W. E. Castle y J. C.
!,:.Y::- Phillips trasplantaron un ovario de una cobayo he1nbra
negra a una hembra blanca, a la que se le habían resecado
los ovarios. Después, aparearon esta hembra blanca con un
macho blanco. Toda la descendencia del apareamiento fue
de color negro (W. E. Castle y J. C. Phillips. 1909.
Science 30:312-313).
(Wegner/ARCO/Nature Picture Library; Nigel Cattlin/Alamy).
a. Explique los resultados de este cruzamiento.
b. Indique el genotipo de la descendencia de este cruza-
miento.
72 CAPITULO 3
c. ¿Qué indica este experimento, si es que indica algo,
acerca de la validez de las teo1ias de pangénesis y del
plasma germinal analizadas en el capítulo 1?
*18. En los gatos, la sangre de tipo A es la consecuencia de un
alelo (/ A) que es dominante respecto de un alelo (iB) que
produce sangre de tipo B. No existe sangre de tipo O. A
continuación , se muestran los tipos de sangre de gastos
n1acho y hembra que se aparearon, y los tipos de sangre
de sus gatitos. Indique los genotipos más probables de los
progenitores de cada camada.
Progenitor Progenitora
macho hembra Gatitos
a. A B 4 con tipo A, 3 con tipo B
b. B B 6 con tipo B
c. B 8 con tipo A
d. A A 7 con tipo A, 2 con tipo B
e. A A 10 con tipo A
f. A B 4 con tipo A, 1 con tipo B
19. La figura 3 -7 muestra los resultados de un cruzamiento
entre una pl anta de gui santes alta y una pl anta de guisan-
tes baja.
a. ¿ Qué fenotipos y proporciones se producirán si se rea-
liza un cruzamiento retrógrado entre una planta alta de
la progenie F 1 y el progenitor bajo?
b. ¿Qué fenotipos y proporciones se producirán si se rea-
liza u11 cruzamiento retrógrado entre una planta alta de
la progenie F 1 y el progenitor alto?
20. Juan tiene un gato blanco llamado Pedro. Cuando Juan
cruzó a su gato con un gato negro, obtuvo 1/2 de gatitos
blancos y ½ de gatitos negros. Cuando los gatitos negros
fueron entrecruzados, todos los gatitos que nacieron fue-
ron negros. Sobre la base de estos resultados, ¿concluiría
usted en que el color negro o blanco del n1anto en los
gatos es un rasgo recesivo? Explique su razonamiento.
*21. En las ovejas, el vellón brillante es el resultado de un alelo
(L) que es dominante sobre el
alelo (l) del vellón normal. Una
oveja (adulto hembra) con vellón
brillante se aparea con un carnero
(adulto macho) con vellón normal.
Después, la oveja da a luz a un
solo cordero con vellón normal.
¿Es posible determinar el genotipo
de los dos progenitores a partir de
esta única descendencia? De ser
así, ¿cuál es su genotipo? De lo
contrario, ¿por qué no es posible?
*22. La alcaptonuria es un trastorno metabólico en el que las
personas afectadas producen orina de color negro. La
alcaptonuria es el resultado de un alelo (a) que es recesivo
respecto del alelo para el metabolismo normal (A). María
tiene un rnetabolisn10 norn1al, pero su hermano presenta
alcaptonuria. El padre de María tiene alcaptonuria, 1nien-
tras que su madre presenta un metabolismo normal.
a. Indique los genotipos de María, su madre, su padre y
su hermano.
b. Si los padres de María tienen otro hijo, ¿cuál es la pro-
babilidad de que este niño presente alcaptonuria?
c. Si María se casa con un hombre que presenta alcapto-
nw·ia, ¿cuál es la probabilidad de que su primer hij o
tenga alcaptonuri a?
23. Suponga que usted cría jerbos mongoles. Usted advierte
que algunos de sus jerbos tienen manchas blancas, mien-
tras que otros tienen manto liso. ¿Qué tipo de cruzamien-
tos podría usted realizar para determinar si las 1nanchas
blancas se deben a un alelo recesivo o dominante?
24. La ausencia de pelo en los pen·os Rat terrier americanos
es un rasgo recesivo respecto de la presencia de pelo.
Suponga que usted tiene un Rat terrier con pelo, ¿cómo
puede determinar si el perro es homocigótico o heteroci-
gótico para el rasgo pelo?
*25. ¿Cuál es la probabilidad de arrojar un dado de seis caras y
obtener los siguientes números?
a. 2
b. 1 o 2
c. Un número par
d. Cualquier número menos el 6
*26. ¿Cuál es la probabilidad de arrojar dos dados de seis caras
y obtener los siguientes números?
a. 2 y 3
b. 6 y 6
c. Por lo menos un 6
d. Dos números iguales (2 unos o 2 dos o 2 tres, etc.)
e. Un número par en ambos dados
f. Un número par por lo menos en un dado
*27. En una familia de siete hijos, ¿cuál es la probabilidad de
obtener el siguiente número de varones y mujeres?
a. Todos varones
b. Todos hijos del mismo sexo
c. Seis niñas y un varón
d. Cuatro varones y tres niñas
e. Cuatro niñas y tres varones
28. La fenilcetonuria (PKU) es una enfermedad que se debe a
un gen recesivo. Dos progenitores normales tienen un hijo
con PKU.
a. ¿ Cuál es la probabilidad de que un espermatozoide del
padre contenga el alelo de PKU?
b. ¿ Cuál es la probabilidad de que un óvulo de la madre
contenga el alelo de PKU?
c. ¿Cuál es la probabilidad de que el próximo hijo presen-
te PKU?
d. ¿Cuál es la probabilidad de que el próximo hijo sea
heterocigótico para el gen de PKU?
*29. En las cucarachas alemanas, las alas curvas (cv) son recesi-
vas respecto de las alas normales (cv+). Una cucaracha ho-
mocigótica de alas normales se cruza con una cucaracha
homocigótica de alas curvas. La F 1 se entrecn1za para pro-
ducir la F2. Asuma que el par de cromosomas que contienen
el locus para la forma de las alas es metacéntrico. Dibuje

este par de cromosomas como aparecerían en los progenito-
res, la F 1 y cada clase de la progenie F2 en la metafase I de
la meiosis. Asu1na que no se produce entrecruzamiento. En
cada etapa, señale en los cromosomas la localización de los
alelos para la forma de las alas (cv y cv+).
*30. En los cobayos, el alelo para el pelaje negro (B) es domi-
nante sobre el alelo para el pelaje marrón (b). Se cruza un
cobayo negro con un cobayo man·ón, y producen cinco
cobayos F 1 negros y seis cobayos F 1 marrones.
a. ¿Cuántas copias del alelo negro (B) habrá en cada célu-
la de un cobayo F 1 negro en las siguientes etapas: G 1,
G2, meta.fase de la mitosis, meta.fase I de la meiosis,
metafase II de la meiosis y después de la segunda cíto-
cinesis? Asuma que no se produce entrecruzamiento.
b. ¿Cuántas copias del alelo marrón (b) habrá en cada
célula de un cobayo F I marrón en las mimas etapas que
las enumeradas en la parte a? Asuma que no se produce
en trecruza1niento.
Sección 3.3
31. En la sandía, el fruto amargo (B) es dominante sobre el
fruto dulce (b), y los puntos amarillos (S) son dominantes
sobre la ausencia de puntos (s). Se cruza una planta ho1no-
cigótica que tiene fruto a1nargo y puntos amarillos con
una planta homocigótica que tiene fruto dulce y ausencia
de puntos. Se entrecruza la F 1 para producir la F2 .
a. ¿Cuáles son las proporciones fenotípicas en la F2 ?
b. Si se realiza un cruzamiento retrógrado entre una plan-
ta F 1 con la planta progenitora amarga y de puntos
a1narillos, ¿qué fenotipos y proporciones se esperan en
la descendencia?
e~ Si se realiza un cruzamiento retrógrado entre una planta
F 1 con la planta progenitora dulce y sin puntos, ¿qué
fenotipos y proporciones se esperan en la descendencia?
32. La figura 3-10 muestra los resultados de un cruzamiento
dihfbrido que involucra la forma y el color de las semillas.
a. ¿Qué proporción de progenie F2 con semillas lisas y
amarillas de este cruzamiento es homocigótica en
ambos locus?
b. ¿Qué proporción de la progenie F2 con semi11as lisas y
a1narillas de este cruzamiento es ho1nocigótica por lo
1nenos en un Jocus?
*33. En los gatos, las orejas rizadas son el resultado de un alelo
(Cu) que es dominante sobre el
alelo (cu) para las orejas nor-
n1ales. El color negro es el
resultado de un alelo que se
segrega de manera indepen-
diente (G) que es dominante
sobre un alelo para el gris (g).
Un gato gris homocigótico para
orejas rizadas se aparea con un
gato negro ho1nocigótico con
orejas normales. Todos los
gatos de F 1 son negros y tienen (Biosphoto/J. -L Klein &
orejas rizadas. M. -L Hubert/Peter Arnold).
Principios básicos de la herencia 73
a. Si se aparean dos de los gatos de F 1, ¿qué fenotipos y
proporciones se esperan en la F2?
b. Un gato F 1 se aparea con un gato callejero que es gris y
tiene orejas normales. ¿Qué fenotipos y proporciones
de progenie se esperan de este cruzamiento?
*34. Se cruzan los siguientes dos genotipos: Aa Bb Ce Dd Ee x
Aa bb Ce Dd Ee. ¿Cuál será la proporción de los siguien-
tes genotipos en la progenie de este cruzanúento?
a. Aa Bb Ce Dd Ee
b. Aa bb Ce dd ee
c. aa bb ce dd ee
d. AA BB ce DD EE
35. En los ratones, el alelo para ojos color damasco (a) es
recesivo respecto del alelo de ojos color marrón (a+). En
un locus de distribución o selección independiente, un
alelo para el manto de color habano (t) es recesivo respec-
to de un alelo para el manto de color negro (t+). Se cruza
un ratón homocigótico para ojos man·ones y manto de
color negro con un ratón que tiene ojos color damasco y
manto color habano. Se entrecruza la F 1 resultante para
producir la F2 . En una camada de ocho ratones F2 , ¿cuál
es la probabilidad de que dos tengan ojos damasco y man-
tos de color habano?
36. En los pepinos, el fruto opaco (D) es dominante sobre el
fruto brilloso (el), el fruto de color naranja (R) es dominan-
te sobre el fruto de color crema (r) y los cotiledones amar-
gos (B ) son dominantes sobre los cotiledones no amargos
(b). Las tres características están codificadas por genes
localizados en pares de cro1nosomas diferentes. Se cruza
una planta homocigótica para fiuto opaco de color naranja
y cotiledones amargos con una planta que tiene fruto bri-
lloso de color crema y cotiledones no amargos. Se entre-
c1uza la F1 para producir la F 2 _
a. Indique los fenotipos y sus proporciones esperadas en
la F 2_
b. Se cruza una planta F 1 con una planta que tiene fruto
brilloso, de color crema y cotiledones no amargos.
Indique los fenotipos y las proporciones esperadas de
la progenie de este cruzamiento.
*37. Los alelos A y a se localizan en un par de cromosomas
metacéntricos. Los alelos B y b se localizan en un par de
cromosomas acrocéntri.cos. Se realiza un cruzamiento
entre individuos que tiene los siguientes genotipos: Aa Bb
Xªª bb.
a. Dibuje los cromosomas según aparecerían en cada tipo
de gameto producido por los individuos de este cruza-
miento.
b. Para cada tipo de progenie resultante de este cruza-
miento, dibuje los cro1nosomas según aparecerían en
una célula en Gi, G2 y meta.fase de la mitosis.
Sección 3.4
*38. J. A. Moore investigó la herencia de los patrones de mo-
f;._" teado en las ranas leopardo (J. A. Moore. 1943. Joumal of
º'º"'°' Heredity 34:3-7). El fenotipo pipiens tiene el moteado
74 CAPITULO 3

normal que le da su nombre a las ranas leopardo. E n cam- □ Hombres

bio, el fenotipo bu1nsi carece de manchas en el dorso.
Moore Jlevó a cabo los siguientes cruzamientos y produjo
O Mujeres
■ eE nanismo
J
la progenie indicada

Fenotipos parentales Fenotipos de la progenie

burnsi x burnsi 39 burnsi, 6 pipiens
bumsi x pipiens 23 bu1nsi, 33 pipiens
bumsi x pipiens 196 burnsi, 21 O pipiens

a. Sobre la base de estos resultados, ¿cuál es el modo de

herencia más probable del fenotipo burnsi?
b. Mencione los genotipos más probables de los progeni-
tores de cada cruzamiento (use B para el alelo burnsi y
B+ para el alelo pipiens).
c. Utilice una prueba de Ji-cuadrado para evaluar el ajuste
de los nú1neros observados de la progenie respecto del
número esperado sobre Ja base de los genotipos pro-
puestos por usted. (Adaptado de The Journal of Heredity 34:232).
*39. En el siglo XIX, un hombre con enanismo que vivía en
tz::." Utah tuvo una gran cantidad de descendientes: 22 hijos,
º ' ºAl°' 49 nietos y 250 bisnietos (véase la ilustración del árbol b. Sobre la base de su respuesta de la parte a, ¿cuál es la
genealógico familiar) , muchos de los cuales ta1nbién fue- proporción esperada de hij os enanos y nonnales en las
ron enanos (F. F. Stephens, 1943. Journal of Heredity familias presentadas en el cuadro? Utilice la prueba de
34:229_235). El tipo de enanismo hallado en esta fami lia Ji-cuadrado para detenninar si el número total de hijos
se denomina condrodisplasia metafisaria de tipo Schmidt, de etas familias (52 normales, 40 enanos) es significati-
aunque originalmente se pensó que era e nanismo acondro- vrunente distinto del nún1ero esperado.
plásico. Entre los familiares, el enanismo solo aparecía en c. Utilice las pruebas de Ji-cuadrado para determinar si el
los miembros que tenían un progenitor con enanismo. número de hijos de la familia C (1 normal, 6 enanos) y
Cuando un progenitor era enano, se producía la siguiente el número de la familia D (6 normales y 2 enanos) son
proporción en los números de hijos. significativa1nente distintos de los nú1neros esperados
sobre la base del tipo de herencia propuesta por usted.
Familia en la que ¿Cómo explicaría estas desviaciones respecto de la pro-
un progenitor Niños con talla Niños con
porción global esperada?
tenía enanismo normal enanismo
*40. El color rosado de los ojos y el albinismo son dos rasgos
A
B
15
4
7
6
tz;...• hallados en el ratón ciervo Peromyscus maniculatus. En
º' º"'°' los ratones con ojos rosados, el oj o carece de color e
e 1 6
impresiona rosado por los vasos sanguíneos de su interior.
D 6 2
Los ratones albinos carecen por completo de coJor e n eJ
E 2 2 pelaj e y los ojos. F. H . Clark c ru zó ratones de ojos rosados
F 8 4
con ratones albinos~ la F 1 resultante tenía ojos y pelaje de
G 4 4 coloración normal. D espués, cruzó a estos ratones F I con
H 2 1
ratones que tenían oj os rosados y eran albinos, y obtuvo
I o 1
los siguientes ratones. Es muy difícil distinguir a los rato-
J 3 1
nes albinos de los ratones albinos con ojos rosados; por Jo
K 2 3
tanto, él combinó estos dos fenotipos (F. H. Clark. 1936.
L 2 1 Journal of Heredity 27:259-260).
M 2 o
N 1 o Número
o o 2 Fenotipo de la progenie

Toral 52 40 p elaje silvestre, color de ojos sil vestre 12

pelaje silvestre, ojos rosados 62
a. Asumiendo que la condrodísplasia metafisaria de tipo albino } 78
Schmidt es infrecuente, ¿este tipo de enanismo se here-
albino, ojos rosados
da como un r asgo do1ninante o recesivo? Explique su
razona1niento. Total 152

a. Mencione el número esperado de progenie con cada
fenotipo si los genes para ojos rosados y albinismo se
segregan independientemente.
b. Utilice una prueba de Ji-cuadrado para determinar si
los números observados de progenie se aj ustan a los
números esperados con distribución o selección inde-
pendiente.
*41. En la amapola de California, un alelo para flores amarillas
(C) es dominante sobre un alelo para flores blancas (e). En
un locus de distribución o selección independiente, un
alelo para pétalos completos (F) es dominante sobre
un alelo para pétalos con flecos (f). Se cruza una planta
hornocigótica para pétalos amarillos y completos con una
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 3.2
42. El enanismo es un rasgo recesivo en el ganado Hereford.
Un ranchero del oeste de Texas descubre que varios de los
terneros de su manada son enanos y desea eliminar ese
rasgo no deseado lo antes posible. Suponga que el ranche-
ro lo contrata como asesor en genética para que lo aconse-
je acerca de có1no elüninar el rasgo del enanismo de su
manada. ¿Qué cruzamientos le aconsejaría al ranchero
para asegurarse de que el alelo que causa enanismo sea
eliminado de la manada?
*43. Un genetista descubre un ratón obeso en su colonia de
laboratorio. Cruza a este ratón obeso con uno norn1al.
Todos los ratones de la F 1 de este cruzamiento son de
tamaño normal. Cuando entrecruza a dos ratones F 1, ocho
de los ratones F 2 son de tamaño normal y dos son obesos.
Después, el genetista entrecruza dos de sus ratones obesos
y observa que toda la progenie de este cruzan1iento es
obesa. Estos resultados hacen que el genetista concluya
que la obesidad en los ratones es el resultado de un alelo
.
reces1vo.
Un segundo genetista de una universidad diferente tam-
bién descubre a un ratón obeso en su colonia de laborato-
ri o. Realiza los 111ismos cruzamientos que los practicados
por el primer genetista y obtiene los mismos resultados.
También concluye en que la obesidad en los ratones
se debe a un alelo recesivo. Un día, ambos genetistas se
encuentran en una conferencia de genética, se enteran de
los experimentos que realjzaba cada uno y deciden inter-
cambiar ratones. Ambos observan que cuando cruzan a
dos ratones obesos de laboratorios diferentes, toda la des-
cendencia es normal; en cambio, cuando cruzan a dos
ratones obesos del mismo laboratorio, toda la descenden-
cia es obesa. Explique sus resultados.
44. En los seres humanos, el albinismo es un rasgo recesivo
(véase la introducción del cap. 1). Un genetista estudia a
una serie de faniilias en la que ambos padres son normales
y por lo menos uno de los hij os presenta albinismo. El
Principios básicos de la herencia 7S
planta con flores blancas de pétalos con flecos. Se cruza
una de las plantas F 1 resultantes con una planta de flores
blancas y pétalos con flecos, y se obtiene la siguiente pro-
genie: 54 a1natillas con pétalos completos, 53 blancas con
pétalos completos y 10 blancas con pétalos con flecos.
a. Utilice una prueba de Ji-cuadrado para comparar los
números observados con los esperados para el cruza-
miento.
b. ¿Qué conclusión puede extraer de los resultados de la
prueba de Ji-cuadrado?
c. Sugiera una explicación para los resultados.
genetista deduce que ambos progenitores deben ser hete-
rocigóticos en estas fanulias, y que el albinis1no debe apa-
rece1· en 1/4 de los hijos de estas familias. Para su sorpresa,
el genetista halla que la frecuencia de albinismo entre los
hijos de estas fainilias es considerablemente superior a 1/4.
¿Podiía pensar en una explicación para esta frecuencia de
albinismo superior a la esperada en los hijos de estas
fainilias?
45. En la salamandI·a Plethodon cinereus, se observan dos
fenotipos distintos: una forma roja y una forma negra.
Algunos biólogos han especulado que el fenotipo roj o se
debe a un alelo autosómico que es dominante respecto de
un alelo para el negro. Lamentablemente, estas salanian-
dras no se aparean en cautiverio, de modo que la hipótesis
de que el rojo es dominante sobre el negro nunca se ha
investigado.
Un día, un estudiante de genética realizaba una ca1ninata
por el bosque y halló 30 salamandras hembra, algunas
rojas y otras negras, poniendo huevos. El estudiante colo-
có a cada hembra con
sus huevos (alrededor
de 20 a 30 huevos por
hen1bra) en una bolsa
de plástico y las llevó
al laboratorio. Allí, el
estudiante incubó con
éxito los huevos hasta
que las salamandras
salieron del cascarón. (George Grall/National Geographic/
Luego, registró el feno- Getty lmages).
tipo de las crías de
salamandra, junto con los feno tipos de sus madres. Así, el
estudiante tenía el fenotipo de 30 hembras y de sus proge-
nies, pero no tenía ninguna información sobre el fenotipo
de los padres.
Explique cómo el estudiante puede detenninar si el rojo
es dominante sobre el negro con esta información sobre
los fenotipos de las hembras y su descendencia.
 4
Determinación del sexo
y características ligadas al sexo

El extraño caso del sexo

del ornitorrinco
El ornitorrinco, Omithorhynchus anatinus, es uno de
los animal es más extraños de la naturaleza. Ti ene una
piel peluda y, como un mamífero, es de sangre caliente
y produce leche para alimentar a sus crías, pero carece
de dientes, tiene un pico y pone huevos como un ave, y
. las hembras no tienen pezones (la cría succiona leche
.. ...• directamente de la piel abdominal); los machos tienen
... . espolones en las patas traseras que liberan un veneno
..... letal similar al de las serpientes. El ornitorrinco presen-
... . .
. ta una mezcolanza tal de rasgos de mamíferos, aves y
..' ...
. . reptiles que los primeros científicos que examinaron un
.. ...
.. espécünen consideraron que podía ser un engaño ela-
. .. .
.. ......
.
.. borado producido mediante la unión de partes seleccio-
...
.. • 'I • • •
' .
nadas de varios organi sn1os diferentes. Pese a su aspec-
..... .::: . .·. .·
. ... . ..
.,
to extraño, el ornitorrinco es, desde el punto de vista
..... ::...... . .. . . .
.. . . .. . genético, un mamífero monotrema, una rama lateral
que se separó del resto de los mamíferos hace alrede-
dor de 166 millones de años.
El ornitorrinco vive en las regiones del este y el sur
. de Australia, y en la isla de Tasmania. Es un excelente
nadador que pasa la mayor parte del tiempo en peque-
Los cromosomas sexuales determinan el sexo del ornitorrinco. Las hembras
ños ríos y arroyos donde busca gusanos, ranas, larvas
tienen 1O cromosomas X, mientras que los machos tienen 5 cromosomas X y 5 cro-
mosomas Y. (Roger Hall/Science Source).
de insectos, camarones y cangrejos. Entre otras rarezas,
localiza a sus presas detectando las corrientes eléctricas
que producen (electrorrecepción). El genoma del orni-
torrinco se secuenció en 2008 y aportó una visión detall ada de la composición genética de
este extraño animal. Su genoma es relativamente pequeño para un mamífero, con 2300 millo-
nes de pares de bases de DNA y alrededor de 18 500 genes que codifican proteínas. Casi el
10% de sus genes codifican proteínas que intervienen en la recepción olorosa y química. El
genoma del ornitorrinco es una mezcla de características de mamíferos, reptiles y otras que
~ .
son umcas.
El sexo del ornitorrinco tan1bíén es inusual. En la mayoría de los mamíferos, que un orga-
nismo sea ,nacho o hembra depende de los cro mosomas sexuales. Las hembras tienen dos
cromosomas X, mientras q ue los machos tienen un solo cromosoma X y un cromosoma
sexual más pequeño denominado Y. Este es el tipo habitual de determinación del sexo en los
mamíferos, pero la n1anera de determinación en el omitoninco fu e un misterio durante
muchos años. Este animal tiene 52 cron1oso1nas, y los primeros genetistas observaron una
confusa 1nezcla de diferentes cromoso1nas en ornitorrincos macho y hembra, incluido un
grupo raro similar a una cadena de cromosomas en la m eiosis (fig. 4-1).
En 2004, Frank Grutzner y un grupo de otros científicos crearon pinturas fluorescentes para
marcar los cromosomas del omitoninco, de manera de poder segui r el comportamiento de
cromosomas individuales durante el curso de la meiosis. Lo que descubrieron fue llamativo:
77
 Y5
X5

Y4 Figura 4-1. Cromosomas sexuales del ornitorrinco. En la meiosis, los cromosomas sexuales forman estructuras

- -
Y3
X4
-
- similares a cadenas. (Adaptado de Veyrunes y cols., Genomes Research 18[6]: 965-973, 2008. Copyright 2008,
Cold Spring Harbar Laboratory Press).

Y2
.. -
X3
los ornitorrincos tienen diez cromosomas sexuales (las be1nbras tienen IO cromoso1nas X, mi.entras

X2
-- que los machos tienen cinco cromosomas X y cinco cromosomas Y). En la meiosis, estos cro1noso-
mas sexuales se alinean en un orden determinado y forman una larga cadena de cromosomas sexua-

•• les. Pese a lo que primero impresiona ser una gran confusión, los cromosomas sexuales del ornito-
rrinco se parean y se alinean con gran precisión, de manera que cada cigoto tiene exactamente cinco
cromosomas X, la mitad de los espermatozoides tienen cinco cromosomas X y la otra mitad, 5 cro-
Y1 n1osomas Y. Todavía no se conoce el mecanis1no que detennina esta separación precisa. El co1nplica-
do conjunto de cromosomas sexuales del ornitorri nco es solo un ejemplo de las variadas maneras en
que el sexo es determinado por la herencia e influye sobre ella.
X1

--
E n el capítulo 3, estudiamos los principios de Mendel de la
segregación y la di stribución o selección independiente y
vimos có1no estos principios explican mucho acerca de la natura-
leza de la herencia. Tras el redescubrimiento de los principios de
Mendel en 1900, los biólogos comenzaron a realizar estudios
genéticos en una amplia variedad de organismos diferentes. Al
aplicar de manera 1nás an1plia los principios de Mendel, se obser-
varon excepciones, y fue necesario concebir extensiones de estos
principios básicos de la herencia. En este capítulo, exploraremos
una de las principales extensiones de los ptincipios de Mendel: la
herencia de características codificadas por genes localizados en
los cromosomas sexuales, que suelen diferir en machos y hem-
bras (fig. 4-2). Estas características y los genes que las producen
se denominan ligados al sexo. Para comprender la herencia de
características ligada<; al sexo, debemos conocer primero cómo se
determina el sexo: por qué algunos miembros de una especie son
1nachos, y otros hembras. La primera prute de este capítulo se
centra en la deternunación del sexo. La segunda parte examina
cón10 se heredan las características codificadas por genes de los
cromosomas sexuales. En el capítulo 5 exploraremos algunas
otras 1naneras de interacción entre sexo y herencia.
Figura 4-2. El cromosoma sexual masculino (Y, a la izquierda) difiere
del cromosoma sexual femenino (X, a la derecha) en forma y tama-
ño. (Biophoto Associates/Photo Researchers).
78
Mientras consideramos la determinación del sexo y las cru·ac-
terísticas ligadas al sexo, será útil pensar acerca de dos p1incipios
importantes. Primero, hay vruios mecanis1nos diferentes de
determinación del sexo y, por último, el mecanismo de determi-
nación del sexo controla la herencia de las características ligadas
al sexo. Segundo, como otros pares de cromosomas, los cromo-
somas sexuales X e Y se aparean y se segregan en el curso de la
meiosis, pero no son homólogos en la 1nayor prute de su longi-
tud (sus secuencias de genes no codifican las mis mas caracterís-
ticas): la n1ayoría de los genes del cromosoma X son diferentes
de los genes del cromosoma Y. En consecuencia, los machos y
las hembras no tienen la mis1na cantidad de alelos en los locus
ligados al sexo. Esta diferencia del número de alelos ligados al
sexo genera distintos patrones de herencia en ,nachos y hen1bras.
IJ INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 14
4.1 El sexo es determinado por una serie
de mecanismos diferentes
La reproducción sexual es la formación de descendientes genéti-
camente distintos de sus progenitores; la mayoría de las veces,
dos progenitores aportan genes a su descendencia, y los genes se
segregan en nuevas combinaciones a través de la meiosis. En la
mayoría de los eucariontes, la reproducción sexual consiste en
dos procesos que llevan a una alternancia de células haploides y
diploides: la n1eiosis produce gametos haploides (esporas en las
plantas) y la fec undación produce cigotos diploides (fig. 4-3).
EJ término sexo hace referencia al fenotipo sexual. La mayoría
de los organismos tiene solo dos fenotipos sexuales: masculino y
femenino. La diferencia fundamental entre machos y hembras es
el tamaño del gai11eto: los machos producen gametos pequeños;
las hembras, gametos relativamente más grandes (fig. 4-4).
El mecani smo por e] que se establece el sexo se denomina de-
terminación del sexo. Definimos el sexo de un organismo en
referencia a su fenotipo. En ocasiones, un organismo tiene cromo-
somas o genes que suelen asociru·se con un sexo pero una anato-
mía que corresponde al sexo opuesto. Por ejemplo, en general las
células de las mujeres tienen dos cromosomas X, y las células de
los varones tienen un cromosoma X y un cromosoma Y. En casos
infrecuentes, algunas personas tienen anatomía masculina, aun-
que sus células contienen dos cromosomas X. Si bien estas per so-
nas son mujeres desde el punto de vista genético, nos referimos a
 Determinación del sexo y características ligadas al sexo 79

Hay vaiias maneras en las que surgen las diferencias sexual es.
La meiosis produce En algunas especies, ambos sexos están presentes en el misn10
Cigoto gametos haploides. organismo, una condición denominada hermafroditismo; se dice
que los organismos que tienen estructuras reproductoras tanto
Diploide (2n) masculinas como femeninas son monoicos ( que significa " una
casa"), mientras que los organi smos que tienen estructuras repro-
ductoras masculinas o fe1ne1únas son dioicos ("dos casas"). Los
Fecundación Meiosis seres humanos son dioicos. En las especies dioicas, la determina-
ción del sexo puede ser cromosómica, genética o ambiental.
Haploide (1n)

La fecundación Sistemas cromosómicos de determinación

(fusión de los Gametos
gametos) produce
un cigoto diploide.
___)
Figura 4-3. En la mayoría de los organismos eucariontes, la repro-
ducción sexual consiste en una alternancia de células haploides (1n)
y diploides (2n).
ellas como varones porque su fenotipo sexual es masculino.
(Co1no veremos m ás adelante en este mismo capítulo, estos vai·o-
nes XX suelen tener un pequeño fragmento del cromosoma Y
unido a otro cromoso1na).
CONCEPTOS
En la reproducción sexual, los progenitores aportan genes para pro-
ducir un descendiente que es genéticamente distinto de ambos
progenitores. En la mayoría de los eucariontes, la reproducción
sexual consiste en meiosis, que produce gametos haploides (o espo-
ras) y fecundación, que produce un cigoto diploide.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
¿Qué proceso causa la variación genética observada en la descenden-
cia producida por reproducción sexual?
Figura 4-4. Los gametos masculino y femenino (espermatozoide y
óvulo, respectivamente) difieren de tamaño. En esta fotografía, un
espermatozoide humano (con flagelo) penetra en un óvulo humano.
(Francis Leroy, Biocosmos/Science Photo Library/Photo Researchers).
del sexo
La teoría cromosó1nica de la herencia (véase cap. 3) afirma que
los genes se localizan en cromosomas, que sirven como vehículos
para la segregación de genes durante la meiosis. El descub1imien-
to de que el sexo de ciertos insectos es determinado por la presen-
cia o la ausencia de determinados cromosomas fue una prueba
definí tiva de esta teoría.
En 1891, Herm ann Henking observó una estructura pecu liar
en los núcleos de las células de insectos macho. Sin conocer su
función ni su relación con el sexo, denominó cuerpo X a esta
estructura. Más tarde, Clarence E. McClung estudió el cuerpo X
en saltamontes y reconoció que era un cromoso1na. M cClung lo
denominó cro1noso1na accesorio, pero finalmente fue conocido
como cromoso1na X, por la designación original de Henking.
McClung observó que las células de los saltamontes hembra te-
nían un cron1osoma más que las de los saltamontes macho, y su
conclusión fu e que los cromosomas accesorios desempeñaban un
papel en la determinación del sexo. En 1905, Nettie Stevens y
Edmund Wilson demostraron que, en los saltamontes y otros
insectos, las célul as de las hembras tienen dos cro1nosomas X,
mientras que las de los 1nachos tienen un solo cromosoma X. En
algunos insectos, contaron el mismo número de cromosomas en
las células de los machos y de las hembras , pero observaron que
un par de cron1osomas era diferente: se observaron dos cromoso-
mas X en las células de las hembras, mientras que había un solo
cro1nosoma X más un cromoso1na 1nás pequeño, que denomina-
ron Y, en las célul as de los machos.
Asimismo, Stevens y Wilson mostraron que los cromosomas X
e Y se separan en diferentes células durante la formación de es-
permatozoides; la mitad de estos reciben un cromosoma X, y la
otra mitad, un cromoso1na Y. Todos los óvulos producidos por
la hembra en la meiosis reciben un cromosoma X. Un espermato-
zoide que contiene un cromosoma Y se une con un óvu lo que con-
tiene un cron1osoma X pai·a producir un macho XY, mientras que
un espermatozoide que contiene un cromosoma X se une con un
óvulo que también contiene un cromosoma X para formar una
hembra XX. La distribución de los cron1oso1nas X e s Y en los
espennatozoides explica la relación de sexos l: 1 observada en la
mayoría de los organismos dioicos (fig. 4-5). Como el sexo se
hereda de la 1nisma manera que otras características heredadas
genéticamente, el descubrimiento de Stevens y Wilson de que el
sexo se asocia con la herencia de un cromosoma particular tam-
bién den1ostró que los genes se encuentran en los cromosomas.
Así como hallaron Stevens y Wilson en los insectos, en 1n uchos
otros organismos el sexo está determinado por un par de cromo-
somas, los cromosomas sexuales, que difieren entre machos y
hembras. Los cromosomas no sexuales, que son iguales en
machos y hembras, se denominan autosomas. Pensamos que el
80 CAPÍTULO 4
Generación P
Hombre
X
XY XX
Gametos •
X Y •
X X
Generación F1
X Espermatozoides Y
X pares de cromoso1nas X, y los machos, cinco pares de cromoso-
X logos en pequeñas regiones denominadas regiones seudoautosó-
Mujer
Condusión: se produce una relación de sexos 1:1
Figura 4-5. La herencia del sexo en los organismos con cromosomas X
e Y determina igual cantidad de descendencia masculina y f emenina.
sexo en organis1nos con cromoso1nas sexuales está detenni nado
por su presencia pero, de hecho, los genes individuales localiza-
dos en los cromosomas sexuales suelen ser responsables de los
fenotipos sexuales.
DETERMINACIÓN DEL SEXO XX-X0 El mecanismo de determi-
nación del sexo estudiado en los saltamontes por McClung es uno
de los más simples de determinación cromosómica del sexo y se
denomina sistema XX-XO. En este sistema, las hembras tienen
dos cromosomas X (XX), y los machos tienen un solo cromoso-
1na X (XO). No hay ningún cromosoma O: el O significa ausencia
de un cromoso1na sexual.
En la meiosis de las hembras, los dos cromosomas X se aparean,
luego se separan y un cromoso1na X ingresa en cada óvulo ha-
ploide. En los machos, el cromosoma X único se segrega durante
la meiosis a la mitad de las células espermáticas; la otra mitad no
recibe ningún cromosoma sexual. Como los machos producen
dos tipos diferentes de gametos respecto de los cromosomas
sexuales, se dice que son el sexo heterogamético. Las hembras
que producen gametos que son todos iguales con respecto a los
cromosomas sex uales son el sexo homogamético. En el sistema
XX-XO, el sexo de un individuo es determinado, en consecuencia,
por el tipo de gameto que fecu nda al óvulo. La unión de un esper-
matozoide que contiene un crom.osoma X con un óvulo portador
de cromosoma X produce cigotos XX, que con el tiempo se desa-
rrollarán como hembras. El espermatozoide que carece de un cro-
mosoma X y se une con un óvulo que contiene un cromosoma X
produce cigotos XO, que se desarrollan como machos.
DETERMINACIÓN DEL SEXO XX-XV En numerosas especies, las
células de las hembras y los machos tienen el mi smo número de
cromosomas, pero las de las hembras tienen dos cromosomas X
(XX), y las de los machos tienen un solo cromosoma X y un cro-
mosoma más pequeño, el cromosoma Y (XY). En los seres huma-
nos y muchos otros organisrnos, el cron1osoma Y es acrocéntrico
(fig. 4-6), no en forma de Y, como se asume con frecuencia. En
este tipo de determinación de sexo, el macho es el sexo heteroga-
mético: la mitad de sus gametos tienen un cromosoma X, y la
mitad, un cromosoma Y. La hembra es el sexo homogamético:
todos sus óvulos contienen un solo cromosoma X. Muchos orga-
nis mos, como algunas plantas, insectos, reptiles y manúferos
(incluidos los seres humanos) tienen el sistema de determinación
de.l sexo XX-XY. Otros organis mos presentan variaciones de este
sistema, como el ornitorrinco de pico de pato (descrito en la intro-
ducción de este capítulo), en el que las hembras tienen cinco
mas X e Y.
Si bien los cromosomas X e Y en general no son hon1ó logos, de
hecho se aparean y se segregan en diferentes células durante la
meiosis. Estos cromosomas pueden aparearse porque son homó-
micas (véase fig. 4-6), en las que presentan los mismos genes. En
los seres humanos, hay regiones seudoautosómicas en ambos
extre1nos de los cromosomas X e Y.
DETERMINACIÓN DEL SEXO 22-ZW En este sistema, la he.robra
es heterogamética, y el macho, homogamético. Para evitar la con-
fusión con el sistema XX-XY, los cromoso1nas sexuales de este
sistema se denominan Z y W, aunque no se parecen a estas letras.
Las hembras de este sistema son 'ZW; después de la meiosis, la
mitad de los óvulos tiene un cro1nosoma Z, y la otra mitad, un
cro1nosoma W. Los machos son ZZ; todos los espermatozoides
Región
seudoautosómica
.
pnmana
. ------·. Brazos
Los cromosomas X e Y son l cortos
omólogos solo en las
egiones seudoautosómicas, Centró mero
ue son esenciales para el
pareamiento de los
romosomas X e Y durante
Brazos
a meiosis en el macho.
Cromosoma
largos
y
Reg ión
seudoautosómica -------w w
secundaria Cromosoma
X
Figura 4-6. Los cromosomas X e Y de los seres humanos difieren en
tamaño y contenido genético. Son homólogos solo en las regiones seu-
doautosóm icas.
 Determinación del sexo y características ligadas al sexo 81

contienen un solo cromosoma Z. EJ sistema ZZ-ZW se observa en Es impottante comprender que, aun en sistemas de determina-
aves, serpientes, 1nariposas, algunos anfibios y algunos peces. ción cromosómica del sexo, en realidad el sexo está determinado
por genes individuales. Por ejemplo en los mamíferos, un gen
(SRY, analizado más adelante en este capítulo) localizado en el
cromosoma Y determina el fenotipo n1asculino. Tanto en la deter-
CONCEPTOS minación génica del sexo como en la determinación cro111osómi-
'

ca del sexo, el sexo es contro lado por genes individuales; la dife-

El descubrimiento de que la presencia o la ausencia de determinados
cromosomas determina el sexo en insectos aportó evidencia de que
los genes se localizan en los cromosomas. En la determinación del
sexo XX-XO, el macho es XO y heterogamético, y la hembra es XX y
homogamética. En la determinación del sexo XX-XY, el macho es XY,
y la hembra, XX; en este sistema, el macho es heterogamético. En la
determinación del sexo ll.-ZW, la hembra es ZW y el macho, ll.; en
este sistema, la hembra es el sexo heterogamético.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿En qué difiere el sexo heterogamético del sexo homogamético?
a. El sexo heterogamético es masculino; el sexo homogamético es
femenino.
b. Los gametos del sexo heterogamético tienen diferentes cromoso-
mas sexuales; los gametos del sexo homogamético t ienen el
mismo cromosoma sexual.
c. Todos los gametos del sexo heterogamético contienen un cromo-
soma Y; todos los gametos del sexo homogamético contienen un
cromosoma X.
Determinación génica del sexo
En algunos organismos, el sexo se determina genéticamente, pero
no hay diferencias evidentes entre los cromoso1nas de n1achos y
he111bras: no hay cro1nosomas sexuales. Estos organismos tienen
determinación génica del sexo: los genotipos en uno o más locus
determinan el sexo del indi viduo . .Los científicos han observado
determinación génica del sexo en algunas plantas, hongos, proto-
zoos y peces.
rencia es que, en el caso de determinación cromosómica del sexo,
los cromosomas sexuales también tienen un aspecto distinto en
machos y hembras.
Determinación ambiental del sexo
En todos los ejen1plos de determinación de] sexo anali zados
hasta ahora, han participado los genes, pero en una serie de orga-
nismos el sexo es determinado total o parcialmente por factores
an1bientales.
Un eje1nplo fascinante de deter1ninación a1nbiental del sexo se
observa en el 1nolusco 1narino Crepidula fornicata, una especie
de lapa (fig. 4-7). Las lapas viven apiladas, una encima de la otra.
Cada lapa comienza la vida como una larva nadadora. La prime-
ra larva que se asienta sobre un sustrato sólido, no ocupado, se
desarrolla como hembra y produce sustancias químicas que atra-
en a otras larvas, que se asientan sobre ella. Estas larvas se desa-
rrollan como 1nachos, que después sirven co1no parejas de la lapa
que está abajo. Después de un período, los .m achos que están arri-
ba se convierten en hembras y, a su vez, atraen a otras larvas que
se asientan en la parte superior de la pila, se desarrollan como
machos y sirven como parejas de las lapas que se encuentran
debajo de ellos. Las lapas pueden formar pilas de doce o más ani-
males; los que están arriba de todo siempre son machos. Este tipo
de desarrollo sexual se denotnina hermafroditismo secuencial;
cada animal individual puede ser tanto macho como hembra, aun-
que no al mismo tiempo. En Crepidula fomicata, hay determina-
ción ambiental del sexo según la posición de la lapa en la pila.
Los factores ambientales también son importantes para deter-
minar el sexo en algunos reptiles; el fenotipo sexual de muchas
tortugas, cocodrilos, caimanes y unas pocas aves es afectado por
la temperatura durante el desarro llo embri onario. En las tortugas,
por ejemplo, las temperaturas de incubación cálidas producen
más hembras, 1nientras que las temperaturas frías producen ma-

O Una larva que se asienta en
un sustrato no ocupado se
desarrolla como hembra, que
produce sustancias qufmicas
que atraen~ tras larvas. /
t)Las larvas atraídas por la 1 Eventualmente, los machos
hembra se asientan sobre ella y
se desarrollan como machos,
que se convierten en parejas de
la hembra original.
de la parte de arriba
~
Entonces, pueden atraer
otras larvas, que se
cambian de sexo y se asientan en la parte
desarrollan como hembr-""
as"'-.__, superior de la pila y se
desarrollan como
j

Tiempo - - - - - - - . .

Figura 4-7. En Crepidula fornicata, la lapa común, el sexo es determinado por un

factor ambiental: la posición de la lapa en la pila.
82 CAPÍTULO 4

Cuadro 4-1 Algunos sistemas de determinación del sexo

Sistema Mecanismo Sexo heterogamético Organismos

XX-XO Hembras XX Machos X Masculino A lgunos saltamontes y otros

insectos

XX-XY Hembras XX Machos XY Masculino Numerosos insectos, peces, anfi-

bios, reptiles; mamíferos, incluí-
dos seres humanos

ZZ-ZW Hembras ZW Machos ZZ Femenino Mariposas, aves; algunos reptiles

y anfibios

Determinación génica del sexo No hay cromosomas sexuales diferentes Varía A lgunas plantas, hongos, proto-
El sexo es determinado por genes de ero- zoos y peces
mosomas indiferenciados

Determinación ambiental del El sexo es det erminado por factores Ninguno A lgunos invertebrados, tortugas
sexo ambientales y lagartos

chos. En los caimanes ocurre lo contrario. En algunas especies,
los cron1osomas sexuales suelen determinar si los individuos son
1nachos o hembras; sin embargo, a veces los factores ambientales
pueden anular esta determinación cromosómica del sexo. Por
eje1nplo, las .lagartij as dragón barbudas son, en condiciones nor-
males, ZZ cuando son machos y ZW cuando son hembras, pero
cuando se incuban los huevos a alta temperatura, los individuos
ZZ se desarrollan con un fenotipo femenino. El cuadro 4-1 resu-
1ne algunos de los diferentes tipos de determinación del sexo.
Ahora que hemos estudiado algunas de las diversas maneras en
las q ue puede determinarse e.l sexo, examinaren10s en detalle un
1necanismo (el sistema XX-XY). La determinación del sexo es
XX-XY tanto en las moscas de la fruta como en los seres huma-
nos, pero como se verá, la manera en que los cromosomas X e Y
determinan el sexo en estos dos organismos es bastante diferente.
►
1920, Calvin Bridges propuso que el sexo de la Drosophila era
determinado no por el nú1nero de cromosomas X e Y, sino 1nás
bien por el equilibrio entre genes del cromosoma X que determi-
nan sexo femenino y genes de los autosomas que deternunan sexo
masculino. Sugirió que e l sexo de una .m osca está determinado
por la así llamada relación X:A, el número de cromosomas X
dividido por el número de juegos haploides de cromosomas auto-
sómicos. L as moscas normales tienen dos juegos haploides de
cromosomas y dos cromosomas X (hembras) o un cromosoma X
y un cromosoma Y (machos). Bridges postuló que una relación
X:A de 1 produce una 1nosca hembra; una relación X:A de 0,5
produce una mosca macho. Asimis.mo, sugirió que una relación
X:A entre 1 y 0,5 produce una mosca intersexual, con una mez-
cla de características masculinas y femeninas. Una relación X :A
menor de 0,5 y mayor de l produce moscas con desarrollo anor-
mal denominadas meta.machos y metahen1bras, respectivamente.

CONCEPTOS
Cuadro 4-2 Complementos cromos6mlcos y fenotipos
En la determinación gén ica del sexo, este es determinado por genes de
sexuales en Drosophila
uno o más locus, pero no hay diferencias evidentes entre los cromo- Complemento Juegos
somas de machos y hembras. En la determinación ambiental del sexo, de cromosomas haploides Relación Fenotipo
este es determinado total o parcialmente por factores ambientales. sexuales de autosomas X:A sexual

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3 XX AA 1 Hembra

XY AA 0,5 Macho
¿En qué difieren la determinación cromosómica, la gén ica y la
ambiental del sexo? xo AA 0,5 Macho

XXY AA 1 Hembra

XXX AA 1,5 Meta hembra

Determinación del sexo
XXXY AA 1,5 Meta hembra
en Drosophila melanoga.s ter
XX AAA 0,67 lntersexo
La 1nosca de la fruta Drosophila melanogaster tiene ocho cromo-
s01nas: tres pares de autosomas y un par de cromosomas sexua- xo AAA 0,33 Meta macho
les. Por lo general, las hembras tienen dos cromosomas X , y los xxxx AAA 1,3 Meta hembra
1nachos, un cromoson1a X y un cromosoma Y. En la década de
 Determinación del sexo y características ligadas al sexo 83

Cuando Bridges y otros examinaron moscas con diferentes núme-

ros de cromosomas sexuales y autosomas, la relación X:A pare-
ció predecir en forma con·ecta el sexo fenotípico de las moscas
(cuadro 4-2). l_ Í)(
Aunque la relación X:A predice correctamente el fenotipo 1 2 3 4 5 6
sexual, investigaciones recientes sugieren que el tnecanismo de la
determinación del sexo no es un equilibri o entre genes ligados a
X y genes autosómicos, como postuló Bridges. Los investigado-
res han localizado una serie de genes en el cromosoma X que
(f
7
<r,r ~ 11 )(
8 9 10 11 12

influyen en el fenotipo sexual, pero se han identificado pocos

genes autosómicos que determinen el sexo (requeridos para la
hipótesis de la relación X:A). Evidencia nueva sugiere que los
genes del cromosoma X son el determinai1te p1ima:rio del sexo.
La influencia del número de cromosomas autosómicos sobre el
sexo es indirecta e incide en la cronología de los eventos del desa-
rrollo y, por lo tanto, en el tiempo durante el que los genes del
cro1nosoma X deter1ninantes del sexo están activos. Por ejemplo,
las moscas XX con tres juegos autosómicos (XX, AAA) tienen
una relación X:A de 0,67 y desarrollai1 un fenotipo intersexual.
En estas moscas, la presencia de tres juegos autosómicos causa el
acortainiento de una etapa crítica del desarrollo que no permite
que factores femeninos codificados en los cromosomas X tengan
el tietnpo suficiente para acumularse, con el resultado de que las
1noscas presentan un fenotipo intersexual. El número de autoso-
n1as influye en la determinación del sexo de Drosophila, pero no
a través de la acción de genes autosómicos como previó Bridges.
CONCEPTOS
Aunque la relación X:A predice el fenotipo sexual de una mosca de
la fruta, en reali dad el sexo es determinado por los genes del cromo-
soma X.
11
13 14 15 16 17
Ir 18
19
r~
20
X y
Figura 4-8. Las personas con síndrome de Turner tienen un solo cro-
mosoma X en sus células. (Department of Clinical Cytogenetics,
Adenbrookes Hospital/Science Photo Library/Photo Researchers).
mente, los emb1iones con ausencia de ainbos cromosomas X son
abo1iados en fonna espontánea en etapas tempranas del desarrollo.
, ,
SINDROME DE KLINEFELTER Las personas con smdrome de
Klinefelter, cuya frecuencia es de alrededor de 1 cada 1000 naci-
mientos de varones, tienen células con uno o n1ás cromosomas Y
y múltiples cromosomas X. Las células de la mayoría de los varo-
nes que presentan este cuadro son XXY (fig. 4-9), pero las de
algunos con síndrome de Klinefelter son XXXY, XXXXY o
XXYY. Los hombres con este trastorno suelen tener testículos
pequeños y escaso vello facial y púbico. A 1nenudo, son 1nás altos
que lo normal y estériles; la mayoría tiene inteligencia normal.

MUJERES POLI-X En alrededor de 1 cada 1000 nacimientos de mu-

jeres, las células de la recién nacida tienen tres cromosomas X, un
Determinación del sexo en seres humanos
cuadro que suele denominarse síndrome del cromosoma X tri-
Los seres humanos, al igual que Drosophila, tienen determina- ple. Estas personas no tienen características distintivas, excepto
ción del sexo XX-XY, pero en ellos, la presencia de un gen (SRY) una tendencia a ser altas y delgadas. Si bien algunas son estériles,
en el cromosoma Y determina la masculinidad. Los fenotipos que
resultan de números anormales de cromoso1nas, que aparecen
cuando los cromosomas sexuales no se segregan de manera
correcta en la meiosis o la nútosis, ilustran la in1portancia del cro-
n1oso1na Y en la determinación del sexo en seres humanos. 1r ¡¡
,.., 11 WH 11 ~I
SÍNDROME DE TURNER Las personas con síndrome de Turner •
.
1 l ~

son mujeres y, a menudo, presentan desarrollo insuficiente de los

'
,.
caracteres sexuales secundarios. Este síndrome se observa en l de
cada 3000 nacünientos de mujeres. Las afectadas suelen ser de ta-
lla baja y tienen una línea de ilnplantación pilosa baja, tórax rela-
11
1
~, ,
ill• i: I& o
... ;.
t't

.,
IO 11 12

tivamente ancho y pliegues en la piel del cueJlo. Por lo general, su

inteligencia es normal. La mayoría de ]as mujeres con síndrome
de Turner son esté1iles. En 1959, Charles Ford aplicó nuevas téc-
ti e@..
'Q
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'IJ
ti
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.....
••
17
b!
,e

nicas al estudio de los cromosomas humanos y descubrió que las

células de una niña de 14 años con sú1drome de Turner tenían un
solo cromosoma X (fig. 4-8); este complemento cromosómico
suele denonúnai·se X0.
19
'!
20 21
• ll A
,, il• X X Y

No hay ningún caso conocido de una persona que carezca de Figura 4-9. Las personas con síndrome de Klinefelter tienen un ero-
ambos cromosomas X , una indicación de que se requiere por lo mosoma Y y dos o más cromosomas X en sus células. (Biophoto
1nenos un cromosoma X para el desarrollo humano. Presunúble- Associates/Science Source/Photo Researchers).
84 CAPÍTULO 4
muchas menstrúan con regularidad y son fértiles. La incidencia
de discapacidad intelectual e n las mujeres con cromosoma X tri-
ple es ligeramente mayor que en la población general, pero la
1nayoría de las mujeres XXX tienen inteligencia normal. Mucho
1nás raras son las mujeres cuyas células contienen cuatro o cinco
cromoso1nas X. Por lo general, estas muj eres tienen anatonúa
fern.e nina normal, pero presentan discapacidad intelectual y una
serie de problemas físicos. La gravedad de la discapacidad inte-
lectual aumenta a medida que se incrementa el número de c romo-
somas por encima de tres.
PAPEL DE LOS CROMOSOMAS SEXUALES Los fenotipos asocia-
dos con ano1nalías de Jos cromoso1nas sexuales nos permiten rea-
lizar varias inferencias acerca de su papel en la determinación del
sexo en seres humanos.
1. El cromosoma X contiene información genética esencial para
ambos sexos; se requiere por lo menos una copia del cromoso-
ma X para el desarrollo humano.
2. El gen determinante de la masculinización se localiza en el
cromosoma Y. Una sola copia de este cromosoma, aun en pre-
sencia de varios cromosomas X, suele producir un fenotipo
masculino.
3. Por lo general, la ausencia del cromosoma Y determina un
fenotipo femenino.
4. Los genes que influyen en la fertilidad se localizan en los cro-
mosomas X e Y. Por lo general, una mujer necesita por lo
menos dos copias del cromosoma X para ser fértil.
5. Copias adicionales del cromosoma X pueden alterar el desa-
n·ollo normal tanto en varones co1110 en mujeres, y provocar
problemas físicos y mentales que aumentan a medida que Jo
hace eJ número de cromoson1as X extras.
GEN DETERMINANTE DE LA MASCULINIZACIÓN EN SERES HU-
MANOS En los seres humanos y todos los demás mamíferos, el
cromosoma Y es de primordial importancia para producir un
fenotipo masculino. Sin embargo, los científicos descubrieron
unos pocos casos raros de varones XX cuyas células carecen, en
apari encia, de un cromosoma Y. Durante 1nuchos años, estos
varones representaron un enigma: ¿cómo podía existir un fenoti-
po masculino sin un cromosoma Y? Finalmente, el examen
exhaustivo reveló un pequeño fragmento del cromosoma Y unido
a otro cromoso1na. Este hallazgo indica que no es todo el cro1no-
soma Y el que determina la masculinización en los seres humano,
sino más bien un gen del cromosoma Y.
En etapas tempranas del desarrollo, todos los seres humanos
tienen gónadas indiferenciadas y conductos reproductores tanto
1nasculinos como femeninos. Luego, alrededor de 6 sen1anas des-
pués de la fecundación, se activa un gen del cromosoma Y. Este
gen hace que las gónadas neutrales se desarrollen co1no testícu-
los, que co1nienzan a secretar dos hormonas: testosterona y sus-
tancia de inhibición mülleriana. La testosterona induce el desarro-
llo de las características masculinas , y la sustancia de inhibición
1nülleriana causa la degeneración de los conductos reproductores
femeninos. En ausencia de este gen determinante de la masculini-
zación, las gónadas neutrales se convierten en ovarios, y se desa-
rrollan caracte1ísticas femeninas.
En 1990, se descubrió en los seres humanos el gen determinan-
te de la masculinización, denominado gen de la región determi-
nante del sexo en el cromosoma Y (SRY) (fig. 4-10). Este gen se
encuentra en varones XX y está ausente en muj eres XY; también
• Gen de la región
Brazo corto ~ ..........._ determinante del
Centrómero --"- sexo en el cromosoma
Y (SRY)
Brazo largo --< ~~~
<Este gen está ligado )
lal cromosoma Y
porq.ue solo se
encuentra en el
Cromosoma Y ~ OfD.P~ í!l::;;.
j
a _,_ Y,_
._
Figura 4-10. El gen SRY se localiza en el cromosoma Y y determina el
desarrollo de características masculinas.
se encuentra en el cromosoma Y de otros mamíferos. La prueba
definitiva de que SRY es el gen determinante de la masculiniza-
ción se obtuvo cuando científicos colocaron una copia de este gen
en ratones XX por medio de ingeniería genética. Los ratones XX
que recibieron este gen, sí bien estériles, se desarrollaron co1110
machos desde el punto de vista anatómico.
El gen SRY codifica una proteína denominada factor de trans-
cripción (véase cap. 13) que se une al DNA y estimL1la la transcrip-
ción de otros genes que promueven la diferenciación de los testícu-
los. Si bien SRY es el determinante primario de la masculinidad
en los seres humanos, otros genes (algunos ligados al cromosoma
X , otros ligados al cromosoma Y y otros autosómicos) también
intervienen en Ja fertilidad y el desarrollo de las diferencias
sexuales.
CONCEPTOS
La presencia del gen SRY en el cromosoma Y determina que un
em brión humano se desarrolle como un varón. En ausencia de este
gen, un embrión humano se desarrolla como una mujer.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
¿ Cuál es el fenotipo de una persona que tiene cromosomas sexuales
XXXY?
a. Síndrome de Kl inefelter
b. Síndrome de Turner
c. Mujer poli-X
SÍNDROME DE INSENSIBILIDAD A LOS ANDRÓGENOS Aunque
el gen SRY es el determinante primario del sexo en embriones
humanos, varios otros genes influyen e n el desa1Tollo sexual,
como ilustran las mujeres con síndro1ne de insensibilidad a los
andrógenos. Estas personas tienen características sexuales exter-
nas femeni nas. De hecho , la mayoría no conoce su condición
hasta que alcanzan la pubertad y no presentan menstruación. El
examen ginecológico revela que la vagina tiene un extremo ciego
y que hay ausencia de útero, tro111pas y ovarios. D entro de la cavi-
dad abdon1inal, un par de testículos producen concentraciones
de testosterona observadas nonnalmente en varones. Las células de
una mujer con síndrome de insensibilidad a los andrógenos con-
tienen un cromosoma X y un cromosoma Y.
¿ Cómo puede una p ersona tener aspecto femenino cuando sus
células contienen un cromosoma Y y tiene testículos que produ-

cen testosterona? La respuesta reside en la compleja relación
entre genes y sexo en los seres humanos. En un embrión hu mano
con un cromosoma Y, el gen SRY hace que las gónadas se desa-
rrollen como testículos, que producen testosterona. La testostero-
na estimula a los tejidos embrionarios para que desarrollen carac-
terísticas 1nasculinas. Pero para que la testosterona ejerza sus
efectos, se debe unir a un receptor de andrógenos. Este receptor
es defectuoso en las mujeres con síndrome de insensibilidad a los
andrógenos; en consecuencia, sus células son insensibles a la tes-
tosterona y aparecen características fe meninas. El gen del recep-
tor de andrógenos se localiza en el cromosoma X , de manera que
este trastorno siempre se hereda de la madre.
E l síndrome de insensibilidad a los an drógenos il ustra puntos
sobre la influencia de los genes en el sexo de una persona.
Primero, este cuadro demuestra que el desarrollo sexual humano
es un proceso complejo, en el que influyen no solo el gen SRY del
cro1nosoma Y, sino también otros genes localizados en otros luga-
res. Segundo, muestra que la mayoría de las personas tienen
genes para características tanto masculinas como femeninas,
como ilustra el hecho de que aquellos son síndrome de insensibi-
lidad a los andrógenos puedan desarrollar características femeni-
nas aunque tengan cromosomas masculinos. De hecho, los genes
para la mayoría de los caracteres sexuales secundarios masculinos
y femeninos no se encuentran en los cromosomas sexuales, sino
en los autosomas. La clave de la masculinidad y la femineidad
reside no en los genes, sino en el control de su expresión.
IJINTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 17
4.2 Los genes de los cromosomas sexuales
determinan las características ligadas al sexo
En el capítulo 3, aprendimos varios principios básicos de la he-
rencia descubiertos por Mendel mediante sus cruzamientos entre
plantas de guisantes. Una extensión ilnportante de estos principios
mendelianos de la herencia es el patrón hereditario de las caracte-
rísticas ligadas al sexo, características determinadas por genes
localizados en los cromosomas sexuales. Los genes deJ cro1noso-
ma X detenninan las características ligadas al cromosoma X ;
(a)
(b)
Determinación del sexo y características ligadas al sexo 85
los del cromosoina Y deter1ninan las características ligadas al
cromosoma Y. Como el cromosoma Y de numerosos organismos
contiene escasa información genética, la mayoría de las caracterís-
ticas ligadas al sexo están ligadas al cromosoma X. Machos y
hembras difieren en sus cromoson1as sexuales, de 1nanera que el
patrón de herencia de las características ligadas al sexo es diferen-
te del de los genes locali zados en cron1osomas autosómicos.
Ojos blancos ligados al cromosoma X
en Drosophila
La prünera persona que explicó la herencia ligada al sexo fue el
biólogo estadounidense Thomas Hunt Morgan (fig. 4-11).
Comenzó su carrera como embriólogo, pero el descubrimiento de
los principios de Mendel lo llevó a iniciar experimentos genéti-
cos, al principio en ratas y ratones. En 1909, Morgan rotó su
investigación a Drosophila melanogaster; un año más tarde, des-
cubrió entre las moscas de su colonia de laboratorio un solo
1nacho que tenía ojos blancos, en 1narcado contraste con los ojos
rojos de las moscas de la fruta normales. Esta mosca ejerció un
tremendo efecto en la carrera de Morgan como biólogo y en el
futuro de la genética.
Para investigar la herencia de la característica ojos blancos en
las moscas de la fruta, Morgan llevó a cabo de manera sistemáti-
ca una serie de cruzanlientos genéticos. Primero, cruzó hembras
de ojos rojos genéticamente puras con su macho de ojos blancos
para producir Ja progenie Fl' que tenía ojos rojos (fig. 4-12a). Los
resultados de Morgan de este cruzamiento inicial fueron consis-
tentes con los principios de Mendel: un cruzamiento entre un
individuo homocigótico dominante y un individuo homocigótico
recesivo produce descendencia heterocigótica que muestra el ras-
go dominante. Sus resultados sugirieron que los oj os blancos eran
un rasgo recesivo simple. Sin embargo, cuando Morgan cruzó las
moscas de la F l entre sí, observó que todas las moscas hembra de
la F2 tenía ojos rojos, pero que la mitad de las moscas macho de la
F, tenía ojos rojos y la otra mitad ojos blancos. Es evidente que
este hallazgo no era el resultado esperado para un rasgo recesivo
simple, que debía aparecer en 1/4 de los descendientes F 2 tanto
macho como he1nbra.
Figura 4-11. El trabajo de Thomas Hunt Morgan
con Drosophila ayudó a revelar muchos principios
básicos de la genética, incluida la herencia ligada
al cromosoma X. (a) Margan. (b) La Habitación de las
Moscas, donde Margan y sus estudiantes llevaron a
cabo la investigación genética . (Parte a: APM/ide World
Photos. Parte b: American Philosophical Society).
 86 CAP[TULO 4

Para expl icar este resultado inesperado, Morgan propuso

que el locus que afecta el color de ojos se encuentra en el
Pregunta: ¿los ojos blancos de las moscas de la fruta se heredan como un
rasgo autosómico recesivo? cromosoma X ( es decir, que el color de ojos está ligado al
cromosoma X). Reconoció que los alelos del color de ojos
Métodos Practicar cruzamientos recíprocos. solo están presentes en el cromosoma X; no hay un alelo
(a) Hembra de ojos rojos cru zada (b) Hembra de ojos blancos homólogo en el crornosoina Y. Como las células de las hem-
con macho de ojos blancos cruzada con macho d e ojos rojos bras tienen dos cromosomas X, las he1nbras pueden ser
homocigóticas o heterocigóticas para los alelos del color de
Generación P Generación P ojos. Por el contrario, las células de los machos tienen un
Hembra de M acho d e Hembra de Macho de único cromosoma X y pueden portar un solo alelo del color
ojos rojos ojos blancos oj os blancos ojos rojos de ojos. Por lo tanto, los machos no pueden ser hotnocigó-
ticos ni heterocigóticos, sino que se dice que son hemicigó-
X X ticos para locus ligados al cromosoma X.
xw y A fin de verificar su hipótesis de que el rasgo ojos blan-

Gamet os
n
(x~ \..y.,/ Gametos x+ Y
cos estaba ligado al cromosoma X, Morgan realizó otros
cruzamientos. Predijo que un cruzamiento entre una hem-
bra de ojos blancos y un macho de ojos rojos produciría
hembras todas de ojos roj os y 1nachos todos de ojos blan-
cos (fig. 4-Ub). Cuando Morgan. realizó este cruzamiento,
Fecundación Fecundación los resultados fueron exactamente los previstos. Observe
que este cruzamiento es el recíproco del cruzamiento origi-
Resultados Generación F1 Í Generación F1 ' nal, y que los dos cruzamientos recíprocos dieron diferentes
Hemb ra d e Macho de Hembra de Macho de
resultados en las generaciones F 1 y F 2 . Asimismo, Morgan
ojos roj os ojos roj os ojos roj os ojos blancos cruzó las hen1bras heterocigóticas de F 1 con su padre de
ojos blancos, las he1nbras de ojos rojos de F 2 con machos de
X X ojos blancos y hembras de ojos blancos con 1nachos de ojos
blancos. En todos estos cruzamientos, los resultados fueron
. xwy
consistentes con la conclusión de Morgan de que el rasgo
-

..... ~
() ojos blancos es una característica ligada al cromosoma X.
Usted puede ver los resultados de los cruzamientos de
Gametos (x_:;(0 Gametos 9 8
Morgan en la Animación 4.1.

Falta de disyunción y teoría

Generación F2
~ ) Espermatozoide <:;'
Generación F,'
€, Espermatozoide IV
1 cromosómica de la herencia
Cuando Morgan cruzó su macho original de ojos blancos
~ '- con hembras homocigóticas de ojos rojos , los 1237 miem-
X"Y X"XN x•v bros de la progenie tuvieron ojos rojos, excepto 3 1nachos
de ojos blancos. Morgan atribuyó estos machos de ojos
@ ~ blancos de la F 1 a la aparición de mutaciones aleatorias adi-
Hembra Macho Hembra Macho cionales. Sin embargo, las moscas con estos fenotipos ines-
de ojos de ojos de ojos de ojos perados continuaron apareciendo en sus cruzamientos.
óvulos rojos rojos óvulos rojos rojos
Aunque infrecuentes, aparecieron con una frecuencia
)(1-)('V )("'Y xwxw xwy
n1ucbo mayor que la debida a una mutación espontánea.
Calvin Brídges, que era uno de los estudiantes de Morgan,
comenzó a investigar la base genética de estas excepciones.
Hembra Macho Hembra Macho Bridges halló que las excepciones surgían solo en ciertas
d e ojos de ojos de ojos de ojos
rojos blancos blancos
cepas de moscas de ojos blancos. Cuando cruzó una de estas
blancos

½ hembras de ojos rojos

¼ machos de ojos rojos
¼ hembras de ojos rojos
¼ hembras de ojos blancos
j hembras de ojos blancos excepcionales con un 1nacho de
ojos rojos, alrededor del 5% de la descendencia mascu lina
tenía ojos rojos, y alrededor del 5% de la descendencia
¼ machos de ojos blancos ¼ machos de ojos rojos femenina tenía ojos blancos. En este cruzamiento, el resulta-
¼ machos de ojos blancos
do esperado era que todas las moscas macho heredaran el
cromosoma X de su madre y n1vieran el genotipo XWY y
Conclusión: no. Los resultados de los cruzamientos recíprocos son consistentes
ojos blancos (véase la progenie F 1 de la fig. 4-Ub). Todas
con herencia ligada al cromosoma X.
las 111oscas hen1bra debían heredar un alelo dominante de
ojos rojos del cromosoma X de su padre, junto con un alelo
Figura 4-1 2. Cruzamientos de M argan ligados al cromosoma X para ojos: de ojos blancos del cromosoma X de su mac!Te; por consi-
blancos en moscas de la fruta. (a) Cruzamientos originales y de F1• (b) guiente, toda la progenie femenina debería ser x+xw y tener
Cruzamientos recíprocos. ojos rojos (véase la progenie F 1 de la fig. 4-Ub). Por
 Determinación del sexo y características ligadas al sexo 87

lo tanto, la aparición continua de machos de ojos rojos y

hembras de ojos blancos en este cruzamiento fue inesperada. Pregunta: en un cruzamiento entre una hembra de ojos blancos y un macho
de ojos rojos, ¿por qué se producen solo unas pocas hembras de ojos blancos y
EXPLICACIÓN DE BRIDGES Para explicar la aparición de machos machos de ojos rojos?
de ojos rojos y hen1bras de ojos blancos en este cruzamiento, Métodos
Bridges postuló que las he1nbras de ojos blancos excepcio-
Hi¡pótesis: las hembras de ojos blancos y los machos de ojos rojos de F1 se deben
nales de esta cepa poseían, en realidad, dos cro1nosomas X y a la falta de disyunción en una hembra XXY.
un cromosoma Y (XwXWY). En Drosophila, las moscas con
cromosomas sexuales XXY suelen desaiTollarse como hem- Generación P
bras, pese a tener un cromosoma Y (véase cuadro 4-2). Al- Hembra de Macho de
rededor del 90% de las veces, los dos cromosomas X de las ojos blancos ojos rojos
hembras xw_xwy se separan uno de otro en la anafase 1 de la
1neiosis, y un cromoson1a X y un cromoso111a Y ingresan en X
un gameto, y un solo cromosoma X ingresa en otro gameto
(fig. 4-13). Cuando estos gametos son fecundados por esper- x•v
matozoides de un macho normal de ojos rojos, se producen
l
1nachos de ojos b lancos y he1nbras de ojos rojos.
Aproximadamente el 10% de las veces, los dos cro1nosomas '
Separación de los
cromosomas X
Falta de disyunción
de los cromosomas X
X de las hembras no se separan en la anafase 1 de la meiosis, (90%1 de las veces) (10% de las veces)
un fenómeno conocido como falta de disyunción. En caso
de falta de disyunción de los cromosomas X, la mitad de los
óvulos reciben dos copias del cromosoma X, y la otra mitad
recibe solo un cromosoma Y (véase fig. 4-13). Cuando estos Gametos xwy y y
óvulos son fecundados por espern1atozoides de un macho
normal de ojos rojos, se producen cuatro con)binaciones de iifecu.n~ación
cro111osomas sexuales. Un óvulo con dos cromosomas X
fecundado por un espermatozoide portador de un cromosoma
X produce un cigoto x-+xwX1", que suele morir. Cuando un Generación F1 Espermatozoide y
óvulo con dos cromosomas X es fecundado por un espenna-
xwyy
tozoide portador de un cro1nosoma Y, el cigoto resultante es
J0'X""Y, que se desarrolla como una hembra de ojos blancos.
Hembra de Macho de Progenie
Un óvulo con solo un cromosoma Y fecundado por un esper- . .
OJOS rOJOS ojos blancos resultante de la
111atozoide portador de un cromosoma X produce un cigoto separación de
x +Y, que se desarrolla como un macho normal de ojos rojos. los cromosomas
Si el óvulo con un único cromosoma Y es fecundado por un xw X
Hembra de Macho de
espennatozoide portador de un cromosoma Y, el cigoto resul- ojos rojos ojos blancos
tante tiene dos cromoso1nas Y y ningún cromosoma X, y
1nuere. Por lo tanto, la falta de disyunción de los cro111osomas
X en hembras de ojos blancos xwx_wy produce unas pocas xwxw Metahembra Hembra de wi.c:.:
hembras de ojos blancos y machos de ojos rojos, que es exac- de ojos rojos (muere) ojos blancos Progenie
tamente lo que halló Birdges en sus cruzamientos. Los resul- resultante de
la falta de
tados de los cruzamientos de Bridges se explican con más
y disyunción
detalles en la Animación 4.1. Macho de Muere
. .
OJOS rOJOS
CONFIRMACIÓN DE LA HIPÓTESIS DE BRIDGES La hipótesis de
Bridges predecía que las hembras de ojos blancos de estos Moscas F1 Cromosomas observados
cruzamientos tend1ian dos cromosomas X y un cromosoma
Y, y que los machos de ojos rojos tendrían un solo cromo- Hembras de ojos rojos 1/ i'XX. 1/ iXXf
s01na X. Para verificar su hipótesis, Bridges examinó los Machos de ojos blancos 1/2XY, 1/2'XYY
cromosomas de sus moscas y halló precisamente lo que Hembras de ojos blancos XXY
había anticipado. La significació n del estudio de Bridges no Machos de ojos rojos XY
es que explicó la aparición de una mosca extraña ocasional
en su cría, sino que pudo vincular la herencia de un gen Conclusión: las hembras de ojos blancos y los machos de ojos rojos de la F1 se
específico (w) con la presencia de un cromosoma específi- deben a la falta de disyunción de los cromosomas X en una hembra XXY.
co (X). Esta asociación entre genotipo y cro1nosomas apor-
tó evidencia inequívoca de que los genes ligados al sexo se
localizan en el cromosoma X y confirmó la teoría cromosó-
Fígura 4-13. Bridges llevó a cabo experimentos q ue probaron q ue el gen de ojos
mica de la herencia. l !INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 22 blancos se localiza en el cromosoma X.
 88 CAPÍTULO 4

CONCEPTOS longitud de onda; uno absorbe luz azul , un segundo absorbe luz
roja, y un tercero absorbe luz verde. En realidad, el ojo humano
Al mostrar que la aparición de fenotipos raros se asocia con la heren- detecta solo tres colores (rojo, verde y azul) pero el cerebro mez-
cia de determinados cromosomas, Bridges probó que los genes liga- cla las señales de diferentes conos para crear el amplio espectro de
dos al sexo se localizan en el cromosoma X y que la teoría cromosó- colores que percibimos. Cada uno de los tres pigmentos es codifi-
mica de la herencia es correcta. cado por un locus distinto; el locus para el pigmento azul se
encuentra en el cro1nosoma 7, y los locus para los pigLnentos verde
y rojo se localizan en el cromosoma X muy cerca uno del otro.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5 Los tipos más comunes de daltonismo humano son causados
por defectos de los pigmentos rojo y verde; nos referiremos a
¿ Cuál era el genotipo de los pocos machos de ojos rojos de F1 obte- estos cuadros co1no ceguera para los colores rojo y verde. Las
nidos por Bridges cuando cruzó una hembra de ojos blancos con un mutaciones que producen visión defectuosa de los colores suelen
macho de ojos rojos? ser recesivas y, como los genes que coctifican los pig1nentos rojo
a. x+ y verde se locali zan en el cromosoma X, la ceguera para los colo-
b. xwx+y
res rojo y verde se hereda como un rasgo recesivo ligado al cro-
mosoma X.
c. x+v Utilizaremos el símbolo xc para representar un alelo de la
d. x+x-iy ceguera para los colores rojo y verde y el símbolo x+para repre-
sentar un alelo de visión norn1al de los colores. Las 1nujeres tie-
nen dos cromosomas X , de manera que tienen tres genotipos posi-
bles: x+ x +y X -xc, que producen visión normal, y xcxc, que
Daltonismo ligado al cromosoma X produce daltonismo. Los varones tienen un solo cromosoma X y
en seres humanos dos genotipos posibles: X +y, que produce visión normal, y xcy,
que provoca daltonisn10.
Para examinar mejor la herencia ligada al cro1nosoma X, conside- Si una 1nujer ho1nocigótica para visión norn1al de los colores se
remos otra característica ligada al cro1nosoma X: el daltonis1no aparea con un hombre con daltonismo (fig. 4-14a), todos los
(ceguera para los colores rojo y verde) en los seres humanos. El gametos producidos por la mujer contendrán un alelo para visión
ojo humano percibe el color a través de las células sensibles a la normal de los colores. La mitad de los gametos del hombre reci-
luz, los conos, que recubren la retina. Cada cono contiene uno de birán el cromosoma X con el alelo de ceguera para los colores, y
los tres pigmentos capaces de absorber luz de una determinada la otra mitad recibirá el cromosoma Y, que no porta alelos que
influyan en la visión de los colores. Cuando un espermato-
zoide po1tador de xc se une con el óvulo portador de x+, se
(a) Mujer normal y (b) Cruzamiento reciproco produce una mujer heterocigótica con visión normal
hombre daltónico (X+xc). Cuando un espermatozoide Y se une con el óvulo
po1tador de X , se produce un varón hemicigótico (X+Y) con
Generación P Generación P
visión normal.
M ujer con Varón con En el cruzamiento recíproco entre una mujer daltónica y
visión normal Varón M ujer visión norma l
de los colores X dalt ónico
un hombre con visión normal de los colores (fig. 4-14b), la
d alt ónica X d e los color es
x+x+ 1nujer produce solo gametos portadores de xc. El hombre
X' Y X' X' x+v
produce algunos gametos que contienen el cromosoma X y

n
Gamet os x• x+
•
n X' y
n
Gamet os X' X'
n x+ y
otros que contienen el cromosoma Y. L os varones heredan el
cromosoma X de la madre, y como ambos cromosomas X
n1aternos tiene el alelo xc, toda la descendencia masculina
será daltónica. En carnbio, las muj eres heredan un cron1oso-
ma X de ambos progenitores; por consiguiente, toda la des-
Fecundación
cendencia femenina de este cruzamiento recíproco será
heterocigótica con visión normal. Las mujeres son daltóni-
Generación F1 Generación F1 cas solo cuando se han heredado alelos de ceguera para los
X' Espermatozoides y x+ Espermatozoides Y colores de ambos progenitores, nuentras que un varón dal-
tónico solo necesita heredar un alelo de ceguera para los
x+xc x•v x+xc X' Y colores de su madre; por esta razón, el daltonis n10 y la
Mujer con Varón con Mujer con Varón
1nayoría de otras características recesivas raras ligadas al
óvulos X+ visión visió n óvulos X' visión daltónico
normal de normal de normal de cromosoma X son más frecuentes en los varones.
los colores los colores los colores Observe que, en estos cruzainientos para daltonismo, una
""""\
1nujer afectada transn1ite el rasgo recesivo ligado al cromo-
Conclusión: t anto varones como Conclusión: las mujeres tienen so1na X a sus hijos, pero no a sus hijas, mientras que un
mujeres t ienen visión normal d e visión normal de los colores; los hombre afectado transmite el rasgo a sus 1uetos a través de
los colores. varones son daltónicos, j sus hijas, pero nunca a sus hijos. Por lo tanto, las caracterís-
ticas recesivas ligadas al cromosoma X parecen alternarse
Figura 4-14. En los seres humanos, el daltonismo se hereda como un entre los sexos, y aparecen en las mujeres de una generación
rasgo recesivo ligado al cromosoma X. y en los varones de la siguiente generación.

Recuerde que los cromosomas X e Y se aparean en la meiosis
porque son ho1nólogos en las pequeñas regiones seudoautosómi-
cas. Los genes de estas regiones de los cromosomas X e Y son
homólogos, al igual que los de los autosomas, y muestran patro-
nes de herencia autosó1nica en lugar de la herencia ligada al sexo
observada en la mayoría de los genes de los cro1noson1as X e Y.
Ahora que conoce1nos el patrón de herencia ligada al cromoso-
1na X, apliquemos nuestro conocimiento para responder una pre-
gunta específica.
Beatri z tiene visión norm.a l, pero su madre es daltónica.
Guillermo es daltónico. Si Guillermo y Beatriz se casan y tienen
un hijo, ¿cuál es la probabilidad de que el niño sea daltónico?
Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
La probabilidad de que el hij o de Beatriz y Guillermo sea daltónico.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
Los fenotipos de Beatriz, de la madre de Beatriz, y de Guillern10.
Pasos de la solución
Como el daltonismo es un rasgo recesivo ligado al cromosoma
X , la madre daltónica de Beatriz debe ser homocigótica para el
alelo de ceguera para los colores (XCX:c). Las 111ujeres heredan
un cromosoma X de cada uno de sus progenitores, de manera
que Beatriz debe haber heredado un alelo de ceguera para .los
colores de su madre. Como Beatriz tiene visión normal de
los colores, debe haber heredado un alelo de visión normal (X+)
de su padre; por consiguiente, Beatriz es heterocigótica (X+X c).
Guillermo es daltónico. Como los varones son hemicigóticos
para los alelos ligados a X , debe ser xcy_
Un apareamiento entre
Beatriz y Guillermo se representa de la siguiente manera:
Beatriz x Gui llermo
x+x:: :XCY
ll
Gametos 0® ®G)
@ ®
x+xc x.c:xc
Mujer de Mujer
visión normal daltónica
x+y XfY
G) Varón de visión Varón
normal daltóni.co
Determinación del sexo y características ligadas al sexo 89
Por consiguiente, la probabilidad de que un hijo sea daltónico es
de 1/2.
► Practique algo más con la herencia ligada al cromosoma X resolviendo
el Problema 24 al final de este capítulo.
. CONCEPTOS
Las características determinadas por genes de los cromosomas sexua-
les se denom inan características ligadas al sexo. Las hembras diploi-
des tienen dos alelos en cada locus li gado al cromosoma X, mientras
que los machos diploides tienen un solo alelo en cada locus ligado al
cromosoma X. Las hembras heredan los alelos ligados a X de ambos
progenitores, pero los machos heredan un solo alelo ligado a X de su
madre.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
La hemofilia (menor coagulación de la sangre) es una enfermedad
ligada al cromosoma X. Una mujer con hemofilia se aparea con un
hombre que presenta coagulación sanguínea normal. ¿ Cuál es la
probabil idad de que su hijo tenga hemofilia?
Símbolos para genes ligados
al cromosoma X
Hay varias 1naneras de registrar genotipos para rasgos ligados al
cromosoma X. En ocasiones, los genotipos se registran de la
misma forma que para las características autosómicas. En este
caso, se asigna solo un alelo a los machos hemicigóticos: por
ejemplo, el genotipo de una Drosophila hembra de ojos blancos
es ww, mientras que el genotipo de un macho hemicigótico de
ojos blancos es \IV. Otro método consiste en incluir el cromoson1a
Y designándolo con una barra diagonal (/). Con este método, el
genotipo de la hembra de ojos blancos es ww, y el genotipo del
macho de ojos blancos es wl. Quizá el método más útil sea escri-
bir los cromosomas X e Y en el genotipo y designar los alelos
ligados al cro1nosoma X con superíndices, como se realiza en este
capítulo. Según este método, una hembra de ojos blancos es
xwxw, y un macho de ojos blancos es x wy_ El uso de X e Y en el
genotipo tiene la ventaja de recordan1os que los genes están liga-
dos al cromosoma X y que el macho siempre debe tener un solo
alelo, heredado de la n1adre.
Características ligadas a Z
En los organismos con determinación del sexo ZZ-'ZW, los ma-
chos son el sexo homogamético (Z:Z) y tienen dos alelos ligados
al sexo (denominados, en general, ligados al cromoso1na Z); por
consiguiente, los machos pueden ser ho1nocigóticos o heterocigó-
ticos. Las hembras son el sexo heteroga1nético (ZW) y tienen un
solo alelo ligado al cromosoma Z. La herencia de las característi-
cas ligadas al cromosoma Z es la misma que la de las caracterís-
ticas ligadas al cromosoma X, excepto que el patrón de herencia
en machos y hembras está invertido.
90 CAPÍTULO 4

Un ejemplo de una característica ligada al cromosoma Z es el son camafeo (ZcªW), y todos los machos de F 1 son azules
fenotipo ca,nafeo del pavo real azu l de la India (Pavo cristatus). (zca+zca), como muestra la figura 4-15. Cuando se entrecruza la
En estas aves, el plumaje silvestre es de color azul metálico bri- F 1, 1/4 de la F son machos azules (zco+zca), 1/4 son hembras azu-
lloso. El pavo real hembra en ZW, y el macho, ZZ. El plumaje les cz ea+w), ~/4 son machos camafeo (z caz ca) y¼ son hembras
camafeo, que produce plumas m arrones, se debe a un alelo liga- camafeo (ZcªW). El cruzamiento recíproco de una hembra cama-
do al cro1nosoma Z (Zca) que es recesivo respecto del alelo azul feo con un n1acho azul homocigótico produce una generación F 1
de tipo silvestre (zca+). Si una hembra de color azul (zca+w) se en la que toda la descendencia es azul, y una generación F2 for-
cruza con un n1acho camafeo (zcazca), todas las hembras de la F 1 mada por ½ de machos azules ((zea+zca+ y zca+z cª), ¼ de hem-
bras azules (ZCa+ W) y ¼ de hembras camafeo (ZcªW).
En organismos con determinación de] sexo ZZ-ZW, la hembra
(a) {b) siempre hereda el cromosoma W de su madre, y hereda el cromo-
soma Z, junto con los alelos ligados a este, de su padre. En este
Generación P Generación P
Hembra Macho Hembra sistema, el macho hereda cr o1nosomas Z, junto con cualquier
azul camafeo alelo Ugado a este, tanto de su 1nadre como de su padre. Este
X patrón de herencia es el inverso del de los alelos ligados al cro-
mosoma X en los organismos con determinación del sexo XX-XY.
zCa+w zca zca Z'ªW zca+zCa+ n 1NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 33

n ---! Gametos <r,

n
zca W Gametos zca+
! Características ligadas al cromosoma Y
Los rasgos ligados al cromosoma Y (denominados también ras-
gos holándricos) muestran un patrón de herencia distinto. Estos
• • • rasgos se hallan solo en los machos, porque solo ellos tienen un cro-
mosoma Y, y siempre se heredan del padre. Más aún, toda la descen-
Generación F1
,l, "'
E ~
~
~:::.;,
'vv'
óvulos \ ':.::.}
Generación F1
m "'
E {l
zca Óvulos W
1 dencia n1asculina de un 1nacho con un rasgo ligado al cromosoma Y
presentará este rasgo, porque todos los 1nachos heredan el cromo-
.... ·- .... -- ~ - - ~ - - - ~ soma Y de su padre. ln1NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 45
~ 2 zca+ zca ZGJW ~ 2 zca zca
.n B .n B
zCa+ EVOLUCIÓN DEL CROMOSOMA y La investigación sobre cromoso-
mas sexuales ha llevado a la conclusión de que los cromosomas X
e Y de nun1erosos organismos evolucionaron a partir de un par de

n
zca+ zca I
_/
,,,.
./
zCa+ zca
n
zCa+ W
autosomas. El primer paso de este proceso evol utivo tuvo lugar
cuando un miembro de un par de autosomas adquirió un gen que
determina la masculinización, como el gen SRY hallado en los
seres humanos actuales (fig. 4-16). En los mamfferos, este paso se
Fecundación
produjo hace 250 millones de años. Cualquier organismo individual
_J con una copia del cromoso1na que contenía este gen se convirtió
entonces en un macho. Hubo otras ,nutaciones del protocro1noso-
Generación F2 Generación F2 ma Y que influyeron en rasgos que son beneficiosos solo para los
/_-
l zca) ÓVU IOS (
Al\
"!,_; zca+ óvulos W machos, como la coloración brillante de las aves macho utilizada
zCa+zca zCa+zCa+ para atraer a las hembras y los cuernos de un alce macho, que
emplea para competir con otros machos. Los genes que codifican
estos tipos de rasgos son ventajosos solo si se presentan en
machos. Para impedir que genes que codifican rasgos 1nasculinos
ro .,. Macho Hembra aparezcan en hembras, se sup1imjó el entrecruzamiento en la ma-
E {l
.... -- 1----<U.M.J..._---l----l,........_ - l
~ 2 zca+zca Z'ªW
yor parte de la longitud de los cromosoma X e Y durante la meiosis .
.n B Sin embargo, puede haber entrecruzamiento entre los dos cromo-
zca somas X en las hembras , pero hay escaso cruzamiento entre los
cro1nosomas X e Y, excepto en pequeñas regiones seudoautosómi-
Macho Hembra Hembra cas en las que los cromosomas X e Y continú an apareándose y
camafeo camafeo azul camafeo
segregándose durante la n1eiosis, como se comentó antes.
Conclusión: Conclusión:
Por razones que escapan al alcance de esta discusión, la falta de
¼ machos azules ½ machos azules entrecruzamiento indujo (y sigue haciéndolo) una acumulación
¼ machos camafeo ¼ hembras azules de mutaciones y la pérdida de material genético del cron1osoma Y
¼ hembras azules ¼ hembras camafeo
(véase fig. 4-16). A lo largo de millones de años , el cromoso-
¼ hembras camafeo
ma Y degeneró lentamente perdiendo DNA y genes, hasta que se
Figura 4- 15. El fenotipo camafeo del pavo real azul de la India se
redujo mucho de tamaño y conservó escasa información genética.
hereda como un rasgo recesivo ligado al cromosoma Z. (a) Hembra Esta degeneración produjo el cromosoma Y hallado en los ma-
azul cruzada con macho camafeo. (b) Cruzamiento recíproco de hembra chos de hoy en día. De hecho, los cromosomas Y de los seres
camafeo con macho azul homocigótico. humanos y de muchos otros organismo suelen ser pequeños y

Una mutación de un f Mutaciones de La supresión del
otros genes inciden entrecruzamiento
gen de un cromosoma en las características mantiene los genes
causa masculinización. masculinas. para rasgos masculinos
ligados al gen determinante
de la masculinización.
r- ■
y
Par de Genes para X
cromosomas Gen determinante rasgos masculinos
autosómicos de la masculinización
Con el tiempo, la falta de
entrecruzamiento entre los
cromosomas X e Y induce
degeneración del cromosoma Y.
Figura 4-16. Evolución del cromosoma Y.
contienen escasa información genética; por lo tanto, pocas carac-
terísticas presentan herencia ligada al cromosoma Y. Algunos
investigadores predijeron que el cro1nosoma Y humano continua-
rá perdiendo infor1nación genética en el futuro y desaparecerá por
co1npleto de la especie en alrededor de 10 n1illones de años, una
perspectiva desalentadora para aquellos de nosotros con un cro-
mosoma Y (y quizá para algunos con dos X). Sin embargo, inves-
tigaciones publicadas en 2012 sugieren que la descomposición
del cromosoma Y humano se ha detenido y que no se han perdi-
do genes en los últimos 6 millones de años. La recombinación
interna dentro del cro1nosoma Y (véase sección siguiente) puede
haber ayudado a enlentecer o ilnpedir la descomposición comple-
ta del cromosoma Y humano.
CARACTERÍSTICAS DEL CROMOSOMA y HUMANO En la actualidad,
se ha deternunado la secuencia genética de la mayor parte del cro-
n1osoma Y humano como parte del Proyecto Genon1a Humano
(véase cap. 19). Este trabajo revela que alrededor de dos tercios
del cromosoma Y consiste en secuencias cortas de DNA que se
repiten muchas veces y que no contienen genes activos. El otro
tercio está formado solo por unos pocos genes. En el cromosoma
Y humano, se han identificado únicamente alrededor de 350
genes, en comparación con miles en la mayoría de los cromoso-
111as, y solo alrededor de la 1nitad de los identificados en el cro-
mosoma Y codifica proteínas. No se conoce bien la función de la
1nayoría de los genes ligados al crom.osoma Y; muchos parecen
influir en el desarrollo sexual masculino y la fertilidad. Algunos
se expresan en todo el cuerpo, pero muchos lo hacen predominan-
te o exclusivamente en los testículos. Si bien el cro1nosoma Y
tiene relativamente pocos genes, investigaciones recientes en
Drosophila sugieren que el cromosoma Y lleva elementos genéti-
cos que inciden en la expresión de numerosos genes de los auto-
somas y los cromosomas X.
Una característica sorprendente revelada por la secuenciación es
la presencia de ochos secuencias palindrómicas 1nasivas en el cro-
1nosoma Y. Un palíndromo se define como una palabra, como
"reconocer", o una oración que se lee igual de adelante hacia atrás,
y viceversa. Una secuencia palindrómica en el DNA se lee igual
en ambas cadenas de la doble hélice, lo que crea dos copias casi
idénticas que se extienden desde un punto central, por ejen1plo:
Determinación del sexo y características ligadas al sexo 91
Brazo 1
5 '-TGGGAG .. . CTCCCA-3'
3 '-ACCCTC ... GAGGGT-5 '
Brazo 2
Por lo tanto, una secuencia palindrómica en el DNA aparece
dos veces, de manera muy similar a las dos copias de una secuen-
cia de DNA que se hallan en dos cromosomas homólogos. De
hecho, se produce recombinación entre las dos secuencias palin-
drómicas del cro1nosoma Y. Como ya se n1encionó, el cro1noso-
ma X y el cromosoma Y no son homólogos en casi ninguna de sus
secuencias, y la mayor parte del cromosoma Y no presenta entre-
cruzamiento con el cro1nosoma X. Esta falta de recombinación
intercromosónuca induce una acu1nulación de mutaciones deleté-
reas en el cromoso1na Y y la pérdida de 1naterial genético. La evi-
dencia sugiere que las dos ramas del cromosoma Y se recombinan
entre sí, lo que compensa, en parte, la ausencia de recombinación
entre los cromosomas X e Y. Esta recombinación interna puede
ayudar a mantener algunas secuencias y funciones de los genes
del cromosoma Y e impedir su degeneración total.
Aunque los palíndro1nos ofrecen oportunidades para la recom-
binación, lo que ayuda a prevenir Ja desco1nposición del cron10-
soma Y a lo largo de la evolución, en ocasiones tienen efectos
nocivos. Una investigación reciente ha revelado que la recon1bi-
nación entre los palíndromos puede inducir reordenamientos del
cromosoma Y que causan anomalías del desarrollo sexual. En
algunos casos, la recombinación entre los palíndromos induce la
deleción del gen SRY, lo que da origen a una 1nujer XY. En otros
casos, la recombinación elimina otros genes del cromosoma Y
que intervienen en la producción de espermatozoides. En ocasio-
nes, la recombinación produce un cromosoma Y con dos centró-
meros, que se puede romper cuando los centró1neros son traccio-
nados en direcciones opuestas durante la mitosis. El cromoson1a
Y roto se puede perder en la 1nitosis, lo que produce células X0 y
síndrome de Turner.
CONCEPTOS
Los rasgos ligados al cromosoma Y muestran un patrón de herencia
distinto: están presentes solo en machos, y toda la descendencia
masculina de un macho con un rasgo ligado al cromosoma Y hereda
ese rasgo. Las secuencias palindrómicas dentro del cromosoma Y
pueden presentar recombinación interna, pero esta recombinación
puede inducir anomalfas cromosómicas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
¿ Qué característica inusual del cromosoma Y permite cierta recombi-
nación entre sus genes?
EL USO DE MARCADORES GENÉTICOS LIGADOS AL CROMOSOMA Y
Con el transcurso del tiempo, las secuencias de DNA del cromo-
92 CAPÍTULO 4
so1na Y presentan mutación y varían entre machos individuales.
Estas mutaciones crean variaciones de la secue ncia de DNA
(denominadas marcadores genéticos) que, al igual que los rasgos
ligados al cromosoma Y, se transmiten de padre a hijo y pueden
utilizarse para estudiar la ascendencia masculina. Si bien los mar-
cadores en sí nlis1nos no codifican ningún rasgo físico, es posible
detectarlos 1nedia nte métodos moleculares . Gran parte del cro1no-
soma Y no es funcio nal, de manera que se acumulan mutaciones
con facilidad. Muchas de estas mutaciones son singulares; surgen
una sola vez y se transmiten a través de generaciones. Por lo
tanto, los machos individuales que tienen el mismo conjunto de
1nutaciones están emparentados, y la distribución de estos marca-
dores genéticos en los cromosoma s Y aporta indicios acerca de
las relaciones genéticas de la gente de la actualidad.
Los marcadores ligados al cromosoma Y se han usado para
estudiar la descendencia de Thomas Jefferson, autor principal de
la Declaración de Independencia y tercer presidente de los
Estados Unidos. En 1802, un enemigo político acusó a Jefferson
de ser padre de un hijo de su esclava Sally He1nings, pero la evi-
dencia era ci rc unstancial. He mings, que trabajaba para la familia
Jefferson y acompañó a Jefferson en un viaje a París, tenía cinco
hijos. Jefferson fue acusado de ser el padre del primer hijo, pero
también circ ularon rumores acerca de la paternidad de los otros
hijos. Los antepasados de los lujos de H emings sostenían que
eran descendientes de la línea Jefferson, pero los descendientes
de Jefferson se negaron a reconocer su reclamo.
Para resolver esta controversia de larga data, los genetistas exa-
minaron marcadores de los cromosomas Y de los descendientes de
línea masculina del primer hijo de Hemings (Thomas Woodson),
su último hijo (Eston He1nings) y de un tío paterno de Jefferson
con el que este tenía cromosomas Y en común; se recur1ió a des-
cendientes del tío de Jefferson porque el propio Jefferson no tenía
ningún descendiente varón comprobado. Los genetistas determina-
ron que Jefferson poseía un conjunto raro y distintivo de marcado-
res genéticos en su cromosoma Y También se hallaron los mismos
1narcadores en los cromoso111as Y de los descendientes de línea
111asculina de Eston Hemings. La probabilidad de que una co1npa-
tibilidad de este tipo surja por azar es 1nenor del 1%. No se halla-
ron los marcadores en los crom.osomas Y de los descendientes de
Thornas Woodson. Junto con la evidencia histórica circunstancial,
estos marcadores compatibles sugieren con firmeza que Jefferson
fue el padre de Eston H emings, pero no de Thomas Woodson.
Asimismo, las secuencias del cromosoma Y se han usado exten-
samente para exalnina r patrones pasados de migración hu1nana y
las relaciones genéticas entre difere ntes poblaciones humanas.
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Reconocimiento de la herencia ligada al sexo
¿ Qué características debemos investigar para identificar un rasgo
ligado al sexo? Un concepto erróneo frecuente es que cua lquier
característica genética en la que difieren los fenotipos de machos y
hembras debe esta r ligada al sexo. De hecho, la expresión de muchas
características autosómicas difiere entre machos y hembras. Los
genes que codifican estas características son los mismos en ambos
sexos, pero su expresión es influenciada por las hormonas sexuales.
Las diferentes hormonas sexuales de machos y hembras hacen que
los mismos genes generen fenotipos distintos en uno u otro sexo.
Otra idea equivocada es que cualquier característica hallada con
mayor frecuencia en un sexo está ligada al sexo. Una serie de rasgos
autosómicos se expresan más a menudo en un sexo que en el otro.
Algunos rasgos autosóm icos se expresan solo en un sexo; se dice que
estos rasgos están limitados por el sexo. Tanto las características
influenciadas por el sexo como las limitadas por el sexo se considera-
rán con más detal le en el capítulo 5.
Varios aspectos de las características ligadas al sexo facilitan su
reconocim iento. Los rasgos ligados al cromosoma Y se encuentran
solo en los machos, pero este hecho no garantiza que un rasgo esté
ligado al cromosoma Y, porque algunas características autosómicas se
expresan solo en los machos. Sin embargo, un rasgo ligado al cromo-
soma Y es singu lar porque todas la descendencia masculina de un
macho afectado expresará el fenotipo del padre, y un rasgo ligado al
cromosoma Y solo puede heredarse del lado paterno de la familia . Por
lo tanto, un rasgo ligado al cromosoma Y puede heredarse solo del
abuelo paterno (el padre del padre), nunca del abuelo materno (el
padre de la madre).
Las características ligadas al cromosoma X también muestran un
patrón distintivo de herencia. El ligamiento al cromosoma X es una
explicación posible cuando cruzamientos recíprocos dan diferentes
resultados . Si una característ ica está ligada al cromosoma X, un cru-
zamiento entre un macho afectado y una hembra no afectada no
dará los mismos resultados que un cruzamiento entre una hembra
afectada y un macho no afectado. Para casi todas las características
autosómicas, los cruzamientos recíprocos dan los mismos resultados.
Sin embargo, no debemos concluir que, cuando los cruzamientos
recíprocos dan resultados diferentes, la característica está ligada al
cromosoma X. Otras formas de herencia ligada al sexo, consideradas
en el capítulo 5, también producen resu ltados diferentes en cruza-
mientos recíprocos. La clave para reconocer la herencia ligada al sexo
es recordar que un macho siempre hereda su cromosoma X de la
madre, no del padre. Por consiguiente, una característica ligada al
cromosoma X no se transmite directamente de padre a hijo; si un
macho hereda con claridad un rasgo de su padre (y la madre no es
heterocigótica), no puede estar ligado al cromosoma X.
4.3 La compensación de la dosis iguala
la cantidad de proteína producida
por los genes ligados al cromosoma X
y autosómicos en algunos animales
En especies con determinación del sexo XX-XY, las diferencias
del nún1ero de cromoso1nas X de 111achos y hen1bras plantean un
proble,na especial para el desarrollo. En las hembras, hay dos
copias del cromoso1na X y dos copias de cada autosoma, de
manera que los genes de los c romosomas X y de los autosomas
están "en equilibrio". En cambio, en los machos, hay un solo cro-
mosoma X , mientras que hay dos copias de cada autosoma. Con10
la cantidad de proteína producida suele ser una función del nún1e-
ro de copias del gen que codifica la proteína, es probable que en
]os machos h aya menos proteína codificada por los genes ligados
al cro1nosoma X que proteína codificada por genes autosómicos .
Esta diferencia puede ser deletérea, porque la concentración de
proteínas a menudo desen1peña un papel crucial en el desarrollo.
 Determinación del sexo y características ligadas al sexo 93

Algunos an imales han superado este problema desarrollando Número de corpúsculos de Barr en células
mecanismos para igualar la cantidad de proteína producida por el humanas con diferentes complementos de
único cromosoma X y dos autosomas en el sexo heterogamético. cromosomas sexuales
Estos mecanismos se denominan compensación de la dosis. En
las moscas de la fruta, la compensación de la dosis se logra Cromosomas Número de corpúsculos
n1ediante una duplicación de la actividad de los genes del cromo- sexuales Síndrome de Barr
so1na X de los 1nachos, pero no de las hembras. En los manúfe-
XX Ninguno 1
ros placentarios, la expresión de genes sensibles a la dosis de los
cromosomas X tanto de machos como de hembras ha aumentado, XY Ninguno o
junto con la desactivación de uno de los cromosomas X de las
he111bras , de manera que la expresión de genes ligados al cromo-
xo Turner o
so1na X y autosómicos está equilibrada en ambos sexos. XXY Klinefelter 1
Por razones desconocidas, la presencia de cro1noso1nas sexua-
XXYY Klinefelter 1
les no siempre produce prob]en1as de dosificación de los genes, y
la compensación de la dosis de genes ligados al cromosoma X no XXXY Klinefelter 2
es universal. Una serie de animales no muestra mecanismos evi- XXXXY Klinefelter 3
dentes de compensación de la dosis: p. ej., 1naliposas y polillas,
aves, algunos peces, e incluso el ornitorrinco. Como discutiremos XXX X triple 2
en la siguiente sección, aun en 111anúferos placentarios, una serie xxxx Mujer poli-X 3
de genes escapan a la compensación de la dosis.
xxxxx Mujer poli-X 4

Hipótesis de Lyon
E n 1949, Murray Barr observó corpúsculos condensados, de
tinción oscura, en los núcleos de las células de gatos hembra
(fig. 4-17); estas estructuras pasaron a conocerse como cor-
púsculos de Barr. En 1961, Mary Lyon postuló que el corpúscu-
lo de Barrera un cromosoma X inactivo; su hipótesis (en la actua-
lidad generalmente aceptada para los mamíferos placentalios) se
conoce como hipótesis de Lyon. La autora sugirió que, dentro de
cada célula femenina, uno de los dos cromosomas X se torna
inactivo; cuál de los cromoso1nas X se inactiva es aleatorio. Si
una célula contiene más de dos cromosomas X, todos salvo uno
de ellos están desactivados. El cuadro 4-3 muestra el número de
corpúsculos de Barr presentes en las células humanas con dife-
rentes co111plementos de cromosomas sexuales.
Como resultado de la desactivación de X , las hembras de mamí-
feros placentarios son hemicigóticas desde el punto de vista fun-
cional en el nivel celular para los genes ligados al cromosoma X.
En las hembras heterocigóticas en un locus ligado al cromosoma
X , alrededor del 50% de las células expresarán un alelo, y el 50%,
el otro; por lo tanto, en las hembras heterocigóticas, se producen
las proteínas codificadas por ambos alelos, aunque no dentro de
la misma célula. Esta hem icigosis funcional ilnplica que las célu-
las de las hembras no son idénticas respecto de la expresión de los
genes del cromosoma X; las hembras son mosaicos para la expre-
sión de genes ligados al cromosoma X.
La desactivación aleatoria del cromosoma X tiene lugar en eta-
pas tempranas del desarrollo: en los seres humanos, dentro de las
prin1eras se1nanas del desarrollo. Después de que un cromoso1na
X se ha desactivado en una célula, permanece inactivo y es inac-
tivo en todas las células somáticas que descienden de la célula.
Por lo tanto, las células vecinas tienden a tener el mismo cromo-
soma X desactivado, lo que produce un patrón en parches (mosai-
co) para la expresión de u na característica ligada al cromosoma X
en hembras heterocigóticas.
Se puede observar esta clistribución en parches en las gatas con
manto tortuga o carey (fig. 4-18). Si bien muchos genes contribu-
yen al color y al patrón del manto en los gatos domésticos, un solo
locus ligado al cromosoma X detertnina la presencia de color
naranja. Hay dos alelos posibles en este locus: x+, que produce

(a) (b)

Figura 4- 17. Un corpúsculo de Barr es un

cromosoma X desactivado. (a) Célula feme-
nina con un corpúscu lo de Barr (señalado por
una flecha). (b) Célula mascu lina sin un cor-
púsculo de Barr. (Chris Bjornberg/Photo
Researchers).
94 CAPÍTULO 4
Figura 4-18. La distribución por parches de color en los gatos de
manto tortuga se debe a la desactivación aleatoria de un cromoso-
ma X en las hembras. (Robert Adrian Hillman/Shutterstock).
pelaje no naranja (en general, negro) , y X º, que produce pelaje
naranja. Los machos son hemicigóticos y, por consiguien te, pue-
den ser negros (X +Y) o naranjas (XºY), pero no negro y naranja.
(Pueden aparecer n1achos raros con manto tortuga por la presen-
cia de dos cromosomas X [X+XºY] ), Las hembras pueden ser
negras (X+x+), naranjas (XºXº) o carey (X +X º), cuyo patrón
surge de una mezcla de parches de pelaje negro y naranja. Cada
parche naranja es un clon de células derivadas de una célula ori-
ginal en la que está desactivado el alelo negro, y cada parche
negro es un clon de células derivadas de una célula original en la
que está desactivado el alelo naranja.
La hipótesis de Lyon sugiere que la presencia de números varia-
bles de cromosomas X no debería afectar el fenotipo de los mamí-
feros, porque cuando hay más de un cro111osoma X se desactiva-
rían todos menos uno. Sin embargo, las personas con síndrome de
Tumer (X0) difieren de las mujeres XX, y aquellos con síndrome
de Klinefelter (XXY) difieren de los varones XY. ¿ Cómo surgen
estos cuadros pese a la compensación de la dosis?
E s probable que estos trastornos se originen porque algunos
genes ligados al cromosoma X escapan a la desactivación. De
hecho, el carácter de la desactivación del cromosoma X es más
complejo de lo que se pensó originalmente. Estudios de genes in-
dividuales revelaron que solo alrededor del 75% de los genes
RESUMEN DE CONCEPTOS
■ La reproducción sexual es la producción de descendientes que
son genéticamente distintos de sus progenitores. La mayoría
de los organismos tienen dos fenotipos sexuales: machos y
hembr as. Los machos producen gametos pequeños; las hem-
bras producen grunetos grandes.
humanos ligados al cromosoma X presentan desactivación per-
manente. Alrededor del 15 % escapan por completo a la desac-
tivación , lo que implica que estos genes producen el doble de
proteína en las hembras que en los machos. El 10% restante es
desactivado en algunas hembras, pero no en otras. No se conoce
la razón de esta variación entre hembras en la activación de algu-
nos genes ligados al cromosoma X. Más aún, investigaciones
recientes indican que, en realidad, la desactivación de X no iguala
la dosis de muchos genes ligados a X y autosómicos en los seres
humanos ni en los ratones. " INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 44
Mecanismo de desactivación aleatoria
del cromosoma X
La desactivación aleatoria de cromosomas X requiere dos pasos.
En el primero, la célula evalúa o contabiliza de alguna manera
cuántos cromosomas X hay. En el segundo, se selecciona un cro-
moson1a X para que se convierta en el cromosoma X activo y se
silencian todos los demás.
Si bien aún no se conocen muchos detall es de la desactivación
del cromosoma X, se han identificado varios genes y secuencias
que participan en el proceso. De ellos, uno de los más importantes
es un gen deno1ninado Xist (por transc1ito específico de desacti-
vación de X [X-inactivation-specific-transcript]). En los cromo-
somas X destinados a ser desactivados, el gen Xist es activo y pro-
duce una .m olécula de RNA de 17 000 nucleótidos de longitud
que recubre al cromosoma X e induce la desactivación de los
genes de este, probablemente por reclutamiento de complejos
proteicos que alteran la estructura de la cromatina. En el cromo-
soma X destinado a ser activo, otros genes repriinen la actividad
de Xist, de manera que el RNA de Xist nunca recubre el cromoso-
ma X, y los genes de este cromoson1a pern1anecen activos.
CONCEPTOS
'
En los mamíferos placentarios, se desactivan todos los cromosomas
X, salvo uno, de cada célula; cuál de los cromosomas X desactivado
es aleatorio y varía de célula a célula.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
¿ Cuántos corpúsculos de Barr tendrá un macho con cromosomas
XXXYY en cada una de sus células?
■ El mecanismo por el cual se especifica el sexo se denomina
determinación del sexo. El sexo puede determinarse por dife-
rencias de cromosomas específicos, de genotipos o del
ambiente.
 Determinación del sexo y características ligadas al sexo 95

■ Los cromosomas sexuales de machos y hembras difieren en
número y aspecto. El sexo homogamético produce gametos
que son idénticos respecto de los cro1nosomas sexuales; el
sexo heterogamético produce ga1netos que difieren en su com-
posición de cro1nosomas sex uales.
■ En el sistema XX-XO de determinación del sexo, las hembras
tienen dos cromosomas X, mientras que los n1achos tienen un
solo cromosoma X. En el siste1na XX-XY, las hembras tienen
dos cromosomas X, en tanto que los machos tienen un cromo-
soma X y un solo cromosoma Y. En el sistema ZZ-ZW, los
machos tienen dos cromosomas Z, y las hembras, un cromo-
soma Z y Lm cromosoma W.
■ Algunos organismos tienen determinación génica del sexo, en
la que los genotipos de uno o más locus determinan el sexo de
un organismo individual. Otros presentan determinación
ambiental del sexo.
■ En Drosophila melanogaster, la relación X:A predice el sexo,
pero este se encuentra determinado funda1nentalmente por
genes del crom.o soma X.
■ En los seres humanos, el sexo es determinado, en última ins-
tancia, por la presencia o la au sencia del gen SRY localizado
en el cromosoma Y.
■ Las características ligadas al sexo son determinadas por genes
de los cromosomas sexuales; las características ligadas al ero-
mosoma X son codificadas por genes del cromosoma X, y
las ligadas al cron1osoma Y, codificadas por genes del cro1no-
som a Y.
■ Una hembra hereda alelos ligados al cromosoma X de ambos
progenitores; un macho hereda alelos ligados al cromosoma X
solo de su progenitor femenino.
■ Los cromosomas sexuales evolucionaron a partir de autoso-
mas. Se ha suprimido el entrecruzamiento entre los cromoso-
m as X e Y, pero secuencias palindrómicas dentro del cron10-
soma Y permiten la recombinación interna en este cromoso-
ma. En ocasiones, dicha recombinación interna induce reorde-
namientos cromosómicos que pueden afectar de 1nanera
adversa el desarroUo sexual.
■ Se observan características ligadas al cromosoma Y solo
en los machos y se transmiten del padre a todos los
hijos.
■ En los mamíferos placentarios, uno de los dos cromosomas X
de las hen1bras norn1aln1ente se desactiva. Cuál de los cromo-
somas X es desactivado es aleatorio y varía de célula a célula.
Algunos genes ligados al cromosoma X escapan a la desacti-
vación, y otros genes ligados al cromosoma X pueden desac-
tivarse en algunas hembras, pero no en otras. El gen Xist con-
trola la desactivación de X.

TÉRMINOS IMPORTANTES

autosoma (p. 79)
característica ligada al cromosoma X
(p. 85)
característica ligada al cromosoma Y
(p. 85)
característica ligada al sexo (p. 85)
compensación de la dosis (p. 93)
corpúsculo de Barr (p. 93)
cromosoma sexual (p. 79)
determinación del sexo (p. 78)
determinación génica del sexo (p. 81)
falta de disyunción (p. 87)
gen de la región determinante del sexo
en el cron1osoma Y (SRY) (p. 84)
hemicigosis (p. 85)
hermafroclitismo (p. 79)
h ermafroditismo secuencial (p. 81)
hipótesis de Lyon (p. 93)
organismo dioico (p. 79)
organismo monoico (p. 79)
región seudoautosómica (p. 80)
sexo (p. 78)
sexo heterogamético (p. 80)
sexo homogan1ético (p. 80)
síndrome de Klinefelter (p. 83)
síndrome de Turner (p. 83)
síndrome del cromosoma X triple (p. 83)

l. Meiosis
2. b
3. En la determinación cromosómica del sexo, machos y hem -
bras tienen cromosomas que son distinguibles. En la determi-
nación génica del sexo, el sexo es deterrrúnado por genes,
pero los cromosomas de m achos y hembras son indistingui-
bles. En la determinación ambiental del sexo, este es deter-
minado total o parcialmente por efectos ambientales.
4. a
5. c
6. Todos los descendientes varones tendrán hemofilia, y ningu-
na descendiente mujer la tendrá, de manera que la probabili-
dad global de hemofilia en la descendencia es de 1/2.
7. Ocho palíndromos grandes que permiten el entrecruzamiento
dentro del cro1noson1a Y.
8. Dos corpúsculos de Barr.
 96 CAPÍTULO 4

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1

Una mosca de la fruta tiene cromosom as sexuales XXXYY; todos los cromosomas autosómicos
son norm ales. ¿Qué fenotipo sexual tiene esta mosca?

Estrategia de solución Pasos de la solución

'

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Pasos de la solución

El fenotipo sexual de una mosca con cromosomas sexuales
XXXYY.
¿Qué información se proporciona para resolver el pro-
blema?
■ La mosca tiene cromosom as sexuales XXXYY.
■ Todos los cromosomas autosómicos son normales.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
D eterminación del sexo en Drosophila melanogaster en la
Sección 4. 1.
En las moscas de la fruta, la relación X:A - relación entre el
número de cromosomas A y el número de conjuntos autosó-
micos haploides- predice el sexo. Una relación X:A de 1 pro-
duce una mosca hembra, y una relación X :A de 0,5 produce
una mosca macho. Si la relación A:A es m ayor de 1, la
Recuerde: nor-
mosca es una 1netahembra, mientras que si es menor malmente,
de 0,5, la 1nosca es un metamacho; si la relación X:A Drosophila me/a-
se encuentra e ntre 1 y 0,5, la mosca es intersexual. nogastertiene
dos juegos de
Esta mosca tiene tres cromosomas X y autosomas autosomas.
normales, de manera qu e la relación X:A en este caso es
de 3/2 o 1,5. Por consiguiente, la mosca es una metahembra.

Problema 2
Una mosca de la fruta tiene cromosomas sexuales XXXYY; todos los cromosomas autosómicos
son normales. ¿Qué fenotipo sexual tiene esta mosca?

Estrategia de solución
1

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Los fenotip os y las proporciones de las moscas F2.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
■ Las cerdas bifurcadas son recesivas ligadas al crom oso-
ma X.
Con1encen1os por las características autosón1jcas. ·una
mosca hembra que es homocigótica para ojos rojos (b+b+) se
cruza con un macho de ojos marrones. Como los ojos marro-
nes son recesivos, el macho debe ser homocigótico para el
alelo de ojos marrones (bb). Toda la descendencia de este cru-
zamiento será heterocigótica (b+b) y tendrá ojos rojos:

■ Los oj os marrones son autos6micos recesivos. p b+b+ X bb

■ Los fenotipos de los progenitores del cruzamiento. Ojos rojos Oj os marrones
■
~
Se entrecruza la F 1 p ara obtener la F2 •

Para obtener ayuda con este problema, repase:

t
D altonismo ligado al cromosoma X en seres humanos en la Gametos b+ b
Sección 4.2. Sección 3.3 del capítulo 3.

Pasos de la solución
1

Pista: en 1.os proble-
mas que involucran
múltiples locus, des-
componga el cruza-
miento en dos cruza-
mientos separados.
1
La mejor manera de resolver este problema es
descompone rlo en dos cruzamjentos separados,
uno para los genes ligados al cromosoma X
que determina el tipo de cerdas y otro para los
genes autosómicos que determinan el color de
OJOS.
Después, se entrecruza la F 1 para producir la F2. Siempre
que se cruzan dos individuos heterocigóticos para una caracte-
rística autosómica recesiva, 3/4 de la descendencia tendrá el
rasgo dominante, y 1/4, el rasgo recesivo; por lo tanto, 3/4 de
las moscas de la F2 tendrá ojos rojos, y 1/4 tendrá ojos ma-
rrones:
 Determinación del sexo y características ligadas al sexo 97

b+b X b b X
Ojos rojos Ojos rojos

l l Gametos
Gametos (0 G) (0 G)
¼ b I b I ojos rojos
½ b +b ojos rojos xf xi x 1-xf
¼ bb ojos matTones Hembra Hembra
normal normal
¾ ojos rojos, ¼ ojos marrones
x +y xfy
Macho
A continuación, buscaremos los resultados para la caracte- Macho
con cerdas
rística ligada al cromosoma X. Una hembra que es homocigó- normal
bifurcadas
tica para cerdas nom1ales (X+x+) se cruza con un macho que Recuerde: la regla
tiene cerdas bifurcadas (X/y). Las hembras de ½ hembras normales,¼ machos normales, ¼ ,nachos con de la multiplicación
Recuerde: las hembras la F 1 de este cruzamiento son heterocigóticas y cerdas bifui-cadas afirma que la pro-
tienen dos alelos liga- babilidad de que
dos al cromosoma X, reciben un cromosoma X con un alelo para cer- ocurran en forma
pero los machos tienen das normales (X ~ de su madre y un cromosoma Para obtener la relación fenotípica de la F 2, combina- simultánea dos
un solo alelo ligado al eventos indepen-
X con una alelo para cerdas bifurcadas (XÍ) de mos ahora estos dos cruzamientos aplicando la regla de dientes se calcula
cromosoma X.
su padre. Los machos de la F 1 son hemicigóti- la multiplicación de la probabilidad y el diagrruna multiplicando sus
probabilidades
cos (X +y) y reciben un cromosoma X con un ramificado: independientes.
alelo para cerdas normales (X+) de su madre y un cromosoma
Color de ojos Cerdas y sexo Fenotipo de Fz Probabilidad
Y del padre:
hembra norn1al hembra normal ¾ X ½ =3/g
(½) de ojos rojos = 6/i6
p x+x+ X xfy . .
Pista: el dia-
grama ramifi-
rOJOS f---➔ OJOS íOJOS macho norma] ¾ X 1/4 = 3/16
Cerdas Cerdas ¾
cado es una
macho normal de ojos rojos manera con-
normales bifurcadas (!4) veniente de

l l 1nacho con cerdas macho de ojos ¾ X 1/4 = 3/16 considerar

bifurcadas (¼) rojos con cerdas todas las
bifurcadas combinacio-
Gametos
© ©0 hembra nonual hembra normal de !./4 X ½ = 1/g
nes posibles
de rasgos.

(½) ojos man·ones = 2116

F1 ½ x +x f cerdas normales
½. X +Y cerdas normales marrones - - OJOS marrones macho normal
¼ tnacho nonnal de ojos mairones
(¼)
Cuando se entrecruzan los miembros de esta F¡, 1/4 de la F 2
serán hembras con cerdas normales, 1/4 serán machos con cer-
macho con macho de ojos ¼X l/4 = l/ 16
cerdas bifurcadas marrones con
das non11ales y 1/4 serán machos con cerdas bifurcadas. (¼) cerdas bifurcadas

Sección 4.1
l. ¿Cuál se considera la diferencia fundamental entre machos
y hembras de la mayoría de los organismos?
2. ¿En qué difieren. los organism.os monoicos de los
dioicos?
3. Desciiba el sistema XX:-XO de determinación del sexo. En
este siste1na, ¿cuál es el sexo heterogamético y cuál el
homogamético?
*4. ¿En qué difiere el sistema XX:-XY de determinación del
sexo del sistema ZZ-ZW?
5. ¿ Qué es la región seudoautosómica? ¿En qué difiere la
herencia de rasgos codificados por genes de esta región de
la herencia de otr as características ligadas al cromosoma Y?
6. ¿Qué significa determinación génica del sexo?
7. ¿En qué difiere la determinación del sexo en Drosophila de
la determinación del sexo en los seres humanos?
98 CAPÍTULO 4

8. Indique el complemento típico de cromosomas sexuales de 11. ¿Qué características tiene un rasgo ligado al cromosoma Y?
las células hallado en las células de personas con síndrome
de Turner, con síndro1ne de Klinefelter y con síndrome de Sección 4.3
insensibihdad a los andrógenos. ¿Cuál es el complemento
de cromosomas sexuales de las mujeres con cromosoma X 12. Explique por qué los gatos de manto tortuga casi siempre
triple? son hen1bras y por qué tienen una distribución en parches
de pelaje naranja y negro.
Sección 4.2 13. ¿Qué es el corpúsculo de Barr? ¿Cómo se relaciona con la
hipótesis de Lyon?
9. ¿Cuáles son las características de un rasgo ligado al cromo-
soma X?
10. Explique cómo ayudó a probar la teoría cromosómica de la
herencia el estudio de Bridges de falta de disyunción en
Drosophila.

Introducción *17. Para cada uno de estos complementos cromosómicos,

¿cuál es el sexo fenotípico de una persona que posee
*14. Como se describe en la introducción de este capítulo, los
ornitorrincos tienen 10 cro1noso1nas sexuales. Las he.1n- a. XY con deleción del gen SRY?
bras tienen cinco pares de cro1nosomas X b. XX con una copia del gen SRY en un cromosoma auto-
, . ?
(X1X 1XzX2X 3JSX4X 4X 5X5), y los machos tienen cinco SOilliCO.
pares de cromosomas X e Y (X 1Y I X 2Y~ Y 3X 4Y 4X 5Y 5).
c. XO con una copia del gen SRY en un cromosoma auto-
Durante la meiosis, ¿cada par de cromosomas XY de los
sórnico?
machos se segrega independientemente? ¿Por qué o por
qué no? d. XXY con deleción del gen SRY?
e. XXYY con deleción de una copia del gen SRY?
Sección 4.1 18. Una Drosophila hembra normal produce huevos anorma-
*15. ¿Cuál es el fenotipo sexual de las moscas de la fruta que les que contienen todos sus cromosomas (un juego diploi-
tienen los siguientes cromosomas? de completo). Se aparea con una Drosophila macho nor-
1nal, que produce espennatozoides normales. ¿Cuál será el
sexo de la progenie de este cruzamiento?
Cromosomas sexuales Cromosomas autosómicos
19. En ciertas salamandras, es posible modificar el sexo de
a. XX todos normales una hembra genética, que se convierte en un macho fun-
b. XY todos normales cional; estas salamandras se denominan machos de sexo
c. xo todos normales invertido. Cuando un macho de sexo invertido se aparea
d. XXY todos nonnales con una hembra normal, alrededor de 2/3 de la descenden-
cia son hembras y 1/3 son machos. ¿Cómo se determina el
e. XYY todos normales
sexo en estas salamandras? Explique el resultado de este
f. XXYY todos normales
cruzamiento.
g. XXX todos normales
h. XX cuatro juegos haploides 20. En algunos ácaros, los machos transmiten genes a sus nie-
tos, pero nunca a sus hijos. Explique esto.
i. XXX cuatro juegos haploides
j. XXX tres juegos haploides *21. En organismos con sistema de determinación del sexo ZZ-
k. X tres juegos haploides ZW, ¿de cuál de las siguientes posibilidades puede heredar
l. XY tres juegos haploides una hembra su cromosoma Z?
m. XX tres juegos haploides
No Sí
a. La madre de su rnadre
16. Si en la meiosis I hay falta de disyunción de los cromoso- b. El padre de su madre
mas sexuales del macho de la figura 4-5, ¿qué fenotipos
c. La madre de su padre
sexuales y proporciones de descendientes se producirán? d. El padre de su padre

Sección 4.2
*22. Cuando Bridges cruzó hembras de ojos blancos con
machos de ojos rojos, obtuvo unos pocos machos de ojos
rojos y hembras de ojos blancos (véase fig. 4-13). ¿Qué
tipos de descendientes se producirían si estos machos de
ojos rojos y hembras de ojos blancos se cruzaran entre sí?
*23. José tiene hemofilia clásica, una enfermedad recesiva liga-
da al cromosoma X. ¿Podría haber heredado el gen de esta
enfermedad de las siguientes personas?
Sí No
a. La madre de su madre
b. El padre de su madre
c. La madre de su padre
d. El padre de su padre
*24. En Drosophila, el cuerpo amarillo se debe a un gen ligado
al cro1noso.ma X que es recesivo respecto del gen para
cuerpo gns.
(Cortesía de Masa-Tosh i Yamamoto, Drosophila Genetics
Resource Center, Kyoto lnst itute of Technology).
a. Se cruza una hembra gris homocigótica con un macho
a1narillo. Se entrecruza la F 1 para producir la F 2.
Indique los genotipos y los fenotipos, junto con las pro-
porciones esperadas, de la progenie F 1 y F 2.
b. Se cruza una hembra amarilla con un macho gris. Se
entrecruza la F 1 para producir la F 2 . Indique los genoti-
pos y los fenotipos, junto con las proporciones espera-
das, de la progenie F 1 y F2 .
c. Se cruza una hembra amarilla con un macho gris. Se
realiza un cruzamiento retrógrado entre las hembras de
la F 1 y machos g1ises. Indique los genotipos y los feno-
tipos, junto con las proporciones esperadas, de la pro-
genie F2 •
d. Si las moscas F 2 de la parte b se aparean al azar, ¿cuá-
les serán las proporciones fenotípicas esperadas de las
n1oscas de la F 3?
25. El color del manto en los gatos es determinado por genes
de varios locus diferentes. En un locus del cro1nosoma X,
un alelo (X+) codifica pelaje negro; otro alelo (Xº) codifi-
ca pelaje naranja. Las hembras pueden ser negras (X+x+),
naranjas (XºXº) o una mezcla de naranja y negro, denomi-
nado manto tortuga (X-Xº). Los machos son negros
Determinación del sexo y características ligadas al sexo 99
(X+Y) o naranja (XºY). Guillermo tiene una gata de
manto tortuga llamada Parches. Una noche, Parches se
escapa de la casa de Guillermo, pasa la noche afuera y
se aparea con un macho callejero. Más adelante, Parches
tiene los siguientes gatitos: un macho naranja, un n1acho
negro, dos hembras de manto tortuga y una hembra naran-
ja. Indique los genotipos de Parches, sus gatitos y del gato
call ejero que se apareó con ella.
*26. En los seres humanos, el daltonismo se debe a un gen
recesivo ligado al cromosoma X. Tanto Juan como
Catalina tienen visión normal de los colores. Después de
10 años de matrimonio con Juan , Catalina tiene una hija
daltónica. Juan pide el divorcio alegando que no es el
padre de la niña. ¿Está j ustificado el recl.amo de Juan de
no paternidad? Explique por qué. Si Catalina hubiera teni-
do un hijo varón daltónico, ¿estatia justificado el reclan10
de Juan de no paternidad?
27. En los seres humanos, el daltonismo se debe a un gen
recesivo ligado al cromosoma X. Una n1ujer cuyo padre es
daltónico tiene un ojo con visión normal de los colores y
un ojo con ceguera para los colores.
a. Proponga una explicación para el patrón de visión de
esta mujer. Asuma que no han surgido mutaciones nue-
vas espontáneas.
b. ¿Sería posible que un hombre tenga un ojo con visión
normal de los colores y un ojo con ceguera para los
colores?
*28. Roberto tiene cromosomas XX.Y (síndrome de Klinefelter)
y es daltónico. Su n1adre y su padre tienen visión normal
de los colores, pero su abuelo materno es daltóni co.
Asuma que la anormalidad cromosómica de Roberto se
debió a falta de disyunción durante la meiosis. ¿En cuál de
los progenitores y en qué división meiótica se produjo la
falta de disyunción? Asuma que no ha habido entrecruza-
miento. Explique su respuesta.
29. Xg es un antígeno hallado en los eritrocitos. Este antígeno
es causado por un alelo ligado al cromosoma X (Xª) que
es dominante respecto de un alelo para ausencia del antí-
geno (X-). Se estudió la herencia de estos alelos ligados al
cromosoma X en niños con anormalidades cromosómicas
para determinar si había habido falta de disyunción de los
cromosomas sexual es. Para cada tipo de apareamiento de
las partes a ad, indique si hubo falta de disyunción en la
madre o en el padre y, si es posible, si tuvo lugar en la
meiosis I o en la meiosis II (asuma que no se produjo
entrecruzamiento).
a. XªY x x-x- ➔ Xª (síndrome de Tumer)
b. XªY X xax- ➔ x- (síndrome de Tumer)
c. XªY x x-x- ➔ XªX -Y (síndrome de Klinefelter)
d. XªY x X ªX ➔ x -x -y (síndrome de Klinefelter)
30. El Talmud, el antiguo libro de leyes civiles y religiosas
judías, afirma que, si una mujer tiene dos hijos que mue-
ren por hemorragia después de la circuncisión (resección
del prepucio), cualquier otro hij o que tenga no debe ser
circuncidado. (Con suma probabilidad, la hemorragia se
debe al trastorno ligado al cromosoma X hemofilia). Más
aún, el Talmud afirma que los hijos de sus her1nai1as no
100 CAPÍTULO 4

deben ser circuncidados, en tanto que los hijos de sus her- 34. Si se lleva a cabo un cruzamiento retrógrado entre las
manos, sí. ¿Es esta ley religiosa consistente con principios hembras azules de la figura 4-lSb y los machos azules de
genéticos sólidos? Explique su respuesta. la generación P, ¿qué tipos y proporciones de descenden-
31. El síndrome craneofrontonasal (SCFN) es un defecto con- cia se producírán?
génito en e l que la fu síón prematura de las suturas cranea- 35. En los seres humanos, el daltonismo es un rasgo recesivo
les causa una forma anormal de la cabeza, ojos n1uy sepa- ligado al cromosoma X. L a polidactilia (dedos extra de las
rados , hendiduras nasales y otras diversas anormalidades manos y de los pies) es un rasgo autosómico dominante.
esqueléticas. George Feldman y sus colegas investigaron a Maita tiene dedos normales de las manos y de los pies, y
varias fam ilias en las que los descendientes presentaban visión normal de los colores. Su madre es normal en todos
SCFN y registraron los resultados mostrados en el los aspectos, pero su padre es daltónico y tiene polidacti-
siguiente cuadro (G. J. Feld1nan. 1997. Human Molecular Iia. Guillermo es daltónjco y tiene polidactilia. Su 1nadre
Genetics 6:1937-1941). tiene visión normal de los colores y dedos normales de las
manos y de los pies. Si Guillermo y Marta se casan, ¿qué
tipos de hijos pueden generai· y en qué proporciones?
Descendencia
Número 36. Una mutación de Drosophila denominada singed (s) hace
Progenitores Normal SCFN que las cerdas se encuentren incurvadas y deformadas.
de
familia Padre Madre Varones Mujeres Varones Mujeres Una mutación deno1ninada purple (p) detenn ina que la
mosca tenga ojos color violeta e n lugai· del color rojo nor-
1 normal SFCN 1 o 2 l mal. Se cruzaron moscas homocigóticas para singed y
5 normal SCFN o 2 l 2 pu,ple con moscas que eran homocigóticas para cerdas
6 normal SCFN o o l 2 normales y oj~s rojos. S~ e1!-trecruzó laFJ pai·a producir la
8 nonnal SCFN 1 1 1 o F 2, y se obtuvieron los s1gwentes resulta os.
10a SCFN normal 3 o o 2
lOb nonnal SCFN 1 l 2 o Cruzamiento 1
12 SCFN normal o o o l
13a nonnal SCFN o l 2 l P macho, cerdas incurvadas y deformadas, OJOS violetas x
13b SCFN normal o o o 2 hembra, cerdas normales, ojos rojos
7b SCFN normal o o o 2
F1 420 hembras, cerdas normales, oj os rojos
426 machos, cerdas normales, oj os rojos
a. Sobre la base de estos resultados, ¿cuál es el modo de
F2 337 hembras, cerdas normales, ojos rojos
herencia más probable del SCFN?
113 hembras, cerdas normales, oj os violetas
b. Indique los genotipos más probables de los progenito-
168 1nachos, cerdas nor1nales, oj os rojos
res de la familia 1 y de la familia 10a.
170 machos, cerdas incurvadas y deformadas, ojos roj os
32. Las alas en miniatura (X111) de Drosophila se deben a un 56 machos, cerdas normales, ojos violetas
alelo ligado al cromosoma X que es recesivo respecto del 58 machos, cerdas incurvadas y defo1madas , ojos violetas
alelo para alas largas (X+). Indique los genotipos de los
progenitores en cada uno de los siguientes cruzainientos.
Cruzamiento 2
p hembra, cerdas incurvadas y deformadas, ojos violetas x
Progenitor Progenitor Descendientes Descendientes
macho, cerdas nonnales, ojos roj os
macho hembra macho hembra
a. largas largas 231 lai·gas 560 largas 504 hembras, cerdas normales, ojos rojos
250 mini~tura 498 machos , cerdas i ncurvadas y deformadas, ojos rojos
b. miniatura largas 610 largas 632 largas
227 hembras, cerdas normales, ojos rojos
c. miniatura largas 410 largas 412 largas 223 hembras, cercas incurvadas y deformadas, ojos rojos
417 miniatura 415 miniatura 225 machos, cerdas normales, ojos rojos
d. largas miniatura 753 miniatura 761 largas 225 machos, cerdas incurvadas y deformadas, ojos roj os
78 hembras, cerdas normales, ojos violetas
e. largas largas 625 largas 630 largas 76 hembras, cerdas incurvadas y defonnadas, ojos violetas
74 machos, cerdas normales, ojos violetas
72 machos, cerdas incurvadas y deformadas, ojos violetas

*33. En los pollos, la calvicie congénita se debe a un gen recesivo
ligado al cromosoma Z. Se aparea un gallo calvo con una
gallina normal. La F 1 de este cruzamiento se entrecruza para
producir la F2. Indique los genotipos y fenotipos, junto con
sus proporciones esperadas, en la progenie F 1 y F 2.
a. ¿ Cuáles son los modos de herencia de singed y purple?
Explique su razonamiento.
b. Indique los genotipos de los progenitores y la descenden-
cia en las generaciones P, F 1 y F 2 del cruzamiento l y el
cruza1niento 2.
 Determinación del sexo y características ligadas al sexo 101

37. Se cruzan los dos genotipos siguientes: Aa Bb Ce x+xr x 43. ¿ Cuál es el sexo y el genotipo más probable del gato mos-
Aa BB ce X+Y, donde a, b y c representan alelos de genes trado en la figura 4-18?
autosó1nicos, y x+y xr representan alelos ligados al cro- *44. En los seres humanos, la displasia ectodérmica anbidrótica
mosoma X de un organismo con determinación del sexo es un trasto1no recesivo ligado al cromosoma X caracteri-
XX-XY. ¿Cuál es la probabilidad de obtener un genotipo zado por dientes pequeños, ausencia de glándulas sudorí-
aa Bb Ce x+x+ en la progenie? paras y escaso vello corporal. Por lo general, este rasgo se
*38. Las alas en miniatura de Drosophila se deben a un alelo observa en hombres, pero las mujeres que son portadoras
ligado al cron1osoma X (Xm) que es recesivo respecto del heterocigóticas del rasgo suelen tener parches irregulares
alelo para alas largas (X+). Los ojos de color sepia son de piel con glándulas sudoríparas escasas o ausentes
producidos por un gen autosómico (s) que es recesivo res- (véase la siguiente ilustración).
pecto del alelo para ojos rojos (s+).
a. Se cruza una mosca hembra que tiene alas en miniatura
y ojos de color sepia con un macho de alas normales y Generación P
homocigótico para ojos rojos. Se entrecruzan las mos-
cas F1 para producir la F2 . Indique los fenotipos, así co-
mo sus proporciones esperadas , de las moscas F1 y F2 _ ( Generación F1
b. Se cruza una mosca hembra homocigótica para alas
normales y ojos de color sepia con un ,nacho que tiene 1
alas en miniatura y es homocigótico para ojos rojos. Se
entrecn1zan las moscas F1 para producir la F2 . Indique
H f
los fenotipos, así como sus proporciones esperadas, de
Parche de piel
las moscas F 1 y F2 . 1
sin glándulas -==--1
39. Suponga que un gen recesivo que produce cola corta en sudoríparas
ratones se localiza en la región seudoautosómíca. Se apa-
rea un ratón macho de cola corta con un ratón hembra ho-
mocigótico para cola normal. Se entrecruzan los ratones
l_ _ l·- - - -

F 1 de este cruzamiento para producir la F2. Indique los fe- ~ neración F2

notipos, así como sus proporciones, de los ratones F 1 y F2.
*40. Una mujer daltónica y un hombre con visión normal de
los colores tienen tres hijos y seis hijas. Todos los hijos
son daltónicos. Cinco de las hijas tienen visión normal,
pero una de ellas es daltónica. La hija daltónica tiene 16
años, es de talla baja para su edad y no ha entrado en la
'
pubertad. Explique cómo heredó esta niña el daltonismo.

Sección 4.3

*41. ¿Cuántos corpúsculos de Barr esperaría observar en una ~ neración F3

célula humana que contiene los sigui entes cromosomas?
a. XX d. XXY g. XYY
b. XY e. XXYY h. XXX
c. XO f. XXXY i. XXXX

42. Una mujer con cromosomas normales se aparea con un

hon1bre que tambi én tiene cromoso1nas normales.
a. Suponga que, en el curso de la ovogénesis, los cromo-
somas sexuales de la mujer presentan falta de disyun-
ción en la meiosis I; los cromosomas del ho1nbre se
separan norn1almente. Indique todas las combinaciones
posibles de cromosomas sexuales que podrían heredar
los hijos de esta pareja y el número de corpúsculos de
Barr que esperaría observar en cada una de las células
de cada hijo.
b. ¿Qué combinaciones cromosómicas y número de cor-
púsculos de Barr esperaría observar si los cro1nosomas
se separaran norn1aln1ente en la ovogénesis pero se pro-
dujera falta de disyunción de los cro1nosomas sexuales
en la meiosis I de la espermatogénesis?
Gemelas idénticas
(De A. P. Manee y J. Manee. Genetics Human Aspects [Sinauer, 1990],
p. 133).
a. Explique por qué las mujeres que son po1tadores hete-
rocigóticas de un gen recesivo para dísplasi.a ectodér-
mica anhidrótica tienen parches irregulares de piel sin
glándulas sudoríparas.
b. ¿Por qué la distribución de los parches de piel sin glán-
du las sudoríparas difiere entre las mujeres representadas
en la ilustración, incl uso entre las gemelas idénticas?
102 CAPÍTULO 4
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 4.2
*45. Un genetista descubre un ratón macho con testículos muy
aumentados de tamaño en su colonia de laboratorio.
Sospecha que este rasgo se debe a una mutación nueva
ligada al cromosoma Y o autosómica dominante. ¿ Cómo
podría determinar si e l rasgo es autosómico dominante o
ligado al cromosoma Y?
Sección 4.3
46. Las mujeres que son heterocigóticas para genes recesivos
ligados al cromosoma X a veces muestran expresión leve
del rasgo. Sin embargo, esta expresión leve de rasgos liga-
dos al cro111osoma X en mujeres heterocigóticas para ale-
los ligados al cromoso111a X no se observa en Drosophila.
¿Qué podría causar esta diferencia de expresión de genes
ligados al cromosoma X entre mujeres y hembras de
Drosophila? (Pista: en Drosophila, la compensación de la
dosi s se logra duplicando la actividad de los genes del cro-
mosoma X de los machos).
47. Los gemelos idénticos (denominados también gemelos
f;." .monocígóticos) derivan de un único óvulo fecundado por
,,,.r,, un solo espermatozoide que crea un cigoto que, más
tarde, se divide en dos (véase cap. 6). Como los gemelos
idénticos se originan de un cigoto único, son idénticos
desde el punto de vista genético. Caroline Loat y sus co-
legas examinaron nueve parámetros de capacidad social,
conductuaJ y cognitiva en 1000 pares de gemelos idénti-
cos de sexo masc ulino y en 1000 pares de ge111elos
idénticos de sexo femenino (C. S. Loat y cols. 2004.
T'i-vin Research 7:54-61). Observaron que en tres de los
parámetros (comportamiento prosocial, problemas con
pares y capacidad verbal) las puntuaciones tendieron a
ser más similares en los dos gemelos varones que en las
dos gemelas mujeres de un par. Proponga una posible
ex plicación para esta observación. ¿Qué podría indicar
acerca de la localización de los genes que influyen en el
comportamiento prosocial , los problemas con pares y la
capacidad verbal?
48. En ocasiones, el cromosoma X de un ratón se rompe en
dos fragmentos, y cada uno de ellos se une a un cromoso-
ma autosómico diferente. En este caso, los genes de solo
uno de los dos fragmentos sufren desactivación de X.
¿Qué indica esta observación acerca del mecanismo de
desactivación del cromoso1na X?
 5
Extensiones y modificaciones
de los principios básicos

La extraña genética de los caracoles

zurdos
Al co1nienzo del siglo XX, se difundió amplian1ente el tra-
bajo de Mendel sobre la herencia en plantas de guisantes
(véase cap. 3), y varios biólogos comenzaron a verificar
sus conclusiones llevando a cabo cruzamientos con otros
organismos. Los biólogos conf1rn1aron rápidamente que
los principios de Mendel no se aplicaban solo a los gui-
santes, sino también al maíz, las alubias, los pollos, los
ratones, los cobayos, los seres hu1uanos y n1uchos otros
organismos. Al mismo tiempo, comenzaron a descubrir
excepciones, rasgos cuya herencia era más compleja que
los rasgos dominantes y recesivos simples observados por
Mendel. Una de estas excepciones con·espondía al espiral
de la concha de un caracol.
La dirección del enrollamiento de la concha de los
caracoles se denomina quiralidad. La mayoría de las con-
chas de los caracoles forman una espiral descendente en
sentido horario o a la derecha. Estas conchas se denomi-
nan dextrógiras. Unos pocos caracoles tienen conchas que
se enrollan en dirección opuesta y for1nan una espiral
descendente en sentido antihorario o a la izquierda. Se
dice que estas conchas son levógiras. La mayoría de las
especies de caracoles tienen conchas que son totalmente
dextrógiras o levógiras; solo en unos pocos casos raros,
coexisten conchas dextrógiras y levógiras en la misma
especie.
La di rección del enrollamiento de la concha de los caracoles Lymnaea es En las décadas de 1920 y 1930, Arthur Boycott, de la
determinada por efecto genético materno. Aquí se muestra Lymnaea stagna-
Universidad de Londres, investigó la genética del enrolla-
lis; un caracol con concha levógira a la izquierda, y un caracol con concha dextró-
gira (diestra), a la derecha. (Cortesía del Dr. Reiko Kuroda).
miento de la concha de Lymnaea peregra, un caracol
común de los estanques en Gran Bretaña. En esta especie,
la mayoría de los caracoles son dextrógiros, pero en algu-
nas poblaciones aparecen unos pocos caracoles levógiros. Boycott se enteró por naturalistas
aficionados que en un estanque cerca de Leeds, Inglaterra, podía hallar una cantidad anormal-
mente alta de caracoles de concha levógira. Obtuvo cuatro de ellos en esta localidad y comen-
zó a investigar la genética de la quira lidad de la concha.
El hecho de que estos caracoles son hermafroditas, lo que implica que pueden autofecun-
darse (aparearse consigo mismos), complicó la investigación de Boycott. Si disponen de una
pareja adecuada, los caracoles también pueden cruzarse (aparearse) con otro individuo.
Boycott observó que si aislaba a un caracol recién nacido y lo criaba solo, con el tiempo pro-
duciría descendencia, de manera que sabía que se había autofecundado (apareado consigo
mismo). Pero cuando colocaba dos caracoles juntos y uno producía descendencia, no tenía
manera de saber si se hab.ía apareado consigo mismo o con el otro caracol. La investigación
de Boycott exigía criar gran número de caracoles en aislamiento y en pares, criar a sus des-
cendientes y determinar la dirección del enrollamiento de la concha de cada caracol de la
103
104 CAP(TULO 5

progenie. Para facilitar el trabajo, solicitó la ayuda de varios científicos aficionados. Uno de sus asis-
tentes fue el Capitán C. Diver, un amigo que trabajaba como asistente en el Parlamento Británico.
Como el Parlamento solo se reunía durante parte del año, Diver tenía tiempo libre y se incorporó con
entusiasmo para ayudar con la investigación. Juntos, Boycott, Diver y otros ayudantes llevaron a cabo
numerosos experimentos de cruzanlientos, con autofecundación y cruzanliento de caracoles, y cría de
la progenie en frascos de dulce. Con el tien1po, criaron más de 6000 camadas y determinaron la direc-
ción del enrollarniento en un 1nillón de caracoles.
Al principio, sus resultados fueron sorprendentes: el enrollamiento de la concha no parecía ajustarse
a los principios de la herencia de Mendel. Finalmente, advirtieron que dextrógiro era dominante res-
pecto de levógiro, pero con un hallazgo peculiar: el fenotipo de un caracol no era determinado por su
propio genotipo sino, más bien, por el genotipo de su madre. Este fenó1neno (un fenotipo influido por
el genotipo de la madre) se denomina efecto genético materno. Los efectos genéticos maternos suelen
surgir porque el progenitor materno produce una sustancia, codificada por su propio genotipo, que se
deposita en e] citoplasma del óvulo y que influye en el desan·ollo temprano de la descendencia.
Nunca se ha aislado la sustancia que determina la dirección del enrollamiento de la concha. Sin
embargo, en 2009, Rieko Kuroda y cols. demostraron que la dirección del enrollamiento en caracoles
Lymnaea es determinado por la orientación de las células cuando el embrión atraviesa etapas tempra-
nas del desarrollo, específicamente la etapa de ocho células. Empujando con suavidad las células de
los e1nbriones de ocho células, pudieron inducir el desarroLio de caracoles levógiros de madres cuyo
genotipo era dextrógiro; de modo similar, indujeron el desarrollo de caracoles dextrógiros de madre
cuyo genotipo era levógiro en1pujando las células en la dirección opuesta.

L a investigación de Boycott sobre la dirección del enrolla-

miento en los caracoles demostró que no todas las caracte-
rísticas se heredan como rasgos dominantes o recesivos sin1ples,
co1no la forma y eJ color de los guisantes que describió Mendel.
Esta demostración no significa que los piincipios de Mendel fue-
ran incorrectos, sino que no son, por sí mismos, suficientes para
explicar la herencia de todas las características genéticas. Nuestro
conocimiento moderno de la genética se ha enriquecido mucho
con el descubrimiento de una serie de 1nodificaciones y extensio-
nes de los principios básicos de Mende1, que son e.l te1na de este
capítulo.
5.1 Factores adicionales en un solo locus
pueden incidir en los resultados
de los cruzamientos genéticos
En el capítulo 3 aprendimos que el p1incipio de la segregación y
el p1incipio de la segregación independiente nos permiten prede-
cir los resultados de los cn1zamientos genéticos. Aquí, exarnina-
1nos varios factores adicionales que actúan en locus individuales
y que pueden modificar las proporciones fenotípicas anticipadas
por los principios de Mendel.
Tipos de dominancia
Una de las contiibuciones importantes para el estudio de la heren-
cia es el concepto de dominancia: la idea de que un organismo
individual tiene dos alelos diferentes para una característica, pero
que en el fenotipo se observa el rasgo codificado por solo uno de
los alelos. En caso de dominancia, el heterocigoto tiene el mismo
fenotipo que uno de los homocigotos.
Mendel observó dominancia en todos los rasgos que eligió para
estudiar de manera exhaustiva, pero sabía que no todas las carac-
terísticas mostraban dominancia. Llevó a cabo algunos cruza-
mientos concernientes al tie1npo que tarda en florecer la planta de
guisantes. Por ejemplo, cuando cruzó dos variedades homocigóti-
cas que diferían en su tiempo de floración en un promedio de 20
días, el tiempo insumido por las plantas F 1 para florecer era inter-
medio entre los de a1nbos progenitores. Cuando el heterocigoto
tiene un fenotipo intermedio entre los fenotipos de dos homoci-
góticos, se dice que el rasgo presenta dominancia incompleta.
DOMINANCIA COMPLETA E INCOMPLETA La dominancia puede com-
prenderse respecto de cómo se relaciona el fenotipo del heteroci-
goto con los fenotipos de los homocigotos. En el ejemplo presen-
tado en el panel superior de la figura 5-1, el color de las flores
puede variar de rojo a blanco. Un genotipo homocigótico, A 1A 1,
produce pigmento rojo, que determina flores rojas; otro, A2A2 , no
produce pigmento, lo que determina flores blancas. El lugar que
ocupa el heterocigoto dentro del espectro de fenotipos determina
el tipo de do1ninancia. Si el heterocigoto (A 1A2) produce la misma
cantidad de pig1nento que el homocigoto A 1A 1, lo que determina
color rojo, entonces el alelo A 1 presenta dominancia completa
respecto del alelo A2; es decir, el rojo es dominante sobre el blan-
co. Por el contrario, si el heterocigoto no produce pigmento, lo
que determina flores del mismo color que las del homocigoto
A 2A 2 (blancas), el alelo A2 es completamente dominante, y el
blanco es do1ninante sobre el rojo.
Cuando el heterocigoto cae entre los fenotipos de los dos bo-
mocigotos, la dominancia es incompleta. En caso de dominan-
cia incompleta, el heterocigoto no necesita ser exactamente
intermedio entre los dos homocigotos (véase panel inferior de la
fig. 5-1); podría tener un matiz de rojo ligeramente más claro o
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 1OS

(a)

~
Dominancia
Generación P
completa Fruto púrpura Fruto blanco
11111

Espectro fenotípico
•

,¡,/•

X
11;1 A 1A 1 codifica A ,A 1 2 2
A A codifica =- A2A2
L flores rojas flores blancas.
PP PP
Rojo Blanco ! +
dominante dominante
Gamet os ®
•A1A2 Fec~nc:tación.",

Si el heterocigoto es rojo, ' Si el heterocigoto es blanco,

Generación F1
el alelo A 1 es dominante el alelo A 2 es dominante
respecto del alelo A 2 . J respecto del alelo A 1.
Fruto violeta Fruto violeta

X
Dominancia Pp
incompleta

Gametos
.-1+
PJ J!)

Fecundación

Si el fenotipo del heterocigoto cae entre los fenotipos de los

~ os homocigotos, la dominancia es incompleta. (b)

Generación F2
Figura 5-1. El tipo de dominancia mostrado por el rasgo depende de
cómo se relaciona el fenotipo del heterocigoto con los fenotipos de los pp Pp
homocigotos.

Púrpura Violeta
pp pp

un matiz de blanco ligeramente rosado. En tanto que sea posible ®

diferenciar el fenotipo del heterocigoto y que este caiga dentro
Violeta Blanco
del espectro de los dos homocigotos, la do1n inancia es incom-
pleta.
Condusión: Proporción genotípica 1 PP: 2 Pp: 1 pp
También se observa dominancia incompleta en el color del Proporc:ión fenotípica 1 púrpura: 2 violetas:1 blanco
fruto de la planta de berenjena. Cuando se cruza una planta ho-
1nocigótica que produce un fruto violeta (PP) con una p lanta Figura 5-2. El color del fruto de la planta de berenjena se hereda
homocigótica que produce un fruto blanco (pp), todas las plan- como un rasgo con dominancia incompleta.
tas heterocigóticas de F 1 (Pp) producen frutos violetas (fig. 5-2a).
Cuando se cruza la F 1 entre sí, 1/4 de la F 2 es púrpura (PP), 1/2 es
violeta (Pp) y ¼ es blanca (pp), como muestra la figura 5-2b.
Observe que esta relación 1:2: 1 es diferente de la relación 3: 1
CONCEPTOS
que observaríamos si el color del fruto de la planta de berenje-
Cuando el heterocigoto tiene un fenotipo intermedio entre los fenoti-
na 1nostrara dominancia completa. Otro ejen1plo de dominancia
pos de los dos homocigotos, hay dominancia incompleta. Cuando un
inco1npleta es el color de las plumas de los pollos. Un cruza-
rasgo muestra dominancia incompleta, un cruzamiento entre dos
1niento en tre un poi.lo homocigótico negro y un pollo homocigó-
heterocigotos produce una proporción fenotípica 1:2:1 en la progenie.
tico blanco produce pollos F 1 grises. Si se entrecruzan estos
pollos F 1 grises, producen aves F 2 en una relación de 1 negra:2
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
grises: 1 blanca.
Ahora, deben10s agregar la proporción 1:2: 1 a las proporciones
Si se utiliza una planta de berenjena F1 de la figura 5-2 en un cruza-
fenotípicas para cruzamientos siinples presentadas en el capítulo
miento de prueba, ¿qué proporción de la progenie de este cruza-
3 (véase cuadro 3-5). Aparece una proporción fenotípica 1:2: 1 en
miento será blanca?
la progenie de un cruzamiento entre dos progenitores heterocigó-
a. Toda la progenie C. l/4
ticos para una característica que muestra dominancia incompleta
b. 1/2 d. O
(Aa x Aa). La proporción genotípica de estas progenies también
106 CAP(TULO 5
es 1:2: l. Cuando un rasgo presenta dominancia inco.mpleta, las
proporciones genotípicas y fenotípicas de la descendencia son
iguales, porque cada genotipo tiene su propio fenotipo. Lo impor-
tante para recordar acerca de la dominancia es que esta influye en
la manera en que se expresan los genes (el fenotipo), pero no en la
fon11a en la que se heredan.
CODOMINANCIA Otro tipo de interacción entre alelos es la codo-
minancia, en la que el fenotipo del heterocigoto no es intermedio
e ntre los fenotipos de los homicogotos, sino que, más bien, el
heterocigoto expresa en forma simultánea los fenotipos de ambos
homocigotos. Un eje1nplo de codonunancia se observa en los
tipos de sangre MN.
El 1ocus MN codifica uno de los tipos de antígeno de los erj-
trocitos. A diferencia de los antígenos extraños para los grupos
sanguíneos ABO y Rh (que también codifican antígenos eritro-
cíticos), los antígenos MN no propios no provocan una reacción
inmunitaria intensa; por lo tanto, los tipos de sangre MN no se
consideran de rutina en las transfusiones de sangre. En el locus
MN, hay dos alelos: el alelo LM, que codifica el antígeno M, y
e l alelo LN, que codifica el antígeno N. Los homocigotos con
genotipo LMLM expresan el antígeno M en sus eritrocitos y tie-
nen tipo de san gre M. Los bomocigotos con genotipo LNLN
expresan el antígeno N en sus eritrocitos y tienen tipo de sangre
N. Los heterocigotos con genotipo LMLN muestran codominan-
cia y expresan tanto el antígeno M co1no el antígeno N; su tipo
de sangre es MN.
Algunos estudiantes podrían preguntar por qué las flores rosa-
das ilustradas en el panel inferior de la figura 5-1 presentan
dominancia incompleta; es decir, ¿por qué este resultado no es
un ejemplo de codominancia? Las flores mostrarían codominan-
cia solo si el heterocigoto produjera pigmento tanto rojo como
blanco, combinados después para produciT un fenotipo rosado.
Sin embargo, en nuestro ejemplo el heterocigoto solo produce
pigmento rojo. El fenotipo rosado se produce porque la cantidad
de pigmento producida por el heterocigoto es menor que la
producida por el homocigoto A I A 1. Por consiguiente, en este
caso, los alelos muestran claramente do1ninancia incompleta, no
Diferencias entre dominancia completa,
dominancia incompleta y codominancia
Tipo de dominancia Definición
Dominancia completa El fenotipo del heterocigoto es igual al
fenotipo de uno de los homocigotos.
Dominancia incompleta El fenotipo del heterocigoto es interme-
dio (cae dentro del espectro) entre los
fenotipos de los dos homocigotos.
Codominancia El fenotipo del heterocigoto incluye los
fenotipos de ambos homocigóticos.
codominancia. El cuadro 5-1 resume las diferencias entre do-
mjnancia completa, dominancia incompleta y codominancia.
ll.IDITENTE RESOLVER EL PROBLEMA 13
EL NIVEL DE FENOTIPO OBSERVADO PUEDE AFECTAR LA DOMINANCIA
Con frecuencia, los fenotipos pueden observarse en varios nive-
les, con10 anatómico, fisio lógico y molecular. El tipo de do1ninan-
cia mostrado por una característica depende del nivel del fenotipo
examinado. Esta dependencia se observa en la fibrosis quística,
un trastorno genético frecuente en los caucásicos que suele con-
siderarse una enfermedad recesiva. Las personas que tienen fi-
brosis quística producen grandes cantidades de moco espeso y
pegajoso, que tapona las vías respiratorias de los pulmones y obs-
truye ]os conductos que conectan el páncreas con el intestino, lo
que causa infecciones respiratorias frecuentes y problemas
digestivos. Aun con tratamiento médico, los pacientes con fibro-
sis quística presentan problemas médicos crónicos, potencial-
mente fatales.
El gen responsable de la fibrosis quística r eside en el brazo
largo del cromoso.m a 7. Codifica una proteína denominada
regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis
quística (CFTR), que actúa como una compuerta en la membra-
na celular y regula el desplazamiento de iones cloruro hacia el
interior y el exterior de la célula. Las personas con fibrosis
quística tienen una forma disfuncional, mutada, de CFTR, que
hace que el canal permanezca cerrado, lo que induce acumula-
ción de iones cloruro en la cél ula. Esta acumulación determina
la formación de n1oco espeso y provoca los síntomas de la
enfermedad.
La 1nayoría de las personas tienen dos copias del alelo normal
para CFTR y producen solo proteína CFfR funcional. Aquellos
con fibrosis quística tienen dos copias del alelo n1utado para CFfR
y producen solo proteína CFTR defectuosa. Los heterocigotos,
que tienen un alelo normal y uno defectuoso para CFI'R, producen
proteína CFfR normal y defectuosa. Por lo tanto, en el nivel mole-
cular, los alelos para CFI'R nor1nal y defectuosa son codominan-
tes, porque ambos alelos se expresan en el heterocigoto. Sin
embargo, co1no un alelo fu ncional produce suficiente proteína
CFfR funcional para permitir el transporte normal de iones cloru-
ro, el heterocigoto no manifiesta efectos adversos, y el alelo muta-
do para CFTR parece ser recesivo en el nivel fisiológico. Como
ilustra este ejemplo, el tipo de dominancia expresada por un alelo
es una función del aspecto fenotípico del alelo que se observa.
CARACTERÍSTICAS DE LA DOM INANCIA Se deben destacar varias
características importantes de la dominancia. Primero, la domi-
nancia es el resultado de las interacciones entre genes de un
mismo locus; en otras palabras, la dominancia es interacción alé-
lica. Segundo, la dominancia no modifica la manera en que se
heredan los genes; solo influye en la manera en que ellos se ex-
presan como un fenotipo. Por consiguiente, la interacción alélica
que caracteriza a la dominancia es una interacción entre los pro-
ductos de los genes. Por último, la dominancia suele depender del
"ojo con que se mire", lo que significa que la clasificación de
do1ninancia depende del nivel en el que se exa1nina el fenotipo.
Como se observa en la fibrosis quística, un alelo puede 111ostrar
codominancia en un nivel y ser recesivo en otro.

CONCEPTOS
La dominancia implica interacciones entre genes del mismo locus
(genes alélicos) y es un aspecto del fenotipo; la dominancia no incide
en la manera en que se heredan los genes. El tipo de dom inancia
mostrado por una característica suele depender del nivel del fenotipo
examinado.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿En qué se diferencian la dominancia completa, la dom inancia incom-
pleta y la codominancia?
Penetrancia y expresividad
En los cruzamientos genéticos presentados hasta ahora, hemos
considerados solo las interacciones de alelos y he1nos asu1nido
que todo organismo individual que tiene un genotipo particul ar
expresa el fenotipo esperado. Por ejemplo, asumimos que el ge-
notipo Rr siempre produce semillas lisas, y que el genotipo rr
siempre produce selnÍllas rugosas. Sin embargo, en algunos ca-
racteres una presunción de este tipo es incorrecta: el genotipo no
siempre produce el fenotipo esperado, un fenón1eno deno1ninado
penetrancia incompleta.
En la polidactilia humana, el cuadro caracterizado por tener
dedos extra de las manos o de los pies, se observa penetrancia
incompleta (fig. 5-3). Hay varias formas diferentes de polidactilia
humana, pero el rasgo suele ser causado por un alelo dominante.
En ocasiones, las personas tienen el alelo para polidactilia (evi-
denciado por el hecho de que sus rujos heredan la polidactilia),
pero no obstante, tienen una cantidad normal de dedos en las
manos y los pies. En estos casos, el gen para la polidactilia no es
completamente penetrante. Penetrancia se define como el por-
centaje de organismos individuales que tienen un genotipo parti-
cular que expresa el fenotipo esperado. Por ejemplo, si examina-
1nos a 42 personas con un alelo para polidactilia y observamos
que solo 38 de ellas tienen polidactilia, la penetrancia sería de
38/ 42 = 0,90 (90%).
Figura 5-3. la polidactilia humana (dedos
extra) muestra penetrancia incompleta y
expresividad variable. (SPL/Photo Researchers).
Extensiones y modificaciones de los principios básicos 107
Un concepto relacionado es la expresividad, el grado de expre-
sión de un rasgo. Ade1nás de la penetrancia incompleta, la poli-
dactilia muestra expresividad variable. Algunas personas con
polidactilia tienen dedos extra en las manos o en los pies que son
completamente funcionales, lnÍentras que otras tienen solo un
pequeño colgajo de piel extra.
La penetrancia incompleta y la expresividad variable se deben a
los efectos de otros genes y a factores ambientales que pueden n10-
clificar o suprimir por completo el efecto de un gen particular. Por
ejemplo, un gen puede codificar una enzima que produce un deter-
minado fenotipo solo dentro de un rango linutado de temperatura.
A te1nperaturas más altas o más bajas, la enzima no funciona, y el
fenotipo no se expresa; por consiguiente, el alelo que codifica una
enzima de este tipo es penetrante solo dentro de un rango particular
de temperatura (véase también Efectos ambientales sobre el feno-
tipo, p. 127). Numerosas características muestran penetrancia in-
completa y expresividad variable; por lo tanto, la 1nera presencia de
un gen no garantiza su expresión. ►
CONCEPTOS
La penetrancia es el porcentaje de individuos que tienen un genotipo
particular que expresa el fenotipo asociado. La expresividad es el
grado de expresión de un rasgo. La penetrancia incompleta y la expre-
sividad variable se deben a la influencia de otros genes y de facto res
ambientales sobre el fenotipo.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿En qué difiere la dominancia incompleta de la penetrancia incompleta?
a. La dominancia incompleta hace referencia a alelos del mismo locus;
la penetrancia incompleta hace referencia a alelos de diferentes locus.
b. La domi nancia incompleta varía de O a 50%; la penetrancia
incompleta varía de 51 a 99%.
c. En la dominancia incompleta, el heterocigoto es intermedio entre
los homocigotos; en la penetrancia incompleta, los heterocigotos
expresan fenotipos de ambos homocigotos.
d. En la dominancia incompleta, el heterocigoto es intermedio entre
los homocigotos; en la penetrancia incompleta, algunos indivi-
duos no expresan el fenotipo esperado.
Alelos letales
Un alelo letal causa la muerte en un estadio temprano del desa-
1rollo (a menudo, antes del nacimiento) y, por consiguiente, algu-
nos genotipos pueden no aparecer en la progenie. Un ejemplo de
alelo letal, descrito originalmente por Erwin Baur en 1907, se
observa en las plantas conocidas con10 bocas de dragón o coneji-
tos. La cepa aurea de estas plantas tiene hojas amarillas. Cuando
se cruzan dos plantas con hojas amarillas, 2/3 de la progenie tiene
hojas amarillas, y 1/3, hojas verdes. Cuando se cruza verde con
verde, toda la progenie tiene hojas verdes; sin embargo, cuando se
cruza a1narillo con verde, L/2 de la progenie tiene hojas verdes, y
1/ 2, hojas amarillas, lo que confirma que todas las plantas boca de
dragón de hojas amrui11as son heterocigóticas.
Otro ~jemplo de alelo letal es el que determina el color amari-
llo del pelaje en los ratones. Un c1uzamiento entre dos ratones
amarillos heterocigóticos produce una relación genotípica inicial
108 CAP(TULO 5
Generación P
Amarillo
X
Yy
Gametos
.---17
y y
-
Meiosis
'
y y
--
Fecundación!
• ' 1 - ' pelaje gris. Para algunos locus, hay más de dos alelos presentes
Generación F1
Muerto Amarillo No amarillo
¼YY ½Yy
Conclusión: los ratones YY mueren; por lo
tanto, 2/ 3 de la progenie son Yy, amarillos;
, 1/ de la progenie son yy, no amarillos.
3
Figura 5-4. La proporción 2:1 producida por un cruzamiento entre
dos ratones amarillos es la consecuencia de un alelo letal.
de 1/ 4 YY, 1/ 2 Yy y ¼ yy, pero los ratones homocigóticos YY 1nue-
ren en estadios tempranos del desarrollo y no aparecen en la pro-
genie, lo que determina una relación 2: L de Yy (amariJlo) respec-
to de yy (no amarillo) en la descendencia (fig. 5-4). Un alelo letal
recesivo casi sie1npre produce una relación 2; 1; por lo tanto,
observar esta relación en la progenie de un cruzamiento entre
individuos con el mismo fenotipo es un firme indicio de que uno
de los alelos es letal. En este ejemplo, como en el de las hojas
amarillas de las plantas boca de dragón, el alelo letal es recesivo
porque causa la muerte solo de los homocigotos. A diferencia de
su efecto sobre la supervivencia, el efecto del alelo sobre el color
es dominante; tanto en ratones como en plantas boca de dragón,
una sola copia del alelo en el heterocigoto produce un color ama-
rillo. Este ejemplo ilustra lo afirmado antes (p. 106), que el tipo
de donünancia depende del aspecto del fenotipo examinado.
En la naturaleza, muchos alelos letales son recesivos, pero tam-
bién puede haber alelos letales dominantes; en este caso, los
homocigóticos y los heterocigóticos para el alelo mueren. Los
alelos letales verdaderan1ente dominantes no pueden transmitirse
CONCEPTOS
Un alelo letal causa la muerte, con frecuencia en un estadio tempra-
no del desarrollo, de manera que en la progenie de un cruzamiento
falta uno o más genotipos. Los alelos letales modifican la proporción
de la progenie resultant e de un cruzamiento .
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
Un cruzam iento entre dos plantas de maíz verdes da 2/ 3 de plantas
verdes y 1/ 3 de plantas amarillas en la progen ie. ¿Cuál es el genotipo
de la progenie verde?
a. WW c. ww
b. Ww d. w_ (WW y Ww)
a 1nenos que se expresen después del comi enzo de la reproduc-
.,
Amarillo CI On. l!►:!::!:!:::!!!:!:!!=.!::2::!::2:=!==2!:::!::!!!!:::!:::!:=:::!~.!::!!J
Alelos múltiples
La m ayoría de los sistemas genéticos que hemos exa1ninado hasta
ahora consisten en dos alelos. En los guisantes de Mendel, por
ejemplo, un alelo codificaba semillas lisas, y otro, semillas rugo-
sas~ en los gatos, un alelo producía un pelaje negro, y otro, un
dentro de un grupo de organisrnos: el locus tiene alelos múltiples
(los alelos múltiples también pueden denominarse serie alélica).
Si bien puede haber más de dos alelos presen tes dentro del grupo
de organis mos, el genotipo de cada organi smo individual dipl oi-
de está formado solo por dos alelos. La herencia de característi-
¼yy cas codificadas por múltiples alelos no es diferente de la herencia
de características codificadas por dos alelos, excepto que hay
1uayor variedad de genotipos y fenotipos posibles.
PATRONES DE LAS PLUMAS DE PATO Un ejemplo de alelos .m últi-
ples es un locus que determina el patrón de las plumas de los
patos de collar. Un alelo, M, produce el patrón ánade real silves-
tre. Un segundo alelo, NfR., produce un patrón diferente denomi-
nado restringido, y un tercer alelo , md, produce un patrón deno-
minado oscuro. En esta serie alélica, restringido es dominante
sobre ánade real y oscuro, y ánade real es dominante sobre oscu-
ro: MR > M > md. Los seis genotipos posibles con estos tres ale-
los y sus fenotipos resultantes son:
Genotipo Fenotipo
MRMR restringido
MRM restringido
MRmd restringido
MM ánade real
Mmd ánade real
mdmd oscuro
Por lo general, el número de genotipos posibles será [n(n + 1)/2],
donde n es igual al número de alelos diferentes en un locus.
Resol ver cruzamientos con alelos múltiples no es diferente de
reso lver cruzamientos con dos alelos; el principio de Mendel
de la segregación aún es válido, co1no se muestra en un cru-
zamiento entre un pato restringido y un ánade real (fig. 5-5).
EL SISTEMA ABO DE GRUPOS SANGUÍNEOS Otro sistema de alelos
múltiples corresponde al locus para los grupos sanguíneos ABO.
Este locus determina su grupo sanguíneo ABO y, como el locus
MN, codifica antígenos de los e1itrocitos. Los tres alelos comunes
para el locus para los grupos sanguíneos ABO son los siguientes:
/ A, que codifica el antígeno A ; JB, que codifica el antígeno B ; e i,
que codifica la ausencia de antígeno (O). Podemos representar las
relaciones de dominancia entre los alelos ABO de la siguiente
manera: ¡ A > i, ¡B > i, ¡A = JB. Tanto los alelos [A como ¡B son
domjnantes respecto de i y codorninantes entre sí; el fenotipo AB
se debe a la presencia de un alelo [A y de un alelo JB, que da por
resultado la producción de antígenos A y B en los eritrocitos. Una
persona con genotipo ii no produce ningún antígeno y tiene san-
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 109

Generación P gre de grupo O. La figura 5-6a muestra los seis genotipos comu-
Restringido Ánade real nes en este locus y sus fenotipos.
Se producen anticuerpos contra cualquier antígeno extraño
(véase fig. 5-6a). Por ejemplo, una persona de sangre de grupo A
X produce anticuerpos anti-B, porque el antígeno B es extraño. Una
persona con sangre de grupo B produce anticuerpos anti-A, y
Mrnd
alguien con sangre de grupo AB no produce anticuerpos anti-A ni
· Meiosis
anti-B, porque ninguno de estos antígenos le es extraño. Una per-
sona con sangre de grupo O no tiene antígenos A ni B; en conse-
Gametos ~3) cuencia, esa persona produce anticuerpos anti-A y anti-B. La pre-
sencia de anticuerpos contra antígenos ABO extraños implica que
~ ación las transfusiones de sangre exitosas solo son posibles entre perso-
nas con cie1tos grupos sanguíneos compatibles (fig. 5-6b).
Un j uicio por paternidad contra el fa1noso actor de ci ne Charles
Generación F1
Restring ido Ánade real Oscuro Cbaplin ilustra la herencia de alelos del locusABO. En 1941 , Cha-
--"- plin conoció a una joven actriz llamada Joan Barry, con la que
manh1vo un romance. Este terminó en febrero del 1942, pero 20
1ueses más tarde, Ban-y dio a luz a una beba y alegó que Chaplin
era el padre. Después, Barry inició un juicio por manutención de
la criatura. En esta época, la tipificación de sangre recién se esta-
ba generalizando, y los abogados de Chaplin solicitaron que se
Conclusión: los fenotipos de la progenie son
l½restringido, ¼ ánade real y¼ oscuro practicara esta determinación a Barry, a Chaplin y a la niña. Barry
tenía grupo A, su hija tenía grupo B, y Chaplin, grupo O. ¿Podía
Figura 5-5. El principio de Mendel de la segregación se aplica a cru- ser Chaplin el padre de la hija de Barry?
zam ientos con alelos múltiples. En este ejemplo, tres alelos determinan Su respuesta debe ser no. Joan Barry tenía sangre de grupo A,
el tipo de plumaje de los patos de collar: M1- (restringido) > M (ánade real, que puede ser producida por un genotipo /A/A o por genotipo IAi.
Mallard) > md (oscuro).

(b)
Reacciones del receptor de
(a) sangre a la sangre donada
Anticuerpos o
generados A B AB (anticuerpos
Tipo de por el (anticuerpos (anticuerpos (ningún anti-A y
Fenotipo
(grupo de sangre) Genotipo antígeno organismo anti-8) anti-A) anticuerpo) anti-8)
Los eritrocitos que no reaccionan
con el anticuerpo del receptor
~ ~~ ;::::::::::-, permanecen dispersos de manera
A A Anti-8 _J.......,c:r, uniforme. La sangre del donante y la
sangre del receptor son compatibles.

B
• - B Anti-A
-,,::::=;-,
Los eritrocitos que reacciona con el
anticuerpo del receptor se aglutinan.
La sangre del donante y la sangre del
receptor no son compatibles.

AB ¡A¡B AyB Ninguno

..
•
Anti-A
o 11 Ninguno y
anti-8

Los donantes de grupo O Los receptores de grupo A87

pueden donar a cualquier pueden aceptar sangre de
Figura 5-6. Grupos de sangre ABO y transfusio- receptor: son donantes cualquier donante: son
nes de sangre posibles. universales. receptores universales.
110 CAPÍTULO 5
Su beba tenía sangre de grupo B, que podía ser producida por
genotipo ¡B¡B o por genotipo JBi. La beba no podía haber hereda-
do el alelo ¡B de Brury (ella no podía tener un alelo ¡B si tenía san-
gre de grupo A); por lo tanto, la beba debía haber heredado su
alelo i . Barry debe haber tenido genotipo JAi , y la beba, genotipo
JBi . Como la beba heredó el alelo i de la madre, tuvo que haber
heredado el alelo fB del padre. Por tener sangre del grupo O, pro-
ducida solo por el genotipo ii, Chaplin no pudo haber sido el pa-
dre de la hij a de Brury. Si bien los grupos de sangre pueden utili-
zarse para descartar la posibilidad de paternida d (como en este
caso), no pueden probar que una persona sea el progenitor de un
niño, porque muchas personas diferentes tienen el mismo gtupo
de sangre.
En el curso del juicio contra Chaplin para establecer la paterni-
dad, tres patólogos testificaron que era genéticamente imposible
que Chaplin fuera el padre de la niña. No obstante, el jurado de-
terminó que lo era y lo obligó a pagar la manutención de la niña
y las costas legales de Brury. ►
HETEROCIGOTOS COMPUESTOS Diferentes alelos suelen dar origen
al mismo fenotipo. Por ejemplo, la fibrosis quística (véase p. 106)
se debe a defectos de los alelos en el locus CFTR, que codifica
una proteína que controla el desplaza1niento de iones cloruro
hacia el interior y el exterior de la célula. En todo el inundo, se
han descubierto 1nás de 1000 alelos diferentes en el locus CFTR
que pueden causru· fibrosis quística. Como la fibrosis quística es
un trastorno autosómico recesivo, uno normalmente debe heredar
dos alelos CFTR defectuosos para presentar fibrosis quística. En
algunas personas con fibrosis quística, estos dos alelos defectuo-
sos son idénticos, lo que significa que la persona es hon1ocigóti-
ca. Otros con fibrosis quística son heterocigóticos y tienen dos
alelos defectuosos diferentes. Un individuo que tiene dos alelos
diferentes en un locus que determinan un fenotipo recesivo se
denomina heterocigoto compuesto.
CONCEPTOS
Dentro de un grupo de organ ismos individua les, puede haber más de
dos alelos (alelos múltiples), aunque cada organismo diploide tiene
solo dos alelos en ese locus. Un heterocigoto compuesto tiene dos
alelos diferentes que determ inan un fenotipo recesivo.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
¿Cuántos genotipos son posibles en un locus con cinco alelos?
a. 30 c. 15
b. 27 d. 5
5.2 La interacción génica tiene lugar
cuando genes de múltiples locus
determinan un único fenotipo
En Jos cruza1níentos dihíbridos que examü1amos en el capítulo 3,
cada locus ejercía un efecto independiente sobre el fenotipo.
Cuando Mendel cruzó una planta homocigótica para liso y a1na-
rillo homocigótica (RR YY) con una planta homocigótica para
rugoso y verde (rr yy) y después autofecundó la Fl' obtuvo una
progenie F 2 con las sig uientes proporciones:
9116 R_ Y_ liso, amarillo
3/i 6 R_ yy liso, verde
3
/16 rr Y_ rugoso, amarillo
1
/1 5 rr yy rugoso, verde
En este ejemplo, los genes mostraron dos clases de independen-
cia. Primero, los genes de cada locus son independientes en su
segregación durante la meiosis, lo que produce la proporción
9:3 :3: 1 de fenotipos en la progenie, de acuerdo con el principio
de Mendel de la segregación independiente. Segundo, los genes
son independientes en su expresión fenotípica: los alelos R y r
influyen solo en la forma de la semilla y no tienen ninguna
influencia sobre su color; los alelos Y e i influyen solo en el color
de la sen1illa y no tienen ninguna influencia sobre su forma.
Con frecuencia, los genes muestran segregación independiente,
pero no actúan de manera independi ente en su expresión fenotípi-
ca ; en cambio, los efectos de los genes de un locus dependen de
la presencia de genes en otros locus. Este tipo de interacción entre
los efectos de los genes de diferentes locus (genes que no son ale-
los) se denomina interacción génica. En caso de interacción
génica, los productos de genes de diferentes locus se combinan
para producir nuevos fenotipos que no son predecibles a partir
únicam.e nte de los efectos de un solo locus. En nuestra considera-
ción de la interacción génica, nos centraremos fundamentalmen-
te en la interacción entre los efectos de los genes de dos locus,
aunque son frecuentes las interacciones entre genes de tres, cua-
tro o más locus.
CONCEPTOS
En la interacción génica, genes de diferentes locus contribuyen a la
determ inación de una característica fenotípica única.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
¿En qué difiere la interacción gén ica de la dominancia entre alelos?
Interacción génica que produce
nuevos fenotipos
Examinemos primero la interacción génica en la que interactúan
genes de dos locus para producir una característica única. El color
del fruto del pimiento Capsicum annuum se determi na de esta
manera. Ciertos tipos de pimiento producen frutos de uno de cua-
tro colores: rojo, durazno, anaranjado (a veces, llamado amarillo)
y crema (o blanco). Si se cruza una planta homocigótica de
pinuentos rojos con una homocigótica de pinuentos crema, todas
las plantas de la F 1 tendrán pimientos rojos (fig. 5-7a). Cuando se
cruzan entre sí plantas de la Fl' la F 2 muestra una relación de 9
rojos:3 color durazno:3 anaranj ados: 1 crema (fig. 5-7b). E sta pro-
porción dihíbrida (véase cap. 3) es producida por un cruzamien-
to entre dos plantas heterocigóticas pru·a dos locus (Y +y c+c x
f +y e+e). En este ejemplo, el locus Y y el locus C interactúan para
producir un único fenotipo, el color del pimiento:
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 111

(a) prueba entre una planta F 1 del cruzamiento de la figura 5-7 (Y+y
Generación P c+c) y una planta con pimientos crema (yy ce). Como se reseñó
Rojo Color crema en el capítulo 3 para locus independientes, podemos resolver este
X cruzamiento descomponiéndolo en dos cruzamientos simples. En
el primer locus, se cruza el heterocigoto y+y con el homocigoto
yy ; este cruzamiento produce progenie ½ y+- y 1/2 yy. De modo
similar, en el segundo locus, se cruza el genotipo heterocigótico
yy cc
c+c con el genotipo homocigótico ce, lo que produce progenie½
Cruzamiento
c+c y 1/2 ce. De acuerdo con el principio de Mendel de la segre-
gación independiente, estas proporciones de un solo locus pueden
combinarse aplicando la regla de la multiplicación: la probabili-
Generación F1
Rojo
dad de obtener el genotipo y+y c+c es la probabilidad de y+-y ( 1/2)
1nultiplicada por la probabilidad de c+c (½), o ½ x 1/2 = ¼. La
probabilidad de cada genotipo en la progenie resultante del cru-
zamiento de prueba es la siguiente:

y+y c +c Genotipo
de la Probabilidad Probabilidad
progenie en cada locos global Fenotipo
(b)
r+-y C-c) 1h, X 1/2
- l/4
. . .
pun.1entos roJos
Generación F1
y+y ce 1/z X 1/2
- l/4 pimientos color
durazno
yy c +c pimientos anaranjados
X yy ce pimientos crema

Cruzamiento Al resolver problemas con interacción génica, es de especial

importancia determinar las probabilidades de los genotipos de
cada locus y multiplicar las probabilidades de los genotipos, no
(c;eneración F2
de los fenotipos, porque los fenotipos no pueden deter1ninarse sin
Rojo Color durazno Anaranjado Color crema
considerar los efectos de los genotipos de todos los locus contri-
buyentes. ►

Interacción génica con epistasia

....__--1 Conclusión: 9 rojos: 3 color durazno:
3 anaranjados: 1 color crema
Figura 5-7. La interacción entre genes de dos locus det ermina una
sola característica, el color del fruto, en el pimiento Capsicum
annuum.
Genotipo Fenotipo
y+_ e+_ COJO
y+_cc
durazno
yy e+_ anaranjado
yy ce crema
El color de los piinientos de Capsicum annumm depende de las
can tidades relativas de carotenoides rojos y ainari ll os, compues-
tos que son sintetizados por una vía bioquímica compleja. El
locus Y codifica una enzima (el primer paso de la vía), y el locus
C codifica una enzima diferente (el último paso de la vía).
Cuando distintos locus influyen en distintos pasos de una vía bio-
química común, suele surgir interacción génica porque el produc-
to de una enzima afecta al sustrato de otra enzima.
Para ilustrar cómo pueden aplicarse las reglas de Mendel de la
herencia para comprender la herencia de características determi-
nadas por interacción génica, consideremos un cruzamiento de
En ocasiones, el efecto de la interacción génica es que un gen
enmascara (oculta) el efecto de otro gen de un locus diferente, un
fenómeno conocido con10 epistasia. En los ejemplos de interac-
ción génica que hemos exami nado, genes de diferentes locus inte-
ractúan para determinar un fenotipo único. E n esos ejemplos, un
gen no enmascaró el efecto de un gen de otro locus, lo que impli-
ca que no hubo epistasia. La epistasia es similar a la dominancia,
excepto que esta última implica el enmascaramiento de genes del
mismo locus (genes alélicos). En la epistasia, el gen que efectúa
el enn1ascaramiento se deno1nina gen epistásico; el gen cuyo
efecto es enmascarado es el gen bipostásico. Los genes epistási-
cos pueden ser recesivos o dominantes en sus efectos.
EPISTASIA RECESIVA Se observa epistasia recesiva en los genes que
determinan el color del pelaje de los labradores perdigueros.
Estos perros pueden ser negros, rnaiTones (denominados a 1nenu-
do chocolate) o amarillos; los diferentes colores del pelaje son
determinados por la interacción entre genes de dos locus (si bien
una se1ie de otros locus también ayudan a determinar el color del
pelaje; véanse pp. 117-119). Un locus determina el tipo de pig-
mento producido por las células cutáneas: un alelo dominante B
codifica pigmento negro, mientras que un alelo recesivo b codifi-
ca pigmento marrón. Los alelos de un segundo locus influyen en
el depósito del pigmento en la vaina del pelo; el alelo dominante
E permite que se deposite pigmento oscuro (negro o marrón), en
112 CAPÍTULO 5

tanto que el alelo recesivo e impide el depósito de pigmento oscu- Observe que los pe1Tos amarillos pueden tener alelos para pig-
ro, lo que determina que el pelo sea amarillo. Por lo tanto, la pre- mento negro o man·ón , pero estos alelos no se expresan en el
sencia del genotipo ee en el segundo locus enmascar a la expresión color de su pelaje.
de los alelos negro y marrón del p1imer locus. Los genotipos que En este ejemplo de interacción génica, el alelo e es epistásico res-
determinan el color del pelaje y sus fenotipos son los siguientes: pecto de B y b, porque e enmascara la expresión de los alelos para
pign1entos negro y marrón, y los alelos B y b son bipostásicos res-
Genotipo Fenotipo pecto de e. En este caso, e es un alelo epistásico recesivo, dado que
B - E_ negro debe haber dos copias de e para enmascarar la expresión de los pig-
mentos negro y marrón. !l lNTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 29
bbE_ marrón
Otro ejemplo de un gen epistásico recesivo es el gen que deter-
B- ee amarillo mina el fenotipo Bombay; este gen enmascara la expresión de
bb ee amarillo alelos del locus ABO. Como mencionamos antes en este capítu-
lo, los alelos del locus ABO codifican antígenos de los eritrocitos;
Sí cruzamos un labrador negro homocigótico para los alelos los antígenos cons isten en cadenas cortas de hidratos de carbono
dominantes (BB EE) con un labrador amarillo homocigótico para incluidas en las n1embranas de los eritrocitos. La diferencia entre
los alelos recesivos (bb ee) y después entrecruzamos la F¡, obte- los antígenos A y B es una función de diferencias químicas en el
nen1os que la proporción de la progenie F2 es 9:3:4: azúcar terminal de la cadena. En realidad, los alelos [ A e ¡B codi-
fican distintas enzimas, que agregan azúcares designados A o B a
p BBEE X bb ee los extremos de las cadenas hidrocarbonadas (fig. 5-8). El sustra-
negro amarillo to com.ún sobre el que actúan estas enzimas es una molécula
denominada H . La enzima codificada por el alelo i aparentemen-
te no agrega ningún azúcar a H o no especifica u na enzima fun-
BbEe cional.
Negro
t Entrecruzamiento
En la mayoría de las personas, un alelo dominante (H) en el
locus H codifica una enziJna que produce H, pero las personas
con el fenotipo Bombay son ho1nocigóticas para una mutación
9/ 16 B_ E_ negro recesiva (h) que codifica una enzima defectuosa. La enzima
3 defectuosa es incapaz de enmascarar a H y, como no se produce
/16 bb E_ marrón
3 H , no se sintetizan los antígenos ABO. Por consiguiente, la
/ 16 B_ ee amarillo } amarillo
1
4116 expresión de los alelos del locus ABO depende del genotipo del
/ 16 bb ee amarillo locus H .

1
filos genotipos del l • ... que determina
locus ABO determinan el grupo de
el tipo de azúcar
terminal agregado... J sangre.

El alelo dominante H
codifica una enzima que
7 fjse requiere compuesto 1 "
Locus
ABO
¡A Antígeno A
1 H para la adición de un
j
,-
convierte un compuesto azúcar terminal.
intermedio en H.
Azúcar
termina l

Compuesto H eno B /
¡B

H_
Intermedio
O (ausencia de
¡¡ antígeno A, B)

hh
9 La sangre del grupo O puede
r deberse a la ausencia de un azúcar
Lterminal en el compuesto H...
b O (ausencia de
antí eno A, B)

Figura 5-8. La expresión de los antígenos ABO .T. o a la ausencia del

depende de los alelos del locus H. El locus H
codifica un precursor de los antígenos denomina-
dos compuesto H. Los alelos del locus H determi-
nan qué tipos de azúcares t erminales se agregan
al compuesto H.
Las personas con fenotipo Bombay
son homocigóticas para una mutación
recesiva (h) que no convierte el
compuesto H.
---
Conclusión: los genotipos tanto del locus H
compuesto intermedio en H.
como del locus ABO determinan el grupo de
sanqre ABO.
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 113

H Fenotipo ¿Cómo puede la interacción génica explicar estos resultados?

Genotipo presente ABO E n la F 2 , 12/16 o 3/4 de las plantas producen zapallo blanco y
3/16 + 1/16 = 4/i6 = 1/4 de las plantas producen zapallo de color.
H - ¡A¡A, H- JAi Sí A Este resultado corresponde a la proporción 3: 1 familiar genera-
da por un cruzamiento entre dos heterocigotos, lo que sugiere
H ¡B¡B H 18 i Sí B
- ' - que un alelo dontinante de un locus inhibe la producción de
H_[A¡B Sí AB pign1ento, con la consig uiente progenie blanca. Si e1nplea1nos
el símbolo W para representar al alelo dominante que inhibe la
H_ii Sí o producción de pigmento, el genotipo W_ inhibe la producción
de pigmento y produce zapallo blanco, mientras que ww per-
hh ¡A¡ A' hh JAi ' hh ¡B¡B '
'
No o mite la producción de pigmento y da origen a zapallo colo-
hh Í 8i, hh JA¡B y hh ii reado.
Entre Jas plantas ww de F 2 con fruto pigmentado, observamos
que 3/ l6 dan frutos amarillos, y 1/16, frutos verdes (una propor-
En este ejemplo, los alelos del locus ABO son hipostásicos respec- ción 3: 1). En este resultado, un segundo locus determina el tipo
to del alelo recesivo h. de pigmento producido en el zapallo, y amarillo (Y_) es domi-
El fenotipo Bombay nos ofrece una buena oportunidad de con- nante sobre verde (ww). Este locus se expresa solo en plantas
siderar cómo a n1enudo surge epistasia cuando los genes inciden 11\lw, que carecen del alelo dominante inhibitorio W. Podemos
en una serie de pasos de una vía bioquímica. Los antígenos ABO asignar el genotipo ww Y_ a las plantas que producen zapallo
son sintetizados en una vía bioquímica de múltiples pasos (véase amarillo y el genotipo ww yy a las plantas que producen zapa-
fig. 5-8) que depende de las enzimas que sintetizan H y de otras llo verde. Los genotipos y sus fenotipos asociados son los
enzimas que convierten a H en antígeno A o B. Observe que el siguientes:
grupo de sangre Opuede surgir de una de dos maneras: 1) por falta
de agregado de un azúcar terminal al compuesto H (genotipo H_ii) W_Y_ zapallo blanco
o 2) por falta de producción del compuesto H (genotipo hh_).
Muchos casos de epistasia aparecen de esta manera. Un gen (por W_yy zapallo blanco
ejemplo, h) que ejerce un efecto sobre un paso temprano de una
vía bioquímica será epistásico respecto de genes (como JA e JB) ~vw Y zapallo amarillo
que influyen en pasos ulteriores, porque los efectos de los genes \,VW )1)1 zapallo verde
de un paso más tardío dependen del producto de la reacción más
temprana.
El alelo W es epistásico respecto de Y e y: enmascara la expresión
EPISTASIA DOMINANTE En la epistasia recesiva, la presencia de de estos genes productores de pigmento. El alelo W es un alelo
dos alelos recesivos (el genotipo homólogo) inhibe la expresión epistásico dominante porque, a diferencia de e en el color del
de un alelo de un locus diferente. Sin embargo, en la epistasia pelaje del labrador perdiguero y de h en el fenotipo Bombay, una
dominante, solo se requiere una única copia de un alelo para inhi- sola copia del alelo es suficiente para inhibir la síntesis de pig-
bir la expresión del alelo de un locus diferente. mento.
Se observa epistasia dominante en la interacción de dos locus Lo más probable es que el pigmento amarillo del zapallo se sin-
que determinan el color del fruto del zapallo de verano, que suele tetice mediante una vía bioquímica de dos pasos (fig. 5-9). La
tener uno de tres colores: amarillo, blanco o verde. Cuando se enzima I convierte un compuesto incoloro (blanco) (designado A
cruza una planta hon1ocigótica que produce zapallo blanco con en la fig. 5-9) en el compuesto verde B, que después es converti-
una planta homocigótica que produce zapallo verde y después se do en el compuesto C por la enzima II. El compuesto Ces el pig-
entrecruzan entre sí las plantas de la Fl' se obtienen los siguien- mento an1arillo del fruto. Las plantas con el genotipo ww produ-
tes resultados: cen enzima I y pueden ser verdes o amarillos, lo que depende de
la presencia de la enzima II. Cuando está presente el alelo Y en un
segundo locus, se produce enzima II, que convierte el compuesto
p B en compuesto C y genera un fruto amarillo. Cuando hay dos
Plantas con Plantas con
zapallo blanco X zapallo verde copias del alelo y, que no codifican una forma funcional de la
enzima II, el zapallo perrnanece verde. La presencia de W en el

¡
Plantas con
primer locus inhibe la conversión de pigmento A en pigmento B;
las plantas con genotipo W_ no sintetizan con1puesto B, y su fruto
permanece blanco, independientemente de los alelos presentes en
zapallo blanco el segundo locus.

EPISTASIA RECESIVA DOBLE Por último, consideremos la epistasia

Entrecruzan1iento recesiva doble, en la que dos alelos recesivos de cualquiera de dos
12/ 6 locus son capaces de suprimir un fenotipo. El albinismo en los
1 plantas con zapallo blanco
3/16
caracoles ilustra este tipo de epistasia.
plantas con zapallo amarillo El albinismo es la ausencia de pigmento y es un rasgo genético
1
/ 16 plantas con zapallo verde frecuente en numerosas plantas y anin1ales. El pigmento casi
114 CAPITULO 5

Las plantas con genotipo ww producen La1s plantas con genotipo Y_ producen
enzima 1, que convierte el compuesto A enzima 11, que convierte el compuesto
(incoloro) en c:ompuesto B (verde). J
B en compuesto C (amaril lo).
~
Plantas ww Plantas Y_
l
Compuesto A
¡ ¡
- - Enzima 1 ----1►► Compuesto B --Enzi ma 11 ----1►► Com p uesto C
Conclusión: los genotipos W_
Y_ y W_ w no producen
enzima 1, ww w
produce
enzima 1, pero no enzima 11;
ww Y_ produce tanto enzima 1
k 1
Plantas W_
k1
Plantas yy
como enzima 11.

Figura 5-9. El pigmento ama-

rillo del zapallo de verano se
El alelo dominante W inhibe , Las plantas con genotipo yy no codifican
sintetiza a través de una vía
la conversión de A a B. una forma funcional de enzima 11. de dos pasos.

siempre se sintetiza a través de una vía bioquími ca de múltiples p aa BB X AA bb

pasos; por consiguiente, el albinistno puede implicar interacción albino albino
génica. Robert T. Dillon y Amy R . Wethington observaron que
el albinismo en el caracol de agua dulce Physa heterostropha
puede deberse a la presencia de dos alelos recesivos en cual- Aa Bb
quiera de dos Jocus diferentes. Se recogieron caracoles insemi-
nados de una población natLu-al y se los colocó en tazas de agua,
donde pusieron huevos. Algunos de los huevos dieron 01igen a
caracoles albinos. Cuando se cruzaron dos caracoles albinos,
¡
pigmentado
Entrecruzamiento

F2 9/ 6 A_ B_ pigmentado
1
todos los miembros de la F 1 fueron pigmentados. Cuando se
3/ 16
entrecruzó la generación Fl' la generación F2 consistió en 9/16 aa B_ albino
caracoles pigmentados y 7/ 16 caracoles albinos. ¿Cómo surgió 3/ 16 A_ bb albino 7/ 16 albino
esta proporción 9:7? 1
La proporción 9:7 observada en los caracoles de la generación /i6 aa bb albino
F 2 puede interpretarse como una modificación de la proporción
9:3:3:1 obtenida cuando se cn1zan dos individuos heterocigóticos Es probable que la proporción 9:7 de estos caracoles sea produci-
para dos locus. La proporción 9:7 surge cuando alelos dominan- da por una vía de síntesis de pigmento de dos pasos (fig. 5-10). El
tes en a1nbos locus (A_ B_.J producen caracoles pigmentados; pigmento (co1npuesto C) se sintetiza solo después de que el com-
cualquier otro genotipo produce caracoles albinos: puesto A ha sido convertido en compuesto B por la enzima I, y

Se requiere un alelo dominante del locus Se requiere un alelo dominante del locus B para
A para producir enzima 1, que convierte producir enzima 11, que convierte el compuesto
el compuesto A en compuesto B. B en compuesto C (pigmento).
-V-
Caracoles A_
-r
Caracoles B_ Los caracoles pigmentados

Compuesto A - - Enzima 1
! ---t.,
►
¡
Compuesto B - - Enzima 11 ----1.,► Compuesto C
-=--J
deben producir enzimas I y 11,
lo que requiere un genotipo A_
B_.

k 1
Caracoles aa
k
1
Caracoles bb
_ _,A..___ _A_
El albinismo se debe a la ausencia de ' ... o por la ausencia de la enzima 11 (A_ bb), por Figura 5-1 O. En los caracoles, el
la enzima 1 (aa B.J, de manera que lo que nunca se produce el compuesto C, o pigmento se sintetiza en una vía
nunca se produce el compuesto B... por la ausencia de ambas enzimas (aa bb). de los pasos.
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 115

después de que el compuesto B ha sido convertido en compuesto INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS

C por la enzima II. Se requiere por lo menos un alelo dominante
A en el primer locus para sintetizar la enzima I ; de modo similar,
se requiere por lo n1enos un alelo dominante B en el segundo
locus para sintetizar la enzin1a II. El albinismo aparece en ausen-
cia del pig1nento C, lo que puede suceder en una de tres maneras.
Prilnero, dos alelos recesivos en el primer locus (genotipo aa B_)
pueden impedir la síntesis de enzima I, por lo que nunca se pro-
duce el compuesto B. Segundo, dos alelos recesivos en el segun-
do locus (genotipo A_ bb) pueden in1pedir la síntesis de enzima
II; en este caso, el compuesto B nunca es convertido en compues-
to C. Tercero, puede haber dos alelos recesivos en ambos locus
(aa bb), lo que causa ausencia tanto de la enzima I como de la
enzima IJ. En este ejemplo de interacción génica, a es epistásico
respecto de B y b es epistásico respecto de A; ambos son alelos
epistásicos recesivos porque se requiere la presencia de dos
copias de alelo a o de alelo b para suprimir la producción de pig-
1nento. Este ejemplo difiere de la supresión del color del pelaje de
los labradores perdigueros en que alelos recesivos de uno de dos
locus son capaces de suprimir la síntesis de pigmento en los cara-
coles, mientras que alelos recesivos de un solo locus suprimen la
expresión de pigmento en los labradores.
CONCEPTOS
Epistasia es el enmascaramiento de la expresión de un gen por otro
gen de un locus diferente. El gen epistásico es el que enmascara; el
gen hipostásico es el enmascarado. Los alelos epistásicos pueden ser
dominantes o recesivos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
Se cruza una serie de gatos totalmente blancos que producen los
siguientes tipos de progenie: 12/ 16 totalmente blancos, 3/ 16 negros y
1/ 6 grises. ¿Cuál es el genotipo de la progenie negra?
1
a. Aa c. A_ B_
b. Aa Bb d. A_ b
Interpretación de las proporciones producidas
por interacción génica
El cuadro 5-2 muestra una serie de proporciones modificadas resultan-
tes de la interacción génica. Cada uno de estos ejemplos representa
una modificación de la proporción dihíbrida básica 9:3:3: 1. Al interpre-
tar la base genética de las proporciones modificadas, es preciso recor-
dar varios puntos. Primero, la herencia de los genes que producen estas
características no difiere de la herencia de genes que codifican caracte-
res genéticos simples. Aún son aplicables los principios de Mendel de la
segregación y la segregación independiente; cada organismo t iene dos
alelos en cada locus, que se separan durante la meiosis, y los genes de
diferentes locus se segregan de manera independiente. La única dife-
rencia consiste en cómo interactúan los productos de los genotipos
para producir el fenotipo. Por lo tanto, no podemos considerar por
separado la expresión de genes de cada locus, sino que debemos con-
siderar cómo interactúan los genes de diferentes locus.
Un segundo punto es que, en los ejemplos que hemos analizado,
las proporciones fenotípicas siempre fueron en dieciseisavos porque,
en todos los cruzamientos, se segregaron pares de alelos de dos locus
de segregación independiente. La probabi lidad de heredar uno de los
dos alelos en un locus es de 1/2. Como hay dos locus, cada uno con
dos alelos, la probabilidad de heredar cualquier combinación particu-
lar de genes es ( 1/2) 4 = 1/16- En un cruzamiento trihíbrido, las propor-
ciones de la progenie serían en sesenta y cuatroavos, porque ( 1/2)6 =
1/54. Por lo general, las proporciones de la progenie deben ser en
fracciones ( 1/2,)2n, donde n equ ivale al número de locus con dos ale-
los que se segregan en el cruzamiento .
Los cruzamientos rara vez producen una progen ie de exactamente
16; por lo tanto, las modificaciones de una proporción dihfbrida no
siempre son evidentes. Las proporciones dihíbridas modificadas son
más fáci les de observar si la cantidad de individuos de cada fenotipo
se expresa en dieciseisavos:
X número de la progenie con un fenotipo
-=---------------
16 número total de la progenie
donde .><116 equivale a la proporción de progenie con un fenotipo par-
ticular. Si resolvemos x (la proporción del fenotipo particular en dieci-
seisavos), obtenemos:

Cuadro 5-2 Proporciones dihíbridas modificadas debido a interacción génica

Genotipo

Proporción* A _B_ A bb
ªª 8 - aa bb Tipo de interacción Ejemplo analizado en el capítulo

9:3:3.1 9 3 3 1 Ninguna Forma y color de las semil las de los guisantes

9:3:4 9 3 4 Epistasia recesiva Color del manto de los labradores perdigueros

12 :3: 1 12 3 1 Epistasia dom inante Color del zapallo

9:7 9 7 Epistasia recesiva doble Albinismo en los caracoles

9:6:1 9 6 1 Interacción doble

15: 1 15 1 Epistasia dominante doble

13:3 13 3 Epistasia dom inante y recesiva

*Cada proporción es producida por un cruzamiento dihíbrido (Aa Bb x Aa Bb). Las barras sombreadas representan combinaciones de genotipos que dan e l mismo fenotipo.
116 CAP(TULO 5

número de la progenie con un fenotipo x 16 De acuerdo con esta h.ipótesis, esperaríamos 156 descendientes
X=--- - - - - - - - - - - - - - violetas y 52 amarillos:
número total de la progenie

Por ejemplo, suponga que cruzamos dos homocigotos, entrecruza- Número Número
mos la generación F1 y obtenemos 63 individuos rojos, 21 marrones Fenotipo Genotipo observado esperado
y 28 blancos en la generación F2• Aplicando la fórmula anterior, hal la- violeta A- 119 3/4 X 208 = 156
mos que la proporción fenotípica en la F2 es rojo = (63 x 16)/112 = 9; 1/4 X
amarillo 89 208 = 52
marrón = (2 1 x 16)/112 = 3; y blanco= (28 x 16)/112 = 4. La propor- ªª
ción fenotípica es 9:3:4.
Total 208
Un último punto para considerar es cómo asignar genotipos a los
fenotipos de las proporciones modificadas resultantes de interacción
génica. No intente memorizar los genotipos asociados con todas las Observamos que los números esperados no se aj ustan con preci-
proporciones modificadas del cuadro 5-2. Por el contrarío, practique sión a los observados. Si realizamos una prueba de Ji cuadrado
relacionando proporciones modificadas con proporciones conocidas, (véase cap. 3), obtendríamos un valor de Ji cuadrado calcul ado de
como la proporción dihíbdrida 9:3:3:1. Suponga que obtenemos una 35,08, que tiene una probabilidad mucho n1enor de 0,05, lo que
progenie 15/1 6 verde y 1h 6 blanca en un cruzamiento entre dos plantas. indica que es sumamente improbable que, cu ando esperamos una
Si comparamos esta proporción 15: 1 con la proporción di híbrida con- proporción 3:1, obtengamos una progenie de 119 granos violetas
vencional 9:3:3:1, observamos que 9/i6 + 3/,5 + 3/,5 es igual a 15/,5. y de 89 granos amarillos. Por lo tanto, podemos rechazar la hipó-
Todos los genotipos asociados con estas proporciones del cruzamien- tesis de que estos resultados se produjeron por un cruzanuento
to dihíbrido (A_ B_, A_ bb y aa B_J deben dar el mismo fenotipo, la
monohíbrido.
progenie verde. El genotipo aa bb representa 1/ 16 de la progenie de un
Otra hipótesis posible es que la progen.ie F2 observada tenga
cruzamiento dihíbrido, la progenie blanca de este cruzam iento.
una proporción de 1:1. Sin embargo, hemos visto en el capítulo 3
Al asignar genotipos a los fenotipos de proporciones modificadas, los
estudiantes a veces se confunden acerca de qué letras asignar a cuál
que una proporción de 1: 1 es producida por un cruzamiento entre
fenotipo. Suponga que obtenemos la siguiente proporción fenotípica:
un heterocigoto y un homocigoto (Aa x aa) y, a partir de la infor-
91, negro: 3/ 4 mación dada, el cruzamiento no fue entre un heterocigoto y un
6 16 marrón: /15 blanco. ¿Qué genotipo asignamos a la pro-
genie, A_ bb o aa B_? Cualquiera de las respuestas es correcta porque homocigoto, porque ambas cepas parentales originales eran ho-
las letras son solo símbolos arbitrarios para la información genética. Lo mocigóticas. Más aún, una prueba de Ji cuad.rado que comparó
importante que se debe advertir sobre esta proporción es que el feno- los nún1eros observados con una proporción 1: 1 esperada dio un
tipo marrón aparece cuando hay dos alelos recesivos en un locus. valor calculado de Ji cuad.rado de 4,32, que tiene una probabili-
dad inferior al 0,05.
A continuación, deberíamos investigar si los resultados pueden
explicarse 1nediante un cruzamiento dihfbrido (Aa Bb x Aa Bb).
Un cruzamiento dihfbrido determ.ina proporciones fenotípicas en
dieciseisavos. Podemos aplicar la fórmula dada antes en este capí-
tulo para determinar el número de dieciseisavos para cada fenoti-
Se cruza una cepa homocigótica de n1aíz an1a.rillo con una cepa po:
homocigótica de maíz violeta. Se entrecruza la generación F 1 y
se produce una mazorca de maíz con 119 granos violetas y 89 número de progen.ie con un fenotipo x 16
granos amarillos (la progenie). ¿Cuál es el genotipo de los gra- x=
nos amarillos? número total de la progenie

Estrategia de solución 119 X 16

x(violeta) = ---- = 9,15
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? 208
E l genotipo de los granos amarillos.
89 X 16
¿Qué información se proporciona para resolver el problema? x(amarillo) = = 6,85
208
■ Se cruza una planta homocigótica de maíz amarillo con una
planta homocigótica de 1naíz violeta. Así, violeta y an1arillo aparecen en una proporción aproximada
■ El número de progenie violeta y amarilla producido p or el de 9:7. Poden1os corroborar esta hipótesis con la prueba de c2:
cruzamiento.
Número Número
Pasos de la solución Fenotipo Genotipo observado esperado

En primer térnúno, debemos considerar si el cruzamiento entre

violeta ? 119 9/i6 X = 117
208
/ 16 X 208 =91
amarillo ? 89 7
cepas amarillas y violetas puede ser un cruzamiento monohfbri-
do para un rasgo dom.inante simple, lo que producüía una pro-
porción de 3:1 en ]a generación F2 (Aa x Aa ➔ 3/4 A_ y¼ aa). Total 208

(observado - esperado) 2
2
X =l-------
esperado
(119 - 117)2 (89 - 91)2
+
117 91
= 0,034 + 0,44 = 0,078
Grados de libertad = n - 1 = 2 - 1 = 1
P > 0,05
La probabilidad asociada con el valor de Ji cuadrado es 1nayor de
0,05, lo que indica que hay un buen ajuste entre los resultados
observados y una proporción 9:7.
Ahora, debemos determinar cómo puede producir un cruza-
1niento dihfbrido una proporción 9:7 y qué genotipos con·espon-
den a los dos fenotipos. Un cruzamiento di.híbrido sin epistasia
produce una proporción 9:3:3: 1:
Aa Bb xAa Bb
J,
A_B_ 9/16
A_ bb 3/16
aa B_ 3/16
aa bb 1116
Como 9/ 16 de la progenie del cruzamiento del maíz corresponde a
granos violetas, el violeta debe ser producido por genotipos A_
B_; en otras palabras, los granos que tienen por lo menos un alelo
dominante en el prin1er locus y por lo menos un alelo donúnante
en el segundo locus son de color violeta. Las proporciones de
todos los demás genotipos (A_ bb, aa B_ y aa bb) suman 7/16, que
es la proporción de la progenie del cruzamiento del maíz con gra-
nos amarillos, y por lo tanto, cada grano que no tenga un alelo
dominante en el primer locus y en el segundo locus será amruillo.
► Ahora pruebe su comprensión de la epistasia resolviendo el Problema
26 al final del capítulo.
Complementación: determinación
de si las mutaciones se encuentran
en el mismo locus o en diferentes locus
¿Cómo sabemos si las distintas mutaciones que afectan una ca-
racterística se p roducen en el mismo locus (son alélicas) o en
locus diferentes? En las 1noscas de la fruta, por ejemplo, blanco
es una mutación recesiva ligada al cromoso1na X que produce
ojos blancos en lugar de los ojos rojos ha!Jados en las moscas de
la fruta de tipo silvestre; damasco es una mutación recesiva liga-
da al cromosoma X que produce ojos de color anaranjado claro.
¿Las mutaciones blanco y damasco ocu1Ten en el 1nismo locus o
en locus diferentes? Pode111os recurrir a una prueba de comple-
mentación para responder esta pregunta.
Para realizru· una prueba de complementación sobre 1nutacio-
nes recesivas, se cruzan progenitores que son homocigóticos para
diferentes mutaciones, lo que genera descendencia heterocigóti-
ca. Si las mutaciones son alélicas (se producen en el mismo
Extensiones y modificaciones de los principios básicos 117
locus), entonces la descendencia heterocigótica solo tendrá alelos
mutantes (a b) y mostrará un fenotipo mutante:
X
Fenotipo de
tipo silvestre
Por el conn·ru·io, si las mutaciones ocurren en locus diferentes,
cada uno de los progeni tores homocigóticos tiene genes de tipo
silvestre en e] otro locus (aa b+b+ y a+a+ bb), de manera que la
descendencia heterocigótica hereda un alelo mutante y un alelo
de tipo silvestre en cada locus. En este caso, la presencia de un
alelo de tipo silvestre con1plementa la mutación en cada locus, y
la descendencia heterocigótica tendrá el fenotipo silvestre:
X
Fenotipo
mutante
Se ha producido complementación sí un individuo que tiene
dos mutaciones recesívas tiene un fenotipo de tipo silvestre, lo
que indica que las mutaciones son genes no alélicos. Hay falta de
complementación cuando dos mutaciones recesivas ocwTen en eJ
mismo locus, lo que produce un fenotipo mutante.
Cuando se aplica la prueba de complementación a las m utacio-
nes blanco y damasco, toda la descendencia heterocigótica tiene
ojos de color clru·o, lo que demuestra que ojos blanco y ojos color
damasco son producidos por mutaciones que ocurren en el nlismo
locus y son alélicas.
CONCEPTOS
Se utiliza una prueba de complementación para determinar si dos muta-
ciones ocurren en el mismo locus (son alélicas) o en locus diferentes.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
En los perros bulldog y chihuahua, el pelaje atigrado es un rasgo rece-
sivo. ¿ Qué tipos de cruzamientos llevaría a cabo para determinar si los
genes atigrado de los bulldogs y los chihuahuas se encuentran en el
mismo locus?
La genética compleja del color del pelaje
en los perros
La genética del color del pelaje en los perros es un ejemplo exce-
lente de cómo pueden participar interacciones complejas entre
genes en la determinación del fenotipo. Los perros domésticos
muestran una cantidad sorprendente de formas, tamaños y colo-
118 CAP(TULO 5
res. Durante miles de años, los seres humanos cruzaron perros
para obtener rasgos particulares y generaron los diversos tipos
observados en la actualidad. Cada raza de pen·os lleva una selec-
ción de genes de1ivados de un conjunto ancestral de genes cani-
nos; estos alelos definen las características de una raza particular.
El geno111a del perro doméstico se secuenció por completo en
2004, lo que facilitó 1nucho el estudio de la genética canina.
Consideraremos cuatro locus (de la lista siguiente) que son
importantes para producir muchas de las diferencias notables de
color y patrón entre razas de perros. Al interpretar la base genéti-
ca de las diferencias de color del pelaje de los pen·os, considere
cón10 la expresión de un determinado gen es modificada por los
efectos de otros genes. Recuerde que otros locus no enumerados
aquí pueden modificar los colores producidos por estos cuatro
locus, y que no todos los genetistas están de acuerdo acerca de la
genética de la variación del color en algunas razas.
l . Locus Agouti (A). Este locus tiene cinco alelos comunes que
detern1inan la profundidad y la di stribución del color del pela-
je de un pen·o:
As Pigmento negro homogéneo.
aw Agouti o gris tipo lobo. El pelaje codificado por este
alelo tiene un aspecto de "saJ y pimienta", producido
por una banda de pigmento amarillo sobre un pelo
negro.
aY Amarillo. El pigmento negro está notoriamente reduci-
do, de n1anera que todo el pelo es amarillo.
5
a Marcas en silla de montar (color oscuro en el lomo,
con marcas color habano en la cabeza y las patas).
at Bicolor (color oscuro en la mayor parte del cuerpo, con
marcas color habano en los pies y las cejas).
Por lo general, los alelos As y aY son domjnantes respecto de
los otros alelos, pero las relaciones de dominancia son co1n-
plejas y no se conocen totahnente.
2. Locus negro (B). Este locus determina si puede formarse pig-
mento negro. El color real del pelaje de un perro depende de
los efectos de los genes de otros locus (como los locus A y E).
Hay dos alelos frecuentes:
B Permite que se sintetice el pigmento negro.
b No puede producirse pigmento negro; los perros píg-
111entados pueden ser chocolate, hígado, habano o rojo.
El alelo B es dominante sobre b.
(a) (b)
Figura 5-11. En los perros, el color del pelaje es determinado por interacciones entre genes de una serie de locus. a) La
mayoría de los labradores perdigueros tienen genotipo AsAs SS, que varía solo en los locus A y E. b) La mayoría de los beagles tie~
nen genotipo asas 88 sPsP. e) Los dálmatas tienen genotipo AsAs EE swsw, que varía en el locus B, que hace que los perros sean
negros (B_J o marrones (bb). (Parte a: imagebroker/Alamy. Parte b: RFcompany/age fotostock. Parte e: PhotoD isc).
3. Locus de extensión (E). Cuatro alelos de este locus determi-
nan dónde se expresa el genotipo del locus A. Por ejemplo, si
un perro tiene el alelo As (negro homogéneo) en el locus A, el
pigmento negro se extenderá por todo el pelaje o estará limita-
do a ciertas zonas según los alelos presentes en el locus E. Las
zonas donde no se expresa el locus A pueden aparecer de color
amarillo, rojo o habano, lo que depende de la presencia de
genes particulares en otros locus. Cuando está presente A+ en
el locus A, los cuatro alelos del locus E ejercen los siguientes
efectos:
Em Máscara negra con pelaje color habano.
E Locus A expresado en todas partes (negro homogéneo).
ebr Atigrado, con negro y amarillo en capas para dar el
aspecto de las rayas del tigre.
e Sin negro en el pelaje, pero la nariz y los ojos pueden
ser negros.
No se conocen bien las relaciones de donrinancia entre estos
alelos.
4. Locus de manchado (S). Los alelos de este locus determinan
si habrá manchas blancas. Hay cuatro alelos comunes:
S Sin manchas.
si Manchado irlandés; numerosas manchas blancas.
sP Manchado piebaldo; diversas cantidades de blanco.
sw Manchado piebaldo extremo; casi todo blanco.
El alelo Ses completamente dominante sobre los alelos si, sP
y sw; los alelos si y sp son dominantes sobre el alelo sw
(S > sí, sP > sw). No está bien definida la relación entre si y
sP; de hecho, pueden no ser alelos distintos. Los genes de
otros Iocus poco conocidos también 1nodifican los patrones
de 1nanchado.
Para ilustrar cómo interactúan ]os genes de estos locus para
determinar el color del pelaje de un perro, consideremos los
siguientes ejemplos.
LABRADOR PERDIGUERO Los labradores perdigueros (tig. 5-lla)
pueden ser negros, marrones o amarillos. L a mayoría es homoci-
gótica A 8A 8 SS; por consiguiente, solo varían en los locus By E.
El alelo As permite la expresión del pigmento oscuro; que un
perro sea negro depende de qué genes estén presentes en los locus
B y E. Como se comentó antes en este capítulo, todos los labra-
dores negros tienen por lo menos un alelo B y un alelo E (B_ E.J.
{e)
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 119

Cuadro 5-3 Genotipos comunes en diferentes razas de perros

Raza Genotipos homocigóticos habituales* Otros alelos presentes dentro de la raza

Basset hound 88 EE aY, at S, sP , s1

Beagle E, e
Bulldog inglés 88

Chihuahua

Collie 88 EE

Dálmata 8, b
Doberman 8, b
Pastor alemán 88 SS aY, a, a5, at P", E, e
Golden retriever E, e
Galgo 88
Setter irlandés 88 ee SS A, at

Labrador perdiguero B, b E, e
Caniche SS A 5, at 8, b E, e

Rottweiler atat 88 EE SS
San Bernardo aYaY 88

*La mayoría de los perros de la raza son homocigóticos para estos genes; unos pocos perros pueden tener otros alelos en estos locus.
Fuente: datos de M. B. Willis. Genetics of the Dog (London: Witherby, 1989)

Los perros n1ruTones son ho1nocigóticos bb y tienen por lo menos
un alelo E (bb E_) . Los perros amarillos son el resultado de la pre-
sencia de ee (B_ ee o bb ee). Los labradores perdigueros son
homocigóticos para el alelo S, que produce un color homogéneo;
las pocas manchas blancas que aparecen en algunos perros de esta
raza se deben a otros genes modificadores.
BEAGLE La mayoría de los beagles (fig. 5-llb) son homocigóti-
cos asas BB sPsP, aunque en ocasiones hay otros alelos en estos
locus. El alelo a 8 produce las marcas en silla de montar - lomo y
flancos oscuros, con cabeza y patas color habano- que son carac-
terísticas de la raza. El alelo B permite que se produzca el color
negro, pero su distribución se ve linutada por el alelo a 8 • La mayor
parte de los beagles son E_, pero el genotipo ee aparece, de hecho,
algunas veces, lo que da origen a algunos beagles totalmente de
color habano. Las manchas blancas de los beagles se deben al
alelo sP.
DÁLMATA Los dálmatas (fig. 5-llc) tienen una composición gené-
tica interesante. La mayoría es ho.micigótica A 8A 8 EE swsw, de
manera que solo varían en el locus B. Observe que estos perros
tienen genotipo A 8A 8 EE, que permite un pelaje homogéneo que
se1ia negro si estuviera presente el genotipo B_ o marrón (deno-
nlÍnado hígado) si estuviera presente el genotipo bb. Sin embru·-
go, la presencia del alelo sw produce un pelaje blanco y enmas-
cara la expresión del color homogéneo. El color del perro solo
aparece en las manchas pigmentadas, que se deben a la presencia
de un alelo de otro locus que permite que el color penetre en una
cantidad linutada de manchas.
E l cuadro 5-3 presenta los genotipos comunes de otras razas de
peITOS. l]INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 33
5.3 El sexo influye de diversas maneras
en la herencia y la expresión
de los genes
En el capítulo 4 , consideramos las características cod ificadas por
genes de los cromosomas sexuales (rasgos ligados al sexo) y
cómo difiere su herencia de la herencia de rasgos codificados por
genes autosómicos. Por ejemplo, los rasgos ligados al cro1noso-
ma X se transmiten de padre a hij a, pero nunca de padre a hijo, y
los rasgos ligados al cromosoma Y se transmiten del padre a todos
los hijos. Ahora, examinaremos otras influencias del sexo, con10
el efecto del sexo de un organismo individual en la expresión de
genes de cromosomas autosómicos, en las características determi-
nadas por genes localizados en el citoplas1na y en características
para las que solo el genotipo de la madre determina eJ fenotipo de
la descendencia. Por últin10, analizaremos situaciones en las que
el sexo del progenjtor de quien se heredan los genes influye en la
expresión de genes de cromosomas autosómicos.
Características influidas o limitadas
por el sexo
Las características influidas por el sexo son determi nadas por
genes autosómicos y se heredan según los principios de Mendel,
pero se expresan de manera diferente en machos y hembras. En
120 CAP(TULO 5

(a) este caso, un rasgo particular se expresa con mayor faci lidad en
un sexo; en otras palabras, el rasgo tiene mayor penetrancia en uno
Generación P
de los sexos.
sin barba d' con barba 2 Por ejemplo, la presencia de barba en algunas cabras está deter-
minada por un gen autosómico (Bb) que es dominante en los
machos y recesivo en las hembras. En los machos, se req uiere un
X solo alelo para la expresión de este rasgo: tanto eJ bo1nocigoto
(BbBb) como e1 heterocigoto (BbB+) tienen barba, mientras que el
macho B+B+ no tiene barba.
BbBb
Meiosi;; ¡ Genotipo
B+B+
Machos
sin barba
Hembras
sin barba
® B+Bb con barba sin barba
BbBb con barba con barba
·F ecundación

En cambio, las hembras requieren dos alelos para barba para que
Generación F1 se exprese este rasgo: el bomocigoto BbBb tiene barba, nuentras
con barba o sin barba2 que el heterocigoto (BbB+) y el otro homocigoto (B+B+), no.
La clave para co mprender la expresión del gen para barba es
investigar al heterocigoto. En los machos (en quienes la presencia
de barba es dominante), el genotipo heterocigótico produce
barba, pero en las hembras (en quienes la ausencia de barba es
dominante) el genotipo heterocigótico produce una cabra sin
barba.
L a figura 5-12a ilustra un cruzamiento entre un macho sin
(b) barba (B+s+) y una hembra con barba (BhBb). Los alelos se sepa-
ran en los gametos de acuerdo con el principio de Mendel de la
Generación F1
con barbad' sin barbao
segregación, y toda la generación F 1 es heterocigótica (B+Bb).
Como el rasgo es dominante en los machos y recesivo en las hem-
bras, todos los machos F 1 tendrán barba, y ninguna de las hembras
X F 1 tendrá barba. Cuando se cruzan entre sí los individuos de la
generación Fl' 1/ 4 de la progenie es B bB b, 1/ 2 es BhIJ+, y¼ es B+B+
(fig. 5-12b). Como los machos heterocigóticos tienen barba, 1/ 4
de los machos de la F2 tienen barba, en tanto que como las hem-
bras heterocigóticas no tienen barba, solo 1/ 4 de las hembras de la
- -

Meiosis
F 2 tienen barba.

Gametos 0 U na forma extrema de herencia influida por el sexo, una carac-

terística limitada por el sexo, es codificada por genes autosómi-
cos que se expresan solo en un sexo; el rasgo tiene penetrancia
Fecundación cero en el otro sexo. En los pollos domésticos, algunos machos
presentan un patrón de plumaje denominado plumaje de gallo
(fig. 5-13a). Otros machos y todas las hembras presentan un
Generación F2 patrón denominado plumaje de gallina (fig. 5-13b y e). El pluma-
sin barba con barba con barba sin barba sin barba con barba je de gallo es un rasgo autosómico recesivo limitado por el sexo
a los machos. Como el rasgo es autosómico, los genotipos de
machos y hembras son iguales, p ero los fenotipos producidos por
estos genotipos difieren en n1achos y hembras.

Fenotipo Fenotipo
Genotipo masculino femenino
¼ B+B+ ½ B +Bb ¼ BbBb ¼ B +B+ iB+Bb ¼ BbBb HH plumaje de ga11ina plumaje de galli na
'-----y--'
¾ ¼ Hh plumaje de gallina plumaje de gallina
Conclusión: ¾ de los machos tienen barba hh plumaje de gallo plumaje de gallina
¼ de las hembras tienen barba
En los seres humanos, un eje1nplo de característica limitada por
Figura 5-12. Los genes que codifican rasgos influidos por el sexo se el sexo es la pubertad precoz limitada a varones. Los seres huma-
heredan según los principios de Mendel, pero se expresan de mane- nos presentan varios tipos de pubertad precoz, la mayoría de los
ra diferente en machos y hembras. cuales no son genéticos. En cambio, la pubertad precoz lin1itada
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 121

{a) {b) {e) Figura 5-13. Una característica limita-

da por el sexo es codificada por
genes autosómicos que se expresan
solo en un sexo. Un ejemplo es el plu-
maje de gallo de los pollos, un rasgo
autsómico recesivo que está limitado a
machos. a) Macho con plumaje de gallo.
b) Hembra con plumaje de gallina . c)
Macho con plumaje de gallina . (Parte a:
superstarjet/Getty lmages. Parte b: Guy
Sagi/istockphoto. Parte e: James
Marshall/Corbis).

(a)
a varones se debe a un alelo autosómico dominante (P ) que se
Generación P
expresa solo en varones; las mujeres con el gen tienen un fenoti-
po normal. Los varones con pubertad precoz entran en la puber- Pubertad Pubertad
tad a una edad temprana, en general antes de los 4 años. En este precoz ó normal ~
Pp X pp
n1omento, aumenta de tamaño el pene, la voz se torna más grave
y aparece vello púbico. No hay ni nguna al teración de la función
sexual; los varones afectados son completamente fértiles. La
n1ayoría tiene talla baja en la adultez, porque los huesos largos Gametos íi)
dejan de crecer después de la pubertad.
Como el rasgo es raro, los varones suelen ser heterocigóticos
(Pp). Un varón con pube1tad precoz que se aparee con una mujer
sin antecedentes fa1niliares de este cuadro transmjtirá el alelo para _ _ _ _ _ ,, _ __. La mitad de los hijos y
pubertad precoz a 1/ 2 de sus hjjos (fig. 5-14a), pero este se expre- '6eneración F1 ninguna de las hijas
sará solo en sus hijos varones. Si una de las hijas heterocigóticas tienen pubertad precoz.
(Pp) se aparea con un varón que tuvo una pubertad normal (pp),
1/ 2 de sus hijos varones presentará pubertad precoz (fig. 5-14b). o
½ Pp pubertad precoz ½ Pp pubertad normal
Por lo tanto, una característica limitada por el sexo puede here-
darse de uno u otro progenitor, aunque el rasgo solo aparece en un ½ pp pub ertad normal ½pp p ub ertad normal
sexo. D INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 35
(b)

( Generación P
CONCEPTOS
Pubertad Pubertad
norma l Ó normal ~
Las caract erísticas influ idas por el sexo son codif icadas por genes
pp X Pp
autosómicos que se expresan con mayor facilidad en un sexo. Las
características limitadas por el sexo son codificadas por genes autosó-
micos cuya expresión se limita a un sexo.
(jj) @ Gamet os ~
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
---~
Fecundación
¿En qué difieren las características influidas por el sexo y las limitadas
por el sexo? ---------------•----1 La mitad de los hijos y
Generación F ninguna de las hijas
( 1
tienen pubertad precoz.

Herencia citoplasmática ó
½ Pp pubertad precoz ½ Pp pubertad no rmal
Los principios de Mendel de la segregación y la segregación inde-
pendiente se basan en la presunción de que los genes se localizan ½ pp pub ertad normal ½ pp pubertad nor mal
en los cromosomas, en el núcleo de la célula. Para la mayor parte ' Conclusión: t anto los varones com o las m ujeres
de las características genéticas, esta presunción es válida, y los pueden transmitir este rasgo limitado por el sexo,
principios de Mendel nos permiten predecir los tipos de descen- j pero solo se expresa en los varones.
dencia que generará un cruzamiento genético. Sin embargo, no
todo el material genético de una célula se encuentra en el núcleo;
Figura 5-14. Las características limitadas por el sexo se heredan
algunas características son codificadas por genes localizados en según los principios de M endel. La pubertad precoz es un rasgo autosó-
el citoplasma. Estas características muestran herencia citoplas- mico dominante limitado a los varones.
mática.
122 CAP(TULO 5

Unos pocos orgánul os, como cloroplastos y mitocondrias, con- Esta célula contiene p urante la división
tienen DNA. El genoma mitocrondrial humano contiene alrede- un número igual de ..-::::::;celular, las mitocondrias
¡se segregan de manera
dor de 15 000 nucleótidos de DNA, que codifican 37 genes. En mitocondrias con
aleatoria.
co1nparación con el DNA nuclear, que contiene aproximada1nen- genes de tipo silvestre
(rojo) y de mitocon-
te 3000 millones de nucleótidos que codifican 20 000 genes, el
drias con genes
tamaño del genom a 111itocondrial es 111uy pequeño; no obstante, mutados (azul).
los genes mi tocondriales y de los cloroplastos codifican algunas
car acterísticas importantes. Los detalles moleculares de este
DNA extranuclear se analizan en el capítulo 11; aquí, nos centra-
La segregación
remos en los patrones de herencia citoplasmática. aleatoria de las
La herencia citoplasmática difiere de la herencia de caracte- mitocondrias Replicación de las mitocondria
rísticas codificadas por genes nucleares en varios aspectos im- durante la división
celular ...
portantes. Un cigoto hereda genes nucleares de ambos progeni-
tores, pero en general todos sus orgánul os citoplasmáticos, y por ~
consiguiente todos sus genes citoplasmáticos, provienen de uno
solo de los gametos, habitualmente el óvulo. El espermatozoide ~ ~
0 t • S) o
del padre suele aportar solo un conjunto de genes nucleares. Así,
la mayoría de los rasgos heredados a partir del citoplas1na están
¡ División celular
\
presentes tanto en machos co1no en hembras y se transnúten de
la madre a la descendencia, nunca del padre a la descendencia. ~ ,.
Por lo tanto, los cruzanuentos recíprocos dan resultados dife-
rentes cuando genes citoplasmáticos codifican un rasgo. Sin
embargo, en algunos organismos, los genes citoplasmáticos se
~~
¼; ~, (@
~
t)
\:~ (}

heredan solo del progenitor masculino o de ambos progeni-

tores.
Las características con herencia citopJ asmática suelen 1nostrar
una gran variación fenotípica, porque ningún mecanismo análogo
a la mitosis o a la meiosis garantiza la distribución uniforme de
los genes citoplasmáticos durante la división celular. Por lo tanto,
diferentes células y cada descendiente contendrán diversas pro-
porciones de genes citoplasmáticos.
Considere los genes mitocondriales. La 111ayoría de las células
contienen miles de mitocondrias, y cada una contiene de 2 a 10 co-
pias de DNA mitocondrial (mtDNA). Suponga que la mitad de las
nutocondrias de una célula contiene una copia de tipo silvestre
normal de mtDNA, y la otra mitad una copia mutada (fig. 5-15).
En la división celular, las 1nitocondrias se segregan en la pro-
genie de manera aleatoria. Solo por azar una célula puede reci-
bir mtDNA en su mayor parte mutado, y otra célula puede recibir
mtDNA en su mayor parte de tipo silvestre. De este modo, distin-
tos individuos de la progenie de una misma madre, e incluso dis-
tintas células de cada individuo de esa progenie, pueden tener
fenotipos diferentes. Los rasgos codificados por el DNA de los
cloroplastos (cpDNA) muestran la misn1a variabilidad. El cuadro
5-4 resume las características de los rasgos con herencia citoplas-
1nática.
Cuadro 5-4 Características de los rasgos con herencia
citoplasmática
1, Presentes en machos y hembras.
2. Suelen heredarse de un progenitor, en general la madre.
3. Los cruzamientos recíprocos dan resultados diferentes.
4. Muestran extensa variación fenotípica, aun dentro de una sola
familia.
. ..da origen a células de la progenie que difieren en el número
de mitocondrias con genes de tipo silvestre y mutados.
Figura 5-15. Las características con herencia citoplasmática suelen
mostrar gran variación fenotípica, porque las células y los individuos
de la descendencia contienen diversas proporciones de genes cito-
plasmáticos.
VARIEGADO DE DONDIEGO DE LA NOCHE En 1909, Carl Correos
reconoció la herencia citoplasmática como una excepción a los
principios de Mendel. Correns, uno de los biólogos que redescu-
brió el trabajo de Mendel, estudió la herencia del variegado de las
hojas de la planta Mirabilis jalapa, conocida como Dondiego de
la noche. Observó que Jas hojas y los brotes de una variedad
de esta planta eran variegados y mostraban una mezcla de man-
chas verdes y blancas. Asimismo, observó que algunas ramas de
la cepa variegada tenían hojas totalmente verdes, mientras que
otras ramas tenían hoj as totalmente blancas. Cada rama producía
flores, por lo que pudo cruzar las flores de las ramas variegadas,
verdes y blancas en todas las combinaciones posibles (fig. 5-16).
Las se1nillas de las ramas verdes sien1pre daban origen a progenie
verde sin impo11ar que el polen fu era de una rama verde, blanca o
variegada. De modo similar, las flores de las ramas blancas siem-
pre generaban progenie blanca. Las flores de las ra1nas variegadas
daban origen a progenie verde, blanca y variegada, sin ninguna
proporción particular.
Los cruzamientos de Con·ens demostraron la herencia citoplas-
mática del variegado en Dondiego de la noche. Los fenotipos de
la descendencia eran determinados totahn ente por el progenitor
 Ext ensiones y modificacion es de los princi pios básicos 123

materno, nu nca por el progenitor paterno (la fuente del polen). variegado de estas plantas se debe a un gen defectuoso del
Más aún, la producción de los tres fenotipos por flores de las cpDNA, que da por resultado una falla para producir el pigmento
ramas variegadas es consistente con herencia citoplasmática. El verde clorofila. Las células de las ramas verdes contienen solo
cloroplastos normales, las células de las ramas blancas contienen
solo cloroplastos anorn1ales, y las células de las ramas variegadas
contienen una 1n ezcla de cloroplastos normales y anormales. En
las flores de las rainas vrui egadas, la segregación aleatoria de clo-
Pregunta: ¿cómo se hereda el co lor del t allo y las hoj as en la roplastos en el curso de la ovogénesis produce algunos óvulos con
planta Dond iego de la noche? cpDNA normal , que generan progenie verde; otros óvulos solo
con cpDNA anormal dan origen a progenie blanca; y por último,
Métodos Plant a del polen<o > otros óvulos con una mezcla de cpDNA nor1nal y anormal gene-
Cruce flores de Polen ) Polen ) ra progenie variegada.
plantas blancas,
verdes y " ENFERMEDADES MITOCONDRIALES Se han identificado una serie
variegadas en de enfermedades humanas (en su mayor parte raras) que muestran
todas las herencia citoplasmática. Estos trastornos se deben a mutaciones
combinaciones.
del mtDNA, la mayo1ia de las cuales afecta a genes que codifican
Planta de la componentes de la cadena de transporte de electrones, que gene-
semi lla <2) Blanca Verde Va riegada
ra la mayoría del ATP (adenosina-trifosfato) de la respiración
Resultados celular aerobia. Una de estas enfermedades es la neuropatía ópti-
ca hereditaria de Leber (NOHL). Los pacientes con este trastorno
y presentan pérdida rápida de la visión de ambos ojos, secundaria a
la muerte de las células del nervio óptico. Por lo general, esta pér-

Blanca
~
Blanca Blanca Blanca
dida de visión se produce en la adultez temprana ( usualmente,
entre los 20 y 24 años de edad), pero p uede sobrevenir en cual-
quier 1no1n ento después de la adolescencia. Hay mucha variabili-
dad clínica en la gravedad de la enfermedad, aun dentro de la
misma familia. La neuropatía óptica hereditaria de Leber muestra
herencia citoplasmática: el rasgo se transmite de la madre a todos
los hijos, varones y mujeres por igual.

Verde Verde Verde Verde Efecto genético materno

El efecto genético materno es un fenómeno genético que a veces
se confunde con herencia cítoplasmática y cuya característica es
-~ { '" que el genotipo de la 1nadre determina el fenotipo de la descen-
~~"
1(\
Blanca
/~
Blanca
"
Blanca
¾ dencia. En la herencia citoplasm ática, se heredan los genes para
una característica de solo uno de los progenitores, en general la
madre. En el efecto genético materno, se heredan genes de ambos
progenitores, pero el fenotipo de la descendencia es determinado
no por su propio genotipo, sino por el genotipo de su madre.
E l efecto genético materno suele apru·ecer cuando sustancias
presentes en el citoplasma del óvulo (codificadas por genes nu-
cleares de la madre) son fundan1entales en etapas tempranas del
Va riega da Verde Verde Verde desarro llo. Un ejemplo excelente es el enrollamiento de la concha
de Lynuinaea peregra (fig. 5-17), descrito en la introducción de
este capítulo. El enrollamiento dextrógiro de la concha es deter-
minado por un par de alelos; el alelo para dextrógiro (s+) es domi-
nante sobre el alelo para levógiro (s). Sin embargo , la dirección
del enroJlamiento es determinado no por el propio genotipo del
Variegada Variegada Variegada caraco l, sino por el genotipo de s u madre. La manera en la que se
divide el citopl asma poco después de la fecundación, que a su vez
es determinada por una sustancia producida por la madre y trans-
Conclusión: el fenotipo de la progenie es determ inado por el mitida a la descendencia en el citoplasn1a del óvulo, incide en la
fenoti po de la rama de la que se originó la semilla, no de la dirección del enrolla1níen:to.
rama de la que se orig inó el polen. El color del tallo y la hoj a Si se cruza un .macho hom ocigótico para alelos dextrógiros
muestra herencia citoplasmática. (s+s+) con una hembra homocígótica para alelos levógiros (ss),
todos individuos de la F 1 son heterocigóticos (s+s) y tienen una
Figura 5-16. Los cruzamientos para los tipos de hoja de las plantas concha levógira porque el genotipo de la madre (ss) codifica
Dondiego de la noche ilustran la herencia citoplasmática. enrollamiento levógiro (véase fig. 5-17). Si estos caracoles F 1 se
124 CAP(TULO 5

El enrollamiento dextrógiro se debe a un alelo la progenie. Sin e mbargo, un macho si influye en el fenotipo de la
autosómico (s+) que es dominante ... generación F2: al contribuir al genotipo de sus hijas, incide en los
Generación P fenotipos de su descendencia. Por lo tanto, los genes que muestran
con concha con concha efecto genético materno se transmiten a través de los machos a las
dextrógira O levógira ~ futuras generaciones. En cambio, los genes que muestran herencia
.. .sobre un alelo para citoplasmática se transmiten solo a través de uno de los sexos (en
concha levógira (s), general, la hembra). •
( que codifica un
enrollamientolevógiro
SS

Gametos 0
+
G)
CONCEPTOS
Las características que muestran herencia citoplasmática son codifica-

l___..___ Fecundación das por genes del citoplasma y, en general, se heredan de un progeni-
tor, la mayoría de las veces, la madre. En el efecto genético materno,
el genotipo de la madre determina el fenotipo de la descendencia.
Generación F1 ___}
Levógira Todos los individuos de la ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 10
generación F1 son heterocigóticos
(s+s); como el genotipo de la ¿ Cómo podría determinar si un rasgo particular se debe a herencia
madre determina el fenotipo de la
descendencia, toda la generación citoplasmática o a efecto genético materno?
F1 tiene una concha levógíra.
s+s
1

Autofecundac:1ón
Generación F2
Dextrógiro Dextrógiro Dextrógiro
) )
¼ s+s+ ½ s+s ¼ ss
Conclusión: como la madre de la progenie F2 tiene
genotipo s+s, todos los caracoles F2 son dextrógiros.
Figura 5-17. En el efecto genético materno, el genotipo de la madre
determina el fenotipo de la descendencia. El enrollamiento de la con-
cha de los caracoles es un rasgo que muestra efecto genético materno.
autofecundan, la proporción fenotípica de la generación F2 es
s+s+:2 s+s: 1 ss.
Observe que e l fenotipo de todos los caracoles F2 corresponde a
em·ollamiento dextrógiro, independientemente de sus fenotipos.
Los descendientes F 2 son dextrógiros, porque el genotipo de su
1nadre (s+s) codifica una concha de enrollamiento dextrógiro y
determina su fenotipo. En caso de efecto genético materno, el feno-
tipo de la progenie no necesariarnente es el mismo que e l fenotipo
de la madre, porque su fenotipo está determinado por el genotipo
de la madre y no por su fenotipo. Ni el genotipo del progenitor
1nasculino ni el de la propia progenie intervienen en el fenotipo de
Impronta genómica
Un principio básico de la genética mendeliana es que el origen
parental de un gen no incide en su expresión y, p or lo tanto, los
cruzamientos recíprocos dan resultados idénticos. H emos obser-
vado que hay algunas caracterís ticas genéticas (las codificadas
por genes ligados al cron1oso1na X y por genes citoplasmáticos)
para las que los cru zamientos recíprocos no dan los mismos resul-
tados. En estos casos, machos y hembras no aportan el mismo
material genético a la descendencia. Con respecto a los genes
autosómicos, los n1achos y las he mbras aportan la misma canti-
dad de genes, y desde hace tiempo se ha asumido que los genes
paternos y maternos ejercen iguales efectos. Sin embargo, el ori-
gen parental influye de manera signifi cativa en la expresión de
algunos genes. Este fenómeno, la expresión diferencial de mate-
1ial genético según se herede del padre o de la madre, se de nomi-
na impronta genómica.
Un gen que presenta impronta genómica tanto en ratones con10
en seres humar1os es Ig/2, que codifica una proteína denominada
factor de crecimiento similar a la insulina 2 (l g/2) . La descenden-
cia hereda un alelo Igf2 de la madre y uno del padre. La copi a
paterna de lg/2 se expresa activamente e n el feto y la placenta,
pero la copia materna es completa1nente silenciosa (fig. 5-18). La
descendencia tanto masculina como femenin a tiene genes lg/2,
pero la clave de la expresión del gen es el sexo del progenitor que
transmitió e l gen. En e l presente ej en1plo, el gen solo se expresa
cuando es transmitido por el padre. En otros rasgos con impronta
genómica, el rasgo solo se expresa cuando el gen es transmitido
por la madre. D e una manera aún no co1nprendida por completo,
el alelo Ig/2 paterno (pero no el alelo n1aterno) promueve el cre-
cimiento placentario y fetal; c uando se induce la deleción de la
copia paterna de lg/2 en ratones, se observa una placenta peque-
ña y descendencia con baj o peso de nacimjento.
Se ha implicado la impronta genómica en vatios trastornos
humanos, como los síndromes de Prader-Willi y de Angelmar1.
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 125

(a) Alelo paterno Alelo materno (b)

lgf2 lg/2

l J

El alelo paterno es
lg/2
l Ig/2
El alelo materno es
activo, y su producto silencioso. La ausencia
proteico estimula el de su producto proteico
crecimiento fetal. no estimula más el
crecimiento fetal.
Cromosoma
humano 11

Figura 5-18. La impronta genómica del gen lgf2 en ratones y

El tamaño del feto es
_ determinado por los
...-.::::::::; efectos combina dos
de ambos alelos.
seres humanos incide en el crecimiento fetal. a) El alelo lgf2
paterno es activo en el feto y la placenta, mientras que el alelo
materno es silencioso. b) El locus lgf2 humano se localiza en el brazo
corto del cromosoma 11 ; en los ratones, el locus se encuentra en el
cromosoma 7. (Cortesía de los Dras.Thomas Ried y Evelin Schrock).

Los niños con síndrome de Prader-Willi tienen manos y pies pe- EPIGENÉTICA La impronta genómica es solo una forma de un fe-
queños, escaso desarrollo sexual y discapacidad intelecn1al. Estos nómeno conocido como epigenética. La mayoría de los rasgos
niños son pequeños al nacer y se amamantan en forma deficiente, son codificados por la información genética que reside en la
pero cuando comienzan a deambular, desarrollan un apetito voraz secuencia de bases nucleotídicas del DNA: el código genético,
y, con frecuencia, se vuelven obesos. Muchas personas con sín- que se analizará en el capítulo 15. Sin embargo, algunos rasgos
drome de Prader-Willi carecen de una pequeña región del brazo son causados por alteraciones del DNA, como Ja adición de gru-
largo del cromosoma 15. La deleción de esta región casi siempre pos metilo a algunas de las bases del DNA (metilación del DNA),
se hereda del padre. Por lo tanto, los niños con síndrome de que afectan la manera de expresión de las secuencias del DNA. A
Prader-Willi carecen de una copia paterna de los genes del brazo menudo, estos cambios son estables y hereditarios en el sentido
largo del cromosoma 15. de que se transmiten de una célula a otra.
La deleción de esta misma región del cromosoma 15 también
puede heredarse de la madre, pero esta herencia provoca una serie
totalmente diferente de sínto1nas, que causa el síndrome de
Angelman. Los niños con síndrome de Angelman muestran risa
frecuente, movimiento muscular descontrolado, boca grande y Cuadro 5-5 Influencias del sexo sobre la herencia
convulsiones inusuales. Carecen de la copia materna de genes del
brazo largo del cromosoma 15. Para que se produzca un desarro- Fenómeno genético Fenotipo determinado por
llo normal, en apariencia se requieren copias de esta región del Característica ligada al Genes localizados en el cromosoma
cromosoma 15 del padre y de la madre. sexo sexual
En los mamíferos, muchos genes con impronta se asocian con
Característica influida Genes de cromosomas autosómicos
el crecimiento fetal. También se ha comunicado impronta genó-
por el sexo que se expresan con mayor facilidad
1nica en las plantas, con expresión diferencial de genes paternos y
en un sexo
1naternos en el endospermo que, al igual que la placenta de los
ma1níferos, aporta nutrientes para el crecimiento del embrión. Característica limitada Genes autosómicos cuya expresión
Aún se está investigando el mecanismo de la impronta, pero la por el sexo se limita a un sexo
metilación del DNA (el agregado de grupos metilo [CH3] a nu-
Efecto genético materno Genotipo nuclear del progenitor
cleótidos del DNA [véanse caps. 10 y 17]) es esencial para el pro-
materno
ceso. En los n1ainíferos, la metilación se elimina en las células
germinales de cada generación y después se restablece en el curso Herencia citoplasmática Genes citoplasmáticos, que suelen
de la formación de gametos, con diferentes niveles de metilación heredarse totalmente de un solo
en espermatozoides y óvulos, lo que luego causa expresión dife- progenitor
rencial de alelos masculinos y femeninos en la descendencia. El Impronta genómica Genes cuya expresión es afectada por
cuadro 5-5 muestra algunas de las diferentes formas de interac- el sexo del progenitor que los transmite
ción entre el sexo y la herencia.
126 CAP(TULO 5

En la impronta genómjca, que el gen se transmita a través del
óvulo o del espennatozoide determina el grado de metilación que
tiene lugar. El patrón de metilación de un gen es copiado cuando
se replica el DNA y, por lo tanto, permanece en el gen cuando este
se transmite de célula a célula mediante mitosis. En cambio, el pa-
trón de metilación se puede 1noclificar o eliminar cuando el DNA
se transmite a través de un gameto, y así, un gen metilado de un
espermatozoide puede no estar metilado cuando finalmente se
transmite al óvulo de una hija. Por último, el grado de metilación
determina si el gen se expresa en la descendencia.
Estos tipos de cambios reversibles del DNA que influyen en la
expresión de rasgos se denominan marcas epigenéticas. La desac-
tivación de uno de los cromosomas X en los ma1níferos he1nbra
(analizada en el cap. 4) es otro tipo de cambi o epi.genéti co. En el
capítulo 21, consideraremos con mayor detalle los cambios epi-
genéticos
dos por la enfermedad. Estas observaciones 11evaron a form ular el
concepto de anticipación. Sin embargo, los genetistas lo desestima-
ron rápidamente porque no había ningún mecanismo evidente para
explicai·lo; los genetistas tradicionales sostenían que los genes se
transmiten sin modificaciones de los progenitores a la descenden-
cia, y tendieron a atribuir la anticipación a sesgo observacional.
En la actualidad, la investigación ha restablecido la anticipación
corno un fenómeno genético legítimo. La mutación que causa la
distrofia miotónica consiste en una región inestable de DNA que
puede aumentar de tamaño a medida que el gen se transmite de
una generación a otra. La edad de comienzo y la gravedad de la
enfermedad se correlacionan con el tamaño de la región inestable;
un au1nento del tamaño de la región a través de generaciones pro-
voca anticipación. Ahora, se ha impljcado este fenómeno en una
seri e de enfermedades genéticas. En el capítulo 18, exalninare-
mos con mayor detalle estos interesantes tipos de mutaciones.

CONCEPTOS
En la impronta genómica, la expresión de un gen es influida por el sexo
del progenitor que t ransmitió el gen a la descendencia. Las marcas epi-
genéticas son cambios reversibles del DNA que no modifican la secuen-
cia de bases, pero pueden afectar la forma de expresión de un gen.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 11
¿ Qué tipo de marca epigenética es responsable de la impronta genó-
mica?
5.4 La anticipación es la expresión más intensa
o más temprana de rasgos en las generaciones
•
sucesivas
Otro fenómeno genético que no es explicado por los p1incipios de
Mendel es la anticipación, en la cual un rasgo genético se expresa
con 1nayor intensidad o a una edad más temprana a medida que se
transmite de generación en generación. A principios del siglo XX,
vaiios médicos observaron que muchos pacientes con distrofia
1niotónica de moderada a grave (un trastorno muscular autosómico
do1ninante) tenían antepasados que solo estaban levemente afecta-
CONCEPTOS
La anticipación es la expresión más intensa o más temprana de un
rasgo genético en las sucesivas generaciones. Es causada por una
región inestable de DNA que aumenta de tamaño de generación en
generación.
5.5 Efectos ambientales pueden influir
en la expresión de un genotipo
En el capítulo 3, aprendimos que cada fenotipo es el resultado de
un genotipo que se desarrolla dentro de un ambiente específico;
cada genotipo puede producir varios fenoti pos diferentes según
las condiciones ambientales en las que tiene lugar el desarrollo .
Por ejemplo, una mosca de la fruta homocigótica para la muta-
ción vestigial (vg vg) desarrolla alas reducidas cuando se cría a
temperatura inferior a 29 ºC, pero el nrismo genotipo determina
el desarrollo de alas mucho más largas a 31 ºC (fig. 5-19).
Para la mayo1ia de las características discutidas hasta ahora, el
efecto del ambiente sobre el fenotipo ha sido leve. Por ejemplo, los
guisantes de Mendel con genotipo yy desarrollaban semillas verdes
independientemente del ambiente en el que fueran cultivados. De
modo similar, las personas con genotipo ¡A¡A presentan el antígeno

t-
E
•

-E
VI
m
m
VI
m
C1I
-o
o
-o
C1I
Figura 5-19. La expresión de la mutación vestigial en
E
o
.... Drosophila depende de la temperatura. Cuando se crían
Q.
-o
a temperaturas inferiores a 29 ºC, las moscas homocigóticas
::,
+'
para vestigial tienen alas muy reducidas; a temperaturas
Cl
e:
superiores a 31 ºC , las moscas desarrollan alas normales.
_g o 18° 19° 20° 21° 22° 23° 24° 25° 26° 27° 28° 29° 30° 31° (Datos de M. H. Harnly. Journal of Experimental Zoology
Temperatura ambiental durante el desarrollo (escala Celsius) 56:363-379, 1936).

A en los eritrocitos, independientemente de su dieta, niveJ socioe-
conómico o ambiente familiar. En cambio, para otros fenotipos, los
efectos ambientaJes desempeñan un papel más importante.
Efectos ambientales sobre el fenotipo
La expresión fenotípica de algunos genotipos depende en for1na
crucial de la presencia de un ambiente específico. Por ejemplo, el
aJelo himalayo de los conejos produce pelaje oscuro en las extre-
midades del cuerpo: nariz, orejas y patas (fig. 5-20). Sin embar-
go, el pigmento oscuro solo se desarrolla cuando el conejo se cría
a una temperatura de 25 ºC o más baja; si un conejo himalayo se
cría a 30 ºC, no aparecen parches oscuros. Por lo tanto, la expre-
sión del aJelo himalayo depende de la temperatu ra; a temperatu-
ras más altas, se inactiva una enzima necesaria para la producción
de pigmento oscuro. El pigmento se limita a la nariz, las patas y
las orejas de un conejo himalayo, porque la temperatura corporal
central del anirnal suele ser superior a 25 ºC, y la enzima solo es
funcionaJ en las células de las extrenudades relativamente frías. El
alelo himalayo es un ejemplo de alelo termosensible, un alelo cuyo
producto es funcional solo a ciertas temperaturas. De modo sirni-
lar, las alas vestigiales de Drosophila melanogaster son causadas
por una mutación dependiente de la temperatura (véase fig. 5-19).
Los factores ambientaJes también desen1peñan un papel impor-
tante en la expresión de una se1ie de enfern1edades genéticas huma-
nas. La fenilcetonu1ia (PKU) se debe a un alelo autosó1nico recesi-
vo que causa discapacidad intelectual. El trastorno es causado por
un defecto de una enzima que normalinente metaboliza el aminoá-
cido fenilaJanina. Cuando esta enzima es defectuosa, no se metabo-
liza la fenilalanina, que se acumula y causa daño cerebral. Un sim-
ple cambio ambiental, indicarle al túño afectado una dieta pobre en
fenilalanina, impide la aparición de discapacidad intelectual.
Estos ejemplos ilustran el punto de que los genes y sus produc-
tos no actúan de manera aislada; más bien, suelen interactuar con
factores ambientaJes. En ocasiones, los factores ambientales solos
p ueden producir un fenotipo que es el mismo que el producido
por un genotipo; este fenotipo se denomma una fenocopia. Por
eje1nplo, en las moscas de la fruta, la n1utación autosónuca rece-
siva sin ojos produce ojos 1nuy reducidos . Asimi smo, el fenotipo
sin ojos también puede ser producido por exposición de larvas de
tnoscas norn1ales a metaborato de sodio.
{a) {b)
Cr iado a 25 ºC o menos. Criado a temperatura superior a 30 ºC.
Extensiones y modificaciones de los principios básicos 127
CONCEPTOS
La expresión de numerosos genes es modificada por el ambiente. Una
fenocopia es un rasgo producido por efectos ambientales que simu la
el fenotipo producido por el genotipo.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 12
¿ Cómo puede determinar si un fenotipo como ojos reducidos en las
moscas de la fruta se debe a una mutación recesiva o es una feno-
copia?
Herencia de características continuas
Hasta ahora, hemos tratado fundarnentalmente características que
tienen solo unos pocos fenotipos defmidos. Por ejemplo, en los
guisantes de Mendel, las semillas eran lisas o rugosas, amarillas
o verdes; los pelajes de los perros eran negros, marrones o amari-
llos; los tipos de sangre eran de cuatro grupos distintos: O, A, B
o AB. Estas características, que tienen unos pocos fenotipos fáci-
les de distinguir, se denominan características discontinuas.
No todas las características muestran fenotipos discontinuos.
La talla humana es un ejemplo de una característica de este tipo;
las personas no tienen solo aJgunas taJlas diferentes, sino que,
más bien, muestran un amplio rango de estaturas. De hecho, hay
tantos fenotipos posibles de talla humana que debemos usar una
medida para describirla. Las características que muestran una dis-
tribución contin ua de fenotipos se denominan características
continuas. Con10 estas características tienen muchos fenotipos
posibles y deben ser descri tas en términos cuantitativos, también
se las denomina características cuantitativas.
Las características continuas suelen surgir porque genes de
numerosos locus interactúan para producir los fenotipos. Cuando
un solo locus con dos alelos codifica una característica, hay tres
genotipos posibles: AA, Aa y aa. En caso de dos locus, cada uno
con dos alelos, hay 3 2 = 9 genotipos posibles. La cantidad de
genotipos que codifican una característica es 3n, donde n es igual
aJ número de locus, cada uno con dos aJelos, que influyen en la
Figura 5-20. La expresión del
gen himalayo depende de la
temperatura a la que se cría el
conejo. El conejo de la izquierda
fue criado a temperaturas inferio-
res a 25 ºC; el conejo de la dere-
cha fue criado a temperaturas
superiores a 30 ºC. (Animal
Photography, Patricia Henningsen).
128 CAP(TULO 5
característica. Por ejemplo, cuando una característica es determi-
nada por ocho locus, cada uno con dos alelos, hay 3 8 = 6561
genotipos diferentes posibles para esta característica. Si cada
genotipo produce un fenotipo distinto, habrá muchos fenotipos
posibles. Las ligeras diferencias entre los fenotipos serán indistin-
g uibles, y la característica parecerá continua. Las características
codificadas por genes localizados en 1nuchos locus se denominan
características poligénicas.
Lo inverso de la poligenia es la pleiotropía, en la que un gen
afecta múltiples características. Numerosos genes muestran
pleiotropía. La fenilcetonuria, mencionada antes, se debe a un
alelo recesivo; las personas homocigóticas para este alelo, de no
1nediar tratam iento, presentan d iscapacidad intelectual, ojos azu-
les y piel clara. El alelo letal que causa color amarillo del pelaje
en los ratones también es pleiotrópico. Además de su letalidad y
efecto sobre el color del pelaje, el gen causa un cuadro similar a
la diabetes, obesidad y mayor propensión a presentar tumores.
Con frec uencia, los fenotipos de las características continuas
tan1bién son influidos por factores ambientales. Cada genotipo es
capaz de producir un espectro de fenotipos. En esta situación, el
fenotipo particular resultante depende tanto del genotipo como de
las condiciones ambientales en las que este se desarrolla. Por
ejemplo, solo tres genotipos pueden codificar una característica,
pero co1no cada genotipo produce un espectro de fenotipos aso-
ciados con diferentes ambientes, el fenotipo de la característica
presenta una distribución continua. M uchas características conti-
nuas son poligénicas e influidas por factores ambientales; las
RESUMEN DE CONCEPTOS
■ La dominancia siempre hace referencia a genes del mismo
locus (genes alélicos) y se puede comprender respecto de
cómo se relaciona el fenotipo del heterocigoto con los fenoti-
pos de los homocigotos.
■ La dominancia es completa cuando un heterocigoto tiene el
1nismo fenotipo que un homocigoto, es incompleta cuando el
heterocigoto tiene un fenotipo intermedio entre los de ambos
homocigotos parentales y es codominante cuando el heteroci-
goto muestra rasgos de ambos homocigotos parentales.
■ El tipo de dominancia no incide en la herencia de un alelo; sí
afecta la expresión fenotípica deJ alelo. La clasificación de
dominancia depende del nivel del fenotipo examinado.
■ La penetranci.a es el porcentaje de individuos con un genotipo
particular que muestran el fenotipo esperado. L a expresividad
es el grado de expresión de una característica.
■ Los alelos letales causan la muerte de un organismo indivi-
dual que los tiene, habitualn1ente en un estadio temprano del
desarrollo, y pueden modificar las proporciones fe notípicas.
■ Alelos múltiples hace referencia a la presencia de más de dos
alelos en un locus dentro de un grupo. Su presencia aumenta
el número de genotipos y fe notipos posibles.
■ Interacción génica hace referencia a la interacción entre genes
de diferentes locus para producir un fenotipo único. Un gen
epistásico de un locus suprime, o enmascara, Ja expresión de
genes hipostásicos de otros locus. La interacción génica suele
producir proporciones fenotípicas que son modificaciones de
las proporciones dihfbridas.
características de este tipo se deno1ninan características multifac-
toriales, porque muchos factores ayudan a determinar el fenotipo.
La herencia de las características continuas puede parecer com-
pleja, pero los alelos de cada locus cumplen con los principios de
Mendel y se heredan de la misma manera que los alelos que codi-
fican características discontinuas, sirnples. Sin embargo, dado que
pruticipan 1nuchos genes, que los factores ambientales influyen en
el fenotipo y que los fenotipos no se distribuyen en unos pocos
tipos diferentes, no podemos observar las proporciones defrnidas
que nos han permitido interpretru· la base genética de las caracte-
rísticas discontinuas. Para analizar las características continuas,
debemos recunir a herramientas estadísticas especiales, como se
analizará en el capítulo 24. ►
CONCEPTOS
Las características discontinuas muestran unos pocos fenotipos dife-
rentes; las características continuas muestran un espectro de fenoti-
pos. Suele producirse una característica continua cuando genes de
numerosos locus y factores ambientales se combinan para determinar
un fenotipo.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 13
¿ Cuál es la diferencia entre poligenia y pleiotropía?
■ Las características influidas por el sexo son codificadas por
genes autosómicos que se expresan con 1nayor facilidad en un
sexo. Las características limitadas por el sexo son codificadas
por genes autosómicos expresados solo en un sexo.
■ En la herencia citoplasmática, los genes para la característica
se hallan en los orgánulos y, en general, se heredan de un solo
progenitor (típicamente, la madre). Se observa efecto genético
materno cuando la descendencia hereda genes de ambos pro-
genitores, pero los genes nucleares de la madre determinan el
fenotipo de la descendencia.
■ Impronta genómica hace referencia a características codifica-
das por genes autosómicos cuya expresión es influida por el
sexo del progenitor que transmite los genes. Efectos epigené-
ticos, como la inlpronta genómica, son causados por alteracio-
nes del DNA (p. ej., metilación del DNA) que no afectan su
secuencia.
■ Anticipación hace referencia a un rasgo genético que se
expresa con mayor intensidad o a una edad 1nás temprana en
las sucesivas generaciones.
■ A menudo, los efectos ambientales modifican los fenotipos.
U na fenocopia es un fenotipo producido por un efecto
a1nbiental que simula un fenotipo producido por un genotipo.
■ Las características continuas son aquellas que muestran un
amplio espectro de fenotipos; con frecuencia, son producidas
por los efectos con1binados de numerosos genes y efectos
ambientales.
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 129

TÉRMINOS IMPORTANTES

alelo letal (p. 107)
alelo termosensible
(p. 127)
alelos múltiples (p. 107)
anticipación (p. 126)
característica continua
(p. 127)
característica cuantitativa
(p. 127)
característica discontinua
(p. 127)
característica influida por
el sexo (p. 119)
característica limitada por
el sexo (p.120)
característica multifactorial
(p. 128)
característica poligénica
(p. 128)
codominancia (p. l 06)
domínancia completa
(p. 104)
do1ninancia incompleta
(p. 104)
efecto genético materno
(p. 123)
epigenética (p. 125)
epistasia (p.1 11)
expresividad (p. 107)
fenocopia (p. 127)
gen epistásico (p. 111)
gen hipostásico (p. l 11)
herencia citoplasmática (p. 121)
heterocigoto compuesto
(p. 110)
impronta genómica (p. 124)
interacción génica (p. 110)
penetrancia (p. 107)
penetrancia incompleta
(p. 107)
pleiotropía (p. 128)
prueba de con1plementación
(p.117)

l. b
2. En caso de dominancia completa, el heterocigoto expresa el
mismo fenotipo que uno de los homocigotos. Si hay domi-
nancia incompleta, el heterocigoto tiene un fenotipo interme-
dio entre los dos homocigotos. En caso de codominancia, el
heterocigoto tiene un fenotipo que expresa simultáneamente
los fenotipos de an1bos bo1nocigotos.
3. d
4. d
5. c
6. La interacción génica es la interacción entre genes de clife-
ren tes Jocus. La dominancia es la interacción entre genes de
un solo locus.
7. d
8. Cruce un bulldog homocigótico para atigrado con un
chihuahua homocigótico para atigrado. Si los dos genes ati-
grado son alélicos, toda la descendencia será atigrada: bb x
bb ➔ todos bb (atigrados). Por el contrario, si el atigrado
en las dos razas se debe a genes recesivos de diferentes
locus, entonces ningún individuo de la descendencia será
atigrado: a+a+ bb x aa b+b+ ➔ a+a b+b.
9. Tanto los rasgos influidos por el sexo como los rasgos limi-
tados por el sexo son codificados por genes autosómicos
cuya expresión es afectada por el sexo del organismo indi-
vidual que tiene el gen. Los rasgos ligados al sexo son codi-
ficados por genes de los cromosomas sexuales.
10. Los rasgos con herencia citoplasmática son codificados por
genes del citoplasma, que suelen heredarse solo del proge-
nitor femenino. Por lo tanto, un rasgo secundario a herencia
citoplasmática siempre será transmitido a través de hem-
bras. Los rasgos debidos a efecto genético materno son
codificados por genes autosómicos y, por lo tanto, pueden
ser transmitidos a través de machos, aunque cualquier rasgo
de un organismo individual es determinado por el genotipo
materno.
11. Metilación del DNA
12. Cruce dos moscas sin ojos y cruce una mosca sin ojos con
una 1nosca de tipo silvestre. Críe a la descendencia de
runbos cruzamientos en eJ 1nismo ambiente. Si el rasgo se
debe a una mutación recesi va, toda la descendencia de las
dos moscas sin ojos debe ser sin ojos, mientras que por lo
menos parte de la descendencia de las moscas sin ojos y de
tipo silvestre debe ser de tipo silvestre. Si el rasgo se debe a
una fenocopia, no habrá diferencias en la progenie de los
dos cruzrunientos.
13. Poligenia hace referencia a la influencia de múltiples genes
sobre la expresión de una única característica. Pleiotropía
hace referencia al efecto de un solo gen en la expresión de
múltiples características.

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
Un genetista cruza dos ratones amarillos de pelo lacio y obtiene la siguiente progenje:
1/ amarillo, lacio
2
1
/ 6 amarillo, rizado
1/ 4 gris, lacio
1
/ 12 gris, rizado
a. Dé la explicación genética de los resultados y asigne genotipos a los progenitores y la progenie de
este cruzamiento.
b. ¿Qué otros cruzamientos podrían llevarse a cabo para determinar si su explicación es correcta?
 130 CAP(TULO 5

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al proble- Ahora, exruninemos la herencia del tipo de pelo. Se cruzan dos
ma? ratones de pelo lacio, lo que produce½+ 1/4 = 2/4 + 1/4 = 3/4
a. Una explicación genética para la herencia de color y tipo de de ratones de pelo lacio y 1/6 + 1'12 = 2/12 + 1/12 = 3/12 =¼ de
pelo de los ratones. Los genotipos de los p rogenitores. ratones con pelo rizado. En el capítulo 3, aprendimos que un
cruzamiento entre dos individuos heterocigóticos para un alelo
b. Ejemplos de otros cruzamientos que podrían llevarse a cabo
dominante simple suele producir una proporción 3: 1:
para determinar si la explicación dada en (a) es con·ecta.
Ss x ss Pista: el cuadro
¿Qué información se proporciona para resolver el proble- 3-3 muestra
ma? J, relaciones feno-
1 tl picas para cru-
■ Fenotipos de los progenitores. SS /4 lacio } ces genéticos
Ss •12 lacio 3¡4 lacio simples.
■ Fenotipos y proporciones de diferentes tipos de progenie.
SS
1/4 rizado
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Ahora, podemos combinar ambos locus y asignar genotipos a
Alelos letales en la Sección 5 .1 y proporciones para cruza- todos los ratones individuales del cruzamiento:
mientos genéticos simples (cuadro 3-5).
p Yy Ss X Yy Ss
Amarillo, lacio Amari llo, lacio

Pasos de la solución
Probabilidad Probabilidad
a. Este cruzamiento concierne a dos características distintas: Fenotipo Genotipo en cada locus combinada
2
Pista: examine
color y tipo de pelo. Primero, analicemos la herencia an1arillo, lacio YyS_ 3
/3 X /4 = 6/12= ½
las proporciones del color. Se cruzan dos ratones am arillos, que p rodu- an1arillo, rizado Yy SS 2 1
/3 X /4 = 2/12 = 1
/6
de la progenie cen 1/2 + 1/6 = 3/6 + 1/6 = 2/3 de ratones amarillos y 1/4
1 3
para cada rasgo
por separado. + 1/12 = 3/12 + 1/12 = 4/12 = 1/3 de ratones grises. En gris, lacio yyS_ /3 X /4 = 3/12 = ¼
este capítulo aprendimos que suele observarse una gris, rizado yy SS 1 1
/3 X /4 = 1
/12
proporción 2: 1 cuando hay un gen letal recesivo pre-
sente: b. Podríamos llevar a cabo una serie de cruzamientos diferen-
tes pru·a investigar nuestra hipótes.is de que amarillo es letal
Recuerde: por Yyxyy
lo general, un
recesivo y que liso es dominante sobre rizado. Por ejemplo,
gen letal produ- J, un cruzamiento entre dos ratones amarillos cualesquiera
ce una propor-
YY 1/4 muere siempre produce descendencia 2/3 amarilla y 1/3 gris, y un
ción 2: 1.
1/ amarillo se convierte en 2/3 cruzamiento entre dos ratones grises debería producir solo
Yy 2 descendencia gris. Un cruzamiento en tre dos r atones de
yy 1/ gris se convierte en 1/3
4 pelo rizado produciría soJo descendencia de pelo rizado.

Problema 2
En algunas ovinos, la presencia de cuernos depende de un alelo autosómico que es dominante en
los machos y recesivo en las hembras. Se cruza una hembra con cuernos con un macho sin cuer-
nos. Se cruza una de las hembras de la generación Fl resultante con un n1ach o sin cuen1os. ¿Qué
proporción de machos y hembras de la progenie de este cruzamiento tendrá cue1nos?

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al ■ Símbolos de los alelos con cuernos y sin cuernos.
problema?
■ La presencia de cuernos se debe a un gen autosómico que
La pr oporción machos y hen1bras con cuernos de la pro- es dominante en los machos y recesivo en las hembr as.
gerne.
■ Se cruza una hembra con cuernos con un macho sin cuer-
¿Qué información se proporciona para resolver el nos. Se cruza una hembra de la generación F 1 resultante
problema? con un macho sin cuernos para producir la progenie.
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 131

Para obtener ayuda con este problema, repase: En el problema, una hembra con cuernos se cruza con un
Características infl uidas por el sexo y limitadas por el sexo, en macho sin cuernos. A partir del cuadro precedente, observa-
la Sección 5.3. mos que una hembra con cuernos debe ser homocigótica para
el alelo de presencia de cuernos (HH), y un macho sin cuernos
debe ser homocigótico para el alelo de ausencia de cuernos
Pasos de la solución (H+H+); por consiguiente, todos los machos de la generación
F 1 serán heterocigóticos; en la generación F 1, los machos ten-
La presencia de cuen1os en estos ovinos es un ejemplo drán cuernos, y las hembras, no, como muestra el siguiente
Pista: escriba los
genotipos y los de característica influida por el sexo. Dado que los diagrama:
fenotipos asocia- fenotipos asociados con ]os genotipos difieren segú n el
dos para cada sexo, comencemos a resolver este proble1na escribien- p X HH
sexo.
do los genotipos y los fenotipos para cada sexo.
Representaren1os con H el alelo que codifica la presen-
cia de cuernos y con H + el alelo que codifica la ausen-
Recuerde: cuan- cia de estos. En los machos, el alelo para presencia de H+H
do un rasgo es cuernos es dominante sobre el alelo para ausencia de
dominante, tanto Machos con cuernos y he1nbras si n cuernos
el homoc1gótico cuernos, lo que significa que los machos homocigóti-
como el heteroci- cos (HH) y h eterocigóticos (H +H) para este gen tienen
gótico expresan el Luego, se cruza una hembra F1 sin cuernos (H+H) con un
rasgo en sus feno- cuernos. Solo los machos homocigóticos para el alelo
tipos. recesivo de ausencia de cuernos (H +H +) no tienen cuer- macho sin cuernos (H+H+):
nos. En las hen1bras, solo las hembras ho1nocigóticas
para este alelo (HH) tienen cuernos; las hembras hete- H +H X H+H+
rocigóticas (H+H) y bomocigóticas (H+H+) para el alelo de Hembra sin cuernos Macho sin cuernos
ausencia de cuernos no tienen cuernos. El siguiente cuadro
resume los genotipos y los fenotipos asociados:
Machos Hembras
Fenotipo Fenotipo .
s1n cuernos sin cuernos
Ge·notipo masculino femenino
con cuernos sm cuernos
HH con cuernos con cuernos
HH+ con cuernos
.
sm cu ernos Por lo tanto, ½ de los machos de la progenie tendrán cuernos,
ff+H + sm cuernos sm cu ernos pero ninguna hembra de la progenie los tendrá.

Sección 5.1 7. ¿ Qué es la impronta genómica?

l. ¿En qué se diferencian la dominancia incompleta y la codo- 8. ¿Cu ál es la diferencia entre efecto genético materno e
minancia? impronta genómica?
2. ¿Qué es la penetrancia incompleta y qué la causa? 9. ¿Cuál es la diferencia entre un gen influido por el sexo y un
gen que muestra impronta genómica?
Sección 5.2
Sección 5.4
3. ¿Qué es la interacción génica? ¿Cuál es la diferencia entre un
gen epistásico y uno hipostásico? 1O. ¿ Qué características espera observar en un rasgo que pre-
senta anticipación?
4. ¿ Qué es un gen epistásico recesivo?
5. ¿Qué es una prueba de complementación y para qué se utiliza? Sección 5.5

Sección 5.3 11. ¿Qué son las características continuas y cómo aparecen?
6. ¿Qué car acterísticas muestra un rasgo con herencia citoplas-
mática?
132 CAP(TULO 5

Secciones 5.1 a 5.4 (a) (b)

12. Asigne a cada uno de los siguientes términos su definición
correcta (partes a a i).
- - fenocopia - - efecto genético materno
- - pleiotropía - - impronta genómica
- - rasgo poligénico - - rasgo influido por el sexo
- - penetrancia - - anticipación
--rasgo limitado por el sexo
a. porcentaje de individuos con un genotipo particular que
expresan el fenotipo esperado (c)
b. un rasgo determinado por un gen autosómico que se
expresa con mayor facilidad en un sexo
c. un rasgo determinado por un gen autosómico que se
expresa solo en un sexo
d. un rasgo determinado por un efecto ambiental y que
tiene el mismo fenotipo que un rasgo detenninado gené-
ticamente
e. un rasgo determinado por genes de numerosos locus
f. la expresión de un rasgo es afectada por el sexo del pro-
genitor que transmite el gen a la descendencia Color del pelaje: (a) palomino, (b) castaño, (e) cremello. (Parte a: Keith J. Smith/Alamy.
g. el rasgo aparece más temprano o con mayor intensidad Parte b: jiri jura/iStockphoto.com. Parte e: Olga_i/Shutterstock).
en las sucesivas generaciones
h. un gen afecta más de un fenotipo
i. el genotipo materno influye en el fenotipo de la descen- a. LMLM x LMLN
dencia b. L NLN X LNLN
Sección 5.1 c. LMLN X LMLN
d. LMLN X LNLN
*13. Los caballos palominos tienen un pelaje amarillo dorado,
los caballos castaños tienen pelaje n1arrón y los caballos e. LMLM x L NLN
cremellos tienen pelaje casi blanco. Una serie de cruza-
mientos entre los tres tipos diferentes de caballos produjo *15. Asuma que en los seres humanos los lóbulos de la oreja
la siguiente descendencia: largos son un rasgo autosómico dominante que muestra
una penetrancia del 30%. Una persona que es heterocigóti-
Cruzamiento Descendencia ca para lóbulos de la oreja largos se aparea con una perso-
palomino x palomino 13 palominos, 6 castaños, na homocigótica para lóbulos de la oreja normales. ¿ Cuál
5 cremellos es la probabilidad de que su primer hijo tenga lóbulos de
castaño x castaño 16 castaños la oreja largos?
cremello x cremello 13 cremellos
16. El pie bot (pie zambo congénito) es una de las anormali-
palomino x cremello 11 palominos, 11 cremellos
castaño x cremello 23 palominos N."'""' dades esqueléticas congénitas más frecuentes, con una
(,º~ incidencia mundial de alrededor de l cada 1 000 naci-
mientos. Se considera que factores genéticos y no genéti-
a. Explique la herencia de los fenotipos palomino, castaño
cos son responsables del pie bot. C. A. Gurnett y cols.
y cremello en los caballos.
(2008. American Jounral of Human Genetics 83:616-622)
b. Asigne símbolos a los alelos que determinan estos identificó una familia en la que el pie bot se heredaba
fenotipos y enumere los genotipos de todos los proge- como un rasgo autosómico dominante con penetrancia
nitores y la descendencia presentada en el cuadro pre- reducida. Detectaron una mutación en el gen PITXJ , que
cedente. causaba pie bot en esta familia. Mediante investigación del
14. Los alelos LM y LN del locus de grupo sanguíneo MN DNA, deternunaron que 11 Lnietnbros de la fru.nilia pre-
muestran codominancia. Indique los genotipos y los feno- sentaban la mutación de PITXJ , pero solo 8 de ellos tenían
tipos esperados, y sus proporciones, de la progenie resul- pie bot. ¿Cuál es la penetrancia de la mutación de PITXJ
tante de los siguientes cruzamientos. en esta familia?
 Extensiones y modificaciones de los principios básicos 133

*17. Cuando se cruzan un hámster chino con manchas blancas 20. Si hay cinco alelos en un locus, ¿cuántos genotipos puede
y otro há1nster que no tiene manchas, alrededor de 1/ 2 de haber en este locus? ¿ Cuántas clases diferentes de homo-
la descendencia tiene manchas blancas, y 1/ 2 no las tiene. cigóticos habrá? ¿ Cuántos genotipos y homocigotos puede
Cuando se cruzan dos hámsteres con manchas blancas, 2/ 3 haber con ocho aJelos en un locus?
de la descendencia tiene manchas blancas, y 1/3 no las 21. Los pavos tienen plumaje negro, bronce o negro-bronce.
tiene. Analice los resultados de los siguientes cruza1nientos:
a. ¿ Cuál es la base genética de las manchas blancas en los
hámsteres chinos? Progenitores Descendencia
b. ¿Cómo podría producir hámsteres chinos con manchas Cruzamiento 1: negro y bronce todos negros
Cruzamiento 2: negro y negro 3/ bronce, 1/ 4 bronce
blancas de pura raza? 4
Cruzamiento 3: negro-bronce todos negro-bronce
18. A principios del siglo xx, Lucien Cuénot estudió la base
y negro-bronce
genética del color amarillo del pelaje de los ratones (anali- 1/2 negro, 1/4 bronce,
Cruzamiento 4: negro y bronce
zado en las pp. 107-108). Llevó a cabo una serie de cruza- 1
/4 negro-bronce
O( DATOS

mientos entre dos ratones a1narillos y obtuvo lo que consi- 1/2

Cruzamiento 5: bronce bronce, 1/2 negro-bronce
deró una proporción 3: 1 de ratones amarillos respecto de
y negro-bronce
grises en la progenie. El siguiente cuadro presenta los 3/ 1/
Cruzamiento 6: bronce y bronce 4 bronce, 4 negro-bronce
resu ltados reales de Cuénot, j unto con los resultados de
una serie mucho más grande de cruzamientos llevados a ¿ Considera que estas diferencias de pi umaje se deben a
cabo por Castle y Little (W. E. Castle y C. C. Little. 1910. dominancia incompleta entre los dos alelos de un solo
Science 32:868-870). locus? Si su respuesta es afirmativa, con.firme su conclu-
sión asignando símbolos a cada alelo e indicando los
Progenie resultado de cruzamientos de ratones amarillo x amarillo genotipos de todos los pavos de los cruzanuentos. Si su
Progenie Progenie Progenie respuesta es negativa, dé una explicación alternativa y
Investigadores amarilla no amarilla total asigne genotipos a todos los pavos de los cruzamientos.
Cuénot 263 100 363 22. En los conejos, una serie alélica ayuda a determinar el
color del pelaje: C (color completo), cch (chinchilla, color
CastJe y Little 800 435 1235
gris), ch (hünalayo, blanco con extremidades negras) y e
Ambos combinados 1063 535 1598 (albino, todo blanco). E l alelo Ces dominante sobre todos
los demás, cch es dominante sobre c11 y e, c11 es dominante
a. Utilizando una prueba de Ji cuadrado, determine si los sobre e, y e es recesivo respecto de todos los demás alelos.
resultados de Cuénot son significativamente diferentes Esta jerarquía de do1ninancia se puede resumir como
de la proporción 3:1 que pensó que observaba. ¿Son C > cch > c11 > c. Se cruzan los conejos de la siguiente lista
diferentes de una proporción 2: 1? y producen la progenie mostrada. Indique los genotipos de
b. Determine si los resultados de Castle y Little son signi- los progenitores de cada cruzamiento:
ficativamente diferentes de una proporción 3 : l. ¿Son
diferentes de una proporción 2: 1? Fenotipos de los Fenotipos de la
progenitores desce11de11cia
c. Combine los resultados de Castle y Cuénot y determine
a. color completo x albino 1/2
color completo,
si son significativamente diferentes de una proporción 1/ 2 albino
3: 1 y de una proporción 2: 1. 1/ himalayo, 1/2 albino
b. bimalayo x albino 2
d. Ofrezca una explicación para las diferentes proporcio- c. color completo x albino 1/ 2 color completo,
1
nes que obtuvieron Cuénot y Castle. /2 chinchilla
d. color completo x himalayo 1'2 color completo,
*19. En la planta de mijo perla, tres alelos de un solo locus 1/ 4 himalayo, 1/4 albino
determi nan el color: Rp 1 (rojo), Rp2 (violeta) y rp (verde). e. color completo x color 3/ color completo,
4
El rojo es dominante sobre el violeta, y el violeta es domi- completo 1/4 albino
nante sobre el verde (Rp 1 > Rp2 > rp). Indique los fenoti-
pos esperados y las proporciones de la descendencia gene- 23. En este capítulo, consideramos el juicio por paternidad de
rada por los siguientes cruzamientos: Joan Barry contra Charlie Chapli n, y cóm.o, sobre la base
de los grupos de sangre, Chaplin no pudo haber sido el
a. Rp 1/Rp2 x Rp 1/rp
padre de su hijo.
b. Rp 1/rp X Rp2/rp
a. ¿Qué grupos de sangre son posibles para el padre del
c. Rp 11Rp2 X Rp1/Rp2 hijo de Barry?
d. Rp2/rp x rplrp b. Si Chaplin hubiera tenido uno de estos grupos de sangre,
e. rplrp x Rp 1/Rp2 ¿eso habría probado que era el padre del hijo de Barry?
134 CAP(TULO 5

*24. Una mujer tiene grupo de sangre AM. Tiene un hijo cuyo *26. Tatuo Aida investigó la base genética de las variaciones de
grupo de sangre es AB MN. ¿Cuál de los siguientes gru- color del medaka (Aplocheilus latipes), un pez pequeño
pos de sangre no podría tener el padre del niño? Explique natural del Japón (T. Aida. 192 1. Genetics 6:554-573).
su razonamiento. Aida halló que los genes de dos locus (B , by R, r) deter-
Jorge o N minaban el color del pez: los peces con un alelo dominan-
Tomás AB MN te en ambos locus (B_R_) eran marrones, los peces que
Guillermo B MN solo tenían un alelo dominante en el locus B (B _ rr) eran
Claudio A N azules, los peces que solo tenían un alelo dominante en el
Enrique AB M locus R (bb R_J eran rojos, y los peces con alelos recesi-
vos e n ambos locus (bb rr) eran blancos. Aida cruzó un
Sección 5.2 pez horn.o cigótico mruTón con uno hornocigótico blanco.
Luego, realizó un cruzamiento retrógrado entre la genera-
*25. En los pollos, la forma de la cresta está determinada por
ción F 1 y el progenitor homocigótico blanco y obtuvo 228
alelos de dos locus (R , r y P, p ). Se produce una cresta en
peces marrones, 230 peces azules, 237 peces rojos y 222
fo1ma de nuez cuando hay por lo menos un alelo domi-
peces blancos.
nante R en un loc us y por lo menos un alelo dominante P
en un segundo locus (genotipo R_P _). Se produ ce una a. Indique los genotipos de la progenie del cruzamiento
cresta en forma de piña cuando hay por lo 1nenos un alelo retrógrado.
dominante en el pri1ner locus y dos alelos recesivos en el b. Utilice una prueba de Ji cuadrado para comparar los
segundo locus (genotipo R_ pp). Se produce una cresta en números observados de la progenie del cruzamiento
fo1ma de gui sante cuando hay dos alelos recesivos en el retrógrado con el número esperado. ¿ Qué conclusión
primer locus y por lo menos un alelo do1ninante en el se- puede extraer de los resultados de su prueba de Ji cua-
gundo (genotipo rr P _). Si en ambos locus hay dos alelos drado?
recesivos (rr pp), se produce una cresta simple. ¿Qué tipo e. ¿ Qué resultados esperaría de un cruzamiento entre un
de descendencia con respecto al tipo de cresta y en qué pez rojo homocigótico y un pez blanco?
proporciones resultará de los siguientes cruzamientos?
d. ¿Qué resultados esperaría si cruzara un pez rojo homo-
a. RRPP xrrpp d. RrppxRrpp cigótico con un pez azul homocigótico y después reali-
b. Rr Pp x rr pp e. Rr pp X rr Pp zara un cruzruniento retrógrado entre un miembro de la
c. Rr Pp X Rr Pp f. Rr pp X rr pp F 1 y un pez parental rojo homocigótico ?
27. Se cruzó una variedad de amapola (Papaver somniferum
L.) de hojas dentadas con una vruiedad de hoj as normales.
Toda la generación F 1 tenía hojas dentadas. Se entrecruza-
(a) (b) ron dos plru1tas F 1 pru·a producir la F 2 . De la F2 _249 tenían
bojas dentadas, y 16, boj as n ormales. Mencione los geno-
tipos de todas las plantas de Jas generaciones P, F 1 y F 2.
Explique cómo son determinadas las hojas dentadas en la
am apola.
28. E. W. Lindstrom cruzó dos plantas de maíz con almácigos
verdes y obtu vo la siguiente progenie: 3 583 almácigos
verdes, 853 almácigos blanco-verdosos y 260 almácigos
amaiillos. (E. W. Lindstrom. 1921. Genetics 6:91-110).
a. Indique los genotipos de la progenir verde, blanco-ver-
dosa y amru·illa.
b. Explique cómo es determinado el color en estos almácigos.
(c) (d) c. ¿Hay epistasia entre los genes que determinan el color
de los almácigos de maíz? De ser así, ¿qué gen es epis-
tásico y cuál es hipostásico?
*29. A un criador de perros le gustaban los labradores perdi-
gueros amarillos y mruTones. En un intento de producir
cachorros amarillos y marrones, apareó a un labrador
macho 1narrón con un labrador hembra runarillo.
Lrunentablemente, todos los cachon·os generados por este
cruzamiento fueron negros (véase una discusión de la base
genética del color del pelaje en los labradores perdigueros
en las pp. 111-1 12).
a. Explique este resultado.
Forma de la cresta: (a) nuez, (b) piña, (e) guisante, (d) simple. (Partes a y d: Robert
Dowling/Corbis. Parte b: Robert Maier/Animals Animals. Parte e: Dapne Godfrey b. ¿ Cómo podría el criador producir labradores amarillos
Trust/Anim als Anim als). y marrones?

{a) {b)
Sección 5.3
{e)
*35. En algunas cabras, la presencia de cuernos es producida
Color de pelo de los cobradores o perdigueros labradores: a) negro, b) marrón,
e) amarillo. (a y b, Juniors Bildarchiv/Alamy. e, Byatt-Norman/Shutterstock).
30. Cuando se cruzó un labrador perdiguero hembra amarillo
con un macho marrón, la mitad de los cachorros fueron
1nru-rones, y la 1nitad amariJl a. La 1nisma hembra, cuando
se apru·eó con un macho marrón diferente, produjo solo
descendencia marrón. Explique estos resultados.
*31. Se cruza una planta de zapallo de verano que produce fru-
tos en forma de disco con una planta que produce frutos
alargados. Toda la generación F 1 tuvo frutos en forma de
disco. Cuando se entrecruza la generación F 1, se produce
progenie F2 con la sigujente proporción: 9/ 16 frutos en
forma de disco: 6/ 16 frutos esféricos: 1/ 16 frutos largos.
Indique los genotipos de la progenie F 2•
32. Algunas plantas de guisantes dulces tienen flores violetas;
otras, flores blancas. Se cruza una variedad homocigótica
de guisantes que tiene flores violetas con una variedad
h omocigótica que tiene flores blancas. Toda la generación
F 1 tiene flores violetas. Cuando se autofecundan estas
plantas F 1, la generación F 2 aparece con una proporción
de 9/i6 violetas: 71i6 blancas.
a. Mencione los genotipos de las flores violetas y blancas
de estos cruzamientos.
b. Dibuje una hipotética vía bioquímica para explicar la
producción de flores violetas y blancas en los guisantes
dulces.
*33. Remítase a las páginas 117-119 para una discusión sobre
la manera de determinación del color y el patrón del pela-
je en los perros.
a. ¿Por qué tienen color rojizo los setter irlandeses?
b. ¿Puede producir crías manchadas el cruzamiento de un
caniche con cualquier otra raza? ¿Por qué o por qué
no?
Extensiones y modificaciones de los principios básicos 135
c. Si se cruza un San B ernardo con un dóberman, ¿cuál
será el color del pelaj e de la descendencia: ho1nogéneo,
a1narillo, en silla de montar o bicolor?
d. Si se cruza un rottweiler con un labrador perdiguero,
¿cuál sería el color del pelaje de la descendencia: sóli-
do, amarillo, en silla de montar o bicolor?
34. La pubertad precoz limitada a los varones se debe a un
alelo autosómico limitado por el sexo, raro (P ), que es
dominante sobre el alelo para pubertad normal (p) y que
se expresa solo en varones. Guillermo presenta pubertad
precoz, pero su hermano Juan y su hermana Beatriz entran
en la pubertad a la edad habitual, entre los 1O y 14 años.
Si bien la madre y el padre de Guillermo tu vieron puber-
tad normal, dos de sus tíos matemos (los hermanos de su
madre) presentaron pubertad precoz. Todos los abuelos de
Guillermo tuvieron pubertad normal. Mencione los genoti-
pos más probables de todos los familiares mencionados de
esta familia.
por un alelo autosómico que es don1inante en los machos
y recesivo en las hembras. Se cruza una hembra con cuer-
nos con un 1nacho sin cuernos. Se entrecruza la descen-
dencia F 1 para producir la generación F 2. ¿Qué proporción
de las he1nbras F 2 tendrá cuernos?
36. En las cabras, la barba es producida por un alelo autosó-
mico que es dominante en los machos y recesivo en las
hembras. Utilizare1nos el símbolo Bb para el alelo de pre-
sencia de barba y s+ para el alelo de ausencia de barba.
Otro alelo autosómico que se segrega independientemente
y produce pelaje negro (W) es dominante sobre el alelo
para pelaje blanco (w). Indique los fenotipos y sus propor-
ciones esperadas para los siguientes cruzrunientos.
a. Macho B +Bb Ww x hembra JJ+Bb Ww
b. Macho B +Bb Ww x hembra s+Bb ww
c. Macho B +B+ Ww x hembra B hBb Ww
d. Macho B +Bb Ww x hembra B bBb ww
37. El plumaje de gallo en los pollos es un rasgo autosómico
recesivo limitado por el sexo a los machos. Enumere todos
los genotipos posibles de los pollos mostrados en:
a. Figura 5-13a
b. Figura 5-13b
c. Figura 5-13c
38. J. K. Breitenbecher (1921, Genetics 6:65-86) investigó la
base genética de la variación del color en el gorgojo de
cuatro manchas (Bruchus quadrimaculatus). Los gorgojos
eran rojos, negros, blancos o habano. Breitenbecher descu-
brió que cuatro alelos (R, Rb, Rw y r) de un solo locus
determinaban el color. Los alelos muestran una jerarquía
de dominancia en la que el rojo (R) es dorninante sobre
todos los otros alelos, el negro (Rb) es dominante sobre el
blanco (Rw) y el habano (r) , y el habano es recesivo res-
136 CAP(TULO 5

pecto de todos los demás (R > Rb > Rw > r). Los siguien- 41. La hipospadias, un defecto congénito de los varones
tes genotipos codifican cada uno de los colores: humanos en el que la uretra desemboca en el cuerpo del
pene, en lugar de en su extremo, se debe a un gen autosó-
rOJO mico don1inante en algunas fanlilias. Las hembras que tie-
negro nen el gen no muestran ningún efecto. ¿Es este defecto
blanco congénito un ejemplo de a) un rasgo ligado al cromosoma
rr habano X , b) un rasgo ligado al cromosoma Y, c) un rasgo limita-
do por el sexo, d) un rasgo influido por el sexo o e) un
La variación de color en esta especie está limitada por el sexo a efecto genético materno? Explique su respuesta.
las he1nbras: los machos tienen genes de color, pero siempre son 42. En los unicornios, dos locus ausotómicos interactúan para
de color habano independientemente de su genotipo. Indique determinar el tipo de cola. Un locus controla la presencia
todos los genotipos posibles de los progenitores para cada uno de cola; el alelo para cola (T) es do1ninante sobre el alelo
de los siguientes cruzamientos llevados a cabo por para ausencia de cola (t). Si el unicornio tiene una cola,
Breitenbecher. entonces alelos de tm segundo locus determinan si la cola
es enroscada o recta. El granjero Baldridge tiene dos uru-
Progenitores Progenie cornios con colas enroscadas; cuando los cruza, 1/2 de la
a. 2 habano x o habano 78 2 rojas, 70 2 bancas, 184 o habano progenie tiene cola enroscada, ¼ tiene cola recta, y ¼ no
b. 2 negra x o habano 151 2 rojas, 49 2 negras, 61 2 habano, tiene cola. Indique los genotipos de los progenitores y la
249 o habano progerue del cruzamiento del granjero Baldridge. Explique
c. 2 blanca x o habano 32 2 rojas, 31 o habano cómo obtuvo la proporción fenotípica 2: 1: 1 en este cruza-
d. 2 negra x o habano 3586 2 negras, 1282 2 habano, miento.
4791 o habano 43. En 1983, un criador de ovejas de Oklahoma advirtió en un
e. 2 blanca x o habano 594 2 blancas, 189 2 habano, rebaño un carnero que tenía más masa muscular en los
862 o habano cuartos traseros. Muchos de las crías de este carnero tenían
f. 2 negra x o habano 88 2 negras, 88 2 habano, el rnisn10 rasgo, que pasó a conocerse como mutante
186 o habano callipyge (callipyge significa "nalgas hermosas" en griego).
g. 2 habano x o habano 47 2 blancas, 51 2 habano, La mutación que causó el fenotipo callypyge se mapeó,
100 o habano finalmente, en una posición del cromosoma 18 ovino.
h. 9 roja x o habano 1932 9 rojas, 592 9 habano, Cuando se cruzaron los machos callipyge descendientes
2586 o habano del carnero mutante origi nal con hembras normales, pro-
i. 2 blanca x o habano 13 2 rojas, 6 2 blancas, 5 2 habano, dujeron la siguiente progenie: ¼ machos callipyge, ¼
19 o habano hembras callipyge, ¼ machos normales y 1/ 4 hembras
j. 2 roja x o habano 190 2 rojas, 196 2 habano, 311 o habano normales. Cuando se cruzaron las hembras callipyge
k. 2 negra x o blanca, 1412 2 negras, 502 o blancas, descendientes del carnero mutante original con n1achos
2 habano 1766 o habano normales, todas las crías fueron normales. El análisis
de los cromosornas de esta descendencia de hembras
*39. El enrollamiento de la concha del caracol Lymnaea pere- callipyge mostró que la mitad de ellas recibieron un cro-
gra ( comentado en la introducción del capítulo) se debe a mosoma 18 con el alelo que codifica callipyge de su
un efecto genético materno. Un alelo autosómico para una madre. Proponga una explicación para la herencia del
concha dextrógira (s+) es dominante sobre el alelo para la alelo callipyge. ¿Cómo podría investigar su explicación?
concha levógira o levógira (s). Un caracol mascota de
nombre Marta tiene concha levógira y se reproduce solo Sección 5.5
como hembra (los caracoles son hermafroditas). Indique
cuáles de las siguientes afrr1naciones son verdaderas y 44. ¿Cuál de las siguientes afirmaciones es un ejemplo de
cuáles son falsas. Explique su razonanliento en cada caso. fenocopia? Explique su razonamiento.
a. El genotipo de Marta debe ser ss. a. La fenilcetonuria se debe a una mutación recesiva que
causa piel clara, así como discapacidad intelectual.
b. El genotipo de Marta no puede ser s+s+.
b. La talla humana es influida por genes de muchos locus
c. Toda la descendencia de Marta debe ser levógira. diferentes.
d. Al menos parte de la progenie de Marta debe ser levógira. c. Las plantas enanas y las hojas moteadas de los tomates
e. La madre de Marta debe haber sido levógira. son causadas por genes distintos que están ligados.
f. Todos los hennaoos de Marta deben ser levógiros. d. Las alas vestigiales de Drosophila son producidas por
40. Si tiene lugar la autofecundación de los caracoles dextró- una n1utación recesiva. Este rasgo también es produci-
giros de F2 con genotipo s+s de la figura 5-17, ¿qué feno- do por la alta temperatura durante el desarrollo.
tipos y proporciones se espera que aparezcan en la proge- e. En los seres humanos, la inteligencia es influida por
nie? factores tanto genéticos como ambientales.

*45. En algunos perros, las orejas largas son un rasgo autosó-
nuco dominante. Se aparean dos perros y producen una
camada en la que el 75 % de los cacho1Tos tienen orejas
largas. De los perros con orejas largas de esta camada, se
sabe que 1/ 3 corresponde a fenocopias . ¿Cuáles son los
genotipos más probables de los dos progenitores de esta
camada?
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 5.1
47. Desde hace tiempo, las palomas han sido objeto de estudios
genéticos. De hecho, Charles Darwin crio palomas con la
esperanza de revelar los principios de la h erencia, pero no
tuvo éxito. A p1incipios del siglo XX, una se1ie de investi-
gaciones genéticas descubrieron la base hereditaria de la
variación del color de estas aves. W. R. Horlancher estaba
interesado en la base genética del patrón de color nulano,
que consiste en una mezcla de puntos rojos y negros en las
plumas. Llevó a cabo los siguientes cruzamientos para in-
vestigar la relación genética entre color del plu1naje milano,
rojo y negro (W. R. Horlancher. 1930. Genetics 15:312-346).
Cruzamiento Descendencia
milano x milano 16 milano, 5 negro, 3 rojo
nlilano x negro 6 nlilano, 7 negro
rojo x milano 18 rojo, 9 milano, 6 negro
a. Sobre la base de estos resultados, postule una hipótesis
para explicar la herencia del color milano, negro y rojo
Extensiones y modificaciones de los principios básicos 137
46. Se cruza la mosca con alas vestigiales mostrada en el
ángulo inferior izquierdo de la figura 5-19 con la mosca
de alas normales mostrada en el ángulo superior derecho
de la figura. Si se cría la progenie a 31 ºC , ¿qué porcentaje
tendrá alas vestigiales?
del plu1naje de las palomas. (Pista: asuma que participan
dos locus y hay algún tipo de epistasia).
b. Para cada uno de los cruzamientos anteriores, investigue
su hipótesis empleando una pn1eba de Ji cuadrado.
Sección 5.3
48. Suponga que está criando a una colonia de ratones en
un instituto de investigación genética y un día descubre un
ratón con orejas torcidas. Usted cruza a este ratón de orejas
torcidas y observa que el rasgo es hereditario. Tanto los
ratones macho como los ratones hembra tienen orejas torci-
das, pero cuando cruza a un macho de orejas torcidas con
una hembra de orejas normales, obtiene resultados diferen-
tes de los obtenidos cuando cruzó a una hembra de orejas
torcidas con un macho de orejas nonnales: los cruzamientos
recíprocos dan resultados diferentes. Describa cómo deter-
minaría si este rasgo se debe a un gen ligado al sexo, un
gen influido por el sexo, un efecto genético materno, un gen
de herencia citoplasmática o a impronta genómica. ¿Qué
cruzamientos realizaría y qué resultados esperaría con estos
diferentes tipos de herencia?
 6
Análisis de árboles genealógicos,
aplicaciones y pruebas genéticas

El misterio de las huellas digitales

desaparecidas
En 2007, una mujer suiza de 29 años intentó ingresar en los
Estados Unidos. Si bien su aspecto coincidía con la fotogra-
fía de su pasaporte, no logró pasar el control de huellas digi-
tales, n o porque estas con·espondieran a las de un ten·orista,
sino más bien porque no tenía huellas digitales: sus dedos
carecían totalmente de cualquier huella. Fue demorada
::;;_,.,,,.~::.::·--.::
--
- - ....:..:·
durante va1ias horas mientras los sorprendidos funcionarios
de inmigración trataban de decidir qué hacer con una perso-
na sin huellas digitales.
Las huellas digitales son uno de nuestros rasgos más per-
manentes y únicos. No hay dos individuos, ni siquiera geme-
los idénticos, que con1partan las mismas huellas digitales.
Desde el punto de vista técnico, las huellas digitales se
denominan crestas epidérmicas o patrones dermatoglíficos, y
se localizan en dedos de la mano, dedos de los pies, palmas
y plantas. Las crestas epidérmicas aparecen mucho antes del
nacimiento (están totalmente formadas 17 semanas después
de la concepción) y son permanentes durante la vida. L a
investigación muestra una clara influencia de la herencia en
los patrones de huellas digitales, pero también pueden
desernpeñar un papel factores aleatorios. Uno de los prime-
ros científicos en investigar las hue.llas digitales fue Francis
Galton, un primo de Charles Darwin. A fi nes del siglo XIX,
Galton estableció que no había dos individuos que tuvieran
las mismas huellas digitales, y mostró que las huellas digita-
les de los familiares son más sünilares que las de personas
sin relación de parentesco.
Las huellas digitales son únicas de cada persona. Unas pocas personas
La ausencia completa de huellas digitales, como la obser-
presentan un cuadro conocido como adermatoglifia (ADG), en el que hay
ausencia completa de huellas digitales; el cuadro se hereda como un rasgo
vada en la mujer suiza del aeropuerto, es un cuadro suma-
autosómico dominante. Aquí se muestra una huella digital humano superpues-
mente raro conocido como adermatoglifi a (ADG). Apodada
ta sobre información de la secuencia de DNA (PHANIE/Science Source). "enfermedad del retraso en inmjgración" debido a la compli-
cación que provoca cuando personas con este cuadro inten-
tan cruzar fronteras, la ADG se ha docun1entado solo en
unos pocos miembros de cuatro fa1nilias en todo el mundo.
En la ADG, las hu ellas digitales están ausentes en el momento del naci miento y nunca apare-
cen. Por lo demás, el trastorno no causa ningún efecto nocivo.
En 2011, genetistas de Israel y Suiza resolvieron el misterio de las huellas digitales desapa-
recidas de las personas con ADG. Janna Nousbeck y cols. exarninaron el cuadro en una familia
suiza grande, en la que algunos miembros tenían huellas digitales normales, y otros miembros
carecían por completo de ellas (fig. 6-1). En esta familia, la ADG presenta las características
distintivas de un rasgo autosómico dominante: afecta por igual a varones y mujeres, no saltea
generaciones y todas las personas con el trastorno ti enen un progenitor que también lo presen-
ta. Los investigadores tom aron muestras de sangre de los familiares que no tenían huellas
digitales y de aquellos con huellas digitales normales. Extrajeron DNA de la sangre y
139
140 CAPITULO 6
1 genotipificaron a los mi embros de la frunilia para 6000 polimor-
11
1 2 4 5
3
111
1 2 3 4 5 6 7 8 9 gen reveló que los miembros de la familia con ADG presenta-
IV
1 2
Figura 6-1. Árbol genealógico de una familia suiza con adermatogli-
fia (ausencia de huellas digitales). Los cuadrados representan varones;
los círculos, mujeres. Los cuadrados y los círculos coloreados corresponden
a personas con adermatoglifia.
L a ausencia de huellas digitales es solo uno de una gran can-
tidad de r asgos y enfermedades humanos que en la actuali-
dad son el foco de investigación genética exhaustiva. En este
capítulo, considerru110s cru·acterísticas genéticas humanas y exa-
mi na mos tres técnicas importantes e mpleadas por los genetistas
para investigarlas: árboles genealógicos, estudi os de gemelos y
estudios de adopción. Al final del cap ítulo, veremos cómo es
posible utilizar la información reunida con estas técnicas en el
asesoramiento genético y el diagn óstico prenatal.
A medida que lea este capítulo, recuerde que muchas carac te-
1isticas un portantes son infl uidas tanto por genes como por el ru11-
bie nte, y siempre es difícil separar estos factores en los seres hu-
manos. Los esh1dios de gemelos y personas adoptadas tienen por
objeto distinguir los efectos de los genes y del ambiente, pero los
estudios de este tipo se basan en presunciones que pueden ser
difíciles de cumplir pru·a algunas cru·acterísticas humanas, en par-
tic ular las conductuales. Por lo tanto, sie mp re es prudente inter-
pretar con cautela los resultados de estos estudios.
6.1 El estudio de la genética en seres humanos
se ve limitado por las características especiales
de la biología y la cultura humana
Los seres humanos son, a la vez, los mejores y los peores organis-
mos para el estudio genético . Por una parte, sabemos más acerca
de la anatomía, la fisiología y la bioquímica humana de lo que
sabemos acerca de la mayoría de los den1ás orgru1isn1os, de n1ane-
ra que existen numerosos rasgos bien caracterizados para estu-
dios. A menudo, las familias tienen registros detall ados acerca de
sus mie mbros que se extienden a muchas generaciones prev ias.
Además, una serie de enfermedades humanas impo1tantes tienen
un componente genético y, por consiguiente, hay un tremendo
incentivo para conocer la herencia hu1nana. Por otra p arte, el estu-
dio de las características genéticas humanas plantea algunos obs-
táculos de importancia.
Pri1nero, no son posibles los apareamientos controlados. Con
otros organis1nos, los gene tistas realizan cruzamientos específicos
para investigar sus hipótesis sobre la herencia. Por ejemplo, hen1os
fismos de nucleótido úni co (SNP, single nucleotide polym orp-
hisms), qu e son secuencias de DNA que varían en un solo
nucleótido. Comparando la presencia de SNP de los miembros
de la familia con huellas digitales y sin ellas, pudieron determi-
nar que el gen para la ADG se localizaba en un intervalo especí-
fico del brazo lru·go del cromosoma 4 . U no de los genes de esta
región es SMARCADI , que codifica una forma corta de una pro-
teína hallada exclusivamente en la piel. La secue nciación del
ban una n1utación no observada en aquellos con huellas digita-
les. La mutación provoca coite y en1palme anormal del RNA
transcrito del gen, lo que detennina que el RNA sea menos esta-
ble. No se sabe cómo la menor estabilidad de este RNA lleva a
la ADG , pero los cie ntíficos esperan que la identificación de
este gen permita comprender mej or cómo se desarrollan las hue-
llas digitales.
visto cómo el cruzamiento de prueba ofrece una manera convenien-
te para determinar si un organismo con un rasgo dominante es ho-
mocigótico o heterocigótico. Lamentablemente (por lo menos para
el genetista), los aparean1ientos entre seres humanos suelen de-
pender del amor, las expectativas fruniliares o, e n ocasiones, de su-
cesos accidentales, más que de los requerimientos de un genetista.
Otro obstáculo es que los seres humanos tienen un tiempo de
generación prolongado. Normalmente, la edad reproductiva hu-
mana no se alcanza hasta 10-14 años después del nacimiento, y la
mayoría de las personas no se reproducen hasta los 18 años de
edad o n1ás; por consiguiente, el tien1po de generació n de los
seres humanos en general es de alrededor de 20 años. Este largo
tiempo de generación implica que, incluso si los genetistas pudie-
ran controlar los cruzamientos humanos, tendrían que aguardar
un pro1nedio de 40 años solo para observar la progeilie F2 . En
ca1nbio, el tiempo de generación en la Drosophila es de 2 sema-
nas; en las bacterias, es de solo 20 1n inutos.
Por último, las familias humanas suelen ser de pequeño ta ma-
ño. La observación aun de las proporciones genéticas simples que
aprendimos e n el capítulo 3 requeriría un número sustancial de
progenie de cada familia. Cuando los padres tienen solo 2 hijos,
la detección de una proporción 3 : 1 es in1posible. Aun una familia
muy numerosa, con 10-1 5 hijos, no permitiría reconocer una pro-
porción dihíbrida 9 :3 :3: 1.
Si bien estas limitaciones especiales to1nan más comp lej os los
estudios genéticos en seres humanos, el conocimiento de la he-
rencia humana es importantísimo. Por lo tanto, los genetistas se han
visto forzados a desarrollar técnicas singularmente adecuadas a
la bio logía y la cultura de los seres hu1nanos. ~ SOLVER
EL PROBLEMA 18
CONCEPTOS
Si bien los principios de la herencia son los mismos en los seres huma-
nos que en otros organ ismos, el estudio de la herencia humana se ve
limitado por la imposibilidad de controlar los cruzamientos genét icos,
el largo tiempo de generación y el pequeño número descendientes.
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas 141

6.1 Los genetistas suelen usar árboles

genealógicos para estudiar la herencia Sexo Sexo Sexo desconocido
masculino femenino o no especificado
de características en los seres humanos
Una técnica in1portante utilizada por los genetistas para estudiar
la herencia bu1nana es el análisis de árboles genealógicos. Un
Persona no afectada
□ o ◊
árbol genealógico es una representación gráfica de la historia de
una familia; en esencia, un diagr ama que reseña la herencia de
una o más características. Cuando se observa una característica o
enfermedad particular en una persona, un genetista a menudo es-
Persona afectada
con el rasgo

Portador obligado
- ♦
tudia a la familia de esta persona afectada dibujando un árbol
genealógico. La palabra pedigrí solo es admisible cuando se apli-
(port a el gen pero
no expresa el rasgo)
[!] @ ~
ca a animales, no a seres humanos. Portador asintomático
(no afectado en este
momento, pero puede [D G)
Símbolos usados en los árboles genealógicos expresar el rasgo más adelante)

La figura 6-2 resume los símbolos que suelen usarse en los árbo-
les genealógicos. En un árbol genealógico, los cuadrados repre-
Múltiples personas (5) [I] 0 0
sentan a varones; los círculos, a mujeres. Una lú1ea horizontal t:ra-
zada entre dos símbolos que representan a un varón y a una n1uj er
indica un apareamiento; los hij os están conectados con sus proge-
Persona fallecida
JZ[ 0
nitores por líneas verticales que se extienden hacia abajo desde
Probando (primer miembro
los progenitores. El árbol genealógico presentado en la figura
6-3a ilustra a una familia con síndrome de Waardenburg, un tipo
afectado de la familia
atendido por un genetista)
.,,
p
autosó.mico dominante de sordera que puede acompañarse de
piel clara, un mechón de .flequillo canoso y problemas visuales ?
(fig. 6-3b). Las personas que muestran el rasgo de interés se re-
presentan con círculos y cuadrados coloreados; en el árbol gene-
Antecedentes fami liares
de la persona desconocidos
□ o
alógico de la figura 6-3a, los símbolos coloreados representan a
1
los miembros de la familia con síndrome de Waardenburg. Los Familia: padres y
mie1nbros no afectados se representan con círculos y cuadrados tres hijos: un varón 1 2
blancos. La persona a partir de la cual se inicia el árbol genealó- y dos mujeres en
orden de nacimiento 11
gico se deno1ni na probando (caso índice) y por lo general se la
señala con una flecha (IV-2 en la fig. 6-3a).
1 2 3
Miremos en forma detenida la figura 6-3 y consideremos algu-
nas otras características de un árbol genealógico. Cada genera-
ción de un árbol genealógico se identifica con un número roma- Adopción (los corchetes
encierran a personas adoptadas;
no; dentro de cada generación, se asignan número arábigos a los la línea interrumpida denota
mi e1nbros de la familia y se enumera a los hijos de cada fa milia padres adoptivos; las líneas •
por orden de nacimiento de izquierda a derecha. La persona II-4,
un hombre con síndrome de Waardenburg, se apareó con II-5, una
continuas indican padres
biológicos)
[O
mujer no afectada, y tuvieron cinco hijos. El mayor de sus hijos
Idénticos No idénticos Desconocidos
es ill-8, un varón con síndrome de Waardenburg, y el menor es
ill-14, una mujer no afectada. L.:►:..!!!:!!!!:::!!:!!=.!!!!:::!:!!:!:::!~!E:::!!!:!!!!~~~~

Análisis de árboles genealógicos

Gemelos
db cib db
La limitada cantidad de descendientes de la mayoría de las fami- 1 2
lias humanas implica que, en general, es imposible discernir pro-
porciones n1endelianas claras en un único árbol genealógico. El Consanguinidad
11
análisis de árboles genealógicos requiere un cierto grado de inda- (apareamiento entre
gaci ón genética, basada en el reconocimiento de patrones asocia- personas emparentadas) 2 3
dos con diferentes modos de herencia. Por ejemplo, los rasgos
autosómicos dominantes deben aparecer con igual frecuencia en 111
an1bos sexos y no deben saltear generaciones, siempre que el
rasgo tenga penetrancia completa (véase p. 107 del cap. 5) y no 1 2
sea influido por el sexo (véanse pp. 119-120 del cap. S). Indica
Ciertos patrones pueden excluir la posibilidad de un modo par- consanguinidad
ticular de herencia. Por ejemplo, un hijo hereda su cromosoma X
de la madre. Si observamos un rasgo que se transmite de padre a Figura 6-2. En los árboles genealógicos, se utilizan símbolos conven-
hijo, podemos descartar la posibilidad de herencia ligada al ero- cionales.
142 CAPITULO 6

En un árbol genealógico, cada Dentro de cada generación, los familiares Los símbolos coloreados representan
generación se identifica con un se identifican con número art:lbigos. familiares con síndrome de Waardenburg ...

(a) {b)
... y los símbolos ~
1 blancos representan
1 2 miembros no afectados.

11

3 4 5

111

5 6 9 10 11 12 13

IV

1~ 2 3 4 5 9 10 11 12 13 14 15
p
Los hijos de cada familia se enumeran de Figura 6-3. El síndrome de Waardenburg (a} se hereda como un rasgo autosómico
izquierda a derecha por orden de nacimiento. dominante y (b) se caracteriza por sordera, piel clara, problemas visuales y flequi-
llo canoso,. El probando (P) es la persona a partir de la que se inicia este árbol genealógi-
co. (Cortesía de Guy Rowland).

mosoma X. En las siguientes secciones, se asume que los rasgos
analizados tienen penetrancia completa y son raros.
Rasgos autosómicos recesivos
Por lo general, los rasgos autosómicos recesivos aparecen con
igual frecuencia en ambos sexos (a menos que la penetrancia
difiera en varones y mujeres) y solo se expresan cuando una per-
sona hereda dos alelos para el rasgo, uno de cada progenitor. Si el
rasgo es infrecuente, la 1nayoría de los progenitores de descen-
dientes afectados son heterocigóticos y no están afectados; en
consecuencia, el rasgo parece saltear generaciones (fig. 6-4). Con
frecuencia, un alelo recesivo puede transmitirse durante una serie
de generaciones sin que el rasgo aparezca en el árbol genealógi-
co. Siempre que ambos progenitores son heterocigóticos, se espe-
ra que alrededor de un cuarto de la descendencia exprese el rasgo,
tados por un rasgo autosómico recesivo, toda la descendencia es-
tará afectada.
Cuando un rasgo recesivo es raro, las personas ajenas a la fan1i-
lia suelen ser homocigóticas para el alelo normal. Por lo tanto,
cuando una persona afectada se aparea con alguien fuera de la
fan1ilia (aa X AA), en general ninguno de los hijos presentará el
rasgo, aunque serán portadores (es decir, heterocigóticos). Es más
probable que un rasgo recesivo aparezca en un ár bol genealógico
cuando se aparean dos personas que pertenecen a la misma fami-
lia, porque hay mayor probabilidad de que an1bos progeni tores
tengan el mismo alelo recesivo. El apareamiento entre personas
estrechamente emparentadas se denomina consanguinidad. En el
árbol genealógico presentado en la figura 6-4, las personas Ill-3
y III-4 son primos hermanos y a1nbos son heterocigóticos para el
alelo recesivo; cuando se aparean dos heterocigotos, se espera que
1/4 de sus hijos tengan el rasgo recesivo.

pero esta proporción no será evidente a menos que la fami lia sea
numerosa. En el raro caso de que ambos progenitores estén afee-
CONCEPTOS

Los rasgos autosómicos Los rasgos autosómicos recesivos aparecen con igual frecuencia en
1 recesivos suelen aparecer varones y mujeres. Los hijos afectados suelen nacer de progenitores
1 2 por igual en varones y no afectados que son portadores del gen para el rasgo, y el rasgo
mujeres ... tiende a saltear generaciones. Los rasgos recesivos aparecen con ma-
11 yor frecuencia en los descendientes de matrimonios consanguíneos.

1 2 3 4 5 ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
111 Primos ...y tienden
a saltear A menudo, los rasgos autosómicos recesivos aparecen en árboles ge-
generaciones. nealógicos en los que ha habido apareamientos consanguíneos, por-
1 2 3 4 5
que estos rasgos
IV Es más probable que a. tienden a saltear generaciones;
los rasgos autosómicos b. aparecen solo cuando ambos progenitores tienen una copia del
reces1vos aparezcan en
1 2 3 4 la progenie de padres gen para el rasgo, lo que es más probable cuando los progenito-
emparentados. res están emparentados;
c. por lo general, se observan en niños nacidos de padres no afectados;
Figura 6-4. En general, los rasgos autosómicos recesivos aparecen d. aparecen por igual en varones y mujeres.
con igual frecuencia en ambos sexos y parecen saltear generaciones.
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas
Una sene de enfermedades metabóJicas humanas se heredan
co1no rasgos autosón1icos recesivos. ·una de ellas es la enfermedad
de Tay-Sachs. Los niños con esta enfermedad impresionan sanos en
el momento del nacimiento, pero se vuelven indiferentes y débiles
ah·ededor de los 6 n1eses de edad. Su estado físico y neurológico
empeora de manera gradual y lleva a la ceguera, la sordera y, final-
n1ente, la muerte a los 2-3 años de edad. La enfer1nedad se debe a
la acumulación cerebral de un lipido denominado gangliósido ~2-
El gangliósido GM2, un componente normal de las células cere-
brales, en general es degradado por una enzima denominad a
hexosaminidasa A, pero los niños con enfermedad de Tay-Sachs
no tienen esta enzima. La acumulación excesiva de gangliósido
CiM.2, en el cerebro causa edema y, por último, síntomas new·ológí-
cos. Los heterocigotos tienen solo una copia normal del alelo que
codifica hexosamioidasa A y producen aproximadamente la mitad
de la cantidad normal de la enzima. Sin embargo, esta cantidad es
suficiente para garantizar la degradación normal del gangliósido
ÜM.2,, y los heterocigotos suelen ser sanos.
Rasgos autosómicos dominantes
Los rasgos autosómicos dominantes aparecen en ambos sexos con
igual frecuencia, y ambos sexos son capaces de transmitirlos a su
descendencia. Toda persona con un rasgo dominante debe haber
heredado el alelo de por lo 1nenos uno de sus progenitores; por lo
tanto, los rasgos autosómicos dominantes no saltean generaciones
(fig. 6-5). Las excepciones a esta regla surgen cuando las perso-
nas adquieren el rasgo por una mutación nueva o cuando el r asgo
tiene penetrancia reducida.
Si un alelo autosómico dominante es raro, la mayoría de las
personas que presentan el rasgo son heterocigóticas. Cuando un
progenitor está afectado y es heterocigótico, y el otro progenitor
no está afectado, alrededor de ½ de la descendencia estará afec-
tada. Si ambos progenitores expresan el rasgo y son heterocigóti-
cos, alrededor de 3/4 de los hijos estarán afectados. Las personas
no afectadas no transmiten el rasgo a su descendencia, aunque el
rasgo tenga penetrancia con1pleta. En la figura 6-5, observamos
que ni nguno de los descendientes de II-4 (que no está afectado)
tiene el rasgo.
CONCEPTOS
Los rasgos autosómicos dominantes aparecen con igual frecuencia en
ambos sexos. Una persona afectada tiene un progenitor afectado (a
menos que la persona presenta mutaciones nuevas), y el rasgo no sal-
t ea generaciones. Las personas no afectadas no transmiten el rasgo.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿Cuándo podría observar que un rasgo autosómico dominante saltea
una generación?
Un rasgo que suele considerarse autosórnico donúnante es la
lúpercolesterolemia fanúliar, una enfern1edad hereditatia que
causa un gran aumento del colesterol sanguíneo debido a un
defecto del transporte de colesterol. El colesterol se transporta por
todo el organismo en pequeñas partículas so lubles denominadas
lipoproteínas (fig. 6-6). Una de las principales lipoproteínas para
143
1 Los rasgos autosómico~
dominantes aparecen por
1 2 igual en varones y mujeres.
11
2 3 4 5
1
111
1 2 3 4 5 10 11 12 13
IV
1 2 3 4 5 6
Las personas no afectadas Las personas afectadas tienen
por lo menos un progenitor
no transmiten el rasgo.
afectado.
Figura 6-5. Los rasgos autosómicos dominantes suelen aparecer con
igual frecuencia en ambos sexos y no saltean generaciones.
el transporte del colesterol es la lipoproteína de baja densidad
(LDL). Cuando una n1olécula de LDL llega a una célula, se une
al receptor de LDL, que después n1oviliza a la LDL a través de la
membrana celular hacia el interior del citoplasma, donde es de-
gradada y libera su colesterol para que sea utilizado por la célula.
Sobreviene hipercolesterolemía familiar cuando hay un defecto
del gen que normalmente codifica el receptor de LDL. Por lo
general, se consider a que es un trastorno autosómico dominante,
porque los heterocigotos tienen deficiencia de receptores de LDL
y elevadas concentraciones sangu íneas de colesterol, lo que indu-
ce mayor riesgo de arteriopatía coronaria. Las personas heteroci-
góticas para hipercolesterolernia familiar tienen concentraciones
sanguíneas de LDL que duplican las normales y suelen tener ata-
ques cardíacos hacia los 35 años de edad.
Muy rara vez, una persona hereda dos alelos defectuosos para
el receptor de LDL. Estas personas no tienen ningún receptor fun-
cional de LDL; sus concentraciones sanguíneas de colestero l
superan más de seis veces las normales y pueden suftir un ataque
cardíaco ya a los 2 años de edad y casi de manera inevitable hacia
los 20 años. Como los homocigóticos presentan cuadros más gra-
ves que los heterocigóticos, se dice que la hipercolesterolemia
familiar tiene do1ninancia inco1npleta. Sin embargo, rara vez se
observan homocigóticos, y la forma heterocigótica de la enferme-
dad aparece como un rasgo dominante simple en la mayoría de
los árboles genealógicos.
Rasgos recesivos ligados al cromosoma X
Los rasgos recesivos ligados al cromoson1a X tienen un patrón
distintivo de herencia (fig. 6-7). Primero, estos rasgos aparecen
con mayor frecuencia en varones que en mujeres, porque los
varones necesitan heredar solo una copia del alelo para presentar
el rasgo, núentras que las n1ujeres deben heredar dos copias del
alelo, una de cada progenitor, para ser afectadas. Segundo, como
un varón hereda s u cromosoma X de la madre, los varones afec-
tados suelen nacer de madres no afectadas portadoras de un alelo
para el rasgo. Dado que el rasgo se transmite de mujer no afecta-
da a varón afectado a mujer no afectada, tiende a saltear genera-
144 CAPITULO 6

/ Lipoproteína de baja densidad (LD L)

na partícula de LDL se
e a un receptor de LDL r===--- -
la superficie celular ...
Receptor de LDL (codificado
por un gen del cromosoma 19)
En la célula, la
partícula de LDL
es degradada ...

••
• •••
• •• •
••
•

, .. y se libera el
---=====:::' colesterol para ser
Figura 6-6. Partículas de lipoproteínas de baja densidad (LDL) trans- • usado por la célula.
Otras •
portan el colesterol. El receptor de LDL moviliza LDL del torrente sanguí-
neo hacia el citoplasma a través de la membrana celular.
• •
-~~-
moléculas • • •

ciones (véase fig. 6-7). Cuando una mujer es heterocigótica, alre-

dedor de 1/2 de sus hijos estarán afectados, y 1/2 de sus bijas serán
portadoras no afectadas. Por ejemplo, sabemos que las mujeres I-
2, Il-2 y ITI-7 de la figura 6-7 son portadoras, porque transmiten
el rasgo a aproximadamente la mitad de sus hijos varones.
Una tercera característica importante de los rasgos recesivos
ligados al cromosoma X es que no se transmiten de padre a hijo,
porque un hijo hereda el cromosoma Y de su padre, no el cromo-
so1na X. En la figura 6-7, no hay ningún caso en el que tanto el
padre como el hijo estén afectados. En cambio, todas las hijas de
un hombre afectado serán portadoras (si su madre es homocigóti-
ca para el alelo normal). Cuando una 1nujer expresa un rasgo rece-
sivo ligado al cromosoma X, debe ser homocigótica para el rasgo,
y todos sus hijos varones también lo expresarán.
CONCEPTOS
Los rasgos recesivos raros ligados al cromosoma X aparecen con
mayor frecuencia en varones que en mujeres y no se transmiten de
padre a hijo. Por lo general, los hijos afectados nacen de madres no
afectadas portadoras del gen para el rasgo; por consiguiente, los ras-
gos recesivos ligados al cromosoma X tienden a saltear generaciones.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿ Cómo puede distinguir entre un rasgo autosómico recesivo con
penetrancia más alta en varones y un rasgo recesivo ligado al cromo-
soma X?

Un varón afectado no
transmite el rasgo a sus Un ejemplo de rasgo recesivo ligado al cromosoma X es la
1 Mujer hi'os varones ... hemofilia A, denominada también hemofilia clásica. La hemofilia
portadora se debe a la ausencia de una proteína requerida para la coagula-
no afectada 1 ción de la sangre. El complejo proceso de coagulación de la san-
.. .pero puede transmitir
el alelo a una hija, que
gre consiste en una cascada de reacciones que incluye más de 13
11 no estará afectada ... factores diferentes. Por esta razón, hay varios tipos de trastornos
de coagulación, cada uno debido a un problema en un paso dis-
lo transmitirá a
3 4 hijos varones,
tinto de la vía de coagulación.
g sí I e a án La hemofilia A se debe a la ausencia o anormalidad del factor
111 VIIl, una de las proteínas de la cascada de coagulación. El gen
para el factor VIII se localiza en el extren10 del brazo largo del
1 2 3 4 5 6 8 cron1osoma X; por lo tanto, la hemofilia A es un trastorno recesi-
vo ligado al cromosoma X. Las personas con hemofilia A sangran
IV Varón
de manera excesiva; aun pequeños cortes y hematomas pueden
afectado
ser potencialmente fatales. Se produce hemorragia espontánea en
1 4 5 6 7 8
Los rasgos recesivos ligados al
articulaciones, como codos, rodillas y tobillos, lo que provoca
cromosoma X aparecen con mayor dolor, tumefacción y erosión ósea. Por fortuna, en la actualidad la
frecuencia en vq_rones. J hemo1r agia de las personas con hemofilia A puede controlarse
Figura 6-7 . Los rasgos recesivos ligados al cromosoma X aparecen mediante la administración de dosis concentradas de factor VIII.
más a menudo en varones que en mujeres y no se transmiten de La familia de la reina Victo1ia de Inglaterra ilustra la herencia de
padre a hijo. la hemofilia A (fig. 6-8).
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas 145

1
Victoria, Princesa Eduardo,
de Sajonia- Duque de
Coburgo-Saalfeld Kent

11
Reina Pri ncipe
Victoria Alberto

111

Victoria Eduardo Alicia Luis de Alfredo Helena Luisa Artu ro Leopoldo Beátriz Enrique
VII Hesse

IV
f---.,......¡ e
Guillermo Sofía de Jorge V, Irene Enrique Federico A lejandra Nicolás Alicia de Alfonso Eugenia Leopoldo Mauricio
Grecia Rey de 11, Zar Athlone XIII, Rey
Inglaterra de Rusia de Espa fia

V
Jorge VI, Valdemar Enrique Oiga Marie Alexis Ruperto Alfonso Gonzalo Juan María
Rey de Segismundo, Tatiana Anastasia
Inglaterra Príncipe de
Prusia
>-- - - - -1--_____:====i----- Familia Real - - - - - - Familia Real ---~=:_:it-..---
. . .-_-f+=-=...===;:::~::1--;::::::====d·- --<
VI Prusiana Rusa

Margarita Isabel 11, Prlncipe Juan Carlos, Sofía de

Reina de Felipe Rey de Grecia
Inglaterra Espafia

VII

Prín cipe Princesa Príncipe Príncipe Elena Cristina Felipe

Carlos _ _ Ana Andrés Eduardo

VIII
~~
Príncipe Príncipe Pedro
Guillermo Enrique
Zara Princesa
Beatriz
Princesa
Eugenia
Felipe Victoria Juan Pablo Miguel

Familia Real Británica Familia Real Española

Figura 6-8. La hemofilia clásica se hereda como un rasgo recesivo ligado al cromosoma X. Este árbol genealó-
gico es de hemofilia en las familias reales de Europa.

Rasgos dominantes ligados al cromosoma X os rasgos dominantes ]

Los varones afectados
gados al cromosoma X
transmiten el rasgo a
Los rasgos dominantes ligados al cromosoma X aparecen en va- ~no saltean generaciones. todas sus hijas y a
1
rones y mujeres, aunque suelen ser más frecuentes en estas últi- ninguno de sus hijos.
mas. Cada persona con un rasgo dominante ligado al cromosoma 1 2
X debe tener un progenitor afectado (a menos que la persona pre-
11
sente una mutación nueva o el rasgo tenga penetrancia reducida).
Los rasgos dominantes bgados al cro1nosoma X no saJtean gene-
raciones (fig. 6-9); los hombres afectados transmiten el rasgo a 1 2 3 4 5 6

todas sus hijas y a ninguno de sus hijos, como se observa en los 111
hij os de I-1 de la figura 6-9. Por el contrario, las mujeres afecta-
das (sin son heterocigóticas) transmiten el rasgo a alrededor de½ 1 2 3 4 8 9 10 11
de sus hijos y a alrededor de 1/2 de sus hij as, co1no se observa en
los hijos de III-6 en el árbol genealógico. Al igual que en el caso IV
de rasgos recesivos ljgados al cromosoma X, un varón hereda un
rasgo dominante ligado al cromosoma X solo de su madre; el
rasgo no se transmite de padre a hijo. Este hecho es el que distin- 1 _ 2_ ~ - 4 516
gue la herencia dominante ligada al cron1osoma X de la herencia Las mujeres afectadas (sin son heterocigóticas transmiten ]
autosó1níca dominante, en la que un varón puede heredar el rasgo el rasgo a alrededor de la mitad de sus hijos y a alrededor
de la mitad de sus hi'as.
de su padre. Por el contrario, una mujer hereda un cromosoma X
tanto de su padre como de su madre; por consiguiente, las muje- Figura 6-9. Los rasgos dominantes ligados al cromosoma X afectan
res pueden recibir un rasgo dominante ligado al cromosoma X de tanto a varones como a mujeres. Un varón afectado debe tener una
uno u otro progenitor. madre afectada.
146 CAPITULO 6

CONCEPTOS figura 6-10. Los rasgos ligados al cromosoma Y no saltean gene-

Los rasgos dominantes ligados al cromosoma X afectan tanto a varo-
nes como a mujeres. Los varones afectados deben tener madres afec-
tadas (a menos que los varones posean una mutación nueva) y trans-
miten el rasgo a todas sus hijas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
raciones. Como se mencionó en el capítulo 4, el cromosoma Y
humano contiene escasa información genética. La masculinidad
es uno de los pocos rasgos de los seres humanos que ha 1nostra-
do estar ligado al cromosoma Y. Como cada varón tiene una sola
copia del cromoso1na Y, hay solo una copia de cada alelo ligado
al cromoso1na Y: por lo tanto, los rasgos ligados aJ cromosoma Y
no son dominantes ni recesivos.

¿Qué proporción de la descendencia de un varón afectado por un

CONCEPTOS
rasgo dominante ligado al cromosoma X expresará el rasgo?
a. 1/2 de los hijos y 1/2 de las hijas c. Todas las hijas y ningún hijo Los rasgos ligados al cromosoma Y aparecen solo en varones y se
b. Todos los hijos y ninguna hija d. 3/4 de las hijas y ¼ de los hijos transmiten del padre a todos sus hijos varones.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
En los seres humanos, la hipofosfatemia o raquitismo resisten-
te a la vitamina Des un ejemplo de rasgo dominante ligado al cro- ¿ Qué características de un árbol genealógico distinguirían entre un
moso1na X. Las personas con este rasgo tienen 1nanifestaciones rasgo ligado al cromosoma Y y un rasgo infrecuente, autosómico
que, superficialmente, se asemejan a las provocadas por el raqui- dominante y lim itado por el sexo a varones?
tismo: deformidades óseas, rigidez de la columna vertebral y las
articulaciones, piernas arqueadas y deficiencias de crecimiento
leves. Sin embargo, el trastorno es resistente al tratamiento con E l cuadro 6-1 resume las principales características de los ras-
vitrunina D , que suele curru· el raquitismo. La hipofosfatenna liga- gos autosómicos recesivos, autosómicos dominantes, recesivos
da al cromosoma X se debe al transporte defectuoso de fosfato, en Ligados al cro1noso1na X, dominantes ligados al cromosoma X y
especial por las células del riñón. Las personas con este trastorno ligados al cromosoma Y. ~ RESOLVER EL PROBLEMA 22
excretan grandes cantidades de fosfato por ori na, lo que determi-
na bajas concentraciones de fosfato en sangre y menor depósito
de minerales en el hueso. El trastorno se trata con altas dosis de
calcitriol (una forma hormonalmente activa de vitamina D) y fos-
fato. Como es habitual en Jos rasgos dominantes ligados al cro- E l siguiente árbol genealógico representa la here ncia de un tras-
n1osoma X, a 1nen udo el cuadro es más severo en los varones con torno raro en una fanulia grande. ¿Cuál es el modo de herencia
bipofosfatemia que en las m ujeres. más probable de esta enfermedad? (Asuma que el rasgo tiene
penetrancia completa).
Rasgos ligados al cromosoma Y
1
Los rasgos ligados al cron1osoma Y muestran un patrón de heren-
1 2
cía específico, fácil de reconocer. Solo afectan a los varones, y el
rasgo se transmite de padre a hijo. Si un ho111bre está afectado, 11
toda su descendencia masculina también lo estará, como en el
caso de I-1 , II-4, II-6, III-6 y III-10 del árb ol genealógico de la 1 2 3 4 5 6 7

111
Los rasgos Íigados al cromosoma Y
aparecen solo en varones. 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
1 Toda la descendencia
masculina de un varón IV
1 2
afectado está afectada.
11
__)
1 2 3 4 5 6 7 8 9

1 2 3 4 5 6 7
Estrategia de solución
111
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 El modo de herencia más probable del rasgo mostrado en el
árbol genealógico.
IV
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
1 2 3 4 5 6 7 8 9 ■ El árbol genealógico, que incluye información acerca del
Figura 6-10. Los rasgos ligados al cromosoma Y aparecen solo en sexo y las relaciones familiares de los individuos afectados.
varones y se transmiten del padre a todos sus hijos varones. ■ El rasgo es raro.
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas
Características del árbol genealógico
de los rasgos autosómicos recesivos,
autosómicos dominantes, recesivos ligados
al cromosoma X, dominantes ligados al
cromosoma X y rasgos ligados al
cromosoma Y
Rasgo autosómico recesivo
1. Por lo general, aparece con igual frecuencia en ambos sexos.
2. Tiende a saltear generaciones.
3. Por lo general, afecta a descendientes de progenitores no
afectados.
4. Cuando ambos progenitores son heterocigóticos, alrededor de
un cuarto de la descendencia estará afectada .
5. Aparece con mayor frecuencia en los hijos de matrimonios con-
sanguíneos.
Rasgo autosómico dominante
1. Por lo general, aparece con igual frecuencia en ambos sexos.
2. Ambos sexos transmiten el rasgo a la descendencia.
3. No sa ltea generaciones.
4. Los descendientes afectados deben tener un progenitor afecta-
do, a menos que posean una mutación nueva.
5. Cuando un progenitor está afectado (heterocigótico) y el otro
progenitor no lo está, alrededor de la mitad de la descendencia
estará afectada.
6. Los progenitores no afectados no transmiten el rasgo.
Rasgo recesivo ligado al cromosoma X
1. Por lo general, afecta a más varones que mujeres.
2. Suele afectar a hijos varones de madres no afectadas; por
consiguiente, el rasgo saltea generaciones.
3. Alrededor de la mitad de los hijos varones de una madre
portadora (heterocigótica) estarán afectados.
4. Nunca se transmite de padre a hijo.
5. Todas las hijas de padres afectados son portadoras.
Rasgo dominante ligado al cromosoma X
1. Por lo general, afecta a varones y mujeres; a menudo,
afecta más a mujeres que a varones.
2. No sa ltea generaciones. Los hijos varones afectados deben
tener una madre afectada; las hijas afectadas deben tener una
madre afectada o un padre afectado.
3. Los padres afectados transmitirán el rasgo a sus hijas.
4. Las madres afectadas (sin son heterocigóticas) transmitirán el
rasgo a la mitad de sus hijos y a la mitad de sus hijas.
Rasgo ligado al cromosoma Y
1. Solo son afectados los varones.
2. Se transmite del padre a todos los hijos.
3. No sa ltea generaciones.
147
Pasos de la solución
Para responder esta pregunta, debemos considerar cada modo de
herencia y determinar cuál podemos eliminar, si es que podemos
elinunar alguno. El rasgo aparece solo en varones, de 111anera
que los 1nodos de herencia autosómica do1ninante y autosónuca
recesiva son improbables, porque los rasgos heredados así apa-
recen por igual en varones y mujeres. Además, puede descartar-
se la dominancia autosómica, porque algunas personas afectadas
no tienen un progenitor afectado.
El rasgo se observa solo en los varones de este árbol genealó-
gico, lo que podría sugerir una herencia ligada al cromosoma Y.
Sin embargo, en caso de un rasgo ligado al cromoso1na Y, los
varones afectados transmitirían el rasgo a todos sus hijos varo-
nes, lo que no ocurre en este ejemplo; II-6 es un hombre afecta-
do que tiene cuatro descendientes varones no afectados.
Podernos eliminar la herencia ligada al cromosoma Y.
Se puede eliminar la do1ninancia ligada al cromosoma X, por-
que los hombres afectados deben transmitir un rasgo do.minante
ligado al cromosoma X a toda su descendencia fe1nenina, y II-6
tiene una hija no afectada (III-9).
A menudo, los rasgos recesivos ligados al cromosoma X apare-
cen con mayor frecuencia en varones, y los varones afectados
suelen ser hijos de mujeres portadoras no afectadas. Para un rasgo
ligado al cromosoma X, alrededor de la mitad de los hijos varones
de una portadora heterocigótica serán afectados. Il-3 y ill-9 son
presuntas po1tadoras, y alrededor de la mitad de sus hijos varones
(tres de cinco) están afectados. Otra característica importante de
un rasgo recesivo ligado al cromosoma X es que no se transmite
de padre a hijo. Observamos que no hay transmisión de padre a
hijo en este árbol geneal.ógico. Por lo tanto, el modo de herencia
más probable es recesívo ligado al cromosoma X .
► Para práctica adicional, intente determinar el modo de herencia para
los árboles genealógicos del Problema 24 al final del capítulo.
6.3 El estudio de gemelos y de adopciones
puede ayudar a evaluar la importancia
de los genes y el ambiente
Los gemelos y las adopciones representan experimentos naturales
para separar los efectos de los genes y de fac tores ambientales en
la determinación de diferencias en los rasgos. Estas dos técnicas
se utilizan mucho en estudi os genéticos.
Tipos de gemelos
Los ge111elos son de dos tipos: los gemelos dicigóticos (no idén-
ticos) se originan cuando dos óvulos disti ntos son fecundados por
dos espermatozoides diferentes, lo que genera cigotos distintos
desde el ptu1to de vista genético; los gemelos monocigóticos
(idénticos) se originan cuando un solo óvulo, fecundado por un
solo esper1n atozoide, se divide en estadios tempranos del desarro-
llo en dos e1nbriones separados.
Como los gemelos monocigóticos se 01i ginan en un solo óvulo
y un solo espermatozoide (un cigoto únjco, "mono"), son genéti-
camente idénticos (excepto por mutaciones somáticas infrecuen-
tes) y tienen el 100% de sus genes en común (fig. 6-lla). Por su
148 CAPITULO 6

(a)
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6

¿ Por qué los gemelos monocigóticos son genéticamente idénticos,

mientras que los gemelos dicigóticos tienen, en promed io, solo 1/2 de
sus genes en común?
a. Los gemelos monocigóticos tienden a ser más parecidos.
b. Los gemelos monocigóticos se desarrollan a partir de dos óvu los
diferentes fecundados por el mismo espermatozoide, mientras
que los gemelos dicigóticos se desarrollan a partir de dos óvulos
fecundados por dos espermatozoides diferentes
c. Los gemelos monocigóticos se desarrollan a partir de un solo
óvulo fecundado por un espermatozoide, mientras que los geme-
los dicigóticos se desarrollan a partir de un solo óvu lo fecundado
por dos espermatozoides diferentes.
d. Los gemelos monocigóticos se desarrollan a partir de un solo
óvulo fecundado por un solo espermatozoide, mientras que los
(b) gemelos dicigóticos se desarrollan a partir de dos óvu los fecunda-
dos por dos espermatozoides diferentes.

Concordancia en gemelos
Las con1paraciones de gemelos dicigóticos y monocigóticos pue-
den utilizarse para evaluar la importancia de factores genéticos y
ambientales en la aparición de diferencias en una característica. A
menudo, esta evaluación se realiza calculando la concordancia
para un rasgo. Si ambos miembros de un par de gemelos expre-
san un rasgo, se dice que los gemelos son concordantes; si solo
un miembro del par expresa el rasgo, se dice que los gemelos son
discordantes. Concordancia se define como el porcentaje de pa-
res de gemelos que son concord.antes para un rasgo. Como los
gemelos monocigóticos tienen el 100% de sus genes en común y
Figura 6-11. Los gemelos monocigóticos (a) son idénticos; los geme-
los gemelos dicigóticos tienen, en promedio, solo el 50% de sus
los dicigóticos {b) no son idénticos. (Parte a: f4foto/Alamy. Parte b: cor-
tesla de Randi Rossignol).

Cuadro 6-2 Concordancia de gemelos monocigóticos

y dicigóticos para varios rasgos
parte, los gemelos d.icigóticos (fig. 6-llb) tienen, en promedio,
Concordancia (%)
solo el 50% de sus genes en común, que es el mismo porcentaje
que el observado en cualquier par de hermanos. Al igual que otros Rasgo Monocigótica Dicigótica
herrnanos, los gemelos dicigóticos pueden ser del nlismo sexo o
de sexos diferentes. La única diferencia entre gemelos dicigóticos 1. Infarto de miocardio (varones) 39 26
y otros hermanos es que los p1imeros tienen la misma edad y
2. Infarto de miocardio (mujeres) 44 14
compartieron el mismo an1biente intrauterino. A menudo, se ob-
serva mayor frecuencia de nacimientos de gemelos dicigóticos en 3 . Asma bronquial 47 24
algunas familias, y la tendencia a estos nacimientos es influida
por la herencia y por factores ambientales. Parece haber escasa 4. Cáncer (todas las localizaciones) 12 15
tendencia genética a producir ge1nelos monocigóticos.
5. Epilepsia 59 19

6. Muerte por infección aguda 7,9 8,8

CONCEPTOS 7. Artritis reumatoide 32 6

Los gemelos dicigóticos se desarrollan a partir de dos óvulos fecunda-
dos por dos espermatozoides diferentes; en promedio, tienen el 50%
de sus genes en común. Los gemelos monocigóticos se desarrollan a
partir de un solo óvulo, fecundado por un solo espermatozoide, que
se divide en dos embriones: tienen el 100% de sus genes en común.
8. Esclerosis múltiple 28 5
Fuentes. (1 y 2) B. Havald and M. Hauge. U.S. Public Health Service Publication 1103
(1963), pp 61-67; (3, 4, 5 y 6) B. Havald and M . Hauge. Genetics and Epidemiology of
Chronic Diseases (U.S. Department of Health Education and Welfare, 1965); (7) J. S.
Lawrence, Anna!s of Rheumatic Diseases 26:357-379, 1970; (8) G. C. Ebers y cols.,
American Journal of Human Genetics 36:495, 1984.
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas
genes en común, los rasgos con infl uencias genéticas deberían
mostrar mayor concordancia en los gemelos monocigóticos. Por
ejemplo, cuando un miembro de un par de gemelos monocigóti-
cos tiene epilepsia (cuadro 6-2), el otro miembro del par tiene
epilepsia en alr ededor del 59% de los casos; por consiguiente, la
concordancia monocigótica para epilepsia es del 59%. En ca1n-
bio, cuando un gemelo dicigótico tiene epilepsia, el otro gemelo
tiene epi lepsia solo en el 19% de los casos (concordancia dicigó-
ti.c a, 19%). La concordancia más alta en los gemelos monocigóti-
cos sugiere que los genes influyen en la epilepsia, un hallazgo
avalado por los resultados de otros estudios fanuliares de esta
enfermedad. En cambio, las tasas de concordancia de muerte por
infección aguda son similares tanto en ge1nelos monocigóticos
como en ge.melos dicigóticos, lo que indica que la mayoría de las
muertes por infección tienen escasa tendencia heredita1ia. E l cua-
dro 6-2 enumera los valores de concordancia para varios otros
rasgos y enfermedades de los seres hun1anos.
El signo distintivo de una influencia genética sobre un rasgo par-
ticular es la concordancia 1nás alta en gen1elos monocigóticos que
en gemelos dicigóticos. La alta concordancia en gen1elos monoci-
góticos por sí misma no señala una influencia genética. Por lo
general, los gemelos comparten el mismo ambiente (son criados
en el mismo hogar, tienen los nusmos amigos, asisten a la misma
escuela) y, por lo tanto, la alta concordancia puede deberse a genes
comunes o al ambiente común. Si la alta concordancia se debe a
factores an1bientales, los ge1nelos dicigóticos, que ta1nbién coin-
parten el mismo ambiente, tendrán una concordancia igual de alta
que los gemelos monocigóticos. En cambio, cuando los genes
influyen en el rasgo, los pares de gemelos monocigóticos presen-
tarán concordancia n1ás alta que los pares de gemelos dicigóticos,
porque los primeros tienen mayor porcentaje de genes en común.
Es importante destacar que cualquier di scordancia entre gen1elos
monocigóticos suele deberse a factores ambientales, porque los
gemelos monocigóticos son genéticamente idénticos. Por ejemplo,
en la epilepsia, la concordancia de gemelos n1onocigóticos es con-
siderablemente menor del 100% (véase cuadro 6-2), lo que sugie-
re que ade1nás de las influencias genéticas ta1nbién factores
runbientales inciden en la variación de este rasgo.
El uso de gemelos en investigación genética se basa en la presun-
ción importante de que, cuando la concordancia en gemelos mono-
cigóticos es mayor que en gemelos dicigóticos, esto se debe a que
los monocigóticos son m ás similares en sus genes y no a que hayan
experimentado un ambiente más similar. Se asume que el grado de
similitud an1biental entre gemelos 111onocigóticos y gemelos dici-
góticos es el mismo. Esta presunción puede no ser siempre correc-
ta, en particular en lo que respecta a comportanúentos humanos.
Como se parecen, los gemelos idénticos pueden ser tratados en
forma más sinulru· por sus padres, m aestros y compañeros que los
gemelos no idénticos. La evidencia de este tratamiento similar se
observa en la tendencia pasada de los padres a vestir de la 1nisma
n1anera a los gemelos idénticos. Pese a esta posible complicación,
los estudios de gemelos han desempeñado un papel central en el
estudio de la genética humana. l]INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 30
Estudio de asma en gemelos
Para ilustrar la utilización de gemelos en la investigación genética,
consideremos un estudio de asma. El asma se caracteriza por cons-
tricción de las vías respiratorias y secreción de moco hacia ellas,
lo que causa tos, dificultad respiratoria y sibilancias (fig. 6-12).
Los casos graves pueden ser potencialmente fatales. El asn1a es un
149
Figura 6-12. Estudios de gemelos muestran que el asma, caracteriza-
da por constricción de las vías respiratorias, es causada por una
combinación de factores genéticos y ambientales. A menudo, se utili-
zan inhaladores para vehiculizar la medicación ant iasmática a los pulmones.
(Stockbyte/Getty lmages).
problema sanitario importante en los países industrializados y
parece estar aumentando. La incidencia de asma infantil es muy
variable; algunas de las tasas 1nás altas (del 21 al 27%) correspon-
den a Australia, el Reino Unido, Suecia y Brasil.
Se sabe que una serie de estímulos ambientales desencadenan
crisis asmáticas, como polvo, polen, polución aérea, infecciones
respiratorias , ejercicio, aire frío y estrés emocional. Con frecuencia,
las alergias aco1npañan al asma, lo que sugiere que este últiJno es
un trastorno del sistema inn1unitario, pero no se conoce bien la rela-
ción precisa entre fu nción inmunitaria y asma. Numerosos estudios
mostraron que los factores genéticos son importantes en el asma.
Se llevó a cabo un estudio genético de asma infantil como parte
del Twins Early Development Study in England (Estudio de desa-
rrollo ten1prano de gemelos en Inglaterra), un proyecto de inves-
tigación en curso que estudia a más de 15 000 gemelos nacidos en
el Reino Unido entre 1994 y 1996. En estos gemelos, se evaluó el
lenguaje, el desarrollo cognitivo, los problemas conductuales y
los logros académicos a los 7 y 8 años de edad, y se examinaron
las contribuciones genéticas y ambientales a una serie de rasgos.
En el estudio de asina, los investigadores evaluaron una muestra
de 491 O gemelos a los 4 años de edad. Se les preguntó a los pa-
dres de los gemelos si alguno de los ge1neios había recibido medi-
cación para controlar el asma; se consideró que los niños medica-
dos contra el asma tenían la enfermedad.
El valor de concordancia para los gen1elos monocigóticos (65%
en 1658 pares de gemelos) fue significativamente 1nás alto que el
observado en gemelos dicigóticos (37% en 3252 pares de geme-
los), y los investigadores concluyeron que, en los niños de 4 años
incluidos en el estudio, los factores genéticos influían firmemen-
te en el asma. E l hecho de que incluso los gemelos monocigóti-
cos fueran discordantes en el 35 % de los casos indica que los fac-
tores ambientales también desempeñan un papel en el asma.
150 CAPITULO 6

CONCEPTOS
Pregunta: ¿influyen factores gehéticos en el índice de masa
corporal (IMC)?
Los gemelos dicigóticos se desarrollan a partir de dos óvulos fecunda-
dos por dos espermatozoides diferentes; en promedio, t ienen el 50% Métodos
de sus genes en común. Los gemelos monocigóticos se desarrol lan a
Compare el índice de masa corporal de los niños adoptados
pa rtir de un solo óvulo, fecundado por un solo espermatozoide, que con aquellos de sus padres adoptivos y biológ icos.
se divide en dos embriones: tienen el 100% de sus genes en común.
Resultados

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7 Padres biológicos Padres adoptivos

Un rasgo muestra concordancia del 100% tanto el gemelos monoci-

góticos como en gemelos dicigóticos. ¿ Qué conclusión puede extraer
_,..,.,
_
Padre

•
acerca del papel de los factores genéticos en la det erminación de dife- V,

./· ·,.
Cl,l
\...
rencias en el rasgo 7 "O
(IJ
Madre -- ' •
o.
a. Los factores genéticos con extremadamente important es. el Los padres
\...._____ './
b. Los factores genéticos t ienen cierta importancia. Cl,l • biológicos con y
"O
u sobrepeso tienden ....A
c. Los fact ores genéticos no son importantes . ~ a tener hijos con No hay ninguna
sobrepeso. asociación consis-
d . Los factores tanto genéticos como amb ientales son importantes. tente entre el peso
de los niños y el de
Madre
sus padres adoptivos.

Delgado Obeso Delgado Obeso

Estudios de adopción
Otra técnica e1n pleada por los genetistas para anali zar la herencia
humana es el estudio de personas adoptadas. Este enfoque es uno
de los más poderosos para distinguir los efectos de los genes y el
ambiente sobre las características.
Por diversas razones, muchos niños son separados de sus pa-
dres biológicos poco después del nacimiento y son adoptados por
adultos con los que no tienen ninguna relación genética. Estas
personas no tienen, en promedio, más genes en co1n ún con sus
padres adoptivos que los que tendrían con personas elegidas de
manera aleatoria; sin embargo, sí comparten un ambiente con sus
padres adoptivos. En cambio, las personas adoptadas tienen el
50% de sus genes en común con cada uno de sus pr ogenitores
biológicos, pero no comparten el mismo ambiente con ellos. Si
las personas adoptadas y sus padres adoptivos 1nuestran sin1i litu-
des en una caracte1ística, estas similitudes pueden atribuirse a fac-
tores ambientales. Por el contrario, si las personas adoptadas y sus
padres biológicos muestran similitudes, es probable que estas se
deban a factores genéticos. Por lo tanto, las comparaciones de
personas adoptadas con sus padres adoptivos y con sus padres
biológicos pueden ayudar a definir los papeles de los fac tores
genéticos y ambientales en la determinación de la variación
humana. Por ej emplo, estudios de adopción fueron operativos pa-
ra mostrar que la esquizofrenia tiene una base genética. Asi-
mismo, los estudios de adopción han mostrado que la obesidad,
medida por el índice de rnasa corporal, es influida, por lo menos
en parte, por la genética (fig. 6-13).
Los estudios de adopción asumen que los a1nbientes de las
familias biológicas y adoptivas son independi entes (es decir, no
más similares que lo que cabría esperar por azar). Esta presunción
puede no ser siempre correcta, porque las agencias de adopción
eligen de n1anera cuidadosa a los padres adoptivos y pueden
seleccionar a una familia que se parezca a la familia biológica.
Por lo tanto, parte de la similitud entre las personas adoptadas y
sus padres biológicos puede deberse a estos ambientes simil ares
y no a factores genéticos comunes. Adem ás, la descendencia y la
1nadre biológica con1parten el mismo ambiente durante el desa-
1Tollo prenatal. ~•~ !!:!!!i!!:!~~~~~~~~~
Categoría de peso Categ oría de peso
del adoptado del adoptado
Conclusión: factores genéticos influyen en el índice de masa
co rporal.
Figura 6-13. Los estudios de adopción demuestran que la obesidad
tiene una influencia genética. (Redibujado con autorización del New
Eng/and Journal of Medicine 314: 195, 1986).
CONCEPTOS
Las similitudes entre personas adopt adas y sus padres adoptivos no
emparentados indican que factores ambientales inciden en una carac-
terística particular; las similitudes entre las personas adoptadas y sus
padres biológicos indican que factores genéticos influyen en la carac-
terística .
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
¿ Qué presunciones subyacen a la uti lización de estudios de adopción
en genética 7
a. Los adoptados no tienen ningún contacto con sus padres biológi-
cos después del nacimiento.
b . Los padres adoptivos y los padres biológicos no est án relacionados.
c. Los ambientes de los padres biológicos y adoptivos son indepen-
di ent es.
d . Todas las anteriores.
6.4 El asesoramiento genético y las pruebas
genéticas proporcionan información a aquellos
preocupados por enfermedades y rasgos
genéticos
Nuestro conocimiento de las enfermedades y trastornos genéticos
se ha ampliado rápidamente en los últin1os años. En la actualidad,
la Online Mendelian lnheritance in Man (Herencia mendeliana
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas
en línea, en el hombre) enumera más de 2 1 000 enfermedades,
trastornos genéticos, genes y rasgos, que tienen una base genéti-
ca simple. La investigación ha aportado gran cantidad de informa-
ción acerca de la herencia, la localización cromosómica, la base
bioquímica y los síntom as de muchos de estos rasgos, enfermeda-
des y trastornos genéticos. A menudo, esta infonnación es útil
para las personas que presentan un cuadro genético.
Asesoramiento genético
El asesoramiento genético es un can1po que proporciona informa-
ción a los pacientes y otras personas preocupadas acerca de cua-
dros hereditarios. E s un proceso educacional que ayuda a los
pacientes y a los miembros de su familia a manej ar numerosos
aspectos de un trastorno genético, como diagnóstico, información
acerca de síntomas y tratamiento, e información acerca del modo
de herencia. Asimismo, el asesoramiento genético ayuda a los
pacientes y a sus familias a afrontar eJ estrés psicológico y físico
que puede asociarse con el trastorno. Es evidente que todas estas
consideraciones no pueden ser manejadas por una sola persona; la
mayor parte del asesoramiento genético está a cargo de un equi-
po que puede incluir consejeros, genetistas médicos y personal de
laboratorio. El cuadro 6-3 enumera algunas razones comunes
para solicitar asesoramiento genético.
Por lo general, el asesoramiento genético comi enza con un
diagnóstico del cuadro. Sobre la base del examen físico, prue-
bas bioquímicas, investigación del DNA, análisis cromosómico,
Cuadro 6-3 Razones habituales para solicitar
asesoramiento genético
1. Una persona sabe que hay una enfermedad genética en la
familia .
2. Una pareja ha tenido un hijo con una enfermedad genética, un
defecto congénito o una anormalidad cromosómica.
3. Una pareja tiene un hijo o un fa miliar cercano con discapacidad
intelectual.
4 . Una mujer madura queda embarazada o desea quedar embara-
zada. No hay acuerdo respecto de la edad a la que una futura
madre que no tiene otros factores de riesgo debe solicitar aseso-
ramiento genético; muchos especialistas sugieren que debe
hacerlo toda mujer de 35 años o mayor.
5. Los cónyuges son familiares cercanos (p. ej., primos).
6. Una pareja tiene dificu ltades para lograr un embarazo exitoso.
7. Una embarazada está preocupada por la exposición a una sus-
tancia ambiental (droga, agente químico o virus) que causa
defectos congénitos.
8. Una pareja necesita ayuda para interpretar los resultados de una
prueba prenatal o de otro tipo.
9. Ambos futuros progenitores son portadores conocidos de una
enfermedad genética recesiva.
151
antecedentes familiares y otra información, un médico determi-
na la causa del tras torno. Es crucial un diagnóstico exacto, por-
que el tratamiento y la probabilidad de transmitir el trastorno
pueden variar según el diagnóstico. Por ejemplo, hay una serie
de tipos diferentes de enanismo, que pueden ser causados por
anormalidades cromosó1nicas, mutaciones de un único gen,
deseq uilibrios hormonal es o factores ambientales. Las personas
con enani smo resu ltante de un gen autosómico do1ninante tie-
nen una probabilidad del 50% de transmitir el cuadro a sus
hijos, mientras que las personas con enanismo causado por un
gen recesivo infrecuente tienen baja probabilidad de transmitir
el rasgo a sus hijos.
Cuando se conoce el carácter del cuadro, un consejero genético
se reúne con el paciente y los 1niembros de su familia y explica el
diagnóstico. Es posible elaborar un árbol genealógico familiar y
calcular la probabilidad de transmitir el trastorno a futuras gene-
raciones para diferentes miembros de la familia. El consejero
ayuda a la fami lia a interpretar los riesgos genéticos y explica
diversas opciones reproductivas disponibles, co1no diagnóstico
prenatal, inseminación artificial y fertilización in vitro. A menu-
do, los miembros de la familia tienen preguntas acerca de las
pruebas genéticas disponibles para ayudar a determinar si son
portadores de una mutación genética. El consejero les ayuda a
decidir si son apropiadas las pruebas genéticas y qué pruebas rea-
lizar. Después de conocer los resultados de las pruebas, el conse-
jero genético s uele ayudar a los .mie:mbros de la familia a interpre-
tar los resultados.
La decisión de una fanulia acerca de futuros embarazos suele
depender de la magnitud del riesgo genético, la gravedad y los
efectos del trastorno, la importancia de tener hijos y la perspecti-
va religiosa y cultural. Tradicionaln1ente, se ha capacitado a los
consejeros genéticos para dar asesoramiento no ctirigido, lo que
significa que proporcionan información y facilitan la discusión,
pero no incorporan sus propias opiniones ni valores en la discu-
sión. El objetivo del asesoramiento no dirigido es que la familia
llegue a su propia decisión sobre la base de la mejor infor1nación
disponible.
Dada la creciente cantidad de pruebas genéticas y la complej i-
dad de la evaluación del riesgo genético, hay ahora cie1to movi-
miento que se aleja del asesoramiento completamente no dirigi-
do. El objetivo continúa siendo proporcionar información a la
familia acerca de todas las opciones y llegar a la mejor decisión
para la familia, pero ese objetivo puede requerir, a veces, que el
consejero recomiende ciertas opciones, de una manera muy simi-
lar a un médico que recomienda el tratamiento más apropiado
para su paciente.
¿ Quién r ealiza asesoramiento genético? En la actualidad, hay
en los Estados Unidos más de 6000 profesionales de la salud cer-
tificados en genética por el American Board of Medica! Genetics
o el American Board of Genetic Counseling. Aproximadamente
la mitad de ellos tienen capac.itación específica en asesoram ien-
to genético, en general por haber completado un programa espe-
cial de maestría de 2 años, de educación en genética y asesora-
miento. La mayoría de los restantes son médicos y científicos
certificados en genética 1nédica o clínica. Debido a la escasez de
consejeros genéticos y genetistas mécticos, la información acer-
ca de pruebas genéti cas y riesgos genéticos a menudo es trans-
mitida por médicos de atención primaria, enfermeros y asisten-
tes sociales. l.!►~!!::!!~!.!!:!:~~~~~~~~:!I
152 CAPITULO 6

ECOGRAFiA Algunos trastornos genéticos pueden detectarse por

CONCEPTOS
El asesoramiento genético es un proceso educacional que proporcio-
na a los pacientes y a sus familias información acerca de un trastorno
genético, sus implicaciones médicas, el modo de herencia y las opcio-
nes reproductivas.
Pruebas genéticas
El objetivo final de las pruebas genéticas es reconocer la posibili.-
dad de un trastorno genético en una etapa muy temprana. En algu-
nos casos, las pruebas genéticas permiten que las personas tomen
decisiones informadas acerca de la reproducción. En otros casos,
per1niten la intervención temprana que puede reducir o incluso
prevenir la aparición del cuadro. En aquellos que saben que están
expuestos a un trastorno genético, las pruebas genéticas pueden
ayudar a aliviar la ansiedad asociada con la incertidumbre de su
situación. Las pruebas genéticas incluyen investigación pre y pos-
natal.
Las pruebas genéticas prenatales son las que se realizan antes
del nacimiento y, en la actualidad, incluyen procedimientos para
diagnosticar varios cientos de enfern1edades y trasto111os genéti-
cos (cuadro 6-4). El propósito principal de las pruebas prenatales
consiste en proporcionar a las familias la información que necesi-
tan para tomar decisiones durante el embarazo y, en algunos
casos, prepararse para el nacimiento de un niño con un trastorno
genético. En las siguientes secciones, se describen varios enfo-
ques de diagnóstico prenatal.
visuali zación directa del feto. La mayoría de las veces, esto se
realiza mediante ecografía. En esta técnica, se disparan haces de
sonido de alta frecuencia hacia el útero; cuando las ondas sonoras
encuentran tejido denso, rebotan y son transformadas en una ima-
gen (fig. 6-14). Es posible dete1minar el tamaño del feto, así como
trastornos genéticos, por ejemplo defectos del tubo neural (defec-
tos del desa1T0Ilo de la columna vertebral y el cráneo) y anomalí-
as esqueléticas. La ecografía es el procedimiento convencional
practicado durante el embarazo para estimar la edad del feto,
determinar el sexo e investigar la presencia de trasto1nos del desa-
rrollo u otros problemas.
AMNIOCENTESIS Las pruebas prenatales tradicionales requieren
tejido fetal, que se puede obtener de vruias maneras. El método
más difundido es la amniocentesis, un procedimiento para obte-
ner una muestra de líquido amniótico de una embarazada (fig. 6-
15). El líquido amniótico - la sustancia que ocupa el saco amnió-
tico y rodea al feto en desarrollo- contiene células que pueden
utilizarse para pruebas genéticas.
La amniocentesis se practica de rutina como un proceditniento
ambulatorio, con anestesia local o sin ella (fig. 6-15). Después, se
practican p1uebas genéticas en las células cultivadas. Las compli-
caciones de la amniocentesis (es su mayor patte, aborto) son
infrecuentes y solo sobrevienen en 1 de cada 400 procedimientos.
BIOPSIA DE VELLOSIDADES CORIÓNICAS Una desventaja importan-
te de la arnniocentesis es que suele practicarse alrededor de las 15
a 18 semanas de gestación (aunque algunos obstetras la realizan
con éxito antes). Después, es preciso cultivar las células obteni-
das por amniocentesis antes de que se practiquen las pruebas

Cuadro 6-4 Ejemplos de enfermedades genéticas que pueden ser detectadas en el período prenatal y técnicas empleadas
para su detección

Trastorno Método de detección

Anormalidades Examen de un cariotipo de células obtenidas por amniocentesis o biopsia de vellosidades coriónicas
cromosómicas
Labio y paladar hendidos Ecog rafía
Fibrosis quística Análisis de DNA de las células obtenidas por amniocentesis o biopsia de vellosidades coriónicas
Enanismo Ecografía o rayos X; algunas formas pueden detectarse por análisis de DNA de células obtenidas por amniocente-
sis o por biopsia de vellosidades coriónicas
Hemofilia Muestreo de sangre fetal* o análisis de DNA de células obtenidas por amniocentesis o por biopsia de vellosidades
coriónicas
Síndrome de Lesch-Nyhan Pruebas bioquímicas en células obtenidas por amn iocentesis o por biopsia de vellosidades coriónicas
Defectos del tubo neura l Detección sistemática inicial con pruebas en sangre materna, seguida de pruebas bioquímicas en líquido amnióti-
co obtenido por amn iocentesis o por detección de defectos congénitos mediante ecog rafía
Osteogénesis imperfecta Ecografía o radiografía
(huesos frág iles)
Fenilcetonuria Análisis de DNA de célu las obtenidas por amniocentesis o por biopsia de vellosidades coriónicas
Anemia drepanocítica Muestreo de sangre fetal* o análisis de DNA de células obtenidas por amniocentesis o por biopsia de vellosidades
coriónicas
Enfermedad de Tay-Sachs Pruebas bioquímicas en células obtenidas por amniocentesis o biopsia de vellosidades coriónicas

*Se obtiene una muestra de sangre fetal insertando una aguja en el cordón umbilical.
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas 153

de vellosjdades coriónicas implica un 1iesgo algo más alto de

complicaciones que la amniocentesis; los resultados de varios
estudios sugieren que este procedimiento puede aumentar la inci-
dencia de defectos de los miembros en el feto cuando se practica
antes de las 10 semanas de gestación.
Las células fetales obtenidas por amniocentesis o por BVC pue-
den utilizarse para preparar un cariotipo, que es una ünagen de
un juego completo de cromosomas e n metafase. En los cariotipos,
es posible investigar anormalidades cromosómicas (véase cap. 8).
Pueden llevarse a cabo análisis bioquímicos e n células fetales
para determinar la presencia de productos metabólicos particula-
res de genes. En las enfer111edades genéticas en las que se ha
determinado la secuencia de DNA del gen causal, es posible
investigar alelos defectuosos en la secuencia de DNA (investiga-
ción del DNA; véase cap. 19).

PRUEBAS DE DETECCIÓN SISTEMÁTICA EN SANGRE MATERNA Es po-

Figura 6-14. Se puede utilizar la ecografía para detectar algunos
trastornos genéticos en el feto y para localizar al feto durante la
amniocentesis y la biopsia de vellosidades coriónicas. (PhotoDisc).
genéticas, lo que requiere aún 1nás tiempo . Por estas razones, a
veces no se dispone de información genética acerca del feto hasta
las 17 o 18 semanas de gestación. En esta etapa, eJ aborto conlle-
va un riesgo de complicaciones y es aún más estresante para los
padres. La biopsia de vellosidades coriónicas (B V C) puede
practicarse antes (entre las semanas 10 y 12) y recolecta mayor
cantidad de tejido fetal, lo que elimina la necesidad de cultivar las
células.
En las BVC, se coloca un catéter (un tubo de plástico blando)
en contacto con el corion, la capa externa de la placenta (fig, 6-
16). Luego, se aplica succión y se reseca un pequeño fragmento
de corion. Si bien el corion está compuesto por células fetales, es
una parte de la placenta que se expulsa del útero después del
parto; el tejido resecado no es, en realidad, del feto. El tejido con-
tiene 1nillones de células que se dividen en forma activa y se pue-
den usar directamente en muchas pruebas genéticas. La biopsia
sible detectar mayor riesgo de algunos trastornos genéticos
1nediante el exan1en de las concentraciones de ciertas sustancias
en sangre de la inadre (denominado prueba de detección siste-
mática en sangre materna). Sin embargo, estas pruebas no
determinan la presencia de un problema genético, sino que solo
indican que el feto tiene mayor riesgo y, por lo tanto, son deno-
minadas pruebas de detección sistemática. Cuando se detecta
mayor riesgo, suelen realizarse pruebas de seguimiento (otras
pruebas de detección siste1nática en sangre 1naterna, ecografía,
amniocentesis o las tres).
Una sustancia investigada en las pruebas de detección sisten1á-
tica en sangre materna es la a-fetoproteína, una proteína que por
lo general produce el feto durante el desa1Tollo y está presente en
sangre fetal , líquido amniótico y sangre de la madre durante el
e1nbarazo. La concentración de a-fetoproteína es significativa-
mente más alta que la normal cuando el feto tiene un defecto del
tubo neural o alguno de varios otros trastornos. Algunas anorma-
lidades cromosómicas determinan concentraciones de a-fetopro-
teína en sangre materna más bajas que las normales. La medición
de a-fetoproteína en sangre materna da una indicación de estos
trastornos.
El A.merican College of Obstetricians and Gynecologists (Co-
legio de tocoginecólogos de los Estados Unidos) recomienda que

ÓBajo control ecográfico,
se introduce una aguja
estéril a través de la pared
abdominal en el saco
amniótico.
Se extrae una El líquido amn iótico , ... y cultivada~ ÓW.go, se practican pruebas ]
pequeña cantidad contiene células, que l:_n las células cultivadas.
de líquido amniótico son separadas de este .. .
a través de la aguja.

Transductor- - - -
' Análisis
qui mico

ecográfico
Análisis
Líquido deDNA
centrifugado Células fetales

Análisis
cromosómico

Figura 6-15. La amniocentesis es un procedimiento para

obtener células fetales para investigación genética.
154 CAPITULO 6
Las BVC pueden Bajo control ecográfico, se
practicarse en introduce un catéter a través
etapas tempranas L
de la vagina y el cuello uterino
,__
de_l ...,.
em....b_a_
ra_zo_._...,, hasta el útero ...
Feto de 10-11 semanas Transductor ecográfico
tero
.._____ Catéter
Vagina
Figura 6-16. La biopsia de vellosidades coriónicas
(BVC) es otro procedimiento destinado a obtener célu-
las fetales para pruebas genéticas.
los médicos propongan pruebas de detección sistemática en san-
gre materna a todas las embarazadas. Una prueba típica, que se
lleva a cabo entre las 11 y 13 sen1anas de gestación, 1nide la gona-
dotropina coriónica hu1nana (hCG, una hormona del e mbarazo) y
una sustancia denominada proteína plasmática asociada al emba-
razo A (PAPP-A). Cuando un feto presenta ciertos defectos cro-
mosómicos , la concentración de PAPP-A tiende a ser baja, y la
concentración de hCG tiende a ser alta. El riesgo de anor1nalidad
cromosótnica se calc ula sobre la base de las concentraciones de
hCG y PAPP-A en sangre materna, junto con los resultados de la
ecografía. Otra prueba, denominada prueba de detección cuádru-
ple, mide los niveles de cuatro sustancias : a -fetoproteína, hCG,
estriol e inhibina. Se calcula el riesgo de anormalidades cromosó-
micas y algunos otros defectos congénitos sobre la base de las
concentraciones combinadas de las cuatro sustancias más la edad
de la madre, el peso, los antecedentes étnicos y el número de
fetos. La pn1eba de detección cuádrupl e identifica de manera exi-
tosa síndrome de Down (secundario a tres copias del cromosoma
21) en el 81 % de los casos.
DIAGNÓSTICO GENÉTICO PRENATAL NO INVASIVO Las pruebas pre-
natales que utilizan solo sangre n1aterna son muy convenientes,
porque no son invasivas ni plantean ningún riesgo para e l feto.
Además de las pruebas de detección sistemática en sangre m ater-
na, que determinan sustancias quúnicas producidas por el feto o
la placenta, los procedinuentos denominados diagnóstico genéti-
co prenatal no invasivo examinan directamente DNA fetal en
sangre de la 1nadre. Estas pruebas pueden practicarse ya a las 10
semanas de gestación.
Durante el embarazo , se liberan unas pocas células fetales al
sistema circulatorio de la madre, donde se mezclan y circu lan con
su sangre . Avances recientes han posibilitado la detección y sepa-
ración de células fetales y células de sangre 1naterna (un procedi-
miento de nominado separación de células fetales) 1nediante el
uso de láseres y aparatos automáticos de separación de célul as.
Las células fetales obtenidas pueden cultivarse para análisis cro-
mosómico o ser utilizadas como una fuente de DNA fetal para
investigación molecular (véase cap. 19). La sangre materna tam-
bién contiene fragmentos que flotan libren1ente de DNA fetal, que
... donde se lo coloca , a aspiración extrae Las células del corion se utilizan
en contacto con el un pequeño directamente para numerosas
canon. fragmento de corion. pruebas genéticas y no requieren
cultivo.
Análisis
deDNA
Célu las
del corion Análisis
cromosómico
es liberado por la ruptura de las células fetales. El DNA fetal se
puede secuenciar e investigar para detectar mutaciones. Asimis-
mo, se dispone de pruebas para determinar el número de copias
de variantes genéticas, lo que pennite determjnar el número de
cromosomas del feto, de manera que es posible detectar anorma-
lidades cromosórnicas, por ejemplo síndrome de Down, a partir
del DNA fetal. En la actualidad, el diagnóstico genético prenatal
no invasivo se utiliza para determinar el grupo de sangre del feto,
detectar síndrome de Down y otros trastornos cromosómicos, y
para identificar 1n utacíones para enfermedades genéticas, como
fibrosis qufstica y tal asemia (un trastorno hematológico). Esta
tecnología posibilita utilizar una simple muestra de san gre de la
madre para investigar cientos de enfermedades genéticas e, inclu-
so, rasgos co1nunes del feto. Esta posibilidad plantea una serie de
cuestiones sociales y éticas acerca del empleo de esta informa-
ción e n decisiones reproductivas.
DIAGNÓSTICO GENÉTICO PREIMPLANTACIÓN Las pruebas genéticas
prenatales proporcionan a los futuros padres de hoy cada vez más
información acerca de la salud de sus futuros hijos. Nuevas tec-
nologías reproductivas ofrecen a las parejas opciones para utilizar
esta información. Una de estas técnicas es Ja fec undación in vitre.
En este procedi mjento, se utilizan hormonas para inducir la ovu-
lación. Se resecan quirúrgicamente los óvulos de la superficie del
ovario, se los coloca e n una placa de laboratorio y se los fecunda
con espermatozoides. Después, se implanta el embrión resultante
en el útero. En la actualidad, ya han nacido miles de bebés con-
cebidos mediante fe cundación in vitre.
Las pruebas genéticas pueden co111binarse con fecundación in
vitre para permjtir la implantación de embri ones sin un defecto
genético específico. Esta técnica, denominada diagnóstico gené-
tico preimplantación (DGP), permite que las personas portado-
ras de un defecto genético eviten tener un lújo con el trastorno.
Por eje1nplo, si una mujer es portadora de una enfermedad rece-
siva li gada al c romosoma X, se espera que alrededor de la mitad
de sus hijos varones presenten la enfermedad. Por n1edio de la
fecundación in vitro y la investigación preimplantación , es posi-
ble seleccionar un embrión sin el trastorno para que sea in1plan-
tado en el útero.
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas
El procedimiento comien za con la producción de varios em-
briones unicelulares mediante fecundación in vitro. Se permite
que los embriones se dividan varias veces hasta que alcanzan el
estadio de 8 o 16 células. En este momento, se retira una célula
de cada en1brión y se investigan anormalidades genéticas. La
extracción de una sola célula en este estadio temprano no pe1ju-
dica al e1nbrión. Después de determinar qué embriones no p resen-
tan el trastorno , se selecciona un embrión sano y se lo implanta
en el útero de la madre.
El diagnóstico genético preimplantación exige la capacidad
de realizar una prueba genética en una sola célula. Esta investi-
gación es posible mediante la reacción en cadena de la polime-
rasa que permite amplificar (repli car) con rapidez cantidades
diminutas de DNA (véase cap. 19). Tras la amplificación del
DNA celular, se examina su secuencia. El diagnóstico genético
preimplantación ha dado por resultado el nacimiento de m_iles
de niños sanos. Su utilización plantea una serie de preocupacio-
nes éticas, porque puede aplicarse como medio de seleccionar,
o no, rasgos genéticos que no impliquen ninguna preocupación
médica. Por eje1nplo, existe la posibilidad de utilizarlo para se-
leccionar un niño con un color de ojos dado o con genes para
mayor aln1ra.
DETECCIÓN SISTEMÁTICA NEONATAL La investigación de trastornos
genéticos en recién nacidos se denomina detección sistemática
neonatal. Todos los estados de los Estados Unidos y muchos
otros países exigen por Ley la investigación de algunas enferme-
dades y cuadros genéticos. En 2006, el American College of
Medical Gen.etics recomendó la detección sistemática obligatoria
de 29 entidades (cuadro 6-5), y ahora muchos estados han adop-
tado esta lista para la detección sistemática neonatal. Estas enti-
dades genéticas se eligieron porque la detección temprana puede
permitir un tratamiento eficaz. Por ejemplo, como se mencionó en
el capítulo 5, la fenilcetonuria es una enfermedad autosómica
recesiva que, de no ser tratada a edad temprana, puede causar dis-
capacidad intelectual. Pero la intervención temprana con una
dieta 1nodifi.cada la previene.
PRUEBAS PRESINTOMÁTICAS Además de la investigación de enfer-
medades genéticas en fetos y recién nacidos, ahora es posible la
investigación de adultos sanos para detectar genes que podrían
predisponerlos a un trastorno genético en el futuro. Este tipo de
investigación se denomina prueba genética presintomática. Por
eje1nplo, se di spone de pruebas presintomáticas para miembros de
famjlias que tienen una forma autosómica dominante de cáncer
de mama. En este caso, la identificación temprana del alelo que
causa la enfermedad permite una vigilancia más est1icta y la
detección temprana de los tun1ores. También existen pn1ebas pre-
sinton1áticas para algunas enfermedades genéticas que no tienen
tratamiento, como la enfermedad de Huntington, una enfermedad
autosómica dominante que provoca un lento deterioro físico y
mental en la mediana edad.
DETECCIÓN SISTEMÁTICA DE HETEROCIGOTOS Otra forma de in-
vestigación genética en adultos es la detección sistemática de
heterocigotos. En este tipo de investigación, se estudia a los
ntiembros de una población para identificar a los portadores hete-
rocigóticos de alelos causantes de enfermedades recesivas: perso-
nas que son sanas pero tienen la posibilidad de tener hijos con una
enfermed ad particular.
155
Trastornos genéticos para los que el American
College of Medica/ Genetics recomienda
detección sistemática obligatoria
Deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena media
Hipotiroid ismo congénito
Fenilcetonuria
Deficiencia de biotinidasa
Anemia drepanocítica (enfermedad de la Hb SS)
Hiperplasia suprarrenal congénita (deficiencia de 21-hidroxilasa)
Acidemia isovalérica
Deficiencia de acil-CoA deshidrogenasa de cadena muy larga
Enfermedad (de la orina) en jarabe de arce
Galactosem ia clásica
Hb S talasemia-~
Enfermedad de la Hb S C
Deficiencia de L-3-hidroxiacil-CoA deshidrogenasa
Acidemia glutá rica tipo 1
Aciduria 3-h idroxi-3-metil glutárica
Deficiencia de proteína trifunciona l
Deficiencia múltiple de carboxilasa
Acidemia metilmalónica (deficiencia de mutasa)
Homocistinuria (secundaria a deficiencia de cistationina ~-sintetasa)
Deficiencia de 3-metilcrotonil-CoA carboxilasa
Hipoacusia
Acidemia metilma lónica
Acidemia propión ica
Defecto de captación de carnitina
Deficiencia de ~-cetotiolasa
Citrulinemia
Acidemia argin inosuccínica
Tirosinemia tipo 1
Fibrosis quística
L a investigación de la enfermedad de Tay-Sachs es un ejemplo
exitoso de detección sisten1ática de heterocigotos. En la pobla-
ción general de Norteamérica, la frecuencia de enfermedad de
Tay-Sachs es solo de alrededor de 1 persona cada 360 000. En los
j udíos askenazfes (descendientes del pueblo j udío que se asenta-
ron en Europa oriental y central), la frecuencia es 100 veces
mayor. Se utiliza una prueba de sangre simple para identificar a
los judíos askenazíes portadores del alelo para enfer1nedad de
Tay-Sachs. Si un hombre y una mujer son ambos heterocigóticos,
se espera que alrededor de uno de cada cuatro de sus hijos presen-
te enfermedad de Tay-Sachs. Las parejas identificadas como por-
tadores heterocigóticos pueden emplear esa información para
156 CAPITULO 6
decidir si tendrán hijos. Asimismo, hay una prueba prenatal para
determinar si el fe to de una pareja de alto ri esgo tendrá enferme-
dad de Tay-Sachs . Los programas de detección sistemática han
logrado una declinación significativa de niños con ascendencia
judía askenazí que nacen con enfermedad de Tay-Sachs (en la
actualidad, 1nenos de 10 niños por año en los Estados Unidos).
CONCEPTOS
Las pruebas genéticas se util izan para investigar enfermedades gené-
ticas en recién nacidos, detectar personas heterocigóticas para enfer-
medades recesivas, detectar alelos que causan enfermedad en aquellos
que todavía no han presentado síntomas de la enfermedad y alelos
defectuosos en fetos. El diagnóstico genético preimplantación combi-
nado con fecundación in vitro permite la selección de embriones sin
enfermedades genéticas específicas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
¿En qué difiere el diagnóstico genético preimplantación de las prue-
bas genéticas prenatales?
Interpretación de las pruebas genéticas
Hoy en día, se dispone de n1ás de mil pruebas genéticas clínicas
y de varios cientos más a través de estudios de investigación. L as
investigaciones futuras aumentarán mucho el número y la com-
plejidad de las pruebas genéticas que aparezcan. Muchas de estas
pruebas estarán destinadas a enfermedades 1nultifactoriales con1-
plejas que son influidas tanto por la genética como por el ambien-
te, entre ellas, arte1iopatía coronaria, diabetes, asma, algunos ti-
pos de cáncer y depresión.
Interpretar los resultados de las pruebas genéticas suele ser
complicado por varios factores. P1in1ero, algunas enfermedades
genéticas son causadas por nu merosas mutaciones diferentes. Por
ejemplo, más de 1000 mutaciones difere ntes en un solo locus
pueden causar fibrosis quística, una enfermedad autosómica rece-
siva en la que el transporte de iones cloruro es defectuosa (véase
p. 106 del cap. S). Por lo general, las pruebas genéticas detectan
solo las mutaciones más frecuentes; no se detectan mutaciones
infrecuentes ni raras. Por lo ta nto, un resultado negativo no impli-
ca ausencia de un defecto genético; so lo indica que esa persona
no tiene una mutación común. Cuando hay miembros de la fami -
lia que presentan la enfermedad, se puede exa minar su DNA para
determinar el carácter de la mutación y después investigar la
misma mutación en otros miembros de la familia, pero esta op-
ción no es factible si no hay fami liares afectados o si no están dis-
puestos a ser estudiados.
Un segundo problen1a reside e n la interpretación de los resul-
tados de las pruebas genéticas. E n una enfermedad genética clá-
sica como la enfermedad de Tay-Sachs, la here ncia de dos copias
del gen prácticamente asegura que la persona tendrá la enferme-
dad. Sin embargo, esto no es así en numerosas enfermedades
genéticas que tienen penetrancia incompleta y en las que inter-
viene n factores ambientales . E n estos casos, ser portador de una
mutación que predispone a la enfermedad solo aumenta el riesgo
de una persona de adquirirla. El riesgo asociado con una muta-
ción particular es una estimación estadística, basada en el efecto
promedjo de la mutación en muchas personas. En esta situación,
el 1iesgo calculado puede aportar escasa información útil a una
persona específica. Asimismo, es importante recordar que para
numerosos rasgos y trastornos genéticos no existe ninguna prue-
ba genética.
CONCEPTOS
La interpretación de las pruebas genéticas es complicada por la pre-
sencia de mú ltiples mutaciones causales, penetrancia incomp leta y la
influencia de factores ambienta les.
Pruebas genéticas directas para el consumidor
En la actualidad, se está ofreciendo una cantidad cada vez rnayor
de pruebas genéticas a c ualquiera interesado en investigar sus pro-
pios trastornos hereditarios, sin requerir de un profesional sanitario.
Se dis pone de estas pruebas genéticas directas para el consumi-
dor a fin de investigar una serie grande y creciente de afecciones
genéticas en adultos y niños, desde trastornos de un único gen,
como la fibrosis quística, hasta cuadros multifactoriales, como obe-
sidad, enfermedad cardiovascular, rendi1niento deportivo y predis-
posición a la adicción a la nicotina. Tainbién existen estas pruebas
directas para investigar paternidad y determinar la ascendencia.
Muchas pruebas genéticas directas para el consunudor se publi-
citan y se solicitan por Internet. Después de que una persona soli-
cita una prueba, la compañia envía un kit para recolectar una
muestra de DNA (en general, células de la saliva, cara interna de
la 1nej illa o una gota de sangre). La persona recolecta la 1nuestra
y la envía de nuevo a la compañía, que realiza la prueba y envía
los resultados a la p ersona. Genetistas, funcionruios de salud pú-
blica y defensores de los consumidores han planteado una serie de
preocupaciones acerca de la investigación genética directa para el
consu1nidor, como preocupaciones respecto de que algunas prue-
bas se proponen sin info1mación ni asesoramiento genético apro-
piado, y que los consumidores a menudo no están prepru·ados para
interpretar los resultados. Otras preocupaciones se centran en la
exactitud de algunas pruebas y en si las indicaciones de riesgo
provistas por la prueba son útiles.
Los defensores de las pruebas genéticas directas para el consu-
midor sostienen que las pruebas per1niten mayor acceso a la inves-
tigación y mayor confidencialidad. Muchos estados no reglame n-
tan la investigación directa para el consumidor y, en la actualidad,
ha y escasa supervisión federal. c:•:..!!!:!~~!!!!::~:=!::!!!!:::!=.!!!~===~!!!:!!::!I
Discriminación genética y privacidad
Con la aparición de muchas pruebas genéticas nuevas, se han plan-
teado preocupaciones acerca de la privacidad concerniente a la
información genética y la posibilidad de discriminación genética.
La investigación muestra que muchas personas con riesgo de
enfermedades genéticas evitan las pruebas porque ten1en que los
resultados les dificulten conseguir un seguro de salud o que la
información afecte de manera adversa su posibilidad de conseguir
empleo. Algunos de los que solicitan pruebas genéticas las pagan
ellos mismos y utilizan nombres falsos para in1pedir que los resul-
tados se conviertan en pruie de su historia clínica. Prácticas pasa-
das han reforzado los temores acerca de la discriminación genéti-
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas
ca. En la década de 1970, algunos afroamericanos identificados
como portadores de anemia drepanocítica (un trastorno autosómi-
co recesivo) enfrentaron discriminación laboral y tuvieron dificul-
tad para obtener un seguro de salud , pese a ser portadores sanos.
En respuesta a estas preocupaciones, el Congreso de los E sta-
dos Unidos promulgó la Genetic Information Nondiscrimina-
tion Act (GJNA, Ley de no disc1iminacióo en función de la infor-
mación genética) en 2008. E sta ley prohíbe que los aseguradores
de salud utilicen la información genética para tomar decisiones
acerca de la cobertura y las tarifas del seguro de salud. También
impide que los empleadores usen la información genética en deci-
siones sobre el empleo, y prohíbe a aseguradores de salud y a
e1npleadores solicitar o exigir que una persona se real ice una
RESUMEN DE CONCEPTOS
■ Las limitaciones respecto del estudio genético de rasgos
humanos incluyen la i1nposibilidad de realizar cruzamientos
controlados, el largo tiempo de generación, el pequeño tama-
ño de las familias y la dificultad para separar influencias
genéticas y ambientales. A menudo, se recurre a árboles gene-
alógicos para estudiar la herencia de rasgos en seres humanos.
■ Por lo general, los rasgos autosómicos recesivos aparecen con
igual frecuencia en ambos sexos y tienden a saltear generacio-
nes. Cuando ambos progenitores son heterocigóticos para un
rasgo autosómico recesivo particular, alrededor de un cuarto
de la descendencia expresará el rasgo. Es más probable que
los rasgos autosómicos recesivos aparezcan en familias con
consanguinidad (apareamiento entre p ersonas estrechamente
emparentadas).
■ Por lo general, los rasgos autosómicos dominantes aparecen
con igual frecuencia en ambos sexos y no saltean generacio-
nes. Cuando un progenitor está afectado y es heterocigótico
para un rasgo autosómico dominante, ah·ededor de la mitad de
la descendencia presentará el rasgo. Normalmente, las perso-
nas no afectadas no transmiten un rasgo autosómico dominan-
te a su descendencia.
■ Los rasgos recesivos ligados al cromosoma X aparecen con
mayor frecuencia en varones que en mujeres. Cuando una
mujer es portadora heterocigótica de un rasgo recesivo ligado
al cromosoma X y el hombre no está afectado, alrededor de la
mitad de sus hijos varones tendrán el rasgo y la mitad de sus
hijas serán po1tadoras no afectadas. Los rasgos ligados al cro-
1noso1na X no se transmiten de padre a hijo.
■ Los rasgos dominantes ligados al cromosoma X aparecen en
varones y mujeres, pero con 1nayor frecuencia en estas últimas.
No saltean generaciones. Los hombres afectados transmiten un
rasgo dominante ligado al cromosoma X a sus hijas, pero a nin-
guno de sus hijos. Las mujeres heterocigóticas transmiten el
rasgo a la mitad de sus hijos y a la mitad de sus hijas.
TÉRMINOS IMPORTANTES
arnniocentesis (p. 152) biopsia de vellosidades
árbol genealógico (p. 141) coriónicas (BVC)
asesoramiento genético (p. 153)
(p. 151) cariotipo (p. 153)
157
prueba genética. Los resultados de las pruebas genéticas reciben
cierto grado de protección de otras reglamentaciones federales
que consideran los usos y revelación de la información de salud
individual. En cambio, GJNA solo cubre las áreas de seguro de
salud y empleo; no se aplica a seguros de vida, discapacidad ni
asistencia a largo plazo. ►
CONCEPTOS
El creciente número de pruebas genéticas y su complejidad han plan-
teado varias preocupaciones, como las referidas a las pruebas directas
para el consumidor, la discriminación genética y la privacidad respec-
to de los resultados de la prueba.
■ Los rasgos ligados al cromosoma Y solo aparecen en varones
y se transmiten del padre a todos los hijos.
■ La concordancia más alta de un rasgo en gemelos monocigóti-
cos que en gemelos dicigóticos indica una influencia genética
sobre el rasgo; menos del 100% de concordancia en gemelos
monocigóticos inctica un a influencia ambiental.
■ Las similitudes entre hijos adoptados y sus padres biológicos
indican la importancia de factores genéticos en la expresión
de un rasgo; las similitudes entre hijos adoptados y sus padres
adoptivos genéticamente no relacionados indican la influencia
de factores ambientales.
■ El asesoramiento genético proporciona información y apoyo a
personas preocupadas acerca de trastornos hereditarios en sus
fa1nilias.
■ Las pruebas genéticas incluyen diagnóstico prenatal, detec-
ción sistemática de alelos causantes de enfermedad en recién
nacidos, detección de personas heterocigóticas para alelos
recesivos y pruebas presinto1náticas para detectar un alelo
causante de enfermedad en personas en 1iesgo.
■ La interpretación de las pruebas genéticas puede ser compli-
cada por la presencia de numerosas mutaciones causales, la
penetrancia incompleta y la influencia de factores an1bien-
tales.
■ La existencia de pruebas genéticas directas para el consumi-
dor ha planteado preocupaciones respecto de la adecuación de
la infonnación proporcionada, la ausencia de asesoramiento
genético, la exactitud, la privacidad y los usos prácticos de
algunas pruebas.
■ Las pruebas genéticas han planteado preocupaciones acerca
de la discrilninación genética y la privacidad respecto de los
resultados. La Genetic lnformation Nondiscrimination Act
prohíbe el uso de información genética para decidir sobre el
acceso a seguros de salud y empleo.
concordancia (p. 148) detección sistemática en sangre
consanguinidad (p. 142) materna (p. 153)
detección sísten1ática de hete- detección siste1nática neonatal
rocigotos (p. 155) (p. 155)
158 CAPfTULO 6

diagnóstico genético
preimplantación (DGP)
(p, 154)
diagnóstico genético prenatal
no invasivo (p. 154)
ecografía (p. 152)
gen1elos dicigóticos
(p. 147)
gemelos monocigóticos
(p . 147)
Genetic Information ondiscrimi-
nation Act (GINA) (p. 157)
probando (p. 141)
prueba genéti ca directa para el
consunudor (p. 156)
pruebas genéticas presintomáti-
cas (p. 155)
separación de células fetales
(p. 154)

l. b 6. d
2. Podría saltear generaciones cuando surge una mutación nueva 7. c
o el rasgo tiene penetrancia reducida. 8. d
3. Si un rasgo es recesivo ligado al cromosoma X, no se trans- 9. El diagnóstico genético preimplantación determina la presen-
mite de padre a hij o. cia de genes causantes de enfermedad en un e mbrión, en un
4. c estadio temprano, antes de que se implante en el útero y se
S. Si el rasgo estuviera ligado al cromosoma Y, un varón afecta- inicie el e mbarazo. El diagnóstico genético prenatal determi-
do lo transmitiría a todos sus hijos varones, mientras que si el na Ja presencia de genes o cromosomas causantes de enfer-
rasgo fu era autosómico y linutado por el sexo, los varones medad en un feto en desarrollo.
heterocigóticos afectados lo transmitirían solo a la rnitad de
sus hijos varones, en promedio.

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
Juana tiene "dedos cortos" (braquidactilia). Tiene dos hermanos mayores que son gemelos idénticos, ambos
con dedos cortos. Las dos hermanas menores de Juana tienen dedos normales. La madre de Juana tiene dedos
norrnales, y su padre tiene dedos cortos. La abuela paterna de Juana (la madre de su padre) tiene dedos cortos;
su abuelo paterno (el padre de su padre), que ya ha fallecido, tenia dedos normales. Ambos abuelos maternos
de Juana (los padres de su 1nadre) tienen dedos normales. Juana se casa con Tomás, que tiene dedos normales;
adoptan un hijo lla1nado Guillenno que tiene dedos normales. Los padres biológicos de GuiUermo tie nen
dedos normales. Después de adoptar a Guillermo, Juana y Tomás tienen dos hijos: una hija mayor con dedos
cortos y un hijo menor con dedos normales.
a. Utilizando símbolos y leyendas convencionales, dibuje un árbol genealógico que ilustre la herencia de
dedos cortos en la familia de Juana.
b. ¿Cuál es el modo de herencia más probable de los dedos cortos en esta familia?
c. Si Juana y Tomás tienen otro hijo biológico, ¿cuál es la probabilidad (basada en su respuesta a la parte b)
de que este hij o tenga dedos cortos?

Estrategia de solución Pasos de la solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al
problema?
a. Un árbol genealógico para representar a la famiHa, dibujado
con los símbolos y leyendas correctos.
b. El modo de herencia más probable para dedos cortos.
c. La probabilidad de que el próximo hijo de Juana y Tomás
tenga dedos cortos.
¿Qué información se proporciona para resolver el
problema?
Los fenotipos de Juana y Ton1ás, y de los miembros de su
familia.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Información sobre árboles genealógicos en la Sección 6.2.
a. En el árbol genealógico de la familia, identifi.- Pista: véase el cua-
que a las personas con el rasgo (dedos cortos) dro 6-2 para repasar
mediante círculos coloreados (muj eres) y cua- los símbolos usados
en un árbol genealó-
drados coloreados (varones). Conecte a los her- gíco.
manos ge1nelos idénticos de Juan a con la línea
de a1Tiba dibujando lineas diagonales que ten-
gan una línea horizontal entre ellas. Encierre entre corchetes
al hijo adoptado de Juana y Tomás; conéctelo con sus pa-
dres biológicos dibujando una línea diagonal y con sus
padres adoptivos dibujando una línea interrumpida.
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas 159

1 dos al cromosoma X, sería esperable que las mujeres con e]

3 4 rasgo lo transmitiera a todos sus hijos varones, pero Juana
(III-6), que tiene dedos cortos, tuvo un hijo varón con
11 dedos normales. En caso de rasgos dominantes ligados a1
1 2 cromosoma X, los hombres afectados deben transmitir el
rasgo a todas sus hijas; como el varón Tl-1 tiene dedos cor-
111 tos y tuvo dos hijas sin dedos cortos (ill-7 y ill-8), sabemos
l que el rasgo no puede ser dominante ligado al cromosoma
X. Es improbable que el rasgo sea autosómico recesivo,
IV porque no saltea generaciones, y alrededor de la mitad de
los hijos de padres afectados tienen el rasgo.
2 3
c. Si tener dedos cortos es autosómico dominante, Tomás
b. En esta familia, el modo de herencia más probable para debe ser bomocigótico (bb) para dedos normales, porque él
dedos cortos es autosómico donunante. El rasgo aparece tiene dedos normales. Juana debe ser heterocigótica (Bb)
por igual en varones y mujeres, y no saltea generacio- porque ella y Tomás han tenido hijos con <lodos cortos y
Pista: véase el
cuadro 6-3 nes. Cuando un progenitor tiene el rasgo, este aparece con dedos normales. En un cruzanüento entre un heteroci-
para repasar las en alrededor de la mitad de los hijos e hijas de ese goto y un homoci goto, se espera que la mitad de Ja proge-
características nie sea heterocigótica, y la otra mitad, homocigótica (Bb x
de los diferen-
progenitor, aunque el número de hijos de las familias
tes modos de es pequeño. Podemos elüninar la herencia ligada al bb ➔ 1/2 Bb, 1/2 bb); por consiguiente, la probabilidad de
herencia. cromosoma Y porque el rasgo se observa en n1ujeres y que el siguiente hijo biológico de Juana y Tomás tenga
en varones. Si los dedos cortos fueran recesivos liga- dedos coitos de 1/2.

Problema 2
Se midieron los valores de concordancia para una serie de rasgos ,e n gemelos m onocigóticos y dicigóticos; los
resultados se muestran en el siguiente cuadro. Para cada rasgo, indique si las tasas de concordancia sugieren
influencias genéticas, influencias ambientales o ambas. Explique s u razonamiento.

Concordancia ( % )
Pasos de la solución
Característica Monocigóticos Dicigóticos
a. La concordancia para el grupo de sangre ABO en Recuerde: la con-
a. Grupo de sangre ABO 100 65 cordancia más alta
los gemelos monocigóticos es del 100%. Esta alta
b. Diabetes 85 36
concordancia en ge111elos monocigóticos no indi- en gemelos homo-
cígóticos que en
c. Beber café 80 o ca, por sí 1nisma, una base genética para el rasgo. gemelos dicigóticos
d. Fumar 75 42 Con10 la concordancia para el grupo de sangre indica la influencia
de factores genéti-
e. Esqt1izofrenia 53 16 ABO es sustancialmente más baja en los gemelos cos sobre el rasgo.
dicigóticos, podríamos concluir con seguridad que
los genes desempeñan un papel en determinar diferencias
Estrategia de solución de los grupos de sangre ABO.
b. La concordancia para diabetes es sustancialmente Recuerde: la con-
cordancia menor
más alta en ge1n elos monocigóticos que en geme- del 100% en
¿Qué información se requiere en su respuesta al
los dicigóticos; por lo tanto, podemos concluir que gemelos monocí-
problema? factores genéticos desempeñan cierto papel en la góticos índica que
factores ambienta-
Indicar para cada rasgo si está influido por factores genéticos, susceptibilidad a la diabetes. El hecho de que los les desempeñan un
facto res ambientales o ambos. gemelos monocigóticos muestren una concordan- papel en el rasgo.
cia menor de 100% sugiere que también intervie-
¿Qué información se proporciona para resolver el nen factores ambientales.
problema? c. Los gemelos tanto monocigóticos como dicigóticos mues-
Los valores de concordancia para cada rasgo en gemelos tran la misma concordancia alta para beber café; por lo
monocigóticos y dicigóticos. tanto, podernos concluir que hay escasa influencia genética
sobre el hábito de beber café. El hecho de que la concor-
Para obtener ayuda con este problema, repase: dancia sea menor que 100% en gemelos monocigóticos
Concordancia en gemelos, en la sección 6.3. sugiere la intervención de factores ambientales.
160 CAPITULO 6
d. La concordancia para tabaquismo es más baja en gemelos
dicigóticos que en gemelos monocigóticos; por lo tanto,
factores genéticos parecen influir en la tendencia a fumar.
El hecho de que los gemelos rnonocigóticos tengan una
concordancia menor del 100% sugiere que también inter-
vienen factores ambientales.
l. ¿Cuáles son los tres factores que complican la tarea de estu-
diar la herencia de las características humanas?
Sección 6.2
2. ¿Quién es el probando en un árbol genealógico? ¿El proban-
do siempre se encuentra en la última generación del árbol
genealógico? ¿Por qué o por qué no?
3. Para cada uno de los siguientes modos de herencia, descri-
ba las características que se mostrarán en un árbol genealó-
gico en el que el rasgo está presente : herencia autosómica
recesiva, autosómica dominante, recesiva ligada al cro1no-
soma X , do1ninante ligada al cromosoma X y ligada al cro-
mosoma Y.
4. ¿En qué difiere el árbol genealógico de un rasgo autosómico
recesivo del árbol genealógico de un rasgo recesivo ligado al
cro.moso1na X?
5. Además del hecho de que un rasgo ligado al cromosoma Y
aparece solo en varones, ¿en qué difiere el árbol genealógico
de un rasgo ligado al cro111osoma Y del árbol genealógico de
un rasgo autosómico dominante?
Sección 6.2
6. ¿Cuáles son los dos tipos de gemelos y cómo se originan?
7. Explique cómo puede utilizarse una comparación de concor-
dancia en gemelos monocigóticos y dicigóticos para determi-
nar en qué grado la expresión de un rasgo es influida por
genes o por fac tores ambientales.
PREGUNTAS Y PROBLEMAS DE APLICACIÓN
Sección 6.1
*18. Si los seres humanos tienen características que los tornan
inadecuados para el análisis genético, como largo tiempo
de generación, fami lias de pequeño tamaño y cruzamien-
tos no controlados, ¿por q ué los genetistas estudian a Jos
seres humanos? Mencione varias razones por las que los se-
res humanos han sido el foco de tanto estudio genético.
Sección 6.2
*19. José es daltónico. Tanto su padre como su madre tienen
visión normal, pero el padre de su madre (el abuelo mater-
no de José) es daltón ico. Todos los demás abuelos de José
tienen visión normal de los colores. José tiene tres herma-
nas: Patricia, Beatriz y Laura, todas con visión normal de
los colores. La hermana mayor de José, Patricia, está casa-
e. Los gemelos monocigóticos muestran concordancia sustan-
cialmente más alta para la esquizofrenia que los gemelos
dicigóticos; por lo tanto, podemos concluir que este trastor-
no es influido por fac tores genéticos. Como la concordan-
cia en gemelos monocigóticos es sustancialmente menor
del 100%, es posible concluir que también intervienen fac-
tores ambientales en el trastorno.
8. ¿Cómo se utilizan los estudios de adopción para separar el
efecto de los genes y el ambiente en el estudio de las caracte-
rísticas humanas?
Sección 6.2
9. ¿ Qué es el asesoramiento genético?
*10. Mencione por lo menos cuatro razones diferentes para
solicitar asesoramiento genético.
11. Defina de manera sucinta la detección sistemática neona-
tal, la detección sisten1ática de heterocigotos, las pruebas
presinton1áticas y el diagnóstico prenatal.
*12. Compare las ventajas y las desventajas de la amniocente-
sis frente a la biopsia de vellosidades co1iónicas para el
diagnóstico prenatal.
13. ¿ Qué es el diagnóstico preimplantacíón?
14. ¿En qué se diferencia la detección sistemática de beteroci-
gotos de la investigación genética presintomática?
*15. ¿Qué son las pruebas genéticas directas para el consumi-
dor? ¿ Cuáles son algunas de las preocupaciones respecto
de estas pruebas?
*16. ¿Qué actividades prohfbe la Genetic lnformation
Nondiscrimination Act?
17. ¿Cómo podrían las pruebas genéticas llevar a la discrimi-
nación genética?
da con un hombre que tiene visión normal de los colores,
pero tiene dos hijos, un varón de 9 años daltónico y una
niña de 4 años con visión normal de los colores.
a. Usando símbolos y leyendas convencionales, dibuje un
árbol genealógico de la fa1nilia de José.
b. ¿ Cuál es el modo de herencia más probable del dalto-
nismo en la familia de José?
c. Si José se casa con una mujer que no tiene anteceden-
tes familiares de daltonismo, ¿cuál es la probabilidad
de que su primer hijo sea un varón daltónico?
d. Si José se casa con una mujer portadora del alelo para
daltonismo, ¿cuál es la probabilidad de que su pri mer
hijo sea un varón daltónico?
e. Si Patricia y su esposo tienen otro hijo, ¿cuál es la pro-
babilidad de que el niño sea un varón daltónico?
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas 161

20. Considere el árbol genealógico mostrado en la figura 6-3. a. Sobre la base del árbol genealógico, ¿cuál es el modo
a. Si el individuo IV-7 se casara con una persona que no de herencia para la enfermedad? Explique su razona-
presentara síndrome de Waardenburg, ¿cuál sería la miento.
probabilidad de que su primer hijo tuviera este síndro- b. Desde su respuesta de la parte a, mencione los genoti-
1ne? Explique su razonamiento. pos más probables de todas las personas del árbol
b. Si los individuos N-4 y N-5 se aparearan y tuvieran un genealógico.
hijo, ¿cuál sería la probabilidad de que el niño tuviera 23. Un hombre con un rasgo genético inusual específico se
síndrome de Waardenburg? Explique su razonamiento. casa con una mujer no afectada y tienen cuatro hij os. Los
21. Numerosos estudios han sugerido una fuerte predisposi- árboles genealógicos de esta frunilia se muestran en las
ción genética a las cefaleas migrañosas, pero el modo de partes a a e, pero no se indica la presencia o la ausencia
herencia no se conoce con claridad. L. Russo y cols. exa- del rasgo en los hijos. Par a cada tipo de herencia, indique
O í DATOS

minaron las cefaleas migrañosas en varias familias, dos de
las cuales se muestran abajo (L. Russo y cols. 2005.
American Journal of Human Genetics 76:327-333). ¿Cuál
es el modo de herencia 1nás probable de las cefaleas
migrañosas en estas fami lias? Explique su razonruniento.
1
Familia 1
cuántos hijos de cada sexo se espera que expresen el rasgo
coloreando los círculos y cuadrados apropiados. Asuma
que el rasgo es raro y tiene penetrru1cia completa.
a. Rasgo autosómico recesivo
1 2

11
1 2 3 4 5 b. Rasgo autos6mico dominante

111
l 2 3 4

1 c. Rasgo recesivo ligado al cromosoma X

Familia 2 1 2

11
1 2 3 4 5 6 7 8 9

d. Rasgo dominante ligado al cromosoma X

111
1 2 3 4 5

*22. La enfermedad de Dent es un trastorno renal en el que hay

f;;" alteración de la reabsorción de los solutos filtrados e insu- e. Rasgo ligado al cromosoma Y
., ••,., ficiencia renal progresiva. R . R. Hoopes y cols. estudiaron
las mutaciones asociadas con enfermedad de Dent en la
siguiente fa1nilia (R. R. Hoopes y cols. 2005. American *24. Para cada uno de los siguientes árboles genealógicos,
Journal o.f Human Genetics 76:260-267). mencione el modo de herencia más probable asumiendo
que el rasgo es raro. Explique de manera detallada su
razonamiento.
1 1
l

11 11
2 3 4 5 8 9 1 2 5

111
111
1 2 3 4 5 6 7 8 4 5 8 9 10

IV
IV
2 l 2 3 4 5 6
162 CAPITULO 6

b. 1 25. El rasgo representado en el siguiente árbol genealógico se

expresa solo en los varones de la familia. ¿El rasgo está
ligado al cromosoma Y? ¿Por qué o por qué no? Si consi-
11 dera que el rasgo no está ligado al cromoso1na Y, propon-
ga una explicación alternativa para su herencia.
7 8 9

111 1

l 2 2
3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

IV 11

1 2 3 4 5 6 7 8 1 2 3 4 5 6

111
c. 1 1 2 3 4 5 6 7 8
1 2 IV
11 1 2

2 3 4 5 6 7 8
26. El siguiente árbol genealógico ilustra la herencia del sín-
111 f;"' drome de Nance-Roran, un trastorno genético raro en el
º'º"'"' que las personas afectadas tienen cataratas y dientes de
1 2 3 4 5 6 7
fonna anormal.
IV
1 2 3 4 5 1
1 2

d. 1 11
1 2 1 2 3 4

11 111
3 4 5 6 7 8 1 2 3 4 5 6 7 8
111 IV
5 6 7 8 9 10 11 12 1 2 3 4 5 6 7
V
1 2 3 4 5 6 7 8 9 l 2 3 4
(Árbol genealógico adaptado de D. Stambolian, R. A. Lewis, K.
Buetow, A. Bond y R. Nussbaum. American Journal of Human
e. 1 Genetics 47: 15).

l 2

11 a. Sobre la base de este árbol genealógico, ¿cuál piensa

que es el modo de herencia n1ás probable del síndrome
l 2 3 4 5 de Nance-Roran?
11
b. Si la pareja III-7 y III-8 tiene otro hijo, ¿cuál es la pro-
habilidad de que el niño presente síndrome de Nance-
l 2 3 4 5 6 7 8 Roran?
c. Si III-2 y III-7 se aparearan, ¿cuál sería la probabilidad
IV
de que uno de sus hijos tuviera síndrome de Nance-
1 2 3 4 5 6 7 8 9 R oran ?
 Análisis de árboles genealógicos, aplicaciones y pruebas genéticas 163

27. El siguiente árbol genealógico ilustra la herencia del cabe- 1

f;:,_" llo anillado, un cuadro en el que cada cabello se diferencia 1 2
º'DA'º' en zonas claras y oscuras. ¿ Qué modo o modos de heren-
cia son posibles para el rasgo de cabello ani llado en es ta 11
-"'~-: ,· ?
li::U lllila.
2 3 4 5 6 7 8 9

1
111
l 2
2 3 4 5 6 7 8
11

1 2 3 4 5 6 7 IV
l 2
111
(Árbol genealógico adaptado de L. Lammi, 2004. American Journal of Human
Genetics 74:1043-1050).
1 2 3 4 5
IV

1 a. ¿Cuál es el modo de herencia más probable para la age-

(Árbol genealógico adaptado de L. M . Ashley y R. S. Jacques.
nesia den tal en esta familia? Explique su razonamiento.
1950. Journaf of Heredity 41 :83). b. ¿Son monocig6ticos o dicigóticos los dos pares de
gemelos de esta familia? ¿ Cuál es la base de su res-
puesta?
28. La ectrodactilia es un trastorno raro en el que los dedos c. Si IV-2 se casara con un hombre que tiene su dentadura
completa, ¿cuál es la probabilidad de que su hijo pre-
f;:,_" están ausentes y la m ano está dividida. Por lo general, se sentara agenesia dental?
º'º.'º' hereda como un rasgo autosómico do1ninante. Ademar
Freire-Maia comunicó la aparición de ectrodactilia en una d. Si ill-2 y ill-7 se casaran y tuvieran un hijo, ¿cuál es la
fan1ilia de San Pablo, Brasi l, cuyo árbol genealógico se probabilidad de que su hijo tuviera agenesia dental?
muestra aquí. ¿Es este árbol genealógico consistente con
herencia autosómica dominante? De no ser así, ¿qué Sección 6.3
modo de herencia es el más probable? Explique su razo-
namien to. *30. Un genetista estudia una serie de características en geme-
los monocigóticos y dicigóticos y obtiene las concordan-
cias enumeradas a continuación. Para cada característica,
1 indique si las tasas de concordancia sugieren influencias
1 2 genéticas, influencias ambientales o ambas . Explique su
razonamiento.
11
1 2 3 4 5 6 7 8 9 Concordancia ( % )
Característica Monocigóticos Dicigóticos
111 Cefaleas migrañosas 60 30
J 2 3 4 5 6 7 8 Color de ojos 100 40
Sarampión 90 90
IV Pie bot 30 '10
J 2
Hipertensión 70 40
(Árbol genealógico adaptado de L. Lammi, 2004. American Joumal of Human
Genetics 7 4: 1043-1050).
Dominancia 1nanual 70 70
Hipertensión 70 40
Tu bercu losis 5 5
29. La ausencia completa de uno o más dientes (agenesia den-
N.."'"-'"' tal) es un rasgo comtín en los seres humanos; de hecho, 31. Sobre la base de las tasas de concordancia mostradas en el
I · V\ más del 20% de los seres humanos carecen de uno o n1ás
Of DATOS
cuadro 6.2, ¿la variación en la artritis reumatoide es
de sus terceros molares. Sin en1bargo, la ausencia más influida por factores genéticos, an1bientales o ambos?
iJnportante de dientes, definida como la falta de seis o más Explique su r azonamiento.
dientes, es menos frecuente y suele ser un cuadro heredi ta- 32. M. T. Tsuang y cols. estudiaron la dependencia de drogas
rio. L. Lammi y cols. examinaron ]a agenesia dental en la /{;.."' en pares de gemelos varones (M. T. Tsuang y cols. 1996.
familia finlandesa representada en el árbol genealógico ., •.,., An1erican Joun1al of Human Genetics 67:473-477).
siguiente (L . L ammi, 2004. American Joumal of Human Observaron que 82 de 313 ge1nelos m onocigóticos eran
Genetics 74: 1043-1050). concordantes para abuso de una o más drogas ilícitas,
 164 CAPITULO 6

mientras que 40 de 243 gemelos dicigóticos eran concor-
dantes para el mismo rasgo. Calcule las tasas de concor-
dancia para abuso de drogas en estos gemelos monocigóti-
cos y dicigóticos. Sobre la base de estos datos, ¿qué con-
clusión puede extraer sobre la participación de factores
genéticos y ambientales en el abuso de drogas?
*33. En un estudio de esquizofrenia (un trastorno mental que
consiste en desorganización del pensamiento y retraimien-
to de la realidad) , los investigadores estudiaron la preva-
lencia del trastorno en los padres biológicos y adoptivos
de personas que fueron adoptadas de niños; hallaron los
siguientes resultados:
Prevalencia de esquizofrenia
Padres Padres
Personas adoptadas biológicos adoptivos
Con esquizofrenia 12 2 35. ¿Qué problemas éticos, si es que hay alguno, podrían
Sin esquizofrenia 6 4
(Fuente: S. S. Kety y cols. 1978. The Nature of Schizophrenia: New Approaches to
Research and Treatment, L. C. Wynne, R. L. Cromwell, and S. Matthysse, Eds. New
York: Wiley, 1978, pp. 25-37).
¿ Qué conclusión puede extraer de estos resultados respec-
to del papel de la genética en la esquizofre1úa? Explique
su razonamiento.
34. ¿Qué conclusiones avala la figura 6-13?
a. Los padres adoptivos de niños obesos tiene un IMC
más alto que los padres adoptivos de niños delgados.
b. Las madres adoptivas de niños delgados tienen IMC
más bajo que las 1nadres adoptivas de niños obesos.
c. Los padres biológicos de niños obesos tienen IMC más
alto que los padres adoptivos de niños delgados.
d. Tanto a como b.
e. Tanto a como c.
Sección 6.4
surgir del uso generalizado de diagnóstico genético pre-
natal no invasivo, que puede llevarse a cabo mucho antes
que la amniocentesis o la biopsia de vellosidades corió-
nicas?

PREGUNTAS DE DESAFÍO

Sección 6.1 a. Si usted considera solo las generaciones I a m, ¿cuál es

36. N umerosos estudios genéticos, en particular los de rasgos
recesivos, se han centrado en poblaciones humanas peque-
ñas y aisladas, como las de las islas. Sugiera una o más
ventajas que podrían ofrecer las poblaciones aisladas para el
estudio de rasgos recesivos.
el modo de herencia más probable para este tipo de sor-
dera?
b. Ofrezca una posible explicación para el cruzamiento
entre ill-7 y III-9 y los resultados para las generaciones
IV a V.

Sección 6.2 Sección 6.3

37. Dibuje un árbol genealógico que represente un rasgo auto-
só1nico dominante, li nútado por el sexo a varones, y que
descarte la posibilidad de que el rasgo esté ligado al cromo-
soma Y.
38. A. C. Stevenson y E. A. Cheeseman estudiaron la sordera
A:..••u•" en una familia del Irlanda del Norte y registraron el siguien-
!.~~ te árbol genealógico (A. C. Stevenson and E. A. Cheese-
man. 1956. Annals of H uman Genetics 20: 177-23 1).
1 dicigóticos y monocigóticos?
2 3
39. A menudo, los gemelos dicigóticos se dan en familias, y su
frecuencia varía según los grupos étnicos, mientras que los
gemelos monocigóticos rara vez se dan en familias, y su
frec uencia es bastante constante en todos los grupos étni-
cos. Estas observaciones se han interpretado como eviden-
cia de una base genética para la variación en gemelos dici-
góticos, pero de escasa base genética para la variación en
gemelos monocigóticos. ¿Puede usted sugerir una razón de
estas diferencias en las tendencias genéticas de gen1elos
4

11
1 2 3 4 5 6 7 8 9

111

IV

V
1 2 3 4
(Arbol genealógico adaptado de A. C. Stevenson and E. A. Cheeseman. 1956.
A1nals of Human Genetics 20:177-231 ).
 7
Ligamiento, recombinación y mapeo
de genes eucariontes

Genes ligados y calvicie

Para muchos, la calvicie es la maldición de la vitilidad.
El 25% de los hombres comienzan a quedar calvos a los
30 años de edad, y casi la mitad presenta algún grado de
calvicie a los 50 años. En los Estados Unidos, la calvi-
cie afecta a más de 40 mi llones de hombres, y se gastan
cientos de millones de dólares todos los años en trata-
mientos contra la caída del cabello. La calvicie no es
solo una cuestión de vanidad: los ho1nbres calvos tienen
mayor probabilidad de presentar cardiopatías, hiperten-
sión y cáncer de próstata.
La calvicie puede deberse a una serie de razones
diferentes, coro.o enfermedades, lesiones, fármacos y la
herencia. El tipo más común de calvicie en los hombres
es la de patrón masculino (conocida técnicamente
como alopecia androgénica) en la que se observa pérdi-
da prematura del cabello de la región frontal y superior
de la cabeza. Más del 95% de los casos de caída del
cabello en los hombres co1Tesponde a calvicie de
patrón masculino. Aunque esta se observa también en
las muj eres, suele expresarse en forma débil como lige-
ro afinanuento del cabello. El rasgo es estitnulado por
las hormonas sexuales masculinas (andrógenos), como
pone en evidencia la observación de que los varones
castrados a edad temprana rara vez presentan calvicie
(si bien esto no se recomienda como tratamiento pre-
ventivo).
Desde hace tiempo, se ha reconocido una fuerte
La calvicie de patrón masculino es un rasgo hereditario. Investigaciones influencia hereditaria sobre la calvicie de patrón mascu-
recientes demostraron que un gen para calvicie de patrón masculino está ligado a lino, pero el modo preciso de herencia ha sido ten1a de
marcadores genéticos localizados en el cromosoma X, lo que llevó a descubrir que controversia. Un estudi o inicial sugirió que era autosó-
la calvicie de patrón masculino es influenciada por la variación del gen del recep- mica dominante en los varones y recesiva en las muje-
tor de andrógenos. El rasgo se observa en John Adams (1735-1826), el segundo
res, un ejemplo de un rasgo influido por el sexo (véase
presidente de los Estados Unidos. (Smithsonian American Art Museum,
cap. 5). Otra evidencia y el folclore sugerían que un
Washington, DC/Art Resou rce, NY).
hombre heredaba la calvicie de la familia materna, con
herencia ligada al cromosoma X.
En 2005, el genetista Axel Hillmer y cols. comenza-
ron a localizar el gen que causa calvicie de patrón masculi no. Sospechaban que el gen podría
ubicarse en el cromosoma X. Las variantes genéticas empleadas en el estudio fueron polirnor-
f1sn1os de nucleótidos únicos (SNP, single-nucleotide polymorprusms), que son posiciones del
genon1a en las que los individuos varían en un solo nucleótido. Los genetistas estudiaron la
herencia de la calvicie de patrón masculino y los SNP de 95 familias en las que por lo menos
dos hermanos habían presentado calvicie de patrón masculino a temprana edad.
Hillmer y cols. observaron que la calvicie de patrón masculino y los SNP del cromoso-
ma X no se heredaban de manera independiente, como predecía el principio de Mendel de
la segregación independiente. En cambio, tendían a heredarse juntos, lo que ocurre cuando

165
166 CAPITULO 7

los genes muestran ligamiento fís ico en el mismo cromosoma y se segregan juntos durante la
me1os1s.
Como aprenderemos en este capítulo, un proceso denominado recombinación o entrecruzamiento
rompe el ligamiento entre genes. En 1911, Thomas Hunt Morgan y su estudiante Alfred Sturtevant
demostraron en moscas de la fruta que los genes pueden mapearse determinando las tasas de
reco1nbinación entre ellos. Aplicando este método a fami lia con calvicie de patrón masculino,
Hillmer y cols. de1nostraron que e l gen para calvicie de patrón masculino está estrechamente ligado
a SNP localizados en la posición p1 2-22 del cromosoma X. Esta región incluye el gen del receptor
de andrógenos, que codifica una proteína que se une a hormonas sexuales masculinas. Dada la clara
participación de las hormonas masculinas en la aparición de calvicie de patrón masculino, el gen
del receptor de andrógenos parecía un candidato probable a causar este tipo de calvicie. Análisis
adicional reveló que ciertos alelos del gen del receptor de andrógenos tenían una estrecha asocia-
ción con la herencia de la calvicie de patrón masculino, y que el gen de l receptor de andrógenos es,
casi sin duda, responsable de gran parte de las diferencias de la calvi cie con patrón masculino
observadas en las familias examinadas. Otros estudios ll evados a cabo en 2008 hallaron que genes
de los cromosomas 3 y 20 tambié n parecen contribuir a la expresión de la calvicie de patrón mas-
culino. ►

E ste capítulo explora la herencia de genes localizados en el

mismo cr on1osoma. Estos genes ligados no obedecen de ma-
nera estricta el principio de Mendel de la segregación indepen-
La separación independiente de los alelos determina recombi-
nación, la redistribución de los alelos en nuevas combinaciones.
Considere un cruza1niento entre individuos homocigóticos para
diente, sino que, más bien, tienden a heredarse juntos. Esta ten- dos pares diferentes de aJelos: AA BB x aa bb. El primer progeni-
dencia exige un nuevo enfoque para comprender su herencia y tor, AA BB, produce gametos con los alelos A B , y el segundo pro-
predecir los tipos de descendencia producidos. Un dato de crucial genitor, aa bb, produce gametos con los alelos a b, que generan
relevancia necesario para predecir los resultados de estos cruza- la progenie F 1 con genotipo Aa Bb (fig. 7-1). Recombinación sig-
mientos es la disposición de los genes en los cromosomas; por
consiguiente, ser á necesar io considerar la relación entre genes y
cromosomas. Una clave para comprender la herencia de los genes
ligados es establecer la conexión conceptu al entre genotipos de
un cruzamiento y comportamiento de los cromosomas durante la P generation
. .
n1e1os1s. AABB X aa bb
Comenzaremos nuestra exploración del liganuento comparan-
do , en prüner término, la herencia de dos genes ligados con la Formación de gameto Formación de gameto
herencia de dos genes que se segregan de manera independi ente.
Después, examinaremos cómo la recombinación separa los genes Gametos
ligados. Se empleará este conocimiento sobre el ligamiento y la
recombinación para predecir los resultados de cruzamientos
genéticos en los que los genes están ligados y para mapear los
genes. M ás adelante en este mismo capítulo, consideraremos
métodos físicos para determinar las JocaLi zaciones cromosómicas Generación F1
de los genes. La sección final analiza la variación de las tasas de AaBb
recombinación. •- --
Formación de gameto~

7.1 Los genes ligados no se segregan

de manera independiente Gametos @ @
\ J
El capítulo 3 presentó los principios de Mendel de la segregación y

y la segregación independiente. Antes de proseguir, repasemos Combinaciones originales Nuevas combinaciones

de alelos (gametos de alelos (gametos
estos dos conceptos importantes. El principio de la segregación
no recombinantes) recom bi nantes)
afirma que cada organisn10 diploide tiene dos alelos en un locus
que se separan durante la n1eiosis, y que un alelo ingresa en cada - ..... Conclusión: a través de la recombinación, los
gameto. El principio de la segregación independiente aporta in- gametos contienen nuevas combinaciones de alelos.
formación adicional acerca del proceso de segregación: afirma
que, durante el proceso de separación, los dos alelos de un locus Figura 7-1. La recombinación es la redistribución de alelos en nuevas
actúan independientemente de los alelos de otros locus. combinaciones.
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 167

nifica que, cuando se reproduce un individuo de la progenje F 1, la Experimento

combinación de alelos de sus gametos puede diferir de las co1n-
Pregunta: ¿se clasifican independientemente los genes para
binaciones de los gametos de sus progerutores. En otras palabras,
el color y la forma del polen en los guisantes dulces?
la generación F 1 puede producir gametos con nuevas combina-
ciones de alelos A b o a B además de los gametos parentales con Métodos Cruce dos cepas homocigotas para dos rasgos
A Boa b. difenrentes.
Los principios de Mendel de la segregación y la segregación
independiente derivaron de observar la progenie de cruzamientos Generación P
genéticos, pero él no conocía los procesos biológicos que produ- Cepas homocigóticas
cían estos fenómenos. En 1903, Walter Sutton propuso una base
Flores violetas, Flores roj as,
biológica para los principios de Mendel, denominada teoría cro- polen alargado polen redondo
mosómica de la herencia, que sostiene que los genes se encuen-
tran en los cro1nosomas (véase cap. 3). Reformulemos los dos
principios de Mendel en relación con la teoría cromosómica de la X
herencia. El principio de la segregación afirma que un organismo
diploide posee dos alelos para una característica, cada uno de los
O Polen
l V
J
cuales se localiza en la misma posición, o locus, de cada uno de
Fecundación
los dos cromosomas homólogos. Estos cromosornas se segregan
durante la meiosis, y cada gan1eto recibe un bo1nólogo. El princi- _________ _________ ,
pio de la segregación independiente afirma que, dw·ante la meiosis, Generación F1
cada par de cromosomas homólogos se segrega independiente- Flores violetas,
mente de otros pares homólogos. Gracias a esta nueva perspecti- polen alargado
va, es fácil observar que el número de cromosomas de la mayoría
de los organismos es limitado y que sin duda hay 1nás genes que
cromosomas; por lo tanto, algunos genes deben estar presentes en
el mismo cromosoma y no deben segregarse de manera indepen-
diente. Los genes que se ubican juntos en el .m ismo cromosoma
se denominan genes ligados y pertenecen al mi smo grupo de
ligamiento. Los genes ligados migran juntos durante la meiosis y,
por último, llegan al mismo destino (el misn10 gameto) y no se Resultados
espera que se segreguen de manera independiente. Generación F2
Todas las caracte1ísticas estudiadas por Mendel en l.os guisan-
tes sí presentaban segregación independiente, y tras el redescubri-
miento del trabajo de Mendel, las primeras características genéti-
cas estudiadas en otros organismos también parecían segregarse
en forn1a independiente. ¿Cómo podía ser que los genes estuvie-
ran presentes en un número limitado de cromosomas y aun así se
segregaran independientemente? 284
o 21 21
o
Esta aparente inconsistencia entre el principio de la segregación f lores flores flores flores
violetas, violetas, rojas, rojas,
independiente y la teoría cron1osómica de la herencia desapareció
polen polen polen polen
tan pronto como los biólogos comenzaron a hallar características alar gado redondo alargado redondo
genéticas que no mostraban segregación independiente. Uno de
los primeros casos fue informado en los guisantes dulces por
William Bateson, Edith Rebecca Saunders y Reginald C. Punnett Conclusión: la prog enie F2 no aparece en la pro porción
9:3:3:1 esperada en caso de segregación independiente.
en 1905. Ellos cruzaron una cepa homocigótica de guisantes que
tenían flores de color violeta y granos de polen alargados con otra
Figura 7-2. Segregación no independiente del color de las flores y la
cepa homocigótica que tenía flores de color rojo y granos de
forma del polen en los guisantes dulces.
polen redondos. Toda la generación F 1 tenía flores de color viole-
ta y granos de polen alargados, lo que indicó que el color violeta
era dominante sobre el rojo y el polen alargado sobre el redondo.
Cuando entrecruzaron la generación Fl' la progenie F 2 no apare- 7.2 Los genes ligados se segregan juntos
ció en ]a proporción 9:3:3:1 esperada en caso de segregación y el entrecruzamiento produce
independiente (fig. 7-2). Numerosas plantas de la generación F 2
recombinación entre ellos
tenían flores de color violeta y polen alargado o flores de color
rojo y polen redondo (los fenotipos parentales). Si bien Bateson, Por lo general, los genes muy cercanos del mismo cro1nosoma se
Saunders y Punnett no pudieron explicar estos resultados, ahora segregan como una unidad y, por lo tanto, se heredan juntos. Sin
sabemos que los dos locus que examinaron se ubican juntos en el embargo, a veces los genes pasan de un cromosoma homólogo a
mismo cromosoma y, por lo tanto, no se segregan de manera inde- otro 1nediante el proceso de entrecruzam iento (véase cap. 2),
pendiente. corno ilustra la figura 7-3. El entrecruzamiento da como resulta-
168 CAPITULO 7

Meiosis 1 Meiosis 11

Profase tardía 1 Metafase 1 Anafase 1 Metafase 11 Anafase 11 Gametos

Entrecruzam iento 1
'
,, . , ,.,..,.

► 1rc*~- ►
,-1'(( ~---..::::::: ' ..
~ . . .. --~ --~
r~ ►
~ JI\ fl\~ ►
t[q ~ -f
/~ f ~\~ ~ 1/ \\t,, ~
.~
1
1
}
Cromosomas
. .,~
::. ""• ~
.,.....
~
recombinantes

Los genes pueden cambiar de un cromosoma

a su homólogo por entrecruzamiento en la [En la meiosis 11, los genes que ] r:;-segregarán de 7 ~ terminarán e~
normalmente están ligados ... ~ era independient~ ~ rentes gamet~
meiosis l. \..._

Figura 7-3. El entrecruzamiento se produce en la meiosis y es responsable de la recombinación.

do la recombinación; rom pe las asociaciones de genes cercanos
entre sí en el mismo cromosoma. El liga1niento y el entrecruza-
miento se pueden considerar como procesos que ejercen efectos
opuestos: el ligamiento mantiene juntos a genes particulares, y el
entrecruzan1iento los 1nezcla y produce nuevas combinaciones de
genes. En el capítulo 5, analizamos una serie de excepciones y
extensiones de los principios de Mendel de la herencia. E l con-
cepto de genes ligados añade una complicación más a la interpre-
tación de los resultados de cruzamientos genéticos. Sin embargo,
si comprendemos cómo el ligamiento afecta la herencia, podre-
mos analizar cruzamientos para genes ligados y predecir con
éxito los tipos de progenie se que producirán.
una línea, y se acepta que los genes locali zados del mismo lado
de la línea se encuentran en el mismo cromosoma:
A B
a b
Esta notación puede si mplificarse aún más separando los alelos
de cada cromosoma con una barra: A 8 / abº
Recuerde que los dos alelos de un locus siempre se localizan en
diferentes cromosomas homólogos y, por lo tanto, deben estar en
lados opuestos de la línea. En consecuencia, nunca debemos
escribir genotipos como

A a
Notación para cruzamientos
con ligamiento B b

Al analizar cruzamientos con genes ligados, debemos conocer no porque los alelos A y a nunca pueden estar en el mismo cron10s0-
solo los genotipos de los individuos cruzados, sino también la dis- ma. También es importante mantener siempre el mismo orden de
posición de los genes en los cromosomas. A fin de rastrear esta Los genes a ambos lados de la línea; por lo tanto, nunca debemos
di sposición, introducimos un nuevo siste1na de notación para pre- escribir:
sentar cruzamientos con genes ligados. Consideremos un cruza- A B
miento entre un individuo homocigótico para alelos dominantes
en dos locus ligados y otro individuo homocigótico para alelos b a
recesivos en esos locus (AA BB x aa bb). En caso de genes liga-
dos, es necesario anotar los alelos específicos co1no están dis- porque implicaría que los alelos A y b son alélicos (del 1nismo
puestos en cada uno de los cro mosomas homólogos: locus).

A B a b
=====X Comparación entre ligamiento completo
A B a b y segregación independiente
En esta notación, cada línea representa uno de los cromoson1as
ho1nólogos. Al heredar un cro moso1na de cada progenitor, la Primero consideraTe1nos lo que sucede con los genes que mues-
progenie F1 tendrá el siguiente genotipo: tran ligamiento completo, lo que significa que están localizados
muy próximos en el mismo cromosoma y no presentan entrecru-
A B zamiento. Los genes rara vez tienen ligan1iento completo pero, al
a b asumir que no se produce entrecruza1niento, podemos observar
con mayor claridad el efecto del ligamiento. Luego, considerare-
En este caso, la importancia de designar los alelos de cada cromo- mos lo que sucede con genes que se segregan de manera indepen-
soma es clara. Un cromosoma tiene los dos alelos dominantes A diente. Por último, analizaremos los resultados obten idos si los
y B, mientras que el cromosoma homólogo tiene los dos alelos genes están ligados pero presentan cierto grado de entrecruza-
recesivos a y b. La notación se puede simplificar trazando solo miento.
 (a) Si los genes están completamente (b) Si los genes no están ligados
ligados (ausencía de entrecruzamiento) (se segregan de manera independiente)

Hojas Hojas Hojas Hojas

normales, alta moteadas, enana normales, alta moteadas, enana

X X

M D 111 d Mn1 Dd mm dd

m d m d

-r
Formación de gametos Formación de gametos Formación de gametos Formación de gameto
-e ~

+ ~ i +
½@:~) ½@ 3/4~ ¼E? ¼@ ¼~,¿_9
Gametos Gametos Gametos
no recombinantes no recombinantes recombinantes

Fecundación

Hojas Hoj as Hojas Hojas Hojas Hojas

normales, alta moteadas, enana norma les, alta moteadas, enana moteadas, enana moteadas, alta

M D m d ¼Mm Dd ¼mni dd ¼Mm dd ¼ mrn Dd

½ __ ½ __
m d m d Progen ie Progenie
no recombinante recombinante
Toda la progenie es no recombinante
Conclusió n: en caso de ligamiento completo, Conclusión: en caso de segregación independiente, la
solo se produce progenie no recombinante. mitad de la progenie es recombinante, y la otra mitad, no.

Figura 7-4. Un cruzamiento de prueba revela los efectos del ligamiento. Result ados de un cruzamiento de prueba para
dos locus de los tomat es, que determinan el t ipo de hoja y la alt ura de la plant a.

Un cruzamiento de prueba revela los efectos del ligamiento. cruzando una variedad de tomate homocigótica para hojas norma-
Por ejen1plo, si se practica un cruzamiento de prueba entre un in- les y altura elevada con un a variedad homocigótica para hojas
dividuo heterocigótico y uno ho1n ocigóti co recesivo (Aa Bb X aa moteadas y altura baja:
bb), los alelos presentes en los gametos aportados por el progeni-
tor heterocigótico se expresarán en el fenotipo de la descendencia p M D m d
X
porque el progenitor homocigótico no puede aportar alelos domi- M D ,n d
nantes capaces de enmascararlos. En consecuencia, los rasgos
que aparecen en la progenie revelan qué alelos fueron transmiti-
dos por eJ progenitor heterocigóti co. F¡ M
~ D
Considere un par de genes ligados de las plantas de tomate. m. d
Uno de los genes afecta el tipo de hoja: un alelo para hoj as mote-
adas (m) es recesivo respecto de uno que produce hojas normales Luego, el genetista usaiía estos heterocigotos F 1 en un cruzamien-
(M). Cerca del anterior en el mismo cromosoma, el otro gen de- to de prueba entre ellos y plantas homocigóticas para hoj as mote-
termina la altura de la planta: un alelo para plantas enanas (d) es adas y altura baj a:
recesivo respecto de un alelo para plantas altas (D).
Se puede investi gar el ligamiento mediante un cru zamiento de
M D ,n d
prueba, que requiere una planta beterocigótica para ambas carac- X
terísticas. Un genetista podría producir esta planta heterocigótica d ni d
169
170 CAPITULO 7
Los resultados de este cruzamiento de prueba se esquematizan en
la figura 7-4a. El heterocigoto produce dos tipos de gametos: al-
gunos con el cromosoma M D y otros con el cromosoma
ni d. Como no se produce entrecruzamiento, estos gametos
son los únicos tipos producidos por el heterocigoto. Observe que
estos gametos solo contienen combinaciones de alelos que esta-
ban presentes en los progenitores originales: el alelo para bojas
normales junto con el alelo para altura elevada (M y D ) o el alelo
para hoj as moteadas j unto con el alelo para altura baja (m y d).
Los gametos que contienen solo combinaciones originales de ale-
los presentes en los progenitores son gametos no recombinantes o
gametos parentales.
E l progenjtor ho1nocigótico del cruzamiento de prueba solo
produce un tipo de gameto; este conti ene el cromosoma m d y se
aparea con uno de los dos gametos producidos por el progenitor
heterocigótico (véase fig. 7-4a). Se generan dos tipos de proge-
nie: la mitad tiene hoj as normales y es alta:
M D
m d
y la mitad tiene hojas moteadas y es enana:
m d
m d
Esta progenie muestra las combinaciones originales de rasgos
presentes en la generación P y es una progenie no recombinan-
te o progenie parental. En la descendencia, no aparecen combina-
ciones nuevas de los dos rasgos, como plantas de hojas nor1nales
y altura baja o de bojas moteadas y altura elevada, porque los ge-
nes que afectan los dos rasgos presentan liga1niento co111pleto y se
heredan juntos. Solo podrían surgir nuevas combinaciones de ras-
gos si se rompiera la conexión física entre M y D o entre m y d.
Estos resultados son definidamente distintos de los esperables
cuando los genes se segregan de manera independiente (fig. 7-4b) .
(a) Sin entrecruzamiento
n la profase 1, se aparean Si no se produce
los cromosomas homólogos . entrecruzamiento ...
. no recombinante con una combinación
(b) Entrecruzamiento
En la profase 1,
D puede haber un
e trecruzam·e to
• 1 . Recombinante}
Figura 7-5. En un entrecruzamiento único, la mitad de los gametos producidos son no recombinantes, y la otra mitad es recombinante .
Si los locus M y D se segregaran en forma independiente, Ja plan-
ta heterocigótica (Mm Dd) produciría cuatro tipos de gametos:
dos gametos con las combinaciones 01iginales de alelos (M D y
n1 d) y dos gametos con nuevas combinaciones de alelos (M d
y m D). Los gametos con nuevas combinaciones de alelos se
denominan gametos recombinantes. En caso de segregación
independiente, se producen gainetos recom.binantes y no recom-
binantes en iguales proporciones. Estos cuatro tipos de gametos
se unen con el único tipo de gameto producido por el progenitor
homocigótico del cruzamiento de prueba para producir cuatro
clases de progenie en iguales proporciones (véase fig. 7-4b). La
progenie con nuevas combinaciones de rasgos formada a partir de
gametos recombínan tes se denomina progenie recombinante.
CONCEPTOS
Un cruzamiento de prueba en el que una de las plantas es heteroci-
gótica para dos genes que presentan ligamiento completo genera dos
tipos de progenie, cada uno de los cuales muestra una de las combi-
naciones origina les de los rasgos presentes en la generación P. En
cambio, la segregación independiente produce cuatro tipos de proge-
nie en una proporción 1: 1: 1: 1, dos tipos de progenie recombinante y
dos t ipos de progenie no recombinante en iguales proporciones.
Entrecruzamiento con genes ligados
Por lo general, hay cierto grado de entrecruzamiento entre genes
localizados en el mismo cromosoma, lo que produce nuevas com-
binaciones de rasgos. Los genes que muestran entrecruzamiento
presentan liga1niento incompleto. Vea111os cómo afecta el liga-
miento incompleto los resultados de un cruzamiento.
TEORÍA La figura 7-5 ilustra el efecto del entrecruzamiento sobre
la herencia de dos genes ligados. El entrecruzamiento, que tiene
. .. cada gameto recibe un cromosoma
original de alelos.
En este caso, la mitad de los gametos resultantes
tendrá un cromosoma no modificado (no
recombinan te),.:....:...:..·_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ___,
:11 No recombinante
Recombinante
... y la mitad tendrá un
cromosoma recombinante .
No recombinante
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes
lugar en la profase I de Ja meiosis, es el in tercambio de material
genético entre cron1átidas no hermanas (véanse figs. 2-16 y 2-18).
Después de que se ha producido un entrecruzamiento simple, las
dos cro1nátidas que 110 participaron del entrecruzamiento 110 pre-
sentan ninguna modificación; los gametos que reciben estas cro-
mátidas son no recombinantes. Las otras dos cromátidas, que sí
participaron en el entrecruza1niento, contienen ahora nuevas com-
binaciones de alelos; los gametos que reciben estas cromátidas
son recombinantes. Por cada meiosis en la que tiene lugar un en-
trecruzamiento simple, se producirán dos gametos no recombi-
nantes y dos recombinantes. Este resultado es el mismo que el
observado en caso de segregación independiente (véase fig. 7-4b);
por consiguiente, cuando se produce entrecruzamiento entre dos
locus en todas las meios.i s, es imposible determinar si los genes
están en el mismo cromosoma y se produjo entrecruzamiento o si
los genes están en cromosomas diferentes.
En el caso de genes estrechamente ligados, no se produce entre-
cruzamiento en todas las 1neiosis. En las meiosis en las que no tiene
lugar el entrecruza1niento, solo se producen gametos no re-
combinantes. En las 1neiosis en las que hay un entrecruzamiento
simple, la mitad de los gametos son recombinantes, y la mitad, no
recombinante (porque un entrecruzamiento simple afecta solo a dos
de las cuatro cromátidas). Dado que cada entrecruzamiento genera
una mitad de gametos recombinantes y una mitad de gametos no
reco1nbinantes, el porcentaje total de gametos recombinantes es
siempre la mitad del porcentaje de meiosis en las que ha ocurrido
entrecruzamiento. Aun si se produce entrecruzamiento entre dos
genes en cada meiosis, solo el 50% de los gametos resultantes serán
recombinantes. Por lo tanto, la frecuencia de gametos recombinan-
tes es sie1npre la mitad de la frecuencia del entrecruzamiento, y la
proporción máxi1na de gametos recombinantes es del 50%.
CONCEPTOS
El ligamiento entre genes hace que estos se hereden juntos y reduce
la recombinación; el entrecruzamiento rompe las asociaciones de
estos genes. En un cruzamiento de prueba para dos genes ligados,
cada entrecruzamiento produce dos gametos recombinantes y dos no
recombinantes . La frecuencia de gametos recombinantes es la mitad
de la frecuencia del entrecruzamiento, y la frecuencia máxima de
gametos recombinantes es del 50%.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
Para entrecruzamientos simples, la frecuencia de gametos recombi-
nantes es la mitad de la frecuencia del entrecruzam iento porque
a. un cruzamiento de prueba entre un homocigoto y un heterocigo-
to produce progen ie 1/2 heterocigótica y 1/2 homocigótica,
b. la frecuencia de recombinación es siempre del 50%,
c. cada cruzamiento tiene lugar solo entre dos de las cuatro cromáti-
das de un par homólogo,
d. los entrecruzamientos se producen en alrededor del 50% de las
me1os1s.
APLICACIÓN Apliquemos lo que hemos aprendido acerca del liga-
miento y la recombinación a un cruzamiento entre plantas de to-
1nate que se diferencian en los genes que codifican el tipo de hoja
y la altura de la planta. Ahora, asuma que estos genes están liga-
171
dos y que tiene lugar cierto grado de entrecruzamiento entre ellos.
Suponga que un genetista llevó a cabo el cruzamiento de prueba
descrito antes:
M D m d
X
,n d m d
Cuando se produce entrecruzamiento en los genes para el tipo de
hoja y la altura, dos de los cuatro gametos producidos son recom-
binantes. Cuando no hay entrecruzamiento, los cuatro gametos
resultantes son no recon1binantes. Como cada entrecruzanriento
produce una nritad de gametos recombinantes y otra mitad de
gametos no recombinantes, la n1ayoría de los ga1netos serán no
recon1binantes (fig. 7-6a). Luego, estos gametos se fusionan con
los producidos por el progenitor homocigótico recesivo, que con-
tienen solo Jos alelos recesivos, lo que determina progenie mayo-
ritariamente no recombinante y una escasa cantidad de progenie
recombinante (fig. 7-6b). En este cruzamiento, observamos que
55 plantas de la progenie del c1u zamiento de prueba tienen hojas
normales y son altas, y que 53 tienen hojas moteadas y son ena-
nas. Estas plantas son la progenie no recombinante, que contiene
las combinaciones originales de rasgos presentes en los progeni-
tores. De las 123 plantas de la progenie, 15 tienen nuevas combi-
naciones de rasgos no observadas en los progenitores: 8 tienen
hojas nonnales y son enanas, y 7 tienen hojas 111oteadas y son
altas. Estas plantas son la progenie recombinan te.
Los resultados de un cruzamiento como el ilustrado en la figu-
ra 7-6 revelan varias cosas. Es esperable que un cruzamiento de
prueba para dos genes que se segregan de manera independiente
produzca una proporción fenotípica l : l: 1: l en la progenie. Es
evidente que la progenie de este cruzamiento no muestra una pro-
porción de este tipo, de 1nanera que podrírunos sospechar que los
genes no se segregan de manera independiente. Cuando los genes
ligados presentan cierto grado de entrecruzamiento, el resultado
es, en su mayor parte, progenie no recombinante y una cantidad
menor de progenie recombinante. Este resultado es el que obser-
vamos en la progenie del cruzamiento de prueba ilustrado en la fi-
gura 7-6, de manera que concluimos que los dos genes muestran
evidencia de ligamiento con cierto grado de entrecruzamiento.
Cálculo de la frecuencia de recombinación
El porcentaje de progenie recombinante producida en un c1uza-
miento se denomina frecuencia de recombinación, que se calcu-
la de la siguiente manera:
frecuencia de recombinación =
número de progenie recombinante
------------x100%
nú1nero total de la progenie
En el cruzamiento de prueba mostrado en la figura 7-6, 15 plan-
tas de la progenie muestran nuevas combinaciones de rasgos, de
manera que la frecuencia de recombinación es:
8+7 15
- - - - - - X 100% = X 100% = 12,2%
55 + 53 + 8 + 7 123
Por lo tanto, el 12,2% de la progenie muestra nuevas combinacio-
nes de rasgos resultantes del entrecruzamiento. La frecuencia de
172 CAPITULO 7

(a) como una fracción

Hojas Hojas '
normales, alta moteadas, enana 1

Los procesos de
meiosis
combinados, con
entrecruzamiento o
sin él, determinan
menos del 50% de
recombinación, en
QromedjQ.,. J de gametos
Sin
entrecruzamiento
Acoplamiento y repulsión
En cruzamientos para genes ligados, la disposición de los alelos
en los cromosomas hon1ól ogos es crucial para determinar el
resultado del cruzamiento. Por ejemplo, considere la herencia de
dos genes de la mosca australiana de las ovejas (Lucilia cuprina).
X En esta especie, un locus determina el color del tórax: un tórax
violeta (p ) es recesivo respecto del tórax verde normal (p+). Un
segundo locus determina el color del pupario: un pupario negro
(b) es recesivo respecto del pupario marrón normal (b+). Los
locus para color de] tórax y color del pupario son cercanos entre
M D ni d sí en el cromosoma. Suponga que realizamos un cn1zamiento de
prueba entre una mosca que es heterocigótica en ambos locus y
,n d m el
una mosca que es homocigótica recesiva en ambos locus. Como
Formación Formación estos genes están ligados, hay dos disposiciones posibles en los
de gametos cromoso.mas de la mosca heterocigótica. Los alelos do1ninantes
para tórax verde (p+) y pupario marrón (b+) podrían residir en un
cromosoma del par homólogo, y los alelos recesivos para tórax
Entrecruzamiento violeta (p) y pupario negro (b) podrían residir en el otro cromoso-
ma ho1nólogo:

p+
p b
Gametos no Gametos no Gametos
recomb inantes (100%) recombinantes (50%) recombinantes (50%)

Esta disposición, en la que se observan alelos de tipo silvestre

en un cro1nosoma y alelos mutantes en el otro, se denomina con-
figuración cis o de acoplamiento. Alternativamente, un cromo-
soma podría tener los alelos para tórax verde (p+) y puparío negro
(b), y el otro cromosoma podría tener los alelos para tórax viole-
(b) ta (p) y pupario m.arrón (b+):
Hojas Hojas moteadas, Hojas Hojas m oteadas,
norma les, alta enana normales, enana alta
p+ b

Esta disposición, en la que cada cromosoma contiene un alelo

de tipo silvestre y un alelo mutante, se denomina configuración
trans o de repulsión. Que los alelos del progenitor heterocigótico
estén dispuestos en configuración de acoplamiento o repulsión
determina qué fenotipos serán n1ás comunes en la progenie de un
cruzamiento de prueba.
Cuando la configuración de los alelos es de acoplamiento, los
tipos más numerosos de progenie son los de tórax verde y pupa-
M D m d M d m D
rio negro, y aquellos con tórax violeta y pupario negro (fig. 7-7a).
n1 el n1 d rn d m d En cambio, cuando la configuración los alelos del progenitor
Número heterocigótico es de repulsión, los tipos de progenie más numero-
55 53 8 7 sos son aquellos con tórax verde y pupario negro, y aquell os con
\ ,de progenie
y

Progen ie
no recombinante
Conclusión: con genes ligados y cierto grado de
entrecruzamiento, predomina la progenie no recombinante.
Figura 7-6. El entrecruzamiento entre genes ligados produce descen-
dencia no recombinante y recombinante. En este cruzamiento de prue-
ba, los genes están ligados y hay cierto grado de entrecruzam iento.
Progen ie tórax violeta y pupario maiTón (fig. 7-7b). Advierta que los geno-
recom bi nante tipos de los progenitores de la figura 7-7a y b son iguales (p+ p
b+ b x pp bb) y que la diferencia sustancial de las proporciones
fenotípicas de la progenie de los dos cruzamientos se debe por
completo a la configuración -acoplamiento o repulsión- de los
cromosomas. El conocimiento de la disposición de los alelos de
los cromosomas es esencial para predecir con exactitud el resul-
tado de cruzamientos en los que los genes están ligados.
 Li 9amiento, recomb inación y mapeo de genes eucariontes 173

(a) Alelos en configuración de acoplamiento (b) Alelos en configuración de repulsión

1 Tórax verde,
pupario marrón

~v-
Tórax violeta,
pupario negro
Tórax verde
pupario marrón
Tórax violeta
pupario negro

Cruzamiento
de prueba p• b+
X
P b
Cruzamiento
de prueba
X fp bi
p b P b P b+ P b
1 1 1 l
Formación de gamet os Formación de gametos Formación de gametoJ Formación de gameto
1 1

b
!b
i
Gametos no Gametos Gametos no Gametos
recombinantes recombinantes recombinantes recombinantes

Fecundación Fecundación

Tórax verde, Tórax violeta, Tórax verde, Tórax violeta, Tórax verde, Tórax violeta, Tórax verde, Tórax violeta,
pupario marrón pupario negro pupario negro pupario marrón pupario negro pupario marrónpupario marrón pupario negro

'1,~' 1
p+ b+
~t✓ ~
p
'·
b
,,
p• b
',t
p b+
1 ~
p+ b
1~
p b+
\
~t
p• b+
J1'· ij
p b

p b p b p b p b p b p b p b p b
Número 40 40 10 10 Número 40 40 10 10
de progenie de progenie
Progenie no Progenie Progenie no Progenie
recombinante recombinante recombinante recombinante

,.___ _ _ _....¡ Conclusión: los fenotipos de la descendencia son iguales, pero los números son diferentes, lo que depende de si _ _ _ __,
los alelos se encuentran en configu ración de acoplamiento o de repulsión.

Figura 7-7. La disposición (acoplamiento o repulsión) de los genes ligados en un cromosoma afecta los resultados de un cruza-
miento de prueba . Los locus ligados de la mosca australiana de las ovejas, Lucilia cuprina, determina el color del tórax y el del pupario.

CONCEPTOS distintos . En este caso, muestran seg regación independiente y se

En un cruzam iento, la disposición de los alelos ligados es crucial para
determinar el resultado. Cuando dos alelos de tipo silvestre se
encuentran en un cromosoma homólogo y en el otro hay dos alelos
mutantes, el los se encuentran en configuración de acoplamiento;
cuando cada cromosoma contiene un alelo de tipo silvestre y uno
mutante, los alelos están en configuración de repu lsión.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
El siguiente cruzamiento de prueba produce la progenie mostrada: A a
Bb x aa bb x 1O Aa Bb, 40 Aa bb, 40 aa Bb, 1O aa bb. ¿Los alelos A
y B del progenitor Aa Bb se encontraban en configuración de acopla-
miento o de repu lsión?
combinan de manera aleatoria cuando se forman los gametos. Un
individuo heterocigótico en dos locus (Aa 8b) produce cuatro t ipos de
gametos (A 8, a b, A b y a 8) en iguales proporciones: dos tipos no
recombinantes y dos recombinantes. En un cruzamiento de prueba,
estos gametos determinarán cuatro t ipos de progenie en igua les pro-
porciones (cuadro 7-1).
Seg undo, los genes pueden presentar ligamiento completo, lo que
implica que se encuentran en el mismo cromosoma y tan próximos
entre sí que el entrecruzam iento ent re ellos es raro. En este caso, los
genes no se recombinan. Un individuo heterocigótico para dos genes
est rechamente ligados en configuración de acoplamiento
A B
a b

produce solo los gametos no recombinantes que contienen los alelos

A B o a b; los alelos no se segregan en nuevas com binaciones como
A b o a B. En un cruzamiento de prueba, los genes con ligamiento
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS completo producirán solo dos tipos de progenie, am bos no recombi-
nantes, en iguales proporciones (véase cuadro 7-1).
Relación entre segregación independiente, ligamiento La tercera situación, ligamiento incompleto, es intermedia entre los
y entrecruzamiento dos extremos de segregación independ iente y ligamiento completo.
Ya hemos analizado tres situaciones referidas a genes de diferentes En este caso, los genes están físicamente ligados en el mismo cromo-
locus. Primero, los genes pueden estar localizados en cromosomas soma, lo que impide la segregación independiente. Sin embargo,
174 CAPITULO 7

entrecruzamientos ocasionales rompen el ligamiento y permiten la Resultados de un cruzamiento de prueba (Aa

recombinación de los genes. En el ligamiento incompleto, un in divi- Bb x aa bb) con ligamiento completo, segre-
duo heterocigótico en dos locus produce cuatro tipos de gametos gación independiente y ligamiento con cierto
(dos tipos recombinantes y dos no recombinantes) pero los no recom- grado de entrecruzamiento
binantes son producidos con mayor frecuencia que los recombinan-
tes, porque no se produce entrecruzamiento en cada meiosis. En el Progenie del cruzamiento
cruzam iento de prueba, estos gametos dan origen a cuatro tipos de
Situación de prueba
progenie, y los tipos no recombinantes son más frecuentes que los Segregación independiente Aa Bb (no recombinante) 25%
recombinantes (véase cuadro 7-1). aa bb (no recombinante) 25º/o
En este capítu lo, ya definimos antes el término recombinación Aa bb (recombinante) 25%
como la redistribución de alelos en nuevas combinaciones. Ahora, aa Bb (recombinante) 25%
hemos considerado dos tipos de recombinación que difieren respecto
del mecanismo que generan estas nuevas combinaciones de alelos. La Ligam iento completo Aa Bb (no recombinante) 50%
recombinación intercromosómica es la que se produce entre genes (genes en configuración de aa bb (no recombinante) 50%
localizados en cromosomas diferentes. Surge de la segregación inde- acoplamiento)
pendiente (la segregación aleatoria de cromosomas en la anafase I de
Ligam iento con cierto grado Aa Bb (no recombinante) } más
la meiosis) y es la clase de recombinación que descubrió Mendel
de entrecruzamiento (genes aa bb (no recombinante) del 50%
mientras estudiaba cruzamientos dihibridos. Un segundo t ipo de
en configuración de acopla- Aa bb (recombinante) } menos
recombinación, recombinación intracromosómica, t iene lugar entre
miento) aa Bb (recombinante) del 50%
genes localizados en el mismo cromosoma. Esta recombinación se ori-
gina por entrecruzamiento: el intercambio de material genético en la
profase I de la meiosis. Ambos t ipos de recombinación generan nue-
vas combinaciones de alelos en los gametos, de manera que no se las
puede distinguir examinando los tipos de gametos producidos. No permitió distinguir visualmente a los dos miembros de un par
obstante, a menudo se las puede diferenciar por las frecuencias de los ho1nólogo.
tipos de gametos: la recombinación intercromosómica produce 50% Creighton y McClintock estudiaron la herencia de dos rasgos
de gametos no recombinantes y 50% de gametos recombinantes, del maíz determinados por genes deJ cromosoma 9. En un locus,
mientras que la recombinación intracromosómica suele producir más un alelo dominante ( C) producía granos con color, mientras que
del 50% de gametos no recombinantes y menos del 50% de game- un alelo recesivo (e) producía granos sin color. En un segundo locus
tos recombinantes. Sin embargo, cuando los genes están muy aleja- ligado, un alelo dominante (Wx) producía granos ai.niláceos, en
dos en el mismo cromosoma, se produce entrecruzamiento en cada tanto que un alelo recesivo (wx) producía granos céreos. Ob-
división meiótica, lo que determina un 50% de gametos recombinan- tuvieron una planta heterocigótica en ambos locus con configu-
tes y un 50% de gametos no recombinantes. Este resultado es el ración de repulsión, con los alelos para granos de color y céreos
mismo que el observado en la segregación independiente de genes
localizados en cromosomas diferentes (recombinación intercromosó-
mica). Por consiguiente, la recombinación intracromosómica de genes
localizados muy lejos entre sí en el mismo cromosoma y la recombi-
nación intercromosómica son indistinguibles desde el punto de vista
fenotípico.

Evidencia de la base física

de la recombinación
La teoría cromosómjca de la herencia de William Sutton, que
establecía que los genes están localizados físicamente en los cro-
mosomas, fue corroborada por el descubrimiento de Nettie
Stevens y Edmund Wilson de que el sexo se asociaba con un cro-
mosoma específico en insectos y por la demostración de Calvin
Bridges de que la falta de disy unción de los cromosomas X se re-
lacionaba con la herencia del color de ojos en Drosophila (cap. 4).
En 1931, aparecieron más evidencias en aval de la teoría cromo-
só1nica de la herencia cuando Harriet Creighton y Barbara
McClintock (fig. 7-8) comprobaron que la recombinación intra-
cromosómica era el resultado del intercambio físico entre cromo-
somas. Creighton y McClintock descubrieron una cepa de maíz Figura 7-8. Barbara McClintock (izquierda) y Harriet Creighton (dere-
con un cromosoma 9 anormal, que contenía un botón que se teñía cha) aportaron evidencia de que los genes se localizan en los cromo-
de manera densa en un extremo y un pequeño fragmento de otro somas. (Karl Maramorosch/Cortesia de Cold Spring Harbar Laboratory
cromosoma unido al otro extremo. Este cromosoma aberrante les Archives).
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 175

en el cromosoma aberrante y los alelos para granos sin color y capítulo 12, se analizará con mayor detalle la base molecular de
amiláceos en el cromosoma normal: la recombinación.

Botón Fragmento extra

Predicción de los resultados de los
\ entrecruzamientos con genes ligados
I
Conocer la disposición de los alelos de un cromoso1na nos per-
mite predecir los tipos de progenie que resultarán de un cruza-
miento que involucra genes ligados y determinar cuál de estos
tipos será el más numeroso. La determinación de las proporcio-
nes de los tipos de descendencia requiere un dato adicional: la
frecuencia de recombinación. Esta nos informa cuán a menudo
Después, cruzaron esta planta heterocigótica con una homoci- aparecen nu evas co1nbinac iones de alelos en los ga1netos, lo
gótica para granos sin color y heterocigótica para granos céreos que permite predecir las proporciones de fenotipos de la des-
(con ambos cromosomas normales): cendencia que generará un cruzamiento específico con genes
ligados.
En los pepinos, el fruto liso (t) es recesivo respecto del fruto
e \'VX e Wx rugoso (T), y el fruto brilloso (d) es recesivo respecto del fru-
----X
e Wx e wx to opaco (D). Los genetistas han determinado que estos dos
genes presentan una frecuencia de recon1binación del 16%.
Suponga que cruzamos una planta hornocigótica para fruto
Este cruzamiento generará diferentes combinaciones de rasgos en opaco y rugoso con una homocigótica para fruto liso y brilloso,
la progenie, pero la única manera en que puede aparecer progenie y después realizamos un cruzamiento de prueba utilizando la
sin color y cérea es a través del entrecruzamiento en el progenitor generación F 1:
doblen1ente heterocígótico:
T D t d
X
t d t d

¿ Qué tipos y proporciones de progenie resultarán de este cruza-

Entrecruzamiento
miento de prueba?
El progenitor heterocigótico producirá cuatro tipos de gan1etos,

C • Wx
X
como muestra la figura 7-9: dos tipos de gametos no recombinan-
tes (T D y t d) y dos tipos de gametos recombinantes (T d
y t D ). La frecuencia de recombinación nos informa que el 16%
de los grunetos producidos por el progenitor heterocigótico serán
recon1binantes. Como hay dos tipos de gametos recombinantes,
cada un o deberá aparecer con una frecuencia de 16%/2 = 8%.
Esta frecuencia también puede representru·se como una probabili-
dad de 0,08. Todos los demás gametos serán no recombinantes,
de manera que deben apru·ecer con una frecuencia de 100% - 16%
Algunos miembros {
de la progenie con
= 84%. Como hay dos tipos de gametos no recombinantes, cada
color, amiláceos - e wxa uno tendrá una frecuencia de 84%/2 = 42% (o 0,42). El otro pro-
genitor del cruzruniento de prueba es homocigótico y, por lo
Algunos miembros tanto, produce un único tipo de gameto (t d), con una frecuencia
de la progenie sin de 100% (o 1,00).
color, céreos El cruzamiento de prueba genera cuatro tipos de progenie
(véase fig. 7-9). La proporción esperada de cada tipo puede deter-
Nota: no se muestran todos losgenotipos de la progenie.
minarse aplicando la regla de la multiplicación (véase cap. 3), es
decir, multiplicando la probabilidad de cada gameto. La progenie
del cruza1niento de prueba con fruto rugoso y opaco
Observe que, si el entrecruzamiento implica intercambio físico
entre los cromosomas, la progenie sin color, cérea, resultante de T D
la recombinación debe tener un cromosoma con un fragmento
extra pero sin un botón. Más aún, parte de la progenie con color, t d
amilácea, debe tener un botón, pero no el frag1nento extra. Este
resultado es precisamente el que obtuvieron Creighton y aparece con una frecuencia de 0,42 (la probabilidad de heredar un
McClintock, lo que confirmó la teoría cromosórnica de la heren- gameto con cro1nosoma T D del progenitor heterocigótico) x
cia. Casi al mismo tiempo, Curt Stern efectuó una demostración 1,00 (la probabilidad de heredar un gameto con cromosoma t d
similar usando marcadores cromosómicos en Drosophila. En el del progenitor recesivo) = 0,42. Es posible calcular las proporcio-
176 CAPITULO 7

Los genetistas han determinado que la frecuencia de recombinación nes de los otros tipos de progenie F2 de ma nera similar (véase
entre dos genes de los pepinos es del 16 % . ¿Cómo podemos utilizar fig. 7-9). Este método puede emplearse para predecir el resultado
esta información para predecir los resultados de este cruzamiento? de cualquier cn1zainiento con genes ligados del que se conozca la
Fruto rugoso, Fruto liso, frecuencia de recombinación.
opaco brilloso
Pruebas de segregación independiente
Cruzamiento X
de prueba En algunos cruzamientos, los genes están evidente1nente ligados
T D t d porque se observa claramente que la progenie no recombinante en
m ás numerosa que la progenie recombinante. En otros cruza-
t d t d
1
mientos, la diferencia entre la segregación independiente y el
!Formación de gametos Formación de gametos ligamiento no es tan obvia. Por ejen1plo, supongamos que realiza-
J 1nos un cruzamiento de prueba para dos pares de genes, corno Aa
Bb x aa bb, y observamos la siguiente cantidad de progenie:
1

54 Aa Bb, 56 aa bb, 42 Aa bb y 48 aa Bb. ¿Corresponde este

resultado a la proporción l: 1: 1: 1 que esperaríamos en caso de que
A y B se segregaran de manera independiente? No con exactitud,
Gametos no Gametos Gametos no
pero es bastante cercana. Quizá estos genes se segregaron de
recombinantes recombinantes recombinantes
1nanera independiente, y el azar produjo las ligeras diferencias
Frecuencia 0,42 0,42 0,08 0,08 1,00
prevista de entre los núm eros observados y la proporción 1: 1: 1: 1 esperada.
gametos Alternativamente, los genes podrían estar ligados, con considera-
Fecundación ble entrecruzamiento entre ellos, y por consiguiente, la cantidad
Como la frecuencia de de progenie no recombinante es solo algo superior a la canti-
recombinación es de 16%,
dad de progenie recombinante. ¿ Cómo distinguimos el papel del
la proporción total de
gametos recombinantes es azar y el papel del liga1niento para producir desviaciones res-
de O, 16. pecto de los resultados esperados en caso de segregación inde-
pendiente?
Frecuencia prevista Hallamos un problema similai· en los cruzamientos con genes
de la progenie no ligados: el problema de diferenciar las desviaciones secun-
Fruto 0,42 X 1,00
darias al azar y las de bidas a otros factores. Encai·amos este
rugoso, = 0,42 problema (en el cap. 3) con la prueba de bondad del ajuste de
opaco Ji cuadr ado, que nos ayuda a evaluar la probabilidad de que el
T D
azar so lo sea responsable de las di ferencias entre los números
de progenie observados y los números esperados por aplicación
t d Progenie no
recombinante de los principios de la herencia. Aquí, estamos interesados en
Fruto liso, una cuestión diferente: ¿es independiente la herencia de alelos
0,42 X 1,00
brilloso = 0,42
de un locus de la herencia de alelos un segundo locus? Si la res-
t d puesta es afinnativa, los genes se segregan de maner a indepen-
diente; si la respuesta es negativa, es probable que los genes
t d estén li gados.
U na posible manera de investigar la segregación independiente
0,08 X 1,00
consiste en calcular la probabilidad esperada de cada tipo de pro-
Fruto
= 0,08
genie asumiendo segregación independiente y, después, utilizai· la
rugoso,
brilloso T d pr ueba de bondad del ajuste de Ji cuadrado para evaluar si los
números observados se desvían signifi cativamente de los núme-
t d ros esperados. En caso de segregación independiente, esperamos
1/4 de cada fenotipo: ¼ Aa Bb, 1/ 4 aa bb, 1/4 Aa bb y 1/4 aa Bb. E sta
Progenie
recombinante
probabilidad esperada de cada genotipo se basa en la regla de la
Fruto liso, 0,08 X 1,00
opaco = 0,08 multiplicación (véase cap. 3). Por ejen1plo, si la probabilidad de
Aa es ½ y la probabilidad de Bb, 1/2, entonces la probabilidad
t D de Aa Bb es ½ x ½ = ¼ . En este cálculo, se efectúan dos presun-
ciones: 1) la probabilidad de cada genotipo de un locus único es
t d 1/2, y 2) los genotipos de los dos locus se heredan de manera inde-

La frecuencia previst a de progenie pendiente (½ x ½ = 1/4).

- - - - - i se obtiene multiplicando las Un problen1a de este enfoque es que un valor significativo de Ji
frecuencias de los gametos. cuadrado puede deberse a una violación de una u otra presunción.
Si los genes están ligados, la herencia de genotipos en los dos
Figura 7-9. La frecuencia de recombinación permite predecir las pro- locus no es independiente (presunción 2), y obtendremos una
porciones de la descendencia esperada de un cruzamiento que invo- diferencia significativa entre los números observados y espera-
lucra genes ligados. dos. Pero también puede haber una diferencia significativa si la
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 177

probabilidad del genotipo de cada locus no es 112 (pre- (a)

sunción 1), aunque los genotipos se segreguen de
manera independiente. Por ejemplo, se puede observar Cuerpo marró n, Cuerpo am ari llo ,
X
una desviación significativa si los individuos con un alas r ecta s a las curvas
genotipo tienen una menor probabilidad de sobrevivir
y +y cv+cv yy cvcv
o si la penetrancia de un genotipo no es del 100% . Se Se lleva a cabo un l J
podrían investigar a1nbas presunciones realizando una cruzamiento de
T
prueba entre
serie de pruebas de Ji cuadrado para investigar, prime- Cruzamiento
cucarachas que
ro, la herencia de genotipos en cada locus por separado difieren en dos
(presunción 1) y después , la segregación independien- ca ract~ rí.?.t icas.
63 y+ y cv+cv
+
cuerpo marró n, alas r ectas
te (presunción 2). Sin embargo, un método más rápido
es investigar la independencia de los genotipos me- 28 y+ y cvcv cuerpo marrón, alas curvas
33 yy cv+ cv cuerpo amarill o, alas rectas
di ante una prueba de Ji cuadrado de independencia.
77 yy cvcv cuerpo amarillo, alas cu rvas

PRUEBA DE JI CUADRADO DE INDEPENDENCIA La prue-

(b) Cuadro de contingencia
ba de Ji cuadrado de independencia nos permite eva-
luar si la segregación de alelos de un locus es inde- Para investigar la ... con los genotipos
Segregación de y+ e y
pendiente de la segregación de alelos de otro locus, segregación independiente para un locus a lo
sin realizar ninguna presunción acerca de la probabi- de alelos que codifican los Totales de largo del borde
dos rasgos, se construye unJ y+ y yy superior ...
Jidad de los genotipos de cada locus. Para ilustrar este las f ilas
cuadro ...
análisis, examinaremos los resultados de un cruza- Segregación cv+cv 63 33 96 Se colocan los
miento entre cucarachas alemanas, en las que el cuer- de cv+ y cv números de cada
CV CV 28 77 105 genotipo en las
po an1arillo (y) es recesivo respecto del cuerpo celdas del cuadro, y
marrón (y+), y las alas curvas (cv) son recesivas res- , ... y los genotipos Tot ales se calculan los
para el otro locus a 91 110 20 1
pecto de las alas rectas (cv+) . Un cruzamiento de
prueba (y+y cv+ x yy cvcv) produjo la progenie mos-
lo largo del lado
·2 uiergo.
j d e l as
columnas Tota l general
totales de las filas,
los totales de las
columnas y el tot al
trada en la figura 7-l0a. Si la segregación de alelos general.
de cada locus es independiente, entonces la propor- (c)
ción de progenie con genotipos y+y e yy debe ser la
Número esperado
misma en cucarachas con genotipo cv+cv que en total de las filasX total de las columna\
Número
cucarachas con genotipo cvcv. Lo contrario también
Genotipo observado
( total general J
es válido; las proporciones de progenje con genotipos
cv+cv y cvcv deben ser las mismas en cucarachas con y+ y cv+cv 63 96 X 91 - 43,46
genotipo y+y que en cucarachas con genotipo yy. 201
Para determinar si las proporciones de progenie con
genotipos de los dos locus son independientes, cons- y+ y CVCV 28 105 X 91 = 47,54 a se calculan los
201 números
truimos primero un cuadro de los números observa- esperados de
96 X 110 - 52,46 progenie
dos de la progenie, algo similar al cuadrado de yy cv+ cv 33
asumiendo
201
Punnett, excepto que colocamos Jos genotipos que segregación
resultan de la segregación de alelos de un locus a lo yy cvcv 77 105 X 110 - 57,46 ~ ndependiente.
largo del borde superior y los genotipos que resultan 201
de la segregación de los alelos del otro locus a lo
(d)
largo de la primera colu1nna (fig. 7-l0b). A continua- Se calcula un
ción, calculamos el total para cada fila, el total para x2 =L (observado - esperado)2
valor de Ji al
cuadrado.
cada columna y e l total general (la suma de los tota- esper ado
les de todas las filas o la su ma de los totales de todas (63 - 43,46) 2 (28 - 47,54) 2 (33 - 52,54)2 (77 - 57,46) 2
las columnas, que deben ser iguales). Estos totales se = 43,46 + 47,54 + 52,54 + 57,46
utilizarán para calcular los valores esperados de la
= 8,79 + 8, 03 + 7,27 + 6,64
prueba de Ji cuadrado de independencia.
Nuestro siguiente paso es calcular los valores espe- = 30, 73
rados para cada combinación de genotipos (cada
celda del cuadr o) con la presunción de que la segre- (e) La probabilidad es
menor de 0,005, lo
df = (número de filas -1) X (número de columnas - 1) que indica que la
diferencia entre los
df =(2 - 1) X (2 - 1) = 1 X 1 =1 números de progenie
observada y esperada
P < 0,005 probablemente no se
Figura 7-10. Se puede recurrir a una prueba de Ji cuadrado deba al azar.
de independencia para determinar si los genes de dos locus Conclusión: los genes para color del cuerpo y tipo de ala
se segregan de manera independiente. no se segregan independientemente y deben estar ligados.
178 CAPITULO 7
gación de alelos del locus y es independi ente de la segregación
de alelos del locus cv. Si la segregación de alelos de cada locus
es independiente, el número esperado en cada celda puede cal-
cularse mediante la siguiente fórmula:
total de las filas x total de las columnas
número esp e r a d o = - - - - - - - - - - - - - - -
total general
En la celda del cuadro correspondiente al genotipo y+y cvcv (la
celda inferior izquierda del cuadro de la fig. 7-lOb), el número
esperado es el siguiente:
96 (total de las filas) x 91 (total de las columnas) 8736
= 43,46
201 (total general) 201
Con este método, se presentan en la figura 7-lOc los números es-
perados para cada celda.
Ahora, calculam.os un valor de Ji cuadrado usando la misma
fórmula que empleamos en el capítulo 3 para la prueba de bon-
dad del ajuste de Ji cuadrado:
( observado - esperado )2
x 2 =L
esperado
Recuerde que r, significa "suma'' y que estamos sumando juntos
el valor ( observado - esperado ) 2/observado para cada tipo de pro-
genie. Con los números observados y esperados de cucarachas del
cruzruniento de prueba, el valor calculado de Ji cuadrado es 30,73
(fig. 7-lOd).
Para determinar la probabilidad asociada con este valor de Ji
cuadrado, es preciso conocer los grados de libertad. R ecuerde del
capítulo 3 que los grados de libertad son el número de maneras
en que las clases observadas pueden variar respecto de los valo-
res esperados. Por lo general, para la prueba de Ji cuadrado de
independencia, los grados de libertad equival en al número de filas
del cuadro menos 1 multiplicado por el número de columnas del
cuadro menos 1 (fig. 7-lOe) o
df = (número de filas - 1) x (número de columnas - 1)
En nuestro ejemplo, hay dos filas y dos colu1nnas, de manera que
los grados de libertad son
df = (2 - 1) X (2 - 1) = 1 X 1 = 1
Por lo tanto, nuestro valor calculado de Ji cuadrado es 30,73, con
1 grado de libertad. Podemos utilizar el cuadro 3-7 para hallar la
probabilidad asociada. En este cuadro, observamos que nuestro
valor calculado de Ji cuadrado es mayor que el valor más alto de
Ji cuadrado dado para 1 grado de Libertad, que tiene una proba-
bilidad de 0,005. Esta probabilidad muy pequeña indica que los
genotipos no se encuentran en las proporciones que esperaríamos
si se produjera segregación independiente. Por lo tanto, nuestra
conclusión es que los genes no se segregan de manera indepen-
diente y que deben estar ligados. Como en el caso de la prueba
de bondad del ajuste de Ji cuadrado, los genetistas suelen consi-
derar que cualquier valor de Ji cuadrado de la prueba de indepen-
dencia con una probabilidad inferior a 0,05 es significativa-
mente di stinto de los valores esperados y, por lo tanto, represen-
ta evidencia de que los genes no se segregan de manera indepen-
diente. ~ OLVER EL PROBLEMA 16
Mapeo de genes con frecuencias
de recombinación
Thomas Hunt Morgan y sus estudiantes desarrollaron la idea de
que las distancias físicas entre los genes de un cromosoma se rela-
cionan con las tasas de recombinación. Postularon que los eventos
de entrecruzamiento tienen lugar de manera más o n1enos aleato-
ria de arriba abajo del cro111osoma y que dos genes alejados tienen
mayor probabilidad de presentar entrecruzamiento que dos genes
ubicados muy cerca entre sí. Propusieron que las frecuencias
de recombinación podrían representar una manera conveniente de
determinar el orden de los genes a lo largo de un cro1nosoma y que
permitirían estiJnar las distancias relativas entre los genes. Los
1napas cron1osómicos que se calculan utilizando el fenómeno
genético de reco111binación se denominan mapas genéticos. En
cambio, los mapas cromosómicos en cuyo cálculo se usan las dis-
tancias físicas a lo largo del cromosoma (expresadas a menudo
como número de pares de bases) se denominan mapas físicos.
Las distancias en los n1apas genéticos se miden en unidades de
mapa (que se abrevia u.m); una unidad de mapa equivale a una
recombinación del 1%. Las unidades de mapa también se deno-
minan centimorgan (cM), en honor a Thomas Hunt Morgan. Las
distancias genéticas medidas con tasas de recombinación son
aproximadamente aditivas: si la distancia del gen A al gen B es de
5 u.m, la distancia del gen B al gen C es de l O u.m. y la distancia
del gen A al gen Ces de 15 u.m., el gen B debe de estar localiza-
do entre los genes A y C. Sobre la base de las distancias de mapa
recién presentados, podemos dibujar un mapa genético simple
para los genes A, B y C, como se muestra aquí:
e--- 10 m.u.- - - B- 5 m.u.-+ A
Asimismo, podríamos dibujar este mapa con Ca la izquierda y A
a la derecha:
1(----- m.u.------1
15
A+- 5 m.u. -+ B- - - 10 m.u.- - - C
Ambos mapas son correctos y equivalentes porque, con la infor-
n1ación acerca de las posiciones relativas de solo tres genes, lo
máxin10 que podemos detern1inar es qué gen se ubica en el
medio. Si obtuviéramos distancias hasta otro gen, podríamos
determinru· la posición relativa de A y C respecto de ese gen. Un
gen adicional D , examinado mediante cruzamientos genéticos,
podría producir las siguientes frecuencias de recon1binación:
Par de genes Frecuencia de recombinación ( % )
AyD 8
ByD 13
CyD 23
 Li 9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 179

oble entrecruzamiento

Un entrecruzami- ... pero un segundo entrecru-

ento ún ico zam iento revertirá los efectos
cambiará los alelo del primero, lo que restablece
de cromosomas la combinación original de
homólogos ... alelos . ..

. .. y produce solo genotipos

no recombinantes en los
gametos, aunque partes de
los cromosomas se han
recombinado.
Figura 7-11. El doble entrecruzamiento bicatenario
entre dos genes ligados produce solo gametos recom-
binantes.

Observe que C y D muestran el máximo porcentaje de recom-
binación; por lo tanto, C y D deben estar más alejados, con los
genes A y B entre ellos. Si utilizrunos las frecuencias y recorda-
mos que 1 u. in = 1% de reco.mbinación, ahora podemos agregar
D a nuestro mapa:
23 m.u.
13 fil.U. ..
. 15 m.u. .
D - - 8 m.u. - ~ A ._ 5 m.U, -i- B--10 fil.U. -➔ C
Al realizar una serie de cruzanlientos entre pares de genes, es
posible con struir mapas genéticos que n1uestrru1 las disposiciones
de los ligamjentos de una serie de genes.
Con·esponde destacar dos aspectos acerca de la construcción de
mapas cromosómicos a partir de las frecuencias de recombina-
ción. Primero, recuerde que no podemos distinguir genes de dife-
rentes cromosomas y genes del mismo cromosoma alej ados entre
sí. Si los genes presentan un 50% de recombinación, lo 1nás que
se puede decir acerca de ellos es que pertenecen a diferentes gru-
pos de ligamiento, de cromosomas distintos o alejados en el
m1smo cromosoma.
El segundo aspecto es que un cruzamiento de prueba para dos
genes que están alejados en el mismo cromosoma tiende a subes-
timar la distancia física verdadera que podría haber, porque el
cruzamiento no revela entrecruzamientos dobles que podr ían
tener lugar entre los dos genes (fig. 7-11). Se produce un doble
entrecruzamiento cuando hay dos eventos separados de entrecru-
zamiento entre dos locus. (Por ahora, consideraremos solo e ntre-
cruzamientos dobles que se producen entre dos de las cuatro cro-
mátidas de un par hon1ólogo: un entrecruza1niento doble de dos
cadenas. M ás adelante, en la sección sobre Efectos de entrecruza-
mientos múltiples, se considerarán los entrecruza1nientos dobles
que se producen entre tres de cuatro cromátidas). Mien tras que un
entrecruzamiento simple produce combinaciones de alelos que no
estab an presentes en los cromosomas parentales originales, un
segundo entrecruzamiento entre los mismos dos genes revierte los
efectos del primero, lo que restablece la combinación parental
original de alelos (véase fig. 7-11). Por consiguiente, no es posi-
ble diferenciar la progenie producida por e ntrecruza1nientos
dobles de dos cadenas de la progenie producida cuando no hay
ningún entrecruzamie nto . Como veremos e n la siguiente sección,
podemos detectar entrecruzamientos dobles si examinamos un
tercer gen localizado entre los dos entrecruzamientos. Como los
entrecruza1nientos dobles entre dos genes no son detectados,
siempre se subestimarán las distancias de mapa en caso de entre-
cruzamientos dobl.es. Los entrecruzamientos dobles son más fre-
cuentes entre genes al.ejados; e n consecuencia, los mapas genéti-
cos basados en distancias cortas suelen ser más exactos que los
basados en distancias más largas.
CONCEPTOS
Un mapa genético revela el orden de los genes de un cromosoma y
las distancias aproximadas de un gen a otro sobre la base de las fre-
cuencias de recombinación. En los mapas genéticos, 1 % de recombi-
nación equivale a 1 un idad de mapa o 1 centimorgan. Los entrecru-
zamientos dobles entre dos genes no son detectados, de manera que
las distancias de mapa entre genes alejados tienden a subestimar las
distancias genéticas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿En qué se diferencia un mapa genético de uno físico?
Construcción de un mapa genético mediante
cruzamientos de prueba de dos puntos
Los mapas genéticos pueden construirse realizando una serie de
cruzami entos de prueba. En cada cruzamiento de prueba, uno
de los progenitores es beterocigótico para un par de genes dife-
rentes, y se calculan las frecuencias de recombinación entr e pares
de genes. U n cruzamiento de prueba entre dos genes se denomi-
180 CAPITULO 7

na cruzamiento de prueba de dos puntos o cruzamiento de dos doble entrecruzamiento entre Jos dos genes no será detectado y se
puntos. Suponga que llevamos a cabo una serie de cruzamientos subestimará la distancia de mapa.
de dos puntos para cuatro genes, a, b , c y d, y obtenemos las Al examinar la frecuencia de recombinación entre e y d, pode-
siguientes frecuencias de recombinación: mos distinguir entre estas dos posibilidades. La frecuencia de
recombinación entre c y des del 28%, de manera que el gen d
Locus de genes en el Frecuencia debe estar a la izquierda del gen b. Observe que la surna de Ja
cruzamiento de prueba de recombinación (%) frecuencia de recombinación entre d y b (10%) y entre b y e
ayb 50 (20%) es mayor que Ia frecuencia de recombi nación entre d y e
ayc 50 (28%). Como ya se comentó, esta discrepancia surge porque no
ayd 50 se detectan los entrecn1zamientos dobles entre los dos genes
byc 20 más distantes, lo que induce una subestimación de la distancia
byd 10 de mapa verdadera. Ahora, el mapa genético de estos genes está
c yd 28 completo:

Podemos comenzar a construir un mapa genético para estos

genes considerando las frecuencias de recombinación para cada Grupo de ligamiento 1
par de genes. La frecuencia de recombinación entre a y b es del a
50%, que es la frecuencia de recombinación esperada en caso de
segregación independiente. Por lo tanto, los genes a y b pueden
estar en cromosomas diferentes o 1nuy alejados en el mismo cro- Grupo de ligamiento 2
mosoma; los ubicaremos en distintos grupos de ligamiento d b e
sabiendo que pueden estar, o no, en el mismo cromosoma:
~10 in.u.-
.....- - - 20 m.u. - - - 1
Grupo de ligamiento 1
~-- - - - - 3 0 m.u. - - - - - ~ ,
a

Grupo de ligamiento 2
b
La frecuencia de recombinación entre a y c es del 50%, lo que
indica que ellos también se encuentran en distintos grupos de
ligamiento. La frecuencia de recombinación entre b y e es del
20%, de manera que estos genes están ligados y separados por 20
unidades de 111apa:
Grupo de ligamiento 1
a U na técnica de mapeo más eficiente es un cruzamiento de prue-
G1upo de ligan1iento 2
b e
1----20 n1.u. ---~)I
La frecuencia de recombinación entre a y des del 50%, lo que
indica que estos genes pertenecen a distintos grupos de liga1nien-
to, 1nientras que ]os genes by d están ligados, con una frecuencia
de recombi nación del 10%. Para decidir si el gen d se encuentra
a 10 u.m. a la izquierda o a la derecha del gen b, debemos consul-
tar la distancia c-d. Si el gen d se encuentra a 1Ou.m. a la izquier-
da del gen b, la distancia entre d y c debe corresponder aproxima-
damente a la suma de la distancia entre b y e, y entre c y d: 20 u.m.
+ 1O u. in. = 30 u.m. Por el contrario, si eJ gen d se localiza a la
derecha del gen b, la distancia entre el gen d y el gen e debe ser
mucho más corta, de alrededor de 20 u.m. - 10 u.m. = 10 u.m. Las
distancias sumadas serán solo aproximadas, porque cualquier
7.3 Puede utilizarse un cruzamiento
de prueba de tres puntos para mapear
tres genes ligados
Si bien los mapas genéticos pueden construirse a partir de una se-
rie de cruzamientos de prueba para pares de genes, este enfoque
no es particularmente eficiente, porque se deben realizar numero-
sos c1uzamientos de dos puntos para establecer el orden de los
genes y porque no se detectan los entrecruzamientos dobles.
ba para tres genes: un cruzamiento de prueba de tres puntos o
cruzamiento de tres puntos. Con un cruzamiento de tres pun-
tos, es posible establecer el orden de los tres genes en un solo
conjunto de la progenie y, por lo general, pueden detectarse
algunos entrecruzamientos dobles, lo que proporciona distancias
de mapa más exactas.
Considere lo que sucede cuando se produce entrecruzamiento
entre tres genes ligados hipotéticos. La figura 7-12 ilustra un par
de cromoso1nas homólogos de un individuo heterocigótico en tres
locus (Aa Bb Ce). Observe que los genes están e n configuración
de acoplan1i ento; todos los alelos dominantes se e ncuentran en un
cromosoma (A B C), y todos los alelos recesívos, en el otro (g_Jz
e). Entre estos tres genes, puede haber tres tipos de eventos de
entrecruzamiento; dos tipos de entrecruzamie ntos simples (véase
fig. 7-12a y b) y un entrecruzamiento doble (véase fig. 7-12c). En
cada tipo de entrecruzamiento, dos de los cro1noso1nas resultan-
tes son recombinantes, y dos son no recombinantes.
Observe que, en los cromosomas recombinantes resultantes
del doble entrecruzamiento, los dos alelos de los extremos son
los mismos que en los cromosomas no recombinantes, pero el

Par de cromosomas
homólogos
(a)
+
Entrecruzamiento (b) Entrecruzamiento (e)
único entre A y B único entre By C entrecruzamiento
...,. B C
•
111111 11
~ nclusión: los cromosomas recombinantes resultantes del doble
Lentrecruzamiento tienen alterado solo el gen del medio.
alelo del medio es diferente. Este resultado nos proporciona un
indicio importante acerca del orden de los genes. En la progenie
generada por un doble entrecruzamiento, solo el alelo del medio
debe diferir de los alelos presentes en la progenie no recombi-
nante.
Construcción de un mapa genético
con el cruzamiento de prueba
de tres puntos
Para examinar el 1napeo de genes con un cruzamiento de prueba
de tres puntos, consideraremos tres mutaciones recesivas de la
mosca de la fruta Drosophila melanogaster. En esta especie, los
ojos escarlatas (st) son recesivos respecto de los ojos rojos (st+) de
tipo silvestre, el cuerpo de color ébano (e) es recesivo respecto del
cuerpo de color gris de tipo silvestre (e+), y las cerdas pequeñas
(ss) son recesivas respecto de las cerdas normales (ss+). Los locus
que codifican estas tres características están ligados y se localizan
en el cromosoma 3.
Nos referiremos a estos tres locus como st, e y ss, pero recuer-
de que en cada locus pueden estar presentes los alelos recesivos
(st, e y ss) o los alelos dominantes (st+, e+ y ss+). Por consiguien-
te, cuando decimos que hay 10 u.m entre st y ss, significa que hay
1O u.m entre los locus en los que se producen las 1nutaciones st y
ss; podríamos decir con igual faciUdad que hay 10 u.ro. entre st+
y ss+.
Para realizar el mapeo de estos genes, debemos deter1ninar su
orden en el cromosoma y las distancias genéticas entre ellos.
Primero, debemos preparar un cruzamiento de prueba de tres pun-
tos: un cruzamiento entre una mosca heterocigótica en los tres lo-
cus y una mosca homocigótica para alelos recesivos en los tres
locus. Para producir 1noscas heterocigóticas en los tres locus,
podríamos cruzar un conjunto de moscas homocigóticas para los
Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 181
Doble
'll
•
ti
1 Figura 7-12. Puede haber tres tipos de entrecruzamien-
tos entre tres locus ligados.
alelos de tipo silvestre en los tres locus con moscas homocigóti-
cas para los alelos recesivos en los tres locus:
p st+ e+ ss+ st e ss
X
st+ e+ ss+ st e ss
Fl
t
st+ e+ ss+
st e SS
El orden de los genes se ha asignado en forma arbitraria porque,
por el 1nornento, no se sabe cuál es el gen del medio. Además, los
alelos de estos heterocigotos están en configuración de acopla-
miento (porque todos los alelos dominantes de tipo silvestre se
heredaron de un progenitor, y todos los alelos recesivos, del otro),
aunque el cruzamiento de prueba también puede realizarse con
alelos en configw·ación de repulsión.
En el cruzamiento de prueba de tres puntos, se cruzan los hete-
rocigotos de la generación Fl con moscas homocigóticas para las
tres mutaciones recesivas. En muchos organismos, no hay ningu-
na diferencia si el progenitor heterocigótico del cruzamiento de
prueba es 1nacho o hen1bra (siempre que los genes sean autosómi-
cos), pero en la Drosophila no se produce entrecruzamiento en los
machos. Como el entrecruzamiento en el progenitor heterocigóti-
co es esencial para determinar .las frecuencias de recombinación,
las moscas heterocigóticas de nuestro cn1zamiento de prueba
deben ser hembras. Por lo tanto, se aparean moscas Fl hembra
heterocigóticas para los tres rasgos con moscas macho homocigó-
ticas para todos los rasgos recesivos:
st e ss
Mujer x - - - - Hombre
Sf e SS st e ss
182 CAPITULO 7

Tipo silvestre Ojos escarlatas, cerdas plo, están presentes las ocho clases feno típicas, pero en algunos
pequeñas, color ébano cruzamientos de tres puntos puede faltar uno o más de los fenoti-
--- pos si el número de la progenie es linutado. No obstante, la ausen-
- X cia de una clase particular puede aportar información importante
acerca de qué combinación de rasgos es la menos frecuente y, por
st e ss
últi1no, acer ca del orden de los genes, co1no veremos.
st e ss st e ss Para el mapeo de genes, se necesita información sobre el lugar
y la frecuencia de entrecruzamiento. En el progenitor homocigó-
ti co recesivo, los dos alelos de cada locus son iguales, de manera
ruzamiento de prueba que el entrecruzamiento no ejercerá ningún efecto sobre los tipos
de gametos producidos; con entrecruzamiento o sin él, todos los
Genot ipo de Fenotipo de Número de gametos de este progenitor tendrán un cromosoma con tres alelos
la progenie la progenie la progenie recesivos (st e ss). E n cambio, el progenitor heterocigótico tiene
diferentes alelos en sus dos cromoso1nas, por lo que es posible
st+ e+ ss+
- Tipo silvestre 283
detectar el entrecruzamiento. Por consiguiente, la información
st e SS
requerida para el mapeo proviene por completo de los gametos
;;+ (+ SS+ producidos por el progenitor heterocigótico. Como los cromoso-
st e SS 1nas aportados por el progenitor homocigótico solo contienen ale-
Todos mutantes 278 los recesivos, cualesquiera que sean los alelos presentes en el cro-
SI e SS mosoma aportado por el padre heterocigótico se expresarán en la
st e SS
progeru e.
st+ e SS Como método fácil y rápido, a menudo no se anotan los geno-
Color ébano, 50
st e SS - cerdas pequeñas
tipos cornpletos de la progenie del cruzamiento de prueba, sino
que solo se enumeran los alelos expresados en el fenotipo, que
son aquellos heredados del progenitor heterocigótico. En la
st e+ ss+
52
siguiente discusión, se utiliza esta convención.
Ojos escar latas
st e SS
:t ;;+ss+
sr+ e+ SS
CONCEPTOS

st e SS ---fe+
st+ SS
Cerdas pequeñas 5
Para realizar un mapeo de genes, se requiere información acerca de
la localización y el número de entrecruzamientos de los gametos que
st e ss+ produjeron la progenie de un cruzamiento. Una manera eficiente de
Ojos escarlatas, 3 obtener esta información consist e en utilizar un cruzamiento de prue-
SI e SS color ébano ba de t res puntos, en el que se cruza a un individuo heterocigótico en
ss+
tres locus ligados con un individuo homocigótico recesivo en los tres
si+ e ss+ locus.
Color ébano 43
st e SS
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
st e+ SS
Ojos escarlatas, Escriba los genotipos de toda la progen ie recombinante y no recom-
41
cerdas pequeñas
st e SS binante esperada del siguiente cruzamiento de tres puntos:

Total 755
Figura 7-13. Se pueden utilizar los resultados de un cruzamiento de
prueba de tres puntos para mapear genes ligados. En este cruzamien-
to de prueba de tres puntos de Drosophila melanogaster, las mutaciones
recesivas ojos de color escarlata (st), cuerpo de color ébano (e) y cerdas
pequeñas (ss) se encuentran en tres locus ligados. El orden de los locus se
estableció de manera arbitraria. Cada clase fenotípica incluye moscas
macho y hembra; el sexo de las moscas ilustradas es aleatorio.
La figura 7-13 enumera la progenie producida a partir de este
cruzamiento. Para cada locus, se producen dos clases de progenie:
progenie heterocigótica, que muestra el rasgo dominante, y pro-
genie homocigótica, que muestra el rasgo recesivo. Con dos
clases de progenie posible para cada uno de los tres locus, habrá
23 = 8 clases de fenotipos posibles en la progenie. En este ejem-
m p s
x-----
m p s m p s
DETERMINACIÓN DEL ORDEN DE LOS GENES La primera tarea en el
mapeo de genes es detenninar su orden en el cromosoma. En la
figura 7-13, se enumeran en forma arbitraria los locus en el orden
st, e, ss, porque no había manera de saber cuál de los tres locus se
encontraba entre los otros dos. Ahora, es posible identificar el lo-
cus del medio analizando la progenie del doble entrecruzamiento.
Primero, determine los tipos de progenie no recombinantes, que
serán las dos clases 1nás numerosas (aun si se produce entrecru-
zamiento en cada meiosis, los individuos no reco1nbinantes repre-
sentarán por lo menos el 50% de la progenie). En la progenie del
cruzamiento de prueba de la figura 7-13, los más numerosos son
aquellos con los tres rasgos dominantes (.Jj+__g+ ss+) y aquellos
con los tres rasgos recesivos (st e ss).
 Li 9amiento, recomb inación y mapeo de genes eucariontes 183

A continuación, identifique la progenie resultante del doble Diferencias entre dominancia completa,
Cuadro 7-2
entrecruzamiento. Estos tipos de progenie siempre deben tener dominancia incompleta y codominancia
los dos fenotipos menos numerosos, porgue la probabilidad de un
doble entrecruzamiento siempre es menor que la probabilidad de 1. Identifique la progen ie no recombinante (los dos fenotipos más
un entrecruzamiento simple. La progenie menos frecuente entre numerosos).
los tipos enumerados en la figura 7-13 corresponde a la progenie
con cerdas pequeñas (st+__!¿+ ss) y a la progenie con ojos escarla- 2. Identifique la progen ie con doble ent recruzamiento (los dos
fenotipos menos numerosos).
tas y cuerpo de color ébano (st e ss+), de manera que estas son
las progenies derivadas del doble entrecruzamiento. 3. Compare el fenotipo de la progen ie con doble ent recruzamiento
Hay tres ordenamientos posibles de genes en el cromosoma: el con el fenotipo de la progenie no recombinante . Deben ser simi-
locus para el color de ojos podría ser el del 1nedio (e st ss) , lares en dos características y diferir en una.
el locus para el color del cuerpo podría ser el del medio (st e ss)
o el locus para las cerdas podr ía ser el del medio (st ss e). Para 4. La característica que difiere entre la progenie con doble entrecru-
determinar qué gen es el del medio, se pueden dibuj ar los cromo- zam iento y la progenie no recombinante es codificada por el gen
somas del progenitor heterocigótico con los tres posibles ordena- del medio.
mientos de genes y después observar si un doble entrecntzanuen-
to produce la combinación de genes observada en la progenie del
doble entrecruzamiento. Los tres ordena1nientos posibles de
genes y los tipos de proge1ue producidos por sus entrecruza.1nien- para cerdas pequeñas (ss) . Con10 el locus para cerdas es el único
tos dobles son los siguientes: que difiere, debe estar localizado en el medio. Se obtendrían los
rnismos resultados si se con1pru·a la otra clase de progenie de
doble entrecruzamiento (st e ss+) con otra progenie no recomb i-
Cromosomas Cromosomas después nante (st e ss). También en este caso , el único locus que difiere
originales del entrecruzamiento es el correspondiente a las cerdas. No olvide que la progenie no
recombinante y la de doble entrecruzanu ento deben diferir en un
e+ st+ ss+ e+ st+ ss+ e+ st ss+ solo locus; si difieren en dos locus, se están comparando clases
1. -+ :=)(=><=: -+ incorrectas de progenie. La Animación 7.1 ilustra cómo se deter-
e st SS e st SS e st+ SS rnina el orden de los tres genes ligados.
st+ e+ ss+ st+ e+ ss+ st+ e ss+
2. ---+ =x=x=:---+ e+
CONCEPTOS
st e SS st e SS Sf SS

st+ ss+ e+ st+ ss+ e+ st+ SS e+
3. ---+ =x=x=:---+
st st
e ss+ e
st SS e SS
El único ordenamiento de genes que produce cromosomas con
el conjunto de alelos observados en la progenie menos numerosas
o entrecruzamientos dobles (~....!l.+-~ y st e ss+ de la figura 7-
13) es aquel en el que el locus ss para cerdas se ubica en el medio
(orden de genes 3). Por lo tanto, este orden (st ss e) debe ser la
secuencia correcta de genes en eJ cromosoma.
Con un poco de práctica, es posible determinar con rapidez qué
locus se encuentra en el medio sin escribir todos los ordenamien-
tos de genes. Los fenotipos de la progenie son expresiones de los
alelos heredados del progenitor heterocigótico. Recuerde que
cuando o bservamos los resultados de los entrecruzamientos
dobles (véase fig. 7-12), solo los alelos del locus del medio dif e-
1í an de los no recombinantes. Si comparamos la progenie no
recombinante con la progenie del doble entrecruzamiento, estas
deben dife1ir solo en los alelos del locus del medio (cuadro 7-2) .
Comparemos los alelos de la progenie del doble entrecruza-
rniento st+_g+ ss con los de la progenie no reco1nbinante st+_g+
sst. Observamos que ambas tienen un alelo para ojos rojos (st+) y
que ambas tienen un a lelo pru·a cuerpo de color gris (e+), pero la
progenie no recombinante tiene un alelo para cerdas normales
(ss+), mientras que los entrecruzamientos dobles tienen un alelo
Para determinar el locus del medio en un cruzamiento de tres puntos,
compa re la progenie de doble entrecruzamiento con la progenie no
recombinante. Los ent recruzamientos dobles serán las dos clases de
fenotipos menos frecuentes; los no recombinantes serán las dos cla-
ses más frecuentes de fenotipos. La progenie de doble entrecruza-
miento debe tener los mismos alelos que los t ipos no recombinantes
en dos locus y alelos diferentes en el locus del med io.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
Se realiza un cruzamiento de prueba de tres puntos entre tres genes
ligados. Las progenies no recombinantes resultantes son s+ ,-+ e+ y s r
e, y las progenies de doble entrecruzamiento son s r e+ y s+ ,-+ c. ¿ Cuál
es el locus del medio?
DETERMINACIÓN DE LAS UBICACIONES DE LOS ENTRECRUZAMIEN-
TOS Una vez conocido el orden correcto de los locus en el cromo-
soma, se deben anotar nuevamente los fenotipos de la progenie
del cruzarniento de pn1eba de la figura 7-13 con los alelos en el
orden correcto para que sea posible determinar dónde se han pro-
ducido entrecruzrunientos (fig. 7-14) .
De las ocho clases de progenie, ya he1nos identificado dos cla-
ses como no recombinantes (ff ss+___g+ y st ss e) y dos clases
como entrecruzamientos dobles (st+ ss e+ y st ss+....!l,). Las otras
cuatro clases de progenie resultaron de un cromosoma que pre-
184 CAPITULO 7

sentó un entrecruzamiento si,n ple: dos presentaron entrecruza-

Tipo si lvestre Ojos escarlatas, color
ébano, cerdas pequeñas
miento simple e ntre st y ss, y dos presentaron entrecruzamiento
simple entre ss y e.
X Para determinar dónde se produj eron los entrecruzamientos en
estas progenies, compare los alelos hallados en la progenie del
st ss e entrecruzamiento simple con los hallados e n la progenie no
recom binante, tal como se hizo en el caso de los entrecr uzatnien-
st ss e st ss e tos dobles. Por ejemplo, considere la progenie con cromosoma st±
ss e. El primer alelo (st+) provino del crom osoma no recombinan-
te st+ ss+ _g_+, y los otros dos alelos (ss y e) de ben de haber pro-
~ruzamiento de pr ueba
venido del otro cromosoma no recombinante st ss e a través de
entrecruzamiento :

e+ st+ ss+ e
, ~
de
Genotipo de
la progenie
Fenotipo de
la progenie
Numero
la progenie 1
---.- - - -- - -
Sl SS e st SS e st SS e+

Tipo silvestre 283

SI SS e E ste mismo entrecruzamiento también produce la progenie g+
ss+_g_+.
st ss e Ojos escarlatas, Este método también puede utilizarse p ara determinar la locali-
color ébano, 278 'j zación del entrecru zamiento en los otros dos tipos de progenie de
st ss e cerdas pequeñas J e ntrecruzamiento simple. El entrecruzamiento entre ss y e produ-
\'(
~s-te- sím
- bo_ l_
o -in-d-ica
- la_p_o_si-
ci_ó_
n j Los no recombinantes se
ce cromoso1n as se+- ss+ _g_ y st ss e+:
ele un entrecruzamient o. producen con mayor
__, frecuencia.

st+ ss e
Cerdas pequeñas, 50
color ébano
st ss e
St SS e st SS é st

Ojos escarlatas 52 Ah ora, conocemos las localizaciones de todos los entrecruza-

st ss e
mientos; sus ubicaciones se marcan con una barra en la figura 7-14.

CÁLCULO DE LAS FRECUENCIAS DE RECOMBINACIÓN A continua-

Color ébano 43
Sf SS e ción , se pueden determinar las distancias de mapa, que se basan
en las frecuencias de reco1nbinación . Se calc ula la frecuencia de
st ss e+ recombinación sumando toda la progeni.e reco1n binante y divi-
Ojos escarlatas, clie ndo este número por el número total de la progenie del cruza-
41
cerdas pequeñas
st ss e miento, y multiplicando el número obtenido p or 100% . Para
st ss e+ determinar con exactitud las distancias de mapa, es preciso incluir
Los rec_o_mbi-nantes
,.... con doble
entrecruzamiento son los que se
todos los entrecruzamientos (tanto simples co1no dobles) que tie-
producen con men~ fr~ ~ia. nen lugar entre dos genes.
La progenie recombin ante que posee un cr omosom a que pre-
Cerdas pequeñas 5 sentó entrecru zamie nto e ntre el locus para el color de oj os (st)
st ss e y el locus p ara cerdas (ss) incluye los entrecruzamie ntos sim-
ples (st+ / ss e y st / ss+g_+) y los dos entrecruzamientos dobles (st+
st / ss / e y); véase figura 7-14. El total de la progenie es de 755, de
Ojos escarlatas,
3 manera que la frecuencia de recombinación entre ss y st es la
color ébano
st ss e siguiente:

Total 755 frecuencia de recombinació n st - ss

Figura 7- 14. Escribir los resultados de un cruzamiento de prueba de 50 + 52 + 5 + 3

tres puntos con los locus en el orden correcto permite determinar
los lugares de entrecruzamientos. Estos result ados son del cruzamiento
de prueba ilustrado en la Figura 7.13, con los locus mostrados en el orden
correcto. La localización de un entrecruzamiento se indica con una barra (().
Cada clase fenotípica incl uye moscas macho y hem bra; el sexo de las mos-
cas ilustradas es aleatorio.
- - - - - - X 100% = 14,6%
775
La clistancia entre los locus st y ss se puede expresar como 14,6 u.m..
La distancia de 1nap a entre el locus para cerdas (ss) y el locus
para color del cuerpo (e) se de termina de la misma manera. L a
progenie recon1binante que posee un entrecruzamiento entre ss y
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 185

Cromosoma 1 (X) Cromosoma 2 Cromosoma 3 Cromosoma 4

Venas netas , , Alas dobladas

,• Cuerpo amarillo ,
,
. . ,;, Venas cúbitas
O --- - •:. cerdas en escudo O -··-, .
•·-Antenas sin aristas O-:;===::· Ojos ásperos O···- \·: Pelos afeitados
1, 5 ,,::II::,.
, . o,·os blancos 1, 3 ,,, .
, •• Ojos en estrella 0,2 ·' •• Venas pequeñas
-.: Escudo sin surcos
3 ,', ,-, - ,."', o,·os facetados 4,3 ' · Alas retenidas
\
Sin ojos
5, .': \'. Ojos de erizo
7, 5 : , • '- Ojos rubí 13 -• - -• -Alas regordetas
. .- ·•. Alas crossveinless 16,5 -·· --- Ojos de tela
13 7
20 _.. ... Alas cortadas
,,• -----•• Cerdas chamuscadas
19,2 -··y··- Cerdas en jabalina
21
27,7 ,,• ··· ojos en oblea
2:6 · ·;
26,5 ·•
,
- .
; · · Ojos sepias
'• Cuerpo peludo
33 - -· ·-- Ojos bermellón
··· Alas en miniatura
41 •. , • Cerdas d ichaete
43 - ·; .
, - ~·· Cuerpo de sable 43, 2 - -= 1 : - - Aristas trenzadas
- .
44 ' • Ojos granates 48,5 •• , Cuerpo negro 44 · · • Ojos escarlata
51 • ' ,', Cerdas reducidas
48 ··:I::·· Ojos rosados
56, 7 ', ,' Cerdas bifurcadas
54, 5 • • • 1'·, Ojos púrpuras ,• • • Alas rizadas
54,8 .:;, -(. Cerdas cortas SO • ,· Cerdas incipientes
57 -:~ - ·~·-· Ojos en barras 58' 2 - -; ,, - cer d as sin
•• =E~- · espina
·
59, 5 ·-- ··· venas fusionadas 55 .•:, <•-Ojos claros
62, 5 · ·• ·-· Ojos rosados 57,5 ,' '- Ojos rojo oscuro 58,5 •·:; ~:·- Cuerpo bitórax
66 -- - - -·- Pelos cortos 66,7 .• • . Ojos escabrosos
67 _,: = :._ Alas vestigiales
62 ·::,K:,:· Cuerpo con franjas
63 • ,' \ ' Ojos de vidrio
,' ,:~ :, \
,, '' 66,2 :,, ._._ Venas en delta
72 ' ,,- •.' Ojos lobulados 69 5 ',, ,' \ •,' Cerdas sin pelos
75,5 · • Alas curvas
il

70,7 :
' , \ \

'. Ojos de ébano

74, 7 • ' Ojos cardena les

91, 1 -- - - --- Ojos rudos

100,5 • Alas en plexo

• . ,'
100,7 --- - - - Ojos clarete
104,5 - - -- Ojos marrones
107 · - • ..!L. -· Cuerpo manchado 106, 2 - • · -. Cerdas diminutas

Figura 7-15. Drosophila melanogaster tiene cuatro grupos de ligamiento correspondientes a sus cuatro pares de cro-
mosomas. Estos genes fueron mapeados utilizando las frecuencias de recombinación. Las distancias entre genes dentro de un
grupo de ligamiento se expresan en unidades de mapa.

e incluye los entrecruzamie ntos simples sr ss+ / e y st ss / e+, y

los entrecruzamientos dobles st+ / ss / e+ y st / ss+ / e. La frecuen-
- ----26¡8 m.u. ---•1
cia de recombinación es la siguiente: st--14.6 m.u. - - s s - - 12 .2 m .u. -➔ e

frecuencia de reco1nbinación ss - e = En la figura 7-15, se muestra el mapa genético de D . melanogaster.

43 + 4 1 + 5 + 3
X 100%
755
P or lo tanto, la distancia de n1apa entre ss y e es de 12,2 u .m.
P or últüno, se calcula la distancia de 1napa entre los dos locus
de los extremos, st y e. Esta distancia se puede ob tener sumando
las distancias de mapa entre st y ss, y entre ss y e ( 14,6 u .m. +
12,2 u.m. = 26,8 u.m .). De esta manera, pueden utilizarse las dis-
tancias de mapa para construir el mapa de los tres genes del cro-
1n osoma:
= 12,2% INTERFERENCIA y COEFICIENTE DE COINCIDENCIA Las distancias de
mapa proporcionan información no solo acerca de las distancias
que separan a los genes, sino también acerca de las proporciones de
gametos reco111binantes y no recombü1antes que se producirán en
un cruza1niento. Por ej emplo, saber que los genes st y ss del tercer
cromoso1na de la D . melanogaster están separados por una distan-
cia de 14,6 u.m. indica que un 14,6% de los gametos producidos
por una mosca heterocigótica en estos dos locus serán recombi-
nantes. D el mismo modo, un 12,2% de los gametos producidos por
una 1nosca heterocigótica para ss y e serán recombinantes.
186 CAPITULO 7
En teoría, deberíamos poder calc ular la proporción de gametos
doblemente recombinantes utilizando la regla de la multiplica-
ción de probabilidad (véase cap. 3), que establece que la proba-
bilidad de que dos eventos independientes ocun·an en forma
simultánea se calcula multiplicando las probabilidades de cada
un o. Al aplicar esta regla, se observará que la proporción (proba-
bilidad) de gametos con entrecruzamientos dobles entre st y e es
igual a la probabi lidad de recombinación entre st y ss, multiplica-
da por la probabilidad de recombinación entre ss y e, o de 0,146
x 0 ,122 = 0,0178. La multiplicación de esta probabilidad por la
cifra total de progenie da por resultado el 11ú1nero esperado de
progenie de entrecruzamiento doble a pa1tir del cruzamiento:
0,0178 x 755 = 13,4. Solo se observaron 8 entrecruza1nientos
dobles en la progenie del cruzamiento, bastante menos que los 13
previstos (véase fig. 7-14).
Este fenómeno es frecuente en organismos eucariontes . El
cálculo asume que cada evento de entrecruzamiento es indepen-
diente y que la aparición de un entrecruzamiento no influye en
que ocu1Ta otro. Sin e1nbargo, con frecuencia los entrecruzamien-
tos no son eventos indepen dientes: un entrecruzam iento tiende a
inhibir otros entrecruzamientos en la misma región del cromoso-
ma; por consiguiente, los entrecruzamientos dobles son m enos
frecuentes que lo esperado.
El grado en el que inte1fiere un entrecruzamiento con entrecru-
zamientos adicionales en la misma región se denomina interferen-
cia. Para calcular la interferencia, es preciso detenn inar primero
el coeficiente de coincidencia, que es la proporción de entrecru-
zainientos dobles observados respecto de entrecruzamientos
dobles esperados:
coeficiente de coincidencia =
número de entrecruzamientos dobles observados
número de entrecruza1uientos dobles esper ados
Pai·a los locus mapeados en el tercer cromosoma de D. melano-
gaster (véase fig. 7-14), observamos que
coeficiente de coincidencia =
5+3 8
- - - =0,6
0,146 X 0,122 X 755 13,4
que indica que, en realidad, se observa solo el 60% de los entre-
cruzamientos dobles esperados sobre la base de las frec uencias de
los entrecruzamientos simples. La interferencia se calcula de la
siguiente manera:
interferencia= 1 - 0 ,6 = 0,4
Este valor de interferencia indica que no se observará el 40% de
la progenie de doble entrecruzamiento esperada, debido a interfe-
rencia. Cuando la interferencia es completa y no se observa nin-
guna progenie de doble entrecruzamiento , el coeficiente de coin-
cidencia es O, y la inte1ferencia es 1.
En ocasiones, un entrecruzamiento aumenta la probabilidad de
que se produzca otro entrecruzamiento cercano, y se observa más
progenie de doble entrecruzamiento que la esperada. En este
caso, el coeficiente de coincidencia es mayor de 1, y la interferen-
cia es negativa.
La mayoría de los organismos eucariontes muestran interferen-
cia, que hace que los entrecruzamientos estén más espaciados que
lo que se esperaría por azar. La interferencia fue observada por
primera vez en cruzamientos de Drosophila a principios del siglo
XX y todavía, pese a años de estudio, aún no se conoce bien su
mecanismo. Un modelo de interferencia propuesto sugiere que
los entrecruzamientos se producen cuando se acumula tensión a
lo largo del cromosoma. Según este modelo, un entrecruzamien-
to libera tensión en alguna distancia a lo largo del cromosoma.
Como un entrecruzamiento alivia la tensión que causa entrecruza-
mientos, es menos probable que haya otros entrecruzamientos en
la misma región. ►
CONCEPTOS
El coeficiente de coincidencia es igual al número de entrecruzamien-
tos dobles observados dividido por el número de entrecruzam ientos
dobles esperados sobre la base de las frecuencias de entrecruzamien-
tos simples. La interferencia es igual a 1 - coeficiente de coincidencia;
indica el grado en que un entrecruzamiento interfiere con entrecruza-
mientos adicionales.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
Al analizar los resu ltados de un cruzamiento de prueba de tres pun-
tos, un estudiante determina que la interferencia es de -0,23. ¿ Qué
indica este valor de interferen cia negativo?
a. Se produjeron menos entrecruzamientos dobles que los esperados
sobre la base de las frecuencias de los entrecruzamientos simples.
b. Se produjeron más entrecruzamientos dobles que los esperados
sobre la base de las frecuencias de los entrecruzam ientos simples.
c. Se produjeron menos entrecruzam ientos simples que los esperados.
d. Un entrecruzamiento en una región interfiere con entrecruza-
mientos adicionales en la misma región.
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Pasos para seguir en el cruzamiento de prueba de tres puntos
Ya se ha examinado en detalle el cruzamiento de t res puntos y se ha
visto cómo la información derivada del cruzamiento puede utilizarse
para el mapeo de una serie de t res genes ligados. Repasemos en
forma sucinta los pasos requeridos para el mapeo de genes de un cru-
zamiento de tres puntos.
1. Anote los fenotipos y los números de la progenie producida
en el cruzamiento de tres puntos . Será más fácil interpretar los
fenotipos de la progenie si utiliza símbolos alélicos para los rasgos
(por ejemplo, st+' e+ ss).
2. Anote los genotipos de los progenitores originales utiliza-
dos para producir el individuo triplemente heterocigótico del
cruzamiento de prueba y (si se conoce) la disposición de los alelos
(acoplam iento o repulsión) en los cromosomas del individuo.
3. Determine qué clases fenotípicas de la progenie son no
recombinantes y cuáles son las resultantes de entrecruza-
 Li 9amiento, recomb inación y mapeo de genes eucariontes 187

mientos dobles. Los no recombinantes serán los dos fenotipos c. D etermine el coeficiente de coincidencia y la interferencia para
más comunes; los entrecruzamientos dobles serán los dos fenoti- estos tres locus.
pos menos comunes.
4. Determine cuál es el locus del medio. Compare los alelos pre- Estrategia de solución
sentes en los entrecruzamientos dobles con los presentes en los ¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
no recombinantes; cada clase de entrecruzamientos dobles debe
El orden de los genes en el cromosoma, las distancias recombi-
ser como uno de los no recombinantes para dos locus y debe
nantes entre los genes, el coefi ciente de coincidencia y la inter-
diferir en un locus. El locus que difiere es el del med io.
ferencia.
5. Vuelva a anotar los fenotipos con los genes en el orden
correcto. ¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
6. Determine dónde deben haberse producido los entrecruza- ■ Se apareó una mosca de tipo silvestre homocigótica con una
mientos para dar origen a los fenotipos de la progenie. mosca que tenía alas de querubín, cuerpo negro y ojos de
Para hacerlo, compare cada fenotipo con el fenotipo de la proge- color bermellón, y se realizó un cruzamiento de prueba entre
nie no recombinante. las hen1bras de la generación F 1 y machos con alas de queru-
7. Determine las frecuencias de recombinación. Sume los
bín, cuerpo negro y ojos de color bermellón.
números de la progenie que posee un cromosoma con un entre- ■ Los números de los diferentes tipos de moscas que aparecie-
cruzamiento entre un par de locus. Sume los entrecruzamientos ron en la progenie del cruzamiento de prueba.
dobles a este número. Divida esta suma por el número total de la
progenie del entrecruzamiento y multiplique por 100%; el resu l- Pasos de la solución
tado es la frecuencia de recombinación entre los locus, que es a. Podemos representar los cruzamientos de este problema de la
igual a la distancia de mapa. siguiente manera:
8. Dibuje un mapa de los tres locus. Indique qué locus se encuen-
ch+ b+ en+ ch b en
tra en el medio e indique las distancias entre ellos.
p X
9. Determine el coeficiente de coincidencia y la interferencia. El ch+ b+ en+ ch b en
coeficiente de coincidencia es el número de progenie de entrecru-
zam iento doble dividido por el número de progenie de entrecruza-
miento doble esperado. El número esperado se puede obtener
ch+
+
b+ en+
multiplicando el producto de las dos probabilidades de recombina-
F1
ción simple por el número total de la progenie del cruzamiento. ch b en
Cruzamiento ch+ b+ en+ ch b en
de prueba X
ch b en ch b en

En la D. melanogaster, las alas de querubín (ch), el cuerpo negro Observe que en este mo1nento no conocemos el orden de los
(b) y los ojos de color be1mellón (en) se deben a alelos recesivos genes; hemos ubicado de 1nanera arbi traria aben el medi o.
que se encuentran en el cromosoma 2. Se apareó una mosca de tipo E l siguiente paso es determinar cuáJ es la progenie no reco1n-
silvestre homocigótica con una mosca que tenía alas de querubín, binante del cruzamiento de pru eba y cuál es la resultante de
cuerpo negro y ojos de color bermellón, y se practicó un cruza- entrecruzamientos dobles. Los no recombinantes deben tener el
miento de prueba entre las hembras de la generación F 1 resultante fenotipo más frecuente, de manera que debe ser la progenie con fe-
y machos con alas de querubín, cuerpo negro y oj os de color ber- notipos codificados por m+--12+ en+ y ch b en. Estos genotipos
mellón. El cruzamiento de prueba produj o la siguiente progenie: son consistentes con los genotipos de los progenitores, presenta-
dos antes. Los en trecru zamientos dobles son los fenotipos menos
ch b+ en 105 frecuentes y son codificados por ch+_f2_+ en y ch b en+~
b+ Podemos determinar el orden de los genes comparando los ale-
ch+ en+ 750 los presentes en los entrecruzamientos dobles con los presentes
ch+ b en 40 en los no recombinantes. La progenie de entrecruzamiento doble
ch+ b+ en 4 debe coincidir con uno de los no recombinantes en dos locus y
ch b en. 753 diferir en un locus; el alelo que difiere estará en el ,nedio.
Compare la progenie de doble entrecruzamiento ch b en+_ con la
ch b+ en+ 41 no recombinante ch b en. Ambas tienen alas de querubín (ch) y
ch+ b en+ 102 cuerpo negro (b), pero la progenie con entrecruzamiento doble
ch b en+ 5 tiene ojos de tipo silvestre (en+), mientras que la no recombinan-
te tiene ojos de color bermellón (en). El locus que deter1nina los
Total 1800 ojos de color bermellón debe estar en el medio.

a. Determine el orden lineal de los genes en el cromosoma (¿qué b. Para calcular las frecuencias de recombinación entre los genes,
gen se encuentra en el medio?). anotamos primero los fenotipos de la progenie con los genes
b. Calcule las distancias recombinantes entre los tres locus. que los codifican en el orden correcto. Ya hemos identificado
188 CAPITULO 7

la progenie no recombinante y de entrecruzamiento doble, de distancia de mapa ch-b = 5% = 12% = 17%

manera que los otros cuatro tipos de progenie deben haber re-
sultado de entrecruzamientos simples. Para determinar dónde ~.-----+--1 7 ID.U. - - - - - -~

se produjeron los entrecruzamien tos simples, co1npara1nos los

alelos hallados en la progenie de entrecruzamiento simple con +-5 m..u.-+ - - - - 12 m.u. - - - -
los de la progenie no reco1nbinante. El entrecruzamiento debe ch en b
haberse producido en la ubicación donde los alelos cambiaron
de los presentes en una de las progenies no recombinan tes a los c. El coeficiente de coincidencia es el número de entrecruzamien-
hallados en la otra. Las ubicaciones correspondientes a los en- tos dobles observados dividido por el número de entrecruza-
trecruzamientos se señalan con una barra: mi entos dobles esperados. El número de entrecruza1njentos
dobles esperados se obtiene multiplicando la probabilidad de
ch en / b+ 105 entrecruzamiento simple un entrecruzamiento entre ch y en (0,05) x la probabilidad de un
ch+ en+ b+ 750 no recombinante entrecruzainiento entre en y b (0,12) x el número total de la
progenie del cruzamiento ( 1800):
ch+ / en b 40 entrecruzamiento simple
b+ 4+5
ch+ / en / 4 entrecruzamiento doble coeficiente de coincidencia =--------- = O'83
ch en b 753 no recombinante 0,05 X 0, 12 X 1 800
ch / en+ b+ 41 entrecruzamiento simple
ch+ en+ / b 102 entrecruzamiento simple Por último, la interferencia es igual a 1 - el coeficiente de coinci-
ch / en+ / b 5 entrecruzamiento doble dencia:
interferencia = 1 x 0,83 =O, 17
Total 1800
A continuación, determinan1os las frecuencias de recombinación ► Para aumentar su habilidad en los cruzamientos de tres puntos, intente
y dibujamos un mapa genético: resolver el Problema 30 al fina l de este capítu lo.

frecuencia de recombinación ch-en =

40 + 4 + 41 + 5 Efecto de entrecruzamientos múltiples
- - - - - - X 100% = 5%
1800
Hasta ahora, se han analizado los efectos de entrecruzamientos
frecuencia de recombinación cn-b = dobles que se producen entre solo dos de las cuatro cromátidas
(cadenas) de un pai· homólogo. Estos entrecruzamientos se deno-
105 + 4 + 102 + 5 minan entrecruzarruentos de dos cadenas. También puede haber
X 100% = 12%
1800 entrecruzainientos dobles que incluyen tres e incluso cuatro de las
cromátidas de un par homólogo (fig. 7-16). Si examinamos solo

Doble entrecruzamiento de dos cadenas

0% de recombinantes
detectables

Doble entrecruzamiento de tres cadenas

50% de recombinantes
detectables

50% de recombinantes
detectables

Doble entrecruzamiento de cuatro cadenas

100% de recombinantes
detectables
Figura 7-16. Resultados de entrecruzamien-
tos dobles de dos, tres o cuatro cadenas en 50%, de recombinantes
la recombinación entre dos genes. detectables en promedio
 Li 9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariont es 189

50 nie de un cruzanúento genético. En consecuencia, las distancias de

-:::R
C)
.........
e
·O
V
~ 25
.o
E reco1nbinación se con·esponden de manera precisa con las distan-
oV
Q)
o:::
o rran entrecruzamientos múltiples, y aumenta la discrepancia entre
o 20 40 60
Distancia de mapa rea l (u.m.)
Figura 7-17. El porcentaje de recombinación subestima la verdadera
distancia física entre genes a distancias de mapa más altas.
los alelos en locus a cada lado de ambos even tos de entrecruza-
miento, los entrecruzamientos dobles de dos cadenas no causan
ninguna combinación nueva de alelos, y no se producen gametos
recombinantes (véase fig. 7-16). Los entrecruzamientos dobles de
tres cadenas dan como resultado que dos de los cuatro gametos
sean recombinantes, y los entrecruzamientos dobles de cuatro
cadenas producen cuatro gametos recombinantes. En consecuen-
cia, los entrecruzamientos dobles de dos cadenas producen 0% de
recombinación, los entrecruzamientos dobles de tres cadenas pro-
ducen 50% de recombinación, y los entrecruzamientos do ble de
cuatro cadenas producen 100% de recombinación. El resultado
global es que todos los tipos de entrecruzamientos dobles en con-
junto producen, en promedio, un 50% de progenie recombinante.
Como hemos visto, los entrecruzamientos dobles de dos cadenas
hacen que los alelos a cada lado del entrecruzamiento perma-
nezcan sin cambios y que la progenie no sea recombinante. Los
entrecruzamientos de tres y cuatro cadenas producen progenie
recombi:nante, pero esta es del 1nismo tipo que la generada por los
entrecruzanlientos simples. Por consiguiente, algunos entrecruza-
mientos múltiples pasan inadvertidos cuando se observa la proge-
mapa basadas en las tasas de recombinación subestin1an las distan-
cias físicas reales entre genes, porque algunos entrecruzamientos
múltiples no son detectados en la progenie de un cruzamiento.
Cuando los genes se encuentran muy cerca, los entrecruzamientos
m últiples son improbables, y las distancias basadas en las tasas de
cias físicas en un cromosoma. Sin embargo, a medida que aumen-
ta la distancia entre los genes, hay mayor probabilidad de que ocu-
80 las distancias genéticas (basadas en las tasas de recombinación) y
las distancias físicas. Para corregir esta discrepancia, los genetis-
tas han desarrollado funciones de mapeo n1atemáticas que rela-
cionan las frecuencias de recon1binación con las distancias físicas
reales entre los genes (fig. 7-17). La mayoría de estas funciones se
basan en la distribución de Poisson, que predice la probabilidad de
múltiples eventos poco comunes. Mediante la utilización de estas
fu nciones de mapeo, es posible estimar con n1ayor exactitud las
distancias de 1napa basadas en las tasas de recon1binación.
Mapeo de genes humanos
Los esfuerzos por mapear el genoma humano se ven obstaculiza-
dos por la imposibilidad de realizar los cruzamientos deseados y
el pequeño número de progenie de la n1ayoría de las fanú lias
hu1nanas. Los genetistas deben restringir sus investigaciones al
estudio de pedigríes que, por lo general, son incompl etos y apor-
tan información limitada. No obstante, se han mapeado con éxito
gran cantidad de rasgos humanos mediante la utilización de los
datos de los pedigríes para analizar el ligamiento. Dado que la
cantidad de progenie que surge de cualquier apareamiento suele
ser peq ueña, se combina información de vruios pedigríes y fanú-
lias a fin de reali zar la prueba para la segregación independiente.
Los n1étodos que se utilizan en este tipo de análisis escapan al
alcance del este libro, pero a través de un ejemplo explicaremos
cómo es posible detectar el ligamiento a partir de la información
que proporciona el pedigrí.

1 A ¡ A¡ A O [ Ai
La persona tiene síndrome B ¡B¡B O [Bi
¡B n
uña-rótula (Nn).
o ii
i N i n

11
Todos los niños de la El síndrome uña-rótula
generación 11con síndrome 1 2 3 4 5 7 8 9 10 no aparece en los niños
uña-rótula tienen sangre de ¡B n ¡A n l n ¡B n ¡B n ¡A n l n ¡A n JA n de la generación II con
grupo B o de grupo O, lo sangre de grupo A.
que ind ica que los genes l N 1 n 1 N l N 1 N i n l n i N 1 11 1 n
para el síndrome y para el
111
grupo de sangre están
li ados. 1 3 4 5
¡A n i n ¡B n ¡B 1t

¡ N 1 fl I fl

Estos resultados se debieron a

eventos de entrecruzamiento.

Figura 7- 18. Se estableció el ligamiento entre grupos de sangre ABO y el síndrome uña-rótula por examen de
f amilias en las qu e se segregan ambos rasgos. El pedigrí aquí mostrado es el de una familia de este tipo. El g rupo
de sangre ABO se indica en cada círculo o cuadrado. El genotipo, que se inf iere a partir del fenotipo, se presenta debajo
de cada circulo o cuadrado.
190 CAPITULO 7
Una de las primeras demostraciones documentadas de liga-
miento en los seres humanos fue entre el locus para el síndrome
uña-rótula y el locus que determina los grupos san guíneos ABO.
El síndrome uña-rótula es una alteración autosó1nica dominante
que se caracteriza por la presencia de uñas anormales en los pies
y por la ausencia de rótulas o presencia de rótulas rudirnentarias.
Los grupos sanguíneos ABO son deternúnados por un loc us auto-
sómico con alelos múltiples (véase cap. 5). El ligamiento entre
los genes que codifican estas características se identificó en fami-
lias en las que se segregaban ambos rasgos. Parte de una de estas
familias se ilustra en la figura 7-18.
El síndro1ne uña-rótula es raro; por lo tanto, puede asumirse
que las personas que lo presentan son heterocigóticas (Nn); los
individuos no afectados son hon1ocigóticos (nn). Los genotipos
ABO se pueden inferir a partir de los genotipos y de los tipos de
descendencia producida. Por ejemplo, la persona I-2 de la figu-
ra 7-18 tiene el grupo sanguíneo B , que presenta dos genotipos
posibles: ¡_B¡B o I_Bi (véase fig. 5-6). Como parte de su descenden-
cia tiene grupo sanguíneo O (genotipo ii) y por lo tanto han here-
dado un alelo i de cada progenitor, la mujer 1-2 debe tener el
genotipo [Bi. De modo similar, la presencia de descendencia con
grupo sanguíneo O en la generación II indica que el hombre I-1 ,
con grupo sanguíneo A, también debe tener un alelo i y, por lo
tanto, tiene genotipo ¡A¡_ Los progenitores de esta familia son:
f Ai Nn x IBi nn
Al estudiar la generación II, es posible observar que los genes
para el síndrome uña-rótula y para los grupos sanguíneos no pare-
cen segregarse de manera independiente. Todos los hijos de la
generación II con síndrome uña-rótula tienen grupo sanguíneo B
o grupo sanguín eo O; todos los que tienen grupo sanguú1eo A tie-
nen uñas y rótu las normales. Si los genes que codifi can el síndro-
me uña-rótula y los grupos sanguíneos se segregaran de manera
independiente, sería lógico esperar que algunos hijos de la gene-
ración II presentaran grupo sanguíneo A y síndrome uña-rótula
por heredar tanto el alelo 1A como el alelo N de su padre. Este
resultado indica que las di sposiciones de los alelos en los cromo-
so mas de los progenitores cruzados son las siguientes:
¡A n ¡_B n sanguíneos o las diferencias bioquímicas. En muchos organis-
X mos, la escasez de estos tipos de características limitó los inten-
l N l n
El pedigrí indica que no hay recombinación entre Ja descenden-
cia (generación II) de estos progenitores, pero que hay dos casos
de recombinación entre las personas de ]a generación III. Las per-
sonas II-1 y II-2 tienen los siguientes genotipos:
·B
l n n longitud de los fragn1entos de restricción (RFLP), que son varia-
X ciones de la secuencia de DNA detectadas por corte del DNA con
l N l n
Su hijo lli-2 tiene grupo sanguíneo A y no presenta síndrome
uña-rótula; por consiguie nte, debe tener el siguiente genotipo
n directa de variaciones individuales de los nucleótidos del DNA.
1 n
y debe haber heredado tanto el alelo i como el alelo n de su padre.
E stos alelos se encuentran en cromosomas diferentes en el padre,
de manera que debe haber habido un entrecruzamiento. También se
debe haber producido entrecruzamiento para producir al hijo ill-3.
En el pedigrí que muestra la figura 7-18, 13 hijos provienen de
apareamientos en los que se segregan los genes que codifican el
síndrome uña-rótula y los grupos sanguíneos; dos de ellos son
recombinantes. Sobre esta base, cabría asumir que los locus para
síndron1e uña-rótul a y grupos sanguíneos ABO están ligados, con
un a frecuencia de recombinación de 2/ 13 = 0,154. Sin embargo, es
posible que estos genes sí se segreguen en forma independiente y
que solo sea el número reducido de hijos el factor que hace pare-
cer que los genes están ligados. Para determinar la probabilidad
de que los genes estén verdaderamente ligados, los genetistas sue-
len calcular la puntuación del logaritmo de la probabilidad (pun-
tuación lod).
Para obtener una puntuación lod, se debe calcular la probabili-
dad de obtener los resultados observados con la presunción de
que los genes están ligados con un grado especificado de reco1n-
binación y la probabilidad de obtener los resultados observados
con la presunción de segregación independiente. Después, se de-
termina el cociente de estas dos probabilidades, y el logaritmo de
este cociente es la puntuación lod. Suponga que la probabilidad
de obtener un conjunto particular de observaciones con la presun-
ción de ligamiento y una cierta frecuencia de recombinación es de
O, 1 y que la probabilidad de obtener la misma observación con la
presunción de segregación independiente es de 0,0001. El cocien-
te de estas dos probabilidades es O.l/o,ooot = 1000, cuyo logaritmo
(la puntuación lod) es 3. Por consiguiente, la probabilidad de liga-
miento con la recombinación especificada es 1000 veces mayor
que la segregación independiente para producir lo observado. Una
puntuación lod de 3 o más alta se suele considerar evidencia con-
vincente de ligamiento. ~ SOLVER EL PROBLEMA 36
Mapeo con marcadores moleculares
Durante muchos años, el mapeo de genes de la mayoría de los
organismos se vio limitado por la disponibilidad de marcadores
genéticos: genes variables con fenotipos fáciles de observar cuya
herencia se puede estudiar. Los marcadores genéticos tradiciona-
les son genes que codifican características fácilmente observables,
como el color de las flores , la forma de las semillas, los grupos
tos de mapeo.
En la década de 1980, nuevas técnicas moleculares posi bilita-
ron anali zar vaiiaciones del propio DNA y suministraron un a can-
tidad casi ilimitada de marcadores genéticos para la creación de
mapas genéticos y el estudio de relaciones de ligamiento. Los pri-
meros de estos marcadores moleculares eran polimorfis1nos de
enziinas de restricción (véase cap. 19). Más adelante, se desarro-
Uaron métodos pai·a detectar números variables de secuencias
cortas de DNA repetidas en tándem, denominadas microsatélites.
En la actualidad, la secuenciación del DNA permite la detección
Todos estos métodos han ampliado la disponibilidad de marcado-
res genéticas y fac ilitaron mucho la creación de mapas genéticos.
El mapeo genético con marcadores moleculares se realiza esen-
cialmente de la misma 1nanera que e] mapeo con marcadores fe-
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 191

notípicos tradicionales: se estucLia la cosegregación de dos o más En una población

marcadores, y las cListancias de ,n apa se basan en las tasas de re- aparecen una serie de
combinación entre los marcadores. Estos métodos y su aplicación haplotipos diferentes.
al mapeo se analizan con mayor detalle en los capítulos 19 y 20.

Los genes se pueden localizar con estudios

Al
)
a>
) ,
es o•
)
A2
)
o•
) ,
o•

de asociación en todo el genoma

Cuando una mutaoón
Mutación (o -) aparece por
El enfoque tradicional para el mapeo de genes, que hemos consi- primera vez. se asocia
derado en este capítulo, consiste en examinar los fenotipos de la con un haplotipo

-·
progenie de cruzamientos genéticos o en individuos de un pedigrí A2 s2 o- especial de alelos en
buscando asociaciones entre la herencia de un fenotipo particular otros locus.
y la herencia de alelos en otros locus. Este tipo de mapeo de genes
se denomina análisis de ligamiento, porque se basa en la detec-
ción de ligamiento físico entre los genes, determinado por la tasa
Sin Entrecruzamiento
de recombinación, en la progenie de un ligamiento. El análisis de entrecruzamiento
ligainiento ha sido una herramienta poderosa para el análisis
genético de n1uchos tipos diferentes de organisn1os, como n1oscas
de la fruta, maíz, ratones y seres humanos.
Otro enfoque alternativo al mapeo de genes consiste en reali zar
Al
) r é'
• •
o-

estudios de asociación en todo el genoma buscando asociacio-

nes no aleatorias entre la presencia de un rasgo y alelos de
,
A' 81

muchos locus diferentes dispersos en todo el geno1na. A diferen-
cia del ai1álisis de ligamiento, este enfoque no rastrea la herencia
de 1narcadores genéticos ni un rasgo en un cruzainiento genético
o en una familia. En su lugar, investiga asociaciones entre rasgos
y juegos particulares de alelos en una población.
Imagine que estamos interesados en hallar genes que contribu-
yen a enfermedad bipolar, una enfermedad psiquiátrica caracteri-
zada por depresión y manía graves. Cuando una mutación que
predispone a una persona a enfermedad bipolar surge por prime-
ra vez en una población, aparecerá en un cron1osoma paiticulai· y
se asociará con un conj unto específico de alelos de ese cromoso-
ma. En el ejemplo ilustrado en la figura 7-19, la mu tación O-
aparece primero en un cromosoma que tiene alelos A2, B2 y C4, y
por lo tanto, la mutación D- está ligada inicialmente a los alelos
A2, B2 y C4. Un conj unto específico de alelos ligados como este
se denomina haplotipo, y la asociación no aleatoria en tre alelos
de un haplotipo se denomi na desequilibrio de ligamiento. Dado
el ligamiento físico entre la mutación bipolar y los otros alelos del
haplotipo, la enfermedad bipolar y el haplotipo tenderán a he-
redarse j untos. Sin embai·go, el entrecruzainiento rompe la aso-
ciación entre los alelos del haplotipo (véase fig. 7-19), lo que
reduce eJ desequilibrio de ligamiento entre ellos. Cuánto tiempo
persiste el desequilibrio de ligamiento a Jo largo de la evolución
depende del grado de recombinación entre los alelos de diferen-
tes locus. Cuando los locus están alejados, el desequilibrio de
ligainiento se rompe con rapidez; cuando los locus están cerca, el
entrecruzamiento es menos frecuente, y el desequilibrio de liga-
miento persistirá por más tiempo. El dato i1nportante es que el
desequilibrio de ligamiento - la asociación no aJeatoria entre ale-
los aporta información acerca de la di stancia entre los genes. Una
asociación firme entre un rasgo con10 enfermedad bipolar y un
conjunto de marcadores genéticos ligados indica que es probable
que uno o más genes que contribuyen a la enfer1nedad bipolai·
estén cerca de los 1narcadores genéticos.
En los últimos afios, los genetistas han mapeado mjllones de
variantes genéticas denominadas polimorfismos de nu cleótico
único (SNP), que son posiciones del genoma donde las personas
•
es
)
o•
•
En ausencia de • En caso de
recombinación, la entrecruzamiento,
mutación D - la mutacióno-
continúa asociada ahora también se
con el haplotipo asocia con el
A2 82 (4_ haplotipo Al 82 cs.j
Figura 7-19. Los estudios de asociación en todo el genoma se basan
en la asociación no aleatoria de una mutación (O-) que produce un
rasgo y genes estrechamente ligados que constituyen un haplotipo.
varían en una sola base nucleotídica (véase cap. 20). Recuerde
que los SNP se usaron en un análisis de ligamiento que localizó
el gen responsable de la calvicie de patrón masculino, analizada
en la introducción de este capítulo. En la actualidad, es posible
obtener de manera rápida y económica el genotipo de personas
para cientos de miles o millones de SNP. Esta genotipificación ha
proporcionado los marcadores genéticos necesarios para realizar
estudios de asociación de todo el genoma, en los que se compa-
rai1 haplotipos de SNP de individuos que presentan una enferme-
dad particular, por ejemplo enfermedad bipolar, con los haploti-
pos de individuos sanos. Las asociaciones no aleatorias entre SNP
y la enfern1edad sugieren que uno o más genes que contribuyen a
la enfermedad están estrechamente ligados a los SNP. Por lo
general, los estudios de asociación en todo el genoma no locali-
zan genes específicos: más bien, asocian la herencia de un rasgo
o enfermedad con una región cromosómica específica. Después
de haber establecido una asociación de este tipo, los genetistas
pueden examinar la región cromosómica para detectar genes que
podrían ser responsables del rasgo. Los estudios de asociación en
todo el genoma han desempeñado un papel decisivo en el descu-
brin1iento de genes de regiones cromosórnicas que influyen en
192 CAPITULO 7

una serie de enfermedades genéticas y rasgos humanos importan- Fibroblasto humano Célu la tumoral de ratón
tes, como enfermedad bipolar, talla, pig1nentación de la piel,
color de ojos, peso corporal, arteriopatía coronaria, concentracio- Se mezclan fibroblas-
nes sanguíneas de lípidos, diabetes, infarto de miocardio, densi- tos humanos y célu las
dad ósea y glaucoma, entre otros. tumorales de ratón en
presencia de
polietilenglicol, lo que
facilita la fusión de sus
CONCEPTOS membranas ...

El desarrollo de técnicas moleculares para est ud iar la variación de las

secuencias de DNA ha suministrado un gran número de ma rcadores
genéticos que pueden utilizarse para crear mapas genéticos y estu- .. .y crea células
híbridas denom inadas
diar relaciones de ligamiento. Los estudios de asociación en todo el
heterocarion.
genoma examinan la asociación no aleatoria de marcadores genéti-
cos y fenotipos para local izar genes que contribuyen a la expresión
de rasgos.
Heterocarion

7.4 Los métodos de mapeo físico se utilizan En algunas células híbridas,)

se fusionan los núcleos
para determinar las posiciones físicas humano de ratón.
de los genes en cromosomas particulares
Los mapas genéticos revelan las posiciones relativas de los genes Cé lula híbrida con
en un cromosoma sobre la base de las frecuencias de recombina- núcleo fusionado
ción, pero no aportan información que nos permi ta ubi car grupos
de genes ligados en cromosomas particulares. Más aú n, las unida-
des de un mapa genético no sie1npre se corresponden precisamen- ' n diferentes líneas
te con las distancias físicas en el cromoso1na, porque una serie de celulares, se pierden
diferentes cromo-
factores aparte de las distancias físicas entre los genes (por ejem-
somas humanos.
plo, el tipo y el sexo del organis1no) pueden influir en la recon1-
binación. Dadas estas limitaciones, se han desarrollado métodos ~
de mapeo físico que no se basan en las frecuencias de recombi na-
. ~

ClOn.
Hibridación de células somáticas
Un 1nétodo utilizado para determinar la posición de los genes en
los cromosomas es la hibridación de células somáticas, que
requiere la fus ión de diferentes tipos de células. La mayoría de las
células somáticas (no sexuales) pueden presentar solo una canti-
dad limitada de divisiones y, por lo tanto, no pueden crecer con-
tinuan1ente. Sin embargo, las células que han sido alteradas por
vir us o que derivan de tumores que han perdido las restricciones
normales de la división celular se dividirán de manera indefi nida;
este tipo de célula puede cultivarse en el laboratorio para produ-
cir una línea celular.
Las células de dos líneas celulares diferentes pueden fusionar-
se tratándolas con polietilenglicol u otros agentes que alteran las
n1embranas plasmáticas. Después de la fusión, la célula posee dos
núcleos y se denomina heterocarion. Finalmente, los dos núcle-
os de un heterocarion también se fusionan, lo que genera una
célula híbrida que contiene cromosomas de ambas líneas celula-
res. Si se mezclan células hun1anas y de ratón en presencia de
polietilenglicol, la fusión determina células somáticas híbridas de
humano-ratón (fig. 7-20). Las células hfbridas tienden a perder
cromosomas a medida que se dividen y, por razones que no se
conocen, hay una pérdida preferencial de los cromosomas de una
de las especies. En las células somáticas híbridas de humano-
A B c D E
Líneas celulares
Figura 7-20. La hibridación de células somáticas se puede usar para
determinar qué cromosoma contiene un gen de interés.
ratón, tienden a perderse los cron1osomas humanos, mientras que
se conservan los cromosomas de ratón. Con el tiempo, el n(rmero
de cromosomas se estabiliza cuando se han perdido todos los cro-
mosomas humanos, excepto unos pocos. La pérdida de cromoso-
mas es aleatoria y difiere entre las líneas celulares. La presencia
de estos cromosomas hun1ru10s "extra" en el genoma del ratón
posibilita asignar genes humanos a cromosomas específicos.
Para 1n apear genes 1nedia.nte hi b1idación de cél ul as son1áticas,
se requiere un panel de diferen tes líneas celulares híbridas. Se
examina de manera cuidadosa por microscopia cada línea celular,
y se identifican los cron1osomas hu1nanos que contiene. Las líne-
as celulares del panel se eligen de manera que difieran en los cro-
mosomas humanos que han conservado. Por ejemplo, una línea
celular podría tener los cromosomas humanos 2, 4, 7 y 8, 1nien-
tras que otra podría tener los cromosomas 4, 19 y 20. Se investi-
ga evidencia de un gen humano particular en cada línea celular
del panel. El gen humano puede detectarse buscando el gen en sí
 Li 9amiento, recomb inación y mapeo de genes eucariontes 193

Cromosomas humanos presentes

Línea Producto ,8
1 2 3 4 5 6 7 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 X
celular génico presente

A + + + + -11-

B + + + + + + + + + +
e + + + +
D + + + + + +
E + +
F + + + +

Figura 7-21. La hibridación de células somáticas se utiliza para asignar un gen a un cromosoma
humano particular. Se investiga la presencia del producto del gen (por ejemplo, una enzima) en un
panel de seis lineas celulares, en el que cada linea contiene un subconjunto diferente de cromosomas.
Cuat ro de las líneas celulares (A, B, D y F) t ienen el producto génico. El único cromosoma común a estas
cuatro líneas es el cromosoma 4, lo que indica que el gen está localizado en este cromosoma.

mismo (lo que se analiza en el cap. 19) o la proteína que produ-
ce. La correlación de la presencia de un gen con la presencia de
cromosomas humanos específicos a 1nenudo permite asignar el
gen al cron1osoma correcto. Por ejemplo, si se detecta un gen en
las dos líneas celulares mencionadas antes, el gen debe estar en el
cromosoma 4, porque es el único cromosoma humano común a
ambas líneas celulares (fig. 7-21).
En ocasiones, es posible utilizar la hibridación de células somá-
ticas para ubicar un gen en una parte específica de un crom oso-
ma. Algunas líneas celulares híbridas contienen un cromosoma
hu1nano con una mutación, como deleción o translocación. Si el
gen está presente en una línea celul ar con el cro mosoma intacto
pero está ausente en una línea con una deleción cromosómica
(una mutación en la que falta un parte de un cromosoma), el gen
debe estar localizado en la región eliminada (fig. 7-22). De modo
similar, si un gen suele estar ausente de un cromoson1a pero apa-
rece en forma consistente siempre que hay una translocación (un
frag1nento de otro cro1noso1na que se ha roto y se ha unido al cro-
mosoma en cuestión), este debe estar presente en la parte trans lo-
cada del cro mosoma.
Se creó un panel de líneas celulares a partir de fusiones de célu -
las somáticas de humano-ratón. Se examinó cada línea para
detectar la presencia de cromosomas humanos y la producción de
haptoglobina human a (una proteín a). Se obtuvieron los siguientes
resultados:

Cromosomas humanos
El producto génico El producto génic~ ~ o fa lta su Línea Haptoglobina
está present e cuando está ausente cuando ~ corto. celular humano 1 2 3 14 15 16 21
el cromosoma 4 está odo el cromosoma
intacto. está ausente .. . A + + +
B + + + +

-- e
D
+ +
+ +
+
+
+

Sobre la base de estos resultados, ¿qué cromosoma humano con-

tiene el gen de haptoglobina?
2 4 11 2 11 2 4 11 Estrategia de solución
Línea celular 1 Línea celular 2 Línea celular 3 ¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?

Conclusión: si está presente el producto génico en una
línea celular con un cromosoma intacto pero falta en una
línea celular con una deleción del cromosoma, el gen para
ese producto debe estar localizado en la región eliminada.
Figura 7-22. La hibridación de células somáticas permite localizar los
genes en una parte específica de un cromosoma.
El cromosoma que contiene el gen de haptoglobina.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
■ Los cromosomas que están presentes en cada línea celular
(del cuadro).
■ Las líneas celulares que expresan haptoglobina humana (del
cuadro).
194 CAPITULO 7

Pasos de la solución tinción especiales que revelan patrones de bandeo característicos

Primero, identifique las líneas celulares que son positivas par a la
proteína (haptoglobina humana) y determine los cromosomas
que tienen en común. Las líneas B y C producen haptoglobina
hu1nana; el único cromoso1na que tienen el común son los cro-
mosomas 1 y 16. A continu ación, examine todas las líneas celu-
lares que poseen los cromosomas 1 y 16, y observe si producen
haptoglobina. El cromosoma 1 se encuentra en las líneas celula-
res A , B, C y D . Si el gen de haptoglobina humana se hallara en
el cromosoma 1, la haptoglobina humana estaría presente en
todas estas líneas celulares. Sin embargo , las líneas A y D no
producen hap toglobina humana, de manera que el gen no puede
estar en el cromosoma 1. El cro mosoma 16 se encuentra solo en
las líneas celulares B y C, y solo estas líneas producen haptoglo-
bina humana; el gen de haptoglobina humana se localiza en el
cro1nosoma 16.
► Para practicar más con hibridaciones de células somát icas, resuelva el Problema 37
al final de este capítulo.
Mapeo por deleción
Otro método para determinar la localización cro1n osómica de un
gen es el mapeo por deleción. Se han desruTollado m étodos de
en los cro moso mas (véase cap. 9). La ausencia de una o 111ás de
las b~ndas que suelen encontrarse en un cromosoma revela la pre-
sencia de una deleción cromosómica. L os genes pueden asignar-
se a regiones de cromosomas es tudiando la asociación entre el
fenotipo o el producto de un gen y deleciones cromosó1nicas par-
ticulares.
En el mapeo por deleción, se cruza un individuo que es homo-
cigótico para una mutación recesiva del gen de interés con un
individuo que es heterocigótico para una deleción (fig. 7-23). Si
el gen de interés se encuentra en la región del cromoson1a repre-
sentada por la deleción (la parte roja de los crornosomas de la
fig. 7-23), entonces alrededor de la mitad de la progenie presen-
tará el fenotipo mutante (véase fig. 7-23a). Si el gen no se encuen-
tra dentro de la región eliminada, toda la progenie será de tipo sil-
vestre (véase fig. 7-23b).
Se ha recurri do a mapeo por deleción para revelru· las localiza-
ciones cromosómicas de una serie de genes humanos. Por ejem-
plo, la distrofia 1nuscular de Duchenne es una enfermedad que
causa debilita,n jento y degeneración progresivos de los músculos.
Por su patrón de herencia Ligada al cromosoma X, se sabía que el
alelo 1nutado causante de este trastorno se encontraba en el cro-
mosoma X , pero no se conocía con certeza su localización preci-
sa. El examen de una serie de pacientes con la enfermedad, que
también tenían pequeñas deleciones, permitió que los investiga-
dores ubicaran el gen en un pequeño seg1nento del brazo corto del
cromosoma X. Ql_NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 39

(a) (b)

Generación P Región de la deleción Cromosoma

a
/a A+ I
con deleción

X X

Región de - - cromosoma
la deleción con deleción
Cruzamiento Cruzamiento

Mutante aa Tipo silvestre A+ Mutante aa Tipo silvestre A+A+

Generación F1
Si el gen de interés se
localiza en la región de la
deleción, la mitad de la
a a
progenie presentará e!
fenotipo mutante.
r Si el gen no se 7
encuentra en la región
de la deleción, toda la
"""'=--J progen ie será de tipo
silvestre.

Tipo silvestre A+a Mutante a

'
Tipo silvestre A+ Tipo silvestre A+a

Figura 7-23. Se puede utilizar mapeo por deleción para determinar la localización cromosómica de un
gen . Un individuo homocigótico para una mutación recesiva del gen de interés (aa) se cruza con un individuo
heterocigótico para una deleción.
 Li 9amiento, recomb inación y mapeo de genes eucariont es
Figura 7-24. La hibridación in situ es otra técnica para determinar la
localización cromosómica de un gen. Los puntos de fl uorescencia roja y
verde son producidos por sondas que son específicas para diferentes
secuencias de DNA en el cromosoma 15. (Wellcome lmages/Custom
Medica! Stock Photography).
Mapeo físico de cromosomas a través
del análisis molecular
Hasta ahora, se han explorado métodos para determinar en forma
indirecta la localización cromosómica de un gen investigando pro-
ductos génicos o mediante mapeo por deleción. En la actualidad,
los investigadores cuentan con la información y la tecnología para
observar dónde se ubica, en realidad, un gen. La hibridación in situ,
que se describe con rnás detalle en el capítulo 19, es un método
para deternunar la localización cro1nosómica de un gen particular a
través del análisis molecular. Este método exige la creación de una
sonda para el gen, que es un complemento de DNA monocatenario
del gen de interés. La sonda es radiactiva o e1nite fluorescencia bajo
luz ultravioleta, de manera que puede ser visualizada. La sonda se
une a la secuencia de DNA del gen en el cromosoma. La presencia
de radi actividad o fluorescencia de la sonda unida revela la locali-
zación del gen en un cromosoma particular (tig. 7-24).
Adem ás de permitimos observar dónde se localiza un gen en un
cromosoma, las técnicas de laboratorio modernas ahora hacen
posible que los investigadores detecten la localización precisa
de un gen en el nivel nucleotídico. Por ej e1nplo, gracias a la
secuenciación del DNA (que se describe en forma exhaustiva en
RESUMEN DE CONCEPTOS
■ Los genes ligados no se segregan de manera independiente. En
un cruzamiento de prueba para dos genes completamente liga-
dos (sin entrecruzan1iento ), solo se produce progenie no recom-
binante. Cuando dos genes se segregan de manera independien-
te, se produce progenie recombinante y progenie no recombi-
nante en proporciones iguales. Cuando dos genes están ligados
con cierto grado de entrecruzamiento entre ellos, se produce
1nás progenie no recombinante que progenie recombinante.
■ La frecuencia de recombinación se calcula sumando el núme-
ro de progenie recombinante, dividiéndolo por el número total
de la progenie producida en el entrecruzanuento y multipli-
cando por 100%. La frecuencia de reco1n binación es la .mitad
195
el cap. 19), pueden determinarse las distancias físicas entre genes
en números de pares de bases.
CONCEPTOS
Los métodos de mapeo físico determinan las localizaciones físicas de
los genes en los cromosomas e incluyen el mapeo por deleción, la
hibridación de células somáticas, la hibridación in situ y la secuencia-
ción directa del DNA.
7 .5 Las frecuencias de recombinación
muestran gran variación
En los últimos años, los genetistas han estudiado la variación de
las tasas de recombinación y han hallado que los niveles de re-
combinación varían a111pliamente entre especies, entre los cro1110-
somas y a lo largo de ellos, e incluso entre 1nachos y be1nbras de
la mi sma especie. Por ejemplo, los seres humanos presentan al re-
dedor del doble de recombinación qu e los ratones y las ratas.
Dentro del genon1a humano, la recombinación varía en los distin-
tos cromosomas, y los cro111osomas 21 y 22 tienen las tasas más
altas, mientras que los cromosomas 2 y 4 tienen las más bajas.
Asinusmo, los investigadores han detectado diferencias entre va-
rones y n1ujeres en las tasas de reco1nbinación: los cro.moso.mas
autosómicos de las mujeres presentan alrededor de un 50% más de
reco1nbinación que los cromoson1as autosómicos de los varones.
Los genetistas han hallado muchos puntos calientes de recom-
binación, donde esta es por lo m enos 10 veces n1ás alta que el pro-
medio en cualquier otro lugar del genoma. Se estima que el geno-
ma hu1nano puede contener de 25 000 a 50 000 de estos puntos
calientes de recombinación, y alrededor del 60% de los entrecru-
zamientos tienen lugar en ellos. En los seres humanos, los puntos
calientes de recombinación tienden a hallarse cerca de genes acti-
vos, pero no dentro de ellos. Otras regiones cromosómicas, como
las cercanas a los centrón1eros, suelen presentar tasas reducidas
de reco mbinación.
CONCEPTOS
Las tasas de recombinación varían entre las especies, entre los cromo-
somas y a lo largo de ellos, e incluso entre machos y hembras.
de la frecuencia de entrecruzanuento, y la frecuencia n1áxima
de gametos recombinan tes es del 50%.
■ Acoplamiento y repulsión se refieren a la disposición de los
alelos en un cromoson1a. Que los genes se encuentren en con-
figuración de acoplamien to o de repulsión determina qué
combinación de fenotipos será más frecuente en la progenie
de un cruzamiento de pru eba.
■ La recombinación intercromosómica tiene lugar entre los ge-
nes localizados en diferentes cromosomas a través de la segre-
gación aleatoria de cromosomas durante la meiosis. L a recom-
binación intracromosómica se produ ce entre genes localizados
en el mismo cromosoma a través del entrecruzamiento.
196 CAPITULO 7

■ Se puede utilizar una prueba de Ji cuadrado de independencia
para determinar si los genes están ligados.
■ Las tasas de recombinación pueden emp learse para determinar
el orden relativo de los genes y las distancias entre ellos en un
crom osoma. El 1% de recon1binación equivale a una unidad
de 1napa. Los 1napas basados en las distancias físicas se deno-
1ninan ma pas físicos.
■ Es posible construir mapas genéticos examinando las tasas de
recombinación de una serie de cruzamientos de dos puntos o
examinando la progenie de un cruzamiento de prueba de tres
puntos.
■ Algunos entrecruzamientos múltip les pasan inadvertidos; por
consiguiente, los m apas genéticos basados en las frecuencias
de recombinació n subestiman las verdaderas di stancias físicas
entre Jos genes.
■ Los genes humanos pueden mapearse analizando la cosegre-
gación de rasgos en pedigríes.
■ Una puntuación lod es el logaritmo del cociente entre la pro-
babilidad de obtener la progenie observada con la presunción
de ligamento y la probabilidad de obtener la progenie obser-
vada con la presunción de segregación independiente. Una
puntuación lod de 3 o más alta suele considerarse evidencia
de li gamiento.
■ Las técnicas moleculares que permiten la detección de dife-
rencias variables de la secuencia de DNA han facilitado
mucho el mapeo de genes.
■ Los estudios de asociación en todo el genoma localizan genes
que inciden en rasgos particulares examinando la asociación
no aleatoria de un rasgo con marcadores genéticos en todo el
genoma.
■ La secuenciación de nucleótidos es otro método de mapeo
físico de genes.
■ Las tasas de recombinación varían ampliamente entre las
especies, entre los cromosomas y a lo largo de ellos dentro de
una sola especie, e inclu so entre 1nachos y he1nbras de la
. .
rms1na especie.

TÉRMINOS IMPORTANTES

análisis de ligamiento
(p. 19 1)
centimorgan (cM) (p. 178)
coeficiente de coincidencia
(p. 186)
configw·ación de acoplamiento
(cis) (p. 172)
configuración de repulsión
(trans) (p. 172)
cruzamiento de prueba de dos
puntos (p. 179)
cruzamiento de prueba de tres
puntos (p. 180)
desequilibrio de ligamiento
(p. 19 1)
estudios de asociación en todo
el genoma (p. 191)
frecuencia de recombinación
(p. 17 1)
función de mapeo (p . 189)
gameto no recombinante
(parental) (p. 170)
gameto recombinante (p. 170)
genes ligados (p. 167)
grupo de ligamiento (p. 167)
h aplotipo (p. 191)
heterocarion (p. 192)
hibridación de células somáti-
cas (p. 192)
interferencia (p. 186)
línea celu lar (p. 192)
mapa físico (p. 178)
m apa genético (p. 178)
mapeo por deleción (p . 194)
marcador genético (p. 190)
polimorfismo de nucleótido
único (SNP) (p. 191)
progenie no recombinante
(parental ) (p. 170)
progenie recombinante (p. 170)
puntuación lod (logaritmo de
probabilidades) (p. 190)

l . c. 4. m+p + s+ ,n+p s mp+ s+ m+ p+ s mp s+ m+ p s+ mp+s mp s

2. R epulsión ,nps ,nps mps m. ps mps nips n1. ps m p s
3. Los mapas genéticos se basan en las tasas de recombinación;
5. El locus c
l.os mapas físicos se basan en las distancias físicas.
6. b

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
En los cobayos, el pelaje blanco (w) es recesivo respecto del pelaje negro (W) , y el pelo ondeado (v) es
recesivo respecto del pelo lacio (V). Un criador cruza un cobayo ho1nocigótico para pelaje blanco y
pelo ondeado con un cobayo que es negro y de pelo lac10. Despu és, se cruza la generación F 1 con
cobayos que tiene pelaje blanco y pelo ondeado en una serie de cruzamientos de prueba. E stos cruza-
mientos de prueba producen la siguiente progenie :
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 197

negro, lacio 30
negro, ondeado 10
blanco, lacio 12
blanco, ondeado 31
Total 83

a. ¿Se segregan independientemente los genes que determinan el color del pelaje y el tipo de pelo? Realice
pruebas de Ji cuadrado para investigar su hjpótesis.
b. Si los genes no se segregan de manera independiente, ¿cuál es la frecuencia de recombinación entre ellos?
Pista: véase la
figura 7-10
Estrategia de solución para repasar
cómo se prac-
tica una prue-
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? de prueba (30 , 1O, 12, 31) no parecen ajustarse bien a los ba de Ji cua-
a. Si los genes se segregan de manera independiente, junto números esperados (20 ,75; 20,75; 20,75; 20,75); de n1anera drado de inde-
que no puede haber habido segregación independiente. pendencia.
con el valor de Ji cuadrado, d.f. y valor P para evaluar su
hipótesis.
Para investigar la hipótesis, realice una prueba de Ji cuadra-
b. Si los genes no se segregan de manera independiente, la
do de independencia. Construya un cuadro, con los genotipos
frecuencia de recombi nación entre ellos.
del primer locus a lo largo del borde superior y los genotipos del
segundo locus a lo largo de la primera columna. Calcule los
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
totales de las fi las y las columnas, y el tota l general.
■ E l pelaje blanco es recesivo respecto del pelaje negro, y el
pelo ondeado es recesivo respecto del pelo lacio. Totales
■ Los números de diferentes tipos de progenie de una serie de Ww ww de las filas
cruzamientos de prueba.
Vv 30 12 42
Para obtener ayuda con este problema, repase:
vv 10 31 41
Entrecruzamiento con genes ligados, Cálculo de la frecuencia
de recombi nación y Pruebas de segregación independiente. Totales 40 43 83 ~ Total general
de las
colunmas

Pasos de la solución
El valor esperado para cada celda del cuadro se calcula por
a. Asumiendo segregación independiente , delinee los cruza- m edio de la siguiente fórmu la:
mientos realizados por el criador:
total de las fibras x total de las columnas
p número esperado=
l!VW VV X WWW total general

t
WwVv
Aplicando esta fórmula, hallamos que los valores esperados
(presentados entre paréntesis) son los siguientes:

Cruzamiento de prueba Ww Vvxww vv

t
Totales
Recuerde: e_n
caso de segrega-
Ww Vv 1/
4
t
negro, lacio
Wn, ww de las filas

ción indepen- Vv 30 12 42
diente, se espera 1/
igual número de
Ww Vv 4 negro, ondeado (20 ,24) (21,76)
descendencia no 1/
ww Vv 4 blanco, lacio
recombinante y vv 10 31 41
recombinante. 1
wwvv /4 blanco, ondeado (19,76) (21,24)

Como se produce un total de progenie de 83 individuos en los Totales 40 43 83 ~ Total general

cruzamientos de prueba, esperamos 1/4 x 83 = 20,75 de cada de las
tipo. Los n úmeros observados en la progenie del cruzamiento columnas
 198 CAPITULO 7

Utilizando estos números observados y esperados, ha!Jamos p w V w V

qu e el val or calculado de Ji cuadrado es: X
w V w V

( observado - esperado )2
X2 = I , - - - - - - -
esperado w V
W V

(30 - 20,24) 2 (10 - 19,76) 2

- - - - - -+ - - - - - - + Cruzamiento w V w V
2 0,24 19,76 de prueba X
w V w V

(12 - 2 1,76) 2
+
(31 - 21,24)2
w V
t
30 pelaje negro , lacio
2 1,76 2 1,24
w V (progenie no recombinan te)
= 4 ,71 + 4 ,82 + 4,38 + 4,48 = 18,39
w V 3 1 pelaje blanco , ondeado
Los grados- de libertad para la prueba de Ji cuadrado de inde- w V (progenie no recombinante)
pendencia son df (número de filas - 1) x (número de columnas
- 1). Hay dos filas y dos colun1nas, de manera que los grados w V 10 pelaje negro, ondeado
de libertad son: w V (progenie reco1nbinante)
df = (2 - 1) X (2 - 1) = 1 X 1 = 1 w V 12 p elaje blanco, lacio
Recuerde: la pro- En el cuadro 3-5, la probabilidad asociada con un w V (progenie recombinante)
babilidad asocia-
da con el valor de
valor de Ji cuadrado de 18,39 y 1 grado de libertad es
Ji cuadrado es la tnenor de 0,005, lo que indica que es muy Ílnprobable L a frecuencia de recombinación es :
probabilidad de que el azar sea responsable de las diferencias entre
que la diferencia frecu encia de recombinación =
entre lo observa- los números observados y los números esperados con
do y lo esperado segregación independiente. Por lo tanto, los genes
se deba al azar. 10 + 12 22
p ara color de pelaje y tipo de pelo no se han segrega- ------ X 100% - -X 100% = 26,5
do de manera independiente. 30 + 31 + 10 + 12 83
b. Para determinar las frecuencias de recombinación , identifi- Recuerde: Frecuencia de recombinación
que la progenie r ecombinante. Utilizando la notación para número de progenie recombinante
genes ligados, esc1iba los cruzamientos: - - - - - - - - - - x 100%
número total de la progenie

Problema 2
Se Jlevaron a cabo una seri e de cru zamjentos de prue ba de dos puntos entre siete locus (a, b, e, d, e, f y g) que
produjeron las siguientes frecuencias de recombinación. U tilizando las frecuencias de recombinación , mapee los
siete locus y muestre sus grupos de ligruniento, el orden de los lo cus en cada grupo de ligamiento y las distan-
cias entre los locos de cada grupo.

Estrategia de solución
Frecuencia de Frecuencia de
Locus de recombinación Locus de recombinación ¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Los grupos de ligamiento para los siete locus, el orden de los
a yb 10 c yd 50 locus dentro de cada grupo de ligamiento y las distancias de
a yc 50 c ye 8 mapa entre los locus.
ayd 14 e yf 50
¿Qué información se proporciona para resolver el
a ye 50 cyg 12
problema?
a yf 50 dye 50
a yg 50 dy f 50 Las frecuencias de recombinación para cada p ar de locu s.
byc 50 dyg 50
Para obtener ayuda con este problema, repase:
byd 4 e yf 50
bye 50 e yg 18 Construcción de un mapa genético mediante c1uzanuentos de
by/ 50 f yg 50 prue ba de dos puntos en Ja Sección 7 .2.
byg 50
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 199

· Pasos de la solución

P ara resolver este problema, recuerde que una reco mbinación Entre f y todos los demás genes, hay una recombinación del
del l % equivale a l unidad de mapa. La frecuencia de recotTI- 50%, de manera que f debe pertenecer a un tercer grupo de
Pista: una frecuen- binación entre a y bes del 10%; por consiguiente, ligamiento:
d a de recombina- estos dos locus se e ncuentran en el mismo grupo de
ción del 50% impli- ligamiento, separados por alrededor de 10 u.m.
ca que los genes de
los dos locus se
a b Grupo de ligamiento 1 a+-------14 m.u.- - - - - -d
segregan de mane-

➔
ra independiente Grupo de liga1niento l
(están localizado en
b
1 f-- 1Ou.m. 1
diferentes grupos
de ligamiento). +-----10 m.u.-----+1+-4 m.u.-
1

La frecuencia de recombinación entre a y e es del

50%, de manera que e debe pertenecer a un segundo grupo de Grupo de ligamiento 2
ligamiento.
a b 1---8 m.u.- - - - Í
Grupo de li gamiento 1
1 f-- 10 u.m. ➔ 1
Grupo de liganu ento 3 f
e
Grupo de liganúento 2

Por 11ltimo, ubique el locus g con respecto a los otros genes.

La frecuencia de recombinación entre a y des del 14%, de
manera que d está localizado e n el grupo de ligamiento 1. ¿El
Pista: para determi- locos d está a 14 u.m, a la derecha o a la izquierda
nar si el locus o está del locus a? Si d se encuentra a 14 u.m . a la iz-
a la derecha o a la quierda de a, la distancia b-d debe ser de 1O u.m.
izquierda del locus
A, mire la distancia + 14 u.m. = 24 u.m. Por el contrario, si d se ubica a
entre By D. 14 u.m. a la derecha de a, la distancia entre by d
debe ser de 14 u .1n. - 1O u .1n. = 4 u .m. La frecuencia
de recombinación b-d es del 4%; por lo tanto, d se encuentra a
14 u.m. a Ja derecha de a. El mapa actualizado es el siguiente:
Las frecuencias de recombinación entre g y los locus a, b y d
son del 50%; por lo tanto, g no se encuentra en el grupo de
ligamiento l. La frecuencia de recombinación en tre g y e es de
12 u.m. ; por consiguiente, g forma parte del grupo de liga-
miento 2. Para determinar si g se encuentra a 12 u.m. a la dere-
c ha o a la izquierda de e, consulte la frecuencia de recombina-
ción g-e. Como esta frecuencia de recombinación es del 18%,
g se debe localizar a la izquierda de e.

· - - - - - -14 m.u.- - - - - - ·d
Grupo de ligamiento 1 <º~ Grupo de ligamiento l a - - - - - - 1 4 m.u. - - - - - - )d
b b
1+--- - -10 1n.u.- - --._,4 m.u.-
,~~- - - - 10 m.u. - - - -+1+-4 in.u. -
Grupo de ligainjento 2
e Grupo de ligamiento 2 g -- - - - - 18 m.u.- - - - -- e

e
Las frecuencias de recombinación entre cada uno de los
locus a, by d, y el locus e son del 50%; en consecuencia, e no ,~·- - - - 1 2 m.u . - - - - ~ ._8 m.u. ~
se e nc uentra en el grupo de ligamiento 1 con a, b y d. La fre-
cuencia de recombinación entre e y e es de 8 u.m. ; por consi- Grupo de ligamiento 3 f
guiente, e se encuentra en el grupo de ligamiento 2.

Grupo de ligamiento l a +-------14 m.u.-----➔d

- - - -10 m.u.- - - --14-4
Grupo de ligruniento 2
e e
1-
Recuerde: como
b algunos entrecruza-
mientos dobles pue-
m.u ;➔ den no ser detecta-
Observe que la distancia g-e (18 u.in) es más dos, la distancia entre
los genes alejados,
corta que la suma de las distancias g-c ( 12 u.m) como g y e, puede ser
y e-e (8 u.m.), debido a entrecruzamientos menor que la suma de
distancias más cortas
dobles indetectables entre g y e.
8m.u.- 1 (como g-c y e-e).
 200 CAPITULO 7

El color ébano de] c ue rpo (e), los ojos rugosos (ro) y las cerdas cortas (bv) son tres mutaciones recesivas que
aparecen en .m oscas de la fruta. Se han mapeado Jos locus para estas mutaciones y están separados por las
siguientes distancias de mapa:

el ro bv

- - - - 20 ro.u. ---➔ 1+---- 12 ro.u.--- 1

La interferencia entre estos genes es de 0,4.

Se cruza una mosca con cuerpo color ébano, ojos rugosos y cerdas cortas con una mosca que es homocigótica
para los rasgos de tipo silvestre. Se realizan cruzamientos de prueba entre las h embras de la generación F 1 y
machos que tienen cuerpo color ébano, ojos rugosos y cerdas cortas; se produce una progenie de 1800 indivi-
duos. Indique el nú1nero esperado de fenotipos en la progenie del cruzamien to de prueba.

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? e+ ro+ bv+ no recombinante

Los números esperados de los diferentes fenotipos producidos e ro bv no recombinante
por el cruzamiento de pn1eba. e+/ ro bv entrecruzamiento simple entre e y ro
e / ro+ bv+ entrecruzamiento simple entre e y ro
¿Qué información se proporciona para resolver el proble-
e+ ro+ / bv entrecruzamiento simple entre ro y bv
ma?
e ro / bv+ entrecruzamiento simple entre ro y bv
■ Las distancias de mapa entre los tres locus. bv+
e+ / ro / entrecruzamiento doble
■ La interferencia entre los locus. e / ro+ / bv entrecruzamiento doble
■ Se realiza un cruzamiento de prueba y se produce una
progenie de 1800 i ndividuos . Para determinar e l número de cada tipo, utilice las distancias
de mapa comenzando con los entrecruzamientos dobles. El
Para obtener ayuda con este problema, repase:
número esperado de entrecruzamientos dobles es igual al pro-
Construcción de un mapa genético con un cruzamiento de duce de las probabilidades de entrecruzamientos simples:
prueba de tres puntos y e l problema resuelto de la Sección 7.3.
nú1nero esperado de
Pasos de la solución entrecruzamíentos dobles = 0,20 x O, 12 x 1800
= 43,2
Recuerde: la pre-
Los cruzamientos son: sencia de interfe-
rencia implica que
Sin embargo, hay cierta interferencia; por consi- no se observarán
e+ ro+ bv+ e ro bv
p guiente, el número observado de entrecruzamie n- todos los entre-
X cruzamientos
e+ ro+ bv+ e ro bv tos dob les será menor que el esperado. La interfe-

¡
dobles esperados.
rencia es l - coeficiente de coincidencia, de
manera que el coeficiente de coincidencia es
e+ ro+ bv+
Fl coeficiente de coincidencia = 1 - interferencia
e ro bv

Cruzamiento e+ ro+ bv+

¡ e ro bv
Se dio un valor de interferencia de 0,4 ; por lo tanto, el coefi-
ciente de coincidencia es igual a 1 - 0,4 = 0,6 . R ecuerde que
de prueba X
e+ ro+ bv+ e ro bv el coeficiente de coincidencia es:

Pista: el mapa
genético sumi- coeficiente de coincide ncia =
nistra eJ orden En este caso, sabemos que ro es el locus del
de los genes.
número de entrecruzamientos dobles observados
n1edio, porque se han 111apeado los genes. Este cru-
zamiento producirá ocho clases de progenie : número de entrecruzamientos dobles esperados
1
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 201

Refonnulando la ecuación, obtenemos: recombinantes pertenecerán a la progenie con entrecru- Pista: no olvide
zamiento simple y algunos, a la progenie con entr e- restar los entre-
número de coeficiente número de cruzamiento doble. Para detenninar el número de pro- cruzamientos
entrecruza1nientos de x entrecruza1nie11to genie resultante de un entrecruzamientos imple, reste dobles del núme-
dobles observados coincidencia dobles esperados ro total de recom-
los entrecruzamientos dobles: binantes.
2 16 - 26 = 190.
nú1nero de entrecruzamientos dobles observados = E sta progenie con entrecruzan1iento simple se divid i-
0,6 X 43,2 = 26 rá entre los dos fenotipos de entrecruzamiento simple
(e+ ro+ / bv y e ro / bv+), de manera que habrá 190/2 = Pista: El número
Se debe observar un total de 26 entrecruzamientos dobles. 95 de cada uno de estos fenotipos. La progenie restante de no recombi-
nantes se puede
Co1no hay dos clases de entrecruzamientos dobles (e+ L ro L bv+ será no recombinante y se puede obtener por sustrac- obtener por sus-
y e/ ro+/ bv), esperamos observar 13 de cada clase. ción: 1800 - 26 - 334 - 190 = 1250; hay dos t racción.
Pista: para obtener A continuaci ón, determinamos el número de proge- no reco1nbinantes (e+ :ro+ bv+ y e ro bv); por consi-
el número de pro-
genie con entrecru- nie con entrecn1zamiento simple. El mapa genético guiente habrá 125º/2 = 625 de cada una. Aquf se enumeran las
zamiento simple, indica que la distancia entre e y ro es de 20 u.m. ; cifras de los distintos fenotipos:
reste el número de
progenie con entre-
por lo tanto, se espera que la recombinación de
cruzamiento doble estos locus haya resultado en una progenie de 360
del número total (20 % de 1800). Algunos individuos pertenecerán a e+ ro+ bv+ 625 no recombinante
resultante de la e ro bv 625 no recombinante
recombinación.
la progenie con entrecruzamiento sunple y otros, a
la progenie con entrecruzamiento doble. Ya hemos e+ / ro bv 167 entrecruzamiento simple entre e y ro
determinado que el número de progenie con doble
e / ro+ bv+ 167 entrecruzamiento simple entre e y ro
entrecruzamiento es 26; en consecuencia, el número de proge-
e+ ro+/ bv 95 entrecruzamiento simple entre ro y bv
nie resultante de un entrecruzamiento simple entre e y ro es
360 - 26 = 334, que se dividirá por igual entre los dos fenoti- e ro / bv+ 95 entrecruzamiento simple entre ro y bv
pos con entrecruzamiento simple (e / ro+/ bv + y e+ I ro hv). e+ / ro / bv+ 13 doble entrecruzamiento
La distancia entre ro y bv es de 12 u.m. ; por co nsiguiente, la ro+ /
e / bv 13 doble entrecruzamiento
progenie resultante de la recombinación entre estos dos genes
es 0,12 x 1800;;:; 216. También en este caso, algunos de estos Total 1800

Sección 7.1 7. ¿ Cuál es la diferencia entre un mapa genético y un mapa

l. ¿Qué significa el término recombinación ? ¿Cuáles son dos
causas de recombinación?
Sección 7.2
2. En un cruzamiento de prueba para dos genes, ¿qué tipos de
gametos se producen con a) ligamiento co mpleto, b) segrega-
ción independiente y c) ligamiento incompleto?
3. ¿Qué efecto ejerce el entrecruzamiento sobre el ligamiento?
4. ¿Por qué la frecuencia de gametos recombinantes es siempre
la mitad de la frecuencia de recombinación?
5. ¿Cuál es la diferencia entre genes en configuración de
acoplruniento y genes en configuración de repulsión?
¿Cómo afecta la disposición de los genes ligados (acopla-
miento o repulsión) los resultados de un cruzamiento
genético?
6. ¿ Qué pruebas realizaría para determinar si dos genes están
ligados?
físico?
8. ¿Por qué las frecuencias de recombinación calculadas entre
pares de locus alejados subestiman las verdaderas distancias
genéticas entre los locus?
Sección 7.3
9. Explique cómo determina cuál de tres locus ligados es el
locus del medio utilizando el número de progenie de un
cn1zamiento de tres puntos.
10. ¿Qué nos dice la interferencia acerca del efecto un entrecru-
zamiento sobre otro?
Sección 7.4
11. ¿Qué es la puntuación lod y cómo se calcula?
12. Enumere algunos de los métodos para el mapeo físico de
genes y expliqué cómo se utilizan para determinar la posi-
ción de los genes en los cromosomas.
202 CAPITULO 7
Introducción
*13. En la introducción de este capítulo, se describió la búsque-
da de genes que determinan la calvicie de patrón masculino
en los seres humanos. En 191 6, Dorothy Osborn sugüió
que la calvicie de patrón masculino es un rasgo influido
por el sexo (véase cap. 5), que es dominante en los varo-
nes y recesivo en las mujeres. La investigación más
exhaustiva sugirió que la calvicie de patrón 1nasculino es
un rasgo recesivo li gado al cromoso1na X. ¿Esperaría
observar segregación independiente entre marcadores
genéticos del cromosoma X y la calvicie de patrón mascu-
lino si a) la calvicie de patrón masculino fu era influida por
el sexo y b) si la calvicie de patrón masculino fuera recesi-
va ligada al cromosoma X? Explique su respuesta.
Sección 7.2
14. En el caracol Cepaea nemoralis, un alelo autosómico que
determina una concha rayada (BB) es recesivo respecto del
alelo para concha no rayada (Bº). Genes de un locus dife-
rente determinan el color de fondo de la concha; en este ca-
so, an1arillo ( CY) es recesivo respecto de marrón ( CB~. Se
cruza un caracol amarillo, rayado, con un caracol marrón
sin rayas homocigótico. Luego, se cruza l.a generación F 1
con caracoles amarillos, rayados (un cruzamiento de pn1eba).
a. ¿Cuáles serán los resultados del cruzamiento de prueba
si los locus que controlan el rayado y el color están
ligados sin entrecruzamiento?
b. ¿ Cuáles serán los resultados del
cruzamiento de prueba si los
locus se segregan de manera
independiente?
c. ¿Cuáles serán los resultados del cruzamiento de prueba
si los locus están ligados y separados por 20 u.m.?
*15. En la mariposa del gusano de seda (Bombyx mori), los
ojos rojos (re) y las alas con franjas blancas (wb) son
codificados por dos alelos mutantes que son recesivos res-
pecto de aquellos que produce los rasgos de tipo silvestre
(re+ y wb+); estos dos genes se encuentran en el mismo
cromosoma. Se cruza una mariposa homocigótica para
ojos rojos y alas con franjas blancas con una mariposa
homocigótica para los rasgos de tipo silvestre. La genera-
ción F 1 tiene ojos normales y alas normales. Se practica
un cruzamiento de prueba entre la generación F 1 y mari-
posas que tienen ojos rojos y alas con franjas blancas. La
progenie de este cruza1niento de prueba es la siguiente:
ojos de tipo silvestre, alas de tipo silvestre 418
ojos rojos, alas de tipo silvestre 19
ojos de tipo silvestre, alas con franj as blancas 16
ojos rojos, alas con franjas blancas 426
a. ¿ Qué proporciones fenotípicas serían esperables si los
genes para ojos rojos y para alas con franjas blancas se
localizaran en cro1nosomas diferentes?
b. ¿Cuál es el porcentaje de recombinación entre los genes
para ojos rojos y aquellos para alas con franjas blancas?
*16. Una genetista descubre una mutación nueva en Drosophila
1nelanogaster que causa que las moscas tiemblen y se
sacudan. Le da a esta mutación la denomin ación de espás-
tica (sps) y decide que se debe a un gen autosómico rece-
sivo. Desea determinar si el gen que codifica espástica
está ligado con el gen para alas vestigia les (vg). Cru za una
mosca homocigótica para los rasgos espástica y vestigial
con una mosca homocigótica para los rasgos de tipo sil-
vestre, y después, utiliza a las he1nbras de la generación F 1
resultante en un cruzamiento de prueba. Obtiene las
siguientes moscas de este cruzamjento de prueba.
vg+ sps+ 230
vg sps 224
sps+
vg 97
vg+ sps 99
Total 650
¿Están ligados los genes que causan alas vestigiales y la
mutación espástica? Realice una prueba de Ji cuadrado de
independencia para determinar si los genes se han segre-
gado de manera independiente.
17. En los pepinos, las hojas en forma de corazón (hl) son
recesivas respecto de las hojas normales (H l) y tener
numerosas espinas en los frutos (ns) es recesivo respecto
de tener pocas espinas en los frutos (Ns). Los genes para
la forma de las hojas y el número de espinas están locali-
zados en el mis mo cromosoma; resultados de experin1en-
tos de mapeo indican que se encuentran separados por
32,6 u.m. Se cruza una planta de pepino que tiene bojas en
forma de corazón y numerosas espinas con una planta
homocigótica para hojas normales y pocas espinas. La
generación Fl se cruza con p lantas que tienen hojas en
forma de corazón y numerosas espinas. ¿Qué fenotipos y
proporciones fenotípicas se esperan en la progenie de este
cruzamiento?
18. En los tomates, la planta alta (D) es dominante sobre la
planta enana (d), y el fruto liso (P) es dominante sobre el
fruto pubescente (p), que está cubierto por una pelusa fina.
Un granjero tiene dos plantas altas y de tomates lisos, que
denominaremos planta A y planta B. Cruza las plantas A y
B con la misma planta enana de frutos pubescentes y
obtiene los siguientes números de progenie:
Progenie de
Planta A Planta B
DdPp 122 2
Ddpp 6 82
ddPp 4 82
ddpp 124 4
a. ¿ Cuáles son los genotipos de la planta A y la planta B?
b. ¿Están ligados los locus que determinan la altura y la
pubescencia de la planta? Si así fuera, ¿cuál es el por-
centaj e de recombinación entre ellos?
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 203

c. Explique por qué se producen diferentes proporciones 22. En los tomates, el rasgo para planta enana (d) es recesivo
de la progenie cuando se cruzan la planta A y la planta respecto del de planta alta (D ), y las hojas opacas (color
B con la misma planta enana de frutos pubescentes. verde claro) (op) son recesivas para hojas verdes (Op).
19. Los alelos A y a están en un locus que pertenece al mismo Los locus que determinan altura y color de hojas están
cromosoma que un locus con alelos By b. Se cruza Aa Bb ligados y separados por una distancia de 7 u.1n. Para cada
con aa bb y se produce la siguiente progenie: uno de los siguientes cruzamientos, determine los fe noti-
pos y proporciones de la progenie producida.
AaBb 5
Aa bb 45 D Op d op
a. X
aa Bb 45 d op d op
aa bb 5
D op d op
b. X
¿ Qué conclu sión se puede extraer sobre la disposición de d Op d op
los genes en los cromosomas del progenitor Aa Bb?
20. Daniel McDonald y Nancy Peer determinaron que los ojos D Op D Op
le:..,_,,,. moteados (un punto claro en el centro del oj o) en el gorgojo c. X

f.~'!: es causado por un gen ligado al cromosoma X (es) que es d op d op

recesivo respecto del alelo para ausencia de ojos moteados
(es+). Ellos realizaron una serie de cruzamientos de prueba D op D op
d. X
para detenninar la distancia entre el gen para ojos moteados D Op d Op
y en gen dominante Ugado aJ cromosoma X para el rasgo ra-
23. En las cucarachas alemanas, los ojos protuberantes (bu) son
yado (St), que actúa como un gen recesívo letal (es letal
recesivos respecto de los ojos normales (bu+), y las alas cur-
cuando es homocigótico en hembras o hemicigótico en ma- vas (cv) son recesivas respecto de las alas rectas (cv+).
chos). Se llevó a cabo el siguiente cruzamiento (D. J. McDo-
An1bos rasgos son codificados por genes autosó1nicos que
nald y N. J. Peer. 1961. Journal of H eredity 52:261-264).
están ligados. Una cucaracha tiene genotipo bu+ bu cv+ cv,
y los genes están en configuración de repulsión. ¿ Cuál de
es st+
X ----o
y
los siguientes conjuntos de genes se hallarán en los gametos
más comunes producidos por esta cucaracha.
a. bu+ cv+
es+ St b. bu cv
1630
es sr+ c. bu+ bu
es s,+ d. cv+ cv
1665
es sr+ e. bu cv+
es St Explique su respuesta.
935
es st+ 24. En Drosophila melanogaster, el cuerpo color ébano (e) y
es+ st+ los ojos rugosos (ro) son codificados por genes autosó1ni-
1005
es sr+ cos recesivos localizados en el cromoso1na 3, que están
sr+ separados por 20 u.in. El gen que codifica cerdas bifurca-
es 1661
y das (f) es recesivo ligado al cromosoma X y se segrega en
forma independiente de e y ro. Indique los fenotipos de la
es+ St+ progenie y sus proporciones esperadas cuando se realizan
1024
y un cruzamiento de prueba entre una hembra con cada uno
de los siguientes genotipos con un macho.
a. ¿ Cuál es la progenie recombinante y cuál la no recom-
binante? e+ ro+ ¡+
b. Calcule la frecuencia de recombinación entre es y St. a. -
c. ¿Se han perdido algunos genotipos potenciales en la pro- e ro f
genie del cruzamiento? De ser así, ¿c uáles y por qué? e+ ro ¡·+
*21. Aquí se muestran las tasas de recombinación entre tres b. -
e ro+ f
locus del maíz.
Locus Tasa de recombinación 25. Las abejas meliferas tienen una determinación del sexo
RyW2 17%
r::;" haplodiploide: las hembras son diploides y se desarrollan
º'º" º' a pa11ir de los óvulos fecundados , mientras que los
Ry L2 35% machos son haploides y se desarrollan a partir de óvulos
18% no fecundados. Otto Mackensen estudió las relaciones de
W2YL2
ligamiento entre ocho mutaciones de las abejas meliferas
¿ Cuál es el orden de los genes en el cromosoma? (0. Mackensen , 1958. Journal of Heredity 49:99-102). El
204 CAPITULO 7

siguiente cuadro presenta los resultados de dos de los cru- tancia entre los genes. Recuerde que estas tasas son esti-
zamientos de Mackensen, incluidas tres mutaciones recesi- maciones de las verdaderas tasas de recombinación y que
vas: cd (color del cuerpo cordobán), h (sin cerdas) y ch hay cierto error asociado con cada estimación . Un asteris-
(color verde amarillento). co al lado de una frecuencia de reco1nbinación indica q ue
esta es significativamente diferente del 50%.
Genotipo Fenotipos de la progenie
de la reina zángano (macho) Tasas de recombinación ( % ) entre siete locus de los guisantes de Linl

294 color cordobán, 236 sin cerdas,

Wl R s Ms e G
262 color cordobán y sin cerdas, D 2,1.* 39,3* 52,4 48,1. 53,1. 51,4 49}8
289 tipo silvestre Wl 38}0* 47,3 47,7 48fi 50,3 50}4
R 51,9 52,7 54}6 49,3 52,6
3131 sin cerdas, 3064 verde amarillento, s 26,9* 54,9 52,0 48}0
96 verde atnarillento y sin cerdas, 132 ½ 48,2 45.,3 50,4
tipo silvestre Ms 14J 7* 43,1.
e 52,0
a. Solo se presenta el genotipo de la reina. ¿Por qué no se
*S ignificativamente diferente de SOo/o.
necesita el genotipo del progenitor macho para mapear
estos genes? ¿Se requeriría el genotipo del progenitor
Sección 7.3
macho si examinára1n os la progenie fe1nenina en lugar
de la progenie masculina? *29. Raymond Popp estudió el ligamiento entre los genes para
b. Determine la progenie no recombinante y recombinante f:;._" ojo rosado (p), shaker-1 (sh-1, que causa comportamiento
para cada cruzamiento y calcule las distancias de mapa ., •.,°' circular, moviJnjentos bruscos de la cabeza y sordera) y
entre cd, h y ch. Dibuje un mapa de ligamiento que ilus- hemoglobina (Hb ) en ratones (R. A. Popp. 1962. Joumal
tre las disposiciones de ligamento entre estos tres genes. o.f Heredity 53:73-80). Realizó una serie de cruzamientos
26. Realice una prueba de Ji cuadrado de independencia para de prueba entre ratones heterocigóticos para ojos de color
los datos presentados en la figura 7-2 a fin de determinar rosa, shaker- 1 y hemoglobina 1 y 2, y ratones hornocigóti-
si los genes para el color de las flores y la forma del polen cos para ojos de color rosa, shaker- 1 y hemoglobina 2.
de los guisantes dulces se segregan de manera indepen-
P Sh- l Hb 1 p sh- l Hb 2
diente. Indique el valor de Ji cuadrado, los grados de li- ----X-----
bertad y la probabilidad asociada. ¿ Qué conclusión extrae- p sh-l Hb2 p sh-l Hb2
ría acerca de la segregación independiente de estos genes?
Se produjo la siguiente progenie.
*27. Se llevaron a cabo una serie de cruzamientos de dos pun-
tos entre siete locus (a, b, c, d, e, f y g), que produjeron
las siguientes frecuencias de recombinación. Realice el Genotipo de la progenie Número
mapeo de los siete locus y muestre sus grupos de liga- p sh- l Hb2
miento, el orden de los Jocus en cada grupo de ligamentos 274
p sh-1 Hb2
y las distancias entre los locus de cada grupo.
P Sh-1 Hb 1
Porcentaje de Porcentaje de 320
Locus recombinación ( % ) Locus recombinación ( % ) p sh-1 Hb 2
ayb 50 c yd 50 P sh- l Hb 2
ayc 50 cye 26 57
ayd 12 cyf 50 p sh-1 Hb2
aye 50 c yg 50 p Sh- 1 Hb 1
ayf 50 dye 50 45
ayg 4 dyf 50 p sh-1 Hb2
byc 10 dyg 8
byd 50 e yf 50 P Sh-1 Hb 2
6
bye 18 e yg 50 p sh-1 Hb 2
byf 50 fy g 50
byg 50 p sh-1 Hb 1
2
5
p sh-1 Hb
28. R. W. Allard y W. M. Clement determinaron las tasas de
f:;_' r~combinación para una serie de genes de los guisantes de p sh-1 Hb 2
2
o
º'DA'º' L1111a (R. W. Allard y W. M . Clernent. 1959. Journal of p sh- l Hb
Heredity 50:63-67). El siguiente cuadro enumera tasas de
recombinación por pares para ocho de los locus (D, WI, p sh-1 Hb 1
1
R, S, Ll' Ms, C y G) que mapearon. Sobre la base de estos p sh-1 Hb2
datos, dibuje una serie de mapas genéticos para los dife-
rentes grupos de ligamiento de los genes e indique la dis- Total 708
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 205

a. Determine el orden de estos genes en el cromosoma. mientos de prueba e indique cuál de los alelos está pre-
b. Calcule la distancia de mapa entre los genes. sente en cada cromosoma.
c. Determine el coeficiente de coincidencia y la interfe- 32. Las espinas finas (s), el fruto liso (tu) y el color uniforme
rencia entre estos genes. del fruto (u) son tres rasgos recesivos de los pepinos,
cuyos genes están ligados en el núsmo cromosoma. En un
30. El endospermo ceroso (wx), el endospermo encogido (sh)
cruza1niento de prueba, se utiliza una planta de pepino
y los almácigos de color amarillo ( v) son codificados por
heterocigótica para los tres rasgos, y se produce la
tres genes recesivos del maíz que están ligados en el cro- siguiente progenie a partir de este cruzamiento:
moson1a 5. Se cruza una planta de 1naíz ho1nocigótica para
los tres alelos recesivos con una planta de 1naíz homocigó-
tica para todos los alelos dominantes. Luego, se realizan
s u Tu 2
s u Tu 70
un cruzamiento de prueba de tres puntos entre la genera-
ción F 1 resultante y una planta homocigótica para los ale-
s u Tu 21
s u tu 4
los recesivos. La progenie del cruzamiento de prueba es la
siguiente:
s u tu 82
s u tu 21
wx sh V 87
s u Tu 13
Wx Sh V 94
s u tu 17
Wx Sh V 3.479 Total 230
wx sh V 3.478
Wx sh V 1.515 a. Determine el orden de estos genes en el cromosoma.
wx Sh V 1.531 b. Calcule las distancias de mapa entre los genes.
wx Sh V 292
Wx sh V 280 c. Determine el coeficiente de coincidencia y la interferen-
cia entre estos genes.
Total 10.756
d. Enumere los genes hallados en cada cromosoma de los
progenitores utilizados en el cruzainiento de prueba.
a. Determine el orden de estos genes en el cromosoma.
33. En Drosophila melanogaster, el cuerpo negro (b) es rece-
b. Calcule las distancias de mapa entre los genes. sivo respecto del cuerpo gris (b+), los ojos color violeta
c. Determine el coeficiente de coincidencia y la interfe- (pr) son recesivos respecto de los ojos rojos (pr+) y las
rencia entre estos genes. alas vestigiales son recesivas respecto de las alas normales
31. Priscilla Lane y Margaret Green estudiaron las relaciones (vg+). Los locus que codifican estos rasgos están ligados,
p:;_• de ligamiento de tres genes que afectan el color del pelaje con las siguientes distancias de mapa:
º'º"º' en los ratones: mahogany (mg), agouti (a) y ragged (Ra).
Realizaron una serie de cruzamientos de tres puntos en los b ~ ~
que aparearon ratones heterocigóticos en los tres locus con
ratones homocigóticos para los alelos recesivos de estos 1 - 6 - 1 - - 13 - -.I
locus (P W. Lane y M. C. Green. 1960. Journal of
Heredity 51:228-230). El siguiente cuadro enumera los La interferencia entre estos genes es de 0,5. Se cruza una
resultados de los cruzamientos de prueba. mosca de cuerpo negro, ojos violetas y alas vestigiales con
una mosca homocigótica de cuerpo gris, ojos rojos y alas
Fenotipo Número normales. Después, se cruza la progenie femenina con
machos de cuerpo negro, ojos violetas y alas vestigiales.
a Rg + 1 Si se produce una progenie de 1000 moscas a pai·tir de
+ + mg 1 este cruzamiento de prueba, ¿cuáles serán los fenotipos y
a + + 15 las proporciones de la progenie?
+ Rg mg 9
34. Los ojos de color sepia, las cerdas sin espinas y el tórax a
+ + + 16
franjas son tres n1utaciones recesivas de Drosop hila halla-
a Rg mg 36
das en el cromosoma 3. Un estudiante de genética cruza
a + mg 76
una mosca homocigótica para ojos seis, cerdas sin espinas
+ Rg + 69
y tórax a franjas con una mosca homocigótica para los
Total 213 rasgos de tipo silvestre: ojos roj os, cerdas normales y
tórax homogéneo. Luego, se realiza un cruzanúento de
Nota: + representa un alelo de tipo silvestre.
prueba entre hembras de la progenie con machos que tie-
nen ojos de color sepia, cerdas sin espinas y tórax a fran-
a. Determ ine el orden de los locus que codifican m.a ho- jas. Asuma que la interferencia entre estos genes es de 0,2
gany, agouti y ragged en el cromosoma, las distancias y que se produce una progenie de 400 moscas a partir del
de mapa entre ellos y la interferencia y el coeficiente cruzamiento de prueba. Sobre la base de las distancias de
de coincidencia para estos genes. mapa presentadas en la figura 7-15, anticipe los genotipos
b. Dibuje un esquema de los dos cromosomas de los rato- y las proporciones de la progenie resultante del cruza-
nes tripJemente heterocigóticos usados en los cruza- miento de prueba.
206 CAPITULO 7

35. Abajo se muestran ocho secuencias de DNA de diferentes *38. Se creó un panel de líneas celulares a partir de fusiones de
individuos. células somáticas de hun1ano-ratón. Se examinó cada línea
para detectar la presencia de cromoson1as humanos y la
Posición de los nucleótidos producción de tres enzimas. Se obtuvieron los siguientes
resultados.
1 5 10 15
Secuencia 1 ... .T C T G G A T C A T CA CA T .. .
Secuencia 2 .... A C A G C A T C A T T A C G T .. . Enzima Cromosomas humanos
Línea
Secuencia 3 .... T C A G G A T C A T T A C A T .. . celular 1 2 3 4 8 9 12 15 16 17 22 X
Secuencia 4 ....T CA G G A T CA T TAC A T .. . A + - + - - + - + + - +
Secuencia 5 .... A C A G C A T C A T T A C G T .. .
B + - - - - + - + +
Secuencia 6 ....T C T G G A T CA T CACA T .. .
c + + + - + +
Secuencia 7 .... T CA G G A T CA T TA CA T .. .
D + + + + - - + - +
Secuencia 8 .... A C A G C A T C A T TA C G T .. .

a. Indique las posiciones nucleotídicas de todos los poli-

morfismos de nucleótido único (SNP; posiciones de Sobre la base de estos resultados, indique la localización
nucleótidos en las que los individuos varían en la base cron1osómica de la enzitn a 1, la enzima 2 y la enzima 3.
presente) de estas secuencias. *39. Se ban mapeado las localizaciones de seis deleciones del
cro1noso ma de Drosophila, como se muestra en el siguien-
b. ¿ Cuántos haplotipos diferentes (conjuntos de variantes
ligadas) se observan en estas ocho secuencias? te m apa de deleción. Se sabe que las mutaciones recesivas
a, b, e, d, e y f están localizadas en la misma región que
c. Mencione el haploti.po de cada secuencia enumerando las deleciones, pero no se conoce el orden de las mutacio-
las bases específicas en cada posición variable de ese nes en el cromosoma.
haplotipo particular. (Pista: véase la fig. 20-8).
*36. Un grupo de genetistas está interesado en identificar genes
que pueden desempeñar un papel en la susceptibilidad al Cron1osoma
asma. Estudian la h erencia de marcadores genéticos en Deleción 1 _ _ _ _ _ __
una serie de familias que tienen dos o más hij os asmáti-
cos. Detectan una asociación entre la presencia o la ausen- Deleción 2 - -
cia de asma y un marcador genético del brazo corto del Deleción 3 - - - - - - - - - -
cromosoma 20 y calculan una puntuación lod de 2 para Deleción 4 - - - - - -
esta asociación. ¿Qué indica esta puntuación lod acerca de
los genes que pueden influir en el asma? Deleción 5 - - -
Deleción 6 - - - - - - - - -
Sección 7.4
37. Se creó un panel de líneas celulares a partir de fusiones de Cuando se cr uzan 1noscas homocigóticas para las 1nuta-
células so1náticas de humano-ratón. Se exa1ninó cada línea ciones recesivas con moscas homocigóticas para las dele-
para detectar la presencia de cromosomas humanos y la ciones, se obtienen los siguientes resultados, en el que
producción de una enzima. Se obtuvieron los siguientes "n1" representa un fenotipo mutante y un signo (+) repre-
resu ltados: senta el tipo silvestre. Sobre la base de estos datos, deter-
min e el orden relativo de los siete genes mutantes del
Cromosomas humanos cromoso1na:
Línea
celular Enzima 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 17 22
Mutaciones
A + - - - + - - - - - +
Deleción a b e d e f
B + + + - - - - + - + +
1 m + m + + m
c + - - - + - - - +
D - - - + - - - - 2 1n + + + + +
E + + - - - - - - + - + + 3 + m m m m +
4 + + m m m +
5 + + + m m +
Sobre la base de estos resultados, ¿qué cromosoma contie-
ne el gen que codifica la enzima? 6 + m + m + +
 Li9amiento, recombinación y mapeo de genes eucariontes 207

PREGUNTAS DE DESAFÍO

Sección 7.5 a. Calcule la frecuencia de recombinación entre los locus

Trf y d utilizando los datos combinados de todos los cru-
40. La transferrina es una proteína sanguínea codificada por el zamientos.
k:'Á'"" locus de transferrina (Trf). En ratones caseros, los dos alelos b. ¿ Qué cruzamientos representan recombinación en la for-
L~~ de este locus (Tr.f y Tr/') son codominantes y codifican tres mación de gametos masculinos y qué cruzamientos
tipos de transferrina: representan recombinación en la formación de gametos
femeninos?
Genotipo Fenotipo
c. Sobre la base de su respuesta a la parte b, calcule la fre-
Tr.f/Tr.f Trf-a cuencia de recombinación entre progenitores macho y
Tr.f/T1jb Trf-ab progenitores hembra por separado.
Tr/'!Tr/' Trf-b d. ¿Son iguales las tasas de recombinación en machos y
hembras? De no ser así, ¿qué podría causar la dife-
El locus de dilución, hall ado en el mis mo cro.m osoma, rencia?
determina si el color de un ratón está diluido o es intenso;
un alelo para dilución (d) es recesivo respecto del alelo para
color intenso (d+):

Genotipo Fenotipo
d+ d+ a+(color intenso)
d+d ct+ (color intenso)
dd d (dilución) Ratón con el rasgo de dilución
(Montoliu L, Oetting WS, Bennett
DC . Color genes. 3/2010. European
Donald Shreffer llevó a cabo una serie de cruzamientos de Society for Pigment Cell Research.
prueba para determinar la distancia de mapa entre el locus [http:/www.espcr.org/micemut]
de transferrina y el locus de dilución (D. C. Shreffer. 1963. 03/2013).
Journal of Heredity 54:127-129). El siguiente cuadro pre-
sente una serie de cruzamientos llevados a cabo por
Shreffer y la progenie resultante de estos cruzamientos.

Fenotipos de la progenie

d d
Cruzamiento Trf-ab Trf-b Trf-ab Trf-b Total

d+ Tr¡a d Tr,f
1 X 32 3 6 21 62
d T,fb d T,:F

d Trfb d+ Tr¡a
2 X 16 o 2 20 38
d T,fb d nf'
d+ T,ta d T,:F
3 X 35 9 4 30 78
d T,fb d Tr/'

4
d T,fb
X
a+ rrr 21 3 2 19 45
d T,fb d Tr/'

d+ T,:F d Tr.f
5 X 8 29 22 5 64
d T,.fª d T,:F

d T,:fº ct+r,r
6 X 4 14 11 o 29
d T,fb d Tif
 8
Variación cromosómica

Construcción de una mejor banana

Las bananas y los plátanos (denominados colectiva-
mente bananas) son la fruta más popular del mundo.
En muchos países en desarrollo, son una fuente de
alimento de crucial ünportancia, que apo1ta al1nidón
y calorías a cientos de millones de personas. En los
países industrializados, se consumen más bananas
que cualquier otra fruta; por ejemplo, los estadouni-
denses consumen tantos kilos de bananas como de
manzanas y naranjas combü1adas. En todo el mundo,
se producen n1ás de 100 millones de toneladas de
bananas por año.
No hay ninguna diferencia biológica concreta en tre
bananas y plátanos, pero el término banana se refiere,
en general, a las fom1as más dulces que se co1nen sin
cocinar, mientras que el término plátano se aplica a
frutas que se pelan cuando no están maduras y se
cocinan antes de comerlas. Las bananas cultivadas
difieren de sus parientes silvestres por no tener semi-
llas, lo que las torna más comestibles pero dificulta
su reproducción. Los granjeros propagan las bananas
en forma vegetativa cortando partes de plantas exis-
tentes; así, logran que crezcan plantas nuevas. Como
Muchas variedades de bananas tienen múltiples juegos de cromosomas. la propagación de las bananas es vegetativa, muchas
(Krankie AngeVAlamy). plantas de bananas cultivadas son genética,nente
idénticas.
Desde el punto de vista genético, las bananas son
interesantes porque muchas variedades tienen múlti-
ples juegos de cromosomas. La 1nayoría de los organismos eucariontes de la naturaleza con
diploides (2n), con dos juegos de cron1osomas. Otros, como los bongos, son haploides (n),
con un único juego de cromoson1as. Las bananas cultivadas suelen ser poliploides, con más de
dos juegos de cromosomas (3 n, 411 o más alto). La mayoría de las especies de bananas cu ltiva-
das se crearon realizando cruzamientos intra e interespecies de dos especies diploides: Musa
acu,ninata (genoma = AA) y Musa balbisiana (genoma BB). Muchas bananas cultivadas son
triploides, con tres juegos de cromosomas, que consisten en AAA, AAB o ABB, y algunas tie-
nen incluso cuatro juegos de cromosomas (tetraploides): AAAA, AAAB, AABB o ABBB.
Pese a su importancia mundial como alimento, las bananas cultivadas modernas se encuen-
tran en problemas. La especie vendida con mayor frecuencia en las tiendas de comestibles
(Cavendish) está amenazada por enfermedades y pestes. La predecesora de Cavendish, deno-
minada Gros Michel (Big Mike), fue la banana de elección hasta su exterminio en las décadas
de 1950 y 1960. Como la propagación vegetativa produce plantas genéticamente idénticas, las
bananas cultivadas m uestran una particular vulnerabilidad al ataque por patógenos y pestes.
Para ayudar a desarrollar una mejor banana (más resistente a enfermedades y pestes, así
como más nullitiva) los genetistas lanzaron u.n proyecto internacional para secuenciar el geno-
ma de la banana y obtuvieron un bon·ador de la secuencia en 20 12. Esta investigación demos-

209
210 CAPITULO 8

tró que el genoma de la banana está formado por más de 500 millones de pares de bases (pb) de DNA
y que contiene 36 500 genes codificadores de proteínas. Utilizando esta secuencia del genoma, los
científicos ya han identificado vatios genes que desempeñan un papel en la resistencia a micosis y
están explorando maneras de producir y genomanipulai· mejores bananas.

L a mayoría de las especies tienen un número característico de

cromosomas, cada uno con un tamaño y una estructura dis-
tintos, y todos los tejidos de un organismo (excepto los gametos)
ma (véase fig. 2-7). Los cromosomas se clasifican en cuatro tipos
básicos:

suelen tener el mi smo conjunto de cromosomas. No obstante, de
hecho aparecen en forma periódica variaciones del número de
cromosomas, como los juegos extra observados en las bananas.
También pueden apai·ecer variaciones en la estructura de los cro-
mosomas: cro1nosomas individuales pueden perder o ganar par-
tes, y puede n1odificai·se el orden de los genes dentro de un
cromosoma. Estas variaciones del número y la estructura de los
cromoso1nas se denominan .mutaciones cromosómicas, y suelen
desempeñar un papel importante en la agricultura y en la evolución.
Este capítulo comienza con un breve repaso de los conceptos
básicos de la estructura de los cromosomas, que aprendimos en el
capítulo 2. Luego, se consideran los diferentes tipos de mutacio-
nes cromosó1nicas, sus definiciones, cai·acterístícas, efectos feno-
típicos e influencia sobre la evolución.
8.1 Las mutaciones cromosómicas comprenden
reordenamientos, aneuploidías y poliploidías
Antes de considerar los diferentes tipos de mutaciones cro1nosó-
micas, sus efectos y la manera en que se originan, repasaremos
los conceptos básicos sobre la estructura de los cromosomas.
Morfología de los cromosomas
Cada cromosoma funcional tiene un centrómero, al que se unen
las fibras del huso, y dos telómeros, que estabilizan el cromoso-
;,.. t•·
1!_ -ó~- P,t'
~ : ,,
t:~' '1,..
-
\· '
- -
-
' ..,_
'I
'
l. Metacéntrico. El centrómero está localizado aproximadamen-
te en el medio, de manera que el cromosoma tiene dos brazos
de igual longitud.
2. Submetacéntrico. El centrómero está desplazado hacia un
extre1no, lo que crea un brazo largo y uno corto. (En los cro-
1noso1nas humanos, eJ brazo corto se designa con la letra p, y
el brazo largo, con la letra q) .
3. Acrocéntrico. El centrómero está cerca de un extremo, lo que
produce un brazo lai·go y un botón, o satélite, en el otro extre-
mo.
4. Telocéntrico. El centrómero está en el extremo o muy cerca
del extremo del cromosoma (véase fig. 2-8).
El juego completo de cromosomas de un organjsmo se denomi-
na cariotipo y por lo general se presenta como una foto de los cro-
moson1as en metafase alineados en orden descendente de tamaño
(fig. 8-1). Los cariotipos se preparan a partir de células que se
dividen en forma activa, como leucocitos, células de médula ósea
o células de tejidos n1eristemáticos de plantas. Después del trata-
miento con un agente químico (p. ej., coJchicina) que les impide
ingresar en la anafase, las células se preservan químicamente, se
extienden sobre un portaobjetos, se tiñen y se fotografían. Luego,
se amplía la foto grafía y los cromosomas individuales se reco1tan
y se ordenan en un cariotipo. Para los cromoso1nas humanos , los
cariotipos a menudo se preparan de n1anera sistemática con apa-
ratos automatizados, que examinan un portaobjetos utilizando
una cámara de video unida a un microscopio para buscar
extendidos cromosómicos. Cuando se ha localizado uno,
la cámara toma una foto de los cromosomas, se digitaliza
la imagen, y una computadora clasifica y ordena electró-
nicamente los cron1osomas.

!\ ~ ~ J\-'
j \~ i~ La preparación y las técnicas de tinción ayudan a dis-
tinguir entre cromosomas de tamaño y forma similares.
2 )
• 5
Por ejemplo, la preparación y tinción especial de cromo-
r
" .. _'. •• t~ -"
' ,.J - ~~ -
¡il ,.
,.
- .• ,'_
somas con un colorante denominado Giemsa revela ban-
~~
~ ,~-
e i, -$~- ,J - ~~-
J\ das G, que distinguen zonas de DNA ricas en pai·es de
- 6 8 9
'º
,, 17

- ••- ,.. • •
_,,_ ~5-
e;
----
-~~-
◄- ..~►-
13 14 15 16 ,, 1a

-- ~-
-•.. ...·', _ - .....
A• - - ili -
- 1-
Figura 8-1 . El cariotipo humano está formado por 46 cro-

~• '
;¡ ;o mosomas. En este caso, se muestra el cariotípo de un varón;
19 20 21 22 y
el cariotipo de una mujer tiene dos cromosomas X.
(ISM/Phototake - Todos los derechos reservados).
 Variación cromosómica 211

(a) (b) Figura 8-2. El bandeo cromosómico es revelado por técni-

cas de tinción especiales. a) Bandeo G. b) Bandeo Q. e)
Bandeo C. d) Bandeo R. (Parte a: Leonard Lessin/Science
Source. Partes by e: University of Washington Pathology
Department, http://pathology.washington.edu. Parte d: Dr. Ram
Verma/Phototake) .

(e) (d)

Tipos de mutaciones cromosómicas

bases adenina-timina (A-T) (fig. 8-2a) (véase cap. 10). La tinción
de los cromosomas con mostaza de quinacrina y su visualización
bajo luz ultravioleta revela las bandas Q (fig. 8-2b); la variación
del brillo de las bandas Q se debe a las diferencias de las canti-
dades relativas de pares de bases citosina-guanina (C-G) y adeni-
na-tilnina. Otras técnicas revelan bandas C (fig. 8-2c), que son
regiones de DNA ocupadas por heterocron1atina centromérica, y
bandas R (fig. 8-2d), ricas en pares de bases citosina-guanina.
L as mutaciones cro1nosónucas pueden agruparse en tres
categorías básicas: reordena1nientos cromosómicos,
aneuploidías y poliploidías (fig. 8-3). Los reordenamientos cro-
mosómicos alteran la estructura de los cromosomas; por ejemplo,
se podría duplicar, eliminar o invertir un segmento de un cromo-
soma. E n la aneuploidía, hay alteración del número de cromoso-
mas: se agregan o se elilninan uno o más cromosomas individua-
les. En la poliploidía, se agregan uno o más juegos completos de
cron1osomas. Un poliploide es un organis1no que tiene más de dos
j uegos de cromosomas (3n, 4n, 5n o más).

-- •• --
A

A
B

B
-
C

-
C
D

D
E

--.·======------========
----------~

-A
•
B

-- --
-----•~-----
e D E e D E
-----•--------
-----•------
-----•------
-----• ------
-----•------
-----•------
====·
- -• -==================:::
---------~ ====·==================:::
- -• ~ - - - - - - - - - ~ ====· =================::::
--•----------~
--•~---------~
Reordenamiento cromosómico Aneuploidía Poliploidía
(duplicación ) (trisomía) (Autotriploide)
2n = 6 2n + 1 = 7 3n = 9

Figura 8-3. Las mutaciones cromosómicas consisten en reordenamientos, aneuploidías y poliploidías.

Las duplicaciones, las trisomías y la autotriploidías son ejemplos de cada categoría de mutación.
212 CAPITULO 8

8.2 Los reordenamientos cromosómicos
modifican la estructura de los cromosomas
Los reordenamientos cromosómicos son mutaciones que cam-
bian la e structura de cro1nosomas individuales. Los cuatro tipos
básicos de reordenruniento son duplicaciones, deleciones, inver-
siones y translocaciones (fig. 8-4). Muchos de estos reordena-
mientos cromosómicos se originan cuando se producen roturas
bicatenarias en las moléculas de DNA halladas dentro de un cro-
mosoma. Las roturas bicatenarias del DNA suelen provocar muer-
te celular, de manera que los organismos han desan·ollado meca-
ni smos complejos para reparar las roturas volviendo a conectar
los extremos rotos del DNA (véase cap. 18). Si estos vuelven a
unirse en forma correcta, se restaura el cromosoma original, y no
se produce ningún reordenamiento cromosómico. Sin embargo, a
veces se conectan los extremos inco1Tectos, lo que provoca un
reordenamiento cromosó1nico. A simismo, los reordenamientos
cromosómicos pueden aparecer por errores de entrecruza1niento o
cuando se produce e ntrecruzamiento entre secuencias repetidas
deDNA.
Duplicaciones
Una duplicación cromosómica es una mutación en la que parte
del cron1osoma se ha duplicado (véase fig. 8-4a). Considere un
cromosoma con segme ntos AB•CDEFG, en el que • representa el
centrómero. Una duplicación podría incluir los segmentos EF, lo
que daría origen a un cromosoma con segmentos AB • CDEFEFG.
E ste tipo de duplicación, en la que la región duplicada es inme-
diata1nente adyacente al segmento original, se denomina duplica-
ción en tándem . Si el segmento duplicado está localizado a cierta
distancia del segmento o riginal , ya sea en e l mis mo cromosoma o
en uno diferente, el reordenamiento cromosómico se denomina
duplicación desplazada. Un ejemplo de duplicación desplazada
sería AB • CDEFGEF. Una duplicación puede tener la misma
orientación de la duplicación original, como en los dos ejemplos
precedentes, o estar invertida: AB• CDEFFEG. Cuando una dupli-
cació n está invertida, se la deno1nina duplicación inversa.
EFECTOS DE LAS DUPLICACIONES CROMOSÓMICAS Un individuo ho-
mocigótico para una duplicación la presenta en ambos cromoso-
mas homólogos, mientras que un individuo heterocigótico para
una duplicación tiene un cromosoma nor1nal y un cromosom a con
la duplicación. En los heterocigotos (fig. 8-Sa), los problemas
surgen e n el apareamjento de los cromosomas durante la profase
I d e la meiosis, porque los dos cromosomas no son homólogos e n
toda su longitud. El apareamiento y la sinapsis de regiones homó-
logas exigen que uno o ambos cromosomas formen un bucle y se
retuerzan para p ermitir la alineación d e estas regiones (fig. 8-Sb) .
Una manera de detectar duplicaciones es la aparición de esta
caracte1istica estructura en buc le durante la meiosis .
Las duplicaciones p ueden ejercer efectos importantes sobre el
fenotipo. En las moscas de la fruta, por ejemplo , una mosca que
presenta una m utación Bar tiene un número reducido de facetas
en el ojo, lo q ue lo vuelve más pequeño y en forma de ban·a en
lugar de ovalado (fig. 8-6). La mutación Bar se debe a una peque-
ña duplicación del cromosoma X que se hereda como un rasgo
do minante incompleto Ligado al crom osoma X: las moscas hem-
bra heterocigóticas tienen ojos algo más pequeños (el número de
facetas es reducido; véase fig. 8-6b), mientras que en las moscas
hembra homocigóticas y macho hemicigóticos hay una gran
reducción del nún1ero de facetas (véase fig. 8-6c). En ocasiones,
una mosca tiene tres copias de la d uplicación Bar en su cro1noso-

(a) Duplicación (c) Inversión

c
•
c A B D E F G

•
A B
•
Cromosoma original • • • ~•
D E F

'-----y---'
G

una duplicación cromosómica,

• • •
b •
fEn una inversión cro mosómica, un 1
se duplica un segmento del ~ ~ segmento del cromosoma gira
cromosoma.
~
180°. j
c :¡ a
• • • • •
A B 3 G
c
• • • •
A B D E F F G
•
Cromosoma reordenado

(d) Translocación
(b) Deleción

•
A B c
• • • •
D E F G . . -. . . .
A B e o __,E F

'---y-------)
G

~
'----y--)
En una deleción cromosómica,
se elimina un segmento del
M
------~~ ~----------,
N O P Q R S
.
En una translocación, un
cromosoma. ~ segmento de un cromosoma
e
XG --==. se desplaza de un cromo-
• • •
A B D
• soma a un cromosoma no
homólogo (como se muestra

•
A B
•
e
~ ■º ■■R ■ ¡
aquí) o a otro lugar del
mismo cromosoma (no

----· .
Figura 8-4. Los cuatro tipos básicos de reordenamientos cromosó-
G mostrado).

••
M N O P E F
micos son duplicaciones, deleciones, inversiones y translocaciones.
 Variación cromosómica 213

(a}
Cromosoma normal (a)
.. • Regi ón Bar

-- A B c

-- -- -- --
o E F G

Un cromosoma tiene
Hembra de tipo
silvestre
B+B+ -
luna dupl icación (E y F). (b)
Cromosoma con
duplicación
~
V Hembra Bar
---'--
------· - - ·
- . - - -- -- -- --
heterocigóti ca
A B C O E F G
s+B

_______
- L......JL__,JJi.....-~.....J- __,J,_ _ -

1 (e)
Alineación en la
, ...,..,
Hembra Bar
p rof ase I de la m eiosis homocigótica
B -------·
(b)

- A B c

--- E F G (d)
Hembra doble Bar
_______ ..,..,

-
-
~

I.-/Jl...-1--a"' _..__,_ ........~ -

~-
- -- .,,.
O E
CIIII
F
-
G
heterocigótica
B+BD
------·--
E
~__.., _A_
Figura 8-6. El fenotipo Bar de la Drosophila melanogaster se debe a
una duplicación ligada al cromosoma X. a) Las moscas de la fruta de
tipo silvestre tienen ojos de tamaño normal. b) Las moscas heterocigóticas y
c) homocigóticas para la mutación Bar tienen ojos en forma de barra más
La región EF duplicada debe formar un bucle para permitir la
alineación de las secuencias homólogas de los cromosomas. pequeños, d) las moscas con doble Bar tienen t res copias de la duplicación
y ojos en forma de barra mucho más pequeños.

Figura 8-5. En un individuo heterocigótico para una duplicación, el

cromosoma duplicado forma un bucle durante el apareamiento en la célula se relaciona directamente con el número de copias de su
profase l. gen correspondiente: un individuo con tres copias funcionales de
un gene suele producir 1,5 veces más proteína codificada por ese
gen que la que produce un individuo con dos copias. Como los
ma X ; en las moscas que presentan estas mutaciones, que se de- procesos de desarrollo requieren la interacción de muchas proteí-
nominan doble Bar, el número de facetas es extremadamente re- nas, con frecuencia dependen fundamentalmente de la dosis géni-
ducido (véase fig. 8-6d). ca correcta. Si aumenta la cantidad de una proteína mientras las
A menudo, las duplicaciones y las deleciones se originan por cantidades de otras se mantienen constantes, puede haber proble-
entrecruzamiento desigual, en el que segmentos duplicados de los mas (fig. 8-8). Las duplicaciones p ueden tener consecuencias gra-
cromoso1nas se alinean 1nal durante el proceso. Con frecuencia, el ves cuando el equilibrio preciso de un producto génico es fLLnda-
entrecruzamiento desigual es la causa del daltonismo en los seres mentaJ para la función celular (cuadro 8-1).
humanos. Los genes de opsina roja y verde, que se encuentran en
el cromosoma X y son idénticos en el 98% de su secuencia de
Gen de Gen de
DNA, afectan la percepción del color. La mayoría de las personas ops1na ops1na
con visión norn1al de los colores tiene un gen de opsina roja y un Los cromosomas no roja ve rde
gen de opsina verde (aunque algunas personas tienen más de una se alinean en forma
copia de cada uno). En ocasiones, dos cromosomas X apareados correcta, lo que
de una mujer no se ali nean de manera co1Tecta en la profase I, y determina entrecru-
zamiento desigual.
se produce entrecruzamiento desigual. El entrecruzamiento desi-
gual produce un cromosoma con un gen de opsina extra y un cro-
mosoma al que le falta un gen de opsina (fig. 8-7; véase también Entrecruzamiento
l desigual
fig. 18-14). Cuando un varón hereda el cromosoma que carece de Un cromosoma
uno de los genes de opsina, presenta daltonismo. resultante tiene dos
genes de opsina verde
(una duplicación) ...
DOSIS GÉNICA DESEQUILIBRADA ¿Cómo modifica el fenotipo una
duplicación cromosómica? En realidad, las duplicaciones no alte-
... y el otro cromosoma
ran las secuencias genéticas, y no se pierde información genética;
no tiene ningún gen de
el único cambio es la presencia de copias adicionales de secuen- opsina verde (una
cias normales. No se conoce bien la respuesta a esta pregunta, deleción).
pero es .muy probable que los efectos se deban a desequilibrios de
las cantidades de productos génicos (dosis génica anormal). A Figura 8-7. El entrecruzamiento desigual produce duplicaciones y
1n enudo, la cantidad de una proteína particular sintetizada por una deleciones.
214 CAPITULO 8

os procesos e o sue en requerir a interacción e secuencias de DNA en un cromosoma (véase cap. 20). Estas téc-
muchos enes. nicas revelan que alrededor del 4% del genoma humano consiste
en duplicaciones segmentarias. En el genoma humano, el tamaño
A B e
promedio de las duplicaciones segmentarias es de 15 000 pb.
Cromosoma
de tipo silvestre
¡ ¡ ¡ IMPORTANCIA DE LAS DUPLICACIONES EN LA EVOLUCIÓN Durante
toda la evolución de 1nucbos organismos eucariontes, ha sido fTe-
Expresión
. .
gen1ca • • cuente la aparición de duplicaciones. Las duplicaciones cro1nosó-
micas representan una manera de desarrollar nuevos genes. En
Interacción de muchos casos, las copias existentes de un gen no tienen la liber-
productos génicos tad de variar, porque codifican un producto que es esencial para
el desarrollo o la función. Sin embargo, después de que un cro-
f1EI desarrollo puede ser
afectado por las cantidades
n1oso1na presenta una duplicación, hay copias extra de genes
relativas de los productos dentro de la región duplicada. La copia original puede proveer la
énicos . función esencial, mientras que una copia extra de la duplicación
puede sufrir una mutación y cambiar. Durante la evolución, la
copia extra puede adquirir mutaciones suficientes para asumir una
nueva función que beneficia al organismo. Por ejemplo, los seres
hun1anos tienen una serie de genes que codifican diferentes cade-
Embrión nas de globina, algunas de las cuales funcionan como transporta-
normal doras de oxígeno durante las etapas adultas, y otras funcionan
Ólas duplicaciones y otras mutaciones cromosómicas - durante el desarrollo embrionario y fetal. Todos estos genes de
j producen copias extra de algunos genes, pero no de
l.!2dos .. .
globina surgieron de un gen original ancestral que presentó una
I se1ie de duplicaciones.

Cromosoma
mutante -¡
' A
•
B

i ¡ ¡
8 e '
CONCEPTOS
Expresión
génica • • • Una duplicación cromosómica es una mutación que duplica parte de
un cromosoma. En individuos heterocigóticos pa ra una duplicación
Interacción de cromosómica, la región duplicada del cromosoma forma un bucle
productos génicos cuando se aparean los cromosomas homólogos en la profase I de la
meiosis. A menudo, las duplicaciones tienen efectos importantes
• .. .lo que altera las cantidades sobre el fenotipo, quizá por modificar la dosis génica. Las duplicacio-
••• relativas (dosis) de los
productos que interactúan.
nes segmentarias son frecuentes dentro del genoma humano y han
desempeñado un papel importante en la evolución de muchos euca-
riontes.

-;
.•... ~~~
......
--....-,;;;:~
......
•
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1

Embrión Desarrollo Las duplicaciones cromosómicas suelen causar fenotipos anormales

anormal
_A
Si la cantidad de un produce aumenta pero las cantidades de otros
productos permanecen constantes, a menudo se producen
roblemas de desarrollo.
Figura 8-8. El desequilibrio de la dosis génica provoca anormalidades
del desarrollo.
DUPLICACIONES SEGMENTARIAS El genoma humano contiene nu-
merosas secuencias duplicadas denominadas duplicaciones seg-
mentarias, definidas como duplicaciones mayores de 1000 pares
de bases (1000 pb) de longitud. En la mayoría de las duplicacio-
nes segmentarias, las dos copias se localizan en el misn10 cromo-
soma (una duplicación intracromosómica), pero en otras las dos
copias se localizan en cromosomas diferentes (una duplicación
intercromosómica). Se han detectado numerosas duplicaciones
segmentarías 111ediante técnicas moleculares que examinan
porque
a. los procesos de desarrollo dependen de las cantidades relativas de
proteínas codificadas por diferentes genes.
b. las copias extra de los genes dentro de la región duplicada no se
aparean en la meiosis.
c. el cromosoma tiene mayor probabilidad de romperse cuando
forma un bucle en la meiosis.
d. se debe replica r el DNA extra, lo que enlentece la división celular.
Deleciones
Un segundo tipo de reordenamiento cromosómico consiste en una
deleción cromosómica: la pérdida de un segmento de cromoso-
ma (véase fig. 8-4b). Un cromosoma con segmentos AB• CDEFG
que presenta una deleción del segmento EF generaría un cromo-
soma mutado AB• CDG.
 Variación cromosómica 215

Cuadro 8-1 Efectos de algunos reordenamientos cromosómicos humanos

Tipo de
reordenamiento Cromosoma Trastorno Síntomas

Duplicación 4, brazo corto Cabeza pequeña, cuello corto, línea de implantación pilosa baja,
retraso del desarrollo e intelectual

Dup licación 4, brazo largo Cabeza pequeña, frente inclinada, anomalías de las manos

Duplicación 7, brazo largo Retraso del desarrollo, cabeza asimétrica, cuero cabelludo crespo,
nariz pequeña, orejas de implantación baja

Duplicación 9, brazo corto Cara característica, discapacidad intelectual variable, frente alta y
ancha, anomalías de las manos

Deleción 5, brazo corto Síndrome del maullido de gato Cabeza pequeña, lla nto característico, ojos muy separados, cara
redonda, discapacidad intelectual

Deleción 4, brazo corto Síndrome de Wolf-Hirschhorn Cabeza pequeña con frente alta, nariz ancha, labio leporino y pala-
dar hendido, discapacidad intelectual grave

Deleción 4, brazo largo Cabeza pequeña, discapacidad intelectual de leve a moderada,

labio leporino y paladar hendido, anomalías de las manos y los pies

Deleción 7, brazo largo Síndrome de Williams-Beuren Caracterfsticas faciales, defectos cardíacos, deficiencia mental

Deleción 15, brazo largo Síndrome de Prader-Wi ll i Dificultades alimenta rias a edad temprana, pero obesidad después
del año de edad, discapacidad intelectual de leve a moderada

Deleción 18, brazo corto Cara redonda, orejas grandes de implantación baja, discapacidad
intelectua l de leve a moderada

Deleción 18, brazo largo Forma de la boca característica, manos pequeñas, cabeza pequeña,
discapacidad intelectual

Es posible detectar con facilidad una de1eción grande porque el
cromosoma está notoriam ente acortado. En individuos heteroci-
góticos para deleciones, el cromosoma normal debe formar un
bucle durante el apareamiento de homólogos en la profase I de la
meiosis (fig. 8-9) para permitir que las regiones homólogas de los
dos cromosomas se al ineen y presenten sinapsis. Este bucle gene-
ra una estructura que se parece mucho a la observada en indivi-
duos heterocigóticos para duplicaciones.
Los efectos fenotípicos de una dele-
EFECTOS DE LAS DELECIONES
ción dependen de qué genes se localizan en la región elimjnada.
Si la deleción incluye e l centrómero, el cromosoma no se segre-
gará durante la meiosis ni la mitosis y, en general, se

- - -- -- --
A B C D E F G
perderá. Muchas deleciones son letales en el estado
El heterocigoto tiene un homocigótico, porque faltan todas las copias de algu-

----- -- -·
_ _ , _ _ . ,, . _ __ _ _ _ L . __ __ _

"'"""""~ cromosoma normal. .. nos genes esenciales localizados en la región elimi-

• • ---=-====0 · ·Y
~ - - - - ~ ~,......_~ ~ ~ ~ ~ - ~
Formación del bucle de deleción
un cromosoma
con una deleción.
J
nada. Aun los individuos heterocigóticos para una
deleción pueden tener múltiples defectos por tres
razones.
urante el apareamiento de homólogos Primero, el estado heterocigótico puede provocar
en la rofase 1 desequilibrios en las cantidades de productos géni-
cos, sinrilares a los desequilibrios causados por
copias extra de genes. Segundo, en general las muta-

}
En la profase 1, el cromosoma normal debe
formar un bucle para permitir la alineación ~:
las secuencias homólogas de los cromosoma~
7
I Aspecto de los cromosomas Figura 8-9. En un individuo heterocigótico para una
homólogos durante el deleción, el cromosoma normal forma un bucle duran-
apareamiento. te el apareamiento de los cromosomas en la profase l.
216 CAPITULO 8
Figura 8-10. El fenotipo Notch se debe a una deleción cromosómica
que incluye al gen Notch. (Izquierda) Distribución venosa normal del ala.
(Derecha) Distribución venosa producida por una mutación de Notch.
(Spyros Araavanis-Tsakonas, Kenji Matsuno y Mark E. Fortini).
ciones recesivas del cromosoma homólogo que no presenta la
deleción pueden expresarse cuando se ha eliminado el alelo de
tipo silvestre (y ya no está presente para enmascarar la expresión
de alelos recesivos). La expresión de una 1nutación nor1nalinente
recesiva se denomina seudodominancia y es una indicación de
que uno de los cromoso1n as homólogos tiene una deleción. Ter-
cero, algunos genes deben estar presentes en dos copias para que
la función sea no1maJ. Cuando una sola copia del gen no es sufi-
ciente para producir un fenotipo de tipo silvestre, se dice que es
un gen haploinsuficiente. En Drosophila, una serie de mutacio-
nes del ala ligadas al cromosoma X se conocen co1no Notch. A
menudo, estas mutaciones se deben a deleciones crom osómicas.
Las deleciones Notch se comportan como mutaciones dominan-
tes: cuando una mosca es heterocigótica para una deleción Notch,
sus alas tienen muescas en los extremos y a lo largo de los bordes
(fig. 8-10). Por lo tanto, la mutación Notch es haploinsuficiente.
Las hembras que son homocigóticas para una deleción Notch (o
los machos que son hemicigóticos) mueren durante el desan·ollo
einbrionario te1nprano . E l locus Notch, que es eliminado en caso
de mutación Notch, codifica un receptor que normalmente trans-
mite señales del exterior al interior de la célula y es importante
para el desarrollo de la mosca. L a deleción actúa como letal rece-
siva porque la pérdida de todas las copias del gen Notch impide el
desarrollo normal.
DELECIONES CROMOSÓMICAS EN SERES HUMANOS En los seres hu-
manos, una de1eción del brazo corto del cromosoma 5 es respon-
sable del síndrome del maullido de gato. El nombre deriva del
llanto peculiar, similar al de un gato, de los lactantes con este sín-
drome. Un niño que es heterocigótico p ara esta deleción tiene
cabeza pequeña, ojos muy espaciados, cara redonda y discapaci-
dad intelectual. La deleción de pa1te del brazo corto del cromoso-
ma 4 causa otro trastorno humano, el síndrome de Wolf-Hirschhorn,
caracterizado por convulsiones, discapacidad intelectual grave y
retraso de crecimiento. Una deleción de un segmento diminuto
del cro1nosoma 7 provoca haploinsuficiencia del gen que codifica
elastina y algunos otros genes, y causa un cuadro conocido como
síndrome de Williams-Beuren, que se 1nanifiesta por rasgos facia-
les característicos, defectos cardíacos, hipertensión arterial y tras-
tornos cognitivos. El cuadro 8-1 resume los efectos de las dele-
ciones de cromosomas humanos.
CONCEPTOS
Una deleción cromosómica es una mutación en la que se pierde parte
de un cromosoma. En individuos heterocigóticos para una deleción,
el cromosoma normal forma un bucle du rante la profase I de la meio-
sis. La deleción permite que se expresen genes recesivos del cromoso-
ma homólogo y puede causar desequilibrios de los productos génicos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿Qué es la seudodominancia y cómo se produce por una deleción cro-
mosóm ica?
Inversiones
Un tercer tipo de reordenamiento cromosónuco es la inversión
cromosómica , en la que un segmento del cromosoma está inver-
tido, girado 180 grados (véase fig. 8-4c). Si originalmente un cro-
mosoma tenía segmentos AB•CDEFG, el cromosoma AB•CFEDG
representa una inversión que incluye los segn1entos DEF. Para
que se produzca una inversión , el cromosoma se debe romper en
dos lugares. Las inversiones que no incluyen el centrómero, como
AB•CFEDG, se denominan inversiones paracéntricas (para sig-
nifica "cerca de"), mientras que las que incluyen el centrómero,
co mo ADC•BEFG, se denominan inversiones pericéntricas
(peri significa "a1rededor").
Los heterocigotos para inversiones son frec uentes en muchos
organismos, como una serie de pl antas, algunas especies de Dro-
sophila, mosquitos y saltamontes. Las inversiones pueden haber
desempeñado un papel importante e n la evolución humana: los
patrones de bandeo G revelan que varios cromosomas humanos
difieren de los de los chimpancés solo por una inversión pericén-
trica (fig. 8-11).
EFECTOS DE LAS INVERSIONES Los individuos con inversiones no
han perdido ni ganado 1naterial genético; solo se ha modificado la
secuencia de DNA. No obstante, estas mutaciones suelen ejercer
pronunciados efectos fenotípicos. U na inversión puede romper un
gen en dos fragmentos, uno de las cuales se moviliza a una nueva
localización y destruye la fun ción de ese gen . Aun cuando las ro-
Centrómero
Cromosoma 4 humano
1 11 /1
\... y
.)
~
Inversión
Jericéntrica
A
Cromosoma 4 de ch impancé r \
IN 11 11
Figura 8-11. El cromosoma 4 difiere en los seres humanos y los chim-
pancés por una inversión pericéntrica . (Cortesla de la Dra. Christine
Harrison).
 (a}

ialheterocigoto posee un ... y un cromosoma con una

cromosoma de tipo silvestre ... inversión paracéntrica.

El heterocigoto tiene un
A B_ _ ~ - - C, __ _ D

-- G

--- c --~---~-
cromosoma normal .. .

-·
-·
-- --
D E

-
Formación de un bucle de inversión

a )
(b} D
Inversión /
... y un cromosoma con
para céntrica En la profase 1,
Formación del un segmento invertido . se forma un
ucle de inversión bucle de c
inversión.

--
En la profase I de la
meiosis, el cromosoma

--·
forma un bucle de
inversión, que permite la
alineación de las secuencias
1 homólogas.
Entrecruzamiento dentro de la inversión
c E (e}

- A B

-- F

--
G

~ .da por resu ltado una estructura inusua~

-
-

-
L.....IL-..;L......... ~ - -

~ ,~ ¡¡,~,___
-~--
Figura 8-12. En un individuo heterocigótico para una inversión para-
- V C __ D _...., E

--
céntrica, el cromosoma forma un rulo de inversión durante el apare- ~ .. y una carece de 1
amiento en la profase l.
--====:::::: un centrómero.

)
--
turas del cromosoma se ubiquen entre genes, pueden aparecer Anafase 1
efectos fenotípicos secundarios a la inversión del orden génico en
la inversión. La regulación de muchos genes depende de su posi-
ción; si una inversión modifica sus posiciones, puede alterarse su
fá:nla anafase 1, se separan los centrómeros y
estiran la cromátida dicéntrica, que se rompe. El
expresión, un resu ltado denominado efecto de posición. Por ejem- ~ omosoma que carece de un centrómero se pierde.
(d}
plo, cuando una inversión desplaza un alelo de tipo silvestre (que
normalmente codifica ojos rojos) del locus blanco de Drosophila
a una región del cromosoma que contiene cromatina 1nuy conden-
sada e inactiva, el alelo de tipo silvestre no se expresa en algunas
c..
-
células, lo que determina un ojo con manchas rojas y blancas.

INVERSIONES EN LA MEIOSIS Cuando un individuo es homocigóti-

co para una inversión particular, no surgen problemas especiales
Puente dicéntrico
- D

)
-
en la meiosis, y los dos cromosomas homólogos se pueden apare-
ar y separar con nor1nalidad. En cambio, cuando un individuo es (e} Anafase 11
heterocigótico para una inversión, el orden génico de los ho1nólo- , Dos gametos contienen
gos es diferente, y las secuencias homólogas se pueden alinear y Gametos cromosomas no recombi-
aparear solo si los dos cromosomas forman un bucle de inversión
(fig. 8-12).
Los individuos heterocigóticos para inversiones también mues-
----
Gameto no recombinante normal

Gametos recombinantes no viables

c
nantes: uno de tipo silvestre
(normal) y uno con
inversión.

tran menor recombinación entre los genes localizados en la región

cromosomas recombinantes
7
invertida. La frecuencia de entrecruzamiento dentro de la inver-
sión en realidad no djs111inuye, pero cuando de hecho se produce que carecen de algunos genes;
Gameto no recombinante con estos gametos no producirán
entrecruzamiento, ocasiona gametos anormales que dan como descendencia viable.
inversión paracéntrica
resultado descendencia no viable, y por consiguiente, no se obser-
va progenie recombinante. Veamos por qué ocurre esto.
La figura 8-13 ilustra los resultados del entrecruzamiento den-
Conclusión: los gametos recombinantes resu ltantes
tro de una inversión paracéntrica: el individuo es heterocigótico no son viables porque carecen de a lgunos genes.
para una inversjón (véase fig. 8-13a), con un cromosoma de tipo
silvestre, no mutado (AB•CDEFG) y un cromosoma invertido Figura 8- 13. En un individuo heterocigótico, un entrecruzamiento
AB•EDCFG). En la profase I de la meiosis, se forma un bucle de simple dentro de una inversión paracéntrica da por resultado game-
inversión, lo que pern1ite el apareamiento de las secuencias ho- tos anormales.
217
218 CAPITULO 8

mólogas (véase fig. 8-13b). Si se produce un entrecruzamiento El heterocigoto posee un

simple en la región invertida (entre los segmentos C y D de la cromosoma de tipo silvestre ...
fig. 8-13), se genera una estructura inusual (véase tig. 8-13c). Las
dos cro1nátidas externas, que no participaron en el cruzamiento, - A 8

•::::~~==~~~~~~=~~-
~ C

-
----
F

-
contienen las secuencias originales no recombinantes de los
genes. Las dos cron1átidas internas, que sí participaron en el )
3
en trecruzamiento, son 1nuy anormales: cada una tiene dos copias
de algunos genes y ninguna copia de otros. Además, una de las , ,-
.. y _Á, con una
un cromosoma ~
~ ~ers1ón pericéntrica,
cuatro cromátidas tiene ahora dos centrómeros, y se dice que es
una cromátida dicéntrica; la otra carece de centrómero y es una Formación del
cromátida acéntrica. bucle de inversión
En la anafase I de la meiosis, los centrómeros son arrastrados
hacia polos opuestos, y se separan los dos cromosomas ho1nóJo-
gos. ,E sta acción estira la cro1nátida di céntrica a través del centro En la profase 1, o Si se produce
del núcleo y forma una estructura denominada puente dicéntrico se forma un entrecruzamiento
bucle de dentro de la región
(véase fig. 8-13d). Eventualmente, el puente dicéntrico se rompe invertid___
a____
.. ·...._
cuando los dos centrómeros se alejan aún más. Las fibras del huso c
,11E
no se unen al fragmento acéntrico, de manera que este 110 se
segrega a un polo del huso y por lo general se pierde cuando vuel-
-- --
ve a formarse el núcleo.
En la segunda división de la meiosis, se separan las cromátidas
hermanas y se forman cuatro gametos (véase tig. 8-13e). Dos de
-- Entrecruzamiento
--~-
~~-

los ga1netos contienen los cromoson1as originales no reco1nbinan-

dentro de la inversió
tes (AB•CDEFG y AB•EDCFG). Los otros dos gametos contie-
nen cromosomas recon1binantes a los que les faltan algunos
genes; estos gan1etos no produci rán descendencia viable. Por lo
tanto, no sw·ge ninguna progenie recombi nante cuando se produ-
ce entrecruzamiento dentro de una inversión paracéntrica. La cla-
- .. ,dos de las cromátidas
-·
-·
ve es reconocer que, aunque se produzca entrecruzamiento, los resultantes t ienen demasiadas
copias de algunos genes y
gametos resultantes no son viables, de manera que no se observa ninguna copia de otros.
progenie recombinante.
La recombinación ta1nbién está reducida dentro de una inver-
sión peri céntrica (fig. 8-14). No se produce ningún puente dicén-
trico ni fragmento acéntrico, pero los cromosomas recombinantes
--3 -
a
-·
-·
tienen demasiadas copias de algunos genes y ninguna copia de ~ s cromosomas se
Anafase 1 separan en la anafase l.
otros, de manera que los gametos que reciben los cromosomas

-- - -- -- -·
recombinantes no pueden producir progenie viable.
Las figuras 8-13 y 8-14 ilustran los resultados de los entrecru-
zamientos dentro de las inversiones. Los en trecruzamientos G F -
dobles en los que ambos se producen en las mismas dos cadenas
(entrecruza1nientos dobles bicatenarios) dan por resultado cromo-
so1nas recombinantes funcionales (para ver por qué los entrecru-
)l
-- B A

zamientos dobles producen ga1netos funcionales, intente dibujar

los resultados de un entrecruzamiento doble bicatenario). Por lo
tanto, aunque la tasa global de recombinación está reducida den-
tro de una inversión, todavía es posible producir cierta progenie Gametos
recombinante viable a través de entrecruzamientos doble bicate- • •- - - • r:'11111 • - Gameto no recombinante
normal
narios. L!►:..!2:~~ RESOLVER EL PROBLEMA 27
·- -~- -._-)i - -
IMPORTANCIA DE LAS INVERSIONES EN LA EVOLUCIÓN Las inversio-
nes también pueden desen1peñar un papel i1nportante en la evolu-
ción al supri mir la recombinación entre un conjunto de genes.
Como se ha visto, el entrecruzamiento dentro de una inversión en
-□ - .L ) ~-
} Gametos recombinantes
no viables

un individuo heterocigótico para una inversión pericéntrica o
paracéntrica produce gametos desequilibrados, con la consiguien-
te ausencia de progenie recombinante. Esta supresión de la re-
combinación permite que conj untos particulares de alelos coa-
daptados que funcionan bien j untos permanezcan intactos, sin ser
desplazados por recombinación.
Gameto no re combinante
con inversión pericéntrica
Conclusión: los gametos recombinantes no son viables porque
les faltan genes o estos están presentes en demasiadas copias.
Figura 8-14. En un individuo heterocigótico, un entrecruzamiento
simple dentro de una inversión pericéntrica da por resultado game-
tos anormales.

CONCEPTOS
En una inversión, un segmento de un cromosoma gira 180 grados.
Las inversiones causan roturas de algunos genes y pueden desplazar
otros a nuevas ubicaciones. En individuos heterocigóticos para una
inversión cromosómica, los cromosomas homólogos forman un bucle
durante la profase I de la meiosis. Cuando hay entrecruzamiento den-
tro de la región invertida, suelen producirse gametos no viables, lo
que determina una depresión de las frecuencias de recombinación
observadas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿Se produce un cromosoma dicéntrico cuando tiene lugar entrecru-
zamiento en un individuo heterocigótico para qué tipo de reordena-
miento cromosómico?
a. Duplicación
b. Deleción
c. Inversión paracéntrica
d. Inversión pericéntrica
Translocaciones
Una translocación implica el desplazamjento de material genéti-
co entre cromosomas no homólogos (véase fig. 8-4d) o dentro del
mismo cromoson1a. La translocación no debe confundirse con
entrecruza1niento, en el que hay un intercambio de material gené-
tico entre cromosomas homólogos.
En una translocación no recíproca, el material genético se des-
plaza de un cron1osoma a otro sin ningún intercambio recíproco.
Considere los dos cromosomas no homólogos siguientes:
AB•CDEFG y MN•OPQRS. Si el segmento cromosómico EF se
desplaza del primer cron1osoma al segundo, sin ninguna transfe-
rencia de segmentos del segundo cro1nosoma al primero, ha teni-
do lugar una translocación no recíproca, que produce cromoso1nas
AB•CDG y MN•OPEFQRS. Con mayor frecuencia, se observa un
intercambio bidireccional de segmentos entre los cromosomas, lo
que da por resultado una translocación recíproca. Una transloca-
ción recíproca entre los cromosomas AB •CDEFG y MN•OPQRS
podría dar origen a los cromoso1nas AB•CD_QRS y MN•OPEFG.
EFECTOS DE LAS TRANSLOCACIONES Las translocaciones pueden
afectar de varias maneras a un fenotipo . Primero, pueden vincu-
lar físicamente genes localizados en diferentes cromosomas. Es-
tas nuevas relaciones de ligamiento pueden incidir en la expresión
génica (un efecto de posición): genes translocados a nuevas ubi-
caciones pueden quedar bajo el control de diferentes secuencias
reguJatorias o de otros genes que afectan su expresión.
Segundo, las roturas cromosómicas que provocan las t:ransloca-
ciones pueden tener lugar dentro de un gen y alterar su función. Los
genetistas moleculares han utilizado estos tipos de efectos para
mapear genes humanos. La neurofibro1natosis es una enfennedad
genética caracterizada por numerosos tumores fibrosos de la piel y
el tejido nervioso; se debe a una mutación autosómica dominante.
Inicialmente, los estudios de ligamiento localizaron el locus que, en
caso de mutación, causa neurofibromatosis en el cromosoma 17,
pero se desconocía el lugar preciso del locus. Más adelante, los
genetistas estrecharon la localización cuando identificaron dos
Variación cromosómica 219
El brazo corto de un
cromosoma acrocéntríco ...
Translocación
robertsonian
. .. lo que crea un cromosoma
Cromosoma
metacéntrico
met acéntrico grande ...
, ... y un fragmento que a
+
menudo no se segrega y se
Fragmento -
ierde.
Figura 8-15. En una translocación robertsoniana, se intercambia el
brazo corto de un cromosoma acrocéntrico por el brazo largo de otro.
pacientes con ne urofibromatosis que poseían una translocación que
afectaba al cromosoma 17. Se asumió que estos pacientes presen-
taban neurofibron1atosis debido a que una de las roturas cromosó-
micas ocurridas en la trans]ocación había alterado un gen particu-
lar, l.o que dio por resultado neurofibromatosis. Se secuenció el
DNA de las regiones que rodeaban las roturas, lo que fmalmente
llevó a identificar el gen responsable de la neurofibromatosis.
Las deleciones suelen aco1npañar a las t:ranslocaciones. Por
ejemplo, en una translocación robertsoniana, los brazos largos
de dos cron1osotnas acrocéntricos se unen a un centrón1ero co-
mún a través de una translocación, lo que genera cromosomas
metacéntricos con dos brazos largos y otro cromosoma con dos
brazos muy cortos (fig. 8-15). El cromosoma más pequeño a me-
nudo se pierde, porque los cron1osomas muy pequeños no tienen
suficiente masa para segregarse de manera correcta durante la
mitosis y la 1neiosis. El resultado es una reducción global del nú-
mero de cromosomas. Como se verá, las translocaciones robert-
sonianas son la causa de algunos casos de síndrome de Down, un
trastorno cromosómico analizado más adelante en este capítulo.
TRANSLOCACJONES EN LA MEIOSIS Los efectos de una transloca-
ción en Ja segregación cromosómica durante la meiosis dependen
del carácter de la translocación. Consideremos lo que sucede en
un individuo heterocigótico para una translocación recíproca.
Suponga que los cromosomas originales eran AB •CDEFG y
M•NOPQRST (designados N 1 y N 2 , respectivamente, por cromo-
somas normales l y 2) y que tiene lugar una translocación re-
cíproca que produce los cromoso1nas AB•CDQRS y M•N OPEFG
(designados T 1 y T 2 , respectivamente, por cromosomas transloca-
dos 1 y 2). Un individuo heterocigótico para esta trans locación
tendría una copia normal de cada cromosoma y una copia trans-
locada (fig. 8-16a). Cada uno de estos cromosomas contiene seg-
mentos que son homólogos para los otros dos crornosomas. Cuan-
do se aparean las secuencias homólogas en la profase I de la
meiosis, se forman configuraciones en cruz co1npuestas por los
cuatro cromoso1nas (fig. 8-16b).
Advierta que N 1 y T 1 tienen centrómeros homólogos (en ambos
cromosomas, el centrómero se encuentra entre los segn1entos B y
C). De modo sunilar, N 2 y T 2 tienen centrómeros homólogos
220 CAPITULO 8

(a)

Un individuo heterocigótico
para esta translocación posee ... y una copia
una copia normal de cada translocada de
M N O P ·---" '-'-'~~-,y!,:
cromosoma (N 1 y N2) ... M N O P - 1t~-1~z-r.~,.
cada uno (T 1 y
M NO P R S T Tz).

m
M N O p R S

(b)
Como cada cromosoma tiene l
segmentos que son homólogos
respecto de otros dos
cromosomas, se forma una
configuración en cruz en la
rotase I de la meiosis.
---

(e) , En la anafase 1, el cromosoma se separa

en una de tres maneras diferentes.

, ,
, ,,
,
,,
,,
, ,,
,
, ,,
,
,,
, ,,
, ,
,
, ,,
,
, ,,
,
, ,,
, T1
,
,,
,
, ,,
,
,,

Segregación alterna Segregación adyacente- 1 Segregación adyacente-2 (rara)

Anafase 11 Anafase 11 Anafase 11

(d)

O P R S

M NO P Q R S T M NO P R S T

',J,__ Q R S T

M NO P Q R S T M NO P Q R S T

Gametos viables Gametos no viables

Conclusión: los gametos resultantes de la segregación adyacente 1 y 2 no son viables
porque algunos genes están presentes en dos copias, mientras que otros están ausentes.

Figura 8-16. En un individuo heterocigótico para una translocación recíproca, se forman estructuras
en cruz en los apareamientos de homólogos.

(entre los segmentos N y 0). Normalmente, los centrómeros
homólogos se separan y se desplazan hacia polos opuestos en la
anafase I de la meiosis. En caso de una translocación recíproca, los
cromosomas pueden segregarse de tres maneras diferentes. En la
segregación alterna (fig. 8-16c), N 1 y N 2 se desplazan hacia un
polo, y T 1 y T 2 lo hacen hacia el polo opuesto. En la segregación
adyacente-!, N 1 y T 2 se desplazan hacia un polo, y T 2 y N 1 lo
hacen hacia el otro. Tanto en la segregación alterna como en la ad-
yacente-1, los centrómeros homólogos se desplazan hacia polos
opuestos. La segregación adyacente-2, en la que N 1 y T 1 se despla-
zan hacia un polo, y N 2 y T 2 lo hacen hacia el otro, es rara, porque
los dos cromosomas homólogos suelen separarse en la meiosis.
La figura 8-16d ilustra los productos de los tres patrones de
segregación. Como puede observar, los gametos producidos por
segregación alterna tienen un juego completo de los segmentos
del cromosoma. Por lo tanto, estos gametos son funcionales y
pueden producir progenie viable. En cambio, los gametos produ-
cidos por segregación adyacente- ! y adyacente-2 no son viables,
porque algunos segn1entos cromosómicos están presentes en dos
copias, mientras que faltan otros. Como la segregación adyacen-
te-2 es rara, la mayoría de los gametos se producen por segrega-
ción alterna o adyacente-1 . Por consiguiente, se prevé que alrede-
dor de la mitad de los gametos de un individuo heterocigótico
para una translocación recíproca ser án funcionales.
IMPORTANCIA DE LAS TRANSLOCACIONES EN LA EVOLUCIÓN Las
translocaciones suelen desempeñar un papel importante en la evo-
lución de los cariotipos. Los chimpancés, los go1ilas y los oran-
gutanes tienen 48 cromosomas, mientras que los seres humanos
tienen 46. El cromoso1na 2 hu1nano es un cromoso1na metacéntri-
co grande con patrones de bandeo G que coinciden con los obser-
vados en dos cron1osomas acrocéntricos diferentes de .los simios
(fig. 8-17). En apariencia, se produjo una translocación robertso-
niana en un ancestro humano, que creó un cromosoma metacén-
trico grande a partir de los dos brazos largos de los cromosomas
acrocéntricos ancestrales y un cromosoma pequeño que consiste
en los dos brazos cortos. Con ulterioridad, se perdió el cromoso-
ma pequeño, lo que determinó la reducción del número de cro1no-
somas de Jos seres humanos respecto del observado en los otros
sumos. L.:►:.2:!!=!!:!!::!.!!=~!::!:~!:.!!!!==!=:::!:2!:~:::S
CONCEPTOS
En las translocaciones, partes de cromosomas se movilizan a otros
cromosomas no homólogos o a otras regiones del mismo cromoso-
ma. Las translocaciones pueden afectar el fenotipo al desplazar genes
a nuevas localizaciones, donde quedan bajo la influencia de nuevas
secuencias regu latorias, o al romper genes y alterar su función.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
¿Cuál es el resultado de una translocación robertsoniana?
a. Dos cromosomas acrocéntricos
b. Un cromosoma metacéntrico grande y un cromosoma muy
pequeño con dos brazos muy cortos
c. Un cromosoma metacéntrico grande y un cromosoma acrocéntri-
co grande
d. Dos cromosomas metacéntricos grandes
Variación cromosómica 221
Cromosoma 2 humano
1
t 111
1
1 1
O serve que as an as e
cromosomas de diferentes especies
son homólo as.
Cromosomas de chimpancé
1 1
Cromosomas de gori la
llt 119
1 a11 11 111111111 t
Cromosomas de orangután
1 1 11t
• 4• 11 U1111111111
Figura 8-17. El cromosoma 2 humano contiene una translocación
robertsoniana que no está presente en chimpancés, gorilas ni oran-
gutanes. El bandeo G revela que una translocación robertsoniana en un
ancestro del hombre provocó un cambio de los brazos largo y corto de dos
cromosomas acrocéntricos, que todavía están presentes en los otros tres
primates. Esta translocación creó el cromosoma 2 hu mano, que es meta-
céntrico y grande. Las líneas de conexión grises destacan algunas regiones
de homología, aunque no todas, entre los cromosomas.
Sitios frágiles
Los cromosomas de las células que crecen un cultivo presentan
constricciones o hiatos en localizaciones particulares denomina-
das sitios frágiles (fig. 8-18) porque son proclives a romperse en
ciertas condiciones. En los cromosomas humanos, se han identi-
ficado más de 100 sitios frágiles.
Los sitios frágiles pertenecen a dos grupos. Los sitios frágiles
comunes están presentes en todos los seres humanos y son una
característica normal de los cromosomas. A 1nenudo, son el lugar
de rotura y reordenamientos cromosómicos en célul as cancerosas,
que causan deleciones, translocaciones y otros reordenamientos
cromosómicos. Los sitios frágiles raros se
observan en pocas personas y se heredan
como un rasgo mendeliano. Suelen aso-
ciarse con trastornos genéticos, como dis-
capacidad inte.lectual. La mayoría de ellos
consisten en expansión de repeticiones
nucleotídicas, en las que aumenta el núme-
ro de repeticiones de un conjunto de nucle-
ótidos (véase cap. 18).
Figura 8- 18. Los sitios frágiles son regiones
cromosómicas susceptibles a la ruptura en
ciertas condiciones. Aquí se muestra un
sitio frágil del cromosoma X humano.
(Cortesía de la Dra. Christine Harrison).
222 CAPITULO 8
Uno de los sitios frágiles raros más estudiados se local iza en el
cromosoma X humano y se asocia con síndrome del cromosoma
X frágil, un trastorno que incluye discapacidad intelectual. Se ha
mostrado que este síndrome, cuya herencia está ligada al cromo-
soma X y cuya frecuencia es de alrededor de l cada 5000 naci-
mientos de varones, se debe a un au1nento de las repeticiones de
un trinucleótido CGG.
Estudios molecu lares de sitios frágiles han mostrado que
muchos de ellos tienen más de 100 000 pb de longitud e incluyen
uno o más genes. A menudo, los sitios frágiles tardan en replicar-
se. En estos lugares, las enzimas que replican el DNA pueden
atascarse mientras continúa el desenrollanuento del DNA (véase
cap. 12), lo que determina largas extensiones de DNA que están
desenrolladas y vulnerables a la rotura. Pese a los avances recien-
tes en el conocimiento de los sitios frágiles, no se comprende por
completo su naturaleza.
Variaciones del número de copias
Tradicionalmente, los reordenamientos cromosómicos se han de-
tectado por examen microscópico de los cromosomas. El examen
visual identifica reordenamientos cromosómicos sobre la base de
cambios del tamaño global de un cromosoma, alteración de los
patrones de bandeo revelada por tinción cromosómica o compor-
tanuento de los cro1nosomas durante la rneiosis. Sin en1bargo, la
mjcroscopia puede detectar solo reordenamientos cromosó1nicos
grandes, en general aquellos que tienen por lo menos 5 millones
de pares de bases de longitud.
Gracias a la finalización del Proyecto Genoma Humano
(véase cap. 20), se accedió a información detallada acerca de las
secuencias de DNA halladas en cada cromosoma. Utilizando
esta infor n1acjón, ahora los genetistas p ueden exanúnar el
número de copias de secuencias específicas de DNA presentes
en una célula y detectar duplicaciones, deleciones y otros reor-
denamientos cromosómicos que no pueden observarse solo por
núcroscopia. El trabajo se ha facilitad o mucho por la disponibi-
lidad de micro111atrices (véase cap. 20), que permiten la detec-
ción simultánea de 1niles de secuencias específicas de DNA en
todo el geno1na. Como estos métodos miden el número de
copias de secuencias de DNA particulares, las variaciones
detectadas se denominan variaciones del número de copias
(VNC). Estas incluyen duplicaciones y deleciones que varían de
longitud desde miles de pares de bases hasta varios millones.
M uchas de estas variantes abarcan por lo menos un gen y pue-
den comprender varios genes.
Estudios recientes de la variación del número de copias han
revelado que las duplicaciones y las deleciones cromosómicas
submicroscópicas son bastante frecuentes: la investigación sugie-
re que cada persona puede tener hasta 1000 variaciones del nwne-
ro de copias. Es probable que muchas no ejerzan efectos fe notípi-
cos observables, pero en la actualidad, se ha ilnplicado a algunas
variaciones del número de copias en una serie de enfermedades y
trastornos. Por ejemplo, Janine Wagenstaller y sus colegas estu-
diaron la variación del número de copias en 67 niños con disca-
pacidad intelectual sin causa reconocida y observaron que 11
(16%) de ellos tenían duplicaciones o deleciones. Asimismo, las
variaciones del número de copias se han asociado con osteoporo-
sis, autismo, esquizofrenia y una se1ie de otras enfermedades y
trastornos. L.•~~~!.!!:2:::!::!::!:!!!E::!!:!!!!===!:!:!!!:!:!2:9
CONCEPTOS
Las variaciones del número de copias de secuencias particulares de
DNA (variaciones del número de copias) son sorprendentemente
comunes en el genoma humano.
8.3 La aneuploidía es un aumento
o una disminución del número
de cromosomas de un individuo
Además de los reordenamientos cromosómicos, las mutaciones
cromosómicas incluyen cambios en el nún1ero de cromosomas.
Las vruiaciones del número de cromosomas pueden clasificarse
en dos tipos básicos: aneuploidía, que es un cambio del número
de cromosomas del individuo, y poliploidía, que es un cambio
del nún1ero de juegos de cromoso1nas.
La aneuploidía puede surgjr de varias maneras. Primero, es
posible perder un cromosoma en el curso de la mitosis o la meio-
sis si, por ejemplo, hay deleción de su centrómero. La pérdida
del centrómero impide la umón de las fibr as del huso; por lo
tanto, el cromosoma no migra hacia el polo del huso y no se
incorpora a un núcleo después de la división celular. Segundo, el
cromosoma pequeño generado por una translocación robertso-
niana puede perderse en la mitosis o la meiosis. Tercero, los
aneuploides pueden surgir por falta de disyunción, la falta de
separación de cromosomas homólogos o cromátidas hermanas
en la meiosis o la mitosis (véase p. 87 del cap. 4). La falta de dis-
yunción hace que algunos gametos o células contengan un cro-
mosoma extra y que otros ga1netos o células carezcan de un
cron1osoma (fig. 8-19). D INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 29
Tipos de aneuploidía
Se considerarán cuatro tipos de aneuploidías frecuentes en indivi-
duos diploides: nulisomía, monosomía, trisomía y tetrasomía.
l. Nulisomía es la pérdida de ambos miembros de un par de cro-
mosomas homólogos. Se representa como 2n - 2, donde n
hace referencia al número haploide de cromosomas. Así, entre
seres h un1anos, que suelen tener 2n = 46 cromosomas, un cigo-
to nuli só1nico tiene 44 cromosomas.
2. Monosomía es la pérdida de un solo cromosoma, representa-
da por 2n - 1. Un cigoto humano 1nonosónuco tiene 45 cromo-
somas.
3. Trisomía es la ganancia de un solo cromosoma, representada
por 2n + l. Un cigoto humano trisónuco tiene 47 cromosomas.
La ganancia de un cromoso1na significa que hay tres copias
hon1ólogas de un cromoso1na. La 1nayoría de los casos de sín-
drome de Down, analizado más adelante en este capítulo, se
deben a tiisomía del cromosoma 21 .
4. Tetrasomía es la ganancia de dos crom osomas homólogos,
representada por 2n + 2. Un cigoto humano tetrasónúco tiene
48 cron1osomas. La tetrasomía no es la ganancia de dos cro-
mosomas extra cualesquiera, sino más bien la ganancia de dos
cromosomas homólogos, de manera que habrá cuatro copias
homólogas de un determinado cromosoma.
 Variación cromosómica 223

(a) Falta de disyunción en la meiosis 1

Gametos Cigotos
(c) Falta de disyunción
MEIOSIS 1 MEIOSIS 11 en la mitosis

MITOSIS
Fecundación

Trisómico
Falta de (2n + 1)
, l
t Falta de
disyunción
t
Gameto
normal

Monosómico
(2n - 1)
Proliferación
(b) Falta de disyunción en la meiosis 11 celular
Gametos Cigotos

MEIOSIS 1 MEIOSIS~

Fecundación
1

Falta de Trisómico Monosómico

disyunción (2n + 1) (2n - 1)

Gameto
normal
Clon somático Clon somático de
de células células trisómicas
Diploide normal (2n) monosóm icas (2n + 1)
(2n - 1)

Figura 8-19. Los aneuploides se pueden producir por f alta de disyunción en la meiosis 1, la meiosis II y la
mitosis. Los gametos resultantes de las meiosis con falta de disyunción se combinan con un gameto (con cromoso-
ma azul) proveniente de una meiosis normal para producir los cigotos.

Puede haber más de una mutación aneuploide en el mjsmo indi-
viduo. Un indjviduo que tiene una copia extra de dos cromosomas
diferentes (no hon1ólogos) se denomina trisómico doble y se
representa como 2n - 1 - l. De modo similar, un monosómico
doble tiene dos cromosomas no homólogos menos (2n - 1 - 1), y
un tetrasómico doble tiene dos pares extra de cromosomas hon1ó-
logos (2n + 2 + 2).
Efectos de la aneuploidía
Uno de los primeros aneuploides reconocidos fue una .m osca de
la fruta con un solo cromosom a X y rungún crom osoma Y descu-
bierta por CaJyjn Bridges en 1913 (véanse pp. 86-87 del cap. 4).
Otro de los estudjos iniciales de aneuploidía se centró en mutan-
tes del estramonio, Datura stramoniu,n. A. Francis Blakeslee
comenzó a cultivar esta planta en 191 3 y observó que los cruza-
mientos con varias mutantes del estramonio producían proporcio-
nes inusuales de progenie. Por ejemplo, la mutante globo (cuya
serrulla tiene una vaina de forma globular) era do1ninante, pero se
heredaba fundamentalmente del progenitor fe.meruno. Cuando
se autofecundaban plantas que presentaban la mutación globo,
solo el 25% de la progenie tenía el fenotipo globo. Si la mutante
globo fuera estrictamente dominante, Blakeslee debería haber ob-
servado 75% de la progenie con el rasgo (véase cap. 3); por lo
tanto, el 25% fue una proporción inusual. Blakeslee aisló 12 1nu-
tantes diferentes (fig. 8-20) que mostraban patrones peculiares de
herencia. Finalmente, John Belling demostró que estos 12 mutan-
tes eran, de hecho, trisómjcos. Datura stramonium tiene 12 pares
de cromosomas (2n =24) y cada uno de los 12 mutantes es tris6mi-
co para un par de cromosomas diferentes. El carácter aneuploide
224 CAPITULO 8
Va inas de las semillas
2n Trisó micos
Tipo silvestre Enrollado Brilloso Combado Elongado
Equino Erizo Microcárpico Reducido
Espinaca Flor de fuego Globular Encina
Figura 8-20. Las vainas mutantes de la semillas del estramonio (Da-
tura stramonium) se deben a diferentes trisomías. Cada tipo de vaina
de las semillas es un fenotipo trisómico para un cromosoma diferente.
de los 1nutantes explicó las proporciones inusuales observadas
por Blakeslee en la progenie. Muchos de los cromosomas extra de
los trisó1nicos se perdieron en la meios is, de .m anera que menos
del 50% de los gametos llevaba el cromosoma extra, y la propor-
ción de trisórnicos en la progenie fue b aja. Además, el polen que
contenía el cromosoma extra no era tan exitoso en la fecundación ,
y los cigóticos trisómicos fueron tnenos viables.
Por lo general, la aneuploidía 1nodifica de manera drástica el
fenotipo. En la mayoría de los an i1nales y en 1nuc has plantas, las
mu taciones aneuploides son letales. Co1no la aneup loidía afecta
la cantidad de copias del gene pero no sus secuencias nucleotídi-
cas, es m uy probable que los efectos de la ane uploidía se de ban a
una dosis génica anormal. La aneuploidía modifica la dosis en
algunos genes pero no en todos, lo que cambia las concentracio-
nes relativas de los productos génicos y a menudo interfiere con
el desarrollo anormal.
U na excepción importante a la relación e ntre el número de ge-
nes y la dosis génica corresp onde al cromosoma X de los ma-
míferos. En los mamíferos, la desactivación del cromosoma X
garantiza que los machos (que tienen un único cro1n osoma X )
reciban la misma dosis funcional de los genes ligados aJ c ro1no-
soma X (véanse pp. 92-94 del cap. 4 para una discusión n1ás deta-
llada de la desactivación del cro mosoma X). En los mamíferos,
los cromosomas X adicionales son desactivados, de manera que
cabría esp erar que la aneuploidía de los cromosom as sexuales
fuera n1enos deletérea en estos animales. D e hecho, este es el caso
en ratones y seres hu1nanos, en los c uales la aneuploidía de los
cromosomas sexuales es la forrna más frecuente de aneuploidía
observada en organismos vivientes. Es probable que la ane uploi-
día del cromosoma Y sea común, porque hay muy poca informa-
ción genética en este cron1osoma.
CONCEPTOS
La aneuploidía, pérd ida o ganancia de uno o más cromosomas indivi-
duales, puede su rgir por la pérdida de un cromosoma secundaria a
translocación o por la fa lta de disyunción en la meiosis o la mitosis.
Altera la dosis gén ica y a menudo ejerce efectos fenotípicos impor-
tantes.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
Un organismo diploide tiene 2n = 36 cromosomas. ¿Cuántos cromo-
somas se hal larán en un miembro trisómico de esta especie?
Aneuploidía en seres humanos
Por razones desconocidas, un alto porcentaj e de los embriones
hun1anos concebidos tiene anon1alías cromosómicas. Los resulta-
dos de estudi os de muj eres que inte ntan lograr un e mbarazo
sugiere n que más del 30% de las concepciones terminan e n un
aborto espontáneo , en general en etapas tan tempran as del desa-
tTollo que la 1nujer ni siquiera sabía que estaba embarazada. Por
lo men os el 50% de los fetos humanos abortados espontáneamen-
te tiene defectos cromosó1n icos, y la a ne uploidía es responsable
de la mayoría de ellos. Esta tasa de anomalía cromosórnica en
seres humanos es más alta que e n otros organismos estudiados;
por ej emplo, en los ratones se detecta aneuploidía en no más del
2% de los óvulos fecundados . En los seres hu1nanos, la aneuploi-
día suele provocar problemas de desatTollo tan graves que causan
abo1to espontáneo. Solo alrededor del 2% de los fe tos con un
defecto cro1n osó1nico sobreviven al nacimiento .
ANEUPLOIDÍA DE LOS CROMOSOMAS SEXUALES Las aneuploidías
más comunes observadas en los seres humanos vivos son las que
afectan los cromosomas sexuales. AJ igual que en todos los 1na-
míferos, la aneuploidía de los cro1n osomas sexuales humanos es
mej or to ler ada que la ru1euploidía de los cro1noso1nas autosó-
micos. Tanto el síndrome de Turner como el de Kl inefelte r
(véanse figs. 4-8 y 4-9) se deben a aneup loidía de los cromoso-
m as sexuales.
ANEUPLOIDIA AUTOSÓMICA En los seres humanos, las aneuploidí-
as autosó1nicas que dan por resultado recién nacidos vivos son
me nos frecue ntes que las aneuploidías de los cromosomas sexua-
les, quizá porque no hay ningún mecanismo de compensación de
la dosis para los cromosomas autosómicos . La mayoría de los
aneuploides autosómicos se abortan esp ontáneamente, aunque a
veces aneuploides de algunos de los autoso1n as pequeños, corno
el cromosoma 21, comple tan el desarrollo y nace una persona con
aneuplo idía. Con10 estos cromosom as son pequeños y contienen
me nos genes, la presencia de copias extra es menos dele térea que
en el caso de cromosomas más grandes.
SÍNDROME DE DOWN En 1866, Jobn Langdon Down, médico y
superintendente médico del E arlswood Asylum en Su1Tey, lng la-
ten·a, advirtió un notable p ru·ecido e ntre una serie de sus pacien-
tes con discapacidad intelectual ; todos ellos tenían cara anc ha,
plana, nariz pequeña y oj os de forma ovalada. De hecho, sus fac-
ciones eran tan similares que estimó que podrían ser considerados
 Variación cromosóm ica 225

{a) {b)
•
lt
,,1
- I!

)1
,. ..
•• •

1 2 3 4 5

u •• • • •
..."
4, , .
• lt
lil 41
Ir

6 7 8 9 10 11 12

• •

14 15 16 17

• . 1! •••. .
19 20 21 22 i
X y

Figura 8-21. El síndrome de Down primario (a) es causado por trisomía del cromosoma 21 (b). (Parte a: George
Doyle/Sotckbyte/Getty lmages. Parte b: L. Wilatt, East Anglian Regional Genetics Service/Science Photo Library/Photo Researchers).

fáci lmente hijos de la misma familia. Down no comprendía la El síndrome de Down familiar aparece en la descendencia de
causa de su discapacidad intelectual, pero esta descripción origi- progenitores que son portadores de cromosomas que han sufrido
nal registra fielmente las características físicas de esta forma una translocación robertsoniana entre el cromosoma 2 1 y el cro-
genética de discapacidad intelectual. En su honor, el trastorno se mosoma 14: el brazo largo del cromosom a 2 1 y el brazo corto del
conoce hoy en día como síndrome de Down. cromosom a 14 se intercambian de lugar (fig. 8-22). Este inter-
El. síndrome de Down, denominado también trisomía 21, es la ca1nbio produce un cro1nosoma que incluye los brazos largos de
aneuplo idía autosómica 1nás com ún en los seres hu1nan os (fig. 8- los cromoso1nas 14 y 2 1, y un cromosoma muy pequeño formado
21a) . En los Estados Unidos, la incidencia de síndrome de Down por los brazos cortos de los cromosomas 21 y 14. Por lo general,
es similar a la observada en todo el mundo (alrededor de 1 cada
700 nacimientos de seres humanos) aunque la incidencia es mayor
en hijos de madres mayores. Alrededor del 92% de aquellos con
síndrome de Down tienen tres copi as completas del cro1nosoma 21
(y, por lo tanto, un total de 47 cromosomas), un cuadro denomina-
do síndrome de Down primario (fig. 8-21b). Por lo general, el
síndrom e de Down prin1ario se debe a la falta de disyunción
espontánea durante la formación del cigoto: alrededor del 75% de 1 2 3 4 5
los eventos de falta de disyunción son de origen materno, y la
mayoría se produce en la 111eiosis l. La mayoría de los niños con
síndrome de Down nacen de progenitores normales, y la falla en la
división cron1osón1ica tiene escasa tendencia hereditari a. Una
)
6 8 9 10 11 12
parej a que ha concebido un hij o con síndrome de Down primario
tiene un riesgo solo ligeramente más alto de concebir un segundo
hijo con síndro1ne de Down (en co1nparación con otras parejas de
edad similar que no han tenido ningún hij o con este síndrome). De
13
115 16 17
1
18

n1odo si n1ilar, los famil iares de la parej a no tienen una 1nayor pro-
babilidad de tener un hijo con síndrome de Down.
Alrededor del 4% de las personas con síndrome de Down no
son trisómicos para un crom osoma 2 1 completo. E n cambio, tie-
nen 46 cromoso1n as, pero una copia extra de parte del cron1oso-
ma 2 1 está unida a otro crom osom a por translocación. Este cua-
dro se denomina síndrome de Down familiar, porque tiene una
tendencia a manifes tarse en familias. Las características fenotípi-
cas del síndrome de Down familiar son iguales que las del síndro-
1ne de Down primario.
19
1C- 20 @ 22
(
X y
Figura 8-22. La translocación del cromosoma 21 hacia otro cromoso-
ma causa síndrome de Down familiar. En este caso, el brazo largo del
cromosoma 21 está unido al cromosoma 14. Este cariotipo es de un porta-
dor de la translocación, que es normal desde el punto de vista fenotípico,
pero tiene mayor riesgo de tener hijos con síndrome de Down. (© Centre
far Genetics Education far and on behalf of the Crown in right of the State
of New South Wales).
226 CAPITULO 8

el cromosoma pequeño se pierde después de varias divisiones
celul ares. Si bi en el intercambio entre los cromosomas 21 y 14 es
la causa más frecuente de síndrome de Down famili ar, el cuadro
también puede ser causado por translocaciones entre el cromoso-
ma 2 1 y otros cromosomas, por eje1nplo el 15.
Las personas con la translocación, denominadas portadores de
translocación, no presentan síndrome de Down. Aunque tienen
solo 45 cromosomas, sus fenotipos son normales porque tienen dos
copias de los brazos largos de los cromosomas 14 y 21, y en ap a-
1iencia, los brazos cortos de estos cromosomas (que se pierden)
no contienen inforn1ación genética esencial. Si bien los portado-
res de translocación son totalmente sanos, tienen 111ayor probabi-
lidad de tener hijos con síndrome de Down.
Cuando un portador de translocación produce gametos, el cro-
mosoma de translocación puede segregarse de tres maneras dife-
rentes. P1imero, puede separarse de los cromosomas 14 y 2 1 nor-
males en la anafase I de la m eiosis (fig. 8-23a). En este tipo de
segregación, la mitad de los gametos tendrán el cromosoma
de translocación y ninguna otra copia de los cromoson1as 2 1 y 14;
la fusión de un gameto de este tipo con un gameto normal dará
origen a un portador de translocación. La otra mitad de los game-
tos producidos por este tipo de segregación será normal, cada uno
con una sola copia de los cromosomas 14 y 21, y producirán des-
cendencia normal.
Alternativan1ente, el cro1noso1na de translocación puede sepa-
rarse del cromosoma 14 y pasar a la misma célula con el cro1no-
soma 2 1 normal (fig. 8-23b). Este tipo de segregación produce
solo gametos anormales; la mi tad tendrá dos copias funcional es
del cromosoma 2 1 (una normal y una unida al cromosoma 14), y
la otra mitad carecerá de cromosoma 21. Si un gameto con dos
copias funcionales del cromosoma 21 se fusiona con un gameto
normal que tiene una sola copia del cromosoma 21 , el cigoto
resultante tendrá síndrome de Down familiar. Si un gameto que
carece de cr o1noso1n a 21 se fusiona con un ga1neto normal, el
cigoto resultante tendrá monosomía 21 y será abortado espontá-
neamente .
En el tercer tipo de segregación, el cromosoma de translocación
y la copia normal del cro1nosoma 14 se segregan juntos (fig. 8-
23c). Presumiblemente, este patrón es raro, porque los dos centró-
1neros provienen del cromosoma 14 y en general se separan uno
del otro. Todos los gametos producidos por este proceso son anor-
males: la mitad da por resultado monosomía 14, y la otra mitad,
trisomía 14. Todos se abortan espontáneamente.
Por consiguiente, solo tres de los seis tipos de gametos que
puede producir un por tador de translocación determinará el naci-
1niento de un be bé, y en teoría, estos gainetos de berían aparecer
con igual frecuencia. U n tercio de la descendencia de un portador
de translocación de bería ser portador de translocación como los
progenitores, un tercio debería tener síndrome de Down fanliliai·,
y un tercio debería ser norn1al. Sin embargo, en realidad menos
de un tercio de los hijos nacidos de p ortadores de translocación
tienen síndrome de Down, lo que sugiere que algunos de los en1-
briones con este síndro1ne son abortados espontánea1nente.
~ INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 32

r
Generación P Progenitor ' Un progenitor que es un 7 Progenitor portador
normal portador de u na t ranslocación r::--::::::::.::::::::::::==d
=e: ..:
u~n=a~t ~ran slocación
1

11 11
21 14
::am•:,:::::::, produce~
gamet os con estas posibles
1
21
1
14-21 14
1
combinaciones cromosómicas_ r--,:=::::::::,.._ Translocación

~ ametogénes~ - - - - - - - -- Gametogénesis i----------

1
(a) t (b) (c)

\. ~
Gametos

14- 21
íl
21 141
1
14-2 1 21 14 14-21 14
(O
21

( Generación F1
'\ - -*- -*- -*- -i- -i- -i--
Gametos
(il) Cigotos l11
Portador de
11 11
Normal
1111
Síndrome
11 1
Monosomía
111 1
Trisomía
11
Monosomía
translocación de Down 21 (aborto) 14 (aborto) 14 (aborto)
\ _____1
y
2/ de los nacídos vivos 1/ de los nacidos vivos
\. ) 3 3

D Si una persona normal se

' ... dos tercios de su descendencia será sana y normal ... pero un tercio tendrá , Otras combinaciones cromosómicas
aparea con un portador de
- incluso los portadores de la translocación- ... síndrome de Down. causaron aborto de los embriones.
una translocación ...

Figura 8-23. Los portadores de la translocación tienen mayor riesgo de tener hijos con síndrome de Down.
 Variación cromosóm ica 227

OTRAS TRISOMÍAS HUMANAS En los seres humanos, pocos aneu- Justo antes de la ovulación, se reanuda la meiosis y se completa la
pl oides autosómicos, aparte de aquellos con trisomía 2 1, nacen primera división, lo que produce un ovocito secundario. En este
v ivos. La uisomía 18, conocida también como síndrome de punto, vuelve a suspenderse la m eiosis y permanece así basta que
Edward, aparece con una frecuencia de alrededor de 1 cada 8000 un espermatozoide penetra en el ovocito secundario. La segunda
nacidos vivos. Los bebés con síndrome de Edward tienen disca- división meiótica tiene lugar de inmediato antes de que los núcleos
pacidad intelectual grave, ünplantación baja de las orejas, cuello del óvulo y el espermatozoide se unan para fonnar el cigoto.
corto, pies defonnados, dedos de la mano en garra, proble1nas Los ovoci tos primarios pueden permanecer suspendidos en
cardíacos y otras discapacidades. Pocos sobreviven más de un año diplotena durante muchos años antes de que se produzca la ovu-
después del nacimiento. La trisomía 13 tiene una frecuencia de lación y se reinicie la meiosis. Los componentes del huso y otras
alrededor de 1 cada 15 000 nacidos vivos, y sus características se estructuras requeridas para la segregación cromosómica se pue-
conocen en conjunto co1no síndrome de Patau. Entre ellas, se den alterar durante la prolongada detención de la meiosis, lo que
observan discapacidad intelectual, cabeza pequeña, frente incli- determina mayor aneuploidía en hijos de madres 1nayores. Según
nada, ojos pequeños, labio leporino y paladar hendido, poJidacti- esta teoría, no se observa ningún efecto de la edad en el sexo mas-
li a en manos y píes, y otros muchos problemas. Alrededor de la culino, porque los espennatozoides se producen continuamente
mitad de los niños con trisomía 13 mueren dentro del primer mes después de la pubertad sin suspensión prolongada de las divisio-
de vida, y el 95% muerte a los 3 años de edad. La trisomía 8 es nes meióticas.
todavía más rara, con una frecuencia que varía de alrededor de 1
en 25 000 a l en 50 000 nacidos vivos. Esta aneuploidía se carac- ANEUPLOIDÍA Y CÁNCER Muchas células tumorales tienen cromo-
teriza por discapacidad intelectual, contracción de los dedos de somas adicionales o faltantes, o an1bos; algunos tipos de tu1nores
las manos y los pies, orejas malformadas de implantación baja y se asocian de manera consistente con mutaciones cromosómicas
frente prominente. Muchos individuos con este trastorno tienen específicas, como aneuploidía y reordenamientos cromosómicos.
expectativa de vida normal. En el capítulo 23 se considera el papel de las mutaciones cromo-
sómicas en el cáncer.
ANEUPLOIDiA y EDAD MATERNA La mayoria de los casos de síndro-
n1e de Down y otros tipos de aneuploidía en seres humanos se
deben a falta de disyunción materna, y la frecuencia de aneuploidía CONCEPTOS
aumenta con la edad de la madre (fig. 8-24) . No se sabe con certe-
za por qué la edad materna se asocia con falta de disyunción. Los En los seres humanos, los cromosomas sexuales aneuploides son más
mamíferos de sexo femenino nacen con ovocitos p1imarios suspen- comunes que los autosomas aneuploides. La desactivación del cromo-
didos en el subestadio de diplotena de la profase I de la meiosis. soma X previene problemas de dosis génica para los genes ligados al
cromosoma X. El síndrome de Down se debe a la presencia de tres
copias funcionales del cromosoma 2 1, ya sea por trisomía (síndrome
de Down primario) o por una translocación robertson iana (síndro-
90 me de Down familiar).
[ Las madres mayores tienen :=:::::==--- Uno en /
mayor probabilidad de tener un 12 •
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
80 1 o con síndrome de Down ...
Explique en forma sucinta por qué en seres humanos y mamíferos
70 las aneuploid ías de cromosomas sexuales son más comunes que
QJ
E o
V,
las aneuploidías autosómicas.
o +-'
.._ e
-e -~ 60
,e E
V')'ü
e ~ Disomía uniparental
o e
~ =-= 50
o E
,e: l...
Normalmente, los dos cromosomas de un par homólogo se here-
·-e: oa. dan de progenitores diferentes: uno del padre y uno de la 1nadre.
QJ e 40 El desarrollo de técnicas 1noleculares que facilitan la identifica-
-e ~
e oº
QJ
ción de secuencias específicas de DNA (véase cap. 19) ha posibi-
E QJ
,::, -e 30 ...que las madres • litado determinar los orígenes parentales de los cro1noso1nas.
z más jóvenes. Sorprendentemente, algunas veces ambos cromoson1as se here-
- - - - - -~ dan del mismo progenitor, un cuadro deno1ninado disomía uni-
20 parental.
Es probable que muchos casos de disomia uniparental se origi-
Uno en
10 100 •
nen como una trisomía. Si bien la mayo1ia de las trisonúas auto-
Uno en Uno en
sómicas son letales, un e1nbrión trisónlico puede sobrevivir si uno
900
./
-·
2 000
• de los tres cromosomas se pierde en etapas tempranas del desa-
• rrollo. S i solo por azar los dos cromosomas restantes provienen
20 30 40 50
Edad de la madre del mismo progenitor, se produce una di somía uniparental.
La disomía uniparental viola la regla de que los niños afectados
Figura 8-24. La incidencia de síndrome de Down primario y de otras por un trastorno recesivo aparecen solo en familias en las que
aneuploidías aumenta con la edad de la madre. ambos padres son portadores. Por ejemplo, la fibrosis quística es
228 CAPITULO 8
una enfermedad autosómjca recesiva; en genera], ambos progeni-
tores de un niño afecto son heterocigóticos para la mutación de la
fibrosis quística en el cromosoma 7. Sin embargo, en una peque-
ña proporción de personas con fibrosis quística, solo uno de los
progenitores es heterocigótico para la n1utación de fibrosis quísti-
ca. En estos casos, la fibrosis quística se debe a disomía uniparen-
tal: la persona que tiene fibrosis quística heredada del progenitor
heterocigótico tiene dos copias del cromosoma 7 portador del
alelo defectuoso de fibrosis quística y ninguna copia del alelo
normal del otro progenitor.
Asim.ismo, se ha observado disomía uniparental en el síndrome
de Prader-Willi, un trastorno raro que aparece cuando falta una
copia paterna de un gen del cromosoma 15. Si bien la mayoría de
los casos de síndro1ne de Prader-Willj se deben a una deleción
cromosómica que elimina la copia paterna del gen (véase p. 125
del cap. 5), del 20 al 30% de los casos aparecen cuando se here-
dan an1bas copias del cromosom a 15 de la madre y ninguna copia
del padre.
Mosaicismo
La falta de disyunción en una división mitótica puede generar
parches de células en las que cada célula tiene una anomalía cro-
mosómica y otros parches en los que cada célula tiene un carioti-
po nonnal. E ste tipo de falta de disyunción determina regiones de
tejido con diferentes composiciones cromosómicas, una condi-
ción denominada mosaicismo. Cada vez más evidencia sugiere
que el mosaicismo es más frecuente de lo que suele reconocerse.
Por ejemplo, alrededor del 50% de los casos diagnosticados de
síndrome de Turner (individuos con un solo cromosoma X) son
en realidad mosaicos, que tienen algunas células 45,X y algunas
células nor1nales 46,X:X. Algunos incluso pueden ser 1nosaicos
para dos o más tipos de cariotipos anormales. Por lo general, el
mosaico 45,X/46,XX surge cuando se pierde un cromosoma X
poco después de la fecundación de un embrión XX.
Las moscas de la fruta que son n1osaicos XX/XO (O designa la
ausencia de un cromosoma homólogo; XO indica que la célula
tiene un único cromosoma X y ningún cromosoma Y) desarrollan
una 1nezcla de rasgos masculinos y femeninos, porque en las
moscas de la fruta la presencia de dos cromosomas X produce
rasgos femeninos, y la presencia de un solo cromosoma X produ-
ce rasgos masculinos (fig. 8-25). En las moscas de la fruta, el sexo
se determina de manera independiente en cada célula durante el
curso del desarrollo. Las células que son XX expresan rasgos
femeninos; las que son XO expresan rasgos 1nasculinos. Estos
mosaicos sex uales se denominan ginandromorfos. Normalmen-
te, los genes recesivos ligados al cromosoma X están enmascara-
dos en las hembras heterocigóticas, pero en mosaicos XX/XO se
CONCEPTOS
En la disomía uniparental, un individuo t iene dos copias de un cromo-
soma de uno de los progenitores y ninguna copia del otro. La disomía
uniparental puede aparecer cuando un embrión trisómico pierde uno
de los cromosomas triplicados en etapas tempranas del desarrollo. En
el mosaicismo, diferentes células dentro del mismo individuo t ienen
distintas composiciones cromosóm icas.
Fenotipo ~ Fenotipo ó
(XX) (XO)
Ojo blanco
Ala de tipo silvest: / \\ Ala diminuta
Figura 8-25. El mosaicismo para los cromosomas sexuales produce
un individuo ginandromorfo. Esta mosca de la fruta ginandromorfa
XX/XO tiene un cromosoma X de tipo silvestre y un cromosoma X con ale-
los recesivos para ojos blancos y alas diminutas. El lado izquierdo de la
mosca tiene un fenotipo femenino normal, porque las células son XX y los
alelos recesivos de un cromosoma X están enmascarados por la presencia
de alelos de tipo silvestre en el otro. El lado derecho de la mosca tiene un
fenotipo masculino con ojos blancos y ala diminuta, porque las células han
perdido el cromosoma X de tipo silvestre (son XO), lo que permite la expre-
sión de los alelos para ojos blancos y alas diminutas.
expresará cualquier gen recesivo ligado al cromosoma X presen-
te en las céJulas con un único cromosoma X.
8.4 La poliploidía es la presencia de más
de dos juegos de cromosomas
Como se comentó en la introducción de este capítulo, algunos
organismos (por ejempl o, las bananas) tienen mےs de dos juegos
de cromosomas y son poliploides. Los poliploides incluyen tri-
ploides (3 n), tetraploides (4n), pentaploi.des (5n) e incluso núme-
ros más altos de juegos de cromosomas.
La poliploidía es común en las plantas y es un mecanismo
impo1tante en la evolución de especjes nuevas. Ali·ededor del 40%
de las especies de plantas con flores, y del 70 al 80% de las hier-
bas, son poliploides. Entre ellas, hay una serie de plantas impor-
tantes para la ag1icultura, como trigo, avena, algodón, patatas y
azúcar de caña. La poliploidía es menos frecuente en animales,
pero se observa en algunos invertebrados, peces, sala1nandras,
ranas y lagartijas. En la naturaleza, no se conocen poliploides via-
bles entre las aves, pero se ha comunicado por lo menos un mamí-
fero poliploide: una rata de la Argentina.
Consideraremos dos tipos ilnportantes de poliploidía: autopo-
liploidía , en la que todos los juegos de cromosomas pertenecen a
una sola especie, y alopoliploidía, en la que los juegos de cro1no-
somas pertenecen a dos o más especies.
Autopoliploidía
La autopoliploidía es causada por accidentes de la mitosis o la
meiosis que producen juegos extra de cromosomas, todos prove-
nientes de una sola especie. Por ejemplo, la falta de disyunción de
todos los cromosomas durante la mitosis en un embrión 2n tem-
prano duplica el número de cromosomas y produce un autote-
traploide (4n), como ilustra la figura 8-26a. Puede aparecer un
autotriploide (3n) cuando la falta de disyunción en la meiosis pro-
 Variación cromosómica 229

(a) Autopoliploidía por mitosis

MITOSIS

/\ u
Separación de¡ Falta de disyunción
Replicación cromátidas ~ (ausencia de división
hermanas celular)

Célula embrionaria Célula autotetraploide

temprana diploide (2n) (4n)

(b) Autopoliploidía por meiosis Gametos Cigotos

MEIOSIS 1 MEIOSIS 11

l\11 /1
/\ " H\u Falta de
disyunción
2n
1n

/\1111
Diploide (2n) /\U 2n
Feditidáimn
Triploide (3n)

La falta de disyunción en ~ ue después se fusiona

la meiosis I produce un con un gameto 1n para
gameto 2n ... producir un autotriploide.

Figura 8-26. La autopoliploidía puede surgir por falta de disyunción en la mitosis o la meiosis.

duce un gameto diploide que después se fusiona con un gameto
haploide normal para producir un cigoto triploide (fig. 8-26b).
Alternativamente, los triploides pueden surgir de un cruzamiento
entre una autotetraploide que produce gametos 2n y un diploide
que produce gametos ln. Es posible inducir experimentalmente
falta de disyunción con colchicina, un agente químico que altera
la formación del huso. A menudo, este agente se usa colchicina
para inducir poliploidía en plantas importantes para la agricultu-
ra y la ornamentación.
Como todos los juegos de cromosomas de los autopoliploides
pertenecen a la misma especie, son homólogos e intentan alinear-
se en la profase I de la n1eiosis, lo que suele producir esterilidad.
Considere la 111eiosis en un autotriploide (fig. 8-27). En la meio-
sis de una célula diploide, se aparean y se alinean dos cromoso-
mas homólogos, pero en los autotriploides, hay tres cromosomas
homólogos. Uno de los tres homólogos puede no alinearse con los
otros dos, y este cro111osoma no alineado se segregará de 1nanera
aleatoria (véase fig. 8-27a). El azar determina qué gameto obtie-
ne el cromosoma extra, lo que será diferente para cada grupo de
cromosomas homólogos. Los gametos resultantes tendrían dos
copias de algunos cromosomas y una copia de otros. Aun si se ali-
nean los tres cromosomas, dos cromosomas deben segregarse a
un gameto, y un cromosoma al otro (véase fig. 8-27b). En ocasio-
nes, la presencia de un tercer cromosoma interfiere con la alinea-
ción normal, y los tres cromosomas ingresan en el mismo game-
to (véase fig. 8-27c).
Sin importar cómo se alinean los tres cromosomas, su segrega-
ción aleatoria creará gametos desequilibrados, con distintos
núm.eros de cromosomas. U n gameto producido por meiosis en
un autotriploide de este tipo pod1ía recibir, por ejemplo, dos
copias del cromosoma 1, una copia del cromosoma 2, tres copias
del cromoso1na 3 y ninguna copia del cromosoma 4. Cuando el
gameto desequilibrado se une con un gameto normal (o con otro
gameto desequilibrado), el cigoto resultante tiene diferentes
números de los cuatro tipos de cromosomas. E sta diferencia del
número genera un desequilibrio de la dosis génica en el cigoto,
que es letal. Por esta razón, en general los triploides no producen
descendencia viable.
En los autopoliploides de nú111ero par, como los autotetraploi-
des, los cro111oso1nas homólogos pueden, en teoría, fonnar pares
y dividirse por igual. Sin embargo, este evento rara vez se produ-
ce, de manera que estos tipos de autotetraploides también pro-
ducen gametos desequilibrados.
Por lo general, la esterilidad que acompaña a la autopoliploidía
se ha aprovechado en agricultura. Como se analiza en la introduc-
ción de este capítulo, las bananas triploides (3n = 33) son estéri-
les y no tienen semillas. De n1odo similar, se han creado sandías
trip] oides sin semillas, muy comercializadas en la actualidad.
Alopoliploidía
La alopoliploidía se origina por hibridación entre dos especies; el
poliploide resultante porta juegos de cromoso1nas derivados de
dos o más especies. La figura 8-28 muestra cómo la alopoliploi-
día puede originarse a partir de dos especies lo suficientemente
relacionadas como para que se produzca hibridación entre ellas.
230 CAPITULO 8

Algunos de los
MEIOSIS 1 MEIOSIS 11
Dos cromosomas homólogos gametos resultantes
se aparean, mientras que el Primera división tienen cromosomas
otro se segrega al azar. meiótica extra y algunos no
i-

(a)
7 [Ana fas e 1
tienen ninguno.

\\ .. 2n

Apareamiento de dos de
..
tres cromosomas homólogos

Los tres cromosomas se aparean y

se segregan de manera aleatoria.
..
(b)
\ I 1n
..
..
Célula triploide Apareamiento de los \\ 1
(3n) tres cromosomas homólogos 2n

Ninguno de los cromosomas

se aparea, y los tres ingresan~

~
en la misma célula.
\f _____... 111 111
(e) 3n

..
Falta de apareamiento
Ausencia de
cromosomas

Figura 8-27. En la meiosis de un autotriploide, los cromosomas homólogos pueden aparearse, o no, de tres mane-
ras posibles. Este ejemplo ilustra el apareamiento y la segregación de un solo juego homólogo de cromosomas.

La especie 1 (AABBCC, 2n = 6) produce ga1netos haploides con
cron1osomas ABC, y la especie Il (GGHHil, 2n = 6) produce
gametos con cro1nosomas GHI. Si se fusionan los ga1netos de las
especies I y Il, se creará un híbrido con seis crom.o somas (ABCG-
HI). E ste hfbrido tiene el mismo número de cromosomas que el
de las dos especies diploides; por lo tanto, se lo considera diploi-
de. Sin embargo, dado que los cromosomas de los hfbridos no son
homólogos y no se aparean ni segregan de n1anera adecuada en la
meiosis, este híbrido es funcionalmente haploide y estéril.
El híbrido esté1il es incapaz de producir gan1etos viables por
meiosis, pero puede perpetuarse a sí mi smo por m_itosis (repro-
ducción asexual). En contadas ocasiones, se produce falta de dis-
yunción durante la división meiótica, lo que causa la duplicación
del número de cro1nosomas y produce un alotetraploide cuyos
cromoso1nas son AABBCCGGHHil. Este tipo de alopoliploide
que consiste en dos genomas diploides combinados se denomina
a veces anfidip)oide. Si bien el número de cromosomas se ha
duplicado en comparación con el que se hallaba presente en cada
una de las especies parentales, el anfidiploide es funcionalmente
diploide: cada cromoso1na tiene uno y solo un co1npañero homó-
logo, que es exactan1ente lo que requiere la m eiosis para una
segregación apropiada. Ahora, el anfidiploide puede presentar
meiosis normal para producir gametos equibbrados que tengan
sets cromosomas.
En la década de 1920, George Karpechenko creó organismos
poliploides en for1na experimental. El repollo (Brassica oleracea,
2n = 18) y el rábano (Raphanus sativa, 2n = 18) son plantas
importantes para la agricultura, pero en general solo se consumen
las hojas del repollo y las raíces del rábano. Karpechenko quería
producir una planta con hoj as de repollo y raíces de rábano, de
manera que no se desperdiciara ninguna parte de la planta. Con10
tanto el repollo corno el rábano tienen 18 cro mosomas,
Karpechenko pudo cruzarlas con éxito y produjo un hfbrido con
2n = 18, pero lamentablemente el híbrido resultó estéril. Después
de varios cruzamientos, advirti ó que una de sus plantas híbridas
había producido algunas semillas. Cuando las plantó, crecieron
 Variación cromosóm ica 231

Generación P
Especie 1 Especie 2

La especie I tiene 2n = 14, y la especie II tjene 2n =20. Mencione

todos los posibles números de cromosomas que pueden hallarse

AA B B C C GG H H 1 1
11 en los siguientes individuos.
a. Un autotriploide de la especie I.
= =
i
(2n 6) ~--....:.::._-~ (2n 6)
I
Gametogénesis ] ¡ b. Un autotetraploide de la especie II.
c. Un alotriploide formado a partir de la especie I y la espe-
cie II.
Gametos 1 11 d. Un alotetraploide formado a partir de la especie I y la
especie II.
AB GH

Fus ió La hibridación entre Estrategia de solución

___,~ dos especies diploides
(2n= 6) roduce ... ¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?

( Generación F1 Todos los posibles números de cromosomas de los individuos

... un híbrido con
Híbrido seis cromosomas
con el tipo de poliploidía indicada.
1 no homólogos ... ¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
... que no se aparean ni ■ La especie I tiene 2n = 14 y la especie II tiene 2n = 20.

111--
ABCGH 1
se segregan de manera
correcta en la meiosis,
lo que da origen a
gametos no viables, no
■ El tipo de poliploidía que tiene e1 individuo.

(2n = 6) equilibrados. Pasos de la solución

Falta de disyunción
en una división El número haploide de cromosomas (n) para la especie I es 7 y
Gametogénesis
mitótica inicial para la especie II es 10.
a. Un individuo triploide es 3n. Un error frecuente es asumir

111 rrn que 3n significa el triple de cromosomas de un individuo

~ Gametos
no viables
Alotetraploide (anfidiploide)
, La fa lta de disyunción
determina una
duplicación de todos
los cromosomas, lo que
produce un alotetra-
normal, pero recuerde que los individuos nor1nales son 2n.
Como n para la especie I es 7 y todos los genomas de un
autopoliploide son de la misma especie, 3n = 3 x 7 = 2 1.
b. Un autotetraploide es 4n con todos los genomas de la
misma especie. Para la especie II, n es 10, de 1nanera que
4n = 4 X 10 = 40.
c. Un triploide es 3n. Por definición, un alopoliploide debe

11 11 11 -
AAB B CCGGHH 1 1
ploidtj4o= 1 2,l. tener genomas de dos especies diferentes. Un alotriploide
podría tener lo de la especie I y 2n de la especie II o (1 x
7) + (2 x 10) = 27. Alternativamente, podría tener 2n de la
(4n = 12)
Gametogénesis especie I y ln de la especie II o (2 x 7) + (1 x 10) = 24. Por
lo tanto, el número de cromosomas de un alotriploide
D El apareamiento y~ podría ser 24 o 27.
segregación de los
cromosomas son > d. Un tetraploide es 4n. Por definición, un alotetraploíde debe
normales y producen 1
gametos equilibrados.
11 1 11 1
' ABCGHI
tener genomas de por lo menos dos especies diferentes. Un
alotetraploide podría tener 3n de la especie I y l n de la
especie II o (3 X 7) + (1 X 10) = 31; o 2n de la especie I y
Gametos 2n de la especie II o (2 x 7) + (2 x 10) =34; o ln de la espe-
cie I y 3n de la especie II o (1 x 7) + (3 x 10) = 37. Por lo
Figura 8-28. La mayoría de los individuos alopoliploides se originan tanto, el número de cromosomas de un alotetraploide podría
por hibridación entre dos especies, seguida de duplicación cromosó- ser 31, 34 o 37.
mica.

plantas fé rtiles y viables de estas semillas. El análisis de sus cro-

mosomas reveló que las plantas eran alotetraploides, con 2n = 36 ► Para práctica adicional, intente resolver el Problema 38 al final del
cromosomas. Sin embargo, para gran desaliento de Karpechenko, capítulo.
las nuevas plantas tenían raíces de repollo y hojas de rábano.
232 CAPÍTULO 8

Generación P Planta silvestre Cuadro 8-2 Ejemplos de plantas de cultivo poliploides

Trigo einkorn (Aegi/ops spe/toides
(Triticum uratu) o especie relacionada) Tipo de Número de
Planta poliploidía Ploidía cromosomas
Patata (papa) Autopoliploid ía 4n 48
X
Banana (plátano) Autopoliploidía 3n 33
Genoma AA Genoma BB Maní Autopoliploidfa 4n 40
(2n= 14) (2n= 14)
Batata Autopoliploidía 6n 90
Gametos Tabaco Alopoliploidía 4n 48
Algodón Alopoliploidía 4n 52
Trigo Alopoliploidía 6n 42
( Generación F1 Avena Alopoliploidía 6n 42
Híbrido Azúcar de caña Alopoliploidía 8n 80
Fruti lla Alopoliploidía 8n 56
GenomaAB
(2n= 14) Fuente: F.C. Elliot, Plant Breeding and Cytogenetics (Nueva York: McGraw-
Hill, 1958) .

Trigo emmer Planta silvestre

(Triticum turgidum) (Aegilops tasuch;;) Significación de la poliploidía
1 /,
En numerosos organismos, el volumen celula r se correlaciona con
el volumen nuclear qu e, a su vez, es determinado por el tamaño
X del genoma. Por consiguiente, el aumento del número de cromo-
somas en caso de poliploidía suele asociarse con un incre1nento
GenomaAA BB O Genoma DD del tamaño celular, y muchos poliploides son físicamente más
(2n= 28) \ (2n= 14) j grandes que Los cüploides. Los agricultores han aprovechado este
efecto para producir plantas con hojas, flores, frutos y semjllas
más grandes. Es probable que el genoma hexaploide (6n = 42) del
( Generación F2 trigo contenga cromosomas derivados de tres especies silvestres
distintas (fig. 8-29). En consecuencia, las semillas del trigo
Híbrido
moderno son 1n ás grandes que las de sus predecesoras. Muchas
otras plantas de cultivo tan1bién son poliploides (cuadro 8-2).
Geno maA BD La poliploidía es menos frec uente en animales que en plantas
(3n= 21)
por varias razones. Según se comentó, la alopoliploidía requiere
hibridación entre diferentes especies, lo que sucede con menor
frecuencia en animales que en plantas. A menudo, el comporta-
miento ani1nal impide el cruzamiento entre especies, y la comple-
Trigo harinero
(Triticum aestivum)
jidad del desarrollo animal hace que la 1nayoría de los híbridos
entre especies no sean viables. Muchos de los animales poliploi-
des que, de hecho, se originan pertenecen a grupos que se repro-
ducen por partenogénesis (un tipo de reproducción en el que un
animal se desairolla a partir de un óvulo no fecundado). Así, la
reproducción asexual puede facilitar el desai-rollo de poliploides,
Genoma AA BB DD
quizá porque la perpetuación de lúbridos a través de esta ofrece
(6n= 42) más oportuni dades de falta de disyunción que la reproducción
sex ual. Solo se han comunicado unos pocos bebés humanos
poliploides, y la mayoría murió en el término de pocos días del
Figura 8-29. El trigo harinero moderno, Triticum aestivum, es un hexa-
nacirniento. Se observa poliploidía (por lo general, triploidía) en
ploide, con genes derivados de tres especies diferentes. Dos especies
diploides, I uratu (n = 14} y quizá Aegilops speltoídes o una especie relacio- alrededor del 10% de los fetos hun1anos abortados espontánea-
nada (n = 14) se cruzaron originalmente para producir un híbrido diploide mente .
(2n = 14), que presentó una duplicación cromosómica para crear T. turgidum
(4n = 28). Un cruzamiento entre T. turgidum y A. tauschíí (2n = 14) produjo IMPORTANCIA DE LA POLIPLOIDÍA EN LA EVOLUCIÓN La poliploidía,
un híbrido triploide (3n = 21) que después sufrió una duplicación cromosómi- en particular la alopoliploidía, a menudo da origen a nuevas espe-
ca para producir, finalmente, T. aestivum, que es hexaploide (6n = 42). cies y ha tenido pait icular importancia en la evolución de las plan-
 Variación cromosómica 233

Cuadro 8-3 Diferentes tipos de mutaciones cromosómicas

Mutación cromosómica Definición

Reordenamiento cromosómico Cambio de la estructura del cromosoma

Duplicación cromosómica
Deleción cromosómica
Inversión
Inversión paracéntrica
Inversión pericéntrica
Translocación
Translocación no recíproca
Translocación recíproca
Duplicación de un segmento del cromosoma
Deleción de un segmento del cromosoma
Segmento cromosómico invertido 180 grados
Inversión que no incluye el centrómero en la región invertida
Inversión que incluye el centrómero en la región invertida
Movimiento de un segmento cromosómico a un cromosoma no homólogo o a otra reg ión del mismo
cromosoma
Movimiento de un segmento cromosómico a un cromosoma no homólogo o a otra región del mismo
cromosoma sin intercambio reciproco
Intercambio entre segmentos de cromosomas no homólogos o entre regiones del mismo cromosoma

Aneuploidía Cambio del número de cromosomas individuales

Nu lisomfa Pérdida de ambos miembros de un par homólogo
Monosomfa Pérdida de un miembro de un par homólogo
Trisomía Ganancia de un cromosoma, que da como resultado tres cromosomas homólogos
Tetrasomía Ganancia de dos cromosomas homólogos, que da como resultado cuatro cromosomas homólogos

Poliploidía Adición de juegos completos de cromosomas

Autopoliploidía Poliploidía en la que los juegos adicionales de cromosomas provienen de la misma especie
Alopoliploidía Poliploidía en la que los juegos ad icionales de cromosomas provienen de dos o más especies

'

tas con flores. La duplicación ocasional del genoma por poliploi- CONCEPTOS
día ha contribuido de manera importante al éxito evolutivo de '

varios grupos. Por ejemplo, Saccharomyces cerevisiae (levadur a)
es un tetraploide que ha experimentado duplicación de todo el
genoma hace alrededor de 100 millones de años. El genoma de
los vertebrados se ha duplicado dos veces, una vez en el ancestro
común de los vertebrados mandibulados y nuevamente en el
ancestro de los peces. Ciertos grupos de vertebrados, como algu-
nas ranas y algunos peces, han experimentado una poliploidía
adicional. Las plantas de cereales han presentado varios eventos
de duplicación del genoma. E l cuadro 8-3 resume los diferentes
tipos de mutaciones cromosómicas.
La ploidía es la presencia de un juego extra de cromosomas : los auto-
poliploides tienen juegos extras de cromosomas de la misma especie;
los alopoliploides tiene juegos de cromosomas extras de dos o más
especies. Los problemas en el apareamiento y la segregación a menu -
do producen esterilidad en los autopoliploides, pero muchos alopoli-
ploides son fértiles.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
La especie A tiene 2n = 16 cromosomas y la especie B tiene 2n = 14.
¿ Cuántos cromosomas esperaría hallar en un alotriploide de estas dos
especies?
a. 21 o 24 c. 22 o 23
b. 42 o 48 d. 45

RESUMEN DE CONCEPTOS
■ Hay tres tipos básicos de mutaciones cromosómicas: 1) reor-
denamientos cro1nosómicos, que son cambios de la estructura
de los cro1nosomas; 2) aneuploidía, que es un aumento o una
disminución del nún1ero de cromosomas, y 3) poliploidía, que
es la presencia de j uegos extra de cromoson1as .
■ Los reordenamientos cromosómicos incluyen duplicaciones,
deleciones, inversiones y translocaciones.
■ En individuos heterocigóticos para una duplicación, la región
duplicada formará un bucle cuando se aparean los cromoso-
111as homólogos en la m eiosis. Las duplicaciones suelen ~jer-
cer efectos pronunciados sobre el fenotipo, debido al desequi-
librio de la dosis génica. Las duplicaciones segmentarías son
frecuentes en el genon1a humano.
■ En individuos heterocigóticos para una deleción, uno de los
cromosomas formará un bucle durante el apareamiento en la
meiosis. Las deleciones pueden causar la expresión de alelos
reces1vos.
■ Las inversiones pericéntricas incluyen el centrómero; las
inversiones paracéntricas, no . En individuos heterocigóticos
para una inversión, los cromosomas homólogos farman bucles
234 CAPITULO 8

de inversión, y dentro de la región invertida se observan
reducción de la recombinación.
■ En los heterocig6ticos para translocación, los cromosomas
forman estructuras en cruz durante la meiosis, y la segrega-
ción de los cromosomas produce gametos desequilibrados.
■ Los sitios frágiles son constricciones o hiatos que aparecen en
regiones particulares de los cromosomas de las células que
crecen en cultivo y son proclives a la rotura en ciertas condi-
ciones.
■ Las variaciones del número de copias (VNC) son diferencias
de la cantidad de copias de secuencias de DNA e incluyen
duplicaciones y deleciones. Estas variantes son frecuentes en
el genoma humano; algunas se asocian con enfermedades y
trastornos.
■ La nulisomía es la pérdida de dos cromosomas homólogos;
la monosomía es la pérdida de uno de los cromoso1nas
homólogos; la trisomía es la adición de un cromosoma
homólogo; la tetrasomía es la adición de dos cromosomas
homólogos.
■ La aneuploidía suele provocar efectos fenotípicos drásticos,
porque induce desequilibrio de la dosis génica.
■ El síndrome de Down primario es causado por la presencia de
tres copias completas del cromosoma 2 1, mientras que el sín-
drome de Down familiar es causado por la presencia de dos
copias normales del cromosoma 21 y una tercera copia que se
une a otro cromoson1a a través de una translocación.
■ .L a disomía uníparental es la presencia de dos copias de un
cromosoma de un progenitor y de ninguna copia del otro. El
mosaicismo es causado por la falta de disyunción en una divi-
sión 1nitótica ten1prana, que determina diferentes composicio-
nes cromosónlicas en distintas células de un mismo individuo.
■ Todos los cromosomas de un autopoliploide derivan de una
especie; los cron1osomas de un alopoliploide provienen de dos
o más especies.

TÉRMINOS IMPORTANTES

alopolipoidía (p. 228)
aneuploidía (p. 222)
anfidiploidía (p. 229)
autopoliploidía (p. 228)
cromátida acéntrica (p. 218)
cromátida dicéntrica (p. 2 18)
cromosoma acrocéntrico
(p. 2 10)
, .
cromosoma metacentr1co
(p. 210)
cromosoma submetacéntrico
(p. 210)
cromosoma telocéntrico
(p. 210)
deleción cromosómica (p. 214)
disomía uniparental (p. 227)
duplicación cromosó1nica
(p. 212)
duplicación desplazada (p. 212)
duplicación en tándem (p. 212)
duplicación inversa (p. 212)
duplicación segmentaria (p.
214)
efecto de posición (p. 217)
gametos desequilibrados
(p. 229)
gen haploinsuficiente (p. 216)
ginandro1norfo (p. 228)
. ., / .
mvers1on cromoso1n1ca
(p. 216)
inversión paracéntrica (p. 216)
inversión pericéntrica (p.216)
monosomía (p. 222)
mosaicismo (p. 228)
mutación cromosómica
(p. 210)
nulisomía (p. 222)
poliploidía (p. 222)
portador de translocación
(p. 226)
puente dicénttico (p. 218)
reordenarniento cromosórnico
(p. 2 12)
segregación adyacente-1
(p. 221)
segregación adyacente-2 (p. 221)
segregación alterna (p. 221)
seudodominancia (p. 216)
síndrome de Down (triso mía
2 1) (p. 225)
síndrome de Down familiar
(p. 225)
síndro1ne de Down prin1ario (p.
225)
síndrome de Edward (trisomía
18) (p. 227)
síndrome de Patau (t:risomía
13) (p. 227)
síndrome del cromoso,na X
frágil (p. 221)
sitio frágil (p. 221)
tetrasomía (p. 222)
translocación (p. 219)
translocación no recíproca
(p. 2 19)
translocación recíproca (p. 219)
translocación robertsoniana
(p . 219)
trisomía (p. 222)
trisornía 8 (p. 228)
variación del número de copias
(VNC) (p. 222)

l. a 6. La compensación de la dosis evita la expresión de copias adi-

2. La seudodominancia es la expresión de una mutación recesi- cionales de genes ligados al cromoson1a X en mamíferos, y
va. Se produce cuando el alelo de tipo sil vestre dominante de hay escasa información en el cromosoma Y, de manera que
un individuo heterocigótico está ausente por deleción en un las copias extra de los cro1nosomas X e Y no ejercen efectos
cromosoma. importantes sobre el desarrollo. Por el contrario, no hay nin-
gún mecanismo de compensación de la dosis en el caso de
3. c
los autosomas; en consecuencia, las copias extra de genes
4. b autosónucas se expresan, lo que altera el desarrollo y causa el
5. 37 aborto espontáneo de embriones aneuploides.
7. e
 Variación cromosómica 235

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
Un cromosom a tiene los siguientes segmentos, donde • representa el centrómero.

A B C D E • FG
¿Qué tipos de mutaciones cro n1osómicas se requieren para cam biar este cromosoma a cada uno de los
siguientes cromosomas? (En algunos casos, se puede requerir más de una mutación crom osómica).

a. ABE • E G d.AF • EDCRG

b. A E D CB • F G e. A B C D E E D C • E G
c. A B A B C D E • E G

Estrategia de solución

¿Qué información se requ iere en su respuesta al problema?
Los tipos de mutaciones cromosómícas que darían origen a los
cromosom as mostrados.
¿Qué información se proporciona para resolver el
problema?
■ Los segmentos génicos originales hallados en el
crom osoma.
■ Los segmentos génicos modificados que se observan
después de las mutaciones.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Sección 8.2.
Pasos de la solución
a. El cromosoma m utado (A B E • E G) carece del segmento
C D ; por lo tanto, la mutación es una deleción.
b. El cromosom a mutado (A E D C B • E G) tiene una copia y
solo una de todos los segmentos génicos, pero e l segmento
BCD E está invertido 180 grados. Como el centrómero
no ha cambiado de lugar y no se encuentra en la región
invertida, esta mutación cromosómíca es una inversión
paracéntr ica.
c. El crom osom a mutado (A B A B C D E • F G) es más
largo de lo normal, y observamos que se ha duplicado
el segmento A B . Esta mutación es una duplicación en
tánde1n.
d. El cromosoma mutado (A E • E D C B G) es de longitud
n ormal, pero se ha modificado el orden de los genes y la
posición del centrómero; _por consiguiente, esta mutación es
una inversión pericéntrica de la región (B C D E • F).
e. El cromosoma mutado (A B C D E E D C • F G) contiene
una dup licación (C D E) que también está invertida; por
consiguiente, este cromosoma ha presentado una duplica-
ción y una inversión paracéntrica.

Problema 2
La especie I es diploide (2n = 4) y sus cr omosomas son AABB ; la especie relacionada II es djploide (2n = 6)
y sus cromosomas son MMNNOO. M encione los cro1n osomas que se ha]]arían en individuos con las sjguien-
tes mu taciones cromosómicas:
a. Autotriploidía en la especie I e. Tetrasomía en la especie I para el cromosoma A
b. Alotetraploidía que incluye las especies I y II f. Alotriploidía que incluye las especies I y II
c. Monosomía en la especie I g. Nulisomía en la especie II para el cromosoma N
d. Trisomía en la especie Il para el cromosoma M

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? ■ La especie I tiene cromosomas AABB.

Las designaciones con letras de los cromoso1nas que se hall.a- ■ La especie II es diploide con 2n = 6.
rán en individuos con cada tipo de mutación. ■ La especie II tiene cromosomas MMNNOO.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema? Para obtener ayud a con est e problema, repase:
■ La especie I es diploide con 2n = 4. Secciones 8.3 y 8.4.
 236 CAPITULO 8
Pasos de la solución
a. Un autotriploide es 3n y todos sus cromosomas provienen
Pista: determi-
ne primero el de una misma especie; por lo tanto, un autotriploide de la
complemento especie I tendrá cromosomas AAABBB (3n = 6).
genómico
haploide para b. Un alotetraploide es 4n, y sus cromosomas provienen de
cada especie. más de una especie. Un alotetraploide podría ser 2n de la
Para la especie 1,
n = 2 para los
especie I y 2n de la especie II, Jo que origina un alotetra-
cromosomas ploide (4n = 2 + 2 + 3 + 3 = 10) cromosomas AABBMMN-
AB, y para la NOO. Un alotetraploide tru11bién podría tener 3n de la
especie 11, n = 3
para los cromo-
especie I y ln de la especie II (4n = 2 + 2 + 2 + 3 = 9;
somas MNO. AAABBBMNO) o In de la especie I y 3n de la especie II
(4n = 2 + 3 + 3 + 3 = 11; ABMMMNNNOOO).
c. Un monosómico ha perdido un solo cromosoma, de
manera que un monosómico de la especie I sería 2n - 1 =
4 - 1 = 3. La monosomía podría incluir cualquiera de los
dos pares de cromosomas, con cromosomas ABB o AAB.
Sección 8. 1
l . Enumere los diferentes tipos de mutaciones cromosómicas y
defina cada una.
Sección 8.2
2. ¿Por qué las copias extra de genes causan a veces efectos
fenotípicos drásticos?
3. Dibuje un par de cromosomas como se los vería durante la
sinapsis en la profase I de la meiosis en un individuo hete-
rocigótico para una duplicación cromosómica.
4. ¿Qué es la haploinsu:ficiencia?
5. ¿Cuál es la diferencia entre una inversión paracéntrica y una
peri céntrica?
6. ¿Cómo pueden causar efectos fenotípicos inversiones en las
que no se pierde ni se gana información genética?
7. Explique, con la ayuda de un dibujo, cómo se produce un
puente dicéntrico cuando tiene lugar entrecruzamiento en
un individuo heterocigótico para una inversión paracéntrica.
8. Explique por qué hay supresión de la recombinación en
individuos heterocigóticos para inversiones paracéntricas y
peri céntricas.
Sección 8. 1
18. Examine los cariotipos de las figuras 8-1 y 8-2. ¿Estos
cariotipos pertenecen a individuos de sexo rnasculino o
femenino?
*19. Qué tipos de mutaciones cromosómicas
a. aumentan la cantidad de material genético en un cro-
moso1na particular,
d. La trisomía requiere un cromosoma extra, de manera que
un trisómico de la especie II para el cromosoma M sería
2n + 1 = 6 + 1 = 7 (MMMNNOO).
e. Un tetrasómico tiene dos cromosomas homólogos extra;
en consecuencia, un tetrasómico de la especie I para el
cro1nosoma A sería 2n + 2 = 4 + 2 = 6 (AAAABB).
f. Un alotriploide es 3n, y los cromosomas provienen de dos
especies diferentes; por lo tanto, un alotriploide podría ser
3n = 2 + 2 + 3 = 7 (AABBMNO) o 3n = 2 + 3 + 3 = 8
(ABMMNNOO).
g. Un nulisómico ha perdido ambos cromosomas de un par
homólogo; por consiguiente, un nulisómico de la especie
II para el cron1osoma N sería 2n - 2 = 6 - 2 = 4
(MMOO).
9. ¿Cómo producen efectos genotípicos las translocaciones en
las que no se pierde ni se gana información genética?
10. Esquematice el apareamiento de cromosomas y los diferen-
tes patrones de segregación que pueden aparecer en un indi-
viduo heterocigótico para una translocación recíproca.
11. ¿Qué es una translocación robertsoniana?
Sección 8.3
12. Enumere cuatro tipos importantes de aneuploidía.
13. ¿Cuál es la diferencia entre síndrome de Down primario y
síndrome de Down familiar? ¿Cómo se origina cada tipo?
14. ¿Qué es la disomía uniparental y cómo se origina?
15. ¿Qué es el mosaicismo y cómo se origina?
Sección 8.4
16. ¿Cuál es la diferencia entre autopoliploidía y alopoliploi-
día? ¿Cómo se origina cada una?
17. Explique por qué los autopoliploides suelen ser estériles,
mientras que los alopolíploides a menudo son fértiles.
b. aumentan la cantidad de material genético en todos los cro-
mosomas,
c. reducen la cantidad de material genético en un cromosoma
particular,
d. cambian la posición de secuencias de DNA en un único cro-
1nosoma sin 1nodificar la cantidad de n1aterial genético,
 Variación cromosómica 237

e. movilizan DNA de un cromosoma a un cromosoma no c. Una hembra Notch de ojos blancos se aparea con un
homólogo. macho de ojos blancos.
24. .L a mosca de nariz verde tiene normalmente seis cromoso-
Sección 8.2 mas: dos metacéntricos y cuatro acrocéntricos. Un genetis-
*20. Un cromosoma tiene los siguientes segmentos, donde • ta examina los cron1osomas de una mosca de nariz verde
representa el centrómero: de aspecto extraño y descubre que solo tiene cinco cromo-
somas; tres de ellos son metacéntricos y dos, acrocéntri-
AB • CDEFG cos. Explique cómo podría haberse producido este cambio
del número de cromosomas.
¿ Qué tipos de mutaciones cromosómicas se requieren para *25. Un cromosoma de tipo silvestre tiene los siguientes seg-
cambiar este cromosoma a cada uno de los siguientes cro- mentos:
mosomas? (En algunos casos, se puede requerir 1nás de
una mutación cromosómica). ABC •D EFGHI
a. A B A B • e D E F G f.AB•EDCFG
Un individuo es heterocigótico para las siguientes muta-
b. A B • C DE A B F G g.C•BADEFG
ciones cromosómicas. Para cada mutación, esquematice
c.AB • CFEDG h. A B • C F E D F E D G cómo se aparearían los cromosomas de tipo silvestre y
d. A• CDEFG i. A B • e D E F e D FE G mutado en la profase I de la meiosis y muestra todas las
e. AB • CDE cadenas del cromosoma.

21. Un cromosoma tiene inicialmente los siguientes segmentos: a. A B C • D E F D E F G H I c.ABC•DGFEHI

AB•CDEFG
Dibuje el cromosoma que resuJtaiia de cada una de las
siguientes m utaciones e identifique sus segmentos.
a. Duplicación en tándem de DEF
b. Duplicación desplazada de DEF
c. Deleción de FG
d. Inversión paracéntrica que incluye DEFG
e. Inversión pericéntrica de BCDE
22. El siguiente diagrama representa dos cromosomas no
homólogos:
AB • CDEFG
RS • TUYWX
¿Qué tipo de mutación cromosómica producina cada uno
de los siguientes cromosomas?
a. A B • CD c.AB • TUVFG
RS•TUVWWXEFG RS•CDEWX
b. A U V B • C DE F G d.AB•CWG
RS •T WX RS•TUVDEFX
*23. La mutación Notch es una deleción del cromosoma X de
Drosophila ,nelanogaster. Las moscas hembra heterocigó-
ticas para Notch tienen una indentacíón en los bordes de
las alas. Notch es letal en caso de homocígosis o de hemi-
cigosis. La deleción Notch abarca la región del cromoso-
ma X que contiene el locus para ojos blancos, un rasgo
recesivo ligado al cromoso1na X. Indique los fenotipos y
las proporciones de la progenie producida en los siguien-
tes cruzamientos.
a. Una hembra Notch de ojos rojos se aparea con un
macho de ojos blancos.
b. Una hembra Notch de ojos blancos se aparea con un
macho de ojos rojos.
b. A B C • D H I d. A B, E D • C F G H I
26. Para el cromosoma mostrado en la figura 8-12, dibuje las
cron1átidas que se producirían después de un entrecruza-
miento doble bicatenario: un entrecruzamiento entre C y
D, y el otro entrecruzamiento entre D y E.
*27. Como se analizó en este capítulo, el entrecruzamiento
N."'"" dentro de una inversión pericéntrica produce cromosomas
!.~~ que tienen copias extra de algunos genes y ninguna copia
de otros. La fecundación de gametos que contienen este
tipo de cromosomas duplicados o deficientes suele dar por
resultado niños con síndromes caracterizados por retraso
del desarrollo, discapacidad intelectual, desarrollo anormal
de órganos y sistemas, y muerte prematura. Maarit Jaarola
y cols. examinaron células espermáticas individuales de
un hombre que era heterocigótico para una inversión peri-
céntrica en el cro1nosoma 8 y determinaron que hubo
entrecruzamie nto dentro de la inversión pericéntrica en el
26% de las divisiones meióticas (M. Jaarola, R. H. Martín
y T. Ashley. 1998. American Journal of Human Genetics
63:218-224).
Asuma que usted es consejero genético y que una pareja
busca asesoramiento. Tanto el hombre como la mujer son
fenotípicamente normales, pero la mujer es heterocigótica
para la inversión pericént1ica del cromosoma 8. El hombre
tiene cariotipo normal. ¿Cuál es la probabilidad de que
esta pareja tenga un hijo con un síndrome debilitante
como consecuencia del entrecruzamiento dentro de la
inversión pericéntrica?
*28. Un individuo heterocigótico para una translocación recí-
proca tiene los siguientes cromosomas:
AB • CDEFG
AB • CDYWX
RS•TUEFG
RS•TUVWX
a. Dibuje la disposición de apareamiento de estos
cromosomas en la profase I de la meiosis.
238 CAPITULO 8
b. Diagrame los patrones de segregación alterna,
adyacente-1 y adyacente-2 en la anafase I de la
me1os1s.
c. Mencione los productos que resultan de la segre-
gación alterna, adyacente-! y adyacente-2.
Sección 8.3
*29. El daltonismo es un trasto1no recesivo ligado al cromoso-
ma X humano. Un hombre joven con un cariotipo
47,XXY (síndrome de Klinefelter) es daltónico. Su herma-
no 46,XY también es daltónico. Ambos progenitores tie-
nen visión normal de los colores. ¿Dónde se produjo la
falta de disyunción que dio origen al hombre joven con
síndrome de Klinefelter? Asun1a que no hubo entrecruza-
miento en la profase I de la meiosis.
30. La epidermólisis ampollar de la unión (JEB, junctional
~ "
epidermolysis bullosa) es un trastorno dermatológico
grave que causa ampollas en todo el cuerpo. El trastorno
O! OAroS
se debe a mutaciones autosómicas recesivas en cualquiera
de tres locus que ayudan a codificar lanúnina 5, un com-
ponente importante de la membrana basal dermoepidérmi-
ca. Leena Pulkkinen y cols. describieron un varón recién
nacido que presentaba JEB y murió a los 2 meses de edad
(L. Pulkkinen y cols. 1997. A,nerican Journal o_f" Human
Genetics 61:611-619); los padres del niño eran sanos y no
estaban emparentados. El análi sis cromosómico reveló que
eJ recién nacido tenía 46 cromosomas de aspecto normal.
El análisis de DNA 1nostró que su madre era heterocigóti-
ca para un alelo causante de JEB en el locus LAMB3, que
se encuentra en el cromosoma 1. El padre tenía dos alelos
nonnales en este locus. Las huellas genéticas del DNA
de1nostraron que el hombre que se asumía que era el padre
del niño de hecho lo había concebido.
a. Asumiendo que no se produjeron mutaciones nuevas en
la fami lia, explique la presencia de una enfermedad
autosómica recesiva en el hijo cuando la 1nadre es hete-
rocigótica y el padre es homocigótico normal.
b. ¿Cómo podría probar su explicación? Asuma que hay una
serie de marcadores genéticos para cada cromosoma.
31. Algunas personas con síndrome de Turner son mosaicos
45,X/46,XY. Explique cómo podría aparecer este mosai-
c1s1no.
*32. Guillermo y Beatriz tienen dos hijos con síndrome de
Down. El hermano de Guillermo tiene síndrom e de Down,
y su hermana tiene dos hijos con síndrome de Down.
Sobre la base de estas observaciones, indique cuál de las
siguientes afirmaciones tiene n1ayor probabilidad de ser
correcta y cuál tiene la mayor probabilidad de ser inco-
rrecta. Explique su razonamiento.
a. Guillermo tiene 47 cromosomas.
b. Beatriz tiene 47 cromosomas.
c. Los hijos de Guillermo y Beatriz tienen 47 cromoso-
mas cada uno.
d. La hermana de Guillermo tiene 45 cromosomas.
e. Guillermo tiene 46 cromosomas.
f. Beatriz tiene 45 cromosomas.
g. El herman.o de Guillermo tiene 45 cromosomas.
33. En los mamíferos, la aneuploidía de los cromosomas
sexuales es más frecuente que la aneuploidía autosómica,
pero en los peces ambas aneup]oidías son igual de fre-
cuentes. Ofrezca una posible expli cación para estas dife-
rencias entre mamíferos y peces. (Pista: piense por qué la
aneuploidía de los cromosomas sexuales es más frecuente
que la aneuploidía autosómica en los 1nanúferos).
*34. Una pareja joven está planeando tener hijos. Como saben
que ha habido una cantidad sustancial de fetos muertos,
abortos y problemas de f e1tilidad en la familia del marido,
consultan con un consejero genético. Un análisis cro1nosó-
1nico revela que la n1ujer tiene un cariotipo normal, pero
el hombre tiene solo 45 cromosomas y es portador de una
translocación robertsoniana entre los cromosomas 22 y 13.
a. Enumere todos los tipos diferentes de gametos que
podría producir el ho1nbre.
b. ¿Qué tipos de cigotos se desarrollarán cuando cada uno
de los gametos producidos por el hombre se una con un
gameto norn1al producido por la mujer?
c. Si las trisomías y las monosomías que implican a los
cromosomas 13 y 22 son letales, ¿aproximadan1ente
qué proporción de descendencia sobreviviente se espera
que sea portadora de la translocación?
35. Aplicando técnicas reproductivas, Andrei Dyban y V. S.
~ "' Baranov (Cytogenetics of Mammalian Embryonic
., ••,., Development. Oxford: Oxford University Press, Clarendon
Press; Nueva York: Oxford University Press, 1987) crea-
ron ratones que eran t1ísómicos para cada uno de los dife-
rentes cromosomas del ratón. Observaron que solo se
desarrollaron los ratones con triso1nía 19. Los ratones tri-
sómicos para todos los demás cromosomas murieron en el
curso del desarrollo. En algunos de estos trisómicos, com-
pararon la duración del desarrollo (número de días des-
pués de la concepción hasta la muerte del e mb1íón) como
una función del tamaño del cromosoma del ratón presente
en tres copias (véase gráfico adjunto). Resuma sus hallaz-
gos presentados en este gráfico y ofrezca una posible
explicación de los resultados.
2,5
11"1
m
E Chr1
o_
11"1 .o
o a.
2 •
E co
~ 1,5
2u.._,. Chr 1~ hJ 14
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/ ª\
,e -o Chr16 Chr18
E o,5
~
o
11 12 13 14 15 16 17 18
Duración del desarrollo
embrionario (días)
(E. Torres, B. R. Williams y A . Amon. 2008. Genetics 179:737-746, fig. 2B).

Sección 8.4
36. La especie I tiene 2n = 16 cromosomas. ¿Cuántos cromo-
sornas se hallarán por célula en cada uno de los siguientes
mutantes de esta especie?
a. Monosómico e. Doble monosómico
b. Autotriploide f. Nulisómico
c. Autotetraploide g. Autopentaploide
d. Trísómico h. Tetrasómico
37. La especie I es díploide (2n = 8) y sus cromosomas son
AABBCCDD; la especie re lacionada II es diploide (2n =
8) y sus cromosomas son MMNNOOPP. ¿Qué tipos de
mutaciones cromosómicas tienen los individuos con los
siguientes juegos de cromosomas?
a.AAABBCCDD e. AAABBCCDDD
b. MMNNOOOOPP f. AABBDD
c. AABBCDD g. AABBCCDDMMNNOOPP
d.AAABBBCCCDDD h. AABBCCDDMNOP
*38. La especie I tiene 2n = 8 cromosomas; la especie II, 2n =
14 cromosomas. ¿Qué números de cromosomas se espera-
rían en individuos con las siguientes mutaciones cromosó-
micas? Dé todas las respuestas posi bles.
a. Alotriploidía que incluye las especies I y Il
b. Autotetraploidía en la especie Il
c. Trisomía en la especie I
d. Monosomía en la esp ecie II
e. Tetrasomía en la especie I
f. Alotetraploidía que incluye las especies I y Il
39. Suponga que la especie I de la figura 8-28 tiene 2n = 10,
y la especie II de la fi gui-a tiene 2n = 12 . ¿Cuántos cromo-
somas estarían presentes en el alotetraploide de la parte
infe1ior de la figura?
40. Considere una célula diploide que tiene 2n = 4 cromoso-
mas: un par de cromosomas metacéntricos y un par de
cromosomas acrocéntricos. Suponga que esta célula pre-
senta fa lta de disyunción que da origen a una célul a auto-
triploide (3n). Después, la célula triploide entra en 1neio-
sis. Dibuje los d iferentes tipos de gametos que pueden
resultar de la m eiosis de la célula t1iploide y muestre los
cromosomas presentes en cada tipo. Para distinguir entre
los diferentes cromosomas metacéntricos y acrocéntricos,
utilice un color distinto para dibujar cada cromosoma
metacéntrico y, de modo similar, para dibujar cada cromo-
soma acrocéntrico. (Pista: véase fig. 8-27).
41. Asuma que la célula autotriploide de la figura 8-27 tiene
3n = 30 cromosomas. Para cada uno de los gametos pro-
ducidos por esta célula, indique el número de cromosomas
del cigoto resultante si el gameto se une con un gameto
haploide normal.
Variación cromosómica 239
42. Nicotiana glutinosa (2n = 24) y N. tabacum (2n = 48) son
f;.._"' dos plantas estrechamente relacionadas que pueden entre-
....... cruzarse, pero las plantas híbridas de la generación F 1 sue-
len ser estériles. En 1925, Roy Clausen y Thomas
Goodspeed cruzaron N. glutinosa y N. tabacum y obtuvie-
ron una planta F 1 fértil (R . E . Clausen y Thomas
Goodsp eed. 1925. Genetics 10:278-284). Pudieron auto-
polinizar las flores de esta planta p ara producir una gene-
ración F2 . Para su sorpresa, las plantas F2 eran con1ple ta-
me nte férti les y producían semillas viables. Cuando
Clausen y Goodspeed examinaron los cromoso.mas de las
plantas F 2, observaron 36 pares de cromoso1nas en metafa-
se I y 36 cromosomas individuales en metafase II.
Explique el origen de las plantas F2 obtenidas por Clausen
y Goodspeed, y los números de cromoson1as observados.
43. ¿Cuál sería el número de cromosomas de la progenie
resultante de los siguientes cruzamie ntos del trigo (véase
fig. 8-29)? ¿Qué tipo de poliploide (alotriploide, alotetra-
ploide) resultaría de cada cruzamiento?
a. Trigo einkhom y trigo emmer
b. Trigo harinero y tJ.i.go emmer
c. Trigo einkhom y trigo harinero
44. Karl y Hally Sax cruzaron Aegilops cylindrica (2n = 28),
f::."' un.~asto silvestre de la región d~l M edit~rráneo, con
º'º"º' Trzttcum vulgare (2n = 42), un tipo de tngo (K. Sax y H.
J . Sax. 1924. Genetics 9:454-464). Las plantas F 1 resultan-
tes de este cruzamiento tenían 35 cromosomas. El exa1nen
de la metafase I en las plantas F 1 reveló la presencia de 7
pares de cromosomas (bivalantes) y 21 cromosomas no
apareados (univalentes).
a. Si los cromosomas no apareados se segregan al azar,
¿qué nún1eros posibles de cromosomas aparecerán e n
los gametos de las plantas F 1?
b. ¿ Qué sugiere el aspecto de los bivalentes de los híbri-
dos F 1 sobre el origen del trigo Triticum vulgare?
Aegilops cylindrica, pasto silvestre. Triticum vu/gare, trigo. (Michael
(5am Brinker, MNR-NHIC, Hieber/123RF.com).
2008/Canadian Food lnspection
Agency).
240 CAPITULO 8
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 8.3
45. El daltonismo es un trastorno recesívo ligado al cromosoma
X humano. Cristina tiene visión normal de los colores, pero
su padre es daltónico. Cristina se casa con Tomás, que tam-
bién tiene visión normal de los colores. Cristina y Tomás
tienen una hij a que presenta síndrome de Tun1er y daltonis-
mo.
a. ¿Cómo heredó el daltonismo su hija?
b. ¿La bija heredó su cromosoma X de Cristina o de
Tomás?
46. La progenie de plantas de tomate triploides contiene frag-
1nentos de un cro1noso1na extra, además del complemento
normal de 24 cromosomas (J. W. Les ley y M. M. Lesley.
1929. Genetics 14:321-326). Los mutantes con un fragmen-
to de un cromosoma extra se denominan secundarios. Jan1es
y Margar~t Lesley observaron que los secundarios surgían
de progemtores triploides (3 n), trisó1nicos (3n + 1) y doble
trisómicos (3n + l + 1), pero nunca de diploides (2n).
Mencione una o más posibles razones por las que los secun-
darios se originan de progenitores que tienen cromosomas
no apareados pero no de progenitores diploides normales.
47. Las mulas se originan a partir del cruzamiento entre un
caballo (2n = 64) y un burro (2n = 62), tienen 63 cromoso-
mas y casi siempre son estériles. Sin embargo, en el verano
de 1985, se observó que una mula hembra llamada Krause,
que pastoreaba junto a un burro macho, tuvo un porrillo (O.
A. Ryder y cols. 1985. Journal of Heredity 76:379-381).
Las pruebas sanguíneas establecieron que el potrillo 1nacho,
al que llamaron apropiadamente "Blue Moon" (en alusión
al dicho once in a blue moon, que en español significa una
vez en un millón), era hijo de Krause, que de hecho era una
mula. Tanto Blue Moon como Krause te1úan el mismo
burro como padre (véase la ilustración). El potrillo, como
su madre, tenía 63 cromosomas: la mitad cromosomas de
caballo, y la 1nitad cromosomas de burro. Los análisis
de marcadores genéticos 1nostraron que, llamativamente,
Blue Moon parecía haber heredado un juego completo de
cromosomas de caballo de su madre, en lugar de la mezcla
aleatoria de cromosomas de caballo y de bun·o que hubiera
sido esperable en una n1eiosis norn1al. Por lo tanto, Krause
y Blue Moon no eran solo madre e hijo, sino también her-
mano y hermana.
a. Mediante un diagrama explique cómo, si Blue Moon
solo heredó cromosomas de caballo de su madre, Blue
Moon y Krause son 1nadre e hijo, así co1no hermano y
hermana.
b. Si bien son raros, se han encontrado otros casos de
mulas fértiles que tuvieron descendencia. En estos casos,
cuando una mula he1nbra se aparea con una caballo
1nacho, la descendencia tiene aspecto sim iJ ar al de un
cabaJlo, pero cuando una 1nula hembra se aparea con un
butTo macho, la descendencia tiene aspecto similar aJ de
la mula. ¿Esta observación es consistente con la idea
de que la descendencia de mulas hembras fértiles hereda
solo un juego de cromoso1nas de caballo de sus madres
mulas? Explique su razonamiento.
c. ¿Puede sugerir un posible mecanismo para explicar
có1no la descendencia de las mulas hembra fértiles
podría transmitir un juego completo de cro1noson1as de
caballo a su descendencia?
1
Burro Caballo
2n= 62 2n= 64
11
Mula Krause
2n= 63, XX
111
Mula Blue Moon
2n= 63, XY
Sección 8.4
48. Los seres humanos y muchos otros organismos complejos
son diploides y tienen dos juegos de genes, uno heredado de
la madre y uno heredado del padre. Sin embargo, una se1ie
de organi smos eucariontes pasa la mayor parte de sus ciclos
vitales en un estado haploide. Muchos de estos eucariontes,
co1no Neurospora y las levaduras, presentan sin embargo
meiosis y reproducción sexual, pero la mayoría de las célu-
las que componen el organismo son haploides.
Considerando que los organismos haploides son comple-
tamente capaces de reproducirse sexualmente y generar
variación genética, ¿por qué la n1ayo1ia de los eucariontes
co1nplejos son diploides? En otras palabras, ¿cuál podría ser
la ventaja evolutiva de existir en un estado diploide en lugar
de en un estado haploide? ¿ Y por qué algunos organismos,
como Neurospora y las levaduras, existen como haploídes?
 9
Sistemas genéticos bacterianos
y virales

La vida en un mundo bacteriano

A los seres humanos les agrada pensar que dominan el
mundo, pero en comparación con las bacterias, sin duda se
hallan en una posición secundaria. Las bacterias se desaiTo-
Uaron por prunera vez hace alrededor de 3500 millones de
años, 2000 millones de años antes de que apareciera el pri-
mer eucarionte (cierta evidencia indica que las bacterias se
desarrollaron aún antes). Hoy en día, las bacterias se encuen-
tran en todos los ambientes concebibles, como hervideros,
lagos muy salinos y por debajo de 1nás de 2 millas de hielo
en la Antártida. Se las encuentra en la cüna del monte
Everest y en el fondo de los océanos más profundos. ¡Tam-
bién están presentes sobre nosotros y en nuestro interior, en
números alarmantes! Dentro del intestino humano promedio,
hay alrededor de 10 000 01ill ones de bacterias, lo que decu-
plica la cantidad total de células de todo el cuerpo humano.
Nadie sabe cómo tantas bacterias pueblan el mundo, pero un
análisis realizado por científicos en 1998 estimó que la can-
tidad total de bacterias vivientes de la Tie1Ta superaba los 5
quintillones (5 x 103°).
Las bacterias representan la mayor parte de la diversidad de la vida L as bacterias no solo son numerosas, sino que representan
y existen en casi cualquier ambiente concebible, incluidos hábitats la mayor parte de la diversidad de la vida. El número total
inhóspitos como el Mar Muerto, extremadamente salino. (PhotoSotck- de especies bacterianas descritas es menor de l O000, en
lsrael/Alamy). cornparación con alrededor de 1,4 millones de plantas, ani-
mal.es, hongos y eucariontes unicelu lares. Pero la cantidad
de especies descritas es muy inferior a la verdadera diversidad microbiana.
Por lo general, las especies de bacterias se describen solo después de que se las ha cultivado
y estudiado en el laboratorio. Como solo algunas especies son pasibles de cultivo en el labora-
torio, dur ante muchos años resultó imposible identificar y estudiar a la mayoría de las bacte-
rias. Luego, en la década de 1970, se desaiTollaron técnicas moleculares para analizar DNA,
lo que abrió toda una nueva perspectiva sobre la diversidad microbiana. Estas técnicas revela-
ron vatios hechos ünportantes sobre las bacterias. Primero, muchas de las relaciones entre las
bacte1ias que los microbiólogos habían estimado sobre la base de los rasgos físicos y bioquí-
micos resultaron incorrectas. Bacterias que alguna vez se pensó que estaban relacionadas
eran, de hecho, bastante diferentes desde el punto de vista genético. Segundo, el análisis
molecu lar 1nostró que los miembros de un grupo de microbios (denominados ahora ai·chaea,
arqueobacterias) eran tan d iferentes de otras bacterias (las eubacterias) con10 de los eucarion-
tes. Tercero, el análisis mo lecular reveló que el nú mero de tipos distintos de bacterias es
asombroso.
En 2007, Louiz Roesch y sus colegas comenzaron a determinar con exactitud cuántos tipos
de bacterias hay en un gramo de suelo. Obtuvieron muestras de suelo de cuatro lugares:
Brasil, Florida, Illinois y Canadá. A partir estas muestras, extrajeron y purificai·on DNA bacte-
riano, mediante el cual determinaron las secuencias de un gen presente en todas las bacterias,
el 16S rRNA. Cada especie diferente de bacteria tiene una secuencia única del gen 16S rRNA,
de manera que pudieron precisar cuántas especies de bacterias existían en cada muestra de
suelo contabilizando el número de secuencias diferentes de DNA.
241
242 CAPÍTULO 9

Los resultados de Roesch fueron increíbles. El número de especies eubacterianas distintas en cada
gramo de suelo variaba de 26 140 en 1nuestras de Brasil a 53 533 en las de Canadá. Se detectaron
muchas bacte1ias inusuales que parecieron disímiles de todos los grupos de bacterias descritos previa-
mente. Otro hallazgo interesante fu e el suelo de los campos cultivados albergaba una cantidad bastan-
te menor de especies que el de los bosques.
Este estudio y otros den1uestran que la diversidad bacteriana supera con an1plitud la de los organis-
mos multicelulares y, sin duda, aún restan por descubrir numerosos grupos de bacterias. Nos guste o
no, en realidad vivitnos en un n1undo bacteriano.

E n este capítulo se examinan algunas de las propiedades gené-

ticas de las bacterias y los virus, y los mecanismos por los
que intercambian y reco1nbinan sus genes. Desde la década 1940,
los sistemas genéticos de bacterias y virus han contribuido al des-
cubrimiento de muchos conceptos importantes en genética. En un
principio, el estudio de la genética molecular se centró casi por
entero en sus genes; en la actualidad, las bacterias y los virus aún
siguen siendo herramientas esenciales para investigar el carácter
de los genes de organismos más compl ejos, en parte porque po-
seen una serie de características que los tornan adecuados para
estudios genéticos (cuadro 9-1).
Asimismo, los sistemas genéticos de bacterias y virus se estudian
porque estos organismos desempeñan papeles importantes en la
sociedad humana. Naturalmente, se encuentran bacte1ias en la bo-
ca, el intestino y la piel, donde son esenciales para la función huma-
na y la ecología. Se los ha aprovechado para producir una serie de
sustancias importantes desde el punto de vista económico, y son
de inmensa significación médica, ya que causan muchas enferme-
dades humanas. En este capítulo, se consideran varios aspectos sin-
gulares de los sistemas genéticos bacterianos y virales. Se describi-
rán procesos significantes de transferencia y recombinación de ge-
nes, y se verá cómo pueden utilizarse estos procesos para mapear
genes bacterianos y virales. ►
Cuadro 9-1 Ventajas de utilizar bacterias y virus para
estudios genéticos
1. La reproducción es rápida.
2. La progenie es numerosa.
3. El genoma haploide permite que se expresen directamente todas
las mutaciones.
4. La reproducción asexual simplifica el aislamiento de cepas gené-
ticamente puras.
5. El crecimiento en el laboratorio es fácil y requiere poco espacio.
6. Los genomas son pequeños.
7. Existen técnicas para aislar y manipular sus genes.
8. Tienen importancia médica.
9. Se los puede genomanipular para producir sustancias de valor
comercial.
9.1 El análisis genético de bacterias
requiere métodos especiales
En las bacterias, la herencia es fundamentalmente similar a la de
organismos más complejos, pero el genoma bacte1iano haploide y
el pequeño tamaño de las bacterias (que dificulta la observación
de sus fenotipos) requieren enfoques y métodos diferentes.
Diversidad bacteriana
Los procariontes son organismos unicelulares que carecen de
membranas nucleares y de orgánulos celulares li1nitados por mem-
branas. Durante muchos años, los biólogos consideraron que to-
dos los procariontes estaban relacionados, pero en la actualidad la
información sobre la secuencia deJ DNA aporta evidencia convin-
cente de que los procariontes se dividen en por lo menos dos gru-
pos: las archaea y las eubacterias. Las archaea son un grupo de
procariontes diversos que suelen hallarse en ambientes extremos,
como hervideros y en el fondo de los océanos. Las eubacterias
son los procariontes restantes, que incluyen a la n1ayoría de las
bacterias familüu·es. Si bien tienen similitud superficial en su es-
tructura celular, las eubacterias y las archaea son distintas en su
composición genética, y las diferencias entre ellas son tan gran-
des como las observadas entre las eubacterias y los eucariontes.
De hecho, las archaea son más similares a los eucationtes que a
las eubacterias en una serie de características 1noleculares y pro-
cesos genéticos. En este libro, suele utilizarse el término bacterias
para referirse a las eubacterias.
Las bacterias son sumamente diversas y presentan una vaiiedad
de formas y tamaños. Algunas tienen forma de bastón, mientras
que otras son esféricas. La n1ayoría de ellas son 1nucho más
pequeñas que las células eucariontes, pero por lo menos una espe-
cie aislada del intestino de pez tiene casi 1 mm de largo y puede
observarse a simple vista. Algunas bacterias son fotosintéticas.
Otras producen tallos y esporas, que se asemejan superficialmen-
te a hongos.
L as bacterias han sido consideradas por mucho tie1npo organis-
mos simples, que carecen de gran parte de la complejidad de los
eucariontes. Sin embargo, evidencia reciente señala una serie de
similitudes y paralelos entre la estructura bacteriana y la euca-
1ionte. Por ejemplo, una proteína bacteriana denominada FtsZ,
que desen1peña un papel integral en la división celular, tiene una
estructura similar a la de las proteínas tubulina de los eucariontes,
que son subunidades de microtúbulos y ayudan en la segregación
de los cromosomas dur ante la mitos is y la meiosis (cap. 2). Al
igual que los eucariontes, las bacterias tienen proteínas que ayu-
dan a condensar el DNA. Otras proteínas bacterianas funcionan
de modo muy similar al de las proteínas citoesqueléticas de los
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 243

(a) (b)

- -Asa de __...,.... Pipeta / Tapa / Varilla de vidrio

inoculación

l
!
l ►
1
p
1
- solución diluida '\. Placa de Petri

Medio
I de células
bacterianas
Medio inoculado Las bacterias El medio de crecimiento Se agrega una solución ______. ,.._________ Después de una --¡
líquido crecen y se La solución bacteriana · b · , d 1 2d_,,,_-I
estéril con bacterias. se suspende en agar diluida de bacterias a incu ac1on e a ias1
dividen. se extiende de manera las bacterias se
- - ---1:s:,::im
.:.:_i::,:
la::._r.:.
ª .:.:
lª:....:9:.::e::
la:.::
ti:,.::
na:.:.._J la placa de Petri . uniforme con la varilla multiplican y forman
~ - - - - - - ~ de vidrio. colonias visibles.

Figura 9-1. Las bacterias pueden crecer (a) en un medio líquido o (b) en un medio sólido.

eucariontes y ayudan a conferir forma y estructura a las células
bacterianas. Y si bien las bacterias no presentan mitosis ni m eio-
sis, la replicación de los cromoso1nas bacterianos precede a la
fisión binaria, y hay procesos bacterianos que garanti zan que se
asigne una copia del cromosoma a cada céluJa.
Técnicas para el estudio de las bacterias
El cultivo y estudio de las bacterias requiere técnicas especiales.
Los 1nicrobiólogos han definido las necesidades nutricionaJes de
una serie de bacterias y han desarrollado m edios de cultivo para
que crezcan en el laboratorio. Los medios de cultivo suelen con-
tener una fuente de carbono, elementos esenciales como nitróge-
no y fósforo, ciertas vitaminas y otros iones y nutrientes requeri-
dos. Las bacterias de tipo silvestre, o protótrofas, pueden utilizar
estos componentes siinples para sintetizar los con1puestos que
necesitan para el creci1niento y la reproducción. Se denomina
medio mínimo a aquel que contiene solo los nutrientes requeri-
dos por bacte1ias protótrofas.
Las cepas mutantes denominadas auxótrofas carecen de una o
n1ás de las enzimas necesarias para sintetizar moléculas esencia-
les, y solo crecerán en medio suplementado con estas 1noléculas
esenciales. Por ejemplo, las cepas auxótrofas que no pueden s in -
tetizar el aminoácido leucina no crecerán en medio mínimo, pero
sf en medio con agregado de leucina. El medio completo contie-
ne todas las sustancias, por ejemplo el aminoácido leucina, reque-
ridas por las bacterias para su crecimiento y reproducción.
A 1nen udo, los cultivos de bacterias crecen en tubos de ensayo
que contienen un n1edio líquido estéril (fig. 9-la). Se agregan
unas pocas bacterias a un tubo y estas crecen y se dividen hasta
que se consumen todos los nutrientes o (con m ayor frecuencia)
hasta que la concentración de sus productos de desecho se vuel-
ven tóxicos. Las bacterias también se cultivan en placas de Petri
(fig. 9-lb). Se vierte el medio de crecimiento suspendido en agar
hasta la mitad inferior de la placa de Petri, lo que ofrece una base
sólida similar a Ltn gel para el crecimiento bacteriano. En un pro-
cedüniento denominado siembra, se extiende una solución dilui-
da de bacterias sobre la superficie de la placa de Petri con agar. A
medida que cada bacteria crece y se divide, da origen a un grupo
visible de células idénticas desde el punto de vista genético (una
colonia). Se pueden aislar cepas genéticamente puras de las bac-
terias recogiendo bacterias de una sola colonia y transfiriéndolas
a un nuevo tubo de ensayo o placa de Pet:ri. La principal ventaja
de este método es que permite aislar y contabilizar bacterias que,
individualmente, son demasiado pequeñas para ser observadas sin
. .
un rrucroscop10.
A menudo, los microbiólogos estudian fenotipos que afectan el
aspecto de la colo nia (fig. 9-2) o que se pueden detectar median-
te pruebas químicas simples. Los auxótrofos suelen ser fenotipos
estudiados. Suponga que desearnos detectar auxótrofos que no

(a) (b)

Figura 9-2. Las bacterias tienen diversos fenotipos. a)

Serratia marcescens con variación de color. b) Bacillus
cereus. (Parte a: Dr. Edward J. Bottone. Parte b: Biophoto
Associates/Photo Researchers).
244 CAPÍTULO 9

Se siembran bacterias en un Se realiza siembra de réplica Las células se , Se presiona en nuevas placas Se recuperan los auxótrofos
medio que contiene leucina. presionando una superficie de adhieren al de Petri. Se transfieren para leucina (/ei.r) de la
Crecen colonias tanto leu+ terciopelo sobre la placa. tercioP.elo. células de cada colonia a las
colonia que crece en medio
como fetr.
,--------~ suplementado, y se los
cultiva para más estudios.
Mango
\
Medio que Solo crecen
\ \, carece de leucina bacterias leu+
' ... \
' '
\
'
I
\

.
\ \ \
\

\ \ ,4 ' \
', '
Su perficie de '
\
\
''
, I
' \ ' - - Colonia
terciopelo ,, '' faltante
(esterilizada)
\
\ , I
''
\
,,
' 1
f
1 \

''
\
1

' \
\

''
1
Cultivo 1
bacteriano

Medio Crecen bacterias

con leucina tanto /eu+ como leu-

Conclusión: una colonia que crece solo en el medio

Figura 9-3. Las cepas bacterianas mutantes pueden aislarse sobre la suplementado tiene una mutación de un gen que codifica
la síntesis de un nutriente esencial.
base de sus requerimientos nutricionales.

pueden sin tetizar Ieucina (1nutantes leu- ). Primero, extendemos que tienen cromosomas lineales. Muchos cromosomas bacteria-
las bacterias sobre una placa de Petri con medio que incluye leu- nos están organizados de manera eficiente. Por ejemplo, más del
cina, en la que crecerán tanto los protótrofos que tienen el alelo 90% del DNA de E. coli codifica proteínas. En cambio, solo alre-
leu+ como los auxótrofos que tienen el alelo leu- (fig. 9-3) . Luego, dedor del 1% del DNA humano codifica proteínas.
aplicando una técnica denorninada siembra en placa de réplica,
transferi1nos unas pocas células de cada una de las colonias de la
placa original a dos nuevas placas de réplica: un a placa contiene
medio al que se le ha agregado leucina, y la otra placa contiene
un medio que carece de leucina. Un medio que carece de un
nutriente esencial, como el medio sin leucina, se denomina medio
selectivo. Las bacterias leu+ crecerán en arnbos medios , pero los
1nutantes leir solo lo harán en el medio selectivo suplementado
con leucina, porque no pueden sinteti zar su propia Jeuci na.
Cualquier colonia que crece en medio que contiene leucina, pero
no en medio que carece de esta, está formada por bacterias leu- .
Después, es posible cultivar los auxótrofos que crecen en el
1nedio suplementado para mayor estudio.

Genoma bacteriano
La mayoría de los genomas bacterianos consisten en un cromoso-
1na circular que contiene una sola n1olécula de DNA de varios
1nillones de pares de bases (pb) de longitud (fig. 9-4). Por ejem-
plo, el genon1a de E. coli tiene alrededor de 4,6 millones de pares
de bases de DNA. Sin embargo, algunas bacterias contienen múl-
tiples cromosomas. Por ejemplo, el Vibrio cholerae, que provoca Figura 9-4. La mayoría de las células bacterianas tienen un
el cólera, tiene dos cromosomas circulares, y el Rhizobium meli- único cromosoma circular, que se observa aquí al emerger de
loti tiene tres cromosomas. Existen incluso unas pocas bacterias una célula bacteriana rota. (Dr. Gopal Murti/Science Source).
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 245

La replicación de un plásmido comienza Las cadenas se separan y la replicación ... y, por último, produce dos
en el origen de replicación, el sitio ori. tiene lugar en ambas direcciones ... moléculas de DNA circular.

Origen de replicación DNA recién

✓(sitio on) - ~ . ,:•/ sintetizado

Separación
Separación de Replicación r---1► de plásmidos;---<
las cadenas hijos

\ l as cadenas se separan Cadena nueva

DNA bicatenario en el sitio orí

Cadena antigua

Figura 9-5. Un plásmido se replica independientemente de su cromosoma bacteriano. La replica-

ción se in icia en el origen de replicación (on) y contin úa alrededor del círculo. En este diagrama, la replica-
ción tiene lugar en ambas direcciones; en algunos plásmidos, la replicación es solo unidireccional.
(Fotografía : Biology Pics/Science Source).

Plásmidos Estos genes regulan la ÍEstas secuencias regulan

transferencia de plásmidos la inserción en el
a otras células. cromosoma bacteriano.
Además de tener un cro1nosoma, 1nuchas bacterias poseen plás-
midos, moléculas en general pequeñas con DNA circular. Algu-
IS~
nos plásmidos están presentes en muchas copias por célula, mien-
tras que otros lo están en solo una o dos copias. Por lo general, los
plásmidos portan genes que no son esenciales para la fu nción bac-
teriana, pero que pueden desempeñar un papel importante en el
ciclo vital y en el crecimiento de sus huéspedes bacterianos. Hay
muchos tipos diferentes de plásmidos; se estima que la bacteria
E. coli sola tiene más de 270 plásmidos naturales distintos. Al-
gunos plásmidos estimulan el aparea1niento entre bacterias; otros
contienen genes que destruyen otras bacterias. Los plásmidos son
1nuy utilizados en ingeniería genética (véase cap. 19), y algunos
de ellos intervienen en la diseminación de la resistencia a antibió- orí (origen de
ticos entre las bacte1ias. oriT (origen de rep ,ne replicación)
La mayoría de los plásmidos son circulares y tienen varios transferencia)
miles de pares de bases de longitud, aunque también se han halla- Estos genes controlan
do plásmidos que consisten en varios cientos de miles de pares de la replicación de los
bases. Cada plásmido tiene un origen de replicación, una secuen- lásmidos.
cia específica de DNA donde se inicia la replicación del DNA Factor F
(véase cap. 2). El origen permite que un plásmido se repliq ue en
forma independiente del cromosoma bacteriano (fig. 9-5). Los Figura 9-6. El factor F, un episoma circular de E. coli, contiene una
episomas son plásmidos capaces de replicarse libremente e inte- serie de genes que regulan la transferencia en la célula bacteria-
grarse en cron1osomas bacterianos. El factor F (fertilidad) de E. na, la replicación y la inserción en el cromosoma bacteriano. La
coli es un episoma que controla el apareamiento y el intercambio replicación se in icia en ori. Las secuencias de inserción 153 e 152 (véase
de genes entre células de esta bacteria, como se discutirá en la capítulo 18) controlan la inserción en el cromosoma bacteriano y su
siguiente sección. escisión.
246 CAPÍTULO 9

CONCEPTOS ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1

Las bacterias pueden estudiarse en el laboratorio cultivándolas en ¿Cuál de estas afirmaciones sobre los plásmidos es verdadera?
medio líquido o sólido definido. Un genoma bacteriano típ ico está a. Están compuestos por RNA.
formado por un único cromosoma circular que contiene varios millo-
b . Existen norma lmente fuera de la célula bacteria na.
nes de pares de bases. Algunos genes pueden estar presentes en plás-
midos, que son moléculas pequeñas de DNA circular que se replican c. Poseen solo una cadena de DNA.
independientemente del cromosoma bacteriano. d . Contienen un origen de replicación.

{a) Conjugación
[El DNA se repica y se Un cruzamiento en
-
... la creación de
~
Se forma el puente
citoplasmático. E nsfiere de una célula a otra. la célula receptora un cromosoma
Célula Célula conduce a... recombinante.
donante receptora

DNA-::fd:- :
egradado ~

~ \\

► ►

0 0
Cromosoma
bacteriano Réplicas del DNA
-----------------------------1 transferidas.
{b) Transformación
. -- - - - - - - - - - - - - - - - - - 1 El DNA desnudo .,___ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ____, Un cruzamiento .. . la creación de
es tomado por la en la bacteria un cromosoma
célula receptora. conduce a.. . recombinante.
Fragmentos
de DNA
) ,
IJ

o o
{e) Transducción

,,---,Un virus se fija a una .. .inyecta ... y se replica, El virus infecta ... portando el Un cruzamiento eni-----1 ... la creación de
célula bacteriana,. .. su DNA ... tomando el DNA otra bacteria ... DNA bacteriano la célula receptora un cromosoma
bacteriano. La célula con él. onduce a. .. recombinante.
bacteriana se lisa .

¾ ., ~ ~

•
~ iq.;
,, ....

► ~ ~ ►

o btl~
~
- IJ )¿l)ll
? "" o
Figura 9-7. La conjugación, la transformación y la transducción son tres procesos de transferencia de genes en las bacterias. Los tres procesos
requieren que el DNA transferido presente recombinación con el cromosoma bacteriano para que sea heredado de manera estable.

9.2 Las bacterias intercambian genes
mediante conjugación, transformación
y transferencia
Las bacterias interca1nbian 1naterial genético 111ediante tres 1neca-
nis1nos diferentes, todos los cuales ünplican algún tipo de trans-
ferencia de DNA y de recombinación entre el DNA transfe,ido y
el cromosoma bacteriano.
l. La conjugación se produce cuando el material genético pasa
directan1ente de una bacteria a la otra (fig. 9-7a). En la conju-
gación, dos bacterias se encuentran próximas entre sí y se
forma un a conexión entre ellas. Un plásmido o un cromoso-
ma pasa de una célula (la donante) a la otra (la receptora).
Después de la conjugación, puede haber entrecruzamiento
entre secuencias homólogas del DNA transferido y el cromo-
so1na de la célula receptor a. En la conjugación, se transfiere
DNA solo del donante al receptor, sin intercambio recíproco
de material genético.
2. La transformación tiene lugar cuando una bacteria capta
DNA del medio en el que está creciendo (fig. 9-7b).
Después de la transformación, puede h aber recombina-
ción entre los genes introducidos y los del cromosoma
bacteriano.
3. La transducción se produce cuando virus bacterianos (bacte-
riófagos) transportan DNA de una bacteria a otra (fig, 9-7c).
En el interior de la bacteria, el DNA recién introducido puede
recombinarse con el cromosoma bacteriano.
No todas las especies bacterianas muestran los tres tipos de
transferencia génica. La conjugación es más frecuente en algu-
nas especies que en otras. En muchas especies de bacterias, la
transfor1nación tiene lugar en un grado lunitado, pero las técni-
cas de laboratorio au1nentan la tasa de captación del DNA. La
111ayoría de los bacteriófagos tienen un espectro limitado de
huéspedes, de manera que la transducción suele producirse solo
entre bacterias de la misma especie o de especies estrechamen-
te relacionadas.
Estos procesos de intercambio genético de las bacterias
difieren de la reproducción sexual de los eucariontes diploides
en dos aspectos importantes. Primero, el intercambio de DNA
y la reproducción no están acoplados en las bacterias; a menu-
do, las bacterias se reproducen (presentan división cel ular) sin
recibir ningún DNA de otra célula . Segundo, el material gené-
tico donado que no se recombina con el DNA del huésped
suele ser degradado, de manera que la célula receptora conti-
núa siendo haploide. E s posible utili zar cada tipo de transfe-
rencia genética para mapear genes, co,no se ana li zará en las
siguientes secciones.
Sistemas genéticos bacterianos y virales 247
CONCEPTOS
El DNA puede transferirse entre células bacterianas mediante conju-
gación, transformación o transducción. Cada tipo de transferencia
génica consiste en un desplazamiento unidireccional de información
genética a la célula receptora, seguido a veces de recombinación. En
las bacterias, estos procesos no están relacionados con la reproduc-
ción celular.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿ Qué proceso de transferencia de DNA en las bacterias requiere un
virus?
a. Conjugación
b. Transducción
c. Transformación
d. Todos los anteriores
Conjugación
En 1946, Josbua Lederberg y Edward Tatum demostraron que las
bacterias pueden transferir y recon1binar información genética, lo
que sentó las bases para el uso de bacte1ias en estudios genéticos.
En el curso de su investigación, estudiaron cepas auxótrofas de
E. coli. La cepa YlO requería los aminoácidos treonina (y era,
desde el punto de vista genotípico, thr) y leucina (leu- ), y la vita-
mina ti.amina (thr) para su crecimiento, pero no reque1ia la vitami-
na biotina (bio+) ni los aminoácidos fenilalanina (phe+) y cisteú1a
(cys+); el genotipo de esta cepa se puede escribir de la siguiente
manera: thr Leu- thi- bio+ phe+ cys+. La cepa Y24 tenía el conjun-
to opuesto de alelos: requería biotina, fenilalanina y cisteína, pero
no treonina, leucina ni ti.amina; su genotipo era thr leu+ cys+ bio-
phe- cys- . En un experimento, Lederberg y Taum mezclaron bacte-
rias Y 1O e Y24 y las sembraron en 1nedio 1nínin10 (fig. 9-8). Luego,
también se se,nbró cada cepa por separado en lnedio míni1no.
Solas, ni YlO ni Y24 crecieron en medio mínimo: cada cepa
requería nutrientes que estaban ausentes. La cepa Yl O no podía
crecer porque requería treonina, leucina y ti.amina, que no estaban
presentes en el medio mínimo; la cepa Y24 no podía crecer porque
requería biotina, fenilalanina y cisteína, que tan1poco estaban pre-
sentes en el medio mínimo. En cambio, cuando Lederberg y Tatum
mezclaron las dos cepas, sí crecieron algunas coloni as en el mecüo
mínimo. Estas bacte1ias protótrofas deben haber tenido genotipos
thr+ leu+ thi+ bio+ phe+ cys+. ¿De dónde se habían originado?
Si las mutaciones fueran responsables de las colonias protótro-
fas, entonces también habrían crecido algunas colonias en las pla-
cas que contenían YlO o Y24 solas, pero en estas placas no creció
ninguna bacteria. Se habrían requerido 1núltiples n1utaciones
simultáneas (thr ➔ thr, leu- ➔ leu+ y thi- ➔ thi+ en la cepa YlO
248 CAPÍTULO 9

o bio- ➔ bio+, phe ➔ phe+ y cys- ➔ cys+ en la cepa Y24) para

Pregunta: ¿intercambian información genética las bacterias?
que una u otra cepa se convirtieran en protótrofas por mutación,
lo que era muy improbable. La conclusión de Lederberg y Tatum
fue que se h abía producido algún tipo de transferencia y recom-
Métodos binación genética:

.. ..
Y10 Y24

Cepa auxótrofa
YlO

Y 24 thr+ Leu+ thi+ bio- phe- cys-

thr- leu- thi-

l bio+ phe+ cys+

thr+ leu+ thi+ bio- phe- cys-

l
thr- leu- thi- bio- phe- cys-
.___ Cromosoma

Ola
I 1
cepa bacteriana
bacteriano
7 ..
1
y la cepa Y24 no
Cepa protótrofa thr+ Leu+ thi+ bio+ phe+ cys+

auxótrofa Y1 O no puede puede sintet izar Lo que no el1os no sabían era cón10 se había producido esto.
sintetizar Thr, Ley o Thi. .. biotina, Phe ni C s .. .
Para estudiar este problema, Bem ard Davis creó un tubo en
fo1ma de U (fig. 9-9) dividido en dos compartimientos por un fil-
tro con poros finos. Este ftltro permitía que el medio líquido pasa-
ra de un lado al otro del tubo, p ero los poros del filtro eran dema-
siado pequeños para permitir el pasaje de bacte1ias. Se colocaron
dos cepas auxótrofas de bacterias en lados opuestos del filtro, y se
aplicó succión alternativa a los extre1nos del tubo en U , lo que
determinó que el medio fluyera en ambos sentidos entre un com-
partimiento y otro. Pese a horas de inc ubación en el tubo en U, las
... y, por consiguiente, ninguna bacterias sembradas en medio mínimo no crecieron; no había
cepa auxótrofa puede crecer en habido intercambio genético entre las cepas. Sin duda, el inter-
~ e.di.Q. mloirnQ. ca1nbio de genes bacterianos requiere contacto di.recto o conjuga-
ción e ntre las células bacteri anas.
Ó Cuando se mezclan '
.A_ j
las cepas Y1 O e Y24 ... CÉLULAS f + Y F- En la mayoría de las bacterias, la conjugación
depende de un factor de fertilidad (F ) presente en la célula don an-
te y ausente en la célula receptora. Las células que contienen fac-
tor F se denominan?, y las que carecen de este factor, P-.
El factor F contiene un origen de replicación y una serie de
Resultados
genes necesarios para la conjugación (véase fig. 9-6). Por ejem-
plo, algunos de estos genes codifican pili sex uales (en singular,
pilus), extensiones delgadas de membrana celular. Una célula que
contiene factor F produce pili sexuales, uno de los cuales entra en
contacto con un receptor de una célula P- (fig. 9-10) y empuja a
las dos células j untas. El DNA es trasferido de la célula p+ a la
... crecen algunas • .. . porque ha habido célula P-. La conjugación puede tener lugar solo entre una célula
colonias... recombinación genética, que posee factor F y una que carece de este.
y las bacterias pueden En la mayor parte de los casos, los únicos genes transferidos
sintetizar todos los durante la conjugación entre p+ y p- son los del factor F (fig. 9-lla
nutrientes necesarios.
y b). La transferencia se inicia cuando una de las cade nas del
DNA del factor F se corta en un origen (oriT). Un extremo del DNA
Conclusión: sí, se produjo intercambio y recombinación cortado se separa del círculo e ingresa en la célula receptora
genéticos entre las dos cepas mutantes. (fig. 9-llc). La replicación tiene lugar en la cadena cortada y pro-
cede alrededor del plásmido circular de la célula p+ y reemplaza
Figura 9-8. El experimento de Lederberg y Tatum demostró que las la cadena transferida (fig. 9-lld). Como el plásmido de la célula
bacterias presentan intercambio genético.
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 249

Pregunta: ¿cómo se produjo el intercambio genético

observado en el experimento de Lederberg y Tatum?

Cepa Cepa

.
Métodos
auxótrofa A auxótrofa B
-Flujo
de aire

Cepa A / --...._ Cepa B

'- ~
L
fs;"separaron dos cepas
Figura 9-10. Los pili sexuales conectan células F+ y F- durante la con-
jugación. (Dr. L. Caro/Photo Researchers, lnc.)
auxótrofas mediante un
filtro que permitía la
mezcla del medio, pero
no de bacterias.
f+ siempre se corta en el sitio oriT, este sitio siempre ingresa en
No se produjo ninguna primer lugar en la célula receptora, seguido del resto del plásn1i-
bacteria protótrofa. do. Por lo tanto, la transferencia de material genético tiene una
-y--\ dirección definida. En el inte1ior de la célula receptora, se replica
Resultados Medio Medio Medio Medio la cadena simple y produce una copia circular bicatenaiia del
mínimo mínimo mínimo mínimo plásmido F (fig. 9-lle). Si todo el factor Fes transferido a la célu-
la receptora P--, esta se convierte en una célula F+.

CÉLULAS HFR La conjugación transfiere material genético del plás-

No hay No hay No hay No hay mido F de células p+ a P--, pero no ex plica la transferencia de
crecimiento crecimiento crecimiento crecimiento genes cromosómicos observada por Lederberg y Tatum. En las
Conclusión: el intercambio genético exige contacto cepas Hfr (de alta frecuencia [high-frequency]), el factor F está
directo entre las células bacterianas. integrado en el cromosoma bacteriano (fig. 9-12). Las células Hfr
se compo1tan como célula p+, forman pili sexuales y se conjugan
Figura 9-9. Experimento del tubo en U de Davis. con células P--.

(a) (b) (e) (d) (e)

Célula F+ Célula F-
(bacteria (bacteria
donante) receptora) f+ F- F+ F- f+ F- F+ F-

► ►
o ►
o ►

o o o
Factor F Cromosoma
bacteriano

p urante la conjugación, Una cadena de DNA e produce El extremo 5' del ... donde se ... lo que produce Ahora, la
se forma una conexión del factor F está replicación del factor DNA cortado replica la cadena una copia circular célula F- se
citoplasmática. cortada en un origen F y se reemplaza la pasa a la célula imple ... bicatenaria del convierte en
y se separa. adena cortada. receptora ... plásmido F. F+.

Figura 9-11. Durante la conjugación, se transfiere el factor F entre una célula F+ y una f-.
250 CAPÍTULO 9

Célula F+ Cromosoma Célula Hfr célula receptora, el crom.o soma donado se degrada y pe1manece
bacteriano el cromosoma receptor recombinante (fig. 9-13e), que se replica-
rá y se transmitirá a las siguientes generaciones por fisión binaria.
En un apareamiento de Hfr x P-, la célula P- casi nunca se con-
vie1te en p+ o en Hfr, porque el factor F se corta en la mitad de la
iniciación de la transferencia de la cadena, lo que deja parte de F
. .. al comjenzo y parte al final de cadena que va a ser transferida .
Para conve1tirse en p+ o en Hfr, la célula receptora debe recibir
todo el factor F, lo que erige la transferencia de todo el cromoso-
ma bacteriano. Este evento rara vez ocu1Te, porque la mayo1ia de
las células que se conj ugan se separan antes de que se haya trans-
Factor F ferido todo el cromosoma.
E l plásmido F de las células p+ se integra en el crom oson1a bac-
Se produce entrecruzamiento El factor F se integra teriano, lo que determina que una cél ula p+ se convierta en Hfr
entre el factor F y el cromosoma. en el cromosoma.
con una frecuencia de solo alrededor de 1 en 10.000. Esta baja
frecuencia explica la escasa tasa de recombinación observada por
Figura 9-12. El factor F se integra en el cromosoma bacteriano de Lederberg y Tatum en sus células F+. El factor Fes escindido del
una célula Hfr.
cromosoma bacteriano con una frecuencia similarmente baja, por
lo que solo unas pocas células Hfr se convierten en p+,

CÉLULAS F' En caso de escisión del factor F del cromosoma bac-

En la conjugación entre células Hfr y P- (:fig. 9-13a), se corta el
factor F integrado y el extre1no de la cadena cortada ingresa en la
célula P- (:fig. 9-13b), al igual que lo hace en la conjugación entre
células p+ y P-. Como en una célula Hfr el factor F se ha integra-
do en el cro.mosoma bacteriano, este último lo sigue a la célula
receptora. La cantidad de cromosoma bacteriano transferido
depende de cuánto dure la conjugación entre las dos células.
En el interior de la célula receptora, se replica la cadena del
DNA donante (fig. 9-13c), y puede haber entrecruzamiento entre
ella y el cro1nosoma original de la célula P- (fig. 9-13d). E sta
transferencia génica entre células Hfr y P- explica la producción
de células recombinantes protótrofas observada por Lederberg y
Tatum. Una vez que ha tenido lugar el entrecruzamiento en la
te1iano, una pequeña cantidad del cromoso1na bacteriai10 puede
ser removido con este, y estos genes cromosómicos serán trans-
portados con el plásmido F (fig. 9-14). Las células que contienen
un plásmido F con algunos genes bacterianos se denominan F
prima (F'). Por ejemplo, si un factor F se integra en un cromoso-
ma adyacente a los genes lac (genes que permiten que una célula
metabolice el azúcar lactosa), el factor F puede tomar genes lac
cuando se escinde y convertirse en F' lac. Las células F ' pueden
conjugarse con células P- porque las F ' contienen el plásmido F
con toda la información genética necesaria para la conjugación y
La transferencia de genes. El cuadro 9-2 resume los diferentes
tipos de apareamiento de E. coli (células con diferentes tipos de
factor F).

(a) (b) (e) (d) (e)

Célula Hfr Célula F- Célula Hfr Célula F-

n- o
.. . .

Factor F Cromomas Hfr

Cromosoma (factor F más
bacteriano genes bacterianos)

En la conjugación, F se La cadena ... y se produce entrecruzamiento El entrecruzamiento puede El cromosoma

corta y el extremo 5' transferida entre el cromosoma Hfr donado inducir la recombinación de lineal se
ingresa en la célula F-. se replica ... y el cromosoma original de la alelos (verde brillante en degrada.
célula F-. lugar del segmento negro).

Figura 9-13. En la conjugación, pueden transferirse genes bacterianos de una célula Hfr a una célula F-. En
una célula Hfr, el factor F se ha integrado en el cromosoma bacteriano.
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 251

Se produce Cuando el factor F se escinde del Durante la conjugación, el .. . lo que produce un

entrecruzamiento cromosoma bacteriano, puede factor F con el gen lac se diploide parcial con dos
dentro del transportar con él algunos genes transfiere a la célula F- , ... copias del gen /ac.
cromosoma Hfr. bacterianos (en este caso, /ac).
(a) (b) (e) (d)
Célula Hfr Célula F' Célu la F-

o
/

~ .. .. .. ..
/ac

u . ~
o ()
Cromosoma bacteriano Cromosoma
con factor F integrado bacteriano

Figura 9-14. Una célula Hfr puede convertirse en una célula F' cuando el factor F se escinde del cromosoma
bacteriano y lleva con él genes bacterianos. La conjugación produce un diploide parcial.

Durante la conjugación entre una célul a F ' lac y una P-, se

transfiere el plásmido F a la célula P-, lo que significa que cual-
quier gen del plásrnido F, incluidos aquellos del cro1nosorna bac-
teriano, pueden ser transferidos a las células P- receptoras. Este
proceso se denomina sexducción. Prod uce diploides parciales o
merocigotos, que son células con dos copias de algunos genes,
una del cromosoma bacteriano y otra del plásmido F recién intro-
ducido. El cuadro 9-3 resume los resultados de la conjugación en
diferentes tipos de apareamiento de E. coli,
CONCEPTOS
La conjugación de E. coli es controlada por un episoma denom inado
factor F. Las células que contienen F (células F+) son donantes durante
la transferencia de genes; las células que carecen de F (células F-) son
receptoras. Las células Hfr tienen un factor F integrado en el cromoso-
ma bacteriano; donan DNA a células F- con una alta frecuencia. Las
célu las F' contienen una copia de F con algunos genes bacteria nos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3

Cuadro 9-2 Características de células de f. coli con Por lo general, la conjugación entre una célula f+ y una célula F- da
diferentes tipos de factor F por resultado
a. dos células F+
Papel en la
Tipo Características del factor F conjugación b . dos células F-

Presente como DNA circular Donante

e. una célula f + y una célula F-
d . una célu la Hfr y una célula f+
Ausente Receptor

Hfr Presente, integrado en el cromoso- Donante de alta

ma bacteriano frecuencia
MAPEO DE GENES BACTERIANOS MEDIANTE CONJUGACIÓN INTE-
F' Presente como DNA circular y por- Donante
RRUMPIDA La transferencia de DNA que tiene lugar entre las
tador de algunos genes bacterianos células Hfr y P- permite mapear genes bacterianos. En la conju-
gación, el cromosoma de la célula Hfr se transfiere a la célula P-.
La transferencia de todo el cromosoma de E. coli requiere alrede-
dor de 100 minutos; si se inten·umpe la conjugación antes de
transcurrido este tie1npo, solo parte del cron1oson1a habrá pasado
Cuadro 9-3 Resultados de la conjugación entre células a la célula P- y habrá tenido oportunidad de recombinarse con el
con diferentes factores F cron1osoma receptor.
La transferencia del cromosoma siempre comjenza dentro de.l
Tipos celulares presentes después factor F integrado y prosigue en dirección continua, de manera
Conjugación de la conjugación que los genes se transfieren según su secuencia en el cromosoma.
Dos células F+ (la célula F- se convierte en F+) E l tiempo requerido para la transferencia de genes individuales
indica sus posiciones relativas en el cromosoma. En la mayoría de
Hfr x F- Una célula Hfr y una célula F- (ningún cambio)* los mapas genéticos, las distancias se expresan corno porcentaje
F' X F- Dos células F' (la célula F- se convierte en F') de recombinación; en cambio, en los mapas bacterianos construi-
dos 1n ediante conjugación interrumpida, la unidad básica de dis-
*Rara vez, la célula F- se convierte en F+ en una conjugación Hfr x F- si todo el cromo- tancia es un minuto. Mire la Animación 9.1 para observar cómo
soma es transferido durante la conjugación. se mapean genes mediante conjugación interrumpida.
252 CAPÍTULO 9

Experimento
Pregunta: ¿có mo se p uede utilizar la conjugación interrumpida
para mapear genes bacterianos?
Para ilustrar el método de mapeo de genes mediante conjugación
interrumpida, observemos el cruzamiento analizado por Frans:ois Métodos
J acob y Elie Wollman, que desarrollaron este n1étodo de 1napeo Una célula Hfr con aenotio@-iStP ... se apareó con una célula
de genes (fig. 9-lSa). Utilizaron células donantes Hfr sensibles al thr- feu+ az,r tonr1ac+ 9• · · · F-, con genotipo str thr leu-
antibiótico estreptomicina (genotipo strs), resistentes a azida de (a) azi5 tons /ac gaJ-.
sodio (azfí) y a infección por bacterófago TI (tonr), protótrofas
para treonina (thr+) y leucina (leu+), y capaces de degradar lacto- Genes transferidos: leu+
y thr- (primeros genes
sa (lac+) y galactosa (gal+). Usaron células receptoras P- que eran seleccionados, definidos
resistentes a estreptomicina (st,-t), sensibles a azida de sodio (azis) como tiempo cero)
y a infección por bacterófago TI (tons), auxótrofas para treonina
(thr) y leucina (leu- ), e incapaces de degradar lactosa (lac-) y
galactosa (gal-). Por lo tanto, los genotipos de las células donan-
conjugación a
tes y receptoras eran: intervalos regulares.

Célu las Hfr donantes: st,-S leu+ thr+ aziT tonr lac+ gal+
Se separan thr + leu +
Células P- receptoras: str leu- thr azi8 ton 8 lac- gal- las bacterias
8m in
azir
Se mezclaron las dos cepas en un n1edio nutriente y se pernú tió
que se conjugaran. Después de algunos minutos, se diluyó el
1nedio para evitar cualquier nuevo apareamiento. A intervalos Se separan ton r thr + /eu +
regulares, se to1naba una muestra de células y se la agitaba de
manera enérgica en una licuadora de cocina para detener toda
10 min las bacterias ~~=,h
:m
conjugación y transferencia de DNA. Se sembraron células de
cada muestra en un medio selectivo que contenía estreptomicina
y carecía de leucina y treonina. Las células donantes originales
eran sensibles a estreptomicina (str5) y no crecerían en este
16 m in
Se separan
las bacteria\
tonr thr + leu +,
111edio. Las células receptoras P- eran auxótrofas para leucina y
treonina, por lo que tampoco podrían crecer en este medio. Des-
pués, se investigaron todas las células strr leu+ thr+para detectar
la presencia de otros genes que podrían haber sido transferidos de
Se separan gal + ton r thr + /eu +
la cepa Hfr donante. las bacterias
Como Jacob y Woll1nan utilizaron estreptomicina para destruir 25 min
tac + azi'
todas las células donantes, no pudieron examinar la transferencia
del gen strs. Todas las células que crecieron en el medio selectivo
eran leu+ thr+; por lo tanto, sabemos que estos genes fueron trans-
feridos. Se grafica el porcentaje de células str leu+ thr que reci- Resultados
bieron alelos específicos (azl, tonr, leu+ y gal+) de la cepa Hfr res- ...ro
(b) :,
100
pecto del transcurso de la conjugación (fig. 9-lSb). ¿Cuál es el (1) -~
azi'
orden en el que se transfirieron los genes y las distancias entre :, t 80
e- ro • - • ton'
ellos? V'I
ro
o.. •
:, o 60
O)
V'I
•(!)
u
(1)
...ro 40 ~ • - • - • tac +
e:
Estrategia de solución "O :,
•/ •••
,· •,.. .,..-•-• gaf +
(1)
-~ e:
ro ro 20
+-' +-'
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
e: e: /
(1)
u
...
(1)
V'I
(1) o ~

El orden de los genes en el cron1osoma bacteriano y las distan- o ...

cias entre ellos.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
■ Las células donantes eran strs Zeu+ thr+ azir tonr tac+ gal+ y
las células receptoras eran strr leic thr azís tons lac+ gal+.
■ El porcentaje de células receptoras con diferentes rasgos
que aparecen en distintos momentos después del comienzo
de la conjugación (fig. 9-15).
a.. o.. o 10 20 30 40 50 60
Tiempo (minutos) desde el comienzo de
la conjug ación entre las células Hfr y r
Conclusión: los t iempos de t ransferencia ind ican el orden y las
distancias re lativas entre los genes y pueden utilizarse pa ra construir
un mapa genético.
Figura 9-15. Jacob y Wollman recurriero n a conjugación interrumpi-
da para el mapeo de genes bacterianos.
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 253

(a)
Pasos de la solución
Hfr1
El primer gen donante en aparecer en todas las células recepto- La transferencia fl En Hfr1, F se integra
ras (aproximadamente a los 9 minutos) fue azi-r. El gen tonr apa- siempre y la entre el gen /eu y el
orientación de F gen azi...
reció a continuación (después de alrededor de 10 minutos),
seguido de lac+ (aproxin1adamente a los 18 minutos) y por gal+
(después de 25 minutos). Estos tiempos de transferencia indican
el orden de transferencia génica y las distancias relativas entre
determina la dirección
de la transferencia.
thi~ ,;,..- •-
thr

♦eu

Factor F
los genes (véase fig. 9-15b).
his azi
--- Cromosoma
Tiempo
(min) o 5 10 15 20 25 gal~ ~ ro
O ... de manera que los 1

Dirección l genes se transmiten lac

de ~ 1 1 1 1 1 1 a partir de leu .
¡
transferencia
Gen
r
on gen
rr
azi ton
r
lac
r
gal (b)
~

•=-
• - - leu thr thi his gal lac pro azi

Mapa genético

HfrS
Nótese que la frecuencia de transferencia génica de las célul as
donantes a las receptoras dis minuyó para los genes más dis tan-
tes. Por ejemplo, alrededor del 90% de las células receptoras
recibieron el alelo azif, pero solo alrededor del 30% recibió el
ÓEn HfrS, F se integ~
entre thi y his.
- .. J
thi♦,;,..- •
thr

alelo gaz+. El porcentaje más bajo para ga[+ se debe al hecho de ~ FactorF
his azi
que algunas célul as que se conjugaron se separaron en forn1a F tiene la orientación - - Cromosoma
espontánea antes de que se interrumpiera el proceso con la opuesta en este
licuadora. La probabilidad de inte1,-upción espontánea aumenta cromosoma; por lo
tanto, los genes se
con el tiempo, de manera que menos células tuvieron la oportu-
1 transfieren a partir 1
nidad de recibir genes que eran transferidos más tarde. ~ thi. --'(

• =.- --
- - .- thr leu azi pro lac gal his
► Para práctica adicional en el mapeo de genes bacteríanos mediante con-
jugación interrumpida, intente resolver el Problema 23 al final del capítulo. Mapa genét ico

Figura 9-16. La orientación del factor F en una cepa Hfr determina la

TRANSFERENCIA DIRECCIONAL y MAPEO Distintas cepas Hfr de una
especie dada tienen el factor F integrado en el cromosoma bacte-
riano en ctiferentes sitios y diversas orientaciones. La transferen-
cia génica sie1npre comienza por eJ factor F, y su orientación y
posición determinan la dirección y el punto inicial de la transfe-
rencia génica. La figura 9-16a muestra que, en la cepa Hfrl, el
factor F está integrado entre leu y azi; la orientación de F en este
sitio impone que la transferencia génica proceda en dirección
antihoraria alrededor del cromoson1a circular. Los genes de esta
cepa se transfe1irán en el siguiente orden:
dirección de la transferencia génica. Las puntas de flecha indican el ori-
gen y la dirección de la transferencia.
CONCEPTOS
La conjugación puede utilizarse para mapear genes bacterianos mez-
clando células Hfr y células F- de diferentes fenotipos e interrumpiendo
la conjugación a intervalos regulares. La cantidad de t iempo requerida
por cada gen para ser transferido de las células Hfr a las células F- indi-
ca las posiciones relativas de los genes en el cromosoma bacteriano.

~ leu-thr-thi-his-gal-lac-pro-azi ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4

En la cepa Hfr5, el factor F está integrado entre los genes thi y his
(fig. 9-16b) y en la orientación opuesta. En este caso, la transfe-
rencia génica se realizará en dirección horaria:
~ thi-thr-leu-azi-pro-lac-gal-his
Se utilizó conjugación interrumpida para mapear tres genes de E. colí.
Los genes donantes aparecieron por primera vez en las células recep-
toras en los siguientes momentos: gal, 1O minutos; hís, 8 minutos;
pro, 15 minutos. ¿ Qué gen se encuentra en el medio?

Si bien el punto inicial y la dirección de la transferencia pueden

diferir entre dos cepas, la distancia relativa de tiempo entre dos
pares cualesquiera de genes es constante.
Nótese que el orden de la transferencia génica no es la misma
en diferentes cepas Hfr (fig. 9-17a). Por ejemplo, azi se transfie-
re justo después de leu en la cepa HfrH , pero n1ucho después que
leu en la cepa Hfrl. La alineación de las secuencias (fig. 9-17b)
muestra que los dos genes a uno y otro lado de azi son siempre
los mismos: leu y pro. Esto cobra sentido si advertimos que el
cromosoma bacteriano es circular y que el punto inicial de la
transferencia varía entre las distintas cepas. Estos datos aportaron
la primera evidencia que de que el cromosoma bacteriano es cir-
cular (fig. 9-17c). ►
254 CAPÍTULO 9

{a) {b)
Cepa Cepa
Hfr Hfr

H. - -• -- - - --- s. - --- -• - - -
thr leu az, pro tac gal his thi thi thr leu az, pro tac
~ his

1
• - -• - --- - ......
leu thr thi
- - -- -
his gal tac pro az,

• - - - H
thr leu az, pro tac gal his thi

2
• - - •• - - - 4 •• - --- - ---- ---- •
pro azi leu thr thi his gal tac thr leu az, pro tac gal his thi

3. -- • -- -
tac pro az, leu thr thi
• ...
- - - - - •• •
his gal
1
az, pro tac gal his thi thr leu

4. - - -• - - -
thi his gal tac pro az,
- - - - •• -- •
leu thr
2
tac gal his thi thr leu az, pro

5. - -• - - - - 3
thi thr leu azi pro tac
;
- - - --•
' • -
gal his
•
his thi thr leu az, pro tac

{e)

thi
•♦
thr
•
■

•• •=••
leu
••
thi♦•
••
thr

~
leu
•• ••
thi ff 1
•♦
thr
leu thi
thr
•._ leu thi
•♦
thr
•• leu thi
•♦
thr
•• leu

his 5 azt his H azi his 4 azi his 1 azi his 2 azi his 3 az,

•♦ ♦.
'♦pro •♦ ♦.
'♦pro
gal ••
..
'♦ pro
gal •• •
♦.
'♦ pro
gal •• . ¡ /• pro gal ••,tJ
♦.
'♦pro
gal ■
•
Jac
gal
----
lac
■
■
tac
•
tac
•
tac tac

Conclusión: el orden de los genes en el cromosoma es el mismo, pero la

posición y la orientación del factor F difiere entre las cepas.

Figura 9-17. El orden de la transferencia de genes en una serie de cepas Hfr diferentes indica que el cromosoma de E. coli es circular.

Transferencia génica natural y resistencia
a los antibióticos
Los antibióticos son sustancias que destruyen bacterias . Su desa-
rrollo y uso generalizado han reducido mucho la amenaza de
enfermedades infecciosas y han salvado innumerables vidas. Pero
1nuchas bacterias patógenas han desarrollado resistencia a los
antibióticos, sobre todo en a1nbientes donde estos se usan de ma-
nera sistemática, con10 hospitales, explotaciones ganaderas y
criaderos de peces. En estos ámbitos, en los que hay presencia
continua de antibióticos, las únicas bacterias que sobreviven son
aquellas que poseen resistencia a antibióticos. Las bacterias resis-
tentes, que ya no compiten con otras bacterias, se multiplican y se
dise1ninan rápidamente. De esta manera, la presencia de antibió-
ticos selecciona bacterias resistentes y reduce la eficacia del tra-
tamiento antibiótico de las infecciones.
En las bacterias, la resistencia a antibióticos suele deberse a la
acción de genes localizados en plásmidos R , pequeños plásmidos
circulares que pueden transferirse por conjugación. Los plásmi-
dos R farmaco1Tesistentes han evolucionado en los últin1os 60
años (desde el comienzo del uso generalizado de antibióticos), y
algunos de ellos transmiten resistencia a varios antibióticos en
forma simultánea. Resulta irónico, aunque verosímil, que las
fuentes de algunos genes de resistencia hallados en los plásmidos
R sean los microbios que producen antibióticos en pruner lugar.
Los plásmidos R pueden propagarse fácilmente por todo el
ambiente y transmitirse entre bacterias relacionadas y no relacio-
nadas en diversas situaciones comunes. Por eje1nplo, la investiga-
ción demuestra que plásmidos que transportan genes de resisten-
cia a 1núltiples antibióticos se transfirieron de una ubre de vaca
infectada por E. coli a una cepa humana de E. coli en una toalla
de mano: un granjero que se limpia las 1nanos después de ordeñar
una vaca infectada podría trans1nitir, sin proponérselo, resistencia
a antibióticos de microbios bovinos a microbios que habitan en
los seres humanos. La conjugación que tuvo lugar en la ca111e cor-
tada sobre una tabla de picar permitió que plásmidos R pasaran de
la E. coli porcina a la humana. Asimismo, la transferencia de plás-
midos R se produce en las aguas servidas, el suelo, el agua de
Lagos y los sedin1entos marinos. El hecho de que los plás1nidos R
puedan propagarse fácilmente por todo el ambiente y transn1itir-
se entre bacterias relacionadas y no relacionadas destaca la
importancia de limitar el uso de antibióticos al tratamiento de
infecciones y la importancia de la higiene en la vida cotidiana.
Transformación de bacterias
Una segunda manera en la que el DNA puede transferirse entre
bacterias es a través de la transformación (véase fig. 9-7b). La

... ...
DNA
receptor /
Ir
Fragmento de
DNA bicatenario Una cadena del fragmento El fragmento monocatenario se
de DNA ingresa en la célula; aparea con el cromosoma bacteriano
la otra es hidrolizada. y se produce recombinación.
Figura 9-18. Los genes pueden transferirse entre bacterias a través de la transformación.
transformación desempeñó un papel importante en la identifica-
ción inicial del DNA como material genético, que se analizará en
el capítulo 10.
La transformación requiere tanto la captación de DNA del
111edio circundante como su incorporación en un cromosoma bac-
teriano o en un plásmido. Se puede producir en forma natural
cuando las bacterias muertas se degradan y liberan fragmentos de
DNA al medio. En el suelo y los ambientes n1arinos, esta puede
ser una vía importante de intercambio genético para algunas bac-
terias.
MECANISMO DE TRANSFORMACIÓN Se dice que las células que
captan DNA a través de sus 1nembranas son competentes. Al-
gu nas especies de bacterias captan DNA con mayor facilidad que
otras: la etapa de crecimiento, la concentración de DNA disponi-
ble en el medio y otros factores ambientales influyen en la con1-
petencia. No es preciso que el DNA que capta una célula bacte-
riana sea bacteriano: las células competentes pueden captar casi
cualquier tipo de DNA (bacteriano o de otro tipo) en condiciones
apropiadas.
A medida que un fragmento de DNA ingresa en la célula en el
curso de la transformación (tig. 9-18), se rompe una de las cade-
nas, mientras que la otra atraviesa la 1nembrana y puede aparear-
se con una región homóloga e integrarse en el cromosoma bacte-
riano. Esta integración requiere dos eventos de entrecruzamiento,
después de lo cual el DNA monocatenario restante es degradado
por enzimas bacterianas. En algunas bacterias, DNA bicatenario
atraviesa la membrana celular y se integra en el cromosoma bac-
teriano.
Los genetistas bacterianos han desarrollado técnicas para
au111entar la frecuencia de transforn1ación en el laboratorio a fin
de introducir fragmentos particulares de DNA en las células.
Asimismo, han desarrollado cepas de bacterias que son más com-
petentes que las células de tipo silvestre. El tratamiento con clo-
ruro de calcio, el choque térmico o un campo eléctrico tornan las
1nembranas bacterianas más porosas y permeables al DNA, y la
eficiencia de la transformación también se puede aumentar utili-
zando altas concentraciones de DNA. Estas técnicas per1ni ten que
los investigadores transformen bacterias como E. coli, que no pre-
sentan competencia natural.
Sistemas genéticos bacterianos y virales 255
... No transformado
Transformado
El resto del fragmento Cuando la célula se replica y se divide,
de DNA monocatena- una de las células resultantes está
rio se degrada. transformada, y la otra, no.
MAPEO GENÉTICO POR TRANSFORMACIÓN La transformación, al
igual que la conjugación, se utiliza para n1apear genes bacteria-
nos, sobre todo en aquellas especies que no presentan conjuga-
ción ni transducción (véase fig. 9-7a y e). El mapeo por transfor-
mación requiere dos cepas de bacterias que difieran en varios ras-
gos genéticos; por ejemplo, la cepa receptora podiía ser a- b- c-
(auxótrofa para estos tres nutrientes), y la célula donante protótro-
fa podría tener alelos a+ b+ e+ (fig. 9-19). Se aísla, se purifica y se
fragmenta el DNA de la cepa donante. Se trata la cepa receptora
para aumentar la competencia, y se agrega DNA de la cepa
donante al medio. Los fragmentos del DNA donante ingresan en
Las células receptoras y se recombinan con secuencias homólogas
de DNA del cromosoma bacteriano. Las células que reciben
material genético a través de la transformación se denominan
transformadas.
Los genes pueden 1napearse observando la frecuencia con que
dos o más genes son transferidos al cron1osoma huésped, o
cotransformados, en la transformación. Cuando el DNA donan-
te se fragmenta antes de la transformación, los genes que se
encuentran físicamente próximos en el cromosoma tienen mayor
probabilidad de estar presentes en el mismo fragmento de DNA y
de ser transferidos juntos, co1no se muestra en el caso de los
genes a+ y b+ de la figura 9-19. Es improbable que los genes que
están alejados se encuentren en el mismo fragme nto de DNA, y
rara vez se transferirán juntos. En el interior de la célula, el DNA
se incorpora al cromoson1a bacteriano mediante recombinación.
Si dos genes están próximos en el mismo fragmento, es probable
que se produzcan dos entrecruzamientos cualesquiera a uno u
otro lado de los dos genes, lo que posibilita que a1nbos se convier-
tan en parte del cromosoma receptor. Si los dos genes están ale-
jados, puede haber un entrecruzamiento entre ellos, lo que permi-
te que uno de los genes, pero no e1 otro, se recombine con el cro-
mosoma bacteriano. Por consiguiente, es más probable que dos
genes se transfieran juntos cuando están próximos en el cromoso-
ma, y los genes alejados entre sí rara vez se cotransfonnan. Por lo
tanto , la frecuencia de cotransformación puede utilizarse para
mapear genes bacterianos. Si los genes a y b, así como los genes
b y e, se suelen cotransformar, pero los genes a y e rara vez lo
hacen, el gen b debe estar entre a y e: el orden de los genes es a
b e. L.:►:.!!!::!!!:!!::!!::!!!:!:!=:!:2:!:!:!::=:!:!!!:E::!:=:!!i:!!::!5=:!I
256 CAPÍTULO 9
Célula donante
Se fragmenta el DNA Los fragmentos~
de una célula donante. son captados por
la célula receptora.
a+ b+ e+ ..
= ,::= ,,..
..... b+a+
Célula receptora ~ ¿;:::
______ ,_,.-1,►,- - ~ - - - - - - - - -....
Figura 9-1 9. Puede utilizarse la transformación para el mapeo de
genes bacterianos.
CONCEPTOS
Es posible mapear los genes de las bacterias aprovechando la trans-
formación: la capacidad de las células para captar DNA del medio e
incorporarlo a sus cromosomas mediante entrecruzamiento. La tasa
relat iva de cotransformación de los genes indica la distancia entre
ellos: cuanto más alta es la tasa de cotransformación, más próximos
se encuentran los genes en el cromosoma bacteriano.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
El DNA de una cepa bacteriana con genotipo his- le1.r thr es trans-
formado con DNA de una cepa que es hís+ leu+ thr+. Se observan
unas pocas células leu+ thr+ y unas pocas his+ thr+, pero ninguna célu-
la his+ leu+. ¿Qué genes están más alejados entre sí?
Secuencias de los genomas bacterianos
Los mapas genéticos sirven de base para la información más deta-
llada aportada por la secuenciación del DNA, como el contenido
y la organización de los genes (véase el análisis de la secuencia-
ción de genes en el cap. 19). En la actualidad, los genetistas han
detenninado las secuencias nucleotídicas completas de más de
dos mil genomas bacterianos (véase cuadro 20-1), y están en cur-
so numerosos otros proyectos de secuenciación microbiana.
CARACTERÍSTICAS DE LOS GENOMAS BACTERIANOS La mayoria de
los genomas bacterianos contienen de 1 a 4 millones de pares de
bases de DNA, pero algunos son mucho más pequeños (p. ej.,
580 000 pb en el Mycoplasma genitalium), y otros son bastante
1nás grandes (p. ej ., más de 7 millones de pb en el Mesorhizobium
Captación de: Transformadas
li"üespués de ingresar
.. -==::::! en la célula, el DNA
donante se incorpora
en el cromosoma
bacteriano mediante
b+ entrecruzamiento .
...___ --= -~►►
~ .:: ' Los genes que están
próximos entre sí
- - - --= - - - 1..► tienen mayor probabili-
dad de estar presentes
en el mismo fragmento
. de DNA y de recombi-
narse juntos .
Conclusión: la tasa de cotransformación es inversamente
proporcional a la distancia entre los genes.
loti). Se considera que el pequeño tamaño de los genomas bacte-
rianos respecto de los hallados en eucariontes multi.celulares, que
a menudo tienen .miles de millones de pares de bases de DNA, es
una adaptación para la división celular rápida, porque la veloci-
dad de la división celular es limitada por el tiempo requerido para
replicar el DNA. Por otra parte, la falta de movilidad de la mayo-
ría de las bacterias requiere flexibilidad metabólica y ambiental,
y por consiguiente, es probable que el contenido y el ta1naño del
genoma sea un equilibrio entre fuerzas evolutivas contrapuestas
de pérdida de genes para mantener la reproducción rápida y la
adquisición de genes para garantizar la flexibilidad.
No se ha determinado la función de una proporción sustancial
de genes de todas las bacterias. Ciertos genes, en particular aque-
llos con funciones relacio nadas, tienden a ser próx imos entre sí,
pero estos grupos se encuentran en localizaciones muy di feren-
tes en distintas especies, lo que sugiere que los genomas bacte-
rianos vuelven a desplazarse en forma constante. Las compara-
ciones de secuencias de genes de bacterias patógenas y benignas
ayudan a identificar genes implicados en la enfermedad y pueden
sugeiir nuevas dianas para antibióticos y otros agentes antimi-
crobianos.
Transferencia génica horizontal
La disponibilidad de secuencias de genomas ha aportado eviden-
cia de que muchas bacterias poseen información genética adqui-
rida de otras especies de bacterias (y, en ocasiones, incluso de
organismos eucariontes) mediante un proceso denominado trans-
ferencia génica horizontal. En la mayoria de los eucariontes, los
genes se transmiten solo entre miembros de la 1nisn1a especie a
través del proceso de reproducción (lo que se denomina transn1i-
sión vertical), es decir, los genes pasan de una generación a la
siguiente. En la transferencia horizontal, los genes pueden trans-
mitirse entre individuos de diferentes especies por mecanismos
no reproductivos, como conjugación, transformación y transduc-

(a) (b)
l.
. ..
.. •
. .
.. • estructuras y tamaños .
• •
ción. La evidencia sugiere que la transferencia génica horizontal
se ha producido de manera reiterada entre las bacterias. Por ejen1-
plo, casi el 17% del genoma de E. coli se ha adquirido de otras
bacterias por transferencia génica horizontal. Algunas bacterias
patógenas han adquirido genes necesaiios para la infección,
núentras que otras han adquirido genes que confieren resistencia
a los antibióticos, lo que es de significación médica.
Dada la frecuencia generalizada de transferencia génica hori-
zontal, n1uchos cromosomas bacteríanos son una mezcla de genes
heredados por transmisión ve1tical y genes adquiridos por trans-
ferencia horizontal. Esta situación ha determinado que algu nos
biólogos cuestionen si el concepto de especie, incluso, es apropia-
do para las bacterias. A menudo, una especie se define como un
grupo de organismos que están aislados reproductiva1nente de
otros grupos, tienen un conjunto de genes en común y evolucio-
nan juntos (véase cap. 26). Dada la transferencia génica horizon-
tal, los genes de una especie bacteriana no est{m aislados de los
genes de otras especies, lo que dificulta aplicar el concepto tradi-
cional de especie. Asimismo, la transferencia génica horizontal
co111plica la determinación de las relaciones ancestrales entre las
bacterias. La reconstrucción de las relaciones ancestrales suele
basarse en Las similitudes y las diferencias genéticas: se asume
que los organismos genéticamente similares han descendido de
un ancestro común, mientras que los organismos genéticamente
distintos tienen una relación más distante. Sin embargo, a través
de la transferencia génica horizontal, bacterias aun con una rela-
ción distai1te pueden tener genes en común, y por lo tanto, puede
parecer que han descendido de un ancestro común reciente. En la
actualidad , el carácter de las especies y la manera de clasificar a
las bactetias son temas controvertidos dentro del campo de la
microbiología.
9.3 Los virus son sistemas de replicación
simples pasibles de análisis genético
Todos los organism.o s (plantas, animales y bacte1ias) son infecta-
dos por virus. Un virus es una estructura de replicación simple
formada por ácido nucleico rodeado de una cubierta proteica
(véase fig. 2-4). Los virus tienen gran variedad de fo1mas y tama-
ños (fig. 9-20). Algunos tienen DNA como material genético,
mientras que otros tienen RNA; el ácido nucleico puede ser bica-
tenario o monocatenario, lineal o circular.
Los virus que infectan bacte1ias (bacteriófagos, o en forma
abreviada, fagos) han desempeñado un papel central en la inves-
Sistemas genéticos bacterianos y virales 257
Figura 9-20. Los virus tienen distintas
a) Bacteriófago T4 (anaranjado brillante). b)
Virus de la gripe (estructuras verdes). (Parte a:
Biozentrum, Universidad de Basilea/Photo
Researchers. Parte b: Eye of Science/Photo
Researchers).
tigación genética desde fines de la década de 1940. Son ideales
para muchos tipos de investigación genética porque tienen geno-
1nas pequeños y fáciles de manejar, se reproducen rápida1nente y
producen grandes nún1eros de progenie. Los bacteriófagos ti enen
dos ciclos vitales alternativos: los ciclos lítico y lisogénico. En el
ciclo lítico, un fago se une a un receptor de la pared celular bac-
teriana e inyecta su DNA en la célula (fig. 9-21). En el interior de
la célula huésped, el DNA del fago se replica, se transcribe y se
traduce, con la consiguiente producción de más DNA y proteínas
del fago. A partir de estos co1nponentes, se ensamblan nuevas par-
tículas del fago. Después, los fagos producen una enzima que
rompe la célula huésped y libera los nuevos fagos. Los fagos
virulentos se reproducen estrictamente a través del ciclo lítico y
siempre dest:1uyen a sus células huésped.
Los fagos atemperados pueden utilizar el ciclo lítico o el ciclo
li sogénico. El ciclo lisogénico conúenza con10 el lítico (véase fig.
9-21) pero, en. el interior de la célula, el fago del DNA se integra
en el cromosoma bacteriano, donde permanece como un profago
inactivo. El profago se replica junto con el DNA bacteriano y se
transmite cuando se divide la bacteria. Ciertos estímulos pueden
hacer que el profago se disocie del cromosoma bacteriano e
ingrese en el ciclo lítico, lo que produce nuevas partículas de fago
y causa li sis celul ar.
Técnicas para el estudio
de bacteriófagos
Los virus se reproducen dentro de las células huésped, de 1nane-
ra que los bacteriófagos deben cultivarse en células bacterianas.
Los fagos pueden crecer en grandes cultivos líquidos de bacterias
para generar un gran número de descendientes, pero para estudiar
las características de la descendencia individual, es preciso aislar-
los en placas. Se n1ezclan fagos y bacterias, y se los siembra en
medio sólido en una placa de Petri. Se utiliza una alta concentra-
ción de bacte1ias, de 1n.a nera que las colonias crecen una dentro
de otra y generan una capa continua de bacterias o "césped" sobre
el agar. Cada fago infecta una sola célula bacteriana y cumple su
ciclo lítico. Se liberan muchos fagos nuevos de la célula lisada,
que infectan otras células; después, se repite el ciclo. Como las
bacterias crecen en medio sólido, la difusión de los fagos es funi-
tada, y solo se infectan las células cercanas. Después de varias
rondas de reproducción de los fagos, aparece un parche clai·o de
células lisadas (una placa) sobre la placa de Petri (fig. 9-22).
Cada placa representa un solo fago que se multiplicó y lisó
258 CAPÍTULO 9

f Se liberan nuevos fagos

~--,' ,. El fago se une--;-i
l
para reiniciar el ciclo.
1 la f acteria. _J ÍEl profago se puede
o DNA huésped separar, y la célula
ingresará en el ciclo lítico.
~ Lisis

€?
et El DNA del fago
ingresa en la célula
o huésped.

El ensamblaje de nuevos fagos Ciclo Ciclo

está completo. Una enzima lítico lisogénico
codificada por el fago causa la
lisis de la célula.
Digestión del Se replica el profago. Esta
DNA huésped. replicación puede continuar a
través de muchas divisiones
celulares.
e Profago

La célula huésped transcribe El DNA del fago se integra

y traduce el DNA del fago y en el cromosoma bacteriano.
produce proteínas del fago.
Fago
replicado
, - -- - ----'
Figura 9-21. Los bacteriófagos tienen dos ciclos vitales alternativos:
Replicación del DNA del fago. lítico y lisogénico.

1nuchas células. Es posible recurrir a la sien1bra de un volu111en

conocido de una solución diluida de fagos en un césped bacteria-
no y a la contabilización del número de placas que aparecen para
determinar la concentración original del fago en la solución.
CONCEPTOS
Los genomas virales pueden ser de DNA o de RNA, circulares o linea-
les, y bicatenarios o monocatenarios. Los bacteriófagos se utilizan en
muchos tipos de investigación genética.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6

¿En qué ciclo vital del bacteriófago se incorpora el DNA del fago en
el cromosoma bacteriano?
a. Lítico
b. Lisogénico
c. Tanto lítico como lisogénico
d. Ni lítico ni lisogénico

Transducción: uso de fagos para el mapeo

Figura 9-22. Las placas son parches claros de células lisadas sobre un
césped de bacterias. (Cortesía de Maria P. MacWilliams y Tong Lee).
de genes bacterianos
En la discusión sobre genética bacteriana, se identificaron tres
mecanismos de transferencia génica: conjugación, transforma-
ción y transducción (véase fig. 9-7). Consideremos con más deta-
lle la transducción, en la que los genes son transferidos entre las
bacterias por virus. En la transducción generalizada, cualquier
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 259

gen puede ser transferido. En la transducción especializada,

solo se transfieren algunos genes.
Pregunta: ¿el intercambio genético entre las bacterias requiere
siempre contacto intercelular?
TRANSDUCCIÓN GENERALIZADA En 1952, Joshua Lederberg y Nor-
ton Zinder descubrieron la transducción generalizada mientras Métodos
intentaban producir recon1binación en la bacteria Salmonella ty-
phimurium mediante conjugación. M.e zclaron una cepa de S. typhi-
1nurium que era phe+ trp+ tyr+ meí hir con una cepa que era phe
t,p- ty,~ met+ his+ (fig. 9-23) y las sembraron en un medio mínimo.
Aparecieron algt1nas recombi nantes protótrofas (phe+ trp+ tyr
1net+ his+), lo que sugirió que se había producido conjugación. Sin
embargo, cuando investigaron las dos cepas en un tubo en U simi-
lar al e1npleado por Davis, se obtuvieron algunas protótrofas phe+
trp+ tyr+ met+ his+ de un lado del tubo (compare la figura 9-23 con
la figura 9-9). Este aparato separaba las dos cepas mediante un fil-
tra con poros demasiado pequeños para que pasaran bacterias, de
1nanera que, ¿ cómo se transferían los genes entre las bacterias en
ausencia de conjugación? Los resultados de estudios ulteriores
revelaron que el agente de transferencia era un bacteriófago.
En el ciclo líti co de reproducción de fagos, el cromosoma bac- ,...
L
, --,C
:::-uando se colocaron las
teriano se rompe en dos fragmentos al azar (fig. 9-24). En algu- Se mezclaron dos cepas
dos cepas en un tubo en U
nos tipos de bacteriófago, a veces un fragmento del cromosoma auxótrofas de Salmonel/a
de Davis ...
bacteriano en lugar del DNA del fago queda emp aquetado en la
typhimurium... j
cubierta del fago; estas partículas de fago se denominan fagos
transductores. El fago transductor infecta una nueva célula y
libera el DNA bacteriano, y los genes introducidos pueden inte-
grarse después en el cromosoma bacteriano mediante un entrecru-
zamiento doble. Algunos fagos transductores introducen DNA
viral junto con el gen bacteriano en el cromosoma de la bacteria.
En cualquier caso, los genes bacterianos pueden desplazarse de Filtro
una cepa bacteriana a otra y producir bacterias recombinantes
deno1ninadas transductantes. •.
No todos los fagos tienen capacidad de transducción , un even-
to raro que requiere 1) que el fago degrade el cromosoma bacte- ... que separaba las cepas mediante
riano, 2) que el proceso de empaquetamiento del DNA en la pro- ... y se sembrara.~ I un filtro con poros demasiado
teína del fago no sea específico para el DNA del fago, y 3) que los en medio mini~ peqyeños para permitir el pasaje
bacterias ...
genes bacterianos transferidos por el vin1s se recombinen con el
c ro1noso1na de la célula receptora. La tasa global de transducción
varía de alrededor de 1 en 100 000 a 1 en 1 000 000.
Dado el tamaño limitado de la partícula de fago, solo se puede
Resultados
!
Colonias Ausencia Colonias
protótrofas de co lonias protótrofas
transducir alrededor del 1% del cromosoma bacte1iano. Unica-
1nente los genes de localización cercana en el cromosoma bacte-
riano se transferirán juntos, o se cotransducirán. Como la proba-
bilidad de que una célula sea transducida por dos fagos distintos
es sumamente pequeña, los genes cotransducidos suelen tener una
localización cercana en el cromoson1a bacteriano. Por lo tanto, las
tasas de cotransducción, al igual que las de cotransformación, dan
una indicación de las distancias físicas entre los genes de un cro-
1nosoma bacteriano.
Para n1apear genes rnediante transducción, se utilizan dos cepas • . ..se obtuvieron colonias
bacterianas con djferentes alelos en varios locus. La cepa donan- Oseobtuvieron algun~ protótrofas de un solo
te es infectada con fagos (fig. 9-25), que se reproducen dentro de colonias protótrofas. J lado del tubo.
la célula. Cuando los fagos han lisado las células donantes, se
Conclusión: el intercambio genético no tuvo lugar mediante
1nezcla una suspensión de la progenie de los fagos con una cepa conjugación. Más adelante, se mostró que un fago fue el agente
de bacterias receptoras, que después se siembra en varias clases de transferencia.
diferentes de medios para determinar los fenotipos de los fagos de
la progenie transductora. Figura 9-23. Experimento de Lederberg y Zinder.
260 CAPÍTULO 9

Se infectan bacterias El cromosoma ... y algunos de los7 ri:;1isis celular libe~ fSi el fago transfiere genes bacterianos a otra
con fago. bacteriano se
_j
fragmenta ...
genes bacterianos se
incorporan en los_ J
~ agos transductores. J bacteria, puede haber recombinación y produce
l una célula bacteriana transducida.
nuevos fagos.
Fragmentos
DNA de cromosoma
.IS"'- . del fago~ bacteriano
~ 'i::P
-,,," $
• • ® • •

o o
Bacteria Fago Fago Cé lula Transductante
donante transductor normal receptora

Figura 9-24. Los genes pueden transferirse de una bacteria a otra medi ante t ransducción generalizada.

Recombinación
r-~~-,
A

Se infecta con un fago

una cepa donante de
bacterias que es a+ b+ e+.
__J

Fago DNA Transductantes simples

del fago
'
, La transferencia y la
recombinación de genes
de la cepa donante
producen transductantes
~ rterias receptoras.

El cromosoma bacteriano se
fragmenta, y los genes bacteria-
nos se incorporan en algunos
1r-
b+ ~ ¡¡¡¡¡¡¡¡¡¡.,
~ _ _.,.
Cotransductante

de los fagos de la progenie ...

No transductante

... que se usan para infectar una Conclusión: los genes que están próximos entre sí tienen
cepa receptora que es a- tr c. mayor probabilidad de ser cotransducidos; por consiguiente,
la tasa de cotransducción es inversamente proporcional a la
distancia entre los genes.
Figura 9-2 5. La transducción generalizada puede utilizarse para el mapeo
de genes.

CONCEPTOS
En la transducción, los genes bacterianos son empaquetados en una
cubierta viral, transferidos a otra bacteria por un virus e incorporados
en el cromosoma bacteriano por entrecruzamiento. Los genes bacte-
rianos pueden mapearse mediante transducción generalizada.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
En experimentos de mapeo de genes que utilizan transducción gene-
ralizada, los genes bacterianos que se cotransducen se encuentran
a. muy alejados en el cromosoma bacteriano,
b . en diferentes cromosomas bacterianos,
c. próximos entre sí en el cromosoma bacteriano,
d. en un plásmido.
TRANSDUCCIÓN ESPEC[ALIZADA AJ igual que la transducción gene-
ralizada, la especializada requiere transferencia génica de una
bacteria a otra a través de fagos, pero en este caso solo se trans-
fi eren genes cercanos a sitios particulares del cromosoma bacte-
riano. El proceso requiere bacteriófagos lisogénicos. El profago
puede escindirse de manera imperfecta del cromoso1na bacteria-
no y transportar con él una pequeña parte del DNA bacteriano
adyacente al sitio de integración del profago. Luego, un fago que
transporta este DNA lo inyectará en otra célula bacteriana en el
siguiente ciclo de infección. El proceso se asemeja a la situación
de las células F ' , en las que el plásmido F transporta genes de una
bacteria a otra ( véase fig. 9-14). La transducción especializada se
produce en fagos que utilizan sitios de integración específicos en
CONCEPTOS
La transducción especializada transfiere solo aquellos genes bacteria-
nos localizados cerca del sitio de inserción del fago.
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Tres métodos de mapeo de genes bacterianos
Hasta ahora, se han descrito t res métodos de mapeo de genes bacte-
rianos: 1) conjugación interrumpida, 2) transformación y 3) transduc-
ción. Los t res métodos tienen simi litudes y diferencias importantes.
El mapeo mediante conjugación interrumpida se basa en el tiempo
requerido para la transferencia de genes de una bacteria a otra por
medio de contacto intercelu lar. La clave de esta técnica es que se
transfiere el propio cromosoma bacteriano, y el orden de los genes y
el tiempo necesario para su transferencia proporcionan información
respecto de las posiciones de los genes en el cromosoma. A diferen-
cia de otros métodos de mapeo, la distancia entre genes se mide no
en frecuencias de recom binación, sino en unidades de t iempo reque-
ridas para que se transfieran los genes. En este caso, la unidad bási-
ca del mapeo por conjugación es un minuto.
En el mapeo gén ico con transformación, el DNA de la cepa do-
nante se aísla, se rompe y se mezcla con la cepa receptora. A lgunos
Sistemas genéticos bacterianos y virales 261
fragmentos ingresan en las célu las receptoras, donde el DNA transfor-
mado puede recombinarse con el cromosoma bacteriano. En este
caso, la unidad de transferencia es un fragmento aleatorio del cromo-
soma . Los locus que están próximos en el cromosoma donante tien-
den a localizarse en el mismo fragmento de DNA, de manera que las
tasas de cotransformación aportan información acerca de las posicio-
nes relativas de los genes en el cromosoma.
El mapeo por transducción también se basa en la transferencia de
genes entre bacterias que difieren en dos o más rasgos, pero en este
caso el vehículo de la transferencia génica es un bacteriófago. En una
serie de aspectos, el mapeo por transducción es similar al mapeo por
transformación. El fago transporta pequeños fragmentos de DNA de
las bacterias donantes a las receptoras, y las tasas de contransduc-
ción, así como las de contransformación, suministran información
sobre las distancias relativas entre los genes.
Todos los métodos aplican una estrategia común para el mapeo de
genes bacterianos. El desplazamiento de genes del donante al recep-
tor es detectado utilizando cepas que difieren en dos o más rasgos, y
se examina la transferencia de un gen en relación con la transferen-
cia de otros. Además, los tres métodos se basan en la recombinación
entre el DNA transferido y el cromosoma bacteriano. En el mapeo por
conjugación interrumpida, el orden relativo y la cronología de la trans-
ferencia de genes aportan la información necesaria para mapear los
genes; en la transformación y la transducción , la tasa de cotransferen-
cia proporciona esta información.
En conclusión, se util izan las mismas est rategias básicas para el
mapeo por conj ugación interru mp ida, t ransformación y transducción.
Los métodos difieren principalmente en sus mecan ismos de transfe-
rencia: en el mapeo por conjugación, el DNA se t ransfiere a través del
contacto entre las bacterias; en la t ransformación , el DNA se transfie-
re como pequeños fragmentos cortados; y en la transducción, el DNA
se transfiere por bacteriófagos.
el cromosoma bacteriano; muchos fagos se integran de manera
aleatoria y solo muestran transducción generalizada.
Mapeo génico en fagos
El mapeo de genes en los propios bacteriófagos depende de la
recombinación homóloga entre cromosomas de fagos y, por con-
siguiente, exige la aplicación de los mismos principios utilizados
para el mapeo de genes en organismos eucariontes (véase cap. 7).
Se realizan cruzamientos entre virus que difieren en uno o 1nás
genes, y se identifican y contabi li zan los fagos de la progenie
recombinante. Después, se utiliza la progenie recombinante para
estimar las distancias entre los genes y su orden lineal en los cro-
mosomas.
En 1949, Alfred Hershey y Raquel Rot111an examinaron las
tasas de recon1binación en el bacte1iófago T2, que tiene DNA
monocatenario. Estudiaron la recon1binación entre genes de dos
cepas que diferían en el aspecto de las placas y el espectro de
huéspedes (las cepas bacterianas que podían infectar los fagos).
Una cepa podía infectar y lisar células de E. coli tipo B, pero no
células B /2 (cepa de tipo silvestre con espectro de huéspedes nor-
mal o h+), y producía una placa anormal que era grande y de
bordes definidos (r). La otra cepa era capaz de infectar y lisar
células tanto B como B/2 (espectro de huéspedes mutante, h- ) y
producía placas tipo silvestre que eran pequeñas y tenían los bor-
des poco definidos (r+).
262 CAPÍTULO 9

Cuadro 9-4 Progenie de fagos producidos a partir

Pregunta: ¿cómo podemos determinar la posición de un gen en de h- r x h+ r -
un cromosoma de un fago?
Fenotipos Genotipos
Método Clara y pequeña h- r+
Infección de E. coli B
Turbia y grande h+ r-
1
Ó Se infectó una célula de E. coli con Turbia y pequeña h+ r +
dos cepas diferentes de fago T2.
Clara y grande h- r-

Hershey y Rotman cruzaron las cepas h+ r y fe r+ de T2 .infec-

tando células de E. coli tipo B con una 1nezcla de las dos cepas.
l T
J Utilizaron una alta concentración de fagos, de manera que fue
DEI entrecruzamiento entre Recombinación
Ó Algunos cromosom; i posible la infección simultánea de la mayoría de las células por las
los dos cromosomas virales h,+ ♦ r- virales no se entrecru- dos cepas (fig. 9-26). Dentro de las células bacterianas, se produ-

./1 _ x r:a
produjo progenie ~combi- zan, lo que da por j o reco1nbinación homóloga ocasional entre los cromosomas de
nante (h+ r+' Y h+ J. I ~~sultado progenie no diferentes cepas de bacteriófagos, lo que produjo cromosomas h+
~ combinante. ,-+ y h- r, que después fueron empaquetados en nuevas partículas
h+ ¡ r+ h- y r+ ~~_, de fago. Cuando se li saban las células, se liberaban los fagos
recombinantes junto con los fagos no recombinantes h+ r y h- r+-.
H ershey y Rotman diluyeron y sembraron los fagos de la proge-
nie sobre un césped bacteriano que consistía en una mezcla de
células B y B/2 . Los fagos que transportaban el alelo h+ (que con-
fería la capacidad de infectar solo células B ) producían una placa
turbia, porque no había lisis de cél ul as B/2. Los fagos con el alelo
h- producían una placa clara porque ocasionaban la lisis de todas
las células dentro de la placa. Los fagos r+ producían placas peque-
El fago no El fago El fago El fago no ñas, núentras que los fagos r producían placas grandes. Por lo
recombinante recombinante recombinante recombinante
tanto, era posible determinar los genotipos de los fagos de la pro-
produce placas produce placas produce placas produce placas
grandes, turbias pequeñas, turbias grandes, claras pequeñas, claras genie por el aspecto de la placa (véanse fig. 9-26 y cuadro 9-4).
En este tipo de cruzamiento de fagos, la frecuencia de recombi-
nación (FR) entre los dos genes puede calcularse mediante la
siguiente fórmula:
Placas recombinantes
FR
placas totales
O Después, se sembrar~
los fagos de la progenie
En el cruzamiento de Hershey y Rotman, las placas recombinan-
sobre una mezcla de
células de E. coli By E. 1 tes eran h+ r+ y h- r; por consiguiente, la frecuencia de recombi-
.,
co/i B/2... _J nac1on era:

Resultados
...lo que permitió
Genotipo Placas Designación identificar los cuatro placas totales
genotipos de la
h-
. r+ 42 Es posible utilizar las frecuencias de recombinación para determinar
Progenie parental progenie.
h+ ,.- 34 76% las distancias entre los genes y su orden en el cromosoma del fago,
h+ ,.+ 12 Recombina nte
• El porcentaje de 7 así corno se usan las frecuencias de recombinación para el mapeo de
progenie recombinante genes en eucari on tes. i.::•~!::!:!:!!::!!!!::~:::!:!!!!:~~===:!:!:~!=!!:~!:2...1
h- ,.- 12 24 % permitió mapear los
mutantes h- y r.
placas recombinantes (h+ r+) + (h- ,-- ) CONCEPTOS
FR = - - - - - - - -
placas totales placas totales
Para el mapeo de genes de fagos, se infectan célu las bacterianas con
Conclusión: la frecuencia de recombinación indica que la distancia
entre los genes h y res 24%. virus que difieren en dos o más genes. Se contabilizan las placas
recombinantes y se utilizan las frecuencias de recombinación para
Figura 9-26. Hershey y Rotman desarrollaron una técnica para el determinar el orden lineal de los genes en el cromosoma y las distan-
mapeo de genes virales. (Cortesía de Steven R. Spilatro). cias entre ellos.

Análisis estructural detallado de los genes
de los bacteriófagos
En las décadas de 1950 y 1960, Seymour Benzer llevó a cabo una
se1ie de experin1entos para exan1.inar la estructura de un gen.
Co1no en esa época no se disponía de ninguna técnica molecular
para estudiar directamente las secuencias nucleotídicas, Benzer se
vio forzado a inferir la estructura de los genes a partir de análisis
de mutaciones y sus efectos. Los resultados de sus estudios mos-
traron que era posible mapear diferentes sitios de mutación den-
tro de un solo gen (denominado mapeo intragénico) mediante
técnicas sin1ilares a las descritas para el mapeo de genes bacteria-
nos por transducción. Los diferentes sitios dentro de un solo gen
están muy próximos entre sí; por lo tanto, la recombinación entre
ellos tiene una frecuencia muy baja. Como se requieren grandes
números de progenie para detectar estos eventos de recombina-
ción, Benzer utilizó el bacteriófago T4, que se reproduce rápida-
111.ente y genera una progenie 1nuy numerosa.
TÉCNICAS DE MAPEO DE BENZER Los fagos T4 de tipo silvestre sue-
len producir placas pequeñas con bordes ru gosos cuando se los
cultiva sobre un césped de E. coli. Ciertos mutantes, lla1nados r
por lisis rápida, producen placas más grandes con bordes defini-
dos. Benzer aisló fagos con una serie de 1nutaciones r diferentes y
se concentró en un subgrupo particular denominado mutantes rll.
Los fagos T4 de tipo si lvestre producen placas típicas (fig.
9-27) en las cepas de E. coli By K. En cambio, los mutantes r/1
producen placas r en la cepa B y no forman placas en absoluto
en la cepa K. Benzer reconoció los mutantes r por sus placas
características cuando crecían en E. coli B. Después, recolectó
el lisado de estas placas y Jo utilizó para infectar E. coli K. Los
fagos que no produjeron placas en E. coli K se definieron como
tipo rII.
Benzer reunió miles de mutaciones rll. Infectó en forma simul-
tánea células bacterianas con dos mutantes diferentes y buscó la
progenie recombinante (fig. 9-28). Considere dos mutaciones rII,
a- y b- (sus alelos de tipo silvestre son a+ y b+). Benzer infectó las
célul as de E. coli B con dos cepas diferentes de fagos, una a- b+
y la otra a+ b- (véase fig. 9-8, paso 3). Ninguna de estas mutacio-
nes puede crecer en células E. coli K. Mientras se reproducían
dentro de las células B, unos pocos fagos de las dos cepas se
reco111binaron (véase fig. 9-28, paso 4). Un entrecruzamiento sim-
Figura 9-27. Los mutantes rll del fago T4 producen placas distintas
cuando crecen sobre células de E. coli B. (Izquierda) Placa producida
por el fago de tipo silvestre. (Derecha) Placa producida por mutantes rll.
(Dr. D. P. Snustad, College of Biological Sciences, University of
Minnesota).
Sistemas genéticos bacterianos y virales 263
ple produce dos cromosomas recombinantes: uno con genotipo a+
b+ y el otro con genotipo a- b- :
Fago l
Fago2 a+ b-
Cí
l b+
a+
x b-
a-
l b-
Los cromosomas recombinantes resultantes, junto con los no
recombinantes (parentales), se incorporaron en los fagos de la
progenie que se usaron después para infectar células de E. coli K.
Se examinaron las placas resultantes para detenninar el genotipo
del fago infecta nte y mapear los mutantes r/1 (véase fig.. 9-28,
paso 5).
Ninguno de los mutantes r/1 creció en E. coli K (véase fig. 9-
28, paso 2), pero los fagos de tipo silvestre sí lo hicieron; por con-
siguiente, los fagos de la progenie con el genotipo recombinante
a+ b+ que produjeron placas sobre E. coli K debían tener el geno-
tipo recombinante a+ b+. Cada evento de reco1nbinación produce
cantidades iguales de mutantes dobles (a- b- ) y cromosomas de
tipo sil vestre (a+ b+); en consecuencia, el número de progenie
recombinante debería ser el doble del número de placas de tipo
silvestre que aparecieron en E. coli K . La frecuencia de recombi-
nación entre los dos mutantes rll sería:
2 x número de placas en E. coli K
FR=--------------
número total de placas en E. coli B
Como los fagos producen grandes números de progenie, Benzer
pudo detectar un recombinante único entre 1niles de millones de
fagos de la progenie. Las frecuencias de recombinación son propor-
cionales a las distancias físicas a lo largo del cromosoma (véase
p. 174 del cap. 7), lo que revela las posiciones de las diferentes
mutaciones dentro de la región rll del cromosoma del fago. De esta
manera, Benzer finaln1ente 1napeó n1ás de 2400 mutaciones rll,
muchas correspondientes a pares de bases únicos del DNA viral. Su
trabajo proporcionó la primera visión 1nolecular de un gen.
EXPERIMENTOS DE COMPLEMENTACIÓN Los experimentos de ma-
peo de Benzer demostraron que algunas mutaciones rll estaban
muy estrechrunente ligadas. Este hallazgo plru1teó el interrogante
de si estaban en el 1nismo locus o en locus diferentes. Para deter-
minar si distintas mutaciones r/1 pertenecían a locus funcionales
distintos, Benzer empleó la prueba de complen1entación (cis-
trans) (véase p. 117 del cap. 5).
264 CAPÍTULO 9

Pregunta: ¿cómo pueden mapearse los mutantes del fago rll y que pueden revelar sobre la estructura del gen?

Fago 2 Fago 1 Fago 2 Fago 1

mutante r/1 mutante r/1 mutante r/1 mutante r/1
1
Métodos Se infectan individual-
mente células de E. colí K
con dos fagos mutantes r/1.
IJSe infectan
simultáneam~~~~n
células de E. co/i B
>-
con dos fagos
, mutantes r/1. j

, La recombinación entre los

Recombinación
cromosomas de los dos

-
1 fagos produjo cromosomas
a+ b-
L:_ecombinantes.

-a-
x
1
b+

b- a+
•
Infecta células de E. coli K Infecta células de E. coli K
1-----

Fago recombinante que Fago recombinante

presenta las dos mutaciones de tipo silvestre
l T
J
Infecta células de E. co/i K

Resultados +
No se forman Las frecuencias de
placas. recombinantes se usaron
para mapear mutantes r/1.

Ausencia de placas Ausencia de placas Placas producidas por

un fago recombinante a+ b+

Conclusión: el mapeo de más de 2400 mutantes r/1 aportó información acerca de la estructura interna de un gen en el nivel de pares de
bases, la primera visión de la estructura molecular de un gen.

Figura 9-28. Benzer desarrolló un procedimiento para mapear mutantes r/1. Se aíslan dos mutantes r/1 diferentes (a- b+ y a+ b-) en células de
E. coli B. Solo el recombinante a+ b+ puede crecer sobre E. coli K, lo que permite identificar a estos recombinantes.

Para llevar a cabo la prueba de complementación en un bacte-
riófago, Benzer infectó células de E. coli K con un alto nú1nero
de dos cepas mutantes de fago (fig. 9-29, paso 1), de manera que
las células fueran doblen,ente infectadas por ambas cepas.
Considere dos mutaciones r1/ r 10 1- y r 104- . Las células infectadas
por ambos mutantes
rlOl- rl04+
r101+ r,04-
eran, en efecto, heterocigóticas para los genes del fago, con las
mutaciones en la configuración trans (véase fig. 9-29, paso 2). En
las pruebas de complementación, los fenotipos de los fagos de la
progenie se exa1ninaron en la cepa K, en lugar de en la cepa B
como ilustra la figura 9-28.
Si las mutaciones r101- y r104- se encuentran en diferentes locus
funcionaJes que codifican proteínas distintas, entonces en las
células bacterianas infectadas por ambos mutantes las secuencias
de tipo silvestre del cromosoma opuestas a cada mutación supe-
rarán los efectos de las n1utaciones recesivas; los fagos produci-
rán placas normales en células de E. coli K (fig. 9-29, pasos 3, 4
y 5). Por el contrario, sí las mutaciones se encuentran en el mismo
1ocus, ninguno de los cromosomas produce ninguna proteína fun-
cional y no aparecen placas en la células de E. coli K (fig. 9-29,
pasos 6, 7 y 8). Por lo tanto, la ausencia de placas indica que las
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 265

a1nbas 1nutaciones (r101- r 104- ). Esta prueba produjo células que

eran homocigóticas y de configuración cis para los genes del
Pregunta: ¿cómo determinamos si dos m ut acion es rIL diferentes
fago:
están en el mismo locus?

Métodos
Mutante rll
Fago r 101 -
Se infectan simultánea-
mente células de E. coli K
con dos mutantes rll :==-1
diferentes (r101-Y r104-), . ..
lo que produce células
heterocigóticas desde
el punto de vista
funcional para las
mutaciones.
r +r +
101 104
Mutante rll ,. 10
Fago r 104- \
?+
10..:.-_ Independientemente de si las mutaciones r 101- y r 104- se encuen-
tran en la misma unidad funcional, estas células contienen una
copia del cromoso1na del fago silvestre (r 101 + r 104+) y producirán
placas nonnales en E. coli K.
Benzer realizó pruebas de co1nplen1entación en muchos pares
~.-- - --'+l..__ de mutantes rll. Observó que la región rll consiste en dos locus,
designados rIIA y rIIB complementarios entre sí, pero las muta-
r 101 ciones del gn1po rIIA no complementaban otras de rIIA ni las
mutaciones del grupo r/IB complementaban otras de rIIB.

Resultados
• Si las dos CONCEPTOS
Si estas dos mutaciones
mutaciones pertenecen al En una serie de experimentos con el bacteriófago T4, Seymour Benzer
pertenecen a mismo cistrón, ... mostró que podía haber recombinación génica dentro de un solo gen
y creó el primer mapa molecu lar de un gen. Utilizó la prueba de com-
r 101 r 101 -r104+
plementación para distinguir entre genes funcionales (locus).

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
'---v--'-----
Cistrón 1 Cistrón 2
En pruebas de complementación, Benzer infectó en forma simultánea
célu las de E. coli con dos fagos, cada uno de los cuales presentaba
V\_ una mutación dif erente. ¿Qué conclusión extrajo cuando los fagos de
la progenie produjeron placas normales?
Proteína A Proteína B Ninguna pr oteína
funcional a. Las mutaciones se encontraban en el m ismo locus.
, ... hay comple- ... no hay b . Las mutaciones se encontraban en diferentes locus .
mentación y se complementación,
c. Las mutaciones estaban próximas entre sí en el cromosoma.
producen no se produce
proteínas ninguna protefna d . Los genes estaban en configuración cis.
funcionales ... L funcional, ..._ __,

En la época de la investigación de Benzer, se desconocía la re-

... lo que causa Aparición
-
No aparecieron D ... y no se
lación entre genes y estructura del DNA. Un gen se definía como
una tuúdad funcional de herencia que codificaba un fenotipo.
la formación de placas placas ~ f~rman
de placas. ~ acas. Muchos genetistas consideraban que los genes eran indivisibles y
que no podía producirse recombinación dentro de ellos. Benzer
Conclusión: la prueba de complementación ind ica si dos m utaciones demostró que, de hecho, había recombinación intragénica (aun-
e encuentran en el mismo locus o en loci diferentes. que en una tasa m uy baja) y aportó a los genetistas la primera
visión de la estructura de un gen individual. ~ SOLVER
Figura 9-29. Se utilizan pruebas de complementación para det erminar EL PROBLEMA 40
si mutaciones diferentes se encuentran en el mismo gen funcional.

dos mutaciones se encuentran en el mismo locus. Benzer acuñó el
término cistrón para designar un gen funcional definido por la
prueba de complementación.
En la prueba de complementación, se utiliza el heterocigoto cis
como control. Benzer infectó en forma simultánea bacterias con
fagos de tipo silvestre (r101 + r 104+) y con fagos que presentaban
Virus RNA
Hasta ahora, hemos considerado fundamentalmente virus que
infectan bacterias. Los virus también infectan plantas y animales,
y algunos son patógenos importantes en estos organis1nos. Lo que
aprendünos sobre los bacteriófagos tiene i_mportantes implicacio-
nes para los virus que infectan estos organismos más complejos.
Los genomas virales pueden estar codificados por DNA o por
RNA. El RNA es el material genético de algunos virus humanos,
266 CAPÍTULO 9

(a) (b) Retrovirus

Envoltura

Proteína de ~-;;:_- •✓ RNA

retroviral
El virus se une a la célula
huésped en los receptores
7 ..!--::-:~ - - - Transcriptasa
inversa
de la membrana.

I
✓

~ ~ }
\
" Las proteínas
\ v irales se
- degradan

~-------'.J . .l \..~ ,.,_ Transcriptasa

El núcleo viral (core) ~ ___.. inversa
Geno ma de RNA
m o nocatenario
ingresa en la célula
huésped.
•
M olde de RNA
(dos copias)
El RNAviral utiliza la /
transcriptasa inversa para ..~
Retrovirus producir el DNA "'- cadena
complementario, y el RNA
Figura 9-30. Un retrovirus utiliza transcripción inversa para incorpo-
rar su RNA en el DNA del huésped. a) Estructura de un retrovirus típico.
Se muestran dos copias del genoma de RNA monocatenario y la enzima
viral se degrada.
- -- - -

\
de cDNA

.
=::::===.,,_--
' )
transcriptasa inversa encerrados dentro de una cápside proteica . La cápside ' La transcnptasa inversa
está rodeada de una envoltura viral tachonada de glucoproteínas virales. sintetiza la segunda
b) Ciclo vital del ret rovirus. cadena de DNA. .,,,_,_.-• '---'~

El DNA viral ingresa en el Núcleo

núcleo, se integra en el
cromosoma del huésped y r,..;::::::::,i,
como los que causan resfríos, gripe, polio y sida. Casi todos los forma un provirus.
virus que infectan plantas tienen genomas de RNA. La impor-
tancia médica y económica de los virus RNA ha estimulado su
estudio.
, Al ser activado, el DNA proviral
transcribe el RNA viral, que es
~
Transcripción i
Los virus RNA capaces de integrarse en los genomas de sus
huéspedes, de manera muy similar a como los fagos atemperados
exportado al citoplasma.
l....

En el citoplasma, se
-- RNA vira l
==

se insertan en cromosomas bacterianos, se denominan retrovirus traduce el RNA viral.

(fig. 9-30a). Como el genoma retroviral es RNA, mientras que el
Se ensamblan el RNA viral,
del huésped es DNA, un retrovirus debe producir transcriptasa las proteínas, la nueva
-¡¡¡¡¡¡¡¡¡¡¡¡¡¡¡-!--~
inversa, una enzima que sintetiza DNA complementario (cDNA) cápside y las envolturas.
Traducción
a partir de un mo lde de RNA o de DNA . Un retrovi1us utili za la
transcriptasa inversa para copiar su genoma RNA en una molécu-
la de DNA monocatenario, y la enzima transcriptasa inversa (o, a ¡
veces, la DNA polimerasa del h uésped) copia este DNA monoca-
tenario, lo que crea una molécula de DNA bicatenario. Después,
(
- \
--·
la copia DNA del genon1a viral se integra en el cromosoma del
huésped. Un genoma viral incorporado en el cromosoma del
huésped se denomin a provirus. Cuando el cromosoma del hués- ... \

ped se duplica, las enzimas del huésped replican el provirus (fig.

/
1
9-30b).
Cuando las condiciones son apropiadas, el provirus es transcri- 1
(11 Un virus ensamblado
to para p roducir numerosas copias del genoma RNA viral ori gi- brota de la
nal . Este RNA codifi ca proteínas virales y sirve co1no RNA genó- membrana celular.
mico para nuevas partículas vir ales. Cuando estos virus escapan
de Ja célula, recolectan p artes de la membrana celular para usar -
las con10 cubiertas.
Todos los genomas retrovirales conocidos tienen tres genes en
co1n ún: gag, pol y env, cada uno de los cuales codifica una prote-
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 267

ína precursora que es escindida en dos o más proteínas fu ncio- Ser humano
nales. El gen gag codifica proteínas que co1nponen la cubierta
proteica viral. El gen poi codifica la transcriptasa inversa y una
enzima denominada integrasa, que inserta el DNA viral en el
cro1nosoma del huésped. El gen env codifica las glucoproteínas
que aparecen en la superficie del virus.
Algunos retrovü·us contienen oncogenes ( véase cap. 23) que
'.
Cepa M Cepa N
•
Cepa O
de HIV-1 de HIV-1 de HIV-1
pueden estimular la división celular y causar la formación de
tumores. El primer retrovirus aislado, el virus del sarcoma de Rous,
se reconoció por su capacidad de provocar tumores del tejido con-
juntivo (sarcomas) en pollos.
t
Chimpancé
t t
Virus de la inmunodeficiencia humana y sida
Un ejemplo de retrovirus es el virus de la inmunodeficiencia
humana (HIV), que causa síndrome de inmunodeficiencia adqui-
rida (sida). El sida se reconoció por primera vez en 1982, cuando
una serie de hombres bon1osexuales de los E stados Unidos co-
t'-----r-t---"t
n1enzaron a presentar síntomas de una nueva enfern1edad de defi-
ciencia del sistema inmunita1io. En ese afio, Robert Gallo postu-
ló que el sida era causado por un retrovirus. Entre 1983 y 1984, a SIVcpz
n1edida que se generalizaba la epidemia de sida, se aislaron retro-
virus HIV de pacientes con sida. En la actualidad, se sabe que el
sida es causado por dos virus de inmunodeficiencia diferentes,
l Recombinación

HIV-1 y ffiV-2, que han infectado a más de 60 1nillones de perso- Chimpancé

nas en todo el mundo. De los infectados, 30 1nillones han 1nuer- (doblemente
to . La mayoría de los casos de sida son causados por HIV-1, que infectado)
ahora tiene una distribución global; el HIV-2 se encuentra funda- SIVrcm SIVgsn
,
1nentalmente en Africa Occidental.
El HIV ilustra la importancia de la reco1nbinación genética en
la evolución viral. Estudios de las secuencias del HIV y de otros Mono r
t l
retrovirus revelan que el HIV-1 está estrechru11ente relacionado
con el virus de la inmunodeficiencia simia hallado en chimpancés
(SIVcpz)- Muchos chimpancés salvajes de África están infectados
SIVrcm SIVgsn
por SIVcpz' aunque en ellos no causa síntomas simi1ares al sida. Mangabeye Mono
El SIV z es, en sí mismo, un htbrido resultante de la recombina- de boina roja cercopiteco
ción enke un retrovirus hallado en el mangabeye de boina roj a de nariz
(un mono) y un retrovirus hallado en el mono cercopiteco de nari z blanca
blanca (fig. 9-31). En apariencia, uno o más chimpancés fueron
infectados por ambos virus; la recombinación entre ellos produjo Figura 9-31. El HIV-1 evolucionó a partir de un virus similar (SIV,pz)
el SIVcpz' que después fue transmitido a los seres humanos por hallado en los chimpancés, que se transmitió a los seres humanos.
contactó con chimpancés infectados. En los seres humanos, el SIVcpz se originó por recombinación entre retrovirus de mangabeyes de
SIVcP.z presentó una evolución significativa para convertirse en boina roja y monos cercopitecos de nariz blanca.
HIV-1 , que más tarde se propagó por todo el mundo para provo-
car la epidemia de sida. Vruias transferencias independientes de
SIVcpz a seres humanos dieron origen a diferentes cepas de HIV-
1. El HIV-2 evolucionó a partir de un retrovirus diferente, SIV8 m, linfocito T auxiliar, presenta transcripción inversa y se integra en
hallado en mangabeyes fuliginosos. el cromosoma. Se reproduce rápidamente y destruye el linfocito
El HIV se trans1nite por contacto sexual entre seres hu1nru1os y T cuando las nuevas partículas virales escapan de la célula. Como
a través de cualquier tipo de contacto sangre-sangre, con10 el cau- los linfocitos T auxiliares resultan fundamentales para la función
sado por con1partir agujas sucias entre los drogadictos. Asimis- inmunitru·ia y son destruidos por la infección, los pacientes con
mo, el HIV puede transmitirse de madre a hijo durante eJ emba- sida presentan dis minución de la respuesta inmunitaria; la mayo-
razo y, después del embarazo, por leche materna. Hasta que las ría de los pacientes con sida mueren por infecciones secundaiias
pruebas de detección sisten1ática pudieron identificar sangre que sobrevienen porque han perdido la capacidad de con1batir a
infectada por HIV, las transfusiones de sangre y factores de coa- los patógenos.
gulación usados por hemofílicos también fueron fuentes de infec- El genoma del HIV tiene una longitud de 9749 nucleótidos y
.,
c1on. contiene Los genes gag, poi, env y seis más, que regulan el ciclo
El HIV ataca principalmente una clase de células sanguíneas vital del virus. La transciiptasa inversa del HIV es muy proclive
llamadas linfocitos T auxiliares (fig. 9-32). El virus ingresa en un a e1Tores, lo que confiere al virus una alta tasa de mutación y le
268 CAPÍTULO 9
Figura 9-32. El HIV ataca principalmente a los linfocitos T auxiliares.
Micrografía electrónica que muestra un linfocito T (verde) infectado por HIV
(anaranjado). (Thomas Deerinck, NCMIR/Science Source).
permite evolucionar rápidamente, incluso dentro de un solo hués-
ped. Esta evolución rápida plantea una particular dificultad para
el desarrollo de una vacuna eficaz contra el HIV. La variación
genética dentro de la población hu1nana también afecta al virus.
Hasta la fecha, se han identificado más de 1O locus que influyen
en la infección por HN y en la progresión del sida.
CONCEPTOS
Un retrovirus es un virus RNA que se integra en el cromosoma de su
huésped realizando una copia DNA de su genoma RNA mediante el
proceso de t ranscripción inversa. El virus de la inmunodeficiencia
hu mana, el agente etio lógico del sida, es un retrovirus. Evolucionó a
partir de retrovirus relacionados hallados en otros primates.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
¿ Qué enzima utiliza un retrovirus para realizar una copia DNA de su
genoma?
Gripe
El viTus de la gripe demuestra cómo pueden surgi r ca1nbios rápi-
dos en un patógeno a través de la recombinación de su material
genético. La gripe es una enfermedad respiratoria causada por
virus de la gripe. En los Estados Unidos, del 5 al 20% de toda la
población es infectada por virus de la gripe en forn1a anual, y aun-
que la mayoría de los casos son leves, se estima que 36 000 per-
sonas mueren por causas relacionadas con gripe cada año. En
ciertas épocas, en particular cuando ingresan nuevas cepas del
virus de la gripe en la población humana, hay epidemias mundia-
les (deno1ninadas pandemias); por ejemplo, se calcula que en
1918 el virus llamado de la gripe española mató a 20-100 millo-
nes de personas en todo el mundo.
Los virus de la gripe son virus RNA que infectan a aves y
mamíferos. Los tres tipos principales son virus de la gripe A, B
y C. La mayoría de los casos de gripe común son causados por
gripe A y B. El virus de la gripe A se divide en subtipos sobre la
base de dos proteínas, bemaglutinina (HA) y neuraminidasa
(NA), halladas en la superficie del virus. Las proteínas HA y NA
afectan la capacidad del virus de ingresar en las células del hués-
ped y la respuesta inmunitaria del organismo huésped a la infec-
ción. Hay 16 tipos de HA y 9 de NA, que pueden existir en un
virus en diferentes combinaciones. Por ejemplo, las cepas comu-
nes de virus de la gripe A que circulan en la actualidad entre los
seres humanos son Hl NJ y H3N2 (cuadro 9-5), junto con varias
cepas de virus de la gripe B. La mayoría de los diferentes subti-
pos de gripe A se encuentran en aves.
E l virus de la gripe es RNA, pero no es un retrovirus: no copia
su genoma a DNA ni se incorpora en el cron1osoma huésped
como hace un retrovirus. El genoma del virus de la gripe consis-
te en siete u ocho fragmentos de RNA limitados por una envoltu-
ra viral. Cada fragmento de RNA codifica una o dos de las prote-
ínas del virus. El virus ingresa en una célula huésped uniéndose a
receptores específicos de la membrana celular. Tras el ingreso de
la partícula viral en la célula, el RNA viral se libera, se copia y se
traduce a proteínas virales. Después, se ensa1nblan las n1olécul as
de RNA viral y las proteínas virales en nuevas partículas virales,
que salen de la célula e infectan a ou·as célul as.
Uno de los peligros del virus de la gripe es que evoluciona rápi-
damente y aparecen con frecuencia cepas nuevas. El virus de la
gripe evoluciona de dos maneras. Primero, cada cepa cambia de
manera continua a través de mutaciones que surgen en el RNA
viral. La enzima que copia el RNA viral es particulannente pro-
clive a presentar errores, y por consiguiente, se introducen de
manera continua nuevas mutaciones en el genoma viral. Este tipo
de cambio continuo se denomina deriva antigénica. En ocasio-
nes, se producen n1odificaciones importantes del genoma viral a
través del cambio antigénico, en el que se combina el material
genético de diferentes cepas en un proceso denominado recombi-
nación. Se produce recombinación cuando un huésped es infecta-
do simultáneamente por dos cepas distintas. Los RNA de ambas
cepas se replican dentro de la célula y se incorporan segmentos de
RNA de dos cepas diferentes en la misma partícula viral, lo que
crea una nueva cepa. Por ejemplo, en 2002 se produjo una reco1n-
binación entre los subtipos HlNl y H3N2, y se creó una cepa
nueva HIN2 que contenía la hemaglutinina de HlN1 y la neura-
minidasa de H3N2. Las nuevas cepas producidas por cambio anti-
génico son responsables de la mayoría de las pandemias, porque
1
Cuadro 9-5 Cepas de virus de la gripe responsables
de las principales pandemias de gripe
Año Pandemia de gripe Cepa
1918 Gripe española H1N1
1957 Gripe asiática H2N2
1968 Gripe de Hong Kong H3N2
2009 Gripe porcina H1N1

Humano Aviar Porcino
l minada gripe porcina) en México, que se propagó rápidamente
Virus de la gripe
porcina H 1N 1
Figura 9-33. Las nuevas cepas de virus de la gripe se crean por
recombinación de material genético de diferentes cepas. Un nuevo
virus H1N1 (gripe porcina) que apareció en 2009 contenía material genéti-
co de virus aviares, porcinos y humanos.
RESUMEN DE CONCEPTOS
■ Las bacterias y los virus se adaptan bien a los estudios genéti-
cos: son pequeños, tienen un genoma haploide, se reproducen
rápidamente y generan una progeme numerosa por reproduc-
ción asexual.
■ Por lo general, el genoma bacteriano consiste en una única
molécula circular de DNA bicatenario. Los plásmidos son
pequeños fragm.entos de DNA bacteriano que pueden replicar-
se independientemente del cromosoma.
■ Es posible transferir DNA entre bacterias mediante conjuga-
ción, transformación o transducción.
■ La conjugación es la unión de dos células bacterianas y la
transferencia de material. genético e ntre e ll as. Es controlada
por un epison1a denominado factor F. La velocidad a la cual
se transfieren genes individuales durante la conjugación apor-
ta información acerca del orden de los genes y las distancias
entre ellos en el cromosoma bacteriano.
■ Las bacterias captan DNA del ambiente mediante el proceso
de transformación. Las frecuencias de cotransformación de los
genes proporcionan información acerca de las distancias físi-
cas entre los genes cromosómicos.
■ Se han determinado secuencias de DNA completas de
muchas especies bacterianas. Esta información sobre la
secuencia indica que la transferencia génica horizontal
(el desplazamiento de DNA entre especies) es común en las
bacterias.
Sistemas genéticos bacterianos y virales 269
nadie tiene inmunidad contra el virus radicalmente distinto que se
produce.
L a mayoría de las cepas diferentes del virus de la gripe A infec-
tan a aves. Los seres humanos no son fácilmente infectados por la
gripe aviar. Se considera que la aparición de nuevas cepas en seres
hun1anos suele deberse a virus que se recon1binan en cerdos, que
pueden ser infectados tanto por virus hu1nanos coino aviares. En
2009, apareció una nueva cepa de virus de la giipe Hl N l (deno-
por todo el mundo. El virus surgió de una serie de eventos de re-
combinación que combinaron secuencias genéticas de virus de la
gripe humana, aviar y porcina para producir el nuevo virus HlNl
(tig. 9-33). Las prácticas de criar cerdos y aves en estrecha proxi-
mjdad pueden :facilitar la recombinación entre cepas aviarias, por-
cinas y humanas de virus de la gripe.
CONCEPTOS
La gripe es causada por virus RNA de la gripe. Aparecen nuevas cepas
de virus de la gripe a través del cambio antigénico, en el que se crean
nuevos genomas virales por recombinación de moléculas de RNA de
diferentes cepas.
■ Los virus son estructuras de replicación con genomas de DNA
o de RNA, que pueden ser bicatenarios o monocatenarios y
lineales o circulares.
■ Los genes bacterianos se incorporan en cubiertas de fagos y
son transferidos a otras bactetias por fagos mediante el proce-
so de transducción . Las tasas de cotransducción pueden utili-
zarse para eJ mapeo de genes bacterianos.
■ Los genes del fago pueden mapearse infectando células bacte-
rianas con dos cepas diferentes de fagos y contabilizando el
número de placas recombinantes producidas por los fagos de
la progenie.
■ Benzer mapeó una gran cantidad de mutaciones que se produ-
cían dentro de la región rII del fago T4. Los resultados de sus
estudios de complemen tación demostraron que la región rll
consistía en dos unidades funcionales , que él denominó cistro-
nes. Mostró que se producía recom binación intragénica.
■ U na serie de virus tiene genomas de RNA. Los retrovirus
codifican transcriptasa inversa, una enzima usada para realizar
una copia de DNA del genon1a viral que después se integra en
el geno1na del huésped como un provirus. El HIV es un retro-
virus que es el agente etiológico del. sida.
■ La gripe es causada por virus RNA de la gripe que evolucionan
a través de pequeños can1bios que se producen por mutación
(deriva antigénica) y de cambios importantes que tienen lugar
por recombinación del material genético de diferentes cepas.
 270 CAPÍTULO 9

TÉRMINOS IMPORTANTES

bacteria auxótrofa (p. 243)
bacteria protótrofa (p. 243)
cambio antigénico (p. 268)
célula co1npetente (p. 255)
colonia (p. 243)
conjugación (p. 247)
cotransducción (p. 259)
cotransfonnación (p. 255)
deriva antigénica (p. 268)
episo111a (p. 245)
factor F (fertilidad)
(p . 247)
fago atemperado (p. 257)
fago transductor (p. 259)
fago virulento (p. 257)
integrasa (p. 267)
mapeo intragénico (p. 263)
medio completo (p. 243)
1nedio mínimo (p. 243)
oncogén (p. 267)
pili (singular, pilus) (p. 248) transducción generalizada
placa (p. 258) (p. 258)
plásmido (p. 245) transductante (p. 259)
profago (p. 257) transferencia génica horizontal
provirus (p. 266) (p. 256)
retrovirus (p. 266) transfonnación (p. 247)
transcriptasa inversa (p. 266) transfonnadas (p. 255)
transducción (p. 247) virus (p. 257)
transducción especializada
(p. 258)

1. d 6. b
2. b 7.c
3. a 8. b
4. gal 9. Transcriptasa inversa
S. his y leu

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
Se aisló DNA de una cepa de bacterias con genotipo a+ b+ e+ tJ,+ e+ y se lo u só para transformar una cepa de bac-
terias que era a- b- e- et- e-. Se investigó la presencia de genes donados en las células transformadas. Se cotrans-
formaron los siguie ntes genes:

¿Cuál es el orden de los genes a, b , c, d y e en el cromoso1na bacteriano?

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
E l orden de los genes a, b, c, d y e en el cromosoma bacteriano.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
■ Las células donantes eran a+ b+ e+ ti,+ e+, y las células
receptoras eran a- b- e et- e-.
■ Las combinaciones de genes que fueron cotransformados.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Transformación de bacterias en la Sección 9 .2.
El gen e+ también es cotrans:formado con el gen b+; de manera
que los locus e y b deben ser próximos entre sí. El locus b
podría estar a uno u otro lado del locus e. Para determinar si el
locus b se encuentra del mismo lado de e que el locus e, obser-
vamos si los genes b+ y e+ son cotransformados. No lo son, de
manera que el locus b debe estar del lado opuesto de e desde c:
d e e b

Pasos de la solución El gen a+ es cotransfor111ado con el gen ti,+; por consiguiente,

deben hallarse próximos entre sí. Si el locus a estuviera locali-
Recuerde: la tasa de En este experimento de transformación, el gen zado del mismo lado de d que el Jocus e, los genes a+ y e+
cotransformación de los c+ es cotransformado con los genes e+ y <Jf", pero setian cotransformados. Como estos genes no muestran
genes és inversamente
proporcional a la distan•
los genes e+ y d+ no son cotransformados; por lo cotransformación, el locus a debe estar del lado opuestos del
cía entre ellos: los genes tanto, el locus e debe estar entre los locus d y e: locus d:
próximos entre sí suelen
ser cotransformados, d e e a d e e b
mientras que los genes
alejados rara vez presen•
tan cotransformación.
1
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 271

Problema 2
Considere tres genes de E. coli: thr+ (la capacidad de sintetizar treonina), ara+ (la capacidad de metabolizar ara-
binosa) y leu+ (la capacidad de sintetizar leucina). Estos tres genes están próximos entre sí en el cromoson1a de
E. coli. Se cultivan fagos en una cepa thr+ ara+ leu+ de bacterias (Ia cepa donante). Se recolecta el lisado produ-
cido por los fagos y se lo usa para infectar una cepa de bacterias thr ara- leu- . Después, se investigan las bac-
terias receptoras en 1nedio que carece de leucina. Luego, las bacterias que crecen y forma n colonias en este
medio (transductantes leu+) se siembran en una placa de réplica con un medio sin treonina y con uno sin arabi-
nosa para observar cuáles son thr+ y cuáles son ara+.
Se investiga otro grupo de bacte1ias receptoras en medio que carece de treonina. Después, las bacterias que
crecen y forman colonias en este medio (transductantes th-,,+") se siembran en una placa de réplica con un medio
sin leucina y uno sin arabinosa para observar cuáles son leu+ y cuáles son ara+. Los resultados de estos experi-
mentos son los siguientes:
Marcador seleccionado Células con genes cotransducidos ( % )
Leu+ 3 thr+
76 ara+
3 leu+
O ara+

¿Cómo están di spuestos los locus en el cro1noso1na?

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al
problema?
El orden de los genes thr, ara y leu en el cromosoma
bacteriano.
¿Qué información se proporciona para resolver el
problema?
■ Los genes están localizados próximos entre sí en el cro-
mosoma de E. coli.
■ La cepa donante es thr+ ara+ leu+, y la cepa receptora es
thr ara- leu:-.
■ El porcentaje de células con genes cotransducidos.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Transducción: uso de fagos para el mapeo de genes bacteria-
nos en la Sección 9 .3.
Pasos de la solución
Nótese que, cuando seleccionamos para leu+ (la mitad superior
del cuadro), la mayoría de las células seleccionada también
son ara+. Este hallazgo indica que los genes leu y ara se
encuentran próxünos entre sí, porque suelen ser cotransduci-
dos. En cainbio, thr+ solo rar a vez es cotransducido con leu+,
lo que indica que leu y thr están mucho más alejados. Sobre la
base de estas observaciones, sabemos que leu y ara están más
cerca gue leu y thr, pero todavía no sabemos el orden de los
tres genes, si thr está del mismo lado de ara que leu o del lado
opuesto, como se muestra aquí:
thr?
leu ara
Observe gue, aunque la frecuencia de cotransducción para thr
y leu también es del 3%, no aparece ningún contransductante
tfir+ ara+. Este hallazgo indica que tbr está más cerca de leu
que de ara, y por lo tanto, thr debe estar a la izquierda de leu,
como se muestra aquí:
thr leu ara

Sección 9.1
l. Explique cómo se aíslan bacterias auxótrofas. mínimos a los que se les ha agregado uno o más nutrientes
2. ¿Cuál es la diferencia entre medio completo y medio (medios suplementados) para aislar mutantes auxótrofos de
mínimo? ¿Có1no se utilizan 1nedios completos y medios bacterias?
272 CAPÍTULO 9

Sección 9.2
3. Explique sucintamente las diferencias entre las células pt. P--,
Hfr y F'.
4. ¿ Qué tipos de apareamientos son posibles entre las células
f+, F-, Hfr y F'? ¿Qué resultados producen estos apareamien-
tos? ¿Cuál es el papel del factor F en la conjugación?
5. Explique cómo pueden usarse la conjugación interrumpida, la
transformación y la transducción para el mapeo de genes bac-
teri anos. ¿Cuáles son las sinulitudes y las diferencias de estos
métodos?
6. ¿Qué es la transferencia génica horizontal y cómo podría pro-
ducirse?
Sección 9.3
7. Enumere algunas de las características que hacen que las
bacterias y los virus sean organismos ideales para muchos
tipos de estudios genéticos.
8. ¿Qué tipos de genomas tienen los virus?
9. Describa brevemente las diferencias entre el ciclo lítico de
los fagos virulentos y el ciclo lisogénico de los fagos atem-
perados.
10. Explique sucintamente cómo se mapean los genes de los
fagos.
11. ¿En qué se diferencia la transducción especializada de la
transducción generalizada?
12. Explique sucintamente el método utilizado por Benzer para
determinar si dos mutaciones diferentes se producían en el
mismo locus.
13. Describa brevemente la estructura genética de un retrovirus
típico.
14. Explique cómo un retrovirus, que tiene genoma de RNA,
puede integrar su material genético en el de un huésped
cuyo genoma es de DNA.
15. ¿Cuáles son los orígenes evolutivos del IDV-1 y el
HIV-2?
16. La mayoría de los seres humanos no son infectados fácil-
mente por la gripe aviar. ¿Cómo se incorporan entonces
secuencias de DNA del virus de la gripe aviar en el virus de
la gripe humana?

PREGUNTAS Y PROBLEMAS DE APLICACIÓN

Introducción (A. L. Taylor y E. A. Adelberg. 1960. Genetics 45:1233-

1243). En un experimento, 1nezclaron células de la cepa
*17. Suponga que desea comparar las especies de bacterias que Hfr AB-312, que era xy[+ mt[+ mal+ met+ y sensibles al
existen en un an·oyo contaminado con las especies que fago T6, con la cepa F- AB-531, que era xyl- mtL- maf-
existen en uno no contaminado. Tradicionalmente, las bac- 1net- y resistente al fago T6. Se permitió la conjugación de
terias se han identificado por cultivo en el laboratorio y las células. A intervalos regulares, los investigadores
con1paración de sus propiedades físicas y bioquímicas. extrajeron una muestra de células e interrumpieron la con-
Usted reconoce que no podrá cultivar la mayoría de las jugación destruyendo las células Hfr con el fago T6. Las
bacterias que residen en los arroyos. ¿Cómo podría identi- células P-, que eran resistentes al fago T6, sobrevivieron y
ficar las especies de los dos an·oyos sin cultivarlas en el después fueron investigadas para detectar la presencia de
laboratorio? genes transferidos de la cepa Hfr. Los resultados de este
experin1ento se muestran en el gráfico adjunto. Sobre la
Sección 9.2 base de estos datos, indique el orden de los genes xyl, mtl,
mal y ,net en el cromosoma bacteriano y señale las distan-
18. Juan García es un criador de cerdos. Durante los últimos 5 cias mínimas entre ellos.
años, García ha agregado vitaminas y bajas dosis de anti-
bióticos al alimento para sus cerdos; afirma que estos
suple1nentos aun1entan el crecimiento de los anirnales. Sin V\ 200
QJ
+-',....,
embargo, el año previo, varios de sus cerdos 1nurieron e s:r mal+
mo
debido a infecciones por bacterias comunes, que no res- .e .... 150
.0 X
E-
pondieron a altas dosis de antibióticos. ¿Puede explicar la
mayor tasa de mo1talidad por infección de los cerdos de
o o,_
~ t; 100 • /
.,xyl+
García? ¿Qué consejo podría darle para prevenir este pro- ~ :E / / :/ mt/ +
blema en el futuro? e : 50 / /_:/ .> met+
19. Rara vez, la conjugación de células Hfr y F-produce dos o
QJ • ¿f/_ _,•"'
células Hfr. Explique cómo se produce este evento. ~ a. o / ~ ;•
O 20 40 60 80 100
20. En la figura 9-8, ¿qué representan las partes rojas y azules Tiempo de muestreo (minutos)
del DNA marcadas por el globo 6?
21. Austin Taylor y Edward Adelberg aislaron algunas cepas
tz;_" nuevas de célul as Hfr que habían usado para mapear *22. Se mezcla una serie de cepas Hfr que tienen genotipo m+
., ••T., varios genes de E. coli mediante conjugación interrumpida n+ o+ p+ q+ ,+
con una cepa P-- que tiene genotipo
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 273

m- n- o- p- q- r . Se interrumpe la conjugación a interva- Sobre la base de estos resultados, ¿ cuál es el orden de los
los regulares y se determina el orden de aparición de los genes en el cromosoma bacteriano?
genes de la cepa Hfr en las células receptoras. E l orden de 27. Se usa el DNA de una cepa bacteriana que es his+ leu+
transferencia génica para cada cepa Hfr es el siguiente: lac+ para transformar una cepa que es his- leu- lac- . Se
transformaron los siguientes porcentajes de células:
Hfr5 m+ q+ p+ n+ ,-+ o+
Hfr4 n+ r+ o+ m+ q+ p+
Hfrl o+ m+ q+ p+ n+ r Genotipo
H fr9 q+ m+ o+ r+ n+ p + Cepa Cepa de las células
Donante receptora transformadas Porcentaje
¿Cuál es el orden de los genes en el cron1osoma bacteria-
no circular? Para cada cepa Hfr, indique la localización his+ leu+ lac+ hi.r leu- lac- his+ leu+ lac+ 0,02
del factor F en el cromosoma y su polaridad. his+ leu+ lac- 0,00
*23. Se realizan cruzamientos de tres cepas Hfr diferentes con his+ leu- lac+ 2,00
muestras distintas de una cepa P-, y se proporcionan los
his+ leu- Zac- 4 ,00
siguientes datos de n1apeo a partir de estudios de conjuga-
ción inte1Tumpida: his- Leu+ lac+ 0 ,10
his- leu- lac+ 3,00
Aparición de genes en células F- his- leu+ lac- 1,50
Hfrl: G enes b+ tI'" e+ r g+
Tiempo 3 5 16 27 59 a. ¿Qué conclusiones puede extraer acerca del orden de
estos tres genes en el crom osoma?
Hf r2: Genes e+ r e+ tI'" b+
b. ¿Cuáles son los dos genes más cercanos?
Tiempo 6 24 35 46 48
H fr3: Genes tI'" e+ r e+ g+ 28. Rollin Hotchkiss y Julius Marmur estudiaron la transfor-
A:."~º"' mación_de la_bacteria Streptococcus pn_eurnoniae (R. J?·
Tiempo 4 15 26 44 38
!,~:.; H otchkiss y J. Marmur. 1954. Proceedings of the National
Acaden1.y of Sciences 40:55-50). Examinaron cu atro muta-
Construya un mapa genético para estos genes e indique su ciones de esta bacteria: resistencia a la penicilina (P),
orden en el cro1nosom a bacteriano y las distancias entre ellos. resistencia a la estreptomicina (S), resistencia a la sulfani-
24. En la figura 9-16, ¿qué gen del factor F será el último en lamida (F) y cap acidad de utilizar manito! (M). Extrajeron
ser transferido en la cepa Hfr5? DNA de cepas de bacterias con diferentes com binaciones
*25. Se utilizó el DNA de una cepa de Bacillus subtilis con el de distintas mutaciones y lo uti li zaron para tran sforn1ar
genotipo trp+ tyr+ para transformar una cepa receptora con células bacterianas de tipo silvestre (p+- s+ F+ M+). Aquí se
e l genotipo trp- tyr. Se recuperaron los siguientes núme- muestran los resu ltados de uno de sus experimentos de
transformación:
ros de células transformadas:

Genotipo Número de células transformadas

DNA DNA Porcentaje del
Trp+ tyr 154 donante receptor Transformantes total de células
trp- tyr+ 3 12
trp+ tyr+ 354 MSF M+ s+ p+ M+Sp+ 4,0
M+S+F 4 ,0
¿Qué sugieren estos resultados acerca del ligamiento MS+p+ 2,6
de los genes trp y tyr? MSp+ 0,41
26. Se utiliz a DNA de una cepa de Bacillus subtilis con geno- M + SF 0,22
tipo a+ b+ e+ tI'" e+ para transformar una cepa con genotipo
Ms+p 0,0058
a- b- e- tJ- e-. Se investigan pares de genes para verificar
si hubo cotransformación y se o btienen los si guientes MSF 0,0071
resultados :

Pares Pares a. H.otchkiss y Marmur observaron que el porcentaje de

de genes Contransformación de genes Cotransformación cotransformación era más alto q ue el esperable por
azar. Por ejemplo, los resultados rnuestran que el 2,6%
a+ y b+ no b+ y tI'" no de las células se transformaron en M y el 4%, en S. Si
_,
a+ y e+ no b+ y e+ SI los rasgos M y S se heredaran en forn1a independiente,
,,
a+ y d+ SI c+ yd+ no la probabilidad esperada de cotransformación de M y S
,, ,,
a+ y e+ SI c+y e+ SI (M S) sería de 0,026 x 0,04 = 0,001 o 0,1 %. Sin embar-
,,
b+y e+ SI tI'" y e+ no go, observaron 0 ,41 % contransformadas M S, cuatro
274 CAPÍTULO 9

veces más de lo que esperaban. ¿ Qué explica la fre- Porcentaje de

cuencia relativamente alta de cotransforn1ación de los Receptor Donante recombinantes
rasgos que observaron?
T3 168PT 12,7
b. Sobre la base de los resultados, ¿qué conclusión puede
extraer acerca del orden de los genes M, S y F en el T3 TI 1 11,8
cromosoma bacteriano? T3 T8 43,5
c. ¿Por qué la tasa de cotransformación de los tres genes T3 H25 28,6
(M S F) es casi la misma que la tasa de cotransforma- 168 H25 44,9
ción de M F solos? H25 4 1,4
TII
29. En el curso de un estudio sobre los efectos del ciz alla- 31,3
Tl H25
~ ,. . miento mecánico del DNA, Eugene Nester, A. T. Ganesan
y Joshua Lederberg estudiaron la transferencia, por trans-
. , . , ., 0 ,
T8 H25 67,4
formación, del DNA cortado de una cepa de tipo silvestre H 25 T3 19,0
de Bacillus subtilis (his2+aro3+ try2+ aro 1+tyr1+aro2+) a H25 TII 26,3
cepas de bacterias que presentan una serie de mutaciones
H25 TI 13,4
(E. W. Nester, A. T. Ganesan y J. Lederberg. 1963.
Proceedings oj· the National Acadeniy of Sciences 49:61 - H25 T8 45,0
68). Comunicaron las siguientes tasas de cotransformación
entre his2+ y los otros genes (expresadas como tasa de Sobre la base de estas frecuencias de r ecombinación de
contransferencia). dos puntos, deter1nine el orden de los genes y las distan-
cias entre ellos. Cuando se complete más de un cruza-
Genes Tasas de cotransferencia miento para un par de genes, promedie las tasas de recom-
binación de los diferentes cruzamientos. Dibuje un map a
his2+y aro3+ 0,015
de los genes en el cromosoma.
his2+ y try2+ 0 ,10
his2+ y aro1+ 0 ,12 Sección 9.3
his2+ y try1+ 0,23 *31. Se han aislado dos mutaciones que afectan la morfología
de las placas producidas por los fagos (a- y b-). Se mez-
his2+y aro2+ 0,05 clan fagos que presentan ambas 1nutaciones (a- b- ) con
fagos de tipo silvestre (a+ b+), y se los agrega a un cultivo
Sobre la base de estos datos, ¿qué gen está más lejos de de células bacterianas. Después de la infección y la li sis,
his2+7 ¿ Cuál está más cerca? se recolectan 1nuestras del lisado producido por los fagos
30. C . Anagnostopoulos e l. P. Crawford aislaron y estudiaron y se las cultiva en células bacterianas. Se observa el
Af"""'" una serie de mutaciones que afectaban varios pasos de la siguiente número de placas:
!.~):;. vía bioquímica de síntesis de triptófano en la bacteria
Bacillus subtilis (C. Anagnostopoulos y l. P. Crawdord. Fenotipo de la placa Número
1961. P,vceedings of the National Academy of Sciences A+ b+ 2043
47:378-390). Aquí se enumeran siete de las cepas que usa-
a+ b+ 320
ron en su estudio, j unto con las mutaciones bailadas en
cada cepa. a+b+ 357
a+b+ 2134
Cepa Mutación
¿ Cuál es la frecuencia de recombinación entre los genes a
T3 r- y b?
168 1-
168PT J- *32. T. Miyake y M . Dem erec examinaron mutaciones que
TI 1- N.••m" req uieren prolina de la bac-

Til J-
!,~;:; teria Salmonella typhimu-
rium (T. Miyake y M.
T8 A- D en1erec. 1960. Genetics
H25 H- 45:755-762). Sobre la base
de estudios de complemen-
Para mapear los genes que intervienen en la síntesis de tación, observaron cuatro
triptófano, llevaron a cabo una serie de experünentos de auxótrofos para prolina:
transformación en cepas con diferentes mutaciones y proA, proB, proC y proD.
determinaron el porcentaje de recombinantes entre las Para determinar si los locus
bacte1ias transformadas. Sus resultados fueron los de proA , proB, proC y
siguientes: proD estaban próximos (5. typhimurium Kwangshin
entre sí en el cromosoma Kim/Photo Researchers).
 Sistemas genéticos bacterianos y virales 275

bacteriano, realizaron un exp erimento de transducción. Se H + r2- x h- r2+ h+ r2+ 6

utilizaron como donantes cepas bacterianas que eran h- r +
proc+ y tenían mutaciones para proA, proB o proD. Se 2 86
infectó a los donantes con bacteriófagos y se permitió que h+ r - 81
2
los fagos de la progenie infectaran bacterias con genotipo h,- ,.2- 7
proc- proA+ proB+ proD +. Después, se sembraron las bac-
teri as e n medio selectivo que permitía crecer solo a las Total 180
bacterias proc+. Luego de esto, se sembraron los trans-
ductantes proc+ en medios selectivos para revelar sus a . Calcule las frecuencias de recombinación entre r2 y h,
genotipos en los otros tres locus pro. Se obtuvieron los
sigu ientes resultados: y entre r 13 y h.
b. Dibuje todos los mapas de ligamiento posibles para
Genotipo estos tres genes.
Genotipo del donante del transductante Número *36. Se infectan en forma simultánea células de E. coli con dos
proc+ proA- pros+ proD+ proc+- proA+ proB+ pro(i+ 2765 cepas de fago A. Una cepa tiene un espectro de h uéspedes
proc+ proA- proB+ proD+ 3 mutante, es tern1osensible y produce placas claras (el
genotipo es h st e); otra cepa tiene los alelos de tipo sil-
proC+ proA+ proB+ pro(!+' proc+- proA+ proB+ proD+ 1838 vestre (eJ genotipo es h+ st+ e+). Se recolectan. los fagos de
proc+ proA+ proB- prov+ 2 la progenie de las células lisadas y se siembran en bacte-
proC+ proA+ proB+ proD- proc+ proA+ proB+ proD+ 1166 rias. Aquí se presentan los números de los diferentes fagos
de la progenie:
proc+ proA+ proB+ proD- o
a. ¿Por qué no hay genotipos p roC- entre los transductantes? Genotipo de los fagos
h. ¿ Cuáles son los genotipos que representan transductantes de la progenie Número de placas
simples y cuáles representan transductantes dobles? h+ e+ sr- 321
c. ¿Hay evidencia de que proA, proB y proD están localiza- he st 338
dos cerca de proC? Explique su respuesta. h,+ e st 26
*33. Una genetista aísla dos mutaciones en un bacteriófago. he+ sr- 30
h+ e st+ 106
Una mutación causa placas claras (e) y la otra produce
he+ st 110
placas diminutas (m) . Experimentos de mapeo previos han
h+ e+ st 5
establecido que los genes responsables de estas dos muta-
ciones se encuentran separados por 8 u.in. La genetista he st+ 6
mezcla fagos con genotipo e+ m+ y genotipo e- m- y utili-
a. Determine el orden de los tres genes en el cromosoma del
za la mezcla para infectar células bacterianas. Recolecta
fago.
los fagos de la progenie y cultiva una muestra de estos en
una siembra de bacterias. Se observa un total de 1 000 b. Determine las distancias de mapa entre los genes.
placas. ¿Qué cantidad de los diferentes tipos de placas (e+ c. Determine el coeficiente de coincidencia y la interferencia
,n+, e- m- , e+ m- , e- m+) debería observar? (véase p. 186 del cap. 7).
34. La genetista realiza el mismo experimento descrito en el 37. Se infecta con fagos una cepa donante de bacterias con
Problen1a 33, p ero esta vez mezcla fagos con el genotipo genes a+ b+ e+ para mapear el cromosoma donante
e+ ,n- y e- m+. ¿Qué resultados se esperan de este cruza- mediante transducción generalizada. Se recoge el lisado de
miento? las células bacterianas producido por los fagos y se utiliza
*35. Un genetista aísla dos bacteriófagos mutantes r (r13 y r,-), para infectar una segunda cepa de bacterias que son cr b-
e-. Se seleccionan las bacterias con el gen a+, y se registra
que causan lisis rápida. Lleva a cabo los siguientes cruza-
el porcentaje de células con cotransducción de los genes
mientos, y contabiliza el número de placas que se enume-
b+ y e+.
ran aqu1:
Gen Células con gen
Donante Receptor seleccionado cotransducido ( % )
Genotipo Número
del fago parental Progenie de placas 25 b+
h+ r +
3 e+
h,+ '13- xh- r13+ 13 1
h- rl3+ 104 ¿ Qué gen se encuentra más cerca del gen a, el gen b o el
h+ r - 110 gen e? Explique su razonamiento.
13
11.- r - 38. Se infecta con fagos una cepa donante de bacterias con
13 2
genotipo leu+ gal- pro+. Se recoge el lisado de las células
Total 216 bacterianas producido por el fago y se lo usa para infectar
276 CAPÍTULO 9

una segunda cepa de bacterias que son leu- gal+ pro- . Se los cultiva sobre la cepa K de E. coli. Para determinar si
selecciona la segund a cepa para leu+, y se obtienen los estas mutaciones se producen en el misn10 gen funcional,
sigu ientes datos de cotransducción: infecta simultáneamente células de E. coli K con combina-
ciones por pares de los mutantes y observa si se forman
Gen Células con gen placas. Obtiene los siguientes resultados. (El signo 1nás
Donante Receptor seleccionado cotransducido ( % ) significa que se formaron placas sobre E. coli K; el signo
menos indica que no se formaron placas sobre E. coli K).
leu+ 47 pro+
leu+ 26 gal- Muta11te 1 2 3 4 5 6 7 8
1
¿Qué genes están más próximos, leu y gal o leu y pro? 2 +
39. Un genetista aísla dos nuevas mutaciones, denominadas 3 + +
4 + +
rllx y rl/Y de la región rII del bacteriófago T4. Se infectan
simultáneamente células de E. coli B con fagos que portan 5 + + +
la mutación rllx y con fagos que portan la n1utación rll . 6 + + +
Una vez lisadas las cél ulas, se toman muestras del lisado 7 + + + +
producido por los fagos. Una muestra se cultiva sobre 8 + + + +
células de E. coli K, y Ltna segunda muestra, sobre cél ul as
de E. coli B. Hay 8322 placas en E. coli By 3 placas en
a. ¿A cuántos genes funcionales (cistrones) pertenecen
estas mutaciones?
E. coli K. ¿ Cuál es la frecuencia de recombinación entre
estas dos mutaciones? b. ¿ Qué mutaciones pertenecen al mismo gen funcional?
*40. Un genetista está trabajando con un nuevo bacteriófago 41. En el virus de la gripe HlNl mostrado en la parte inferior
denominado fago Y3 que infecta a E. coli. Ha aislado de la figura 9-33, ¿los virus de qué organismo aportaron
ocho fagos mutantes que no producen placas cuando se la mayoría del RNA al virus HI Nl?

PREGUNTAS DE DESAFÍO

Sección 9.2
42. Como proyecto de verano, un estudiante de microbiología
aísla de manera independiente dos mutaciones de E. coli
que son auxótrofas para glicina (gly- ). El estudiante desea
saber si estos dos n1utantes se encuentran en la misma uni-
dad funcional. Diseñe un procedimiento que pueda utilizar
para detenninar si estas dos mutaciones gly- se producen
dentro de la misma unidad funcional.
43. Un grupo de estudiantes de genética mezcla dos cepas auxó-
trofas de bacterias: una es leu+ trp+ hir meí y la otra es leu-
trp- his+ met+. Después de mezclar las dos cepas, siembran
las bacterias en medio mínilno y observan unas pocas colo-
nias protótrofas (leu+ trp+ his+ met+). Asumen que ha tenido
lugar cierta transferencia génica entre las dos cepas. ¿Cómo
pueden determinar si la transferenc.ia de genes se debe a
conjugación, transducción o transformación?
 10
DNA: la naturaleza química
del gen

Caminatas por el Ártico y DNA antiguo

Groenlandia es la isla más grande del mundo, con una
superficie de más de 2 200 000 kilómetros cuadrados
(830 000 millas cuadradas), pero la vasta n1ayoría de la
tierra está sepultada en forma permanente bajo cientos de
metros de hielo. Es uno de los ambientes más extremos
de la Tierra. La temperatura a lo largo de la costa aumenta
unos pocos grados por encima de la congelación durante
los días de verano, pero después desciende muchos gra-
dos bajo cero durante el invierno. Con luz solar limitada
(el sol se encuentra por encima del horizonte solo durante
algunas horas en los días de invierno), el frío extremo y
los vientos que alcanzan fuerza de huracán, Groenlandia
tiene un ambiente peligrosamente inhóspito.
-• Aun así, pese a las condiciones
, rigurosas, la isla ha
estado ocupada por gente del Artico en forma continua
durante casi 5000 años. Los primeros habitantes fueron el
- pueblo saqqaq, que vivió en pequeños asentamientos en la
costa de Groenlandia desde hace 4800 a 2500 años. Los
saqqaq habitaban en pequeñas carpas y cazaban mamífe-
ros y aves marinos. El origen de este pueblo ha sido un
Groenlandia, uno de los ambientes más extremos de la Tierra, fue habita-
do originalmente por el pueblo saqqaq. En 201 O, se secuenció el genoma de
misterio desde hace mucho tiempo. ¿Descendieron de
un hombre saqqaq de 4000 años de antigüedad: la notable estabilidad del DNA aborígenes runericanos que e1nigraron de Asia al Nuevo
posibilita el análisis de los genomas de pobladores antiguos. (Alex Hibbert/age Mundo y más tarde se trasladaron a Groenlandia? ¿O des-
fotostock). cendieron del mismo grupo que dio origen al pueblo
esquimal
, que en la actualidad habita el Nuevo Mundo
Artico? ¿O quizá se originaron de otro grupo que emigró
en forma independiente de Asia a Groenlandia después de que los ancestros de los esquimales
y los aborígenes americanos ingresaron en el Nuevo Mundo?
El misterio del origen de los saqqaq se resolvió en 20 1O, cuando los genetistas determ ina-
ron toda la secuencia de DNA de un hombre saqqaq (apodado Inuk) cuyos restos, de 4000
años de antigüedad, se recuperaron de un sitio arqueológico en la costa oeste de Groenlandia.
Los científicos extrajeron DNA de ovillos de cabello hallados en el permafrost. Pese a la gran
antigüedad de la n1uestra, los científicos pudieron determinar con éxito toda la secuencia del
geno,na de Inuk , que consistía en más de 3000 millones de pares de bases de DNA.
Comparando este DNA con secuencias de poblaciones conocidas, los científicos también
pudieron demostrar que los saqqaq están más estrechamente relac.ionados con los chukchis,
un pueblo indígena actual de Rusia. Este hallazgo indica que los saqqaq se originaron de
cazadores que caminaron desde Siberia hacia el Este, a través de Alaska y Canadá, hasta
Groenlandia y que llegaron al Nuevo Mundo independiente1nente de otros que dieron origen a
los aborígenes americanos y a los esquimales. El análisis más detallado del DNA de Inuk
reveló que tenía piel oscura, ojos castaños, sangre de grupo A+ y que probablemente estaba
quedándose calvo.
El DNA, con su espiral de doble cadena, es una de las más elegantes de todas las moléculas
biológicas, pero la doble hélice no es solo una estructura bella, sino que tan1bién le confiere al
277
278 CAP[TULO 1O
DNA una estabilidad y una permanencia increíbles, evidenciadas por su secuenciación de 4000 años
de antigüedad. En una hazaña aún más notable, los genetistas secuenciaron, en 2009, todo el genoma
del neandertal a partir de DNA extraído de huesos de neandertales de 38 000 años de antigüedad.
E ste capítulo considera la forma en la se identificó el DNA
como la fuente de información genética y cómo este codifi-
ca las instrucciones genéticas. Comenzamos por considerar los
requerimientos básicos del material genético y la historia del
estudio del DNA: cómo se descubrió su relación con los genes y
cómo se determinó su estructura. La historia del DNA ilustra
varios puntos in1portantes acerca de la naturaleza de la investiga-
ción científica. AJ igual que tantos avances científicos importan-
tes, la estructura del DNA y su función como material genético no
fueron descubiertas por una sola persona, sino que fueron revela-
das en forma gradual durante un período de casi 100 años, gracias
al trabajo de muchos investigadores. Nuestro conocimiento de la
relación entre el DNA y los genes aumentó muchísin10 en 1953,
cuando James Watson y Francis Crick, analizando los datos pro-
porcionados por Rosalind Franklin y Maurice Wilkins, propusie-
ron una estructura tridimensional para el DNA que esclareció de
manera brillante su papel en la genética.
Después de revisar los descubrimientos que llevaron a nuestro
conocinúento actual del DNA, exanú nare1nos la estructura del
DNA. Esta es importante por sí mis1na, pero el concepto genéti-
co fundamental. es la relación entre la estructura y la función del
DNA: cómo su estructura posibilita que actúe con10 material
genético.
10.1 El material genético tiene varias
características clave
La vida se caracteriza por una tremenda diversidad, pero las ins-
trucciones de codificación de todos los organismos vivientes es-
tán escritas en el misn10 lenguaje genético: el de los ácidos
nucleicos. Sorprende que la idea de que los genes están compues-
tos de ácidos nucleicos no se aceptara de manera generalizada
hasta después de 1950. En parte, el escepticismo se debía a la
falta de conocimiento sobre la estructura del ácido desoxirribonu-
cleico (DNA). Hasta que se conoció la estructura del DNA, no
quedaba claro cómo este podía almacenar y transmitir la infor-
mación genética. Aun antes de que se identificaran los ácidos
nucleicos como material genético, los biólogos reconocieron que,
cualquiera fuera la naturaleza del mate1ial genético, este debía
presenta cuatro características importantes:
l. El material genético debe contener información compleja.
Primero y principal, el 1naterial genético debe ser capaz de
almacenar grandes cantidades de información: instrucciones
para los rasgos y funciones de un organismo.
2. El material genético debe replicarse de manera fiel. Una
segunda característica necesaria es que el material genético
debe tener la capacidad de ser copiado con exactitud. Todos los
organismos comienzan la vida como una célula (1nica. Para
producir un organismo multicelular complejo, como usted, es-
ta única célula debe presentar 1niles de millones de divisiones
celulares. En cada división celular, deben transmitirse instruc-
ciones genéticas a las células descendientes con gran preci-
sión. Cuando los organismos se reproducen y transmiten genes
a su progenie, las instrucciones de codificación deben copiar-
se con fidelidad.
3. El n1aterial genético debe codificar el fenotipo. El material
genético (el genotipo) debe tener la capacidad de expresarse:
codificar rasgos (el fenotipo). A menudo, el producto de un
gen es una proteína o una molécula de RNA, de manera que
debe haber un mecanismo para que las instrucciones genéticas
del DNA sean copiadas en RNA y proteínas.
4. El material genético debe tener la capacidad de variar. La
información genética debe tener la capacidad de vaiiar, porque
diferentes especies (e incluso cada miembro de una especie)
difieren en su co1nposición genética.
CONCEPTOS
El materia l genético debe ser capaz de transportar grandes cantida-
des de información, replicarse con fidelidad, expresar sus instruccio-
nes de codificación en fenotipos y tener la capacidad de variar.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
¿Por qué el descubrimiento de la estructura del DNA fue importante
para comprender la genética?
10.2 Toda la información genética está
codificada en la estructura del DNA o del RNA
Si bien nuestro conocinúento de cómo el DNA codifica la infor-
mación genética es relativamente reciente, el estudio de su estruc-
tura se remonta a más de 100 años (fig. 10-1).
Primeros estudios del DNA
En 1868, Johann Friedrich Miescher se graduó en la facultad de
medicina en Suiza. Influenciado por un tío que consideraba que
la clave para comprender las enfe1medades residía en la química
de los tejidos, Miescher viajó a Tubinga, Alemania, para estudiar
con Ernst Felix Hoppe-Seyler, uno de los pioneros en el campo
e1nergente de la 1nicrobiología. Bajo su dirección, Miescher se
concentró en la química del pus, una sustancia de evidente ilnpor-
tancia médica. El pus contiene leucocitos con núcleos grandes;
Miescher desarrolló un método para aislar estos núcleos. Las
pequeñas cantidades de material nuclear que obtuvo resultaron
insuficientes para un análisis químico exhaustivo, pero sí estable-
ció que el 1naterial nuclear contenía una nueva sustancia levemen-
te ácida y rica en fósforo. Miescher denominó nucleína, a este
material, que consistía en DNA y proteína. Más adelante, uno de
sus estudiantes lo redenominó ácido nucleico.
En 1887, varios investigadores concluyeron de manera inde-
pendiente en que la base física de la herencia residía en el núcleo.
 DNA: la naturaleza química del gen 279

1833 1869 1884 1900 1910 1928 1947 1952 1953

Brown M iescher descubre Se aíslan Se redescubre Levene postula Griffith Ashbury inicia Hershey y Chase Watson y Crick
d escribe la nucleína (DNA) las el trabajo la teoría del demuestra los estudios del demuestran que conciben la estructura
DNA mediante el DNA es el
el núcleo en los n úcleos histonas de Mendel tetranucleótido el p r incipio de secundar ia del DNA
difracción material genético
de la célu la de los linfocitos del n úcleo transformación
de ra os X de los bacteriófagos

•
1830 1850 1860 1870 ~-1_8_8º_ ~ 1890 ~ 900 1910 1920 1930 1940 1950
•
1960

1839 1866 1887 Fines del siglo XIX 1944 1948 1956
Schleiden y Se publica Se reconoce que Kossel determina Avery, Mcleod y McCarty Chargaff y sus colegas Fraenkel-Conrat y Singer
Schwann postulan la por p rimera vez el núcleo es la base demuestran que el descubren la regularidad demuestran que
que el DNA cont iene
t eoría celular el trabajo física de la herencia DNA es el principio en la proporción de algunos virus utilizan
bases nitroge nadas
de Mendel de transformación bases del DNA RNA como material genético

Figura 10- 1. Muchas personas han contribuido a nuestro conocimiento de la estructura del DNA.

Se demostró que la cromatina estaba for mada por ácidos nuclei- Composición de bases {porcentaje*)
cos y proteínas, pero no se sabía con certeza cuál de estas sustan- del DNA de distintas fuentes
cias era la información genética. A fmes del siglo XIX, Albert y proporciones de bases
Kossel continuó trabajando en la química del D NA y deter1ninó
que este contenía cuatro bases nitrogenadas: adenina, citosina, Proporción
guanina y tünina (abreviadas A, C , G y T).
Fuente (A + G)/
En el s iglo XX, el Rockefeller Institute de la ciudad de N ueva
York se convirti ó en un centro de investigación de ácidos nuclei-
de DNA A T G e A/ T G/C (T + C)

cos. Pheobus Aaron Levene se unió al Instituto en 1905 y pasó los E. coli 26 23,9 24,9 25, 2 1,09 0,99 1,04
40 años siguientes estudiando la química del D NA, Descubrió
que el DNA está formado p or una gran cantidad de unidades rep e- Levadura 31,3 32,9 18,7 17, 1 0,95 1,09 1
titivas ligadas, deno1ninadas nucleótidos; cada nucleótido contie-
Erizo de mar 32 ,8 32, 1 17,7 18,4 1,02 0,96 1
ne un azúcar, un fosfato y una base.
Rata 28, 6 28,4 21,4 2 1,5 1,01 1 1
B ase
Fosfato Ser humano 30,3 30,3 19,5 19,9 1 0,98 0,99

Azúcar * Porcentaje en moles de componentes nitrogenados por 100 g-át omos de fosfato en
el hidrolizado corregido para recuperación del 100%. De E. Chagaff y J. Davidson
Nucleótido (eds). The Nucleic Acids, Vol. 1. (New York: Academic Press, 1955).

Equivocadamente, Levene postuló que el DNA consiste en una

se1ie de unidades de cuatro nucleótidos, cada una de las cuales
contiene las cuatro bases (adenina, guanina, citosina y ti.mina) en
una secuencia fija. Este concepto, conocido corno la hip ótesis del
tetranucleótido, implicaba que la estructura del DNA no es lobas-
tante vari able como para ser el material genético. La hipótesis del
tetranucleótido contribuyó a la idea de que la proteína es el mate-
1ial genético porque, con sus 20 aminoácidos diferentes, la estruc-
tura de la proteína podía ser muy variable.
A n1edida que finalizaron otros estudios sobre la quúnica del
DNA en las décadas de 1940 y 1950, este concepto de que el
DNA era una molécula simple e invariabl e comenzó a cambiar.
Erwin Cbargaff y cols. midi eron cuidadosamente las cantidades
de las cuatro bases del DNA de una cantidad de organismos y
halló que el DNA de diferentes organismos varía n1ucho en su
composición de bases. E ste hallazgo refutó la hipótesis del tetra-
nucleótido. Descubrieron que, dentro de cada especie, hay cierta
regularidad en las proporciones de bases; la cantidad de adenina
siempre es igual a la de timina (A = T ), y la cantidad de guani-
na siempre es igual a la de citosin a (G = C ; cuadro 10-1). E stos
resultados se conocieron como reglas de Cha.rga.ff.
CONCEPTOS
Una serie de científicos esclareció deta lles de la estructura del DNA.
Al principio, se interpretó que el DNA era demasiado regular para
contener información genética, pero en la década de 1940 se obser-
vó que el DNA de diferentes organismos varía en su composición de
bases.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿Qué contribución aportó Levene al conocimiento de la estructura del
DNA?
a. Determ inó que el núcleo contiene DNA.
b . Determinó que el DNA contiene cuatro bases nitrogenadas.
c. Determinó que el DNA está formado por nucleótidos.
d. Determinó que las bases nucleotídicas del DNA están presentes
en proporciones regulares.
280 CAP[TULO 1O

DNA como fuente de información

genética
Pregunta: puede un extracto de células bacterianas muertas
Mientras los químicos descifraban la estructura del DNA, los bió- transformar genéticamente células vivas?
logos intentaban identificar la fuente de la información genética.
Mendel identificó las reglas básicas de la herencia en 1866, pero Métodos
no tenía idea acerca de la naturaleza física de la infonnación here- (a) (b) (e) (d)
ditaria. A principios del siglo x:x, los biólogos habían concluido
en que los genes residían en los cromosomas, que se sabía conte-
nían DNA y proteína. Dos conjuntos de experimentos, uno lleva-
do a cabo en bacterias y otro en virus, aportaron evidencia funda-
mental de que el DNA, más que las proteínas, era el material
genético.

EL DESCUBRIMIENTO DEL PRINCIPIO DE TRANSFORMACIÓN El pri-

mer indicio de que el DNA era el portador de la información Se inyectan
+
Se inyectan Se inyectan Se inyecta una
hereditaria provino de la demostración de que el DNA era res- bacterias bacterias de bacterias de tipo mezcla de bacterias
ponsable de un fenó1neno denominado transformación. Este de tipo II1S tipo IIR (no I11S destruidas de tipo IIR y de tipo
fenómeno fue observado por primera vez en 1928 por Fred (virulentas) virulentas) a por calor a un IIIS destruidas por
Griffith, un médico inglés con especial interés en la bacteria a un ratón. un ratón. ratón. calor a un ratón.
causante de neumonía: Streptococcus pneumoniae. Griffith
había tenido éxito en aislar varias cepas diferentes de S. pneu-
nioniae (tipo I, II, m, etc.). En las formas virulentas (causantes
de enfermedad) de una cepa, cada bacteria está rodeada de una
l
Resultados
l l l
cubierta de polisacáridos que hace que la colonia bacteriana
tenga un aspecto liso cuando crece sobre una placa de agar;
estas formas se denominan S, por liso (smooth en inglés).
Griffith observó que en ocasiones estas formas virulentas muta- El ratón muere El ratón vive El ratón vive El ratón muere
ban a formas no virulentas, que carecían de la cubierta de poli-
sacáridos y producían una colonia de aspecto rugoso; estas for-
mas se denominan R (rougb en inglés).
Observó que, si se inyectaban pequeñas cantidades de bacterias
vivas de tipo IIIS a ratones, estos presentaban neu1n.onía y mo- Se recuperan No se No se Se recuperan
rían; cuando examinó a los ratones muertos, detectó grandes can- bacterias de recupera recupera bacterias de
tidades de bacterias de tipo IIIS en su sangre (fig. 10-2a). Cuando tipo IIIS ninguna ninguna tipo IIIS
inyectó bacterias de tipo IIR a los ratones, estos vivieron y no se (virulentas) bacteria bacteria (virulentas)
recuperaron bacterias de su sangre (fig. 10-2b). Griffith sabía que Conclusión: una sustancia de las bacterias virulentas
la ebullición mataba todas las bacterias y destruía su virulencia; destruidas por calor transformó genéticamente bacterias
cuando inyectó grandes cantidades de bacterias de tipo IIIS des- de tipo IIR en bacterias virulentas vivas de tipo IIIS.
truidas por calor a ratones, estos vivieron y no se recuperaron bac-
terias de tipo IIIS de su sangre (fig. 10-2c). Figura 10-2. Los experimentos de Griffith demostraron la transfor-
Los resultados de estos experimentos no fueron inusuales. Sin mación de las bacterias.
embargo, Griffith se sorprendió cuando infectó a sus ratones con
una pequeña cantidad de bacterias vivas de tipo IIRjunto con una
gran cantidad de bacterias de tipo IIIS destruidas por caJor. Como
tanto las bacterias de tipo IIR como las de tipo IIIS destruidas por
calor no eran virulentas, esperaba que estos ratones vivieran. Para improbable, porque había utilizado solo bacterias de tipo IIIS des-
su sorpresa, cinco días después de las inyecciones, los ratones truidas por calor en el experimento control y nunca habían provo-
contrajeron neumonía y n1urieron (fig. 10-2d). Cuando Griffith cado neu1nonía a los ratones.
examinó la sangre deJ corazón de estos ratones, identificó bacte- Una segunda interpretación era que las bacterias vivas de tipo
1ias vivas de tipo IIIS. Además, estas bacterias conservaron sus IIR hubieran mutado a Ja forma virulenta S. Una n1utación de este
características de tipo IIIS por varias generaciones, de manera tipo causaría neumonía a los ratones, pero produciría bacterias de
que la infectividad era heredable. tipo IIS, no las de tipo IDS halladas por Griffith en los ratones
Griffitb consideró todas las interpretaciones posibles de sus muertos. Como las bacterias de tipo II y de tipo III difieren en una
resultados. Primero, podría haber sucedido que las bacterias de se1ie de rasgos , se requerirían nun1erosas mutaciones para que las
tipo IIIS no hubieran estado suficientemente esterilizadas y, por bacterias de tipo 11 se convirtieran en tipo m, y Ja probabilidad de
lo tanto, permanecieron unas pocas bacterias vivas en el cultivo. que todas las mutaciones fueran simultáneas era bajísima.
CuaJquier bacteria viva inyectada a los ratones se habría multipli- La conclusión de Griffith fue que las bacterias de tipo IIR se
cado y causado neumonía. Griffitb sabía que esta posibilidad era habían transformado de alguna manera y habían adquirido la
 DNA: la naturaleza química del gen 281

virulencia genética de las bacterias muertas de tipo IIIS. Esta

transformación había provocado un cambio genético permanen-
te en las bacterias. Si bien Griffith no comprendía la naturaleza Pregunta: ¿cuál es el carácter químico de la sustancia de
de esta transformación, postuló que podría ser responsable algu- transformación?
na sustancia de la cubierta polisacárida de las bacterias muertas.
Denominó a esta sustancia principio de transformación.
Métodos Bacterias
de tipo 111S g utilice calor para
IDENTIFICACIÓN DEL PRINCIPIO DE TRANSFORMACIÓN En la época (virulentas) destruir bacterias
del informe de Griffith, Oswald Avery (véase fig. 10-1) era un viru lentas,
microbiólogo del Rockefeller Institute. Al principio, Avery se 1- -=-=====íJ homogeneícelas
mostró escéptico, pero después de que otros microbiólogos repi- + U fíltrelas.
tieran con éxito los experimentos de G1iffith con otras bacterias,
comenzó a identificar la naturaleza de la sustancia de transfor- Trate las
., muestras con
mac1on. Filtrado de
Tras 10 años de investigación, Avery, Colin MacLeod y Maclyn enzimas que
bacterias de
destruyen
McCarty tuvieron éxito en aislar y purificar en forma parcial la tipo 111S
proteínas, RNA
sustancia de transformación. Mostraron que su composición quí-
o DNA.
mica era muy compatible con la del DNA y bastante diferente de
la de las proteínas. Las enzimas, como tripsina y quimotripsina,
que se sabe que degradan las proteínas, no ejercían ningún efecto
sobre la sustancia de transformación. La ribonucleasa, una enzi-
ma que destruye el RNA, tampoco tenía efecto. En cambio, las
enzimas capaces de destruir el DNA eliminaron la actividad bio- RNasa Proteasa DNasa
lógica de la sustancia de transformación (fig. 10-3). Avery, ' (destruye ' (destruye (destruye
' el RNA) ' proteínas) el DNA)
MacLeod y McCaity mostraron que la sustancia de transforma-
ción precipi taba aproximadamente a la misma velocidad que el
DNA purificado y que absorbía luz ultravioleta en las mismas
longitudes de onda que el DNA. Estos resultados , publicados en
Agregue las
1944, aportaron evidencia convincente de que el principio de
transformación (y por consiguiente la información genética) resi- t t muestras
tratadas a
de en el DNA. Sin e1nbargo, las nuevas teo1ias científicas rara vez cultivos de
se aceptan sobre la base de un solo experimento, y muchos biólo- bacterias de
gos siguieron prefiriendo la hipótesis de que el material genético tipo IIR.
era proteína.

Bacterias Bacterias Bacterias

de tipo IIR de tipo IIR de tipo IIR
CONCEPTOS
El proceso de transformación indica que alguna sustancia (el principio
de transformación) es capaz de modificar genéticamente las bacte-
Resultados
• t t
rias. Avery, MacLeod y McCarty demostraron que el principio de
transformación es el DNA, lo que aportó la primera evidencia de que
el DNA es el material genético.
Bacterias de Bacterias de Bacterias
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3 tipo 111S y de tipo 111S y de de tipo IIR
tipo IIR tipo IIR
Si Avery, Macleod y McCarty hubieran hallado que muestras de bac- _L_ _A_
terias destruidas por calor y tratadas con RNasa y DNasa transforma- ' Los cultivos tratados con proteasa ... pero el cultivo
ban bacterias pero que las muestras tratadas con proteasa no lo hací- o RNasa contienen bacterias de tratado con
an, ¿a qué conclusión habrían llegado? tipo 111S transformadas, ... DNasa, no.

a. La proteasa lleva a cabo la transformación.

b. El RNA y el DNA son los materiales genéticos.
c. La proteína es el material genético.
d. La RNasa y la DNasa con necesarias para la transformación.
Conclusión: como solo la DNasa destruyó la sustancia de
transformación, esta es DNA.
Figura 10-3. El experimento de Avery, Macleod y McCarty reveló el
carácter del principio de transformación.
282 CAP[TULO 1O

EL EXPERIMENTO DE HERSHEY-CHASE La segunda evidencia que (a}

indicó que el DNA era el material genético provino de un estudio El genoma del
del virus T2 llevado a cabo por Alfred Hershey y Martha Chase. -.--, fago es DNA.
El virus T2 es un bacteriófago (fago) que infecta la bacteria
Escherichia coli (fig. 10-4a) . Como se comentó en el capítulo 9,
un fago se reproduce uniéndose a la pared externa de una célula
bacteriana e inyectando su DNA en el interior de la célula, donde
- '

~
Todas las demás
se replica y le indica a la célula que sintetice las proteínas del
fago. El DNA del fago es encapsulado dentro de proteínas, lo que
-
:::::: partes del
bacteriófago son
proteínas.
produce fagos de la progenie que lisan (rompen) la célula y esca-
pan (fig. 10-4b).
En la época del estudio de Hershey-Chase (el artículo fue publi-
•
cado en 1952), los biólogos no sabían con exactitud cómo se
reproducían los fagos. Lo que sí sabían era que el fago T2 estaba
compuesto por alrededor de un 50% de proteína y 50% de DNA,
que un fago infecta una célula uniéndose primero a la pared celu- (b}
lar y que finalmente se producen los fagos de la progenie dentro
de la célula. Como la progenie tiene los mismos rasgos que el fa- Fago El fago se une a
go infectante, el 1naterial genético del fago üúectante debe trans- E. coli e inyecta su
mitirse a la progenie, pero no se conocía el mecanismo de esta E. coli cromosoma.
transmisión genética. "--
Hershey y Chase diseñaron una serie de experimentos para de-
terminar si la proteína del fago o el DNA del fago se transmitían
en su reproducción. Para rastrear el destino de la proteína y el
Cromosoma
DNA, utilizaron fonnas radiactivas, o isótopos, de fósforo y azu- del fago
fre. Es posible emplear un isótopo radiactivo como trazador para
identificar la localización de una 1nolécula específica, porque
El cromosoma
cualquier molécula que contenga el isótopo será radiactiva y, por
bacteriano se degrada,
lo tanto, detectable con facilidad. El DNA contiene fósforo pero y se replica el
no azufre, de manera que Hershey y Chase usaron 32P para ras- cromosoma del fago.
trear el DNA del fago durante la reproducción. La proteína con-
tiene azufre pero no fósforo, por lo que utilizaron 35S para rastre-
ar Ja proteína.
Hershe~ y Chase cultivaron un lote de E. coli en un medio que
contenía 2P e infectaron las bacterias con fago T2, de modo que to-
dos los nuevos fagos tuvieran DNA marcado con 32P (fig. 10-5).
Cultivaron un segundo lote de E. coli en un medio con 35S e La expresión de los
genes del fago
infectaron estas bacterias con fago T2, de manera tal que todos
produce componentes
estos nuevos fagos tendrían proteínas 1narcadas con 35S. Luego, estructurales del fago.
infectaron lotes separados de E. coli no marcada con los fagos
marcados con 35S y 32P. Después de permitir que transcurriera un
tiempo para que los fagos üúectaran las bacterias, colocaron célu-
las de E. coli en una licuadora para que se desprendieran las
cubiertas proteicas ya vacías de las paredes celulares. Separaron
las cubiertas proteicas y las cultivaron con las células bacterianas , Se ensamblan partlculas
infectadas. ~ de los f_
agos de la

~~
Cuando los fagos marcados con 35S infectaron las bacterias, se ~ agente.

detectó la mayor parte de la radiactividad en las cubiertas pro-

teicas y escasa cantidad en las células. Además, cuando emergie-
ron los nuevos fagos de la célula, casi no contenían 35S ( véase
fig. 10-5). Este resultado indicó que el componente proteico de l / \ '.
<i!
un fago no ingresa en la célula y no se transmite a los fagos de la Se lisa la pared
bacteriana y se liberan
progerue.
~ ---==:::::::: los fagos de la
En cambio, cuando Hershey y Chase infectaron bacterias con progenie.
fagos marcados con 32P y extrajeron las cubiertas proteicas, las
bacterias eran radiactivas. Los más significativo fue que, después
de la lisis celular y la salida de los fagos de la nueva progenie, Figura 10-4. T2 es un bacteriófago que infecta a E. coli. a) Fago T2 . b)
muchos de estos fagos emitían radiactividad de 32P, lo que demos- Su ciclo vital. (Micrografía: © Lee D. Simon/Photo Researchers).
 DNA: la naturaleza química del gen 283

tró que el DNA de los fagos infectantes había sido trans-

Pregunta: ¿qué parte del f ago (su DNA o su proteína) sirve como mitido a la progenie (véase fig. 10-5). Estos resultados
material genético y se transmite a su progenie? confirmaron que el DNA, no la proteína, es el material
genético de los fagos. ~•~~~~~~~~~~~~ EL PROBLEMA 24
Métodos Proteína - ( 8 -DNA

Fago T2 ,~
I , \'' O~ E
<:::> O . co 1
¡·
1

~
Ólrrlecte E. coli cultivada
~ medio que contiene 355.
l I
~- - -......---♦
J~ fecte E. coli cultivada en
un medio que contiene Pj
32
l 1
CONCEPTOS
Utilizando isótopos radiactivos, Hershey y Chase rastrearon

7 el desplazamiento del DNA y la proteína durante la infec-

ción por fagos. Demostraron que el DNA, no la proteína,
ingresa en la célu la bacteriana durante la reproducción del
fago, y que solo el DNA se t ra nsmite a los fagos de la pro-
gen ie.

El 355 es captado por la El 32 P es captado par el

proteína del fago, que DNA del fago, que ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
~ ontiene S pero no P. ~ ontiene P pero no S~

¿Podrían Hershey y Chase haber utilizado un isótopo radiac-

Ó Fagos con
35
infectan E. coli
s Fagos con 32P
infectan E. coli
7 tivo de carbono en lugar de 32 P? ¿Por qué o por qué no?
no marcada. no marcada.

Descubrimiento de Watson
, Desprenda las
y Crick de la estructura
cubiertas proteicas tridimensional del DNA
en la licuadora ...
Los experimentos sobre la naturaleza del material gené-
tico sentaron las bases para uno de los avances más
impor tantes en la historia de la biología: el descubr i-
mien to de la estructura tridu11ensional del DNA por
James Watson y Francis Crick en 1953.
Antes del gran avance de Watson y Crick, gran parte
de la química básica del DNA ya había sido determina-
da por Miescher, Kossel, Levene, Chargaff y otros cien-
tíficos, que habían establecido que el DNA estaba forma-
do por nucleótidos, y que cada nucleótido contenía un
Resultados
azúcar, una base y un grupo fosfato. Sin embargo, no
quedaba claro cómo encaj aban los nucleótidos en la
estructura tridimensional de la molécula.
Qp En 1947, William Ashbury comenzó a estudiar la es-
tructura. tridimensional del DNA mediante una técnica
C?- 355~ denominada difracción de rayos X (fig. 10-6), en la que
, Después de la • Después de la un haz de rayos X dirigido sobre una molécula se refle-
centrifugación, se centrifugación, las ja en un patrón específico que revela aspectos de la
recupera 35S del llquida bacterias infectadas
que contiene las
estructura de dicha molécula. Sin embargo, las imágenes

e
forman un pellet que
de difracción que obtuvo carecían de la resolución sufi-
cubiertas del virus.

J ) ', ) 0 ,
~
32
contiene 32P en el
fondo del tubo.
32
ciente para revelar la estructura. Un g1upo de investiga-
ción del King's College de Londres dirigido por Maurice
Íf) o,~ JReproducción l P ½ P Wilki ns también uti li zó difracció n de rayos X para estu-
fP ◄lllt------ del f ago ----► ~ ~ diar el DNA. Rosalind Franklin, que trabajaba en el
laboratorio con Wilkins, obtuvo imágenes llamativamen-
No se detecta radiactividad, lo que Los fagos de la progenie son radiacti- te n1ejores de la molécula. Sin en1bargo, el progreso de
indica que no se ha transmitido la vos, lo que indica que se ha transmitido
Wilkins y Franklin para desarrollar una estructura con1-
¿ otefna a los fagos de la progenie~ DNA a los fagos de la progenie.
pleta de la molécula se vio obstaculizado por desavenen-
Conclusión: el DNA - no las proteínas- es el mat erial genético de los cias personales.
( ·t Watson y Crick investigaron la estructura del DNA,
Figura 10-5. Hershey y Chase demostraron que el DNA contiene la pero no buscm·on nuevos datos, sino que utilizaron toda
información genética de los bacteriófagos. la información conocida acerca de la química del DNA
284 CAP[TULO 1O

Se bombardean cristales de El espaciamiento entre los Momos dentro del cristal El patrón de difracción aporta
una sustancia con rayos X, determina el patrón de difracción, que aparece información acerca de la
que presentan difracción . como puntos sobre una película fotográfica. estructura de la molécula. _j

""'
\
Haz de rayos X

\
Fuente de
\
Pantalla
/
Detector
¡..
rayos X de plomo (placa fotográfica) Patrón de difracción

Figura 10-6. La difracción de rayos X proporciona información acerca de la estructura de las moléculas. (Science Source).

para construir 1nodelos moleculares (fig. 10-7a). Emplearon las
excelentes imágenes de difracción de rayos X tomadas por
Rosalind Franklin (fig. 10-7b) y, aplicando las leyes de la quími-
ca estructural, pudieron limitar la cantidad de estructuras posibles
que podía asumir el DNA. Investiga.ron varias estructuras constru-
yendo modelos de alambre y placas 1netálicas. Con sus modelos,
pudieron observar si una estructura era co1npatible con los princi-
pios quí1111cos y con las imágenes de rayos X.
La clave para resolver la estructura del DNA apareció cuando
Watson reconoció que una base adenina podía unirse con una ba-
se timina y que una base guanina podía unirse con una base cito-
sina; estos apareamientos explicaban las proporciones de bases
descubiertas antes por Chargaff. El n1odelo de Watson y Crick
mostró que el DNA consiste en dos cadenas de nucleótidos que
corren en direcciones opuestas (son antipara.lelas) y que se enro-
Han entre sí para fo rmar una hélice dextrógira, con los azúcares y
los fosfatos en el exterior, y las bases en el interior. Reconocieron
que la estructura bicatenaria del DNA, con su apareamiento espe-
cífico de bases, representaba un 1nedio elegante que permitía la
replicación del DNA. Watson y Crick publicaron una espectacu-
lar descripción de su modelo en Nature, en 1953. Al mismo tiem-
po, Wilkins y Franklin publicaron, cada uno, su .i nformación
sobre difracción de rayos X, que demostró experimentalmente la
hipótesis de que el DNA tenía una estructura helicoidal.
Muchos consideran que la resolución de la estructura del DNA
es el descubrimien to biológico más importante del siglo XX. Por
su descub1irniento, Watson y Crick, junto con Maurice Wilkins,
recibieron el Pre1nio Nobel en 1962. Rosalind Franklin había
muerto de cáncer en 1958, por lo que no pudo ser candidata al
premio compartido, pero muchos académicos e historiadores con-

(a) (b)

~ -~~_,¡~:~~~-"!1-~
/ 1
f ';.,:>

1
'
f
-

Figura 10-7. James Watson y Francis Crick (a) crearon un modelo tridlimensional de la estructura del DNA
basado, en parte, en las fotografías de la difracción de rayos X tomadas por Rosalind Franklin (b). (Parte a:
A. Barrington Brown/Science Photo Library/Photo Researchers. Parte b: Scie1nce Source/Photo Researchers).
 DNA: la naturaleza química del gen 285

sideran que debe compartiT igual crédito por la resolución de la Experimento

estructura del DNA. Pregunta: ¿qué sustancia (RNA o proteína) contiene el
Después del descubrimiento de la estructura del DNA, muchas material genético en el virus del mosaico del tabaco (TMV)?
investigaciones se centraron en cómo se codifica la información
genética dentro de la secuencia de bases, y en cómo se copia y se

~
Métodos
expresa esta información. Aun en la actualidad, los detalles de la
estructura y la función del DNA continúan siendo te1na de activa
investigación. . .ª.;I¡,
1
11
•• ·1I ,11

1!1:1:1 !.,:
1
1 1

TMV de t ipo B
CONCEPTOS
Degrade ambos
-=: tipos de TMV .. .
Por medio de la recolección de la información existente acerca de la Prot eína
qu ímica del DNA y la construcción de modelos moleculares, Watson y
Crick pudieron descubrir la estructura trid imensiona l de la molécula de ,íl ,.
~#~ / t,~,_.~~#• .. para obtener
DNA. ' t 3 --==:::: RNA y proteínas
~ de la cubierta.
--- RNA - ~
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5 ~ ~
Mezcle RNA de 1
¿ Qué utilizaron Watson y Crick para ayuda r a resolver la estructura del un t ipo con
DNA? proteína del
a. Difracción de rayos X.
~ otro ...
~ ~ ,' - - - - - - . J
b. Leyes de química estructural.
~ +
c. Modelos de DNA.
~
d. Todo lo anterior. ~
RNA de Proteína RNA de Prot eína
tipo A de ti o B t ipo B de ti o A

RNA como material genético

~
E n la 111ayoría de los organismos, el DNA transpo1ta la infonna-
ción genética. Sin embargo, unos pocos virus utilizan RNA, no
DNA, como material genético. Esto fu e demostrado en 1956 por
- "''
!11111n•••¡¡
,~u•,n::., . .. para crear
Heinz Fraenkel-Conrat y Bea Singer, quienes trabajaron con el ..=··1
11
:.: 1·•!!1
•::;i virus híbridos.
' ' 111=·~
virus del mosaico del tabaco (TMV), que infecta y causa enfer- TMV híbrido TMV h íbrido
medad a las plantas de tabaco (fig.10-8). El virus del mosaico del
tabaco tiene una sola 1nolécula de RNA rodeada de un cilindro
di spuesto en fonna helicoidal de moléculas proteicas. Fraenkel-
Conrat observó que, después de separar el RNA y la proteína del
l .,,,,,, Ta b aco .........._
l-=(; nfecte el tabaco]
con los hfbridos .

TMV, podía volver a mezclar RNA y proteína de diferentes cepas

de TMV y obtener partículas virales infecciosas intactas.
Junto con Singer, Fraenkel-Conrat creó después virus hfbridos
mezclando RNA y protefua de diferentes cepas de TMV. Cuando
estos virus hfbridos infectaron hojas de tabaco, se produjeron nue-
vas partículas virales. La nueva progenie viral era idéntica a la cepa RNAB

€g
de la cual se habfa aislado el RNA y no presentaba las caractetisti- / RNAA /
cas de la cepa que habfa donado la proteína. Estos resultados mos- Resultados Proteína A ( ~ / Proteín a B
traron que el RNA contiene la información genética en el TMV. ,I t=,/ r El tipo de RNA
También en 1956, Alfred Gierer y Gerhard Schramm demostra- l!Un!!il'!: :1 f! w.~ del TMV parental
ron que el RNA solo aislado del TMV es suficiente para infectar
'
111
d!U'~¡¡! •:
11
1 il
tt ,Eli~
ít';t, h'b 'd
1 n o

plantas de tabaco y diri gir la producción de nuevas partfculas de :5(Uld !~

• : • L.~ determina el
RNA y la proteína
TMV. Este hallazgo confirmó que el RNA es el portador de las de los virus de la
instrucciones genéticas. ~ SOLVER EL PROBLEMA 18 progenie. _J
Conclusión: el RNA es el mater ial genético del TMV.
CONCEPTOS
Figura 10-8. El experimento de Fraenkel-Co nrat y Singer demostró
El RNA sirve como material genético en algunos virus. q ue el RNA del virus del mosaico del t abaco t ransporta la informa-
ción genét ica.
286 CAP[TULO 1O

10.3 El DNA consiste en dos cadenas

complementarias y antiparalelas
de nucleótidos que forman una doble hélice

El DNA, aunque de estructura relativamente simple, tiene una

elegancia y una belleza no superadas por otras moléculas grandes.
Es útil considerar la estructura del DNA en tres niveles de com-
plejidad creciente, conocidos como estructuras p1imaria, secun-
daria y terciaria. La primaria se refiere a la estructura nucleotídi-
ca del DNA y a la forma en que los nucleótidos se unen entre sí.
La estructura secundaria es la configuración tridimensional esta-
ble del DNA, es decir, la estructura heJj coidaJ descifrada por
Watson y Crick. En el capítulo 11 considerare.mos las estructuras
terciarias del DNA, que son los empaquetamientos complejos del
DNA bicatenario en los cromosomas.
Estructura primaria del DNA
La estructura primaria del DNA consiste en una cadena de nu-
cleótidos unidos entre sí por enlaces fosfodiéster.
NUCLEÓTIDOS Por lo general, el DNA es una molécula muy larga ;
por lo tanto, se la denomina macromolécula. Por ejen1plo, dentro
de cada cromoso111a hu111ano hay una única 1nolécula de DNA
que, si se la estirara, mediría varios centí1netros de longitud, 1niles
de veces más que la propia célula. Pese a este gran tamaño, el
DNA tiene una estructura bastante simple: es un polímero, es
decir, una cadena compuesta por muchas unidades repetidas uni-
das entre sí. Las unidades repetidas del DNA son nucleótidos,
cada uno de los cuales está comp uesto por tres partes: 1) un azú-
car, 2) un fosfato, y 3) una base nitrogenada.
Los azúcares de los ácidos nucleicos, llamados pentosas, tienen
cinco átomos de carbono, numerados 1', 2', 3', etc. (fig. 10-9).
Los azúcares del DNA y el RNA tienen ligeras diferencias de
Ribosa Desoxirribosa
Figura 10-9. Un nucleótido contiene ribosa (en el RNA) o desoxirri-
bosa (en el DNA). Se asignan números con el símbolo prima (') a los
átomos de carbono.
estructura. El azúcar del RNA, llan1ado ribosa, tiene un grupo
hidroxilo (-OH) unido al átomo de carbono 2', mientras que el
azúcar del DNA, o desoxirribosa, tiene un átomo de hidrógeno
(-H) en esta posición. Esta diferencia da 01igen a los nombres de
ácido ribonucleico (RNA) y desoxirribonucleico (DNA). La
mayo1ia de las enzimas celulares que interactúan con el DNA o el
RNA reconocen esta diferencia química menor, lo que genera
funciones específicas para cada ácido nucleico. Además, el átomo
de oxígeno adicional del nucleótido del RNA lo torna más reacti-
vo y .menos químicamente estable que el DNA. Por esta razón, el
DNA está mejor dotado para servir como depósito a largo plazo
de la información genética.
E l segundo componente de un nucleótido es su base nitrogena-
da, que puede ser de dos tipos: una purina o una pirimidina (fig.
10-10). Cada purina consiste en un aoiUo de seis lados unido a
un anillo de cinco lados, núentras que cada pirimidina consiste
en un anillo de seis lados solamente. Tanto el DNA como el RNA
contienen dos purinas , adenina y guanina (A y G), que difieren
en las posiciones de sus dobles enlaces y en los grupos unidos al

H
c
N-7° 4'-:CH
1~ ~11
HC~ 1 CH
N
Purina Pirimidina
(estructura básica) (estructura básica)

NH2 o NH 2 o o
11 1 11 11
1
c / C"-- /CH 3 e
~ c , c ..,......N~ HN/ ~C_.....N~ N-7° -i' :c H HN 4 -C
~ 11 ~ 11
1
1
1 11 ; cH 1 :! ]I 1
/ CH -:?C'- 1/ CH
) 1:
-:? C.:::___ 1/ CH
He~ ,,.......c ..._ N H 2N - C~ N""C-..N O N O N o,:?
N H H H H H
Adenina (A) Guanina (G) Citosina (C) Timima (T) Uracilo (U)
(presente en el DNA) (presente en el RNA)

Figura 10-10. Un nucleótido contiene una base púrica o una base pirimídica. Los átomos de los ani-
llos de las bases no llevan números con el símbolo prima.
 DNA: la naturaleza química del gen 287

o- o
1 N
-O-P=O
1
o-
>
N

Fosfato

Figura 10-11. Un nucleótido contiene un grupo fosfato.

OH H OH H
anillo de seis miembros. En los ácidos nucleicos, hay tres pirimi- Desoxiadenosina Desoxiadenosina
dinas comunes: citosina (C), timina (T) y uracilo (U). La citosi- 5' -monofosfato 5' -monofosfato
na está presente tanto en el DNA como en el RNA, mientras que (dGMP)
(dAMP)
el uracilo solo se encuentra en el RNA. Las tres pirimidinas difie-
ren en los grupos o átomos unidos a los átomos de carbono del
anillo. En un nucleótido, la base nitrogenada siempre forma un o
enlace covalente con el átomo de carbono l ' del azúcar (véase
fig. 10-9). La unión de una desoxirribosa o una ribosa y una base
se deno1nina nucleósido.
E l tercer compone nte de un nucJeótido es el grupo fosfato, que
un átomo de fósforo unido a c uatro átomos de oxíge-
no (fig. 10-11). Se observan grupos fosfato en todo nucleótido y
suelen tener carga negativa, lo que torna ácido al DNA. El grupo
fosfato siempre está unido al átomo de carbono 5 ' del azúcar
(véase fig. 10-9) de un nucleótido.
E l nombre correcto de los nucleótidos del D NA es desoxirri- OH H OH H
bonucleótidos o desoxirribonucleósido 5' -monofosfatos. Como Desoxiadenosina Desoxiadenosina
hay cuatro tipos de bases, hay cuatro clases diferentes de nucleó- 5' -monofosfato 5' -monofosfato
tidos del DNA (fig. 10-12). Los nucleótidos equivalentes del
(dTMP) (dCMP)
RNA se denominan ribonucleótídos o ribonucleósido 5' -1no110-
fosfatos. A veces, las moléculas de RNA contiene n otras bases
Figura 10- 12. Hay cuatro tipos de nucleótidos de DNA.
atípicas que son formas n1odifi cadas de las cuatro bases co1nu nes.
Estas bases modificadas se analizarán con mayor detalle al exa-
minar la función de las moléculas de RNA e n el capítulo 14. El
cuadro 10-2 muestra los nombres de las bases, los nucleótidos y
los nucleósidos del DNA. ► ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6

¿En qué se diferencian los azúcares del RNA y del DNA?

a. El RNA tiene un azúcar de seis ca rbonos; el DNA tiene un azúcar
CONCEPTOS de cinco ca rbonos.

La estructura primaria del DNA consist e en una cadena de nucleóti- b. El azúcar del DNA tiene un grupo hidroxi lo que no se encuentra
dos. Cada nucleótido está formado por un azúcar de cinco carbonos, en el azúca r del DNA.
un fosfato y una base. Hay dos tipos de bases del DNA: purinas (ade- c. El RNA contiene uracilo; el DNA, timina.
nina y guanina) y pirimidinas (timina y citosina). d. El azúcar del DNA tiene un átomo de fósforo; el azúcar del RNA, no.

Cuadro 10-2 Nombres de las bases, nucleótidos y nucleósidos del DNA

Adenina Guanina Timina Citosina

Símbolo de la base A G T e
Nucleótido desoxiadenosina 5' mono- desoxiguanos ina 5' mono- desoxitimidina 5' mono-/div> desoxicitidina 5' mono-
fosfato fosfato fosfato fosfato

Símbolo del nucleótido dAMP dGMP dTMP dCMP

Nucleósido desoxiadenosina desoxiguanos ina desoxitimidina desoxicitid ina

Símbolo del nucleósido dA dG dT dC

288 CAPÍTULO 1O

CADENAS POLINUCLEOTÍDICAS El DNA está formado por numero- fosfato libre (lo que significa que no está unido en uno de sus
sos nucleótidos conectados entre sí por enlaces covalentes, que se lados) se une al átotno de carbono 5' del azúcar del nucleótido.
unen el grupo 5 ' -fosfato de un nucleótido con el grupo 3 ' -hidro- Por consiguiente, este extremo de la cadena se denomina extre-
xilo del nucleótido siguiente (fig. 10-13). Obsérvese que las mo 5'. El otro extremo de la cadena, denominado extremo 3',
estructuras mostradas en la figura 10-13 están aplanadas en dos tiene un grupo OH libre unido al átomo de carbono 3' del azúcar.
dimensiones, en tanto que la molécula propian1ente dicha es tridi- Los nucleótidos de RNA también están conectados por uniones
n1ensional, co1no 1nuestra la figura 10-14. Estos enlaces, denomi- fosfodiéster para formar cadenas polinucleotídicas sünilares 5' a
nados uniones fosfodiéster, son enlaces covalentes resistentes; 3' (véase tig. 10-13).
una serie de nucleótidos unidos de esta manera constituye una
cadena polinucleotídica. El esqueleto axial de la cadena polinu-
cleotídica está compuesto por azúcares y fosfatos alternantes; las CONCEPTOS
bases se proyectan hacia afuera del eje longitudinal de la cadena.
Las cargas negativas de los grupos fosfato suelen ser neutral izadas Los nucleótidos del DNA se unen en cadenas polinucleotídicas me-
por la asociación de cargas positivas de las p roteínas, los metales diante enlaces fosfodiéster que conectan el átomo de carbono 3' de
u otras moléculas. un nucleótido con el grupo S'-fosfato del siguiente. Cada cadena
Una característica importante de la cadena polinucleotídica es polinucleotídica tiene polaridad, con un extremo 5' y un extremo 3'.
su dirección o polaridad. En un extremo de la cadena, un grupo

Cadenas polinucleotídicas de DNA Cadena polinucleotídica de RNA

Los pares T-A tienen )
dos puentes de En el RNA, el uracilo (U)
hidrógeno. reemplaza a la timina (T).
~--~

- o-P=O -o- P=O

1 1
o H O 3' o
1
H2d 5' o HzC 5' O

El RNA contiene ribosa

H O H C 5' ' ~ H
3' 21 3' (aquí hay un grupo OH).
O H
o
Un enlace fosfodiéster O OH
1 1 conecta el grupo S' -fosfato 1
-o - P= O O = P- O- - o-P= O
y el grupo 3' -OH de
1 1
o H O
J
nucleótidos adyacentes. o
J 5' . 1 S'
HC
2
O ~ HC
2
O

, j. H
' -.Y
H3~ O H2C 5
1
O-
::;·
CI)
O H o -·'""tl-
CI)
1
o OH
1 ("\

8. -o- t= o O= P- O- 9-: 0. - 0-P = O

O· 1 ""\ O· 1
1 CI)
?
? o o
0- 1 5'
H O 8.
O·
0-
CI) 1 S'
CI)
H2C ? V! H2C
~ 0- Q)
Q) CI)
O H1C S' vJ
V!
H 1
H \ o
\ N_ H
¡;c .._ c/ •••• o O= P-o-
1

HC f' C \\ \\C .._,c.,. N~CH

\ N
···· H- 'c,,_ I'c ....
J

H O
N .._c/ N/ G \\. N'
\\O ....._ N
• • • • H- N/
\
H
H OH

Los pares C-G tienen tres

puentes de hidrógeno.

El DNA contiene desoxir:i~\ I Las cadenas corren en direcciones J

bosa (aquí no hay oxíge~ opuestas, son antiparalelas.

Figura 10-13. El DNA y el RNA están compuestos por cadenas de polinucleótidos. Por lo general, el
DNA está formado por dos cadenas polinucleotídicas, aunque algunos virus contienen DNA monocatenario.
 DNA: la naturaleza química del gen 289

Estructuras secundarias del DNA ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7

La estructura secundaria del DNA se refiere a su configuración El carácter antiparalelo del DNA hace referencia a
tridimensional: su estructura helicoidal fundamental. La estructu-
ra secundaria del DNA puede asumir diversas configuraciones, lo a. sus grupos fosfato con carga,
que depende de su secuencia de bases y de las condiciones en las b. el apareamiento de bases de una cadena con bases de la otra
que se enc uentre. cadena,
c. la formación de puentes de hidrógeno entre bases de cadenas
LA DOBLE HÉLICE Una característica fundamental de la estructura opuestas,
secundaria del DNA es que consiste en dos cadenas polinucleotí- d. la dirección opuesta de las dos cadenas de nucleótidos.
dicas enrolladas entre sí: una doble hélice. Las uniones azúcar-
fosfato se encuentran en la parte externa de la hélice, y las bases
se apilan en el interior de la 1nolécula (véase fig. 10-13). L as dos
cadenas polinucleotídi cas corren en direcciones opuestas: son DIFERENTES ESTRUCTURAS SECUNDARIAS Como hemos visto, el
antiparalelas, lo que significa que el extremo 5' de una cadena es DNA está form ado normalmente por dos cadenas polinucleotídi-
opuesto al extremo 3' de la otra. cas que son antiparalelas y complementarias (las excepciones son
Las cadenas se mantienen juntas mediante dos tipos de fuerzas las moléculas de DNA monocatenai·io de unos pocos virus). Sin
moleculares. Los puentes de hidrógeno unen las bases de cadenas embargo, la forn1a tridimensional precisa de la 1nolécula puede
opuestas (véase fig. 10-13). E stos enlaces son relativamente débiles vai·iar según las condiciones en las que se halle el DNA y, en algu-
en comparación con las uniones fosfodiéster covalentes, que conec- nos casos, según su propia secuencia de bases.
tan el azúcar con los grupos fosfato de nucleótidos adyacentes de la La estructura tridimensional del DNA desc1ita por Watson y
misma cadena. Como veremos, varias funciones importantes del Crick se denomina estructura B-DNA (fig. 10-14). Esta estructu-
DNA exigen la separación de sus dos cadenas nucleotídicas, y esta ra existe cuando el agua que rodea a la molécula es abundante y
separación puede lograrse simple1nente debido a la relativa facili- no bay secuencias de bases inusuales en el DNA, condiciones que
dad de rotura y restablecinliento de los puentes de hidrógeno. son probables en las células. La estructura B-DNA es la configu-
La naturaleza del puente de hidrógeno impone una limitación
sobre los tipos de bases que pu eden aparearse. Normalmente, la (b) Extremo 5 ·
adenina se aparea solo con timina a través de dos puentes de o-
hidrógeno, y la citosina se aparea solo con guanina a través de tres 1 Extremo 3 ·
puentes de hidrógeno (véase fi.g. 10-13). Como se fo1man tres puen-
tes de hidrógeno entre C y G, y solo dos puentes de hidrógeno
-o-P = O
6 H
t
entre A y T, el aparea1niento C-G es más fuer te que el aparea- ~ C G
mi ento A-T. La especificidad del apareamiento de las bases in1p.li- A T
ca que siempre que se halle una A en una cadena debe haber una C G
Ten la posición con·espondiente de la otra cadena, y que sie1npre
que se halle w1a G en una cadena debe haber una C en la otra. Por G e
lo tanto, las dos cadenas polinucleotídicas de una molécula de T A
DNA no son idénticas, sino que son cadenas complementarias
de DNA. El carácter complementario de las dos cadenas nucleo-
El esqueleto axial
consiste en desoxirri-
:-y e
T A
G

tídicas permite la replicación eficiente y exacta del DNA, como se basa unida por fosfato. I< 2nm ~ 3,4 nm
analizará en el capítulo 12. A T
La segunda fuerza que mantiene juntas las dos cadenas de DNA G e
es la interacción entre los pares de bases apilados en el interior de T A
(a)
la molécula. El apilamiento impli ca que las bases adyacentes están e G
alineadas de manera que sus anillos son paralelos y se apilan unos
sobre otros. Las interacciones por apilamiento estabilizan la molé-
G C -0,347F
cula de DNA, pero no requieren que ninguna base particular esté a nmi
T A
continuación de otra. Por lo tanto, la secuencia de bases de la molé- Oxigeno
c G
cula de DNA puede vaiiar libren1ente, lo que le permite portar la
T A
información genética. ~•~!!!:::!~~~~~~~~~~~~~_J
Hidrógeno- A T
Carbono en el G e
esqueleto 1 1
CONCEPTOS axial de OH o
Extremo 3 · 1
azúcar-fosfato - o-P=O
El DNA consiste en dos cadenas polinucleotídicas. Los grupos azúcar- b-
fosfato de cada cadena polinucleotídica se encuentran en la parte Extremos ·
exterior de la molécula, y las bases se hallan en el interior. Los puentes
de hidrógeno unen las bases de las dos cadenas: la guanina se aparea Figura 10-14. El 8-DNA consiste en una hélice dextrógira con
con citosina, y la aden ina con timina. Las dos cadenas polinucleotídi- alrededor de 10 bases por giro. a) Modelo espacial de B-DNA que
cas de una molécula de DNA son complementarias y antiparalelas. muestra los surcos mayor y menor. b) Representación esquemática.
290 CAP[TULO 1O
Dirección de la hélice
TA
28
1 La gran contribución de Watson y Crick consistió en dilucidar la
(a) Forma A (b) Forma B (e) Forma Z
Figura 10-15. El DNA puede asumir varias estructuras secundarias
diferentes. (De J. M. Berg, L. Tymoczko y L. Stryer. Bíochemístry, 6th ed.
[New York: W. H. Freeman and Company, 2002], pp. 785 y 787).
ración n1ás estable para una secuencia aleatoria de nucleótidos en
condiciones fisiológicas, y la mayor parte de la evidencia sugiere
que es la estructura predominante en la célula.
El. B-DNA es una hélice dextrógira, lo que significa que tiene
una espiral que gi ra en sentido horario. Hay alrededor de 1Opares
de bases (pb) por rotación de 360 grados de la hélice, de n1anera
que cada par de bases está girado 36 grados respecto de las bases
adyacentes (véase fi.g. 10-14b). Los pares de bases están separa-
dos por 0,34 nanómetros (nm); por lo tanto, cada rotación co111-
pleta de la molécula abarca 3,4 nm. El diámetro de la hélice es de
2 nin, y Jas bases son perpendiculares al eje longitudinal de la
molécula de DNA. Un modelo espacial muestra que el B-DNA
tiene una estructura delgada y elongada (véase fig. 10-14a). La
espiral que forman las cadenas nucleotídicas genera un surco
mayor y un surco menor en la hélice, características impo11antes
para la unión de algunas proteínas que regulan la expresión de la
infonnación genética (véase cap. 16).
Otra estructura secundaria que puede asumir el DNA es la
estructura A-DNA, que está presente cuando hay menos agua. Al
igual que el B-DNA, el A-DNA es una hélice dextrógira (fig. 10-
lSa), pero más corto y más ancho que el B-DNA (fi.g. 10-lSb), y
sus bases están inclinadas hacia afuera del eje principal de la
n1olécula. Se ha detectado A-DNA en algunos complejos DNA-
proteína y en esporas de algunas bacterias.
U na estructura secundaria radicalmente distinta, denominada
Z-DNA (fig. 10-15), forma una hélice levógira. En esta forma, el
esqueleto axial de azúcar-fosfato zigzaguea hacia adelante y hacia
atrás, lo que da origen a su nombre. Se puede generar una estruc-
tura Z si la molécula contiene secuencias de bases particulares,
como segmentos de nucleótidos de C y G alternados. Los investi-
gadores han hallado que los anticuerpos específicos contra Z-
DNA se unen a regiones del DNA que se están transcribiendo a
RNA, lo que sugiere que el Z-DNA puede dese1npeñar algún
CONCEPTOS
El DNA puede asumir diferentes estructuras secundarias, lo que depen-
de de las condiciones en las que se halle y de su secuencia de bases.
Se considera que el B-DNA es la configuración más frecuente en la
célula.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
¿En qué se diferencia el Z-DNA del B-DNA?
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Implicaciones genéticas de la estructura del DNA
estructura química del genotipo, lo que posibilitó que los genetis-
tas comenzaran a examinar directamente los genes en lugar de
observar solo las consecuencias fenotípicas de su acción. La deter-
minación de la estructura del DNA dio origen a la genética mole-
cu lar: el estud io de la naturaleza química y molecular de la infor-
mación genética.
La estructura de Watson y Cri ck hizo más que solo ofrecer la
posibilidad de estudios genéticos moleculares; fue una fuente
inmediata de conocimientos sobre procesos genéticos clave. Al
principio de este capítulo, se identificaron cuatro propiedades
fundamentales del material genético. Primero, debe ser capaz de
portar grandes cantidades de información. El modelo de Watson
y Crick sugirió que la inf ormación genética está cod ificada en la
secuencia de bases, la única parte variable de la molécula.
Una segunda propiedad necesaria del material genético es su
capacidad de replicarse con fidelidad. Las cadenas polinucleotídi-
cas complementarias de DNA posibilitan esta replicación. Watson
y Crick postularon que, en la replicación, las dos cadenas pol inu-
cleotíd icas se desenrollan, lo que rompe los puentes de hidróge-
no débiles entre las dos cadenas, y que cada cadena sirve de
molde para la síntesis de una nueva cadena. La especificidad del
apareamiento de bases implica que, a partir de cada molde, se
puede sintetizar la única secuencia posible de bases: la secuencia
complementaria . Por lo tanto, las moléculas de DNA bicatenario
recién repl icadas serán idénticas a la molécula de DNA bicatena-
rio original (véase cap. 12 sobre repl icación del DNA).
Una tercera propiedad esencia l del material genético es la capa-
cidad de expresar sus instrucciones en el fenotipo. El DNA expresa
sus instrucciones genéticas transfiriendo primero su información a
una molécula de RNA en un proceso denominado transcripción
(véase cap. 13). El término transcripción es apropiado porque, si
bien la información se transfiere del DNA al RNA, la información
se mantiene en el lenguaje de los ácidos nucleicos. En algunos
casos, la molécula de RNA transfiere después la información
genética a una proteína especificando su secuencia de aminoáci-
dos. Este proceso se denomina traducción (véase cap. 15), por-
que la información se debe traducir al lenguaje de los aminoáci-
dos. Una cuarta propiedad del DNA es que debe ser capaz de
varia r. Esta variación consiste en diferencias de la secuencia de
bases halladas en distintos individuos.
Ahora podemos identificar tres vías importantes de f lujo de
información en la célula (fig. 10-16a): en la replicación, la infor-
mación pasa de una molécu la de DNA a otras moléculas de DNA;
 DNA: la naturaleza química del gen 291

(a) Vías principales de información (b) Vías especiales de información

ió n del RNA
' n del DNA
La información se
transfiere de una En algunos virus, la
molécula de DNA a información se transfiere
Transcripción La información se
una molécula de RNA. Transcripción de RNA a DNA ...
transfiere de una molécula j inversa
de DNA a otra.
. .. o a otra
I I f f / I ReplicaEión del - =-:::,1molécula de RNA.
RNA
La información se transfiere del
RNA a una proteína a través de Transcripción
un código que especifica la
secuencia de aminoácidos.

PROTEÍNA PROTEÍNA

Figura 10-16. Vías de transferencia de información dentro de la célula .

en la transcripción, la información pasa del DNA al RNA; en la tra- (a) Horquilla

ducción, la información pasa del RNA a la proteína. Este concep- iGCGATACTCATCGCA
to de flujo de información fue formalizado por Francis Crick en un
concepto que él denominó el dogma central de la biología mole-
cula r. El dogma central afirma que la información genética pasa
del DNA a la proteína en una vía de información unidireccional.
Sin embargo, en la actualidad advertimos que el dogma central es
una simplificación excesiva. Además de las tres vías de informa-
ción generales de replicación, transcripción y t raducción, puede
haber otras transferencias en ciertos organismos o en circunstan-
cias especiales. Los retrovirus (cap. 9) y algunos elementos traspo- (b) Tallo
nibles (véase cap. 18) transfieren información del RNA al DNA (en
la transcripción inversa), y algunos virus RNA transfieren infor-
mación de RNA a RNA (en la replicación del RNA; fig. 10-16b).

papel en la expresión de genes. Se pueden formar otras estructu-

ras secundarias del DNA (C-DNA, D-DNA, etc.) en condiciones (c)
de laborato1io especializada o en DNA con determinadas secuen-
cias de bases.

10.4 Se pueden formar estructuras especiales

en el DNA y el RNA
Las secuencias dentro de una única cadena de nucleótidos pueden
ser complementarias entre sí y aparearse para formar puentes de
hidrógeno, lo que produce regiones bicatenarias (fig. 10-17). Este
apareamiento de bases interno confi ere una estructura secundaria
a una molécula monocatenaria. Un tipo frecuente de estructura
secundaria hallada en cadenas nucleotídicas simples es la horqui-
lla, que se forma cuando secuencias de nucleótidos de la misn1a
Figura 10-17. Tanto el DNA como el RNA pueden formar estructuras
cadena son con1plementos invertidos (véase fig. 10-17a). Una
secundarias especiales. a) Una horquilla, que consiste en una región de
horquilla consiste en una región de bases apareadas (el bucle). bases apareadas (que forman el tal lo) y una región de bases no apareadas
Cuando las secuencias complementarias son contiguas, la horqui- entre las secuencias complementarias (que forman un bucle al final del
lla tiene un tallo pero no un bucle (véase fig. 10-17b). Las molé- tallo). b) Un tallo sin bucle . c) Estructura secundaria del componente RNA
culas de RNA pueden contener numerosas horquillas, lo que les de una RNasa de E. coli. Las moléculas de RNA suelen tener estructuras
permite plegarse en estructuras completas (véase fig. 10-17c). Las secundarias complejas.
292 CAP[TULO 1O
DNA
} triple
CAGAAGGGAGAAGGGGG DNA
3'
triple
TTCCCTCTTCCCCC _ _.-
Figura 10-18. El H-DNA se origina cuando se aparean tres
cadenas de polinucleótidos.
estructuras secundarias desempeñan papeles importantes en las
func iones de 1n ucbas moléculas de DNA, con10 se analizará en
los capítulos 14 y 15.
Asimismo, las secuencias de DNA forman en ocasiones estruc-
turas de tricatenaiias (triples), denominadas H-DNA, cuando se
desenrolla un segmento del DNA y una sola cadena polinucleotí-
dica de una parte de la molécula se aparea con DNA bicatenai·io
de otra parte de la n1olécula (fig. 9-18). Esto es posible porque en
ciertas condiciones una base puede aparearse en forma simultá-
nea con otras dos bases. A menudo, el H-DNA abarca secuencias
largas que contienen solo bases púricas o solo bases pirimídicas.
Algunas estructuras triples están farmadas por una cadena de
purinas apareada con dos cadenas de pirimidinas; otras estructu-
ras triples consisten en una cadena de pirimidinas apareada con
dos cadenas de purinas. Las secuencias capaces de adoptar la con-
fi guración de H-DNA son comunes en los genomas de mamífe-
ros, y la evidencia indica que el H-DNA existe en condiciones
CH 3 Grupo metilo
5-metilcitosina
Figura 10-19. En el DNA eucarionte, las bases citosina a menudo son
metiladas para formar 5-metilcitosina.
naturales. Investigación reciente ha demostrado que el H-DNA se
rompe más fácilmente que el DNA bicatenario, lo que induce
tasas más altas de mutación en las estructuras H-DNA. En ciertas
condiciones, se pueden formar estructuras cuádruples que involu-
cran cuatro cadenas de DNA. ► RESOLVER El PROBLEMA 39
CONCEPTOS
En el DNA y el RNA, el apareamiento de bases entre nucleótidos de la
misma cadena produce estructuras secundarias especiales, por ejem-
plo, horquillas. Pueden aparecer estructuras de DNA tricatenario cuan-
do una sola cadena de DNA se aparea con DNA bicatenario.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
Las horquil las se forman como resultado de
a. secuencias de la misma cadena que son complementarias y están
invertidas,
b. secuencias de la cadena opuesta que son complementos,
c. secuencias de la misma cadena que son idénticas,
d. secuencias de la cadena opuesta que son idénticas.
La estn1ctura primaria del DNA puede modificarse de diversas
maneras. Una de estas modificaciones es la metilación del DNA,
un proceso en el que se agregan (por medio de enzimas específi-
cas) grupos n1etilo (-CH3) a ciertas posiciones de las bases nu-
cleotídicas. A menudo, el DNA bacteriano se metila para distin-
guirse del DNA no 1netilado, extraño, que puede ser introducido
por virus: las bacterias utilizan proteínas denominadas enzi mas
de restricción para cortar cualquier DNA viral no metilado (véase
cap. 19). En las células eucariontes, la metilación suele relacio-
narse con la expresión génica. Por lo general, las secuencias meti-
ladas muestran bajos niveles de transcripción, mientras que las se-
cuencias no metiladas se transcriben activamente (véase cap. 17).
La metilación también puede afectar la estructura tridimensional
de la molécula de DNA.
En las bacterias, la adenina y la citosina suelen estar metiladas.
En el DNA eucarionte, las bases citosina a veces son metiladas
para forn1ai· 5-metílcitosina (fig. 10-19). El grado de metilación
de la citosina varía en distintos organi smos eucariontes; en la
mayoría de las células anjmales, alrededor del 5% de las bases
citosina están metiladas, pero no hay metil ación de la citosina en
las levaduras, y en algunas plantas, más del 50% de las bases cito-
sina están metiladas. No se ha esclarecido por qué el grado de
metilación es tan diferente en los organismos eucai·iontes.
CONCEPTOS
Es posible agregar grupos metil o a ciertas bases del DNA, lo que
depende de sus posiciones en la molécula. Se puede metilar tanto el
DNA procarionte como el DNA eucarionte. En los eucariontes, las
bases citosina son las metiladas con mayor frecuencia para formar 5-
metilcitosina, y la metilación a menudo se relaciona con la expresión
gén ica.
 DNA: la naturaleza química del gen 293

RESUMEN DE CONCEPTOS
■ El material genético debe contener información compleja,
replicarse con exactitud, codificar el fenotipo y tener capaci-
dad de variar.
■ La evidencia de que el DNA es la fuente de información
genética provino del hallazgo de Avery, MacLeod y McCarty
de que la transformación dependía del DNA, y de la demos-
tración de Hershey y Chase de que el DNA viral se transmite
a los fagos de la progenie. Los resultados de experimentos
con TMV 1nostraron que el RNA es portador de información
genética en algunos virus.
■ James Watson y Francis Crick, con datos proporcionados por
Rosalind Franklin y Maurice Wilkins, propusieron un modelo
para la estructura tridimensional del DNA en 1953.
■ Un nucleótido de DNA está formado por una desoxirribosa,
un grupo fosfato y una base nitrogenada. El RNA consiste en
ribosa, un grupo fosfato y una base nitrogenada.
■ Las bases de un nucleótido de DNA son de dos tipos: purinas
(adenina y guanina) y pirimidinas (citosina y timina). El RNA
contiene la pirimidina uracilo en lugar de timina.
■ En una cadena polinucleotídica, los nucleótidos están unidos
entre sí por uniones fosfodiéster. Cada cadena polinucleotídica
tiene un grupo fosfato libre en el extremo 5' y un grupo hidro-
xilo libre en el extremo 3'.
■ El DNA consiste en dos cadenas nucleotídicas que se enrollan
entre sí para formar una doble hélice. Los azúcares y los fos-
fatos se ubican del lado exterior de la hélice, y las bases se
apilan en el interior. Las dos cadenas están unidas entre sí por
puentes de hidrógeno entre las bases de cada cadena. Las dos
cadenas son antipara.lelas y complementarias.
■ Las moléculas de DNA pueden formar una serie de estructu-
ras secundarias diferentes, lo que depende de las condiciones
en las que se halla el DNA y de su secuencia de bases.
■ La estructura del DNA tiene varias implicaciones genéticas
importantes. La información genética reside en la secuencia
de bases del DNA, que finalmente especifica la secuencia de
aminoácidos de las proteínas. El carácter complementario
de las bases de las dos cadenas del DNA permite que se repli-
que la inforn1ación genética.
■ El dogma central de la biología molecular afirma que la infor-
mación fluye en forma unidireccional, del DNA al RNA, a la
proteína. En la actualidad, se conocen excepciones al dogma
central.
■ El apareamiento entre bases de la misma cadena nucleotídica
puede generar horquillas y otras estructuras secundarias.
■ El DNA puede ser modificado por el agregado de grupos
metilo a las bases nucleotídicas.

TÉRMINOS IMPORTANTES

5-metilcitosina (p. 292)
adenina (A) (p. 286)
A-DNA (p. 290)
antipa:ralelo (p. 289)
base nitrogenada (p. 286)
B-DNA (p. 289)
cadena polinucleotídica
(p. 288)
cadenas complementarias de
DNA (p. 289)
citosina (C) (p. 287)
desoxinibonucleótido (p. 287)
desoxinibosa (p. 286)
difracción de rayos X (p. 283)
dogma central (p. 291)
extremo 3' (p. 289)
extremo 5' (p. 288)
grupo fosfato (p. 287)
guanina (G) (p. 286)
H-DNA (p. 291)
horquilla (p. 29 1)
isótopo (p. 282)
metilación del DNA (p. 292)
nucleósido (p. 287)
nucleótido (p. 279)
pirimidina (p. 286)
principio de transformación
(p. 281)
purina (p. 286)
reglas de Chargaff (p. 279)
replicación (p. 290)
ribonucleótido (p. 287)
ribosa (p. 286)
timina (T) (p. 287)
traducción (p. 290)
transcripción (p. 290)
transcripción inversa (p. 291)
unión fosfodiéster (p. 288)
uracilo (U) (p. 287)
Z-DNA (p. 290)

l. Sin conocer la estructura del DNA, era imposible comprender 6. b

cómo se codificaba o se expresaba ]a infon11ación genética. 7. d
2. c 8. El Z-DNA tiene una hélice levógira; el B-DNA, una hélice
3. c dextrógira. El esqueleto axial de azúcar-fosfato del Z-DNA
4. No, porque tanto las proteínas como los ácidos nucleicos zigzaguea hacia adelante y hacia atrás, mientras que el del B-
contienen carbono. DNA forma una cinta lisa continua.
5. d 9. a
294 CAP[TULO 1O

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
El porcentaje de citosina de una mo lécula de DNA bicatenario es del 40%. ¿Cuál es el porcentaje de timina?

Estrategia de solución Pasos de la solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Si C = 40%, entonces el porcentaje de G debe Recuerde: en el DNA
ser 40%. El porcentaje total C +G es, por lo bicatenario, A se
El porcentaje de tilnina de la molécula de DNA. aparea con T, mien-
tanto, 40% + 40% = 80%. Todas las bases res- tras que G se aparea
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
tantes deben ser A o T; en consecuencia, el con C; por lo tanto,
■ La molécula de DNA es bicatenaria. porcentaje total de A + T = l 00% - 80% = el porcentaje de A es
igual aJ porcentaje de
■ El porcentaje de citosina es del 40%. 20%; corno el porcentaje de A es igual al por- T, y el porcenta¡e de
centaje de T, este es 20%/2 = 10%. G es igual al porcen·
Para obtener ayuda con este problema, repase: taje de C.
Estructura primaria del D NA y Estructuras secundarias del
DNA, en la Sección 10.3.

Problema 2
¿Cuál de las siguientes r elaciones será verdadera respecto del porcent~je de bases del DNA bicatenaiio?

C T
a.C+T=A+G b. - = -
A G

Estrategia de solución Pasos de la solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Una manera fácil de determinar si las relaciones son verdade-
C T ras consiste en asignar porcentajes arbitrarios a las bases y
Indicar si C + T = A + G y - =- son verdaderas. recordar que, en el DNA bicatenario, A = T y G = C. Por
A G ejemplo, sj los porcentajes de A y T son cada uno del 30%,
¿Qué información se proporciona para resolver el problema? entonces los porcentajes de G y C son cada uno del 20 %.
■ La molécula de DNA es bicatenaria. Podemos sustituir estos valores en las ecuaciones para obser-
var si las relaciones son válidas.
■ Las proporciones de los diferentes giupos de bases.
a. 20 + 30 = 30 + 20 Esta relación es verdadera.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Estructura primai·ia del DNA y Estructuras secundarias del b. 2º / 30 = 3º/20 Esta relación no es verdadera.
DNA, en la Sección 10.3.

Sección 10.1 S. ¿Cómo mostraron Hershey y Chase que el DNA se transmite

l. ¿ Cuáles son las cuatro características generales que debe
tener el mate1ial genético?
Sección 10.2
2. Reseñe en forma sucinta la historia de nuestro conocimiento
sobre la estructura del DNA hasta la época de Watson y
Crick. ¿Cuáles considera que fueron las contiibuciones
y desarrollos principales?
3. ¿ Qué experimentos demostraron que el DNA es el material
genético?
4. ¿Qué es la transformación? ¿Cómo demostraron Avery y
cols. que el principio de transforn1ación es DNA?
a los nuevos fagos dtu·ante la reproducción?
6. ¿Por qué fue tan importante el descubrimiento de la estructu-
ra del DNA?
Sección 10.3
7. Dibuje e identifique las tres partes de un nucleótido de
DNA.
8. ¿En qué se diferencia un nucle6tido de RNA de un nucleóti-
do de DNA?
9. ¿En qué se diferencia una purina de una pirimídina?
¿ Qué purinas y pirimidinas se encuentran en el DNA y el
RNA?

10. Dibuje un segmento corto de una cadena polinucleotídica
siJnple que incluya por lo 1nenos tres nucleótidos. Indique
la polaridad de la cadena identificando el extremo 5' y el
extremo 3'.
11. ¿Qué bases pueden formar puentes de hidrógeno entre sí?
12. ¿Qué tipos diferentes de enlaces químicos se encuentran en
el DNA y dónde se localizan?
13. ¿ Cuáles son algunas de las implicaciones genéticas impor-
tantes de la estructura del DNA?
Introducción
17. La introducción a este capítulo, acerca de la secuenciación
de DNA de 4000 años de antigüedad , destaca la extrema
estabilidad del DNA. ¿ Qué aspectos de la estluctura del
DNA contribuyen a la estabilidad de la molécula? ¿Por qué
el RNA es menos estable que el DNA?
Sección 10.2
*18. Haga coincidir los investigadores (a-j) con los descubri-
mientos enumerados.
a. Kossel f. Hershey y Chase
b. Fraenkel-Conrat g. Avery, MacLeod y McCarty
c. Watson y Crick h. Griffith
d. Levene i. Franklin y Wtlkins
e. Miescher j. Chargaff
- Tomaron las fotos de la difracción de rayos X usadas para
construir la estructura del DNA.
- Determinó que eJ DNA contiene bases nitrogenadas.
- Identificaron el DNA como el material genético en bacte-
riófagos.
- Descub1ió la regularidad de las proporciones de las dife-
rentes bases del DNA.
- Determinó que el DNA es responsable de la transfo1ma-
ción en las bacterias.
- Descifraron la estructura helicoidal del DNA construyendo
modelos.
Descub1ió que el DNA consiste en nucleótidos repetidos.
Determinó que el DNA es ácido y r ico en fósforo.
Llevaron a cabo experiJnentos que mostraron que el RNA
puede servir como material genético en algunos vilu s.
- Demostró que el material de bacterias destruidas por calor
podía transformar genéticamente bacterias vivas.
*19. Un estudiante mezcla algunas bacterias Streptococcus
pneu,non iae de tipo IIS destruidas por calor con bacterias
vivas de tipo IIR y le inyecta la muestra a un ratón. El
ratón presenta neumonía y muere. El estudiante recupera
algunas bacterias del ratón muerto. Si este es el único
experimento que realiza el estudiante, ¿ha demostrado que
se ha producido transformación? ¿Qué otras explicaciones
DNA: la naturaleza química del gen 295
14. ¿Cuáles son las tres vías principales de flujo de información
dentro de la célula?
Sección 10.4
15. ¿ Qué son las horquillas y cómo se forman?
16. ¿ Qué es la metilación del DNA?
podrían justificar la presencia de bacterias de tipo IIS en el
ratón muerto?
20. Anticipe lo que habría sucedido si Griffith hubiera mez-
clado algunas bacterias de tipo IIIS destruidas por calor y
algunas bacterias de tipo IIR destruidas por calor y se las
hubiera inyectado a un ratón. ¿Hubiese contraído neumo-
nía y habría muerto el ratón? Explique por qué o por qué
no.
21. Explique cómo las bacterias de tipo ms destruidas por
calor del expe1imento de Griffith modificaron genética-
mente las bacterias vivas de tipo IIR. (Pista: véase la dis-
cusión sobre transfor1nación en el cap. 9).
22. ¿Qué resultados esperaría si el experimento de Hershey y
Chase se llevara a cabo en virus del mosaico del tabaco?
23. ¿ Cuáles de los procesos de transferencia de información
ilustrados en la figura 10-16 se 1·equieren para la repro-
ducción del fago T2 ilustrada en la figura 10-4?
*24. Imagine que es un estudiante del laboratorio de Alfred
Hershey y Martha Chase a fines de la década 1940. Le
entregan cinco tubos de ensayo que contienen bacterias
E. coli que fueron marcadas con 32P o 35S. Lamentable-
mente, usted olvidó rotular los tubos y ahora no está segu-
ro acerca de cuáles están marcadas con 32P y cuáles lo
están con 35S. Coloca el contenido de cada tubo en una
licuadora y Ja hace funcionar durante algunos segundos
para desprender las cubiertas proteicas. Después, centrifu-
ga el contenido para separar las cubiertas proteicas y las
células. Ve1ifica la presencia de radiactividad y obtiene los
siguientes resul tados. ¿Qué tubos contenían E. coli infec-
tada por fago 1narcado con 32P ? Explique su respuesta.
Número de tubo Presencia de radiactividad en
1 células
2 cubiertas proteicas
3 cubiertas proteicas
4 células
5 células
25. La figura 10-8 ilustra el experimento de Fraenkel-Conrat
y Singer sobre el 1naterial genético del TMV. ¿Qué resul-
tados esperaría en este experilnento si la proteína, en lugar
del RNA, portara la informac ión genética del TMV?
296 CAP[TULO 1O

Sección 10.3 30. Boris Magasanik reunió datos sobre las cantidades de
~ "' bases del RNA aislado de una serie de ~uentes, expresa~as
*26. A menudo, se separan moléculas de DNA de distinto ., ••,o, respecto de un valor de 10 para la adenma (B. Magasanik,
tamaño med iante una técnica denominada electroforesis en The Nucleic Acids: Chemishy and Biology, vol. I, E.
(véase cap. 19). Con esta técnica, las moléculas de DNA Chai·gaff y J. N. Davidson, Eds. New York: Academic
se colocan en un gel al cual se le aplica una corriente eléc- Press, 1955).
trica, y ]as moléculas de DNA migran hacia el polo positi-
vo ( +) de la corriente. ¿ Qué aspecto de esta estructur a Porcentaje
hace que una 1uolécula de DNA migre hacia el polo positi-
vo? Organismo y tejido A G e T
*27. Cada par de nucleótidos de una doble hélice de DNA pesa Núcleos de hígado de rata 10 14,8 14,3 12,9
alrededor de 1 x 10- 21 g. El cuerpo hun1ano contiene alre- Núcleos de hígado de conejo 10 13,6 13, 1 14
dedor de 0,5 g de DNA. ¿Cuántos pares de nucleótidos de
Cerebro de gato 10 14,7 12 9,5
DNA h ay en el cuerpo humano? Si asume que todo el
DNA de las células humanas se encuentra en la forma B- Músculo de carpa 10 21 19 11
DNA, ¿cuán lejos llegaiia el DNA si se lo extendiera de Levadura 10 12 8 9,8
extremo a extremo?
28. Una cadena nucleotídica de una molécula de DNA tiene la a. Calcule para cada organismo la proporción de (A+
siguiente secuencia de bases: G)/(U + C).
5' -ATTGCTACGG-3' b. ¿Cómo se comparan estas proporciones con la propor-
Indique la secuencia de bases y rotule los extremos 5 ' y 3' ción (A+ G)/(T + C) hallada en el DNA (véase
de la cadena nucleotídica complementaria del DNA. Problema 29)? Explíquele.
*29. Erwin Chargaff recolectó 31. ¿Cuál de las siguientes relaciones sería verdadera en una
molécula de DNA bicatenario?
/Z;" datos sobre las proporcio-
nes de bases nucleotídicas
OE DATOS

del DNA de una variedad a.A+T= G + C

de organismos y tejidos e .A+G -10
- -- - '
diferentes (E. Chargaff, en C+T
The Nucleic Acids: A G
Chen1istry and Biology, vol. b.A+T=T+C f. - = -
I, E . Chargaff y J. N. c T
Davidson, Eds. New York:
A C
Academic Press, 1955). Los c.A+C=G+T g.-=-
siguientes datos provienen G T
del DNA de varios organis- Erwin Chargaff (Horst
Tappe/Getty lmages). A+T A G
mos analizados. d. - - = 1,0 h. - = -
C +G T C
Organismo y tejido
Porcentaje A G e T *32. Si una molécula de DNA bicatenaiio contiene 15% de
Timo de oveja 29,3 2 1,4 21,0 28,3 timina, ¿cuáles son los porcentajes de todas las demás
Hígado de cerdo 29,4 20,5 20,5 29,7 bases?
Timo humano 30,9 l99 19,8 29,4 33. Suponga que cada una de las bases del DNA fuera capaz
'
Médula ósea de rata 28,6 2 1,4 20,4 28,4 de apareai·se con cualquier otra base. ¿ Qué efecto tendría
Eritrocitos de gallina 28,8 20,5 21,5 29,2 esta aptitud sobre la capacidad del DNA pai·a servir como
Levadura 31,7 18,3 17,4 32,6 fuente de información genética?
E. coli 26 24,9 25,2 23,9 34. Heinz Shuster reunió los
Espermatozoides bun1anos 30,9 19,1 18,4 31,6 N."/uJ'" siguientes datos sobre la
Espennatozoides de salmón 29,7 20,8 20,4 29,1 !,~":;:: composición del virus del
Espermatozoides de arenque 27,8 22, 1 20,7 27,5 llantén (H. Shuster, en The
Nucleic Acids: Chemistry and
a. Calcule para cada organismo la proporción (A + G)/(T Biology, vol. I , E. Chargaff y
+ C) y la proporción (A + T)/(C + G). J. N. Davídson, Eds. New
b. ¿Son estas proporciones constantes o varían entre los York: Academic Press, 1955).
organismos? Explique por qué. Sobre esta base, ¿la infom1a-
c. ¿Es diferente la proporción (A+ G)/(T + C) en las ción genética del virus del
muestras de espermatozoides? ¿Esperaría que Jo fuera? llantén es RNA o DNA? ¿E s
Virus del mosaico del llantén
¿Por qué o por qué no? probable que sea n1onocate- (Jena Library of Biological Macro-
nai·io o bicatenario? molecules).
 DNA: la naturaleza química del gen 297

Porcentaje a. Confeccione una lista de los errores de la estructura de

esta cadena polinucleotídica.
A G C T u b. Dibuje la estructura correcta de la cadena polinucleotí-
Virus del llantén 29,3 25,8 18 o 27 dica.
38. El capítulo 1 consideró la teoria de la herencia de caracte-
*35. Aquí se tabulan las cantidades relativas de cada base 1ísti cas adquiridas y observó que esta teoría ya no se acep-
nucleotítidica de cuatro virus diferentes. Para cada virus ta. ¿Es consistente el dogma central con la teoría de la
enumerado en el siguiente cuadro, indique si su material herencia de características adquiridas? ¿Por qué o por
genético es DNA o RNA y si es monocatenario o bicate- qué no?
nruio. Explique su razonamiento.
Sección 10.4
Virus T e u G A
I o 12 9 12 9 *39. Escriba una secuencia de bases de una molécula de RNA
que for1nará una horquilla.
II 23 16 o 16 23
111 34 42 o 18 39 40. Escriba una secuencia de nucleótidos en una cadena de
DNA que formru·á una horquilla.
IV o 24 35 27 17

*36. Una molécula de B-DNA tiene l .m illón de pares de nucle-

ótidos. ¿Cuántos giros co,npletos hay en esta 1nolécuJa?
*37. Como entretenimiento en una o
noche de viernes, un profesor 1
-o- P- 0-
de genética propuso que sus 1
hij os d iagramaran un a cadena OH - base
polinucleotídica de DNA.
Como había aprendido acerca H
del DNA en preescolar, su hija
de 5 años pudo dibujar una
H 9
cadena polinucleotídica, pero
-o-r- o-
cometió va1ios en·ores. El dia- OH-CH C base
grruna de la hija (aquí repre-
sentado) contenía por lo
n1enos 10 errores. H OH

PREGUNTAS DE DESAFÍO

Sección 10.1 información genética y que, con e l tiempo, el DNA reem-

*41. Suponga que se envía una sonda automatizada, no tripula-
da, al espacio para buscar vida extraterrestre. D espués de
errar durante muchos años-luz por los confines del univer-
44. Según se informa, los científicos han aislado pequeños frag-
so, la sonda llega a un planeta distante y detecta vida. La
con1posición quú11ica de la vida en este planeta es total-
mente di stinta de la vida sobre la Tie1Ta, y su material
genético no está compuesto por ácidos nucleicos. ¿ Qué
predicciones puede hacer acerca de las propiedades quími-
cas del 1naterial genético en este planeta?
Sección 10.2
42. ¿Cómo se podrían usar el 32P y el 35S para demostrar que el
principio de transformación es DNA? Reseñe en forma
breve un experimento que mostraría que el D NA, y no la
proteína, es e l principio de transformación.
plazó al RNA como fuente de información genética. ¿ Qué
aspectos de la estn1ctura del DNA podrían volverlo más
apto que el RNA para ser el material genético?
mentos de DNA de huesos de dinosaurio fosilizados de
cientos millones de años de antigüedad. La técnica emplea-
da para aislar este DNA es la Teacción en cadena de la poli-
merasa, que puede amplificar un millón de veces cantidades
muy pequeñas de DNA (véase cap. 19). Los críticos han
argumentado que el DNA ai slado de huesos de dinosaurio
no es exclusivamente de origen antiguo, sino que ha sido
contaminado por D NA de organismos de la época actual,
como bacterias, mohos o seres humanos. ¿Qué precaucio-
nes, análisis y experimentos de control se podrían llevar a
cabo para gru·antizar que el DNA recuperado de fósiles sea
verdaderame nte de origen antiguo?

Sección 10.3
43. Los investigadores han postulado que las primeras formas
de vida sobre la Tierra utilizaban RNA como su fuente de
 11
Estructura cromosómica y DNA
de los orgánulos

Telómeros y adversidad en la infancia

Dentro de cada una de nuestras células hay 46 cromosomas,

estructuras exquisita1nente co1nplejas de DNA y proteína que
contienen las instrucciones de codificación de todos nuestros
rasgos. Estos cromosomas son transmitidos por nuestros pro-
genitores y representan la base de la herencia, la transmisión
de rasgos de una generación a la siguiente. Pero los cromoso-
mas no solo son portadores de un registro de nuestro legado
genético. También llevan un registro ( en la longitud de sus
telórneros) de los factores de estrés que hallan1os.
Los telómeros son estructuras protectoras especiales loca-
lizadas al final de cada uno de nuestros cromosomas. Como
las pequeñas puntas de plástico que impiden que se deshila-
chen los extremos de un cordón de zapatos, los telómeros
evitan que los cromosomas se degraden en sus extremos.
Pese a la protección de los telómeros, los cromosomas de la
1nayorfa de las células se acortan de 1nanera progresiva con
cada división celular. Debido a una peculiaiidad de la repli-
cación del DNA, la mayoría de las células son incapaces de
copiar el propio extremo de cada cromoson1a lineal (véase
Niño de un orfanato rumano. La investigación demostró que los niños que un análisis completo sobre el problema de la replicación de
vivían en orfanatos estatales tenían telómeros más cortos que aquellos de hogares los extremos en el cap. 12). Por consiguiente, con cada
sustitutos. (Jenny Matthews/Alamy).
ciclo de replicación, el cro1nosoma se acorta hasta que está
tan reducido que la célula deja de dividi rse, se torna inacti-
va y, finalmente, muere. En la mayoría de las células, este acortamiento de los telómeros limi-
ta la cantidad de divisiones posibles. Se observan excepciones en las células germinales (que
producen futuras generaciones), ciertas células madre y, lamentablemente, en muchas células
cancerosas que han escapado a las limitaciones nor1nales de la división celular.
Como los telómeros se acortan con cada división celular, se ha investigado mucho para
determinar si la longitud del telómero es indicativa de envejecimiento biológico. Si bien la
relación entre la longitud de los telómeros y el envejecimiento es compleja y no se conoce por
completo, considerable evidencia indica que, de hecho, los telómeros se acortan con la edad y
que los procesos que inducen su acortamiento prematuro se asocian con características de
envejecimiento. En 2011, los genetistas observaron que las dificultades halladas en etapas
tempranas de la vida pueden desempeñar un papel en el acortruniento de los telómeros.
Pai·a estudiar los efectos de la experi encia en las primeras etapas de la vida sobre la longi-
tud de los telómeros , los geneti stas estudiaron a 100 niños que vivían en orfanatos estatales en
Rumania. A una edad muy temprana, algunos de estos niños fueron ubicados en hogares susti-
tutos; otros permanecieron en los orfanatos. E studios previos demostraron que los niños de
estos orfanatos recibían 111enos atención y cuidados individuales que aquellos que crecían con
sus padres naturales o sustitutos, y se asu1ne que el cuidado institucional es más estresante
que la guarda sustituta.
Cuando los niños tenían de 6 a 1O años, los investigadores tomaron muestras de su DNA y
midieron la longitud de sus telómeros. Los resultados fueron sorprendentes: los niños que per-
1nanecieron en los orfanatos tenían telón1eros significativan1ente más cortos que los que vivie-

299
 Bacteria E. co/i

¿ ------ ~:.:,osoma bacteriano~::=-::=-~~---;-~;~-----------------------

Figura 11-1. El DNA de
E. coli es alrededor de 1000
veces más largo que la
propia célula.
ron en guarda sustitu ta. La conclusión de los investigadores fue que la adversidad en la infancia incide
en la longitud de los telómeros: los niños criados en ambientes estresantes tienen 1nayor probabilidad
de tener telómeros más cortos que aquellos criados en ambientes menos estresantes. Varios otros estu-
dios han hallado una asociación similar entre longitud de los telómeros en adultos y factores de estrés
en etapas tempranas de la infancia, como abuso y enferrnedad crónica. No se sabe cómo el estrés a
afecta los telómeros y causa su acortamiento, pero la investigación documenta que los cron1osomas son
más que un depósito de informació111. genética: su estructura ta1nbién es afectada por nuestro atnbiente.

E n este capítulo, examinamos la estructura molecular de los

cromosomas y el DNA hallado en los orgánulos citoplasmá-
ticos. La pritnera parte del capítulo considera un problema de
almacenamiento: cómo se guardan tremendas cantidades de DNA
dentro del limitado espacio de una célula. Aun en los organismos
que tienen las cantidades más pequeñas de DNA, la longitud del
material genético supera en mucho la longitud de la célula. Por lo
tanto, el DNA debe estar 1nuy plegado y densamente empaqueta-
do, pero este empaquetamiento crea problemas: torna inaccesible
el DNA, lo que no permite que sea copiado ni leído. El DNA fun-
cional debe ser cap az de desplegarse y expandirse parcialmente,
de manera que sean factibles la replicación y la transcripción de
genes individuales. El carácter flexible y dinámico del empaque-
tamiento del DNA es uno de los principales temas de este capítu-
lo. Consideran1os primero el supereru:ollamiento, una estructura
terciaria importante del DNA hallada en células tanto procarion-
tes como eucaiiontes. Después de una breve revisión deJ cromo-
soma bacteriano, examinamos la estructura de los cromosomas
eucariontes. Prestamos especial atención a las paites operativas
del cromosoma: específicamente, los centrómeros y los telóme-
ros. Asimismo, analizamos los tipos de secuencias de DNA pre-
sentes en 1nuchos cromoson1as eucariontes.
La segunda parte de este capítulo se centra en la organización de
las secuencias de DNA halladas en las mitocondrias y los cloro-
plastos. En el capítulo 5, se examinó la herencia uniparental de los
genes presentes en estos orgánulos; aquí, estudiamos aspectos
moleculares del DNA de los orgánulos. Consideramos de manera
sucinta la estructura de las mitocondrias y los cloroplastos, la he-
rencia de rasgos codificados por sus genes y el origen evolutivo de
estos orgánulos. Después, examinainos las características generales
del DNA mitocondrial (mtDNA), para después analizar la organi-
zación y la función de diferentes tipos de genomas mitocondriales.
Por últin10, consideramos el DNA de los cloroplastos (cpDNA) y
exa1ninainos sus características, organización y función.
11.1 Grandes cantidades de DNA
son empaquetadas en una célula
El empaquetamiento de tremendas cantidades de información ge-
nética en el pequeño espacio de una célula se ha denominado el
problema primordial de almacenamiento. Considérese el cromo-
soma de la bacteria E. coli, una sola molécula de DNA con ah·e-
dedor de 4,6 millones de pares de bases. Si este DNA se estirara,
mediría alrededor de 1000 veces n1ás que la célula en la que resi-
de (fig. 11-1). Las células humanas contienen más de 6 mi11ones
de pares de bases de DNA, que medirían más de 2 metros (más de
6 pies) si se las estirara de extremo a extremo. Aun el DNA del
cromosoma humano más pequeño superaría, estirado, 14 000 ve-
ces la longitud del núcleo. Es evidente que las moléculas de DNA
deben estar densamente e1npaquetadas para caber en espacios tan
pequeños.
Es posible considerar tres niveles jerárquicos en la estructura del
DNA: la estructura prin1aria del DNA es su secuencia de nucleóti-
dos, la estructura secundaria es la doble hélice y la estructura ter-
ciaria se refiere al plegamiento de orden superior que permite el
empaquetamiento del DNA en el limitado espacio de una célula.
CONCEPTOS
El DNA cromosóm ico existe en forma de moléculas de gran longitud
que son densamente empaquetadas para que quepan dentro de los
pequeños límites de una célula.
Superenrollam iento
Un tipo de estn1ctura terciai·ia del DNA es el superenrollamiento,
que tiene lugar cuando la hélice de DNA está sometida a tensión
por estar demasiado o poco enrollada. El estado de menor energía
para el B-DNA (véase cap. 10) es cuando este tiene alrededor de
10 pb por giro de su hélice. En este estado relajado, un segmento
del 100 pb de DNA supondría alrededor de 10 giros completos (fig.
11-2a). Si se utiliza energía para agregar o eliminar algún giro, se
impone tensión a la 1nolécula, lo que h ace que la hélice se superen-
rolle, o gire, sobre sí misma (fig. ll-2b y c). Las moléculas rotadas
en exceso presentan superenrollamiento positivo (véase fig. 11-
2b). Las moléculas subrotadas muestran superenrollamiento ne-
gativo (véase fig. 11-2c). El superenrollamiento es una solución
parcial al problema del empaquetamiento del DNA celulai·, porque
el DNA superenrollado ocupa menos lugar que el DNA relajado.
El superenrollainiento se produce cuando la tensión de la rota-
ción excesiva o la subrotación no puede ser compensada por el giro
de los extremos de la doble hélice, como en el caso del DNA circu-
lar, es decir que no tiene extremos libres. Si las cadenas pueden
girar con libertad, sus extremos simplemente girarán a medida que
se agreguen o se eliminen rotaciones extra, y la molécula recupera-
rá en forma espontánea el estado relajado. Por lo general, tanto el
DNA bacteriano como el euca1ionte se pliegan en bucles estabili-
zados por proteínas (que evitan .la rotación libre de los extre1nos;
véase fig. 11-3), y se produce superenrollamiento dentro de ellos.
El superenrollarniento depende de las topoisomerasas, enzi-
mas que agregan o eli1ninan rotaciones de la hélice de DNA al
romper en forma transitoria las cadenas nucleotídicas, rotar los
extren1os alrededor de sí mismos y, después, reunir los extre1nos
separados. Así, las topoisomerasas pueden tanto inducir como li-
berar el superenrollamiento, aunque no todas hacen ambas cosas.
La mayor parte del DNA hallado en las células presenta supe-
renrollamiento negativo, que tiene dos ventajas respecto del
 (a) DNA que no está superenrollado. Primero, el superenrollamien-
to negativo facilita la separación de las dos cadenas de DNA
durante la replicación y la transcripción. El DNA con superenro-
llamiento negativo está subrotado, de manera que la separación
DNA circu lar de las dos cadenas durante la replicación y la transcripción es
relajado más rápida y requiere menos energía. Segundo, el DNA superen-
rollado puede ser e1npaquetado en un espacio más pequeño que
el DNA relajado.

CONCEPTOS

,,- La rotación excesiva o la subrotación de una doble hélice de DNA

(b) Agrege dos giros
(rote en forma excesiva)
Un cordón de teléfono es impone tensión a la molécula, lo que determina que se superenrolle.
similar a DNA circular relajado. El superenrol lamiento es controlado por enzimas topoisomerasas. La
mayoría del DNA celular presenta superenrollamiento negativo, que
facilita la separación de las cadenas nucleotídicas durante la replica-
(c) Elimine dos giros ción y la transcripción, y permite que el DNA sea empaquetado en
(su brote) espacios pequeños.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1

Una molécu la de DNA de 300 pb de longitud tiene 20 rotaciones

completas. Esta molécula de DNA está
a. superenrollada positivamente,
b. superen rollada negativamente,
c. relajada.

El cromosoma bacteriano
La mayoría de los genomas bacterianos consiste en una sola
molécula de DNA circular, aunque se han hallado moléculas de
DNA lineal en algunas especies. En los cromosomas bacterianos
circulares, el DNA no existe en un círculo abierto, relajado; los 3
a 4 millones de pares de bases del DNA presentes en un genon1a
bacteriano típico serían demasiado grandes para caber en una
célula bacteriana (véase fig. 11-1). El DNA bacteriano no se une
a proteínas histona como el DNA eucarionte (lo que se analiza
más adelante en este capítulo), sino que forma un complejo con
una serie de proteú1as que ayudan a con1pactarlo.
Cuando se observa una célula bacteriana con el microscopio
Superenrollamiento Superenrollamiento electrónico, su DNA suele aparecer como una acumulación defi-
positivo negativo
_A
El superenrollamiento El superenrollamiento Si usted gira el CONCEPTOS
positivo se produce negativo se produce receptor al colgar,
cuando el DNA está cuando el DNA está induce un Un cromosoma bacteriano típico está formado por una molécula cir-
excesivamente subrotado; la hélice superenrollamiento cular grande de DNA, que consiste en una serie de bucles enrolla-
rotado; la hélice se gira sobre sí misma en negativo en el cordón. dos. El DNA bacteriano se visualiza como una acumulación definida,
retuerce sobre la dirección o uesta. el nucleoide, dentro de la célula bacteriana.
sí misma.

Figura 11-2. El DNA superenrollado está rotado en forma excesiva o ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
subrotado, lo que hace que gire sobre sí mismo. Las micrografías elec-
trónicas corresponden a DNA relajado (arriba) y a DNA superenrollado ¿En qué se diferencia el DNA bacteriano del DNA eucarionte?
(abajo). (Dr. Gopal Murti/Phototake).
302 CAP[TULO 11

(a) (b) Bucles retorcidos

de DNA

Figura 11-3. El DNA bacteriano está

altamente plegado en una serie de
bucles. (Parte a: Dr. Gopal Murti/Photo
Researchers). Proteínas

nida, el nucleoide, limitado a una región específica del citoplas- titutiva. Asimismo, la heterocromatina puede apru·ecer durante
ma. Si se abre con delicadeza una célula bacteriana, su DNA se ciertas etapas del desruTollo y se la denomina heterocromatina
derrama al exterior en una serie de bucles enrollados (fig. 11-3a). facultativa. Por ejemplo, se observa heterocrom atina facultativa a
Lo 1nás probable es que las proteínas mantengan en su sitio a los lo largo de todo un cromosoma X en los mamíferos hembra curu1-
extremos de los bucles (fig. 11-3b). M uchas bacterias contienen do se desactiva este cro1nosoma X (véase p. 25 del cap. 4).
DNA adicional en forma de pequeñas moléculas circulares deno- Además de mantenerse condensada durante todo el ciclo celulru·,
minadas plásmidos, que se replican independientemente del cro- la heterocromatina se caracteriza por una ausencia general de
mosoma (véase cap. 9). transcripción, de entrecruzamiento y de replicación a fines de la
fase S. El cuadro 11-1 resume las diferencias entre la eucrom ati-
Cromosomas eucariontes na y la beterocron1atina.
Las proteínas más abundantes de la cro1natina son las histonas,
Cada cromosoma eucarionte contiene enormes cantidades de pequeñas proteínas con carga positiva pertenecientes a cinco gru-
DNA. Al igual que el cromosoma bacteriano, cada cromosoma pos principales: Hl , H2A, H2B, H3 y H4. Todas las hlstonas tie-
eucarionte consiste en una sola molécula de DNA, sumamente nen un alto porcentaje de arginina y lisina, aminoácidos con carga
larga. Para que este DNA quepa dentro del n úcleo, se req uiere positiva que les confieren una cru·ga positiva neta. L as cru·gas
muchísimo empaquetamiento y plegamiento, cuyo grado debe positivas atraen las negativas de los fosfatos del DNA; esta atrac-
ca1nbiar en el curso del ciclo celular. Los cromosomas se encuen- ción man tiene al DNA en contacto con las histonas. E n los cro-
tran en un estado elongado, relativamente no condensado, duran- mosomas eucariontes, también hay una variedad heterogénea de
te la interfase del ciclo celular (véanse pp. 93-49 del cap. 2), pero proteínas cromosómicas no histonas. En ocasiones, se incorpo-
aquí es importante el término relativrunente. Si bien el DNA de ran en la cromatina variantes de histonas , con secuencias de ami-
los cromosomas en la inte1fase está empaquetado en forma 111enos noácidos algo diferentes, en lugar de una de las histonas principa-
densa que el DNA de los cromosomas en nlitosis, aun así la con- les. ►
densación es alta; so lo está menos condensado. En el curso del
ciclo celular, se modifica el nivel de empaquetamiento de l DNA:
los cromosomas progresan de un estado muy condensado a otro
de condensación extrema, necesario para el movüniento de los Cuadro 11-1 Características de la eucromatina y la hetero-
cromosomas durante la mitosis y la meiosis. Asimismo, el empa- cromatina
queta1niento del DNA se n1odifica local111ente en la replicación y
la transcripción, cuando las dos cadenas nucleotídicas deben Característica Eucromatina Heterocromatina
desenrollarse para exponer una secuencia de bases particuJar. Por Condensación Menos condensada Más condensada
consiguien te, el empaquetan1iento del DNA eucarionte (su estruc- de la cromatina
tura cromosómica terciru-ia) no es estático, sino que cambia con
regularidad en respuesta a procesos celulares. Loca Iización En los brazos del En centrómeros, teló-
cromosoma meros y otros lugares
CROMATINA El DNA eucarionte de la célula está estrechamente específicos
asociado con proteínas. Esta co1nbinación de DNA y proteínas se
denomina cromatina. Los dos tipos básicos de cromatina son la Tipo de secuencias Secuencias únicas Secuencias repetidas*
eucromatina, que presenta el proceso normal de condensación y Presencia de genes Muchos genes Pocos genes*
descondensación durante el ciclo celular, y la heterocromatina,
que permanece en un estado muy condensado durante todo el Cuándo se replica Durante toda la Fase S tardía
ciclo celular, aun durante la interfase. La eucromatina constituye fase S
la mayor parte del material cromosómico y es donde tiene lugar
la mayor parte de la transcripción. Todos los cromosomas tienen Transcripción A menudo Infrecuente
heterocromatina permanente (denominada heterocromatina cons- Entrecruzam iento Frecuente Infrecuente
titutiva) en los centrómeros y en los teló1neros; el cromosoma Y
también está formado en gran medida por heterocromatina cons- *Solo aplicable a la heterocromatina constitutiva.
 Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 303

En el nivel más simple, la Doble hélice de DNA

cromatina es una estructura
helicoidal bicatenaria de DNA. ')

)' -.L
2nm
..i:'...
El DNA forma un Cada nucleosoma está compuesto por ocho
complejo con histonas histonas alrededor de las cuales se envuelve
para dar origen a los el DNA aproximadamente 1,65 veces.
nucleosomas.
- Histona H1
/
Centro del nucleosoma con __.....--.e
ocho moléculas de histona
... que forma bucles de 300 nm
de longitud, en promedio. ' Los nucleosomas se pliegan para
-----v-- producir una fibra de 30 nm .. .
300 nm

~ I Las fibras de 300 nm se comprimen

y se pliegan para producir una fibra
Fibra de 250 nm de ancho - =; de 250 nm de ancho.

VI 1 -I ~I700 nm
i
1400 nm
l
Figura 11-4. La cromatina tiene una estructura muy compleja, con varios niveles de organización.

asocia con proteínas y se pliega mucho para formar un cromo-

CONCEPTOS
La cromatina, que consiste en un complejo de DNA y proteínas, es
el material que compone los cromosomas eucariontes. Las más
abundantes de estas proteínas son los cinco tipos de histonas con
carga positiva: H 1, H2A, H2B, H3 y H4. En ocasiones, se pueden
incorporar en la cromatina variantes de histonas en lugar de las his-
tonas normales.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿Qué efecto ejercería sobre las histonas la neutralización de sus
cargas positivas?
a. Se unirían más estrechamente al DNA.
b. Se unirían menos estrechamente al DNA.
c. Ya no se atraerían entre sí.
d. Causarían superenrollamiento del DNA.
EL NUCLEOSOMA La cromatina tiene una estructura muy com-
pleja con vari os niveles de organización (fig. 11-4). El nivel más
simple es la estructui-a de doble hélice del DNA analizada en el
capítulo 10. En un nivel más complejo, la molécula de DNA se
so1na.
Cuando se aísla la cro1natina del núcleo de una célula y se la
observa con un microscopio electrónico, suele tener el aspecto de
un collar de cuentas (fig. 11-Sa). Si se añade una pequeña canti-
dad de nucleasa a esta estructura, la enzima degrada la "cadena"
entre las "cuentas", lo que deja cuentas individuales unidas a ah·e-
dedor de 200 pb de DNA (fig. ll-5b). Si se agrega más nucleasa,
la enzima digiere todo el DNA entre las cuentas y dej a un centro
de proteínas unido a un fragn1ento de DNA (fig. 11-Sc). Estos
experimentos demostraron que la cromatina no es una asociación
aleatoria de proteínas y DNA, sino que tiene una estructura fun-
damental repetitiva.
El centro repetitivo de proteína y DNA producido por digestión
con nucleasas es el nivel más simple de estructura de la cro111ati-
na, el nucleosoma (véase fig. 11-4). El nucleosoma es una partí-
cula central compuesta de DNA que envuelve alrededor de dos
veces un octámero de ocho histonas (dos copias de H2A, H2B,
H3 y H4), muy similar a un hilo enrollado alrededor de un carre-
tel (fig. 11-Sd). El DNA en contacto directo con el octámero de
histonas tiene de 145 a 147 pb de longitud.
Cada una de las histonas que forman la partícula central del
nucleosoma tiene una "cola" flexible, que contiene de 11 a 37
aminoácidos, que se extiende fuera del nucleosoma. Los aminoá-
cidos con carga positiva de la cola de las histonas interactúan con
las cargas negativas de los fosfatos del DNA, lo que mantiene la
304 CAP[TULO 11

(a) Histonas centrales DNA conector Cada nucleosom a abarca alrededor de 167 pb de DNA. Los

/
del nucleosoma
nucleosomas se locali zan a intervalos regulares a lo largo de la
/.,,,,..- molécula de DNA y están separados por un DNA conector, que
Vista en "collar de varía de tamaño según los tipos celulares; en la mayoría de las
cuentas" de la cromatina
células, el DNA conector comprende de 30 a 40 pb. Las proteínas
cro1nosómicas no histonas se pueden asociar con este DNA
Nucleasa ----.. conector, y algunas también parecen unirse directa1nente a la par-
Una pequeña cantidad
de nucleasa degrada
tícula central. ►
la "cadena" entre
(b) las cuentas ... ESTRUCTURA CROMATÍNICA DE ORDEN SUPERIOR Cuando la croma-
1/; tina se encuentra en forma condensada, los nucleoso1nas adyacen-
/~
~ ' lf!á
m ... y libera cuentas "' tes no están separados por un espacio equivalente a la longitud del
• ~ , '\ individuales unidas a DNA conector; más bien, los nucleoso1nas se pliegan sobre sí
~ -.::::;::: alrededor de 200 pb j mi smos para formar una estructura densa, estrechamente empa-
[ de DNA. .
Nucleasa
quetada (véase fig.11-4), que constituye una fibra de alrededor de
á una mayor cantidad de 30 nm cuya estructura no se conoce con certeza.
- --======~
==: nucleasa destruye todo E l nivel supe1ior siguiente de la estructura de la cromatina con-
el DNA no protegido
(c) siste en una serie de bucles de fibras de 30 nm (fig. 11-4), cada
entre las cuentas, ...
uno fijado en su base por proteínas. En promedio, cada bucle

11 nm J~ ¡,• -.: : ;
~ , a,íoque deja un ce~
de protefnas unido
a 145-147 pb de DNA.
abarca alrededor de 20 000 a 100 000 pb de DNA y tiene aproxi-
madamente 300 nm de longitud , pero cada uno varía de m anera
considerable. Los bucles de 300 nm se empaquetan y se pliegan
para for1nar una fibra de 250 nm de ancho. En enrollamiento heli-
coidal denso de la fibra de 250 nm produce, a su vez, la estructu-
(d)
ra que aparece en la 111etafase: cromátidas inctividuales de alrede-
dor de 700 nm de ancho.

CONCEPTOS
El nucleosoma consiste en una partícula central de ocho histonas y
DNA que la envuelve. Una sola histona H 1 se asocia con cada partí-
cula central. Los nucleosomas están separados por DNA conector. Se
pliegan para formar una fibra de cromatina de 30 nm, que aparece
como una serie de bucles que se empaquetan para crear una fibra
de 250 nm de ancho. El enrollamiento helicoidal de la fibra de
250 nm produce una cromátida.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
Figura 11-5. El nucleosoma es la unidad repetitiva fundamental de la
cromatina. La parte (d) muestra un modelo espacial de la partícula central, ¿ Cuántas copias de la histona H2B se hallarían en cromatina que
que consiste en dos copias de cada histona: H2A, H28, H3 y H4, alrededor
contiene 50 nucleosomas 1
de la cual se enrolla el DNA (blanco). (Parte d: reimpreso con autorización
de Macmillan Publishers Ltd. De K. Luger y cols., Nature 389:251. © 1997. a. 5 c. 50
Cortesía de T. H. Richmond). b. 10 d. 100

estrecha asociación entre el DNA y las histonas. Las colas de un
nucleosoma también pueden interactuar con nucleosomas veci-
nos, lo que fac ilita su compactación. Las n1odificaciones quími-
cas de las colas de histonas inducen cambios en la estrucrura de
la cromatina (lo que se analiza en la siguiente sección), que son
necesarios para la expresión génica.
El quinto tipo de histona, Hl , no for1na parte de la partícula
central del nucleoso1na, pero desempeña un papel importante en
la estructura de este. Hl se une a 20-22 pb del DNA, donde este
se une y abandona el octámero (véase fig.11-4) y ayuda a bloque-
ar en su lugar al DNA actuando como una pinza alrededor del
octámero del nucleoson1a.
Cambios en la estructura de la cromatina
Si bien el DNA eucarionte debe estar densamente empaquetado
para caber en el núcleo de la célula, también se debe desenrollar
en forma periódica para que tengan lugar la transcripción y la
replicación.
CROMOSOMAS POLITÉNICOS En ciertos tejidos de D1vsophila y en
algunos otros organismos (fig. 11-6), se observan cromosomas
gigantes denominados cromosomas politénicos, y han proporcio-
nado a los investigadores evidencia del carácter cambiante de la
estructura de la cromatina. Estos cromosomas grandes, infrecuen-
 Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 305

tes, aparecen cuando tienen Jugar ciclos reiterados de replicación

(a) del DNA que no se acompañan de divisiones celulares, lo que
genera miles de copias de DNA adyacentes entre sí. Cuando los
cromosomas politénicos se tiñen con colorantes, se visualizan
(b) numerosas bandas. En ciertas condiciones, las bandas pueden
A1 ·2 - mostrar engrosamientos (pujfs) cromosómicos, tumefacciones
A4•5-= localizadas del cromosoma. Cada engrosanliento es una región de
A7( la cromatina que tiene una estructura relajada y, en consecuencia,
A8 .. 10 [ - A1·2 un estado más abierto. La investigación indica que los engrosa-
B1 (·2)- mientos cromosómicos son regiones de transcripción activa. Esta
correlación entre el desarTollo de la transctipción y la relajación
de la cromatina en un sitio de engrosamiento indica que la estruc-
J tura de la cro1natína presenta cambios dinámicos asociados con la
actividad de los genes. ~•~~~~~~:!:?=~~:!:::!~~u
Engros~miento
cromosómico SENSIBILIDAD A DNASA I Una segunda evidencia que indica que la

C1- - J
- estructura de la cromatina se modifica con la actividad génica es
la sensibilidad a la DNasa I, una enzin1a que digiere el DNA. La
capacidad de esta enzima de digerir el DNA depende de la estruc-
- tura de la cromatina: cuando el DNA está estrechamente unido a
histonas, es menos sensible a la DNasa I, mientras que el DNA
Figura 11·6 . Los engrosamientos (puffs) cromosómicos son regiones libre es más sensible a esta enzima. Los resultados de experimen-
de cromatina relajada donde se está produciendo transcripción acti· tos que examinan el efecto de la DNasa I en genes específicos
va. Aquí se ilustran a) engrosamientos cromosómicos de cromosomas poli- muestran que la sensibilidad a la DNasa I se correlaciona con la
t énicos gigantes aislados de las glándulas salivales de Drosophila, y b) la actividad de los genes. Estudios de los genes de la globina del
región correspondiente sin engrosamientos cromosómicos. (Cortesía de pollo aportan evidencia de esta correlación. Los genes de la glo-
Dmitri V. Novikov).
bina codifican la hemoglobina de los eritroblastos (precursores de

Pregunta: ¿se modifica la estructura de la cromatina durante la transcripción?

Método Se investigó la sensibilidad del DNA a DNasa I en Clave

diferentes tejidos y en distintos momentos del desarrollo.
BDNA altamente
Gen de globina Genes de sensible a
embrionaria globina adulta DNasa 1

DNA \
de pollo
u aD llA

Antes de la síntesis de hemo-

Resultados Eritroblastos globina, ninguno de los genes
de las primeras de la giobina es sensible a la
24 horas u nº a.. A digestión por DNasa 1

Eritroblastos
! Una vez iniciada la síntesis de
globina, todos los genes son
sensibles a la DNasa 1, pero
de 5 días
el gen U de la globina
u ªº aA
embrionaria es el más sensible.

! En el embrión de 14 días de
vida, cuando solo se expresa
l
Eritroblastos
hemoglobina adulta, los genes
de 14 días
u aD aA adultos son muy sensibles, y el
gen embrionario es insensible.J

Células
cerebrales
En el cerebro, los genes de
globina - que no producen
1 Figura 11•7. La sensibilidad a la DNasa I se
durante todo globina- permanecen insensi- correlaciona con la transcripción de los
el desarrollo u bles durante todo el desarrollo. genes de globina en eritroblastos de
embriones de pollo. El gen U codifica la hemo-
Conclusión : la sensibilidad del DNA a la digestión por DNasa I se correlaciona con la expresión globina embrionaria; los genes aP y a,A codif ican
génica, lo que sugiere que la estructura de la cromatina cambia en el curso de la transcripción.
la hemoglobina adulta.
306 CAP[TULO 11
los eritrocitos) de los pollos (tig. 11-7). E stos tipos de experimen-
tos demuestran que los genes que presentan transcripción activa
son sensibles a la DNasa I, lo que indica que la estructura de la
cromatina está más expuesta durante la transcripción.
¿Cuál es la naturaleza de la modificación de la estructura de la
cromatina que produce eng:rosanúentos cromosómicos y sensibi-
lidad a la DNasa I? En a1nbos casos, la cromatina se relaja; pre-
sumiblemente, la<; hi stonas aflojan su prensión sobre el DNA. Un
proceso que modifica la estructura de la cromatina es la acetila-
ción. Las enzimas denominadas acetiltransferasas unen grupos
acetilo a aminoácidos lisina de la cola de las histonas. Esta modi-
ficación reduce las cargas positivas que existen normalmente en
la lisina y desestabiliza la estructura del nuc leosoma, por lo que
la uni ón entre hi stonas y DNA se torn a n1ás laxa. Otras modifica-
ciones químicas de las histonas, como la metilación y la fosfori-
lación, también cambian la estructura de la cromatina, así como
de proteínas especiales remodeladoras de la cromatina que se
unen al DNA.
CAMBIOS EPIGENÉTICOS ASOCIADOS CON MODIFICACIONES DE LA
CROMATINA Hasta ahora, hemos observado cómo puede cambiar
la estructur a de la cromatina por modificación química de las his-
tonas. Una se1ie de otros cambios también pueden influir en la
estructura de la cromatina, como la metilación del DNA (véase
cap. 10), el uso de variantes de histonas en el nucleosoma y la
unión de proteínas al DNA y a la cromatina. Si bien estos ca1n -
bios no modifican la secuencia del DNA, a 1nenudo ejercen efec-
tos importantes sobre la expresión de genes, lo que se analizará
con mayor detalle en el capítulo 17.
Algunos cambios de la estructura de la cromatina se conser van
a través de la división celular; por lo tanto, se transmiten a futu-
ras generaciones de células, e incluso en ocasiones, tam bié11 a
futuras generaciones de organismos. Las modificaciones estables
de la estructura de la cromatina que pueden transmitirse a célu-
las o a organismos individuales suelen denominarse cambios epi-
genéticos o solo epigenética (véase cap. 5). Por ejemplo, el
locus agouti ayuda a determinar el color del pelaje de los rato-
nes: progenitores que tienen idénticas secuencias de DNA pero
diferentes grados de metil ación de su DNA pueden tener descen-
dencia con distinto color de pelaje (fig. 11-8). Estos cambios epi-
genéticos se han observado en una serie de organismos y son res-
ponsables de diversos efectos fenotípicos. A diferencia de las
mutaciones, los ca1nbios epigenéticos no n1odifican la secuencia
de DNA, pueden ser revertidos y a menudo son influenciados por
factores ambientales.
Figura 11-8. La variación de la metilación del DNA en el locus agouti
produce diferentes colores de pelaje en los ratones. (Cropley y cols. ©
2006 The National Academy of Sciences of the USA).
CONCEPTOS
Los cambios epigenéticos son modificaciones de la cromatina o de la
estructu ra del DNA que no incluyen cambios de la secuencia de bases,
sino que son estables y se t ransmiten a células u organismos. Algunos
cambios epigenéticos se deben a modificaciones de las histonas.
11.2 Los cromosomas eucariontes tienen
centrómeros y telómeros
Los cromoso111as se segregru1 durru1te la 111itosis y la 1n eiosis, y
permanecen estables a lo largo de nu111erosas divisiones celulares.
En parte, estas propiedades de Los cromosomas se deben a sus
características estructurales especiales, com o los centrómeros y
los telómeros.
Estructura de los centrómeros
El centrómero es una región estrechada del cromosoma a la que se
unen las fibras del huso y es esencial para el desplazamiento co-
tTecto de los cromosomas en la mitosis y la meiosis (véase cap. 2).
Los prin1eros genetistas reconocieron el papel esencial del centró-
mero en el desplaza1niento de los cromosomas al observar las con-
secuencias de la rotura cro1nosó1nica. Cuando un cromoso1na se
rompe, se producen dos fragmentos, uno con un centrómero y otro
sin centrómero (fig. 11-9); el fragmento cromosómico que contie-
ne el centrómero se une a las fibras del huso y migra hacia el polo
de este. El fragmento sin centrómero no se conecta con ninguna
fibra del huso y en general se pierde porque no se desplaza al
núcleo de una célula hija durante la nútosis (véase fig. 11-9) .
Los centrómeros son Jos sitios de unión para el cinetocoro, al que
se unen las fibras del huso. En Drosophila, Arabidopsis y seres
humanos, los centrómeros abarcan cientos de miles de pares de
bases. La mayor parte del centrómero está compuesta de heterocro-
matina. Resulta sorprendente que no se detecten secuencias especí-
ficas en todos los centrómeros, lo que plantea el interrogante de qué
determina con exacti tud la localización del centrómero. La investi-
gación sugiere que la mayoría de los centrómeros no son definidos
por la secuencia de DNA, sino más bien por cambios epigenéticos
de la est1uctura de la cromatina. Los nucleosomas de los centróme-
ros de la mayoría de los eucariontes tienen una variante de histona
deno1ninada CenH3, que ton1a el lugar de la histona H3 habitual.
La hi stona CenH3 induce un cambio en la esttu ctura del nucleoso-
ma y la cromatina, que se considera promueve la formación del
cinetocoro y la unión de las fibras del huso al cromosoma.
CONCEPTOS
El centrómero es una reg ión del cromosoma a la que se unen las
fibras del huso. Los centrómeros muestran considerable variación
estructu ral y se distinguen por cambios epigenéticos de la estructu ra
de la cromatina, como el uso de una variante de histona H3 en el
nucleosoma.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
¿ Qué le sucede a un cromosoma que pierde su centrómero?
 Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 307

Centrómero Una rot ura Cuadro 11-2 Secuencias de DNA halladas habitualmente
cromosómica produce en los telómeros de diversos organismos
dos tipos de
7'"..,.._===::::! fragmentos, aquellos Organismo Secuencia
con un centrómero
y aquellos sin éste.
Tetrahymenea (protozoo) 5'-TT GGGG-3'
3'-AAC C C C-5'

Saccharomyces (levadura) S'-T1_6 GTG2_3-3'

3' -A 1-5CAC 2_3-5'
Anafase de
la mitosis Caenorhabditis (nematodo) 5'-TTAGGC-3'
3'-AATC C G-5'

Vertebrado 5'-TTAGGG-3'
3'-AAT ce
C-5'

... pero un fragmento Arabidopsis (planta) 5'-T TTAGGG-3'

que carece de un
3'-AAAT CCC-5'
Telofase de centrómero no se une
la mitosis --~.::;:::::;~ a una fibra del hueso y,
\ I ¡, ~ por lo general, se Fuente: V A. Zakian, Science 270: 1602, 1995.
\(;,'/ I \. ~ pierde del núcleo.

1i( ¡,: V
\ lt humanos es 5 '-TTAGGG-3', que puede repetirse de cientos a
miles de veces. La secuencia siempre se orienta con la cadena de
____l_______ G y C hacia el extremo del cromosoma, como se muestra aquí:
t D espues
' de t hacia el 5'-TTAGGGTTAGGGTTAGGG-3' extremo del
cenu·ómero 3' -AATCCCAATCCCAATCCC-5 ' cro1noso1na

A menudo, la cadena rica en G sobresale de la cadena rica en C

."..... ----
"--
~ .....
.· - -
.·~ en el extremo del cromosoma (fig. 11-l0a) y se denomina salien-
Los fragmentos te 3'. La saliente 3' de los telómeros de los mamíferos tiene de 50
cromosómicos se degradan
a 500 nucleótidos de largo. Proteínas especiales se unen a la se-
Figura 11-9. Los fragmentos cromosómicos que carecen de centró-
meros se pierden en la mitosis.
(a)

Estructura de los telómeros

Secuencia de DNA
al final del cromosoma
Los telómeros son los extremos naturales de un cromosoma
(véase fig. 2-7 y la introducción de este capítulo). El trabajo pio-
nero de H ermann M uller (en moscas de la fru ta) y de Barbara
McClintock (en el maíz) mostró que las roturas cro1nosómicas
producían extremos inestables con tendencia a adherirse entre sí,
lo que permite la degradación del cromosoma. Como la adheren- (b) bucle t
cia y la degradación no se observan en ]os extremos de un cromo-
soma que tiene telómeros, cada telómero debe servir como una
cubierta que estabiliza el cromosoma. Asimismo, los telómeros
proporcionan un medio para la replicación de los extre1nos del
cromoso1na, lo que se analizará en el capítulo 12. En 2009, Eliza-
beth Blackburn, Caro] Greider y Jack Szostack recibieron el No-
bel de fi siología y medicina por descubrir la estructura de los teló-
meros y su mecanismo de replicación (analizado en el cap. 12).
Hasta ahora, se han aislado telón1eros de protozoos, plantas, 5' \! . • ll'
3' •\ l • • l

seres hu1nanos y otros organismos; la n1ayoría tiene una estructu-

ra similar (cuadro 11-2). Por lo general, estas secuencias telomé-
ricas consisten en unidades repetidas de una serie de nucleótidos
de adenina o timina, seguidos de varios nucleótidos de guanina,
que adoptan ]a forma 5 '-(A o T)111G 7l-3', donde m es de 1 a 4 y n
es 2 o 1nás. Por ejemplo, la unidad repetitiva de los telómeros
Saliente monocatenaria rica en G
Figura 11-10. El DNA de los extremos de los cromosomas eucariontes
consiste en secuencias teloméricas. a) En el telómero, la cadena rica en G es
más larga que la cadena rica en C. b) El algunas células, la cadena rica en G se
pliega y se aparea con un corto segmento de DNA para formar un bucle t.
308 CAP[TULO 11

cuencia monocatenaria rica en G y protegen al telómero de la
degradación y evitan que los extremos del cromosoma se adhie-
ran entre sí. Un complejo multiproteico denominado shelterina
se une a los telómeros y protege los extremos del DNA de ser
reparados de manera inadvertida como una rotura bicatenaria. En
algunas células, la saliente 1nonocatenaria se puede plegar y apa-
rear con un segmento corto de DNA para formar una estructura
denominada bucle t, que también protege de la degradación al
extremo del telómero (fig. 11-l0b).
células humanas decuplican la cantidad de DNA encontrada en
las células de Drosophila, mientras que algunas células de sala-
mandra contienen 20 veces más DNA que las células humanas. Es
evidente que estas diferencias del valor C no pueden explicarse
solo por la diferente complej idad de los organismos. Por lo tanto,
¿qué hace todo el DNA extra de los eucariontes? Esta pregunta se
ha deno1ninado la paradoja del valor C. Todavía no se conoce
una respuesta co1npleta a la paradoja del valor C, pero las secuen-
cias del DNA eucarionte revelan una complejidad que está ausen-
te en el DNA procaiionte.

CONCEPTOS
Un telómero es el extremo estabilizador de un cromosoma. En el extre-
mo de cada telómero hay numerosas secuencias teloméricas cortas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
¿Cuál es una característica de las secuencias de DNA en el telómero7
a. Una cadena consiste en nucleótidos de guanina y adenina
(o timina).
b. Consisten en secuencias repetidas.
c. Una cadena sobresale de la otra, lo que crea algo de DNA mono-
catenario en el extremo.
d. Todas las anteriores.
11.3 El DNA eucarionte contiene varias clases
de variación de secuencias
Los organismos eucariontes difieren de manera sustancial en la
cantidad de DNA por célula, una cantidad denomina valor C de
un organismo (cuadro 11-3). Por ejemplo, cada célula de una
mosca de la fruta contiene 35 veces la cantidad de DNA hallada
en una célula de la bacteria E. coli. En general, las células euca-
1iontes contienen más DNA que las procariontes, pero la variabi-
lidad de los valores C de diferentes eucariontes es enorme. Las
Cuadro 11-3 Tamaño de los genomas de diversos
organismos
Desnaturalización y renaturalización del DNA
El p rimer ind icio de que el DNA eucarionte contiene varios tipos
de secuencias no presentes en el DNA procarionte provino de
estudios en los que se sepai·ó DNA bicatenario y después se per-
mitió la reasociación. Cuando se calienta el DNA bicatenario en
solución, se debilitan los puentes de hidrógeno que mantienen
unidas las dos cadenas, y con calor suficiente, se separan por
completo las dos cadenas nucleotídicas, un proceso denominado
desnaturalización o fusión (melting) del DNA. La temperatura a
la que se desnaturaliza el DNA, llamada temperatura de desna-
turalización (Tm), depende de la secuencia de bases de la m ues-
tra particular de DNA: los pares de bases G-C tienen tres puentes
de hidr ógeno, inientras que los p¡u·es de bases A-T solo tienen
dos; por lo tanto, la separación de los pares G-C requiere más
calor (energía) que la separación de los pares A-T.
La desnatur alización del DNA por calor es reversible; si se
enfría lentrunente el DNA monocatenario, las cadenas simples
chocarán y volverán a formarse puentes de hidrógeno entre pares
de bases comple1nentarios para producir DNA bicatenario. Esta
reacción se denomina renaturalización.
Dos moléculas monocatenarias de DNA de disti ntas fuentes,
por ejemplo organismos diferentes, se acoplarán si son comple-
mentarias, un proceso denominado hibridación. Para que se pro-
duzca la hibridación, no es preciso que las cadenas sean comple-
mentarias en todas sus bases, solo en las bases suficientes para
mantener juntas las dos cadenas. El grado de hibridación puede
uti li zarse para determinar la simi litud de los ácidos nucleicos de
dos fuentes diferentes y para evaluar relaciones evolutivas. La
velocidad con la que se p roduce la hibridación también aporta
información acerca de la complej idad de las secuencias de DNA.

Tamaño aproximado Tipos de secuencias de DNA en los eucariontes

Organismo
t.. (bacteriófago)
Escherichia coli (bacteria)
Saccharomyces cerevisiae (levadura)
Arabidopsis thaliana (planta)
Drosophila melanogaster (insecto)
Homo sapiens (ser humano)
Zea mays (maíz)
Amphiuma (salamandra)
del genoma (pb)
El DNA eucarionte está compuesto por no menos de tres tipos de
50 000 secuencias: DNA de secuencias únicas, DNA moderadamente
repetitivo y DNA alta1nente repetitivo. El DNA de secuencias úni-
4 640 000
cas consiste en secuencias que están presentes solo una vez o, co-
12 000 000 mo máxin10, unas pocas veces en el genoma. El DNA incluye
secuencias que codifican proteínas, así como una gran cantidad de
125 000 000 DNA cuya función se desconoce. Los genes que están presentes en
170 000 000
una sola copia representan alrededor del 25-50% de aquellos que
codifican proteínas en la mayoría de los eucariontes 111ulticelula-
3 200 000 000 res. Otros genes del DNA de secuencias únicas están presentes en
varias copias similares, pero no idénticas, y se denominan colec-
4 500 000 000 tivam.e nte familia génica. .La mayoría de las fam ilias gén icas se
765 000 000 000 originaron por duplicación de un gen existente e incluyen solo
algunos genes miembros, pero algunas, como la que codifica las

inmunoglobu linas en los vertebrados, contienen cientos de miem-
bros. Los genes que codifican globinas de tipo ~ son otro eje1nplo
de una familia génica. En los seres humanos, hay siete genes de
~-globina, agrupados en el cromosoma 11 . Los polipéptidos codi-
ficados por estos genes se unen con polipéptidos de ~-globina
para fonnar moléculas de hemoglobina, que transportan oxígeno
en la sangre.
Hay otras secuencias de las que existen muchas copias y se
denominan DNA repetitivo. Algunos organismos eucariontes tie-
nen grandes cantidades de DNA repetitivo; por ejemplo, casi la
mitad del genon1a humano consiste en este tipo de DNA. Una
clase importante de DNA repetitivo se denomina DNA modera-
damente repetitivo, que suele consistir en secuencias de 150 a
300 pb de longitud (aunque pueden ser más largas), que se repi-
ten 1nuchos miles de veces. Algunas de estas secuencias desem-
peñan funciones importantes para la célula; por ejemplo, los
genes de los RNA ribosómicos (rRNA) y de los RNA de transfe-
rencia (tRNA) representan una parte del DNA 111oderadamente
repetitivo. En sí 1nis1no, este consiste en dos tipos de repeticiones.
Las secuencias repetidas en tándem aparecen una detrás de la
otra y ti enden a agruparse en localizaciones particulares de los
cromosomas. Las secuencias repetidas dispersas se localizan
por todo el genoma. Un ejemplo de ellas es la secuencia Alu, una
secuencia de alrededor de 300 pb que está presente más de un
ntill ón de veces y q ue representa el 11 % del geno.ma hu1nano,
aunque no cumple ninguna función celular evidente. Las repeti-
ciones cortas, como las secuencias Alu, se deno1ninan elementos
clispersos cortos (SINE, short interspersed elements). L as repe-
ticiones dispersas más largas formadas por varios miles de pares
de bases se denominan elementos dispersos largos (LINE, long
interspersed elements). Una clase de LINE, llamada LINEl,
representa alrededor de 17% del genoma humano. La mayoría de
las repeticiones dispersas son los remanentes de elementos trans-
ponibles, secuencias que se pueden multiplicar y desplazar (véase
cap. 18).
La otra clase importante de DNA repetitivo es el DNA alta-
mente repetitivo. Estas secuencias cortas, a menudo de menos de
1O pb de longitud, están presentes en cientos de 1niles a millones
de copias que se repiten en tándem y se agrupan en ciertas regio-
nes del cromosoma, sobre todo en los centrón1eros y los telóme-
ros. En ocasiones, el DNA altamente repetitivo se denomina
DNA satélite, porque sus porcentajes de las cuatro bases difieren
de las de otras secuencias de DNA y, por consiguiente, se separa
como una fracción satélite cuando es centrifugado a alta veloci-
dad en un gradiente de densidad (véase p. 327 del cap. 12). El
DNA altamente repetitivo rara vez se transc1ibe a RNA. Si bien
estas secuencias pueden contribuir a la función de los centróme-
ros y los telómeros, la mayor parte del DNA altamente repetitivo
no cu1nple ninguna función conocida.
Las reacciones de renaturalización del DNA y, en fo1ma más
reciente, la secuenciación directa de los genomas eucaiiontes
también aportan muchos datos acerca de la organización de la
información genética dentro de los cromosomas. Por ejemplo, el
cromosoma humano 19 tiene una alta densidad de genes, con
alrededor de 26 genes por millón de pares de bases. Por el contra-
iio, el cromosoma 13 tiene solo alrededor de 6,5 genes por 1nillón
de pares de bases. Asimismo, la densidad génica puede variar
dentro de distintas regiones del mismo cromosoma: algunas par-
tes del brazo largo del cromosoma 13 tienen solo 3 genes por
1nillón de pares de bases, mientras que otras pa1tes tienen casi 30
genes por millón de pares de bases. A su vez, el brazo corto del
Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 309
cromosoma 13 casi no contiene genes y está compuesto por com-
pleto de heterocro1natin a.
Recientemente, el proyecto Encyclopedia of DNA Elements
(ENCODE, Enciclopedia de elementos del DNA) consideró la
función de las secuencias de DNA que no codifican proteínas,
incluido el DNA repetitivo (véase cap. 20). El objetivo del pro-
yecto ENCODE era identificar todos los nucleótidos del geno1na
humano que cumplen alguna fun ción. La conclusión del proyec-
to fue que gran parte del genoma se transcribe y que por lo menos
el 80% de las secuencias son funcionales. Muchas de las secuen-
cias funcionales parecen controlar la expresión de genes.
CONCEPTOS
El DNA eucarionte comprende tres clases importantes: DNA de
secuencias únicas, DNA moderadamente repetitivo y DNA altamente
repetitivo. El DNA de secuencias únicas contiene secuencias que
existen en una o unas pocas copias. El DNA moderadamente repeti-
tivo consiste en secuencias que pueden tener varios cientos de pares
de bases de longitud y están presentes en miles o cientos de miles
de copias. El DNA altamente repetitivo consiste en secuencias muy
cortas repetidas en tándem y está presente en cientos de miles a
mi llones de copias. La densidad de genes varía mucho entre los cro-
mosomas, e incluso dentro de ellos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
La mayoría de los genes que codifican proteínas se encuentran en
a. DNA de secuencias únicas.
b . DNA moderadamente repetitivo.
c. DNA altamente repetitivo.
d. Todo lo anterior.
11.4 El DNA de los orgánulos tiene
características singulares
Como hemos visto, los cromosomas eucariontes residen dentro
del núcleo y tienen una estructura co1npleja forn1ada por DNA e
histonas asociadas. Sin en1bargo, cierto DNA hallado en células
eucariontes se localiza fuera del núcleo, tiene una organización
muy diferente y 1nuestra un patrón distinto de herencia respecto
del DNA nuclear. Este DNA existe en las mitocondrias y los clo-
roplastos, que son orgánulos limitados por membrana localizados
en el citoplas1na de las células eucariontes (fig. 11-11).
Estructura de las mitocondrias
y los cloroplastos
Las rnitocondrias están presentes en casi todas las células euca-
riontes, n1ientras que los cloroplastos se hallan en plantas y algu-
nos protistas. Ambos orgánulos generan ATP, el transportador
universal de energía de las células.
Las 1nitocondrias son estructuras tubul ares que miden de 0,5 a
1,0 micrómetros (µm) de cliámetro, aproximadamente el tamaño
de una bacteria típica, mientras que los cloroplastos suelen medir
310 CAP[TULO 11

Mitocondria Cloroplasto
_ __..., Membrana
1
externa
~ - - r - M em b rana ---,r---,-J.t.
interna

....
........
p
V, Estroma l. t
....
1 O)

-3 Granas
DNA
' f
·
3

--=.....-Ribosomas I \t
Membrana
tilacoide

Figura 11- 11. Comparación de las estructuras de las mitocondrias y los cloroplastos. (Izquierda: Don
W. FawcetVScience Source /Photo Researchers, lnc. Derecha: Biophoto Associaites/Photo Researchers).

de 4 a 6 µm de diámetro. Ambos están rodeados por dos membra-
nas que delimitan una región (denominada matriz en las mitocon-
drias y estroma en los cloroplastos) que contiene enzimas, riboso-
mas, RNA y DNA. En las mitocondrias, la men1brana interna está
altamente plegada; las enziinas que catalizan el transporte de elec-
trones y la fosfori lación oxidativa están incluidas dentro de ella.
Los cJoroplastos tienen una membrana tilacoide, que está altame n-
te p legada y apilada para formar agregados denominados granas.
Esta membrana contiene los pigmentos y las enzimas reque1idos
para la fotofosforilación. Las mitocondrias y los cloroplastos nue-
vos se originan por división de los orgánulos existentes, divisiones
que se producen durante todo el ciclo celular y son independien-
tes de la mitosis y la meiosis.
Las mitocondrias y los cloroplastos tienen DNA que codifica
algunos polipéptidos usados por el orgánulo, así co1no el RNA
hallado en el ribosoma (RNA ribosómico o rRNA) y algunos
RNA de transferencia (tRNA) necesarios para la traducción de
estas proteínas. Los genes de la mayoría de las aproximadamente
900 proteínas estructurales y enzimas halladas en las mitocon-
drias son codificados en realidad por DNA nuclear; el genoma
mitocondrial s uele codificar solo algunas proteínas y unas pocas
moléculas de rRNA y tRNA requeridos para la síntesis proteica
mi tocondrial.
Teoría endosimbiótica
Las mitocondrias y los cloroplastos son siinilares a las bacterias
en muchos aspectos. La si1nilitud no es superficial; de hecho, hay
evidencia convincente de que estos orgánulos evolucionaron a
partir de eubacterias (véase p. 19 del cap. 2). La teoría endosim-
biótica (fig. 11-12) postula que las mitocondrias y los cloroplas-
tos fueron alguna vez bacte1ias de vida libre que se convirtieron

D Hace alrededor de 1000 a 1500 mi- l El endosim- De modo similar, la ' ... llevó a la evolución
llones de años, una célula eucarionte bionte aeróbico endocitosis de una de las células eucarion-
Célula eucarionte anaerobia englobó una célula eubac- evolucionó eubacteria capaz de tes modernas con mito-
anaerobia teriana aerobia mediante endocitosis. a mitocrondrias realizar fotosíntesis... condrias y cloroplastos.

Endocitosis Endocitosis ~

DNA ~ 1
l Evolución 1 @--- - 1
Evolución
a-Proteobacteria
(aerobia) + Cianobacteria
+
M itocondria M itocondria - -@
~ / Cloroplasto - -- ~\\
~

Cé lu la animal actual Célula vegetal actual

Figura 11-12. La teoría endosimbiótica postula que las mitocondrias y los cloroplastos de las célu-
las eucariontes se originaron en eubacterias.

en habitantes internos (en dosimbiontes) de las primeras células
eucariontes. Se asume que, a lo largo de la evolución, muchos de
los genes originales de los endosimbiontes se perdieron (porque
existían genes nucleares que cumplían la misma función) o fue-
ron transferidos al núcleo.
Gran cantidad de evidencia avala la idea de que las mitocondrias
y los cloroplastos se ori ginaron como cél ul as eubacterianas.
Muchos euca1iontes unicelulares modernos (protistas) son huéspe-
des de bacterias endosimbióticas. Las 1nitocondrias y los cloro-
plastos tienen un tamaño similar al de las eubacterias actu ales y
tienen su propio DNA, que presenta muchas características en
común con el DNA eubacteriano. Las mitocondrias y los cloro-
plastos tienen riboso1nas, algunos de los cuales son de ta1naño y
estructura sim.ilares a los de los ribosomas eubacterjanos. Además,
los antibióticos que inhiben la síntesis proteica de las eubacterias
pero no afectan la síntesis proteica de las células eucaiiontes tam-
bién inhiben la síntesis proteica en estos orgánulos.
La evidencia más firme en favor de la teoría endosimbiótica
proviene del estudio de las secuencias de DNA, que demuestra
que las secuencias del mtDNA y el cpDNA muestran una relación
más estrecha con las de los genes de las eubacterias que con las
halladas en el núcleo eucarionte. Toda esta evidencia indica que
las mitocondrias y los cloroplastos están más estrechamente rela-
cionados con las células eubacterianas que con las células euca-
riontes en las que se hallan en la actualidad.
CONCEPTOS
Las mitocondrias y los cloroplastos son orgánulos de las células
eucariontes limitados por membranas que, en general, tienen su
propio DNA. La teoría endosimbiótica, bien avalada, postu la que
estos orgánulos comenzaron como bacterias de vida libre que esta-
blecieron relaciones endosimbióticas estables con las primeras célu-
las eucariontes.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
¿Cuál es la evidencia que ava la la teoría endosimbiótica?
Herencia uniparental de rasgos codificados
por orgánulos
Las mitocond:rias y los cloroplastos se localizan en el citoplasma,
como ya se afirmó, y suelen heredarse de un solo progenitor. Por
lo tanto, los rasgos codificados por DNA 1nitocondrial (n1tDNA)
y DNA de los cloroplastos (cpDNA) presentan herencia un iparen-
tal (véase cap. 5 ). En los animales, el mtDNA se hereda casi con
exclusividad del progenitor femenino, aunque en ocasiones se ha
demostrado transmisión masculina. En parte, la herencia materna
de mtDNA animal puede ser una función del tamaño de los game-
tos: los espermatozoides son 111ucho más pequeños que los óvulos
y tienen menos 1nitocondrias. Sin embai·go, investigaciones
recientes han observado que, en ciertos eucariontes, se eliminan
selectivamente las mitocondrias paternas por autofagia, un proce-
so en el que las mitocondrias son digeridas por la célula. Las
1nitocondrias paternas están marcadas para la destlucción, míen-
Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 311
Figura 11-13. Las células individuales pueden contener muchas mito-
condrias, cada una con varias copias del genoma mitocondrial. Se
muestra una célula de Euglena gracilis, un protista, teñida de manera que
el núcleo aparece rojo; las mitocondrias, verdes y el mtDNA, amarillo. (De
Y. Huyashi y K. Veda, Journal of Ce// Sciences 93:565, 1989).
tras que las maternas, no; el mecanismo responsable de esta dife-
rencia es desconocido. La herencia paterna de orgánulos es fre-
cuente en las gimnosper1nas (coníferas) y en unas pocas angios-
pennas (plantas con flores). Incluso, algunas plantas muestran
herencia biparental de 1ntDNA y cpDNA.
SEGREGACIÓN REPLICATIVA Cada célula puede contener de doce-
nas a cientos de orgánulos, cada uno con nu1nerosas copias de su
genoma, de manera que cada célula suele tener de cientos a miles
de copias de los genomas de las nlitocondrias y los cloroplastos
(tig. 11-13). Una m utación que aparece en una molécula de DNA
de un orgánulo genera una mezcla de orgánulos dentro de la célu-
la, algunos con una secuencia mutante de DNA, y otros con una
secuencia de tipo silvestre de DNA. La aparición de dos variedades
distintas de DNA dentro del citoplasma de una sola célula se deno-
1nina heteroplasmia. Cuando se divide una célula heteroplásmica,
Los orgánulos se segregan de 1nanera aleatoria entre las dos células
de la progenie en un proceso conocido como segregación replica-
tiva (fig. 11-14), y el azar determina la proporción de orgánulos
mutantes de cada célula. Si bien la mayoría de las células de la pro-
genie heredarán una mezcla de orgánulos mutantes y normales,
solo por azar algunas células pueden recibir orgánulos que contie-
nen únicamente secuencias 1nutantes o secuencias de tipo silvestre;
esta situación, en la que todos los orgánu los son idénticos desde el
punto de vista genético, se conoce como homoplasmia. Asimismo,
es frecuente que se produzca fusión de las mitocondrias.
Cuando se produce segregación replicativa en células somáti-
cas, puede haber variación fenotípica dentro de un solo organis-
mo; diferentes célul as del organismo pueden tener distintas pro-
porciones de secuencias 1nutantes y de tipo silvestre, que causan
diversos grados de expresión fenotípica en diferentes tejidos. En
caso de segregación replicativa en las células germinales de un
donante citoplasmático heteroplásmico, puede haber diferentes
fenotipos en la descendencia.
La enf ermedad conocida con10 epilepsia mioclónica y síndro-
me de las fibras rojas rasgadas (MERRF, myoclonic epilepsy and
ragged redfiber syndro,ne) se debe a una mutación de un gen del
mtDNA. Una persona de 20 años con esta mutación en el 85% de
su mtDNA presentaba un fenotipo nom1al, mientras que un prin10
312 CAP[TULO 11

Una célula da de 1940, Boris Ephrussi y sus colegas advirtieron que, cuando
-=::, heteroplásmica crecían en medio sólido, al gunas colonias de levadura eran mucho
tiene dos más pequeñas de lo normal. El examen de estas colonias petite
variedades
reveló gran reducción de las velocidades de crecimiento de las
distintas de DNA
en sus orgánulos. células dentro de las colonias. Los resultados de los estudios bio-
quúnicos den1ostraron que los mutantes petite no tenían capaci-
----i
4>. ,._..__, Los orgánulos se dad de respiración aero bi a; obtenían toda su energía del 1netabo-
f//¡J¡~ "" segregan de lismo anaerobio (glucólisis y fermentación), que es mucho menos
~ manera aleatoria
eficiente que la respiración aerobia y da por resultado colonias de
en la división
~---------- tamaño más pequeño.
celular, ...
Algunas n1utaciones petite consisten en defectos del DNA
nuclear, pero la mayoría de estas mutaciones se producen en el
DNA ,nitocond.ria:t. Los mutantes petite 111itocondrial.es a menudo
presentan grandes deleciones del n1tDNA o, en algunos casos,
carecen por co1npleto de mtDNA. Gran parte del mtDNA codifi-
ca enzimas que catalizan la respiración aerobia; por lo tanto, los
mutantes petite no pueden realizar respiración aerobia ni producir
cantidades normales de ATP, lo que inhibe su crecimiento.
Otra mutación conocida del mtDNA se produce en Neurospora
(véanse pp. 41 2-41 5 en el cap. 15). Los mutantes poky, aislados por
Mary Mitchell en 1952, presentan herencia citoplasmática y tienen
Los orgánulos
cantidades anormales de citocromos. Los citocromos son compo-
Replicación de las mitocondrias vuelven a
nentes proteicos de la cadena de electrones de las 1nitocond1ias y
replicarse ... desen1peñan un papel integral en la producción de ATP. La mayo-
J \ ría de los organisn1os tienen tres tipos p1imarios de citocromos:
citocromo a, citocromo by citocromo c. Los mutantes poky tienen
citocromo c, pero no citocromo a ni b. Al igual que los mutantes
petite, los mutantes poky presentan deficiencias en la síntesis de
ATP y, por consiguiente, crecen 1nás lentamente que las células
.. . y se segregan normales de tipo silvestre. i.::►.!:!:!::!!!:!:!!::!!:!:!::!::2::!:!2:!:!!!!:2==:~5!1
de manera aleatoria. En los últimos años, se ha identificado una serie de enfermeda-
des genéticas de los seres hun1anos que se deben a mutaciones del
mtDNA. Además del síndrome MERRF mencionado antes, la
neuropatía óptica hereditaria de Leber (LHON, Leber hereditary
optic neuropathy) se debe a mutaciones de genes del 1ntDNA que
1
codifican las proteínas de transporte de electrones. Por lo general,
'céru1a Células heteroplásmicas Célula la LHON provoca pérdida súbita de la visión en la mediana edad.
horno- homop lásmica Otra enfermedad causada por mutaciones del 1ntDNA es la debi-
plásmica lidad mu scu]ar neurógena, ataxia y retinitis pi gmentaria (NARP,
Conclusión: la m ayoría de las cél ulas resultantes son hetero-
plásmicas pero, solo por azar, algunas células pueden recibir
únicamente un tipo de orgánulo (p. ej., pueden recibir
orgánulos todos normales o todos mutantes). J Colonia normal

Figura 11-14. Los orgánulos de una célula heteroplásmica se dividen

de manera aleatoria entre las células de la progenie. Este diagrama
ilustra la segregación repl icativa en la mitosis; el mismo proceso tiene lugar
en la meiosis.

olonia petite

que presentaba la mutación en el 96% de su mtDNA 1nostraba

compromiso grave. En enfermedades causadas por mutaciones
del mtDNA, la gravedad de la enfermedad puede relacionarse con
la proporción de secuencias mutantes de mtDNA heredadas en el
momento del nacirniento. ►
RASGOS CODIFICADOS POR mtDNA Se han estudiado una serie de
rasgos codificados por DNA de los orgánulos. Uno de los prime-
ros en ser examinados con detalle fu e el fenotipo causado por las
mutaciones petite en las levaduras (fig. 11-15). A fines de la déca-
Figura 11-15. Los mutantes petite tienen grandes deleciones en su
mtDNA y no pueden llevar a cabo la fosforilación oxidativa. Colonias
de células de levadura normales y colonias petite. (De Xin Jie Chen y G.
Desmond Clark-Walker, Genetics 144: 144 5- 1454 , Fig. 1, 1996. © Genetics
Society of America. Cortesía de Xin Jie Chen, Department of Biochemistry
and M olecular Biology, SUNY Upstate M ed ica! University).

neurogenic muscle weakness, ataxia, and retinitis pigmentosa),
que se caracteriza por convulsiones, demencia y retraso del desa-
1Tollo. Otras enfermedades mitocondriales son el síndrome de
Kearns-Sayre (KSS, Kearns-Sayre syndrome) y la oftalmolplejía
externa crónica (CEOP, chronic externa! ophthalmoplegia), que
causan, ambos, parálisis de los n1úsculos oculares, ptosis palpe-
bral y, en casos graves, pérdida de la visión, sordera y de1nencia.
Todas estas enfermedades muestran herencia citoplasmática y
expresión variable (véase cap. 5).
Un rasgo de las plantas producido por mutaciones de los genes
mitocondriales es la esterilidad masculina citoplasmática, un
fenotipo mutante hallado en más de 140 especies diferentes de
plantas y que se hereda solo del progenitor materno. Estas muta-
ciones inhiben el desarrollo del polen, pero no afectan la :fertili-
dad femenina.
Asimismo, se ha descubierto una serie de mutantes de cpDNA.
Uno de los primeros en ser reconocidos correspondió al aspecto
multicolor de las hoj as de la planta cuatro en punto (Mirabilis
jalapa), que fue estudiada por Carl Correns en 1909 (véanse
pp. 122-123 del cap. 5). En el alga verde Chlamydomonas se pro-
ducen mutaciones de resistencia a la estreptomicina en el cpDNA,
y se han rastreado una serie de mutantes que pueden alterar la pig-
mentación y el crecimiento en plantas de orden superior y que se
han relacionado con defectos del cpDNA.
CONCEPTOS
En la mayoría de los organismos, los genes codificados por mtDNA y
cpDNA se heredan de un solo progenitor. Un gameto puede conte-
ner más de un tipo distinto de mtDNA o cpDNA; en estos casos, la
segregación aleatoria del DNA de los orgánulos puede provocar
variación fenotípica dentro de un solo organismo o causar diferentes
grados de expresión fenotípica en la progenie.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
En algunos organ ismos, los rasgos codificados por mtDNA pueden
heredarse de uno u otro progenitor. Esta observación indica que, en
estos organismos,
a. las mitocondrias no presentan segregación replicativa,
b. hay heteroplasmia,
c. tanto los espermatozoides como los óvulos aportan citoplasma al
cigoto,
d. hay múltiples copias de mtDNA en cada célula.
Para ilustrar la herencia de un r asgo codificado por DNA de orgá-
nulos, considérese el siguiente problema. Un 1nédico examina a
un hombre joven que presenta trastorno muscular y alteraciones
visuales progresivos. Una serie de familiares del paciente presen-
ta el mismo cuadro, como muestra el pedigrí adjunto. El grado de
Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 313
1 2
11
1 2 3 4 5
111
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
IV
1 2 3 4 5
expresión del rasgo es muy vari able entre los miembros de la
familia: algunos muestran solo compromiso leve, mientras que
otros presentan sínton1as graves a una edad temprana. El médico
concluye en que este trastorno se debe a una mutación del geno-
ma mitocondrial. ¿Coincide con la conclusión del médico?
¿Podría deberse eJ trastorno a una 1nutación de un gen nuclear?
Explique su razona1n iento.
Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al proble-
ma?
Una explicación de si este trastorno podría deberse a una
mutación del genoma mitocondrial y por qué, así como si el
trastorno podría deberse a una mutación de un gen nuclear y
,
por que .
¿Qué información se proporciona para resolver el proble-
ma?
■ El hombre joven tiene trastorno muscular y alteraciones
visuales progresivos.
■ Un pedigrí que ilustra la fami Ua del hombre joven.
■ El rasgo es altamente variable entre los miembros de la
familia.
Pasos de la solución
La conclusión de que el trastorno se debe a una mutación del
genoma mitocond1ial es avalada por el pedigrí y la observación
de expresión variable en miembros afectados de la misma fami-
lia. El trastorno se transmite solo de madres afectadas a su des-
cendencia tanto n1asculina como femenina; cuando los padres
están afectados, ninguno de sus hij os presenta el rasgo (como se
observa en los hijos de II-2 y III-6). Este resultado es esperable
en rasgos determinados por mutaciones del 1ntDNA, porque las
mitocondrias se localizan en el citoplasma y suelen heredarse de
un solo progenitor (en los seres humanos, la madre). El rasgo no
puede ser recesivo ligado al cro1nosoma X, porque un cruza-
miento entre una 1nujer con el rasgo (XªX ª) y un hombre sin el
rasgo (X+Y) no produciría hijas con el rasgo (XªX ª), como
314 CAP[TULO 11
observamos en III-10, IV-3 y IV-4. No puede ser dominante
ligado al cromoson1a X, porque II-2 y III-6 tendrían que trans-
mitirlo a sus hijas, que no están afectadas (a menos que el rasgo
presentara penetrancia incompleta).
Los hechos de que algunos descendientes de madres afectadas
no muestran el rasgo (ill-9 y IV-5 ) y que la expresión varía de
una persona a otra sugieren que las personas afectadas son hete-
roplásmicas, con mitocondrias tanto mutantes como de tipo sil-
vestre. La segregación aleatoria de las mitocondrias en la meio-
sis puede producir gametos que tienen diferentes proporciones
de secuencias mutantes y de tipo silvestre, lo que determina dis-
tintos grados de expresión fenotípica entre la descendencia. Lo
más probable es que los síntomas del trastorno aparezcan cuan-
do cierta proporción mínima de las nutocondrias son n1utantes.
Solo por azar, algunos de los gainetos producidos por una madre
afectada contíenen pocas mitocondrias mutantes, por lo que s u
descendencia no presenta el trastorno.
Otra explicación posible del trastorno es que resulte de un gen
autosómico dominante. Cuando una persona afectada (heteroci-
gótica) se aparea con una persona no afectada (homocigótica),
se espera que alrededor de la n1itad de la descendencia presente
el rasgo, pero solo por azar algun os progenitores afectados no
tendrán descendientes afectados. Los individuos II-2 y III-6 del
pedigrí podrían haber sido varones solo por azar, y su sexo
podría no estar relacionado con el modo de transmisión. La
expresión variable podría explicarse por expresividad variable
(véase cap. S).
► Para obtener mayor experiencia sobre la herencia de rasgos codificados
por orgánulos, intente resolver el Problema 29 al final del capítulo.
El genoma mitocondrial
En la mayoría de los animales y hongos, todo el genon1a 1nitocon-
drial ex iste en una sola 1nolécula de DNA circular, altamente
enrollada, aunque puede haber muchas copias de este genoma en
cada célula. La estructura circular de las mitocond1ias es similar
a la estructura de un cromosoma eubacteriano. A menudo, el ge-
noma mitocondrial de las plantas consiste en una colección com-
pleja de múltiples n1oléculas de DNA circular. En algunas espe-
cies, el genoma mitocondrial es una sola 1nolécula de DNA lineal.
Cada mitocondria contiene n1últiples copias del genoma mito-
condrial, y una célula puede contener muchas mitocondrias. Por
ejemplo, una célula hepática típica de rata tiene de 5 a 10 molé-
culas de mtDNA en cada uno de las aproxünadamente 10001nito-
condrias; por lo tanto, cada célula tiene de 5000 a 10 000 copias
del genon1a mitocondrial. El DNA .mitocondrial representa alre-
dedor del 1% del DNA celular total en una célul a hepática de rata.
Al igual que los cromosomas eubacterianos, el mtDNA carece de
las histonas normalmente asociadas con el DNA nuclear euca-
1ionte, aunque for1na complejos con otras proteú1as que tienen
algunas propiedades similares a las de las histonas. El contenido
de guanina-citosina (GC) del mtDNA suele ser bastante diferente
del observado en el DNA nuclear, dado que el mtDNA puede
separarse del DNA nuclear por centiifugación en gradiente de
densidad.
Cuadro 11-4 Tamaño de los genomas mitocondriales de
algunos organismos
Tamaño del
Organismo mtDNA (pb}
Pichia canadensis (hongo) 27 694
Podospora anserina (hongo) 100 314
Saccharomyces cerevisiae (hongo) 85 779*
Drosophila melanogaster (mosca de la fruta) 19 517
Lumbricus terrestris (lombriz de tierra) 14 998
Xenopis laevis (rana) 17 553
Mus musculus (ratón casero) 16 295
Hamo sapiens (ser humano) 16 569
Chlamydomonas reinhardtii (alga verde) 15 758
Plasmodium falciparum (protista) 5 966
Paramecium aurelia (protista) 40469
Arabidopsis thaliana (planta) 166 924
Cucumis me/o (planta) 2 400 000
*El tamaño varía entre las cepas.
Los genomas mitocondriales son pequeños en comparación con
los genomas nucleares y varían mucho de tamaño en diferentes or-
ganismos (cuadro 11-4). Los tamaños de los genomas mitocon-
driales de la mayoría de las especies varían de 15 000 a 65 000 pb,
pero los de unas pocas especies son mucho más pequeños (p. ej .,
el genoma de Plasmodium falciparum, el parásito que causa el
paludismo, es de solo 6000 pb), mientras que los de algunas plan-
tas tienen millones de pares de bases. Si bien la cantidad de DNA
de los genomas mitocondriales varía mucho, no hay nü1guna
correlación entre el ta1naño del genoma y el número de genes. El
número de genes es más constante que el tamaño del geno1na; la
mayoría de las especies tienen solo de 40 a 50 genes. Estos genes
codifican cinco funciones básicas: respiración y fosforilación oxi-
dativa, traducción, ti·anscripción, procesamiento del RNA e im-
portación de proteínas al interior de la célula. La n1ayor parte de
la variación de tainaño de los genomas mitocondriales se debe a
diferencias en las secuencias de DNA no codificantes. Como se
mencionó antes, los genes de la mayoría de las proteínas y enzi-
mas halladas en las mitocondrias son codificadas, en realidad , por
el DNA nuclear.
mtDNA HUMANO El mtDNA humano es una molécula circular que
abarca 16 569 pb y que codifica dos rRNA, 22 tRNA y 13 proteí-
nas. Las dos cadenas nucleotídicas de la molécula difieren en su
composición de bases: la cadena pesada (H, heavy) tiene más
nucleótidos de guanina, mientras que la cadena liviana (L, light)
tiene más nucleótidos de citosina. La cadena H es el rnolde para
ainbos rRNA, 14 de los 22 tRNA y 12 de las 13 proteínas, en tanto
que la cadena L sirve de molde para solo 8 de los tRNA y 1 prote-
ína. El bucle D (fig. 11-6) es una región del mtDNA que contiene
sitios donde se inicia la replicación y la transcripción del mtDNA.
El mtDNA hu1nano es altamente económico en su organización:
 Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 315

(a) 16S rRNA 12S rRNA (b)

leu v1/ / phe Bucle D
NDl
}! thr
ile
fMET. ~y,..ori H

ND2 --.,.. gin

- Citocromo b
trp ala
~ asn DNA
~ cys mitocondrial
Citocromo \ ·tyr humano
oxidasa 1 orí L Cadena L - - - cadena H
asp _ ., ser
"-Nos
Citocromo ------ / TPasa 8 Figura 11-16. El genoma mitocondrial humano, que consiste en 16
« -Jeu
lys ....--.A. 569 pb, es altamente económico en su organización. a) El círculo
oxidasa 11 I l er externo representa la cadena pesada (H), y el círculo interno, la cadena
his
liviana (L). Los orígenes de replicación de las cadenas H y L son ori H y ori L,
Subunidad 6 - - - - - - / / \
de la ATPasa gly arg ND4 respectivamente. ND identifica genes que codifican subunidades de NADH
Citocromo ND3 ND4L deshidrogenasa. b) Micrografía electrónica de mtDNA aislado. (Parte b:
oxidasa 111 CNRI/Photo Researchers).

Clave: - Gen de tRNA Gen de proteína Gen de rRNA

hay pocos nucleótidos no codificantes entre los genes, y casi todo
el RNA mensaj ero codifica proteínas. También contiene muy poco
DNA repetitivo. La única región del mtDNA humano que sí con-
tiene algunos nucleótidos no codificantes es el bucle D .
mtDNA DE LEVADURA La organización del mtDNA de la levadura
es bastante diferente de la observada en el mtDNA humano. Si
bien el genoma mitocondrial de la levadura con 78 000 pb es casi
cinco veces 1nás grande, codifica solo seis genes adicionales para
un total de 2 rRNA, 25 tRNA y 16 polipéptidos (fig. 11-17). La
mayor parte del DNA extra del geno1na mitocondrial de la leva-
dura consiste en secuencias no codificantes halladas dentro de los
genes y entre ellos.
CONCEPTOS
El genoma mitocondrial consiste en DNA circular sin histonas asocia-
das, aunque forma complejos con otras proteínas que t ienen algu-
nas propiedades similares a las de las histonas . Los tamaños y las
estructu ras del mtDNA difieren mucho entre los organismos. El
mtDNA humano muestra economía extrema, pero los mtDNA halla-
dos en levaduras y plantas con flores contienen muchos nucleótidos
no codificantes y secuencias repet itivas. El DNA mitocondrial de la
mayoría de las plantas que f lorecen es grande y, por lo general,
tiene una o más repeticiones directas largas que pueden recombi-
na rse para generar moléculas más pequeñas o más gran des.
thr
RNA
ribosómico '-
grande
-_;_-
'-

___
11, ¡_r11e
ffr--trr
r ,--asn
mtDNA DE PLANTAS CON FLORES Las plantas con flores (angios- , - - met
ser......._ ...._
pennas) tienen los geno1nas nu tocondriales 1nás grandes y co1n - , '-Proteína

plejos que se conocen; sus genomas mitocondriales varían de asociada

al ribosoma
Gtocromo e ~ ,,,.,?:/:,e
oxldasa 11 / ,,,,,-val
186 000 pb en la m ostaza blanca a 2 400 000 pb en el melón
alroi7'.clero. Aun especies de plantas estrechamente relacionadas
<)
o
Subunidad 9
de la ATPasa
Citocromo e
oxidasa 111
-
pueden diferir mucho en el tamaño de sus mtDNA. g
Parte de la extensa vaiiación de tamaño del 1ntDNA de las plan- ...o
ü
DNA mitocondrial de levadura

_ _.-iMet
tas con flores se puede explicar por la presencia de secuencias lar- glu .,-- Clave ~ -pro
gas que son repeticiones directas. El entrecruzami ento entre estas "trp
- Gen detRNA
repeticiones puede generar múltiples cromosomas circulares de
Gen de proteína
diferentes tamaños. Por ejemplo, el genoma mitocondrial de los
nabos consiste en un "cú·culo maestro" forn1ado por 218 000 pb, - Gen de rRNA
'-RNA
que tiene repeticiones directas. La recombinación hon1óloga entre ribosómico
\ pequeno
las repeticiones p uede generar dos círculos más pequeños de trp
C'itn..
135 000 y 83 000 pb (fig.11-18). Otras especies contienen varias -..ro
/))oc
-~a asa
repeticiones directas, lo que posibilita eventos complej os de
entrecruzamiento que pueden aumentar o disminuir el número y Figura 11-17. El genoma mitocondrial de la levadura, formado por
el tamaño de los círculos. 78 000 pb, contiene mucho DNA no codificante.
316 CAP[TULO 11
83 000 pb
Repetició Repetición
Entrecruzamiento ...._....;
,,,,--
218 000 pb 135 000 pb
Figura 11- 18. La variación de tamaño del mtDNA de las plantas puede generarse por recombinación
entre repeticiones directas. En los nabos, el genoma mitocondrial consiste en un "círculo maestro" de 218 000
pb; el entrecruzamiento entre las repeticiones directas produce dos círculos más pequeños de 135 000 pb y
83 000 pares de nucleótidos.
Evolución del DNA mitocondrial
Como ya se mencionó, las con1paraciones de secuencias de DNA
mitocondrial con secuencias de DNA de las bacte1ias avalan con
firmeza un origen eubacteriano común de todo el 1ntDNA. No
obstante, los patrones de evolución observados en el n1tDNA va-
1ian 111ucho en diferentes grupos de organisn1os.
Las secuencias del 1n tDNA de los vertebrados muestran un
ritmo de evolución acelerado: por ejemplo, en los mamíferos, las
secuencias del mtDNA suelen cambiar de 5 a 10 veces más rápi-
do que las del DNA nuclear. El ritmo evolutivo acelerado obser-
vado en el mtDNA de los vertebrados se debe a su alta tasa de
mutaciones, que permite que las secuencias de DNA se modifi-
quen con mayor rapidez. En cambio, las secuencias del mtDNA
de las plantas evolucionan lentamente, a un ritmo de solo 1/10
que el observado en el genoma nuclear, pero su contenido de genes
y su organización cambian con rapidez. Todavía no se conoce la
razón de estas diferencias básicas en los 1itmos de evolución.
El DNA mitocondrial se ha estudiado de manera exhaustiva
para reconstruir los patrones de evolución de los seres hu1nanos y
de muchos otros organismos. Algunas de las ventajas del mtDNA
para estudiar la evolución son 1) el pequeño tamaño y la abu ndan-
cia de mtDNA en la célula; 2) Ia rápida evolución de las secuen-
cias de mtDNA en algunos organismos, que facilita el estudio de
grupos estrechamen te relacionados; y 3) la herencia materna
de 1ntDNA y la ausencia de recombinación, lo que posibilita ras-
trear las líneas femeninas de descendencia. Se han analizado
muestras de mtDNA humano de miles de personas pertenecientes
a cientos de gn1pos étnicos diferentes de todo el mundo. Estas
muestras de mtDNA están ayudando a descifrar muchos aspectos
de la evolución y la historia hu1nanas. Por ejemplo, los prüneros
estudios sobre las secuencias de mtDNA llevaron
, a postular que
pequeños grupos de hu1nanos emigraron de Afríca hace alrededor
de 85 000 años y poblaron el , resto del mundo. Esto se conoce
corno la hipótesis Fuera de Africa o hipótesis del Reemplazo
Af1icano que, en la actualidad,
, ha ganado amplia aceptación. La
hipótesis Fuera de Africa es avalada por otros estudios de las
secuencias de DNA del cromosoma Y. En el capítulo 26, se descri-
birá con mayor detalle el uso del mtDNA en estudios evolutivos.
En el momento de la concepción, un cigoto de mamífero here-
da alrededor de 100 000 copias de mtDNA provenientes del
óvulo. Dado el gran número de moléculas de DNA de cada célu-
83 000 pb
\
,i
►
_ _1Separad ón ---~•►
135 000 pb
la y la alta tasa de mutación del mtDNA, sería esperable que la
mayo1ia de las células contuv ieran una mezcla de moléculas de
mtDNA mutante y de tipo silvestre (heteroplasmia). Sin embargo,
rara vez hay heteroplasmia: en la mayoría de los organismos, las
copias de mtDNA son idénticas desde el punto de vista genético
(homoplasmia). Para explicar la uniformidad del mtDNA en orga-
nismos individuales, los genetistas postulan que, en etapas ten1-
pranas del desarrollo o de la fo1mación de game tos, el mtDNA
atraviesa algún tipo de cuello de botella en el que los mtDNA de
una célula se reducen a solo unas pocas copias que después se re-
plican y dan origen a todas las copias ulteriores de mtDNA. Me-
diante este proceso, se elimina la variación genética del rntDNA
dentro de una célula, y la mayoría de las copias de mtDNA son
idénticas. Estudios recientes han aportado evidencia de que, de
hecho, existe un cuello de botella, pero hay evidencias contradic-
torias respecto de dónde surge este en el desarrollo.
CONCEPTOS
Todo el mtDNA parece haber evolucionado a partir de un ancestro
eubacteriano común, pero los patrones de evolución observados en
diferentes genomas mitocondriales varían mucho. El mtDNA de los
vertebrados muestra cambio rápido de secuencia pero escasa modi-
ficación del contenido y la organización de los genes, mientras que
el mtDNA de las plantas presenta escaso cambio de secuencia pero
gran variación del contenido y la organización de los genes. Las
secuencias de DNA mitocondrial suelen utilizarse para estudiar los
patrones de evolución.
El daño del DNA mitocondrial se asocia
con envejecimiento
Los síntomas de muchas enfern1edades genéticas humanas causa-
das por defecto del mtDNA aparecen por pri.J.n era vez en la
mediana edad o más adelante, y aumentan su gravedad a medida
que la persona envejece. Una hipótesis para explicar esto se rela-
ciona con la declinación de la fosforilación oxidativa con el enve-
jecimiento.
 Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 317

La fosforilació n oxidativa es el proceso que genera ATP, el
transpo11ador fundamental de energía de la célula. Este proceso
tiene lugar en la membrana interna de la 1nitocondria y requiere
de una serie de proteínas diferentes, algunas codificadas por
mtDNA y otras codificadas por genes nucleares. Por lo general,
la fosforilación oxidativa declina con la edad y, si cae por deba-
jo de un umbral crítico, los tejidos no sintetizan suficiente ATP
para mantener las funciones vitales y aparecen síntomas de
enfermedad. La mayoría de las personas inician la vida con una
capacidad excesiva para la fosforilación oxidativa; esta capaci-
dad disminuye con la edad, pero la mayoría de las personas
alcanza una edad avanzada o 1nuere antes de traspasar el umbral
c1itico. Los que nacen con enfermedades mitocondriales tienen
mutaciones del mtDNA que reducen su capacidad de fosforíla-
ción oxidativa. En el momento del nacimiento, su capacidad
puede ser suficiente para satisfacer sus necesidades de ATP pero,
a medida que su capacidad de fosforilació n oxidativa declina con
la edad, cruzan el umbral crítico y co1nienzan a presentar sínto-
mas de enfermedad.
¿Por qué declina con la edad la capacidad de fosforilacíón oxi-
dativa? Una posible explicación es que, con la edad, se acumula
el daño del mtDNA: las deleciones y las sustituciones de bases en
el mtDNA aumentan con la edad. Por ejemplo, una deleción fre-
cuente de 5 000 pb en el mtDNA está ausente en el 1niocardio nor-
mal antes de los 40 años de edad, pero después se observa esta
deleción con creciente frecuencia. La misma deleción se detecta
con baja frecuencia en tejido cerebral normal antes de los 75 años
de edad, pero está presente en el 11-12% del mtDNA de los gan-
glios basales a los 80 años. Las personas con enfermedades gené-
ticas pueden envejecer en fonna prematura, porque comienzan la
vida con mtDNA dañado.
Aún no se conoce el mecanismo de los aumentos relacionados
con la edad del daño del mtDNA. Es sabido que los radicales de
oxígeno (compuestos altamente reactivos que son derivados natu-
rales de la fosforilación oxidativa) dañan el DNA (véase p. 508
del cap. 18). Como el mtDNA es físican1ente cercano a las enzi-
mas que intervienen en la fosforilación oxidativa, el mtDNA
puede ser más proclive al daño oxidativo que el DNA nuclear.
Una vez dañado el mtDNA, disminuye la capacidad de la célula
para producir ATP.
El genoma de los cloroplastos
Desde hace tiempo, los genetistas han reconocido que muchos
rasgos asociados con los cloroplastos muestran herencia citoplas-
mática, lo que indica que estos rasgos no son codificados por
genes nucleares. En 1963, los cloroplastos mostraron tener su
propio DNA (fig. 11-19).

\l.~ ?,A

PsbH
tr" c. /
1.9
/un
-- trf'I
~ltr" ~
DNA de cloroplastos
de Oryza sa,tiva (arroz)
o?-'r

trn G
trnf 11A
-
~ trn í

• _,.trn G
ORf 62
trnS -
134 525 pb psb C
psb D
trn S - --ORF 100
- Gen detRNA Gen de protefna trnQ _ ~Sbl
psb K

- Gen de rRNA Marco de lectura

abierto (ORF) no
asignado

Figura 11-19. DNA del cloroplasto del arroz.

318 CAP[TULO 11
Cuadro 11-5 Tamaño de los genomas de cloroplastos de
algunos organismos
Organismo Tamaño del cpDNA (pb)
Euglena gracilis (protista) 143 172
Porphyra purpurea (alga roja) 191 028
Ch/ore/la vulgaris (alga verde) 150 613
Marchantía polymorpha (hepática) 121 024
Nicotiana tabacum (tabaco) 155 939
Zea mays (maíz) 140 387
Pinus thunbergii (pino negro) 119 707
En diferentes plantas, el genoma de los cloroplastos varía de
80 000 a 600 000 pb, pero la 1nayoría de ellos varía de 120 000 a
160 000 pb (cuadro 11-5). Por lo general. el DNA de los cloro-
plastos es una única molécula de DNA bicatenario, circular, alta-
mente enroll ada y que carece de histonas asociadas. Al igual que
en el caso del 1n tDNA, cada cloroplasto contiene múltiples copias
de su genoma, y hay múltiples orgánulos por célula~ por lo tanto,
existen de varios cientos a varios miles de copias de cpDNA en
una célula vegetal típica.
Se han secuenciado los genomas de los cloroplastos de una
serie de especies de plantas y algas, y hoy en día se reconoce que
el cpDNA tiene una organi zación básicamente eubacteriana: el
orden de al gunos grupos de genes es el mismo que el observado
en E. coli, y mu chos genes de cloroplastos están organizados en
grupos similares a los hallados en las bacterias. Muchas de las
secuencias del cpDNA son bastante similares a las presentes en
genes eubacterianos equivalentes.
.E n las plantas vasculares, los cromoso1nas de los cloroplastos
son simj) ares en el contenido y el orden de los genes. Un genoma
de cloroplasto típico codifica 4 genes de rRNA, de 30 a 35 genes
de tRNA, una serie de proteínas ribosómicas, numerosas proteí-
nas involucradas en la fotosíntesis y varias proteínas que intervie-
nen en procesos no fotosintéticos. Una proteína clave codificada
por cpDNA es la ribulosa-1,5-bisfosfato carboxilasa-oxigenasa
(abreviada RtiBisCO), que participa en la fijación de carbono
durante la fotosíntesis. RuB isCO representa alrededor del 50% de
la proteína hallada en plantas verdes y, por lo tanto, se la conside-
ra la proteína m ás abundante de la Tien·a. Es una proteína com-
pleja formada por ocho subunidades grandes idénticas y ocho
subunidades pequeñas idénticas. La subunídad grande es codifi-
cada por DNA del cloroplasto, 1nientras que la subunidad pequ e-
ña es codificada por DNA nuclear. Gran parte del cpDNA consis-
te en secuencias no codificantes.
EVOLUCIÓN DEL DNA DE LOS CLOROPLASTOS Las secuencias del
DNA de los clor oplastos son 1n uy similares a las halladas en las
cianobacterias (un grupo de bacterias fotosintéticas), de manera
que los genomas de los cloroplastos tienen sin duda una ascen-
dencia eubacteriana. En ténninos generales, las secuencias de
cpDNA evolucionan lentamente respecto de las secuencias del
DNA nuclear y algunos mtDNA. En la mayoría de los genomas
de los cloroplastos, el tamaño y la organización de los genes son
similares, aunque hay algunas excepciones notables. Como evo-
luciona lenta1n ente y, al igual que el mtDNA, se hereda solo de un
progenitor, el cpDNA a menudo es útil para determinar las rela-
ciones evolutivas entre diferentes especies de plantas.
CONCEPTOS
La mayoría de los genomas de los cloroplastos consisten en una sola
molécula de DNA circu lar que no forma complejos con histonas. Si
bien hay considerable variación de tamaño entre las especies, los
cpDNA hallados en la mayoría de las plant as vasculares tiene alrede-
dor de 150 000 pb . Las secuencias del DNA de los cloroplastos son
muy simi lares a las secuencias del DNA de las cianobacterias, lo que
avala la teoría endosimbiótica.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 10
En su organización, el DNA de los cloroplastos es muy similar a
a. eubacterias,
b. archaea,
c. DNA nuclear de plantas,
d. DNA nuclea r de eucariontes prim itivos.
A lo largo de la evolución, la información
genética se ha desplazado entre los genomas
nuclear, mitocondrial y de los cloroplastos
Muchas proteínas halladas en las rnitocondrias y los cloroplastos
modernos son codificadas por genes nucleares, lo que sugiere que
es probable que gran parte del material genético original de endo-
simbionte haya sido transferido del núcleo. Esta presunción es
avalada por la observación de que algunas secuencias de DNA ha-
lladas normalmente en el m tDNA se han detectado en el DNA
nuclear de algunas especies de levadura y 111aíz. De modo similar,
se han observado secuencias de los cJoropl astos en el DNA nucle-
ar de la espi naca. M ás aún , las secuencias de los genes nucleares
que codifican proteínas de los orgán ulos son muy similares a sus
homólogas eubacterianas.
Asimismo , hay evidencia de que el material genético se ha des-
plazado de los cloroplastos a las mitocondrias. Por ejen1plo, se
han hallado fragmentos de DNA de algunos genes de rRNA que
suelen ser codificados por cpDNA en el 1. ntDNA del n1aíz. Las
secuencias del gen que codifica la subunidad grande de RuB isCO,
que normalmente es codificada por cpDNA, están duplicadas en
el mtDNA del 1naíz. Incluso, hay evidencia de que algunos genes
nucleares se han desplazado a genomas rnitocondriales. El inter-
cambio de material genético entre los geno1nas nuclear, nútocon-
drial y de los cloroplastos ha dado origen al término "DNA pro-
miscuo" para describir este fenómeno. No se ha esclarecido por
completo el mecanismo de este intercambio.
 Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 319

RESUMEN DE CONCEPTOS

■ Los cromosomas contienen moléculas muy largas de DNA
que están densamente empaquetadas.
■ El superenrollamiento se debe a la tensión generada cuando se
agregan o se eliminan rotaciones a una molécula de DNA rela-
jada. La rotación excesiva produce superenrollamiento positivo;
la subrotación produce superenrollamiento negativo. El supe-
renrollamiento es controlado por enzimas topoisomerasas.
■ Un cromosoma bacteriano está formado por una sola molécu-
la de DNA circular, que se une a proteínas y presenta una
serie de bucles grandes. Por lo general, se visualiza en la célu-
la co1no una acumulación definida conocida como nucleoide.
■ Cada cromosoma eucarionte contiene una sola molécula de
DNA lineal, larga, unida a histonas y a proteínas cromosómi-
cas no histonas. La eucromatina presenta el ciclo normal de
descondensación y condensación durante el ciclo celular. La
heterocromatina se mantiene muy condensada durante todo e l
ciclo celul ar.
■ El nucleosoma consiste en un centro de ocho histonas y DNA
que lo envuelve. Los nucleosomas se pliegan en una fibra de
30 nm que forma una serie de bucles de 300 nm de longitud;
estos bucles están fijados en sus bases por proteínas. Los bucles
de 300 nm se condensan para formar una fibra que se em·olla
densamente sobre sí 1nis1na para producir una cro1nátida.
■ Las regiones cromosórnicas que presentan transcripción activa
son sensibles a la digestión por DNasa I, lo que indica que el
DNA se desenrolla durante el proceso de transcripción,
■ Los cambios epigenéticos son modificaciones estables de la
expresión génica que no requieren cambios de las secuencias
de DNA. Pueden tener lugar por cambios de la estructura de
la cromatina.
■ Los centrómeros son regiones cromosómicas donde se unen
las fibras del hu so; los cromosomas sin centrómeros suelen
perderse en el curso de la división celular. La mayoría de los
centrómeros están definidos por cambios epigenéticos en la
estructura de la c ro1natina. Los telómeros estabilizan los
extremos de los cromosomas.
■ El DNA eucarionte presenta tres clases de secuencias. El
DNA de secuencias únicas está presente en muy pocas copias.
El DNA moderadamente repetitivo consiste en secuencias
relativamente largas que se repiten de cientos a miles de
veces. El DNA altamente repetitivo consiste en secuencias
rnuy cortas que se repiten en tándem de muchos nules a
millones de veces.
■ Las mitocondrias y los cloroplastos son orgánulos eucariontes
que tienen su propio DNA. La teoría endosimbiótica postula
que las mitocondrias y los cloroplastos se originaron como
organisn1os procaiiontes de vida libre (específicamente,
eubacterianos) que ingresaron en una asociación beneficiosa
con las células eucai·.iontes.
■ .L os rasgos codificados por mtDNA y cpDNA suelen heredar-
se de un solo progenitor, la mayo1ía de Jas veces de la madre.
La segregación aleatoria de orgánulos en la división celular
puede causar variación fenotípica entre las células de un orga-
nisn10 individual y entre la descendencia de una sola hembra.
■ Por lo general, el genoma mitocondrial consiste en una sola
molécula de DNA circular que carece de histonas . El DNA
mitocondrial varía de tamaño en diferentes grupos de organis-
mos. El mtDNA humano es altamente económico, con pocos
nucleótidos no codificantes. El mtDNA de hongos y plantas
contiene mucho DNA no codificante entre los genes.
■ Las comparaciones de las secuencias de mtDNA sugieren que
las mitocondrias evolucionaron a partir de un ancestro e ubac-
teriano. El mtDNA de los vertebrados muestra un rápido cam-
bio de secuencia pero escasa modificación del contenido y la
organización de los genes. El mtDNA de las plantas 1nuestra
escaso cambio de secuencia pero gran variación del conte11.ido
y la organización de los genes.
■ Las secuencias del DNA mitocondrial son muy utilizadas para
estudiar la evolución.
■ Los genomas de los cloroplastos consisten en una sola molécula
de DNA circular que carece de histonas y varía poco de tamaño.
Cada célula vegetal contiene múltiples copias de cpDNA. Las
secuencias del DNA de los cloroplastos son muy sinulares a las
de las cianobacterias y tienden a evolucionar lentamente.
■ A. lo largo de la evolución, muchos genes mitocondriales y de
cloroplastos se han desplazado a cromosomas nucleares. En
algunas plantas, hay evidencia de que copias de los genes de
cloroplastos se han desplazado al genoma mitocondrial.

TÉRMINOS IMPORTANTES

bucle D (p. 3 14)
cambio epigenético
(p. 306)
desnaturalización (melting)
(p. 308)
DNA altamente repetitivo
(p. 309)
DNA conector (p. 304)
DNA de los cloropJastos
(cpDNA) (p. 300)
DNA de secuencias únicas
(p. 308)
DNA mitocondrial (mtDNA)
(p. 300)
DNA moderadamente repetiti-
vo (p. 309)
DNA repetitivo (p. 309)
elemento corto disperso
(SINE) (p. 309)
elemento largo disperso
(LINE) (p. 309)
engrosa1niento (pujf) cromosó-
mi co (p. 304)
estado relajado del DNA
(p . 300)
eucromatina (p. 302)
farnilia génica (p. 308)
heterocromatina (p. 302)
heter oplas1nia (p. 3 11)
hibridación (p. 308)
bornoplasmia (p. 311)
nucleoide (p. 301)
nucleosoma (p. 303)
paradoja del valor C (p. 308)
proteína cromosórnica no
histona (p. 302)
renaturalización (reacopla-
miento) (p. 308)
secuencia repetida dispersa
(p. 309)
secuencia repetida en tándem
(p. 309)
secuencia telomérica (p. 307)
segregación replicativa (p. 311)
shelterina (p. 308)
superenrollamiento (p. 300)
superenrollamiento negativo
(p. 300)
superenrollamiento positivo
(p. 300)
ten1peratura de desnaturaliza-
ción (Tm) (p. 308)
teoría endosimbiótica (p. 310)
topoisomerasa (p. 300)
valor C (p. 308)
 320 CAP[TULO 11

l.b 8. M uchas proteínas modernas son huésp edes de bacterias

2. El DNA bacteriano no forma complej os con histonas endosimbióticas. L as 1nitocondrias y los cloroplastos tie-
nen un tamaño similar al de las eubacterias y tienen su
y es circular.
p ropio DNA, así como ribosomas que son similares e n
3. b tamaño y for1na a los ribosomas e ubacterianos. Los anti-
4. d bióticos que inhiben la síntesis proteica en las eubacte-
rias también inhiben la síntesis proteica en las m itocon-
S. Un cromosoma que pierde su centrómero no se
drias y los cloroplastos. Las secuencias génicas del
segregará al núcleo durante la mitosis y, general,
mtDNA y el cpD NA son 1nuy simi lares a las del D NA
se pierde.
eubacte riano.
6. d 9. c
7. a 10. a

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
Una planta diploide contiene 2000 millones de pares de bases de DNA.
a. ¿ Cuántos nuclesom as hay en la célula?
b. Indique el número de moléculas de cada tipo de histona asociadas con el D NA gen6mico.

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
El núm ero de nucleosomas por célula y el número de cada
tipo de histona asociada con el DNA.
¿Qué información se proporciona para resolver el proble-
ma?
La célula contiene 2000 millones de pares de bases de DNA.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
El nucleosoma, en la Sección 11.1.
a. Para determinar la cantidad de nucleosom as presentes en la
célula, simplemente dividimos la cantidad de total de pares
de bases de DNA (2 x 109 pb) por el n.ún1ero de pares de
bases por nucleosoma:
2 x 1o9 nucleótidos
2 x 102 nucleótidos p or nucleosom a
= 1 x 107 nucleosomas

Pasos de la solución Por consiguiente, hay alrededor de 1O millones de nu cleo-

somas en la cél ula.
Recuerde: la Debemos examinar la estructura, la organización y las b. Cada nucleosoma incluye dos moléculas de cada histona:
unidad repetitiva
del cromosoma secuencias del genoma del orgánulo. Si este solo H2A, H2B, H3 y H4. Por lo tanto, hay 2 x 107 moléculas
es un nucleoso- 1nuestra las características del DNA eucarionte, es n1uy de cada histona: H2A, H2B, H3 y H4. Cada nucleosoma
ma, que consiste probable que tenga un origen eucarionte, pero si pre- tiene asociada una copia de histona H l; por lo tanto, hay l
en DNA que
forma complejos senta algunas características de DNA eubacteriano, x 10 7 moléculas de H l.
con histon as. entonces esto avala la teoría de un origen eubacteriano.

Problema 2
Suponga que se descubre un nuevo orgánulo en un grupo poco conocido de protistas. Este orgánulo contie-
ne un pequeño genoma de DNA, y algunos científicos argumentan que, aJ igual que los cloroplastos y las
rnitocondrias, este orgánulo se originó como una eubacteria de vida libre que estableció una relación endo-
simbiótica con el protista. Delinee un plan de investigación para determinar si el nuevo orgánulo evolucio-
nó a partir de una eubacteria de vida libre. ¿Qué clases de datos reuniiia y qué predicciones haría si la teo-
ría fuera correcta?

Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Un plan de investigación, con los tipos de datos que reuniría y
sus predicciones.
¿Qué información se proporciona para resolver el pro-
blema?
■ Se descubre un nuevo orgánulo.
■ El orgánulo contiene un pequeño genoma de DNA.
■ El orgánulo podría haber evolucionado a partir de una
relación endosimbiótica.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Secciones sobre Teoría endosimbiótica, El genoma mitocron-
drial y El genoma de los cloroplastos, en la Sección 11 .4.
Sección 11.1
l. ¿Cómo se produce el superenrollamiento? ¿Cuál es la diferencia
entre superem·ol1am:iento positivo y negativo?
2. ¿Qué funciones cumple el superenrollamiento en la célula?
3. Describa la composición y la estructura del nucleosoma.
4. Describa por pasos cómo la doble hélice de DNA, que tiene
2 nm de ancho, da origen a un cromosoma que tiene 700 nm de
ancho.
5. ¿Qué son los cromosomas politénicos y los engrosamientos
(puffs) cromosómicos?
6. ¿Qué son los cambios epigenéticos y cómo se producen?
Sección 11 .2
7. Describa la función del centrómero. ¿En qué se diferencian los
centrómeros de otras regiones del croinosoma?
8. Describa la función y la estructura molecular de un telómero.
9. ¿Cuál es la diferencia entre eucromatina y heterocromatina?
Introducción
17. En la introducción de este capítulo, se analizó un estudio
sobre la longitud de los teló1neros en niños ru1nanos. El
estudio demostró que los niños cti ados en orfanatos tenían
telómeros más cortos que los criados en hogares sustitutos.
¿Qué efecto sobre la vida adulta, si es que hay alguno,
piensa que podrían tener los telón1eros más cortos en la
infancia?
Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 321
Pasos de la solución Recuerde: la teoría
endosimbiótica postu-
la que los o rgánulos
evolucionaron a partir
Debemos examinar la estructura, la organización y
de eubacterias.
las secuencias del genoma del orgánulo. Si este solo
muestra las características del DNA euca1ionte, es
muy probable que tenga un origen eucarionte, pero
si presenta algunas características de DNA eubacte-
riano, entonces esto avala la teoría de un origen
eubacteriano.
P odríamos comenzar por examinar las características gene-
rales del DNA del orgánulo. Si tiene un origen eubacteriano,
podríamos esperar que el genoma del orgánulo consistiera en
una molécula circular y que careciera de histonas. Podrían1os
comparar las secuencias del DNA hallado en el orgánulo con
secuencias homólogas de genomas de eubacterias y eucarion-
tes. Si la teoría del origen endosimbiótico es correcta, enton-
ces las secuencias deberían ser muy similares a las secuencias
homólogas halladas en eubacterias.
Sección 11.3
10. ¿Qué es el valor C de un organismo?
11. Describa las diferentes clases de variación de secuencias de
DNA que existen en los eucariontes.
Sección 11.4
12. Explique por qué muchos rasgos codificados por mtDNA y
cpDNA muestran considerable variación en su expresión, aun
en miembros de la 1nisma fanúlia.
13. ¿Qué es la teoría endosímbíótica? ¿Cómo ayuda a explicar
algunas de las característícas de las mitocondrias y los cloro-
plastos?
14. ¿Qué evidencia avala la teoría endosimbiótica?
15. Describa sucintamente la organización de los genes en el geno-
1na del cloroplasto.
16. ¿ Qué significa el término "DNA promiscuo"?
Sección 11.1
*18. Compare y contraste los cromosomas procariontes y euca-
1iontes. ¿En qué se parecen y en qué se diferencian?
*19. a) En una célula eucarionte típica, ¿esperaría hallar más
moléculas de la histona H 1 o 1nás moléculas de la histona
H2? Explique su razonruniento. b) ¿Esperaría hallru· más
n1oléculas de H2A o más molécul as de H3? Explique su
razonamiento.
322 CAP[TULO 11

*20. Sobre la base de la sensibilidad a la DNasa I ilustrada en

la figura 11-7 , ¿qué tipo de hemoglobina de pollo AGGCGGGTAGGCACCCTTA
(embrionaria o adulta) es probable que se produzca en TCCGCCCATCCGTGGGAAT
máxima cantidad en los siguientes tejidos y etapas del
desarroJlo? *27. En un estudio de bíbridación del DNA, se aisló DNA de
a. Eritroblastos durante las primeras 24 horas. /Z:..." una especie particular, se lo marcó con 32P y se lo cortó
b. Eritroblastos en el día 5. . , • • T°' en pequeños fragmen tos (S. K. Dutta y cols. 1967.
Genetics 57:719-727). Luego, se compararon las hibrida-
c. Eritroblastos en el día 14. ciones entre estos fragmentos marcados y DNA desnatura-
d. Células cerebrales durante todo el desarrollo. lizado de varias especies. El siguiente cuadro presenta los
21. Suponga que un investigador agregó por poco tiempo uri- porcentajes de DNA de trigo marcado que se hibrídó con
dina marcada radiactivamente a larvas de Drosophila cuyo moléculas de DNA de trigo, maíz, rábano y repollo.
cromosoma politénico se 111uestra en la figura 11-6.
Indique en la figura dónde esperaría observar acumulación Porcentaje de DNA de trigo
de uridina radiactiva. Especie unido hibridado respecto del trigo
*22. Una célula diploide humana contiene alrededor de 6 400 Trigo 100
millones de pares de bases de DNA. Repollo 23
a. ¿ Cu ántos nucleosomas están presentes en una célula de Maíz 63
este tipo? (Asuma que el DNA conector abarca 40 pb). Rábano 30
b. ¿Cuántas proteínas histona forman un complejo con
¿Qué indican estos resultados acerca de las diferencias
este DNA?
evolutivas entre estos organ is1nos?
*23. ¿Esperaría observar mayor o menor acetilación en regio-
nes de DNA que son sensibles a la digestión por DNasa I?
Sección 11.4
¿Por qué?
bt 0AfO1

24. Gunter Korge examinó varias proteínas que son secretadas *28. Se encuentra una planta de trigo de color verde claro cre-
por las glánd ulas salivales de Drosophila 111elanogaster ciendo en un ca1npo. El análisis bioquímico revela que los
durante el desru.Tollo larval (G. Korge. 1975. Proceedings cloroplastos de esta planta producen solo el 50% de la clo-
of the National Acadeniy oj"Sciences of the United States rofila hallada normalmente en los cloroplastos del trigo.
of America 72:4550-4554). Una proteína, denominada Proponga una serie de cruzanlientos para determinar si el
fracción proteica 4, era codificada por un gen localizado fenotipo verde claro es causado por una mutación de un
en el cromosoma X en posición 3C mediante mapeo por gen nuclear o de un gen de los cloroplastos.
deleción. Korge observó que, alrededor de 5 horas antes *29. En la familia ilustrada en el pedigrí, se detecta una rara
de la síntesis inicial de la fracción proteica 4, se formaba enfennedad neurológica. ¿Cuál es el modo de herencia más
una región expandida y engrosada en el cromoson1a X en probable de este trastorno? Explique su razonru.niento.
la posición 3C. Este engrosamiento (pujf) cromosómico
desaparecía antes del final del tercer estadio larval, cuando
cesaba la síntesis de factor proteico 4. Observó que no
había ningún engrosanliento en la posición 3C, en una
especie especial de moscas que no secretaban factor pro- 1 2
teico 4. Explique estos resultados. ¿Qué es el engrosa- 11
miento cromosómico en la región 3 y por qué su aparición
y desapa1ición coincide aproxin1adamente con la secreción
1 2 3 4 5 6 7 8
de factor proteico 4?
25. Suponga que un químico desarrolla un nuevo fármaco que 111
neutraliza las cargas positivas de la cola de las histonas.
¿ Cuál sería el efecto 111ás probable de este nuevo fárn1aco 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
sobre la estructura de la cromatina? ¿Ejercería este fárma-
IV
co algún efecto sobre la expresión génica? Explique sus
respuestas.
1 2 3 4 5 6 7 8

Sección 11.3
30. Asuma que el trastorno mostrado en el pedigrí del
*26. ¿Cuál de las siguientes dos moléculas de DNA tiene la Proble1na resuelto de la p. 313 es una enfennedad rara
te1nperatura de desnaturalización más baja? ¿Por qué?
que se debe a un defecto del DNA mitocondrial. Si el
individuo III-8 tiene una hija, ¿cuál es la probabilidad de
AGTTACTAAAGCAATACATC que ella herede el trastorno muscular de su progenitora
TCAATGATTTCGTTATGTAG afectada?
 Estructura cromosómica y DNA de los orgánulos 323

31. Fredrick Wilson y sus colegas estudiaron a miembros de encuentre por célula durante todo el ciclo celular.
una familia numerosa que tenía bajos niveles de magnesio Después, dibuje una línea de puntos en el mismo gráfi co
F;' en sangre (véase el pedigrí abajo). Argumentaron que este
DE DATOS para indicar la cantidad relativa de mtDNA que usted
trastorno del magnesio (y la hipertensión y la hipercoleste- esperaría observar en ctiferentes puntos del ciclo celular.
role1nia asociadas) era causado por una mutación del
mtDNA (F. H. Wilson y cols. 2004. Science 306: 1190-
1194).
<{
a. ¿ Qué evidencia sugiere que un gen del mtDNA es el z
o 2,0 X
causante del trastorno? (1)
"O
b. ¿Podría este trastorno ser causado por un gen autosó- ro
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1nico don1Ínante? ¿Por qué o por qué no? ro
1,5 X
....
(1)

"O
ro
"O
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ro
u 1,0 X

k ~
t t
Citocinesis Mitosis
Ciclo celular

34. En 1979, huesos hallados fuera de Ek.ate1inburgo, Rusia,

VI
(De F. H.Wilson y cols. 2004. Science 306:1190-1194).
*32. En una cepa particular de Neurospora , una mutación poky
muestra herencia biparental, 1nientras que las 1nutaciones
poky de otras cepas se heredan solo del progenitor mater-
no. Explique estos resultados.
*33. Una científica recolecta células en distintos puntos del
ciclo celular y aísla DNA de ellas. Mediante centrifuga-
ción en gradiente de densidad, separa el D NA nuclear y el
mtDNA. Después, mide la cantidad de mtDNA y de DNA
nuclear presente en diferentes puntos del ciclo celular. En
el siguiente gráfico, clibuje una línea que represente las
cantidades relativas de DNA nuclear que espera que ella
mostraron ser los del zar Nicolás y su fanlilia, quienes
fueron ejecutados en 1918 por un pelotón de fusilamiento
bolchevique durante la Revolución 1usa (véase la introduc-
ción del cap. 14). Para probar que los esqueletos eran los
de la familia real, se extrajo mtDNA de las 1nuestras
óseas, se Jo amplificó por PCR y se lo comparó con el
mtDNA de fa1níliares vivos de la familia del zar.
a. ¿Por qué se analizó el DNA de las mitocondrias en
lugar del DNA nuclear? ¿Cuáles son algunas de las
ventajas de usar mtDNA para este tipo de estudio?
b. ¿El DNA mitocondrial de qué familjares vivos aporta-
ría información útil para verificar que los esqueletos
eran los de la fanu lia real?
35. Los antibióticos como el cloranfenicol, la tetraciclina y la
eri tro1nicina inhiben la síntesis proteica en las eubacterias,
pero no tienen ningún efecto sobre la síntesis proteica
codificada por genes nucleares. La cicloheximida inhibe la
síntesis proteica codificada por genes nucleares, pero no
ejerce ningún efecto sobre la síntesis proteica eubacteria-
na. ¿Cómo pod1ian utilizarse estos compuestos para deter-
minar qué proteínas son codificadas por genomas mito-
condriales y de cloroplastos?

PREGUNTAS DE DESAFÍO

Sección 11.1 de DNA de 120 pb permanece unido a un centro de histo-

nas. El análisis del centro de histonas revela las siguientes
36. Un explorador descubre una nueva especie extraña de
proporciones:
planta y envía parte del tejido vegetal a una genetista para
estudio. La genetista aísla cromatina de la planta y la exa- Hl 12,5%
mina con un microscopio electrónico. Observa lo que H2A 25%
p arecen ser cuentas de un collar. Después, agrega una H2.B 25%
pequeña cantidad de nucleasa, que degrada la cadena en H3 0%
cuentas individuales, que contienen, cada una, 280 pb de H4 25%
DNA. Tras la digestión con más nucleasa, un fragmento H7 (una histona nueva) 12,5%
324 CAP[TULO 11

Sobre la base de estas observaciones, ¿qué conclusiones
podría extraer la genetista acerca de la probable estruc-
tura del nucleosoma de la cromatina de esta planta?
Sección 11.3
b. Advierta que, para las especies de Vicia, la velocidad
de renaturalización es mucho más rápida en la primera
hora y después se enlentece. ¿ Qué podría causar esta
renaturalización rápida inicial y el enl entecim.iento
ulterior?

37. En experimentos de hibridación del DNA en seis especies Sección 11.4

r::;· de plantas del género Vicia, se aisló DNA de cada una de
las seis especies, se lo desnaturalizó por calentam.iento y
OE DAIOS
38. Steven Frank y Laurence Hurst argumentaron que una
• ••
0
mutación con herencia citoplasmática de los seres huma-
'"

se lo cortó en pequeños frag1nentos (W. Y. Chooi. 1971. ., ••ro, nos que ejerce efectos graves en los varones pero ningún
Genetics 68:2 13-230). En un experimento, se permitió la efecto en las n1uj eres no se ewn.inará de la población por
renaturalización del DNA de cada especie y de E. coli. El selección natural, porque solo las mujeres transmiten
gráfico muestra los resultados de este experimento de mtDNA (S. A. Frank y L. D. Hurst. 1996. Nature
renaturalización. 383:224). Utilizando este argumento, expl.ique por qué los
varones con neuropatía óptica hereditaria de Leber presen-
tan co1npro1n.iso más grave que las mujeres.
100
o
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11)
·, 39. En un estudio de una miopatía, varias familias mostraban
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• • • f;;,._" problen1as de visión, debilidad muscular y sordera (M.
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•,. --=::::::.-•
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- •2 º'º"°' Zeviani y cols. 1990. American Jouma.l of Human

·-==-:::.
z~ •3 Genetics 47:904-914). El análisis del mtDNA de las per-
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sonas afectadas de estas familias reveló que, en grandes
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""·""'·""·--. números de este, había deleciones de diversa longitud.
Diferentes m.iembros de la misma fam.ilia, e incluso distin-
tas mitocondrias de la misma persona, tenían deleciones
a..

o
·- -· // •7
de diferentes tamaños; por consiguiente, el defecto de base
parecía ser una tendencia a las deleciones del mtDNA de
o 2 4 6 8 10 12 14 24 las personas afectadas. Aquí se muestra un pedigrí de una
nempo (horas) de las familias estudiadas. Los investigadores concluyeron
Clave
1 =V. melanops, 2 = V. sativa, 3 = V. benghalensis, que este trastorno se hereda co1no un rasgo autosónlico
4 = V. atropurpurea, 5 = V. faba, 6 = V. narbonensis, 7 =E. coli donlinante y mapearon el gen causante de la enfern1edad a
una posición del cromosoma 10 del núcleo.
a. ¿ Qué características del pedigrí descartan la herencia
de un rasgo codificado por un gen del mtDNA?
a. ¿Puede explicar por qué el DNA de E. coli se renatu.ra-
liza a una velocidad mucho m ás rápida que el DNA de b. Explique cómo una mutación de un gen nuclear podría
todas las especies de Vicia? inducir deleciones en el mtDNA.

11

111

IV
(De M. Zevian i y cols. 1990. American Journal of Human Genetics 47:904-9 14).

40. Se han detectado secuencias de DNA mitocondrial en los

geno1nas nucleares de .muchos organismos, y en ocasiones
se encuentran secuencias de cpDNA en el genoma mito-
condrial. Proponga un mecanismo por el cual este "DNA
Veza o arveja (Vicia sativa) (Bob promiscuo" podría desplazarse entre los genomas nuclear,
Gibbons/Alamy). mitocondrial y de los cloroplastos.
 12
Replicación y recombinación del DNA

Topoisomerasa, replicación y cáncer

En 1966, Monroe Wall y Mansukh Wani hallaron una
cura potencial del cáncer en la corteza del árbol de la
felicidad (Camptotheca acuminata), una rara planta
nativa de China. Wall y Wani se encontraban en el pro-
ceso de investigar la actividad antineoplásica de un
gran número de sustancias naturales, con la esperanza
de hallar sustancias químicas que resultaran eficaces
para el tratamiento del cáncer. Descubrieron que un
extracto del árbol de la felicidad era eficaz para tratar
la leucemia en ratones. Mediante análisis químico,
pudieron aislar el compuesto activo, que fue nombrado
camptotecina.
En la década de 1970, los médicos administraron
camptotecina a pacientes con cánceres incurables. Si
bien el fármaco mostró cie1ta actividad antineoplásica,
tenía efectos colaterales tóxicos. Finalmente, los qufrni-
cos sintetizaron varios análogos de la ca1nptotecina que
eran menos tóxicos y más eficaces para el tratamiento
del cáncer. Dos de estos análogos, el topotecán y el iri-
notecán, se utilizan actualmente en el tratamiento del
cáncer de ovario, el cáncer microcítico de pulmón y el
El árbol de la felicidad, Camptotheca acuminata, contiene camptotecina, una
sustancia usada para tratar el cáncer. La camptotecina inhibe el cáncer por bloqueo
cáncer de colon.
de un componente interno de la maquinaria de replicación. (Johnny Pan/Getty lmages). Durante muchos años, se desconoci ó el mecanismo
por el. cual los co1npuestos de camptotecina inhibían el
cáncer. En 1985, casi 20 años después de su descubri-
miento, los científicos de la Johns Hopkins University y Smith Kline and French L aboratories
(en la actualidad, GlaxoSmithKline) mostraron que la camptotecina actuaba inhibiendo un
componente importante de la maquinaria de síntesis del DNA en los seres humanos, una enzi-
ma denominada topoisomerasa l.
La quimioterapia del cáncer es una tarea delicada, porque las células diana son las propias
del paciente, y los fármacos deben destruir las cél ulas cancerosas sin matar al paciente. Una
de las características distintivas del cáncer es la proliferación: la división de las células cance-
rosas no está regulada, y muchas células se dividen a gran velocidad, lo que da origen a tumo-
res con capacidad de crecer y diseminarse. Como aprendimos en el capítulo 2, antes de que
una célula pueda dividirse debe replicar de manera exitosa su DNA, de manera que cada célu-
la hija reciba una copia exacta del material genético. Los puntos de control del ciclo celular
garantizan que no se produzca la división celular si la replicación del DNA está inhibida o es
defectuosa, y muchos tratamientos oncológicos se centran en interferir con el proceso de
replicación del DNA.
La replicación del DNA es un proceso co1nplejo que requiere una gran cantidad de compo-
nentes, cuyas acciones deben estar intrincadrunente coordinadas para asegurar que el DNA sea
copiado con exactitud. Un componente esencial de la replicación es la topoisomerasa. A
medida que el DNA se desenrolla en el curso de la replicación, se acumula tensión por delan-
te de la separación, y las dos cadenas se retuercen entre sí, como se anuda una soga cuando se
separan dos de sus hebras. Este retorcin1iento del DNA se denonlina superenrollamiento

325
326 CAP[TULO 12

( véase cap. 11). Si no se eliminan los superenrollamientos, estos finalinente detienen la separación de
las cadenas y se interrumpe la replicación. Las enzimas topoi somerasas eliminan los superenrolla-
mientos pinzando con fuerza el DNA y rompiendo una o ambas de sus cadenas. Después, las cadenas
giran una alrededor de la otra, lo que elimina el superenrollruniento y la tensión. Una vez que el DNA
está relajado, la topoisomerasa que eluninó el superem·ollamiento vuelve a sellar los extremos corta-
dos del DNA.
La ca1nptotecina actúa interfieriendo con la topoíso1nerasa l. El fármaco se inserta en el hiato crea-
do por el corte de la cadena de DNA e impide que la topoisomerasa vuelva a sellar los extremos cor-
tados. Originalmente, los investigadores asumieron que la crunptotecina atrapaba la isomerasa y blo-
queaba la acción de otras enzimas necesru·ias para la síntesis de DNA. Sin embargo, investigaciones
recientes indican que la crunptotecina es tóxica para la topoisomerasa, por lo que esta no puede elimi-
nru· los superenrollamíentos por delante de la replicación. Los superem·ollamientos acumulados detie-
nen la maquinaria de replicación e impiden la proliferación de células cancerosas. Al igual que
muchos otros fármacos oncológicos, la ca1nptotecina también inhibe la replicación de células norma-
les no cancerosas, razón por la que la quimioterapia enfem1a a muchos pacientes.

E ste capítulo se centra en la replicación del DNA, proceso por

el cual una célula duplica su DNA antes de dividirse. Comen-
zamos con el mecanismo básico de replicación basado en la
estructura del DNA formulada por Watson y Crick. Luego, exruni-
namos varios modos diferentes de replicación, sus requisitos y la
dirección uni versal de la síntesis de DNA. Asimismo, analizrunos
las enzimas y las proteínas que participan en este proceso. Por últi-
mo, consideramos los detalles n1oleculares de la recombu1ación,
que está estrechamente relacionada con la replicación y que es
esencial para la segregación de los cro1nosomas homólogos, la
producción de la vru·iación genética y la reparación del DNA.
12.1 La información genética se debe copiar
con exactitud cada vez que se divide una célula
En un juego escolar, un niño le susurra a otro un mensaje, como
"el perro mru-rón de Juru1 escapó de su casa", quien corre hacia un
segundo niño pru·a repetfrseJo. Este mensaje se transmite de un ni-
ño a otro a través del patio de la escuela hasta que regresa al men-
sajero original. Inevitablemente, el último niño retorna con un
mensaje muy diferente: por ejemplo, "Juan Marrón tiene un cerdo
que vive debajo de la entrada de su casa" . Cuantos más niños
intervengan en el juego, más distorsionado resultará el 111ensaje.
E ste juego ilustra un principio importante: siempre que se copia
un mensaje surgen e1Tores; cuantas 1nás veces se copie, mayor
será la cantidad de errores.
Un organismo multicelular complejo enfrenta un problema aná-
logo al de los niños del juego escolar: con qué fidelidad se trans-
miten las instrucciones genéticas cada vez que la célula se divide.
La solución a este problema es básica para la replicación. Un
cigoto hu1nano unicelular contiene 6400 1nillones de pares de
bases de DNA; incluso una tasa de e1Tor baja durante el copiado,
como una vez por millón de pares de bases, causaría 6400 en·ores
cada vez que se divide una célula, errores que se volve1ían más
complejos con cada una de las 1nillones de divisiones celulares
sucesivas que se producen durante el desarrollo humano.
No solo el copiado del DNA debe ser increíblemente preciso,
sino que trunbién debe desarrollarse a gran velocidad. El único
cromosoma circular de E. coli contiene alrededor de 4,6 millones
de pares de bases. A una velocidad de más de 1000 nucleótidos
por minuto, la replicación de todo el cromosoma requeriría casi
tres días. Sin embargo, como ya se mencionó, estas bacterias son
capaces de dividirse cada 20 minutos. En realidad, Escherichia
coli replica su DNA a una velocidad de 1000 nucleótidos por
segundo, con menos de un e1Tor cada 1000 millones de nucleóti-
dos. ¿Cóm.o se logra este proceso tan rápido y exacto?
12.2 La replicación del DNA tiene lugar
de manera semiconservadora
A partir de la estructura tridimensional del DNA propuesta por
Watson y Crick en 1953 (véase fig. 10-7), se evidenciaron de in-
mediato varias implicaciones genéticas importantes. El carácter
complementario de las dos cadenas nucleotídicas de una molécu-
la de DNA sugirió que, durante la replicación, cada cadena puede
servir de molde para la síntesis de una nueva cadena. La especifi-
cidad del apareruniento de bases (adenina con timina; guanina
con citosina) implica que cada 1nolde puede especificar una única
secuencia de bases, de manera que las dos moJéculas de DNA sin-
tetizadas a partir del par de moldes serán idénticas a la original.
Este proceso se denomina replicación semiconservadora porque
cada una de las cadenas nucleotídicas originales permanece intac-
ta (conservada), pese que ya no está combinada en la misn1a
molécula; la 1nolécula original de DNA se sen1iconserva durru1te
la replicación.
En un principio, se propusieron tres modelos de replicación del
DNA. En la replicación conservadora (fig. 12-la), toda la molé-
cula de DNA bicatenario su·ve de molde para una molécula nueva
entera de DNA, y la 1nolécula original de DNA se conserva total-
mente durru1te la replicación. En la replicación dispersiva (fig. 12-
lb), runbas cadenas nucleotídicas se degradan (dispersan) en
fragmentos que sirven de moldes pru·a la síntesis de nuevos frag-
mentos de DNA, que luego vuelven a ensrunblarse en dos molé-
culas completas de DNA. En este modelo, cada molécula de DNA
resultante tiene fragn1entos de DNA antiguo y nuevo intercalados;
no se conserva ninguna parte de la molécula original. La replica-
ción semiconservadora (fig. 12-lc) es un proceso intermedio
entre estos dos modelos; las dos cadenas nucleotídicas se desen-
rollan y cada una sirve de molde para una nueva molécula de
DNA.
 Repl icación y recombinación del DNA 327

(a) Replicación conservadora (b) Replicación dispersiva (c) Replicación semiconservadora

DNA original

Primera replicación

,, ..

Segunda replicación •
Él ,_ ,, r-
~
• e,
~
,,• .. .. .. r.,.

Figura 12-1. Tres modelos propuestos de replicación son replicación conservadora, replicación
dispersiva y replicación semiconservadora.

Estos tres modelos permiten hacer diferentes predicciones acer- que el DNA bacteriano sintetizado después de la modificación
ca de la distribución del DNA original y el DNA recién sintetiza- contenía 14N y era relativamente ligero.
do después de la replicación. En la replicación conservadora, des- Meselson y Stahl distinguieron entre el DNA pesado cargado
pués de un ciclo de replicación, el 50% de las moléculas están de 15N y eJ DNA ligero cargado de 14N n1ediante centrifugación
compuestas en su totalidad por DNA original, y el otro 50% por
DNA nuevo. Tras un segundo ciclo de replicación, el 25% de las
moléculas consisten por entero en DNA original, y el 75% con-
siste por entero en DNA nuevo. Con cada ciclo adicional de re-
plicación, la proporción de moléculas de DNA nuevo au1nenta, Se llena un tubo de una
aunque el número de moléculas de DNA original se 1nantiene centrífuga con una solución
constante. La replicación dispersiva siempre produce un híbrido salina pesada y fragmentos J
de DNA.
con algunas moléculas de DNA original y algunas nuevas, pero la
proporción de DNA nuevo dentro de las moléculas aumenta con
cada replicación. En cambio, en la replicación semiconservadora,
un ciclo de replicación produce dos moléculas híbridas, cada una
compuesta por un 50% de DNA original y un 50% de DNA
nuevo. Después de un segundo ciclo de replicación, la mitad de
las moléculas es lnbrida, y la otra mitad solo está compuesta por
l
DNA nuevo. Los ciclos adicionales de replicación producen una
cantidad cada vez mayor de moléculas compuestas solo por DNA
Luego, se lo centrifuga a alta
nuevo y persisten unas pocas moléculas híbridas. --==:! velocidad durante varios días.

Experimento de Meselson y Stahl

Para determinar cuál de los tres modelos de replicación corres-
ponde a las células de E. coli, Matthew Meselson y Franklin Stahl
necesitaban una manera de distinguir DNA antiguo y nuevo. Lo
hicieron utilizando dos isótopos de nitrógeno, 14N (la forma co-
mún) y 15N (una forma rara, pesada). Meselson y Stah.l cultivaron
l Se genera un gradiente de den-
1

E. coU en un medio que contenía 15N como única fuente de nitró- sidad dentro del tubo. El DNA
geno; después de muchas generaciones, todas las células DNA con 14
N pesado (con 15 N) se desplazará
de E. coli habían incorporado 15N en todas las bases de purina y __ hacia el fondo; el DNA ligero
~::;;.-, (con 14N) permanecerá cerca
pirimidina de su DNA (véase fig. 10-10). Estos investigadores DNA con 15
N
de la superficie.
tomaron una muestra de estas bacterias, transfirieron el resto de
las bacterias a un medio que solo contenía 14N y obtuvieron
muestras adicionales después de unas pocas generaciones celula- Figura 12-2. Meselson y Stahl utilizaron centrifugación de equilibrio
res. En cada muestra, el DNA bacteriano sintetizado antes del en gradiente de densidad para distinguir entre DNA cargado con
cambio de medio poseía 15N y era relativamente pesado, mientras 15 N, pesado, y DNA cargado con 14N, más ligero.
328 CAP[TULO 12

de equilibrio en gradiente de densidad (fig. 12-12). E sta técnica
consiste en llenar un tubo de centrifugación con una solución sali-
na y un a sustancia de densidad desconocida; en este caso, frag-
mentos de DNA. Desp ués, se centrifuga el tubo a alta velocidad.
Tras varios días de centrifu gación, se genera un gradiente de den-
sidad dentro del tubo, con alta densidad en el fondo y baja densi-
dad en la superficie. La densidad de Jos frag1nentos de DNA es
compatible con la de la sal: las moléculas livianas suben y las pe-
sadas se hunden.
Meselson y Stahl hallaron que el DNA de las bacterias que pro-
liferaban en un n1edio solo con 15N producía una única banda en
la posición esperada del DNA que contenía solo 15N (fig. 12-3a).
El DNA de las bacterias transferidas al medi o con 14 N y someti-
das a un ciclo de replicación también producía una sola banda,
pero en una posición intermedia entre la esperada para el DNA
solo con 15N y la esperada para el DNA solo con 14 N (tig. 12-3b).
E ste resultado no es compatible con el modelo de replicación con-
servadora, que predi ce Ja presencia de una banda pesada (molécu-
las de DNA origi nal) y una banda ligera (las moléculas de DNA
nuevas). Tanto en el modelo semiconservador como en el disper-
sivo se prevé una banda única de densidad intermedia.
Para distinguir entre estos dos modelos, Meselson y Stahl cul-
tivaron las bacterias en un medio que contenía 14N para obtener
una segunda generación. Tras un segundo ciclo de replicación
en el medi o con 14 N, aparecieron dos bandas de igual densidad,
una en la posición intermedia y la otra en la posición esperada
para el DNA que contiene solo 14N (tig. 12-3c). Todas las
muestras tomadas después de ciclos adicionales de replicación
pr odujeron las mismas dos bandas, y la banda que representa-
ba DNA ligero se tornó cada vez más intensa (fig. 12-3d). Lo s
res ultados de Meselson y Stahl fuero n exactamente lo s pre-
vistos para la replicación serniconservadora y son incompatibles
con los anticipados para la replicación conservadora y dispersiva.
~ TENTE RESOLVER EL PROBLEMA 22

Pregunta: ¿qué modelo de replicació n del DNA (conservadora, dispersiva o semiconservadora) es aplicable a E. coli ?

(a) (b) (c) (d)

Transf erencia a Segundo ciclo de Ciclos ad icionales

medio con 14N·, un replicación en med io d e rep licación en
M edio con 15 N
con 14N medio con 14 N ..
ciclo de repl icación . .. .. .. ...
•• • • •
. . . . ... ..

Centrif ugación Centrif ugación Centrifugación Centrifugación

Li gero (14 N) - - - - - - - - - - - ,_ __________

Pesado (1 5 N}

ÍEIDNA de bacterias que habfan

crecido en medio con 15N
l apareció como una banda únic_
a_.
J --
Después de un ciclo de replica-1 Tras un segundo ciclo de replicación, el Las muestras tomadas después
ción, el DNA apareció como DNA apareció como una banda única de ciclos adiciona les de replica-
.J una banda única de peso de peso intermedio. ción muestran dos bandas,
intermedio. como en la parte c. J

' 'R. fJ I¡ I¡ IJ
11, I¡ I¡ l¡"VJ 1/~J fJ 1¡· I¡

~ l.1 IJ I¡ I¡ I¡
l. IJ fJ
lj I¡ I¡ fJ IJ
DNA original
¡" fJ IJ \ ~
'.I fJ I¡ I¡ I¡
Ca dena Ca den a I¡ fJ '.I 1,/ I¡
p arental nueva

Conclusión: la repl icación del DNA en E.coli es semiconservadora.

Figura 12-3. Meselson y Stahl demostraron que la replicación del DNA es semiconservadora.
 Replicación y recombinación del DNA 329

Las unidades individuales de replicación se denominan replico-

CONCEPTOS nes, cada uno de los cuales contiene un origen de replicación. La
replicación se inicia en el origen y continúa hasta que se ha repli-
La replicación es semiconservadora: cada cadena de DNA sirve de
cado todo el replicón. Los cromosomas bacterianos tienen un solo
molde para la síntesis de una nueva molécula de DNA. Meselson y
origen de replicación, mientras que los cromosomas eucariontes
Stahl demostraron de manera convincente que la replicación en E. coli
contienen muchos.
es semiconservadora.

REPLICACIÓN THETA Un tipo frecuente de replicación que se ob-

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
¿ Cuántas bandas de DNA se esperarían en el experimento de
Meselson y Stahl después de dos ciclos de replicación conservadora?
Modos de replicación
Después del trabajo de M eselson y Stahl, los investigadores con-
firmaron que otros organisn1os también recurren a la replicación se-
mj conservadora. No se halló ninguna evidencia de replicación
conservadora o ilispersiva. Sin en1bargo, la replicación semicon-
servadora puede tener lugar de varias maneras ilistintas, que difie-
ren sobre todo en la naturaleza del 1nolde de DNA, es decir, si es
lineal o circular.
serva en el DNA circular, como el hallado en E. coli, se denomi-
na replicación theta (fig. 12-4a) porque genera una estructura
que se asemeja a la legra griega theta (0). En esta y en todas las
fig uras posteriores de este capítulo, la cadena original (molde) de
DNA se muestra en color gris, y la cadena de DNA recién sinte-
tizada, en color rojo.
En la replicación theta, el DNA bicatenario comienza a desen-
rollarse en el origen de la replicación, lo que produce cadenas nu-
cleotídicas simples que sirven de moldes para la síntesis de DNA
nuevo. El desenrollamiento de la doble hélice genera un bucle,
denominado burbuja de replicación. El desenrollamiento puede
producirse en uno o ambos extremos de la burbuja, lo que la vuel-
ve cada vez más grande. La replicación del DNA en ambas cade-
nas molde y el desenrollamiento son simultáneos. El punto donde
las dos cadenas nucleotídicas simples se separan de la doble héli-
ce de DNA se denomina horquilla de replicación.

(a)

' Finalmente, se producen dos

moléculas de DNA circular.
Horqu ill a de
replicación
DNA recién
rigen de sintetizado
replicación Burbuja de
replicación

El DNA bicatenario se ... y produce moldes monoca- Las horquillas avanzan

esenrolla en el origen tenarios para la síntesis de alrededor del círcu lo.

--
e replicación ... nuevo DNA. Se forma una
burbuja de replicación, que
suele tener un origen de
Conclusión: los productos de la replicación
theta son dos moléculas de DNA circular.
replicación en cada extremo.

,.. .,,. .. i . · ' . r

(b) Horquilla iJ..~. ".._. -r,._., ~·~~.; '>J
t,~·,·-~ . - ., ._~ ~. .,
¡
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de replicación '
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Burbuja de ., ,
11·
replicación
1
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....
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. .,.•"''·~-~-
.,'-f • •
#

Figura 12-4. La replicación theta e s un tipo de replicación frecuente en E. coli y otros organismos que tienen DNA circular. (Parte b: Bernhard Hirt,
L' lnstitut Suisse de Recherche Expérimentale sur le Cancer).
330 CAP[TULO 12
Si hay dos horqui1las de replicación, una en cada ex tremo de
la burbuja de replicación, ambas avanzan hacia afuera en ambas
direcciones en un proceso conocido como replicación bidirec-
cional, que consiste en el desenrolla1niento y la replicación
sünultáneos del DNA hasta que las dos horquillas finalmente se
encuentran. Si hay una sola horq uilla de replicación, esta avan-
za alrededor de todo eJ cú-culo. Tanto Ja repli cación bidireccio-
nal como la unidireccional producen dos 1noléculas completas
de DNA circular, formadas por una cadena nucleotídica antigua
y una nueva.
En 1963, John Cairns aportó la primera evidencia visible de la
replicación theta al cultivar bacterias en presencia de isótopos
radiactivos. Después de la replicación, cada molécu la de DN.A
consistía en una cadena "caliente" (radiacti va) y una "fría" (no
radiactiva). Cairns aisló DNA de las bacterias después de la repli-
cación, lo colocó en una grilla de un microscopio electrónico, que
cubrió luego con emulsión fotográfica. La emulsión expuesta a la
radiactividad presente en la 1nuestra generó una foto de la 1nolécu-
la (deno1ninada autorradiografía), de modo similar a la exposición
a la luz de una película fotográfi ca. Como el DNA recién sinteti-
zado contenía nucleótidos radiactivos, Cairns pudo obtener una
microfotografía electrónica del proceso de replicación, análoga a
las mostradas en la figura 12-4b.
REPLICACIÓN POR CÍRCULOS RODANTES Otra forma de .replicación,
deno1ninada replicación por círculos rodantes (fig. 12-5), ti.ene
lugar en algunos virus y en el factor F (un pequeño círculo de
DNA extracromosórnico que controla el apareamiento, analizado
en el cap. 9) de E. coli. Esta forma de replicación se inicia me-
diante un corte en una de las cadenas nucleotídicas, que crea un
grupo 3'-0H y un grupo 5'-fosfato. Se añaden nuevos nucleóti-
dos al extremo 3' de la cadena cortada usan do como .m olde la
cadena interna (intacta). A medida que se agregan nuevos nucle-
ótidos al extremo 3', el extremo 5 ' de la cadena cortada se despla-
za respecto del molde de la 1nisma manera que se despliega un
hilo de un carretel. El extremo 3' crece alrededor del círculo, lo
que da origen al no1nbre de círculo rodante.
La replicación se inicia rLa síntesis de DNA comienza
con una rotura en una en el extremo 3' de la cadena
de las cadenas de rota; la cadena interna se utiliza
nucleótidos. como molde. Se desplaza el
extremo 5' de la cadena rota.
5'
Se puede repetir
Figura 12-5. La replicación por circulos rodantes tiene lugar en algu-
nos virus y en el factor F de E.coli.
La horqui ll a de repl icación puede continuar alrededor del cfrcu-
lo una serie de veces, lo que produce vruias copias ligadas de la
misma secuencia. Con cada vuelta ah·ededor del círculo, el extre-
mo 3' en crecüniento desplaza la cadena nucleotídica sintetizada
en la vuelta precedente. Por último, la molécula de DNA lineal se
escinde del cú·culo, lo que da origen a una molécula de DNA cir-
cular bicatena.rio y a un a 1nolécul a de DNA lineal monocatenaria.
La molécula lineal se torna circular antes o después de servir de
molde para la síntesis de una cadena complementaria.
REPLICACIÓN EUCARIONTE LINEAL Las moléculas de DNA circular
que presentan replicación tbeta o por círculos rodantes tienen un
solo origen de replicación. Dado eJ limitado tamaño de estas
moléculas de DNA, la repl icación que se inicia en un ori gen
puede atravesar todo el cromoson1a en una cantidad de tiempo
razonable. En cambio, los cromosomas lineales grandes de las
células eucariontes contienen mucho más DNA para que se repli-
que con rapidez a partir de un solo origen. La replicación euca-
rionte procede a una velocidad de 500 a 5000 nucleótidos por
minuto en cada horquilla de replicación (considerablemente más
lenta que la replicación bacteriana). Aun a 5000 nucleótidos por
minuto en cada horquilla, la síntesis de DNA a partir de un solo
origen requeriría 7 días para replicar un cromosoma humano típi-
co formado por l 00 1nillones de pares de bases de DNA. En rea-
lidad, la replicación de los cromosomas eucariontes se produce en
cuestión de minutos u horas, no de días. Esta velocidad es posible
porque la replicación se inicia en miles de orígenes.
Los replicones eucariontes típicos tienen de 20 000 a 300 000
pares de bases de longitud (cuadro 12-1). En cada origen de
replicación, el DNA se desenrolla y produce una burbuja de repli-
cación. La replicación tiene lugar en ambas cadenas, en cada
extremo de la burbuja de replicación, y las dos horquillas de repli-
cación se extienden hacia afuera. Finalmente, las horquillas de
replicación de los replicones adyacentes se encuentran, y los re-
plicones se fusionan para formar segmentos largos de DNA recién
sintetizado (fig. 12-6) . La replicación y la fusión de todos los
replicones dan 01igen a dos moléculas idénticas de DNA. El cua-
La escisión libera una fEl DNA lineal puede vol- Conclusión: los productos
molécu la de DNA lineal verse circular y servir de de la replicación por círculos
monocatenario y una molde para la síntesis de rodantes son múltiples
molécu la de DNA una cadena complementaria. moléculas de DNA circular.
circular bicatenario.
S'
S'
Escisión
...
el ciclo ..
 Cada cromosoma contiene
numerosos orígenes

Origen 1 Origen 2 Origen 3

Cuadro 12- 1 Número y longitud de los replicones

Número Longitud
de orígenes promedio del En cada origen, el DNA se desenrolla
y produce una burbuja de replicación j
Organismo de replicación replicón (pb)

Escherichia colí 1 4 600 000 7

(bacteria)

Saccharomyces 500 40 000

cerevisiae
La síntesis de DNA tiene lugar en ambas
(levadu ra) cadenas, en cada extremo de la burbuja,
a medida que las horquillas de replicación
Drosophila 3 500 40 000
avanzan bi;lcia_afV+ '
melanogaster
(mosca de la fruta)

Xenopis laevis (rana) 15 000 200 000 - ~

Mus muscu/us (ratón) 25 000 150 000

¡
--
Fuente: Datos de B. L. Lewin, Genes V (Oxford: Oxford University Press, 1994),
p. 536 .
- ~

clro 12-2 resume las características importantes de la replicación

theta, la replicación por círculos rodantes y la replicación euca-
1ionte lineal. ►
" L
• Finalmente, las horquillas de burbujas
adyacentes se encuentran, y los seg-
mentos de DNA se fusionan, ...

CONCEPTOS

La replicación theta, la replicación por círculos rodantes y la replica-

ción eucarionte lineal difieren respecto de la iniciación y la progresión
1
de la replicación, pero todas producen nuevas moléculas de DNA por
... lo que produce dos molé-
replicación sem iconservadora.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
DNA
recién sintetizado t
-n-
culas idénticas de DNA lineal.
f

'
¿ Qué tipo de replicación requiere un corte en la cadena nucleotídica \
para comenzar?
a. Replicación theta.
Conclusión: los productos de la replicación del DNA
b. Replicación por círculos rodantes. eucarionte son dos moléculas de DNA linea l.
c. Replicación eucarionte lineal.
d. Todas las anteriores. Figura 12-6. La replicación del DNA lineal se produce en cromo-
somas eucariontes.

Cuadro 12-2 Características de la replicación theta, por círculos rodantes y eucarionte lineal

Ruptura
Modelo Molde de la cadena Número Unidireccional
de replicación de DNA nucleotídica de replicones o bidireccional Productos

Theta Circu lar No 1 Unidireccional o Dos moléculas circulares

bidireccional

Por círculos Circu lar Sí 1 Unidireccional Una molécula circular y una molécu-
rodantes la lineal que puede volverse circular

Eucarionte lineal Lineal No Muchos Bidireccional Dos moléculas lineales

331
 (a) (b)
Fosfato Cadena nueva Cadena molde
5' 3' 3'
o o o OH OH
11 11 11
-o - P- 0 - P - 0 - P- o-
1 1 1
o o- O-

H ¿ p [ ~ase j
s\~ Hfl
21/"
=-s-e -si-n-te-ti~
za_D
_N_A_ n-ue_v_o _a~
H ~ _ _ ¿t H partir de desoxirribonucle-
3, OH ~ ósidos trifosfato (dNTP)

Azúcar desoxirribosa

·En la replicación, el ----i

grupo 3'-0H del último • Se forma una
nucleótido de la unión fosfodiéster
cadena ataca al grupo entre los dos
Figura 12-7. Se sintetiza 5'-fosfato del dNTP nucleótidos, ...
DNA nuevo a partir de entrante.
desoxirribonucleósidos OH
3'
trifosfato (dNTP). Esta
cadena recién sintetizada es
complementaria y antipara-
5'
-,
1
1
t --
lela respecto de la cadena OH ,
1 3
molde; las dos cadenas se
mantienen juntas por
Se escinden dos
medio de puentes de hidró- , OH
fosfatos. 3
genos (representados por
líneas de puntos rojos) Desoxirribonucleósido 5' 5'
entre las bases. trifosfato (dNTP)

Requerimientos de la replicación CONCEPTOS

Si bien el proceso de replicación incluye muchos componentes,
estos pueden combinarse en tres grupos principales:
l. Un molde de DNA monocatenario.
2. Materias primas (sustratos) que se ensamblarán en una nueva
cadena nucleotídica.
3. Enzimas y otras proteínas que "leen" el molde y ensamblan
los sustratos en una molécula de DNA.
Dado el carácter semiconservador de la replicación del DNA,
una molécula de DNA bicatenario se debe desenrollar para expo-
ner las bases que actúan con10 molde para el ensa1nblaje de nue-
vas cadenas polinucleotídicas, que serán complementarias y anti-
paralelas respecto de las cadenas molde. Las materias primas a
partir de las cuales se sintetizan las nuevas moléculas son desoxi-
nibonucleósidos trifosfato (dNTP), cada uno de los cuales consis-
te en un azúcar desoxinibosa y una base (un nucleósido) unido a
tres grupos fosfato (fig. 12-7a). En la síntesis de DNA, se añaden
nucleótidos al grupo 3' -OH de la cadena nucleotídica en creci-
miento (fig. 12-7b). El grupo 3'-0H del último nucleótido de la
cadena ataca el grupo 5' -fosfato del dNTP que ingresa. Se escin-
den dos grupos fosfato del dNTP entrante y se crea una unión fos-
fodiéster entre los dos nucleótidos.
La síntesis de DNA no se produce en forn1a espontánea, sino
que requiere de numerosas enzimas y proteínas que func ionan de
manera coordinada. Examinaremos este complejo conjunto de pro-
teínas y enzimas al considerar con mayor detalle el proceso de
replicación.
332
La síntesis de DNA requ iere un molde de DNA monocatenario, deso-
xirribonucleósidos trifosfato, una cadena nucleotídida en crecimiento
y un grupo de enzimas y proteínas.
Dirección de la replicación
En la síntesis de DNA, se unen nucl.eótidos nuevos, de a uno por
vez, al extremo 3' de la cadena recién sintetizada. Las DNA poli-
merasas, las enzimas que sintetizan DNA, pueden añadir nucleóti-
dos solo al extremo 3' de la cadena en crecimiento (no al extremo
5'); en consecuencia, las nuevas cadenas de DNA siempre se alar-
gan en la n1is1na dirección, de 5' a 3' (5' ➔ 3'). Como los dos 1nol-
des de DNA monocatenario son antiparaleJos y la elongación de la
cadena es siempre 5' ➔ 3 ', si la síntesis en un molde avanza, por
ejemplo, de derecha a izquierda, la síntesis en el otro molde debe
avanzar en dirección opuesta, de izquierda a derecha (fig. 12-8). A
medida que el DNA se desenrolla durante la replicación, la natu-
raleza antiparalela de las dos cadenas de DNA in1plica que un
molde es expuesto en dirección 5 ' ➔ 3', y que el otro 111olde lo es
en dirección 3' ➔ 5 '. Por consiguiente, ¿cómo puede haber sínte-
sis simultánea de ambas cadenas en la horquilla?
REPLICACIÓN CONTINUA y DISCONTINUA A medida que se desenro-
lla el DNA, la cadena molde expuesta en dirección 3 ' ➔ 5' (la
cadena inferior en las figs. 12-8 y 12-9) permite que la cadena
nueva se sintetice en forma continua, en dirección 5' ➔ 3'. Esta
cadena nueva, donde se produce una replicación continua, se
denomina cadena líder.
 Replicación y recombinación del DNA 333

1recc1on e íntesis

Dcomo las dos cadenas fÍ... y la síntesis de DNA Horquilla de replicación

~ olde son antiparalelas ... siempre es s· - 3', .. .

Dirección de la síntesis Desenrrollamiento

Figura 12-8. La síntesis de DNA se produce en direcciones
opuestas en las dos cadenas molde de DNA. La replicación del
DNA en una sola horquilla de replicación comienza cuando una expuesto
molécula de DNA bicatenario se desenrolla para proporcionar dos ' ... y de izquierda a dere- 3 ' ---+-5'
moldes monocatenarios. cha en la otra cadena.

La otra cadena molde es expuesta en dirección 5' ➔ 3' (la cade-

na superior en las figs. 12-8 y 12-9). Después de que se ha desen-
rollado un segmento corto del D NA, la síntesis debe proceder e n
sentido 5' ➔ 3', es decir, en dirección opuesta a la del desenro11a- En la cadena molde inferior, la síntesis de7
DNA avanza en forma continua en dirección
miento (fig. 12-9). Como solo es necesario desenrollar un segmen-
5' - 3', igual que el desenrollamiento.
to corto de DNA para iniciar la síntesis sobre esta cadena, la maqui-
naria de replicación pronto se queda sin molde . En ese momento, S'
3'
ya se ha desenrollado 1nás DNA, lo que proporciona nuevo molde
en el extremo 5' de la cadena nueva. La síntesis de DNA debe
~: 3'
S'

comenzar de nuevo en la horquilla de replicación y proceder en la

dirección opuesta al movimiento de la horquilla hasta que se
3•-·
s' • •
' •

DNA recién
Desenrolla--•
miento y replicación

encuentra con el segmento de DNA replicado antes. Este proceso sintetizado

se repite una y otra vez, de 1nanera que la síntesis de esta cadena En la cadena molde superior, la síntesis de
tiene lugar en salvas cortas, discontinuas. La cadena nueva produ- DNA comienza en la horquilla y avanza e
cida por replicación discontinua se denomina cadena retrasada. dirección opuesta al desenrollamiento, de
manera que pronto se queda sin molde.
FRAGMENTOS DE OKAZAKI Los segmentos cortos de DNA produ- S'
cidos por la replicación discontinua de la cadena retrasada se de- 3'

nominan fragmentos de Okazaki, por Reiji Okazaki, que fue 3'

5'
quien los descubrió. En las células bacterianas, cada fragmento de S'
3'
Okazaki varía de alrededor de 1000 a 2000 nucleótidos de longi-
tud; e n las células eucari ontes, tie ne n entre 100 y 200 nucleótidos La sfntesis de DNA vuelve a comenzar
de longitud. Los fragmentos de Okazaki de la cadena retrasada se en la horquilla de la cadena superior,
unen para formar una nueva 1nolécula de DNA continua. Obsér- y cada vez se aleja de la horquilla.
vese cómo se produce replicación continua en una cadena y dis- S'
3'
continua en la otra en la Animación 12.1.
3'
5'

CONCEPTOS , La síntesis de DNA en esta cadena es dis-

continua; los fragmentos cortos de DNA
Toda la síntesis de DNA es S' ➔ 3', lo que significa que los nucleótidos producidos por síntesis discontinua se de-
nuevos siempre se añaden al extremo 3' de la cadena nucleotídica en nominas fragmentos de Okazaki.
Cadena retrasada
crecimiento. En cada horquilla de replicación, la síntesis de la cadena Fragmentos de Okazaki Síntesis discontinua
líder procede de manera continua, mientras que la de la cadena retra- S'
3' ' deDNA
5•~~~~~~~3•
sada lo hace de manera discont inua.

S' ~ S'
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3 3'
Cadena líder
Síntesis continua
¿La replicación discontinua es un resultado de qué propiedad del DNA?
de DNA
a. Bases complementarias. c. Cadenas nucleotídicas antiparalelas.
b. Grupo fosfato con carga. d. Azúcar de cinco carbonos. Figura 12-9. La síntesis del DNA es continua en una cadena molde de
DNA y discontinua en la otra.
334 CAP[TULO 12

(a) Modelo theta

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS Cadena
Desenrollamiento líder El DNA se desenrolla en el
La dirección de la síntesis en diferentes modelos y replicación
de replicación

Relacionemos la dirección de la síntesis de DNA con los modos de rigen

replicación exam inados antes. En el modelo theta (fig. 12-10a), el
DNA se desenrolla en un lugar particular, el origen, y se forma una
Cadena "W ,, ~adena
retrasada
Origen
burbuja de replicación . Si la burbuja tiene dos horqu illas, una en cada
extremo, la síntesis se produce en forma simultánea en ambas (repli-
cación bidireccional). En cada horqu ill a, la síntesis sobre una de las Desenrollamiento
Cadena y replicación
cadenas molde procede en la misma dirección que el desenrollamien-
to; esta cadena recién replicada es la cadena líder con replicación con-
t inua. En la otra cadena molde, la síntesis procede en d irección opues-
ta al desenrollamiento; esta cadena recién si ntetizada es la cadena OLa°"síntesis de DNA de la cade- ] En cada horquilla, la síntesis de 7
na retrasada avanza de mane- DNA de la cadena líder avanza
retrasada con replicación discontinua . Concéntrese solo en una de las
ra discontin ua en dirección de manera continua en la misma
cadenas molde dentro de la burbuja. Obsérvese que la síntesis sobre , opuesta al desenrollamiento. J ~ rección del desenrollamiento.J
esta cadena molde es continua en una horquilla pero discontinua en
la otra . Esta diferencia se debe a que la síntesis de DNA tiene siempre
(b) Modelo de círculos rodantes
la misma dirección (5 ' ➔ 3 '), pero las dos horqu illas se mueven en
' La síntesis continua de DNA sel
direcciones opuestas. inicia en el extremo 3' de la
La replicación en el modelo de círculos rodantes (fig. 12-10b) es Cadena
Origen cadena nucleotfdica rota.
algo diferente, porque no hay burbuja de replicación. La replicación
comienza en el extremo 3' de la cadena nucleotídica cortada. Se pro-
duce replicación continua sobre el molde circular a medida que se
agregan nuevos nucleótidos al extremo 3' .
A medida que se desenrolla
La replicación de moléculas li neales de DNA, como las halladas en la molécula de DNA, hay
las célu las eucariontes, produce una serie de burbujas de replicación desplazamiento progresivo
(fig. 12- 10c). La síntesis de DNA en estas burbujas es la misma que en del extremo 5'.
la burbuja de replicación única del modelo theta; comienza en el cen-
tro de cada burbuja de replicación y continúa en las dos horquillas, una Desenrollamiento
a cada lado de la burbuja. En ambas horquillas, la síntesis de la cadena y replicación
líder avanza en la misma dirección del desenrollamiento, mientras que
(c) Replicación eucarionte lineal
la síntesis de la cadena retrasada lo hace en la dirección contraria al
desenrollam iento. ~•~~~~~~~~~==~~~:!.I En cada horquilla, la cadena líder se
sintetiza de manera continua en la
dirección del desenrollamiento.
Origen
12.3 La replicación bacteriana requiere ••
{
un gran número de enzimas y proteínas Cadena Cadena
s· líder retrasada 3'
La replicación tiene cuatro etapas: iniciación, desenrollamiento, 3' Cadena Cadena
5'
elongación y terminación. El siguiente análisis sobre el proceso Desenrolla- retrasada líder Desenrolla-
de replicación se centrará en sistemas bacterianos, donde la repli- miento miento
cación se ha estudiado de manera más exhaustiva y se conoce y replicación
Origen
y replicaci ón
mejor. Si bien muchos aspectos de la replicación en células euca-
1iontes son similares a los de las bacterianas, hay algunas diferen- f.lLa cadena retrasada se sintetiza
de manera discontinua en direc-
cias importantes. Más adelante en este capítulo, compararemos la ~ ón opuesta al desenrollam iento_:,
replicación bacteriana y eucarionte.
Figura 12-10. El proceso de replicación difiere en la replicación theta,
Iniciación la replicación por círculo rodante y la replicación lineal.

El cromosoma circular de E. coli tiene un solo origen de replica-

ción (oriC). La secuencia mínima requerida para que oriC fun-
cione consiste en 245 pb que contienen varios sitios críticos. Una
proteína iniciadora (conocida co1no DnaA en E. coli) se une a
oriC y causa el desenrollamiento de un segmento corto de DNA.
Este desenrollamiento permite que la helicasa y otras proteínas
de unión a cadena simple se unan a la cadena polinucleotídica
(fig. 12-11).
Desenrollamiento
Como la síntesis de DNA requiere un molde monocatenario y el
DNA bicatenario debe desenrollarse antes de que pueda tener
lugar la síntesis de DNA, la célula depende de varias proteínas y
enzimas para lograr el desenrollamiento.
 Replicación y recombinación del DNA 335

DNA HELICASA Una DNA helicasa .r ompe los puentes de hidróge-

no que existen entre las bases de las dos cadenas de nucleótidos
.l)·v; .I)~ -~
de una molécula de DNA. La belicasa no puede iniciar el desen-
• Proteínas rollamiento del DNA bicatenario; la proteína iniciadora separa
de in iciación primero las cadenas de DNA en el origen, lo que proporciona un
segmento corto de DNA n1onocatenario al que se une la helicasa.
La helicasa se une al 1nolde de la cadena retrasada en cada hor-
quilla de replicación y se mueve en dirección 5' ➔ 3' a lo largo de
esta cadena, lo que también desplaza la horquilla de replicación
(fig. 12-12).

PROTEÍNAS DE UNIÓN A CADENA SIMPLE Una vez que la helicasa

ha desenrollado el DNA, Jas proteínas de unión a cadena simple
(SS B, sing le-strand-binding proteins) se unen estrechamente al
,.IJ .lf ll DNA monocatenario expuesto (véase fig. 12-12). Estas proteí-
nas protegen las cadenas nucleotídicas sin1ples y evitan la for-
mación de estructuras secundarias, por ejemplo horquillas
(véase fig. 10-17), que interfieren con la replicación. A dife-
rencia de 1nuchas proteínas de unión a DNA, las SSB son in-
diferen tes a la secuencia de bases: se unirán a cualq uier DNA
... lo que causa el
desenrollamiento de un
monocatenario. Las proteínas de unión a cadena simple forman
segmento corto de DNA. tetrámeros (grupos de cuatro); cada tetrámero abarca de 35 a 65
nucleótidos.

DNA GIRASA Otra proteína esencial para el proceso de desenrolla-

mien to es la enzüna DNA girasa, una topoisomerasa. Como se
comentó en el capítulo 11 y en la introducción de este capítulo,
El desenrollamiento
perm ite que la helicasa y
las topoisomerasas controlan el superenrollamiento del DNA.
otras proteínas de unión a Hay dos tipos principales: las topoisomerasas de tipo I modifican
la cadena simple se unan el superenrollamiento al efectuar cortes monocatenarios en el
al DNA monocatenario. DNA, mientras que las topoisomerasas de tipo II provocan cortes
bicatenarios. La DNA girasa es una topoison1erasa de tipo 11. En
la replicación, reduce la tensión de torsión (torque) que se acumu-
la por delante de la horquilla de replicación como resultado del
desenrollamiento (véase fig. 12-12). Disminuye la tensión de tor-
sión efectuando un corte bicatenario en un segmento de la hélice
de DNA, pasando otro segmento de la hélice a través del coite y
volviendo a sellar, después, los extremos cortados del DNA. E sta
Figura 12- 11 . La replicación del DNA de E. coli comienza cuando las acción, que requiere ATP, elimina un giro del DNA y reduce el
proteínas de iniciación se unen a oriC, el origen de replicación. superenrollamien to.

La DNA helicasa se une al molde de la cadena retrasa- Las proteínas de unión La DNA girasa alivia
da en cada horquilla de replicación y se mueve en di- a la cadena simple la tensión por delan-
rección S'- 3' a lo largo de esta cadena, lo que estabilizan el DNA mo- te de la horquilla de
rompe los puentes de hidrógeno y desplaza la nocatenario expuesto.J replicación.

~
horquilla de replicación.

Origen

,..-...::::::>•, -► ~ _ ,
~ Desenrollamíento
DNA he licasa Proteínas de unión
a la cadena simple

Figura 12-12. La DNA helicasa

desenrolla el DNA uniéndose al
molde de la cadena retrasada en
cada horquilla de replicación y des-
plazándose en dirección S' ➔ 3'. Desenrollamiento Desenrol lamiento
336 CAP[TULO 12

Un grupo de antibióticos denominados 4-quinolonas destruye Elongación

las bacterias por unión a la DNA girasa e inhibición de su acción.
La inhibición de la DNA girasa determina la interrupción de la
síntesis de DNA y el crecimiento bacteriano. Un ejemplo de 4-
quinolona es el ácido nalidíxico, que fue introducido por prime-
ra vez en la década de 1960 y suele indicarse en el tratamiento de
infecciones urinarias. Muchas bacterias han adquirido resistencia
a las quinolomas mediante mutaciones del gen de DNA girasa.
CONCEPTOS
La replicación se inicia en un o rigen de replicación, donde una prote-
ína iniciadora se une y causa el desenrollamiento de un segmento
corto de DNA . La DNA helicasa rompe los puentes de hidrógeno en
una horquilla de replicación, y las proteínas de unión a cadena simple
estabilizan las cadenas separadas. La DNA girasa reduce la tensión de
torsión que se crea a medida que se desenrollan las dos cadenas
de la doble hélice de DNA.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
Ordene los siguientes componentes según su utilización en el curso
de la replicación: helicasa, proteína de unión a cadena simple, DNA
girasa, proteina iniciadora.
En la fase de elongación de la replicación, se usa DNA monoca-
tenario como molde para la síntesis de DNA. Este proceso requie-
re una serie de enzimas.
SiNTESIS DE CEBADORES Todas las DNA polimerasas requieren un
nucleótido con un grupo 3 '-OH al que puedan añadir un nuevo
nucleótido. Dado este requerimiento, las DNA polimerasas no
pueden iniciar la síntesis de DNA sobre un molde desnudo, sino
que requieren un cebador - un grupo 3' -OH preexistente- para
activarse. Entonces, ¿cómo co1nienza la síntesis de DNA?
Una enzima denominada primasa sintetiza segmentos cortos
(alrededor de 10-12 nucleótidos de longi tud) de nucleótidos de
RNA o cebadores, que proveen un grupo 3 '-OH al que la DNA
polimerasa puede unir nucleótidos de DNA. (Como la primasa es
una RNA polimerasa, no requiere un grupo 3' -OH preexistente
para iniciar la síntesis de una cadena nucleotídica). Inicialmente,
todas las moléculas de DNA tienen cebadores cortos de RNA
incluidos dentro de ellas; más tarde, estos cebadores son elimina-
dos y reemplazados por nucleótidos de DNA.
En la cadena líder, donde la síntesis de DNA es continua, se
requiere un cebador solamente en el extremo 5' de la cadena
recién sintetizada. En la cadena retrasada, donde la replicación es
discontinua, se debe generar un nuevo cebador al comienzo de
cada fragmento de Okazaki (fig. 12-13). La primasa fo1ma un
complejo con la helicasa en la horquilla de repli cación y se des-
plaza a lo largo del n1olde de la cadena retrasada. Es probable que
el complejo primasa-helicasa presente en el molde de la cadena

Girasa Helicasa Origen Pri masa

Desenrollamiento Desenrollamiento
------------
En la cadena líder, donde la replicación es
La primasa sintetiza segmentos cortos de nu-
continua, se requiere un cebador solamente
l
cleótidos de RNA, lo que aporta un grupo
3' -OH al que la DNA polimerasa puede añadir
nucleótidos de DNA.
Síntesis de DNA
en el extremo 5' de la cadena recién
intetizada.
ador para la cadena retrasada

;•d•~~de~ OH 1 /

OH
, tp-)
Í5esenrollamiento / -===::::iiiii Desenrollamiento
Cebador para la cadena retrasada Cadena líder
Cont inúa la En la cadena retrasada, donde la replicación es
sl ntesis de DNA discontinua, se debe generar un nuevo cebador al
- 1 comienzo de cada fragmento de Okazaki.
Cadena líd er + Cadena retrasa

e \
Cebadores l, -z:::::::::: Llo . 5-5 •
Ceba ores
1

.. fJ . I
Desen rol lam iento
"~ ---~ / -/ Desenrollamiento
Cadena retrasada Cadena líder

Figura 12-13. La primasa sintetiza segmentos cortos de nucleótidos de RNA y proporciona un

grupo 3'-0H al que la DNA polimerasa puede añadir nucleótidos de DNA.
 Replicación y recombinación del DNA 337

retrasada de Ja otra horqujJla de rep Ucación, en eJ extremo opues-
to de 1a burbuja de replicación, sintetice el único cebador de la
cadena líder. ~ TE RESOLVER EL PROBLEMA 30
CONCEPTOS
La primasa sintetiza un segmento corto de nucleótidos de RNA (ceba-
dores) que proporcionan un grupo 3'-0H para la unión de nucleóti-
dos de DNA, lo que permite iniciar la síntesis de DNA.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
¿ Dónde son sintetizados los cebadores en la cadena retrasada?
a. Solo en el extremo 5' de la cadena recién sintetizada.
b. Solo en el extremo 3' de la cadena recién sintetizada.
c. Al com ienzo de cada fragmento de Okazaki.
d. En múltiples lugares dentro de un fragmento de Okazaki.
SÍNTESIS DE DNA POR DNA POLIMERASAS Después del desenrolla-
miento del DNA y del agregado del cebador, las DNA polimerasas
alargan la nueva cadena polinucleotídica medi ante la catalización
de la poli merización del DNA. Las polimerasas mejor estudiadas
son las de E. coli, que tiene por lo menos cinco DNA polimerasas
diferentes. Dos de ellas, la DNA polimerasa I y la DNA polime-
rasa III, llevan a cabo la síntesis del DNA durante la replicación
(cuadro 12-3); las otras tres cumplen funciones especializadas en
la reparación del DNA.
La DNA polimerasa ID es una gran complejo multiproteico
que actúa como el encargado principal de la replicación. La DNA
polimerasa III sintetiza cadenas nucleotídicas agregando nuevos
nucleótidos al extremo 3' de una molécula de DNA en crecimien-
to. Esta enzima tiene dos actividades enzimáticas (véase cuadro
12-3). Su actividad de polimerasa 5 ' ➔ 3' le permite añadir nue-
vos nucleótidos en dirección 5' ➔ 3'. Su actividad de exonucleasa
le pe1mite eli1ninar nucleótidos en dirección 3' ➔ 5', lo que posi-
bilita la corrección de e1Tores. Si se inserta un nucleótido que
tiene una base incorrecta en la molécula de DNA creciente, la
DNA polimerasa III recurre a su actividad de exonucleasa 3' ➔ 5 '
para retroceder y elirninar el nucleótido incorrecto. Luego, reanu-
da su actividad de polünerasa 5' ➔ 3'. Juntas, estas dos funciones
permiten que la DNA polirnerasa III sintetice de manera eficien-
te y exacta nuevas moléculas de DNA. ·L a DNA poli1nerasa IIl
posee una alta capacidad de procesamiento (procesividad), lo que
significa que es capaz de añadir muchos nucleótidos a la cadena
creciente de DNA sin liberar el 1nolde: normalmente, se sujeta al
molde y continúa sintetizando DNA hasta que el molde ha sido
replicado por co1npleto . Uno de los polipéptidos que compone la
enzitna garantiza la alta procesividad de la DNA polimerasa ID.
Este polipéptido, denominado subunidad ~, sirve como pinza pa-
ra la enzima polimerasa: rodea el DNA y mantiene a la DNA po-
limerasa unida a la cadena molde durante la replicación. La DNA
polimerasa III agrega nucleótidos de DNA al cebador y sintetiza
el DNA tanto de la cadena líder co1no de la cadena retrasada.
La primera polimerasa de E. coli en ser descubierta, la DNA
polimerasa I, también tiene actividades de 5 ' ➔ 3' poli.merasa y
3' ➔ 5' exonucleasa (véase cuadro 12-3), lo que permite que la
enzima sintetice DNA y con·ija errores. Sin embargo, a diferencia
de la DNA polin1erasa III, la DNA polimerasa I tan1bién posee
actividad de exonucleasa 5 ' ➔ 3', que se utiliza para eliminar los
cebadores depositados por la primasa y reemplazarlos por nucle-
ótidos deDNA mediante la síntesis en dirección 5' ➔ 3'. La DNA
polimerasa I tiene menor procesividad que la DNA polimerasa
III. La eliminación y el reen1plazo de los cebadores parece ser
la principal función de la DNA polimerasa I. Después de que la
DNA polünerasa III ha iniciado la síntesis en el cebador y se ha
desplazado corriente abaj o (en dirección 3'), la DNA poli1nerasa
I elimina los nucleótidos de RNA del cebador y los reemplaza por
nucleótidos de DNA. Las DNA polimerasas II, IV y V actúan en
la reparación del DNA.
Pese a sus diferencias, todas las DNA polimerasas de E. coli
l. sintetizan cualquier secuencia especificada por la cadena molde;
2. sintetizan en dirección 5 ' ➔ 3' afiadiendo nucleótidos a un
grupo 3 '-OH;
3. usan dNTP para sintetizar DNA nuevo;
4. requieren un grupo 3'-0H para iniciar la síntesis;
5. catalizan la formación de una unión fosfodiéster por unión del
grupo 5'-fosfato del nucleótido entrante al grupo 3'-0H del nu-
cleótido precedente de la cadena creciente, proceso en el que
se escinden dos fosfatos;
6. producen cadenas recién sintetizadas que son complementa-
rias y antiparalelas respecto de las cadenas molde;
7. se asocian con una serie de otras proteínas. ►
L PROBLEMA 27

Cuadro 12-3 Características de las DNA polimerasas de E. coli

DNA Poi imerización Exonucleasa Exonucleasa

polimerasa S '➔ 3' 3' ➔ 5' S '➔ 3' Función

Sí Sí Sí Elimina y reemplaza a los cebadores

11 Sí Sí No Repara el DNA; reinicia la replicación después de que el

DNA dañado detiene la síntesis

111 Sí Sí No Elonga el DNA

IV Sí No No Repara el DNA

V Sí No No Repara el DNA; realiza síntesis translesional de DNA

 Cadena molde
(a)

La DNA polimerasa 111 ha añadido
nucleótidos de DNA al cebador.
(b)
Cebador de RNA
añadido por la primasa y reemplazando, uno por vez, los nucleótidos de RNA del ceba-
dor (fig. 12-14b).
Una vez que la polimerasa I ha reemplazado el últiino nucleó-
DNA polimerasa 1
tido del cebador de RNA por un nucleótido de DNA, persiste un
\ corte en el esqueleto axial de azúcar-fosfato de la nueva cadena
de DNA. El grupo 3' -OH del último nucleótido añadido por la

\ -%
J-_l 3'
DNA polünerasa I no se une al grupo 5' -fosfato del primer nu-
cleótido añadido por la DNA polünerasa III (fig. 12-14c). Este
corte es sellado por la enzima DNA ligasa, que cataliza la forma-
ción de una unión fosfodiéster sin añadir otro nucleótido a la
cadena (fig. 12-14d). El cuadro 12-4 resume algunas de las prin-
5'
cipales enzimas y proteú1as requeridas para la replicación del
DNA procarionte.

la DNA polimerasa I reemplaza

los nucleótidos de RNA del ce- ~ ~ :
bador por nucleótidos de DNA. OH CONCEPTOS
Nucleótido dNTP

(e)
l de RNA de DNA Una vez que se han eliminado y reemplazado los cebadores, la DNA
ligasa sella el corte en la unión azúcar-fosfato.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
l
. I ~ Muesca
¿ Qué enzima bacteriana elimina los cebadores?
[ Una vez reemplazado el último nucleótido
de RNA del cebador, queda una muesca en
a. Primasa c. DNA polimerasa 111
Lel esqueleto de azúcar fosfato dr cade~ b. DNA polimerasa 1 d. Ligasa

(d)

Cuadro 12-4 Componentes requeridos para la replicación

DNA ligasa en células bacterianas
La DNA ligasa sella esta muesca con un enlace fosfo- Componente Función
diéster entre el grupo 5' -P del nucléotido inicial aña-
dido por la DNA polimerasa 111 y el grupo 3'-0H del Proteína Se une al origen y separa las cadenas de DNA
nucleótido final añadido por la DNA polimerasa l.
iniciadora para inicia r la replicación

Figura 12- 14. La DNA ligasa sella el corte dejado por la
DNA polimerasa I en el esqueleto axial de azúcar-fosfato.
CONCEPTOS
Las DNA polimerasas sintetizan DNA en dirección 5' ➔ 3' añadiendo
nuevos nucleótidos al extremo 3' de una cadena nucleotídica en cre-
cimiento.
DNA helicasa Desenrolla el DNA en la horquilla de replicación
Proteínas de Se unen a DNA monocatenario y evitan la for-
unión a cadena mación de estructuras secundarias
simple
DNA gi rasa Se mueve por delante de la horqui lla de repli-
cación cortando y volviendo a sellar la doble
hélice de DNA para li berar la tensión torsional
(torque) que se acumula como resultado del
desenrollamiento en la horqui lla de replicación

DNA primasa Sintetiza un cebador de RNA corto a f in de

DNA LIGASA Después de que la DNA polimerasa une un nucleó- proporcionar un grupo 3'-0H para la unión de
tido de DNA al grupo 3' -OH del último nucleótido del cebador de nucleót idos de DNA
RNA, cada nuevo nucleótido de DNA provee el grupo 3' -OH
necesario para la adición del siguiente nucleótido de DNA. Este DNA Elonga una nueva cadena nucleotídica a partir
proceso continúa mientras se disponga de molde (fig. 12-14a). La polimerasa 111 del grupo 3' -OH provisto por el cebador
DNA polimerasa I actúa después de la polimerasa III y, mediante DNA Elimina a los cebadores de RNA y los reemplaza
su actividad de exonucleasa 5' ➔ 3' , elimina el cebador de RNA.
polimerasa 1 por nucleótidos de DNA
Después, emplea su actividad de polimerasa 5' ➔ 3' para reem-
plazar los nucleótidos de RNA por nucleótidos de DNA. La DNA DNA li gasa Une los fragmentos de Okazaki sellando los
polimerasa I une el primer nucleótido al grupo OH en el extremo cortes del esqueleto axial de azúcar-fosfato del
3' del fragmento de Okazaki precedente y, luego, continúa en DNA recién sintetizado
dirección 5 ' ➔ 3' a lo largo de la cadena nucleotídica eliminando
338
 Replicación y recombinación del DNA 339

ELONGACIÓN EN LA HORQUILLA DE REPLICACIÓN Ahora que se han nucleótido m al apareado no tiene la posición con·ecta en el sitio
presentado los principales componentes enzimáticos de la elonga- activo de la DNA poli1nerasa para aceptar el siguiente nucleótido.
ción - DNA polimerasa, helicasa, primasa y ligasa-, considere- Esta posición incorrecta obstaculiza la reacción de polilneriza-
mos cómo interactúan estos componentes en la horquilla de repli- ción, y la actividad de exonucleasa 3 ' ➔ 5' de la DNA polimera-
cación. Como la síntesis de ambas cadenas es simultánea, debe
haber dos unidades de DNA polin1erasa III presentes en la horqui-
lla de replicación, una para cada cadena. En un modelo del pro-
ceso de replicación, las dos unidades de DNA polimerasa IIl están
( Dos un idades de
DNA pol imerasa 111
Complejo
helicasa-primasa
conectadas (fig. 12-15); el m.o lde de la cadena retrasada forma un Cadena líder
bucle para qu edar en posición adecuada para la replicación 5' ➔
3'. De esta n1anera, el complejo de DNA polimerasa III puede lle-
Yl. ~· b. {J'
var a cabo la replicación 5 ' ➔ 3' simultáneamente en ambos mol-
des, aunqu e ellos corran en direcciones opuestas. Tras la síntesis
de alrededor de 1000 pb, la DNA polímerasa IIl Ubera el molde
de la cadena retrasada y forma un bucle nuevo (véase fig. 12-15).
La primasa sintetiza un nuevo cebador en la cadena retrasada, y
después la DNA polimerasa IIl sintetiza un nuevo fragmento de
Okazaki. Obsérvese cómo se produce la replicación en ambas
A cadenas de manera simultánea en la Animación 12.2.
Primer cebador
En resumen, cada horquilla de replicación activa requiere cinco
componentes básicos: La cadena retrasada forma un bucle para permitir la
síntesis 5'- 3' en ambas cadenas antiparalelas.

l. helicasa para desenrollar el DNA,

2. proteínas de unión a cadena simple para proteger las cadenas
nucleotídicas simples y evitar es tructuras secundarías, ./J' b. 'l. fJ.. b . .IJ· b' t,7-
Primer cebador
r .J,IJ._.4
3. topoisomerasa girasa para eliminar la tensión por delante de la
horquilla de replicación, / j ~b ..'l· ~4-rr-~·.1 /
4. primasa para sintetizar cebadores con un grupo 3' -OH al co- Seguné:lo •~ /
cebador \ Tercer cebador ,
mienzo de cada fragmento de DNA,
' " / c:¡a - __, ·
S. DNA polimerasa para sintetizar las cadenas nucleotídicas líder
y retrasada. IJ
•

Puede observarse cómo actúan j untos los diferentes componen- - 1 ~

A medida que la unidad de la DNA polimerasa III de la
tes del proceso de replicación en las Animaciones 12.3 y 12.4. cadena retrasada alcanza el extremo del fragmento de
Okasaki sintetizado antes con el primer cebador, ...

Terminación
En algunas 1noléculas de DNA, ]a replicación se termina sie1npre
que se encuentran dos horquillas de replicación. En otras, secuen- fJ' rf IJ' (J' h JJ~h' 1,7-
cias de terminación específicas (denominadas sitios Ter) bloque-
an la continuación de la replicación. Una proteína de terminación,
denominada Tus en E. coli, se une a estas secuencias y crea un
rercer s'
cebador f •
.IJ
•
.~7,
l Cuarto
cebador

complejo Tu s-Ter que bloquea el movimiento de la helicasa, lo

que obstruye la horquilla de replicación e impide la replicación
del DNA. Cada complejo Tus-Ter bloquea una horquilla de repli-
cación que se mu eve en una dirección, pero no en la otra.
Fidelidad de la replicación del DNA
En ténn inos generales, la tasa de e1Tores de replicación es infetior
a un error por mil millones de nucleótidos. ¿Cómo se logra esta
increíble exactitud?
Las DNA polimerasas son muy paiticulares para aparear los
nucleótidos con sus co1nple111entos de la cadena n1olde. Los erro-
res de selección de nucleótidos por la DNA polimerasa apai·ecen
solo alrededor de una vez cada l 00 000 nucleótidos. La mayoría
de los errores que sí surgen en la selección de nucleótidos se
resuelven mediante un segundo proceso denominado corrección
(proofreading). Cuando una DNA polimerasa inserta un nucleóti-
do incorrecto en la cadena en crecimiento, el grupo 3' -OH del
~g·f_ IJ 'l~w · .fí h ~
Primer cebador Segundo cebador
... la polimerasa debe liberar el molde y desplazarse a
una nueva posición más alejada a lo largo de este (en
el tercer cebador) para reanudar la síntesis. _J
Conclusión: en este modelo, el DNA debe formar
un bucle, de manera que ambas cadenas puedan
replicarse en forma simultánea.
Figura 12-15. En un modelo de replicación de DNA en f. coli, las dos
unidades de DNA polimerasa 111 están conectadas. El molde de la cade-
na retrasada fo rma un bucle, de manera que perm ite la replicación de las
dos cadenas antiparalelas de DNA. En la parte superior, se muestran los
componentes de la maquinaria de replicación en la horq uilla de replicación .
340 CAP[TULO 12
sa elimina e l nucleótido apareado en forma incorrecta y luego
inserta el nucleótido correcto. En conjunto, la corrección y la
selección de nucleótidos determinan una tasa de error de solo uno
cada 1O millones de nucleótidos.
Un tercer proceso, denominado reparación de los errores de
apareamiento (analizada con más detalle en el cap. 18), corrige
los errores detectados después de que finaliza la replicación .
Cualquier nucleótido apareado en forma incorrecta que persiste
después de la reparación produce una deformidad de la estructu-
ra secundaria del DNA; las enzimas reconocen la deformidad ,
escinden el nucleótido incorrectamente apareado y utilizan la
cadena nucleotídica original como m olde para reemplazar el
nucleótido erróneo. La re paración de los errores de aparea1niento
requiere que las enzin1as tengan la capacidad de distinguir entre
la cadena de DNA antigua y la nueva, porque deben tener alguna
manera de determinar cuál de las dos bases apareadas en forma
incon·ecta deben eliminar. En E. coli, se añaden grupos metilo
(-CH3) a secuencias nucleotídicas particulares, pero solo después
de la replicación. En consecuencia, inmediata1nente después de la
síntesis de DNA, solo la cadena de .D NA antigua está metilada.
Así, es posible di stinguirla de la cadena recién sintetizada, y la
reparación de los en·ores de apareamiento tiene lugar, preferen-
cialmente, en la cadena nucleotídica no 111etilada. Ningún proce-
so aislado podría alcanzar este nivel de exactitud; se requiere una
se1ie de procesos, cada uno de los c uales detecta los en·ores inad-
vertidos por los precedentes.
CONCEPTOS
La replicación es extremadamente exacta, con menos de un error por
mil millones de nucleótidos. El alto nivel de exactitud en la replicación
del DNA se logra por selección de nucleótidos, corrección y repara-
ción de los errores de apareamiento.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
¿Qué mecanismo requiere la capacidad de distinguir entre la cadena
recién sintetizada y la cadena molde de DNA?
a. Selección de nucleótidos.
b. Corrección del DNA.
c. Reparación de los errores de apareamiento.
d. Todos los anteriores.
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Reglas básicas de la replicación
La replicación bacteriana requ iere de una serie de enzimas (véase cua-
dro 12-4), proteínas y secuencias de DNA que actúan juntas para sin-
tetizar una nueva molécula de DNA. Estos componentes son impor-
tantes, pero no debemos permitir que los detalles del proceso nos
hagan olvidar los principios generales de la replicación.
1. La replicación siempre es semiconservadora.
2. La replicación com ienza en secuencias denominadas orígenes.
3. La síntesis de DNA se inicia por medio de segmentos cortos de
RNA denominados cebadores.
4 . La elongación de las cadenas de DNA siempre es en dirección
5' ➔ 3'.
5. El DNA nuevo se sintetiza a partir de dNTP; en la polimerización
del DNA, se escinden dos grupos fosfato de un dNTP y se añade
el nucléotido resultante al grupo 3' -OH de la cadena nucleotídica
en crecimiento.
6. La replicación es continua en la cadena líder y discontinua en la
cadena retrasada.
7 . Las nuevas cadenas nucleotídicas son complementarias y antipa-
ra lelas respecto de sus cadenas molde.
8. La replicación tiene lugar a velocidades muy altas y es sorpren-
dentemente exacta gracias a la selección precisa de nucleótidos,
la corrección y la reparación de los errores de apareamiento.
12.4 La replicación del DNA eucarionte
es similar a la replicación bacteriana,
pero difiere en varios aspectos
Si bien la replicación eucarionte se asemeja a la bacteriana en mu-
chos aspectos, la replicación en las células eucariontes plantea
varias dific ultades adicionales. Primero, el tamaño n1ucho 1nayor
de los genomas e ucruiontes exige que la replicación se inicie en
múltiples orígenes. Segundo, los cromosomas eucari.o ntes son
lineales, mientras que los cromosomas procariontes son circula-
res. Tercero, el molde de DNA se asocia con proteínas histonas en
forma de nucleosomas, y el ensa1nblaje de los nucleosomas debe
seguir de inmediato a la replicación del DNA.
Orígenes eucariontes
Los investigadores aislaron por primera vez los 01igenes de replica-
ción de los eucariontes en células de levadura al demostrar que cier-
tas secuencias de DNA confieren la capacidad de replicarse al ser
transferidas de un cromosoma de levadura a pequeños fragn1entos
circulares de DNA (plásmidos). Estas secuencias de replicación
autónoma (ARS, autonomously replicating sequences) posibili-
taban la replicación de cualquier DNA al que se unieran. Luego se
mostró que eran los orígenes de replicación de los cromosomas de
levadura. Los orígenes de replicación de diferentes organismos
eucariontes vru·fan n1ucho en su secuencia, aunque suelen contener
una serie de pares de bases A-T. U n complejo multiproteico, el
complej o de reconocimiento del origen (ORC, origen-recognition
complex), se une a los orígenes y desenrolla el DNA en esta región.
CONCEPTOS
El DNA eucarionte contiene muchos orígenes de replicación . En cada
origen, se une un complejo multiproteico de reconocimiento del ori-
gen para iniciar el desenrollamiento del DNA.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
En comparación con los procariontes, ¿cuáles son algunas de las dife-
rencias de la estructu ra del genoma de las células eucariontes que
inciden en el mecanismo de replicación?
 Replicación y recombinación del DNA 341

El permiso de replicación del DNA
Las células eucariontes utilizan 1niles de orígenes y, por consi-
guiente, pueden replicarse de manera oportuna. Sin embargo, el
uso de n1últiples orígenes crea un problema especial en el mo-
mento de la replicación: todo el genon1a debe replicarse con pre-
cisión una vez en cada ciclo celular, de 1nodo que ningún gen deja
de ser replicado y ningún gen se replica más de una vez. ¿ Cómo
garantiza una célula que la replicación se inicie en miles de orí-
genes solo una vez por ciclo celular?
La replicación precisa del DNA se logra por la separación del
inicio de la replicación en dos pasos distintos. En el prüner paso,
se autorizan los orígenes (se aprueba su replicación). Este paso
tiene lugar en etapas tempranas del ciclo celular, cuando un factor
permisivo de la replicación se une a un origen. En el segundo
paso, la maquinaiia de replicación inicia la replicación del origen
autorizado. La clave es que la maquinaria de replicación funciona
solo en orígenes autorizados. A medida que las horquillas de repli-
cación se alejan del origen, se elimina el factor permisivo, lo que
deja al 01igen en un estado no autorizado, en el que no puede vol-
ver a iniciar la replicación hasta que se renueve el permiso. Para
garantizar que la replicación se produzca solo una vez por ciclo
celular, el factor permisivo es activo solo después de que la célula
ha completado la mitosis y antes de que se inicie la replicación.
El factor permisivo eucarionte es un co111pleto deno1ninado
MCM (por 111inichron1osome maintenance), que contiene un a
DNA helicasa que desenrolla un segmento corto de DNA en el
inicio de la replicación. El MCM se debe unir al DNA para que
se inicie la replicación en un origen. Una vez comenzada la repli-
cación en un origen, una proteína denominada Geminina evita
que el MCM se una al DNA y reinicie la replicación en ese ori-
gen. Al final de la 1nitosis, se degrada la Geminina, lo que permi-
te que el MCM vuelva a unirse al DNA y vuelva a auto1izai· el ori-
gen. El MCM tan1bién funciona como la DNA helicasa durante el
proceso de replicación.
Desenrollamiento
Se aislaron diferentes helicasas que separan el DNA bicatenario de
las células eucariontes, así como proteínas de unión a cadena sim-
ple y topoisomerasas (que cumplen una función eq uivalente a la de
la DNA girasa de las células bacterianas). Se asume que estas enzi-
mas y proteínas intervienen en el desenrollamiento del DNA euca-
rionte de una manera muy similar a sus homólogas bacterianas.
DNA polimerasas eucariontes
Algunas diferencias significativas de los procesos de repli cación
en las bacterias y en los eucariontes consisten en el número y las
funciones de las DNA polimerasas. L as células eucariontes con-
tienen una se1ie de DNA polimerasas diferentes que actúan en la
replicación, la recon1binación y la reparación del DNA.
Tres DNA poliJnerasas llevan a cabo la n1ayor pa1te de la sfnte-
sis de DNA nuclear durante la replicación: la DNA polimerasa a,
la DNA polimerasa 8 y la DNA polimerasa e (cuadro 12-5). La
DNA polimerasa a presenta actividad de primasa e inicia la sín-

Cuadro 12-5 DNA polimerasas de células eucariontes

DNA Actividad de 5' ➔3 ' Actividad de 3' ➔ 5'

polimerasa polimerasa exonucleasa Función celular

a (alfa) Sí No Iniciación de la sfntesis de DNA nuclear y reparación del DNA; t iene

actividad de primasa
8(delta) Sí Si Síntesis de la cadena retrasada de DNA nuclear, reparación del DNA
y reparación translesional del DNA
t:(épsilon) Sí Sí Síntesis de la cadena retrasada
y(gamma) Sí Sí Replicación y reparación del DNA mitocondrial
~(zeta) SI No Síntesis translesional de DNA
77 (eta) Sí No Síntesis translesional de DNA
0(theta) Sí No Reparación del DNA
1(iota) Sí No Síntesis translesional de DNA
K(kappa) Sí No Síntesis translesional de DNA
,l(lambda) Sí No Reparación del DNA
p(mu) Sí No Reparación del DNA
a(sigma) Sí No Replicación del DNA nuclear (posiblemente), reparación del DNA y
cohesión de cromátidas hermanas
q,(phi) Sí No Síntesis translesional de DNA
Rev1 Sí No Reparación del DNA

Nota: las polimerasas enumeradas en el final del cuadro son las que pueden llevar a cabo la replicación.
342 CAP[TULO 12
tesis de DNA nuclear al sintetizar un cebador de RNA, seguido de
una cade na corta de nucleótidos de DNA. Después de que la poli-
merasa a, coloca de 30 a 40 nucleótidos, la DNA polimerasa 6
completa la replicación de la cadena retrasada. La DNA polime-
rasa 6, de estructura y función similares a las de la DNA poli-
merasa e, replica la cadena líder. Otras DNA polimerasas inter-
vienen en la reparación y la reco1nbinación o catalizan la replica-
ción del DNA de los orgánulos.
Algunas DNA polimerasas, como la DNA polimerasa 6 y la
DNA polimerasa e, son capaces de replicar DNA a alta velocidad
y con gran fidelidad (escasos errores), porque tienen sitios activos
que se adaptan de manera perfecta y exclusiva solo a los cuatro
nucleótidos normales del DNA: adenosina, guanosina, citidi11a y
timjdína monofosfatos. Como consecuencia de esta especificidad,
los moldes de DNA distorsionados y las bases anormales no se
alojan fácilmente en el sitio activo de la enzima. Cuando se detec-
tan estos errores en el molde de DNA, las DNA polimerasas de
alta fidelidad se atascan y no pueden sortear la lesión.
Otras DNA polimerasas tienen 1nenor fidelidad pero pueden
sortear distorsiones del molde de DNA. Por lo general, estas DNA
polimerasas translesionales tienen un sitio activo más abierto, y
pueden alojar y copiar moldes con bases anormales, estructuras
distorsionadas y lesiones voluminosas. Por consiguiente, estas
enzimas especializadas pueden sortear este tipo de errores p ero,
como sus sitios activos son 1nás abiertos y accesibles, tienden a
cometer más errores. En la replicación, suelen utilizarse enzimas
de alta fidelidad, alta velocidad, basta que encuentran un bloqueo
de la replicación. En este momento, toman el mando una o más
de las polimerasas translesionales, sortean el daño y continúan
replicando un segmento corto de DNA. Después, las pownerasas
translesionales se desprenden de la horquilla de replicación, y las
enzimas de alta fidelidad reanudan la replicación con alta veloci-
dad y eficacia. A menudo, las enzimas de reparación del DNA
corrigen errores producidos por las polimerasas translesionales,
aunque algunos de ellos pueden no ser detectados e inducir muta-
ciones.
Ensamblaje de los nucleosomas
El DNA eucarionte fo1ma complejos con proteínas histonas para
crear estructur as denominadas nucleosomas, que contribuyen a la
estabilidad y al empaquetamiento de la molécula de DNA (véase
fig. 11-4). Durante la replicación, la horquilla de replicación alte-
ra la estructura de la cron1atina, pero los nucleoson1as se reensa1n-
E
• w~~~~ llfli~$~~~ h~
:::i.
o~ ~~íl
~
Figura 12-16. Los nucleosomas se reensamblan con rapidez en el DNA recién sintetizado. Esta microfo-
tografía electrónica del DNA eucarionte en proceso de replicación muestra con claridad que el DNA recién repli-
cado ya está cubierto de nucleosomas (círculos oscuros). (Victoria Foe).
CONCEPTOS
En las células eucariontes, hay un gran número de DNA polimerasas.
Las DNA polimerasas a, 8 y E replican las cadenas líder y retrasada.
Otras DNA polimerasas se encargan de la reparación del DNA. Las
polimerasas translesionales especializadas se utilizan para sortear dis-
torsiones del molde de DNA que normalmente causan atascamiento
de las DNA polimerasas principales.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
Algunas de las DNA polimerasas eucariontes tienen una tendencia a
cometer errores en la replicación. ¿Por qué una célula utilizaría una
DNA polimerasa procl ive a errores en lugar de una más exacta?
blan con rapidez en las dos nuevas n1oléculas de DNA. Las mi-
crofotografías electrónicas de DNA eucari onte, como la de la
figura 12-16, muestran DNA recién replicado ya cubierto de nu-
cleosomas, lo que indica que estos se reensamblan rápidamente.
La creación de nuevos nucleosomas requiere tres pasos: 1) rotu-
ra de los nucleosomas originales de la molécula parental de DNA
por delante de la horquilla de replicación; 2) redistribución de las
hi stonas preexistentes entre las nuevas moléculas de DNA; y
3) adición de histonas recién sintetizadas para completar la for-
mación de los nuevos nucleosomas. Antes de la replicación, una
sola molécula de DNA se asocia con histonas. Después de la re-
plicación y el ensamblaje de los nucleosomas, dos moléculas de
DNA se asocian con histonas. ¿Per1nanecen juntas las histonas
originales de un nucleosoma, unidas a una de las nuevas molécu-
las de DNA, o se desensamblan y se 1nezclan con nuevas histonas
en ambas moléculas de DNA?
Para encarar esta cuestión, se aplicaron técnicas similares a las
empleadas por Meselson y Staltl para determinar el modo de re-
plicación del DNA. Se cultivaron células durante varias genera-
ciones en un 1nedio que contenía runinoácidos marcados con un
isótopo pesado. Las histonas incorporaron estos ami noácidos
pesados y se volvieron densas (fig. 12-17). Después, se transfirie-
ron las células a un medio de cultivo que contenía aminoácidos
marcados con un isótopo ligero. Las histonas ensambladas des-
pués de la transferencia poseían los nuevos aminoácidos ligeros y
eran menos densas.
~
~"'".:
..-.¼I
,
·-..~ :r:
, .
'
 Replicación y recombinación del DNA 343

D espués de la re plicación, se aislaron los octámeros de histo-

nas y se centrifugaron en un gradiente de densidad. Los resul -
Pregunta: ¿qué sucede con las histonas en la replicación del DNA eucarionte?
tados mostraron que, después de la replicación, los octám eros
formaban una banda continua entre alta densidad (que represen- Métodos Ó(ultive células durante varias ] Transfiera las células a un me- 1
taba los octámeros an tiguos) y baja densidad (que representaba generaciones en medio que dio que contenga aminoácidos
los nuevos octá meros) . Este resultado indica que los octán1eros contenga aminoácidos mar- marcados con un isótopo ligero.
recién ensamblados están fo rmados por una mezcla de histonas cados con un isótopo pesado.
antiguas y nuevas. Evidencia adicional indica que los nucleoso-
mas reconstituidos aparecen e n las nuevas moléculas de DNA
poco después de que este emerge de la maquinaria de r epli- Cambie
., de medio Replicación
cac1on .
El reensamblaj e de los nucleosomas durante la replicación se
ve facilitado por proteínas denomi nadas chaperonas de hi stonas, Aísle los Aísle los octámeros de histonas an- Aísle los
que se asocian con la e nzin1a helicasa que desenrolla e] .DNA. Las octám eros ~ tes y después de la replicación,... "---:::;oc;?"c·támeros
chap eronas de histonas aceptan histonas antiguas de la molécula
original de DNA y las depositan, j unto con histonas recié n sinte-
tizadas, en las dos nuevas moléculas de DNA. Evidencia actual
sugiere que el nucleoso1na original se descompone en dos díme-
ros H 2A-H2B (cada dímero consiste en una H2A y una H2B) y
un único tetrámero H3-.H4 (cada tetrámero consiste en dos histo-
Resultados - Los octámeros recién sintetiza-
dos son menos densos y, por
consiguiente, se localizarán en ~
nas H3 y dos histonas H4). Luego, el tetrámero H 3-H 4 es trans- zonas más altas del tubo.
ferido de manera aleato1ia a una de las nuevas moléculas de DNA ,...
y sirve de base para la adición de copias nuevas o antiguas de ~ =, Los octámeros antiguos son
Banda única; densos y se desplazarán al Banda ancha;
dímeros H 2A-H2B . Asimismo, los tetrámer os H 3-H4 y los díme- fondo del tubo.
octám eros octámeros con
ros H2A-H2B recién sintetizados se añaden a cada 1nolécula antiguos con una mezcla de
nueva de DNA para completar la formación de nuevos nucleoso- am inoácidos pesad os h ist onas antiguas
mas. Una proteína denominada factor de ensamblaje de cromati- y n uevas (a m inoácidos
na 1 (CAF-1) facilita el ensamblaje de nuevos nucleosomas. pesados y ligeros)
►
Conclusión: tras la rep licación d el DNA, los nuevos octám eros reensambla-
dos son u na mezcla aleatoria d e histonas antiguas y nuevas .

Figura 12-17. Procedimiento experimental para estudiar cómo se

CONCEPTOS disocian y reasocian los nucleosomas en el curso de la replicación.

Tras la replicación del DNA, los nuevos nucleosomas se reensamblan

con rapidez en las moléculas de DNA. En el curso de la replicación, los
nucleosomas se descomponen y se reensamblan a partir de una mez-
cla de histonas antiguas y nuevas. El reensamblaje de los nucleosomas ce en una cantidad lünitada de sitios fij os, a 1nenudo denomina-
durante la replicación es facilitado por chaperonas de histonas y fac-
dos fábricas de replicación. M icrofotografías tomadas a interva-
tores de ensamblaje de cromatina.
los regulares revelan que el DNA recién duplicado sale de estos
sitios particulares. Se han obtenido resultados silni lares en célu-
las bacterianas.

La síntesis de DNA y el ciclo

Lugar de la replicación dentro
del núcleo
Las DNA polimer asas que llevan a cabo la replicación suelen re-
presentarse n1ovié ndose a lo largo del molde de DNA, de manera
similar a una locomotora que viaja por una vía de tren. Evidencia
reciente sugiere que este concepto es incorrecto. U na interpreta-
ción más precisa es que la polimerasa está fija en el lugar y el
molde de D NA es el que pasa a través de ella, y las moléculas de
DNA recién sintetizado emergen por el otro extremo
Las técnicas de 1nicroscopia de fluorescencia, que pueden reve-
lar sitios activos de síntesis de DNA, muestran que la 1nayor parte
de la replicación en el núcleo de una célula eucarionte se produ-
celular
En las bacterias, que se dividen rápidamente, la replicación del
D NA es continua. En cambio, en las células eucariontes, la repli-
cación está coordinada con el ciclo celular. El pasaje a través del
ciclo celul ar, jncl uido el comienzo de la replicación, es controla-
do por puntos de control del ciclo celular. El punto de control
importante G 1/S (véase cap. 2) mantiene el ciclo celu lar e n G l
hasta que el DNA está preparado para ser replicado . Una vez
pasado el punto de control Gl/S, la célula ingresa en la fase S, y
se replica el DNA. Luego, el sistema de pern1iso de replicación
garantiza que el DNA no vuelva a replicarse hasta después de que
la célula haya atravesado la mitosis.
344 CAP[TULO 12

Replicación en los extremos (a) DNA circular

de los cromosomas
La replicación alrededor del cír-
culo proporciona un grupo 3'-0H
Una diferencia fundamental entre la replicación eucarionte y la frente al cebador; cuando se
replicación bacteriana se debe a que los cromosomas eucariontes reemplaza el cebador, se pueden
son lineales y, por lo tanto, tienen extremos. Como ya se 1nencio- añadir nucleótidos al grupo 3'-0H
nó, al principio de la replicación los cebadores de RNA, sintetiza-
dos por la primasa, aportan el grupo 3' -OH necesario para la
replicación por DNA polimerasas. La solución es transitoria por-
que, con el tiempo, los cebadores deben ser eliminados y ree111- (b) DNA lineal
plazados por nucleótidos de DNA. En una molécula de DNA cir- Telómeros En el DNA lineal con múltiples orígenes de
/
cu lar, la elongación alrededor del círculo proporciona finalrnente replicación, la elongación del DNA en replí-

3
un grupo 3'-OHjusto frente aJ cebador (fig.12-18a). Una vez eli- cones adyacentes proporciona el grupo
minado el cebador, los nucleótidos de DNA de reemplazo pueden 3'-0H para el reemplazo de cada cebador.
agregarse a este grupo 3'-OH. Cadena retrasada Origen Cebador
\
~ ,,,,.
EL PROBLEMA DE LA REPLICACIÓN DE LOS EXTREMOS En cromoso- S'
3'
mas lineales, la elongación del DNA en replicones adyacentes
también proporciona un grupo 3' -OH que precede a cada cebador
(fig. 12-18b). Sin embargo, en el extremo de un cromosoma line-
al, no hay un segmento adyacente de DNA replicado que provea Desenrollamiento
este grupo 3' -OH crucial. U na vez eliminado el cebador en el Los cebadores en los extremos del cromosoma
extremo del cromosoma, este no puede ser reen1plazado por nu- no pueden ser reemplazados, porque no hay
cJeótidos de DNA y provoca un hiato en el extremo del cro1no- ningún 3'-0H adyacente al que puedan unirse
soma, lo que sugiere que el cromoso1na se acortará en forma nucleótidos de DNA.
progresiva con cada ciclo de replicación. El acortamjento del cro- S'
3'
mosoma implicaría que, cuando un organismo se reproduce,
transmitiría cromosomas más cortos que los heredados. Los cro- 5'
mosomas se tornarían 1nás cortos con cada nueva generación y, 3' c::ic===========
por último, se desestabilizarían. Esta situación se ha denominado
el problen1a de replicación de los extremos. De hecho, se produ-
ce acortamiento de los cromosomas en muchas célul as somáticas, Cuando es eliminado el
pero en los organismos unicelulares, las células germinales y las cebador en el extremo de un
células emb1ionarias iniciales, los cromosomas no se acortan ni se cromosoma, .. .
autodestruyen. Entonces, ¿cómo se replican los extremos de los ,
s,
cromosomas lineales? 3

• ... no hay ningún grupo 3' -OH al que puedan Hiato dejado
TELÓMEROS Y TELOMERASA Los extremos de los cromosomas (los
añadirse nucleótidos de DNA, lo que deja un por la
telómeros) presentan varias características singulares, una de las eliminación
cuales es la presencia de numerosas copias de una secuencia corta hiato.
del cebador
repetida. En el protozoo Tetrahymenea (donde se descubrieron
por primera vez las secuencias repetidas), esta repetición telomé- Conclusión: en ausencia de mecanismos especiales,
1ica es TTGGGG (véase cuadro 11-2), y esta cadena rica en G la replicación del DNA dejaría hiatos debido a la
eliminación de cebadores en los extremos de los
suele sobresalir de la cadena rica en C (fig. 12-19a; véase también
cromosomas.
la sección sobre Estructura de los telómeros en el cap. 11):
Figura 12-18. La síntesis de DNA en los extremos de los cromosomas
hacia el ~ 5' -TTGGGGTTGGGG-3' ➔ extremo del
circulares y lineales debe ser diferente.
centró mero 3' -AACCCC-5 ' cromoso1na

El extremo monocatenario sobresaliente del telómero, conoci-

do como saliente G, puede ser extendido por la telomerasa, una
enzjma con un componente proteico y un componente de RNA
(conocida también como ribonucleoproteína). La parte RNA de la
enzima contiene de 15 a 22 nucleótidos que son complen1entarios
de la secuencia de la cadena rica en G. Esta secuencia se aparea
con el extremo 3' sobresaliente del DNA (fig. 12-19b) y propor-
ciona un molde para la síntesis de copias adicionales de DNA de
las repeticiones. Los nucleótidos de DNA se añaden al extremo 3'
de la cadena de a uno por vez (fig. 12-19c) y, después de que se
han agregado vaiios nucleótidos, el molde de RNA se desplaza
por el DNA y se añaden más nucleótidos al extremo 3' (fig. 12-
19d). Por lo general, se agregan de 14 a 16 nucleótidos al extre-
mo 3 ' de la cadena rica en G.
De esta manera, la telo1nerasa puede extender el extremo 3' del
cromosoma sin utilizar un molde de DNA complementario (fig.
12-19e). No se sabe con certeza cómo se sintetiza la cadena rica
en C (fig. 12-19t). Se puede sintetizar mediante replicación con-
vencional, con síntesis de un cebador de RNA por la DNA poli-
 Replicación y recombinación del DNA 345

El telómero tiene un extremo sobresalien- merasa a en el extremo 5' del molde extendido (rico en G). La eli-
te con una secuencia repetida rica en G. minación de este cebador vuelve a dejar un hiato en el extremo 5'
(a) ~ del cromosoma, pero este hiato carece de importancia, porque el
,
iTTGGGGTTGGGG
, : extremo del cromosoma es extendido en cada replicación por la
••
telo1nerasa; por lo tanto, el cromosoma no se acorta.

(b) ! Telomerasa
\
Molde
de RNA
La telon1erasa está presente en organisn1os unicelulares, células
ge11ninales, en las primeras cél ulas embrionarias y en ciertas
células somáticas prohferativas (como las células de la médula
ósea y las que tapizan el intestino), todas las cuales deben presen-
tar división celular continua. La mayoría de las células somáticas
tienen actividad de telomerasa escasa o nula, y los cromosomas
de estas células se acortan de manera progresiva con cada división
La parte de RNA de la telomerasa es complementaria de
la cadena rica en G y se aparea con ella, lo que proporcio-
celular. Estas cél ulas son capaces de experi mentar solo una canti-
l
na un molde para la síntesis de copias de las repeticiones. dad limitada de divisiones; cuando los telómeros se han acortado

(c)
-¡- DNA nuevo
más allá de un punto crítico, el cromosoma se vuelve inestable,
tiene tendencia a presentar reordenamientos y se degrada. Estos
eventos llevan a la muerte de la célula.
TTGGGGTTGGGGTTGGGG 3'
AACCCC"t ACCCÍ\ACCC
3' 5'
CONCEPTOS
Se añaden nucleótidos al extre-
Los extremos de los cromosomas eucariontes se replican por med io de
mo 3' de la cadena rica en G.
una enzima compuesta por RNA-proteína denominada telomerasa .
Esta enzima añade nucleótidos extra a la cadena de DNA rica en G del
(d)
telómero.
TTGGGGTTGGGGTTGGGG
, 3'
¡ '

3' ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 10

Después de haber añadido varios nucleótidos, ¿ Cuál sería el resultado si la telomerasa de un individuo estuviera
el molde de RNA se mueve a lo largo del DNA. mutada y no fuera funcional?
a. No se produciría la replicación del DNA.
(e) b. La enzima DNA polimerasa se atascaría en el telómero .
TTGGGGTTGGGGTTGGGGTTGGGG 3' c. Los cromosomas se acortarían con cada nueva generación.
' ¡ 5'
3' S' d. No podrían eli minarse los cebadores de RNA.

Se añaden más nucleótidos.

TELOMERASA, ENVEJECIMIENTO y ENFERMEDAD El acortamiento de

TTGGGGTTGGG GTTGGGGTTGGGG 3' los telómeros puede contribuir al proceso de envejecimiento. Los
- ----- ' ' 5'
telómeros de ratones genomanipulados que carecen de un gen fun-
cional de telomerasa (y, por consiguiente, no expresan telomerasa
en las células somáticas ni germinales) presentan acortanuento
3• progresivo en las sucesivas generaciones. Después de vari as gene-
_A_ raciones, estos ratones 1nuestran algunos signos de envejecimien-
[ se elimina la telomerasa7 to prematuro, como encanecimiento, caída del pelo y retraso en la
cicatrización de heridas. Mediante ingeniería genética, también es
(f) posible crear células somáticas que expresan telomerasa. En estas
3' células, los telómeros no se acortan, se inhi be el envejecimiento
AACC CCAACCCCAACCCC •
celular y las célul as se dividen de manera indefinida.
Parte de la evidencia más sóli da respecto de que la longitud de
Se produce la síntesis en la cadena complemen-
taria, lo que rellena el hiato producido por la eli- los telómeros se relaciona con el envejecimiento proviene de estu-
minación del cebador de RNA en el extremo. dios de telómeros en aves. En 2012, científicos del Reino Unido
midieron la longitud de los telómeros de 99 pinzones cebra en
Conclusión: la telomerasa extiende el DNA y llena el
hiato producido por la eliminación del cebador de RNA.
l diversas etapas de su vida. Los científicos hallaron una firme corre-
lación entre la longitud de los telómeros y la longevidad: los paja-
ros con telómeros más largos vivían más que aquellos con telóme-
Figura 12- 19. La enzima telomerasa es responsable de la ros más cortos. El factor predictivo más importante de expectativa
replicación de los extremos del cromosoma . de vida co1respondió a la longitud de los telómeros medida en eta-
346 CAP[TULO 12

Se alinean los cromosomas homólo-
gos y se producen cortes monaca-
l ~:,narios en la misma posición de
l.'.:..mbas moléculas de DNA.
Un extremo libre de
cada cadena cortada
1 migra a la otra molé-
~ la de DNA.
O cada cadena invasora se une al extremo
cortado de la otra molécula de DNA, lo que
crea una unión de Holliday y comienza a
desplazar a la cadena complementaria original.
A B

><
A B A B

► Unión de Holliday

a b a b ti b

pas temprana de la vida, a los 25 días, lo que equivale aproxin1a-
da1nente a la adolescencia humana. Si bien estas observaciones
sugieren que la longitud de los telómeros se asocia con el envejeci-
n1iento en algunos animales, aún no se conoce con certeza el papel
preciso de los telómeros en el envejecimiento humano.
Algunas enfermedades se asocian con anonnalidades de la re-
plicación de los telómeros. Las personas con síndrome de Werner,
una enfermedad autosómica recesiva, muestran signos de enveje-
cimiento pren1aturo que coinienza en la adolescencia o las prime-
ras etapas de la adultez y se manifiesta por piel arrugada, encane-
cimiento, calvicie, cataratas y atrofia muscular. A menudo, estos
pacientes presentan cáncer, osteoporosis, enfermedades cardíacas
y arteriales, y otras patologías asociadas típicamente con el enve-
jecimiento. El gen causal, WRN, fue 1napeado en el cromosoma
8 y, en condiciones normales, codifica una enzima helicasa Recq.
Esta enzima es necesaria para la replicación eficiente de los teló-
meros. En personas con síndrome de Werner, esta helicasa es
defectuosa y, en consecuencia, los telómeros se acortan en forma
prematura.
Otra enfer1nedad asociada con 1nantenimiento anormal de los
teló1neros es la disqueratosis congénita, que induce una falla pro-
gresiva de la 1nédula ósea, con producción insuficiente de nuevas
células sanguíneas. Las personas con un a forma de la enfermedad
ligada al cromosoma X tienen una mutación del gen que codifica
la disquerina, una proteína que suele ayudar a procesar el compo-
nente RNA de la telomerasa. Por lo general, las personas con esta
enfermedad heredan telómeros cortos de un progenitor que pre-
senta la 1nutación y que no puede mantener la longitud de los teló-
meros en sus células germinales debido a una disquerina defec-
tuosa. En las familias portadoras de esta mutación, la longitud de
los telómeros se acorta con cada generación sucesiva, lo que indu-
ce anticipación, un aumento progresivo de la gravedad de la
enfermedad a lo largo de las generaciones (véase cap. 5).
Asimismo, la telomerasa parece desempeñar un papel en el
cáncer. Las células cancerosas tienen la capacidad de dividirse de
manera indefinida, y la enzima telomerasa se expresa en el 90%
de los cánceres. Cierta evidencia reciente indica que la telomera-
sa puede estimular la proliferación celular independientemente
de su efecto sobre la longitud de los telórneros, y en consecuen-
cia, no se ha esclarecido el mecanismo por el que la telo1nerasa
contribuye al cáncer. Con10 se comentará en e l capítulo 23, el
cáncer es un proceso complejo, de múltiples pasos, que suele
requerir mutaciones de por lo menos varios genes. La activación
de la telomerasa sola no induce crecimiento canceroso en la
mayoría de las células, pero sí parece ser necesaria, junto con
otras 1nutaciones, para la aparición de esta patología. Algunos
fármacos oncológicos experi mentales actúan inhibiendo la
acción de la telomerasa.
Una de las dificultades para estudiar el efecto del acortamiento
de los telómeros sobre el proceso de envejecimiento es que la
expresión de telomerasa en células somáticas también pron1ueve
cáncer, que puede acortar la expectativa de vida de una persona.
Para eludir este problema, Antonia Tomas-Loba y cols. crearon
ratones genomanipulados que expresaban teJomerasa y eras por-
tadores de genes que los tornaban resistentes al cáncer. Estos rato-
nes tenían telómeros más largos, vivían más y mostraban menos
cambios relacionados con la edad, como alteraciones de la piel,
disminución de la coordinación ne uro muscular y enfermedades
degenerativas. Estos resultados avalan la idea de que el acorta-
1niento de los teló1neros contribuye al envejecinriento . ._•-===-
RESOLVER EL PROBLEMA 35
Replicación en archaea
El proceso de replicación en archaea tiene una serie de caracterís-
ticas en común con la replicación en células eucariontes; .m uchas
de las proteínas que intervienen son más similares a las de las cé-
lulas eucariontes que a las de las eubacterias. Al igual que las
eubacterias, algunas archaea tienen un solo origen de replicación,
pero la archaea Sulfolobus so{fataricus tiene dos, similar a los
múltiples 01igenes observados en los genomas eucaríontes. Los
orígenes de replicación de las archaea no contienen las secuencias
típicas reconocidas por las proteínas iniciadoras bacterianas, sino
que presentan secuencias similares a las halladas en los orígenes
eucariontes. Asimismo, las proteínas iniciadoras de las archaea se
asemejan más a las de los eucariontes que a las de las eubacterias.
Estas similitudes de la replicación entre células de archaea y
eucariontes refuerzan la conclusión de que las archaea guardan
una relación más estrecha con las células eucariontes que con las
eubacterias procariontes.
12.5 La recombinación se produce mediante
la rotura, la alineación y la reparación
de las cadenas de DNA
La recombinación es el intercambio de información genética
entre moléculas de DNA; cuando el intercambio se produce entre
moléculas de DNA homólogas, se denomina recombinación
homóloga. Este proceso tiene lugar en el entrecruzamiento,
durante el cual se intercan1bian regiones homólogas de los cro1no-
somas (véase fig. 7-5) y los alelos se mezclan en nuevas combi-
naciones. La recombinación es un proceso genético de suma
importancia porque aumenta la variación genética. Las tasas de
recombinación aportan infonnación importante acerca de las rela-
ciones de ligamiento entre los genes, lo que se utiliza para crear
mapas genéticos (véanse figs. 7-13 y 7-14). La recombinación
también es esencial para algunos tipos de reparación del DNA
(co1no se co1nentará en el cap. 18).
La recombinación homóloga es un proceso notable: una cadena
nucleotídica de un cron1osoma se alinea de manera precisa con
una cadena nucleotídica del cromosoma homólogo, aparecen cor-
 Replicación y recombinación del DNA 347

• La migración de la rama se produce
A
cuando las dos cadenas nucleotídi-
cas intercambian posiciones, lo quej
..
Esta v¡sta de la estructura , La rotación de la mitad
muestra los extremos de los dos inferior de la estructura ...
dúplex interconectados que se

A
l
_ crea las dos moléculas dúplex_
8
_ separan uno de otro.

a
----•>< b
Heterodúplex de DNA

a
Intermediario de Holliday A ... produce esta
estructura.

tes en regiones correspondientes de diferentes moléculas de Plano

DNA, partes de las moléculas cambian de lugar con precisión y horizontal
después se unen los fragmentos de manera correcta. En esta serie
complicada de eventos, no se pierde ni se gana información gené- Escisión en el Escisión en ~
plano horizontal. .. plano vertical. ..
tica. Si bien todavía no se conoce bien el mecanismo molecular Plano _..J

preciso de la recombinación homóloga, es probable que el inter- vertical

cambio se produzca por aparea1niento de bases complemenL:'lrias. a

Una molécula de DNA monocatenario de un cro1nosoma se apa-

rea con una molécula de DNA monocatenario de otro para formar
un heterodúplex de DNA. Escisión Escisión
En la meiosis, la recombinación homóloga (entrecruzamiento)
podría tener lugar, en teoría, antes o después de la síntesis de .. . y la reasocia- ... y la reasocia-
A Í A
DNA o durante esta. Evidencia citológica, bioquímica y genética ción de las cade- ción de las cade-
indi ca que se produce en la profase I de la meiosis, mientras que nas nucleotídicas_,J
... nas nucleotídicas ..
la replicación del DNA tiene lugar antes, en la interfase. Por lo
tanto, el entrecruzamiento debe implicar la rotura y la reasocia-
ción de las cromátidas cuando los cron1osomas homólogos se en-
cuentran en el estadio de cuatro cadenas (véase fig. 7-5). Esta sec-
ción explora algunas teorías sobre el 1necanismo del proceso de
recombinación.

Modelos de recombinación a

La recombinación homóloga puede producirse a través de varias

Recombinantes Recombinantes
vías diferentes. Una vía se inicia con la rotura monocatenaria en sin entrecruzamiento con entrecruzamiento
cada un a de las dos moléculas de DNA e incluye la formación
de una estructura especial denominad a unión de Holliday (fig.
12-20). En este modelo, las moléculas de DNA bicatenario de los
r nr
dos cromoso1nas homólogos se alinean con precisión. Una rotura
monocatenaria en una de las moléculas de DNA proporciona un
G ----------
1 ... producen recombinantes sin
Ju- - - - - - - - - -~
j ... producen recombinantes con
extremo libre que invade y se une al extremo libre de la otra 1nolé-
entrecruzamiento compuestos po• entrecruzamiento compuestos po
cula de DNA. La invasión y la unión de las cadenas se producen
en ambas moléculas de DNA, lo que crea dos heterodúplex de
_________ .
dos moléculas de heterodúplex. _, .__
..___ _________
dos moléculas de heterodúplex. __,

DNA, formado cada uno por una cadena original más una cadena
nueva de la otra molécula de DNA. El punto en el que las cade-
nas nucleotídicas pasan de una molécula de DNA a la otra es la
unión de Holliday. La unión se desplaza a lo largo de las molécu-
las en un proceso denominado migración de la rama. El interca1n-
bio de cadenas nucleotídicas y la migración de la rama producen
una estructura denominada intermediario de Holliday, que puede
separarse de una de dos maneras. La escisión en el plano ho-
' Conclusión: el modelo de Hollidáy predice la presenéia de DNA
recombinante sin entrecruzamiento o con él, lo que depende J
de si la escisión es en el plano horizontal o en el vertical.
Figura 12-20. Modelo de Holliday de recombinación homóloga. En
este modelo, la recombinación tiene lugar a través de un corte monoca-
tenario en cada dúplex de DNA, desplazam iento de la cadena, migración
de la rama y resolución de una sola unión de Holliday.
348 CAP[TULO 12
1izontal, seguida de reasociación de las cadenas, produce recom-
binantes sin entrecruzamiento, en los que los genes de cualquiera
de los extremos de las moléculas son idénticos a los presentes ori-
ginalmente (gen A con gen By gen a con gen b). La escisión en
el plano vertical, seguida de reasociación, produce recombinantes
con entrecruza1niento, en los que los genes de cualquiera de los
extre1nos de las molécuJas son diferentes de los originales (gen A
con gen b y gen a con gen B)
Otra vía de recombinación se inicia mediante roturas bicatena-
1ias en una de las dos moléculas de DNA alineadas (fig. 12-21).
En este modelo, la eliminación de algunos nucleótidos en los
extremos de las cadenas cortadas -seguida de invasión, desplaza-
miento y replicación de la cadena- produce dos 1noléculas hete-
rodúplex de DNA conectadas por dos unjones de Holliday. Las
moléculas interconectadas producidas en el modelo de rotura
bicatenaria pueden separarse por escisión adicional y reunión de
las cadenas nucleotídicas de la rnis1na manera que se separa el
intern1ediario de Holliday en el modelo de rotura monocatenaria.
Que se for1nen .moléculas con entrecruzarniento o sin entrecruza-
mi ento depende de si la escisión se produce en el plano vertical o
en el horizontaJ. Obsérvese en la Animación 12.5 cómo los mode-
los de Holliday y de rotura bicatenaria inducen recombinación.
Originalmente, la evidencia sobre el modelo de rotura bicatena-
lia provino de los resultados de cruzamientos genéticos en la leva-
dura, que no podían ser explicados por el modelo de Holliday.
Observaciones ulteriores mostraron que, en la levadura, aparecen
roturas bicatenarias en la profase I, cuando tiene lugar el entrecru-
zamiento, y que las cepas mutantes que son incapaces de formar
roturas bicatenarias no presentan recombinación meiótica. Si bien
considerable evidencia avala el modelo de rotura bicatenaria en la
levadura, aún no se sabe en qué grado es aplicable a otros orga-
msmos.
CONCEPTOS
La recombinación homóloga requiere la formación de heterodúplex
de DNA, formados por una cadena nucleotídica de cada uno de los
dos cromosomas homólogos. En el modelo de Holliday, la recombina-
ción homóloga se logra mediante una rotura monocatenaria del DNA,
desplazamiento de la cadena y migración de la rama. En el modelo de
rotura bicatenaria, la recombinación se logra a través de roturas bica-
tenarias, desplazamiento de la cadena y migración de la rama.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 11
¿Por qué es importante la recombinación?
Enzimas requeridas para la recombinación
La recombinación entre moléculas de DNA requiere el desenro-
llamiento de las hélices de DNA, la escisión de las cadenas nucleo-
tídicas, la invasión de la cadena y la migración de la rama, segui-
dos de escisión adicionaJ de ]a cadena y su unión para eliminar las
uniones de Holliday. Gran pa11e de nuestro conocimiento acerca
de estos procesos proviene de estudios sobre intercan1bio de
Se alinean dos moléculas de DNA bica-
tenario de cromosomas homólogos.
.1, fÍ Se produce un corte bicatenario en una
f "t_de las moléculas.
5' 3'
s
Se eliminan enzimáticamente los nucleó-
tidos, lo que produce cierta cantidad~
DNA monocatenario a cada lado.
,¡
5' , t s
•Ün extremo 3' libre invade y despla,a un~
t cadena de la molécula de DNA no cortada.
• •1
5' , l s
Se alarga el extremo 3', lo que desplaza '
aún más la cadena original.
,
, La cadena desplazada forma un bude cuyas
bases se aparean con la molécula de DNA
cortada.
t' 1
5'
La síntesis de DNA se inicia en el extremo
3' de la cadena inferior, y el bucle despla-
zado se utiliza como molde.
Unión de Holliday La unión de las cadenas produce dos unio-
nes de Holliday, cada una de las cuales se
puede separar por escisión y reasociación~
Figura 12-21. Modelo de recombinación de la ruptura bicate-
naria. En este modelo, la recombinación se produce mediante una
ruptura bicatenaria en un dúplex de DNA, desplazamiento de la
cadena, síntesis de DNA y resolución de dos uniones de Holliday.
genes en la E. coli. Si bien las bacterias no presentan meiosis, sí
tienen un tipo de reproducción sexual (conjugación), en la que
una bacteria dona su cromosoma a otra (analizado en forma 1nás
detallada en el cap. 9). Después de la conjugación, la bacteria
receptora tiene dos cromosomas, que pueden presentar recom-
binación homóloga. Los genetistas aislaron cepas mutantes de
E. coli que son deficientes en recombinación; el estudio de estas
cepas permitió identificar genes y proteínas que intervienen en la
 Replicación y recombinación del DNA 349

recombinación bacteriana, lo que reve.ló varías vías diferentes por cadenas y los reemplazan por DNA nuevo utilizando como molde
las que puede llevarse a cabo. la cadena complementrui a. Una copia de un alelo puede conver-
Los siguientes tres genes desempeñan papeles fundamentales tirse en el otro alelo, lo que determina un evento de conversión
en la recombinación de E. coli: recB, recC y recD, que codifican génica (véase fig. 12-22) según qué cadena sirva de molde.
tres polipéptidos que, juntos, form.an la proteína recBCD. Esta
proteína desenrolla el DNA bicatenario y es capaz de escindir las
cadenas nucleotídicas. El gen recA codifica la proteína RecA;
:La secuencia GGG de este cromosoma es el alelo A+, ...
esta proteína permite que una cadena simple invada una hélice de ~ __,
DNA y el desplazamiento ulterior de una de las cadenas origina-
les. En los eucariontes, la enzima Rad51 facilita la formación y la
migración de la rama de las estructtu·as de Holliday.
GGG
CCC
GGG
CCC
•• Cromosomas
En E. coli, los genes rnvA y rnvB codifican proteínas que cata- homólogos
lizan la migración de la rama, y el gen ruvC produce una proteí-
AAA
TTT
•
na resolvasa, que escinde las estructuras de Holliday. En los euca-
riontes, una enzima análoga denominada GENl lleva a cabo la
escisión y la resolución de las estructuras de Holliday. Asimismo, ... y la secuencia AAA de
j
AAA
TTT
•
las proteínas de unión a cadena simple, la DNA ligasa, las DNA este cromosoma es
polimerasas y la DNA ligasa participan en diversos tipos de el alelo a-.
reco1nbinación, además de cumplir sus funciones en la replica- - - - -GGG _ _...._
ción del DNA. - - - -((( __.,,,,r1
- - - -GGG • ~ la recombinació~
■ccc se producen roturas
AAA monocatenarias y las j
CONCEPTOS ■TTT ) lcadenas se invaden, ...

Una serie de proteínas intervienen en la recombinación, como RecA,

- - - -AAA - - - - . . .
- - - -TTT - - - - -
.,
RecBCD, RuvA, RuvB, resolvasa, proteínas de unión a cadena simple,
ligasa, DNA polimerasas y girasa. - - - -GGG _ _ _
- - - -ccc - - -
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 12
-----GGG..___ r ... lo que produce l
TTT DNA heterodúplex con
_ _ __,_AAA " ' - - - [ errores en el aparea_j
-
iento de bases.
¿Cuál es la función de la resolvasa en la recombinación? ------.CCC ----
- - - -AAA _ __
a. Desenrolla el DNA bicatenario.
- - - -TTT - - -
b. Permite que una cadena simple de DNA invada una hélice de DNA.
c. Desplaza una de las cadenas de DNA original durante la migra-
ción de la rama. Reparación del DNA
d. Escinde la estructura de Holliday. - -ciGG - - ,-------------. - - cGGG - -
- ...cCC En la reparación del DNA, - ....:ce - -
- -«:;GG - -
los nucleótidos mal apa-
reados son escindidos y - - -TTT - -
reemplazados mediante el
Conversión génica uso de la cadena comple-
- ..:ce - - mentaria como molde. - ..:ce - -
Como hemos visto, la recombinación homóloga es el mecanis1no
- ~AA - - -■-AAA --
que produce entrecruzamiento. También es responsable de un fe- -...-rTT - - -...-rTT - -
nómeno relacionado conocido corno conversión génica, un pro-
ceso de intercambio genético no recíproco que puede producir
proporciones anormales de gametos después de la meiosis. Por Si se usa una cadena como
-■-;GG --
molde, se produce conver- - ..cee A+
ejemplo, se espera que un organis1no con genotipo Aa produzca
1/2 de gametos A y 1/2 de gametos a. Pero en ocasiones, la meio- sión génica y se obtienen
--■IGGG - - - tres copias del alelo A+. -■-AAA --
sis en un individuo Aa produce 3/4 de A y 1/4 de a o 1/2 de A y 3/4 A+ ce - - -■-rTT a
de a. La conversión génica se debe a la formación de heterodú-
--■IGGG - - -■-;GG --
plex que tiene lugar durante la recombinación. Durante la forma- A+ ce - - - -=ee A+
ción de heterodúplex, una molécula de DNA monocatenario de un
- ~AA - - -■-AAA --
cromosoma se aparea con una 1nolécula de DNA monocatenario a- -■-rTT _ _, TT _ _ a
de otro cron1osoma. Si las dos cadenas de un heterodúplex pro- ¡5ila otra cadena se usa como molde, se produce recombinación
vienen de cromosomas con alelos diferentes, habrá mal aparea- normal, que produce dos copias de A+ y dos copias de a-.
miento de bases en el heterodúplex de DNA (fig. 12-22). La célu-
la suele reparar estos errores de apareamiento. Con frecuencia, los Figura 12-22. La conversión génica se produce durante la reparación
1necanisn1os de reparación escinden nucleótidos de una de las de errores de apareamiento entre las bases del heterodúplex de DNA.
350 CAP[TULO 12

RESUMEN DE CONCEPTOS

■ La replicación es semiconservadora: se separan las dos cade-
nas nucleotídicas del DNA, y cada una sirve como molde para
la síntesis de una nueva cadena.
■ En la replicación theta del DNA, se desenrollan las dos cade-
nas nucleotídicas de una molécula circul ar de D NA, lo que
crea una burbuja de replicación. Normalmente, el DNA se sin-
tetiza en ambas cadenas y en ambas horquillas de replicación,
lo que produce dos moléculas circulares de DNA.
■ La replicación por círculos rodantes se inicia mediante un
corte en una cadena de DNA circular, que produce un grupo
3 ' -OH al que se añaden nuevos nucleótidos mientras que el
extremo 5' de la cadena cortada es desplazado del círcu lo.
■ El DNA eucarionte lineal contiene muchos orígenes de repli-
cación. El desenrollamiento y la replicación tienen lugar sobre
ambos moldes en los dos extremos de la burbuja de replica-
ción hasta que se encuentran los replicones adyacentes, lo que
da por resultado dos moléculas lineales de DNA.
■ Toda la síntesis de DNA es en dirección 5 ' ➔ 3 '. Como las
dos cadenas nucleotídicas del DNA son antiparalelas, la repli-
cación tiene lugar de manera continua en una cadena (la cade-
na líder) y de manera discontinua en la otra (la cadena retrasa-
da).
■ La replicación comienza cuando una proteína iniciadora se
une a un origen de replicación y desenrolla un segmento corto
de DNA al que se une la DNA helicasa. La DNA helicasa
desenrolla el DNA en la horquilla de replicación, se unen las
protefuas de unión a cadena simple a las cadenas nucleotídi-
cas simples para evitar estructuras secundarias, y la DNA
girasa (una topoiso1nerasa) elimina la tensión por delante de
la horquilla de replicación, generada por el desenrollamiento.
■ Durante la replicación, la primasa sintetiza cebadores cortos
de nucleótidos de RNA, que proveen un grupo 3 '-OH al que
la DNA p olimerasa puede añadir nucleótidos de DNA.
■ La DNA polimerasa añade nuevos nucleótidos al extremo 3'
de una cadena polinucleot{dica en crecimiento. L as bacterias
tienen dos DNA polimerasas que cumplen funciones funda-
mentales en la replicación: la DNA polimerasa III, que sinteti-
za DNA nuevo en las cadenas líder y r etrasada, y la DNA
polimerasa I, que elünina y reemplaza a los cebadores.
■ La DNA ligasa sella los cortes que persisten en el esqueleto
axial de azúcar-fosfato cuando se reemp lazan los cebadores de
RNA por nucleótidos de DNA.
■ Varios mecanismos garantizan la alta tasa de exactitud en la
replicación, con10 selección precisa de nucleótidos, corrección
y reparación de en·ores de apareamiento.
■ En los eucariontes, la replicación precisa en múltiples oríge-
nes está garantizada por un factor permisivo que debe unirse a
un origen antes de que pueda co1nenzar la replicación.
■ Los nucleosomas eucariontes se reensamblan con rapidez en
las nuevas moléculas de DNA; los nucleosomas recién reen-
sainblados consisten en una mezcla aleatoria de histonas anti-
guas y nuevas.
■ La enzima telomerasa replica los extremos de las moléculas
lineales de DNA eucarionte.
■ La recombinación homóloga tiene lugar mediante roturas de
las cadenas nucleotídicas, alineación de segmentos homólogos
de DNA y reasociación de las cadenas. La recombinación
homóloga requiere una serie de enzimas y proteínas.
■ La conversión génica es el intercambio genético no recíproco
y produce proporciones anormales de gametos.

TÉRMINOS IMPORTANTES

burbuja de replicación
(p. 329)
cadena líder (p. 332)
cadena retrasada (p. 333)
cebador (p. 336)
centrifugación de equilibrio
en gradiente de densidad
(p. 327)
conversión génica (p. 349)
corrección (proofreading)
(p. 339)
DNA girasa (p. 335)
DNA helicasa (p. 335)
DNA ligasa (p. 338)
DNA po)jn1erasa a (p. 342)
DNA polimerasa 8 (p. 342)
DNA polimerasa (p. 332)
DNA polimerasa I (p. 337)
DNA polimerasa III (p. 337)
DNA polimerasa translesional
(p. 342)
DNA polin1erasa a (p. 342)
factor permisivo de la replica-
ción (p.34 1)
fragn1ento de Okazaki
(p. 333)
heterodúplex de DNA
(p. 347)
horquilla de replicación
(p. 329)
origen de replicación (p. 329)
priinasa (p. 336)
proteína de unjón a cadena
simple (SSB) (p. 335)
proteína iniciadora (p. 334)
recon1binación homóloga
(p. 346)
reparación de los e11·ores de
apareamiento (p. 340)
replicación bidireccional
. 329)
replicación continua (p. 332)
replicación discontinua
(p. 333)
replicación por círculos
rodantes (p. 330)
replicación semiconservadora
(p. 326)
replicación theta (p. 329)
replicón (p. 329)
saliente G (p. 344)
secuencia de replicación
autóno ma (ARS)
(p. 340)
telomerasa (p . 344)
unión de Holliday (p. 347)

l. Dos bandas 4. Proteína iniciadora, heli.casa, proteína de unión a cadena sim-

2. b ple, DNA girasa.

3.c 5.c
 Replicación y recombinación del DNA 351

6.b 10. c
7.c 11. La recombinación es importante para la variación genética y
8. El tamaño de los genomas eucariontes, la estructura lineal de para algunos tipos de reparación del DNA.
los cromosomas eucariontes y la asociación del DNA con pro- 12.d
teínas hjstonas.
9. Porque las DNA polime.rasas proclives a error pueden sortear
lesiones de la hélice de DNA donde se atascan las DNA polime-
rasas exactas, de alta velocidad.

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
E l siguiente diagrama representa las cadenas molde de una burbuja de replicación de una molécula de
DNA. Dibuje las cadenas recién sjntetizadas e identifique las cadenas líder y retrasada.
Origen

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Origen

El diagrama anterior con el dibujo de las cadenas recién sinte-
tizadas, y las cadenas líder y retrasada marcadas.
5' 3'
¿Qué información se proporciona para resolver el
problema? Desenrol lam1ento Desenrollamiento
Origen
U n diagrama del DNA molde con los extremos 5' y 3'
n1arcados.
A continuación, determine la dirección de la replicación
para cada cadena nueva, que debe ser 5' ➔ 3'. Podría Recuerde: la
Para obtener ayuda con este problema, repase: síntesis de DNA
dibujar flechas sobre las cadenas nuevas para indicar
D irección de la replicación, en la Sección 12.2, es siempre de
la dirección de la replicación. Después de que ha esta- 5' a 3'
y fig. 12-l0c.
blecido la dirección de la rep licación para cada cadena,
observe cada horquill a y determi ne si la dirección de la repli-
cación para una cadena es igual que la dirección de desenro-
llamiento. La cadena en la que la replicación tiene la misma
dirección que el desenrollamiento es la cadena líder. La cade-
na en la que la replicación tiene dirección opuesta al desenro-
LJarruento es Ja cadena retrasada.
Pista: cada horqui-
Pasos de la solución lla de replicación
debe tener una
Origen cadena líder y una
Recuerde: las dos Para determinar las cadenas líder y retrasa- cadena retrasada.
cadenas de DNA son da, observe primero qué extre1no de cada
antiparalelas, de
manera que la cade- cadena molde es 5' y qué extremo es 3'.
na recién sintetizada Con un lápiz, dibuje las cadenas sintetiza- 3
debe tener la polari- das en estos 1noldes e identifique sus extre- Retrasada
dad (dirección)
opuesta a la de la mos 5' y 3' . Desenrol lamiento Desenrollamiento
Origen
cadena molde.

Problema 2
Considere el experimento realizado por Meselson y Stahl en el que usaron 14N y L5N en cultivos de
E. coli y centrifugación de equilibrio en gradiente de den sidad . D ibuje las bandas producidas por DNA
352 CAP[TULO 12

bacteriano en el tubo de gradiente de densidad antes del cambio al medio que contiene 14N, y des-
pués de uno, dos y tres ciclos de replicación tras el cambio al medio que contiene 14N. Utilice un
conjunto distinto de dibujos para mostrar las bandas que aparecerían si la replicación fuera a) semi-
conservadora, b) conservadora, c) dispersiva.

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al proble- 14

N. En el siguiente ciclo de replicación, las dos cadenas
ma? vuelven a separarse y sirven de 1nolde para nuevas Pista: repase la
Dibujos que representen las bandas producidas por DNA bac- cadenas. Cada una de las cadenas nuevas contiene distribución €le!
14
solo N, por lo que algunas moléculas de DNA con- DNA nuevo y anti-
teriano en tubos de gradiente de densidad antes del cambio al guo en la replica-
medio que contiene 14N, y después de uno, dos y tres ciclos tendrán una cadena con el 15N original y una cadena ción semiconserva-
de replicación tras el cambio el medio con 14N; por lo tanto, con eJ 14N nuevo, mientras que otras moléculas con- dora, conservadora
usted debe dibujar cuatro tubos para cada modelo de replica- tendrán dos cadenas con el 14N. Este marcaje produ- y dispersiva en la
fi gura 12-1.
ción. Necesitará un conj unto separado de dibujos para la cirá dos bandas, una en la posición intennedia y una
replicación semiconservadora, conservadora y díspersiva. en una posición más alta del tubo. Otros ciclos de
replicación producirán cantidades crecientes de DNA que
¿Qué información se proporciona para resolver el proble- solo contienen 14N; por consiguiente, la banda más alta se
ma? tornará más oscura.
■ El DNA bacteriano se marcó originalmente con 15N y
después se pasaron las bacterias a un medio con 14N
(véase discusión del experimento en las pp. 325-328).
■ El DNA original tendrá 15N. El DNA recién sintetizado
tendrá 14N.
-
,
Replicación
-
,
Replicación Replicación
-
■ Se realizó centrifugación en gradiente de densidad antes
de cambiar a 14N, y luego de uno, dos y tres ciclos de
replicación después del cambio. Antes del Después de Después de Después de
cambio un ciclo de dos ciclos de tres ciclos de
a 14N replicación replicación replicación
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Experimento de Meselson y Stabl, en la Sección 12.2.
b. En la replicación conservadora, toda la molécula sirve de
molde. Después de un ciclo de replicación, algunas molé-
Pasos de la solución culas consistirán totalmente en 15N, y otras, en 14N; por lo
tanto, debe haber dos bandas. Los ciclos ulteriores de
El DNA marcado con 15N será más denso que el DNA marca- replicación aun1enta:rán la fracción de DNA que consiste
do con 14N; por lo tanto , el DNA marcado con 15N descende- por completo en 14N nuevo; por consiguíente, la banda su-
rá más en el tubo de gradiente de densidad. Antes del cambio pe1ior se oscurecerá. Sin embargo, persistirá el DNA ori-
al medio que contiene 14N, todo el DNA de las bacterias con- ginal con 15N, de manera que habrá dos bandas presentes.
tendrá 15N y producirá una sola banda en la parte inferior del
tubo.
a. En la replicación semiconservadora, se separan las dos
cadenas, y cada una sirve como molde para Ja síntesis de .
~ ~

la cadena nueva. Después de un ciclo de replicación, la Replicación Replicación Replicación

cadena molde original de cada n1olécula contendrá 15N y
la cadena nueva de cada molécula contendrá 14N, de mane-
ra que aparecerá una sola banda en el gradiente de densi- Antes del Después de Después de Después de
dad, en una posición intermedia entre las esperadas para cambio un ciclo de dos ciclos de tres ciclos de
DNA que contiene solo 15N y para DNA que contiene solo a 14N replicación replicación replicación
 Replicación y recombinación del DNA 353

c. En la replicación dispersiva, ambas cadenas nucleotídicas También es esperable que la banda se oscurezca a medida
se rompen en fragmentos que sirven de molde para la sín- que aumenta la cantidad total de DNA.
tesis de DNA nuevo. D espués, los fragmento se reensam-
blan en moléculas de DNA. Tras un ciclo de replicación,
todo el DNA debe contener aJrededor de ]a mitad de l5N y
la mitad de 14 N, lo que produce una banda de posjció n ,-
Replicación
-.
Replicación
,
Replicación
-
intermedia entre las esperadas para el DNA n1arcado con
15
N y el DNA marcado con 14N . Con los ciclos ulteriores
de replicación, aumenta la proporción de 14N de cada
Antes del Después d e Después de Después de
molécula; por lo tanto, persiste una sola banda híbrida, cambio u n ciclo de dos ciclos de tres ciclos de
pero su posición en el gradiente de densidad ascenderá. a 14N replicación replicación replicación

Sección 12.2 función de cada DNA polimerasa en las célul as

l. ¿Qué es la replicación semiconservadora?
2. ¿Cómo demostraron Meselson y Stabl que la replicación en
E . coli tiene lugar en forma semiconservadora?
3. Dibuje una molécula de DNA que presenta replicación theta.
En su dibujo, identifique a) origen, b) polaridad (extremos 5'
y 3') de todas las cadenas molde y recién sintetizadas, c)
cadenas líder y retrasada, d) frag1nentos de Okazaki y e)
localización de los cebadores.
4. Dibuje una molécula de DNA que presenta replicación por
círculos rodantes. En su dibujo, identifique a) origen, b) pola-
ridad (extremos 5' y 3') de todas las cadenas molde y recién
sintetizadas, c) cadenas líder y retrasada, d) fragmentos de
Okazaki y e) localización de los cebadores.
S. Dibuje una molécula de DNA que presenta replicación euca-
ri onte lineal. En su dibujo, identifique a) origen, b) polaridad
(extre1nos 5' y 3') de todas las cadenas molde y recién sinte-
tizadas, c) cadenas líder y retrasada, d) fragm entos de
Okazaki y e) localización de los cebadores.
6. ¿Cuáles son los tres requisitos principales de la replicación?
7. ¿ Qué sustratos se utilizan en la reacción de síntesis de DNA?
bacterianas?
11. ¿Por qué se requiere primasa para la replicación?
12. ¿ Cuáles son los tres mecanismos que garantizan la exactitud
de la replicación en las bacterias?
Sección 12.4
13. ¿De qué manera el factor permisivo de la replicación garan-
tiza que el DNA se replique solo una vez en cada origen por
ciclo celular euca1ionte?
14. ¿En qué aspectos la replicación en los eucariontes es similar
a la replicación en las bacterias y en qué aspectos es dife-
rente?
15. ¿ Cuál es el problema de los extremos de los cromosomas
para la replicación lineaJ? ¿Por qué, en ausencia de telo1ne-
rasa, los extremos de los cromosomas se vuelven progresi-
vamente más cortos cada vez que se replica el DNA?
16. Describa con palabras y dibujos cómo se replican los
telómeros en los extremos de los cromosomas
eucariontes.
Sección 12.5

17. Explique cómo el tipo de escisión del intermediario de

Sección 12.3
8. Enum.e re las diferentes proteínas y enzimas que participan
en la replicación bacteriana. Indique la fun ción de cada una
en el proceso de replicación.
9. ¿Por qué es necesaria la DNA girasa para la replicación?
10. ¿Qué similitudes y diferencias existen en las actividades
enzimáticas de las DNA polimerasas I y III? ¿ Cuál es la
Holliday produce reco1n binantes sin entrecruzanuento y
reco1n binantes con entrecruzamiento.
18. ¿Cuáles son algunas de las enzimas que participan
en la recombinación de E. coli y qué papeles
desempeñan?
19. ¿Qué es la conversión génica? ¿Cómo se origina?
354 CAP[TULO 12
Sección 12.2
20. Suponga que un futuro científico explora un planeta dis-
tante y descubre una nueva forma de ácido nucleico bica-
tenario. Cuando este ácido nucleico es expuesto a DNA
polimerasas de E. coli, la replicación se produce en
forma continua en ambas cadenas. ¿ Qué conclusión
puede extraer acerca de la estructura de este nuevo ácido
nucleico?
21. Se requiere fósforo para sintetizar los desoxirribonucleósi-
dos trifosfato usados en la replicación del DNA. Un gene-
tista cultiva algunas E. coli en un medio que contiene fós -
foro no radiactivo durante muchas generaciones. Después,
se transfiere una muestra de las bacterias a un medio que
contiene un isótopo radiactivo de fósforo ( 32P). Se toman
1nuestras de las bacterias inmediatamente después de la
transferencia, y después de uno y dos ciclos de replica-
ción. Asu1na que el DNA recién sintetizado contiene 32P y
que el DNA original contiene fósforo no radiactivo. ¿Cuál
será la distribución de la radiactividad en el DNA de las
bacterias de cada muestra? ¿Se detectará r adiactividad en
ninguna de las cadenas, en una de ellas o en ambas cade-
nas de DNA?
*22. Se cultiva una línea de células de ratón durante muchas
gener aciones en un 1nedio con 15N. Las células en Gl se
transfieren, después, a un medío que contiene 14N. Dibuje
un par de cromosomas homólogos de estas células en las
siguientes etapas y muestre las dos cadenas de las molécu-
las de DNA halladas en los cromosomas. Utilice colores
diferentes para representar las cadenas con 14N y con 15N.
a. Células en G 1, antes del cambio al medio con 14 N
b. Células en G2, después del cambio al medio con 14N
c. Células en la anafase de la mitosis, después del cambio
al medio con 14N
d. Células en la metafase I de la meiosis, después del
cainbio al medio con 14N
e. Células en la anafase II de la meiosis, después del cam-
bio al medio con 14N
*23. Una molécula circular de DNA contiene 1 millón de pares
de bases. Si la velocidad de síntesis en una horquilla de
replicación es de 100 000 nucleótidos por 1ninuto, ¿cuánto
tiempo req uerirá la replicación theta, si se asume que es
bidireccional, para replicar por compl eto la molécu la?
¿Cuánto tiempo demandará la replicación por cúculos
rodantes de este cromosoma circular? Ign ore la replica-
ción de la cadena desplazada en la replicación por círculos
rodantes.
24. Una bacteria sintetiza DNA en cada horquilla de replica-
ción a una velocidad de 1000 nucleótidos por segundo. Si
esta bacteria replica por co1npleto su cromosoma circular
por replicación theta en 30 Ininutos, ¿cuántos pares de
bases de DNA contendrá este cromosoma?
Sección 12.3
*25. El siguiente diagrama representa una molécula de DNA en
proceso de replicación. Dibuje las cadenas del DNA recién
sintetizado e identifique a) la polaridad de las cadenas
recjén sintetizadas, b) las cadenas líder y retrasada, c) los
frag1nentos de Okazaki y d) los cebadores de RNA.
Origen
5'
Desenrolla miento Desenrollamiento
Origen
26. En la figura 12-8, ¿cuál es la cadena líder y cuál es la
cadena retrasada?
*27. ¿Cuál sería el efecto sobre la replicación del DNA de
mutaciones que destruyeran cada una de las siguientes
actividades de la DNA polilnerasa I?
a. actividad de exonucleasa 3 ' ➔ 5 '
b. actividad de exonucleasa 5' ➔ 3'
c. actividad de polimerasa 5' ➔ 3'
28. ¿Cuál de las DNA polimerasas mostradas en el cuadro
12-3 tiene capacidad de corrección?
29. ¿Cómo se afectaría la replicación del DNA en una célula
bacteriana que careciera de DNA. girasa?
*30. Si el gen de primasa mutara de manera que no se produje-
ra ninguna primasa funcional, ¿cuál sería el efecto sobre la
replicación theta? ¿Sobre la replicación por círculos
rodantes?
31. Las DNA polimerasas no pueden cebar la replicación,
pero sí pueden hacerlo la primasa y otras RNA poli1nera-
sas. Algunos genetistas han especulado que la incapacidad
de las DNA polimerasas para cebar la replicación se debe
a su fun ción de con·ección. E sta hipótesis argumenta que
la corrección es esencial para la translnisión fidedigna de
la información genética y que, como las DNA polimerasas
han desaiTollado la capacidad de co1Tegir, no pueden cebar
la síntesis de D NA. Explique por qué las funciones de
corrección y de cebado podiian ser inco mpatibles en la
misma enzima.
 Replicación y recombinación del DNA 355

Sección 12.4 de estas familias es negativa, lo que indica que sus telón1e-
ros son más cortos que lo normal. En la longitud de los
32. Marina Melixetian y cols. suprimieron la expresión de la telómeros ajustada por edad, c uanto más negativo es el
f;;_" proteína Geminina en células humanas tratándolas con número, más corto es el telómero.
º'""'"' RNA de inte1ferencia pequeños (síRNA) comple,nentarios
del RNA mensajero de la Geminina (M. Melixetian y cols.
2004. Journal of Cell Biology 165:473-482). (Los RNA de Longitud de los telómeros Longitud de los telómeros
interferencia pequeños f om1an un complejo con proteínas de los padres de los hijos
y se aparean con secuencias complementarias de los
n1RNA; después, el con1plej o escinde el mRNA, de n1a- -4,7 -6 1
nera que no se produce su traducción; pp. 403-404 del '
-6,6
cap. 14). Cuarenta y ocho horas después del tratamiento -6
con siRNA, las células con depleción de Gerninina se -3,9 -0,6
agrandaron y contenían un núcleo gigante. El análisis del -14 -2 2
contenido de DNA reveló que 1nuchas de estas células con ' '
-5 2 -54
de pleción de Gerninina eran 4n o más grandes. Explique ' '
-22 -3 ,6
estos resultados. '
-4,4 -2
*33. ¿Qué resultados se esperarían del experimento reseñado -4,3 -6,8
en la figura 12-17 si durante la replicación todas las pro- -5 -3 8
-5,3
'
-6,4
teínas bistonas originales permanecieran en una cadena
del DNA y las histonas nuevas se unieran a la otra cade- -0,6 -2 5
'
na? -1 3 -5 1
'
-3,9 '
34. Una serie de científicos que estudian el tratamiento del
-4,2 -5,9
cáncer se han interesado en la telo1nerasa. ¿Por qué?
¿Cómo podrían actuar los tratamientos farmacológicos
antineoplásicos dirigidos a la telon1erasa?
a. ¿Cómo es la longitud de los telómeros de los padres
*35. La enzima telomerasa está compuesta por proteína y respecto de la longitud de los telómeros de los hijos?
RNA. ¿Cuál se1ía el efecto más probable de una deleción (Pista: calcule la longitud promeilio de los telómeros de
grande del gen que codifica la parte de RNA de la telo- todos los padres y la longitud promedio de los telóme-
merasa? ¿Cómo se vería afectada la función de la telo- ros de todos los hijos).
merasa? b. Explique por qué los telómeros de las personas con
36. La disqueratosis congénita (DKC) es un trastorno genético DKC son más cortos que lo normal.
J,c..••'"" raro caractelizado por anormaljdades de las uñas de los c. Explique por qué la DKC aparece a una edad más tero-
. .
!. ••~ dedos de la mano y la pigmentación de la piel, la apali- prana en generaciones sucesivas.
ción de parches blancos en la lengua y las mejillas e insu- 37. Un individuo es heterocigótico en dos locus (Ee Ff> y los
ficiencia progresiva de la médula ósea. Una forma autosó- genes se encuentran en configuración de repulsión (véase
mica dominante de DKC se debe a una mutación del gen p. 172 del cap. 7). Suponga que se producen roturas
que codifica el componente RNA de la telo1nerasa. Tom monocatenarias y migración de la rama en las posiciones
Vulliamy y cols. examinaron a 15 familias con DKC auto- n1ostradas abajo. Utilizando distintos colores para repre-
sórnica dominante (T. Vulliamy y cols. 2004. Nature sentar los dos cromosomas hon1ólogos, dibuje las molécu-
Genetics 36:447-449). Observaron que la m.e diana de edad las de DNA recombinantes sin entrecruza1n iento y las
de comienzo de la DKC en los progenitores era de 37 recombinantes con entrecruzamiento que resultarán de la
años, mientras que la meiliana de la edad de comienzo en recombinación homóloga. (Pista: véase fig. 12-20).
los hijos de padres afectados era de 14,5 afíos. Por lo
tanto, en estas familias, la DKC se manifestó a edades ca-
da vez menores en las sucesivas generaciones, un fenóme-
Roturas monocatenarias Migración de la rama
no conocido como anticipación (véase p. 126 del cap. 5). hasta a uí
Los investigadores midieron la longitud de los teló1neros
E f
de los nliembros de estas familias; las mediciones se pre-
sentan en el cuadro adjunto. Por lo general, los telómeros
se acortan con la edad, y por lo tanto, la longitud de los
telómeros se ajustó por edad. Obsérvese que la longitud
de los telómeros ajustada por edad de todos los miembros
356 CAP[TULO 12
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 12.3
38. Una mutación condicional expresa su fenotipo mutante solo
en ciertas condiciones (condiciones restrictivas) y expresa el
fenotipo nor1nal en otras condiciones (condiciones permisi-
vas). Un tipo de n1utación condicional es la mutación ter-
mosensible, que expresa el fenotipo 111utante solo a deter1ni-
nadas temperaturas.
Se han aislado cepas de E. coli que contienen mutaciones
termosensibles en los genes que codifican diferentes com-
ponentes de la maquinaria de replicación . En cada una de
estas cepas, la proteína producida por el gen mutado no es
funcional en condiciones restrictivas. Se c ultivan estas
cep as en condiciones permisivas y, después , se cambia brus-
camente a la condición restrictiva. Después de un ciclo de
replicación en condición restrictiva, se aísla y se analiza el
DNA de cada cepa. ¿ Qué características esperaiia observar
en e l DNA aislado de cada cepa con una mutación termo-
sensible del gen que codifica las siguientes proteú1as?
a. DNA ligasa
b. DNA polimerasa I
c. DNA polimerasa III
d. Primasa
e. Proteína iniciadora
Sección 12.4
39. Las DNA topoisomerasas desempeñan papeles importan-
~ " tes en la replicación del DNA y en el superenrollamiento
º'DA'º' ( véase cap. 11). Estas enzimas también son las dianas de
ciertos fármacos antineoplásicos. Eric Nelson y cols.
estudiaron m -AMSA, uno de los compuestos antineoplá-
sicos que actúan sobre las enzimas topoiso1nerasas (E. M.
Nelson, K . M . Tewey y L. F. Liu. 1984. Proceedings of
the National A cademy o_f Sciences 81:1361-1365).
Observaron que e l m-AMSA estabiliza un intermediario
producido en el curso de la acción de la topoisomerasa.
El intermediario está formado por la topoisomerasa unida
a los extremos cortados de l DNA. L as roturas del DNA
provocadas por compuestos a ntineoplásicos como m-
AMSA inhiben la replicación del DNA celular y, por con-
siguiente, detienen la proliferación de las células cancero-
sas. Proponga un mecanismo por el c ual tn-AMSA y
otros agentes antineoplásicos dirigidos contra las enzimas
topoisomerasas que p articipan e n la replicación podrían
inducir roturas del DNA y reordenamientos cromosó-
m 1cos.
*40. La regulación de la replicación es esencial para la estabili-
dad genómica y, e n condiciones normales, el DNA se
replica solo una vez por ciclo celular en los eucariontes
(en la fase S). Las células normales producen proteína A ,
que attmenta su concentración en la fase S. En las células
que tienen una copia n1utada de la proteína A, esta no es
funcional y la replicación se produce de manera continua
durante todo el ciclo celular, con la consecuencia de que
las célul as pueden tener una cantidad de DNA que supera
50 veces la nonnal. En general, la proteína B está presente
en G 1 pero desaparece del núcleo celular en la fase S. En
las células con una copia mutada del gen de la proteína A,
los niveles de proteína B no desaparecen e n la fase S, sino
que permanecen altos durante todo el ciclo celular.
Cuando hay mutación del gen de la proteína B, no se pro-
duce la replicación.
Proponga un mecani smo por medio del cual Ja proteína
A y la proteína B podrían regular normalmente la replica-
ción , de manera que cada célula recibiera la cantidad apro-
piada de DNA. Explique cómo la n1utación de estos genes
causa los efectos recién descritos.
 13
Transcripción

Intoxicación por Amanita phalloides

El 8 de noviembre de 2009, To1nasa, de 3 1 años de edad,
estaba canu nando por eJ sendero natural de Lago Laki, al
este de San Francisco, con su esposo y su primo, cuando
encontraron algunos hongos blancos grandes muy pareci-
dos a los hongos comestibles que disfrutaban en su
México natal. Recogieron los hongos, los llevaron a su
hogar, y los cocinaron y consumieron durante la cena. En
el térnúno de horas, Ton1asa y su familia se s intieron mal
y concun·ieron al hospital. Más tarde, fueron derivados a
la u nidad de cuidados intensivos del California Pacific
Medical Center de San Francisco, donde Tomasa murió
por insuficiencia hepática 3 semanas n1ás tarde. Su esposo
finalmente se recuperó después de una hospitalización
prolongada; el primo de ella requirió un trasplante hepáti-
co para sobrevivir.
Los hongos consumidos por Tomasa y su familia eran
Anianita phalloides, conocidos comúnmente como oronja
mortal. Una sola Amanita phalloides contiene suficiente
toxina para matar a un ser humano adulto. La tasa de mor-
talidad entre aquellos que consu1nen Amanita phalloides
La oronja mortal, Amanita phalloides, causa la muerte por inhibición del pro- es del 22%; en los niños menores de 10 afios, es superi or
ceso de transcripción. (©MAP/Jean-Yves Grospas/Age FotoStock America, lnc.). al 50%. Estos hongos parecen estar extendiéndose en
California, con el consiguiente aumento reciente de la
cantidad de intoxicaciones.
La intoxicación por Amanita phalloides es gradual y lenta. Los síntomas digestivos (dolor
abdo1ninal, cólicos, vó1nitos, diarrea) aparecen dentro de las 6-12 horas de consunudos los
hongos, pero en general remiten en el térnuno de algunas horas, y el paciente parece recupe-
rarse. Dada esta remisión inicial, a menudo no se le da transcendencia a la intoxicación hasta
que es demasiado tarde para lavar el estómago y eliminar la toxina del organismo. Después de
uno o dos días, comienzan los síntomas graves. Aparece una necrosis de las células hepáticas,
que suele causar daño hepático permanente y muerte en unos pocos días. No hay ningún trata-
tniento eficaz, excepto un trasplante hepático para reemplazar el órgano dañado.
¿Cómo mata la Amanita phalloides? Su toxina letal, contenida en los cuerpos fructíferos
que producen esporas reproductivas, es la proteína a-amanitina, que consiste en un péptido
corto de ocho aminoácidos que forma un rulo circu lar. La a-amanitina es un potente in hi bidor
de la RNA polimerasa II, la enzima que transcribe genes que codifican proteínas en los euca-
riontes. La RNA polimerasa II se une a los genes y sintetiza n1oléculas de RNA que son com-
plementarias del n1olde de DNA. En el proceso de transc1ipción, la RNA polimerasa se des-
plaza por el molde de DNA y afiade un nucleótido por vez a la cadena de RNA crecien te. La
cx.-amanitina se une a la RNA polimerasa y bloquea las partes móviles de la enzima, lo que
interfiere con su capacidad de desplazarse a lo largo del molde de DNA. En presencia de
a-amanitina, se enlentece la síntesis de RNA de su velocidad normal de varios miles de nu-
cleótidos por minuto a solo algunos nucleótidos por n1inuto. Los resultados son catastróficos.
357
358 CAPITULO 13
Sin transcripción, la síntesis proteica (requerida para la fu nción ceJular) se detiene, y las células mue-
ren. El hígado, donde se acumula la toxina, presenta daño irreparable y deja de funcionar. En casos
graves, el paciente muere.
L a intoxicación por Amanita phalloides ilustra la extrema
importancia de la transc1ipción y el papel central que desem-
peña la RNA polimerasa en el proceso. Este capítulo considera el
proceso de transcripción: el primer paso del dogma central, la vía
de transferencia de información del DNA (genotipo) a la proteína
(fenotipo). La transcripción es un proceso complejo que requiere
precursores de los nucleótidos de RNA, un molde de DNA y una
se1ie de componentes proteicos. A medida que exarrúne.m os las
etapas de la transc1ipción, intente poner en perspectiva todos los
detalles y concéntrese en comprender cómo ellos se relacionan
con el objetivo general de la transcripción: la síntesis selectiva de
una molécula de RNA.
Este capítulo co1nienza con una breve revisión de la estructw·a
del RNA y un análisis de ]as diferentes clases de RNA. Después,
consideran1os los principales componentes requeridos para la
transcripción. Por último, exploramos el proceso de transcripción.
En vruios puntos del texto, nos detendremos para considerar algu-
nos principios generales que surjan de él.
13.1 El RNA, una cadena simple
de ribonucleótidos, participa
en diversas funciones celulares
Antes de iniciar nuestro estudio de la transcripción, considerare-
n1os la in1portancia pasada y actual del RNA , repasare1nos la
estructura del RNA y examinaremos algunos de los diferentes
tipos de moléculas de RNA.
Un mundo temprano de RNA
La vida requiere dos funciones básicas. Primero, los organismos
vivos deben ser capaces de almacenar y transmitir información
genética durante la reproducción en forma fiable. Segundo, deben
tener la capacidad de catalizar las transformaciones químicas para
iniciar las reacciones que düigen los procesos vitales. Durante
mucho tiempo, se creyó que las funciones de almacenamiento de
la información y de transfonnación química dependían de dos
tipos de moléculas completa1nente di stintas: la información gené-
tica está almacenada en los ácidos nucleicos, mientras que las
transformaciones químicas son catalizadas por enzimas proteicas.
Esta dicotomía bioquímica generó un dilema. ¿Qué apareció pri-
mero, las proteínas o los ácidos nucleicos? Si los ácidos nucleicos
son portadores de las instrucciones necesarias para codificar las
proteínas, ¿de qué manera se podiían haber generado las proteí-
nas sin eBos? Por otra parte, dado que los ácidos nucleicos son
incapaces de copiarse a sí mismos, ¿cómo podrían haberse gene-
rado sin proteínas? Si el DNA y las proteínas se necesitan mutua-
mente, ¿cón10 pudo comenzar la vida?
Esta aparente paradoja desapareció en 1981, cuando Thomas
Cech y cols. descubrieron que el RNA puede servir como catali-
zador biológico. Estos científicos comprobaron que el RNA del
protozoo Tetrahymenea thermophila puede escindir 400 de sus
propios nucleótidos en ausencia de cualquier proteína. Ahora, se
han descubierto otros eje1nplos de RNA catalíticos en diferentes
tipos de células. Estas moléculas de RNA, denominadas ribozi-
m.as, pueden escindir partes de sus propias secuencias , conectar
entre sí ciertas moléculas de RNA, replicar otras e incluso catali-
zar la formación de enlaces peptídicos entre los anunoácidos. El
descubrilniento de las ribozimas es otra evidencia que sugiere que
el material genético original fue eJ RNA
Es probable que las ribozimas que se auton·eplican hayan sur-
gido de 3500 a 4000 millones de años atrás y hayan iniciado la
evolución de la vida sobre la Tierra. En sus principios, probable-
mente la vida fue un mundo de RNA, en el que las moléculas de
RNA cumplían funciones de portadoras de la información genéti-
ca y tan1bién de catalizadores de las reacciones químicas necesa-
rias para sostener y perpetuar la vida. Estos RNA catalíticos pue-
den haber adquirido la capacidad de sintetizar enzimas basadas en
proteínas, que son catalizadores más eficientes. Es probable que,
a medida que las enzimas fueron adquiriendo cada vez más fun-
ciones catalíticas, el RNA haya sido relegado al almacenamiento
y la transferencia de infonn ación. El DNA, con su estabilidad
quí1nica y su replicación :fidedigna, reemplazó con el tiempo al
RNA como portador primario de la información genética. No obs-
tante, el RNA es producido en numerosos procesos biológicos o
desempeña un papel vital en ellos, como transcripción, replica-
ción, procesamiento del RNA y traducción. En los últünos 15
años, la investigación también ha determinado que las moléculas
pequeñas de RNA recién descubiertas tienen una participación
fundamental en muchos procesos biológicos básicos, lo que
demuestra que la vida actual todavía es, en gran medida, un mun-
do de RNA. En el capítulo 14, se analizarán con mayor detalle
estas moléculas pequeñas de RNA.
CONCEPTOS
Es probable que, en sus in icios, la vida se centrara en RNA, que
actuó como material genético original y como catalizador biológico.
Estructura del RNA
Al igual que el DNA, el RNA es un polímero compuesto por nu-
cleótidos unidos por enlaces fosfodiéster (véase un análisis de la
estructura del RNA en el cap.10). Sin ernbargo, hay algunas dife-
rencias importantes entre la estructura deJ DNA y la del RNA.
Mientras que los nucleótidos de DNA contienen azúcares desoxi-
rribosa, los nuclótidos de RNA tienen azúcares ribosa (tig. 13-la).
Con un grupo hidroxilo libre en el átomo de cru·bono 2' de la ribo-
sa, el RNA se degrada rápidamente en condiciones alcalinas. La
desoxin-ibosa del DNA carece de este grupo hidroxilo libre; por
lo tanto, el DNA es una molécula más estable. Otra diferencia
impo1tante es que la timina, una de las pirimidinas halladas en el
DNA, es reemplazada por uracilo en el RNA.
Una última diferencia entre la estructura del DNA y la del RNA
es que el RNA suele consistir en una sola cadena polinucleotídi-
 Transcripción 3 59

(a) tarias cortas dentro de una cadena nucleotíctica se pueden aparear

5' y formar estructuras secunda1ias (véase fig. 13-lb). A menudo,
La cadena Fosfato
estas estructuras secundarias del RNA se denominan estructuras
en horquilla y rulo o en tallo y rulo. Cuando se aparean dos regio-
con~inúa /
Base nes dentro de una misma n1olécula de RNA, las cadenas de esas
-◊-P
:
= O
CH
c#1/ El RNA contiene uracilo regiones deben ser antiparalelas, y el apareamiento será entre
citosina y guanina, y entre adenina y uracilo (aunque en ocasio-
J ;-;_ ...::........,==; en lugar de tim ina.
nes la guanina se aparea con uracilo).
1
H2C 5' O La formación de estructuras secundarias desempeña un papel
11
4' o Azúcar El RNA tiene un grupo hidroxi lo importante en la función del RNA. La estructura secundaria
ribosa Ien el átomo de carbono 2' de depende de la secuencia de bases de la cadena nucleotídica, de
o OH - -===---=::::::::: su componente azúcar, mientras
manera que diferentes moléculas de RNA pueden asumir distin-
1 N 1que el DNA tiene un átomo de
- o - P=O H1 ~ t #o [ hidrógeno. El RNA es más tas estructuras. Co1no su estructura determina su función, las
o
1
Ne~ -e\ reactivo que el DNA. moléculas de RNA tienen el potencial de una enorme variación de
\ G _,N --H ---- función. El DNA, cuyas dos cadenas complementarias forman
HC
l S'
O N :::::,C
2
\ una hélice, tiene un rango mucho más restringido de estn1cturas
N- H secundarias que puede asumir y, por consiguiente, desempeña
H/
menos papeles funcionales en la célula. El cuadro 13-1 resume
O OH
1
las similitudes y las diferencias de las estructuras del DNA y el
- o - P=O
RN A. i:..►!!!:!!~!::!!!!~!::!:!::!~:!..!!!!!~~!!!.!!!!!.1
d
H2C 5' o
1

Clases de RNA
Las moléculas de RNA cumplen diversas funciones en la célula.
o OH H
H
\
E l RNA ribosómico (rRNA) y las subunidades proteicas ribosó-
1 \
C'( /
N- H micas constituyen el ribosoma, el sitio de ensamblaje de proteínas.
- o-P = O
En el capítulo 14 se analizará con más detalle el riboson1a. El
d HC .f(
\
\\
N RNA mensajero (mRNA) transporta las instrucciones de codifi-
~/
\\ cación para las cadenas polipeptídicas del DNA a un ribosoma.
o Después de unirse al ribosoma, una molécula de mRNA especifi-
ca la secuencia de aminoácidos de una cadena polipeptídica y
OH proporciona un 1nolde para su unión. Las moléculas precursoras
grandes, que se denomi nan RNA premensajeros (pre-mRNA),
La cadena son los productos inmediatos de la transcripción en las células
continúa
eucariontes. Los pre-mRNA son modificados en forma extensa
3'
antes de transf armarse en mRNA y salir del núcleo para ser tra-
(b) Estructura primaria ducidos a proteína. Las células bacterianas no tienen pre-mRNA;
D ',\ltd(cfflitr¡Gijlt!fiffit!<it◄nitDldiiltdltMcct!tmcWt2@.:.fi.t( JD en estas células, la transcripción tiene lugar en forma concurren-
te con la traducción.
Una molécu la de RNA se
pliega para formar estructu- lega miento
ras secundarias ...

Cuadro 13-1 Comparación de las estructuras del DNA

... debido a los puentes de hi- y el RNA
drógeno entre las bases comple-
mentarias de la misma cadena. Característica DNA RNA
Compuesto por nucleótidos Sí Sí
Est ructura
secundaria Tipo de azúcar Desoxirribosa Ribosa

Presencia de grupo 2'-0H No Sí

Bases A,G, C, T A,G ,C,U
Figura 13- 1. El RNA tiene una estructura primaria y secundaria. Nucleótidos unidos por Sí Sf
en laces fosfodiéster
Bicatenario o En general, En general,
ca (fig.13-lb), mientras que el DNA está formado habitualmente monocatenario bicatenario monocatenario
por dos cadenas polinucleotídicas unidas por puentes de hidróge- Estruct ura secundaria Doble hélice Muchos tipos
no entre bases complementarias (aunque algunos virus contienen
Estabilidad Estable Fáci lmente
genomas de RNA bicatenario, como se comentó en el cap. 9). Si degrada ble
bien el RNA en general es monocatenario, regiones comple1nen-
360 CAPITULO 13

Cuadro 13-2 Localización y funciones de diferentes clases de moléculas de RNA

Tipo Lugar de la función en

Clase de RNA de célula las células eucariontes* Función

RNA ribosómico (rRNA) Bacteriana Citoplasma Componentes estructurales y funcionales del ribosoma
y eucarionte

RNA mensajero (mRNA) Bacteriana Núcleo y citoplasma Transporta el código genético para las proteínas
y eucarionte

RNA de transferencia (tRNA) Bacteriana Citoplasma Ayuda a incorporar aminoácidos en la cadena

y eucarionte polipeptídica

RNA nuclear pequeño (snRNA) Eucarionte Núcleo Procesamiento de pre-mRNA

RNA nucleolar pequeño (snoRNA) Eucarionte Núcleo Procesamiento y ensamblaje de rRNA

Micro-RNA (miRNA) Eucarionte Núcleo y citoplasma Inhibe la traducción de mRNA

RNA de interferencia pequeño Eucarionte Núcleo y citoplasma Desencadena la degradación de otras moléculas de RNA
(siRNA)

RNA de interacción con Piwi Eucarionte Núcleo y citoplasma Suprime la transcripción de elementos transponibles en
(piRNA) célu las reproductoras

RNA de CRISPR (crRNA) Procarionte Ayuda a destruir DNA extraño

*Todos los RNA eucariontes se sintetizan en el núcleo.

El RNA de transferencia (tRNA) sirve como enlace entre la

secuencia de codificación de nucleótidos del mRNA y la secuen-
cia de aminoácidos de una cadena polipeptídica. Cada tRNA se
une a un tipo particular de aminoácido y ayuda a incorporar el
aminoácido a una cadena polipeptítica (tema que se analiza en
el cap. 15).
En los núcleos de las células eucariontes, se encuentran otras
clases de moléculas de RNA. Los RNA nucleares pequeños
(snRNA) se combinan con pequeñas subunidades proteicas para
formar ribonucleoproteínas nucleares pequeñas (snRNP, cono-
cidas como "snurps"). Algunos snRNA participan en el procesa-
miento del RNA y convierten pre-mRNA en mRNA. Los RNA
nucleolares pequeños (snoRNA) intervienen en el procesamien-
to del rRNA.
En las células eucariontes, hay una clase de 1noléculas muy
pequeñas y abundantes de RNA, denominadas micro-RNA
(111íRNA), y RNA de interferencia pequeños (siRNA), que lle-
van a cabo la interferencia por RNA (RNAi), un proceso en el que
estas moléculas de RNA pequeñas ayudan a desencadenar la
degradación del mRNA o a inhibir su traducción a proteína. En el
capítulo 14 se analizará con mayor profundidad la interferencia
por RNA. Investigaciones recientes han revelado otra clase de
moléculas pequeñas de RNA, llamadas RNA de interacción con
Piwi (piRNA; nombradas así por las proteínas Piwi con las que
interactúan). Estas moléculas de RNA, halladas en los testículos
de mamíferos, son similares a los rniRNA y a los siRNA; se con-
sidera que intervienen en la supresión de la expresión de ele-
mentos transponibles (véase cap. 18) en células reproductoras.
Reciente1t1ente se ha descubierto un sistema similar a la interfe-
rencia por RNA en procariontes, en los que pequeños RNA de
CRISPR (crRNA) ayudan a destruir moléculas de DNA extraño.
El cuadro 13-2 resume algunas de las diferentes clases de las
moléculas de RNA.
CONCEPTOS
El RNA difiere del DNA en que tiene un grupo hidroxilo en el átomo
de carbono 2' de su azúcar, contiene uracilo en lugar de timina y
suele ser monocatenario. Existen varias clases de RNA en las células
bacterianas y eucariontes.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
¿Qué clase de RNA está correctamente asociada con su función?
a. RNA nuclear pequeño (sn RNA): procesa el rRNA.
b. RNA de transferencia (tRNA): se une a un aminoácido.
c. M icro-RNA (miRNA): transporta información sobre la secuencia de
aminoácidos de una proteína.
d. RNA ribosómico (rRNA): lleva a cabo la interferencia por RNA.
13.2 La transcripción es la síntesis de una
molécula de RNA a partir de un molde de DNA
Todos los RNA celulares son sintetizados a partir de moldes de
DNA mediante el proceso de transcripción (tig. 13-2). En muchos
aspectos, la transc1ipción es similar al proceso de replicación,
pero hay una diferencia fundamental relacionada con la longitud
del 1nolde utilizado. En la replicación, se copian todos los nucleó-
tidos del 1nolde de DNA, pero en la transcripción, solo se trans-
criben a RNA pequeños segmentos de la molécula de DNA, en
general un solo gen o, como máximo, algunos genes. Como no se
necesitan todos los productos génicos al mismo tiempo ni en la
misma célula, la transcripción constante de todos los genes de una
 Transcripción 361

Algunos RNA se
RNA mensajero (mRNA)
transcriben tanto
en células proca-
riontes como
eucariontes; ...
RNA ribosómico (rRNA)
RNA de transferencia (tRNA) T
,...-,:::::=::::::::::..... Transcripción

t
Pre-RNA mensajero (pre-mRNA) ' Algunos virus
RNA nuclear pequeño (snRNA) copian RNA
~ algunos se pro- RNA nucleolar pequeño (snoRNA) directamente
ducen solo en Micro-RNA (miRNA) Replicación a partir de RNA.
l_:ucariontes, ... _ __, RNA de interferencia pequeño (siRNA) del RNA
RNA de interacción con Piwi (piRNA)

L yotros se produ-
cen solo en proca- RNA de CRISPR (crRNA)
~ ontes. PROTEiNA Figura 13-2. Todos los tipos de RNA celu-
lares se transcriben a partir de DNA.

célula sería altamente ineficiente. Más aún, gran parte del D NA (a)
no codifica un producto funcional, y la transcripción de estas
secuencias sería inútil. De hecho, la transcripción es un proce-
so altamente selectivo: cada gen se transcribe so lamente cuan-
do se requieren sus productos. Sin embargo, esta selectividad
plantea un problen1a fundamental para la célula: cómo recono-
cer genes individuales y transcribirlos en el lugar y 1nomento
adecuados.
Al igual que la replicación, la transcripción requiere tres com-
ponentes principales:

l. un molde de DNA,
2. las materias primas (ribonucle6sidos trifosfato) necesarias
para crear una nueva molécula de RNA,
3. el aparato de transcripción, que consiste en las proteínas nece- (b)
sarias para catalizar la síntesis de RNA.

El molde
Molécula
de DNA
En 1970, Osear Miller, h., Barbara Hamkalo y Charles Tho1nas
utilizaron 1nicroscopia electrónica para exruninar el contenido
celul ar y demostrar que e] RNA se trru1scribe a partir de un molde
de DNA. Observaron estructuras similru·es a un árbol de Navidad
dentro de la célula: fibras centrales delgadas (el tronco del árbol)
a las que se uníru1 cadenas (las rrunas) con gránulos (fig. 13-3a).
El agregado de desoxirribonucleasa (una enzima que degrada el
DNA) hizo que desaparecieran las fibras centrales, lo que indicó
"----- y )
M oléculas de RNA transcritas
que los "troncos de árboles" eran moléculas de DNA. La 1ibonu- a partir de DNA
cleasa (una enzima que degrada el RNA) eliminó las cadenas con
gránulos, lo que indicó que las ramas eran RNA. Su conclusión Figura 13-3. Bajo el microscopio electrónico, las moléculas de DNA
en proceso de transcripción muestran estructuras similares a un
fue que cada "árbol de Navidad" representaba un gen en proceso
árbol de Navidad . a) Microfotografía electrónica de estructuras de aspec-
de transcripción (fig. 13-3b). La transcripción de cada gen co-
to similar a árboles de Navidad. b) El tronco de cada "árbol de Navidad"
mienza en la parte supe1ior del árbol; ahí, se ha transcrito poco (una unidad de transcripción) representa una molécula de DNA; las ramas
DNA y las ramas son cortas. A medida que el aparato de trans- del árbol son moléculas de RNA que han sido transcritas a partir del DNA.
cripción desciende por el árbol y transcribe mayor cantidad del A medida que el aparato de transcripción se desplaza por el DNA y transcri-
molde, las moléculas de RNA se alargan y generan las ramas lar- be una mayor cantidad de molde, las molécu las de RNA se vuelven cada
gas de la parte inferior. vez más largas. (Parte a: Dr. Thomas Broken/Phototake).
362 CAPITULO 13

DNA
- 3•
3 ' -....5 '
¡"º Cadena

molde
Por lo general, la cadena
no molde no se transcribe.

La síntesis de RNA es complementaria y DNA

antiparalela respecto de la cadena molde. r=""'-- . .,
RNA Se añaden nuevos nucleótidos al grupo
3'
3'-0H del RNA en crecimiento; por lo tanto,
la transcripción procede en dirección S' - 3'
Cadena molde

Figura 13-4. Las moléculas de RNA sintetizadas son complementarias y antiparalelas res-
pecto de una de las dos cadenas nucleotídicas del DNA, la cadena molde.

LA CADENA TRANSCRITA El molde para la síntesis de RNA, al igual CONCEPTOS

que para la síntesis de DNA, es una cadena sünple de la doble
hélice de DNA. Sin embargo, a diferencia de la replicación, la
transcripción de un gen tiene lugar solo en una de las dos cadenas
nucleotídicas del DNA (fig. 13-4). La cadena nucieotídica usada
para la transcripción se denomina la cadena molde. La otra cade-
na, llamada cadena no molde, en general no se transcribe. Así,
dentro de un gen solo suele transcribirse a RNA una de las cade-
nas nucleotídicas (hay algunas excepciones a esta regla).
Durante la transcripción, se sintetiza una molécula de RNA que
es complementaria y antipara.lela respecto de la cadena molde de
DNA (véase fig. 13-4). El transcrito de RNA tiene la misma pola-
ridad y secuencia de bases que la cadena no molde, con la excep-
ción de que el RNA contiene U en lugar de T. En la mayoría de
los organismos, cada gen se transcribe a partir de una sola cade-
na, pero diferentes genes pueden transcribirse a partir de distintas
cadenas, como se muestra en la figura 13-5. L::•~~~~~~!!....I
EL PROBLEMA 15
Los genes a y e se transcriben
a partir de la cadena (+) ...
RNA
DNA .. 1 ción de la transcripción. Asimismo, el promotor determina el sitio
cadena (-) 5' Gen
cadena (+) 3'
RNA RNA
. . . y b se transcribe a
partir de la cadena (-).
Figura 13-5. El RNA se transcribe a partir de una cadena de DNA. En
la mayoría de los organismos, cada gen se transcribe a partir de una sola
cadena de DNA, pero diferentes genes pueden transcribirse a partir de
cualquiera de las dos cadenas de DNA.
Dentro de un mismo gen, solo una de las dos cadenas de DNA, la
cadena molde, suele ser transcrita a RNA.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿Cuál es la diferencia entre la cadena molde y la cadena no molde?
LA UNIDAD DE TRANSCRIPCIÓN Una unidad de transcripción es un
segmento de DNA que codifica una molécula de RNA y las
secuencias necesarias para su transcripción. ¿Cómo reconoce el
complejo de enzimas y proteínas que lleva a cabo la transcripción
-el aparato de transcripción- una unidad de transcripción? ¿Có-
mo sabe que hebra de DNA leer y cuándo leer y cuándo detener-
se? Esta información es codificada por la secuencia de DNA .
D entro de una unidad de transcripción, hay tres regiones críti-
cas: un promotor, una secuencia codificante de RNA y un termi-
nador (fig. 13-6). El promotor es una secuencia de DNA que el
aparato de transcripción reconoce y a la que se une. Indica cuál
de las dos cadenas de DNA debe ser leída como 1nolde y la direc-
e 3'
5'
de iniciación de la transcripción, el p1imer nucleótido que será
transcrito a RNA. En muchas unidades de transcripción, el pro-
motor está localizado cerca del sitio de ü1icio de la transcripción,
pero él nu smo no es transcrito .
La segunda región crítica de la unidad de transcripción es la re-
gión codificante de RNA , una secuencia de nucleótidos de DNA
que es copiada a una molécula de RNA . El tercer componente
de la unidad de transcripción es el terminador, una secuencia de

Dirección 5' ----Dirección 3'

Cadena no
molde !.<'. Promotor I Región codificante de RNA "'
lf--r-----> ~ < - - - - - - - - - - - - - - - - 7 1
5'
-,,,.,__: ....- 3'
DNA ,
3 5'
/
Cadena molde
1 ..
Sitio de inicio ,ermIna
T • d or /s.· t · ·-
ItI0 d e term1nacIon
Figura 13-6. Una unidad de transcripción incluye un de la transcripción de la transcripción
promotor, una región codificante de RNA y un ter-
minador. Transcrit o de RNA 5' 3'
 Transcripción 363

nucleótidos que señala dónde debe finalizar la transcripción. Por Trifosfato

lo general, los termi nadores forman parte de la secuencia codifi- o o o
cante de RNA; la transcripción se detiene solo después de que el Base
11 11 11
terminador ha sido copiado a RNA. -o-P- 0 - P-O-P- O- CH2
A menudo, los biólogos moleculares utilizan los términos en 1 1 1
sentido 5' (upstream) y en sentido 3' (downstream) para referirse o- o- o-
a la dirección de la transcripción y la localización de secuencias
nucleotídicas que rodean la secuencia codifican te de RNA. Se OH OH
dice que el aparato de transcripción se desplaza en dirección 3' Azúcar
durante la transc1ipción: se une al promotor (que suele estar en
dirección 5' respecto del sitio de iniciación) y se mueve hacia el Figura 13-7. Los ribonucleósidos trifosfato son sustratos utilizados
terminador (que suele estar en dirección 3' respecto del sitio de en la síntesis de RNA.
iniciación).
Cuando se escriben las secuencias de DNA, a menudo solo se
indica la secuencia de una de las dos cadenas. Los biólogos mole- donde PPi representa pirofosfato. Los nucleótidos siempre se
culares suelen escribir la secuencia de la cadena no molde, por- agregan al extremo 3' de la molécula de RNA; por lo tanto, la
que tendrá la misma secuencia que el RNA transcrito a partir del dirección de la transc1ipción es 5' ➔ 3' (fig. 13-8), igual a la direc-
molde (con excepción de que, en el RNA, el U reemplaza a la T ción de la síntesis de DNA durante la replicación. La síntesis
del DNA). Por convención, la secuencia de la cadena no 1nolde se de RNA es co1nple1nentaria y antiparalela a una de las cadenas de
escribe con el extremo 5' a la izquierda y el extremo 3' a la dere- DNA (la cadena molde). A diferencia de la síntesis de DNA, la
cha. El p1in1er nucleótido transcrito (el siti o de iniciación de la síntesis de RNA no requiere un cebador.
transcripción) se numera +1; se asignan números positivos a los
nucleótidos en sentido 3' respecto del sitio de iniciación, y se
asignan números negativos a los nucleótidos en sentido 5'. Así, el CONCEPTOS
nucleótido +34 estaría 34 nucleótidos en sentido 3' respecto del
sitio de iniciación, 111ientras que el nucleótido -75 estaría 75 El RNA se sintetiza a partir de ribonucleósidos trifosfato. La trans-
nucleótidos en sentido 5' del sitio de iniciación. Ningún nucleóti- cripción es 5' ➔3' : cada nucleótido nuevo se une al grupo 3'-0H del
do lleva el número O. último nucleótido agregado a la molécula de RNA en crecim iento.

CONCEPTOS
Una un idad de transcripción es un segmento de DNA que codifica
una molécula de RNA y las secuencias necesarias para su correcta
transcripción . Cada unidad de transcripción incluye un promotor,
una región codificante de RNA y un terminador.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿Cuál de las siguientes frases no describe una función del
promotor?
a. Sirve como secuencia a la que se une el aparato de transcripción.
El aparato de transcripción
Recuérdese que la replicación del DNA requiere de una se1ie de
enzimas y proteínas diferentes. Si bien la transcripción podría
parecer en un principio bastante distinta porque una sola enzima
(la RNA polimerasa) lleva a cabo todos los pasos requeridos para
la transcripción, al inspeccionarlos más de cerca ambos procesos
son en realidad si1nilares. La acción de la RNA polimerasa es
potenciada por una seri e de proteínas accesorias que se unen a la
la iniciación de la síntesis de
[ RNA n, equiere un cebador.

b. Determina el primer nucleótido que debe ser transcrito a RNA.

c. Determina qué cadena de DNA es el molde. 5' 3'
,M· (i /j¡ IJ ,,. lf:, IJ 1/~
d. Señala dónde finaliza la transcripción.
DNA T fise añaden nuevos ]
RNA
nucleótidos al extremo 3' de
la molécula de RNA.

,.T:; fJ'< lf< •/Ji

El sustrato para la transcripción
El RNA se sin tetiza a partir de ribonucleósidos trifosfato (rNTP; .
- ---,
El DNA se desenrolla en el frente
~ e la burbuja de transcripción~
fig. 13-7). Durante la síntesis, se añaden nucleótidos, uno por vez,
al grupo 3' -OH de la molécul a de RNA en crecimiento. Se escin-
den dos grupos fosfato del ribonucleósido trifosfato entrante; el
grupo fosfato restante participa en un enlace fosfo diéster que
~. lfw"&()' b,,- ~ r,
5'
conecta al nucleótido con la cadena de RNA en crecimiento. La , ... y después vuelve a enrollarse.
reacción química global para la adición de cada nucleótido es
Figura 13-8. En la transcripción, los nucleótidos siempre se añaden al
RNA 0 + rNTP ➔ RNAn + 1 + PPi extremo 3' de la molécula de RNA.
364 CAPITULO 13
(a) Factor sigma
o
a controla la unión de la RNA polimerasa al promotor. Sin sigma,
a
--"--""""------+~ B' :
a
o
Centro de la RNA Holoenzima de RNA
pol imerasa polimerasa
(b)
Figura 13-9. En la RNA polimerasa bacteriana, el centro enzimático
está formado por cinco subunidades: dos copias de alfa (a), una sola
copia de bet a {~), una sola copia de beta prima {~') y una sola copia
de omega {ro). El centro enzimático cat aliza la elongac:ión de la
molécula de RNA mediante el agregado de nucleótidos de RNA. a) El
factor sigma (cr) se une al centro de la holoenzima, que es capaz de unirse
a un promotor e iniciar la transcripción. b) El modelo molecular muestra la
RNA polimerasa (azul) uniéndose al DNA (violeta) y sintetizando RNA (rojo}.
(Parte b: Laguna Design/Science Photo Li brary).
polimerasa y la abandonan en diferentes etapas de l proceso. Cada
proteína accesoria es responsable de cumplir o regular una fun-
ción especial. Por consiguiente, la transcripción, al igual que la
replicación, requiere de un conjunto de proteínas.
RNA POLIMERASA BACTERIANA Por lo general, las células bacteria-
nas tienen solo un tipo de RNA polünerasa, que cataliza la sínte-
sis de todas las clases de RNA bacte1iano: n1RNA, tRNA y rRNA.
La RNA poli merasa bacteriana es una enzima grande multimérica
(que significa que está formada por varias cadenas polipeptídicas).
En el interior de la n1ayoría de las RNA polimerasas bacteria-
nas, hay cinco subunidades (cadenas polipeptídicas individuales
que componen el centro de la enzima: dos copias de una subuni-
dad llamada alfa [ a] y copias únicas de las subunidades beta (,B],
beta prima [ ,8] y omega [ cu] [fig. 13-9]). La subunidad ro no es
esencial para la transcripción, pero ayuda a estabilizar la enzima.
El centro de la enziln a (core) cataliza la elongación de la molécu-
la de RNA mediante la adición de nucleótidos de RNA. Otras
subu nidades funcionales se unen al centro de la enzima en etapas
pa1ticulares del proceso de transcripción. El factor sigma (o)
la RNA polilnerasa iniciará la transcripción en un punto aleatorio
del DNA. Una vez que sig ma se ha asociado con el centro de la
enzima (y ha formado una holoenzima), la RNA polünerasa se
une en forma estable solo a la región del promotor y comienza la
transcripción en el sitio de iniciación con·ecto. El factor sigma es
necesario solo para la unión al promotor y la iniciación; cuando
se han unido algunos nucleótidos de RNA, sigma suele despren-
derse del centro de la enzilna. Muchas bacterias tienen múltiples
tipos de fac tores sign1a; cada tipo de sig1na inicia la unión de la
RNA polimerasa a un conjunto particul ar de pro motores.
Las rifamicinas son un grupo de antibióticos que destruyen
células bacterianas por inhibición de la RNA polimerasa. Estos
antibióticos se utilizan mucho para el tratamiento de la tuberculo-
sis, una enfermedad que mata casi a 2 millones de personas por
año en todo el mundo. Las estructuras de las RNA polünerasas
bacterianas y las RNA polimerasas eucariontes son lo bastante
diferentes para que las rifamicinas inhiban las primeras sin inter-
ferir con las últimas. Investigaciones recientes demostraron que
vaii as rifamicinas inhiben la RNA polimerasa uniéndose a la
parte de la RNA polirnerasa que actúa como pinza sobre el DNA
y bloqueándola, lo que impide que la RNA polimerasa interactúe
con el promotor del DNA.
RNA POLIMERASAS EUCARIONTES La mayoría de las células euca-
riontes tienen tres tipos distintos de RNA polimerasa, cada una
de las cuales es responsable de transcribir una clase diferente de
RNA: la RNA polimerasa I transcribe rRNA; la RNA polimera-
sa II transcribe pre-mRNA, snoRNA, algunos miRNA y algunos
snRNA; y la RNA polimerasa m transcribe otras moléculas
pequeñas de RNA, específicamente tRNA, rRNA pequeño, algu-
nos miRNA y algunos snRNA (cuadro 13-3). Las RNA polime-
rasas I, II y III se encuentran en todos los eucariontes. En las plan-
tas, se hallaron otras dos RNA polimerasas, RNA polimerasa IV
y RNA polimerasa V. Las RNA polimerasas IV y V transcriben
RNA que desempeña un papel en la meti.lación del DNA y la
estructura de la cromatina.
Cuadro 13-3 RNA polimerasas eucariontes
Tipo Presente en Transcribe
RNA polimerasa 1 Todos los rRNA grandes
eucariontes
RNA polimerasa 11 Todos los Pre-m RNA, algunos
eucariontes snRNA, snoRNA, algunos
miRNA
RNA polimerasa 111 Todos los tRNA, rRNA pequeños,
eucariontes algunos snRNA, algunos
miRNA
RNA polimerasa IV Plantas Algunos siRNA
RNA polimerasa V Plantas Moléculas de RNA que
participan en la forma-
ción de heterocromatina
 Transcripción 365

Todas las polimerasas eucariontes son enzimas grandes, mu Jti- La secuencia consenso
méricas, que suelen estar formadas por más de una docena de comprende los nucleótidos
subunidades. Algunas subunidades son comunes a todas las RNA hallados con mayor fre-
polimerasas , mientras que otras se limitan a una ellas. Al igual cuencia en cada sitio. 5'- T ATA A A A G- 3'
que en las células bacterianas, una serie de proteínas accesorias se Secuencias 5'- T C CA A T G C- 3'
unen al centro de la enzima e inciden en su función. reales 5'-A ATA G C C G- 3'
'- TAC A G G A C- 3'
Secuencia
CONCEPTOS consenso -5'-T A y A R N A c;G-3'

Las células bacterianas tienen un solo tipo de RNA polimerasa, que

Esta anotación sig-;;-i
consiste en el centro de la enzima y otras subunidades que partici- Las pirimidi- fica que la citosina y
pan en diversas etapas de la transcripción. Las células eucariontes nas se indican la guanina son ig__J
ual
tienen varios tipos distintos de RNA polimerasas, que transcriben [ con Y. j de frecuentes.
diferentes clases de moléculas de RNA.
Las purinas se
indican con R.
N significa que l
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
ninguna base
en particular es

¿Cuál es la función del factor sigma?

más frecuente. j
Figura 13-10. Una secuencia consenso consiste en las bases encon-
tradas con mayor frecuencia en cada posición de un grupo de
secuencias relacionadas.

13.3 La transcripción en las bacterias consiste

en iniciación, elongación y terminación
Ahora que hemos considerado algunos de los principales compo-
nentes de la transcripción, estamos preparados para analizar en for-
ma detallada el proceso. L a transcripción puede dividirse en tres
etapas:
l . iniciación, en la que el aparato de transcripción se ensambla
con el promotor y comienza la síntesis de RNA;
2. elongación, en la que el DNA pasa a través de la RNA polime-
rasa, esta lo desenrolla y añade nuevos nucleótidos, uno por
vez, al extremo 3' de la cadena de RNA en crecimiento;
3. terminación, el reconocimiento del final de la unidad de trans-
cripción y la separación de la molécula de RNA del molde de
DNA.
Examinaremos p1imero cada uno de estos pasos en las células
bacterianas, en las que se comprende mejor el proceso; luego,
considerare1nos la transcripción en eucariontes y archaea.
Iniciación
La iniciación comprende todos los pasos necesarios para con1en-
zar la síntesis de RNA, como 1) reconocimiento del promotor,
2) formación de la burbuja de transcripción, 3) creación de los
primeros enlaces entre rNTP y 4) escape del aparato de transclip-
ción del promotor.
El inicio de la transcripción requiere que el aparato de trans-
cripción reconozca al promotor y se una a él. En este paso, se
refuerza la selectividad de la transcripción; la unión de RNA poli-
merasa al promotor determina qué partes del molde de DNA
deben transcribirse y con qué frecuencia. Diferentes genes se
transcriben con distintas frecuencias, y la unión al promotor es la
responsable fundamental de determinar la frecuencia de trans-
cripción de un gen particular. Asimismo, los promotores tienen
diferentes aflllidades por la RNA polünerasa. Aun dentro de un
solo promotor, la afinidad puede variar con el transcurso del tiem-
po según la interacción del promotor con la RNA polimerasa y
una serie de otros factores.
PROMOTORES BACTERIANOS La información esencial para la uni-
dad de transcripción -dónde comenzará la transcripción, qué
cadena debe ser leída y en qué dirección se moverá la RNA poli-
merasa- está incluida en la secuencia nucleotídica del promotor.
Los promotores son secuencias de DNA que son reconocidas por
el aparato de transcripción y son necesarias para que tenga lugar
la transcripción. En las células bacterianas, los promotores suelen
ser adyacentes a una secuencia codificante de RNA.
Un examen de n1uchos promotores de E. coli y otras bactetias
revela una caracterís6ca general: si bien la mayoría de los nucleó-
tidos dentro de los promotores varían de secuencia, segmentos
cortos de nucleótidos son comunes a muchos. Además, el espa-
ciamiento y la localización de estos nucleótidos respecto del sitio
de inicio de la transcripción son sinúlares en la mayoría de los
promotores. Estos segmentos cortos de nucleótidos comunes se de-
nominan secuencias consenso; "secuencia consenso" hace refe-
rencia a secuencias que tienen considerable similitud, o consenso
(fig. 13-10). La presencia de consenso en un conjunto de nucleó-
tidos suele implicar que la secuencia se asocia con una función
importante. (l lNTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 21
La secuencia consenso más frecuente, hallada en casi todos los
promotores bacterianos, está centrada al rededor de 10 pb en sen-
tido 5' respecto del sitio de iniciación. Denominada secuencia
consenso -10 o, en ocasiones, caja de Pribnow, su secuencia con-
senso es
5'-T A T AA T-3'
3'-ATATTA-5'
que a menudo se escribe simple1nente TATAAT (fig. 13-11).
Recuérdese que TATAAT es solo la secuencia consenso, que
366 CAPITULO 13
5'
DNA ,
3
Figura 13-11. En los promotores bacterianos, las secuencias
consenso se encuentran en dirección 5' respecto del sitio de
iniciación, aproximadamente en las posiciones -10 y -35.
representa los nucleótidos hallados más comúnmente en cada una
de estas posiciones. En la mayoría de los promotores procarion-
tes, la secuencia real no es TATAAT.
Otra secuencia consenso común a la mayoría de los promotores
bacte1ianos es TTGACA, que se ubica alrededor de 35 nucleóti-
dos en dirección 5' respecto del sitio de iniciación y se denomina
secuencia consenso-35 (véase fig. 13-11). Los nucleótidos a uno
y otro lado de las secuencias consenso - 10 y -35, y aquellas entre
ellas, varían mucho entre los distintos promotores, lo que sugiere
que estos nucleótidos no son muy in1portantes para el reconoci-
miento del pron1otor.
En los promotores bacterianos, se estudió la función de estas
secuencias consenso mediante la inducción de mutaciones en dis-
tintas posiciones dentro de las secuencias consenso y la observa-
ción del efecto de los cambios sobre la transcripción. Los resulta-
dos de estos estudios revelan que la mayoría de las sustituciones
de bases dentro de las secuencias consenso -10 y -35 reducen la
velocidad de transcripción; estas 1nutaciones se denonlinan 1nuta-
ciones lentificadoras (down mutations), porque enlentecen la
velocidad de transcripción. En ocasiones, un cambio particular en
una secuencia consenso aumenta la velocidad de transcripción;
este tipo de cambio se denomina 1nutación activadora (up muta-
tion).
Como se 1nencionó antes, el factor sigma se asocia con el cen-
tro de la enzima (fig. 13-12a) para formar una holoenzima que se
une a las secuencias consenso -35 y - 10 del promotor de DNA
(fig. 13-12b). Aunque se une solo a los nucleótidos de las secuen-
cias consenso, la enzima se extiende de -50 a +20 cuando está
unida al promotor. Al principio, la holoenzüna se une al pro1no-
tor en fonna débil, pero después sufre un cambio estructural que
le permite uniTse más estrechamente y desenrollar la doble hélice
de DNA (fig.13-12c). El desenrollamiento comienza dentro de la
secuencia consenso - 1O y se extiende en dirección 3' durante
alrededor de 14 nucleótidos, incluido el sitio de iniciación (de los
nucleótidos - 12 a +2).
A lgunos promotores bacterianos contienen una tercera secuen-
cia consenso que también interviene en el inicio de la transclip-
ción. Denominada elemento en dirección 5' (usptream element),
esta secuencia contiene una serie de pares A-T y se localiza apro-
xünadamente entre las posiciones -40 y -60. Una serie de proteí-
nas pueden unirse a las secuencias del pron1otor y cercanas a él;
algunas estünulan la velocidad de transcripción, y otras la repri-
n1en. En e.l capítulo 16, consideraremos estas proteínas, que regu-
lan la expresión génica. L.:►~~~~~=!:~!:!:!~~~~~
Promotor Cadena
no molde
TTGACA TATAAT 1
+1 1
Cadena
-35 -10 L. molde
Secuencia Secuencia Sitio de inicio
consenso consenso dela
t ranscripción
Transcrito de RNA 5'
CONCEPTOS
Un promotor es una secuencia de DNA adyacente a un gen y reque-
rida para la transcripción. Los promotores contienen secuencias con-
senso cortas que son importantes en el inicio de la transcripción.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
¿ Qué es lo que se une a la secuencia consenso -1 O hallada en la
mayoría de los promotores bacterianos?
a. La holoenzima (centro de la enzimas + sigma).
b . El factor sigma solo.
c. El centro de la enzima solo.
d. mRNA.
SÍNTESIS INICIAL DEL RNA Una vez que la holoenzima se ha unido
al promotor, la RNA polimerasa se posiciona sobre el sitio de ini-
cio de la transcripción (en la posición + 1) y desenrolla el DNA
para producir un molde monocatenario. La orientación y el espa-
ciam iento de las secuencias consenso de una cadena de DNA
determinan qué cadena será el molde para la transcripción y, en
consecuencia, su dirección.
La posición del sitio de iniciación depende no de las secuencias
allí presentes, sino de la localización de las secuencias consenso,
que posiciona a la RNA polimerasa de manera que el sitio activo
de la enzü11a esté alineado para el inicio de la transcripción en + 1.
Si las secuencias consenso se desplazan artificialmente en direc-
ción 5' o en dirección 3', la localización del punto de inicio de la
transcripción cambia en forma correspondiente.
Para comenzar la síntesis de una molécula de RNA, la RNA
polimerasa aparea la base de un ribonucleósido trifosfato con su
base co1nplementaria en el siti o de iniciación de la cadena molde
de DNA (jtíg. 13-12dJ. No se requiere ningún cebador para iniciar
la síntesis del extremo 5' de la molécula de RNA. Cuando se
añade el nucleótido al extremo 3' de la molécula de RNA en cre-
cimiento, se escinden dos de los tres grupos fosfato. Sin embargo,
como el extren10 5' del prin1er ribonucleósido trifosfato no inter-
viene en la formación de una unión fosfodiéster, conserva sus tres
grupos fosfato. Por lo tanto, una molécula de RNA tiene, orlo me-
nos al principio, tres grupos fosfato en su extremo 5' (fig. 13-1 ).
 Transcripción 367

Factor Ó El factor sigma se asocia con el centro

Centro de la RNA polimerasa sigma '""""==--' enzimático para formar una holoenzima, ...

(a)
'-►• In icio de la t r anscr ipción

Holoenzima
l a
... que s.e une a las secuencias
consenso - 35 y -1 O del promotor.
\ +
(b)

Cadena molde
\ O
.r'
~-y-:¡::::::::----------> GGATTCG

(c)

p -1p - P\.-N La homolenzima se une con firmeza al

Nucleósido promotor y desenrolla el DNA bicatenario. 5'
trifosfato (NTP)

a ' Un nucleósido trifosfato complementario

del DNA en el sitio de iniciación sirve como
(d) primer nucleótido de la cadena de RNA.
......,
N
¼...:.::::.:::.--.::.-=..-:..-:::-:_-=:-=-=--=--=--=--=->
Se escinden dos grupos fosfato de cada
p P¡
~ nucleósido trifosfato ulterior, lo que crea un
I ~ucleótido de RNA que se agrega al extremo
a L.:_' de la molécula de RNA en crecimiento. _J CCTAAGC

~-·- 5'

• El factor sigma es liberado cuando la RNA

polimerasa se mueve más allá del promotor.

~
------>
(e) •
5'

f Conclusión: la transcripción del RNA se in icia cuando el centro

'
~ la RNA p olimerasa se une al pr omotor con la ayuda de sigm: J

Figura 13-12. En las bacterias, la transcripción se lleva a cabo mediante Ea RNA polimerasa, que se
debe unir al f actor sigma para que se inicie el proceso.

A menudo, en el curso de la iniciación, la RNA polimerasa
genera y libera de manera reiterada transcritos cortos, de 2 a 6
nucleótidos de longitud, 1nientras aún está unida al prom.otor. Este
proceso, conocido como iniciación abortiva, se observa en pro-
cariontes y eucariontes. Tras varios intentos abortivos, la polime-
rasa sintetiza una molécula de RNA de 9 a 12 nucleótidos de lon-
gitud, que le permite avanzar a la fase de elongación.
Elongación
Al final de la iniciación, la RNA polimerasa sufre un cambio de
conformación (forma) y, de ahí en adelante, ya no puede unirse a
las secuencias consenso del promotor. Este cambio permite que la
polimerasa escape del promotor y comience la transcripción en
sentido 3'. Por lo general, la subunidad sig1na se libera después
de la in iciación, aunque algunas poblaciones de RNA poJimerasa
pueden conservar a sigma durante toda la elongación.
A .medida que se mueve en sentido 3 ' a lo largo del m.olde, la
RNA polimerasa desenrolla progresivamente el DNA en el borde
líder (en sentido 3 ') dela burbuja de transcripción, une nucleótidos
a la 1nolécula de RNA según la secuencia del molde y vuelve a
enrollar el DNA en el borde posterior (en sentido 5 ') de la burbuja
de transcripción. En células bacterianas a 37 ºC, se agregan alrede-
dor de 40 nucleótidos por segundo. Esta velocidad de síntesis de
RNA es mucho más baja que la de síntesis de DNA, que alcanza
de 1000 a 2000 nucleótidos por segundo en células bacterianas.
368 CAPITULO 13
BURBUJA DE TRANSCRIPCIÓN La transcripción ti.ene lugar dentro
de un corto segmento de alrededor de 18 nucleótidos de DNA
desenrollado: la burbuja de transcripción. Dentro de esta región,
se sintetiza RNA en forma continua usando como molde DNA
monocatenario. Se aparean aproximadamente 8 nucleótidos de
RNA recién sintetizado con los nucleótidos del molde de DNA
por vez. A medida que el aparato de transcripción progresa por el
molde de DNA, genera superenrollamiento positivo por delante
de la burbuja de transc1ipción y superenrollamiento negativo por
detrás de ella. Es probable que las enzimas topoisomerasas ali-
vien la tensión asociada con el desenrollanúento y el nuevo enro-
llamiento del DNA durante la transcripción, como lo hacen
durante Ja replicación del DNA.
PAUSAS DE TRANSCRIPCIÓN Una serie de características del RNA o
del DNA, por ejemplo estructuras secundruias, secuencias especí-
ficas o presencia de nucleosomas, hacen que la RNA polimerasa
detenga de manera transitoria la etapa de elongación de la trans-
cripción. A menudo, las pausas son causadas por retroceso (back-
tracking ), cuando la RNA polimerasa se desliza hacia atrás a lo
largo de la cadena molde de DNA. El retroceso hbera el grupo
3'0H de la molécula de RNA del sitio activo de la RNA polime-
rasa y detiene en forma transitoria la síntesis adicional de RNA.
Las células utilizan varios mecanisn1os para 1ninimizar el retroce-
so, co1110 proteínas que escinden el RNA retrocedido del sitio
activo, lo que genera un nuevo 3'0H al que pueden añadirse nue-
vos nucleótidos. En las células bacterianas, la traducción del
mRNA por los ribosomas sigue de cerca a la transcripción (véase
cap. 15), y la presencia de ribosomas que se desplazan a lo largo
del 1nRNA en dirección 5 ' ➔3' también impide el retroceso de la
RNA polimerasa en el extremo 3' del 1nRNA.
Las pausas transitorias de la transcripción son unportantes para
coordinar la transcripción y la traducción en las bacterias, así
como para coordinar el procesamiento del RNA en los eucarion-
tes. Asimismo, las pausas inciden en la velocidad de la síntesis de
RNA. En ocasiones, una pausa puede ser estabilizada por secuen-
cias del DNA que, finalmente, determinan la terminación de la
trru1scripción (véase la sección sigu i.e nte sobre terminación).
EXACTITUD DE LA TRANSCRIPCIÓN Si bien la RNA polimerasa es
bastante exacta al incorporar nucleótidos en la cadena de RNA en
crecimiento, de hecho a veces aparecen errores. La investigación
demostró que la RNA polim erasa es capaz de realizar un tipo de
corrección en el curso de la transcripción. Cuando la RNA poli-
merasa incorpora un nucleótido que no es compatible con el
molde de DNA, retrocede y escinde los últimos dos nucleótidos
(incluido el nucleótido mal incorporado) de la cadena de RNA en
crecimiento. Después, la RNA polimerasa avanza y vuelve a
transcribir el molde de DNA.
, CONCEPTOS
La transcripción comienza en el sitio de iniciación, que está determi-
nado, en las células bacterianas, por la unión de la RNA polimerasa
a las secuencias consenso del promotor. No se requiere ningún
cebador. La transcripción tiene lugar dentro de la burbuja de t rans-
cripción. El DNA se desenrolla por delante de la burbuja y se vuelve
a enrollar detrás de esta. En el proceso de transcripción, hay pausas
frecuentes.
Terminación
La RNA polimerasa agrega nucleótidos al extremo 3' de la molé-
cula de RNA hasta que se transcribe un terminador. La mayoría
de los terminadores se encuentran en dirección 5' respecto del
sitio en el que, en realidad, tiene lugar la terminación. Por lo tan-
to, la transcripción no se detiene de manera súbita cuando la poli-
merasa alcanza un terminador, como hace un automóvil ante una
señal de alto. En cambio, la transc1ipción se detiene después de
que se ha transcrito el terminador, como un automóvil que se
detiene solo después de haber pasado por un lomo de burro. En el
terminador, se requieren varios eventos superpuestos para que
finalice la tran scripc1ón: la RNA poli1nerasa debe dejar de sinte-
tizar RNA, la molécula de RNA debe ser liberada de la RNA poli-
merasa, la molécula de RNA recién sintetizada se debe disociar
por completo del DNA, y la RNA polimerasa se debe desprender
el molde de DNA.
Las células bacterianas tienen dos tipos ünportantes de termi-
nadores. Los terminadores dependientes de rho pueden causar el
final de la transc1ipción solo en presencia de una proteína auxiliar
denominada factor rho. Los terminadores independientes de
rho (conocidos también como terminadores intrínsecos) pueden
causar el final de la transcripción en ausencia de rho.
TERMINADORES DEPENDIENTES DE RHO Los terminadores depen-
dientes de Rho tienen dos características. La primera es el propio
terminador, que consiste en secuencias de DNA que causan que
la RNA polimerasa haga una pausa. La segunda característica es
una secuencia de DNA que codifica un segmento de RNA en
dirección 5' respecto del terminador, que suele ser rico en nucle-
ótidos de citosina y carece de estructuras secundarias. Esta se-
cuencia se denonlina sitio de utilización de rho (rut); sirve con10
sitio de unión para la proteína rho. Una vez que rho se une al
RNA, se mueve hacia su extremo 3' siguiendo a la RNA pohme-
rasa 1ng. 13-11). Cuando la RNA polimerasa encuentra al termi-
nador, efectúa una pausa, lo que permite que rho la alcance. La
proteína rho tiene actividad de helicasa, que emplea pru·a desen-
rollar el híbrido RNA-DNA en la burbuja de transcripción, lo que
determina el final de la transcripción.
TERMINADORES INDEPENDIENTES DE RHO Los terminadores inde-
pendientes de Rho, que representan alrededor del 50% de los ter-
minadores, tienen dos características en común. Primero, contienen
repeticiones inve1tidas, que son secuencias de nucleótídos en una
cadena que están invertidas y son complementarias. Cuando las
repeticiones invertidas se han transcrito a RNA, se forma una
estructura secundaria en horquilla (fig. 13-12V. Segundo, en los ter-
minadores independientes de rho, Ta segunda repetición invertida
del 1nolde de DNA es seguida de una cadena de siete a nueve nucle-
ótidos de adenina. Su transc1ipción produce una cadena de nucleó-
tidos de uracilo después de la horquilla en el RNA transcrito.
La cadena de uracilos de la molécu la de RNA provoca una
pausa de la RNA polimerasa, lo que da tiempo para la formación
de una horquilla. La evidencia sugiere que la fonnación de la hor-
quilla desestabiliza el apru·eamiento DNA-RNA, lo que causa que
la molécula de RNA se separe de su 1nolde de DNA. La separa-
ción puede ser faci litada por los apareamientos de bases adenina-
uracilo, que son relativamente débiles respecto de otros tipos de
apareamientos de bases. Cuando el transcrito de RNA se ha sepa-
rado del molde, la síntesis de RNA ya no puede continuar (véase
1tig. 13-1 :,>.
L.:.J►!::!:!:!::!:::!::!::!:!::!.!:!:!:::E:!:::2!!:::!!!::E~=i:!:=::::!::!:2:!:::!J
 Transcripción 369

RNA polimerasa Un terminador independiente de rho contiene una repetición

\. invertida seguida de una cadena de alrededor de seis
nucleótidos de adenina.
3'

Sitio rut' r . Repeticiones invertid as

Sitio terminador
DNA ~
- -===~ Rho se une al sitio rut y se
5'
\ mueve el extremo 3'.
rho

Cuando la RNA polimerasa encuentra una

secuencia terminadora, hace una pausa .. .
3'

3'
Las repeticiones invertidas
se transcriben a RNA.

S'
... y rho la alcanza.
Transcrit o de RNA La cadena de U hace que la RNA
polimerasa se detenga ...
-----
3'
,_...,.t .
_L AAAAAAA
Gracias a la actividad de helicasa~ S'
rho desenrolla el híbrido DNA-RNA
_1.
y termina la transcripción.
, ... y las repeticiones inver- Ó ... qve desestabiliza el7
5'
tidas del RNA se pliegan
para formar un bucle en
Lapareamiento DNA-R~
Figura 13-13. En algunos genes bacterianos, la termina-
t forma de horquilla, .. .... j
ción de la transcripción requiere la presencia de la pro-
teína rho.

MRNA POLICISTRÓNICO En las bacterias, a menudo se transcribe

un grupo de genes a una sola molécula de RNA, que se denomi-
na RNA policistrónico. Por consiguiente, el RNA policistrónico
se produce cuando hay un solo terminador al final de un grupo de , El transcrito de RNA
5' 3'
varios genes que son transcritos juntos, en lugar de que cada gen se separa del molde,
lo que termina la ~
tenga su propio terminador. El RNA policistrónico aparece, de transcripción. _J
hecho, en algunos eucari ontes como el Caenorhabditis elegans,
pero es infrecuente. Puede observar el proceso de transcripción, Conclusión: la transcripción -- Horquilla
termina cuando las repeticiones
incluidas la iniciación, la elongación y la terminación, en la
invertidas forman una horquilla,
Animación 13.1. La animación muestra cómo interactúan las seguida de una cadena de uracilos.
diferentes partes de la unidad de transcripción para producir la
síntesis co1npJeta de una molécula de RNA. Figura 13-14. En las bacterias, la terminación independiente de rho
es un proceso de múltiples pasos.

CONCEPTOS
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
La transcripción finaliza después de que la RNA polimerasa transcri-
be un terminador. Las células bacterianas t ienen dos tipos de termi- Reglas básicas de la transcripción
nador: un terminador independient e de rho, que la RNA polimerasa
Antes de examinar el proceso de la transcripción en eucariontes,
puede reconocer por sí misma, y un terminador dependient e de rho,
resumamos algunos de los principios generales de la t ranscripción
que la RNA polimerasa puede reconocer solo con la ayuda de la pro-
en las bacterias.
teína rho.
1. La transcripción es un proceso select ivo; solo ciertas partes del
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6 DNA se transcriben por vez.
2. El RNA se transcribe a partir de DNA monocatenario. Dentro de
¿Qué caract erísticas son las halladas con mayor frecuencia en los un gen, solo una las dos cadenas de DNA (la cadena molde)
terminadores independientes de rho? suele copiarse a RNA.
370 CAPITULO 13
3. En la síntesis de RNA, se utilizan como sustratos ribonucleósidos
trifosfato. Se escinden dos g rupos fosfato de un ribonucleósido
trifosfato, y se une el nucleótido resu ltante al grupo 3'-0H de la
cadena de RNA en crecimiento.
4. Las moléculas de RNA son antiparalelas y complementarias res-
pecto de la cadena molde de DNA. La transcripción siempre es
en di rección S'A:3', lo que significa que la molécula de RNA
crece en el extremo 3'.
5. La transcripción depende de la RNA polimerasa: una enzima mul-
timérica, compleja. La RNA polimerasa consiste en un centro
enzimático, que es capaz de sintetizar RNA, y otras subun idades
que pueden unirse de manera transitoria para cumplir funciones
adiciona les.
6. El factor sigma permite que el centro enzimático de la RNA poli-
merasa se una a un promotor e inicie la transcripción.
7. Los promotores contienen secuencias cortas cruciales para la
unión de la RNA poli merasa al DNA; estas secuencias consenso
están intercaladas con nucleótidos que no desempeñan ningún
papel conocido en la transcripción .
8. La RNA polimerasa se une al DNA en un promotor, comienza a
transcribir en el sitio de in iciación del gen y final iza la transcrip-
ción después de haber t ranscrito un t erminador.
9. Las enzimas topoisomerasas eliminan el superenrollamiento que
aparece por delante y por detrás de la burbuja de transcripción a
medida que el DNA es desenrollado y vuelto a enrollar durante la
transcripción .
13.4 La transcripción en eucariontes es similar
a la transcripción en bacterias, pero tiene
algunas diferencias importantes
La transcripción en eucariontes es silnilar a la transc1ipción en
bacterias en cuanto a que incluye iniciación, elongación y terrru -
nación, y a que los principios básicos de la transcripción ya rese-
ñados son aplicables a la tran scripción en eucariontes. Sin embar-
go, hay algunas diferencias importantes. Las células eucariontes
tienen tres RNA polimerasas diferentes , cada una de las cuales
transcribe una clase diferente de RNA y reconoce un tipo distin-
to de pron1otor. Por consigui ente, no es posible describir un pro-
motor genérico para las células eucariontes, sino que la descrip-
ción del promotor depende de si este es reconocido por la RNA
polimerasa I, II o III. Otra diferencia es el carácter del reconoci-
miento del promotor y la iniciación. Numerosas proteínas partici-
pan en la unión de las RNA polin1erasas eucariontes a los moldes
de DNA, y los diferentes tipos de promotores requieren di stintas
proteínas.
Transcripción y estructura
de los nucleosomas
La transcripción exige que las secuencias de DNA sean accesi-
bles a la RNA polimerasa y otras enzimas. Sin embargo, en las
células eucariontes, el DNA forma complejos con proteínas his-
tonas en la cromatina altamente comprimida (véase lfig. 11-40.
¿Cómo p ueden acceder las proteínas necesa1ias para la transcrip-
ción al DNA eucarionte cuando este forma un complejo con his-
tonas?
La respuesta a esta pregunta es que la estn1 ctura de la cro1na-
tina se modifica antes de la transcripción, de manera que el DNA
adopta una configuración más abierta y más accesible a la
1naquinaria de transcripción. Varios tipos de proteínas intervie-
nen en la modificación de la cromatina. Las acetiltransferasas
añaden grupos acetilo a los aminoácidos en los extremos de las
histonas, lo que desestabiliza la estructura del nu cleosoma y
torna más accesible el DNA. Otros tipos de modificación de las
histonas también pueden afectar el emp aquetamiento de la cro-
1nati na. Ade1nás, proteínas deno1ninadas rernodeladoras de la
cromatina pueden unirse a esta y desplazar los nucleoso111as de
los promotores y otras regiones importantes para la transcrip-
ción. En el capítulo 17, se estudiará con más detalle el papel de
los cambios de la estructura de la cromatina asociados con la
., , .
expres1on gemca.
CONCEPTOS
El inicio de la transcripción requiere la modificación de la estructura
de la cromat ina, de manera que el DNA sea accesible a la maqu ina-
ria de transcripción.
Promotores
Una diferencia significativa entre la transcripción en bacterias y
en eucariontes es la existencia de tres RNA polimerasas eucarion-
tes diferentes, que reconocen distintos tipos de promotores. En las
células bacterianas, la holoenzima (RNA polimerasa más factor
sigma) reconoce secuencias del promotor y se une directan1ente a
ellas. En las células eucariontes, el reconocimiento del promotor
depende de proteínas accesorias que se unen a este y después
reclutan una RNA polimerasa específica (1, II o ill) para el pro-
motor.
Una clase de proteínas accesori as comprende los factores de
transcripción general que, junto con la RNA polimerasa, forman
el aparato de transcripción basal, un grupo de proteínas que se
ensatnblan cerca del sitio de iniciación y son suficientes para ini-
ciar niveles mínimos de transcripción. Otra clase de proteínas
accesorias consiste en proteínas activadoras de la transcrip-
ción, que se unen a secuencias específicas del DNA e inducen
niveles más altos de transcripción al estimular el ensan1blaje del
aparato de transcripción basal en el sitio de inicio.
Centraremos nuestra atención en los promotores reconocidos
por la RNA polimerasa II, que transcribe los genes que codifican
proteínas. Por lo general, un promotor para un gen transcrito por
RNA poli1nerasa II está formado por dos partes principales: el
promotor mínimo (core prometer) y el promotor regulador.
PROMOTOR MÍNIMO El promotor mínimo se localiza inmediata-
mente en sentido 5' respecto del gen tfig. 13-l;u y es el sitio al
que se une el aparato de transcripción basal. Por lo general, inclu-
ye una o más secuencias consenso. Una de las más frecuentes de
estas secuencias es la caja TATA, que tiene la secuencia consenso

Elemento de
reconocimiento
de TFIIB Caja TATA
DNA
r----A'---, ~ r_....,..__,
5'
3'
II Gtc•,,•,, CGCC TATAAA
-35 -25
'-y--'
Promotor Promotor
regulador mínimo
Figura 13-15. Los promotores de los genes transcritos por la RNA polimerasa II consisten en
un promotor mínimo y un promotor regulador que contienen secuencias consenso. No todas
las secuencias consenso mostradas se encuentran en todos los promotores.
TATAAA y se localiza de -25 a -30 pb en sentido 5' respecto del
sitio de iniciación. L~ figura 13-1~ muestra otras secuencias con-
senso que pueden hall arse en el promotor mínimo de los genes
transcritos por la RNA polimerasa II. Los factores de transcrip-
ción reconocen estas secuencias consenso, se unen a ellas y sir-
ven como plataforma para el ensainblaje del aparato de transcrip-
ción basal.
PROMOTOR REGULADOR El promotor regulador se localiza inme-
diatamente en sentido 5' respecto del promotor mínimo. En los
promotores reguladores, es posible hallar una variedad de secuen-
cias consenso diferentes que se pueden mezclar y co1nbinar en
diversas formas. Las proteínas activadoras de la transcripción se
unen a estas secuencias, se ponen en contacto directo o indirecto
con el aparato de transcripción basal e inciden en la velocidad a
Ja que se inicia la transcripción. Las proteínas activadoras tam-
bién regulan la transcripción mediante la unión a secuencias más
distantes denominadas intensificadoras. El DNA entre un inten-
sificador y el promotor forma un rulo, de manera que las proteí-
nas activadoras de la transcripción unidas al intensificador pueden
interactuar con la 1naquinaria de transcripción basal en el pro1no-
tor mínimo. En el capítulo 17, se anali zan con más detalle los
intensificadores.
PROMOTORES DE LAS RNA POLIMERASAS I Y 111 La RNA polimera-
sa I y la RNA polimerasa ill reconocen, cada una, promotores
distintos de los reconocidos por la RNA poli1nerasa II. Por ejem-
plo, los promotores para genes de rRNA pequeño y tRNA , trans-
critos por la RNA polimerasa III, contienen promotores internos
ubicados en sentido 3' respecto del sitio de iniciación y son trans-
critos en el RNA.
CONCEPTOS
Los factores de transcripción general y la RNA polimerasa se ensam-
blan en el aparato de transcripción basal, que se une al DNA cerca
del sitio de iniciación y es necesario para que tengan lugar niveles
mínimos de transcripción. Otras proteínas denominadas activadoras
de la transcripción se unen a otras secuencias consenso de promo-
tores e intensificadores e inciden en la velocidad de transcripción.
Transcripción 371
Elemento promotor
Elemento mínimo en
iniciador dirección 3'
A A
r-~----'\
YYAN-VAYY R~'rCGTG
+l +30
1 ..
Sitio de inicio
de la transcripción
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
¿ Cuál es la diferencia entre el promotor mínimo y el promotor regu-
lador?
a. Solo el promotor mínimo tiene secuencias consenso.
b. El promotor regu lador está más alejado en sentido 5' respecto
del gen.
c. Los factores de transcripción se unen al promotor mínimo; las
protefnas activadoras de la transcripción se unen al promotor
regulador.
d. Tanto b como c.
Iniciación
La transcripción en eucaiiontes se inicia mediante el ensamblaje
de la maquinaria de transcripción en el promotor. Esta maquina-
ria está con1puesta por RNA polimerasa II y una serie de factores
de transcripción que forman un complejo gigante de 50 o más
poli péptidos. El ensamblaje de la maquinaria de transcripción
comienza cuando las proteínas reguladoras se unen al DNA cerca
del promotor y modifican la estructura de la cromatina, de mane-
ra que pueda tener lugar la transc1ipción. Luego, estas proteínas y
otras proteínas regulatorias reclutan el aparato de transcripción
basal al pro1notor núnimo.
El aparato de transcripción basal consiste en RN.A polimera-
sa, una serie de factores de transcripción general y un complejo
de proteínas conocido como mediado1;g:,}tW· Los factores de
transcripción general son TFIIA, TFll , T , TFIIE, TFIIF y
TFIIH, en los 'I'FII significa factor de transcripción para RNA po-
limerasa II y la letra final designa el factor individual.
La RNA polimerasa II y los factores de transcripción general se
ensamb.lan en el promotor 1nínimo y forman un complejo de prei-
niciación análogo al complejo cerrado observado en la iniciación
bacteriana. Recuerde que, en las bacte1ias, el factor sigma reco-
noce la secuencia del promotor y se une a ella. En los eucarion-
tes, la f unción de sigma es reemplazada por la de los factores de
transcripción general. En la iniciación, un primer paso es la unión
del TFIID a la caja TATA del molde de DNA. El fac tor TFIID está
formado por no menos de nueve polipéptidos. Uno de ellos es la
proteína de unión a TATA (TBP, TATA-binding protein), que
372 CAPITULO 13

Promotor regulador Promotor mínimo

DNA Caja TATA / L._

~ Inicio de la
(J1FIID se une a la caja TATA TFIID - transcripción
ldel promotor mínimo. \
TBP

Mediador
-
TFIIA TFIIB
TFIIH

RNA polimerasa 11

, i )espués, los factores de transcripción y la l

~ A polimerasa II se unen al promotor mínim~

Ó las proteínas activadoras de la

transcripción se unen a secuen-
cias de los intensificadores.

, El DNA forma un bude, lo que perrrilteque

""--......~, las proteínas unidas al intensificadorinterac-
túen con el aparato de transcripción basal.

Coactivador
~ ......
•
Proteína activadora --------
de la t ranscripción -
Las proteínas activadoras de la transcripción se unen a secuencias del promotor
\
Aparato de
L.~
transcripción basal
..

regulador e interactúan con el aparato de transcripción basal a través del mediador.

Figura 13-16. La transcripción se inicia en los promotores de la RNA polimerasa 11. La transcripción se inicia
cuando el factor de transcripción TFIID se une a la caja TATA, lo que es seguido de la unión de una holoenzima
preensamblada que contiene los factores de transcripción general, la RNA polimerasa 11y el mediador. TBP significa
proteína de unión a TATA.

reconoce la secuencia consenso TATA y se une a ella. La proteí-

na de unión a TATA se une al surco menor y se coloca a horca· a- EL PROBLEMA 35
das sobre el DNA como una silla de 1nontar molecular fig. 13
[TIJ), lo que curva al DNA y lo desenrolla en form a parcia. ros
factores de transcripción se unen a otras secuencias consenso del
promotor mínimo y a la RNA polimerasa, y posicionan a esta
enzima sobre el sitio de inicio de la transcripción.
Después de que la RNA polimerasa y los factores de transcrip-
ción se han ensamblado en el pro1notor mú1üno, se producen
cambios de conformación tanto en el DNA como en la polimera-
sa. Estos ca1nbios hacen que se separen de 11 a 15 pb del DNA
que rodea el sitio de inicio de la transcripción, lo que produce
DNA monocatenario que servirá de molde para la transcripción.
El molde de DNA monocatenario se ubica dentro del sitio acti-
vo de la enzin1a RNA polünerasa y crea una estructura denonunada
complejo abierto. Una vez for1nado el complejo abierto, comien-
za la síntesis de RNA a medida que se escinden grupos fosfato de
nucleósidos trifosfato y se unen nucleótidos para formar una
molécula de RNA. Al igual que en la transcripción bacte1iana, la Figura 13-17. La proteína de unión a TATA (TBP) se une al surco
RNA pofunerasa puede generar y liberar varios moléculas cortas menor del DNA y se coloca a horcajadas de la doble hélice de DNA
de RNA en la transc1ipción abortiva antes de iniciar la síntesis de como una silla de montar.
 Transcripción 373

cadenas del DNA, y se añaden los nucleótidos de RNA que son

CONCEPTOS
La transcripción se inicia cuando el aparato de transcripción basal,
formado por la RNA polimerasa y factores de transcripción, se
ensambla en el promotor mínimo y se convierte en un complejo
abierto.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
¿Cuál es el papel del TFIID en el inicio de la transcripción?
Elongación
Después de que se han sintetizado alrededor de 30pb de RNA, la
RNA polin1erasa abandona el pro1notor y comienza la fase de
elongación de la transcripción. Muchos de los factores de trans-
cripción quedan detrás del promotor y pueden servir para reiniciar
rápidamente la transcripción con otra enzima RNA polimerasa.
La estructura m olecular de la RNA polimerasa II eucarionte y
su funcionamiento durante la elongación fueron revelados por
Roger Kornberg y cols., por lo que Kornberg recibió el Nobel de
quünica en 2006. La RNA poliinerasa mantiene una burbuja
de transcripción durante la elongación, en la que alrededor de
ocho nucleótidos de RNA permanecen apareados por sus bases a
la cadena molde de DNA. La doble hélice de DNA ingresa en una
hendidura de la polimerasa y es suj etada por extensiones simila-
res a 1nandíbulas de la enzima qfig. 13-t g). Se desenrollan las dos
' DNA saliente
(dirección 5')
5' Salida
Apareamiento
DNA entrante
complementarios del molde al extremo 3' en crecimiento de la
molécula de RNA. A medida que atraviesa la polimerasa, el hfbri-
do DNA-RNA choca con una pared de aminoácidos y se incurva
casi en ángulo recto; esta curva posiciona el extremo del hfbrido
DNA-RNA en el sitio activo de la polin1erasa, y se añaden nuevos
nucleótidos aJ extre1no 3' de la 1nolécula de RNA en crecimiento.
El RNA recién sintetizado se separa del DNA y atraviesa otro
surco antes de salir de la polimerasa.
Terminación
Las tres RNA polin1erasas eucariontes uti lizan diferentes meca-
nismos de terminación. La RNA poli1nerasa I requiere un factor
de terminación similar al factor rho empleado en la terminación
de algunos genes bacterianos. A diferencia del rho, que se une a
la molécula recién transcrita de RNA, el factor de terminación
para la RNA polimerasa I se une a una secuencia de DNA locali-
zada en sentido 3' respecto del sitio de terminación.
La RNA polimerasa III finaliza la transcripción después de
transcribir una secuencia terminadora que produce tma cadena
de nucleótidos de uracilo en la molécula de RNA, como la produ-
cida por los terminadores independientes de rho de las bacterias.
Sin embargo, a diferencia de los ter1ninadores independientes de
rho de las células bacterianas, la RNA polimerasa no requiere una
estructura en horquilla que preceda a la cadena de U.
La terminación de la transc1ipción por la RNA polimerasa II no
se produce en secuencias específicas. En cambio, la RNA polime-
rasa II suele continuar sintetizando RNA cientos o miles de nu-
cleótidos después de la secuencia de codificación necesaria para
producir el mRNA. Como veremos en el capítulo 14, el extremo
del pre-mRNA es escindido en un sitio especffico, designado por
una secuencia consenso, mientras todavía prosigue la transc1ip-
ción en el extremo 3' de la molécu la. La escisión corta el pre-
mRNA en dos fragmentos: el mRNA, que finalmente codificará
la proteína, y otro fragn1ento de RNA que tiene su extremo 5'
sobresaliendo de la RNA polimerasa 1~g. :~-~~- Una enzima
(den om inada Ratl en la levadura) se ure a x r mo 5 ' de este
RNA y se desplaza hacia el extremo 3 ' donde la RNA polimerasa
continúa con la transcripción del RNA. Rat 1 es una exonucleasa
5' ➔3', una enzima capaz de degradar RNA en dirección 5 ' ➔3'.

------
de bases Como un torpedo dirigido, Rat 1 localiza la polimerasa y "mastica"
(dirección 3')
RNA , ~
- - - - - - - - - - : _- ~ ~ , _ ,# ~
"Pared" de - Surco
aminoácidos 3' CONCEPTOS
Poro
Las diferentes RNA polimerasas eucariontes utilizan distintos meca-

\
Embudo
nismos de terminación. La t ranscripción de genes transcritos por la
RNA polimerasa 11 termina cuando una enzima exonucleasa se une
NTP Transcripción al extremo 5' escindido del RNA, se mueve a la largo del RNA y
alcanza a la enzima polimerasa.
RNA polimerasa 11
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
Figura 13-18. La estructura de la RNA polimerasa II es una fuente de
datos sobre su función. La doble hélice de DNA ingresa en la polimerasa ¿En qué se parecen y en qué se diferencian los procesos de termina-
a través de un surco y se desenrolla. El dúplex DNA-RNA se curva en un ción por RNA pol imerasa II y la terminación dependiente de rho en
ángulo recto, lo que posiciona el extremo 3' del RNA en el sitio activo de la las bacterias?
enzima. Los nucleótidos nuevos se añaden al extremo 3' del RNA.
374 CAPITULO 13

La RNA polimerasa II transcribe el RNA a medida que se desplaza. Cuando Ratl al.c anza la maqu i-
más allá de las secuencias de codi- naria de transcripción, finaliza la transcripción. Observe que este
ficación de la mayoría de los genes. mecanismo es similar al de la terminación dependiente de rho en
RNA
po limerasa "'-. las bacterias (véase !fig.13-13~, excepto que rho no degrada la
molécula de RNA.
DNA

13.5 La transcripción en archaea es más similar

a la transcripción en eucariontes que
a la transcripción en eubacterias
g / de escisión Hace aproximadamente 2000 a 3000 millones de afios, la vida
Pre-m RNA divergió en tres líneas de descendencia evolutiva: las eubacterias,
las archaea (arqueobacterias) y los eucariontes (véase cap. 2). Si
DNA 3'
bien las eubacterias y las archa.ea tienen características superficia-
La escisión se produce ... mientrasi;' les similares (son unicelulares y carecen de núcleo), los resulta-
cerca del extremo 3' RNA polime-
del RNA ...
dos de estudios de sus secuencias de DNA y otras propiedades
rasa continúa bioquímicas indican que la relación entre ellas es tan distante co-
transcribiendo.
3' 1no su relación con los eucariontes. La distinción evolutiva entre
archaea, eubacterias y eucariontes es clara. Sin embargo, ¿los
g /
eucariontes fueron los primeros en diferenciarse de un procarion-
Pre-m RNA te ancestral, con separación ulte1ior de los procariontes en eubac-
te1ias y archaea, o las archa.ea y las eubacte1ias se separaron pri-
DNA mero, y los eucariontes evolucionaron más adelante a partir de
uno de estos grupos?
• La endonuclea-
sa Rat1 se une Estudios sobre la transcripción en eubacterias, archaea y euca-
al extremo S' riontes han aportado hallazgos importantes acerca de las relacio-
de la cola de nes evolutivas de estos organismos. Las archaea, al igual que las
RNA... ' Rat1 eubacterias, tienen una sola RNA polimerasa, pero esta enzima es
muy similar a las RNA polimerasas de los eucariontes. Como se
S
DNA
------3•
Pre-m RNA
comentó antes, la RNA polimerasa bacteriana está formada por 5
subunidades, 1nient:ras que las RNA polimerasas eucariontes son
mucho más complejas; por ejemplo, la RNA polimerasa II está
compuesta por 12 subunidades. La RNA polimerasa arqueobacte-
riana tiene una complejidad similar, con 11 o más subunidades.
Más aún, las secuencias de aininoácidos de la RNA polimerasa de
las archa.ea y de la RNA polimerasa II eucarionte son similares .
. . . y se mueve hacia la RNA
Los promotores de las archa.ea contienen una secuencia consen-
polimerasa y degrada el
RNA a medida que avanza. so simjlar a la caja TATA hallada en los promotores euca1iontes.
En las archa.ea, la caja TATA se localiza alrededor de 27 pb en
Pre-m RNA dirección 5' :respecto del sitio de inicio de la transc1ipción y, al
g igual que en los eucariontes, ayuda a determinar la localización
del sitio de inicio de la transcripción. Las archa.ea tienen una pro-
DNA
teína de unión a TATA (TBP), que es un factor de transcripción
• Cuando Rat1 alcanza a la crítico hallado en las tres polimerasa eucariontes, pero no en la
polirnerasa, se termina la RNA polimerasa eubacteriana. En las archaea, la TBP se une a
transcripción. la caja TATA con la ayuda de otro factor de transcripción, TFIIB,
que también se encuentra en las archa.ea pero no en las bacterias.
Pre-mRNA Sin en1bargo, algunos otros reguladores de la transcripción halla-
s ------.3'
dos en las archaea son más similares a los observados en las bac-
DNA
terias, lo que destaca que la transcripción en las archaea no es de
carácter completan1ente eucarionte. Al igual que los procariontes,
Figura 13- 19. La t erminación de la transcripción por la RNA polime- las archa.ea carecen de membrana nuclear, pero muchas especies
rasa II requiere la exonucleasa Rat1 . La escisión del pre-mRNA produce sí producen proteínas histonas, que ayudan a compactar el DNA
un extremo 5' al que se une Rat1 . Rat1 degrada la molécula de RNA en y for1nar estructuras relacionadas con los nucleosomas.
dirección 5' ➔3'. Cuando Rat1 alcanza a la polimerasa, se detiene la trans- Por lo tanto la transcripción, uno de los procesos 1nás básicos
cripción. de la vida, tiene firmes similitudes en los eucariontes y las ar-
 Transcripción 375

chaea, lo que sugiere que estos dos grupos tienen una relación CONCEPTOS
más estrecha entre sí que la que tiene cada uno de ellos con las
eubacterias. Esta conclusión es avalada por otros datos, como los El proceso de transcripción en archaea tiene muchas similitudes con
obtenidos de una comparación de las secuencias de genes. la transcripción en eucariontes.

RESUMEN DE CONCEPTOS
■ En sus inicios, la vida utilizó RNA como portador de la infor-
1nación genética y como catalizador biológico.
■ El RNA es un polím.e ro formado por nucleótidos unidos por
enlaces fosfodiés ter. Cada nucleótido de DNA consiste en un
azúcar ribosa, un fosfato y una base. El RNA contiene la base
uracilo y por lo general es monocatenario, lo que le permite
formar estructuras secundarias.
■ Las células tienen varias clases diferentes de RNA. El RNA
ríbosómico es un componente del ribosoma, el RNA n1ensaje-
ro transporta instrucciones de codificación para proteínas, y el
RNA de transferencia ayuda a incorpor ar los aminoácidos en
una cadena polipeptídica.
■ El molde para la síntesis de RNA es DNA monocatenario. En
la transcripción, la síntesis de RNA es con1plementaria y anti-
paralela respecto de la cadena molde de DNA. Una unidad de
transcripción consiste en un promotor, una región codificante
de RNA y un terminador.
■ Los sustratos para la síntesis de RNA son ribonucleósidos tri-
fosfato.
■ La RNA polimerasa de las células bacterianas consiste en un
centro enzi n1ático, que cataliza la adición de nucleótidos a una
moléculas de RNA, y otras subunidades. El factor sigma con-
trola la unión del centro enzimático al promotor.
■ Las células eucariontes contienen varias RNA polimerasas
diferentes.
■ E l proceso de transcripción consiste en tres etapas: iniciación,
elongación y terminación.
■ La transcripción comienza en el sitio de iniciación, que es
determinado por secuencias consenso. Cerca del sitio de ini-
ciación, se desenTolla un segmento corto de DNA, se sintetiza
RNA a partir de un molde de DNA monocatenario, y vuelve a
enrollarse el DNA en el extremo retrasado de la burbuja de
transcripción. Las RNA polimerasas tienen capacidad de
corrección.
■ La síntesis de RNA finaliza después de que se ha transcrito
una secuencia terminadora. Las células bacterianas tienen dos
tipos de terminadores: terminadores independientes de rho y
terminadores dependientes de rho .
■ El inicio de la transcripción en eucaiiontes requiere la m odifi-
cación de la estructura de la cromatina. En los eucariontes,
distintos tipos de RNA polimerasas reconocen diferen tes tipos
de pro1notores.
■ En los genes transcritos por RNA polimerasa II, los factores
de transcripción general se unen al promotor mínimo y for-
man parte del aparato de transcripción basal. L as proteínas
activadoras de la transcripción se unen a secuencias de los
pron1otores reguladores y los intensificadores, e inter actúan
con e l apai·ato de transcripc ión basal en el promotor míni1no.
■ Las tres RNA polimerasas halladas en todas las células euca-
ri ontes utilizan diferentes mecanismos de terminación.
■ Hay muchas similitudes entre la transcripción en arch aea y la
transcripción en eucai·iontes.

TÉRMINOS IMPORTANTES

apai·ato de transcripción basal
(p. 370)
cadena molde (p. 362)
cadena no 111olde (p. 362)
caja TATA (p. 370)
centro enzimático (core)
(p. 364)
ele1nento en sentido 5'
(upstrea1n) (p. 366)
factor de transcripción general
(p. 370)
factor rho (p. 368)
factor sigma (cr) (p. 364)
holoenzima (p. 364)
iniciación abortiva
(p. 367)
intensificado r (p. 371)
micro-RNA (miRNA)
(p. 360)
1nRNA policistrónico
(p. 369)
promotor (p. 362)
promotor interno (p. 37 1)
promotor mínimo (p. 370)
promotor regulador (p. 37 1) RNA de CRISPR (crRNA)
proteína activadora de la (p. 360)
transcripción (p. 370) RNA de interacción con Piwi
proteína de unión a TATA (p. 360)
(TBP) (p. 371) RNA de interferencia peque-
región codificante de RNA ño (siRNA) (p. 360)
(p. 362) RNA de transferencia (tRNA)
ribonucleoproteína nuclear (p. 360)
pequeña (snRNP) (p. 360) RNA m ensajero (mRNA)
ribonucleósido trifosfato (p. 359)
(rNTP) (p. 363) RNA nuclear pequeño
ribozirna (p. 358) (snRNA) (p. 360)
376 CAPITULO 13

RNA nucleolar pequeño
(snoRNA) (p. 360)
RNA polin1erasa (p. 363)
RNA polimerasa I (p. 364)
RNA polimerasa TI (p. 364)
RNA polimerasa m (p. 364)
RNA polimerasa IV (p. 364)
RNA polimerasa V (p. 364)
RNA premensaj ero
(pre-mRNA) (p. 359)
RNA ribosómico (rRNA)
(p. 359)
secuencia consenso (p. 365) terminador dependiente de
secuencia consenso -1 O rho (p. 368)
(caja de Pribnow) (p. 365) terminador independiente de
secuencia consenso -35 rho (p. 368)
(p. 366) unidad de transcripción
terminador (p. 363) (p. 362)

l. b 6. Repeticiones invertidas seguidas de una cadena de nucleóti-

2. La cadena molde es la cadena de DNA que se copia a una dos de adenina.
molécula de RNA, mientras que la cadena no molde no se 7. d
copia. 8. El 'IFllD se une a la caja TATA y ayuda a centrar la RNA
3. d polimerasa sobre el sitio de inicio de la transcripción.
4. El factor sigma reconoce el promotor y controla la unión de 9. Ambos procesos utilizan una proteína que se une a la molé-
la RNA polimerasa al promotor. cula de RNA y se desplaza a lo largo del RNA hacia la RNA
5. a polimerasa. Difieren en que rho no degrada el RNA, mientras
que Rat 1, sí.

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
El diagrama representa una secuencia RNA-
5'-CATGTT ... TTGATGT- Secuencia - GACGA...TTTATA .. GGCGCGC-3'
de nucleótidos que rodea a una secuencia 3'-GTACAA .. AACTACA-codificante -CTGCT.. . AAATAT..CCGCGCG-5'
codificante de RNA.
a. ¿Es probable que la secuencia codificante de RNA provenga de una célula bacteriana o de una
célula eucarionte? ¿Cómo podría asegurarlo?
b. ¿Qué cadena de DNA servirá como cadena molde durante la transcripción de la secuencia codi-
fican te de RNA?

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
a. Si es probable que la secuencia codificante de RNA pro-
venga de una célula bacteriana o de una célula euca:rionte y
,
por que.
b. Qué cadena es la cadena molde.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
■ Las secuencias nucleotídicas de ambas cadenas de DNA.
■ Los extremos 5 ' y 3' de las cadenas.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
El molde, en la Sección 13.2, Pro motores bacte1ianos, en la
Sección 13.3, y Promotores, en la Sección 13.4.
Pasos de la solución
a. Las células bacterianas y eucariontes utilizan las mismas
bases del DNA (A, T, G y C); por lo tanto, las bases en sí
mismas no aportan ningún indicio sobre el origen
de la secuencia. La secuencia codificante de RNA Pista: repase las
deb e tener un promotor, y las células bacterianas secuencias con-
y euca:riontes sí difieren en las secuencias con- senso halladas
en promotores
senso halladas en sus promotores; en consecuen- bacterianos y
eucariontes en
cia, debemos examinar las secuencias para detec-
las figuras 13--11
tar secuencias consenso familiares. En la cadena y 13-15.
inferior a la derecha de la secuencia codificante de
RNA, hallamos AAATAT, que, escrita de manera
convencional (5' a la izquierda), es 5'-TATAAA-3'. Esta
secuencia es la caja TATA hallada en la mayoría de las célu-
las eucarjontes. Sin embargo, la secuencia tainbi én es bas-
tante similar a la secuencia consenso - 10 (5'-TATAAT-3')
hallada en los promotores bacterianos.
Más a la derecha de la cadena inferior, también observa-
mos 5'-GCGCGCC-3', que es el elemento de reconoci-
miento de TFIIB (BRE, véase ptg. 13-f} en los promotores
o
de RNA polimerasa II e ucarionte; por tanto, podemos
estar bastante seguros de que esta secuencia es un promotor
eucarionte y una secuencia codifican te de RNA.
 Transcripción 377

b. La caja TATA y BRE de los promotores de RNA polime-
rasa II se encuentran en dirección 5' respecto de las
secuencias codificantes de RNA; por lo tanto, la RNA
polimerasa se debe unir a estas secuencias y, después,
proceder en dirección 3' transcribiendo la secuencia codi-
ficante de RNA. De esta manera, la RNA polirnerasa debe
proceder de derecha (direcci ón 5' ) a izquierda (dirección
3 '). La molécula de RNA siempre se sintetiza en direc-
ción 5' ➔ 3' y es antiparalela respecto de la cadena molde
de DNA; por consiguiente, la cadena molde se Recuerde:
debe leer en dirección 3' ➔ 5 ' . Si la enzima proce- durante la trans-
de de derecha a izquierda y lee el molde en direc- cripción, la
cadena molde
ción 3' ➔5 ', la cadena superior debe ser el molde, se lee en direc-
como se muestra en el siguiente diagrama. ción 3'➔5' .

Cadena molde RNA- RNA polimerasa

5'-CATGTT ...TTGATGT- Secuencia - GACGA... 11 1ATA ... GGCGCGC- 3'
3'-GTACAA ... AACTACA- codificante - CTGCT... AAATAT... CCGCGCG- 5'
+-( - - - - - lDirección de la transcripción

Problema 2
Suponga que hu biera una deleción de una secuencia consenso del promotor regulador de un gen eucarionte que codifica la enzima
A. ¿Cuál de los siguientes efectos provocaría esta deleción? Explique su razonamiento.
a. La enzima A tendría una secuencia de aminoácidos diferente.
b. El mRNA de la enzima A seria anormalmente corto.
c. La enzima A carecería de algunos aminoácidos.
d. El mRNA de la enzima A se transcribiría pero no se traduciría.
e. Afectaría la cantidad de mRNA transcrito.

Estrategia de solución Pasos de la solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Selección del resultado (a, b, e, do e) que ocurriría en caso de
deleción de una secuencia consenso del promotor regulador.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
La secuencia consenso eliminada se encuentra en el promotor
regulador.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Sección 13.4.
La respuesta correcta es parte e. E l promotor regulador contie-
ne sitios de unión para las proteínas activadoras de la trans-
cripción. Estas secuencias no forman parte de la secuencia
codificante de RNA para la enzima A; por consiguiente,
la mutación no tendría ningún efecto sobre la longitud de la
secuencia de aminoácidos de la enzima, lo que el imina las res-
puestas a, by c. Las proteínas activadoras de la transcripción
se unen al pron1otor regulador e influyen en el grado de trans-
cripción que tiene Jugar mediante interacciones con el aparato
de transcripción basal en el promotor mínimo.

Sección 13.1 5. ¿Cuál es el sustrato para la síntesis de RNA? ¿Cómo se

l. Dibuje un nucleótido de RNA y un nucleótido de DNA y
destaque las diferencias. ¿En qué se parece la estructura del
RNA a la estructura del DNA? ¿En qué se diferencia?
2. ¿ Cuáles son las principales clases de RNA celular?
3. ¿Por qué el DNA es más estable que el RNA?
Sección 13.2
4. ¿ Qué partes del DNA componen una unidad de transcrip-
ción? Dibuje una unidad de transcripción bacteriana típica e
identifique sus partes.
modifica este sustrato y se une para producir una 1nolécula de
RNA ?
6. Describa la estructura de la holoenzima de la RNA pol.imera-
sa bacteriana.
7. Nombre las RNA polimerasas halladas en células eucariontes
y los tipos de RNA que transcriben.
Sección 13.3
8. ¿Cuáles son las tres etapas básicas de la transcripción?
Describa lo que sucede en cada etapa.
378 CAPITULO 13

9. Dibuje un promotor bacteriano típico e identifique cualquier 12. ¿En qué se parecen y en qué difieren la transcripción y la
. /

secuencia consenso comun. replicación?

10. ¿Cuáles son los dos tipos básicos de terminadores hallados 13. ¿En qué se diferencia la transcripción en bacterias y en
en las células bacterianas? Describa la estructura de cada euca:riontes? ¿En qué se parecen?
tipo.

Sección 13.4
11. Compare el papel de los factores de transcripción general y
de las proteínas activadoras de la transcripción.

Sección 13.1 19. Asuma que se produce una mutación en el gen que codifi-
ca cada una de las siguientes RNA polimerasas. Haga
*14. Una molécula de RNA tiene los siguientes porcentajes de
coincidir la mutación con los posibles efectos colocando
bases: A= 23%, U= 42%, C = 21 % y G = 14%.
a. ¿Es monocatenario o bicatenario este RNA? ¿Cómo la letra correcta en el espacio en blanco de abajo. Puede
puede asegurarlo? haber más de un efecto para cada polimerasa mutada.
b. ¿Cuáles serían los porcentajes de bases de la cadena
Una mutación
molde de DNA que contiene eJ gen de este RNA? en el gen que codifica Efectos
RNA polimerasa I
Sección 13.2 RNA polimerasa II
*15. El siguiente diagrama representa el DNA que forma parte RNA polin1erasa III
de la secuencia codificante de RNA de una unidad de trans-
cripción. La cadena inferior es 1a cadena molde. Indique la Posibles efectos
secuencia hallada en la molécula de RNA transcrita a partir a. no se sintetiza tRNA
de este DNA e identifique los extremos 5' y 3' del RNA. b. no se sintetiza algo de RNA ribosómico
c. no se procesa el RNA ribosómico
5 '-ATAGGCGATGCCA-3' d. no se procesa el pre-mRNA
3'- TATCCGCTACGGT- 5' ~ Cadena molde e. no se degradan algunas moléculas de mRNA
f. no se sintetiza pre-mRNA
16. Para la molécula de RNA ilustrada en la!figura 13-141,
escriba la secuencia de bases de 1as cadenas molde y no Sección 13.3
molde de DNA a pa1tir de las cuales se transcribe este
RNA. Indique los extre1nos 5' y 3' de cada cadena. 20. Proporcione la secuencia consenso para las tres primeras
secuencias reales mostradas en 1~ figura 13-19.
17. En un molde de DNA monocatenario, se encuentra la
siguiente cadena de nucleótidos: *21. Escriba la secuencia consenso del siguiente grupo de
secuencias nucleotídicas.
ATIGCCAGATCATCCCAATAGAT
AGGAGTT
Asuma que la RNA polimerasa procede a lo largo de AGCTATI
esta cadena de izquierda a derecha. TGCAATA
ACGAAAA
a. ¿Qué extremo del molde de DNA es el 5' y qué extre- TCCTAAT
mo es el 3'? TGCAATI
b. Indique la secuencia e identifique los extremos 5' y 3 '
del RNA copiado a partir de este molde. 22. Enum.e re por lo menos cinco propiedades en común de las
18. La velocidad a la que las RNA polimerasas llevan a cabo DNA polimerasas y las RNA polimerasas. Enumere por lo
la transcripción es mucho más baja que la velocidad a la menos tres diferencias.
que las DNA polimerasas llevan a cabo la replicación. 23. La mayoría de las moléculas de RNA tienen tres grupos
¿Por qué la velocidad es más importante en la replicación fosfato en el extremo 5 ', pero las moléculas de D NA
que en la transcripción? nunca los tienen. Explique esta diferencia.

*24. Escriba una secuencia hipotética de bases que podrían
hallarse en los primeros 20 nucleótidos de un promotor de
un gen bacteriano. Incluya las dos caden as de DNA e
identifique los extremos 5' y 3' de a mbas. Asegúrese de
incluir el si tio de inicio de la transcripción y cualquier
secuencia consenso encontrada en el promotor.
*25. ¿Cuál sería el efecto más probable de una mutación en las
siguientes localizaciones de un gen de E. coli?
a. -8
b. -35
c. -20
d. Sitio de iniciación
26. Una cepa de bacterias presenta una mutación termosensi-
ble del gen que codifica el factor sig1na. Las bacterias mu-
tantes producen un factor sigma que es incapaz de unirse a
la RNA polimerasa a ternperaturas elevadas. ¿Qué efecto
ejercerá esta 1nutación sobre el proceso de transcripción
cuando se cultivan las bacterias a altas temperaturas?
27. En 1~ figura 13-~, indique la localización de los promoto-
res y los terminadores de los genes a, by c.
28. El siguiente diagrama representa una unidad de transcrip-
ción de una molécula de DNA.
Sitio de inicio de la transcripción
5'----------'--------------
3'----------------------
Cadena 1nolde
a. Asuma que esta molécula de DNA es de una célula
bacteriana. Dibuje la localización aproximada del pro-
motor y el terminador para esta unidad de transcrip-
. /
CJOil.
b. Asuma que esta molécula de DNA es de una célula
eucarionte. Dibuje la localización aproximada de un
pro1notor de la RNA polimerasa II.
*29. Los siguientes nucleótidos de DNA se encuentran cerca
del extremo de una unidad de transcripción bacte1iana.
3 '-AGCATACAGCAGACCGTTGGTCTGAAAAAAGCATACA-5'
a. Marque el punto en el que terminará la transcripción.
b. ¿Este terminador es independiente de rho o dependien-
te de rho?
c. Dibuje un diagrama del RNA que será transcrito a par-
tir de este DNA, incluidas su secuencia de nucleótidos
y cualquier estructura secundaria que se forme.
30. Una cepa de bacterias presenta una mutación tennosensi-
ble del gen que codifica la subunidad rbo. A altas tempe-
raturas, rho no es funcional. Cuando se cultivan estas bac-
terias a altas temperaturas, ¿cuál de los siguientes efectos
esperaría observar? Explique su razonamiento para aceptar
o rechazar cada una de estas cinco opciones.
a. No se produce la transcripción.
b. Todas las moléculas de RNA son más cortas que lo
normal.
Transcripción 379
c. Todas las moléculas de RNA son más largas que lo
normal.
d. Algunas moléculas de RNA son más largas que lo nor-
mal.
e. Se copia RNA a partir de ambas cadenas de DNA.
31. El siguiente diagrama representa una de las estructuras
similares a un árbol de Navidad mostradas en la lfigur1
113-j Identifique en el diagrama las partes a a i.
a. Molécula de DNA
b. Extremos 5' y 3' de la cadena molde de DNA
c. Por lo menos una molécula de RNA
d. Extremos 5' y 3' de por lo menos una molécula de
DNA
e. Dirección de movimiento del aparato de transcripción
en la molécula de DNA
f. Localización aproximada del promotor
g. Posible localización de un terminador
h. Direcciones en sentido 5' y en sentido 3'
i. Moléculas de RNA polimerasa (utilice puntos para
representar estas molécu las)
32. Suponga que se eliminara la cadena de nucleótidos A que
sigue a la repetición invertida de un terminador indepen-
diente de rho, pero que la repetición invertida quedara
intacta. ¿ Cómo afectaría la terminación esta deleción?
¿ Qué sucedería cuando la RNA polünerasa alcance esta
región?
Sección 13.4
33. El siguiente diagrama representa una unidad de transcrip-
ción de una hipotética molécula de DNA.
5' ... TIGACA ... TATAAT ... 3'
3' ... AACTGT ... ATATTA ... 5'
a. Sobre la base de la información proporcionada, ¿este
DNA pertenece a una bacteria o a un organismo euca-
1ionte?
b. Si se transcribe esta molécula de DNA, ¿cuál será la
cadena molde y cuál será la cadena no molde?
c. ¿Dónde estará aproximadamente el sitio de iniciación
de la transcripción?
34. Los programadores de computación, en colaboración con
genetistas moleculares, han desarrollado programas infor-
máticos que permiten identificar genes dentro de largas
extensiones de secuencias de DNA. Imagine que está tra-
bajando con un prograinador en un proyecto de este tipo.
380 CAPITULO 13

En función de lo que usted sabe acerca del proceso de
transcripción, ¿qué secuencias utilizaría para identificar el
comienzo y el final de un gen mediante este program a
infonnático?
*35. Mediante ingeniería genética, un genetista muta el gen que
codifica TBP en células humanas cultivadas. Esta muta-
ción destruye la capacidad de la TBP de unirse a la caja
TATA. Prediga el efecto de esta mutación sobre las células
que la tienen.
36. La replicación se asocia con elaborados m ecanismos de
reparación para evitar mutaciones permanentes del DNA;
en cambio, no hay reparación similar asociada con la
transcripción. ¿Puede mencionar una razón para esta dife-
rencia entre la replicación y la transcripción? (Pista: pien-
se acerca de los efectos relativos de una mutación perma-
nente de una molécula de DNA en comparación con una
en una molécula de RNA).

PREGUNTAS DE DESAFÍO

Sección 13.3 go, la caj a TATA de S. cerevisiae se encuentra de 40 a 120

37. Muchos genes tanto de bacterias como de eucaiiontes con-
tienen numerosas secuencias que pueden causar pausas o
terminaciones prematuras de la transcripción. No obstante,
la transcripción de estos genes dentro de una célula produ-
ce, en condiciones norn1ales, n1últiples 1noléculas de RNA
de miles de nucleótidos de longitud sin pausas ni ternuna-
ciones prematuras. En cambio, cuando se lleva a cabo una
sola ronda de transcripción de moldes de este tipo en un
tubo de ensayo, es frecuente que la síntesis de RNA sea
intem1mpida por pausas o terminaciones prematuras, lo
que reduce la velocidad de la transcripción y suele acortai·
la longitud de las 1noléculas de mRNA producidas. La
mayoría de las pausas y las terminaciones se producen
cuando la RNA polimerasa retrocede en forma transitoria
(es decir, vuelve atrás) uno o dos nucleótídos a lo largo
del DNA. Hallazgos exp erimentales demostraron que la
mayoría de los retrasos de la transcripción y las termina-
ciones pre111aturas desaparecen si varias RNA polünerasas
están transcribiendo de 1nanera simultánea la molécula de
DNA. Proponga una explicación para la transc1ipción más
rápida y el m.RNA más largo cuando múltipl.es RNA poli-
merasas transcriben el molde de DNA.
Sección 13.4
nucleótidos en sentido 5' respecto del sitio de iniciación.
Para comprender mejor la manera en que se fija el sitio
de iniciación en estos organismos, investigadores de
Stanford University llevaron a cabo una serie de experi-
mentos para determinar qué co1nponentes del aparato de
transcripción de estas dos especies podían intercambiarse
(Y. Li y cols. 1994 . Science 263:805-807). En estos expe-
1imentos, se intercambiaron diferentes factores de trans-
cripción y RNA polimer asas entre S. pombe y S. cerevi-
siae, y se observai·on los efectos del cambio sobre el nivel
de síntesis de RNA y sobre el punto de iniciación de la
transcripción. En el siguiente cuadro, se n1uestran los re-
sultados de un grupo de expe1imentos. Los componentes
cTFIIB, cTFIIE, cTFilF, cTFIIH son factores de transcrip-
ción de S. cerevisiae. Los componentes p'I'FIIB, p'I'FIJE,
pTFIIF, pTFIIH son factores de transcripción de S. pombe.
Los compone ntes cPol Il y pPol II son RNA polimerasa II
de S. cerevisiae y S. pombe, respectivamente. El cuadro
indica si el componente estaba presente(+) o ausente(-)
en el exp erimento. En el gel asociado, la presencia de una
banda indica que se produjo RNA, y la posición de la ban-
da indica si era de la longitud estimada cuando la trans-
cripción se inicia 30 pb en dirección 3' respecto de la
caj a TATA o de 40 a 120 pb en dirección 3' respecto de
la caja TATA.

38. Los intensificadores son secuencias que inciden en el ini- Experimento

/1:.:.ÁU'" cio de la transcripción de genes que están a cientos o a
Componentes 2 3 4 6
!.~';t.- mi les de nucleótidos de distancia. Por lo general, las pro- 1 5 7
cTFIJE + + + + +
teínas activadoras de la transcripción que se unen a los
cTFIIH + cTFIIF + + + + +
intensificadores actúan directamente con los factores de
transcripción en los promotores y hacen que el DNA inter- cTFIIB + cPol Il +
puesto fonne un rulo. Un intensificador del bacteriófago pPot rr + + + + +
pTPIIB + + + + +
T4 no actúa de esta manera (D . R. Herendeen y cols.
pTFIIE + pTFUH + pTFIIF +
1992. Science 256:1298-1 303). Proponga algunos otros
mecanismos (aparte de la formación de rulos en el DNA) Transcripción en el sitio
por los que este intensificador podría afectar la transcrip- de iniciación de 5. pombe
ción de un gen situado a miles de nucleótidos de distancia. (30 pb en dirección 3'
*39. Las localizaciones de la caja TATA en dos especies de respecto de la caja TATA) ---l~
► - -
JC..ÁU'° levadura, Saccharomyces pombe y Saccharomyces cerevi-
f.~';t:- siae, difieren de manera drástica La caja TATA de S. Transcripción en el sitio
pombe se localiza alrededor de 30 nucleótidos en sentido de iniciación de S. cerevisiae
(40-120 en dirección 3'
5 ' respecto del sitio de iniciación, similar a la localización
respecto de la caja TATA)
en la mayor parte de otras células eucariontes. Sin embar- Gel
 Transcripción 381

a. ¿Qué conclusión puede Primero, midieron el nivel de transcripción del DNA

extraer de estos datos desnudo, sin histonas asociadas. A continuación, midieron
acerca de qué compo- el nivel de transcripción después del agregado de octáme-
nentes determinan el ros de nucleoso1nas (sin histona H 1) al DNA. La adición
sitio de injciación de la de los octámeros causó un descenso del nivel de transcrip-
transcripción? ción del 50%. Cuando se agregaron tanto los octámeros
b. ¿Qué conclusiones del nucleosoma como las proteínas Hl al DNA, se produ-
puede extraer acerca de jo una represión importante de la transcripción, que cayó a
las interacciones de los menos del 1% de la obtenida con el DNA desn udo, como
S. pombe. (Steve Gschmeissner/Photo se 1nuestra en el cuadro.
diferentes con1ponen- Researchers}.
tes del aparato de GAIA-VP16 es una proteína que se une al DNA de cier-
transcripción? tos genes eucariontes. Cuando se añade esta proteína al
DNA, aumenta mucho el nivel de transcripción por RNA
c. Proponga un mecanis- polimerasa II.
mo que explique por
qué el sitio de inicia- Cantidad relativa
ción de la transcrip- Tratamiento de transcripción
ción en S. pombe se DNA desnudo 100
encuentra a 30 pb en
dirección 3' respecto D NA + octámeros 10
de la caja TATA, D NA + octámeros + H 1 < 1
mientras q ue en S.
DNA + GAL4-VP 16 1000
cerevisiae se encuen- S. cerevisiae. (Steve Gschmeissner/
tra a 40- 120 p b en Science Source). DNA + octán1eros + GAL4-VP16 1000
dirección 3' respecto DNA + octámeros + Hl + GAL4-VP16 1000
de la caja TATA.
40. Glenn Croston y cols. estudiaron la relación entre la Aun en presencia de proteína Hl, GAL4-VP16 estimula
(Z;' estructura de la cromatina y la actividad de transcripción. altos ruveles de transcripción.
En un conjunto de experimentos, midieron el nivel de
010A101 Proponga un mecanismo que explique cómo la proteína
transcripción in vitro de un gen de Drosophila por acción Hl reprime la transcripción y cómo GAL4-VP16 supera
de la RNA polimerasa II mediante el uso de DNA y varias esta represión. Explique la manera en que el mecanismo
combinaciones de bistonas (G. E. Croston y col s. 1991. prop uesto por usted produciría los resultados obtenidos en
Science 25 1:643-649). estos experimentos.
 14
Moléculas de RNA y procesamiento
del RNA

Una enfermedad Real

El 12 de agosto de 1904, el zar de Rusia, Nicolás

Ron1anov II, escribió en su diario: "Un gran día que
nunca será olvidado, cuando la bendición de Dios nos ha
visitado tan claramente''. Ese día había nacido Alexei, el
primer hijo varón de Nicolás y el heredero aJ trono de
Rusia.
Cuando nació, Alexei era un bebé grande y vigoroso, de
cabello rizado rubio y ojos azules, pero a las 6 semanas
de edad con1enzó a sangrar en forma espontánea por el
ombli go. La hemon·agia persistió durante vrui os días y
provocó gran alarma. A medida que creció y comenzó a
caminar, Alexei a menudo tropezaba y caía, con10 todos
los niños. Aun estos pequeños raspones sangraban de
manera profusa, y hematomas menores causaban hemorra-
gia interna significativa. Pronto quedó claro que Alexei
presentaba hemofilia.
La hemofi lia, caracterizada por coagulación lenta y san-
grado excesivo, se debe a una mutación de uno de varios
genes que codifican las proteínas que participan en el pro-
ceso de coagulación de la sangre. En los hemofílicos,
Familia del zar Nicolás Romanov II de Rusia. El niño al frente es el hijo del zar, lesiones menores pueden provocar pérdida de sangre
Alexei, que presentaba hemofilia. (Mondadori vía Getty lmages). potencial mente fatal, y la he1norragia espontánea en
articulacio nes erosiona el hueso con consecuencias
invalidantes.
Alexei tenía he1nofilia clásica, que es un trastorno gené-
tico ligado al cromosoma X. H eredó el gen de hemofilia de su madre, Alejandra, que era por-
tadora. El gen parece haber se originado con la reina Victoria de Inglaterra (véase ¡fig. 6-Sp.
Los diez descendientes vru·ones de la reina Victoria presentaban hemofilia. Seis descendientes
mujeres, incluida su nieta Alejandra (la madre de Alexei), eran portadoras.
DuTante su infancia, Alexei tuvo una serie de episodios hemorrágicos graves. A menudo, los
médicos reales no podían h acer nada durante estos episodios: no contaban con ningún trata-
miento que detu viera la hemorragia. En esta época, estalló la Revolución rusa. Los bolchevi-
ques capturru·on al zru· y su familia, y los 1nru1tuvieron cautivos en la ciudad de
Ekaterimburgo. La noche del 16 de j ulio de 1918, un pelotón de fusil amiento ejecutó a la
famil ia reaJ y a su séquito, incluidos Alexei y sus cuatro hennanas. Durante n1uchos años, los
cuerpos de la famili a del zar estuvieron perdidos, pero :finalmente se recuperaron sus esquele-
tos de dos tumbas en las afueras de Ekaterimburgo. Las comparaciones del DNA mitocond1ial
y el DNA nuclear de los h l!.lesos y de descendientes de familiares corroboraron que los huesos
eran, de hecho, de la fanrilia real. Si bien este análisis deternrinó la identidad de los restos, el
carácter m olecular de la hemofilia real siguió sin con ocerse durante mucho tiempo.
En 2009, los genetistas analizaron DNA de los huesos de la familia del zar para determinar
e] carácter genético de la hemofilia real. En las personas con hemofilia ligada a] cromosoma
X, suele haber una mutació n en uno de los dos genes de este cro1nosoma, el gen del factor
VIII de coagulación de la sangre o el gen del factor IX.
383
384 CAPITULO 14

En las células eucariontes, los genes a menudo son interru mpidos por secuencias no codificantes.
Las partes de un gen que codifican los aminoácidos de una proteína se denominan exones, mientras
que las secuencias no codificantes se denominan intrones. Inicialmente, tanto los exones como los
intrones se transcriben a pre-m.RNA pero, mediante un proceso denominado corte y empalme del
RNA, después se cortan los intrones y se pegan juntos los exones. El examen de las secuencias de
DNA de los dos genes de factores de coagulación de Alejandra no revelaron mutaciones de los nucle-
ótidos que codifican aminoácidos, pero sí una mu tación de uno de los intrones de su gen del factor
IX. Esta mutación alteró el corte y empal1ne de los exones, y creó una nueva señal de terminación en
la secuencia de codificación del mRNA, lo que produjo un factor IX truncado y defectuoso. En el
DNA de Alejandra, se detectaron tanto un alelo normal como uno mutante, como es esperable en una
portadora heterocigótica. El DNA de Alexei contenía solo el alelo mutante, que causaba su hemofilia.

e orno ilustra la hemofilia de Alexei, el procesamiento del

RNA tiene importancia crucial para la síntesis correcta de
proteú1as. En las células eucariontes, las moléculas de RNA sue-
len n1odificarse mucho después de la transcripción: para los genes
que codifican proteínas, se añade un nucleótido especial deno1ni-
nado casquete al extremo 5 ', se agrega una cola de nucleótidos de
adenina al extremo 3' y se cortan los intrones del medio. Tanto en
los procariontes como en los eucariontes, también se modifican
los rRNA y los tRNA después de la transcripción. En el capítulo
13, consideramos la transcripción: el proceso por el cual se sinte-
tizan las moléculas de RNA. En este capítulo, exainínamos la fun-
ción y el procesamiento del RNA.
Comenzamos repasando de manera cuidadosa la naturaleza del
gen. Después, examinamos el RNA mensajero (mRNA), su es-
tructura y cómo se modifica en los eucariontes después de la trans-
cripción. Luego, estudiamos el RNA de transferencia (tRNA), la
111olécula adaptadora que fonna la interfaz entre los anunoácídos
y el mRNA en la síntesis proteica. Examinamos el RNA 1ibosó-
mico (rRNA), la estructura y la organización de los genes de
rRNA y la manera de procesamiento de los rRNA. Por último,
consideramos un grupo recién descubie1to de RNA muy pequeño
que desempeña papeles importantes en numerosas funciones bio-
lógicas.
A 1nedida que exploremos el mundo de RNA y su papel en la
función génica, hallare1nos evidencia de dos características im-
portantes de este ácido nucleico. Ptimero, el RNA es sumamente
versátil, tanto desde el punto de vista estructural como bioquími-
co. Puede asumir una serie de estructuras secundarias diferentes,
que proporcionan la base pai·a su diversidad funcional. Segundo,
el procesamiento y l.a función del RNA suelen incluir interaccio-
nes entre dos o más moléculas de RNA.
14.1 Muchos genes tienen estructuras
complejas
¿Qué es un gen? Como se mencionó en el capítulo 3, la defini-
ción de un gen suele cambiar cuando exploramos diferentes as-
pectos de la herencia. En el capítulo 3 se definió un gen como
un factor hereditario que determina una característica. Esta defi-
nición puede haber parecido vaga, pero solo dice lo que hace un
gen y no lo que es un gen. No obstante, esta definición fue apro-
piada en ese mo1nento, porque nos centrábamos en cómo influ-
yen los genes en la herencia de rasgos. No era preciso conside-
rar la naturaleza física de un gen para aprender las reglas de la
herencia.
Al conocer algo sobre la estructur a quín1Íca del DNA y el pro-
ceso de transcripción, ahora podemos ser más precisos acerca de
qué es un gen. En el capítulo 10 se describió cómo se codifica la
información genética en la secuencia de bases del DNA: un gen
consiste en un conjunto ele los nucleótidos de DNA. Pero ¿cuántos
nucleótidos constituyen un gen y cómo se organiza la información
en estos nucleótidos? En 1902, Archibald Garrad sugirió, de
manera correcta, que los genes codifican proteínas. Las proteínas
están compuestas por aminoácidos, de manera que un gen contie-
ne los nucleótidos que especifican los a1ninoácidos de una proteí-
na. Por lo tanto, durante muchos años, la definición operativa de
gen fue un conjunto de nucleótidos que especifican la secuencia
de aminoácidos de una proteína. A medida que los genetistas
aprendieron más acerca de la estructura de los genes, resultó evi-
dente que este concepto del gen era una sobresimplificación.
Organización de los genes
El trabajo inicial sobre la estructura de los genes se llevó a cabo,
en gran medida, 1nediante el examen de mutaciones en bacterias
y virus. Esta investigación llevó a Francis Crick a postular, en
1958, que los genes y las proteínas son colineales, que hay una
correspondencia directa entre la secuencia de nucleótidos del
DNA y la secuencia de aminoácidos de una proteína ffig. 14-~).
El concepto de colinealidad sugiere que el número de nucleótidos
de un gen debe ser proporcional al número de aminoácidos de la
proteína codificada por ese gen. En un sentido general, este con-
cepto es válido para los genes hallados en células bacte1ianas y
muchos virus, aunque estos son ligeramente 1nás lai·gos de lo que
cabría esperar si la coli nealidad se aplicara en sentido estricto,
porque los mRNA codificados por los genes contienen secuencias
en sus extremos que no especifican aminoácidos. AJ principio, en
general se asumió que los genes eucariontes y las proteínas tam-
bién eran colineales, pero había indicios de que la estructura del
gen eucarionte tiene diferencias fundamentales. Las células euca-
riontes contienen mucho más DNA que el requerido para codificar
proteínas (véase cap.11). Más aún, muchas moléculas grandes de
RNA observadas en el núcleo estaban ausentes en el citoplasma,
lo que sugirió que los RNA nucleares presentan algún tipo de
cambio antes de ser exportados al citoplasma.
No obstante, el anuncio en la década de 1970 de que no todos
los genes son continuos sorprendió a la mayoría de los genetistas.
Los investigadores observaron cuatro secuencias de codificación
de un virus eucarionte que estaban interrumpidas por nucleótidos
que no especificaban aminoácidos. Este descubrimiento se reali-
 Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 385

Una secuencia continua

de nucleótidos de DNA ...
Pregunta: ¿es siempre continua la secuencia codificante de
un gen?
S'
DNA
3'
DNA RNA

Transcripción
o •
mRNA S' 3'
'----r''-v-''-v-''-v-''-v-''-v-''-v-''---v-J
'-..../ Métodos Mezcle DNA con RNA
Codones
~-----~
Traducción
complementario y
cal1ente para separar
las cadenas de DNA.

Cadena
polipeptídica
•••••••• .V .dos
A mInoacI
z
.. . codifica una secuencia continua de
aminoácidos en la proteína.
Enfríe la mezcla.
Conclusión: con la colinealidad, el número de nucleótidos Se aparean las
del gen es proporcional al número de aminoácidos de la secuencias
proteína. complementarias.

Figura 14-1. El concepto de colinealidad sugiere que una secuencia ..--

continua de nucleótidos del DNA codifica una secuencia continua d Resultados El DNA puede aparearse con
aminoácidos en una proteína. su cadena complementaria ...

zó cuando se hibridó DNA viral con el mRNA transcrito a partir z

de este y se examinó la estructura hibridada con un microscopio
electróni co uig. 14-71>. Sin duda, el DNA era mucho más largo
que el rnRNA, porque algunas regiones del DNA formaban bucles
.. ..
que sobresalían de las moléculas hibridadas. Estas regiones con- .•"~,-.,
~~-
Las regiones no co-
tenían nucleótidos de DNA que estaban ausentes de los nucleóti- dificantes de DNA
dos codificantes del mRNA. Con ulterioridad, se descubrieron ~·
••
• ===--, se visua lizan como
t•
1nuchos otros ejemplos de genes interru1npidos; con 1nucha rapi- bucles.
dez, resu ltó evi dente que la mayoría de los genes eucariontes con-
sisten en segmentos de nucleótidos codificantes y no codificantes.
Conclusión: las secuencias codificantes de un gen pueden ser
interrumpidas por secuencias no codificantes.

CONCEPTOS Figura 14-2. La no colinealidad de los genes eucariontes se descubrí '

Cuando una secuencia continua de nucleótidos de DNA codif ica una
secuencia continua de aminoácidos de una proteína, se dice que
ambas son colineales. En los eucariontes, no todos los genes son coli-
neales con las proteínas que codifican.
al hibridar DNA y mRNA. (De Susan M. Berget, Claire Moore y Phillip A.
Sharp. Proc. Nati. Acad. Sci. USA 74[8], pp. 3171-3 175, Fig. 4g agosto
1977 Biochemistry).

na ovoalbúmina tiene ocho exones y siete intrones; el gen del cito-

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
¿Qué evidencia indicó que los genes eucariontes no son colineales
con sus proteínas?
lntrones
Muchos genes eucariontes contienen regiones codificantes denomi-
nadas exones y regiones no codificantes denominadas secuencias
interpuestas o intrones. Por ejemplo, el gen que codifica la proteí-
cromo b tiene cinco exones y cuatro intrones 4fig. 14-3D. El gen
humano promedio contiene de ocho a nueve intrones. Inicialmente,
todos los intrones y los exones se transcriben a RNA pero, después
de la transcripción, se elinrinan los intrones mediante coite y
e1npalme, y se unen los exones para producir RNA maduro.
Los intrones son comunes en los genes eucariontes, pero raros
en los genes bacterianos. Durante una serie de años después de su
descubrimiento, se consideró que los geno1nas procariontes care-
cían por completo de intrones, pero ahora se los ha observado en
archaea, bacteriófagos e incluso en algunas eubacterias. Los
intrones están presentes en genes mitocondriales y de cloroplas-
386 CAPITULO 14

Gen ovoalbúmina Exones Gen de citocromo b Exones

DNA 3'
5'
1 23~ 6
1 1 1 1 l
7 8
3'
DNA 3'
5'
1 _ 2
•
----r--- ■ ■
4 5
3'
1 1 5' 5'
~ lntrones
~
lntrones
■-■
Transcripción El DNA se transcribe a Transcripción
RNA1 y los intrones se
eliminan mediante corte y
empalme del RNA.
1 234567 8 1 23 4 5
\\\1/// / \ \ 1 /
mRNA 5' 3' mRNA 5' 3'

Figura 14-3. Las secuencias codificantes de numerosos genes eucariontes están interrumpidas por intrones no codificantes.

tos, así como en genes nucleares de eucariontes. En los genomas Cuadro 14-1 Principales tipos de intrones
eucariontes, el tamaño y el número de intrones parecen estar
directamente relacionados con la complejidad creciente de los Tipo Mecanismo de
organisn1os: los genes de levadura contienen solo unos pocos de intrón localización corte y empalme
intrones cortos; los intrones de Drosophila son más largos y más
Grupo 1 Genes de eubacterias, bac- Autocorte
nLtmerosos, y la mayoría de los genes de los vertebrados están
teriófagos y eucariontes y empalme
interrumpidos por intrones largos. Todas las clases de genes euca-
riontes - los que codifican rRNA, tRNA y proteínas- pueden con- Grupo 11 Genes de orgánulos de Autocorte
tener intrones. El número y el tan1año de los intrones son muy eubacterias, archaea y y empalme
variables: algunos genes eucariontes no tienen ningún intrón, eucariontes
1nientras que otros pueden tener 1nás de 60; la longitud de los
Pre-mRNA Genes codificantes de pro- Espliceosoma
intrones varía de menos de 200 nucleótidos a más de 50 000. Los nuclear teínas en el núcleo de euca-
intrones tienden a ser más largos que los exones, y la mayoría de riontes
los genes eucariontes contienen más nucleótidos no codificantes
que nucleótidos codificantes. Por último, la mayoría de Jos intro- tRNA Genes de tRNA de eubacte- Enzimático
nes no codifican proteínas: por lo general, un intrón de un gen no rias, archaea y eucariontes
es un exón para un gen diferente. Nota: también hay varios tipos de intrones menores, como intrones de grupo 111,
Desde hace tiempo, los geneti stas han debatido el oiigen evolu- "twintrones" e intrones de archaea.
tivo de los intrones. Una idea, denominada hipótesis de los intro-
nes tardíos, postula que los organismos antiguos carecían de
intrones, pero que estos fueron adquiridos más adelante por los otro mecanisn10 de corte y empaltn e, que depende de enzimas
eucariontes. Otra idea, denominada hipótesis de los intrones tem- para cortar y volver a sellar el RNA. Además de estos grupos prin-
pranos, sugiere que los ancestros iniciales de las bacterias, las cipales, hay otros tipos de intrones.
archa.ea y los eucariontes poseían intrones que, más tarde, fueron En este capítulo, anali zaremos en detalle la química y la me-
perdidos por los procariontes y los eucariontes simples. La evi- cánica del corte y empalme del RNA. Por ahora, debemos recor-
dencia sugiere que, a lo largo de la evolución, se han perdido y dar dos características generales del proceso de corte y empalme:
ganado intrones, porque eucariontes divergentes tienen intrones en 1) el corte y empalme de todos los intrones del pre-mRNA tiene
las mismas posiciones de sus genes, lo que sugiere que estos intro- lugar en el núcleo, y 2) el orden de los exones del DNA suele
nes estaban presentes en los ancestros de todos los eucariontes. mantenerse en el RNA cortado y e1npalmado: las secuencias de
Hay cuatro tipos principales de intrones, que se diferencian por codificación de un gen pueden separarse, pero en general no se
la manera en que son eliminados (cuadro 14-1). Los intrones del mezclan. [llNTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 19
grupo I, hallados en algunos genes de eubacterias, bacteriófagos
y eucariontes, tienen capacidad de autocorte y empalme: pueden
catalizar su propia eliminación. Los intrones del grupo Il están
presentes en algunos genes de mitocrondrias, cloroplastos, archa- CONCEPTOS
ea y algunas eubacterias; ta1nbién tienen capacidad de autoco1te y
empalme, pero su mecanismo de corte y e1npalrne es diferente del Muchos genes eucariontes contienen exones e intrones. Ambos se
de los intrones del grupo l. Los intrones nucleares del pre- transcriben a RNA, pero más tarde se eliminan los intrones med iante
mRNA son los mejor estudiados; incluyen intrones localizados procesamiento del RNA. El número y el tamaño de los intrones va rían
en los genes del núcleo eucarionte. El 1necanisn10 de coite y entre los distintos genes; son comunes en muchos genes eucariontes,
e1npalme por el que estos intrones son el iminados es similar al de pero infrecuentes en genes bacterianos.
los intrones del grupo II, pero los intrones nucleares no tienen
capacidad de autocorte y empalme, y su eliminación req uiere ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
snRNA (analizados más adelante en este capítulo) y una serie de
proteínas. Los intrones del RNA de transferencia, hallados en ¿Cuáles son los cuatro tipos principales de intrones?
los genes del tRNA de eubacterias, archaea y eucariontes, utilizan

Revisión del concepto de gen
¿Cómo afecta la presencia de intrones nuestro concepto de gen?
Ya no parece apropiado definir un gen como una secuencia de
nucleótidos que codifica aminoácidos de una proteína, porque
esta defmición excluye a los intrones, que no especifican amino-
ácidos. Asünismo, esta defmición excluye a los nucleótidos que
codifican los extremos 5' y 3' de una molécula de mRNA, que son
necesarios para la traducción pero que no codifican aminoácidos.
Definir un gen en estos términos también excluye las secuencias
que codifican rRNA, tRNA y otros RNA que no codifican proteí-
nas. Dado nuestro conocimiento actual de la estructura y la fun-
ción del DNA, necesita1nos una definición más precisa de gen.
Muchos genetistas han ampliado el concepto de gen para
incluir todas las secuencias de DNA que se transcriben a una
única molécula de RNA. Así definido, un gen incluye todos los
exones, intrones y las secuencias al comienzo y al final del RNA
que no son traducidas a una proteína. Esta definición también
incluye las secuencias de DNA que codifican rRNA, tRNA y
otros tipos de RNA no mensajeros. Algunos genetistas han am-
pliado aún más la definición de gen para incluir toda la unidad de
transcripción: el promotor, la secuencia codificante de RNA y el
terminador. Sin en1bargo, en la actualidad nueva evidencia cues-
tiona incluso esta definición. Investigaciones recientes sugieren
que gran parte del geno1na se transcribe a RNA, aunque no se
sabe claramente qué hace, si es que hace algo, gran parte de este
RNA. Lo que es seguro es que el proceso de transcripción es más
complejo de lo que se consideraba antes, y que defmir un gen
co1no una secuencia que es transcrita a una molécula de RNA no
es tan sencillo co1no se pensaba. Cuanto más sabemos acerca del
carácter de la información genética, más esquiva parece tornarse
la definición de gen.
CONCEPTOS
El descubrimiento de los intrones exigió revaluar la definición de gen.
En la actualidad, gen suele definirse como una secuencia de DNA que
codifica una molécula de RNA o toda la secuencia de DNA requerida
para transcribir y codificar una molécula de RNA .
14.2 Los RNA mensajeros, que codifican
las secuencias de aminoácidos de las proteínas,
son modificados después de la transcripción
en eucariontes
En cuanto se identificó el DNA como la fuente de infonnación
genética, resul tó evidente que el DNA no puede codificar directa-
mente las proteínas. En las células euca1iontes, el DNA reside en
el núcleo, pero la síntesis de proteínas se produce en el citoplas-
ma. Los genetistas reconocieron que otra molécula debía partici-
par en la transferencia de infor1nación genética.
Los resultados de estudios sobre la infección por bacteriófagos
llevados a cabo a fines de la década de 1950 y principios de la
década de 1960 señalaron al RNA como un probable candidato a
esta función de transporte. Los bacteriófagos inyectan su DNA en
las células bacterianas, donde se replica, y se producen grandes
Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 387
cantidades de proteína del fago en los ribosomas bacterianos. Ya
en 1953, Alfred Hershey descubrió un tipo de RNA que se sinte-
tizaba con rapidez después de la infección por bacte1iófagos. Los
hallazgos de estudios ulteriores mostraron que este RNA de vida
breve tenía una composición nucleotídica similar a la del DNA
del fago, pero bastante diferente de la del RNA bacteriano. Estas
observaciones eran consistentes con la idea de que el RNA era
copiado a partir del DNA y que este RNA dirigía, después, la sín-
tesis de proteínas.
En ese entonces, se sabía que los ribosomas estaban implicados
de alguna manera en la síntesis de proteínas, y que gran parte del
RNA de una célula se encontraba en forma de riboson1as. Se con-
sideraba que los ribosomas eran los agentes mediante los cuales
se trasladaba la información genética al citoplas1na para la pro-
ducción de proteínas. En 196 1, utilizando centiifugación de equi-
librio en gradiente de densidad (véase¡fig. 12-4), Sydney Brenner,
Fran~ois Jacob y Matthew Messelson demostraron que este no era
el caso. Mostraron que no se producen nuevos riboso1nas durante
la síntesis proteica explosiva que aco1npaña a la infección por
fagos tflg. 14-4). Los ribosomas no eran portadores de la in-
fo1mación genética necesaria para producir nuevas proteínas del
fago.
En un experimento relacionado, Fran~ois Gros y sus colegas
infectaron células de E. coli con bacteriófagos, mientras añadían
al 1nedio uracilo radiactivo, que se incorporaría en el RNA del
fago recién producido. Estos investigadores hallaron que el RNA
del fago recién producido era de corta vida, persistía solo algu-
nos minutos y se asociaba con riboson1as, pero era distinto de
ellos. Concluyeron que este RNA de vida co11a recién sintetiza-
do lleva al riboso111a la infor1nación genética de la estructura de
las proteínas. Se acuñó el término RNA mensajero para este
transportador.
Estructura del RNA mensajero
El RNA mensajero funciona como el molde para la síntesis de
proteínas ; transporta la información genética del DNA a un ribo-
so1na y ayuda a ensainblar aminoácidos en s u orden correcto. En
las bacterias, el mRNA se transcribe directa1nente a partir del
DNA, pero en los eucariontes se transcribe primero un pre-mRNA
(denonlinado también transcrito prima1io) a partir del DNA, que
después es procesado para producir el mRNA maduro. Reservare-
mos el ténnino mRNA para las moléculas de RNA que han sido
procesadas por co1npl.eto y están preparadas para ser traducidas.
En el mRN.A, un conjunto de tres nucleótidos, denominado
codón, especifica cada aminoácido de una proteína. Los RNA
tanto procariontes como eucariontes contienen tres regiones pri-
marias ftíg. 14-5)1 La región 5' no traducida (5' UTR; denomi-
nada a veces la líder) es una secuencia de nucleótidos en el extre-
mo 5' del mRNA que no codifica ninguno de los aminoácidos de
una proteína. En el mRNA bacteri ano, esta región contiene una
secuencia consenso (UAAGGAGGU), conocida co1no secuencia
Shine-Dalgarno, que actúa como sitio de unión al ribosoma du-
rante la traducción (véase cap. 15); se localiza alrededor de siete
nucleótidos en dirección 5' respecto del primer codón traducido a
un anlinoácido (denominado codón de iniciación). Durante la tra-
ducción, la secuencia Shine-Dalgarno es complementaria de las
secuencias de una de las moléculas de RNA que componen el
1ibosoma y se aparea con ellas. El mRNA eucruionte no tiene nin-
guna secuencia equivalente en su región 5' no traducida. En las
388 CAPITULO 14
Pregunta: ¿los ribosomas llevan información genética?
Métodos Se cultivó E. coli en medio que
contenía isótopos pesados
durante varias generaciones,
de manera que se
incorporaran en todos 1::--J
s
ribosomas de E. cofi.
, región 5' no traducida, la región codificante de proteínas y la
- Medio con 15 N y 13c
Cu lt ivo de E. coli
O Se trasladaron las células a
- un medio que contenía
7 isótopos ligeros ( 14N y 12 C) ...
11 ... y se infectaron
l con bacteriófago. ,
Si se produjeran nuevos
ribosomas después de la
infección por fagos, estos
contendrían 14 N y 12 C y
serían relativamente ligeros.
f.7- .., - ¡
...:~ , , . . ~ Después de producidas las proteí-
nas del fago, se separaron los ribo-
somas por centrifugación de equi-
librio en gradiente de densidad.
Centrifugación
Resultados Densidad
creciente
~ Solo se hallaron ribosomas
. 1 antiguos que contenían
:--======-_ isótopos pesados (15N y 13C).
1 espacio en las células euc ariontes. La transcripción tiene lugar
Conc.lusión: en la reproducción de fagos, no se producen riboso-
mas que, por lo tanto, no son portadores de información genét ica.
Figura 14-4. Brenner, Jacob y M eselson demostraron que los riboso-
mas no llevan información genética.
células eucariontes, los riboson1as se unen a un extremo 5' modi-
ficado del mRNA, como se analiza más adelante en este capítulo.
La siguiente sección del mRNA es la región codifican te de pro-
teína, que comprende los codones que especifican la secuencia de
aminoácidos de la proteína. La región codificante de proteína
Secuencia Shine-Da lgarno
solo en procariontes
mRNA
5'
- -
~ Codón de iniciación Codón de terminación
3'
Reg ión 5' Región codificante Región 3'
no traducida de proteína no traducida
figura 14-5. Tres regiones principales del mRNA maduro son la
región 3' no traducida.
comienza con un codón de iniciación y finaliza con un codón de
terminación. La últin1a región del mRNA es la región 3' no tra-
ducida (3' UTR; denominada a veces remolque), una secuencia
de nucleótidos en el extremo 3' del mRNA que no se traduce a
proteína. El 3' UTR afecta la estabilidad del 1nRNA y la traduc-
ción de la secuencia codificante de proteína del nlRNA. Ob-
sérvese en la Animación 14.1 cómo mutaciones de cLiferentes
regiones de un gen afec tan el flujo de información del genotipo al
fenotipo.
CONCEPTOS
Las moléculas de RNA mensajero contienen t res regiones principales:
un región 5' no traducida, una región codificante de proteínas y una
región 3' no traducida. Las regiones 5' y 3' no traducidas no codifi-
can ningún aminoácido de una proteína, pero contienen información
que es importante para la traducción, la estabilidad del RNA y la regu-
lación de la expresión gén ica.
Procesamiento del pre-mRNA
En las células bacteri anas, la transcripción y )a traducción tie-
nen lugar en forma simultánea; mientras el exti-emo 3' de un
m.RNA se encuentra en proceso de transcripción, los ribosomas
se unen a la secuencia Shine-Dalgarno cerca del extremo 5' y se
inicia la traducción. Co1110 la transcripción y la traducción están
acopladas, el mRNA bacteriano tiene escasa oportunidad de ser
modificado antes de la síntesis proteica. En cambio, la transcrip-
ción y la traducción están separadas tanto en tiempo como en
en el núcleo, mientras que la traducción se produce en el cito-
plas1na; esta separación ofrece una oportunidad para que se
modifique el RNA eucarionte antes de que sea traducido. De
hecho, el n1RNA eucarionte presenta extensa 1nodi:ficación des-
pués la transcripción. Se realizan cambios en el extremo 5', el
extremo 3' y en la sección codificante de proteína de la molécu-
la de RNA (cuadro 14-2).
Adición del casquete S'
Un tipo de modificación del pre-rnRNA es la adición de una es-
tructura denominada casquete 5' . El casquete consiste en una
molécula extra en el extremo 5' del 1nRNA y grupos metilo
 Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 389

Cuadro 14-2 Modificaciones postrasncripción del

/ Nucleótido
pre-mRNA eucarionte
/ / Fosfato
Modificación Función mRNA 5' ppp NrP1NfP- 3'
Adición del cas- Facil ita la unión del ribosoma al extremo S'
quete 5' del mRNA, aumenta la estabilidad del mRNA, Se elimina uno de Eliminación
incrementa el corte y empalme del RNA los tres grupos P1 del grupo
fosfato del extremo
fosfato
Escisión 3' y ad i- Aumenta la estabilidad del mRNA, facilita la 5' del mRNA, ...
ción de cola de unión del ribosoma al mRNA
poli(A)

Corte y empalme Elimina intrones no codificantes del pre- fÍ ... y se añade un nucleótido '
del RNA mRNA, facilita la exportación del mRNA al de guanina (con su grupo IGTP 1
citoplasma, permite que se produzcan múlti- fosfato).
ples proteínas mediante corte y empalme
alternativo
5' G P P. P N lp] N[Pa 3'
Edición del RNA Modifica la secuencia de nucleótidos del
mRNA Se agregan grupos metilo a la
posición 7 de la base del nu- Metilación
~ leótido de guanina terminal. ..

'r-
5' Cl:l3,- G P P P N..P] NI.P _ _ 3'
(CH3) en la base del nucleótido recién agregado y en el grupo
Metilación
2'-OH del azúcar de uno o más nucleótidos en el extremo 5'
ttíg. 14-~ . El agregado del casquete tiene lugar con rapidez des- • ... y a la posición 2' del La base del nucléotido
pués del inicio de la transcripción y, co:mo se analizará con azúcar en el segundo y inicial también puede
tercer nucleótidos. estar metilada.
mayor profundidad en eJ capítulo 15, actúa en el inicio de la tra-
ducción. Las proteínas de unión al casquete lo reconocen y se
unen a él; después, un ribosoma se une a estas proteínas y se
mueve en dirección 3' a lo largo del mRNA hasta que alcanza el 5 ' Qil lG P P

codón de iniciación y se inicia la traducción. La presencia de un

casquete 5' también aumenta la estabilidad del mRNA e influye
en la eliminación de intrones.
Como se mencionó en la exposición sobre transcripción del CH 3 - Grupo CH3
metilo 7
capítulo 13, en el extremo 5' de todas las moléculas de mRNA
hay tres grupos fosfato, porque en la reacción de transc1ipción no H2C ~ P P p 1-cH 2
se escinden los grupos fosfato del p1imer ribonucleósido trifosfa- Grupo
to. El extremo 5' del pre-mRNA puede representarse co1no 5'- metilo 2'
pppNpNpN ... , en el que la letra "N" representa un ribonucleóti- 1
OCH:3
do, y "p", un fosfato. Poco después del inicio de la transcripción, OH OH
se elimina uno de los grupos fosfato y se añade un nucleótido de -meti lguanosina
guanina (véase pig. 14-6). Este nucleótido de guanina se une al
pre-mRNA mediante un único enlace 5' -5', que es bastante dis-
tinto del enlace fosfodiéster 5 '-3' habitual que une a todos los
demás nucleótidos del RNA. Luego, se agregan uno o más grupos OCH:3
p
metilo al extremo 5'; el primero de estos grupos metilo se añade
a la posición 7 de la base del nucleótido de guanina terminal y Ja
Figura 14-6. La mayoría de los mRNA eucariontes tienen un cas-
convierte en 7-metilguanina. A continuación, puede agregarse un quete 5'. El casquete consiste en un nucleótido con 7-metilguanosi-
grupo 1netilo a la posición 2' del azúcar del segundo y tercer nu- na unido al pre-mRNA por un único enlace 5' -5' (mostrados en deta-
cleótidos (véase¡fig. 14-6]. Rara vez, pueden unirse grupos me- lle en el recuadro inferior).
tilo adicionales a las bases del segundo y tercer nucleótido del
pre-mRNA.
Vaiias enzimas diferentes participan en la adición del casquete
5'. El paso inicial depende de una enzima que se asocia con la Adición de la cola de poli(A)
RNA polimerasa II. Como ni la RNA polunerasa I ni la RNA
polin1erasa III tienen esta enzima asociada, las moléculas trans- Un segundo tipo de n1odificación del RNA eucarionte es la adi-
critas por estas poli1nerasas (rRNA, tRNA y algunos snRNA) no ción de 50 a 250 o más nucleótidos de adenina en el extremo 3',
tienen casquete. que forman una cola de poli(A). Estas molécu las no están codifi-
390 CAPITULO 14
DNA
1 •
Sitio de inicio
de la transcripción Transcripción
Secuencia
Escisión
S' 'AAUAAA
Poliadeni lación
mRNA 5'
Figura 14-7. La mayoría de los mRNA eucariontes tienen una (Zc;"nclusión: en el procesamiento del pre-mRNA, se af\a<k7
cola 3' de poli(A). Eª
cadas por el DNA, sino que se agregan después de la transcrip-
ción (Jtig. 14-'lp en un proceso denominado poliadenilación. Mu-
chos genes eucariontes transcritos por la RNA polimerasa II se
transcriben más allá del final de la secuencia de codificación
(véase cap. 13); después, se escinde la mayoría del material extra
del extremo 3' y se agrega la cola de poli(A). En algunas molécu-
las de pre-1nRNA, pueden elüninarse más de 1000 nucleótidos del
extremo 3' antes de la poliadeni lación.
El procesamiento del extremo 3' del pre-mRNA requiere se-
cuencias conocidas como señal de poliadenilación, tanto en
dirección 5' como en dirección 3' respecto del sitio donde se pro-
duce la escisión. Por lo general, la secuencia consenso AAUAAA
se locali za de 11 a 30 nucleótidos en dirección 5' respecto del
sitio de escisión (véase¡fig. 14-, ) y determina el punto en el que
se producirá la escisión. Suele haber una secuencia rica en nucle-
ótidos de uracilo (o en nucleótidos de guanina y uracilo) en
dirección 3' respecto del sitio de escisión. Una gran cantidad de
proteínas intervienen en hallar el sitio de escisión y eli1ninar el
extremo 3'. U na vez finalizada la escisión, se añaden nucleótidos
de adenina sin un molde al nuevo extremo 3', lo que crea una
cola de poli(A). La cola de poli(A) confiere estabilidad a muchos
mRNA, lo que aumenta el tiempo durante el cual el mRNA per-
manece intacto y disponible para la traducción antes de ser
degradado por enzirnas celulares. La estabilidad conferida por la
cola de poli(A) depende de las proteínas que se unen a la cola y
de su longitud. Asimisn10, la cola de poli(A) facilita la unión del
ribosoma al mRNA y desempeña un papel en la exportación
del mRNA al citoplasma.
Se añaden colas de poli(U) a los extremos 3' de algunos rn.RNA,
microRNA y RNA nucleares pequeños. Si bien todavía se está
investigando la función de las colas de poli(U), la evidencia
sugiere que pueden facilitar la degradación de algunos mRNA.
ll!_NTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 29
Se escinde el pre-mRNA en una po-
sición de 11 a 30 nucleótidos en di-
rección 3' respecto de la secuencia
11 -30 consenso en la región 3' no traduci~
nucleótidos
3'
t Secuencia rica en U
Sitio de
escisión ~
El agregado de nucleótidos de ade-
nina (poliadenilación) tiene lugar en
3' el extremo 3' del pre-mRNA, lo que j
genera la cola de poli(A).
V
Cola de poli(A)
AAAAAAAAAAAAAAAAA 3'
cola de poli(A) mediante escisión y poliadenílación. _J
CONCEPTOS
Los pre-mRNA eucariontes son procesados en sus extremos 5' y 3'. Se
agrega un casquete, que consiste en un nucleótido modificado y
varios grupos metilo, al extremo 5'. El casquete facilita la unión de un
ribosoma, aumenta la estabil idad del mRNA y puede incidir en la eli-
minación de intrones. El procesamiento en el extremo 3' incluye esci-
sión en dirección 3' de una secuencia consenso AAUAAA y el agrega-
do de una cola de poli(A).
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿Por qué los pre-mRNA tienen casquete, pero los tRNA y los rRNA no?
Corte y empalme del RNA
El otro tipo importante de n1odificación del pre-1nRNA eucarion-
te es la eliminación de intrones media nte corte y empalme del
RNA. Esta modificación tiene lugar en el núcleo, antes de que el
RNA se traslade al citoplasma.
SECUENCIAS CONSENSO y EMPALMOSOMA El corte y empalme exi-
ge la presencia de tres secuencias en el intrón. Un extremo del
intrón se denomina sitio de corte y empalme 5' , y el otro extremo
es el sitio de coite y en1palme 3' ~fig. 14-8]; estos sitios de corte
y empalme tienen secuencias consenso cortas. La mayoría de los
intrones de los pre-mRNA comienzan con GU y finalizan con
AG, lo que indica que estas secuencias desempeñan un papel cru-
cial en el corte y e1npalme. De hecho, ca1nbiar un solo nucleóti-
do en uno u otro de estos sitios ilnpide el corte y empaline.
La tercera secuencia importante para el corte y empalme se
encuentra en el punto de ramificación, que es un nucleótido de
 Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 391

Exón 1 Exon 2

S' [ -~{i ·------~------·

Sitio de corte y empalme S'

...J...ctGUA¡c;A GU
t.._____ _________,J
y
lntrón

A
\
Sitio de corte y empalme 3'

CAG
'-y--' -- 3'
Figura 14-8. El corte y empalme del pre-mRNA requiere
secuencias consenso. Hay secuencias consenso críticas en el
sitio de corte y empalme 5' y el sitio de corte y empalme 3'.
Existe una secuencia consenso débil (no mostrada) en el punto
Secuencia Punto de Secuencia
consenso 5' ramificación consenso 3' de ramificación.

adenina que se encuentra de 18 a 40 nucleótidos en dii-ección 5 '

respecto del sitio de corte y empalme 3' (véase! fig. 14-§). La
secuencia que rodea al punto de ramificación no tiene un consen-
so fu·me. La deleción o la rnutación del nucleótido de adenina en
el punto de ramificació n evita el corte y empalme.
E l corte y empalme se produce dentro de una estructui-a grande
denominada espliceosoma, que es una de las estructuras molecu-
lares más grandes y complejas. El espliceosoma consiste en cinco
1noléculas de RNA y casi 300 proteínas. Los componentes RNA
son RNA nucleares pequeños (snRNA; véase cap. 13) que varían
de 107 a 210 nucleótidos de longitud; estos snRNA se asocian
con proteínas para formar pequeñas partículas de ribonucleopro-
teínas nucleares (snRNP). Cada snRNP contiene una sola molé-
cula de snRNA y múltiples proteínas. El espliceosoma está com-
puesto por cinco snRNP (Ul, U2, U4, U5 y U6) y algunas prote-
ínas no asociadas con un snRNA.
CONCEPTOS
Los intrones de los genes nucleares contienen tres secuencias consen-
so cruciales para el corte y empalme: un sitio de corte y empalme 5',
un sitio de corte y empalme 3' y un punto de ramificación. El corte y
empalme del pre-mRNA tiene lugar dentro de un gran complejo
denominado espliceosoma, que consiste en snRNA y proteínas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
Si un sitio de corte y empalme mutara de manera que no se produje-
ra el corte y empalme, ¿cuá l sería el efecto sobre el mRNA?
a. Sería más corto de lo norma l.
b. Sería más largo de lo normal.
c. Sería de la misma longitud, pero codificaría una proteína diferente.
PROCESO DE CORTE y EMPALME Antes de que tenga lugar el corte
y empalme, un intrón se localiza entre un exón en dirección 5 '
(exón 1) y un exón en dirección 3' (exón 2), como muestra la
!figura ~4-9'- El corte y empalme del mRNA se produce en dos
pasos dístintos. E n el primer paso del corte y empalme, se corta
el pre-mRNA en el sitio de corte y e1npalme 5'. Este corte libera
el exón 1 del intrón, y el extremo 5' del intrón se une al punto de
ramificación; el intrón se pliega sobre sí mismo y forma una
estructura denominada lazo. En esta reacción, el nucleótido de
guanina de la secuencia con senso del sitio de corte y empalme 5'
se une con el nucleótido de adenina que se encuentra en el punto
de ramificación 1nediante una reacción de tran sesterificación.
E n esta reacción, tanto la escisión 5 ' como la formación del lazo
se producen en un solo paso. El resultado es que el grupo fosfa-
to 5 ' del nucleótido de adenina ahora está unido al grupo 2' -OH

Sitio de corte{ empalme S' Sitio de corte { empalme 3'

Pre-mRNA lii•h•• 1 lntrón Ex:ón 2

Se corta el mRNA El extremo 5' del in- Se realiza un corte en el

en el sitio de corte trón se une al punto sitio de corte y empalme 3' .
y empalme S' . de ramificación .
r----'
1

5'

... y se cortan y em-

' El intrón se libera
palman juntos los
como un lazo, ...
dos exones.
7
Lazo mRNA Exón 1 1 E,cón 2

, Se rompe el enlace que El RNA cortado y empal-

mantiene el lazo, y se mado es exportado al
degrada el intrón lineal. Traducción citoplasma y traducido.

Figura 14-9. El corte y empalme de los intrones nucleares requiere

un proceso de dos pasos.
392 CAPITULO 14

de l nu cleótid o de adenina del punto de ramificación (véase
111g. 14-~)-
En el segundo paso del corte y empalme de RNA, se realiza un
corte en el sitio de corte y empalme 3' y, en forma simultánea, el
extremo 3' del exón 1 forma una unión covalente (se empalma)
con el extren10 5' del exón 2. EJ intrón se libera como un lazo.
Finalmente, una enzima desramificadora del lazo rompe eJ enJa-
ce en el punto de ramificación, lo que produce un intrón lineal que
es degradado con rapidez por enzimas nucleares. El mRNA
maduro formado por los exones empalmados se exporta al cito-
plasma, donde es traducido.
Estas reacciones de corte y empalme tienen lugar dentro del
espliceoson1a, que se ensambla en el pre-1nRNA aso a aso y
lleva a cabo las reacciones de corte y empalme fig. 14-1 ). Una
caracte1istica cn1cial del proceso es una serie ciones
entre el mRNA y los snRNA, y entre diferentes snRNA. Estas
interacciones dependen del apareamiento de bases complementa-
rias entre las distintas moléculas de RNA y acercan los compo-
nentes esenciales del transcrito de pre-inRNA y el esplíceoso111a,
lo que posibilita el corte y e1npalme. Los snRNA que constituyen
5' lntrón A j;ft.¡J¡; 3 '
t 1 t enfermedades genéticas humanas alteran el coite y empaln1e del
Punto de ramificación
el espliceosoma llevan a cabo pasos catalíticos clave del proceso
de corte y empalme.
Primero, la snRNP Ul se une al sitio de corte y empalme 5 ' , y
después se une U2 al punto de ramificación. Un complejo forma-
do por U4, U5 y U6 (que fonnan una sola snRNP) se une al espli-
ceosoma. Esta adición induce un cambio de conformación del
espliceosoma, el intTón forma un bucle y eJ sitio de corte y empal-
me 5' se acerca al punto de ramificación. Las partículas Ul y U4
se disocian del espliceosoma, con la consiguiente formación de
pares de bases entre U6 y U2, y entre U6 y el sitio de corte y
empalme 5'. El sitio de corte y en1palme 5', el sitio de corte y
e1npalme 3' y el punto de ramificación se encuentran en estrecha
proxünidad, y el espli ceosoma los mantiene juntos. Se producen
las dos reacciones de transesterificación, que unen los dos exones
y liberan el intrón como un lazo.
La mayoría de los mRNA se producen a partir una única molé-
cula de pre-tnRNA a partir de la que se cortan y empalman los
exones. Sin embargo, en algunos organismos (sobre todo, nema-
todos y tripanoso1nas), los mRNA pueden producirse por corte y
empalme de secuencias de dos o más moléculas diferentes de
RNA, proceso que se conoce como corte y empalme trans.
Muchas enfermedades genéticas humanas se deben a mutacio-
nes que afectan el corte y empalme del pre-mRNA; de hecho, alre-
dedor del 15 % de las sustituciones de una única base que causan
pre-mRNA. Algunas de estas 1nutaciones interfieren con eJ reco-
nocimiento de los sitios de corte y empalme 5' y 3' normales.

_ _ _ _ __,.U1
l U2
Otras crean nuevos sitios de corte y empalme, como fue el caso de
la mutación que causó la hemofilia de la familia real, analizada en
. . U1 se une al sitio de Ó U2 se une al punto ' la introducción de este capítulo. ►
~ rte y empalme 5' Lde ramificación . _j Antes de que el RNA pueda moverse al citoplasma, se debe rea-
--y-
,..,,,.,, lntrón A ·r:¡¡•1R•t""l►ln•-
lizar su corte y en1palme, que tiene lugar en eJ núcleo. Los RNA
sometidos a corte y empalme incompleto permanecen en el núcleo
hasta que se completa el corte y empalme o hasta que se degrada
U1 U2 t
el pre-mRNA. Inmediatamente después del corte y empalme, se
deposita un grupo de proteínas denominadas complejo exón-unión
U4 U5 Ó Un completo de U4,1 (EJC, exon-junction co1nplex) alrededor de 20 nucleótidos en sen-
US y U6 se une al tido 5' respecto de cada unión exón-exón del mRNA. El EJC pro-
U6
i espliceosoma. i mueve la exportación del mRNA del núcleo al citoplasma.

' Se liberan U1 y U4. CONCEPTOS

y Espliceosoma

u, P El corte y empalme de intrones de genes nucleares es un proceso de

• U4 ~ dos pasos: 1) se escinde el extremo 5' del intrón y se une al punto
de ramificación para formar un lazo, y 2) se escinde el extremo 3 ' del
El apareamiento de bases k-P~ intrón, y se empalman juntos los dos exones. En el proceso, los exo-
entre las secuencias del U2 nes se unen y se elimina el intrón interpuesto. Estas reacciones tienen
mRNA y los snRNA mantie- lugar dentro del espliceosoma.
ne junto el espliceosoma.

CORTE y EMPALME MENOR Algunos intrones de los pre-mRNA de

Exón 1 Exón 2. eucariontes multicelulares utilizan un proceso diferente de elimi-
nación de intrones conocido co1no corte y empaln1e menor. Los
• Los exones se unen, y intrones sometidos a corte y empalme menor tienen secuencias
A se libera el intrón
U2 U6 como un lazo.
consenso diferentes en el sitio de corte y empalme 5' y en el punto
de ramificación, y utilizan un espliceosoma menor, que contiene
Figura 14-10. El corte y empalme del RNA tiene lugar un conjunto algo distinto de snRNA. Aproximadamente 700-800
dentro del espliceosoma. El espliceosoma se ensambla de genes del geno1na humano contienen intrones que presentan corte
manera secuencial. y empalme menor.
 Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 393

(a) lntrón del grupo 1 empalme de los intrones del grupo Il se logra mediante un meca-
nismo que guarda algunas similitudes con el corte y empalme
mediado por el espliceosoma de los genes nucleares, y el corte y
empalme genera una estructura en lazo. D ebido a estas sin1ilitu-
des, se ha sugerido que los intrones del grupo Il y los intrones del
pre-mRNA nuclear están relacionados desde el punto de vista
Sitio de corte evolutivo; quizá los intrones nucleares evolucionaron a partir de
y empalme 5' los intrones del grupo Il con capacidad de autocorte y empalme,
t y más adelante adoptaron las p roteínas y los snRNA del esplice-
osoma para llevar a cabo la reacción de corte y empalme.
/
Exón 1
Sitio de \
corte y
empalme 3' Exón 2
CONCEPTOS
Algunos intrones se eliminan mediante el sistema de corte y empal-
me menor. Otros intrones tienen capacidad de autocorte y empalme,
y consisten en dos tipos: intrones del grupo I e intrones del grupo 11.
Estos intrones tienen estructuras secundarias complejas que les per-
El intrón grande se miten catalizar su escisión de las moléculas de RNA sin la ayuda de
elimina por corte y enzimas ni de otras proteínas.

7 m•
(b) lntrón del grupo 11
Se elimina el intrón J
en forma de una es-
tructura en lazo._j
Exón 1 ~ , i~ Exón 11
Figura 14-11 . Los intrones de grupo I y grupo II se plie-
gan en estructuras secundarias características.
INTRONES CON CAPACIDAD DE AUTOCORTE y EMPALME Algunos in-
trones tienen capacidad de autocorte y empalme, es decir, pueden
autoeliminarse de una molécula de RNA. Estos i ntrones con capa-
cidad de autocorte y empaline p e1tenecen a dos categorías princi-
pales. Los intrones del grupo I se encuentran en diversos genes,
incluidos algunos genes de rRNA en protistas, algunos genes
mitocondriales de hongos e incl uso e n algunos genes de bacterias
y bacteriófagos. Si bien la longitud de los intrones del grupo I
varía, todos ellos se pliegan en una estructura secundaria común
con nueve tallos con bucles (tig. 14-lla), necesarios p ara el corte
y en1pahne.
Los intrones del grupo 11, presentes en genes de orgánulos de
eubacte1ias, archaea y eucariontes, también tienen la capacidad
de autocorte y empalme. Todos los intrones del gn1po Il también
se pliegan en estructuras secundarias [fig. 14-116f. El corte y
Vías de procesamiento alternativas
U n hallazgo que con1plica el concepto de un gen co1no una se-
cuencia de nucleótidos que especifica una secuencia de aminoáci-
dos de una proteína (véase sección "Revisión del concepto de gen")
es la existencia de vías de procesamiento alternativas. En estas
vías, un único pre-mRNA se procesa de distintas maneras para pro-
ducir tipos alternativos de mRNA, lo que determina la síntesis de
diferentes proteínas a partir de la misma secuencia de DNA
Un tipo de procesamiento alternativo es el corte y empalme
alternativo, en el que el mismo pre-mRNA se puede cortar y
empalmar en más de una forma para producir múltiples mRNA
que se traducen a diferentes secuencias de aminoácidos y, por
consiguiente, a diferentes proteínas 11ig~ 4-1fa,. Otro tipo de
procesamiento alternativo requiere la u zac1on de múltiples
sitios de escisión 3' {ffg. 1~-~1:~). donde h ay dos o más sitios
potenciales de escisión y po la e ní lación en el pre-mRNA. En el
ejemplo de la!figura 14-12§, la escisión en el primer sitio produ-
ce un mRNA relativamente corto en comparación con el mRNA
producido por la escisión en el segundo sitio. La utilización de un
sitio de escisión alternativo puede producir, o no, una proteína
diferen te, lo que depende de si la posición del sitio es previa o
poste1ior al codón de terminación.
En el mismo transcrito de pre-mRNA, p ueden existir tanto corte
y empalme alternativo como múltiples sitios de escisión 3'. Se ob-
serva un ejemplo en el gen que codifica la calcitonina en los mamí-
feros; este gen contiene seis exones y cinco intrones k1ig. 14-lla).
Todo el gen se transcri be a pre-ni.RNA !fig. 14-1360. Hay dos
posibles sitios de escisión 3'. En las célu las de la g lándula ti roi-
des, la escisión 3' y la poliadenilación tienen lugar después del
cuarto exón para producir un mRNA maduro formado por los
exones 1, 2, 3 y 4 {fig. 14-13q). Este mRNA se traduce a la hor-
mona calcitonina, que es producida por la glándula tiroides y
regula las concentraciones de calcio. En las células cerebrales, se
transcribe el pre-mRNA idéntico a partir de DNA, pero la esci-
sión y la poliadenilación tienen lugar después del sexto exón.
D urante el corte y empalme, se elimina el exón 4; por lo tanto,
solo los exones 1, 2, 3, 5 y 6 están presentes en el mRNA madu-
394 CAPITULO 14

(a) Corte y empalme (b) Múltiples sitios 3' de escisión

DNA lntrón 1 lntrón 2 lntrón

DNA
\ \ \

Transcripción Transcripción
Sitio de escisión 3'
Pre-m RNA
♦ Pre-mRNA tO tf>Sitios de escisión 3'
1~1,1■ -- 3' s• 16ia■ L ___ . 3'

~ escisión puede r... o en el

Escisión 3' y
poliadenilación
E en el sitio 3' 1...
Escisión y
poliadenilación 3'
~ itio 3' 2.

9
5• íi="'''' lff•iiiC AAAAA 3' 5' iti•iii■ 1 AAAAA 3' 5' lff•i,ií AAAAA 3'
Exon 2. _ _ _ _ _ _ _ __
fSe eliminan dos
intrones para pro-
Corte y empalme
S se eliminan dos intro- l Corte y
Después del corte y em-
Corte y
nes y el exón 2 para pro- palme, se producen pro-
alternativo
ducir un mRNA ... empalme ductos de mRNA de empalme
d el RNA
del RNA diferentes longitudes. del RNA

mRNA
AAAAA 3' 5' Exón 1 Exón 3 AAAAA 3' 5' AAAAA 3' 5' AAAAA 3'

lntrón 1 lntrón 2 lntrón 1, exón 2 lntrón 1 lntrón 2

e intrón 2

Conclusión : tanto el corte y empalme alternativo como los

múltiples sitios de escisión 3' producen diferentes mRNA a
partir de un único pre-mRNA.

Figura 14-12. Las células eucariontes tienen vías alternativas para el procesamiento del mRNA. a) Con
corte y empalme alternativo, el pre-mRNA puede ser cortado y empalmado de manera diferente para producir dis-
tintos mRNA. b) Con múltiples sitios de escisión 3', hay dos o más sitios potenciales para la escisión y la poliadeni-
lación; la utilización de los diferentes sitios produce mRNA de distintas longit udes.

ro fig. 14-13 . Cuando es traducido, este mRNA produce una
prote1na enonunada péptido relacionado con el gen de calcitoni-
na (CGRP), que tiene una secuencia de aminoácidos bastante
diferente que la de la calcitonina. El CGRP causa vasocli latación
y pueden actuar en la transmisión del dolor. Ciertas investigacio-
nes sugieren que el CGRP interviene en la aparición de cefaleas
migrañosas. El corte y empalme alternativo puede provocar dis-
tintas combinaciones de exones en el nlRNA, pero en general no
se 1nodífica el orde n de los exones.
El procesamiento alternativo de los pre-mRNA es frecue nte e n
los eucariontes multicelulares. Por eje1nplo, los investigadores
estiman que el 90% de todos los genes humanos presentan corte
y empalme alternativo. A menudo, la forma de corte y empalme
difiere entre tejidos humanos: los tejidos cerebral y hepático hu-
1nanos tienen mayor cantidad de RNA son1etido a corte y en1pal-
1ne alternativo que otros tejidos. E n ocasiones, el corte y e1npalme
varía incluso de una persona a otra. Las diferentes vías de proce-
samiento contribuyen a la regulación génica, como se analizará en
el capítulo 17.
E l corte y empalme alternativo puede desempeñar un papel en
la complejidad de los organismos. La secuenciación co1npleta de
los genomas de numerosos organi s1nos (véase cap. 20) ha lleva-
do a la conclusión de que el número de genes de un organismo no
se asocia con su complejidad. Por ejemplo, las moscas de la fruta
tienen solo alrededor de 14 000 genes, mientras que nematodos
más silnples desde el punto de vista anatómico tienen 19 000 ge-
nes. La planta Arabidopsis thaliana tiene alrededor de 20 000
genes, casi tantos como los seres humanos . Si organismos anató-
micamente s imples tienen tantos genes como los organismos com-
plejos, ¿cómo se codifica la complejidad del desarrollo en el ge-
noma? Una posible respuesta es el procesamiento alternativo, que
puede producir múltiples proteínas a partir de un solo gen y es
una fuente importante de diversidad proteica en los vertebrados.
La investigación reciente demuestra que aun especies estrecha-
mente relacionadas a menudo difieren en la manera de cortar y
empalmar sus pre-mRNA, y el corte y empatme alternativo puede
haber desempeñado un papel importante en la esp eciación (véase
cap. 26).
 Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 395

(a)

DNA
5' xón 1 xón 2 Ex · n 3 Exón 5
3'

Transcripción

(b)

Pre-mRNA S' Exón 1 Exón 2 Exón 3 Exón 5 Exón 6 3'

t t
En las células tiroideas, la :::::::::::::::::::==¡-- Sitio de escisión 3 ' Sitio de escisión 3'
escisión y la poliadenilación
tienen lugar en el extremo • En las células cerebrales, la
del exón 4 .. . Procesam iento del RNA escisión 3' tiene lugar en el
extremo del exón 6.
Células tiroideas Células cerebrales DIDura_nt~ el cort~ Y empalme,
--------------------------- 1 se el1~tna el exon 4 con los
~ co 1ntrones, ...

(c) (d)

mRNA 5' Exón 1 Exón 2 AAAAA 3' mRNA 5' Exón 1 Exón 2 1Exón 3 Exón 5 • Exón 6 AAAAA 3'
_A_
... , lo que produce un La traducción produce • ... , lo que produce un La traducción produce7
RNA que contiene los la hormona calcitonina. mRNA que contiene los el péptido relacionado
exones 1, 2, 3 y 4. exones 1, 2, 3, 5 y 6. con el gen de calcitonina.
_)

Calcitonina Péptido relacionado con el

gen de calcitonina (CGRP)

Figura 14-13. El pre-mRNA codificado por el gen de calcitonina presenta procesamiento alternativo.

modifica después de la transcripción, de manera que la proteú1a

CONCEPTOS
El corte y empa lme alternativo permite que los exones sean cortados
y empalmados juntos en dif erentes combinaciones para producir
mRNA que codifican distintas proteínas. Los sitios de escisión 3' alter-
nativos permiten la escisión del pre-mRNA en diferentes sitios.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
Los sitios de escisión 3' alternativos dan por resultado
a. mú ltiples genes de diferentes longitudes,
b. mú ltiples pre-mRNA de diferentes longitudes,
c. múltiples mRNA de diferentes longitudes,
d. todas las anteriores.
Edición del RNA
Un proceso denominado edición del RNA contradice la presun-
ción de que toda la información acerca de la secuencia de ami-
noácidos de una proteína reside en el DNA. En la edición del
RNA, la secuencia de codificación de una molécula de RNA se
tiene una secuencia de a1ninoácidos que difi ere de la codificada
por el gen.
En 1986, se detectó por primera vez la edición del RNA al
comparar las secuencias de los mRNA con las secuencias de
codificación del DNA a partir de las cuales habían sido transcri-
tas. En algunos genes nucleares de células de mamíferos y en
algunos genes mitocondriales de células vegetales, había habido
sustitu ciones de algunos de los nucleótidos del 1nRNA. Se ha
observado edici ón del RNA más ex tensa en el mRNA de algu-
nos genes mitocondriales de parásitos tripanosomas (que causan
la enfermedad del sueño africada; ltig. 14-1, . En algunos
mRNA de estos organismos, más del 60% de la secuencia se
detern1ina por edición del RNA. En Ja actualidad, se han obser-
vado diferentes tipos de edición del RNA en los ,nRNA, tRNA
y rRNA de un amplio espectro de organjsmos; los tipos com-
prenden la inserción y la deleción de nucleótidos, y la conver-
sión de una base en otra.
Si la secuencia modificada de una molécula de RNA editada no
proviene de un molde de DNA, ¿cón10 es especificada? Diversos
mecanismos pueden provocar los cambios de las secuencias de
RNA. En algunos casos, molécu las denominadas RNA guías
(gRNA) desempeñan un papel crucial. Un gRNA contiene se-
cuencias que son en parte complementarias de segmentos del
396 CAPITULO 14

mRNA
preeditado 5' AAAGGGCUUUAACUUCA 3'

El mRNA preeditado se
aparea con el RNA guía

RNA
preeditado S' 3'
UUUUUUUGAAAUUGAAGU
mRNA AAA AAAA
3' A 5'
guía
El RNA guía sirve de
molde para el agregado, ,
la deleción o la modifi-
cación de las bases.

5' uuu u u uu u u 3'

UUUAAAUAUAUAAUAGAAAAUUGAAGU
3' 5'
Después, se libera
el mRNA maduro.
Figura 14-14. El Trypanosoma brucei causa la enfermedad del sueño
africana. El RNA mensajero producido a partir de genes mitocondriales de
este parásito (en violeta) presenta extensa edición del RNA. (Davic mRNA
Spears/Last Refuge Ltd./Phototake). maduro 5' 3'

~ nclusión: el RNA guía añade nucleótidos al 7

~ -mRNA que no fueron codificados por el DN~

RNA preeditado, y las dos moléculas presentan apareamiento de
bases en estas secuencias (pg. 14-15). Después de que una molé-
cula de mRNA se une al gRNA, el mRNA es sometido a escisión
y se añaden, se elüninan o se modifican nucleótidos según el
molde proporcionado por el gRNA. En otros casos, Jas enzimas
causan conversión de bases. Por ejemplo, en los seres humanos,
un gen se transcribe a mRNA que codifica un polipéptido trans-
portador de lípidos denominado apolipoproteína-B 100, que tiene
4.563 aminoácidos y se sintetiza en las células hepáticas. En las
células intesti nales, se sintetiza una forma truncada de la proteína
deno1ninada apolipoproteína-B48 (de solo 2153 aminoácidos)
mediante la edición del mRNA de la apolipoproteína-B 100. En
esta edición, una enzima desamina una base citosina y la convier-
te en uracilo. Esta conversión cambia un codón que especifica el
aminoácido glutamina en un codón de terminación que finaliza en
forma prematura la traducción, lo que determina una proteína
acortada. ►
CONCEPTOS
Los nucleótidos individuales del interior del pre-mRNA se pueden
cambiar, agregar o eliminar mediante edición del RNA. La secuencia
de aminoácidos producida por el mRNA editado no es la misma que
la cod ificada por el DNA.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
¿Qué especifica la secuencia modificada de nucleótidos hallada en
una molécula de RNA editado?
Figura 14-15. Los RNA guía llevan a cabo la edic;ión del RNA. El mRNA
guía tiene secuencias que son parcialmente complementarias a las del
mRNA preeditado y se aparea con este. Después del apareamiento, el
mRNA se escinde y se añaden nuevos nucleótidos que utilizan como molde
secuencias del gRNA. Después, se unen los extremos del mRNA.
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Estructura de los genes eucariontes y procesamiento del
pre-mRNA
En los capítulos 13 y 14 se presentaron una serie de componentes
diferentes de los genes y las moléculas de RNA, como promotores,
regiones 5' no traducidas, secuencias codificantes, intrones, regiones 3'
no traducidas, colas de poli(A) y casquetes. Consideremos ahora cómo
se combinan algunos de estos componentes para crear un gen euca-
rionte típico y cómo se produce un mRNA maduro a partir de ellos.
El promotor, que suele localizarse en dirección 5' respecto del sitio
de inicio de la transcripción, es necesario para que tenga lugar la
transcripción, pero en general él mismo no es transcrito cuando la
RNA polimerasa II transcribe los genes codificantes de proteínas (!!ID
n4-16ap. Puede haber potenciadores (secuencias de DNA que tam-
bién regulan la transcripción) localizadas más lejos en dirección 5' o
en dirección 3' respecto del sit io de iniciación.
En la transcripción, todos los nucleótidos entre el sitio de inicio de
la transcripción y el sitio de terminación se transcriben a pre-mRNA,
incluidos exones, intrones y un extremo 3' largo, que más tarde es
escindido del transcrito (fig. 14-166). Obsérvese que el extremo 5' del
primer exón contiene la secuencia que codifica la región 5' no tradu-
cida y que el extremo 3' del último exón contiene la secuencia que
codifica la región 3' no traducida.
 Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 397

(a)
- Por lo ge nera l, el intensificado r se encuentra en dirección 3' ,
pero podría estar en dirección 3' o en un intrón
Promotor Codif icación del RNA

DNA lnt rón lntrón

5'
3' •
• Inicio de la Fina l _j
Los intrones, los exones y un extremo
transcripción dela
3' largo son transcritos a pre-mRNA.
transcripción
(b)
Secuencia consenso
Pre-mRNA ,----A-------.
5' '-------y------
-------...L 3'

Región 5' Región 3'

no t raduci da no traducida

(e)
Pre-mRN A
AAllAAA 3'

La escisión en el extremo 3' se

t
Sitio de escisión 3'
produce alrededor de 1o nu-
cleótidos en dirección 3' res-
(d)

5'
_______
Pre-mRNA .....
pecto de la secuencia consenso.

-"--' 3'

IJ La poliadenilación en el' t
Sit io de escisión 3'
sitio de escisión produ-
(e) ce la cola de poli(A).
Pre-mRN A
5' AAAAA 3'
t
(f) Por último, se elimi- , ... lo que produc Sitio de escisión 3'
Corte y em palme del RNA
nan los intrones~ mRNA maduro.

, - - - - - - - , . - - - - - ------l.\ t - -- - - - - - - - - - f

mRNA Co la de poli(A) Figura 14-16. El mRNA eucarionte

~ maduro se produce cuando se
5' . - - - - - -AAAAA 3'
....__ ________J...___ _ _ _ _ _ _ _ _J, I transcribe el pre-mRNA y se lo
lntrones ~ y
somete a varios tipos de procesa-
Región 5' Región codificante Reg ión 3'
miento.
no t r aducida de proteína no t raducida

Luego se procesa el pre-mRNA para producir un mRNA maduro. El

14.3 Los RNA de transferencia, que se unen
primer paso de este procesamiento es la adición de un casquete al
extremo 5' del pre-mRNA 19. . A cont inuación, se escinde el a aminoácidos, son modificados después
extremo 3' en un sit io en 1recoon respecto de la secuencia con- de la transcripción en células bacterianas
senso AAUAAA ~~1- último exón ' ig. 14-16dl Inmediatamente y eucariontes
después de la esc1s1on, se añade una cola de pol i(A) al extremo 3'
tfig. 14-16ep. Por último, se eliminan los int rones para producir el
En 1956, Francis Crick propuso la idea de una molécula que
mRNA maduro (f1g. 14-16tp. Ahora, el mRNA contiene regiones 5' y
3' no traducidas, que no se traducen a aminoácidos, y los nucleót idos
transporta aminoácidos al ribosoma e interactúa con los codones
que llevan las secuencias cod ificantes de proteínas. Usted puede
del m.RNA, lo que coloca los aminoácidos en su orden correcto en
la síntesis proteica. En 1963, ya se había confirmado la existencia
explora r las consecuencias del procesamiento fall ido del RNA miran-
de una molécula adaptadora de este tipo, denominado de RNA de
do la Animación 14.2 e int eractuando con ella.
transferencia. El RNA de transferencia (tRNA) sirve de conector
L~ figura 14-1~ presenta la secuencia de nucleótidos de un peq ue-
ño gen (el gen de interleucina 2 hu mano), con la identificación de
entre el código genético del mRNA y los aminoácidos que com-
ponen una proteína. Cada tRNA se une a un aminoácido particu-
estos com ponentes.
lar y lo transporta al riboso1na, donde el tRNA aQfeo-a
º o su amino-
398 CAPITULO 14

5' .... CATCACAACACGAAAAATCAAGGTAATG f f f I f l l'.ACACACGTAAAGTCTTTCAAAATATGTGTM TATGTAMACATTTTGACACCCCCATAATAI f I f ILCAGAATTAACAGTATMATTGCATCTCTTG

5' ~TL
TTCAACAGTTCCdATCACTCTCTTTAATCACTACTCACAGTAACCTCAACTCCTGCCACEl!l"TACAGGATGCAACTCCTGTCTTGCATTGCACTAAGTCTTGCACTTGTCACAAACAGTGCACCTACTTCAA
L...sitio de inicio de fa transcripción Exón 1 codón de iniciación lntrón 1
GTTCTACAAAGAAAACACAGCTACAACTGGAGCATTTACTTCTGGATTTACAGATGATTTTGAATGGAATTAA1GTAAGTATATTTCCTTTCTTACTAAAATTATTACATTTAGTAATCTAGCTGGAGATCAmCT
Exón 2
TAATAACAATCCATTATACTTTCTTAGAATTACAAGAATCCCAAACTCACCAGGATGCTCACATTTAAGf IIIACATCCCCAAGAAGGTAAGTACAATATTTTATGTTCAATTTCTGIII IAATAAAATTCAAAGTA

ATATGAAAATTTGCACAGATGGGACTAATAGCAGCTCATCTGAGGTAMGAGTAACTTTAATTTG II II III GAAAACCCAAGTTTGATAATGAAGCCTCTATTAAAACAGTTTTACCTATAIIII IAATATATATTT

lntrón 2
GTGTGTTGGTGGGGGTGGCAACAA-·- (•2400bp} ·" ·TGCACAAAGTCTAACATTTTCCAAAGCCAAATTAAGCTAAAACCAGTCAGTCAACTATCACTTAACCCTAGTCATAGGTACTTCAGCCCTAGIIII

TCCAGTTTTATAATGTAAACTCTACTGGT~CATCTTTACAGTGACATTGAGAACAGAGAGAATGGTAAAAACTACATACTGCTACTCCAAATAAAATAAATTGGAAATTAATTTCTGATTCTGACCTCTATGTAAA
Exón 3
CTGAGCTGATGATAATTATTATTCTAGGf CACAGAACTGAAACATCTTCAGTGTCTAGAAGMGMCTCAAACCTCTGGAGGMGTGCTMATTTAGCTCAMGCAAAMCTTTCACTTMGACCCAGGCACT
lntrón 3
TAATCACCAATATCMCCTAATAGTTI: rCCAACTAMCGTAAGGCATTACTTTATTTGCTCTCCTCCAAAT AAAAAAAAAAAAGTAGCCCCAAMGT-(;. 1900 BP)-- -CTTGAAMTAAACCCAACACCCCTA
Exón4
TAAGACTTCAATTGGGAATAACTGT,TATAAGGTAMCTACTCTGTACTTTAAAAAATTAACAIII IIC II IIATAGGGATCTCAAACAACATTCATGTGTGAATATGCTGATGAGACAGCAACCATTGTAGAATTT
Codón de terminación , ._ _3 '_,._T_
R _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
CTGAACAGATCiGATTACCTTTTG" -::.AAAGCATCATCTCMCACTGAC ildJIAATTMGTGCTTCCCACTTAAAACATATCAGGC11TTCTATTTATTTAAATATTTAMTTTTATATTTATTGTTGAATGTATGGTTT
3'UTR
CCTACCTATTGTAACTATTATT1 TTAATCTTAAAACTATAAATATGCATCIIIIATGA11CIIIIIGTAAGCCCTAGCCCCTCTAA.i ~TCCTTTCACTTATTTATCCCAAAATATTTATTATTATGTTCAATCTTAAATA
3'UTR
•
TAGTATCTATGTAGATTGGTT lGTAMACTATTTMTMATTTGATAM'rATMACMGCCTGGATATTTCTTATTTTGGAAACAG( \CAGAGTMGCATTTAMTATTTCTTAGTTACTTGTGTGMCTGTAGGATG
Secuencia consenso de p oli(A) ♦sitio de escisión 3'
GTTAAAATGCTTACAAAAC CACTCTTTCTCTGAAGAAATATGTAGAACAGAGATGTAGACTTCTCAAAAGCCCTTGCTTl'
I
Puede observar que los intrones no codificantes ocupan grandes Los exones codifican menos de 165 1
partes de los genes, aun cuando no se enumeren de manera aminoácidos, una proteína pequeña.
individual grandes números de bases.

Figura 14- 17. Esta representación de la secuencia de nucleótidos del gen de la interleucina 2 humana
incluye la caja TATA, el sitio de inicio de la transcripción, codones de iniciación y de terminación, intrones,
exones, secuencia consenso poli(A) y sitio de escisión 3'.

ácido a la cadena polipeptídica en crecun1ento en la posición o

especificada por las instruccíones genéticas del mRNA. En el
capítulo 15 consideraremos con más detalle el mecanismo de
este proceso.
Cada tRNA puede unirse solo a un tipo de aminoácido. El com-
plejo de tRNA más su aminoácido puede esc1ibirse en forma o
o\ lribosa 1
abreviada agregando un superíndice de tres letras que representa
Ribotimiclina
el aminoácido al término tRNA. Por ejemplo, un tRNA que se une
al aminoácido alanina se escribe tRNAAla. Como en las proteínas
se encuentran 20 aminoácidos ctiferentes, debe haber un mínin10
de 20 tipos distintos de tRNA. D e hecho, la mayoría de los orga-
o\ lribosa 1
o
lribosa 1

nismos tienen por lo menos de 30 a 40 tipos diferentes de tRNA,

cada uno de los cuales es codificado por un gen distinto ( o, en
algunos casos, múltiples copias de un gen) del DNA.
Estructura del RNA de transferencia
Una característica singular del tRNA es la aparición de bases
modificadas raras. Todos los RNA tienen las cuatro bases conven-
cionales (adenina, citosina, guanina y uracilo) especificadas por
el DNA, pero los tRNA tienen bases adicionales, como ribotinli-
na, seudou1idin a (que, en ocasiones, también están presentes en
los snRNA y los rRNA) y docenas de otras. La !figura 14-18j
muestra las estructuras de estas dos bases modificadas.
Si solo hay cuatro bases en el DNA y todas las moléculas de
DNA se transcriben a partir de DNA, ¿cón10 adquieren estas
bases adicionales los tRNA? Las bases modificadas se originan
por cambios químicos de las cuatro bases convencionales que tie-
nen lugar después de la transcripción. Estos cambios se realizan
por medio de enzimas modificadoras del tRNA. Por ejemplo, la
adición de un grupo metilo al uracilo crea la base modificada
ribotimidina.
Uracilo
o~
H
Seudouridina
Figura 14-18. Dos de las bases modificadas halladas en los tRNA.
Todas las bases modificadas de los tRNA se producen por modif icación quí-
mica de las cuatro bases convenciona les del RNA.
La estructura de todos los tRNA es similar, una característica
crucial para su función. La mayoría de los tRNA contienen entre
74 y 95 nucleótidos, algunos de los cuales son complementarios
entre sí y forman puentes de hidrógeno intramoleculares. En con-
secuencia, cada tRNA presenta una estructura en hoja de trébol
dfig. 14-IS). La estructura en hoja de trébol tienen cuatro brazos
principales. Desde la parte superior y en dirección horaria alrede-
dor del tRNA ilustrado a la derecha de l4 figura 14tJb
los cuatro
brazos principales son el brazo aceptar, el brazo , el brazo
anticodón y el brazo DHU . Tres de los brazos (los brazos 1\¡IC,
anticodón y DHU) consisten en un tallo y un bucle. El tallo está
formado por el apareamiento de nucleótidos complementarios, y

Este modelo molecular espacial Este modelo en cinta destaca las regio-
muestra la estructura t ridimensional ~ s internas de apareamiento de bases.
de un tRNA.
Puentes de
hidrógeno entre
bases apareadas
Este ícono para el
tRNA se utilizará en
los siguientes capítulos
Figura 14-19. Todos los tRNA tienen una estructura secundaria común, la estructura en hoja de
trébol. La secuencia de bases del modelo aplanado es para el tRNAA1ª.
el bucle se localiza en el extremo del tallo, donde no hay ningún
aparea1niento de nucleótidos.
En lugar de tener un bucle, el brazo aceptor incluye los extre-
mos 5' y 3' de la molécula de tRNA. Todos los tRNA tienen la
misma secuencia (CCA) en el extremo 3 ' , donde se une el amino-
ácido al tRNA; por consiguiente, esta secue ncia no es responsa-
ble de especificar qué aminoácidos se unirán al tRNA.
E l. brazo TyR recibe su nombre por las bases de los tres nucle-
ótidos del bucle de este brazo: timina (T), seudouridina (y) y cito-
sina (C). El brazo anticodón se localiza en la parte inferior del
tRNA. Tres nucleótidos al frnal de este brazo componen el anti-
codón, que se aparea con el codón cotTespondiente del mRNA
para garantizar que los aminoácidos se unan en el orden correcto.
El brazo DHU se denomina así porque suele contener la base
modificada di hidrouridi na.
Si bien cada molécula de tRNA se pliega en una estru ctura en
hoja de trébol de bido al aparea1niento de bases comple1nentarias,
la hoja de trébol no es la estructura tridimensional (terciaria) del
tRNA hallada en la célula. Los resultados de los estudios de cris-
talografía de rayos X han mostrado que la hoja de trébol se plie-
ga sobre sí misma para formar una estructura en forma de L,
como il ustran los modelos espaciales y de cinta de la[tigura
t:::I2] Nótese que el tallo aceptor se encuentra en un extrem o de a
estructura terciara y el anticodón, en el otro extremo.
Estructura y procesamiento de los genes
del RNA de transferencia
Los genes que producen tRNA pueden agruparse o estar disper-
sos por el genoma. En E. coli, los genes de algunos tRNA están
presentes en una sola copia, Inientras los genes de otros tRNA se
hallan en varias copias; por lo general, las células eucariontes tie-
nen numerosas copias de cada gen de tRNA. Todas las moléculas
de tRNA de las células bacterianas y e ucariontes son some tidas a
procesamiento después de la transcripción.
En E. coli, suelen transcribirse varios tRNA juntos como un
tRNA precursor grande, que después se corta en fragmentos , cada
Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 399
Este modelo aplanado en hoja de trébol muestra
apareamiento ent re nucleótidos complementarios.
/
Sitio de unión
del aminoácido----- ,
i,
(siempre CCA)
3' 5' • __...--Brazo
aceptor
Brazo DH Brazo ri1,c
Base ----4:ir ~
rara ( e )
Brazo
•
anticodón raza extra
(el tamaño varía)
El anticodón comprende
tres bases e interactúa
con un codón del mRNA.
uno de los cuales contiene un único tRNA . Luego, es posible eli-
minar nucleótidos adicionales, de a uno por vez, de los extremos
5' y 3' del tRNA en un proceso conocido como recorte. Después,
las enzimas modificadoras de bases pueden cambiar algunas de
las bases convencionales a bases modificadas (!fig, 14-29), En
algunos procariontes, las secuencias CCA halladas en los extre-
mos 3' de los tRNA están codificadas en el gen de tRNA y se
transcriben al tRNA; en otros proca1iontes y en e ucrui ontes, estas
secuencias son agregadas por una enzima especial que añade los
nucleótidos sin utilizar ningún molde.
No hay ninguna vía genérica de procesatniento pru·a todos los
tRNA: diferentes tRNA se procesan de diversas maneras. Los tRNA
eucariontes se procesan de una manera similar a la de los tRNA bac-
terianos: la mayoría se transcribe co1no precursores 1nás grandes
que, después, son escindidos, recortados y modificados para pro-
ducir tRNA maduros .
Algunos genes de tRNA de eucruiontes y archaea tienen intro-
nes de longitud variable que deben ser eliminados durante el pro-
cesruniento. Por ejemplo, ali·ededor de 40 de los 400 genes de
tRNA de levadura contienen un único intrón que siempre tiene
una Localización adyacente al lado 3' del anticodón. Los intrones
11-1 del tRNA son más cortos que los hall ados en el pre-mRNA y no
tienen las secuencias consenso halladas en las uniones intrón-
exón de los pre-mRNA. El proceso de corte y empalme de los
genes de tRNA es bastante diferente de las reacciones 1nediadas
por el espliceosorna, que eliminan intrones de los genes que codi-
fican proteínas.
CONCEPTOS
Todos los tRNA son de tamaño similar y tienen una estructura secun-
daría común conocida como hoja de trébol. Los RNA de transferencia
contienen bases modificadas y son sometidos a un extenso procesa-
miento después de la transcripción en las células tanto bacterianas
como de eucaríontes.
400 CAPITULO 14

D Se escinde un tRNA precursor grande para

[ producir una molécula individual de tRNA.
j fl se e~imina un intrón
por corte y empalme, ...
O ... y se añaden basesj
al extremo 3'.
O la modificación de
varias bases (• ) produce
1 el tRNA maduro.
___:_;

'

\
tRNA precursor
3'
\\
i ~\ 3'
A
tRNA maduro
3'
A /
~

3' e e
5' S' 5' e 5' e

Sitio de
Formará el{ • corte y
anticodón , empalme 5' , corte y Anticodón
empalme 3'
lntrón - - - Conclusión: el procesamiento del tRNA puede
incluir escisión, corte y empalme, adición de bases j
y modificación de bases. .

Figura 14-20. Tanto las células bacterianas como las eucariontes pr,ocesan los RNA de trans-
f erencia . Los diferentes tRNA son modificados de distintas maneras. Aquí se presenta un ejemplo.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7 Estructura del ribosoma

¿Cómo se incorporan bases raras en el tRNA?
a. Codificadas por RNA guía.
b. Mediante cambios químicos de una de las bases convencionales.
c. Cod ificadas por bases raras del DNA.
d. Cod ificadas por secuencias de los intrones.
14.4 El RNA ribosómico, un componente
del ribosoma, también es procesado después
de la transcripción
Dentro de los ribosomas, las instrucciones genéticas contenidas
en el mRNA se traducen a las secuencias de aminoácidos de poli-
péptidos. Por consiguiente, los ribosomas desempeñan una parte
integral en la transferencia de información genética del genotipo
al fenotipo. En el capítulo 15 exatninaremos el papel de los ribo-
so1nas en el proceso de traducción. Aquí, consideraren1os la
estructura de los ribosomas y examinare1nos cómo son procesa-
dos antes de tomarse funcionales.
El ribosoma es uno de los complejos moleculares más abundan-
tes de la célula: una sola célula bacteriana puede contener hasta
20 000 ribosomas, y las células eucariontes tienen todavía más.
Por lo general, los 1ibosomas contienen alrededor del 80% del
RNA celular total. Son estructuras complejas, cada una de las
cuales consiste en más de 50 proteínas y moléculas de RNA
diferentes (cuadro 14-3). Un ribosoma funcional está formado
por dos subunidades, una subunidad ribosómica grande y una
subunidad ribosómica pequeña, formadas cada una de ellas
por uno o 1nás fragmentos de RNA y una serie de proteínas. El
tamaño de los ribosomas y sus componentes RNA se expresan
en unidades Svedberg (S) (una unidad que mide la rapidez con
la que sedimenta un objeto en un campo centrífugo). Es impor-
tante destacar que las unidades S no son aditivas; la co1nbina-
ción de una estructura 1OS y una estructura 20S no produce
necesariamente una estrcutura 30S , porque la estructura tridi-
mensional y la masa inciden en la velocidad de sedimentación.
La estructura triditnensional del ribosoma bacteriano se escla-
reció con gran detalle gracias a la cristalografía de rayos X. En
el capítulo 15 se analizará más acerca de la estructura del ri-
bosoma.

Cuadro 14-3 Composición de los ribosomas de las células bacterianas y eucariontes

Tipo celular Tamaño del ribosoma Subunidad Componente de rRNA Proteínas

Bacteriano 70S Grande (50S) 23S (2 900 nucleótidos, SS (1 20 nucleótidos) 31

Pequeña (30S) 16S (1 500 nucleótidos) 21

Eucarionte 80S Grande (60S) 28S (4 700 nucleótidos), 5,8S (160 nucleótidos), 5S 49
(120 nucleótidos)

Pequeña (40S) 18S (1 900 nucleótidos) 33

Nota: la letra S equivale a "unidad Svedberg ".

 Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 401

Estructura y procesamiento de los genes Cuadro 14-4 Número de genes de rRNA en diferentes
de RNA ribosómico organismos

Puede haber múltiples copias de los genes de rRNA, así como de Número de copias de genes
los de tRNA, y el número puede va1i ar entre las especies (cua- Especie de rRNA por genoma
dro 14-4); todas las copias del gen de rRNA de una especie son Escherichia co!i 7
idénticas o casi idénticas. E n las bacterias, los genes de tRNA
están dispersos, pero en las células eucariontes están agrupados, Levadura 100-200
con los genes dispuestos en tándem, uno después de otro. Ser humano 280
Las células eucruiontes tienen dos tipos de genes de rRNA : un
gen grande que codifica rRNA 18S, rRNA 28S y rRNA 5,8S, y Rana 450
un gen pequeño que codifica rRNA SS . Los tres rRNA bacte1ia-
nos (rRNA 23S, rRNA ] 6S y rRNA SS) son codificados por un
solo tipo de gen.
Tanto las células bacterianas como las eucariontes procesan el
RNA ribosómico. En E. coli, cada gen de RNA se transc1ibe a un CONCEPTOS
rRNA 30S precursor ~fig. 14-213(). Este precursor 30S está meti-
lado en varios lugares y después es escindido y recortado pru·a Un ribosoma es un orgánu lo complejo formado por varias molécu las
producir rRNA 16S, rRNA23S y rRNA SS, j unto con uno o más de rRNA y numerosas proteínas. Cada ribosoma funcional consiste en
tRNA. Una serie de enzim.as llevan a cabo la escisión, la metila- una subunidad grande y una subunidad pequeña. Los RNA ribosómi-
ción y el recorte. cos de las células tanto bacterianas como eucariontes son modifica-
Los tRNA eucariontes son sometidos a un procesamiento simi- dos después de la transcripción. En los eucariontes, RNA nucleolares
lar Kfíg. 14-216J. Los RNA nucleolares pequeños (snoRNA) ayu- pequeños llevan a cabo el procesamiento del rRNA.
dan a escindir y modificar los RNA eucariontes y a ensamblru· los
rRNA procesados en ribosomas madw·os. A l igual que los snRNA ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
que intervienen en el corte y e1npal me del pre-mRNA, los snoRNA
se asocian con proteínas para formar partículas de 1ibonucleopro- ¿Qué t ipos de cambios se producen en el procesamiento del rRNA?
teínas (snoRNP). Los snoRNA tienen extensa complementarie- a. Metilación de bases.
dad con las secuencias de rRNA en las que se produce la modifi-
cación. Interesa destacar que algunos snoRNA son codificados b. Escisión de un precursor más grande.
por secuencias de los intrones de otros genes que codifican pro- c. Se recortan nucleótidos de los extremos de los rRNA.
teínas. En los eucariontes, el procesamiento del rRNA y el ensru11- d. Todas las anteriores.
blaje de los ribosomas se realizan en el nucléolo.

(a) rRNA procariontes (b) rRNA eucariontes

Transcrito de rRNA precursor (30S) Transcrit o de rRNA precursor (4SS)

- ------ - ------------
Se añaden grupos metilo
Metilación Metilación
a bases específicas y al
átomo de carbono 2' de
algunos azúcares ribosa.
mn
Grupos metilo ~

-
Int ermediarios
■
165 tRNA 235 SS

. . . y se recorta .
RNA maduros
~ ■ .,--,,....,..,.-r--P""""'ll~--il'-,1 - ~
rRNA 165 t RNA rRNA 235 rRNA SS rRNA 18S rRNA S,8S rRNA 28S
' El resultado son moléculas
de rRNA maduras.

Figura 14-21 . El RNA ribosómico es procesado después de la transcripció n. El rRNA procarionte (a) y el rRNA euca-
rionte (b) se producen a partir de transcritos de RNA precursores que son metilados, escindidos y procesados para producir
RNA maduros. El rRNA SS eucarionte se transcribe por separado a partir de un gen diferente.
402 CAPITULO 14

14.5 Las moléculas de RNA pequeñas
participan en diversas funciones
Gran cantidad de evidencia sugiere que el material genético ini-
cial era RNA y que, en sus inicios, la vida era dominada por 1no-
léculas de RNA (véase cap. 13). Esta época, cuando el RNA
dominaba los procesos esenciales de la vida, se ha denominado el
"mundo temprano de RNA" . La percepción común es que este
mundo de RNA mu1ió hace miles de millones de años, cuando
muchas de las funciones del RNA fueron reemplazadas por molé-
culas de DNA 1nás estables y por catalizadores proteicos más efi-
cientes. Sin embargo, en los últimos IO años, se descubrieron
numerosas moléculas de RNA pequeñas (la n1ayoría de ell as de
20 a 30 nucleótidos de longitud) que influyen mucho en numero-
sos procesos biológicos básicos, como la formación de la estruc-
tura de la cromatina, la transcripción y la traducción. Las molécu-
las de RNA pequeñas desempeñan papeles importantes en la
expresión génica, el desarrollo del cáncer y la defensa contra
DNA extraño. Asimismo, los investigadores las aprovechan para
estudiar la función de los genes y tratar enfermedades genéti cas.
El descubrimiento de moléculas de RNA pequeñas ha influido
expresión génjca, la defensa contra virus, la supresión de los
transposones y la modificación de la estructura de la cromatina.
En los procariontes, se detectó un grupo análogo de RNA peque-
ños con funciones de silenciamiento, denominados RNA de
CRISPR (crRNA). Por su descubrimiento de la interferencia por
RNA, Fire y Mello recibieron el premio Nobel de fisiología o
tnedicina en 2006.
La interferencia por RNA (RNA.i) es un mecanismo poderoso
y preciso usado por las células eucariontes para limitru· la invasión
de genes extraños (de virus y transposones) y para censurar la
expresión de sus propios genes. La interferencia por RNA es
desencadenada por moléculas de RNA bicatenario, que pueden
(a) Micro-RNA (b) RNA de Interferencia pequeños
Repetición invertida
DNA ~ RNA bicatenario
- --'- - - D La transcripción a través D El RNA bicatenario
Transcripción .- de una repetición puede surgir ce
invertida del DNA . .. virus RNA o de
horquillas largas.

mucho en nuestra conocimiento de cómo se regulan los genes y f) , .. produce un

m iRNA primario f) La eni1ma Dker
la importancia de las secuencias de DNA que no codifican prote- (pri-miRNA). escinde el RNA
ínas. Estos nuevos hallazgos demuestran que en gran medida Pri-miRNA 1
bicatenario ...

todavía viviinos en un mundo de RNA.

En esta sección, examinaremos la interferencia por RNA (que
llevó al descubrimiento de los RNA pequeños), los diferentes
IJ El pri -miRNA se
tipos de RNA pequeños y el mecanismo de procesamiento de escinde para pro-
los miRNA. En el capítulo 17 analizaremos mejor el papel de los Escisión
ducir un RNA corto IJ ... para pro-
con una horquilla. ducir siRNA.
RNA pequeños en el control de la expresión génica; en el capítu-
lo 19 veremos cómo están utilizándose los RNA pequeños como
he1Tamientas importantes en biotecnología.
siRNA
----
Interferencia por RNA
En 1998, Andrew Fire, Craig Mello y sus colegas observaron un
El La enzíma Dker
extraño fenó1neno. Estaban inhibiendo la expresión de genes en el elimina el bucle
nematodo Caenorhabditis elegans mediante la inserción de molé- terminal de la horquilla. O Un siRNA se combina
' para
con protemas
culas de RNA monocatenario complementarias de una secuencia formar un RISC . . .
del DNA de los genes. Es sabido que estas moléculas, denomina-
das RNA antisentido, inhiben la expresión génica mediante la Proteína Proteína
unión a secuencias del mRNA e inhibición de la traducción. Fire, O una cadena del miRNA
Mello y cols. hallaron que se desencadenaba un silenciamiento se combina con proteínas
para formar un complejo
aún más potente de los genes al inyectar RNA bicatenari o en los silenáador inducido por
animales. Este hallazgo fue sorprendente, porque no se conocía RNA (RISC) ...
ningún mecanismo por el que el RNA bicatenario pudiera inhibir /
RISC '-.. RISC
la traducción. También se observó que el RNA bicatenario desen- Apareamiento
cadenaba vatios otros tipos de silenciamiento génico descritos Apareamiento de bases
de bases imperfecto perfecto
con anterioridad. Estos estudios iniciales llevaron al descubri- _:...¡_
mRNA mRNA
1níento de molécu las de RNA pequeñas que son importantes en el S' 3' 5' 3'
silenciamiento génico.
Investigaciones ulteriores revelaron una serie asombrosa de U ... que se aparea
moléculas de RNA pequeñas con importantes funciones celulares O ... que se aparea con mRNA y lo es-
con un mRNA e 1 cinde, lo que induce
en los eucariontes, que en la actualidad incluyen no menos de tres inhibe la traducción. degradación.

clases principales: RNA de interferencia pequeños (siRNA),

Inhibición de Escisión y
1nicro-RNA (miRNA) y RNA de interacción con Piwi (piRNA), la t raducción degradación
lo que depende de su origen y modo de función. Estos RNA
pequeños se encuentran en muchos eucariontes y son responsa- Figura 14-22. Los RNA de interferencia pequeños y los micro-RNA se
bles de diversas funciones diferentes, como la regulación de la producen a partir de RNA bicatenarios.

originarse de varias Lnaneras (tig. 14-22j: por transcripción de
secuencias invertidas a una molécula de RNA que después aparea
bases consigo misma para formar RNA bicatenario; por transcrip-
ción simultánea de dos moléculas de RNA diferentes que son
complementarias entre sí y que se aparean formando RNA bica-
tenario, o por infección por virus que fabrican RNA bicatenario.
E stas moléculas de RNA bicatenario son cortadas por una enzima
que recibe el apropiado nombre de Dicer (cortadora), lo que da
por resultado moléculas de RNA pequeñas que son desenrolladas
para producir siRNA y miRNA (véas~ tig. 14-2l).
Algunos genetistas especulan que la interferencia por RNA
evolucionó como un mecanismo de defensa contra virus RNA y
elementos transponibles que se movilizan a través de intern1edia-
rios de RNA (véase cap. 18); de hecho, algunos han denominado
a la RNAi el sistema inmunitario del genoma. Sin e1nbargo, la
interferencia por RNA también es responsable de regular una
serie de procesos genéticos y del desarrollo clave, como cambios
de la estructura de la cromatina, traducción, destino y prolifera-
ción celular, y 1nuerte celular. Asimismo, los genetistas utilizan la
maquinaria de RNAi como una hen·amienta eficaz para bloquear
la expresión de genes específicos (véase cap. 19).
RNA de interferencia pequeños y micro-RNA
Los RNA de interferencia pequeños y los micro-RNA son dos
clases abundantes de 1noléculas de RNA que intervienen en la
interferencia por RNA. Si bien estos dos tipos de RNA difieren en
su modo de origen (cuadro 14-5; véase jtig. 14-2~), tienen una se-
rie de características en común y sus funciones muestran una
superposición considerable. Ambos tienen alrededor de 22 nucle-
ótidos de longitud. Los RNA de interferencia pequeños se origi-
nan por escisión de mRNA, transposones de RNA y virus RNA.
Algunos miRNA son escindidos de moléculas de 'R NA transcritas
a partir de secuencias de codifican miRNA solo, pero otras están
codificadas en los intrones y los exones de los mRNA. Cada
miRNA es escindido a pa11ir de un RNA monocatenario precur-
sor que forma horquillas pequeñas, mientras que múltiples siRNA
se producen a partir de un dúplex de RNA que consiste en dos
moléculas de RNA diferentes.
Por lo general, los siRNA son exactamente complementarios de
sus secuencias diana de mRNA o de DNA, mienu·as los miRNA
tienen complementariedad limitada con sus mRNA diana. Los
RNA de interferencia pequeños supri1nen la expresión gé1úca por
Cuadro 14-5 Diferencias entre siRNA y miRNA
Característica siRNA
Origen mRNA, transposón o virus
Escisión de RNA dúplex o RNA monocatenario que forma horquillas
largas
Tamaño 21 -25 nucleótidos
Acción Degradación de mRNA, inhibición de la transcripción,
modificación de la cromatina
Diana Genes a partir de los cuales fueron transcritos
Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 403
degradación del mRNA o por inhibición de Ja transcripción,
mientras que los 1niRNA a menudo sup1imen la expresión génica
al inhibir la traducción. Por último, los miRNA suelen silenciar
genes distintos de aquellos a partir de los cuales fueron transcri-
tos, en tanto que los siRNA en general silencian los genes a par-
tir de los cuales fueron transcritos. No obstante, obsérvese que es-
tas diferencias entre siRNA y miRNA no son absolutas, y que los
científicos están encontrando una cantidad cada vez mayor de
RNA pequeños que presentan características de ambos. Por ejem-
plo, algunos miRNA (como los de las plantas) tienen complemen-
tariedad exacta con la secuencias de mRNA y escinden estas
secuencias, características que suelen asociarse con los siRNA.
Las moléculas tanto de s iRNA co1no de miRNA se combinan
con proteínas para fo rmar un com le·o de silenciamiento indu-
cido por RNA (RISC; véas tig. 14-2 ). Una proteína llamada
Argonauta es clave para el funcionamiento del RISC. El RISC se
aparea con una 1nolécula de mRNA que tiene una secuencia com-
plementaria a la de su componente siRNA o rniRNA, y escinde el
1nRNA, lo que induce su degradación o reprüne su traducción.
Algunos siRNA también sirven de guías para la metilación de
secuencias co1nplementarias del DNA, y otros modifican la
estructura de la cromatina; ambos procesos afectan la transcrip-
ción. Obsérvese en la Animación 14.3 cómo los RNA de interfe- A
rencia pequeños y los rnicro-RNA influyen sobre la expresión
✓ •
gen1ca.
Se han hallado 1nicro-RNA en todos los organis1n os eucariontes
examinados hasta la fecha, así como en virus: controlan la expre-
sión de genes que intervienen en numerosos procesos biológicos,
como crecimiento, desarrollo y metabolismo. Los seres humanos
tienen más de 450 miRNA distintos; los científicos estiman que
más de un tercio de los genes humanos son regulados por miRNA.
La mayoría de los genes de miRNA se localizan en regiones de
DNA no codificante o dentro de los intrones de otros genes.
PROCESAMIENTO y FUNCIÓN DE LOS miRNA y LOS siRNA Los genes
que codifican miRNA se transcriben a precursores más largos,
denominados miRNA primario (pri-miRNA), que varían de va-
rios cientos a varios nliles de nucleótidos de longitud {fig.'""TZl'J-
~ - Luego, el pri-miRNA es escindido en uno o más molecuTas
de RNA más pequeñas con una horquilla. La enzima Dicer se une
a esta estructura en horquilla y elimina el bucle terminal. Una de
las cadenas del miRNA se incorpora en el RISC; la otra cadena es
liberada y degradada.
miRNA
RNA transcrito a partir de un gen distinto
RNA monocatenario que forma horquillas cortas de RNA
bicatenario
21-25 nucleótidos
Degradación de mRNA, inhib ición de la traducción
Genes distintos de aquellos a partir de los cuales fueron
transcritos
404 CAPITULO 14

E l RISC se une a una secuencia complementaria del mRNA ,
ubicada por lo general en la región 3' no traducida del 1nRNA. La
región de estrecha complementariedad, conocida como región
semilla, es bastante corta, habitualmente solo de alrededor de
siete nucleótidos de longitud. Como la secuencia semilla es tan
corta, cada miRNA puede aparearse con secuencias de cientos de
1nRNA diferentes. Más aún, una sola 1n olécula de mRNA puede
tener múltiples sitios de unión a miRNA. La inhibición de la tra-
ducción puede requerir la unión de varios RISC a la misma molé-
cula de mRNA. La Animación 14.2 ilustra el proceso por el que
se producen microRNA.
Los RNA de interferencia pequeños se procesan de una mane-
ra similar 1flg.J.~-22§). El RNA bicatenaiio de virus u horquillas
largas es escindi o por la enzima Dicer para producir siRNA, que
se combina con proteínas para formar el RISC. L uego, este se
aparea con secuencias del mRNA diana y lo escinde, tras lo cual
el mRNA es degradado.
CONCEPTOS
Los RNA de interferencia pequeños y los micro-RNA son RNA peque-
ños producidos cuando la enzima Dicer escinde moléculas más gran-
des de RNA bicatenario. Los RNA de interferencia pequeños y los
micro-RNA participan en diversos procesos, como degradación del
mRNA, inhibición de la traducción, metilación del DNA y remodelado
de la cromatina.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
¿Cómo se dirigen los siRNA y los miRNA a mRNA específicos para su
degradación o para reprimir la traducción?
archaea, denominadas repeticiones palindrómicas cortas agrupa-
das y regularmente espaciadas (CRISPR, Clustered Regularly
lnterspaced Short Palindromic Repeats). Las secuencias palin-
drómicas se leen igual hacia adelante y hacia atrás en las dos
cadenas complementarias de DNA. Las CRISPR consisten en una
serie de estas secuencias palindrómicas, separadas por secuencias
únicas que son homólogas aI DNA de genomas de bacteri ófagos
o plásmidos. Por ejemplo, en la bacteria Pseudomonas aerugino-
sa, las repeticiones palindrómicas tienen 28 pb de longitud, sepa-
radas por espaciadores de 32 pb.
Los RNA de CRISPR desempeñan un papel en la defensa contra
la invasión por DNA extraños específicos, como DNA originado en
bacteriófagos y plásmidos (véase cap. 9). Co1no están cfuigidos
contra moléculas específicas de DNA, el siste1na de CRISPR se ha
comparado con el sistema inmunitario de los ve1tebrados.
A través de un mecanismo que aún no se conoce por completo,
cuando un bacteriófago o un plásmido invaden una célula pro-
carionte, pequeñas porciones del genon1a invasor se insertan co-
1no espaciadores entre las repeticiones palindrómicas de CRISPR
Kfig. 14-23@). Después, el DNA espaciador sirve como memoria de
este DNA invasor. La región de CRISPR se transcribe a un solo
(a)
5' 3'
3' 5'
DNA del
fago Fragmentos de DNA del fago
se insertan en CRISPR
Espaciadores
- - ~ 7 "-=:---
5' 3'
3' 5'
DNA bacteriano ~
Pa líndromos

Transcripción
RNA de interacción con Piwi de CRISPR
En 2001, se descubrieron los RNA de interacción con Piwi (b)
(piRNA). Son algo 1nás largos que los siRNA y los miRNA, están
formados por 24 a 30 nucleótidos y derivan de transcritos de RNA
5'
--
Pre-crRNA
3'

monocatenario largos, a diferencia de los siRNA y los miRNA, Escisión por

que son procesados a partir de RNA bicatenario. También a dife- pr oteínas CAS
rencia de los siRNA y los miRNA, la enzima Dicer no está invo-
(c)
lucrada en la producción de piRNA.
crRNA 5' 3'
Los RNA de interacción con Piwi se combinan con proteínas
Piwi, que están relacionadas con Argonauta, y suprimen la expre- Apareamiento
sión y el movimiento de los transposones en las células germina- de l crRNA con
les de 8oimales. Si bien no se conoce por completo el mecanismo DNA del fago
de silenciamiento de los transposones por piRNA, sabemos que (d)
incluye la degradación del nlRNA transcrito a partir de los trans- 5' 3'
posones, los cambios de la estructura de la cromatina que inhiben
la transcripción de los transposones y la inhibición de la traduc- 5' 3'
3' S'
ción de proteínas codificadas por los transposones. No se conoce
qué función, si es que tienen alguna, cumplen los piRNA fuera de
Escisión del DNA
las células germinales. de l fago

RNA de CRISPR DNA

5' 3'
del 3' S'
Tras el descubrimjento de los RNA pequeños en eucariontes, se fago
detectaron RNA pequeños similares, denominados RNA de
CRISPR (crRNA) en procariontes: los crRNA son codificados Figura 14-23. Los RNA de CRISPR actúan en la defensa contra la inva-
por secuencias de DNA halladas en los genon1as de bacterias y sión de DNA extraños, como el DNA de bacterióf agos y plásmidos.

RNA de CRISPR precursor, largo ttig. 14-23»), que después es
esci ndido por proteínas asociadas con CRISPR (proteínas Cas) en
crRNA, cada uno de los cuales consiste en una secuencia espacia-
dora (homóloga a la del DNA invasor) flanqueada por una parte de
la secuencia palindrómica (tíg. 14-23cp. Cuando DNA extraño
adicional de la misn1a fuente ingresa en la célula, los crRNA se
aparean con este y ayudan a provocar la escisión del DNA invasor
0:íg. 14-23CI(). De esta manera, los crRNA actúan como un sistema
de defensa RNA adaptativo contra invasores extraños.
CONCEPTOS
Los RNA de interacción con Piwi se encuentran en las células germi-
nales de los animales e inhiben los t ransposones. Los RNA de CRISPR
se hallan en procariontes, donde funcionan como defensa contra
DNA extraño.
14.6 Los RNA no codificantes largos regulan
la expresión génica
Durante muchos años, nuestro conocimiento del RNA se limitó a
las moléculas que desempeñan un papel central en la síntesis de
proteínas: 1nRNA, tRNA y rRNA. Más tarde, se agregaron a la
lista los RNA nucleares pequeños que participan en el procesa-
miento postranscripción del RNA (snRNA y snoRNA). A partir
de fines de la década de 1990, los genetistas comenzaron a reco-
nocer que numerosos RNA pequeños (siRNA, miRNA, piRNA y
crRNA) también eran abundantes y de importancia fundamental
para la función celular. En forma más reciente, se ha vuelto evi-
dente que se transcribe la n1ayoría de los genon1as eucariontes:
aunque so lo alrededor del l % del genoma humano codifica direc-
tamente proteínas, se transcribe más del 80%, lo que produce
muchas moléculas largas de RNA que no codifican proteínas.
Estos RNA, denominados RNA largos no codificantes (lncRNA),
suelen tener más de 100 nucleótidos de longitud y carecen de un
1narco de lectura abierto (una secuencia con un codón de injcia-
ción y un codón de terminación, que es traducida por ribosomas).
Se han descubierto miles de lncRNA en los últimos cinco años.
Las secuencias de DNA que los codifican , junto con otro DNA de
función desconocida, se han denominado "la cuestión oscura del
genoma".
Si bien todavía no se conoce clara1nente la función de 1nuchos
lncRNA, cada vez hay más evidencia de que por lo menos algu-
RESUMEN DE CONCEPTOS
■ Ungen suele definirse como una secuencia de nucle6tidos de
DNA que se transcribe a una sola molécula de RNA.
■ Los íntrones (secuencias no codificantes que interrumpen las
secuencias codificantes [exones] de los genes) son comunes
en las células eucariontes, pero raras en las células bacte-
rianas.
■ Una molécula de mRNA tiene tres partes fundamentales: una
región 5' no traducida, una secuencia codificante de proteínas
y una región 3' no traducida.
Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 405
nos desempeñan un papel en el control de la expresión génica.
Algunos de los lncRNA interactúan con proteínas que regulan la
transcripción. Por ejemplo, un lncRNA denominado linc-RNA-
p21 interactúa con una proteína llamada p53, un factor de trans-
cripción que activa numerosos genes, como los involucrados e n el
control del ciclo celular y el cáncer. Al reprimir a p53, lincRNA-
21 afecta la t.ransc1ipción de cientos de genes. Otros lncRNA
modifican la estructura de la cromatina, que también regula la
transcripción (véase cap. 17). Algunos lncRNA tienen sitios que
son reconocidos por miRNA, y los lncRNA sirven como señuelos
para la unión de miRNA. Así, los lncRNA y los mRNA con1piten
por un número limitado de miRNA y regulan la traducción y degra-
dación de uno y otro. Otros lncRNA son co1nple1nentarios de las
secuencias del mRNA y funcionan por apareamiento de bases con
el mRNA y evitan la traducción o el corte y empalme.
Uno de los lncRNA mejor estudiados es Xist RNA, que desem-
peña un papel central en la compensación de la dosis en las célu-
las de mamíferos (véase cap. 4). Para equilibrar la expresión de
genes ligados al cromosoma X en los machos (con un cro111oso-
ma X), se desactiva uno de los cromosomas X en cada célula de
las hembras de mamíferos. Cuál de los cro1nosomas X se desac-
tiva es aleatorio y se produce en etapas tempranas del desarrollo;
una vez desactivado, este cromosoma se mantiene inactivo a
través de múltiples ciclos de división celular. El Xist RNA se
transcribe solo a partir del cro1nosoma X destinado a tornarse
inactivo; el Xist RNA lo recubre y recluta proteínas que metilan
histonas de la cromatina. Luego, la metilación de la cron1atina
induce la inhibición de la transcripción de genes del cromoson1a
X inactivo. Por lo n1enos otros dos lncRNA actúan para regular la
expresión de Xist RNA.
La evidencia sugiere que otros lncRNA también causan im-
pronta genómica (véanse caps. 4 y 21). La in1pronta se produce
cuando un gen se expresa de manera diferente según se herede del
progenitor masculino o femenino. Muchos grupos de genes con
impronta contienen secuencias que codifican lncRNA, y la evi-
dencia sugiere que algunos genes con impronta son controlados
por los lncRNA.
CONCEPTOS
Los RNA no codificantes largos son moléculas largas de RNA que no
codifican proteínas. La evidencia sugiere cada vez más que muchas de
estas moléculas funcionan en el control de la expresión génica.
■ El mRNA bacteriano se traduce inmediatamente después de la
transcripción y es sometido a escaso procesarruento. El pre-
mRNA de un gen eucarionte codificante de proteínas es pro-
cesado en forma extensa: se añade un nucleótido modificado y
un grupo n1etiJo, denominados en conj unto casquete, a1 extre-
mo 5' del pre-mRNA; se escinde el extremo 3' y se agrega
una cola de poli(A), y se eliminan los intrones. Los intrones
se eliminan dentro de una estructura denominada espliceoso-
1na, que está compuesta por varios RNA nucleares pequeños y
proteínas.
406 CAPITULO 14

■ Algunos intrones hallados en los genes de rRNA y los genes
mitocondriales tienen capacidad de autocorte y empalme.
■ Algunos pre-mRNA presentan corte y empalme alternativo, en
el que se cortan y en1palman juntas diferentes combinaciones
de exones o se utilizan distintos sitios de escisión 3' .
■ Los RNA mensajeros pueden modificarse mediante adición,
deleción o modificación de nucleótidos de la secuencia de
codificación, un proceso denominado edición del RNA.
■ Los RNA de transferencia, que se unen a aminoácidos, son
moléculas cortas que asumen una estru ctura secundaria
común y contienen bases modificadas.
■ Los ribosomas, los sitios de síntesis proteica, están compues-
tos por varias moléculas de RNA ribosórnico y numerosas
proteínas.
■ Los RNA de interferencia pequeños, los microRNA, los RNA
de interacción con Piwi y los RNA de CRISPR desempeñan
papeles importantes en el silenciarniento de genes y en una
se1ie de otros procesos biológicos.
■ Los RNA no codificantes largos son moléculas de RNA que
no codifican proteínas. La evidencia sugiere cada vez más que
muchas
. .,
de estas moléculas actúan en el control de la expre-
_,, .
s1on geruca.

TÉRMINOS IMPORTANTES

anticodón (p. 399) edición del RNA (p. 395) intrón del RNA de transferen- secuencia Shine-Dalgarno
base modificada (p. 398) espliceosoma (p. 391) cia (p. 386) (p. 387)
casquete 5' (p. 388) enzima modificadora de lazo (p. 391) sitio de coite y e1npalme 3'
codón (p. 387) tRNA (p. 398) múltiples sitios de escisión 3' (p. 390)
cola de poli(A) (p. 389) estructura en hoja de trébol (p. 393) sitio de corte y empalme 5'
colinealidad (p. 384) (p. 398) punto de ramificación (p. 390)
complejo de silencia1niento exón (p. 385) (p. 390) subunidad 1ibosómica grande
inducido por RNA (RISC) interferencia por RNA región 3' no traducida (p. 400)
(p. 403) (RNAi) (p. 402) (3' UTR) (p. 388) subunidad ribosómica peque-
corte y empahne alternativo intrón (p. 385) región 5' no traducida ña (p. 400)
(p. 393) intrón del grupo I (p. 386) (5' UTR) (p. 387) vía de procesamiento alterna-
corte y empalme de (p. 390) intrón del grupo II (p. 386) región codificante de proteína tiva (p. 393)
corte y empalme trans intrón del pre-mRNA nuclear (p. 388)
(p . 392) (p. 386) RNA guía (p. 395)

l. Cuando se bib1id6 DNA con mRNA transcrito a partir de 5. c

este, las regiones de DNA que no se correspondían con el 6. RNA guía
RNA formaron un bucle.
7. b
2. Intrones del grupo I , intrones del grupo II, intrones del pre-
mRNA nuclear e intrones del RNA de transferencia. 8. d
3. Una proteína que añade el casquete 5' se asocia con la RNA 9. Un siRNA o miRNA se combina con proteínas para formar el
polimerasa II, que transcribe pre-mRNA pero está ausente de RISC, que después se aparea con mRNA mediante aparea-
la RNA polimerasa I y III, que transcriben rRNA y tRNA. miento entre bases del siRNA o del miRNA y bases del
1nRNA complen1entarias.
4. b

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
Se aisló y desnaturalizó el DNA de w1 gen eucarionte y se lo hibridó con el mRNA trans-
crito a partir del gen; después, se observó la estructura hibridada con un microscopio elec-
trónico. Se visualizó la estructura adjunta.
a. ¿Cuántos intrones y exones hay en este gen? Explique su respuesta.
b. Identifique los exones e intrones de esta estructura bibridada.
 Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 407

Estrategia de solución Pasos de la solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? a. Cada uno de los bucles representa una región en la Recuerde: los
intrones son
■ El número de intrones y exones, y cómo arribó a su res- que las secuencias del DNA no tienen secuencias secuencias no
correspondientes en el RNA; estas regiones son codificantes
puesta. halladas den-
■ La localización de los intrones y los exones marcados en intrones. Hay cinco bucles en la estructura híbrida- tro de los
da; por consiguiente, debe haber cinco intrones en genes euca•
la figura. riontes.
el DNA y seis exones.
¿Qué información se proporciona para resolver el proble-
ma? b.
■ El DNA y el RNA son de un eucarionte. Intrón Pista: el
Exón número de
■ El DNA fue desnaturalizado e hibridado con el mRNA. intrones será
■ Una imagen de la estructura hibridada. uno menos
que el núme-
ro de exones.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Exón Intrón
lntrones en la Sección 14.1 y lalligu.ra 14-?f
Exón

Intrón
Intrón

Problema 2
Dibuje un mRNA bacteriano típico y el gen a partir del cual fue transcrito. Identifique los extremos 5' y 3' de las moléculas de
RNA y de DNA, así co1no las siguientes regiones o secuencias:

a. Promotor e. Sitio de inicio de la transcripción

b. Región 5' no traducida f. Terminador
c. Región 3' no traducida g. Secuencia Shine-Dalgarno
d. Secuencia codificante de proteína h. Codones de iniciación y de terminación

Pista: repase la
Estrategia de solución Pasos de la solución estructura de una uni-
dad de t ranscripción
en !~ figura 13-ij y la
¿Qué información se requiere en su respuest a al estructura del mRNA
en !~ figura 14-!J!.
problema?
Un dibujo del mRNA y del gen a partir del cual fue transcri-
to. Los extremos 5' y 3' de las moléculas de n1RNA. Inicio de la transcripción Detención de la transcripción
Localizaciones de las estructuras enumeradas en el dibujo. Pi~;~pto; 1 1

DNA , _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ __
¿Qué información se proporciona para resolver el problema? 3
■ El gen pertenece a una bacteria. Codón de Codón de
Secuencia iniciación terminación Terminador
■ Diferentes partes del DNA y el RNA que deben ser rotu- Secuencia
Slúne-Dalgarno
ladas. codifican te
de proteína
Para obtener ayuda con este problema, repase: RN A 5' ____:~..lc====:::::====:::::iL
, - - L, 3'
~ y
El molde en la Sección 13.2 y Estructura del RNA mensajero región 5' región 3'
en la Sección l 4.2. no traducida no traducida
408 CAPITULO 14
Sección 14.1
l. ¿ Cuál es el concepto de colinealidad? ¿De qué manera se
cumple este concepto en células bacterianas y eucariontes?
2. ¿Cuáles son algunas de las características de los intrones?
3. ¿Cuáles son los cuatro tipos básicos de intrones? ¿En qué
organismos se encuentran?
Sección 14.2
4. ¿Cuáles son los tres elementos principales de las secuencias
de mRNA en las células bacterianas?
5. ¿ Cuál es la función de la secuencia consenso Shíne-
Dalgamo?
6. a) ¿Qué es el casquete 5'? b) ¿Cómo se agrega el casquete
5 ' al pre-mRNA eucarionte? c) ¿Cuál es la función del cas-
quete 5'?
7. ¿Cómo se agrega la cola de poli(A) al pre-mRNA? ¿Cuál es
el propósito de la cola de poJi(A)?
8. ¿Cómo está compuesto el espliceosoma? ¿Cuál es su función?
9. Explique el proceso de corte y empalme del pre-mRNA en
los genes nucleares.
10. Describa dos tipos de vías de procesamiento alternativo.
¿Cómo Uevan a la producción de múltiples proteínas a par-
tir de un solo gen?
Sección 14.1
* 19. La distrofia muscular de Duchenne es causada por una
mutación de un gen que comprende 2,5 millones de nu-
cleótidos y especifica una proteína denominada distrofina.
Sin embargo, 1nenos del 1% del gen codifica, en realidad,
los am inoácidos de la proteína distrofina. Sobre la base
de lo que ahora sabe sobre la estructura de los genes y el
procesamiento del RNA en células eucariontes, ofrezca
una explicación posible del gran tamaño del gen de
distrofina.
20. ¿Qué sucedería en el experimento ilustrado en 1~ figura 1
¡t4-12¡si el DNA y el RNA mezclados provinieran de
organismos muy diferentes, por eje1nplo un gusano y un
cerdo?
21. En el gen de ovoalbúmina mostrado en la gura 14- ,
¿dónde se localizarían las regiones 5' y 3 ' no tra
el DNA y el RNA?
Sección 14.2
22. ¿En qué se diferencian los mRNA de las células bacteria-
nas y los pre-mRNA de las células eucariontes? ¿En qué
se diferenciru1 los 1nRNA 111aduros de las células bacteria-
nas y eucariontes?
11. ¿ Qué es la edición del RNA? Explique el papel de los RNA
guía en la edición del RNA.
12. Resuma los diferentes tipos de procesamiento que pueden
tener lugar en el pre-1nRNA.
Sección 14.3
13. ¿ Cuáles son algunas de las modificaciones del tRNA que
tienen lugar 1nediante procesamiento?
Sección 14.4
14. Describa la estructura básica de los ribosomas de las células
bacterianas y eucariontes.
15. Explique cómo se procesa el rRNA.
Sección 14.5
16. ¿Cuál es el origen de los RNA de interferencia pequeños,
los micro-RNA y los RNA de interacción con Piwi?
¿ Qué función cun1plen estas moléculas de RNA en la
célula?
17. ¿ Cuáles son algunas similitudes y diferencias entre los
siRNA y los miRNA?
18. ¿ Cómo se procesan los miRNA?
23. ¿Son codificadas las regiones 5' no traducidas (5' UTR)
de los mRNA eucaiiontes por secuencias del promotor, el
exón o e l intrón del gen? Explique su resp uesta.
*24. Dibuje un gen eucarionte típico, y el pre-mRNA y el
mRNA derivados de este. Asuma que el gen contiene tres
exones. Identifique los siguientes ítems y, para cada uno,
describa brevemente su función:
a. Región 5' no traducida
b. Promotor
c. Secuencia consenso AAUAAA
d. Sitio de inicio de la transcripción
e. Región 3' no traducida
f. Intrones
g. Exones
h. Cola de poli(A)
i. Casquete 5 '
25. ¿Cómo afectaría la deleción de la secuencia Shine-
Dalgarno a un n1RNA bacte1iano?
26. ¿Cuál sería el efecto más probable de mover la secuencia
consenso AAUAAA mostrada en 1~ figura 14-'Jj diez
nucleótidos en dirección 5' ?
27. ¿Cuál sería el efecto más probable de la delecíón de las
s iguientes secuencias o características a un pre-1nRNA
eucarionte?

a. Secuencia consenso AAUAAA
b. Casquete 5'
c. Cola de poli(A)
28. Suponga que se produce una mutación en el medio de un
intrón grande de un gen que codifica una proteína. ¿Cuál
será el efecto 1nás probable de la n1utación sobre la
secuencia de aminoácidos de esa proteína? Explique su
respuesta.
*29. Un genetista induce una mutación en una línea de
células cultivadas en un laboratorio. La mutación se pro-
duce en uno de los genes que codifica proteínas que par-
ticipan en la escisión y la poliadenilación del m.RNA
e ucarionte. ¿Cuál será el efecto inmediato de esta
mutación sobre las moléculas de RNA en las células cul-
tivadas?
30. Un genetista muta el gen de las proteínas que se unen a la
cola de poli(A) en una línea de células cultivadas en el
laboratorio. ¿ Cuál será el efecto inmediato de esta muta-
ción en las células cultivadas?
31. Un genetista aísla un gen que contiene ocho exones.
Después, aísla el mRNA maduro producido por este gen.
Luego de fabricar el DNA monocatenario, mezcla el DNA
monocatenario y el RNA. Parte del DNA 1nonocatenario
se híbrida (aparea) con el mRNA complementario. Dibuje
un esquema de cómo se verán los híbridos DNA-RNA en
el microscopio electrónico.
32. Un genetista descubre que dos proteínas diferentes son
codificadas por el mismo gen. Una proteína tiene 56 ami-
noácidos, y la otra tiene 82 aminoácidos. Proporcione una
explicación posible acerca de cómo el mismo gen puede
codificar estas dos protefuas.
33. ¿ Qué conclusiones puede extraer acerca de los tamaños
relativos de las dos proteínas producidas por corte y
en1palme alternativo en la lfigura 14-q ?
*34. Explique cómo cada uno de los siguientes procesos com-
p Iica el concepto de colinealidad.
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 14.2
37. El corte y empalme alternativo se produce en más del 90%
A..- "" de los genes hu1nanos que codifican proteínas. Los investi-
!,0~ gadores han hallado que la secuencia del pro1notor del pre-
mRNA incide en la manera en que corta y empalma un pre-
.mRNA (D. Auboeuf y cols. 2002. Science 298:416-419).
Además, los factores que afectan la velocidad de elongación
de la RNA polimerasa durante la transcripción inciden en el
tipo de corte y en1palme que tiene lugar. Estos hallazgos
sugieren que el proceso de transcripcjón incide en el corte y
empalme. Proponga uno o más mecanismos que expliquen
cómo la transcripción podría afectar el corte y empalme
alternativo.
Moléculas de RNA y procesamiento del RNA 409
a. Corte y empalme trans
b. Corte y empalme alternativo
c. Edición del RNA
Sección 14.5
35. La interferencia por RNA puede desencadenarse cuando se
transcriben repeticiones invertidas a una molécula de RNA
que después se pliega para formar RNA bicatenario. Escriba
una secuencia de repeticiones invertidas dentro de una
molécula de RNA. Mediante un diagrama, muestre cómo
puede plegarse el RNA con las repeticiones invertidas para
formar RNA bicatenario.
36. A principios de la década de 1990, Carolyn Napoli y sus
t,.;.,w_""' colegas estaban trabajando con petunias e intentaban crear
!.~~ por ingeniería genética una variedad con pétalos de color
violeta oscuro introduciendo numerosas copias de un gen
que codifica pétalos de ese color (C. Napoh , C. Le1nieux y
R. Jorgensen. 1990. Plant Cell 2:279-289). Su razonamien-
to fue que las copias extra del gen inducilian mayor produc-
ción de pigmento violeta y darían por resultado una petunia
con un 1natiz aún más oscuro de violeta. Sin embargo, para
su gran sorpresa, muchas que las plantas portadoras de
copias extra del gen violeta eran totalmente blancas o solo
tenían parches de color. El análisis molecular reveló que el
nivel del mRNA producido por el gen violeta se redujo 50
veces en las plantas genomanipuladas respecto de los nive-
les de mRNA de las plan-
tas de tipo silvestre. De
alguna manera, la intro-
ducción de copias extra
del gen violeta silenció
tanto las copias introduci-
das como los genes violeta
propios de la planta.
Proporcione una explica-
ción posible sobre cómo la Petunia blanca (roger ashford/Alamy).
introducción de numerosas
copias del gen violeta silenció todas las copias de este gen.
38. La distrofia muscular de Duchenne (DMD) es una enferme-
,\..-'"" dad genética ligada al cromosoma X causada por mutacio-
!.~';f; nes del gen que codifica la distrofina, un proteína grande
que desempeña un papel importante en el desarrollo de
fibras musculares nonnales. El gen de di strofina es enorme,
abarca 2,5 millones de pares de bases y contiene 79 exones
y 78 intrones. Muchas de las mutaciones que causan DMD
producen codones de terminación prematuros, que detienen
la síntesis proteica, lo que deternlina una forn1a de distrofi-
na muy acortada y no funcional. Algunos genetistas han
propuesto tratar a los pacientes con DMD introduciendo
moléculas de RNA pequeñas que hagan que el espliceoso-
ma saltee el exón que contiene el codón de terminación. La
introducción de los RNA pequeños producirán una proteína
41 O CAPITULO 14
algo acortada (porque se saltea un exón y faltan algunos
aminoácidos), pero puede generar, aun así, una proteína que
presenta cierta función (A. Goyenvalle y cols., 2004.
Science 306: 1796-1799). Los RNA pequeños usados para
saltear exones son complementarios de las bases del pre-
mRNA. Si estu viera diseñando RNA pequeños para saltear
exones con el fm de tratar la DMD, ¿qué secuencias debe-
rían contener los RNA pequeños?
39. En las células eucariontes, suele añadirse una cola de
poli(A) a las moléculas de pre-mRNA, pero no al rRNA ni
al tRNA. Gracias al uso de técnicas de DNA recombinante,
un gen codificante de proteínas (que suele ser transcrito por
la RNA polimerasa II) puede conectarse a un promotor para
RNA polimerasa l. Este gen híbrido es transcrito después
por la RNA polimerasa I, y se produce el pre-m.RNA apro-
piado, pero este pre-1nRNA no se escinde en el extre1no 3'
ni se agrega una cola de polí(A).
Proponga un mecanismo para exp Hcar cómo el tipo de
promotor hallado en el extremo 5' de un gen puede influir
en si se añade o no una cola de poli(A) al extremo 3'.
40. Las proteínas SR son esenciales para el ensamblaje correc-
to del espliceosoma y se sabe que intervienen en la regula-
ción del corte y empalme alternativo. Sorprendentemente,
el pro1notor utilizado para la transcripción del pre-mRNA
afecta el papel de las proteínas SR en la selección del sitio
de corte y empalme, y el corte y empalme alternativo. Por
ejemplo, n1ediante ingeniería genética, es posible crear pro-
motores de la RNA polimerasa II que tienen secuencias
algo diferentes. Cuando se transcriben pre-mRNA con
exactamente las mismas secuencias a partir de dos promo-
tores diferentes de la RNA polimerasa II que presentan
li geras djferencias de secuencia, el pro1notor utilizado
puede afectar la manera en que se corta y empalma el
pre-mRNA.
Proponga un mecanismo por el que la secuencia de DNA
de un pro1notor de la RNA polin1erasa II podría afectar el
corte y empalme alten1ativo del pre-mRNA.
 15
El código genético y la traducción

Huteritas, ribosomas y síndrome

de Bowen-Conradi

Los niños con sú1drome de Bowen-Conradi ilustran

dolorosamente la naturaleza esencial del ribosoma, la
fábrica de proteú1as de la célula. Estos niños, que
nacen con una nariz promjnente, cabeza pequeña y
una curvatura inusual del dedo meñique, tienen retra-
so de crecimiento, no aumentan de peso y por lo
general mueren dentro del primer año de vida.
Casi todos los niños con síndro1ne de Bowen-
Conradi son huteritas, una rama de los anabaptistas
que se originó en el siglo XVI en los Alpes tiroleses
de Au stria. Tras años de persecución, los huteritas
llegaron a Dakota del Sur en la década de 1870-80, y
después se extendieron a los estados de la pradera
vecinos y a las provincias canadienses. En la actuali-
dad, los huteritas de Norteamérica ascienden a
40 000 personas. Viven en granjas comunitarias, son
pacifistas estrictos y rara vez se casan fuera de la
comunidad huterita.
El smdro1ne de Bowen-Conradi se hereda con10 un
Los huteritas son una rama religiosa de los anabaptistas, que viven en gran- trastorno autosómico recesivo, y Ja asociación de este
jas comunitarias en los estados y provincias de la pradera de Norteamérica. síndrome con la comunidad huterita es una función
Un pequeño número de fundadores, unido a una tendencia a casarse entre ellos, han de la historia genética singular del grupo. El conjunto
causado una alta frecuencia de la mutación del síndrome de Bowen-Conradi entre de genes de los huteritas actuales de Norteamérica
los huteritas. El síndrome de Bowen-Conradi se debe a la biosíntesis defectuosa de puede rastrearse a menos 100 personas que emigra-
ribosomas, que afecta el proceso de traducción . Aquí se muestra a niños huteritas ron a Dakota del Sur a fines del siglo XIX. La mayor
sanos. (Kevin Fleming/Corbis).
incidencia de síndrome de Bowen-Conradi de los
huteritas actuales se debe al efecto fundador (la pre-
sencia de un alelo que cau sa síndrome de Bowen-
Conrad i en uno o má de los fLLndadores originales) y su pro pagación, porque los huteritas se
casan con miembros de su comunidad. Debido al efecto fundador y a la endogamia (véase
cap. 25), muchos huteritas de la actualidad tienen un parentesco muy cercano, por ejemplo
son primos hermanos. Esta relación genética cercana entre los huteritas aumenta la probabili-
dad de que un niño herede dos copias del alelo recesivo y presente síndrome de Bowen-
Conradi; de hecho, casi 1 de cada 10 huteritas es un portador heterocigótico del alelo que
causa la enfern1edad.
Si bien el síndrome de Bowen-Conradi se describió por primera vez en 1976, la base genéti-
ca y bioquímica de la enferm edad continuó s iendo un misterio durante mucho tiempo. En
2009, después de una investigación de 7 años para hallar el gen causal, los investigadores de
la Universidad de M anitoba determinaron que el síndrome de Bowen-Conradi se debe a una
mutación de un solo par de bases del gen EMGl, localizado en el cromosoma 12.
El descubrimiento del gen del síndrome de Bowen-Conradi permitió conocer de inmediato
el carácter bioquímico de la enfermedad. Aunque se sabe poco acerca de la función del gen
EMG 1 en sereB humanos, estudios previos en levaduras revelaron que codifica una proteína
que ayuda a ensamblar el ribosoma. Como se comentó en el capítulo 14, el ribosoma está
411
412 CAPÍTULO 15

compuesto por subunidades pequeña y grande. En los seres humanos, la subunidad pequeña
consiste en un solo fragmento de RNA ribosómico, conocido como rRNA 18S, y un gran
número de proteínas. La proteína codificada por el gen EMGJ desempeña un papel esencial en
el procesa1niento del rRNA 18S y ayuda a ensamblarlo en la subunidad pequeña del ribosoma.
Debido a una mutación del gen EMGJ, los bebés con síndrome de Bowen-Conradi producen
ribosomas que funcionan 111al, lo que afecta el proceso por el cual se sintetizan todas las pro-
teínas.

E 1 síndrome de Bowen-Conradi ilustra la extrema importancia

de la traducción , el proceso de síntesis proteica, que es el
tema de este capítulo. Comenzamos examinando la relación mo-
lecular entre genotipo y fenotipo. A continuación, estudiarnos el
código genético (las instrucciones que especifican la secuencia de
aminoácidos de una proteína) y después analizamos el mecanis-
1110 de síntesis proteica. Nos concentrare111os funda1nentaln1ente
en la síntesis proteica en células bacterianas, pero examinaremos
algunas de las diferencias con las células eucariontes. Al final del
capítulo, consideraremos algunos aspectos adicionales de la sín-
tesis proteica.
15.1 Muchos genes codifican
proteínas
La primera persona que sugirió la existencia de una relación entre
el genotipo y las proteínas fu e el médico inglés Archibald Garrod.
En 1908, Garrod postuló, de manera correcta, que los genes codi-
fican enzimas, pero lamentablemente su teoría impresionó poco a
sus conte1n poráneos. La relación entre genes y proteínas no se
aceptó ampliamente hasta la década 1940, cuando George Beadle
y Edward Tatum examinaron la base genética de las vías bioquí-
1nicas en Neurospora. El trabajo de Beadle y Tatum ayudó a defi-
nir la relación entre genotipo y fenotipo al llevar a la hipótesis de
un gen, una enzi1na: la idea de que cada gen codifica una enz ilna
distinta.
esporas individuales en diferentes tubos de cultivo que contenían
medio completo (aquel con todas las sustancias biológicas ne-
cesarias par a el crecimiento). Estas esporas se desarrollaron a
hongos y produj eron esporas por mitosis. A continuación, transfi-
rieron esporas de cada cultivo a tubos con medio 1nínimo. Los
hongos que contenían mutantes auxótrofos crecían en medio
completo, pero no lo hacían en medio mínimo, Jo que permitió
que Beadle y Tatum identificaran los cultivos que presentaban
mutaciones.
Tras haber definido que un cultivo particular tenía una muta-
ción auxótrofa, Beadle y Tatum comenzaron a determinar el efec-
to de la mutación. Transfirieron las esporas de cada cepa mutante
de un medio completo a una serie de tubos (véaselfíg.15-2!), cada
uno de los cuales poseía medio mínimo más una de una variedad
de molécu las biológicas esenciales, por ejemplo, un aminoácido.
Si en un tubo crecían las esporas, Beadle y Tatum podían identi-
ficar la sustancia agregada con10 la 1nolécula biológica cuya sín-
tesis había sido afectada por la mu tación. Por ejen1plo, un mutan-
te auxótrofo que solo crecía en medio mínimo al que se había
agregado arginina debía haber tenido una mutación que alterara la
síntesis de arginina.
Adrian Srb y Norman H. Horowitz aplicaron con paciencia este
procedimiento para disecar genéticamente la vía bioquúuica de la

Hipótesis de un gen, una enzima

Beadle y Tatum utilizaron el moho del pan Neurospora para estu-
diar los resultados bioquímicos de las mutaciones. El n1oho
Neurospora es fácil de cultivar en el laboratori o, y la parte vege-
tativa principal del hongo es haploide, lo que permite observar
con faci li dad los efectos de mutaciones recesivas 41ig. 15-~).
El Neurospora de tipo silvestre crece en medio mínimo, que
solo contiene sales inorgánicas, nitrógeno, una fuente de carbono
co1no sacarosa y la vita1uina biotina. El hongo puede sintetizar
todas las moléculas bio lógicas que necesita a partil· de estos co1n-
puestos básicos. Sin embargo, pueden surgir mutaciones que alte-
ran el crecimiento del hongo aJ destruir su capacidad para sinteti-
zar una o más moléculas biológicas esenciales. Estos mutantes
con deficiencias nutricionales, denominados auxótrofos (véase
cap. 9), no crecerán en medio mínimo, pero pueden hacerlo en
1nedio que contenga la sustancia que ya no son capaces de sinte-
tizar. Figura 15-1. Beadle y Tatum utilizaron el hongo Neurospora, que
Beadle y Tatum irradiaron, en primer lugar, esporas de Neuro- tiene un ciclo vital complejo, para estudiar la relación entre genes y
spora para inducir mutaciones {tíg. IS-2p. Después, colocaron proteínas.
 El código genético y la traducción 413

Pregunta: ¿cómo se pueden aislar e identificar las mutaciones Figura 15-2. Beadle y Tatum desarrollaron un método para aislar mutantes
auxótrofas? auxótrofos de Neurospora.

Métodos
___________
R__
ayos X \
Se irradió un cultivo de \'
Neurospora para inducir r--:::,,__ , ~ Neurospora síntesis de arginina (ffig. 15-3~. Primero, aislaron una serie de
mutaciones. mutantes auxótrofos cuyo crecimiento reque1ia arginina. Luego,
~ Medio
investigaron la capacidad de estos mutantes de crecer en medio
Se t ransfirieron
mínimo suplementado con tres compuestos: ornitina, citrulina y
esporas individuales f arginina. A prutir de los 1·esultados, pudieron colocar a los mutan-
a tubos que contenían f tes en tres grupos sobre la base de qué sustancias posibilitaba el
medio completo. crecimiento (cuadro 15-1).
En función de estos resultados, Srb y Horowitz postu laron que
Medio completo \
la vía bioquímica que lleva al aminoácido arginina tenia por lo
Se t ransfirieron menos tres pasos:
esporas de cad
cultivo a tubos
que contenían Paso 1 Paso 2 Paso 3
medio mínimo. precursor ----►► ornitina ---11►► citrulina ----►► arginina

, Los hongos con

mutaciones auxó-
Su conclusión fue que las mutaciones del grupo I afectan el paso
trofas no crecieron 1 de esta vía, las n1utaciones del grupo Il afectan el paso 2, y las
en medio mínimo, ... mutaciones del grupo m afectan el paso 3. Pero ¿cómo sabían
que el orden de los compuestos de La vía bioquímica era el co-
Medio mínimo ___, rrecto?
... mientras que los hongos que Obsérvese que si una mutación bloquea el paso I, la adición de
, Se t ransfirieron las es- crecieron en medio mínimo no ornitina o citrulina permite el crecimi ento, porque estos compues-
poras de cultivos mu- ~ nlan mutaciones auxótrofas. tos todavía pueden ser convertidos en arginina (véasejtig. 15-3!).
tantes a tubos, cada De rnodo sin1ilar, si se bloquea el paso 2, la adición de citrulina
uno de los cuales con- 1.--::~
permite el crecimiento, pero La adición de ornitina no ejerce nin-
tenía medio mínimo
más un aminoácido. gún efecto. Si se bl oquea el paso 3, las esporas crecerán solo si se
añade arginina al medio. El principio de base es que un mutante
Resultados auxótrofo no puede sintetizar ningún compuesto que aparezca
La cepa mutante de Neurospora creció después del paso bloqueado por una mutación.
solo cuando se suplementaba con arginina, Aplicando este razonamiento a la información del cuadro 15-1,
lo que indica que carecía de la capacidad podemos observru· que La adición de arginina al medio permite
de sintetizar arginina. que crezcan los tres grupos de mutantes. Por lo tanto, los pasos
bioquün icos afectados por todos los mutantes preceden al paso
que da por resultado arginina. La adición de citrulina posibilita el
crecimiento de los mutantes del grupo I y el grupo Il, pero no de
los mutantes del grupo Ill; en consecuencia, las 1nutaciones del
grupo m deben afectar un paso bioquímico que tiene lugar des-
pués de la producción de citrulina pero antes de la producción de
arg1n1na.

Crecimiento de mutantes aux:ótrofos

de arginina en medio mínimo con diversos
suplementos

Número de
cepa mutante Ornitina Citrulina Arginina
, ~1>(:-0 .,¡_,,(:-1> . ~,(:-1> i'c.,O ~c.,O i'(:-1> ~(:-1> ~,(:'-?> ~,(:-1> '!..e,\(:-1>
!<..o v .,;_,,.,'<Y- !<..'?> R'?> v"'-1> ?>(,,?f. c,e eº ó" Grupo 1 + + +
,~,~ 'I;, ~v 7>'> 0'.:: h.'>~ -<._(,,
.i..O-., · oº i--
Grupo 11 + +
•~◊v •~o
Grupo 111 +
Conclusión: la mutación pudo identificarse por la capacidad
de las esporas para crecer en medio mínimo suplementado
Nota: un signo más(+) indica crecimiento; un signo menos(- ) indica ausencia de cre-
por las sustancias que estas no podían sintetizar.
cimient o.
414 CAPÍTULO 15

Pregunta: ¿qué información nos aportan los efectos de una mutación genética en una vía
bioquímica acerca de la relación gen-proteína?

Suplementos para el medio mínimo

Métodos Ninguno Ornitina Citrulina Arginina

Grupo
Las espor~s _de los mu~antes a_u ~ótrofos
cuyo crec1m1ento requiere arginina se
7
Tipo
olocan en medio mínimo y en medio
silvestre
mínimo con un suplemento.

Resultados

Los mutantes del grupo I pueden crecer~ n

medio mínimo suplementado con ornitina, 1
citrulina o arginina. La mutación bloquea
un paso previo a la síntesis de ornitina,
citrulina y arginina.

Los mutantes del grupo 11 crecen en med~

suplementado con arginina o con citrulina,
pero no con ornitina. La mutación bloquea l:::-11
un paso previo a la síntesis de citrulina r
y arg1rnna.

---
Los mutantes del grupo 111 crecen solo en
medio suplementado con arginina. La __ 111
mutación bloquea un paso previo a la
síntesis de arginina.
1
El grupo I se bloquea en este paso. El grupo II se bloquea en este paso. El grupo 111 se bloquea en este paso.

'\
Figura 15-3. Método aplicado para
determinar la relación entre genes y Interpretación Compuesto - Enzima Enzima !Enzima
enzimas de Neurospora. Esta vía bioquí- de los datos precursor ~ A
Ornitina
8
j+ Citrulina
7 c
Arginina

mica lleva a la síntesis de arginina en t t t

Neurospora. Los pasos de esta vía son Gen A Gen B Gen e
catalizados por enzimas afectadas por
Conclusión: cada gen codifica una proteína distinta; en este caso, una enzima.
mutaciones.

Mutaciones Como las 1nutaciones del grupo I afectan algún paso previo a
del grupo m
la producción de ornitina, podemos concluir que deben afectar la
citrulina -----t► argllllJ1a conversión de algún precursor a ornitina. Ahora, podemos deline-
ar la vía bioquímica que produce ornitina, citrulina y arginina.
La adición de ornitina permite el crecimiento de 1nutantes del
grupo I, pero no de mutantes del grupo II ni del grupo III; por lo
tanto, las mutaciones de los grupos II y III afectan los pasos pos- Mutaciones Mutaciones Mutaciones
del del del
teriores a la producción de ornitina. Ya he1nos establecido que las
grupo I grupo II grupo m
1nutaciones del grupo II afectan un paso previo a la producción de precursor - - - ~ornitina - - - , .citrulina - - - , .argm1na
citnllina; por consiguiente, las mutaciones del grupo II deben blo-
quear la conversión de ornitina a citrulina.
Importa destacar que este procedimiento no detecta necesaria-
mente todos los pasos de una vía, sino aquellos que producen los
Mutaciones Mutaciones compuestos investigados.
del grupo II del grupo ID Utilizando las mutaciones y este tipo de razonamiento, Beadle,
01nitina -----ti► citrulina --------:i► arouuna
o Tatum y otros pudieron identificar genes que controlan varias vías

biosintéticas en Neurospora. Establecieron que cada paso de una
vía es controlado por una enzima diferente, con10 se muestra en
1~ figura 15-~ para la vía de arginina. También llevaron a cabo ex-
per1mentoscte cruzamientos genéticos y de mapeo (véase cap. 7),
y pudieron den1ostrar que las mutaciones que afectan cualquier
paso de una vía siempre se producían en la misma localización
cromosómi ca. Beadle y Tatum razonaron que las mutaciones que
afectan un determinado paso bioquímico se producían en un solo
locus que codificaba una enzima particular. Esta idea se conoció
como la hipótesis de un gen, una enzima: los genes actúan
codificando enzimas, y cada gen codifica una enzima distinta. Si
bien los genes que examinaron Beadle y Tatum codificaban enzi-
mas, muchos genes codifican proteínas que no son enzimas, de
manera que su idea más general fue que cada gen codifica una
proteína. Cuando los hallazgos de la investigación mostraron que
algunas proteínas están compuestas por 1nás de una cadena poli-
peptídica y que las diferentes cadenas polipeptídicas están co-
dificadas por distintos genes, se 1nodificó este 1nodelo para con-
vertirl o en la hipótesis de un gen, un polipéptido.
RESOLVER EL PROBLEMA 16
CONCEPTOS
Los estudios de Beadle y Tatum sobre vías bioqufm icas en el hongo
Neurospora ayudaron a definir la relación entre genotipo y fenotipo
al establecer la hipótesis de un gen, una enzima: la idea de que cada
gen codifica una enzima distinta. Más tarde, esto se modificó para
postu lar la hipótesis de un gen, un polipéptido.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
La mutación auxótrofa 103 crece en medio mínimo suplementado
con A, B o C; la mutación 106 crece en medio suplementado con
A y C, pero no con B; y la mutación 102 crece solo en medio suple-
mentado con C. ¿ Cuá l es el orden de A, B y C en una vía bioquí-
mica?
(a) (b)
Figura 15-4. Las proteínas cumplen una serie de funciones biológicas. a) La luz producida por las luciérnagas es el
resultado de una reacción generadora de luz entre la luciferina y el ATP, catalizada por la enzima luciferasa. b) La proteína
fibroina es el principal componente estructural de las telarañas. c) Las sem illas de ricino contienen una proteína altamente
tóxica denominada ricina. (Parte a: Darwin Dale/Science Source. Parte b: Rosemary Calvert/lmagestate. Parte e: Paroli
Gal erti/© Cuboima es/Photoshot.
El código genético y la traducción 415
Estructura y función de las proteínas
Las proteínas son centrales para todos los procesos vitales (Jii
115-4). Muchas proteínas son enzimas, los catalizadores biológí-
cos que dirigen las reacciones químicas de la célula; otras son
componentes estructurales que proporcionan el andamiaje y el
sostén para las membranas, los filamentos, el hueso y el pelo.
Algunas proteínas ayudan a transportar sustancias; otras tienen
una función regulatoria, de comunicación o de defensa.
AMINOÁCIDOS Todas las proteínas están compuestas por aminoá-
cidos, unidos en forma te.rminotermioaL En las proteínas, se en-
cuentran veinte aminoácidos comu nes; estos aminoácidos se
muestran en lajtigura 15-ª , tanto con su abreviatura de tres letras
como de una letra ( otros aminoácidos hallados a veces en las pro-
teínas son formas modificadas de los aminoácidos comunes). Los
20 aminoácidos comunes tienen estructura similar: cada uno está
formado por un átomo de carbono central unido a un grupo
amino, un átomo de hidrógeno, un grupo carboxilo y un grupo R
(radical), que difiere para cada aminoácido. Los aminoácidos de
las proteínas se unen mediante enlaces peptídicos <fie·
15-q) para
fo1mar cadenas polipeptídicas, y una proteína esta compuesta
por una o más cadenas polipeptídicas. Al igual que los ácidos
nucleicos, los polipéptidos tienen polaridad, con un extremo que
presenta un grupo amino libre (NH;) y el otro que tiene a un
grupo carboxilo libre (COO-). Algunas proteínas consisten solo en
unos pocos aminoácidos, mientras que otras pueden tener miles.
ESTRUCTURA DE LAS PROTEÍNAS Al igual que los ácidos nucleicos,
la estructura molecular de las proteínas tiene varios niveles de
organización. La estructura primaria de las proteínas es su
secuencia de an1inoácidos Ktig. 15-7a[). Mediante interacciones
entre aminoácidos vecinos, una cadena polipeptídica se pliega y
gira para formar una estructura secundaria [fig. 15-'Jbt; dos
estructuras secundarias comunes halladas en las proteínas son la
hoja beta (~) plegada y la hélice alfa (a). Las estructuras secun-
darias interactúan y se pliegan aún 111ás para formar una estructu-
ra terciaria [tig. 1S-7q), que es la forma tridimensional global de
la proteína. Las estructuras secundaria y terciaria de una proteína
dependen, en gran medida, de la estructura prim.a ria - la secuencia
(e)
416 CAPÍTULO 15

IIHidr:?feno Figura 15-5. Los aminoácidos comunes tienen estructuras similares. Cada aminoácido está formado por
un átomo de carbono central (Ca) unido a 1) un grupo amino (NH,/); 2) un grupo carboxilo (Coo-); 3) un
átomo de hidrógeno (H); y 4) un grupo radical, designado R. En las estructuras de los 20 aminoácidos comu-
O Grupo g Grupo
nes, las partes en negro son comunes a todos los aminoácidos, y las partes en rojo son los grupos R.
amino carboxilo
+H3N - -1C - - coo-

R
1
OGrupo rad.ical
(cadena lateral)

Grupos R alifáticos, no polares 1 Grupos R aromáticos

H H H H H H
+uN-
... 43
1
c;-coo- +HN-
1
3
1
c1 - coo- +u
... ~
N-c-coo-
1
1
+~N- T- coo- +R:iN- T-coo- +R:iN-
1 1
r-
1
coo-
H CH~
.,
H 3C
/
CH
' CH3
CH2

/,?"
CH2

/,?"
CH2
1
C = CH\
Glicina Alanina Valina NH
(Gly, G) (Ala, A) (Val, V)

o
Fenilalanina Tirosina Triptófano
(Phe, F) (Try, Y) (Trp, W)

Grupos R cargados positivamente

H H H
1 1 1
+l-l
.. ~
N- c1 - coo- +H3N- c1 - coo- +u
... ~
N- c1 - coo-
Leucina l soleucina Metionina e~ e~ c~
1 1 1
(Leu, L) (lle, I) (Met, M) CH2 CH2 C- NH
1 1 CH
Grupos R no cargados, polares TH 2 1H2 ~ - ÑH+
H H H CH2 NH
1 1 1
1 1
+H3N- -coo- +H3N- -coo- +R:iN-9-coo-
1
ctt20H H-
1 - 0H 7 H2
NH3+ C= ~
1
+

1CH SH Lisina
NH2
Arginina Histidina
3
Serina Treonina Cisteína (Lys, K ) (Arg, R) (His, H)
(Ser, S) (Thr, T) (Cys, C)
Grupos R cargados negativamente
H H
1 1
+H N-c-coo- +H N-c-coo-
3 1 3 1
CH2 CH2
1 1
coo- CH2
1

coo-

Prolina Asparagina Glutamina Aspartato Glutamato

(Pro, P) (Asn, N) (Gln, Q) (Asp, D) (Glu, E)
 El código genético y la traducción 417

tl ~ ~2 de aminoácidos- de la proteína. Por último, algunas proteínas

están formadas por dos o más cadenas polipeptídicas que se aso-
cian para producir una estructura cuaternariaj (fig. 15-1q).
+HN - CH - c - o - +H - N - CH - c oo-
3 11 1
O H 15.2 El código genético determina cómo
la secuencia de nucleótidos especifica
la secuencia de aminoácidos de una proteína
En 1953, James Watson y Fran cis Crick resolvieron la estructura
R1 H R2 del DNA e identificaron la secuencia de bases con10 la po1tadora
1 1 1
de la infor1nación genética (véase cap. 10). Sin embargo , la
+H N-CH-C- N- CH- c oo-
3 11 manera en que la secuencia de bases del DNA especifica las
O Enlace peptídico secuencias de aminoácidos de las proteínas ( el código genético)
no se di lucidó durante otros 10 años.
Figura 15-6. Los aminoácidos se unen mediante enlaces peptídicos. U na de las primeras preguntas consideradas acerca del código
En un enlace peptíd ico (rojo), el grupo carboxilo de un aminoácido se une genético fue cuán tos nucleótidos se necesitan para especificar un
en forma covalente al grupo amino de otro aminoácido. solo aminoácido. El conj unto de nucleótidos que codifican un so-
lo aminoácido (la unidad básica del código genético) es un codón
(véase cap. 14). En un principio, muchos investigadores recono-
cieron que los codones deben contener un mínimo de tres nu-
cleótidos. Cada posición de los nucleótidos del mRNA puede ser
ocupada por una de las cuatro bases: A, G, C o U. Si un codón
CONCEPTOS consistiera en un solo nucleótido, entonces serían posibles solo
cuatro codones diferentes (A, G, C y U), lo que no es suficiente
Los productos de muchos genes son proteínas cuyas acciones produ-
para codificar los vei nte an1inoácidos distintos que suelen hall ar-
cen los rasgos especificados por estos genes. Las proteínas son polí-
se en las proteínas. Si un codón estuviera compuesto por dos
meros formados por aminoácidos unidos por enlaces peptídicos. La nucleótidos cada uno (es decir, GU, AC, etc.), hab1ía 4 x 4 = 16
secuencia de aminoácidos de una proteína es su estructura primaria.
codones posibles, lo que aún no es suficiente para codificar los 20
Esta estructura se pliega para crear las estructuras secundaria y tercia-
aminoácidos. Con tres nucleótidos por codón, hay 4 x 4 x 4 = 64
ria; dos o más cadenas polipeptídicas pueden asociarse para crear una
codones posibles, lo que es 111ás que suficiente para especificar 20
estructura cuaternaria .
ami noácidos cListintos. Por lo tanto, un código de tripletes que
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2 requiere tres nucleótidos por codón es la manera más eficiente de
codificar los 20 aminoácidos. Mediante mutaciones de bacterió-
¿ Qué determina fundamentalmente las estructuras secundaria y ter- fagos, Francis Crick y cols. confirmaron, en 1961 ,
genético es, de hecho, un código de tripletes. c:►.!!:!:!i!:!!!!:1!!!:::=~W
ciaria de las proteínas?
11!:QS PROBLEMAS 20 Y 21

La estructura primaria de Las interacciones entre los aminoácidos hacen La estructura secundaria Pueden asociarse dos o más
una protefna es su se- que la estructura primaria se pliegue en una es- se pliega aún más en cadenas pol ipeptídicas para
cuencia de aminoácidos. tructura secundaria, por ejemplo, esta hélice alfa. una estructura terciaria. crear una estructura cuaternaria.
---V- -y-
(a) Estructura primaria (b) Estructura secundaria (e) Estructura terciaria (d) Estructura cuaternaria

Amino-
ácido 1 [[]◄~ o
.
o o·•.....
·············•.......
··············· ,--= '-e . )
·········
···········•·,......,...........
..,··············•······
• •. . . . . . . .• . . • • •• . . . . . . b b • . . •••

o •
•• · · · · . . . ···(~l°- •o •
~ ~
····•···•···········

Amino- o • [[] •
ácido 2
• •• o
Amino-
ácido 3 [[] -~ Hemo

Amino-
ácido 4

Figura 15-7. Las proteínas tienen varios niveles de organización estructural.

 418 CAPÍTULO 15

CONCEPTOS
Pregunt a: ¿qué aminoácidos son especificados por codones compuestos por
solo un tipo de base? El código genético es un código de tripletes, en los que tres nucleóti-
dos codifican cada aminoácido de una proteína .
Métodos

'ffl (!J
mt'im•~
\ Dlt\ ~m -P-
o-lin- u-cl-
eo-· t-id_o_►
uuuuuuuuuuuuuuuuuu
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
Homopolímero
fosforilasa Un codón es
Nucleót idos de uracilo poli(U)
a. uno de los tres nucleótidos que codifican un aminoácido,
Se agregó un homopollmero ~n este caso, mRNA fJ Se incubó 7 Se produjo b. tres nucleótidos que codifican un am inoácido,
poli(U}-- a un tubo de ensayo que contenía un sistema
de traducción libre de células, 1 aminoácido marca-
do radiactivamente y 19 aminoácidos no marcados.
l )~boa
¡ c. _ J
I
1, c. tres am inoácidos que cod ifican un nucleótido,
d. una de las cuatro bases del DNA.

- -
Violación del código genético
Una vez establecido con firmeza que el código genético consistía
en codones de tres nucleótidos de longitud, el siguiente paso fue
Precipitación determinar qué grupos de tres nucleótidos especifican qué ainino-
• Se filtró la proteína, y se de la proteína ácidos. Lógicamente, la manera más fácil de violar el código
investigó radiactividad
en el filtro.
genético habría sido determinar la secuencia de bases de un frag-
Aminoácidos mento de RNA, agregarlo a un tubo de ensayo que contuviera
/ libres "'- todos los componentes necesarios para la traducción y permitirle
dirigir la síntesis de una proteína. Después, podría determinarse la
00011
secuencia de la proteína recién sintetizada y compararse su
,, ., ., ,., ., Proteína _,,,.-
secuencia con la del RNA. Lan1en table1nente, en ese 1nomento no
había ninguna manera de determinai· la secuencia de nucleótidos
Aspiración de un fragmento de RNA, de modo que se requerían métodos
indirectos para violar el cóctigo genético.
~ Se repitió el procedimiento en 20 tubos, cada uno de los
Resultados
~ cuales contenía un aminoácido marcado diferente. uso DE HOMOPOLÍMEROS Los primeros indicios acerca del códi-
go genético aparecieron en 1961 , a partir del trabajo de Marshall
- - - - - - Nirenberg y Johann Heinrich Matthaei. Estos investigadores
crearon RNA sintéticos utilizando Lma enzima denominada poli-
nucleótido fosforilasa. A diferencia de la RNA polimerasa, la
polinucleótido fosforilasa no requiere un molde; une en forn1a
aleatoria cualquier nucleótido de RNA que esté disponible. Los
Pro Lys Arg His Tyr Ser Thr Asn Gin Cys
primeros mRNA sintéticos usados por Nirenberg y Matthaei
eran homopolímeros, moléculas de RNA formadas por un solo
tipo de nu cleótido. Por ejemplo, mediante la adición de po-
linucleótido fosforilasa a una solución de nucleótidos de uraci-
lo, generaron n1oléculas de RNA que consistían por entero en
Asp Glu Trp Gly Ala Val lle Leu Met
nucleótidos de uracilo y, por consiguiente, contenían solo codo-
nes UUU {fig. 15-§). Después, se agregaron estos RNA poli(U)
a 20 tubos, cada uno de los cuales contenía el componente nece-
~ b o en el que la protelna estaba marcada radiactivamente contenla ' saiio para la traducc.ión y los 20 aminoácidos. En cada uno de los
proteína recién sintetizada con el aminoácido especificado por el homo- 20 tubos , se marcó radiactivamente un aminoácido distinto. L a
polímero. En este caso, UUU especificó el aminoácido fenilalanina.
proteína radiactiva apareció solo en uno de los tubos, el que con-
tenía fenilalanina marcada (véas1 tig. l5-8P. Este resultado mos-
Conclusión: UUU codifica fenilalanina; en otros experimentos, AAA codificó
lisina, y CCC, prolina. tró que el codón UUU especifica el aminoácido fenilalanina. Los
resultados de experimentos similares utilizando RNA poli(C) y
poli(A) demostrai·on que CCC codifica prolina y AAA coctifica
Figura 15-8. Nirenberg y Matthaei desarrollaron un método para lisina; por razones técnicas, los resultados de poli(G) no fueron
identificar el aminoácido especificado por un homopolímero. interpretables.
 El código genético y la traducción 419

uso DE COPOLÍMEROS ALEATORIOS Para obtener información acer- que estaba unido valina, mientras que los RNA con codones UGU
ca de otros codones, Nirenberg y cols. crearon RNA sintéticos que y UUG , no. Nirenberg y cols. pudieron determinar los aminoáci-
contenían dos o tres bases diferentes. Como la polinucleótido dos codificados por más de 50 codones.
f osforilasa incorpora nucleótidos en forma aleatoria, estos RNA
contenían n1ezclas aleatorias de bases y, por lo tanto, se denomi-
naron copolímeros aleatorios. Por ejemplo, cuando se mezclaron
nucleótidos de adenina y citosina con polinucleótido fosforilasa,
Pregunta: con el uso de tRN, ¿qué otras coincidencias entre
las moléculas de RNA produjeron ocho codones diferentes:
codón y aminoácido podrían determinarse?
AAA , AAC, ACC, ACA, CAA, CCA, CAC y CCC. Estos RNA
poli(AC) produjeron proteínas que contenían seis aminoácidos Métodos ... y se añadieron a una
Se sintetizaron mRNA
diferentes: asp¡u·agina, g lutamina, histidina, lisina, prolina y muy cortos con co- mezcla de ribosomas y
treonina. dones conocidos ... tRNA unidos a aminoácidos.
Las proporciones de los distintos aminoácidos en las proteínas
dependían de la proporción de los dos nucleótidos usados para
crear el mRNA sintético, y la probabilidad teórica de hallar un
codón particular podía calcularse por las proporciones de bases.
Si se utilizaba una proporción 4:1 de C a A para sintetizar el
RNA, la probabilidad de que C se encontrara en cualquier posi-
ción dada de un codón era de 4/s, y la probabilidad de A era de 1/s.
Con la incorporación aleatoria de bases, la probabilidad de cual- ■cuu■
mRNA sintético tRNA con Ribosoma
quiera de los codones con dos C y una A (CCA, CAC o ACC)
con un codón aminoácidos
sería 4/5 x 4/s x 1/s = 16/125 = 0,13, o 13%, y la probabilidad de
l J
cualquier codón con dos A y una C (AAC, ACA o CAA) sería de
1
/s x 1/s x 4/s = 4/125 = 0,032, o alrededor del 3%. Por lo tanto, un
l
1Mezcla
ami noácido codificado por dos C y u.na A será más común que
un aminoácido codificado por dos A y una C. Al comparar los
porcentajes de los aminoácidos de las proteínas producidas por Ó El ribosoma
copolímeros aleatorios con las frecuencias teóricas esperadas unió el mRNA
para los codones, Nirenberg y cols. pudieron obtener informa- y los tRNA
ción acerca de la composición de bases de los codones. Sin especificados
embargo, estos experimentos no revelaron nada respecto de la ~ porel
secuencia de bases del codón ; era evidente que la histidina era 1..._mRNA.
codificada por un codón con dos C y una A, pero no se sabía si el tRNA Ribosoma con mRNA y tRNA
codón era ACC, CAC o CCA. Este método tenía otros problemas:
los cálculos teóricos dependían de la incorporación aleatoria de
libres
__,_
especificado por el codón

Solución para filtrar]

bases, que no siempre se producía y, como el código genético es
redundante , a veces varios codones diferentes especifican eJ ' Después, se pasó la
mis mo aminoácido. mezcla a través de un
fi ltro de nitrocelulosa.
uso DE tRNA UNIDOS A RIBOSOMAS Para superar las limitaciones Los tRNA apareados
de los copolímeros aleatorios, en 1964 Nirenberg y Philip Leder con mRNA unido a
desarrollaron otra técnica que empleaba tRNA unidos a riboso- ribosomas quedaron
mas. Observaron que una secuencia muy corta de rnRNA (inclu- atrapados en el filtro,
- = - - - - -F_il_tr.....
o '---.. _..,,
, mientras que los tRNA
so una formada por un solo codón) se uniría a un ribosoma.
Resultados Se analizó libres lo atravesaron.
Después, el codón del m.RNA corto debe aparear sus bases con el '

el filtro para
anticodón correspondiente de un RNA de transferencia que lleva
determinar qué
el aminoácido especificado por el codón {fig. 15-~. Los mRNA aminoácído
cortos que se unieron a ribosomas se mezclaron con tRNA y ami- se había unido.
noácidos, y se hizo pasar esta mezcla a través de un filtro de nitro-
celulosa. Los tRNA apareados con el mRNA unido a ribosomas
quedaron atrapados en el filtro, mientras que los tRNA libres lo
atravesaron. La ventaja de este sistema era que podía utilizarse Conclusión: cuando se añadía un mRNA con GUU, los tRNA del
con 1noléculas de RNA sintéticas muy coitas, que podían sinteti- filtro se unían a valina; por lo tanto, el codón GUU especifica
zarse con una secuencia conocida. Nirenberg y Leder sintetizaron valina. Se determinaron muchos otros codones mediante
1nás de 50 mRNA cortos con codones conocidos y los agregaron este método.
en forma individual a una mezcla de riboso1nas y tRNA. Después,
aislaron los tRNA unidos al mRNA y los 1i.bosomas, y determina-
ron qué anlinoácidos estaban presentes en los tRNA unidos. Por Figura 15-9. Nirenberg y Leder usaron tRNA unidos a ribosomas para
ejemplo, el RNA sintético con el codón GUU retenía un tRNA al aportar información adicional sobre el código genético.
420 CAPÍTULO 15

Otros experimentos aportaron información adicional acerca del

código genético, que se descifró por completo en 1968. En la
siguiente sección, examinaremos algunas de las características
del código, que tiene tanta iinp ortancia para la biología moderna ~

que Francis Crick lo co1nparó con la de la tabla periódica de ele- Anticod ón D EI apareamiento en
n1entos en química. la posición del terc . ..
codón está relajado. Pos1c1on
3' :. . S' 3' ! ' de tambaleo
5'
,
Degeneración del código
Un aininoácido es codificado por tres nucleótidos consecutivos
del 1nRNA, y cada nucleótido puede tener LLna de c uatro bases
G del anticodón pue- l ... o con U.
de aparearse con C~
posibles ~A, G , C y U) en cada posición del nucleótido, lo que
pernllte 4 = 64 codones posibles qffg. lS-l (J). Tres de estos codo- Figura 15-11. Puede haber tambaleo o titubeo (wobble) en el apare-
nes son de ternllnación, que especifican el final de la traducción. amiento de un codón y un anticodón. El mRNA y el tRNA se aparean en
Por lo tanto, 61 codones, denomi nados codones con sentido, codi- forma antiparalela . El apareamiento en la primera y segunda posición del
fican aminoácidos. Corno hay 61 codones con sentido y solo sue- codón cumple las reglas de apareamiento de Watson y Crick (A con U, G
len hallarse 20 aminoácidos diferentes e n las proteínas, el código con C); en cambio, las reg las de apareamiento se relajan en la tercera posi-
con tiene n1ás inforn1ación de la necesaria para especifi car los ción del codón, y la G del anticodón puede aparearse con U o C del codón
a1ninoácidos, y se dice que es un código degenerado. Esta ex- en este ejemplo.
presión no significa que el código genético sea depravado ; dege-
nerado es un término que Francis Crick incorporó de la física
cuántica, donde describe múltiples estados físicos que tienen sig-
nificado equivalente. L a degeneración del código genético
implica que los a minoácidos pueden ser especificados por más de cactos por dos codones, y algun os, por ejemplo le ucina, son espe-
un codón. Solo el triptófano y la metionina son codificados por un cifi cados por seis codones diferentes. Se dj ce que los codones que
único codón (véase¡ fig. 15-10). Otros aminoácidos son esp ecifi- especifican el mis1no runinoácido son sinónimos, como las pala-
bras sinónimas son aquellas diferentes que tie nen el mismo signi-
ficado .
Como aprendimos en el capítulo 14, los tRNA sirven como
moléculas adaptadoras que se unen a aminoácidos particulares y
Segunda base los entregan a un ribosoma donde, después, son ensamblados en
u C A G cadenas polipeptídicas. Cada tipo de tRNA se une a un solo tipo
UUU Phe
ucu UAUT UGUC u de aminoácido . Las células de la mayoría de los organismos tie-
nen alrededor de 30 a 50 tRNA distintos, aunque solo hay 20 ami-
u uuc UCC Ser
UAC yr cUGC ys
noácidos diferentes e n las proteínas. Por lo tanto, algunos amino-
UUALeu UCA UAA Stop UGA Stop A ácidos son transportados por más de un tRNA. Los difere ntes
UUG UCG UAG Stop UGG Trp G tRNA que aceptan el mis1no aminoácido pe ro tienen distintos
anticodones se denominan tRNA isoaceptores.
cuu ccu CAU
His
CGU u Aunque algunos aminoácidos tienen múltiples tRNA (isoacep-
CUCL CCC p CAC CGC Ar c tores), aun así existen n1ás codones que anticodones, porque un
eu ro anticodón puede aparearse con diferentes codones mediante la
CUA CCA CGA g A ~
CAA Gin ~ flexibilidad en el apareamie nto de bases en la tercera posición del
G .e
CUG CCG CAG CGG CIS 14
codón. El examen de figura 15-lOlrevela que muchos codones
AUU ACU AAU AGU u ¡:t sinónimos difieren solo e n la tercera posició n. Por ejemplo, la ala-
nina es codificada por los codones GCU, GCC, GCA y GCG,
AUC lle ACC Thr
AAC Asn AGC Ser c ~ todos los cuales comienzan con GC. Cuando se unen el codón del
AUA ACA AAA AGA A mRNA y el anticodón del tRNA (tig. 15-11), la primera base (5')
L ys AGG Arg G del codón se aparea con la tercera base (3') del anticodón, estric-
AUG Met ACG AAG
tamente según las reglas de Watson y Crick. Después de que estos
GUU GCU
GAU GGU u pares han forn1ado puentes de hidrógeno, la tercer a base se apa-
GAC Asp GGC c rea en forma débil y puede haber flexibilidad, o tambaleo o titu-
G GUC Val GCC Ala
GGA Gly A beo (wobble), en su apareamiento.
GUA GCA GAA
En 1966, Francis Crick desatTolló la hipótesis del tambaleo o
GUG GCG GAG Glu GGG G titubeo, que postulaba que podían producirse algunos aparea-
mientos de bases no convencionales en la tercera posición de un
Figura 15-10. El código genético consiste en 64 codones. Los aminoá- codón. Por ej emplo, una G del anticodón puede aparearse con
cidos especif icados por cada codón se presentan en su abreviatura de tres una C o un U de la tercera posición del codón (véase p. 399 del
letras. Los codones se escriben en dirección 5' ➔3 ' según aparecen en el cap. 14 y cuadro 15-2: obsérvese que la inosina de este cuadro
mRNA. AUG es un codón de iniciación; UAA, UAG y UGA son codones de es una de las bases modificadas h alladas en el tRNA) . Lo impor-
terminación (stop). tante para recordar acerca del tambaleo es que p ermite que algu-
 El código genético y la traducción 421

Reglas del tambaleo o titubeo (wobb/e), ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4

que indican qué bases en la tercera posición
(extremo 3') del codón del mRNA pueden Mediante tambaleo, un solo _ _ _ _ puede aparearse con más
aparearse con bases en la primera posición deun _ _ __
(extremo 5') del anticodón del tRNA a. codón, anticodón,
b . grupo de tres nucleótidos del DNA, codón del mRNA,
Primera Tercera
c. tRNA, aminoácido,
posición del posición
d. anticodón, codón.
anticodón del codón Apareamiento

Anticodón
3'-X-Y-C-5'
e G 1 1 1
Marco de lectura y codones de iniciación
5'- Y- X- G- 3'
Codón Los hallazgos de los estudios iniciales acerca del código genético
indicaron que, por lo 1nenos en general, el código es no solapa-
Anticodón do. Un código genético solapado es aquel en el que es posible
3'-X-Y-G-5' incluir un solo nucleótido en m ás de un codón, de la siguiente
G UoC 1 1 1 manera:
5'-Y-X-U-3'
e Secuencia de nucleótidos A U A C G A G U C
Codón

Anticodón
Código no solapado AUACGAGUC
'--- ..._,_--J '----v---' ~

3'-X-Y-A-5' lle Arg Val

A u 1 1 1
5'- Y- X- U- 3' Código solapado AUACGAGU
Codón '-v---'
lle
Anticodón
3'-X-Y-U-5' UAC
'------v---'
u AoG 1 1 1 Tyr
5'-Y-X-A-3'
G ACG
Codón '----v---'
Thr
Anticodón
3'-X-Y-1-5' Sin embargo, cada nucleótido suele formar parte de un único
1(inosina)* A, U o C 1 1 1 codón . En los virus, hay algunos genes solapados, pero los codo-
5'- Y- X- A- 3' nes dentro del mismo gen no se solapan, y por lo general, se con-
u sidera que el código genético es no solapado.
e Para cualquier secuencia de nucleótidos, hay tres conj untos
Codón posibles de nucleótidos, tres maneras en las que es posible leer las
secuencias en grupos de tres. Cada 1nanera diferente de leer la
*La inosina es una de las bases modificadas halladas en los tRNA.
secuencia se denonlina un marco de lectura, y cualquier secuen-
cia de nucleótidos tiene tres marcos de lectura. Los tres marcos
de lectura tienen conjuntos totalmente distintos de codones y, por
nos tRNA se apareen con más de un codón del m.RNA; por lo lo tanto, especifican proteínas con secuencias de aminoácidos
tanto, de 30 a 50 tRNA pueden aparearse con 61 codones con completamente diferentes. Por consiguiente, es esencial que la
sentido . Algunos codones son sinónünos a través del ta1nbaleo. maquinaria de traducción utilice el marco de lectura correcto.
¿Cómo se establece el 1narco de lectura correcto? El marco de
lectura se establece por el codón de iniciación, que es el primer
codón del mRNA que especifica un aminoácido. Después del
CONCEPTOS codón de iniciación, los otros codones se leen como grupos suce-
sivos de tres nucleótidos. No se saltea ninguna base entre los
El código genético consiste en 61 codones con sentido que especifi- codones; por lo tanto, no hay ningún signo de puntuación para
can 20 aminoácidos comunes; el código es degenerado, lo que signi- separarlos.
fica que algunos aminoácidos son codificados por más de un codón. Por lo general , el codón de iniciación es AUG, aunque en raras
Los tRNA isoaceptores son diferentes de los tRNA con anticodones ocasiones se utilizan GUG y UUG. El codón de iniciació n es solo
distintos que especifican el m ismo aminoácido. Asimismo, el tamba- una secuencia que señala el comie nzo de la traducción; especifi-
leo en la tercera posición del codón permite que diferentes codones ca un aminoácido. En las células bacterianas, el primer AUG
especifiquen el mismo aminoácido. codifica un tipo modificado de 1netionina, N-formilmetionina;
todas las proteínas de las bacterias se inician con este aminoáci-
422 CAPÍTULO 15

do, pero el grupo forrnil (o, en algunos casos, todo el aminoáci-
do) puede eliminarse después de que se ha sintetizado la proteína.
Cuando el codón AUG se encuentra en una posición interna de un
gen, codifica 111etionina no formilada. En las células de archaea y
eucariontes, AUG especifica n1etionina no forn1ilada, tanto en la
posición de iniciación como en posiciones internas. Tanto en bac-
terias como en eucariontes, hay diferentes tRNA para el iniciador
n1etionina (designado tRNAifMet en las bacterias y tRNAiMet en
los eucariontes) y metionina interna (designado tRNAMe!).
Codones de terminación
Tres codones (UAA, UAG y UGA) no codifican aminoácidos.
Estos codones señalan el final de la proteína en células tanto bac-
terianas como eucariontes y se denominan codones de termina-
ción o codones sin sentido. Ninguna molécula de tRNA tiene
anticodones que se apareen con codones de terminación.
La universalidad del código
Durante muchos años, se asu1nió que el código genético era uni-
versal, lo que significa que cada codón especifica el mismo ami-
noácido en todos los organ is111os. Ahora sabemos que el código
genético es casi, pero no totaJmente, universal; se han hallado
CONCEPTOS
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Características del código genético
Ahora que hemos considerado una serie de características del
código genético, dediquemos un momento a repasarlas.
1. El código genético consiste en una secuencia de nucleótidos de
DNA o el RNA. Hay cuatro letras en el código, que corresponden a
las cuatro bases : A, G, C y U (Ten el DNA).
2. El código genético es un código de tripletes. Cada aminoácido es
codificado por una secuencia de tres nucleótidos consecutivos,
denominada un codón .
3. El código genético es degenerado; de 64 codones, 61 codifican
solo 20 aminoácidos de proteínas (3 codones son codones de ter-
minación). Algunos codones son sinónimos y especifican el mismo
aminoácido.
4. Los tRNA isoaceptores son tRNA con diferentes anticodones que
aceptan el mismo aminoácido; el tamba leo permite que el antico-
dón de un tipo de tRNA se aparee con más de un t ipo de codón
del mRNA.
5. Por lo general, el código es no solapado; cada nucleótido de una
secuencia mRNA pertenece a un solo marco de lectura.
6. El marco de lectura se establece por un codón de iniciación, que
suele ser AUG .
7. Cuando se ha establecido un marco de lectura, los codones se leen
como grupos sucesivos de tres nucleótidos.

Cada secuencia de nucleótidos t iene t res posibles marcos de lectura .
El marco de lectura correcto se establece mediante el codón de inicia-
ción. Un codón de terminación señala el fina l de una secuencia codi-
ficante de proteínas. Con algunas excepciones, todos los organismos
uti lizan el mismo código genético.
8. Cualquiera de los tres codones de terminación (UAA, UAG y UGA)
puede seña lar el final de una proteína; los codones de terminación
no codifican ningún aminoácido.
9. El código es casi universal.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
algunas excepciones. La mayoría de ellas corresponden a codones
de tenni nación, pero hay algunos casos en los que un codón con
¿Los codones de iniciación y de terminación especifican un aminoáci-
sentido es sustituido por otro. Gran parte de las excepciones se
do? De ser así, ¿cuáles?
observan en genes mitocondriales; se han detectado algunos
codones no universales en los genes nucleares de protozoos y de
DNA bacteriano (cuadro 15-3). ►
Cuadro 15-3 Algunas excepciones al código genético
universal 15.3 Los aminoácidos son ensamblados
Código Código
en una proteína a través de la traducción
Genoma Codón universal alterado Ahora que ya esta1nos familiarizados con el código genético, pode-
mos comenzar a estudiar cómo se ensamblan los aminoácidos en
DNA bacteriano
Mycoplasma UGA Terminación Trp
las proteínas. Como se sabe más acerca de la traducción en las bac-
capricolum terias, nos centraremos funda1nentalmente en la traducción bacte-
1iana. En la mayoría de los aspectos, la traducción en eucariontes
DNA mitocondrial es sin1ilar, aunque se observarán algunas diferencias significativas.
Humano UGA Terminación Trp Recuérdese que solo los mRNA se traducen a proteínas. La tra-
Humano AUA lle Met ducción tiene lugar en los ribosomas; de hecho, es posible conside-
Humano AGA,AGG Arg Terminación rar que los ribosomas son máquinas móviles de síntesis de proteí-
Levadura UGA Terminación Trp nas. Mediante diversas técnicas, en los últin1os años se ha generado
Tripanosomas UGA Terminación Trp una vista detallada de la estructura del riboso1na, que ha mejorado
Plantas CGG Arg Trp
mucho nuestro conocimiento de la traducción. Un ribosoma se fija
cerca del extremo 5' de una cadena de mRNA y se mueve hacia el
DNA nuclear
Tetrahymenea UAA Terminación Gin extremo 3' traduciendo los codones a medida que avanza (fig. 15-
Paramecium UAG Terminación Gin 12). La síntesis comienza en el extremo amino de la proteína, y la
proteína se alarga por adición de nuevos a1ninoácidos al extremo

Ribosoma
mRNA
5'
Cadena
polipeptídica
N
••-- ••--
mRNA
5'
Figura 15-12. La traducción de una molécula de mRNA tiene lugar en
un ribosoma. La letra N representa el extremo amino de la proteína;
C representa el extremo carboxilo.
carboxilo. La síntesis proteica incluye una serie de interacciones
RNA-RNA: las interacciones entre el mRNA y el rRNA, que suje-
tan el mRNA en el ribosoma; entre el codón del mRNA y el anti-
codón del tRNA; y entre el tRNA y el rRNA del ribosoma.
La síntesis proteica puede dividirse de manera conveniente en
cuatro etapas: 1) carga del tRNA, en la que los tRNA se unen a
aminoácidos; 2) iniciación, en la que los componentes necesarios
para la traducción se ensa1nblan en el ribosoma; 3) elongación, en
la que los anú noácidos se unen, uno por vez, a la cadena polipep-
tídica en crecimiento; y 4) terminación, en la que la síntesis pro-
teica se detiene en el codón de terminación y los componentes de
traducción se liberan del ri boson1a.
La unión de aminoácidos a RNA
de transferencia
La prin1era etapa de la traducción es la unión de m oléculas de
tRNA a sus aminoácidos apropiados, lo que se denomina carga
del tRNA. Cada tRNA es específico para un anunoácido particu-
lar. Todos los tRNA tienen la secuencia CCA en el extren10 3', y
el grupo carboxilo (COO-) del aminoácido se une al nucleótido
adenina en el extremo 3' del tRNA ffíg. 15-1:1). Si cada tRNA es
específico para Ltn determinado aminoácido pero todos los amino-
ácidos se unen al mismo nucleótido (A) en el extremo 3' de un
tRNA, ¿cóm o se une un tRNA con su anúnoácido apropiado?
tRNA
5
, ,e e H
J .1 ,/
3'
.. .c
Tallo aceptor
del aminoácido
Figura 15-13. Un aminoácido se une al extremo 3' de un tRNA. El grupo carbo-
xilo (Coo-) del aminoácido se une al grupo hidroxilo del átomo de carbono 2' o 3'
\ del nucleótido final del extremo 3' del mRNA, cuya base siempre es adenina.
Anticodón
El código genético y la traducción 423
La clave de la especifi cidad entre un aminoácido y su RNA es
un conjunto de enzimas denominadas aminoacil-tRNA sinteta-
sas. Una célula tiene 20 aminoacil-tRNA sintetasas diferentes,
una para cada uno de los 20 a1ninoácidos. Cada sintetasa recono-
ce un a1ninoácido en particular, así como todos los tRNA que
aceptan ese aminoácido. E l reconocimiento del aminoácido apro-
piado por una si ntetasa se basa en los diferentes tamaños, cargas
y grupos R de los aminoácidos. El reconocimiento de tRNA por
una sintetasa depende de las diferentes secuencias de nucleótidos
de los tRNA. Los investigadores han identificado cuáles son los
nucleótidos importantes para el reconocüniento 1nediante la 1no-
dificación de distintos nucleótidos de un tRNA particular y la
determinación de si el tRNA modificado es reconocido, aun así,
por su sintetasa 4fig. 15-14).
La unión de un tRNA a su aminoácido apropiado, denominada
carga del tRNA, requiere energía, que es sumini strada por la ade-
nosina trifosfato (ATP):
aininoácido + tRNA + ATP ➔ arninoacil-tRNA + AMP + PPi
~
Esta reacción se produce en dos pasos 11ig. 15-1~. Para identifi-
car el tRNA aminoacilado resultante, escr161n1os abreviatura de
tres letras del aminoácido delante del tRNA; por ejemplo, el ami-
noácido alanina (Ala) se une a su tRNA (tRNAAlª) y da origen a
su aminoacil-tRNA (Ala-tRNAAla).
Los errores en la carga del tRNA son raros: ocurren solo en
alrededor de 1 cada 100 000 o 1 cada 100 000 reacciones. En par-
te, esta fidelidad se debe a la presencia de actividad de edición ( co-
rrección) en 1nuchas de las sintetasas. La actividad de edición
detecta y elünina de los tRNA los runinoácidos apareados de
manera incorrecta. Alg unos agentes químicos antimicóticos actú-
an atrapando tRNA en el sitio de edición de la enzima, lo que
impide su liberación y, por consiguiente, inhibe el proceso de tra-
ducción en los hongos.
CONCEPTOS
Los aminoácidos se unen a tRNA específicos med iante aminoacil-
tRNA sintetasas en una reacción de dos pasos que requiere ATP.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
¿A qué parte del tRNA se unen los am inoácidos?
a. anticodón c. extremo 3'
b. brazo DHU d. extremo 5'
tRNA Aminoácido
o o 1
11 __.J..-0--C - C - GrupoR
-C- 0 - P - O - CH2 ~--- 11 1
1 O +NH3
o-
424 CAPÍTULO 15

Las posiciones en azul Tallo aceptar

son las mismas en
3' 30S y la subunidad grande SOS itig. 15-16ap. Una molécula de
todos los tRNA y no ~=~- • mRNA puede unirse a la subunidad pequeña del ribosoma solo
pueden ser utilizadas • cuando las subunidades están separadas. El factor de iniciación
para diferenciar los 5' • 3 (]F-3) se une a la subunidad pequeña del ribosoma y evita que
distintos tRNA. la subunidad grande se una durante la iniciación (fig. 15-16bf).
Las posiciones en ama- Otro factor, el factor de iniciación 1 (IF-1 ), aumenta la disocia-
Las posiciones en rojo ~-:::::--- rillo son utilizadas por
son importantes para más de una sintetasa.
ción de las subunidades 1ibosónlicas grande y pequeña.
el reconocimiento de ¿A qué parte del mRNA se une el riboso1na durante la inicia-
tRNA por una sintetasa. ción de la traducción? Se han identificado secuencias clave del
•• mRNA requeridas para la unión del ribosoma en experimentos
Brazo T,pc
diseñados para per1nitir que el ribosoma se una al 1nRNA pero no
Brazo DHU •• proceda con la síntesis proteica; por lo tanto, el ribosoma se atas-
• ca en el sitio de iniciación. Se añade una ribonucleasa, que
degrada todo el mRNA, excepto la región cubierta por el riboso-
Brazo extra
ma. Se puede separar el mRNA intacto del ribosoma y estudiar-
lo. La secuencia cubierta por el ribosoma durante la iniciación es
de 30 a 40 nucleótidos de longitud e incluye el codón de inicia-
ción AUG. Dentro del sitio de unión al 1ibosoma, se encuentra Ja
Brazo anticodón •
secuencia consenso Shine-Dalgarno t.líg. 15-1'7¡; véase también
'-- ----.y ,---...-1 cap. 14), que es complementaria de una secuencia de nucleóti-
Anticodón dos en el extremo 3' del rRNA 16S (parte de la subunidad peque-
ña del 1ibosoma). Durante la iniciación, los nucleótidos de la
Figura 15-14. Ciertas posiciones de las moléculas de tRNA son reco-
secuencia Shine-Dalgarno se aparean con sus nucleótidos com-
nocidas por la aminoacil-tRNA sintetasa apropiada.
ple1nentarios del rRNA 16S, Jo que permi te que la subun idad
pequeña del ribosoma se una al mRNA y posicione al riboso1na
directamente sobre el codón de iniciación. Estas secuencias de
unión al ribosoma se encuentran dentro de la región 5 ' no tradu-
Iniciación de la traducción
cida del mRNA.
La segunda etapa del proceso de sú1tesis proteica es la iniciación. El tRNA iniciador, tMet-tRNAtMet, se une al codón de inicia-
En esta etapa, todos los co1nponentes necesarios para la síntesis ción (véase1ftg. 15-16cl). Esto requiere del factor de iniciación 2
proteica ensamblan 1) mRNA; 2) las subunidades pequeña y (IF-2), que forn1a un complejo con GTP.
grande del ribosoma; 3) un conjunto de tres proteínas denonlina- En este punto, el complejo de iniciación consiste en 1) la subu-
das complejo de iniciación; 4) tRNA iniciador con unión de N- nidad pequeña del ribosoma, 2) el mRNA, 3) el tRNA iniciador
forn1il1netionina (fMet-tRNAfMet) y 5) guanosina trifosfato con su aminoácido (fMet-tRNAfMet), 4) una molécula de GTP y
(GPT). La iniciación comprende tres pasos importantes. Primero, 5) varios factores de iniciación. Estos componentes se conocen en
el rnRNA se une a la pequeña subunidad del riboso1na. Segundo, forma colectiva como complejo de iniciación 30S (véasq fig. ~~­
e l tRNA iniciador se une al n1RNA mediante aparean1íento de ~ . En el paso final de la iniciación, IF-3 se disocia de 1a su u-
bases entre el codón y el anticodón. Tercero, la subunidad grande nidad pequeña, lo que permite que la subunidad grande del ribo-
del ribosoma se une al complejo de iniciación. Consideremos con soma se una al complejo de iniciación. La molécula de GTP (pro-
1nás detalle cada uno de estos pasos. vista por IF-2) se hidroliza a guanosina difosfato (GDP), y se
disocian los factores de iniciación (véase pg.15-lóq). Cuando la
INICIACIÓN EN LAS BACTERIAS El ribosoma funcional de las bacte- subunidad grande se ha unido al complejo de üúciación, el com-
rias está compuesto por dos subunidades, la s ubunidad pequeña plejo se denonlina complejo de iniciación 70S.

D En el primer paso, el amino- ... y produce En el segundo paso, el amino-

. ácido reacciona con ATP ... aminoacil-AM P y PP¡. ácido es transferido al tRNA ...

Aminoácido '
ATP
~ ,oR I
~º
+H3N -C -C
Grupo R ~ 1 ' o
+H N - c - e ~º +H
~ ~º
N- C - c
H
Aminoacil-tRNA
3 1 ' o- 3 1
H
'
AMP
H
AM P _ ri ... yse 7
~ libera AMP.j
r-- ...
...___ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ____,, Conclusión: al final de la carga del tRNA, un
aminoácido queda unido a su tRNA apropiado.
Figura 15-15. Un aminoácido se une al tRNA apropiado en una reacción
de dos pasos.
 El código genético y la traducción 425

(a) Secuencia Shine-Dalgarno

Ribosoma t
l l
Subunidad mRNA 5' UAAGGAGGU ~ 3'
~
grande Codón de iniciación
(SOS)
rRNA 16S 3' 5'

Figura 15-17. Se requiere la secuencia consenso Shine-Dalgarno del

Subunidad
mRNA para la unión de la subunidad pequeña del ribosoma.
pequeña
(30S)
El ribosoma está compuesto
por dos subunidades.
INICIACIÓN EN LOS EUCARIONTES Durante la iniciación de la tra-
ducción en células eucariontes, se producen eventos similares,
pero hay algunas diferencias importantes. En las células bacteria-
nas, las secuencias de la subunidad pequeña del rRNA 16S se
IF-3 se une a la subuni-
unen a la secuencia Shine-Dalgamo del mRNA. No existe ningu-
(b) dad pequeña y evita que
se una la subunidad na secuencia consenso análoga en el mRNA eucarionte. En cam-
Secuencia Codón de grande, ... bio, el casquete en el extremo 5' del 1nRNA eucarionte desempe-
Shine-~ar~ iniciación ña un papel crucial en el inicio de la traducción. En una serie de
mRNA f!,liltl pasos, la subunidad pequeña del ribosoma eucarionte, los factores
de iniciación y el tRNA iniciador con su aminoácido (Met-
G..___________,, -.._.,~ i::• ... lo que permite q~ tRNAiMet) forman un complejo de iniciación que reconoce el cas-
la subunidad pequeña
se una al mRNA. quete y se une en ese lugar. Después, el complejo de iniciación se
mueve a lo largo (barre) del mRNA hasta que localiza el prin1er
GT P codón AUG. La presencia de una secuencia consenso (denomina-
da secuencia Kozak), que rodea al codón de iniciación, facilita la
tRNA" '
' Un t~NA cargado con identificación de este codón:
o N-formilmetionina

• forma un complejo
con IF-2 y GTP, ...
Secuencia Kozak
r,..._..,,,._"---..,
5 '-ACCAUGG-3'
(c)
\
Cod6n de iniciación
Complejo ... y se une al codón 1
de iniciación de iniciación, mientras
30S
Otra diferencia importante es que la iniciación en eucariontes
GT P que IF-1 se une a la
~
subunidad pequeña.
requiere por lo menos siete factores de iniciación. Algunos facto-
res mantienen separadas las subunidades ribosórnicas, al igual
mRNA que lo hace IF-3 en las células bacterianas. Otros reconocen el
casquete 5' del n1RNA y pern1íten que ahí se una la subunidad
pequeña del ribosoma. Otros tienen actividad de RNA helicasa,
- - - - - - - -~ - - - - - .•~. Todos los factores de
que se utiliza para desenrollar estructuras secundarias que pueden
iniciación se disocian
del complejo, se hidro- existir en la región 5' no traducida del mRNA, lo que permite que
liza el GTP a GDP, . .. la subunidad pequeña se 1nueva a lo largo del n1RNA hasta alcan-
zar el codón de illiciación. Otros factores de iniciación ayudan a
8 + GDP + P¡ llevar el Met-tRNAiMet al complejo de iniciación.
En los eucariontes, varias proteínas, una de las cuales es el
complejo de unión al casquete (CBC), se unen inicialmente al
(d) casquete. El CBC ayuda a exportar el mRNA del núcleo y, des-
Complejo pués, promueve el ciclo "pionero" o inicial de traducción en el
... y se une la subuni- citoplas1na. Este primer ciclo de traducción desen1peña un papel
de iniciación
70S dad grande para crear importante en la ve1ificación de errores en el rnRNA (véase
un complejo de inicia-
"Vigilancia del RNA men sajero" en la siguiente sección).
ción 70S.
Después del ciclo pionero de traducción, el CBC es reemplazado
m RNA -..........,_
~ '-v-' por el factor de iniciación 4E eucarionte (elF-4E), que promueve
Codó n la traducción continuada del mRNA.
siguiente Asimismo, la cola de poli(A) en el extren10 3' del mRNA euca-
1Conclusión: al final de la iniciación, se ensambla rionte dese1npeña un papel en el inicio de la traducción. Durante
el ribosoma en el mRNA y se une el primer tRNA la iniciación, las proteínas que se unen a la cola de poli(A) inte-
l al codón de iniciación. j ractúan con proteínas que se unen al casquete 5', lo que aumenta
la unión de la subunidad pequeña del ribosoma al extremo 5' del
Figura 15-16. La iniciación de la traducción requiere varios factores mRNA. Esta interacción indica que el extremo 3' del mRNA se
de iniciación y GTP. incurva y se asocia con el casquete 5' durante el inicio de la tra-
426 CAPÍTULO 15

odón de iniciación Codón de terminación Elongación

5' AAAAAAA 3'
La siguiente etapa de la síntesis proteica es la elongación, en la
Región 5' Región 3' Cola de que se unen aminoácidos para crear una cadena polipeptídica. La
no traducida no traducida poli(A) elongación requiere 1) el complejo 70S recién descrito, 2) tRNA
[ Las proteínas que se unen al
cargados con sus aminoácidos, 3) varios factores de elongación y
Proteínas de unión la cola de poli(A) 3' interac- 4) GTP.
al casquete túan con las proteínas de Un ribosoma tiene tres sitios que pueden ser ocupados por

r
ión al casquete ...
-~
Ribosoma
5' roICI
... y aumenta la unión cie!l
( bosoma al extremo 5'
del mRNA.
Figura 15-18. La cola de poli(A) del mRNA eucarionte desempeña un
papel en la iniciación de la traducción.
ducción, lo que forma una estructura circular conocida como
bucle cerrado f ftg. 15-18]. Unos pocos mRNA eucru.i.ontes contie-
nen sitios de entrada internos del ribosoma, donde los ribosomas
p ueden unirse directamente sin hacerlo primero al casquete 5 ' .
CONCEPTOS
En la iniciación de la traducción en las célu las bacterianas, la subuni-
dad pequeña del ribosoma se une al mRNA, y el tRNA iniciador lo
hace al codón de iniciación. Este proceso requiere varios factores de
iniciación (IF-1, IF-2 e IF-3) y GTP. En el paso final, la subunidad ribo-
sómica grande se une al complejo de iniciación.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
Durante la iniciación de la traducción, ¿a qué secuencia consenso de
las bacterias se une la subunidad pequeña del ribosoma?
tRNA; el sitio arninoacil o A, el sitio peptidil o P y el sitio de
salida o E [fig. 15-19a). El tRNA iniciador ocupa de inmediato el
sitio P (el único sitio al que puede unirse fMet-tRNAfMer), pero
todos los otros tRNA ingresan primero en el sitio A. Al final de la
injciación, el ribosoma se w1e aJ mRNA, y fMet-tRNAfMet se
ubica sobre el codón de iniciación AUG en el sitio P; el sitio A
adyacente no está ocupado (véase ¡fig. 15-19~ .
La elongación tiene lugar en tres pasos. E n el primero ~fig. 1ª-
~ . un tRNA cargado se une al sitio A. Esta unión tiene lugar
cuando el factor de elongación Tu (EF-Tu) se une al GTP y, des-
j pués, a un tRNA cargado pru.·a form.ar un complejo de tres partes.
1
Este complejo ingresa en el sitio A del ribosoma, donde el antico-
dón del tRNA se aparea con el codón del mRNA. Después de que
el tRNA cargado se encuentra en el sitio A , el GTP se degrada a
GDP y se libera el complejo EF-Tu-GDP (ttg. 15-194). El factor
de elongación Ts (EF-Ts) regenera EF-Tu-GDP a EF-Tu-GTP.
En las células eucaiiontes, un conjunto simi lar de reacciones
entrega el tRNA cargado al sitio A.
El segundo paso de la elongación es la formación de un enla-
ce peptídico entre los aminoácidos que se unen a los tRNA en los
sitios P y A (fig. 15-199), La formación de este enlace peptídico
li bera el aminoácido en el sitio P de su tRNA. La forn1ación de
enlaces peptídicos se produce dentro del centro de la peptidil
transferasa, que forma parte de la subunidad grande del riboso-
ma. La evidencia indica que la actividad catalítica es una propie-
dad del RNA ribosórnico localizada en la subunidad grande del
ribosoma (el rRNA 23S en las bacterias, el RNA 28S en los euca-
riontes); este rRNA actúa como una ribozima (véase p. 358 del
cap. 13).
El tercer paso de la elongación es la translocación (:ff'g:'""t!¡
!
19ep, el movinriento del ribosoma por el mRNA en m
5' ➔3' . Este paso posiciona al ribosoma sobre el siguiente codón
y requiere el factor de elongación G (EF-G) y la hidrólisis de
GTP a GDP. Como los tRNA de los sitios P y A todavía están unj-
dos al rnRNA mediante el apru.·eamiento codón-an ticodón, no se

1
fMet-tRNAfMet ocupa e EF-Tu, GTPy el tRNA cargado ... que ingresa en el ÓDespués de que el tRNA carga-
sitio P del ribosoma. forman un complejo ... sitio A del ribosoma. do se ubica en el sitio A, se de-
grada el GTP a GDP y se libera

(a)
o T (b) _ __, (c)
el complejo EF-Tu-GDP.

Paso 1
mR NA
5' 3' 3' 5'

EF-Ts regenera el complejo EF-Tu-GTP,

que entonces está preparado para
Figura 15-19. La elongación de la traducción comprende tres pasos. ___________:•:::31~~{~- --iJ L
combinarse con otro tRNA cargado.
 El código genético y la traducción 427

1nueven con el riboson1a a medida que este se transloca. En con-
secuencia, el ribosoma se desvía, de manera que el tRNA que
ocupaba previamente el sitio P ahora ocupa el sitio E, desde el
que se mueve hacia el citoplasma, donde puede volver a cargarse
con otro aminoácido. Asimismo, la translocación causa que el
tRNA que ocupaba el sitio A (que se une a la cadena polipeptídi-
ca en crecimiento) p ase al sitio P y deje abierto el sitio A. Por con-
siguiente, el progreso de cada tRNA a través del ribosoma en el
curso de la elongación puede resumirse de la siguiente manera:
citoplasma ➔ sitio A ➔ sitio P ➔ citoplasma. Como se mencio-
nó antes, el tRNA iniciador es una excepción: se une directrunen-
te al sitio P y nunca ocupa el sitio A.
Después de la translocación, el sitio A del 1ibosoma está vacío
y preparado para recibir el tRNA especificado por el siguiente
codón. El ciclo de elongación (véaselfig. 15-t9q hasta e) se repi-
te: un tRNA cru·gado y su aminoácido ocupan el sitio A, se forma
un enlace peptídico entre los atninoácidos de los sitios A y P, y el
ribosoma se transloca al siguiente codón. DLtrante todo el ciclo, la
cadena polipeptídica se mantiene unida al tRNA del sitio P. Otra
proteína, denominada fac tor P de elongación de la traducción
(EF-P), aumenta la traducción de proteínas que contienen copias
consecutivas del aminoácido prolina. En ausencia de EF-P, a
veces los riboso1nas se atascan durante la traducción de estas pro-
teínas que contienen poliprolina.
L os RNA mensajeros, aunque 1nonocatenarios, a menudo
contienen estructuras secundarias formadas por apareamiento
de bases complementarias en diferentes partes del mRNA
(véase¡f1g. 13-1§ ). A medida que el ribosoma se mueve a lo
largo del mRNA, estas estructuras secundarias se desem·ollan
por la actividad de belicasa localizada en la subunidad pequeña
del ri bosorna.
Recientemente, los investigadores han desarrollado métodos
para seguir un único 1ibosoma a medida que traduce codones
individuales de una molécula de mRNA. Estos estudios revelaron
que la traducción no tiene lugar de una manera continua unifor-
1ne. Por lo general, cada paso de translocación requiere menos de
un décimo de segundo, pero a veces hay pausas definidas, que a
menudo duran varios segundos, entre cada evento de transloca-
ción cuando el ribosoma se mueve de un codón a otro. Por consi-
guiente, la traducción tiene lugru· en una serie de translocaciones
rápidas inten1.1mpidas por pausas breves. Ade1nás, en las pausas
breves entre los eventos de translocación, la traducción puede ser
interrumpida por pausas más prolongadas (de 1 a 2 minutos de
duración) que pueden desempeñar un papel en la regulación del
proceso de traducción.
E n las células eucari ontes, la elongación tiene lugar de una
manera simi lar. Los eucariontes tienen por lo menos tres facto-
res de elongación, uno de los cuales también actúa en la inicia-
ción y la terminación. Otro de los factores de elongación usados
en los eucariontes, denominado factor 2 de elongación eucarion-
te (eEF-2), es la diana de una toxina producida por bacterias que
causa difteria, una enfermedad que hasta hace poco era una
causa importante de muerte en niños. L a toxi na diftérica inhibe
CONCEPTOS
La elongación consiste en tres pasos: 1) un tRNA cargado ingresa en
el sitio A, 2) se crea un enlace peptídico entre los aminoácidos de los
sitios A y P, y 3) el ribosoma se transloca al siguiente codón. La elon-
gación requiere varios factores de elongación y GTP.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
En la elongación, la creación de en laces peptídicos entre aminoácidos
es catalizado por
a. rRNA.
b. proteína en la subunidad pequeña.
c. proteína en la subunidad grande.
d. tRNA.
el eEF-2, que previene la trans locación del ribosoma a lo largo
del rn.RNA, con la consiguiente interrupción de la síntesis pro-
teica.
Terminación
La síntesis proteica termina cuando el ribosoma se transloca a un
codón de terminación. Como no hay ningún tRNA con anticodo-

gs; forma un enlace peptídico entre los - Ó El ribosoma se mueve por el RNA El tRNA que se hallaba en el sitio
aminoácidos de los sitios P y A, y el tRNA hasta el siguiente codón (transloca- P está ahora en el sitio E, a partir
del sitio P libera su aminoácido. ción), lo que requiere EF-G y GTP. del cual se traslada al citoplasma.
(d) (e)

-.
• El tRNA que ocupaba~
sitio A se encuentra ahora

Paso 2 Paso 3
• ---..
en el sitio P. El sitio A ahora
está abierto y preparado
para recibir otro tRNA. .J

5'
3'
p
--- 3'
GTP E A
GDP
+
1P 1
Conclusión: al final de cada ciclo de elongación, el aminoácido
que se encontraba en el sitio A es añadido a la cadena
polipeptídica, y el sitio A queda libre para aceptar otro tRNA.
428 CAPÍTULO 15

(a) Cuando el ribosoma se

transloca a un codón de Carga de tRNA
terminación, no hay ningún Aminoácido
tRNA con un anticodón que
pueda aparearse con el - tRNA Subun idades
codón del sitio A. ribosómicas
~ -------4

Ribosoma -._ Grande

// Codón de
mRNA
Á termi nación
S' 3' i·i·H,i·ilMG,~
E p A
S' AUGCCCACGACUGCGAGCGUUCCGCUAAGGUA 3'

L mRNA Pequeña
@H,i·t!'··hifiiH,i

(b) Factores de liberaci ón

Iniciación

F-1 se une al
itio A, ...

. ,\ .d o - GTP
Po lIpeptI
---
... y RF-3 forma
un complejo con
5'
E p A
3'

GTP y se une al j
5' 3' ribosoma. _ J
E p A Elongación

•El polipéptido se libera del l-- ca rgado

tRNA en el sitio P. _J
El GTP asociado con RF-3
es hidrolizado a GDP.
(c) \

5'
A

5' AGGUAG 3' Terminación

~,..____ _ _ __ Factor de
rrlEI tRNA, el mRNA y los fac- liberación
tores de liberación se liberan
del ribosoma.

Figura 15-20. l a traducción finaliza cuando se encuentra un codón

de terminación. Como en esta ilustración el codón de terminación es 5' 3'
UAG, el factor de liberación es RF- 1. E p A

liberación del péptido

Polipéptido
completo
•
5' AU~~CUGCGAGCGUUCCGCUAAGúUAG 3'
Figura 15-21 . l a traducción requiere carga de los tRNA, iniciación,
elongación y t erminación . En este proceso, se unen los aminoácidos en
el orden especificado por el mRNA para crear un polipéptido. Una serie de Conclusión: mediante el proceso de
factores de iniciación, elongación y terminación intervienen en el proceso, y traducción, los aminoácidos se unen
en el orden especificado por el mRNA. 1----------'
la energía es suministrada por ATP y GTP.
 El código genético y la t rad ucción 429

nes co1nplementarios a los codones de terminación, 11ingún tRNA
ingresa en el sitio A del ribosom a cuando se encuentra un codón
de terminación l(fig. 15-20ij). En cambio, se unen al ribosoma pro-
teínas deno1ninadas factores de liberación {fig. 15-20q). La
E scherichía coli tiene tres factores de liberación: RF-1, RF-2 y
RF-3. El factor de Jiberación 1 se une a los codones de tern1ina-
ción UAA y UAG, y el RF-2 se une a UGA y UAA. La unión del
factor de liberación RF-1 o RF-2 al sitio A del 1i bosoma pron1ue-
ve la escisión del tRNA del sitio P de la cadena polipeptídica y la
liber ación del polipéptido. El factor de liberación 3 se une al ribo-
soma y fonna un complejo con GTP. Este complejo induce un
cambio conformacional en el riboso1na y libera a RF-1 o RF-2 del
siti o A y hace que el tRNA del siti o P se mueva al sitio E ; en el
proceso, se hidroliza GTP a GDP. Otros factores ayudan a causar
la liberación del tRNA del sitio P, la liberación del mRNA del
ribosoma y la disociación del ribosoma ffig. 15-20q). Es impor-
tante destacar que el codón de terminación no se localiza en el
extremo 3' del n1RNA, sino que es seguido de una serie de nucle-
ótidos que constituyen la región 3' no traducida (UTR) del
mRNA. A menudo , la región 3' UTR contiene secuencias que
afectan la estabilidad del mRNA e influyen en si tiene lugar la tra-
ducción (véase cap. 17).
Investigación recien te muestra que algunos ribosomas bacte-
rianos realizan un tipo de corrección sim ilar a la de las DNA
polimerasas durante la replicación. Después de la tran slocació n,
el ribosoma verifica la interacción entre el mRNA y el tRNA en
el sitio P. Si se agregó el tRNA incon·ecto, la alineación entre el
mRNA y el tRNA será incorrecta, lo que desencadena la termi-
nación prematura de la traducción. La evidencia sugiere que una
fun ción in1portante de RF-3 es ayudar a termi nar la traducción
cuando se ha utilizado un tRNA erróneo. Explore el proceso de
traducción bacteriana examinando las consecuencias de diversas
mutaciones de la región codificante de un gen en la Animación
15.1.
En las células eucariontes, la traducción termina de una .mane-
ra silnilar, excepto que hay dos factores de liberación: eRF-1 , que
reconoce los tres codones de terminación, y eRF-2, que se une a
GTP y estimula la liberación del polipéptido del ribosoma. En las
células eucariontes, no se ha observado con·ección de la traduc-
ción, como la estimulada por RF-3 en las bacterias . ._•===---'
CONCEPTOS
La terminación tiene lugar cuando el ribosoma alcanza un codón de
terminación. Los factores de liberación se unen al codón de termina-
ción y causan la li beración del polipéptido del último tRNA, del tRNA
del ribosoma y del mRNA del ribosoma.
La figura 15-21 resume el proceso global de síntesis proteica,
incluidas carga del tRNA, iniciación, elongación y terminación.
El cuadro 15-4 enumera los componentes que intervienen en este
proceso.

Cuadro 15-4 Componentes requeridos para la síntesis proteica en células bacterianas

Etapa Componente Función

Carga del tRNA Aminoácidos Segmentos estruct urales de las proteínas

tRNA Entrega aminoácidos a los ribosomas
Aminoacil-tRNA sintet asas Une aminoácidos a los t RNA
ATP Proporciona energía para la unión del aminoácido al tRNA

Iniciación mRNA Porta instruccio nes de codificación

fMet-tRNAfMet
Subunidad ribosómica 30S
Subun idad ri bosómica SOS
Factor de iniciación 1
Factor de iniciación 2
Factor de iniciación 3
Provee el primer aminoácido del péptido
Se une al mRNA
Estabiliza los tRNA y los aminoácidos
Aumenta la disociación de las subunidades grande y pequeña del ribosoma
Se une al GTP; entrega fMet_tRNAfMet al codón de iniciación
Se une a la subunidad 30S e impide la asociación con la subun idad 50S

Elongación Complejo de iniciación 70S
tR NA cargados
Factor de elongación Tu
Factor de elongación Ts
Factor de elongación G
GTP
Peptidil transferasa
Ri bosoma funcional con sit ios A, P y E, donde tiene luga r la síntesis proteica
Llevan aminoácidos al ribosoma y ayudan a ensamblarlos en el o rden especificado por el
mRNA
Se une al GTP y al tRNA cargado; entrega tRNA cargado al sitio A
Genera el facto r de elongación activa Tu
Estimula el movimiento del ribosoma al codón siguiente
Aporta energía
Crea el enlace peptídico entre los aminoácidos del sit io A y el sitio P

Terminación Factores de li beración 1, 2 y 3 Se une al ribosoma cuando se alcanza el codón de terminación y finaliza la traducción
430 CAP(TULO 15

nas y eucariontes. Como las archaea carecen de membranas nuclea-

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
res, la transcripción y la traducción son simultáneas, al igual que en
Comparación de la traducción bacteriana y eucarionte las células eubacterianas. Las archaea utilizan metionina no formi-
lada como aminoácido iniciador, una característica de la traducción
Ahora que hemos considerado el proceso de traducción en las célu- eucarionte. En archaea, algunos de los factores de iniciación y libe-
las bacterianas y observado algunas diferencias características que ración son similares a los hallados en eubacterias, mientras que
existen en las células euca riontes, reflexionemos sobre algunas simili- otros son similares a los hallados en eucariontes. Por último, algu-
tudes y diferencias importantes de la síntesis proteica entre células nos de los antibióticos que inhiben la traducción en las eubacterias
bacterianas y eucariontes. no ejercen ningún efecto sobre la traducción en archaea, lo que
Primero, debemos destacar que el código genético de células bac- aporta evidencia adiciona l de las diferencias fundamentales entre
terianas y eucariontes es casi idéntico, la única diferencia correspon- eubacterias y archaea.
de al aminoácido especificado por el codón de iniciación. En las célu-
las bacterianas, AUG de iniciación codifica un t ipo modificado de
metionina, N-formilmetionina, mientras que en las células eucarion-
tes, AUG de iniciación codifica metionina no formilada. Una conse-
cuencia del hecho de que las bacterias y los eucariontes utilicen el 15.4 Otras propiedades del RNA y los
mismo código es que los genes eucariontes pueden ser traducidos en ribosomas que influyen en la síntesis
sistemas bacterianos, y viceversa; esta característica posibilita la inge- de proteínas
niería genética, como veremos en el capítulo 19.
Otra diferencia es que la transcripción y la traducción tienen lugar
Ahora que hemos considerado con cierto detalle el proceso de tra-
en forma simu ltánea en las células bacterianas, pero la envoltura
ducción, examinaremos algunos aspectos adicionales de la sínte-
nuclear separa estos procesos en las células eucariontes. La separa- sis de proteínas y la maquinaria de síntesis proteica.
ción física de la transcripción y la traducción tiene implicaciones
importantes para el control de la expresión génica, que considerare-
mos en el capítulo 17, y permite la modificación extensa de los mRNA Estructura tridimensional del ribosoma
eucariontes, como se comentó en el capítulo 14.
El papel central del ribosoma en la síntesis de proteínas se r~co-
Otra diferencia es que el mRNA de las células bacterianas tiene una
noció en la década de 1950, y desde entonces se han estudiado
vida breve, en general solo de algunos minutos, mientras que la lon-
numerosos aspectos de su estructura. No obstante, muchos aspec-
gevidad del mRNA de las células eucariontes puede ser de horas o
tos continuaron siendo un misterio hasta que se completaron
días. El casquete 5' y la cola de poli(A) 3' halladas en los mRNA euca-
reconstrucciones tridünensionales detalladas. En 2009, se otorgó
riontes aumentan su estabilidad (véase Cap. 14).
el Nobel de quí_mjca a Venkatraman Ramakrishman, Thomas
En las células tanto bacterianas como eucariontes, las aminoacil-
Steitz y Ada Yonath por su investigación sobre la estructura mole-
tRNA sintetasas unen aminoácidos a sus tRNA apropiados, y el proce-
cular del 1ibosoma.
so químico es el mismo. Hay diferencias significativas en los tamaños La figura 15-22a muestra un modelo del ribosoma de E. coli en
y composiciones de las subunidades ribosómicas bacterianas y euca- baja resolución. En el modelo representado en la figura 15-22b,
riontes. Por ejemplo, la subunidad grande del ribosoma eucarionte
se observa una imagen de alta resolución del ribosoma bacteria-
contiene tres rRNA, mientras que el ribosoma bacteriano contiene
no, deternlinado por cri stalografía de rayos X. El niRNA está
solo dos. Estas diferencias permiten que los antibióticos y otras sus-
unido a la subunidad pequeña del ribosoma, y los tRNA se loca-
tancias inhiban la traducción bacteriana sin ejercer ningún efecto lizan en los sitios A, P y E (fig. 15-22c), que forman un puente
sobre la traducción de los genes nucleares eucariontes, como se ana- entre las subunjdades pequeña y grande (véase fig. 15-22a). Los
lizará más adelante en este capítulo.
factores de iniciación 1 y 3 se unen a sitios de la paite externa de
Otras diferencias f undamentales residen en el proceso de iniciación
la subunidad pequeña del riboson1a. EF-Tu, EF-G y otros factores
en células bacterianas, la subunidad pequeña del ribosoma se une
que forman un complejo con GTP interactúan con un centro de
directamente a la región que rodea el codón de iniciación a través de
unión de fac tores. Las imágenes cristal.o gráficas de alta resolu-
puentes de hidrógeno entre la secuencia consenso Sh ine-Da lgarno
ción aportan información que indica que, en la subunidad peque-
de la región 5' no traducida del mRNA y una secuencia en el extremo 3'
ña del riboson1a, hay un centro de decodificación (este centro de
del rRNA 16S. En cambio, la subunidad pequeña de un ribosoma
decodificación no es observable en la fig. 15-22b). Este centro
eucarionte se une primero a proteínas unidas al casquete 5' del mRNA
percibe la concordancia entre el codón del mRNA y el anticodón
y después migra por el mRNA barriendo la secuencia hasta encontrar
del tRNA cargado entrante. Solo los tRNA con el anti codón co-
el primer codón de iniciación AUG. Además, un número mayor de
1recto se LLnen estrecha1nente al ribosoma. L os análisis estructu-
factores de iniciación intervienen en la iniciación eucarionte que en la
rales también indican que la subunidad grande del 1ibosoma
iniciación bacteriana .
contiene el centro de la peptidil transferasa, donde se produce la
La elongación y la terminación son similares en células bacterianas
formación de enlaces peptídicos. En el centro de la peptidil trans-
y eucariontes, aunque se utilizan diferentes factores de elongación y
ferasa, no hay ninguna proteú1a ribosó1nica; la molécula de RN~
terminación . En ambos tipos de organismos, los mRNA se traducen
lleva a cabo la formación de enlaces peptídicos. Estos análisis
múltiples veces y se unen en forma simultánea a varios ribosomas,
también revelan que un túnel conecta el sitio de formación del
con la consiguiente formación de polirribosomas, según se comenta
enlace peptídico con la parte posterior del ribosorna; la cadena
en la Sección 15.4.
polipeptídica en crecimiento atraviesa el túnel hacia e~ e~t~rior
Se sabe mucho menos acerca del proceso de traducción en ar-
del ribosoma. El túnel puede alojar alrededor de 35 arrunoac1dos
chaea, pero parece haber una mezcla de características eubacteria-
de la cadena polipeptídica en crecimiento.
 El código genético y la traducción 431

(a) (b) rRNA (e)

SS
Polipéptido
E
rRNA
23S
Subunidad
grande

Subunidad
pequeña
rRNA
16S
3'

Figura 15-22. Estructura del ribosoma. a) Modelo de baja resolución del ribosoma, que muestra los sitios A, P y E donde residen los
tRNA, el mRNA y la cadena polipeptídica en crecimiento. b) Modelo de alta resolución del ribosoma. El tRNA del sitio E es marrón rojizo,
el tRNA del sitio P es rojo, y el tRNA del sitio A es verde. Se muestra el rRNA 16S en amarillo, el rRNA 23S en azul verdoso, y el rRNA 5S
en verde. Las proteínas de la subun idad ribosómica pequeña se muestran en anaranjado, mientras que las proteínas de la subunidad
ribosómica grande se muestran en violeta. c) Posiciones de los tRNA de los sitios E, P y A del ribosoma mostrados en la parte b. (Parte
b: MRC Lab of Molecular Biology, Wellcome lmages).

Polirribosomas desarrollo y el funcionamiento correctos de un organismo. En

consecuencia, las células han desarroll ado una serie de mecanis-
En las células tanto procari ontes como euca1iontes, las moléculas mos de control de calidad para garan tizar la exactitud de la trans-
de mRNA son traducidas en forma sim ultánea p or múltiples ribo- ferencia de información. La síntesis p roteica no es la excepción:
somas (fig. 15-23). La estructura resultante (un mRNA con varios existen varios mecanjsmos, denominados en conjunto vigilancia
ribosomas unidos) se denomina polirribosoma (o, a menudo, del mRNA, para detectar y tratar errores de los mRNA que pue-
solo polisoma). Cada ribosoma se une en forma sucesiva al sitio
de unión del ribosoma en eJ extremo 5' del mRNA y se n1ueve (a) Dirección de la transcripción
hacia eJ extremo 3'; el polipéptido asociado con cada ribosoma
DNA
se torna progresivamente más largo a medida que el ribosoma se
mueve a lo largo del mRNA. En las células procariontes, la trans-
cripción y la traducción son simultáneas; múltiples ribosomas m RNA e;
-., RNA

'l
pueden unirse al extren10 5' del mRNA mientras todavía está pro-
duciéndose la transcripción en el extremo 3', como muestra la
figura 15-23. En los eucariontes, la transcripción y la traducción Subunidades
\)
Cadena
están separadas en tiempo y espacio: la transcripción tiene lugar ribosómicas polipeptídica
en el núcleo, y Ja traducción, en el citop lasma. ent rantes en crecimiento
' :i. ,
Dirección de la traducción

(b)
CONCEPTOS r Un gen . '
¡ 9
I
1 .
En las células tanto procariontes como eucariontes, múltiples riboso- i~
.JI' f"""~ ~..... J '-1"~
mas pueden un irse a un solo mRNA, lo que genera una estructura
denominada polirribosoma .
~.Á f.• j
1~ ~' l ._..,JJ"
DNA
!

mRNAi~r /;, ,&.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9

En un polirribosoma, ¿los polipéptidos asociados con qué ribosomas

l,t \/
Ribosomas
- Dirección de
la t ranscripción

serán los más largos? \.. ,

a. Aquellos del extremo 5' del mRNA.
Figura 15-23. Una molécula de mRNA puede ser traducida en forma
b. Aquellos del extremo 3' del mRNA.
simultánea por varios ribosomas. a) Cuatro ribosomas están traducien-
c. Aquellos de la parte media del mRNA.
do una molécula de mRNA; el ribosoma se mueve del extremo 5' al extre-
d. Todos los polipéptidos serán de la misma longitud.
mo 3' del mRNA. b) En esta microfotografía electrónica, el filamento hori-
zontal largo es DNA, las esferas de tinción oscura son polirribosomas y los
filamentos delgados que conectan los ribosomas son mRNA. La transcrip-
Vigilancia del RNA mensajero ción del DNA procede de derecha a izquierda; los mRNA de la derecha son
más cortos que los de la izquierda. Múltiples ribosomas están traduciendo
La transferencia exacta de información genética de una genera- cada mRNA. (Parte b: O. L. Miller, Jr. y B.A. Hamaklo, y C.A. Thomas, Jr.
ción a la siguiente y del genotip o al fenotipo es crucial para el Science 169(1 970):392. Reimpreso con autorización de AAAS).
432 CAPÍTULO 15

den generar problemas en el curso de la traducción. Estos meca- El ribosoma se atasca cuando
nismos evitan que la célula desperdicie recursos traduciendo - - - - - - - - - - - , llega al final de un mRNA que ca-
rece de un codón de terminación.
1nRNA aberrantes e iinpide la producción de proteínas truncadas,
que pueden ser tóxicas para la célula. . /, 1.d o
Po l1pept

DEGRADACIÓN DEL MRNA MEDIADA POR CODONES DE TERMINA- Ribosoma ......._

CIÓN Una mutación frecuente es aquella en la que una m odifica-
ción de un codón que especifica un aminoácido lo convierte en un mRNA
codón de terminación (denominada mutación tenninadora; véase
cap. 18). Una mutación terminadora no afecta la transcripción, E p A

pero la traducción finaliza en for1na pre1natura cuando se encuen-

tra el codón de terminación. La proteína resultante está truncada
tmRNA
y, a menudo, no es funcional. U na manera común de que aparez-
can estas mutaciones terminadoras ocurre cuando uno o más exo- Parte de tRNA
nes son salteados o experimentan un corte y empalme inadecua-
do. El corte y empalme inadecuado induce la deleción o adición
de nucleótidos en el mRNA, que 1nodifica el marco de lectura y,
Parte de mRNA
a menudo, introduce codones de terminación prematuros.
Para evitar la síntesis de proteínas aberrantes resultantes de El tRNA, que está cargado
1nutaciones terminadoras, las células e ucariontes han desarrolla- con Ala, se une al sitio A
do un mecani smo conocido como degradación del RNA media-
da por codones de terminación (NMD, nonsense-mediated degra-
dation), que causa la rápida el iminación del mRNA que contiene
,,..... del ribosoma. Se añade
alanina a la cadena
polipeptíd ica.

codones de terminación pre1naturos. Aún no se conoce bien el

mecani s1no responsable de la degradación del RNA mediada por
codones de terminación. E n los mamíferos, parece involucrar a mRNA
proteínas que se unen a los sitios de enlace exón-exón. Estas pro-
teínas de la unión de exones pueden interactuar con enzimas que E
degradan el RNA. Una posibilidad es que el primer 1ibosoma
que traduce el tnRNA (en el ciclo pionero de traducción) elimine
~

las proteínas de la unión de exones, lo que protege al mRNA de 11 Se añaden diez aminoácidos
la degradación. Sin en1bargo, cuando el ribosoma encuentra un .--- - - - - - - --+------1 codificados por el mRNA a
codón de terminación, no atraviesa todo el mRNA y no se elimi- la cadena polipeptídica.
nan algunas de las proteínas de la unión de exones, lo que deter-
1nina degradación del RNA 1nediada por codones de ter1ninación.
►
•••••• •

RIBOSOMAS ATASCADOS y mRNA SIN CODÓN DE TERMINACIÓN Un

problema que en ocasiones aparece en la traducción consiste en que mRNA
un ribosoma se atasca en el mRNA antes de que finalice la traduc-
E P A
ción. Esta situación puede surgir cuando una mutación del DNA
cainbia un codón de terminación por uno que especifica un amino-
ácido. Asimismo, puede observai·se cuando la transcripción termi-
na e n forma prematura, lo que produce un mRNA truncado que - GTP
carece de un codón de terminación. En estos casos, el ribosoma Etiqueta que marca al
alcanza el extremo del nlRNA sin hallar un codón de terminación Factores de liberación
péptido para
y queda atascado, aún unido al mRNA. La unión al mRNA in1pide su degradación La terminación tiene lugar
que el iibosoma se recicle para ser utilizado en otros mRNA y, si - - - - - - -1- - -,----J cuando el ribosoma alcanza
estos episodios son frecuentes, el resultado es una escasez de ribo- • un codón de terminación
•
somas que di.s minuye los niveles totales de síntesis proteica. .. cerca del final del tmRNA.
Las bacterias han desarrollado un a clase de grúa molecular
denominada RNA de transferencia-mensajero (tm-RNA) que
elimina los ribosomas atascados. Esta molécula de RNA tiene
propiedades del tRNA y del tnRNA; su co1nponente tRNA suele
estar cargado con el a1ninoácido alanina. Cuando un ribosoma mRN
queda atascado en un mRNA, EF-Tu entrega el tm-RNA al sitio
A del ribosoma, donde actúa como sustituto del tRNA (fig. 15- E P -
A
24). Se crea un enlace peptídico entre el aminoácido del sitio P
del ribosoma y la alanina (unida al tmRNA) ahora localizada en
el sitio A , se transfiere la cadena polipeptídica al tmRNA y se Figura 15-24. En las bacterias, el tmRNA permite que los ribosomas
libera el tRNA del sitio P. atascados reanuden la traducción.

Luego, el 1ibosoma reanuda la traducción y cambia del mRNA
original, aberrante, al nlRNA que forma parte del tmRNA. El pro-
ceso de traducción agrega 1O aminoácidos codificados por el
trnRNA, y después se alcanza un codón de terminación en el ex-
tre1no 3' del tmRNA, que finaliza la traducción y libera el ribo-
soma . Los aminoácidos añadidos son una etiqueta especial que
convierte a la cadena polipeptídica incompleta en diana para la
degradación. Cierta evidencia sugiere que el tmRNA también
convierte al mRNA aberrante en diana para la degradación. No se
sabe con claridad la manera en que el tmRNA reconoce los ribo-
somas atascados, pero este método es eficiente en el reciclado de
ribosomas atascados y la eliminación de proteínas anormales que
dan por resultado transcripción truncada.
Los eucariontes han desarrollado un mecanismo diferente para
tratar a los mRNA que carecen de codones de terminación. En
lugar de r einiciar la actividad del ribosoma atascado y degradar la
proteína anormal resultante, las células eucariontes recurren a un
1necanisn10 denominado degradación del RNA no mediado por
codones de terminación, que causa la rápida degradación del
mRNA anonnal. En este mecanismo, el sitio A sin codón del ribo-
soma atascado es reconocido por una proteína especial que se une
al sitio A y recluta otras proteínas que después degradan el mRNA
de su extremo 3'.
DEGRADACIÓN NO-GO Otro sistema de vigilancia del mRNA ha-
llada en los eucariontes es la degradación no-go (NGD, no-go
degradation), que ayuda a eliminar ribosomas atascados resultan-
tes de estructuras secundarias del mRNA, daño químico del
nlRNA, codones de terminación prematuros y defectos ribosómi-
cos. Una serie de proteínas causan la tenninación, el reciclado de
los ribosom.as y la degradación del mRNA.
CONCEPTOS
Las células tienen mecanismos de vigilancia del mRNA para detectar
molécu las de mRNA que contienen errores y pueden crear problemas
en el curso de la traducción.
Plegamiento y modificaciones postraducción
de las proteínas
Las func iones de muchas proteínas dependen críticamente del
plegamiento correcto de la cadena polipeptídica; algunas proteí-
nas se pliegan de n1anera espontánea en sus formas correctas,
pero en otras, el plegamiento correcto puede requerir, al principio,
la participación de otras moléculas denominadas chaperonas
moleculares. Algunas chaperonas m oleculares se asocian con el
ribosoma y pliegan cadenas poli peptídicas recién sintetizadas a
medida que emergen del túnel del ribosoma, en cuyo caso el ple-
gamiento de las proteínas tiene lugar durante el transcurso de la
traducción.
Muchas proteú1as deben ser modificadas después de la traduc-
ción para tornarse activas. A menudo, las proteínas de las células
tanto procariontes como eucariontes son modificadas después de
la traducción. Hay una serie de tipos diferentes de modificaciones
posibles. Algunas proteínas se sintetizan como proteínas precur-
soras más grandes, y deben ser escindidas y recortadas por enzi-
n1as antes de que las proteínas puedan tornarse funcionales. Co-
El código genético y la traducción 433
mo se 1nencionó antes, es posible eliminar el grupo formil o todo
el residuo metionina del extremo amino de una proteína. Algunas
proteínas requieren la unión de hidratos de carbono para la acti-
vación. Se pueden modificar los aminoácidos dentro de una pro-
teína: se añaden grupo fosfato, carboxilo y metilo a algunos ami-
noácidos. En las células eucariontes, el extremo ami no de una
proteína a 1nenudo es acetilado después de la traducción.
En los eucariontes, una modificación postraducción común es
la unión de una proteína deno1ninada u bicuitina, que convierte a
la proteína en diana para la degradación. Otra modificación de
algunas proteú1as es la eliminación de 15 a 30 aminoácidos, deno-
minados secuencia señal, en el extremo ainino de la proteína. La
secuencia señal ayuda a dirigir la proteína a un lugar específico
dentro de la célula, tras lo cual enzimas especiales eliminan la
secuencia.
CONCEPTOS
Muchas proteínas presentan modificaciones postraducción después
de su síntesis.
Traducción y antibióticos
Los antibióticos son fármacos que destruyen microorganismos.
Para fabricar un antibiótico eficaz, no servirá cualquier tóxico: el
truco es destruir las bacterias sin dañar al paciente.
La traducción suele ser la diana de los antibióticos, porque es
esencial para todos los organisn1os vivos y difiere de manera sig-
nificativa entre célu las bacterianas y eucariontes. Una serie de
antibióticos se une de 1nanera selectiva a ribosomas bacterianos e
inhibe diversos pasos de la traducción, pero no afecta a los ribo-
somas eucariontes. Por ejemplo, las tetraciclinas son una clase de
antibióticos que se une al sitio A de un 1iboso1na bacteriano y blo-
quea el ingreso de tRNA cargados al sitio A. El cloranfenicol se
une a la subunidad grande del riboso1na y bloquea la formación
de enlaces peptídicos. La estreptomicina se une a la subunidad
pequeña del ribosoma e inhibe la iniciación, y la eritromicina blo-
quea la translocación. Aunque el cloranfenicol y la estreptomici-
na son inhibidores potentes de la traducción en las bacterias, no
inhiben la traducción en las archaea.
La estn1ctura tridimensional de la puromicina se asemeja al
extremo 3' de un tRNA cargado, lo que permite que la puromici-
na ingrese de manera eficiente en el sitio A de un ribosoma e inhi-
ba el ingreso de tRNA. Se puede f ermar un enlace peptídico entre
la molécula de puromicina del sitio A y un aminoácido del tRNA
del sitio P del ribosoma, pero la puromicina no puede unirse al
sitio P y no se produce la translocación, lo que bloquea aún más
la elongación de la proteína. Como la estructura del tRNA es
similar en todos los organismos, la puromicina inhibe la traduc-
ción en las células tanto bacterianas como eucariontes; en conse-
cuencia, la puromicina destruye las células eucrui ontes junto con
las bacterias y, a veces, se indica en el tratai11iento del cáncer para
destruir células tumorales.
Muchos antibióticos actúan bloqueando pasos específicos de la
traducción, y diferentes antibióticos bloquean diversos pasos de
la síntesis proteica, como la iniciación o la elongación. Dada esta
especificidad, los antibióticos suelen utilizarse para estudiar el
proceso de síntesis proteica.
434 CAPÍTULO 15

RESUMEN DE CONCEPTOS
■ George Beadle y Edward Tatum desarrollaron la hipótesis de
un gen, una enzima, que postulaba que cada gen especificaba
una enzi1na; más adelante, esta hipótesis se moctificó para
convertirse en la hipótesis de un gen, un polipéptido.
■ Las proteínas están compuestas por veinte aminoácidos dife-
rentes. Los runinoácidos de una proteína están unidos por
enlaces peptídicos. Las cadenas de aminoácidos se pliegan y
se asocian para producir las estructuras secundarias, terciarias
y cuaternarias de las proteínas.
■ La dilucidación del código genético requirió varios enfoques
diferentes, co1no el uso de mRNA sintéticos con secuen cias
aleatorias y n1RNA coitos que se unían a tRNA cargados.
■ E l código genético es un código de tripletes: tres nucleótidos
especifican un solo aminoácido. También es degenerado (lo
que significa que 1nás de un codón puede especificar un ami-
noácido), no solapado y (casi) universal.
■ Diferentes tRNA (tRNA isoaceptores) pueden aceptar el
1nismo aminoácido. Distintos codones pueden apru·earse con
el mismo anticodón mediante tambaleo, que puede existir en
la tercera posición del codón y permite cierto apareruniento de
bases no convencionales en esta posición.
■ El codón de iniciación establece el marco de lectura. Uno de
tres codones de terminación marca el fmal de la sección codi-
ficante de proteína de un mRNA.
■ La síntesis de proteínas comprende cuatro pasos: 1) la unión
de aminoácidos a los tRNA apropiados, 2) iniciación, 3) elon-
gación y 4) terminación.
■ La unión de un aminoácido a un tRNA requiere la presencia
de una runjnoacil-tRNA sintetasa específica y ATP. E l aminoá-
cido se une por su extremo carboxi lo al extremo 3' del tRNA.
■ En la iniciación de la traducción bacteriana, la subunidad
pequeña del riboso1na se une al mRNA y se posiciona sobre el
codón de iniciación. Se le une el primer tRNA y su aminoáci-
do asociado (N-formilmetionina en las células bacterianas) y,
después, la subunidad grande del ribosoma. La iniciación
requiere varios factores de iniciación y GTP.
■ En la elongación, un tRNA cargado ingresa en el sitio A de un
ribosoma, se forma un enlace peptídico entre los aminoácidos
de los sitios A y P, y el ribosoma se mueve (se transloca) a lo
largo del mRNA hasta el siguiente codón. La elongación
requiere varios factores de elongación y GTP.
■ La traducción se termina cuando el ribosoma encuentra uno
de los tres codones de terminación. Se requieren factores de
liberación y GTP para que se produzca la terminación.
■ Cada mRNA puede ser traducido en forma simultánea por
varios ribosomas, lo que produce una estructura denominada
polirribosoma.
■ Las células tienen .m ecanismos de vigilancia del RNA que eli-
minan mRNA con e1Tores y que pueden generar problemas en
la traducción.
■ Los antibióticos suelen actuar por interferencia con la traduc-
ción, porque muchos aspectos de esta difieren en bacterias y
eucariontes.
■ Muchas proteínas son sometidas a modificación postraducción.

TÉRMINOS IMPORTANTES

aminoácido (p. 415)
aminoacil-tRNA sintetasa
(p. 423)
carga de tRNA (p. 423)
chaperona moleculru· (p. 433)
código genético degenerado
(p. 420)
código genético no solapado
(p. 421)
código genético universal
(p. 422)
codón con sentido (p. 420)
codón de iniciación (p. 421)
codón de terminación (o sin
sentido) (p. 422)
codones sinónimos (p. 420)
complejo de iniciación 30S
(p. 424)
complejo de iniciación 70S
(p. 424)
cornplejo de unión al casquete
(CBC) (p. 425)
degradación del mRNA
mediada por codones de ter-
1ninación (NMD) (p. 432)
degradación del m.RNA no
1nediada por codones de ter-
minación (p. 433)
degradación no-go (p. 433)
enlace peptíctico (p. 415)
factor de elongación
G (EF-G) (p. 427)
factor de elongación
Ts (EF-Ts) (p. 426)
factor de elongación
Tu (EF-Tu) (p. 426)
factor de iniciación
(IF-1, IF-2, IF-3) (p. 424)
factor de liberación
(RF-1, RF-2, RF-3)
(p. 427)
hipótesis de un gen, un poli-
péptido (p. 415)
hipótesis de un gen, una enzi-
ma (p. 415)
marco de lectura (p. 421)
pobpéptido (p. 415)
polirribosoma (p. 427)
RNA de transferencia-mensa-
jero (tmRNA) (p. 432)
secuencia señal (p. 433)
sitio aminoacil (A) (p. 426)
sitio de salida (E) (p. 426)
sitio peptidil (P) (p. 426)
trunbaleo (wobble) (p. 420)
translocación (p. 426)
tRNA isoaceptores (p. 420)
vigilancia del mRNA
(p. 431)
 El código genético y la traducción 435

1.B ➔ A ➔ C 6. c
2. La secuencia de aminoácidos (estructura primaria) de la pro- 7. La secuencia Shíne-Dalgruno.
teína. 8. a
3. b 9. b
4. d
5. En las bacterias, el codón de iniciación codifica N-formilme-
tionina; en los eucariontes, codifica metionina. El codón de ter-
1ninación no especifica aminoácidos.

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1

Se aislaron una serie de m utantes auxótrofos de Neurospora. El examen de los h ongos que presen-
taban estas mutaciones reveló que crecían en medio mínimo al que se agregaban diversos compues-
tos (A, B , C, D); el siguiente cuadro muestra las respuestas de creci miento a cada uno de Jos cuatro
compuestos. Indique el orden de los compuestos A, B, C y D en una vía bioquímica. Delinee una
vía bioquímica que incluya estos cuatro compuestos e indique qué paso de la vía es afectado p or
cada una de las n1utaciones.

Compuesto
Número de mutación A B c D
134 + + +
276 + + + +
987 +
773 + + + +
772 +
146 + + +
333 + + +
123 + +
Pista: agru-
pe las muta-
ciones
según qué
compuestos
Estrategia de solución Pasos de la solución permiten el
crecimiento.
¿Qué información se requiere en su respuesta al Mutación Compuesto
problema?
El orden de los compuestos de una vía bioquímica; para Grupo Número A B c D
cada mutación, qu é paso de la vía es afectado por la I 276 + + + +
mutación .
773 + + + +
¿Qué información se proporciona para resolver II 134 + + +
el problema? 146 + + +
Para cada mutante, si creció en medio mín imo al que 333 + + +
se agregaron compuestos A, B, C y D.
m 123 + +
Para obtener ayuda con este problema, repase: IV 987 +
Hipótesis de un gen, una enzima en la Sección 15.1. 772 +
 436 CAPÍTULO 15

Pista: si se añade
un compuesto des- Los mutantes deJ grupo I crecerán si se agrega que el compuesto C precede a A en la vía, de manera que A
pués del bloqueo,
este permitirá que compuesto A, B, C o D ; en consecuencia, estas debe ser el siguiente compu esto de la vía:
el mutante crezca; mutaciones deben afectar un paso previo a la pro-
si se agrega un d ucción de los cuatro compuestos: ----11
►► compuesto C
compuesto antes Mutaciones Mutaciones
del bloqueo, este
no ejercerá ningún ----11►► compuestos A, B, C, D del grupo 1 del grupo II
efecto.
M utaciones
del grupo I compuesto A ► compuestos B, D
Mutaciones
Los mutantes del grupo II crecerán si se agrega compuesto A, de] grupo III
B o D , pero no si se agrega compuesto C. En consecuencia, eJ
compuesto C es previo a A, B y D ; y las mutaciones del grupo Por último, los n1utantes del grupo IV crecerán si se agrega
Il afectan la conversión del co1npuesto C en uno de los otros compuesto D, pero no si se añade compuesto A, B o C. Por lo
compuestos: tanto, el compuesto D es el cuarto compuesto de la vía, y las
mutaciones del grupo IV bloquean la conversión de B a D:
----11►► compuesto C ----11
►► compuestos A, B, C, D
M utaciones M utaciones
----11
►► compuesto e ---~ compuesto A ►
del grupo I del grupo II
Mutaciones Mut aciones Mutaciones
del grupo I del grupo Il del grupo ID
Los mutantes del grupo ID permiten el crecimiento si se añade
compuesto B o D, pero no si se añade compuesto A o C. Por compuesto B ► co1npuesto D
consiguiente, las mutac iones del grupo III afectan los pasos Mutaciones
que siguen a la producción de A y C; ya hemos determinado del grupo IV

Problema 2
Una cadena molde de DNA bacteriano tiene la siguiente secuenc.Íi.a de bases:

5'-AGGTITACGTGCAT-3'

¿Qué aminoácidos codifica esta secuencia?

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Cadena molde de DNA: 5 '-AGGTITACGTGCAT- 3'
La lista de aminoácidos codificada por la secuencia dada. mRNA copiado del DNA: 3 '-UCCAAAUUGCACGUA-5'

¿Qué información se proporciona para resolver el proble-

ma?
■ La secuencia de DNA de la cadena molde.
■ Los extrem os 5' y 3' de la secuencia m olde.
■ Los aminoácidos codificados por diferentes codones
(fig. 15-10).
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Degeneración del código en la Sección 15.2.
Un mRNA se traduce en dirección 5' ➔ 3'; por lo tanto, será
útil girar la molécula de RNA con el extremo 5' a la izquierda:
rnRNA copiado del DNA: 5 '-AUGCACGUUAAACCU-3'
Los codones consisten en grupos de tres nucleótidos que
se leen sucesivamente después del primer codón AUG;
usando la figura 15-10, podemos determinar que los ami-
noácidos son:

Pasos de la solución
5'-AUG - CAC - GUU- AAA-CCU-3'
Recuerde: el mRNA
es antiparalelo y com-
plementario respecto
Para responder esta pregunta, debernos descifrar
primero la secuencia de mRNA que será u·anscri- t t t t
fMet - -His - -Val - - Lys - - Pro
t
de la cadena molde ta a partir de esta secuencia de DNA :
de DNA.

1
 El código genético y la traducción 437

Problema 3
Los siguientes tripletes representan anticodones hallados en una s erie de tRNA. Nombre los aminoácidos transportados por cada
uno de estos tRNA.
a. 5' -UUU-3 '
b. 5'-GAC-3'
c. 5'-UUG-3'
d. 5'-CAG-3'

· Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Al enumerar estos codones de la manera convencional, con el
El aminoácido transportado por cada tRNA. extremo 5' a Ja derecha, te nemos:

¿Qué información se proporciona para resolver el problema? Codón: 5 '-AAA-3'

■ La secuencia del anticodón de cada tRNA. Codón: 5 '-AAG-3'

■ Los aminoácidos codificados por diferentes codones

Según la figura 15-10, ambos codones especifican el amino-
(fig. 15-10).
ácido lisina (Ly s). Recuerde que eJ tambaleo en la tercera
Para obtener ayuda con este problema, repase: posición permite que más de un codón especifique el mismo
aminoácido; por consiguiente, cualquier tambaleo que exista
Degeneración del código en la Sección 15.2. producirá el misn10 aminoácido que los apareamientos de
bases convencionales, por lo que no necesitamos imaginarlos
.

Pasos de la solución cuál será el tambaleo para responder esta pregunta. Las res-
1

puestas para las partes b, e y d son las siguientes:

Recuerde: los co- Para resolver este problema, debemos determinar
dones son arit1pa-
ralelos y comple-
primero los codones con los que se aparean estos b. Anticodón: 5 '-GAC-3'
mentarios respec- anticodones y1 después, observar el aminoácido Anticodón: 3'-CAG-5'
to del anticodón. especificado por el codón en la figura 15-10. Para Codón: 5'-GUC-3' codifica Val
la parte a, el anticodón es 5'- UUU-3' .
1
Pista: consulte Según las reglas de tambaleo, U en la primera posi- c. Anticod6n: 5 '-UUG-3'
las reglas de tam- ción del codón puede aparearse con A o con G en la Anticodón: 3'-GUU-5'
baleo en el cua- tercera posición del codón., de manera que hay dos
dro 15-2. Codón: 5'-CAA-3' codifica Gln
codones que pueden aparearse con este anticodón:

Anticodón: 5'-UUU-3' d. Anticodón: 5'-CAG-3 '

Codón: 3'-AAA-5' Anticodón: 3'-GUC-5'
Codón: 3'-GAA-5' Codón: 5'-CUG-3' codifica Leu

Sección 15.1 S. Defina los siguientes términos según se aplican al código

genético:
l. ¿Cuál es la hip ótesis de un gen, una enzima? ¿Por qué esta
hi.pótesis fue un avance importante e n nuestro conocüni ento a. Marco de lectura h. Código universal
de la genética? b. Código solapado i. Codones no universales
c. Código no solapado
Sección 15.2
d. Codón de iniciación
2. ¿Qué métodos difer entes se utilizaron para ayudar a violar el
código genético? ¿Qué reveló cada método, y cuál es eran las e. Codón de terminación
ventajas y las desventajas de cada un o de ellos? f. Codón con sentido
3. ¿Qué son los tRNA isoaceptores? g. Codón de terminación o sin sentido
4. ¿Cuál es la significación del hecho de que muchos codones 6. ¿ Cómo se establece el marco de lectura de una secuencia
sinónimos difieran solo en la tercera posición del nucleótido? nucleotídica?
438 CAPÍTULO 15

Sección 15.3 diferencias del proceso de traducción en estos dos tipos

7. ¿Cómo se unen los tRNA a sus aminoácidos correspondien-
tes?
8. ¿ Qué papel desempeñan los factores de iniciación en la sín-
tesis proteica?
9. ¿En qué se diferencia el proceso de iniciación en las células
bac terianas y e ucaii ontes?
10. Mencione los factores de elongación utilizados en la traduc-
ción bacteriana y explique el papel que desempeña cada
fac tor e n la traducción.
11. ¿Qué eventos provoca la terminación de la traducción?
12. Compare y contraste el proceso de síntesis proteica en célu-
las bacterianas y eucariontes e indique las similitudes y las
celulares.
Sección 15.4
13. ¿Cómo superan las células procariontes el problema de un
ribosoma atascado en un rn.RNA que no tie ne codón de ter-
minac.ión ? ¿Cón10 resuelven este problen1a las células euca-
1iontes?
14. ¿Cuáles son algunos tipos de modificación p ostraducción de
las proteú1as?
15. Explique cómo actúan ciertos antibióticos en la afectación
del proceso de síntesis proteica.

Sección 15.1 17. Los compuestos I, II y III pertenecen a la siguiente vía bio-
, .
qu1ffi1ca:
*16. Sydney Brenner aisló mutantes de Salmonella typhimu-
rium implicados en la biosíntesis de triptófano y que no precursor - -- compuesto I - --
enzuna enzuna
crecían en medio mínimo. Cuando se investigaron estos A B
mutantes en medio n1ínimo al que se le había agregado
uno de c uatro compuestos (indol glicerol fosfato, indol, compuesto II - --compuesto III
enzima
ácido antranílico y triptófano), se obtuvieron las respues-
e
tas de creciln iento 1nostradas en el siguiente cuadro.
La mutación a desactiva la enzima A ; la mutación b desacti-
Indol va la enzima B , y la mutación c desactiva la enzima C. Se
, .
Ac,do
glicerol investigaron mutantes, cada uno de los cuales tenía uno de
Medio
, .
Mutante n11n1mo antranílico fosfato Indol Triptófano estos defectos, en n1edio mínimo al que se le añadió com-
puesto I, Il o III. Complete los resultados esperados de estas
t,p-1 + pruebas colocando un signo más (+) en caso de crecitnie nto
trp-2 o un signo menos(-) en caso de ausencia de crecimi ento,
+ + +
en el siguiente cuadro.
lrp-3 + +
Medio mínimo al que se añade
t,·p-4 + + +
Cepa con Compuesto Compuesto Compuesto
trp-6 + mutación I 11 m
t,p-7 + a
trp-8 b
+ + + +
e
t,p-9 +
Sección 15.2
tJp-10 +
18. U n genetista realiza el experimento delineado en la figura
t,p-11 + 15-8, pero esta vez combina nucleótidos de guanina (en
lugar de uracilo) con polinucleótido fosforilasa. ¿En qué
tubo debería aparecer la proteú1a n1arcada radiactivamente?
M encione el orden de indol glicerol fosfato, indol, ácido antra- 19. Para el expe1imento reseñado en la figura 15-8, ¿podrían
nílico y triptófano en una vía bioquímica que lleva a la síntesis Nirenberg y Mattaei haber sustituido la polinucleótido fos -
de triptófano. Indique qué paso de la vía es afectado por cada forilasa por RNA polimerasa sin modificar por lo demás el
una de las m utaciones. experimento? ¿Por qué o por qué no?
 El código genético y la traducción 439

*20. Asuma que la cantidad de tipos diferentes de bases del cación de una única base, determine qué posición del
RNA es cuatro. ¿Cuál sería el tan1año mínimo del codón codón (primero, segundo o tercer nucleótido) del mRNA
(número de nucleótidos) requerido para especificar todos se debe mod:ificar para que se produzca el ca,nbio.
los aminoácidos si el nú1nero de tipos de diferentes de a. Leu ➔ Gln
aminoácidos de las proteínas fuera de a) 2, b) 8, c) 17, d)
45 y e) 75? b. Phe ➔ Ser
*21. ¿Cuántos codones serían posibles en un código de triple- c. Phe ➔ lle
tes si solo se utilizaran tres bases (A, C y U)? d. Pro ➔ Ala
*22. En referencia al código genético presentado en la figu- e. Asn ➔ Lys
ra 15-10, indique los aminoácidos especificados por las f. lle ➔ Asn
siguientes secuencias de mRNA bacteriano.
a. 5' - AUGUUUAAAUUUAAAUUUUGA-3' Sección 15.3
b. 5' -AGGGAAAUCAGAUGUAUAUAUAUAUAU-
GA-3 ' *30. Organice los siguientes componentes de la traducción en
el orden aproximado en que aparecerían o se utilizarían en
c. 5' - UUUGGAUUGAGUGAAACGAUGGAUGAAA- la síntesis proteica en procariontes:
GAUUUCUCGCUUGA-3 '
complejo de iniciación 70S
d. 5'-GUACUAAGGAGGUUGUAUGGGUUAGGGGA-
CAUCAUUUUGA-3' complejo de iniciación 30S
23. Una cadena no molde de DNA bacteriano tiene la siguien- factor de liberación 1
te secuencia de bases. ¿Qué secuencia de ain:inoácidos factor de elongación G
codificará esta secuencia?
factor de iniciación 3
5 •- ATGATACTAAGGCCC-3' factor de elongación Tu
fMet-tRNAfMet
24. Se encuentra la siguiente secuencia de aminoácidos en un
tripéptido: Met-Trp-His. Mencione todas las posibles 31. Examine la figura 15-14 de un tRNA. ¿Cuál piensa que
secuencias de nucleótidos del mRNA, de la cadena molde sería el efecto potencial de una mutación en la parte del
del DNA y de la cadena no molde del DNA que puede gen de tRNA que codifica a) el tallo aceptor, b) el antico-
codificar este t1ipéptido. dón, c) uno de los nucleótidos coloreados de rojo?
25. ¿Cuántas secuencias diferentes de mRNA pueden codifi- 32. El siguiente d:iagrama ilustra un paso del proceso de tra-
car una cadena polipeptíd:ica con la secuencia de aminoá- ducción. Bosqueje el diagran1a e identifique en él los
cidos Met-Leu-Arg? (Asegúrese de inclu:ir el codón de ter- siguientes elementos:
núnación).
*26. Una serie de tRNA tienen los siguientes anticodones.
Considere las reglas de tambaleo enun1eradas en el cua-
d1·0 15-2 y mencione todos los codones posibles con los
que puede aparearse cada tRNA.
a. 5'-GCC- 3 '
b. 5'- AAG -3'
c. 5'-IAA-3' ¡-
mRNA
d. 5'-UGG-3'
e. 5'-CAG-3'
27. Un investigador crea copolímeros aleatorios de tres nu-
cleótidos mezclando polinucleótido fosfo1ilasa con nucleó- a. Extremos 5' y 3 • del mRNA
tidos de guanina y adenina en una proporción de 5 nu- b. Sitios A , P y E
cleótidos de guanina por l de adenina. Mencione los dife- c. Cod6n de iniciación
rentes copolíineros producidos y sus proporciones teóricas.
d. Codón de terminación
28. Asuma que el nucleótido del extremo 5' del primer antico-
dón del tRNA (el tRNA de la izqui erda) de la figura 15- e. Extremos amino y carboxilo de la cadena polipeptídica
11 mutara de G a U. Mencione todos los codones con los recién sintetizada
que podría aparearse el nuevo anticodón mutado. f. Localización aproximada del siguiente enlace peptídico
29. ¿ Cuál de los siguientes cambios de aminoácidos podrían que se form ará
producirse por una 1nutación que modificara una sola g. Lugar del ribosoma al que se unirá el factor de libera-
base? Para cada cambio que pudiera resultar de la modifi- ción 1
440 CAPÍTULO 15

*33. Refiérase al diagrama del Problema 32 para responder las 3' respecto del casquete 5', donde se unen normalmente
siguientes preguntas. los ribosomas. En una investigación, los miRNA no supri-
a. ¿Cuál será el anticodón del siguiente tRNA añadido al 1nieron la traducción de los ribosomas que se unieron a los
sitio A del ribosoma? sitios internos de unión al ribosoma (R. S. Píllai y cols.
b. ¿ Cuál será el siguiente aminoácido agregado a la cadena 2005 . Science 309:1573-1576). ¿Qué sugiere este hallazgo
polipeptídica en crecimjento? acerca de la manera en que los miRNA suprimen la tra-
*34. Un mRNA sintético añadido a un sistema de síntesis pro- ducción?
teica libre de células produce un péptido con la siguiente 37. Indique la secuencia de aminoácidos de la proteína codifi-
secuencia de aminoácidos: Met-Pro-Ile-Ser-Ala. ¿Cuál cada por el 1nRNA de la figura 15-21.
sería el efecto sobre la traducción si se 01nitieran los
siguientes componentes del sistema de síntesis proteica Sección 15.4
libre de células? ¿Qué tipo de proteína se produciría, en
*38. Las mutaciones que introducen codones de terminación
caso de que se produjera alguna?
~~ causan una serie de enfermedades genéticas. Por ejen1plo,
a. Factor de iniciación 3 ., •.,"' deJ 2 al 3% de las personas con fibrosis quística tienen
b. Factor de iniciación 2 una mutación que introduce un codón de terminación pre-
c. Factor de elongación Tu maturo en el gen que codifica el regulador de la conduc-
tancia transmembrana de la fibrosis quística (CF'l'R). Este
d. Factor de elongación G codón de terminación prematuro produce una fortna trun-
e. Factores de liberación RF-1, RF-2 y RF-3 cada de CFTR que no es funcional y provoca síntomas de
f. ATP :fibrosis quística. Una posible manera de tratar a las perso-
nas con enfermedades genéticas causadas por estos tipos
g. GTP
de mutaciones consiste en engañar al ribosoma para que
35. Para cada una de las siguientes secuencias, tilde el espacio lea a través del codón de terminación insertando en su
apropiado para indicar el proceso afectado de manera más lugar un aminoácido. Si bien la proteína producida puede
inmediata por la deleción de la secuencia. Elija solo un tener un aminoácido alterado, es más probable que sea por
proceso para cada secuencia (es decir, un tilde por lo menos parcialmente funcional que la proteína truncada
secuencia). producida cuando el ribosorna se atasca en el codón de
terminación. De hecho, los genetistas han realizado estu-
Secuencia Procesamiento dios clínicos en personas con fibrosis quística para investi-
elin1inada Replicación 1\-anscripción del RNA 1\-aducción gar un fármaco deno1ninado PTC124, que interfiere con la
a. Sitio orí capacidad del riboso1na para leer de manera correcta los
b. Sitio consen-
codones de terminación (C. Ainsworth. 2005. Nature
so de corte y
438:726-728). Sobre la base de lo que sabe acerca del
empalme 3 ' mecanismo de la degradación del RNA mediana por codo-
nes de terminación (NMD), ¿esperaría que la NMD fuera
c. Cola de
un problema con este tipo de tratamiento? ¿Por qué o por
poli(A)
qué no?
d. Tenninador

e. Codón de
iniciación

f. Consenso
-10

g. Shine-
Dalgarno

36. Los microRNA son moléculas pequeñas de RNA que se

f,:;" unen al extremo 3' de los mRNA y suprimen la traducción
•.••,., (véase cap. 14). Todavía se está investigando cómo supri-
men la traducción los miRNA. Algunos mRNA eucarion-
tes tienen sitios internos de unión al ribosoma en dirección Niño con fibrosis quística. (Lisa Eastman/Alamy).

PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 15.2
39. La redundancia del código genético significa que algunos
aminoácidos son especificados por más de un codón. Por
ejemplo, el aminoácido leucina es especificado por seis . ,
codones diferentes. Dentro de un genoma, los codones s1no-
nimos no están presentes en igual número; algu nos codones
sinónimos aparecen con mucha mayor frecuencia que otros,
y los codones preferidos difieren en distin tas especies. Por
ejemplo, en una especie, el codón UUA podría usarse la
mayoría de las veces para codificar leucina, mientras que en
otra especie, puede utilizarse 1nás a menudo CUU. Especule
sobre una razón para este sesgo en la utilización de codones
y por qué los codones preferidos no son los mismos en
todos los organismos.
Sección 15.3
40. ¿En qué aspectos se asemejan los espliceosomas y los ribo-
so.mas? ¿En qué aspectos se diferencian? ¿Puede sugerir
algunas razones posibles de sus similitudes?
*41. Se llevaron a cabo varios experimentos para obtener infor-
mación acerca de cómo reconoce el ribosoma eucarionte
El código genético y la traducción 441
el codón de iniciación AUG. En un experimento, se locali-
zó y se modificó el gen que codifica el tRNA iniciador de
metionina (tRNAiMeC). Se mutaron los nucleótidos que
especifican el anticodón del tRNAiMet, de manera que el
anticodón del tRNA fuera 5'-CCA-3' en lugar de
5' -CAU-3'. Cuando se colocó este gen mutado en una
célula eucarionte, se produjo la síntesis proteica, pero las
proteínas producidas fueron anormales. Algunas de las
proteínas producidas contenían aminoácidos extra, mien-
tras que otras contenían menos aminoácidos que lo
normal.
a. ¿Qué indican estos resultados acerca de la manera en
que el ribosoma reconoce el punto de iniciación de la
traducción en células eucariontes? Explique su razona-
miento.
b. Si se hubiera realizado el mismo experimento en célu-
las bacterianas, ¿qué resultados habría esperado?
.,; ,, . .,;.
c. Explique por qué algunas protemas conten1an anunoac1-
, .
dos extra, mientras que otras conten1an menos ammo-
ácidos que lo normal.
 16
Control de la expresión génica
en las bacterias

Operones y la célula ruidosa

En 2011, genetistas de todo el inundo festejaron el

quincuagésimo aniversario del operón. Un operón es
un grupo de genes que comparten un promotor común
y se transcriben como una unidad, lo que produce un
solo mRNA que codifica varias proteínas. Por lo gene-
ral, estas proteínas interactúan de alguna manera; por
ejemplo, el operón trp de la bacteria Escherichia coli
codifica componentes de tres enzimas que actúan jun-
tas para sintetizar el aminoácido triptófano. Los ope-
rones controlan la expresión de genes, como los que
regulan su transcripción. Los genes de las bacterias
suelen estar organizados en operones, pero estos son
mucho menos comunes en eucariontes.
El operón fue descubierto mediante la elegante
investigación de Francois Jacob y Jacques Monod, que
trabajaban en extremos opuestos del ático del Instituto
Pasteur de París. Jacob estaba estudiando el bacterió-
fago lambda, un virus que infec ta una E. coli. Monod
estaba analizando las propiedades de la ~-galactosida-
sa, una enzilna que utiliza la E. coli para 1netabolizar
el azúcar lactosa. Una noche de verano de 1958, Jacob
tuvo un ra1nalazo de inspiración: observó una cone-
xión entre la investigación que se Uevaba a cabo en
La expresión de genes en las bacterias a menudo es regulada a través de ope- cada extremo del ático. Jacob reconoció que los genes
rones, grupos de genes que se transcriben como una unidad. Aquí se muestra que inducían la reproducción del fago eran controla-
Escherichia coli, una bacteria común hallada en el tubo digestivo de los mamí- dos de la misma manera que los genes que controla-
feros. (Pasieka/Science Source).
ban la producción de ~-galactosidasa en E. coli. Esto
llevó a una importante colaboración entre Jacob y
Monod; juntos, revelaron finalmente la estructura y la función del operón lac y, en 1965, reci-
bieron el Nobel en Fisiología o Medicina, junto con su colaborador Andre Lwoff.
Después del descubrimiento de Jacob y Monod del operón lac, se descubrieron otros opero-
nes en las bacterias, y una gran cantidad de investigaciones se centró en el mecanismo de fun-
ción de los operones. Pese a la investigación intensiva acerca de cómo actúan los operones, se
sabía mucho 1nenos acerca de por qué existen: ¿por qué los procariontes los tienen, mientras
que la 1nayoría de los eucariontes no? ¿Por qué algunos genes están incluidos en operones y
otros no? Estas preguntas ~ntrigaron a Oleg Igoshin, de la Rice University, y a Christian Ray,
del University of Texas MD Anderson Cancer Center. Igoshin y Ray son biólogos computa-
cionales, una nueva clase de científicos que utilizan mate1nática compleja para estudiar
problen1as fundamentales de la biología. Igoshin y Ray adoptaron lo que podría parecer un
enfoque improbable de la cuestión del porqué de la existencia de los operones. En lugar de
cultivar bacterias, inducir mutaciones y examinar el DNA, desarrollaron una serie de modelos
matemáticos de redes de genes que podían correrse en un ordenador. Con estos modelos, ob-
servaron cómo funcionaban los genes cuando estaban agrupados en operones y cuando esta-
ban regulados por separado.
443
444 CAPITULO 16

Igoshin y Ray sabían que hay fluctuaciones aleatorias naturales en los niveles de transcrip-
ción y traducción. Debido a estas f luctuaciones (ruido en el sistema), las cantidades de diferen-
tes proteínas pueden variar en forma amplia; la cantidad de proteína sintetizada puede ser más o
m enos que óptima para el crecimiento y la supervivencia de la célula. Igoshin y Ray postularon
que la coordinación de la transcripción de varios genes a través de una estructura de operones
podría reducir el ruido en el sistema y permitir un control 1nás fino de la expresión génica.
Para investigar su hipótesis, Igoshin y Ray corrieron modelos co1nputarizados para seis tipos
diferentes de interacciones entre los productos de genes que es posible hallar en operones. Sus
modelos mostraron que algunos tipos de interacciones proteicas que agrupan genes en operones
reducen el ruido bioquímico. Para otros tipos de interacciones proteicas, en realidad la ag1upa-
ción de genes en operones aumenta el 1uido. Por lo tanto, la estructura de los operones tiene el
potencial de au1nentar o reducir el ruido según qué genes se agrupen.
Luego, Igoshin y Ray examinaron los genes hall ados realmente en operones de E. coli y des-
cub1ieron que los operones con genes cuyas interacciones reducen el ruido eran n1ás frecuentes
que lo esperable por azar. Por el contrario, los operones cuyas interacciones génicas aumentan
el ruido eran menos comunes que lo esperado. Su conclusión fue que los operones han evolu-
cionado como una manera de que la célula acople la transcripción de genes para reducir el
ruido bioquímico en la célula, lo que le permite ajustar de manera más fina las proporciones
relativas de proteínas codificadas por el operón. lgoshin y Ray especularon que los operones
son menos comunes en los eucariontes porque el volumen celular más grande reduce el efecto
de las fluctuaciones aleatorias y, quizá, porque los eucariontes tienen otros mecanismos (como
los cambios de la estructura de la cromatina) que acoplan la transcripción de genes.

E ste es el primero de dos capítulos acerca de regulación géni-

ca, los mecanismos y sistemas que controlan la expresión de
genes. En este capítulo, considerarnos sistemas de regulación
génica en las bacterias. Comenzamos por analizar la necesidad de
regulación génica, los niveles a los que se controla la expresión
génica y la diferencia entre genes y elementos reguladores. Lue-
go, examinamos la estructura y la función de los operones, y con-
sideramos la regulación génica en algunos ejemplos específicos
de operones, como el operón lac estudiado por Jacob y Monod.
Por últin10, discutiremos varios tipos de regulación génica bacte-
1iana que son facilitados por moléculas de RNA. En el capítulo
17, se estudiarán los mecanismos de regulación génica en los
genomas eucari ontes.
16.1 La regulación de la expresión génica
es crucial para todos los organismos
Un tema impo11ante de la genética molecular es el dogma central,
que afirma que la información genética fluye del DNA al RNA a
las proteínas (véase fig. 10-16). Si bien el dogma central suminis-
tró la base molecular para la conexión entre genotipo y fenotipo,
no consideró una cuestión crucial: ¿cómo se regula el flujo de
información a lo largo de la vía molecular?
Considérese a la E. coli, una bacteria que res ide en el intestino
grueso. Sus hábitos ali111entarios determinan por compl.e to los
nutrientes disponibles para esta bacteria: no puede buscar nutri-
ción externa cuando los nutrientes son escasos ni alejarse cuando
se enfrenta a un medio desfavorable. La E. coli compensa su inca-
pacidad de alterar el 1nedio externo mediante flexibilidad interna.
Por ejemplo, si hay glucosa, la E. coli la utiliza para generar ATP;
si no hay g lucosa, utiliza lactosa, arabinosa, maltosa, xilosa o
cualquiera de una serie de otros azúcares. Cuando hay aminoáci-
dos, la E. coli los utiliza para sintetizar proteínas; ante la ausen-
cia de un aminoácido pat1icular, la E. coli produce las enzimas
necesarias pai·a sintetizarlo. Por lo tanto, la E. coli responde a los
cambios ambientales mediante una rápida modificación de su bio-
química. Sin embargo, esta flexibilidad bioquímica conlleva un
alto precio. Producir todas las enzimas necesat·ias para cada con-
dición runbiental sería costoso desde el punto de vista energético.
Por lo tanto, ¿cón10 n1antiene la E. coli la flexibilidad bioquímica
a la vez que optimiza la eficiencia energética?
La respuesta es a través de la regulación génica. Las bacterias
transpo1t.an la información genética para sintetizar numerosas
proteínas, pero solo un subgrupo de esta información genética se
expresa por vez. Cuando cambia el ambiente, se expresan nuevos
genes y se sintetizan las proteínas apropiadas para el nuevo am-
biente. Por ejemplo, si aparece una fuente de carbono en el ambien-
te, se transcriben y se traducen con rapidez los genes que codifican
enzimas que captan y metabolizan la fuente de carbono. Cuando
esta fuente de carbono desaparece, se silencian los genes que co-
difican estas enzimas.
Los organismos eucariontes mu1ticelulares enfrentan un proble-
ma diferente. Las célul as individuales de un organismo multice-
lular están especiali zadas en tareas particulares. Por ejemplo, las
proteínas producidas por una célula nerviosa son bastante distin-
tas de las producidas por un leucocito. Aunque difieren en forma
y función, una célula nerviosa y una sanguínea llevan las 1nis1nas
inst1ucciones genéticas.
El desafío de un organismo multicelular es inducir la especiali-
zación de células que tienen un conjunto común de instrucciones
genéticas (el proceso de desan·ollo). Este desafío se cumple a tra-
vés de la regulación génica: todas las células del organismo por-
tan la núsn1a inforn1ación genética, pero solo un sub grupo de
genes se expresa en cada tipo celular. Los genes necesarios para
otros tipos celulares no se expresan. Por lo tanto, la regulación
génica es la clave tanto de la flexibilidad unicelulai· como de la
especialización multicelulai·, y es crucial para el éxito de todos los
organismos vivientes.
 Cont rol de la expresión génica en las bacterias 445

CONCEPTOS
En las bacterias, la regulación génica mantiene la flexibilidad interna,
y activa y desactiva genes en respuesta a cambios amb ientales. En
los organismos eucariontes multicelulares, la regu lación génica indu-
ce la diferenciación celular.
CONCEPTOS
Los elementos reguladores son secuencias de DNA que no son
transcritas pero que afectan la expresión de genes. Los mecanismos
de control positivo estimu lan la expresión génica, mientras que el
control negativo la inhibe.

Los mecanismos de regulación génica se investigaron por pri-
mera vez en células bacterianas, en las que la disponibilidad de
mutantes y la facilidad de manipulación de laboratorio posibilita-
ron la dilucidación de los mecanismos. Cuando comenzó el estu-
dio de estos mecanis mos en célul as eucari ontes, la regulación de
genes bacterianos p areció diferir claram ente de la regulación
de genes eucariontes. Sin embargo, a m edida que se h a acumula-
do más información acerca de la regulación génica, han surgido
una serie de temas cornunes. En la actualidad , se reconoce que
muchos aspectos de la regulación génica en células bacterianas y
eucariontes son similares. Antes de examinar elementos específi-
cos de regulación génica bacteriana (este capítulo) y regulación
génica eucarionte (cap. 17), consideraremos en forma sucinta
algunos temas de regulación génica comunes a todos los orga-
rusmos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
¿ Qué es un gen constitutivo?
Niveles de regulación génica
Tanto en bacte1ias como en eucariontes, los genes pueden ser
regulados en una serie de niveles de la vía de flujo de información
del genotipo al fenotipo (fig. 16-1). Primero, la regulación puede
efectuarse por n1odificación de la estructura del D NA o de la cro-
matina; este tipo de regulación génica tiene lugar fundamental-
mente en eucariontes. Las modificaciones del DNA o de su emp a-
quetamiento pueden ayudar a determinar qué secu encias están
DNA compacto Niveles de control génico

Genes y elementos reguladores

Al considerar la regulación génica tanto en bacterias como en
eucariontes, debe1nos distinguir entre secuencias de DNA que son Modificación de la estructura
transcritas y secuencias de DNA que regulan la expresión de otras
DNA relajado
secuencias. Los genes estructurales codifican proteínas que se
utilizan en el n1etabolismo o en la bi osíntesis o que desempeñan
un papel estructuraJ en la célula. Los genes reguladores son aque-
llos cuyos productos, RNA o p roteínas, interactúan con otras
Transcripción
secuencias de DNA y afectan la transcripción o la traducción de
esas secuencias . En m uchos casos, los productos de los genes
Pre-mRNA
reguladores son proteínas de unión a DNA (aunque moléculas de
RNA ta1nbién afectan la expresión génica). Las bacterias y los
eucariontes utili zan genes regu ladores para controlar la expresión
Procesamiento del mRNA
de muchos de sus genes estructurales. Sin embargo, algun os genes
estructurales, en particular aquellos que codifican funciones celula-
res esenciales, se expresan continuamente y se dice que son cons- mRNA procesado
_ _ _ _ _ _ _ __,,AAAA
titutivos. Por lo tanto, los genes constitutivos no son regulados.
Asinlismo, encontraremos secuencias de DNA que no son Estabilidad del RNA
transcritas en absoluto pero que, aun así, desempeñan un papel en Traducción
la regulación de genes y otras secuencias de DNA. E stos ele1nen-
tos reguladores afectan la expresión de secuencias a las que están
físicamente ligados. Los elementos reguladores son comunes en
Proteína
células tanto bacterianas co1no eucariontes, y gran p arte de la {inactiva)
regul ación génica de ainbos tipos de organis1nos tiene lugar
n1edian te la acción de proteínas producidas por genes reguladores
que reconocen los elementos reguladores y se unen a ellos.
La regulación de la expresión génica p uede producirse por pro-
cesos que estimulan la expresión génica, denominado control
positivo, o por procesos que inhiben la expresión génica, denomi-
l Modificación postraducción

Proteína modificada
nado control negativo . Las bacterias y los eucariontes utilizan {activa)
n1ecanismos de control positivo y negativo p ara regulai· sus genes.
Sin embargo, el control negativo es más importante en las bacte-
•
rias, mientras que es más probable que los eucariontes utilicen Figura 16- 1. La expresión génica puede controlarse en
1necanisn1os de control positivo. múltiples niveles.
446 CAPITULO 16
disponibles para la transcripción o la velocidad a la que se trans-
criben las secuencias. La metilación del DNA y los cambios de la
cromatina son dos procesos que desempeñan un papel fundainen-
tal en la regulación génica.
Un segundo punto en el que se puede regular un gen es el nivel
de la transcripción. Por razones de economía celular, tiene senti-
do limitar la producción de una proteína en etapas tempranas del
proceso, y la transcripción es un punto importante de regulación
génica en células tanto bacterianas como eucariontes. Un tercer
punto potencial de regulación génica es el procesamiento del
n1RNA. El mRNA eucarionte sufre extensas modificaciones antes
de ser traducido: se añade un casquete 5', se escinde y se polia-
denila el extremo 3', y se eliminan intrones (véase cap.14). Estas
n1odificaciones determinan la estabilidad deJ mRNA, su movi-
miento hacia el citoplasma, la posibilidad de traducir el mRNA,
la velocidad de traducción y la secuencia de aminoácidos de la
proteína producida. Cada vez hay más evidencia de que una serie
de mecanismos reguladores de las células eucai·iontes operan en
el nivel del procesa1niento del 1nRNA.
Un cuarto punto para el control de la expresión génica es la
regulación de la estabilidad del RNA. L a cantidad de proteína
producida depende no solo de la cantidad de mRNA sintetizado,
sino también de su velocidad de degradación. Un quinto punto de
regulación génica corresponde al nivel de la traducción, un proce-
so co1nplejo que requiere una gran cantidad de enzimas, factores
proteicos y 1noléculas de RNA (véase cap. 15). Todos estos fac-
tores, así como la disponibilidad de aminoácidos, afectan la ve-
locidad de producción de proteínas y, por lo tanto, representan
puntos en los que es posible controlar la expresión génica. La tra-
ducción ta1nbién puede ser afectada por secuencias del mRNA.
Por último, muchas proteínas son modificadas después de la
traducción (véase cap. 15), y estas 1nodificaciones inciden en si
Jas proteínas se tornan activas; los genes pueden ser regulados
mediante procesos que afectan la modificación postraducción.
Las actividades reguladoras en uno o todos estos puntos pueden
influir en la expresión génica.
Proteínas de unión a DNA
Gran parte de la regulación génica en las bacterias y los eucarion-
tes se logra mediante proteínas que se unen a secuencias de DNA
(a) Hélice-giro-hélice (b) Dedos de cinc
Hélice Giro Hélice
\
\
Hélice de
\ Giro Hélice de unión 1
unión a DNA al dímero __) Dedo
Figura 16-2. Las proteínas de unión a DNA pueden agruparse en varios tipos sobre la base de sus
estructuras o motivos.
CONCEPTOS
La expresión génica puede ser controlada en cualquiera de una serie
de niveles a lo largo de la vía molecular desde el DNA a la proteína,
como estructura del DNA o la cromatina, transcripción, procesa-
miento del mRNA, estabilidad del RNA, traducción y modificación
postraducción.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿Por qué la transcripción es un nivel particularmente importante de
regulación génica tanto en bacterias como en eucariontes?
y afectan su expresión. Por lo general, estas proteínas reguladoras
tienen pa1tes funcionales discretas ( conocidas como dominios,
que suelen consistir en 60 a 90 anlinoácidos), responsables de la
unión a DNA. Dentro de un do1ninio, solo algunos aininoácidos
entran realmente en contacto con el DNA. Estos aminoácidos (la
mayoría de Jas veces, asparagina, glutarnina, glicina, lisina y argi-
nina) a menudo forman puentes de hidrógeno con las bases o inte-
ractúan con el esqueleto axial de azúcar-fosfato del DNA. Muchas
proteínas reguladoras tienen donunios adicionales que pueden
unirse a otras moléculas, por eje1nplo, otras proteínas regulado-
ras. Mediante la unión física aJ DNA, estas proteínas pueden afec-
tar la expresión de un gen. La mayoría de las proteínas de unión
a DNA se unen en forn1a dinámica ( o sea, de manera transitoria)
y liberan el DNA y otras proteínas reguladoras. Por lo tanto, aun-
que pueden per1nanecer unidas al DNA la mayor parte del tiem-
po, la unión nunca es permanente. Este carácter dinámico impli-
ca que otras moléculas pueden con1petir con las proteínas de
unión a DNA por los sitios reguladores del DNA.
Las proteínas de unión a DNA pueden agruparse en varios tipos
distintos sobre la base de una estructura característica, denomina-
da motivo, hallada dentro del dominio de unión. Los motivos son
estructuras sin1ples, como hélices alfa, que pueden encajar en el
sw·co mayor del DNA. Por ejemplo, el motivo hélice-giro-hélice
(fig. 16-2a), que consiste en dos hélices alfa conectadas por un
giro, es común en las proteínas reguladoras bacterianas. El motivo
dedo de cinc (6g. 16-2b), frecuente en numerosas proteínas regu-
(e) Cremallera de leucina
•• •• •• •• •• ..
Cremallera
 Control de la expresión génica en las bacterias 447

Cuadro 16-1 Motivos comunes de unión a DNA

Motivo Localización Características Sitio de unión en el DNA

Hélice-giro-hélice Proteínas reguladoras bacterianas; moti- Dos hélices alfa Surco mayor
vos relacionados de proteínas eucariontes
Dedo de cinc Proteínas reguladoras y otras proteínas Bucle de aminoácidos con cinc en la base Surco mayor
eucariontes

Receptor de Proteínas eucariontes Dos hélices alfa perpendiculares con cinc Surco mayor y esquelet o de
esteroides rodeado de cuatro residuos cisteína DNA

Cremal lera de Factores de transcripción eucariontes Hélice de residuos de leucina y un brazo bá- Dos surcos mayores adyacen-
leucina sico; dos residuos de leucina interdigitados tes

Hélice-bucle-hélice Proteínas eucariontes Dos hélices alfa separadas por un bucle de Surco mayor
aminoácidos

Homeodominio Proteínas reguladoras eucariontes Tres hélices alfa Surco mayor

laderas eucariontes, consiste en un bucle de aminoácidos que con-
tiene un ion cinc. La cremallera de leucina (fig. 16-2c) es otro
motivo hallado en diversas proteínas de unión eucaiiontes. El cua-
dro 16-1 resume estos y otros motivos comunes de unión a DNA.
CONCEPTOS
Las protefnas reguladoras que se unen al DNA t ienen motivos comu-
nes que interactúan con secuencias del DNA.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿Cómo interactúan con el DNA los aminoácidos de las proteínas de
unión al DNA?
a. Formando enlaces covalentes con bases del DNA.
b. Formando puentes de hidrógeno con bases del DNA.
c. Formando enlaces covalentes con azúcares del DNA.
16.2 Los operones controlan la transcripción
en las células bacterianas
Una diferencia significativa entre el control de genes bacterianos
y eucariontes reside en la organización de genes funcionalinente
relacionados. Como se comentó en la introducción de este capítu-
lo, muchos genes bacterianos que ti enen funciones relacionadas
están agrupados y bajo el control de un único promotor. A menu-
do, estos genes se transcriben juntos en un solo mRNA. Un grupo
de genes estructurales bacterianos que se transcriben juntos (con
su promotor y secuencias adicionales que controlan la transcrip-
ción) se denomina operón. El operón regula la expresión de los
genes estructurales controlando la transclipción que, en las bacte-
1ias, suele ser el nivel más importante de regulación génica.
Estructura de los operones
La figura 16-3 ilustra la organización de un operón típico. En un
extremo del operón, hay un conjunto de genes estructurales, mos-

n operón es un grupo de genes estructurales Operón

más secuencias que controlan su transcripción.
Genes estructurales

RNA
Promotor 1 polimerasa mlil!.. <&irea:
1
(Transcripción ----~----.A.
~ que puede unirse al sitio
1
!Transcripción

fÍun gen regulador

independiente -con
su propio promotor-
codifica una proteína
1.... reiuladora ...
mRNA - - - •
! operador para regular la
transcripción del mRNA.
mRNA
l
Proteína
Traducción

Proteínas (enzimas) A
l
Traducción

B
t l
e
reguladora
GiLos productos de mRNA
[ catalizan reacciones de
a vía bioquímica.

Vía bioquímica •-- ■ A-- ♦

Precursor Productos Producto
Figura 16-3. Un operón es una unidad de transcripción única que
X intermedios Y
incluye una serie de genes estructurales, un promotor y un operador.
448 CAPITULO 16
tractos en la figura 16-3 como gen a, gen b y gen c. Estos genes
estructurales se transcriben a un solo mRN·A, que es traducido
para producir las enzimas A, B y C. Estas enzimas llevan a cabo
una serie de reacciones bioquímicas que convierten a la molécula
precursora X en el producto Y. La transcripción de los genes
estructurales a, b y c se encuentra bajo el control de un promotor,
que se localiza en dirección 5' respecto del prilner gen estructu-
ral. La RNA polimerasa se une al promotor y después se ,nueve
en dirección 3' y transcribe los genes estructurales.
Un gen regulador ayuda a controlar la transcripción de los
genes estructurales del operón. A unque afecta la función del ope-
rón, el gen regulador no se consider a parte de este. Tiene su pro-
pio promotor y se transcribe a un mRNA corto, que es traducido
a una proteína pequeña. E sta proteína reguladora puede unirse
a una región del operón denominada operador y dete1mina si es
posible producir la transcripción. Por lo general, el operador se
superpone con el extremo 3' del promotor y, en ocasiones, con el
extremo 5' del primer gen estructural (véase fig. 16-3).
CONCEPTOS
Los genes funcionalmente relacionados de las células bacterianas
suelen agruparse en una sola unidad de transcripción denominada
operón. Un operón típico incluye varios genes estructurales, un pro-
motor para los genes estructurales y un sitio operador al que se une
el producto de un gen regulador.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
¿Cuál es la diferencia entre un gen estructural y un gen regulador?
a. Los genes estructurales se transcriben a mRNA, pero los genes
reguladores, no.
b. Los genes estructurales tienen estructuras complejas; los genes
regu ladores, estructuras simples.
c. Los genes estructura les codifican proteínas que funcionan en la
estructura de la célula; los genes reguladores llevan a cabo reac-
ciones metabólicas.
d. Los genes estructura les codifican proteínas; los genes reguladores
controlan la transcripción de los genes estructurales.
Control negativo y positivo: operones
inducibles y reprimibles
Hay dos tipos de control de la transcripción: control negativo, en
el que una proteína reguladora es un represor que se une al DNA
e inhibe la transcripción, y control positivo, en el que una prote-
ína reguladora es un activador que esti1nula la transcripción. Los
operones también pueden ser inducibles o reprimibles. Los ope-
rones inducibles son aquellos en los que la transcripción suele
estar desactivada (no se produce); algo debe suceder para inducir
la transcripción o activarla. Los operones reprimibles son aque-
llos en los que la transcripción normalmente está activa (tiene
lugar); algo debe suceder para reprimir la transcrípción o desacti-
varla. En las siguientes secciones, consideraremos al gunas varie-
dades de estos mecanismos de control básicos.
OPERONES INDUCIBLES NEGATIVOS En un operón inducible nega-
tivo, el gen regulador codifica un represor activo que se une fácil-
mente al operador (fig. 16-4a.). Como el sitio operador se super-
pone con el sitio promotor, la unión de esta proteína al operador
bloquea físicamente la unión de RNA polimerasa al promotor y
evita la transcripción. Para que se produzca la transcripción, algo
debe suceder que impida la unión del represor en el sitio opera-
dor. Se dice que este tipo de sistema es inducible porque la trans-
cripción normalmente está desactivada (inhibida) y debe ser acti-
vada (inducida).
La transcripción se activa cuando una molécula p equeña, un
inductor, se une al represor (fig. 16-4b). Las proteínas regulado-
ras suelen tener dos sitios de unión: uno que se une al DNA, y
otro que se une a una pequeña n1olécula como un inductor. La
unión del inductor (precursor V en la fig. 16-4b) modifica la
forma del represor y evita que se una al D NA. Las proteínas de
este tipo, que cambian de forma al unirse a otra molécula, se de-
nominan proteínas alostéricas.
Cuando el inductor está ausente, el represor se une al opera-
dor, no se transcriben los genes estru cturales y no se sintetizan
las enzimas D, E y F (que n1etabolizan al precursor V) (véase
fig. 16-4a). E ste mecanismo es adaptativo: como no se dispone
de precursor V, la síntesis de enzimas sería poco económica
cuando no cuentan con ningún sustrato para 1netabolizar. En
cuanto hay precursor V di sponible, parte de este se une al repre-
sor y lo torna inactivo e incapaz de unirse al sitio operador. Aho-
ra, la RNA polimerasa puede unirse al promotor y tran scribir los
genes estructurales. Después , el mRNA resultante es traducido a
enzimas D , E y F, que convierten el sustrato V en producto W
(véase fig. 16-4b). De esta manera, un operón con control n ega-
tivo inducible regula la síntesis de las enzimas de manera econó-
mica: las enzimas se sinteti zan solo cuando su sustrato (V) está
disponibl e.
Por lo general, los operones inducibles controlan proteínas que
llevan a cabo procesos de degradación, proteínas que descompo-
nen moléculas. Para este tipo de proteínas, el control inducible
tiene sentido, porque las proteínas no son necesarias a menos que
haya sustrato (que es degradado por las proteínas).
O PERONES REPRIMIBLES NEGATIVOS Algunos operones con control
negativo son reprimibles, lo que significa que normalmente tiene
lugar la transcripción y que debe ser desactivada o reprimida. En
este tipo de operón, la proteína reguladora también es un represor,
pero se sintetiza en una forma inactiva que no puede unirse, por
sí misma, al operador. Como no hay ningún represor unido al ope-
rador, la RNA p olimerasa se une fácilmente al promotor y trans-
cribe los genes estructurales (fig. 16-Sa).
Para desactivar la transcripción, algo debe suceder que active al
represor. Una molécula pequeña denominada correpresor se une
al represor y lo vuelve capaz de unirse al operador. En el eje1nplo
ilustrado (véase fig. 16-Sa), el producto (U) de la reacción meta-
bólica es el con·epresor. En tanto el nivel del producto U sea alto,
estará disponible para unirse al represor y activarlo, lo que evita
la transcripción (fig. 16-Sb). Con el operón reprimido, no se sin-
tetizan las enzünas G, H e I y no se produce más U a partir del
precursor T. Sin e1nbargo, cuando se consume todo el producto U,
el represor ya no es activado por este y no puede unirse al oper a-
dor. La inactivación del represor permite la transcripción de los
genes estructurales y la síntesis de enzimas G, H e I, lo que deter-
 Control de la expresión génica en las bacterias 449

Operón inducible negativo

RNA
po limerasa
(a) Sin inductor presente ')( Genes estructura les
~
Promotor Re ufa o _ _ _ PromoW • •·

1 t
Transcripció~ [Ausencia de transcripción
y traducción
1 La proteína regu ladora es un represor
t
Proteína
regulad~ra
activa
Q que se une .al operador e impide la
·- -===:::::¡ transcripción de los genes estructurales. j

RNA
po limerasa
(b) Inductor presente
\
Precursor V
que actúa
,,
· Qperador · · ·· - r ''
como inductor /
• " , __

í
1
Transcripción
y traducción "--. ~ 'K
Transcripción
y traducción

Proteína
regu ladora
•
Cuando está presente el inductor, este
+ +
E F

activa
se une al regulador, lo que imposibilita
la unión del regu lador con el operador.
Se produce la transcripción .

Vía bioquímica e -~•► ■

Precursor
• --•► ♦
Productos Producto
•
V intermedios W
Figura 16-4. Algunos operones son inducibles.

mina la conversión del precursor T en producto U. Al igual que
los inducibles, los operones reprimibles son económicos: las enzi-
mas solo se sintetizan según sea necesario.
Por lo general, los operones reprimibles controlan proteínas
que llevan a cabo la biosfntesis de moléculas necesa1ias en la
célula, por ejemplo, aminoácidos. Para estos tipos de operones, el
control reprimible tiene sentido porque la célula siempre necesita
el producto de las proteínas. En consecuencia, estos operones
están normalmen te activados y se desactivan cuando ya hay con-
centraciones adecuadas del producto.
Obsérvese que tanto el siste1na inducible como el reprimible
que hemos considerado son formas de control negativo, en el que
la proteína reguladora es un represor. Ahora, consideraremos el
control positivo, en el que una proteína reguladora estin1ula la
transcripción.
CONTROL POSITIVO Con control positivo, una proteína reguladora
es un activador: se une al DNA (por lo general, en un sitio distin-
to del operador) y estimula la transcripción. El control positivo
puede ser inducible o reprimible.
En un operón inducible positivo, la transcripción normaln1ente
está desactivada, porque la proteína reguladora (un activador) se
produce en una forma inactiva. La transcripción tiene lugar cuan-
do un inductor se ba unido a la proteína reguladora y ha activado
el regulador. Lógicamente, el inductor debería ser el precursor de
la reacción controlada por el operón, de manera que solo se sin-
tetizarían las enzimas necesarias cuando estuviera presente el sus-
trato para su reacción.
Un operón positivo trunbién puede ser reprünible; la proteína
reguladora se produce en una forn1a que se une fácilmente al
DNA, lo que significa que la transcripción normalmente tiene
lugar y debe ser reprimida. La transcripción se inhibe cuando una
sustancia se une al activador y lo torna incapaz de unirse al DNA,
de manera que ya no se estin1ula la transcripción. En este caso, el
producto (P) de la reacción controlada por el operón sería, lógica-
mente, la sustancia represora, porque sería económico que la
célula evitara la transcripción de genes que permiten la síntesis de
P cuando ya se dispone de gran cantidad de P. La figura 16-6
resume las características del control positivo y negativo en ope-
rones inducibles y reprinúbles. ►
450 CAPITULO 16

Operón reprimible negativo

RNA
po limerasa
(a) Ausencia de producto U Genes estructurales

PromofL~i,i§21•Gllf1§•l41 uíBJrefh C&lreii 1

Transcripción Transcripción
y traducción y traducción

Proteína reguladora
7 La proteína reguladora es
un represor inactivo, incapaz
A
fÍ Por lo tanto, t iene lugar
la transcripción de los
inactiva (represor) de unirse al operador. genes estructurales.

Enzimas
-+ H

+• +
1

Vía bioqu ímica

T
• •
Precursor Productos
intermedios
•
Producto U
(correpresor)

RNA Se acumulan niveles

(b) Producto U presente po limerasa ~ producto U.

•
Producto U

Transcripción \ _ .. a Ausencia de t ranscripción

y traducción ~ ...,

+ )
Proteína reguladora ~ Ó EI producto U se une~ ~ lo que la torna activa y 7 , ... y de esta manera7
inactiva (represor) l protelna reguladora,... J l J evita la transcripción.:J
capaz de unirse al operador ..

Figura 16-5. Algunos operones son reprimibles.

El operón /ac de E. coli

CONCEPTOS
'

En 1961, Fran9ois Jacob y Jacques Monod describieron el "mo-

Hay dos tipos básicos de control de la transcripción: negativo y posi-
t ivo. En el control negativo, cuando una proteína reguladora (repre-
sor) se une al DNA, se inh ibe la transcripción; en el control positivo,
cuando una proteína reguladora (activador) se une al DNA, se esti-
mu la la transcripción. A lgunos operones son inducibles; la transcrip-
ción normalmente está desactivada y debe ser activada. Otros ope-
rones son reprimibles; la transcripción normalmente está activada y
debe ser desactivada.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
En un operón reprimible negativo, la proteína reguladora se sintetiza
como
a. un activador activo,
b. un activador inactivo,
c. un represor activo,
d. un represor inactivo.
delo de operón" para el control genético del metabolismo de la
lactosa en E. coli. Este trabajo e investigaciones ulteriores
sobre la ooenéti ca del metabolismo de la lactosa establecieron
. . _,,
que el operón era la unidad básica de control de la transcr1pc1on
en las bacterias. Pese al hecho de que en esa época no había
ningún método para determinar las secuencias de nucleótidos,
Jacob y Monod dedujeron la estructura del operón genética-
mente analizando las interacciones de las mutaciones que inter-
ferían con la regulación normal del metabolisino de la lactosa.
Examinaremos los efectos de algunas de estas mutaciones des-
pués de observar cómo regula el metabolismo de la lactosa el
operón lac.
METABOLISMO DE LA LACTOSA La lactosa es un hidrato de carbo-
no importante hallado en la leche; puede ser metabolizada por
bacte1ias E. coli que residen en el intestino de los mamíferos. La
lactosa no difunde fácilmente a través de la membrana celular de
E. coli y debe ser transportada en forma activa hacia la célula por
 (a) lnducible (c) lnducible
negativo - -RNA polimerasa positivo
_ ., .,.,
)(

Represor
l ~ nscripción desactivadal Activador
l 1Transcripción desactivada '
activo inactivo

:- -::!!!!!!! ! -.
-
l Transcri pción activada
¡
J
Transcripción activada

-l- •
·-
l
~

lEl sustrato torna

inactivo al represor. Sus! a_t_o_ _ _ _
Pr•o! ctv
~ strato torna
l_activo al activador.
-----•-----•
(b) Reprimible (d) Reprimible
negativo positivo

__ -
·----·
,
.- - ~... ", .- - - =
. .-~---·
><- - --''-- --
Transcripción activada
~ Activador
l Transcripción activada

activo

'
•-----•

__4"-
~~
l l
ranscripción desactivada
' __,.,,
. "'1---.
)(
Transcripción desactivada

ÍEl producto torn~

~ ivo al represo~
I - - - - - - - - - - - -- •
~
1
-A: : ::-------=====
El producto torna
inactivo al activador.
1
•

Figura 16-6. Resumen de las características de control positivo y negativo en operones

inducibles y reprimibles.

La perm~asa trans-
,)-•,,... r'- Lactosa
porta activamente "--./ "--"--./ extracelular
lactosa al interior
de la célula, .. . r r Permeasa Membrana celular
1

... donde la enzima

!3-galactosidasa la degrada I
en galactosa y glucosa. _J

~-gala~ sa
0-0Lactosa
La 13-galactosidasa 1
también convierte
~-galactosidasa
~b + b
la lactosa en el
compuesto re lacio-
t Galactosa Glucosa

nado alolactosa .. .
~-galactosidasa
Alolactosa
_L
Figura 16-7. La lactosa, un importante hidrato de • ... y convierte la alolactosa
carbono hallado en la leche, consiste en dos azú- en galactosa y glucosa .
cares de seis carbonos unidos.
451
452 CAPITULO 16

la proteína permeasa (fig. 16-7). Para utilizar lactosa como fuen- agrega lactosa al medio y hay ausencia de glucosa, la velocidad
te de energía, la E. coli debe degradarla primero a glucosa y ga- de síntesis de las tres proteínas aumenta en fo nna simultánea alre-
lactosa, una reacción catalizada por la enzin1a ~-galactosidasa. dedor de mil veces en el término de 2 a 3 minutos. Este estímulo
Asimismo, esta enzima puede convertir lactosa en alolactosa, un de la síntesis proteica se debe a la transcripción de lacZ, lacY y
compuesto que desen1peña un papel importante en la regulación lacA, y ejemplifica la inducción coordinada, la síntesis simultánea
del metabolis1no de la lactosa. El operón lac también produce una de varias proteínas, estimulada por una molécula específica, el
tercera enzima, tiogalactósido transacetilasa, cuya función en el inductor (fig. 16-Sb).
metabolismo de la lactosa aún no se conoce con claridad. U na Si bien aquí la lactosa parece ser el inductor, en realidad , la alo-
posible fu nción es la desintoxicación, que evita la acumulación de lactosa es responsable de la inducción. Localizado en dirección 5'
tiogalactósidos que son transportados al interior de la célula junto respecto de lacP , hay un gen regulador, lacl, que tiene su propio
con la lactosa por la lactosa permeasa. promotor (P 1). El gen lacl se transcribe a un mRNA corto que es
traducido a un represor. El represor consiste en cuatro polipépti-
REGULACIÓN DEL OPERÓN LAC El operón tac es un ejemplo de un dos idénticos y tiene dos tipos de sitios de unión; un tipo de sitio
operón inducible negativo. Las enzimas ~-gaJactosidasa, permea- se une a la aJolactosa, y el otro, al DNA. En ausencia de lactosa
sa y transacetilasa son codificadas por genes estructurales adya- (y, por lo tanto, de alolactosa), el represor se une al sitio del ope-
centes del operón lac de E. coli (fig. 16-Sa) y tienen un promotor rador lac, lacO (véase fig. 16-Sa). Jacob y Monod mapearon el
común (lacP en la fig. 16-Sa). La ~-galactosidasa es codificada operador a una posición adyacente al gen lacZ; la secuenciación
por el gen lacZ; la permeasa, por el gen lacY; la transacetilasa, por de nucleótidos más reciente ha den1ostrado que en realidad el
el gen lacA. Cuando la lactosa está ausente del n1edio en el que operador se superpone con el extren10 3' del promotor y el extre-
crece E. coli, se producen pocas moléculas de cada proteína. Si se mo 5' de lacZ (fig. 16-9).

Operón
El operón /ac Operador
RNA
(a) Ausencia de lactosa polimerasa r->--.
la e_________________
O Genes estructurales ___
Gen regulador
( lac 1) tacZ tac Y tacA
p1 - -;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;;
lacP

Transcripción Ausencia de transcripción

y traducción

En ausencia de lactosa, la proteína

Proteína reguladora • 'a / reguladora (un represor) se une al
activa (represor) . . . operador e inhibe la transcripción.

Operador
taco
RNA
r->--.
(b) Presencia de lactosa poli meras a

\
.. -
Transcripción Transcripción
y traducción y traducción

Proteína reguladora •
~
¡• ... que después se une a la
proteína reguladora y la
• La protefna
reguladora no puede
d ~-y se transcriben y
I ~,..aducen los genes
'
activa torna inactiva. un irse al operador ... ~ ructurales. _J
Proteína reguladora
inactiva (represor)
~ Enzimas -
Transaceti lasa
Alolactosa\ p-galactosída~rmeasa

♦ Glucosa
- - - - - - - - --
ando hay lactosa, part:Se convierte
alolactosa,...
~ ~~-----------La-•
P-c'9afaq .d Lactosa • Galactosa
0s1 asa

Figura 16-8. El operón /ac regula el metabolismo de la lactosa.


/acP (promotor)
5' TAGGCACCCCAGGCTTT ACACTTT ATGCTTCCGGCTCGT ATGTTGTGTG GAATTGTG AGCGG7'IAACAAmCAC.
3'
;•gil 3~
(secuencia
consenso)
Figura 16-9. En e l operón Jac, e l operador se superpone al promotor y al
extremo 5' del primer gen estructural.
La RNA polimerasa se une al promotor y se mueve por la molé-
cula de DNA transcribiendo los genes estructurales. Cuando el
represor se une al operador, se bloquea la unión de la RNA poli-
merasa y se ünpide la transcripción. En presencia de lactosa, prute
de esta es convertida en alolactosa, que se une al represor y hace
que sea liberado del DNA. Por consiguiente, cuando hay lactosa,
el represor es desactivado, ya no hay bloqueo de la unión de RNA
polimerasa, tiene lugar la transcripción de lacZ, lacY y lacA y se
producen las proteínas lac.
¿Ha perdido la pista en la explicación recién dada para la induc-
ción de las proteínas lac? Podría recordar que se requ iere perme-
asa para transportar lactosa hacia el interior de la célula. Si se
reprime el operón lac y no se produce permeasa, ¿cómo ingresa
lactosa en la célula para desactivar al represor y activar la trans-
cripción? Además, el inductor es en realidad alolactosa, que debe
ser producida a partir de lactosa por la P-galactosidasa. Si hay
represión de la producción de P-galactosidasa, ¿có1no se puede
inducir el metabolismo de la lactosa?
La respuesta es que la represión nunca anula totalmente la
transcripción del operón lac. Aun con represor activo unido al
operador, hay un bajo nivel de transcripción y se sintetizan unas
pocas moléculas de p-galactosidasa, penneasa y transacetilasa.
Cuando aparece lactosa en el medio, la per measa presente trans-
porta una pequeña cantidad de lactosa hacia el interior de la célu-
la. Allí, las pocas moléculas de P-galactosidasa presentes convier-
ten. parte
.,
de la lactosa en alolactosa, que después induce la trans-
cr1pc1on.
Varios compuestos relacionados con la alolactosa también pue-
den unirse al represor tac e inducir la transcripción del operón
lac. Uno de estos inductores es el isopropiltiogalactósido (IPTG).
Si bien el IPTG desactiva al represor y permite la transcripción de
lacZ, lacY y lacA, este inductor no es metabolizado por ~-galac-
tosidasa; por esta razón, a menudo se utiliza IPTG en la investi-
gación para exa1ninar los efectos de la inducción, independiente
del metabolis1no.
CONCEPTOS
El operón lac de E. coli controla la transcripción de tres genes nece-
sarios para el metabolismo de la lactosa: el gen lacZ, que codifica la
p-galactosidasa; el gen lacY, que codifica la permeasa; el gen lacA,
que codifica la t iogalactósido t ransacetilasa. El operón lac es negati-
vo inducible: un gen regulador produce un represor que se une al
Control de la expresión génica en las bacterias 453
Gen Jaez
Represor /ac
I
Región -10 Sitio de
(secuencia iniciación de
consenso) la transcripción
sitio operador y evita la transcripción de los genes estructura les. La
presencia de alolactosa desactiva al represor y permite la transcrip-
ción del operón tac.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
En presencia de alolactosa, el represor tac
a. se une al operador,
b. se une al promotor,
c. no puede unirse al operador,
d. se une al gen regulador.
Mutaciones de /ac
Jacob y Monod dilucidaron la estructura y la función del operón
lac analizando las mutaciones que afectaban el metabolismo de
la lactosa. Para ayudar a definir los papeles de los diferentes
componentes del operón, utilizaron cepas diploides parciales de
E. coli. Las células de estas cepas tenían dos moléculas diferen-
tes de DNA: el cromosoma bacteriano co1npleto y un fragmento
extra de DNA. Jacob y Monod crearon estas cepas al permitir la
conjugación entre dos bacte1ias (véase cap. 9). En la conjugación,
un pequeño fragmento circular de DNA (el plásmido F; véase
cap. 9) se transfiere de una bacteria a otra. El plásmido F utiliza-
do por Jacob y Monod contenía el operón lac, de n1anera que la
bacteria receptora se tornó parcialmente diploide, con dos copias
del operón lac. Empleando diferentes combinaciones de mutacio-
nes del DNA bacteriano y del plásmido, Jacob y Monod determi-
naron que algunas partes del operón lac actúan en forma cis (pue-
den controlar la expresión de genes solo cuando se encuentran en
el 1nisn10 fragmento de DNA), mientras que otras partes actúan
en forma trans (pueden controlar la expresión de genes en otras
molécu las de DNA).
MUTACIONES DE GENES ESTRUCTURALES Jacob y Monod fueron
los primeros en descubrir algunas cepas mutantes que habían per-
dido la capacidad de sintetizar ~-galactosidasa o permeasa (ellos
no estudiaron en detalle tos efectos de las 111utaciones sobre la
enzima transacetilasa, por lo que esta no será considerada aquí).
Las mutaciones de las cepas mutantes se localizaban en los genes
estructurales lacZ o lacY y modificaban las secuencias de amino-
ácidos de las proteínas codificadas por los genes. Sin duda, estas
454 CAPITULO 16

mutaciones afectaban la estructura de .las proteínas, pero no la
regulación de su síntesis.
Mediante el uso de diploides parciales, Jacob y Monod pudie-
ron establecer que las mutaciones de los genes lacZ y lacY eran
independientes y, en general, solo afectaban el producto del gen
en que se producía la mutación. Los diploides parciales con lacz+
tac Y- en el cromosoma bacteriano y lacz- lac y+ en el plásmido
funcionaban en fo1ma normal y producían p-galactosidasa y per-
measa en presencia de lactosa. (El genotipo de un diploide parcial
se escribe separando los genes de cada molécula de DNA con una
barra: lacz+ lacY-J lacz- lacY+). En este díploide parcial, un solo
gen funcional de P-galactosidasa (lacZ+) es suficiente para produ-
cir P-galactosidasa; no hay ninguna diferencia si el gen funcional
de P-galactosidasa se acopla con un gen funcional (lacy+) o
defectuoso (lacY- ) de pe1measa. Lo mismo es váli do para el gen
lacY+.
MUTACIONES DE LOS GENES REGULADORES Jacob y Monod tam-
bién aislaron mutaciones que afectaban la regulación de la pro-
ducción de proteínas. Las mutaciones del gen lacl afectan la
producción tanto de P-galactosidasa como de permeasa, porque
los genes de ambas proteínas se encuentran en el mismo operón y
están regulados en forma coordinada.
Algunas de estas mutaciones eran constitutivas, lo que deter-
minaba que se produjeran proteínas lac en forma continua, en
presencia o ausencia de lactosa. Estas mutaciones del gen regu-
lador se designaron lacJ- . La construcción de diploides parcia-
les demostró que el gen lacJ+ es dominante sobre el gen lacJ- ;
una sola copia de lacJ+ (genotipo lacJ+/ lacJ- ) era suficiente para
la regulación normal de la producción de proteínas. Más aún,
lac/+ restableció el control normal a un operón, aun si este esta-
ba localizado en una molécula de DNA diferente, lo que mostró
que lacJ+ puede tener acción trans. Un diploide parcial con
genotipo lacJ+ lacz-¡ lacJ- lacz+ funcionó normalmente y sinte-
tizó ~-galactosidasa solo en presencia de lactosa (fig. 16-10). En
esta cepa, el gen lacJ+ del cromosoma bacteriano era funcional,
pero el gen lacz- era defectuoso; en el plás1nido, el gen lacJ- era
defectuoso, mientras que el gen lacz+ era funcional. E l hecho de
que un gen lacJ+ pudiera regu lar un gen lacz+ localizado en una
molécula de DNA diferente indicó a Jacob y Monod que el pro-
ducto del gen lacJ+ podía operar en el plásmido o en el cromo-
soma.
Algunas ele las n1utaciones lacl aisladas por estos investigado-
res evitaron la transctipción aLtn en presencia de lactosa. Estas
mutaciones se denominaron como superrepresoras (lacl s), porque
producían represores defectuosos que no podían ser desactivados

(a) RNA
Ausencia de lactosa
po lim erasa

P1

Represor
activo

Represor
mutante
" El gen /ac/+ es dominante en trans:
el represor producido por /ac/+
puede unirse a ambos operadores
RNA
polimerasa
!Transcripción
L inhibida

t y reprimir la transcripción en
ausencia de lactosa.
p
- J

(b) Presencia de lactosa flEn presencia de lactosa, esta

inactiva al represor y se produce
¡3-galactosidasa funcional a partir
del gen lacz+.
P¡ 1+

Lactosa • ,
lacP
------=
Transcripción
Represor y traducción
activo

Represor
•
Represor
inactivo
~-ga lactosidasa
no funcional
mutante

pl
l J

Transcripción
y traducción
Figura 16-10. El diploide parcial lacf+ lazZ- / lac, lacZ.- produce ~galactosidasa solo en
presencia de lactosa, porque el gen lacl es dominante en trans. ~-ga lactosidasa
 Control de la expresión génica en las bacterias 455

RNA
polimerasa
'X
5
I IEI gen /ac/ produce un \
superrepresor que no lacP
~ se une a lactosa.
---,.
Superrepresor 5
f lEI.9en /ac/ es dominante en
trans: el superrepresor se une a
ambos operadores y evita la
Represor
activo u
t
- -.
•
. . . . ~
Represor
RNA
pol imerasa
'X
\
transcripción en presencia y en
ausencia de lactosa.

Lactosa inactivo /acP

Figura 16-11 . El diploide parcial /ac/5 lacr I lacJ+ lacz+ no produce ,l>-galactosidasa ni en pre-
sencia ni en ausencia de lactosa, porque el gen /ac/5 codifica un superrepresor.

por un inductor. Las mutaciones lacP producían un represor con
una alteración de] sitio de unión al inductor, lo que impedía que
este último se uniera al represor; en consecuencia, el represor
sie1npre podía unirse al sitio operador y evitar la transcripción de
los genes lac. Las n1utaciones superrepresoras eran dominantes
sobre lacJ+; los diploides parciales con genotipo lacl s
lacz+flacI+facZ+ eran incapaces de sintetizar ~-galactosidasa o
permeasa, hubiera o no lactosa presente (fig. 16-11).
MUTACIONES DEL OPERADOR Jacob y Monod mapearon otra clase
de mutantes constitutivos en un sitio adyacente a lacZ. Estas
mutaciones se producían en el sitio operador y se denominaron
lacoc (O corresponde a operador y "c" a constitutivo). Las muta-
ciones lacoc modificaban la secuencia de DNA deJ operador, de
manera que la proteína represora ya no era capaz de unirse. Un
diploide parcial con genotipo lacJ+ lacoc lacz+JzacJ+ lacO+ lacz+
mostró síntesis constitutiva de ~-galactosidasa, lo que indicó que
lacoc es dominante sobre laco+.
.E l análisis de otros diploides parciales mostró que el gen lacO
actuaba en cis y solo afectaba a genes de la misma molécula de
DNA. Por ejemplo, un diploide parcial con genotipo lacJ+ taco+
lacZ-!lacJ+ lacOC lacz+ era constitutivo y producía ~-galactosidasa
en presencia o en ausencia de lactosa (fig.16-12a), pero un diploi-
de parcial con genotipo lac/+ laco+ lacZ+JlacJ+ laco c lacZ- produ-
cía P-galactosídasa solo en presencia de lactosa (fig.16-12b). En el
diploide parcial constitutivo (lacf+ laco + lacZ-!lacJ+ lacOC lacz+;
véase fig. 16-12a), la mutación lacoc y el gen funcional lacz+ se
encuentran en la misma n1olécula de DNA; en cainbio, en lacJ+
lacO+ lacz+JzacJ+ lacOC lacz- (véase fig. 16-12b), la mutación
lacoc y el gen funcional lacz+ se encuentran en moléculas diferen-
tes. La mutación lacO afecta solo a genes con los que está física-
mente conectada, como es válido pai·a todas las mutaciones del
operador. Evitan la unión de una proteína represora al operador, lo
que posibilita que la RNA polimerasa transcri ba genes de la .m isma
molécula de DNA. Sin embargo, no pueden evitar que un represor
se una a operadores normales de otras moléculas de DNA. Obsér-
vense los efectos de diferentes combinaciones de mutaciones lacl
y lacO sobre la expresión del operón lac en la Animación 16.1.
MUTACIONES DEL PROMOTOR También se han aislado mutaciones
que afectan el metabolismo de la lactosa en el sitio promotor;
estas mutaciones se designan lacP- e interfieren con la unión de
la RNA polimerasa al promotor. Como esta unión es esencial para
la transcripción de genes estructurales, las cepas de E. coli con
mutaciones lacP- no producen proteínas lac en presencia ni en
ausencia de lactosa. Al igual que las mutaciones del operador, las
mutaciones LacP- actúan en cis, por lo que solo afectan a genes de
la misma molécula de DNA. El diploide parcial lacJ+ lacp+
lacz+J[ac/+ lacP- lacz+ presenta síntesis normal de ~-galactosida-
sa, mientras que lacJ+ lacP- lacz+J[acJ+ lacp+ lacz- no produce
~-galactosidasa ya sea que haya o no lactosa presente. El cuadro
16-2 resume los diferentes tipos de mutaciones que se producen
en el operón lac.

Cuadro 16-2 Características de las mutaciones del operón /ac

Tipo Localización Cis/ trans Efecto

Mutaciones de genes estructurales laCZ, lacY Solo afecta /acZ o lacY Modifica la secuencia de aminoácidos de la proteína
codificada por el gen en el que se produce la mutación

Mutaciones de genes regu ladores lact Trans Afecta la transcripción de genes estructurales

Mutaciones del operador taco Cis Afecta la transcripción de genes estructurales

Mutaciones del promotor lacP Cis Afecta la transcripción de genes estructurales

456 CAPITULO 16

(a) Diploide parcial /ac/+ lacO + lacz-11ac/+ lacO' lacz+ (b) Diploide parcial Jac/+ lacO + Jacz +/Jac/+ Jaco' Jaez-

Ausencia de lactosa Ausencia de lactosa

x~ 'x
~
Pi lacP ~ ~ Pi +

+
Represor
activo

t ){
Represor
activo

t
<., ){
Pi lacl .._. lacP ,Z,¡¡;Q .. #~ :'I
:1 Pi lact• lacPrl)lflf P.•i ftl-tli.~[ :'I
:1

Transcripción Transcripción
y traducción y traducción

~-galactosidasa • ~ ~ ~-gala~osidasa
no funcional

Presencia de lactosa Presencia de lactosa

.__ /acP ~ laco+ ¡'lj , facp~

i ; _. . +
){ ){
Lactosa
•\ • J
Transcripción
Represor
Lactosa
•\ • Transcripció~
Repre~or • • - - y traducción y traducción ]
activo . . . ,
• ♦
activo
•
Represor
inactivo

•){
~~ ~-galactosidasa
no funcional
Represor
inactivo
' ~-galactosidasa

_ lacP11Jfl=(J.. iWAr7z•• ---.,

Transcripción Transcripción
y traducción y traducción

~-galactosidasa " ' ~~-galactosidasa

no funcional

Figura 16-12. Las mutaciones de lacO son constitutivas y actúan en cis. (a) El diploide parcial /ac/t /aco+
lac? I tacf tacoc tac? es constitutivo y produce ~-galactosidasa en presencia y en ausencia de lactosa. (b) El
diploide parcial tac/t taco+ tac?/ tacr- tacoc tacZ- es inducible (produce ~-galactosidasa solo en presencia de lac-
tosa), lo que demuestra que el gen taco actúa en cis.

Para cepas de E. coli con los siguientes genotipos lac, utilice un
signo 111ás ( +) para indicar la síntesis de ~-galactosidasa y per-
measa, y un signo menos (-) para indicar falta de síntesis de las
proteínas en ausencia y en presencia de lactosa.
Genotipo de la cepa
a. lacJ+ lacp+ laco+ lacz+ lacY+
b. lacJ+ lacP+ lacoc lacz- lacY+
c. lacJ+ lacP- laco+ lacz+ lacY-
d. lacJ+ lacp+ taco+ lacz- LacY-J lacJ- Lacp+ laco+ lacz+ lacY+
Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Una indicación de si cada genotipo produce o no ~-galactosida-
sa y permeasa en presencia y en ausencia de lactosa colocando
un signo más (+) o un signo menos (-) para cada enzima y con-
dición del cuadro.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
El genotipo de cada cepa.

Pasos de la solución
Genotipo de la cepa
a. lacJ+ lacp+- laca+ lacz+ lac y+
b. lacJ+ lacp+- lacac lacz- lac y+
c. lacJ+ lacP- laca + lacz+ lac y-
d. lacJ+ lacp+- laca+ lacz- lac y-¡ lacJ- lacp+- laca+ lacz+ lac y+
a. Todos los genes poseen secuencias normales, de manera que el
operón lac funciona con norn1alidad: en ausencia de lactosa, la
proteína reguladora se une al operador e inhibe la transcripción
de los genes estructurales y, por lo tanto, no se produce ~-ga-
lactosidasa ni permeasa. En presencia de lactosa, parte de esta
se convierte en alolactosa, que se une al represor y lo torna
inactivo; el represor no se une al operador y, por lo tanto, se
transcriben los genes estructurales y se produce ~-galactosida-
sa y permeasa.
b. El gen estructural lacZ está mutado, por lo que no se produci-
rá ~-galactosidasa en ninguna condición. El gen laca presen-
ta una mutación constitutiva, lo que significa que el represor es
incapaz de unirse a lacO, por lo que la transcripción tiene lugar
en forma continua. En consecuencia, se producirá permeasa
tanto en presencia como en ausencia de lactosa.
c. En esta cepa, el promotor está mutado, de manera que la RNA
polimerasa es incapaz de unirse y no se produce la transcrip-
ción. Por consiguiente, no se produce ~-galactosidasa ni per-
measa en ninguna condición.
d. Esta cepa es un diploide parcial, que consiste en dos copias el
operón lac: una en el cromosoma bacteriano y otra en un plás-
mido. El operón lac representado en la parte supe1ior del geno-
tipo tiene mutaciones en los genes lacZ y lacY; por consiguien-
te, no es capaz de codificar ~-galactosidasa ni permeasa en
ninguna condición. El operón lac de la parte inferior del geno-
tipo tiene un gen regulador defectuoso, pero el gen regulador
normal del operón superior produce un represor con capacidad
de difusión (que actúa en trans) que se une al operón inferior
en ausencia de lactosa e inhibe la transc1ipción. Por lo tanto,
no se produce ~-galactosidasa ni permeasa en ausencia de lac-
tosa. En presencia de lactosa, el represor no puede unirse al
operador, de manera que se transcribe el operón inferior y se
producen ~-galactosidasa y permeasa.
► Ahora intente predecir el resultado de diferentes mutaciones de lac
resolviendo el Problema 19 al final del capítulo.
Control de la expresión génica en las bacterias 457
Lactosa ausente Lactosa presente
~-galactosidasa Permeasa ~-galactosidasa Permeasa
+ +
+ +
+ +
Control positivo y represión por catabolitos
E. coli y muchas otras bacterias metabolizan glucosa preferen-
ci almen te en presencia de lactosa y otros azúcares. :Lo hacen por-
que la gl ucosa entra en glucólisis sin modificaciones adicionales
y, por lo tanto, su metabolismo requiere menos energía que el de
otros azúcares. Cuando se dispone de glucosa, los genes que par-
ticipan en el metabolismo de otros azúcares son reprimidos, fenó-
meno conocido como represión por catabolitos. Por ejemplo, la
transcripción eficiente del operón lac solo tiene lugar en presen-
cia de lactosa y ausencia de g lucosa. Pero ¿cómo influye la glu-
cosa en la expresión del operón lac? ¿ Qué causa la represión por
catabolitos?
La represión por catabolitos resulta del control positivo en res-
puesta a la glucosa. (Esta regulación se suma al control negativo
provocado por la unión del represor en el sitio del operador del
operón lac en ausencia de lactosa). El control positivo se logra
mediante la unión de una proteín a dimérica denominada proteína
activadora de catabolitos (CAP) a un sitio que tiene alrededor
de 22 nucleótidos de longitud y se localiza dentro del promotor de
los genes lac o ligeran1ente en dirección 5' respecto de este (fig.
16-13). La RNA polimerasa no se une de manera eficiente a
numerosos promotores, a menos que la CAP se una primero al
DNA. Antes de que la CAP pueda unirse al DNA, debe formar un
complejo con un nucleótido modificado denominado adenosina-
3' -5' -monofosfato cíclico (AMP cícliclo o cAMP), que es impor-
tante en los procesos de señalización celular tanto en células bac-
terianas con10 eucariontes. En la E. coli, el cAMP es regulado de
manera que su concentración sea inversamente proporcionaJ a la
concentración de glucosa di sponible. Una alta concentración de
glucosa dentro de la célula reduce la cantidad de cAMP, de mane-
ra que se dispone de escaso complejo cAMP-CAP para unirse al
DNA. En consecuencia, la RNA polirnerasa tiene escasa afinidad
por el promotor lac, y hay escasa transcripción del operón lac.
Las bajas concentraciones de glucosa estin1ulan altos niveles de
cAMP, con el consiguiente aumento de la unión de cAMP-CAP
al DNA. Este aumento intensifica la unión de la RNA polimerasa
al pro1notor y aumenta la transcripción de los genes lac alrededor
de 50 veces.
La proteína activador a de catabolitos ejerce control positivo
sobre más de 20 operones de E. coli. La respuesta a la CAP varía
entre estos pron1otores; algunos operones son activados por bajos
niveles de CAP, mientras que otros requieren altos niveles. La
458 CAPITULO 16

Cuando la concentración de glucosa es baja

. .Los niveles de cAMP son altos, cAMP se une con facili- ... lo que aumenta la eficiencia
~ d a la CAP y el complejo CAP-cAMP se une al DNA, ... de la un ión de la polimerasa.
-V-
cAMP
cAMP
cAMP cAMP
cAMP
ta
cAMP
RNA polimerasa
- - - ...:::::,,_ _ _ cAMP
~ - - --
i9l'!llt. cAMP

.
/
ao ,',~ /acY /acA
/acP

J
¡Transcripción Los resultados son altas tasas l
L y traducción de transcripción y t raducción j
de los genes estructurales ...

Enzimas
t ! t
t
~-galactosidasa Permeasa Transacetilasa
l
J

•-------
Lactosa
♦ Glucosa

■ Galactosa

, ...y la producción de glu-

Cuando la concentración de glucosa es alta L:.?sa a partir de lactosa.
Los niveles de cAMP son bajos, y es menos ] La RNA polimerasa no puede unirse
probable que cAMP se una a la CAP. al DNA en forma tan eficiente, ...

~
cAMP cAMP
RNA
\ polimerasa ,

'---.~ - - )( ~
a.de
l
manera que hay ba- l +
ja tasa de transcripción. ~ Escasa transcripción

Figura 16- 13. La proteína activadora de catabolitos (CAP) se une al promotor del operón lac y estimula la trans-
cripción. La CAP debe formar un complejo con adenosina-3'-5'-monofosfato cíclico (cAM P) antes de unirse al promot or
del operón lac. La unión de cAMP-CAP al promotor activa la t ranscripción al facilitar la unión de la RNA polimerasa. Las
concentraciones de cAMP tienen una relación inversa con la glucosa: la glucosa baja induce cAMP alto; la glucosa alta
induce cAMP bajo.

CAP contiene un motivo de unión al DNA hélice-giro-hélice y, ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7

cuando se une al sitio CAP del DNA , hace que la hélice de DNA
se curve (fig. 16-14). La hélice curvada pemúte que la CAP faci-
¿ Cuál es el efecto de altos niveles de glucosa sobre el operón /ac?
lite la uni ón de la RNA polimerasa al promotor y el inicio de la
a. Estimula la transcripción.
transcripción. i.::►~~~~~~~:!!~===~~!.I
b. Tiene lugar escasa t ranscripción.
c. No afecta la transcripción.
d. Puede estimu lar o inhibi r la t ra nscripción según los niveles de lac-
CONCEPTOS tosa .

Pese a su nombre, la represión por cat abolitos es un tipo de control

positivo del operón lac. La proteína activadora de cat abolitos (CAP)
forma un complej o con cAMP y se une a un sitio cercano al promo-
tor y estimula la unión de RNA polimerasa . Los niveles celulares de
cAMP son controlados por la glucosa; una baja concentración de
gl ucosa aumenta la abundancia de cAMP e intensifica la transcrip-
ción de los genes estructurales lac.
El operón trp de f . co/i
El operón lac recién analizado es un operón inducible, uno en el
que la transcripción normalmente no se produce y debe ser acti-
vada. Otros operones son reprimibles; en estos, la transcripción
normalmente está activada y debe ser reprimida. El operón de
 Control de la expresión génica en las bacterias 459

(a) triptófano (trp) de E. coli, que controla la biosíntesis deJ aminoá-

cido t1iptófano, es un ejemplo de operón repri mible negativo.
El operón trp contiene cinco genes estructurales (trpE, trpD,
trpC, trpB y trpA) que producen los componentes de tres enzimas
(dos de ellas están formadas por dos cadenas polipeptídicas).
Estas enzimas convierten el corismato en triptófano (fig. 16-15).
EJ prit11er gen estructural , trpE, contiene una región 5' no tradu-
cida (5' UTR) larga, que se transcribe pero no codifica ninguna de
estas enzimas. En canibio, esta 5' UTR desempeña un papel
importante en otro mecanismo regulador, analizado en la siguien-
te sección. El promotor trp se localiza en dirección 5' respecto de
la 5' UTR. Cuando las concentraciones de triptófano son bajas, la
RNA polimerasa se une al promotor y transcribe los ci nco genes
estructurales en un solo 1nRNA, que después es traducido a enzi-
mas que convierten corismato en triptófano.
A cierta distancia del operón trp hay un gen regulador, trpR,
que codifica un represor que por sí solo no puede unirse al DNA
(véase fig.16-15). Al igual que el represor lac, el represor de trip-
(b)
tófano tiene dos sitios de unión, uno que se une al DNA en el sitio
Complejo cAMP-CAP operador y otro que lo hace a triptófano (el activador). La unión
DNA con triptófano causa un canibio de conformación del represor que
Sitio cAMP
RNA polimerasa lo vuelve capaz de unirse al DNA en el sitio operador, que se
CAP-.. tm I superpone con el promotor. Cuando el operador está ocupado por
el represor de triptófano, la RNA polimerasa no puede unirse al
1 ► promotor, y no pueden transcribirse los genes estructurales. Por lo
Sitio de iniciación tanto, cuando las concentraciones celulares de triptófano son
Promotor de la transcripción bajas, se produce la transcripción del operón trp y se sintetiza más
triptófano; cuando las concentraciones celulares de triptófano son
Figura 16-14. La unión del complejo cAMP-CAP al DNA produce
altas, se inhibe la transcripción del operón trp y no se sintetiza
una curva aguda en el DNA que activa la transcripción.
más triptófano.

Cuando la concentración de triptófano es baja

RNA polimerasa Genes estructurales
\
Pg '====""--!~Promotótl•J•f46f•f•ii,M UTR trpE trpD trpA
D EI represor trp normal-
mente es inactivo.
Transcripción
f lNo puede unirse ~-X Transcripción _ Dl... y tiene lugar la
y traducción al operador, ...__j _.,,,,, y traducción transcripción .

Proteína reguladora
Enzimas
inactiva (represor)
com ponentes
l l J J J
♦
Corismato --► - - - - - - - - - • Triptófano

Cuando la concentración de triptófano es alta

~ -
Operador
~ .. -

Transcripción !Ausencia de transcripción

y traducción

D El triptófano se une fl Luego, el represor trp se

Proteína reg uladora al represor y lo torna une al operador y desactiva
inactiva (represor) activo. fa transcripción.

Figura 16-15. El operón trp controla la biosíntesis del aminoácido triptófano en E. coli.
460 CAPITULO 16
lntensificadores bacterianos
Otro tipo de secuencia reguladora que afecta la transcripción es
un intensificador, un eleme nto del DNA que influ ye en la trans-
cripción pero, a diferencia de los promotores, se suele hallar a
cierta distancia del gen ( véase cap. 17). Los intensificadores fue-
ron descrjtos originalmente en eucariontes, per o en la actualidad
la investigación indica que también aparecen en bacterias y
archa.ea.
Como los intensifica.dores de los eucariontes, los intensifica.do-
res bacterianos contienen sitios de unión p ara proteínas que
aumentan la velocidad de transcripción de pron1otores que se
encuentran alejados del gen. Logran esto haciendo que e l DNA
entre el promotor y el intensificador forme un bucle, de .m anera
que el factor de transcripción en el intensificador interactúe en
forma directa con la RNA polimerasa en el promotor. Los inten-
sifica.dores también son independientes de la posición, lo que
implica que pueden moverse sin afectar su capacidad de au1nen-
tar la transcripción. La 1nayoría de los intensifica.dores bacteria-
nos se enc uentran en dirección 5' respecto de genes que utilizan
un tipo especial de factor sigma (véase cap. 13), conocido como
sigma 54 (c,54). En el capítulo 17, se analizarán con m ás detalle
los intensifica.dores.
CONCEPTOS
El operón trp es un operón reprimible negativo que controla la bio-
síntesis de triptófano. En un operón reprimible, la transcripción nor-
malmente está activada y debe ser reprimida: esto se logra median-
te la unión de triptófano al represor, que lo torna activo. El represor
activo se une al operador y evita que la RNA pol imerasa transcriba
los genes estructurales. Los intensificadores bacterianos aumentan la
velocidad de transcripción de genes que se encuentran lejos del
intensif icador.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
En el operón trp, ¿qué sucede con el represor trp en ausencia de
t riptófano?
a. Se une al operador y reprime la transcripción.
b. No puede unirse al operador y tiene lugar la transcripción.
c. Se une al gen regu lador y reprime la transcripción.
d. No puede unirse al gen regu lador y tiene lugar la transcripción.
16.3 Algunos operones regulan
la transcripción mediante atenuación,
la terminación prematura
de la transcripción
Hasta ahora hemos visto varias maneras diferentes en las que una
célula regula el inicio de la transcripción en un op erón. Algunos
operones tienen un nivel adicional de control que afecta la conti-
nuación de la transcripci6n en lugar de su iniciaci6n. En la ate-
nuación, la transcripción comienza en el sitio de iniciación, pero
termi na en fo rma prematura, antes de que la RNA polimerasa
alcance los genes estructurales. La atenuación se produce en una
serie de operones que codifican enzimas que participan enlabio-
síntesis de aminoácidos.
Atenuación en el operón trp de E. coli
Es posible comprender con mayor facilidad el proceso de atenua-
ción analizando uno de los ejemplos mejor estudiados, que co-
rresponde al operón trp de E. coli. El operón trp es inu sual, debi-
do a que está regulado tanto por represión como por atenuación.
La mayoría de los operones están regulados por uno de estos
1necanism.o s, pero no por ambos.
La atenuación se descub1ió cuando Charles Yanofsky y sus
colegas realizaron varias observaciones a principios de la década
de 1970 que indicaron que la represión en e l sitio operador no es
el único método de regulación del operón trp. Aislaron una serie
de mutantes que presentaban altos niveles de tran scripción , aun-
que el control en el sitio operador no estaba afectado, lo que sugi-
rió que algún mecanismo distinto de la represión en el sitio ope-
rador controlaba la tran scripción. Más aún, observaron que se
transcribían dos rnRNA de diferente tamaño a pa1tir del operón
trp: un mRNA largo que contenía secuencias para los genes
estructurales y un mRNA mucho n1ás corto de solo 140 nucleóti-
dos. Estas observaciones llevaron a Yanofsky a postular que un
mecanis1no que causaba la terminación prematura de la transcrip-
ción también regu la la transcripción e n el operón trp.
El examen minucioso del operón trp revela una regi6n de 162
nucleótidos que con·esponde a la 5' UTR larga del rnRNA (m en-
cionada antes) transcrita a partir del operón trp (fig. 16-16a). La
5' UTR (denominada también líder) contie ne cuatro regiones: la
región 1 es co1nple1nentaria de la región 2, la región 2 es comple-
mentaria de la región 3 y la región 3 es complementaria de la
región 4 (fig. 16-16b). Estas complementariedades permiten que
la 5' UTR se pliegue en dos estructuras secundarias diferentes
(fig. 16-16c). Solo una de estas estructuras secundarias causa ate-
.,
nuac1on.
Una de las estructuras secundarias contiene una horquilla for-
mada por el apareamiento de bases de las regiones 1 y 2, y otra
horquilla producida por el apareamiento de bases de las regiones
3 y 4. Obsérvese que una cadena de nucleótidos de uracilo sigue
a la horquilla 3+4. No es coincidencia que la estructura de un
ter1ninador intrínseco bacteriano (véase cap. 13) incluya una hor-
quilla seguida de una caden a de nucleótidos de uracilo; esta
estructura secundaria de la 5' UTR del operón trp es, de hecho, un
termi nador y se denon1ina atenuador. El atenuador se forma cuan-
do las concentraciones celulares de triptófano son altas y causa la
terminación de la transcripción antes de que se puedan transcribir
los genes estructurales ttp.
En ca1nbio, cuando las concentraciones celulares de triptófano
son bajas, se produce la estructuTa secundaria alternativa de la 5'
UTR por apareamiento de bases de las regiones 2 y 3 (véase fig.
16-16b). Este apareamiento de bases también produce una hor-
quilla, pero esta horquilla no es seguida de una cadena de nucle-
ótidos de uracilo, de manera que esta estructura no funciona como
un terminador. La RNA polünerasa continúa más allá de la 5'
UTR hacia la sección codificante de los genes estructurales, y se
producen las enzimas que sintetizan tiiptófano. Dado que evita la
terminación de la transcripción, la estrucuu-a 2+3 se denomina
antiterminador.
 Control de la expresión génica en las bacterias 461

(a) Operón Trp

5' UTR
Gen trp E
Regiones: 1 2 3 4 I
5' 3'
V \
Sitio de unión Codón de iniciación Codones uuuuuuu Codón de iniciación
al ribosoma trp

(b) Secuencia de 5' UTR del mRNA Péptido líder (alto)

1
Met-Lys- Ala- lle- Phe- Val-Le u- Lys- Gly- Trp- Trp-Arg-Thr- Ser- (stop)
tdi•Jlooutffitt,
2

Thr- Gln-Mett t 4 3
t Final de 5' UTR Sitio de atenuación
Gen trp E de la transcripción

(e)

Codones t rp L O Cuando la concentracíón de triptófano fl Cuando la concentrac1ón de triptófano

es alta, lc;1 región 3 se aparea con la es baja, la región 2 se aparea con la
_,,,,:::! región 4 . Esta estructura termina la ~ región 3. Esta estructura no termina
transcripción. ~ la transcripción.
(IJIJIJIJIIIJ•u

Estructura secundaria Estructura secundaria

1+2 y 3+4 2+3
Atenuación Antiterminación
(termina la transcripción)

Figura 16-16. Dos estructuras secundarias diferentes pueden ser formadas por la 5' UTR del transcrito de mRNA del operón trp.

Para resumir, la 5' UTR del operón trp puede plegarse en una
de dos estructuras. Cuando la concentración de ttiptófano es alta,
se forma la estructura 3+4, la transcripción se termina dentro de
la 5' UTR y no se sintetiza triptófano adicional. Cuando la con-
centración de ttiptófano es baja, se forma la estructura 2+3, la
transcripción continúa hasta los genes estructurales y se sintetiza
triptófano. Entonces, la pregunta crucial es ¿por qué surge la
estructura 3+4 cuando la concentt·ación celu lar de triptófano es
alta, mientras que surge la estructura 2+3 cuando la concentración
es baja?
Para responder esta pregunta, debemos inspeccionar mejor la
secuencia de nucleótidos de la 5' UTR. En el extremo 5' , en direc-
ción 5' respecto de la región 1, hay un sitio de unión a ribosomas
(véase fig. 16-16a). La región 1 codifica una proteína pequeña.
D entro de la secuencia de codificación de esta proteína, hay dos
codones UGG que especifican el aminoácido triptófano; por con-
siguiente, se requiere t1iptófano para la traducción de esta secuen-
cia de 5' UTR. No se ha aislado la proteína pequeña codificada
por la 5' UTR y se presume que es inestable; su única función
aparente es controlar la atenuación. Si bien en el capítulo 14 se
462 CAPITULO 16
afirmó que una 5' UTR no se traduce a una proteína, la 5' UTR
de los operones sujetos a atenuación es una excepción a esta
regla. El momento y la interacción precisos de la transcripción y
la traducción en la 5' UTR determinan si se produce atenuación.
TRANSCRIPCIÓN CUANDO LAS CONCENTRACIONES DE TRIPTÓFANO
SON BAJAS Consideremos primero qué sucede cuando las con-
centraciones intracelulares de t:tiptófano son bajas. Recuérdese
que, en las células procariontes, la transcripción y la traducción
están acopladas: mientras se está produciendo la transcripción en
el extremo 3' del mRNA, se inicia la traducción en el extren10 5'.
La RNA polimerasa comienza la transcripción del DNA y produ-
ce la región 1 de la 5 ' UTR (fig. 16-17a). Siguiendo de cerca a la
RNA polimerasa, un riboso1na se une a la 5' UTR y comienza a
traducir la región codificante. Mientras tanto, la RNA polimerasa
está transcribiendo la región 2 (fig. 16-17b). La región 2 es com-
plementaria de la región 1, pero co1no el ribosoma está traducien-
do la región 1, los nucleótidos de las regiones l y 2 no pueden
aparearse.
La RNA polimerasa comienza a transcribir la región 3, y e]
tibosoma alcanza los codones UGG de triptófano de la región 1.
Cuando alcanza los codones de triptófano, el ribosoma se atasca
(fig. 16-17c), porque la concentración de triptófano es baja y los
tRNA cargados con triptófano son escasos o ni siquiera están dis-
ponibles. El ribosoma se asienta en los codones de triptófano y
aguarda la llegada de un tRNA cargado con triptófano. Sin embar-
go, el atascamiento del 1ibosoma no obstaculiza la transcripción;
la RNA polimerasa continúa moviéndose a lo largo del DNA, y la
transcripción se adelanta a la traducción.
Como el ribosoma está atascado en los codones de triptófano de
la región 1, la región 2 está libre para aparear sus bases con la
región 3, lo que forma la horquilla 2+3 (fig.16-17d). Esta horqui-
Jla no causa terminación, de .m anera que la transcripción prosi-
gue. Como la región 3 ya está apareada con la región 2, nunca se
forma la horquilla 3+4 (el atenuador) , de manera que no tiene
lugar la atenuación y continúa la transcripción. La RNA polime-
rasa continúa a lo largo del DNA, pasa la región 5' UTR y trans-
cribe todos los genes estructurales a mRNA, que es traducido a
las enzimas codificadas por el operón trp. Luego, estas enzimas
sintetizan más triptófano.
TRANSCRIPCIÓN CUANDO LAS CONCENTRACIONES DE TRIPTÓFANO
SON ALTAS Veamos ahora qué sucede cuando las concentraciones
intracelulares de triptófano son altas. También en este caso, la
Cuadro 16-3 Eventos del proceso de atenuación
Nivel El ribosoma Posición del ribosoma
intracelular se atasca cuando se transcribe
de triptófano en codones trp la región 3
Alto No Cubre la región 2
Bajo Sí Cubre la región 1
RNA polin1erasa comienza a transcribir el DNA y produce la
región 1 de 1a 5 ' UTR (fig. 16-17e). Siguiendo de cerca ala RNA
polimerasa, un ribosoma se une a la 5' UTR y comienza a traducir
la región codificante (fig. 16-17f). Cuando el ribosoma alcanza
los dos codones UGG de triptófano, no se enlentece ni se atasca,
porque el triptófano abunda y los tRNA cargados con triptófano
son fácilmente accesibles (fig. 16-17g). Es crucial tener en cuen-
ta este punto: como el triptófano abunda, la traducción puede
mantenerse a la par de la transcripción.
A medida que avanza más allá de la región 1, el ribosoma cubre
en forma parcial la región 2 (fig. 16-17h); mientras tanto, la RNA
polimerasa completa la transcripción de la región 3. Aunque las
regiones 2 y 3 son co1nplementarias, el ribosoma bloquea física-
mente su apareamiento.
La RNA polinlerasa continúa moviéndose a lo largo del DNA y,
por último, transcribe la región 4 de la 5' UTR. La región 4 es com-
plementaria de la región 3, y con10 la región 3 no puede aparear sus
bases con la región 2, se aparea con la región 4. El apareamiento de
las regiones 3 y 4 (véase fig. 16-17h) produce el atenuador y ter-
mina la transcripción justo después de la región 4. No se trans-
criben los genes estructurales, no se traduce ninguna enzima pro-
ductora de triptófano y no se sintetiza triptófano adicional. El
cuadro 16-3 resume los eventos importantes en el proceso de ate-
nuación. En la Animación 16.2, intente pausar el riboso1na en el
codón trp durante distintos períodos y observe qué efecto ejerce
la pausa sobre la transcripción. A
Un factor clave para controlar la atenuación es el número de
moléculas de tRNA cargadas con triptófano, porque su disporubi-
lidad es lo que determina si el ribosotna se atasca en los codones
de triptófano. Un segundo factor concierne a la sincronización de
la transcripción y la traducción, que es crucial para la atenuación.
La sincronización se logra mediante un siti o de pausa localizado
en la región 1 de Ja 5' UTR. Cuando se transcribe este sitio, el
RNA se pliega en una estructura secundaria que inhibe la trans-
cripción ulterior. Por consiguiente, la RNA polimerasa se detiene
en for1na transitoria en el sitio de pausa, lo que da tiempo para que
un ribosoma se una al extremo 5 ' del 1nRNA. Cuando el riboso-
ma se acerca a la estructur a secundaria del RNA, la ro1npe y per-
mite que continúe la transcripción. Después, la traducción sigue
de cerca a la transcripción. Es importante destacar que los riboso-
mas no atraviesan las horquillas retorcidas de la 5 ' UTR para tra-
ducir los genes estructurales. Los ribosomas que se unen al extre-
mo 5' de la región 1 del nlRNA encuentran un codón de termina-
ción al final de la región 1. Los nuevos ribosomas que traducen
Estructura Terminación
secundaria de la transcripción
de S' UTR del operón trp
Horquilla 3+4 Sí
Horquilla 2+3 No
 Control de la expresión génica en las bacterias 463

Cuando la concentración de triptófano es baja mRNA RNA poli1merasa

(a) - ----... f 5odones Trp
La RNA polimerasa comienza a transcribir
el DNA y produce la región 1 de la 5' UTR.
~ >"""'i2--=~ ~~ 4
3

(b) Ribosoma
Un ribosoma se une al extremo 5' de la mRNA 1 2
5' UTR y traduce la región 1 mientras se DNA 9 ~~~ - - --=i-=::::::::=~
L__
está transcribiendo la región 2. ~ :::::::
(c)
Codones Trp
~ ribosoma se atasca en los codones Trp
de la región 1, porque el tritpóf ano es
escaso. Como el ribosoma está atascado,
la región 2 no es cubierta por el ribosoma j
J
mRNA

DNA
l 2

cuando se transcribe la región 3.

"--

(d)
f Cuando se transcribe la región 3, esta se aparea 1 2 3
con la región 2. Cuando se transcribe la región 4,
no puede aparearse con la región 3, porque esta
ya está apareada con la región 2; nunca se
DNA
forma el atenuador, y prosigue la transcripción.

Cuando la concentración de triptófano es alta

(e) mRNA
La RNA polimerasa comienza a transcribir DNA
el DNA y produce la región 1 de la 5' UTR.
1 2 3 4
•
(f)
mRNA 1 2
Un ribosoma se une al extremo 5' de la
5' UTR y traduce la región 1 mientras se DNA
está transcribiendo la región 2.

(g) ••••••••
~ La- RNA polimerasa transcribe la región3 l mRNA 2
El ribosoma no se atasca en los codones
DNA
Trp, porque el triptófano abunda.

(h)
El ribosoma cubre parte de la región 2, lo
que impide que se aparee con la región 3.
La región 4 se transcribe y se aparea con la
mRNA
-·--····••... 2
región 3, lo que produce el atenuador que
termina la transcripción .

3 4

Figura 16-17. La terminación prematura de la transcripción (atenuación) en el operón trp

depende de la concentración celular de triptófano.
464 CAPITULO 16
los genes estructurales se unen a un sitio de unión al ribosoma di-
ferente localizado cerca del comienzo del gen t,pE. L-•===--'
RESOLVER EL PROBLEMA 27
¿Por qué hay atenuación
en el operón trp?
¿Por q ué las bacterias necesitan atenuación en el operón trp?
¿No debería la represión en el sitio operador evitar la transcrip-
ción cuando las concentraciones celulares de triptófano son
altas? ¿Por qué la célula tiene dos tipos de con trol? Parte de la
respuesta es que la represión nu nca es completa; se ini cia cierto
grado de transcripc ión aun cuando el represor trp está activo; la
represión reduce la transcripción solo 70 veces. L a atenuación
puede reducir aún más la transcripción, otras 8-10 veces, de
manera que, en conjunto, ambos procesos pueden reducir la
transcripción del operón trp n1ás de 600 veces. Ambos mecanis-
mos proporcionan a la E. coli un grado de control 1nucho 1nás
fino sobre la síntesis de triptófano que el que podrían alcanzar
por separado.
Otra razón para el control dual es que la atenuación y la repre-
sión responden a diferentes señales: la represión responde a las
concentraciones celulares de triptófano, mientras que la atenua-
ción responde al número de tRNA cargados con triptófano. A ve-
ces, la capacidad de una célula de responder a estas diferentes
señales puede ser ventajosa. Por último, el represor t,p afecta
varios operones, aparte del operón trp. En un estadio evolutivo
previo de E. coli, el operón trp puede haber sido controlado solo
por atenuación. El represor trp puede haber evolucionado funda-
mentalmente para controlar los otros operones y solo afecta de
n1anera incidental al operón trp.
La atenuación es un proceso difícil de co1nprender porque
usted debe visualizar en forma simultánea cómo interactúan dos
procesos diná.m icos (transcripción y traducción) y es fácil con-
fundirlos. Recuérdese que la atenuación hace referencia a la ter-
minación prematura de la transcripción, no de la traducción
(aunque los eventos de traducción implican la tenninación de la
transcripción). A menudo, la atenuación causa confusión porque
sabemos que la transcripción debe preceder a la tradu cción. Nos
sentimos cómodos con la idea de que la transcripción pueda
afectar la traducción, pero nos resulta m ás difícil imaginar que
los efectos de la traducción puedan influir en la transcripción,
como sucede en la atenuación. La realidad es que la transcrip-
ción y la traducción están estrechamente acopladas en las célul as
proca1iontes, y los eventos de un proceso pueden afectar fácil-
mente al otr o.
CONCEPTOS
En la atenuación, la transcripción se inicia pero termina en forma
prematura. Cuando las concentraciones de triptófano son bajas, el
ribosoma se atasca en los codones de triptófano y la transcripción
continúa. Cuando las concentraciones de triptófano son altas, el
ribosoma no se atasca en los codones de triptófano, y la 5' UTR
adopta una estructura secundaria que termina la transcripción antes
de que puedan copiarse los genes estructurales a RNA (atenuación).
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
¿Qué regiones de la 5' UTR se aparean para producir atenuación,
a. 1 y 3
b. 2 y 3
c. 2 y 4
d. 3 y 4
16.4 Moléculas de RNA controlan la expresión
de algunos genes bacterianos
Todos los reguladores de la expresión génica que hemos conside-
rado hasta ahora han sido proteú1as. También se han descubierto
varios ejemplos de RNA reguladores.
RNA antisentido
Algunas moléculas de RNA son complementruias de determina-
das secuencias de los mRNA y se denominan RNA antisentido.
Controlan la expresión génica por unión a secuencias del mRNA
e inhibición de la traducción. El control de la traducción por RNA
antisentido se observa en la regulación de.l gen o mpF de E. coli
(fig. 16-18a). Este gen codifica una proteína de la membrana
externa que funciona como un canal para la difusión pasiva de
pequeñas 1noléculas polares, como agua e iones, a través de la
membrana celular. En la mayoría de las condiciones, el gen ompF
se transcribe y se traduce, y se sintetiza la proteína O1npF. Sin
embargo, curu1do aumenta la osmolaridad del medio, la cél ula
deprime la producción de proteína OmpF para ayudar a mantener
la osmolaridad celular. Se activa un gen regulador denominado
micF - por RNA complementario de interferencia con mRNA- y
se produce RNA n1icF (tig. 16-18b). El RNA micF, un RNA anti-
sentido, se une a una secuencia comple1nentaria de la 5' UTR del
mRNA ompF e inhibe la unión del ribosoma. Esta inhibición
reduce el grado de traducción (véase fig. 16-18b), lo que determi-
na menor cantidad de proteínas OmpF en la membrana externa,
con la consiguiente reducción del desplazamiento deletéreo de
sustancias a través de la men1brana debido a los can1bios de os-
molaridad. Investigaciones recientes han hallado muchas molécu-
las de RNA antisentido en un amplio espectro de especies bacte-
nanas. IJllinNTE RESOLVER EL PROBLEMA 30
Interruptores ribosómicos
Hemos visto que los operones de bacterias contienen secuencias
de DNA (sitios pro1notores y operadores) donde la unión de
moléculas pequeñas induce o reprime la transcripción. Algunas
moléculas de mRNA contienen secuencias reguladoras denomi-
nadas interruptores ribosómicos (riboswitches), donde pueden
unirse moléculas y afectar la expresión génica al influir en la for-
mación de estructuras secundarias del mRNA (fig. 16-19). Los
interruptores ribosómicos se descubrieron en 2002, y en la actua-
lidad pru·ecer ser comunes en las bacterias, donde regulan alrede-
dor del 4% de los genes bacterianos. También están presentes en
archaea, hongos y plantas.
 Control de la expresión génica en las bacterias 465

(a) Baja osmolaridad Cuando la osmolaridad (b) Alta osmolaridad Cuando la osmolaridad
~ xtracelular es baja, ... ~ xtracelular es alta, ...
Gen om F Gen micF Gen ompF

Transcripción [Transcripción

mRNA - - - - - - - - - - •
RNA _ _ _ _ __ mRNA _ _ _ _ _ _ _ _ __ t
antisentido
... se traduce el mRNA
ompF para producir
protefna OmpF. . ... .se activa el gen micF y se
Traducción Traducción
-::, ~ roduce RNA micF.

El RNA micF se aparea con

el extremo 5' del RNA ompF,
¡
lo que bloquea el sitio de
unión al ribosoma. No se
--._ Ribosoma
produce proteína OmpF.
Proteína Ausencia de traducción
OmpF

Figura 16-18. El RNA antisentido puede regular la traducción.

Por lo general, los interruptores ribosó1nicos se encuentran en
la 5' UTR del mRNA y se pliegan en estructuras secundarias
compactas de RNA, con un tallo básico y varias horquillas rami-
ficadas. En algunos casos, una pequeña molécula reguladora se
une al inten·uptor ribosómico y estabiliza un terminador, que
causa terminación prematw·a de la transcripción. En otros casos,
la unión de una 1nolécula reguladora estabiliza una estructura
secundaria que enmascara el sitio de unión a riboson1as, .lo que
impide el inicio de la traducción. Cuando no hay W1a molécula
reguladora unida, el interruptor ribosómico asume una estructura
alternativa que elimina el terminador prematuro o torna accesible
el sitio de unión a ribosomas.
UN INTERRUPTOR RIBOSÓMICO CONTROLA LA SÍNTESIS DE VITAMI-
NA B12 Se observa un ejemplo de interruptor ribosómico en los
genes bacterianos que codifican enzimas que inter vienen en la
síntesis de vitamina B 12. Los genes de estas enziinas se tr ans-
criben a u na molécula de mRNA que tiene un inte1Tuptor ribosó-
mico. Cuando la forma activada de vitan1ina Bl2 (denominada
coenzima B 12) está presente, esta se une al inte1Tuptor ribosó-
mico, y el mRNA se pliega en una estructura secundaria que
obst1uye el sitio de unión a ribosomas. En consecuencia, no
tiene lugar la traducción del mRNA. En ausencia de coenzima
Bl2, el mRNA asume una estructura secundaria diferente. Esta
estru ctura secu ndaria no obstruye el sitio de unión a riboso-
mas, de manera que se inicia la traducción. En algunos inte-
rruptores ribosómicos, la molécula r eguladora actúa como un
represor (según se acaba de describir) por inhibición de la
transcripción o la traducción; en otros, la molécula reguladora
actúa como un inductor al causar la formación de una estructu-

(a) Proteína reguladora presente (b) Proteína reguladora ausente

Una proteína reguladora

Proteína se une al interruptor ribo- Sin la proteína reguladora,
reguladora sómico y estabiliza una el interruptor ribosómico
¡estructura secundaria._..__, asume una estructura j
secundaria alternativa .. .
Interruptor
ribosómico

. .. que torna accesible

... que enmascara el sitio el sitio de unión al
Sitio de
de unión al ribosoma. ribosoma.

S'
mRNA lv unión al
ribosoma
3' 3'
Gen Gen

l
~ --==::; No se produce Sitio de unión Tiene lugar
5'
♦ la traducción al ribosoma la traducción.

Ausencia de traducción Traducción

Figura 16-19. los interruptores ribosómicos son secuencias de RNA del mRNA que afectan la expresión génica.
466 CAPITULO 16

ra secundaria que permite que tenga lugar la transcripción o la DNA

traducción.

Represión mediada por RNA a través Transcripción

de ri bozi mas
Otro tipo de control génico se lleva a cabo mediante 1noléculas de
RNA denominadas 1i bozimas, que poseen actividad catalítica Ribozima
(véase cap. 14). Se ha demostrado este tipo de control, denomi-
glmS mRNA S'
nado represión mediada por RNA, en el gen glmS de la bacteria
Bacillus subtilis. La transcripción de este gen produce una molé- 1
cula de mRNA que codifica la enzima glutamina-fructosa-6-fos- [ Traducción ] ÍLa transcripción y
fato aminotransferasa (fig. 16-20), que ayuda a sintetizar un azú- + la traducción del gen
car pequeño denomi nado glucosam.ina-6-fosfato (GlcN6P). Glutamina-6-fosfato glmS gene producen
- - 7
-=== una enzima ...
Dentro de la 5' UTR del mRNA glmS hay alrededor de 75 nucle- am inotransferasa
ótidos que actúan como una ribozima. En ausencia de GlcN6P, el
gen glmS se transcribe y se traduce para producir la enzima, que ... que ayuda
sintetiza más GlcN6P. En can1bio, cuando hay suficiente GlcN6P,
esta se une a la parte ribozima del mRNA, lo que luego induce la - - -T a sintetizar el
azúcar GlcN6P.
autoescisión del mRNA: la ribozima rompe el esqueleto axial de Precursor GlcNGP
azúcar-fosfato del RNA. Después, esta escisión impide la traduc-
ción del mRNA.
GlcN6P se une a la
ribozima e induce
- -===::, autoescisión del
mRNA.
CONCEPTOS
El RNA antisentido es complementario de otras secuencias de RNA o
DNA. En las células bacterianas, puede inhibir la t raducción al un irse
a secuencias de la 5' UTR del mRNA y al evitar la unión del ribosoma.
Los interruptores ribosómicos son secuencias de moléculas de mRNA
que se unen a molécu las reguladoras e inducen cambios de la estruc-
tu ra secundaria del RNA que afectan la expresión génica. En la repre-
sión mediada por RNA, una secuencia de ribozima del mRNA induce
la autoescisión y degradación del mRNA cuan do se une a una mo- Figura 16-20. Las ribozimas, cuando están unidas a pequeñas
lécula reguladora. moléculas reguladoras, pueden inducir la escisión y degrada-
ción del mRNA.

RESUMEN DE CONCEPTOS
■ La expresión génica puede controlarse en diferentes niveles,
como la modificación de la estructura del DNA o la cromati-
na, la transcripción, el procesamiento deJ mRNA, la estabili-
dad del RNA, la traducción y la modifi cación postraducción.
Gran parte de la regulación génica se produce n1ediante la
acción de proteínas reguladoras que se unen a secuencias
específicas del DNA.
■ Por lo general, los genes de las células bacterianas se agrupan
en operones, grupos de genes estructurales funcionalmente
relacionados y las secuencias que controlan su transcripción.
Los genes estructurales de un operón se transcriben juntos a
una sola molécula de mRNA.
■ En el control negativo, una proteína represora se une al DNA e
inhibe la transc1ipción. En el control positivo, una proteína
activadora se une al DNA y estünula la transcripción. En los
operones inducibles, la transcripción normalmente está desacti-
vada y debe ser activada ; en los operones reprimibles, Ja trans-
cripción normalmente está activada y debe ser desactivada.
■ El operón lac de E. coli es un operón inducible negativo. En
ausencia de lactosa, un represor se une al operador e impide la
transcripción de genes que codifican ~-galactosidasa, permea-
sa y transacetilasa. En presencia de lactosa, parte de esta se
convierte en al olactosa, que se une al represor y lo torna inac-
tivo, lo que permite la transcripción de los genes estructurales.
■ El control positivo en el operón lac y otros operones se produ-
ce mediante represión por catabolitos. La proteú1a activadora
de catabolitos, cuando forma un compl.ejo con AMP cíclico,
se une a un sitio del promotor o cercano a este y estimula la
transcripción de los genes estructurales. Los niveles de cAMP
muestran una co1Telación inversa con la glucosa; por consi-
g uiente, las bajas concentraciones de glucosa estimulan la
transcripción, y las altas concentraciones la inhiben.
■ El operón trp de E. coli es un operón reprimible negativo que
controla la biosíntesis de triptófano.
■ La atenuación causa terminación prematura de la transcrip-
ción. Se produce a través del estrecho acoplamiento de la
 Cont rol de la expresión génica en las bacterias 467

transcripción y la traducción, y depende de la estructura
secundaria de la secuencia 5 ' UTR.
■ Los RNA antisentido son complementarios de secuencias del
1nRNA y pueden inhibir la traducción al unirse a estas secue n-
cias, lo que im pide la unión o el progreso del ribosoma.
■ Cuando están unidos a una molécula reguladora, los interrup-
tores ribosómico s de las moléculas de 1nRNA inducen cam-
bios de la estructura secundaria del niRNA, lo que afecta la
expresión génica. Algunos mRNA poseen secue ncias de ribo-
zimas que inducen autoescisión y degradación c uando se les
une una molécula reguladora.

TÉRMINOS IMPORTANTES

adenosina-3' -5 ' -monofosfato
cíclico (cAMP) (p . 457)
antiterminador (p. 46 1)
atenuación (p . 460)
atenuador (p. 460)
contro l negativo (p. 448)
control positivo (p . 448)
correpresor (p . 448)
diploide parcial (p. 453)
dominio (p. 446)
eleme nto regu lador
(p. 445)
gen constitutivo (p. 445)
gen estructural (p. 445)
gen regulador (p . 445)
gen regulador (p. 448)
inducción coordinada (p. 452)
inductor (p. 44 8)
inte rruptor ribosómi co
(p . 464)
operador (p. 448)
operón (p. 447)
operón inducible (p . 448)
operón reprin1ible (p. 44 8)
proteína activadora de catabo-
litos (CAP) (p. 457)
pro teína alostérica (p. 448)
proteína reguladora (p . 448)
regul ación génica (p. 444)
represión por catabolitos
(p . 4 57)
RNA antisentido (p. 464)

l . Un gen constitutivo no es regulado y se expresa continua- 4. d

me nte. S. d
2. Porque es el primer paso en el proceso de transferencia de 6. c
inform ación del DNA a la proteína. Para la eficiencia celular,
la expresión génica a menudo es regulada en etapas te mpra- 7. b
nas del proceso de producción de proteínas. 8. b
3. b 9. d

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
El operón fox, que tiene secuencias A, B, C y D ( que pueden representar genes estructurales o
sec uencias reguladoras), codifica las enzimas 1 y 2 . Mutaciones dle las secuencias A, B, C y D
ej ercen los siguientes efectos, donde un signo más(+ ) indica que se sinte tiza la enzilna, y un
signo menos(-) indica que no se s intetiza la enzima.

Fox ausente Fox presente

Mutación
de secuencia Enzima 1 Enzima 2 Enzima 1 Enzima 2

Ninguna mutación + +
A +
B
e +
D + + + +

a. ¿E l operón fox es inducible o reprimible?

b. Indique qué secuencia (A, B , C o D) forma parte de los siguientes componentes del operón . Cada secuencia debe
utilizarse solo una vez.

Gen regulador _ _ _ _ Gen estructural para la enzi ma J _ _ __

Promotor _ _ __ Gen estructur al para la enzima 2 _ _ __
 468 CAPITULO 16

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? b. La mutación de A permite la producción de la enzima 2 en

a. Si el operón fox es inducible o reprimí.ble. p resencia de Fox, pero la enzima 1 no se produce en pre-
sencia ni en ausencia de Fox, de manera que A debe ten er
b. Qué secuencia representa cada parte del oper6n .
una mutación del gen estructural para la enzima l. Con la
mutación de B, no se produce ninguna enzima en ningun a
¿Qué información se proporciona para resolver el proble-
condición; por Lo tanto, lo más probable es que esta muta-
ma?
ción afecte al promotor e impida la unión de la RNA poli-
Para cada mutación, si se produce la enzima l y la enzima 2 mer asa. La mutación de C afecta solo la enzima 2, que no
en presencia y en ausencia de Fox. es pI"oducida en presencia o ausencia de Fox; la enzima l
se produce normalmente (solo en presencia de Fox), de
Para obtener ayuda con este problema, repase: manera que es muy probable que la mutación de C ocun·a
Sección 16.2 en el gen estructural para la enzima 2. La mutación de D es
constitutiva y permite la producción de las enzimas 1 y 2
esté presente o no Fox. Lo más probable es que esta muta-
Pasos de la solución ción ocurra en el gen regulador, lo que produce un represor
defectuoso que no puede unirse al operador en ninguna
Pista: repase el a . Cu ando no hay mutaciones, las enzimas 1 y 2 se condición.
resumen de la
estructura del producen en presencia de Fox pero no en su ausen-
cia, lo que indica que el operón es inducible y que Gen regulador D Gen estructural para la enzima 1 A
operón en la
figura 16-3. Fox es el inductor. Promotor B Gen estructural p ara la en zim a. 2 C

Problema 2
Se produce una m utación en la 5' UTR del operón trp que reduce la capacidad de la región 2 para
aparearse con la región 3. ¿Cuál será el efecto de esta mutación cuando la concentración de triptó-
fano sea alta? ¿Cuándo la concentración de triptófano sea baja?

Estrategia de solución Pasos de la solución

Pista: repase un
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Cuando la concentración de triptófano es alta, las resumen de ate-
nuación en la
E l efecto de la mutación cuando la concentración de triptófano regiones 2 y 3 nor n1a1J11ente no se aparean y, por lo figura 16-17.

es alta y cuando es baja. tanto, la mutación no ejercerá ningún efecto. E n

¿Qué información se proporciona para resolver el proble-
ma?
■ Las mutaciones se producen en la 5' UTR del operón trp.
■ La mutación reduce la capacidad de la región 2 para apa-
rearse con la región 3.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Sección 16.3
cambio, cuando la concentración de ttiptófano es baja, el ribo-
soma normalmente se atasca en los cod.ones de triptófano de la
región 1 y no cubre la región 2, de manera que las regiones 2
y 3 pueden aparearse, lo que evita el apareamiento de las
regiones 3 y 4 y la formación de un terminador, que finalizaría
la transcripción. Si las regiones 2 y 3 no pueden ap arearse, se
aparearán las regiones 3 y 4, aun cuando la concentt·ación de
triptófano sea baja, y siempre se producirá atenuación. Por lo
tanto, no se sintetizará más triptófano, aun e n ausencia de trip-
tófano.

Sección 16.1 Sección 16.2

l. ¿P or qué la regulación génica es importante para las células 3. Dibuje un diagrama que ilustre la estructura general de un
bacterianas? operón e identifique sus partes .
2. Nombre seis niveles diferentes en los que podría controlarse 4. ¿Cuál es la diferencia entre control positivo y negativo? ¿Cuál
la expresión génica. es la diferencia entre operones inducibles y reprimibles?

5. Describa en forma sucinta el operón lac y cómo controla el
1netabolismo de la lactosa.
6. ¿Qué es la represión por catabolitos? ¿ Cómo permite que una
célula bacteriana utilice glucosa en preferencia a otros azúca-
res?
Sección 16.3
7. ¿Qué es la atenuación? ¿Cuáles son los mecanismos por los
cuales se for1na el atenuador cuando las concentraciones de
Sección 16.1
10. Examine la figura 16-2b. ¿Por qué piensa que el motivo de
la proteína de unión a DNA mostrada se denomina dedo de
cinc?
Sección 16.2
*11. Para cada uno de los siguientes tipos de control de la
transcripción, indique si la proteína producida por el gen
regulador será sintetizada iniciahnente como un represor
activo, un represor inactivo, un activador activo o un acti-
vador inactivo.
a. Control negativo en un operón reprim.ible
b. Control positivo en un operón reprimible
c. Control negativo en un operón inducible
d. Control positivo en un operón inducible
12. Una mutación en el sitio operador impide la unión de la
proteína reguladora. ¿ Qué efecto tendrá esta mutación en
los siguientes tipos de operones?
a. La proteína reguladora es un represor en un operón
reprimible
b. La proteína reguladora es un represor en un operón
inducible
13. El operón blab produce enzimas que convierten el com-
puesto A en compuesto B. El operón es controlado por un
gen regulador S. Normalmente, las enzimas son sintetiza-
das solo en ausencia del con1puesto B . Si hay mutación
del gen S, las enzünas se sintetizan en presencia y en
ausencia del compuesto B. ¿El gen S produce un represor
o un activador? ¿Este operón es inducible o reprimible?
*14. Una mutación impide la unión de la proteína activadora de
catabolitos (CAP) al promotor del operón lac. ¿Cuál será
el efecto de esta mutación sobre la transcripción del ope-
rón?
15. La transformación es un proceso en el que las bacterias
captan DNA nuevo liberado por células muertas y lo inte-
gran en sus propios genomas (véase p. 247 del cap. 9). En
Streptococcus pneu,noniae (que causa muchos casos de
Control de la expresión génica en las bacterias 469
triptófano son altas y se forma el antiterminador cuando las
concentraciones de triptófano son bajas?
Sección 16.4
8. ¿Qué es el RNA antisentido? ¿Cómo controla la expresión
génica?
9. ¿Qué son los interruptores ribosóm.icos? ¿Cómo controlan la
expresión génica? ¿De qué manera difieren de la represión
mediada por RNA?
neumonía, infecciones del oído interno y meningitis), la
capacidad de llevar a cabo la transformación requiere de
105 a 124 genes, denominados en conjunto regulón com.
El regulón com se activa en respuesta a una proteína deno-
minada péptido estimulador de la competencia (CSP), que
es producido por bacterias y exportado al medio circun-
dante. Cuando se acumula suficiente CSP, este se une a un
receptoI" de la membrana celular bacteriana, que después
activa una proteína reguladora que estimula la u·anscrip-
ción de genes dentro del regulón co1n y pone en movi-
miento una serie de reacciones que, finalmente, dan por
resultado la transformación. ¿Mediante qué tipo de regula-
ción génica parece estar controlado el regulón co1n de
Streptococcus pneu,noniae? Explique su respuesta.
a. Negativa inducible
n. Negativa reprim.ible
c. Positiva inducible
d. Positiva reprim.ible
16. ¿En cuál de las siguientes condiciones un operón lac pro-
duciría la máxima cantidad de ~-galactosidasa? ¿La míni-
ma? Explique su razonamiento.
Lactosa presente Glucosa presente
Condición l Sí No
Condición 2 No Sí
Condición 3 Sí Sí
Condición 4 No No
17. Una cepa mutante de E. coli produce ~-galactosidasa en
presencia y en ausencia de lactosa. ¿En qué parte del ope-
rón podría encontrarse la mutación en esta cepa?
18. Examine la figura 16-8. ¿Cuál sería el efecto de un fárma-
co que modificara la estructura de la alolactosa, de manera
que esta no pudiera unirse a la proteína reguladora?
*19. Para las cepas de E. coli con los genotipos lac mostrados a
continuación, utilice un signo más ( +) para indicar la sín-
tesis de ~-galactosidasa y penneasa, y un signo menos (-)
para indicar ausencia de síntesis de las proteínas.
470 CAPITULO 16

Lactosa ausente Lactosa presente

Genotipo de la cepa ~-galactosidasa Permeasa ~-galactosidasa Permeasa
lacJ+ lacp+ taco+ lacz+ lacY+
lacJ- lacP+ taco+ lacz+ lacY+
tac/+ lacp+ laco c lacz+ lacY+
lacJ- lacp+ lacO+ lacz+ lacY-
lacJ- lacP- taco+ lacz+ lacY+
lacJ+ lacP+ taco+ lacz- lacY+ /
lacJ- lacP+ laco+ lacz+ lacY-
lacJ- lacP+ tacoc lacz+ lacY+ /
lacf + lacP+ laco+ lacz - lacY-
lacJ- lacP+ lacO+ lacz+ lacY- /
lacf+ lacP- lacO+ lacz- lacY+
lacJ+ lacP- lacoc lacz- lacY+ /
tac/- tacp+ taco+ tacz+ lacY-
lacJ+ lacp+ taco+ lacz+ lacY+ /
lacf+ lacp+ laco + lacz+ lacY+
lac/S lacp+ taco+ lacz+ lacY- /
lacJ+ lacp+ lacO+ lacz- lacY+
lacls lacP- lacO+ lacz- lacY+ /
lacJ+ lacP+ lacO+ lacz+ lacY+

20. Indique todos los genotipos posibles de un operón lac que a. ¿El operón mmm es inducible o reprimible?
produce ~-galactosidasa y permeasa en las siguientes con- b. Indique qué secuencia (A, B, C o D ) forma parte de los
diciones. No dé genotipos diploides parciales. s iguientes componentes del operón.
Lactosa ausente Lactosa presente
Gen regulador
~-galactosidasa Permeasa ~-galactosidasa Permeasa Promotor
a. + +
Gen estructural para la enzima 1
b. +
c. + Gen estructural para la enzima 2
d. + + + +
e. 24. Ellis Engelsberg y sus colaboradores examinaron la regu-
f. + + ~ " lación de genes que intervienen en el metabolismo de la
g. + + .,..... arabinosa, un azúcar (E. Engelsberg y cols. 1965. Journal
of Bacteri.ology 90:946-957). Cuatro genes estructurales
codifican enzimas que ayudan a 1netabolizar la arabinosa
*21. Explique por qué las mutaciones del gen lacl son trans en
(genes A, B, D y E). Un gen C adicional está ligado a los
sus efectos, pero las mutaciones del gen lacO son cis en
genes A , B y D. Estos genes se encuentran en el orden D-
sus efectos.
A-B-C. El gen E está alejado de los otros genes.
22. ¿Qué cadena del DNA (superior o inferior) de la figura E ngelsberg y sus colegas aislaron rnutaciones del gen C
16-9 es la cadena molde? Explique su razonamiento. que afectaban la expresión de los genes estructurales A, B,
23. El operón mmm , que tiene secuencias A, B, C y D (que D y E. En un grupo de experimentos, crearon diversos
pueden ser genes estn1cturales o secuencias reguladoras), genotipos en los locus A y C, y determinaron si la arabino-
codifica las enzimas l y 2. Las mutaciones de las secuen- sa isomerasa (la enzima codificada por el gen A) se produ-
cias A, B , C y D tienen los siguientes efectos, donde un cía en presencia o ausencia de arabinosa (el sustrato de la
signo 1nás ( +) indica que la enzin1a es sintetizada y un arabinosa isomerasa). Los resultados de este experimento
signo 1nenos (-) indica que la en zima no es sintetizada. se presentan en el siguiente cuadro, donde un signo 1nás
(+) indica que se sintetizó arabinosa isomerasa y un signo
Mmmausente Minm presente menos(-) inctica que no se sintetizó la enzima.
Mutación
de secuencia Enzin1a 1 Enzima 2 Enzima 1 Enzima 2 Arabinosa Arabinosa
Genotipo ausente presente
Ninguna mutación + + l. e+- A+ +
A +
2. C- A.+
B + + + +
e + 3.C-A+/c+-A +
D 4. ~A-/ C-A + +
 Control de la expresión génica en las bacterias 471

a. Sobre la base de los resultados de estos experimentos, Sección 16.3

¿el gen C es un operador o un gen regulador? Explique
su razonamiento.
h. ¿Estos experimentos sugieren que el operón de arabino-
sa está sujeto a control negativo o positivo? Explique
su razonamiento.
c. ¿ Qué tipo de mutación es CC?
25. En E. coli, tres genes estructurales (A, D y E) codifican las
ff:.."""' enzimas A, D y E, respectivamente. El gen O es un opera-
f.=Y:- dor. Los genes se encuentran en el orden O-A-D -E en el
cro1nosoma. Estas enzimas catalizan la biosíntesis de vali-
na. Se aislaron mu taciones en los genes A, D, E y O para
estudiar la producción de enzimas A, D y E cuando las
concentraciones celulares de valina eran bajas (T.
Ramakrishnan y E. A. Adelberg. 1965. Journal of
Bacteriology 89:654-660). En el siguiente cuadro, se
muestran las concentraciones de enzimas producidas por
E. coli diploide parcial con diversas combinaciones de
mutaciones.
Cantidad de enzima producida
26. ¿En qué nivel de regulación génica mostrado en la figura
16-1 se produce la atenuación?
*27. Las partes de a a g enumeran algunas mutaciones halladas
en la región 5 ' UTR del operón trp de E. coli. ¿Cuál será
el efecto más probable de cada una de estas mutaciones
sobre l.a transcripción de los genes estructurales trp?
a. Una mutación que evita la unión del ribosoma al extre-
mo 5' de la 5' UTR del mRNA
b. Una mutación que cambia los codones de triptófano de
la región 1 de la 5' UTR del mRNA por codones de
alanina
c. Una mutación que crea un codón de terminación en la
región 1 de la 5' UTR del mRNA
d. Deleciones en la región 2 de la 5' UTR del mRNA
e. Deleciones en la región 3 de la 5' UTR del mRNA
f. Deleciones en la región 4 de la 5 ' UTR del mRNA
g. Deleción de la cadena de nucleótidos de adenina que
siguen a la región 4 de la 5' UTR

Genotipo E D A 28. Algunas mutaciones de la región 5' UTR de trp aumentan

la terminación por el atenuador. ¿Dónde podrían ocurrir
1. E+ n + A+ o+ I 2,40 2 3,50 estas mu taciones y cómo podrían afectar al atenuador?
E+ n+ A+ o+
2. E+ D + A+ 0-1 29. Algunas de las mutaciones mencionadas en el Problema
35,80 38,60 46,80
E+ D+ A+ o+
28 tienen una propiedad interesante. Impiden la formación
del antiterminador que normahnente tiene lugar cuando la
3. e+ D - A+ O- I 1,80 1 47
E+ D + A- o+
concentración de triptófano es baja. En u na de las muta-
4. E+ n+A- 0- I
ciones, hay deleción del codón de iniciación AUG para el
35,30 38 1,70
péptido de 5' UTR. ¿Cómo podría evitar esta n1utación
E+ V-A+ o+
5. E- D + A + O-/ que se produjera la antiterminación?
2,38 38 46,70
E+ V-A+ o+
Sección 16.4
a. ¿Es la proteína reguladora que se une al operador de
*30. Se han descubierto varios ejemplos de RNA antisentido
este operón un represor (control negativo) o un activa-
que regula la traducción en las células bacterianas. Los
dor (control positivo)? Explique su razonamiento.
genetistas moleculares también han utili zado RNA anti-
h. ¿Están los genes A, D y E bajo el control del operador sentido para controlar de manera artificial la transcripción
O? Explique su razonamiento. de genes bacterianos y eucariontes. Si deseara inhibir la
c. Proponga una explicación para el bajo nivel de enzima transcripción de un gen bacteriano con RNA antisentido,
E producido en el genotipo 3. ¿qué secuencias debería contener el RNA antisentido?

PREGUNTA DE DESAFIO

Sección 16.3
31. ¿Esperaría observar atenuación en el operón lac y otros
operones que controlan el metabolismo de azúcares? ¿Por
qué o por qué no?
 17
Control de la expresión génica
en eucariontes

Diferencias genéticas que nos hacen

humanos

Hace más de 140 años, Charles Darwin postuló que los

seres hu1nanos compartían un ancestro con1ún reciente
con los grandes simi os africanos. En la actualidad, hay
evidencia significativa de que nuestro pariente vivo más
cercano es el chimpancé. Evidencia fósil indica que los
seres humanos y los chimpancés divergieron genética-
n1ente hace solo 5 a 7 millones de años, un mero parpa-
deo en el tiempo evolutivo. Sin e1nba:rgo, los seres
hu1nanos y los chimpancés difieren en una gran canti-
dad de rasgos anatómicos, fisio lógicos, conductuales y
cognitivos. Por ejemplo, hay numerosas diferencias en
la estructura de la colunma vertebral, la pelvis, el crá-
neo, la mandíbula, los dientes, las manos y los pies de
seres humanos y chimpancés. El cerebro humano tiene
n1ás del doble de tamaño que el del chiinpancé, y los
seres humanos muestran características de lenguaje y
culturales complejas no observadas en los chimpancés.
De hecho, el grado de diferencia fenotípica entre an1bos
es tan grande que los científicos los ubican en familias
de primates totaltnente distintas (los seres humanos en
la fruni lia Hominidae y los chim pancés en la familia
Pongidae).
Pese al gran abismo fenotípico entre seres humanos y
chimpancés, la secuenciación de sus genon1as revela
que su DNA es notablemente similar. Solo alrededor
del 1% de pares de bases individuales difieren entre las
Los cambios de un pequeño número de secuencias reguladoras ayudan a pro- dos especies, junto con una diferencia del 3% en inser-
ducir las grandes diferencias fenotípicas entre seres humanos y chimpancés.
Aquí se ilustra una red de genes interactuantes de factores de transcripción que se
ciones y deleciones. Por consiguiente, el 96% del DNA
expresan de manera diferencial en el cerebro de seres humanos y chimpancés, y con-
de seres humanos y chimpancés es idéntico. Pero sin
trolan la expresión de otros genes. Los círculos rojos representan factores de transcrip- duda los seres humanos no son chimpancés. Entonces,
ción que tienen expresión más alta en el cerebro humano; los círculos verdes represen- ¿cómo llegaron a ser tan diferentes ambas especies?
tan factores de t ranscripción que tienen expresión más alta en el cerebro de chimpan- ¿Dónde están los genes que nos hacen seres humanos?
cé. (Edwin Hadley, University of lllinois). E n 1975, los genetistas Mary-Claire King y A. C.
Wilson propusieron una posible respuesta de esta pru·a-
doja. Aplicando las limitadas técnicas de esa época
(comparación de aminoácidos de las proteínas y estudios de hibridación del DNA), King y
Wilson concluyeron que los seres humano y los chimpancés diferían solo en alrededor del 1%
de sus secuencias de DNA. Para explicar cómo estos ca1nbios genéticos n1uy pequeños po-
drían explicar las grandes diferencias físicas y conductuales entre seres humanos y chimpan-
cés, King y Wil son sugirieron que las variaciones genéticas que nos hacen seres humanos se
concentran en secuencias reguladoras, las partes del genoma que controlan la expresión de
otros genes. De esta manera, pequeños crunbios genéticos podrían influir en la expresión de
1nuchos otros genes y afectar los fenotipos de nun1erosos rasgos en forma sin1ultánea.
473
474 CAP(TULO 17

Lam.entablemente, en esa época no se disponía de ninguna técnica para examinar secuencias regu-
ladoras y e investigar su hipótesis.
Avancemos basta 2009. Aplicando técnicas más avanzadas de investigación genómica y bioin-
formática, Katja Nowick y cols. en la University of Illinois y la Norges teknisk-naturvitenskapeli-
ge universitet (Universidad Noruega de Ciencia y Tecnología) identificaron un grupo de 90 facto-
res de transcripción, cuya expresión difería significativamente entre seres humanos y chin1pancés.
Co1no se comentó en el capítulo 13, los factores de transcripción son proteínas que se unen al
DNA y facilitan o reprimen la síntesis de RNA, el primer paso del proceso de transferencia de
inforn1ación del genotipo al fenotipo. Cada factor de transcripción puede afectar la expresión de
múltiples genes, de manera que un pequeño cambio genético que afecta la expresión de un solo
factor de transcripción puede influir en muchos genes adicionales. Las diferencias que Nowick y
cols. hallaron en la expresión de los factores de transcripción fueron particularmente pronunciadas
en el tejido cerebral, donde pueden explicar las grandes diferencias de fu nción neural y cognitiva
de los seres humanos y los chimpancés.
Muchos de los factores de transcripción que Nowick y cols. identificaron fueron proteínas con
dedos de cinc del dominio de caja asociada a Krüppel (KRAB-ZFP), fac tores de transcripción que
se unen a secuencias específicas del DNA y causan cambios en la est1uctura de la cromatina.
Como analizaremos en este capítulo, los cambios en la estructura de la cromatina a menudo están
involucrados en la regulación de la expresión génica. Otros estudios han den1ostrado que las
KRAB-ZFP han evolucionado con rapidez en seres humanos, probablemente favorecidas por
selección natural. Los factores d e transcripción identificados por Nowick y cols. se agrupaban en
dos redes reguladoras interconectadas pero distintas, encargadas del control del metabolismo ener-
gético, la transcripción, el transporte vesicular y la 1nodificación de proteínas.
Estos resultados avalan la idea propuesta por primera vez por King y Wilson: que los cambios
de un número relativamente pequeño de secuencias reguladoras afectan la expresión de numerosos
genes en seres hu1nanos y chi1npancés, y ayudan a producir las grandes diferencias observadas en
la anatomía, el tamaño del cerebro, la cognición y la conducta.

E ste capítulo analiza la regulación génica en células eucarion-

tes, los can1bios propios que ayudan a hacer únicos a los
seres humanos. Por lo general, la regulación génica tiene lugar en
múltiples niveles. Comenzamos considerando cómo influyen
en la expresión génica los cambios en la estluctura de la cromati-
na, que puede ser modificada por vatios mecanismos. A continua-
ción, consideramos el üúcio de la transcripción en eucariontes,
que es controlada por una interacción compleja de vari os tipos de
proteínas y los elementos reguladores del DNA a los que se unen.
Examinamos varias maneras en las que se controla la expresión
génica mediante procesamiento, degradación y traducción del
1nRNA. Por último, revisamos algunas de las similitudes y dife-
rencias de la regulación génica en bacterias y eucariontes.
17.1 Las células eucariontes y las bacterias
tienen muchas características de regulación
génica en común, pero difieren en varios
aspectos importantes
Co1no se co1nentó en el capítulo 16, muchas características de la
regulación génica son comunes a células bacterianas y eucarion-
tes. Por ejemplo, en ambos tipos de células las proteínas de unión
a DNA influyen en la capacidad de la RNA polimerasa para ini-
ciar la transcripción. Sin e1nbargo, también hay algunas diferen-
cias. Primero, 1nuchos genes procariontes están organizados en
operones y se transcriben a una única rnolécula de RNA. Si bien
se han hallado algunos grupos de genes similares a operones en
gusanos y algunos cordados primitivos, la mayoría de los genes
eucariontes tienen sus propios promotores y se transcriben por
separado. Segundo, la estt·uctura de la cromatina afecta la expre-
sión génica en células eucariontes; el DNA debe desenrollarse de
las bistonas antes de que pueda tener lugar la transcripción.
Tercero, en las células eucariontes la presencia de la membrana
nuclear separa la transcripción y la traducción en tiempo y espa-
cio. Por lo tanto, la regulación de la expresión génica en células
eucariontes se caracteriza por una mayor diversidad de mecanis-
mos que actúan en diferentes puntos de la transferencia de infor-
mación del DNA a la proteína.
La regul ación génica eucarionte se conoce 1nenos que la bacte-
riana, debido, en parte, a los genomas más grandes de los euca-
1iontes, su mayor complejidad de secuencias y la dificultad para
aislar y manipular mutaciones que pueden ser utilizadas para el
estudio de la regulación génica. No obstante, en los últünos años
ha habido grandes avances en nuestro conocimiento de la regula-
ción de genes eucariontes.
17.2 Los cambios de la estructura
de la cromatina afectan la expresión génica
En las células eucariontes, un tipo de control génico se logra
mediante la modificación de la estructura de la cromatina. En el
núcleo, las proteínas histona se asocian para formar octámeros,
alrededor de los cuales se enrolla estrechamente el DNA helicoi-
dal para crear la cron1atina (véase fig. 11-4). En un sentido gene-
ral, esta estructura de la cromatina reprime la expresión génica.
Para que se transcriba un gen, factores de transcripción, otras pro-
teínas reguladoras y la RNA polimerasa deben unirse al DNA.
¿Cómo pueden producirse estos eventos con el DNA estrecha-
mente envuelto alrededor de las bistonas? La respuesta es que,
antes de la transcripción, cambia la estructura de la cromatina y
el DNA se torna más accesible a la maquinaria de transcripción.
 Control de la expresión génica en eucariontes 475

Nucleosomas
Hipersensibilidad a la DNasa 1
--.
Se observan varios tipos de cambios de la estructura de la croma-
,, ,
~--"--'- .,-.?-
tina cuando los genes se tornan transcripcionalmente activos. A
1nedida que los genes se tornan activos desde el punto de vista de
D El complejo de remodelación de 1
-l '----
y - ATP
la transcripción, las regiones que rodean los genes se vuelven
la cromatina se une al DNA...
n1uy sensibles a la acción de la DNasa I (véase cap. 11). Estas
regiones, denominadas sitios de hipersensibilidad a la DNasa I , fl ...y reposiciona los ADP + P¡
suele n aparecer alrededor de 1000 nucleótidos en dirección 5' res- nucleosomas, lo que Complejo de
expone un sitio de unión
pecto del sitio de iniciación de la transcripción, lo que sugiere que remodel ación
a factores de transcripción. j de la cr o mat ina
la cromatina de estas regiones adopta una configuración más
abierta durante la transcripción. Esta relajación de la estructura de \
la cromatina permite el acceso de las proteínas reguladoras a
sitios de uni ón en el DNA. D e hecho , muchos sitios hipersensi-
bles a la DNasa I corresponden a sitios de unión conocidos para Sitio de u n ión
/
proteínas reguladoras. Por lo menos tres procesos diferentes afec- pa ra e l f actor de Factor de
t ranscr ipción transcripció n
tan la regulación génica por modificación de la estructura de la
cromatin a: 1) remodelación de la cromatina, 2) n1odificación de
las histonas, 3) m etilación del DNA. En las secciones siguientes,
se analizará cada uno de estos mecani smos.

CONCEPTOS D Los factores de

transcripción y la RNA 1
polimerasa se unen al RNA p olimerasa
La sensibilidad a la digestión por DNasa I indica que el DNA transcri-
DNA e inician la
to asume una configuración abierta antes de la transcripción . transcripción. J

Remodelación de la cromatina
Algunos factores de transcripción y otras proteínas reguladoras
1nodifican la estructura de la cromatina sin alterar en forma direc-
ta la estructura química de las histonas . Estas proteínas se deno-
minan complejos de remodelación de la cromatina. Se unen
directan1ente a sitios particulares del DNA y reposicionan los
nucleosomas, lo que permite que los factores de transcripción y la
RNA polimerasa se unan a los promotores e inicien la transcrip-
ción (fig. 17-1).
U no de los ej en1plos mejor estudiados de un complej o de reino-
delación de la cromatina es SWI-SNF, que se halla e n levaduras,
seres humanos, Drosophila y otros organismos. Este complejo
utiliza energía derivada de la hidrólisis de ATP para reposicionar
nucleosomas, lo que expone a los p romotores del DNA a la
acción de otras proteínas reguladoras y de la RNA polimerasa.
La evidencia sugiere por lo menos dos mecanismos a través de
los c uales los complej os de re1nodelación reposicionan los nucle-
osomas. Primero, algunos complejos de remodelación causan que
el nucleosom a se deslice a lo largo del DN A, lo que p ermite
que el DNA que estaba enrollado alrededor del nucleosoma ocu-
pe una posición entre los nucleosomas, donde es 1nás accesible a
las proteínas que inciden en la expresión génica (véase fig. 17-1).
Segundo, algunos compl ejos causan ca1nb ios de confo1111ación e n
el DNA, en los nucleosomas o e n ambos, de manera que el DNA
unido al nucleosoma asume una configuración más expuesta.
Los complejos de ren1odelación de la cromatina son dirigidos a
secuencias de DNA específicas por activadores o represores de la
transcrip ción , que se unen a un complejo de remodelación y des-
pués, a los promotores de genes específicos. Asi mismo, hay evi-
dencia de que los complejos de remodelación de la cromatina tr a-
baj an juntos con e nzimas que modifican histonas, como enzimas
acetiltransferasa (véase siguiente sección), para alterar la estruc-
tura de la cromatina y exponer el DNA para la transcripción.
/
mRNA
Figura 17-1. Los complejos de remodelación de la croma-
tina reposicionan los nucleosomas, lo que permite que
los factores de transcripción y la RNA polimerasa se
unan a los promotores e inicien la transcripción.
Modificación de las histonas
Las hi stonas del octámero central del nucleosoma tienen dos do-
minios: 1) un dominio globular que se asocia con otras histonas y
el DNA, y 2) un dominio de cola con carga positiva que interactúa
con grupos fosfato negativamente cargados del esqueleto axial del
DNA. Las colas de las histonas a menudo son modificadas por la
adición o la eliminación de grupos fosfato, grupos metilo o grupos
acetilo. Otra modificación de las histonas es la ubic uitinación, en
la que pequeñas moléculas denominadas ubicuitina se agregan o
se eliminan de las histonas. En ocasiones, todas estas modificacio-
nes se han denonúnado código de histonas, porque codifican
infor1nación que afecta la manera de expresión de los genes. El
código de bistonas afecta la expresión génica por modificación
directa de la estructura de la cron1atina o, en alg unos casos, por
serv ir como sitio de reconocimiento para las proteínas que se unen
al DNA y que después regulan la transcripción.
METILACIÓN DE LAS HISTONAS Un tipo de modificación de las bis-
tonas es la adición de grupos metilo a las colas de las histonas.
Estas modificaciones pueden causar activación o represión de la
transcripción, lo que depende de q ué aminoácidos particulares de
la cola de histonas sean metilados. Enzimas denominadas histona
metiltransferasas agregan grupos metilo a anúnoácidos especí-
ficos (por Jo general, lisina o arginina) de las histonas. Otras en-
476 CAPÍTULO 17
zimas, conocidas como hi stona desmetilasas, eliminan grupos
metilo de las histonas. Muchas de las enzimas y proteínas que
1nodifican histonas, como metiltransferasas y desmetilasas, no se
unen a secuencias específicas del DNA y deben ser reclutadas a
sitios específicos de la cromatina. Las proteínas de unión a se-
cuencias específicas, las modificaciones preexistentes de las his-
tonas y las moléculas de RNA sirven para reclutar enzimas 1nodi-
ficadoras de histonas a sitios específicos.
Una modificación común es la adición de tres grupos metilo a
la lisina 4 de la cola de la proteína histona H3 , abreviada
H3K4n1e3 (K es la abreviatura de lisina). Las histonas que con-
tienen la 1nodificación H3K4me3 suelen hallarse cerca de los pro-
1notores de genes activos desde el punto de vista de la transcrip-
ción en eucariontes. Algunos estudios han identificado proteínas
que reconocen a H3K4me3 y se unen a ella, incluido el factor de
remodelación del nucleosoma (NURF, nucleosome remodeling
factor). El NURF y otras proteínas que reconocen a H3K4me3
tiene n un dominio común de unión a proteínas que se une a la co-
la de las hi stonas H3, y después 1nodifica11 el ernpaqueta1niento
de la cromatina, lo que permite que se lleve a cabo la transcrip-
ción. Asimismo, la investigación ha demostrado que algunos fac-
tores de transcripción, que son necesarios para la iniciación de la
transcripción (véanse cap. 13 y Sección 17.3), se unen directa-
1nente a H 3K4me3.
ACETILACIÓN DE LAS HISTONAS Otro tipo de modificación de las
histonas que afecta la estn1ctura de la cromatina es la acetilación,
adición de los grupos acetilo (CH3CO) a la histona. Por lo gene-
ral, la acetilación de las histonas estimula la transcripción. Por
ejemplo, la adición de un gn1po acetilo a la lisina 16 de la cola de
la histona H4 impide la formación de la fibra de cromatina de 30
nm (véase fig. 11-4), lo que determina que la cromatina tenga una
configuración abierta y esté disponible para la transcripción. Los
grupos acetilos suelen desestabilizar la estructura de la cromatina,
lo que per1nite que tenga lugar la transcripción (fig. 17-2). En-
zimas acetiltransferasas añaden grupos acetilo a las proteínas his-
tona; otras enzünas, denominadas desacetilasas, eliminan grupos
acetilo de las histonas y restabl ecen la estructura de la cromatina,
lo que reprime la transcripción. Ciertos factores de transcripción
( véase cap. 13) y otras proteínas que regulan la transcripción tie-
nen actividad de acetilu·ansferasa o atraen acetiltransferasas al
DNA.
LA ACETILACIÓN DE LAS HISTONAS CONTROLA LA FLORACIÓN EN
ARABIDOPSIS La importancia de la acetiJación de histonas en la
regulación génica se demuestra por el control de la floración en
Arabidopsis thaliana, una planta con una serie de características
que la convierten en un excelente modelo genético para sistemas
vegetales (véase información adicional en la Guía de referencia
de organisn1os genéticos n1odelo, al final del libro) . El momento
e n el que tiene lugar la floración es crucial para la vida de una
planta; si la floración se inicia e n la época inco1Tecta del año,
puede no haber polinizadores disponibles para fecundar las flores
o las condiciones ambientales pueden ser inadecuadas para la
supervivencia y la germinación de las semillas. En consecuencia,
el momento de la floración en la mayoría de las plantas se regula
de manera c uidadosa en respuesta a múltiples indicios internos y
externos, como ta1naño de la planta, fotoperíodo y temperatura.
Entre los numerosos genes que controlan la floración en Ara-
bidopsis, se encuentra el locus de floración (FLC), que desempe-
Proteína histona DNA
Las colas de las histonas
positivamente cargadas
interactúan con los grupos
fosfato del DNA cargados j
negativamente.
l
Cola cargada
• positivamente
La acetilación de las colas
debilita su interacción con
el DNA y permite que algu-
nos factores de transcrip-
ción se unan al DNA.
Figura 17-2. la acetilación de proteínas
histona modifica la estructura de la cro-
matina y permite que algunos factores
de transcripción se unan al DNA.
ña un papel importante en suprimir la floración hasta después de
un período prolongado de frío (proceso denominado vernaliza-
ción). El gen FLC codifica una proteína reguladora que reprime
la actividad de otros genes que afectan la floración (fig.17-3). En
tanto FLC está activo, persiste la supresión de la floración. La
actividad de FLC es controlada por otro locus denominado locus
de floración D (FW), cuyo papel clave es estimular la floración
reprimiendo la acción del FLC. En esencia, la floración es estimu-
lada porque FLD reprime al represor. ¿Cómo rep1ime FW a
FLC?
FLD codifica una enzima desacetilasa, que elimina grupos
acetilo de las histonas en el FLC que rodea la cromatina (véase
fig. 17-3). La e1iminación de grupos acetilo de las histonas modi-
fica la estructura de la cromatina e inhibe la transcripción. Esta
inhibición impide la transcripción del FLC y elirnina su represión
sobre la floración. En breve, FLD estirnula la floración en Ara-
bidopsis por desacetilaci6n de la cromatina que rodea el FLC, lo
que elimina su efecto inhibitorio sobre la floración.
Los cambios de la estructura de la cromatina que afectan la
expresión génica, como los mecanismos recién descritos (remode-
lación de la cron1atina, modificación de las histonas y metilación
del DNA), son ejemplos del fenómeno de epigenética. La epigené-
tica se define como modificaciones de la estructura del DNA y de
la cromatina que inciden en los rasgos y que se transmiten a otras
células o generaciones, pero que no son causadas por cambios de
las secuencias de bases del DNA. Los cainbios epigenéticos y sus
efectos sobre la regulación génica se analizarán con más detalle en
el capítulo 21. ~•~~~~~~~~~~~
INMUNOPRECIPITACIÓN DE LA CROMATINA La aplicación de una
técnica denominada inmunoprecipitación de la cromatina (ChIP)
ha permitido que avance mucho nuestro conocimiento sobre la
 Cromatina
acetilada

-
FLC FLD
Cromatina
/ ~

Los grupos acetilo de

s histonas desesta-
Transcripción ilizan la estructura Transcripción

mRNA
la cromatina.

El locus C de la
floración (FLC)
mRNA •
codifica una proteína
Traducción Traducción
reguladora que Restauración
reprime la floración. .. .que elimina grupos de la cromatina
acetilo y restablece la
estructura de la '
cromatina. Ausencia deJ
transcripción
Proteína reguladora Enzima
desacetilasa (Í No se produce la -Y,-
~ anscripción de FLC. J
No hay
floración. , El locus D de la flora-
ción (FLD) codifica una
enzima desacetilasa ... fii; floración no se
suprime y, por lo
~ ~to, hay floración.

Figura 17-3. En Arabidopsis, la floración está controlada en parte por FLD, un

gen que codifica una enzima desacetilasa. Esta enzima elimina grupos acetilo de
las histonas de la cromatina que rodea a FLC, un gen que suprime la floración. La eli-
Represión minación de los grupos acetilo de las histonas restablece la estructura de la cromati- No hay represión
de la floración na y reprime la transcripción de FLC, lo que permite la floración de la planta. de la floración

1nanera en que los cambios de la estn1ctura de la cromatina se
asocian con la expresión génica y sobre cómo las proteínas de
unión al DNA afectan la transcripción. Esta técnica permite que
los investigadores determ inen las localizaciones específicas den-
tro del genoma en el que las proteínas interactúan con el DNA.
Esas proteínas podrían ser histonas que han sufrido modificacio-
nes, factores de transcripción u otras proteínas que se unen a pro-
1notores e intensificadores (secuencias que influyen en la trans-
cripción de genes distantes; véase cap. 13).
La idea básica de la ChIP consiste en aislar una proteína parti-
cular y el DNA al que se une, después se separan la proteína y el
DNA, y se identifica la secuencia de DNA a la que la proteína
estaba formalmente unida. La técnica ha aportado un poderoso
medio para determinar las localizaciones en todo el genoma de las
histonas modificadas y los sitios de unión para factores de trans-
cripción y otras proteínas que afectan la transcripción.
Una versión de la ChIP, denominada ChIP con en laces cruza-
dos (XChlP), se utiliza para identificar los sitios de LLnión de fac-
tores de transcripción y otras proteínas que se unen al DNA. En
este procedimiento (fig. 17-4), se induce la formación de enlaces
cruzados transitorios entre la proteína y el DNA asociado, lo que
significa que son tratados con fo rn1aldehído o luz UV para crear
enlaces covalentes entre el DNA y la proteína. Los enlaces cruza-
dos mantienen juntos al .D NA y la proteína, de manera que el
DNA al que se une la proteína se separará junto con esta. Después
de la formación de enlaces cruzados, se lisa la célula y se frag-
menta la cromatina por digestión enzimática o por cizallarniento
mecánico. Luego, se aplican anticuerpos específicos para una
proteína particular, por ejemplo un factor de transcripción especí-
fico. Los anticuerpos se unen a los complejos proteína-DNA y
determinan su precipitación. Luego se revierte el enJace cruzado
y se separan el DNA y la proteína. La proteína es eliminada por
una enzima que digiere la proteína pero no el DNA, lo que deja
los fragmentos de DNA a los que estaba unida la proteína. Luego,
estos fragmentos se pueden secuenciar o identificar con otros
métodos. El resultado es la información acerca de las localizacio-
nes genómicas de sitios de unión para la proteína específica.
Una versión de esta técnica, denominada ChIP nativa (nChIP) ,
no utiliza enlaces cruzados. A menudo, se la emplea para hallar
las localizaciones de las histonas modificadas. En ese caso, no se
requieren enlaces cruzados porque el DNA y las histonas están
naturalmente Ligados por la estructura del nucleoso.ma. Se aísla la
cron1atina de ]a célula y se la fragmenta, y se utili zan anticuerpos
contra una proteína particular (en general, una histona modifica-
da específica) para precipitar los complejos proteína-DNA. Se
separan la proteína y el DNA, se digiere la proteína y se secuen-
cian o identifican de otra manera los fragmentos de DNA a los
que estaban unidas Las histonas modificadas.
Se ha recurrido al análisis de ChIP para determinar las localiza-
ciones de histonas modificadas que activan o reprimen la trans-
cripción. Corno se mencionó, la marca de histona H3K4me3 se
asocia con promotores de genes activos. La nChIP ha identifica-
477
478 CAP(TULO 17

Proteína de
unión a DNA CONCEPTOS
DNA

/ Las colas de las histonas a menudo se modifican por la adición o la

eliminación de grupos fosfato, grupos metilo o grupos acetilo, u otros
cambios. Estas modificaciones alteran la estructura de la cromatina y
afectan la transcripción de los genes.

Enlaces cruzados
de DNA y proteínas Metilación del DNA
Otro cambio de la estructura de la cromatina asociada con la
transcripción es la metilación de las bases citosina, que da por
resultado 5-metilcitosina (véase tig. 10-19). La meti1aci6n de la
citosina del DNA es distinta de la metilación de las proteínas his-
tona mencionada antes. El DNA intensamente metilado se asocia
con represión de la transcripción en los vertebrados y las plantas,
¡Lisis celular núentras que el DNA transcripcionalmente activo en general no
está metilado en estos organismos. Asinlis1no, algunos tipos de
cáncer se asocian con patrones anormales de metilación.
~ """' La metilación del DNA es más común en las bases citosina adya-
1Fragmentación
tde la cromatina centes a nucleótidos de guanina (CpG, donde p representa el giupo
fosfato del esqueleto axial del DNA); por consiguiente, dos citosi-
VW\ nas metiladas se ubican en diagonal entre sí en cadenas opuestas:
--· 4
m
Agregado de anticuerpos
y 5'-C G-3 '
y precipitación
3'-G C- 5'
m

Las regiones de DNA con numerosas secuencias CpG se deno-

Separación de DNA y proteínas
Digestión de proteínas
minan islas CpG y suelen hallarse cerca de los sitios de inicio de
la transcripción. Mientras no se transcriben los genes, estas islas
CpG suelen estar 1netiladas, pero los grupos metilo se elin1inan an-
tes de que se inicie la transcripción. Asimismo, la metilación de
CpG se asocia con represión génica a largo plazo, como la del cro-
moson1a X desactivado de los mamíferos hembra (véase cap. 4).
La evidencia indica que existe una asociación entre la metilación
del DNA y la desacetilación de histonas, procesos que reprimen,
ambos, la transcripción. Ciertas proteínas que se unen estrecha-
mente a secuencias CpG metiladas forman complejos con otras
proteínas que actúan como desacetilasas de histonas. En otras pa-

~
~
! Secuencia de fragmentos
de DNA
~
labras, la metilación parece atraer desacetilasas, que eliminan gru-
pos acetilo de las colas de las histonas, lo que estabiliza la estruc-
tura del nucleosoma y reprime la transcripción. La desmetilación
,,
~

del DNA permite que las acetiltransferasas agreguen grupos aceti-

, ,, ,.
,., , lo, lo que altera la estructura de los nucleosomas y permite la
" " r, r,

w ~
(' "" ~(\ " " V\ ,
transcripción. l!.►~~:!!:::!~~=!:!~!::!.!!!!!::::!~~~!.I

T e T G G T G T T G A A G A G
Figura 17-4. Se puede recurrir a inmunoprecipitación de la
cromatina (ChlP) para identificar sitios de unión al DNA de
una proteína específica y las localizaciones de las proteínas
histona modificadas. Aquí se muestra el método para inmuno-
precipitación de cromatina con enlaces cruzados (XChlP).
e A G A
CONCEPTOS
La estructura de la cromatina puede modificarse por metilación del
DNA. En los eucariontes, la metilación del DNA consiste en 5-metilci-
tosina que aparece en dinucleótidos CpG. Por lo general, la metila-
ción del DNA se asocia con represión de la transcripción .

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1

do con éxito localizaciones de esta histona modificada del geno- ¿ Cuáles son algunos de los diferentes procesos que afectan la regu-
1na humano, lo que ayuda a identificar promotores activos en lación génica por modificación de la estructura de la cromatina?
diferentes tejidos.

17.3 La iniciación de la transcripción
es regulada por factores de transcripción
y proteínas reguladoras
Ya considerainos un nivel en el que se controla la expresión géni-
ca: la modificación de la estructura de la cromatina y el DNA.
Ahora consideraremos otro nivel de control importante: control a
través de la unión de proteínas a secuencias de D NA que afectan
la transcripción. La transcripción es un nivel impo1tante de con-
trol en células eucariontes, y este control requiere una serie de
tipos diferentes de proteínas y elementos reguladores. En el capí-
tulo 13, se analizó con detalle la iniciación de la transcripción en
eucari ontes. Recuérdese que los factores de transcripción general
y la RNA polimerasa se ensamblan en un apai·ato de transcripción
b asal, el complejo de RNA polimerasa, factores de transcrip-
ción y otras proteínas que llevan a cabo la transcripción. El apa-
rato de transcripción basal se une a un promotor mínimo locali-
zado irunediatainente en dirección 5' respecto de un gen y es capaz
de iniciar niveles mínimos de transcripción; se requieren proteí-
nas reguladoras de la transcripción para inducir niveles normales
de transcripción. Estas proteínas se unen a un promotor regula-
dor, que se localiza en dirección 5 ' respecto del promotor mínimo
(fig. 17-5), y a intensificadores, que pueden localizarse a cierta
distancia del gen. Algunas proteínas reguladoras de la transcrip-
ción son activadores, que estimulan la transcripción. Otros son
represores, que inhiben la transcri pción.
Activadores y coactivadores de la transcripción
Las proteínas activadoras de la transcripción estimulan y estabili-
zan el aparato de transcripción basal en el promotor n1ínilno. Los
activadores pueden interactuar en fo1ma directa con el aparato de
Sitio de unión a activadores
(promotor regulador) Promotor mínimo
DNA
Los factores de transcripción, la
RNA polimerasa y las proteínas
activadoras de la transcripción :::::....
se unen al DNA y estimulan la
transcripcíón .
Coactivador
\
Proteína activadora
de la transcripción \ transcripción
------v
Aparato de transcri pción basal
Control de la expresión génica en eucariontes 479
transcripción basal o en forma indirecta a través de coactivadores
proteicos. Algunos activadores y coactivadores, así co mo los fac-
tores de transcripción general, también tienen actividad de acetil-
transfe rasa y, por consiguiente, estimulan aún más la transcrip-
ción n1odificando la estructura de la cromatina.
Las proteínas activadoras de la transcripción cu1nplen dos fun-
ciones distintas (véase fig. 17-5). Primero, son capaces de unirse
al DNA en una secuencia de bases específica, en general una
secuencia consenso de un promotor regulador o un intensificador;
para esta función, la mayoría de las proteínas activadoras de la
transcripción contienen uno o más motivos de unión al DNA,
como hélice-giro-hélice, dedo de cinc y cremallera de leucina
(véase cap. 16). Una segunda función es la capacidad de interac-
tuai· con otros componentes del aparato de la transcripción e
influir en la velocidad de transcripción.
Dentro del promotor regulador, suele haber varias secuencias
consenso diferentes a las que pueden unirse distintos activadores
de la transcripción. Entre los diversos pron1otores, los sitios de
unión al activador se mezclan y se con1binan en diferentes combina-
ciones (fig. 17-6); por lo tanto, cada promotor es regulado por una
combinación única de proteínas activadoras de la transcripción.
Las proteínas activadoras de la transcripción se unen a las se-
cuencias consenso del promotor regulador y afectan el ensambla-
je o la estabilidad del aparato de transcripción basal en el promo-
tor mínilno. Uno de los componentes del aparato de transcripción
basal es un complejo de proteínas denominado mediador (véase
tig. 17-6). Las proteínas activadoras de la transcripción que se
unen a las secuencias del promotor regulador (o intensificador,
véase siguiente sección) hacen contacto con el mediador y afec-
tan la velocidad de iniciación de la transcripción. Algunos pro-
motores reguladores también contienen secuencias que se unen a
proteínas que reducen la velocidad de transcripción 1nediante
interacciones inhibitorias con el mediador.
I L.+
Caja TATA Iniciación de la
transcripción
Proteína activadora
de la transcripción
RNA
__....Mediador polimerasa
-~ /
TATA Figura 17-5. Las proteínas activa-
1 •
doras de la transcripción se unen
\
Factores de
a sitio del DNA y estimulan la
transcripción. La mayoría actúa esti-
) mulando o estabilizando el ensambla-
je del aparato de transcripción basal.
480 CAPÍTULO 17

Promotor regulador Pro motor mínimo REGULACIÓN DEL METABOLISMO DE LA GALACTOSA A TRAVÉS DE
- - - - - - - - - ' ' - - - - - - - - - - . . . . ...---A.__...., GAL4 Un ejemplo de proteína activadora de la transcripción es
Promotor temprano de SV40 r "
GAL4, que regula la transc1ipción de varios genes de levadura cu-
GC GC GC GC GC GC yos productos metabolizan galactosa. Al igual que los genes del
operón lac, aquellos que controlan el metabolismo de la galacto-
1 •
sa son inducibles: en ausencia de galactosa, estos genes no se
Sitio de iniciación transcriben, y no se producen las proteínas que degradan la galac-
de la transcripción tosa; en presencia de galactosa, se transcriben los genes y se sin-
Promotor de timidina cinasa tetizan las enzimas. GAIA contiene varios dedos de cinc y se une
OCT GC CAAT GC TATA a una secuencia de DNA llamada UASG (secuencia activadora en
dirección 5' para GAL4). UASG presenta las propiedades de un
intensificador, una secuencia reguladora que puede estar a cierta
• distancia del gen regulado y es independiente del gen en posición
y otientación (véase cap. 13). Cuando se une a UASG, GAIA
Promotor de histona H2B
activa la transcripción de los genes de levadura necesarios para
OCT CAAT CAAT OCT TATA metabolizar la galactosa. GAL4 y una serie de otras proteínas
activadoras de la transcripción contienen múltiples aminoácidos
con cargas negativas que forman un dominio acídico de activa-
- 120 - 100 - 80 - 60 -40 - 20 • ción. Estos activadores acídicos estimulan la transcripción al
intensificar el ensamblaje del aparato de transcripción basal.
Caja TATA - Caja GC Una región particular de GAL4 se une a otra proteína denomina-
Caja CAAT - Elemento octámero (OCD da GAL80, que regula la actividad de GAL4 en presencia de galac-
tosa. En ausencia de galactosa, GAL80 se une a GAIA, lo que evita
que esta última active la transcripción (fig. 17-7). En cambio, cuan-
Figura 17-6. Las secuencias consenso de los promotores de tres
do hay galactosa presente, esta se une a otra proteína denon1inada
genes eucariontes ilustran el principio de que diferentes secuencias
se pueden mezclar y combinar de distintas maneras. Una proteína
GAL3, que interactúa con GAL80, lo que causa un cambio de con-
activadora de la t ranscripción diferente se une a cada secuencia consenso, formación de GAL80, de manera que esta ya no puede unirse a
de manera que cada promotor responde a una combinación única de pro- GAL4. Entonces, la proteína GAIA puede activar la transcripción
teínas activadoras. de los genes, cuyos productos metabolizan la galactosa.

GAL4 UASG
/4_ _ __

IIEn ausencia de galactosa, - -_-:..-:._- -c;AL80

GAL80 bloquea a GAL4 y evita
que active la transcripción.

TATA
49 49
Aparato de transcripción basal

•
GAL3
• • •• Galactosa
••

GAL4

0 Ahora, GAL4 puede interactuar
con el aparato de t ranscripción
basal y estimular la transcripción .
TATA
49 Figura 17-7. GAL4 activa la trans-
cripción en respuesta a la galacto-
GAL80 GAL3 faEn presencia de galactosa, sa. GAL4 se une al sitio UASG y con-
\ esta se une a GAL3 e induce trola la transcripción de los genes que
un cambio de conformación participan en el metabolismo de la
de GAL80. galactosa.

El intensificador I puede estimular la
transcripción del gen A, pero el aisla- Proteína
dor bloquea su efecto sobre el gen B. de unión al
ais lador
xJ,. x
IAiilamw -
Ci&ne4=_ _ Promotor
., -----'====--
_.J
Iniciación de
la transcripción
Represores de la transcripción
En las células e ucariontes, algunas proteínas reguladoras actúan
con1 0 represores e inhiben la transcripción. Estos represores se
unen a secuencias del promotor regulador o a secuencias distan-
tes denominadas silenciadores, que, al igual que los intensificado-
res, son independientes de la posición y la orientación. A diferen-
cia de los represores en las bacterias, la 1nayoría de los re presores
eucariontes no bloquean en forma directa la RNA polünerasa.
Estos represores pueden competir con activadores por los sitios
de unión al DNA: cuando tu1 sitio es ocupado por un activador, se
activa la transcripción, pero si un represor ocupa ese sitio, no hay
activación. Alternativamente, un represor puede unirse a sitios
cercanos a un activador y evita que el activador entre en contacto
con el aparato de transcripción basal. Un tercer n1ecanis1110 posi-
ble de acción de los represores es la interferencia directa con e l
e nsamblaje del aparato de transcripción basal , lo que bloquea la
iniciación de la transcripción.
CONCEPTOS
En las células eucariontes, las proteínas reguladoras de la transcrip-
ción pueden influir en la iniciación de la transcripción afectando la
estabilidad o el ensamblaje del aparato de transcripción basal. Al-
gunas proteínas reguladoras son activadoras y estimu lan la transcrip-
ción; otras son represoras e inh iben la iniciación de la t ranscripción.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
La mayoría de las proteínas activadoras de la transcripción afectan la
t ranscripción por interacción con
a. intrones,
b . el apa rato de t ranscri pción basal,
c. la DNA polimerasa,
d. el t erminador.
lntensificadores y aisladores
Los intensificadores son capaces de afectar la transc1ipción en
promotores distantes. Por ejemplo, un intensificador que regula el
gen que codifica la cadena alfa del receptor de linfocitos T se
localiza 69 000 pb en dirección 3' respecto del pro1notor de l gen.
Más aún, la posición y la orientación exactas de un intensificador
respecto del promotor pueden va1iar. ¿Cómo puede afectar un
inte nsificador la inj ciación de la transcripción que tiene lugar en
un promotor que se encuentra a decenas de miles de pares de
bases? E n muchos casos, las proteínas reguladoras se unen al
inte nsíficador y hacen que el DNA entre el intensificador y el pro-
Control de la expresión génica en eucariontes 481
El intensificador 11 puede estimular la Figura 17-8. Un aislador blo-
transcripción del gen B, pero el aisla- quea la acción de un intensifi-
dor bloquea su efecto sobre el gen A. cador sobre un promot or cuan-
do el aislador se localiza ent re
-..
1 "
el intensif icador y el promotor.
Promotor Gll•111111ee/1Jm- =~
Iniciación de
la transcripción
motor for111e un rulo, lo que acerca entre sí al promotor y al inten-
sificador, de manera que las prote ínas reguladoras de la transcrip-
ción pueden interactuar directamente con el aparato de trans-
cripción basal e n el pro1notor minin10 (véase fig. 17-5). Algunos
intensificadores pueden ser atraídos por proteínas que se unen a
secuencias de l promotor regulador y "fijan" al intensificador
cerca del promotor mínilno. A simismo, los intensificadores pue-
den afectar la transcripción por sufrir modificaciones que alteran
la estructw·a de la cromatina. Un intensificador típico tiene alre-
dedor de 500 pb de longitud y conti ene 1O sitios de unión para
proteínas que regulan la transcripción.
Investigaciones recientes demuestran que muchos intensifica-
dores se transcriben a sí mismos a moléculas cortas de RNA de-
nominadas RNA intensificadores (eRNA). La evidencia sugiere
que la transcripción de un intensificador suele asociarse con
transcripción en los promotores afectados por los inte nsificado-
res. No se ha esclarecido cómo la transcripción en e l intensifica-
dor podría afectar la transcripción que ocurre en un promotor dis-
tante. Los intensificadores podrían reclutar RNA polimerasa, que
después es transferida al promotor cuando el intensificador inte-
rac túa con el promotor. Alternativamente, la transcripción del
intensificador podría pennítir que la cro111atina adoptara una con-
figuración más abierta, que después facilita la transcripc ión en
promotores cercanos.
La mayoría de los intensificadores son capaces de estimular cual-
quier promotor de sus vecindades. Sin embargo, sus efectos son
linútados por aisladores (denominados también elementos límite),
que son secue ncias de DNA que bl oquean o aíslan el efecto de
intensificadores de manera dependiente de la posición. Si e l ai sla-
dor se ubica entre el intensificador y el promotor, este bloquea la
acción del intensificador; pero sí el aislador se localiza fuera de
la región entre los dos, no ejerce ningún efecto (fig. 17-8) Proteínas
específicas se unen a aisladores y desempeñan un papel en su acti-
vidad de bloqueo. Algunos ai sladores también limitan la propaga-
ción de cambios de la estructura de la cromatina que afectan la
transcripción. En los procariontes, se encuentran algunos elementos
similares a intensificadores. i::►.!!!:!!!::!::!!:::!!!:!:2=!:!:!!!::!::.!!!!2==:!!:!:!!!S!.I
CONCEPTOS
Algunas proteínas reguladoras se unen a intensificadores, que son
elementos reguladores que están alejados del gen cuya t ranscripción
estimulan. Los aisladores son secuencias de DNA que bloquean la
acción de los intensificadores.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿ Cómo afecta la transcripción la un ión de proteínas reg uladoras a los
intensificadores en genes que se encuentran a miles de pares de bases?
482 CAP(TULO 17
Regulación del atascamiento de la transcripción
y la elongación
En los eucariontes, la transcripción a 1nenudo es regulada median-
te factores que afectan la iniciación de la transcripción, incluidos
cambios de estructura de la cromatina, factores de transcripción y
proteínas reguladoras de la tran scripción. La investigación indica
que la transcripción también puede ser controlada por factores
que afectan el atascamiento y la elongación de la RNA polimera-
sa después de iniciada la transcripción.
El aparato de transcripción basal (formado por RNA poli1nerasa,
factores de transcripción y otras proteínas) se ensambla en el pro-
motor míni mo. Cuando se ha iniciado l.a transcripción, la RNA
polimerasa se mueve en dirección 3', transcribe el gen estructural y
produce un producto de RNA. En algunos genes, la RNA polime-
rasa inicia la transcripción y transcribe de 24 a 50 nucleótidos de
RNA, pero después hace una pausa o se atasca. Por ejemplo, el
atascamiento se observa en genes que codifican proteínas del cho-
que té1mico en la Drosophila, proteínas que ayudan a prevenir el
daño secundario a agentes de estrés, por ejemplo, calor extremo.
Una gran cantidad de genes diferentes producen proteínas de cho-
que térnú co. Durante períodos de estrés ambiental, la transcripción
de todos los genes del choque término ya está muy elevada. La
RNA polimerasa inicia la transcripción en genes de choque térmi-
no de Drosophila pero, en ausencia de estrés, se atasca en dirección
3' respecto del sitio de iniciación de la transcripción. Cuando se
halla estrés, se liberan las polimerasas atascadas, lo que pernúte la
rápida transcripción de los genes y la producción de proteínas de
choque térmico que facilitan la adaptación al medio estresante.
Antes, se consideraba que el atascamiento se producía solo en
una pequeña cantidad de genes, pero ahora la investigación indi-
ca que el atascamiento es generalizado en todos los geno1nas
eucariontes. Por ejemplo, se observaron RNA p olimerasas atasca-
das en cientos de genes de Drosophíla. Se han identificado varios
factores que promueven el atascamiento; uno de ellos es una pro-
teína denominada factor de elongación negativo (NELF), que se
une a la RNA polin1erasa y determina que se atasque después de
la iniciación. Otra proteína denominada fac tor de elongación
positivo b (P-TEFb) alivia el atascamiento y promueve la elonga-
ción por fosforilación de NELF y la RNA polimerasa, quizá al
hacer que el NELF se disocie de la polimerasa.
CONCEPTOS
'
En algunos genes, la RNA polimerasa puede hacer una pausa o atas-
carse en dirección 3' respecto del promotor. Los factores regu ladores
afectan el atascamiento y la elongación de la transcripción.
Cuadro 17-1 Algunos elementos de respuesta hallados en células eucariontes
Elemento de respuesta
Elemento de choque térmico
Elemento de respuesta a glucocorticoides
Elemento de respuesta a ésteres de forbol
Elemento de respuesta al suero
Fuente: de B.Lewin, Genes IV (Oxford University Press, 1994), p. 880.
Regulación génica coordinada
Si bien la mayoría de las células eucariontes no poseen operones,
varios genes eucariontes pueden ser activados por el 1nismo estí-
1nulo. A n1enudo, grupos de genes bacterianos se expresan en
forma coordinada (se activan y desactivan juntos), porque est:'Ín
físicamente agrupados como un operón y tienen el mismo promo-
tor, pero en las células eucariontes, los genes que se expresan en
forma coordinada no están agrupados. Entonces, ¿cómo se coor-
dina el control de la transcripción de genes eucariontes si no están
organizados en un operón?
Los genes que se expresan de manera coordinada en las células
eucariontes pueden responder al mismo estírnulo, porque tienen
secuencias reguladoras cortas en común en sus promotores o
intensificadores. Por ejemplo, diferentes genes eucariontes de
choque térmico poseen un elemento regulador común en direc-
ción 5' respecto de sus sitios de iniciación. Estas secuencias regu-
lador as del DNA se deno1ninan elementos de respuesta: son
secuencias cortas que suelen contener secuencias consenso (cua-
dro 17-1) a diversas distancias del gen regulado. Los elementos
de respuesta son sitios de unión para activadores de la transcrip-
ción. Una proteína activadora de la transcripción se une al ele-
mento de respuesta y eleva la transcripción. El mismo elen1ento
de respuesta puede estar presente en diferentes genes, lo cual per-
mjte que múltiples genes sean activados por el 1nismo estímulo.
Un solo gen eucarionte puede ser regulado por varios elemen-
tos de respuesta diferentes. Por ejemplo, el gen de metalotioneína
protege a las células de la toxicidad de metales pesados mediante
la codificación de una proteína que se une a metales pesados y los
elin:rina de las céluJas. El aparato de transcripción basal se ensan1-
bla al.rededor de Ja caja TATA, inmediatamente en dirección 5'
respecto del sitio de iniciación de la transcripción para el gen de
metalotioneína, pero tan solo e.l aparato es capaz de inducir úni-
cam ente bajas tasas de transcripción.
Otros elementos de respuesta hallados en dirección 5' del gen de
metalotioneína contribuyen a au1nentar su velocidad de transcrip-
ción. Por ejemplo, varias copias de un ele1nento de respuesta a los
metales (MRE) se encuentran en sentido 5' respecto del gen de
metalotioneína (fig. 17-9). Los metales pesados estimulan la unión
de proteínas activadoras a MRE, lo que eleva la velocidad de trans-
cripción del gen de n1etalotioneína. Co1no hay múltiples copias del
MRE, los metales inducen altas velocidades de transc1ipción. Asi-
mismo, dos intensificadores se localizan en la región en dirección
5' del gen de metalotioneína; un intensificador contiene un elemen-
to de respuesta conocido como TRE, que estimula la transcripción
en presencia de una proteína activada denominada AP l. Un tercer
elemento de respuesta denominado GRE se localiza alrededor de
250 nucleótidos en dirección 5' respecto del gen de 1netalotioneína
y esti1nula la transcripción en respuesta a cie1tas hormonas.
Responde a Secuencia consenso
Calor y otros factores de estrés CNNGAANNTCCNNG
Glucocorticoides TGGTACAAATGTTCT
Ésteres de forbol TGACTCA
Suero CCATATTAGG
 Control de la expresión génica en eucariontes 483

lntensificador lntensificador
J..
GRE MRE ' TRE ' MRE TATA Gen de rnetalotionelna
I /'--... I /'--... I +1 1

- t Iniciación de
'\... la transcripción
Proteína
receptora
de esteroides
Proteína
activadora
de MRE
AP1 Proteína
activadora
de MRE
•• RNA
polimerasa

l _A Factores de
transcripción
rDiversas proteínas pueden unirse a elementos de
E puesta en dirección 5' para estimular la transcripción. Aparato de transcripción basal

Figura 17-9. Los elementos de respuesta múltiple (MRE) se hallan en la región en dirección 5' del gen de
metalotioneína. El aparato de transcripción basal se une cerca de la caja TATA. En respuesta a metales pesados, las
proteínas activadoras se unen a varios MRE y estimulan la transcripción. El elemento de respuesta TRE es el sitio de
unión para el factor de transcripción AP1, que es estimulado por ésteres de forbol. En respuesta a hormonas glucocor-
ticoideas, las proteínas receptoras de esteroides se unen al elemento de respuesta GRE localizado alrededor de 250
nucleótidos en dirección 5' del gen de metalotioneína y estimu lan la transcripción.

Este ejemplo ilustra una característica común del control de la de coite y empalme 5' produce mRNA que codifica el antígeno T
transcripción en eucariontes: un solo gen puede ser activado por grande, nuentras que la utilización de otro sitio de corte y empal-
varios elementos de respuesta diferentes hallados tanto en promo- me 5' (que se encuentra más alejado en dirección 3') produce un
tores como en intensificadores. Múltiples ele.mentos de respuesta mRNA que codifica un antígeno t pequeño.
penniten que el mismo gen sea activado por distintos estímulos. Una proteína denoininada factor de corte y empalme 2 (SF2)
Al mismo tiempo, la presencia del mismo elemento de respuesta intensifica la producción de mRNA que codjfica el antígeno t
en diferentes genes posibilita que un único estimulo active múlti- pequeño (véase fig. 17-10). El factor de corte y empalme 2 tiene
ples genes. De esta manera, los elementos de respuesta permiten dos dominios de u1uón: un dominio es una región de unión a
respuestas bioquímicas con1plejas en células eucariontes. RNA, y el otro tiene aminoácidos serina y arginina alternantes.
Estos dos dominios son típicos de las proteínas SR (ricas en seri-
na y arginina), que a menudo dese1npeñan un papel en la regula-
17.4 Algunos genes son regulados
ción del corte y empalme. El factor de corte y empalme 2 estimu-
por procesamiento y degradación del RNA la la unión de pequeñas ribonucleoproteínas nucleares (snRNP) al
En las bacterias, la transcripción y la traducción son simultáneas.
En los eucariontes, la transcripción tiene lugar en el núcleo, y des-
La utilización d el La utilizacíón del
pués los pre-mRNA son procesados antes de movilizarse al cito- primer sitio de corte segundo sitio de
plasma para la traducción, lo que ofrece oportunidades para el y empalme S' Sitios de corte corte y empalme S'
produce un mRNA y empalme produce un mRNA
control génico después de la transcripción. En consecuencia, la que codifica el alternativos 5' que codifica el
antígeno T grande. antígeno t pequeño.
regulación génica postranscripción asume un papel importante en
las células eucariontes. Un nivel común de regulación génica en
los eucariontes es el procesamiento y la degradación del RNA.
Pre-mRNA S'
A
.J

'º *º B
lntrón
C
3'

II La proteína SF2 intensifica IJ

Regulación génica mediada por corte L 1~tilización del segundo sitio
~ corte y empalme.

T
y empalme del RNA
El corte y empalme alternativo posibilita que un pre-mRNA sea
_ _...___r •
Procesamiento del mRNA

cortado y empalmado de múltiples maneras, lo que genera dife-

rentes proteínas en distintos tejidos o en diversos momentos del
desarrollo (véase cap. 14). Numerosos genes eucariontes presen-
lntrón
tan corte y en1pahne alternativo, y la regulación del corte y B
empalme es un medio importante de controlar la expresión géni- mRNA mRNA
ca en células eucariontes. S' 3' 5' 3'
A C A B e
CORTE y EMPALME ALTERNATIVO DEL GEN DEL ANTÍGENO T El gen ~ l._ I_
Traducción Traducción
del antígeno del viius SV40 de 1na1níferos es un ejen1plo bien
estudiado de corte y empalme alternativo. Este gen es capaz de
codificar dos proteínas diferentes, los antígenos T grande y t pe-
queño. Cuál de las dos proteínas se produce depende de cuál de
los dos sitios de corte y empalme 5' alternativos se utiliza en el
'
Antígeno T grande Antígeno T pequeño

Figura 17-10. El corte y empalme alternativo induce la producción

del antígeno t pequeño y el antígeno T grande del virus SV40 de
corte y empalme del RNA (fig. 17-10). La utilización de un sitio mamíferos.
484 CAPÍTULO 17

sitio de corte y empalme 5', uno de los primeros pasos del corte
y empalme del RNA (véase cap. 14). No se conoce bien el meca-
nismo preciso por el qu e las proteínas SR influyen en la elección
de los sitios de corte y empalme. Un modelo sugiere que las pro-
teínas SR se unen a sitios de corte y empalme específicos del
nlRNA y estimulan la unión de snRNP, que después asignan el
sitio al corte y empalme.
CORTE Y EMPALME ALTERNATIVO EN EL DESARROLLO SEXUAL DE
DROSOPHILA Otro ejemplo de corte y empalme alternativo del
1nRNA que regula la expresión génica es la determinación del de-
san·ollo co1no macho o como hembra de una mosca de la fruta. La
diferenciación sexual en la Drosophila surge de una cascada de
regulación génica. Cuando hay dos cromosomas X, se activa un
promotor específico de hembra en etapas tempranas del desarro-
llo y estimula la transcripción del gen letal p ara el sexo (Sxl)
(fig. 17-11). La proteína codificada por Sxl regula el corte y
empaln1e del pre-mRNA transcrito a partir de otro gen denonuna-
do transformador (tra). El corte y empalme del pre-m.RNA de tra
detennina la producción de la proteína Tra (véase fig. 17-11).
Junto con otra proteína (Tra-2), Tra estimula el corte y empalme
específi co de hembras del pre-rnRNA a partir de otro gen deno-
1ninado doble sexo (dsx). El evento produce una proteína Dsx
específica de hembras, que hace que el embrión desarrolle carac-
terísticas de hembras.
En los embriones macho, que tienen un solo cromoso.m a X
(véase fig. 17-11), el promotor que transcribe el gen Sxl en las
hembras es inactivo, de manera que no se produce proteína Sxl.
En ausencia de proteína Sxl, el pre-mRNA de tra es cortado y
empallnado en un sitio de corte y e1npalme 3' alternativo para
producir una forma no funcional de la proteína Tra (fig. 17-12). A
su vez, La presencia de esta Tra no funcional en los ,nachos deter-
1nina que l.os pre-mRNA de dsx sean cortados y empalmados en
forma diferente que en las hembras, y se produce una proteína
Dsx específica de 1nachos (véase fig.17-11). Este evento causa el
desarrollo de rasgos específicos de machos.
E n resumen, las proteínas Tra, Tra-2 y Sxl regulan el corte y
empalme altetnativo que produce fenotipos de machos y hembras
en la Drosophila. Todavía no se sabe con exactitud c6mo estas pro-
teínas regulan el coite y empalme alternativo, pero la proteína Sxl
(producida solo en hembras) posible1nente bloq uea el sitio de corte
y empahne en dirección 5' en el pre-mRNA de tra. Este bloqueo
forzaría al espliceosoma a utilizar el sitio de corte y empalme 3' en
dirección 3', que determina la producción de la proteína Tra y,
finalmente, da por resultado rasgos de hembra. i.:•!!!:!::!::!::!!:!!!!!=2:!:!:!!:!.J
EL PROBLEMA 24
CONCEPTOS
Los genes eucariontes pueden ser regu lados mediante el control del
procesam iento del mRNA. La selección de sitios de corte y empalme
alternativos induce la producción de proteínas diferentes.
Degradación del RNA
La cantidad de proteína que se sintetiza depende de la cantidad
del n1RNA correspondiente disponible para la traducción. A su
vez, la cantidad de .mRNA di sponible depende de la velocidad de
síntesis deJ mRNA y de la vel.ocídad de degradación del mRNA.
Por lo general, los mRNA eucariontes son más estables que los
mRNA bacterianos, que suelen durar solo unos pocos minutos
antes de ser degradados. No obstante, hay gran variabilidad de la
estabilidad del mRNA eucarionte: algunos mRNA persisten solo
durante algunos minutos, nú.e ntras que otros d uran horas, días o,
incluso, meses. Estas variaciones pueden provocar grandes dife-
rencias en la cantidad de proteína sintetizada.

Genotipo XX

Mosca hembra
Proteína Tra-2 }
Pre-mRNA de dsx--►► Proteína 2 Dsx
Gen Sxl --ilJI.
► Proteína Sxl IJI. Pre-mRNA de tra -►
IJI. Proteína Tra j

O En los embriones XX, fl ...que causa que el pre-mRNA de O- ...para producir

el gen Sxl activado
produce una proteína ...
tra sea cortado y empalmado en
un sitio 3' ubicado en dirección 3' ...
-
J
--- -
O En conjunto, las proteínas Tra y Tra-2 IJ ...que produce proteínas que
J a proteína Tra. dirigen el corte y empalme específico determinan que el embrión se
de hembras del pre-mRNA de dsx, ... desarrolle como una hembra.

Genotipo XY

Mosca macho

Gen Sx l
Ausencia de
proteína Sxl
Pre-mRNA de tra Proteína Tra dsx prewmRNA -►► Proteína o Dsx ---i►►
no funciona l

J
O En los embriones XY, el gen Sxl no O mRNA
Por consiguiente, el pre-
de tra es cortado y
O ... lo que produce D sin Tra, el corte y empalme ... produce proteínas Dsx masculinas]
está activado, y la proteína Sxl no una proteín 9 Tra específico de machos del que hacen que el embrión se
se produce.
empalmado en un sitio en
dirección 5' , ... no funcional. pre-mRNA de dsx...
i
desarrolle como un macho. __Jj
Figura 17-11. El corte y empalme alternativo controla la determinación del sexo en Drosophíla.
 Control de la expresión génica en eucariontes 485

Sitios de corte y empalme 3' alternativos acortado por debajo de un límite crítico, se e limina el casquete 5',
A B !
C ! D y después las nucleasas degradan el mRNA por eliminación de
Pre-mRNA de tra 5' - ., ___ - 3'
nucleótidos del extremo 5 ' . Estas observaciones sugieren que el
lntrón lntrón
casquete 5' y la cola de poli(A) 3' del mRNA eucarionte interac-
En las hembras, la presencia
En los machos, túan en forma física entre sí, muy probablemente porque la cola
de la proteína Sxl hace que
se utiliza el sitio se utiliza el sitio de corte y de poli(A) se curva de 1nodo que las PABP hacen contacto con el
de corte y em- empalme 3' en dirección 3', ... casquete 5' (véase fig. 15-18).
palme 3' en Gran parte de la degradación del RNA tiene lugar en complejos
dirección 5', .. . especializados denominados cuerpos P. Sin embargo, los cuerpos
P parecen ser más que meros sitios de destrucción del RNA. Hay
B
.. evidencia que sugiere que estos cuerpos pueden almacenar de
manera transitoria moléculas de mRNA que más tarde pueden ser
liberadas y traducidas. Por consiguiente, los cuerpos P ayudan a
controlar la expresión de genes mediante la regulación de qué
... y el codón de termi- moléculas de RNA son degradadas y cuáles son secuestradas para
nación es eliminado por
1 ~~rte Y. empalme junto
liberación ulterior. La degradación del RNA facilitada por RNA
L'.::'..nel mtrón. de interferencia pequeños (siRNA) también puede producirse
dentro de los cuerpos P (véase siguiente sección).
A B e D A e D Otras partes del nlRNA eucarionte, como secuencias de la re-
mRNA 5' - - - 3' 5' _ _ _ 3'
gión 5' no traducida (5' UTR), la región codificante y la 3' UTR,
Codón de terminación prematuro también afectan la estabilidad del mRNA. Algunos mRNA euca-
riontes de vida breve tienen una o más copias de una secuencia que
~ o que determina la consiste en 5'-AUUUAUAA-3', denominada elemento 1ico en
Traducción
inclusión de un codón AU, en la 3' UTR. Los RNA mensajeros que contienen elementos
de terminación pre- ócos en AU se degradan mediante un mecanismo en el que inter-
maturo en el mRNA. vienen 1nicro-RNA (véase siguiente sección). ►
EL PROBLEMA 26
Proteína Tra
Proteína Tra
no f uncional
____A
No se produce pro- Se produce una pro-
teína Tra funcional. teína Tra funcional.
CONCEPTOS
La estabilidad del mRNA influye en la expresión génica por incidir en
Fenotipo Fenotipo la cantidad de mRNA disponible para la traducción. El casquete 5', la
macho hembra cola de poli(A), la 5' UTR, la sección de cod ificación y secuencias de
la 3' UTR afectan la estabilidad del mRNA.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4

¿ Cómo afecta la estabilidad la cola de poli(A)?

Figura 17-12. Corte y empalme alternativo del pre-mRNA de tra. Hay
dos sitios alternativos de corte y empalme 3'.

17.5 La interferencia por RNA es un mecanismo

El RNA celular es degradado por ribonucleasas, enzimas que
degradan específicamente el RNA. La mayoría de las células
eucariontes contienen 10 o más tipos de ribonucleasas, y hay
varias vías diferentes de degradación del 1nRNA. En una vía, se
elimina primero el casquete 5', lo que es seguido de la elimina-
cíón 5' ➔3' de nucleótidos. Una segunda vía comienza en el
extremo 3' del mRNA y elimina nucleótidos en dirección 3' ➔ 5'.
En una tercera vía, el mRNA es escindido en sitios internos.
La degradación del RNA mensajero desde el extremo 5' es más
con1ún y comienza con la eliminación del casquete 5' . Por lo
general, esta vía es precedida por el acortamiento de la cola de
poli(A). Normalmente, las proteínas de unión a poli(A) se unen a
la cola de poli(A) y contribuyen a su efecto de aumento de la esta-
bilidad. La presencia de estas proteínas en el extremo 3' del
1nRNA protege el casquete 5' . Cuando la cola de poli(A) se ha
importante de regulación génica
La expresión de una se1ie de genes eucariontes se controla me-
diante la interferencia por RNA, conocida también como silencia-
miento del RNA y silenciamiento génico postranscripción (véase
cap. 14). La investigación sugiere que hasta el 30% de los genes
humanos son regulados mediante interferencia por RNA. En los
eucariontes, la interferencia por RNA es generali zada y existe en
hongos, plantas y animales. Asimismo, este mecani smo es muy
utilizado como una poderosa técnica para la regulación de la ex-
presión génica en organismos genomanipulados (véase cap. 19).
RNA de interferencia pequeños y micro-RNA
La interferencia por RNA es desen cadenada por micro-RNA
(nriRNA) y RNA de interferencia pequeños (siRNA), lo que
depende de su origen y mecanismo de acción (véase Cap. 14).
486 CAP[TULO 17

(a) (b) (c)

RNA bicatenario Región bicatenaria del RNA DNA
5' -- 3' 5' _ \_ _
3' -------- 5' La enzima Dicer 3' Otras regiones Otros siRNA
escinde el RNA
bicatenario ...
bicatenarias de
moléculas de RNA siRNA
't: se unen a
secuencias
son escindidas por complementarias
la enzima Dicer ... del DNA y atraen
siRNAs
-----
-----
... para producir
RNA de interferencia
pequeños (siRNA).
miRNAs

........._ ~
~
para produc; - i
icro-RNA. __J
I
Enzima
metiladora
enzimas
metiladoras, ...
J
Los siRNA se
combinan con el Algunos miRNA se
complejo proteico combinan con el
mRNA RISC ... mRNA
s•
-~===- complejo proteico
RISC y se aparean
5' 3' 3,
de manera
• ... y se aparean imperfecta con un DNA
_ I
Escisión 1

♦
con secuencias
complementarias
del mRNA.
mRNA, ...

• ... lo que induce la

~~
,r,__ metilado
1____
... que metilan
inhibición de la el DNA o las
El complejo
traducción. histonas e
escinde el mRNA.
inhiben la
Inhibición de transcripción.
[Degradacióñ 1--===:' Después de la Inhibición de
~ escisión, se degrada la traducción la transcripción
el RNA.

Figura 17-13. El silenciamiento del RNA induce la degradación del mRNA o la inhibición de
la traducción o la transcripción. (a) Los RNA de interferencia pequeños (siRNA) degradan el mRNA
por escisión . (b) Los micro-RNA (m iRNA) inducen inhibición de la traducción. (c) Algunos RNA de
interferencia pequeños (siRNA) meti lan proteínas histona del DNA, lo que inhibe la transcripción.

U na enzima llan1ada Dicer escinde y procesa el RNA bicatenario para
producir siRNA o miRNA monocatenarios, que tienen de 21 a 25
nucleótidos de longitud (fig. 17-3) y se aparean con proteínas para for-
n1ar un co1nplejo de silencianuento inducido por RNA (RISC, RNA-
induced silencing complex). Luego, el componente RNA del RISC se
aparea con secuencias de bases complementarias de moléculas espe-
cíficas de RNA, la mayoría de las veces con secuencias de la 3' UTR
del mRNA. Los RNA de inte1ferencia pequeños tienden a aparear per-
fectamente sus bases con los mRNA, mientras que los miRNA a
111enudo for1nan apareamientos menos perfectos.
Mecanismos de regulación génica
mediante interferencia por RNA
Los RNA de inte1ferencia pequeños y los rnicro-RNA regulan la
expresión génica mediante por lo n1enos cuatro mecanismos
distintos: l) escisión del mRNA, 2) inhibición de la traducción ,
3) silenciamiento de la transcripción o 4) degradación del RNA.
ESCISIÓN DEL RNA Los RISC que contienen un siRNA (y algunos
que contienen un miRNA) se aparean con 1noléculas de mRNA
y escinden el mRNA cerca del 111edio del siRNA unido (véase
fig. 17-13). Una proteína, que a veces se denomina "Slicer'' (re-
banadora), lleva a cabo esta escisión. Después de la escisión, el
mRNA continúa degradándose. Por lo tanto, la presencia de
siRNA y miRNA aumenta la velocidad de degradación de los
mRNA y reduce la cantidad de proteína producida.
INHIBICIÓN DE LA TRADUCCIÓN Algunos miRNA regulan genes
por inhibición de la traducción de sus mRNA complementarios
(véase fig.17-13b). Por ejemplo, APETALA.2 es un gen importan-
te para el desarrollo de las flores de Arabidopsis thaliana. La ex-
presión de este gen está regulada por un miRNA que aparea sus
bases con nucleótidos de la región codificante del mRNA de
APETALA2 e inhibe su traducción.
No se conoce el mecanismo exacto por el cual los miRNA re-
primen la traducción, pero cie1tas investigaciones sugieren que
pueden inhibir tanto el paso de iniciación de la traducción como
los pasos posteriores a esta, como los que causan terminación pre-
matura. Muchos n1RNA tienen múltiples sitios de unión a miRNA ,
y la traducción es inhibida de manera muy eficiente cuando múl-
tiples miRNA se unen al mRNA.
SILENCIAMIENTO DE LA TRANSCRIPCIÓN Otros siRNA silencian la
transcripción al modificar la estructura de la cromatina. Estos
siRNA se combinan con proteínas para formar un complej o deno-

1nínado RITS (RNA transcriptional silencing; véase fig. 17-13c),
que es análogo al RISC. El componente siRNA del RITS se une
a su secuencia complementaria del DNA o a una molécula de
RNA durante el proceso de transcripción y reprime la t:ranscrip-
ción atrayendo enzilnas que metilan las colas de las histonas. La
adición de grupos 1netilo a las histonas hace que estas se unan
1nás estrechrunente al DNA, lo que restringe el acceso de las pro-
teínas y enzi mas necesarias para llevar a cabo la transcripción
(véase sección previa sobre modificación de las histonas). Al-
gunos miRNA se unen a secuencias complementarias del DNA y
atraen enzilnas que metilan dil·ectamente al DNA, lo que también
induce la supresión de la transcripción (véase sección previa
sobre rnetilación del DNA).
DEGRADACIÓN DEL mRNA INDEPENDIENTE DE SLICER U n últilno
mecanismo mediante el cual los miRNA regu lan la expresión
génica consiste en desencadenar la degradación del mRNA en un
proceso que no requiere actividad de Slicer. Por ejemplo, un
n1RNA de vida corta con un elemento rico en AU en su 3' UTR
es degradado mediante un mecanismo de silenciamiento del
RNA. Los investigadores han identificado un miRNA con una
secuencia complementaría de la secuencia consenso del elen1en-
to rico en AU. Este miRNA se une al ele1nento 1ico en AU, y de
una manera aún no conocida por completo, induce la degradación
del 1nRNA en un proceso que requiere Dicer y RISC.
Control del desarrollo mediante
interferencia por RNA
Gran parte del desarrollo de eucariontes multicelulares se pro-
duce mediante regulación génica: diferentes genes son activados
y desactivados en 1nomentos específicos (véase cap. 22). De
hecho, cuando se descubrieron los miRNA, los investigadores
advirtieron que una mutación de un miRNA de C. elegans cau-
saba un efecto deletéreo. En la actualidad, la investigación
demuestra que las moléculas de miRNA son factores clave para
controlar el desarrollo de plantas, allimales y seres humanos.
Por eje1nplo, el corazón de los vertebrados se desarrolla a través
de diferenciación y proliferación programada de cardi omioci-
tos, que son controladas por un miRNA específico denominado
lniR-1 -1.
Estudios recientes demuestran que, a través de sus efectos sobre
la expresión génica, los 1niRNA desempeñan papeles ünportantes
en muchas enfermedades y trastornos. Por eje1nplo, una forma
genética de hipoacusia se ha asociado con una mutación del gen
que codifica un miRNA. Otros miRNA se asocian con cardiopa-
tía. Un miRNA denominado miR-1-2 muestra alta expresión en el
miocai·dio. Los ratones genomanipulados para que expresen solo
el 50% de la cantidad normal de miR-1-2 suelen presentar orifi-
cios en la pared que separa los ventrícu los izquierdo y derecho,
una cardiopatía congéni ta frecuente en recién nacídos humanos.
La sobreexpresión de otro miRNA, denominado miR-1, en el co-
razón de ratones adultos causa arritmia cardíaca, actividad eléc-
trica irregular del corazón que puede ser potencialmente fatal en
los seres hun1anos. Los cambios de expresión de otros rniRNA se
han asociado con cáncer.
Control de la expresión génica en eucariontes 487
CONCEPTOS
Moléculas de RNA bicatenario que son escindidas y procesadas inician
el silenciamiento del RNA. Los siRNA o los miRNA resultantes se com-
binan con proteínas para formar complejos que se unen a secuencias
complementarias del mRNA o el DNA. Los siRNA y los miRNA afectan
la expresión génica por escisión de mRNA, inhibición de la traducción,
mod ificación de la estructura de la cromatina o desencadenamiento
de la degradación de RNA.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
En el silenciamiento del RNA, ¿a qué parte de las moléculas de RNA
que controlan suelen unirse los siRNA y los miRNA?
a. 5' UTR.
b. Segmento que codifica aminoácidos.
c. Cola de poli(A) 3'.
d. 3' UTR.
17.6 Algunos genes son regulados
por procesos que afectan la traducción
o por modificación de proteínas
Se requieren ribosornas, aminoacil tRNA, factores de iniciación y
factores de elongación para la traducción de moléculas de mRNA.
La disponibilidad de estos componentes afecta la velocidad de
traducción y, por lo tanto, influye en la expresión de genes. Por
ejemplo, la activación de linfocitos T es crucial para el desarroll o
de respuestas inmunitarias a virus (véase cap. 22). Normalmente,
los linfocitos T se encuentran en el estadio G0 del ciclo celular y
no se dividen en forma activa. Sin embargo, ante la exposición a
antígenos virales, se activan linfocitos T específicos, que presen-
tan proliferación rápida (fig. 7-14). La activación incluye un
aumento de 7 a 10 veces de la síntesis proteica que hace que las
células ingresen en el ciclo celular y proliferen. Este estallido de
síntesis proteica no requiere un aumento de la síntesis de mRNA.
En ca1nbio, el aumento global de la síntesis proteica se debe a la
mayor disponibilidad de factores de iniciación que intervienen en
la traducción (factores de iniciación que permi ten que los riboso-
mas se unan al mRNA y comience la traducción). Este aumento
de factores de iniciación induce mayor traducción a partir de las
moléculas de mRNA existentes, lo que au1nenta la cantidad glo-
bal de proteína sintetizada. De modo si milar, la insulina estimula
la iniciación de la síntesis proteica global al aumentar la dispo-
nibilidad de factores de iniciación. Los factores de iniciación
existen en fo rmas inactivas y, en respuesta a diversas señales celu-
lares, pueden ser activados por modificaciones químicas de su es-
tructura, por ejemplo, fosfo1ilación.
Asilnismo, existen mecallismos para regular la traducción de
mRNA específicos. La iniciación de la traducción de algunos
mRNA se regula mediante proteú1as que se unen a la 5' UTR de
488 CAP(TULO 17

Los linfocitos T están La exposición a de aminoácidos de los extremos, por acetilación o por adición de
normalmente en G0 un antígeno, por grupos fosfato, grupos carboxilo, grupos metilo o hidratos de car-
y no se dividen. Virus ejemplo un virus, ...
bono a la proteína. Estas modificaciones afectan el transporte, la
~ fu nción y la actividad de las proteínas.

~ ..
Exposición CONCEPTOS
a antígeno
Linfocito T
..causa un aument: J
La iniciación de la traducción puede ser afectada por proteínas que se
unen a secuencias específicas en el extremo 5' del mRNA. La disponi-

l
. /
de disponibilidad de
factores de iniciación, ...
bilidad de ribosomas, tRNA, factores de iniciación y elongación, y otros
componentes del aparato de traducción pueden afectar la velocidad

Factores L .
..____...,. .....
••••
Aumento de • • • • •
de traducción. La traducción de algunos mRNA está regulada por pro-
teínas que se unen a las regiones 5' y 3' no traducidas del mRNA .

de iniciación disponibilidad • • Ó ... lo que permite

que los ribosomas
l
se unan al mRNA INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
y lleven a cabo
la traducción.
Subunidades ribosómicas
Comparación del control génico bacteriano y eucarionte

.........
--- - ---
Ahora que hemos considerado los principales tipos de regulación
génica en las bacterias (cap. 16) y eucariontes (este capítulo), analice-

- - ~ ----- •
mos algunas de las similitudes y diferencias del control génico bacte-
riano y eucarionte.
1. En las células bacterianas, gran parte de la regulación génica se
+
produce en el nivel de la transcripción (aunque, de hecho, existe
./ en otros niveles). En las células eucariontes, la regulación génica
Proteína ....

-·--·
mRNA • tiene lugar en mú ltiples niveles, como estructura de la cromatina,
transcripción, procesamiento del mRNA, estabilidad del RNA,
interferencia por RNA y control postraducción.

Ó La síntesis proteica aume~ 2. En células bacterianas y eucariontes, complejos eventos bioquími-

~ 7 a 10veces, ... _ _ _ ==- Aumento cos y del desarrollo pueden requerir una cascada de regulación
de la síntesis génica en la que la activación de un conjunto de genes estimula
proteica la activación de otro conjunto.
3. Gran parte de la regulación génica tanto en células bacterianas
Linfocito T
como en células eucariontes se logra a través de proteínas que se
activado
._.--...;:_
unen a secuencias específicas del DNA. Las proteínas reguladoras
11 ... lo que induce la son de diversos tipos, pero la mayoría puede caracterizarse según
I ~roliferación del ¡---
~ focito T. J un pequeño grupo de motivos de unión al DNA.
4 . La estructura de la cromatina desempeña un papel en la regula-
l ción génica eucarionte (pero no bacteriana). Por lo general, la
cromatina condensada reprime la expresión génica; la estructura
de la cromatina se debe modificar antes de que pueda tener lugar
la transcripción. La estructura de la cromatina se altera mediante
proteínas de remodelación de la cromatina, modificación de his-
tonas y metilación del DNA,
5. En los eucariontes, las modificaciones de la estructura de la cro-
Figura 17-14. La expresión de algunos genes eucariontes es regulada matina pueden inducir cambios epigenéticos, que son aquellos
por la disponibilidad de los componentes requeridos para la traduc- que afectan la expresión génica y se transmiten a otras células o
ción. En este ejemplo, la exposición a un antígeno estimula una mayor dis- a futuras generaciones.
ponibilidad de factores de iniciación, con el consiguiente aumento de la
síntesis proteica, que lleva a la proliferación de linfocitos T. 6. En las células bacterianas, los genes a menudo se agrupan en ope-
rones y se expresan en forma coordinada med iante t ranscripción a
una única molécula de mRNA. En cambio, muchos genes eucarion-
un mRNA e inhi ben la unión de riboson1as, de modo similar a la tes tienen sus propios promotores y se transcriben en forma inde-
manera en que las proteínas represoras se unen a operadores y evi- pendiente. En las células eucariontes, la regulación coordinada suele
tan la transcripción de genes estructusales. La unión de proteínas a producirse a través de elementos de respuesta comunes, presentes
secuencias de Ja 3' UTR afecta la traducción de algunos mRNA. en los promotores e intensificadores de los genes. Diferentes genes
Nun1erosas proteínas eucariontes sufren extensas modificacio- que tienen el mismo elemento de respuesta en común son influen-
nes después de la traducción por la escisión y el recorte selectivos ciados por la misma proteína reguladora .
 7. Las proteínas reguladoras que afectan la transcripción muestran
dos tipos básicos de control: los represores inhiben la transcripción
(control negativo); los activadores est imulan la transcripción (con-
trol positivo). En las células bacterianas y eucariontes, se observa
tanto control negativo como positivo.
8. La iniciación de la transcripción es un proceso relativamente sim-
ple en las células bacterianas, y las proteínas reguladoras actúan
por bloqueo o estimulación de la unión de RNA polimerasa al
DNA. En cambio, la transcripción eucarionte requiere maqu inaria
compleja que incluye RNA polimerasa, factores de transcripción
general y activadores de la transcripción, lo que permite que múl-
tiples factores influyan en la transcripción.
9. Algunas proteínas reguladoras de la transcripción en eucariontes
funcionan a distancia del gen por unión a intensificadores, lo que
determina la formación de un bucle en el DNA, que acerca mucho
al promotor y el intensificador. En las célu las bacterianas, se han des-
crito algunas secuencias de acción a distancia análogas a los inten-
sificadores, pero parecen ser menos frecuentes.
10. El mayor retraso de tiempo entre transcripción y traducción en
las células eucariontes que en las célu las bacteria nas permite que
la estabilidad del mRNA y el procesamiento de l mRNA desem-
peñen papeles más importantes en la regulación génica euca-
rionte.
11. Las moléculas de RNA (RNA antisentido) pueden actuar como regu-
ladores de la expresión génica en las bacterias. La regulación por
siRNA y miRNA, que es extensa en eucariontes, está ausente en las
células bacterianas.
En el cuadro 17-2, se resumen estas similitudes y diferencias de la regu-
lación génica en bacterias y eucariontes.

Cuadro 17-2 Comparación de la expresión génica en bacterias y eucariontes

Característica Control génico bacteriano Control génico eucarionte

Niveles de regu lación Fundamentalmente transcripción Numerosos niveles

Cascadas de regulación génica Presentes Presentes

Proteínas de unión a DNA Importantes Importantes

Papel de la estructura de la cromatina Ausente Importante

Presencia de operones Frecuente Infrecuente

Control negativo y positivo Presente Presente

Iniciación de la transcripción Relativamente simple Relativamente compleja

lntensificadores Menos frecuentes Más frecuentes

Transcripción y traducción Ocurren en forma simu ltánea Ocurren por separado

Regulación por RNA pequeños Raro Común

RESUMEN DE CONCEPTOS

■ Las células eucariontes difieren de las bacterias en varios
aspectos que afectan la regulación génica, como la ausencia
de operones y la presencia de cro1natina y de una me1nbrana
nuclear en los eucariontes.
■ En las células eucariontes, la estructura de la cromatina repri-
me la expresión génica. En la transcripción, la estructura de la
cro111atina puede modificarse por reposicionai11iento de los
nucleoson1as y modificación de las histonas, incluidas acetila-
ción, fosforilación y metilación. La metilación del DNA tam-
bién afecta la transcripción.
■ En los eucariontes, la iniciación de la transcripción es contro-
lada por factores de transcripción general que se ensa1nblan
en el aparato de transcripción basal y por proteínas regulado-
ras de la transcripción que estimulan o reprimen los niveles
normales de transcripción por unión a promotores e intensifi-
ca.dores reguladores.
■ Los intensifica.dores afectan la transcripción de genes distan-
tes. Las proteínas reguladoras se unen a intensificadores e
interactúan con el aparato de transcripción basal al determinar
que el DNA interpuesto forme un bucle.
■ Secuencias de DNA denominadas aisladores limitan la acción
de los intensificadores al bloquear su acción en una manera
dependiente de la posición.
■ Algunos factores reguladores hacen que la RNA polimerasa se
atasque en dirección 3' respecto del promotor.
■ En las células eucariontes, los genes controlados en forma
coordinada responden a los mismos factores, porque tienen
elementos de respuesta comunes que son estimulados por el
mismo activador de la transcripción.
■ .E n las células eucariontes, la expresión génica puede ser
influenciada por el procesamiento del RNA.
■ La expresión génica puede ser regulada por cambios de la
estabilidad del RNA. El casquete 5', la secuencia codifica.t1te,
la 3' UTR y la cola de poli(A) son importantes para controlar
la estabilid ad de los rnRNA eucariontes. Las proteínas que se
unen a los extremos 5' y 3' del mRNA eucarionte pueden
afectar su traducción.
■ El silenciamiento del RNA desempeña un papel importante en
la regulación génica eucarionte. Las rnoléculas pequeñas de
RNA (siRNA y rniRNA) escindidas del DNA bicatenario se
co1nbinan con proteínas y se unen a secuencias del mRNA o
del DNA. Estos complejos escinden RNA, inhiben la traduc-
ción, afectan la degradación del RNA y silencia.t1 la transcrip-
.,
ClOn.
■ El control de la modificación post:raducción de las proteínas
puede desen1peñar un papel en la expresión génica.
489
 TÉRMINOS IMPORTANTES
aislador (p. 481) elemento de respuesta
código de histonas (p. 475) (p. 482)
co1nplejo de remodelación de isla CpG (p. 478)
la cromatina (p. 475) mediador (p. 479)
l. Tres procesos generales son remodelación de la cromatina,
modificación de las histonas (p. ej., metilación y acetilación
de histonas) y 1netilación del DNA.
2. b
3. El DNA entre el intensificador y el promotor forma un bucle,
de manera que las proteínas reguladoras unidas al intensifica-
PROBLEMAS RESUELTOS
Problema
¿Cuál sería el efecto de una mutación que causara que las proteínas de unión a poli(A) no fueran funcionales?
Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problem a?
U na declaración sobre el efecto de una n1utación que eliminó
la función de la proteína de unión a poli(A).
¿Qué información se proporciona para resolver el
problema?
■ Hay una mutación del gen que codifica la proteína de
unión a poli(A).
■ La mutación determina que la proteína de unión a poli(A)
no sea funcional.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Degradación del RNA en la Sección 17 .4.
Adición de la cola de poli (A) en la Sección 14.2 (cap. 14).
Introducción
l . ¿Cuán similares son los genomas de los seres humanos y los
chilnpancés? ¿Qué cambios genéticos podrían ser responsa-
bles de las grandes diferencias en la anatomía, la fisiología y
la conducta de seres humanos y chimpancés?
Sección 17.1
2. Enumere algunas diferencias importantes entre células bacte-
rianas y eucariontes que afectan la manera de regulación de los
genes.
Sección 17.2
3. ¿Dónde se hallan los sitios de hipersensibilidad a DNasa I y
qué indican acerca del carácter de la cromatina?
490
proteína de choque sitio hipersensible a la DNasa I
térmico (p. 482) (p. 475)
proteína SR (p. 483)
dor pueden interactuar directamente con el aparato de trans-
cripción.
4. La cola de poli(A) estabiliza el casquete 5', que debe ser eli-
minado antes de que la molécula de RNA pueda ser degrada-
da a partir del extremo 5'.
5. d
Pasos de la solución
El RNA mensajero puede ser degradado desde el
Recuerde: la
extremo 5', el extre1no 3' o a través de escisión inter- cola de poli(A)
na. La degradación desde el extremo 5' requiere la eli- afecta la estabili-
minación del casquete 5' y, por lo general, es precedi- dad del mRNA.
da por el acorta1niento de la cola de poU(A). Las
proteínas de unión a poli(A) se unen a la cola de poli(A) y
evitan que se acorte. Por lo tanto, la presencia de estas proteí-
nas en la cola de poli(A) protege al casquete 5 ', que impide la
degradación del RNA. Si el gen de las proteínas de unión a
poli(A) presentara una mutación que causara la producción de
proteínas de unión a poli(A) no funcionales, las proteínas no
se unirían a la cola de poli(A). La cola presentaría acorta-
miento prematuro, se eliminaría el casquete 5' y se degradaría
con mayor facilidad el RNA. El resultado final sería n1enos
1nRNA y, por consiguiente, menos síntesis proteica.
4. ¿Qu é cambios se producen en la estructura de la cromatina y
qué papel desempeñan en la regulación génica eucarionte?
5. ¿Qu é es el código de histonas?
6. ¿Cómo se utiliza la inmunoprecipítación de la cron1atina para
detenninar las localizaciones de las n1odificaciones de histo-
nas en el geno.m a?
Sección 17.3
7 . Explique en forma sucinta cómo afectan el nivel de trans-
c1ipción de los genes eucariontes las proteínas activadoras
de la transcripción y los represores.
8. ¿Qué es un intensificador? ¿Cómo afecta la transcripción de
genes alejados?

9. ¿Qué es un aislador?
10. ¿Qué es un elemento de respuesta? ¿Cómo determinan los
elementos de respuesta la expresión coordinada de genes
eucariontes?
Sección 17.4
11. Rese.ñe el papel del corte y empalme alternativo en el con-
trol de la diferenciación sexual en Drosophila.
12. ¿Qué papel desempeña la estabilidad del RNA en la regula-
ción génica? ¿Qué contro la la estabilidad del RNA en las
células eucariontes?
Sección 17.2
15. El paludismo, una de las enfermedades infecciosas más
/Z:.' generalizadas y destructivas, es causada por protozoos pará-
0,0.,0, sitos del género Plasmodium, que se transmiten de persona
a persona a través de mosquüos. Los parásitos Plasmodium
pueden evadir el sistema inmun itario del huésped modifi-
cando en forma constante la expresión de sus genes var, que
codifican los antígenos de superficie de Plasmodiunz (L. H.
Freitas-J unior y cols. 2005. Cell 121:25-36). Los genes var
individuales se expresan cuando la estructura de la cromati-
na es alterada por cambios químicos de las histonas. ¿ Qué
tipos de cambios químicos de las histonas podrían ser res-
ponsables de estos cambios de expresión génica?
16. Un genetista intenta determinar cuántos genes se hallan en
una región de 300 000 pb de DNA. El análisis muestra que
se observan cuatro modificaciones de H3K4me3 en este
fragmento de DNA. ¿ Qué podría sugerir su presencia
acerca del número de genes aquí localizados?
17. En una línea de células humanas cultivadas, un genetista
aísla una mutación termosensible en un locus que codifica
una enzima acetiltransferasa; a temperaturas superiores a
38 ºC , las células mutantes producen una forma no funcio-
nal de la enzima. ¿ Cuál sería el efecto más probable de
esta n1utación cuando se cultivan las células a 40 ºC?
*18. ¿Cuál sería el efecto más probable de la deleción del locus
de floración D (FLD) en Arabidopsis thaliana?
*19. X31b es un compuesto experimental captado por células
que se dividen con rapidez. La investigación ha mostrado
que X3 l b estilnula la metilación del DNA. Algunos inves-
tigadores del cáncer están interesados en probar a X3 lb
como un posible fármaco para tratar el cáncer de próstata.
Ofrezca una posible explicación por la que X3 l b podría
ser un fármaco eficaz contra el cáncer.
Sección 17.3
20. ¿En qué difieren los represores que se unen a silenciado-
res en los eucariontes de los represores que se unen a ope-
radores en las bacte1ias?
21. Examine 1a figura 17-7. ¿Cuál sería el efecto sobre la
transcripción si hubiera una 1nutación del gen codifica
GAL3 que impidiera la p roducción de GAL3 funcional?
Control de la expresión génica en eucariontes 491
Sección 17.5
13. Enumere en forma sucinta algunas de las maneras en que
los siRNA y los miRNA regulan los genes.
Sección 17.6
14. ¿En qué se diferencia la regulación génica bacteriana de la
regulación génica eucarionte? ¿En qué se parecen?
22. ¿ Cuál sería el efecto de trasladar el aislador mostrado en
la figura 17-8 a una posición entre el Intensificador II y el
promotor del gen B?
*23. Un intensificador está rodeado de cuatro genes (A, B, C y
D), como muestra el diagrama adjunto. Un aislador se
localiza entre el gen C y el gen D. Sobre la base de las
posiciones de los genes, el intensificador y el aislador, ¿la
transcripción de qué genes es más probable que sea esti-
m ulada por el intensificador? Explique su razonamiento.
~ t;;
Ge ~n:¡:;;:~
A :::::::;- Gen 8 lt.liB.llafor Gen D
Sección 17.4
*24 . ¿Cuál será el efecto sobre el desarrollo sexual de embrio-
nes de Drosophila recién fecundados si hay deleción de
los siguientes genes?
a. letal para el sexo
b. transformador
c. doble sexo
25. E~amine la figura 17-12. ¿Cuál sería el efecto de una
m utación que eliminara el segundo sitio de cor te y empal-
me 3' en el extremo del exón B del pre-mRNA de tra?
*26. Algunos mRNA eucariontes tienen un elemento rico en
AU en la región 3' no traducida. ¿Cuál se1ia el efecto
sobre la expresión génica si este elemento presentara una
mutación o fuera eliminado?
27. Una cepa de Arabidopsis thaliana posee una mutación del
gen APETALA2 en la que hay una deleción de gran parte
de la región 3' no traducida del mRNA transcrito a partir
del gen. ¿Cuál es el efecto más probable de esta mutación
sobre la expresión del gen APETALA2?
28. ¿Cuál será el efecto de una m utación que destruya la capa-
cidad de la proteína de unión a poli(A) (PABP) de unirse a
la cola de poli(A)?
Sección 17.5
29. Suponga que un genetista introdujo un RNA de interferen-
cia pequeño (siRNA) complementario del mRNA de FLC
de la figura 17-3. ¿Cuál sería el efecto sobre la floración de
Arabidopsis? Explique su respuesta.
 492 CAP(TULO 17

PREGUNTA DE DESAFÍO

Sección 17.3 ner secuencias consenso. La creatina cinasa B (CK-B) es

una enzima importante para el metabolis1no celular. Ciertas
30. El gen de levadura SER3, que ínterviene en la biosíntesis de
células - denominadas células U937D- tienen mucha canti-
~ '" se1i~a, es reprinlido _durant~ el crecimiento en 111edi? ri_~o en dad de n1RNA de CK-B, pero no hay enzi1na CK-B presen-
º'°"°' nutrientes, de .mane1a que tiene lugar escasa transcnpc1on y
te. En estas células, el extremo 5' del mRNA de CK-B está
se produce escasa enzima SER3. En una investigación de la
urudo a los ribosomas, pero en apariencia el n1RNA no se
represión del gen SER3, se observó intensa transcripción de
traduce. En estas células, algo inllibe la traducción del
una región de DNA en dirección 5' respecto de SER3 cuan-
mRNA de CK-B.
do_ se reprime a SER3 (J. A. Martens, L. Laprade y F.
Los investigadores introdujeron numerosos segn1entos
W1nston. 2004. Nature 429:571-574). Dentro de esta región
cortos de RNA que contenían solo secuencias 3' UTR en
e~\ sentido 5', hay un promotor que estimula la transcrip- células U937D. En consecuencia, las células U937D
c1.on de una molecula de RNA denominada RNA de SGRJ
comenzaron a sintetizar la enzima CK-B, pero la cantidad
(para el gen regulador 1 de SER3). Esta molécula de RNA
total de mRNA de CK-B no aU1nentó. La introducción de
no tiene ninguna de las secuencias necesarias para la tra-
segmentos cortos de otras secuencias de RNA no estimuló
ducción. Las mutaciones del promotor de SRGJ determinan
la síntesis de CK-B; solo las secuencias 3' UTR activaron la
la desaparición del RNA de SGRJ, y estas mutaciones eli-
traducción de la enzima.
minan la represión de SER3. Cuando la RNA polimerasa se
Sobre la base de estos resultados , proponga un mecanis-
une al pro1notor de SGRJ, se observa que la polimerasa
rno para la inhibición de la traducción de CK-B en las célu-
se d~s~laza en dir~cción 3', tran scribe el RNA de SGRJ, y
las U937D. Explique córno la introducción de segmentos
continua y transcribe el promotor de SER3. Esta actividad
coitos de RNA que contienen las secuencias de 3 'l.JTR
i~~uce la !·epresión de ~ER_~. Proponga una posible explica- podría elinlinar la inllibición.
c1on de como la transcnpc1on de SGRJ podría reprimir la
transcripción de SER3. (Pista: recuerde que el RNA de
SGRJ no codifica una proteína).

Sección 17.5
31. Una característica común de muchos mRNA eucariontes es
la presencia de una 3' UTR bastante larga, que suele con te-
 18
Mutaciones génicas y reparación
del DNA

Una mosca sin corazón

El corazón de la mosca de la fn1ta es un órgano simple que con-

siste en un tubo con un extremo abierto que se contrae de n1ane-
ra rít1nica y bombea líquido (de modo bastante ineficiente) por
e] cuerpo de la mosca. Si bien es simple y poco sofisticado, el
•
• corazón de la mosca de la fruta es, no obstante, esencial.
Llamativamente, unas pocas moscas de la fn1ta mutantes raras
nunca desarrollan un corazón y mueren (lo que no resulta sor-
prendente) en un estadio embrionario temprano. En la década de
1980, el genetista Rod Bod1ner analizó estos 1n utantes y realizó
un descubrimiento i1nportante: un gen que especifica el desarro-
llo del corazón. Llamó a este gen tinman (hombre de hojalata),
por el personaje de El mago de Oz, que también carecía de cora-
zón. L a investigación de Bodmer reveló que el gen tinm.an codi-
fica un factor de transcripción que se une al DNA y activa otros
genes esenciales para el desarrollo normal del corazón. En las
moscas ,n utantes estudiadas por Bodmer faltaba este gen, no se
producía el factor de transcripción y no se desa1Tollaba el cora-
zón. Resultados de investigaciones ulteriores revelaron la exis-
tencia de un gen humano (llamado Nkx,2.5) con u na secuencia
similar al tinman, aunque se desconocía su función.
Más adelante, en la década de 1990, los médicos Jonathan y
Chiistine Seid1nan con1enzaron a estudiar a personas nacidas
con defectos cardíacos, co mo un orificio en el tabique que sepa-
ra las cavidades del lado izquierdo y el lado derecho del cora-
zón. Estos defectos determinan flujo sanguíneo anor1nal a través
del corazón, lo que hace que este órgano trabaj e con más carga
que la nor1nal, y esto provoca la 1nezcla de la sangre oxigenada
y desoxigenada. L as cardiopatías congénitas no son infrecuen-
tes; afectan a alr ededor de 1 cada 125 bebés. Algunos de los
defectos se curan espontáneamente, pero otros requieren una
cirugía correctiva. Si bien la cirugía suele ser exitosa para rever-
tir los problemas cardíacos complejos, muchos de estos pacien-
Las personas con una mutación del gen tinman, que recibió su nom- tes conrienzan a presentar latidos cardíacos irregulares en la ter-
bre por el hombre de hojalat a de El Mago de Oz, suelen presentar
cera y cuarta décadas de la vida. Los Seidman y cols. hall aron
malformaciones cardíacas. (Mary Evans Picture Library/Alamy).
varias fa milias con defectos cardíacos congéni tos e irregularidades
de los lati dos cardíacos heredados de manera simultánea en forma
autosómica dominante. El análisis molecular detallado de una de estas familias reveló que el
gen responsable de los problemas cardíacos estaba localizado en cromosoma 5, en un punto
donde se había n1apeado antes el gen tinman humano (Nkx2.5). Todos los 1nie1nbros de esta
familia que heredaron los d efectos cardíacos también heredaron una 111utación del gen tinman.
Estudios posteriores con más pacientes mostraron que m uchas personas con cardiopatías con-
génjtas presentan una mutación del gen tinman. Tanto la versión humana de este gen como su
contrapartida en las moscas codifican un factor de transcripción que controla el desarrollo car-
díaco. Pese a las enormes d iferencias de tamaño, anatonúa y fisiología, los seres hun1anos y
las moscas utilizan el mismo gen para formar el corazón.
493
494 CAPITULO 18
L a historia de tinman ilustra la importancia central del estudio
de las mutaciones: a menudo, el anális is de mutantes es una
fuente de conocimientos clave sobre procesos biológicos impor-
tantes. Este capítulo considera las mutaciones génicas: la manera
en la que surgen las mutaciones de las instn1cciones genéticas y
cómo se estudian esos errores. Co1nenzan10s con un breve exa-
men de los diferentes tipos de 1nutaciones, que incluye sus efec-
tos fenotípicos, el modo en que pueden ser suprimidas y las tasas
de mutación. La siguiente sección explora cómo se originan
mutaciones en el curso de la replicación y después de ella, y el
modo en que los productos químicos y las radiaciones inducen
mutaciones. Después de evaluar el análisis de las mutaciones,
consideran1os los elementos transponibles, secuencias de DNA
capaces de desplazarse dentro del genoma y que, a menudo, pro-
vocan mutaciones cuando se movilizan. Por último, consideramos
la reparación del DA y algunas de las enfe1medades que aparecen
cuando esta es defectuosa.
18.1 Las mutaciones son alteraciones
hereditarias de la secuencia de DNA
El DNA es una molécula muy estable que se replica con asombro-
sa exactitud (véanse caps. 10 y 12), pero de hecho se producen
cambios en la estructura del DNA y errores de replicación. Una
mutación se define como un cambio heredado de la información
genética; los descendjentes pueden ser células u organismos.
La importancia de las mutaciones
Las mutaciones son tanto protectoras de la vida como causa de
gran sufrimiento. Por un lado, la mutación es la fuente de toda la
variación genética, la materia prima de la evolución. La capacidad
de los organismos de adaptarse al cambio del ambiente depende
de la presencia de variación genética en poblaciones naturales, y
la variación genética se produce por mutación. Por otra parte,
numerosas mutaciones tienen efectos deletéreos, y la mutación es
la fuente de muchas enfermedades y trastornos.
.L a 1nayor parte del estudio de la genética se centra en la forma
en que se heredan las variantes producidas por mutación; los cru-
zamientos genéticos son insignificantes si todos los miembros de
Se producen mutaciones somáticas
en las células no reproductoras ...
Mutación
Tejido
somático
somática
Célula mutante
Tejido de la
línea germinal Mutación de
-----~
la línea germinal
Las mutaciones de la línea ' La meiosis y la reproducción permiten que
germinal afectan a célu las que mutaciones de la línea germínal se trans-
dan origen a gametos. mitan a alrededor de la mitad de los
miembros de la siguiente generaci~
Figura 18-1. Las dos clases básicas de mutaciones son mutaciones somáticas y mutaciones de la línea germinal.
una especie son homocigóticos idénticos para los mismos alelos.
Gran parte del éxito de Gregor Mendel en desentrañ ar los princi-
pios de la herencia puede atribuirse a su utilización de variantes
cuidadosamente seleccionadas de guisantes. De n1odo similar, Tho-
mas Hunt Margan y sus estudiantes descubrieron muchos prin-
cipios genéticos básicos analizando moscas de la fruta mutantes.
Las mutaciones también son útiles para examinar procesos bio-
lógicos fundamentales. Hallar o crear mutaciones que afectan
diversos componentes de un sistema biológico y estudiar sus
efectos a menudo puede posibilitar el conocimiento del sistema.
Este método, denominado disección genética, es análogo a ima-
ginarse cón10 funciona un automóvil rompiendo diferentes partes
de este y observando los efectos; por ejemplo, aJ romperse el
radiador, el motor se recalienta, lo que revela que el radiador
enfría el motor. Del mismo modo, la utilización de mutaciones
para alterar la función puede ser una fuente de conocimjento de
procesos biológicos. Por ejemplo, los genetistas han comenzado
a descifrar los detalles moleculares del desarrollo estudiando
1nutacíones, co1no tinn1an, que interrumpen distintos estadios
e1nbrionarios de Drosophila (véase cap. 22). Asimismo, los cien-
tíficos utilizaron el análisis de mutaciones para revelar las dife-
rentes partes del operón lac (véase cap. 16) y cómo actúan en la
regulación génica. Sí bien el método de romper "partes" para
determinar la función podría parecer un enfoque rudimentario
para co1nprender un siste1na, en realidad es muy poderoso y se ha
aplicado ampliamente en bioquí1nica, biología del desarrollo,
fisio logía y ciencias del comportamiento. ¡Pero no es un método
recomendable para comprender cómo funciona su automóvil!
CONCEPTOS
Las mutaciones son cambios hereditarios del DNA. Resu ltan esencia-
les para el estudio de la genética y de utilidad en muchos otros cam-
pos biológicos.
Categorías de mutaciones
En organismos multicelulares, podemos di stinguir entre dos am-
plias categorías de mutaciones: somáticas y de la línea germinal .
.:.... y se transmiten a nuevas célu-
U Población de
las, 1~ que crea un clon de células células mutantes
l que tienen un gen mutante. ~
.
.-..~ ~ "
.. in
Todas las células Ninguna célula
portan mutación porta mutación
... que portarán la mutación
en todas sus células.
 Mutaciones génicas y reparación del DNA 495

Las mutaciones somáticas se originan en los tejidos sornáticos, Tipos de mutaciones génicas
que no producen gametos (fig. 18-1). Cuando se divide (mitosis)
una célula somática con una mutación, esta se transmite a las Hay varias maneras de clasificar las mutaciones génicas. Algunos
células hijas, lo que da 01i gen a una población de célu las idénti- esquemas de clasificación se basan en el carácter del efecto feno-
cas desde el p unto de vista genético (un clon). Cuanto más tem- típico; otros, en el agente etiológico de la mutación, y otros, en el
prano durante el desarrollo tiene lugar una n1utación son1ática, carácter molecular del defecto. Aquí clasificaremos las 111utacio-
n1ás grande es el clon de células con la m utación. nes fundamentalmente por su carácter molecular, pero ta1:nbién
Dado el enorme número de células presentes en un organismo hallaremos algu nos términos que relacionan las causas y los efec-
eucarionte típico, las mutaciones somáticas son numerosas. Por tos fenotípicos de las mutaciones.
ejemplo, hay alrededor de 1014 células en el cuerpo humano.
Por lo general, surge una mutación por millón de divisiones celu- SUSTITUCIONES DE BASES El tipo más simple de mutación génica
lares, de manera que deben aparecer cientos de millones de es una sustitución de bases, la alteración de un solo nucleótido del
mutaciones somáticas en cada persona. M uchas mutaciones so- DNA (fig. 18-2a). Hay dos tipos de sustituciones de bases. En una
n1áticas no tienen njngún efecto evidente sobre el fe notipo, por- transición, se reemplaza una purina por una purina diferente, o
que la fu nción de la célula mutante es reemplazada por la de alternativamente, se reemplaza una pirimidina por una pirimidina
células normales o porque la célula m utante m uere y es reempla- diferente (fi.g. 18-3). En una transversión, se reemplaza una puri-
zada por células nor111ales. Sin embargo, las células con una na por una pirilnidina o una pirimidina por una purina. El número
mutación somática que estimula la división celular pueden de transversiones posibles ( véase fig. 18-3) duplica el número de
aumentar de nú1nero y propagarse; este tipo de mutación puede transiciones posibles, pero las transiciones son 111ás frecuentes, por-
dar origen a célul as con una ventaja selectiva y es la base de los que transformar una pu1ina en una purina diferente o una pirimidina
cánceres (véase cap. 23). en una pirimidina diferente es más fácil que transformar una purina
Las mutaciones de la línea germinal aparecen en célul as que en una pirimidina, o viceversa. ►
fi nalmente producen gametos. Una mutación de la línea germinal
puede transmitirse a futuras generaciones, lo que produce orga- Secuencia
nisn1os que portan la n1utación en todas sus células somáticas y deDNA
GGG AGT GT A GAT CGT
en las de la línea germinal (véase fig. 18-1). Cuando hablamos de original
mutaciones en organismos mul ticelulares, en general nos referi- Una sustitución de
mos a mutaciones de la línea germinal. bases altera un único
Tradicionalmente, las 1nutaciones se han dividido en las que codón.
(a)
afectan un solo gen, deno1ninadas mutaciones génicas, y aquellas
Sustitución GGG AGT GCA GAT CGT
que afectan el n úmero o la estructura de los cromosomas, deno-
de bases
..._....,
nlinadas mutaciones cromosómicas. Esta distinción surgió porque Un codón modificado
las mutaciones cromosómicas podían observarse directamente,
por investigación de los cromosomas con un microscopio, mien-
tras que las mutaciones génicas solo podían detectarse por obser- (b)
vación de sus efectos fenotípicos. En la actualidad, la secuencia- Inserción
ción del DNA permite la observación directa de las mutaciones
génicas, y las n1utaciones cromosómicas se distinguen de las géni-
de bases
Una inserción o una
deleción modifica el
7
cas en forma algo arbitraria sobre la base del tamaño del daño del marco de lectura y puede
DNA. No obstante, es práctico utilizar mutación cromosómica cambiar muchos codones.
(c)
para una alteración genética en gran escala que afecta la estrucn1-
Deleción
ra del cro1nosoma o el número de cromosomas, y utilizar muta- de bases
ción génica para un daño relativamente pequeño del DNA que
afecta un solo gen. Este capítulo considera las rnutaciones géni- Figura 18-2. Tres tipos básicos de mutaciones son sustitucio-
cas; las mutaciones cromosómicas se analizaron en el capítulo 8. nes, inserciones y deleciones de bases.

Transiciones Posibles cambios Transversiones

de bases A--► C

., A __ G A
G
T
C
G A
Purina Purina Purina Pirimidina G --► T

e --► A

o~ o
Pirimidina Pirimidina
T
e
--► C

---i► r

Pirimidina Purina
e
T --► A
T --► G
---,► G

Figura 18-3. Una transición es la sustitución de una purina por una purina o de una pirimidina por una pirimi-
dina; una transversión es la sustitución de una pirimidi na por una purina o de una purina por una pirimidina.
496 CAPITULO 18

INSERCIONES y DELECIONES Otra clase de mutaciones génicas con-

tienen inserciones y deleciones: la adición o eliminación, respec-
tivamente, de uno o más pares de nucleótidos (fig. 18-2b y c) . Si
bien suele asumirse que las sustituciones de bases son el tipo más
frecuente de mutación, el análisis molecular ha revelado que las
inserciones y las deleciones suelen ser n1ás frecuentes. Las inser-
ciones y deleciones dentro de secuencias que codifican proteínas
pueden inducir mutaciones del marco de lectura, cambios del
marco de lectura del gen (véase p. 421 del cap. 15). Por lo gene-
ral, las mutaciones del marco de lectura alteran todos los ami-
noácidos codificados por nucleótidos localizados después de la
mutación y, por consiguiente, ejercen efectos drásticos sobre el
fenotipo. Algunos marcos de lectura ta1nbién introducen codones
de terminación prematuros, que terminan la síntesis de proteínas
en forma prematura y es to da por resultado una proteína acortada
(truncada). Sin embargo, no todas las inserciones y deleciones
inducen mutaciones del marco de lectura; las inserciones y dele-
ciones que consisten en algún múltiplo de tres nucleótidos deja-
rán intacto el n1arco de lectura, aunque la adición o la elirninación
de uno o más aminoácidos pueden afectar, aun así, el fenotipo.
Las inserciones y deleciones que no afectan el marco de lectura se
denominan inserciones y deleciones en el marco de lectura.
CONCEPTOS
Las mutaciones génicas consisten en un solo gen y pueden ser susti-
tuciones de bases (se altera un único par de nucleótidos) o insercio-
nes o deleciones (se agregan o se eliminan nucleótidos). Una sustitu-
ción de bases puede consistir en una transición (sustitución por bases
similares) o en una transversión (sustitución por bases diferentes).
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
¿ Cuá l de los siguientes cambios es una sustitución de bases por tran-
sición?
a. La adenina es reemplazada por timina.
b. La citosina es reemplazada por adenina.
c. La guanina es reemplazada por adenina.
d. Se insertan tres pares de nucleótidos en el DNA.
1
Sitio frágil
Figura 18-4. El cromosoma X frágil se asocia con una constricción
característica (sitio frágil) en el brazo largo. (© 2013 Custom Medical
Stock Photo).
EXPANSIÓN POR REPETICIÓN DE NUCLEÓTIDOS Las mutaciones en
las que aumenta el número de copias de un conjunto ele nucleóti-
dos se denominan expansiones por repetición de nucleótidos.
Este tipo de mutación se detectó por primera vez en 1991 en un
gen denominado FMR-1, que ocasiona el síndrome del cromoso-
ma X frágil, la causa hereditaria más frecuente de discapacidad
intelectual. El trastorno se denonlina de esta manera porque, en
células tratadas especialmente de personas que presentan el cua-
dro, eJ extremo de cada brazo largo del cromosoma X está unido
por una parte de aspecto delgado del cron1osoma (fig. 18-4). El
alelo normal FMR-1 (que no contiene la mutación) tiene 60
copias o menos de CGG, pero en personas con síndrome del cro-
mosoma X frágil, el alelo puede albergar cientos o incluso miles
de copias.
Se ha observado expansión por repetición de nucleótidos en
casi 30 enfermedades humanas, varias de las cuales se enumeran
en el cuadro 18-1. La mayoría de estas enfermedades son causa-
das por la expansión de un conjunto de tres nucleótidos (denomi-
nado un trinucleótido), la mayoría de las veces CNG, donde N
puede ser cualquier nucleótido. Sin embargo, algunas enfer1neda-
des son causadas por repeticiones de cuatro, cinco e incluso doce
nucleótidos. A menudo, el número de copias de la repetición de

Cuadro 18-1 Ejemplos de enfermedades genéticas humanas causadas por expansión por repetición de nucleótidos

Enfermedad Secuencia repetida Rango normal Rango de enfermedad

Atrofia muscular espinal y bulbar CAG 11-13 40-62

Síndrome del cromosoma X frágil CGG 6-54 50-1500

Síndrome de Jacobsen CGG 11 100-1000

Ataxia espinocerebelosa (varios t ipos) CAG 4-44 21 -1 30

Ataxia cerebelosa autosómica dominante CAG 7-1 9 37-220

Distrofia miotónica CTG 5-37 44-3000

Enfermedad de Huntington CAG 9-37 37 -1 21

Ataxia de Friedreich GAA 6-29 200-900

Atrofia dentato-rubro-pá lido-luisiana CAG 7-25 49-75

Epilepsia mioclón ica del tipo Unverritch-Lundborg CCCCGCCCCGCG 2-3 12-13

 Mutaciones génicas y reparación del DNA 497

nucleótidos se correlaciona con la gravedad o la edad de comien- 1 2 3 4 5 6 7 8 Esta molécula de

,->-, ,->-, ,->-, ,->-, ,->-, ,->-, ,->-, ,->-,
zo de la enfermedad. El número de copias de la repetición tam- DNA tiene ocho
MmRcimRcituRciWlé: J copias de una
bién se correlaciona con la inestabilidad de las repeticiones de CAGCAGCAGCAGCAGCAGCAGCAG
repetición CAG.
nucleótidos: cuanto más repeticiones, aumenta la probabilidad
de expansión a aún más repeticiones. Esta asociación entre el
número de copias de repeticiones de nucleótidos, la gravedad de
-
O Se separan las
--.::::;::-:..¡ dos cadenas ...
la enfennedad y la probabilidad de expansión induce un fenó1ne-
no conocido como anticipación (véase cap. 5), en el que las enfer-
GTC GTC GTC GTC GTC GTC GTC GTC
medades causadas por expansiones por repetición de nucleótidos
se tornan más graves en cada generación. Con menor frecuencia, ... y se
el número de repeticiones de nucleótidos puede disminuir dentro replican.
de una familia. Asünismo, se ha observado expansión por repeti-
ción de nucleótidos en algunos microbios y plantas.
Los aumentos del número de repeticiones de nucleótidos pue- GTC GTC GTC GTC GTC GTC GTC GTC
den provocar síntomas de enfermedad de diferentes maneras. En CAG CAG CAG CAG CAG CAG CAG
varias de las enfermedades (p. ej., enfermedad de Huntington), el
nucleótido se expande dentro de la parte codificante de un gen, lo
que produce una proteína tóxica que tiene residuos de glutamina
extra (el anlinoácido codificado por CAG). En otras enfe1meda-
!
des, la repetición está fuera de la región codificante de un gen y
afecta su expresión. En el síndrome del cromosoma X frágil, otras
copias de la repetición de nucleótidos hacen que el DNA se meti-
GTC GTC
-
GTC GTC GTC GTC GTC GTC

le, lo que desactiva la transcripción de un gen esencial.

Cierta evidencia sugiere que la expansión por repetición de
nucleótidos se produce en el curso de la replicación del DNA y • En el curso de la replicació~
parece estar relacionada con la formación de horquillas y otras - -==~ se forma una horquilla en la 1
cadena recién sintetizada,. ·.:...J
estructuras de DNA especiales que se forman en el DNA mono-
catenario y que consisten en repeticiones de nucleótidos. Estas
estructuras pueden interferir con la replicación normal al causar
deslizamiento de las cadenas, mala alineación de las secuencias o 8
■
atascan1iento de la replicación. La figura 18-5 muestra un mode-
lo de có1no la repetición de horquillas podría causar expansión de
repeticiones. Observe la Animación 18.1 para comprender mejor
_____ y
13)
__,

cómo aumentan de número las copias de repeticiones de nucleó- á _A_ "'

tidos. Se han postulado otros modelos de expansión por repeti- 1:111 .. . lo que causa que parte de la cadena
molde sea replicada dos veces y aumenta
ción que se producen a través de la transcripción y reparación del
DNA. Se desconocen muchos aspectos de este fenón1eno, inclui-
el número de repeticiones en la cadena j
do por qué se observa expansión por repetición en algLLnas perso- 5 1_ recién sintetizada. _

nas y no en otras.
, Se separan las dos cadenas de la
- =:::::: nueva molécula de DNA, ...
CONCEPTOS
La expansión por repetición de nucleótidos son regiones de DNA que 1 2 3 4 5 6 7 10 11 12 13
consisten en copias repetidas de grupos de nucleótidos. El aumento
... y la cadena con las copias extra
del número de repeticiones de nucleótidos se asocia con varias enfer- de CAG sirve como molde para la
medades genéticas humanas. replicación.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 1O 11 12 1.,.,.,3ª_
Efectos fenotípicos de las mutaciones
Otra manera de clasificar las mutaciones se basa en sus efectos
------1aq
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

fenotípicos. En el nivel 1nás general, podemos distinguir una La molécula de DNA resultante
mutación sobre la base de su fenotipo en co111paración con el contiene cinco copias adicionales
de la repetición CAG.
fenotipo de tipo silvestre. Una mutación que altera el fenotipo de
tipo silvestre se denomina mutación directa, mientras que una
mutación inversa (una reversión) restablece el fenotipo de tipo sil- Figura 18-5. Modelo de cómo el número de copias de una repeti-
vestre. ción de nucleótidos puede aumentar durante la replicación.
498 CAPITULO 18
DNA
Ausencia de mutación (a) Mutación de sentido erróneo
DNA
mRNA
Proteína
- -- - l Se produce proteína 1----- '
de tipo silvestre.
El nuevo codón codifica un ami-
noácido diferente; hay un cambio
de la secuencia de aminoácidos.
Figura 18-6. Las sustituciones de bases pueden causar (a) mutaciones de sentido erróneo, (b) mutaciones ter-
minadoras y (e) mutaciones silenciosas.
Los genetistas emplean otros términos para describir los efec-
tos de mutaciones sobre la estructur a proteica. Una sustitución de
bases que determina un aminoácido diferente en la proteína se
denomina mutación de sentido erróneo (fig. 18-6a). U na muta-
ción terminadora cambia un codón con sentido (uno que especi-
fica un aminoácido) por uno de terminación (que finaliza la tra-
ducción), como se muestra en la figura 18-6b. Si se produce una
mutación terminadora a principios de la secuencia de mRNA, la
proteína estará truncada y, en general, no será funcional.
Dada la redundancia del código genético, algunos codones dis-
tintos especifican el mismo aminoácido. Una mutación silencio-
sa cambia un codón por un codón sinónimo que especifica el
mi smo an,inoácido (fig. 18-6c), lo que modifica la secuencia de
DNA sin cambiar la secuencia de aminoácidos de la proteína. Sin
embargo, no todas las n1utaciones silenciosas son verdadera1nen-
te silenciosas: algunas sí tienen efectos fenotípicos. Por ejemplo,
las mutaciones silenciosas pueden ejercer efectos fenotípicos
cuando se utilizan diferentes tRNA (denominados tRNA isoacep-
tores; véase cap. 15) para dis6ntos codones sinónimos. Como
algunos tRNA isoaceptores son más abundantes que otros, cuál
de los codones sinónimos se utiliza puede afectar la velocidad de
síntesis proteica. L a velocidad de síntesis proteica puede influir
en el fenotipo por afectar la cantidad de proteína presente en la
célula y, en algunos casos, el plegainiento de la proteína. Otras
mutaciones silenciosas pueden modificar las secuencias cerca de
las uniones exón-i ntrón, que afectan el corte y empalme (véase
cap. 14). Otras mutaciones silenciosas pueden influir en la unión
de miRNA a secuencias complementarias del mRNA, lo que
determina si se traduce el 1nRNA (véase cap. 14).
Una mutación neutral es aquella de sentido erróneo que alte-
ra la secuencia de aminoácidos de la proteína pero no modifica
significativamente su función. Las mutaciones neutrales se produ-
cen cuando un aminoácido es reemplazado por otro químicamen-
te similar o cuando el aminoácido tiene escasa influencia sobre la
función de la proteína. Por ejemplo, las mutaciones neutrales se
producen en los genes que codifican la hemoglobina; si bien estas
n1utaciones modifican la secuencia de aminoácidos de la hemo-
globina, no afectan su capacidad de transporte de oxfgeno.
Las mutaciones de pérdida de función causan la ausencia
completa o pai·cial de la función normal de la proteú1a. Una muta-
(b) Mutación terminadora (e) Mutación silenciosa
Codón de
terminación
•
El nuevo codón es un codón
de terminación; la traducción
El nuevo codón codifica el mismo
aminoácido; no hay ningún cambio
finaliza en forma prematura. de la secuencia de aminoácidos.
ción de pérdida de función altera de tal manera la estructura de la
proteína que esta ya no actú a cotTectamente, o la mutación puede
aparecer en regiones reguladoras que afectan la transcripción, la
traducción o el corte y empalme de la proteína. Las 1nutaciones
de pérdida de función suelen ser recesivas: un organismo diploi-
de debe ser ho1nocigótico para una :mutación de pérdida de fun-
ción antes de que se puedan observar los efectos de Ja pérdida de
la proteína funcional. Las mutaciones que causan fibrosis quísti-
ca son mutaciones de pérdida de función: provocan una forma no
funcional del regulador de la conductancia transmembrana de la
fibrosis quística, que en condiciones normales regula el desplaza-
mien to de iones cloruro hacia el interior y el exterior de la célula
(véase cap. 5).
En cambio, una mutación de ganancia de función hace que la
célula produzca una proteína o producto génico cuya función nor-
malmente no está presente. Esto podría ser un producto génico
nuevo por co1npleto o uno producido en un tejido inapropiado o
en un momento inadecuado del desarroJlo. Por eje1nplo, una mu-
tación de un gen que cocLifica un receptor de un factor de creci-
miento podría determinar que el receptor mutado estimulara el
crecimiento todo el tiempo , aun en ausencia del factor de creci-
miento. Las mutaciones de ganancia de función suelen ser domi-
nantes en su expresión, porque una única copia de la mutación
induce la presencia de un nuevo producto génico. Otros tipos de
mutaciones son mutaciones condicionales, que se expresan solo
en ciertas condiciones. Por ejemplo, algunas mutaciones condi-
cionales afectan el fenotipo solo a temperaturas elevadas. Otras
son mutaciones letales, que causan muerte prematura (cap. 5).
~ SOLVER EL PROBLEMA 22
Mutaciones represoras
Una mutación supresora es un cambio genético que oculta o
suprime el efecto de otra mutación. Este tipo de mutación es dife-
rente de una mutación inversa, en la que el sitio mutado recupera
la secuencia de tipo silvestre original (fig. 18-7). Una mutación su-
presora se produce en un sitio distinto del lugar de la mutación
01iginal; por lo tanto, un individuo con una mutación supresora es
un doble mutante, que tiene tanto la mutación 01iginal como la
mutación supresora, pero que presenta el fenotipo de un tipo sil-
 Mutaciones génicas y reparación del DNA 499

Una mutación directa Una mutación inversa Se produce una mutación

cambia el fenotipo silvestre restablece el gen y el supresora en un sitio diferente
por un fenotipo mutante. fenotipo de tipo silvestre. del de la mutación original ...
Mutación M utación
' ... y produce un
Genotipo: Tipo silvestre _d_ _ _A-
irecta _, . Mutación supresora a- Mutación
A- s - individuo que tiene
A+ B+
Mutación tanto la mutación
inversa de A- original como la
mutación supresora ...

. . .pero tiene el
fenotipo silvestre.

Figura 18-7. Relación de mutaciones

directas, inversas y supresoras. Ojos roj os Ojos b lancos Ojos rojos

vestre no mutado. Los genetistas distinguen entre dos clases de Deleción de un nucleótido
mutaciones supresoras: intragénicas e intergénicas.
DNA 3 ' -AAA
/
l<CAC TTO OCO TAC AA-5
1

MUTACIONES SUPRESORES INTRAGÉNICAS Una mutación supreso-

ra intragénica tiene lugar en el mismo gen que contiene la .m uta-
1nRNA 5' - UUU OUG AAC CGC AUG UU-3 '
ción que está siendo suprimida y puede actuar de varias maneras.
El supresor puede cambiar un segundo nucleótido del mismo Aminoácidos Phe Val Asn Arg Met
codón alterado por la mutación original, lo que produce un codón
que especifica el 1nisn10 aminoácido que el codón original no
mutado (tig. 18-8). Los supresores intragénicos también pueden Si se añade un solo nucleótido al tercer codón (la 1nutación supre-
actuar por supresión de una mutación del marco de lectura. Si la sora) , se restablece el marco de lectura, aunque difieren dos de los
mutación original consiste en la deleción de una base, la adición aminoácidos respecto de los especificados por la secuencia ori-
de una sola base en otra parte del gen restablecerá el marco de ginal.
lectura anterior.
Consideremos la siguiente secuencia de nucleótidos de la cade- Inserción de un nucleótido
na molde del DNA y los a1ninoácidos que esta codifica:
DNA 3 '-AAA CAC
I
TTT GGC GTA CAA-5
1

DNA 3' -AAA TCA CTT OOC OTA CAA-5'

mRNA 5' -UUU OUG AAA eco CAU OUU-3'
mRNA 5' - UUU AOU OAA eco CAU OUU- 3'
Aminoácidos Phe Val Lys Pro His Val
Aminoácidos Phe Ser Olu Pro His Val
De modo similar, una 1nutación secundaria a una inserción puede
Suponga que se produce una deleción de una base en el primer ser suprimida por una deleción ulterior en el mismo gen.
nucleótido del segundo codón. Esta deleción desplaza el marco de Una tercera manera en la que puede actuar u na mutación supre-
lectura en un nucleótido y modifica todos los aminoácidos que sora intragénica consiste en efectuar cambios compensatorios en
siguen a la 1nutación. la proteína. Una primera mutación de sentido erróneo puede alte-

Una mutación de sentido Una segunda mutación

erróneo altera un único codón. en un sitio diferente
del mismo gen ...
M utación
DNA M ut ación 1
i---+- - - supresora .
¡ intra énica

mRN A

i
Proteína

Figura 18-8. Una mutación supresora intragénica se produce en el gen que contiene la
mutación que está siendo suprimida.
500 CAPITULO 18

(a) Secuencia de típo silvestre (b) Sustitución de bases (e) Sustición de bases en un segundo sit io
Sitio 1 En el sitio 2, hay un gen que
DNA (primera mutación) Sitio 2- ::::=:::; codifica el tRNA de la tirosina.
TG
ATC
..,tRNA
!:,1!](] 1
Transcripción lTra nscripción ! Segunda mutación

Codón de ¡ de sustitución de bases La transcripción normal

7
terminación produce un tRNA con un
mRNA anticodón AUA (que se apa-
rearfa con el codón UAU de la
tirosina durante la traducción).

•• l Traducción 1 1
-.....:::::::::::-,..-1 La introducción de una base

•••
1 Transcripción

Ribosoma
•••• ! ♦
..,tRNA
incorrecta (G) da por
resultado un tRNA mutante
que tiene un anticodón AUC

•• 1
1.1ml
(en lugar de AUA), ...

- f• -UAG
: ~=.----- {
1 Traducción
Se detiene la síntesis
proteica, lo que da .... +__ ... que puede aparearse con l
por resultado una --~~::-i el codón de terminación U~
l proteína no funcional.J
Se incorpora Leu
en la proteína. Terminación de La traducción continúa
la traducción más allá del codón de
- - -===::::::7 terminación, y se incorpora

.. ! •
l Tyr en la proteína .

Proteína Proteína Proteína

f uncional de no funcional funcional de longitud
longitud completa acortada completa

Figura 18-9. Una mutación supresora intergénica se produce en un gen distinto del que contiene la muta-
ción original. (a) La secuencia de tipo silvestre produce una proteína funcional de longitud completa. (b) Una susti-
tución de bases en un sitio del mismo gen produce un codón de terminación prrematuro, que da por resultado una
proteína no funcional acortada. (c) Una sustitución de bases en un sitio de otro gen que, en este caso, codifica tRNA
modifica el anticodón del tRNATyr; el tRNAlyr puede aparearse con el codón de terminación producido por la mutación
original, lo que permite que se incorpore tirosina en la proteína y continúe la traducción.

rar el plegamiento de una cadena polipeptídica al modificar la
manera en que los aminoácidos de la proteína interactúan entre sí.
Una segunda .m utación de sentido e1Tóneo en un sitio diferente (el
supresor) puede recrear el patrón de plegamiento original al res-
tablecer las interacciones entre los aminoácidos.
MUTACIONES SUPRESORAS INTERGÉNICAS En cambio, una mutación
supresora intergénica se produce en u.n gen distinto del que presen-
ta la mutación oiiginal. En ocasiones, estas mutaciones supresoras
actúan por modificación de la forma de traducción del rn.RNA. En
el ejemplo ilustrado en la figura 18-9a, la secuencia original del
DNA es AAC (UUG en el mRNA) y especifica leucina. Esta
secuencia muta a AIC (U.AG en el rn.RNA), un codón de ter1nina-
ción (fig. 18-9b). La mutación terminadora ATC podría ser supri-
mida por una segunda mutación de un gen diferente que codificara
un tRNA; esta segunda mutación druia origen a un codón capaz de
aparearse con el codón de terminación UAG (fig. 18-9c). Por ejem-
plo, el gen que codifica el tRNA para tirosina (tRNATyr), que tiene
el ru1ticodón AUA, podría mutar para tener el anticodón AUC, que
después se aparearía con el codón de terminación UAG. En lugar
de que la traducción termine en el codón de terminación UAG, se
insertaría tirosina en la proteína y se produciría una proteína de lon-
gitud completa, aunque ahora la leucina sustituiría a la tirosina. El
efecto de este cambio dependería del papel de este aminoácido en
la estructura global de la proteína, pero es probable que el efecto de
la ,n utación supresora sea n1enos deletéreo que el de la mutación
terminadora, que detendría de manera prematura la traducción.
Como las células de muchos organismos tienen múltiples co-
pias de genes de tRNA, habría otras copias no mutadas de tRNATyr
disponibles pru·a reconocer codones de tirosina en los transcritos
del gen mutante en cuestión y se expresarían otros genes en forma
concurrente. Podríamos esperru· que los tRNA con la mutación
supresora recién descrita también suprimieran los codones de ter-
minación normales en los extremos de otras secuencias de codifi-
cación, lo que determinaría la producción de proteínas más largas
que las normales, pero en general no se produce este evento.
 Cuadro 18-2 Características de diferentes tipos de mutación

Tipo de mutación Definición

Sustitución de bases Cambia la base de un solo nucleótido del DNA

Transición Sustitución de bases en la que una purina reemplaza a una purina o una pirimidi na reemplaza a una pirimidina

Transversión Sustitución de bases en la que una purina reemplaza a una pirimidina o una pirimidina reemplaza a una purina

Inserción Adición de uno o más nucleótidos

Deleción Eliminación de uno o más nucleótidos
Mutación del marco de lectura Deleción o inserción que modifica el marco de lectura de un gen

Deleción o inserción en el Deleción o inserción de un múltiplo de tres nucleótidos que no modifica el marco de lectura
marco de lectura
Expansión por repetición Secuencia repetida de un conjunto de nucleótidos en la que el número de copias de la secuencia aumenta
de nucleótidos
Mutación directa Cambia el fenotipo de tipo si lvestre a un fenotipo mutante

Mutación inversa Vuelve el fenotipo mutante al fenotipo de t ipo silvestre

Mutación de sentido erróneo Cambia un codón con sentido por otro codón con sentido diferente, lo que determina la incorporación de un
aminoácido distinto en la proteína

Mutación terminadora Cambia un codón con sentido por un codón de terminación, lo que causa la terminación prematura de la
traducción

Mutación silenciosa Cambia un codón con sentido por un codón sinónimo, lo que no modifica la secuencia de aminoácidos de la
proteína
Mutación neutral Modifica la secuencia de am inoácidos de una proteína sin alterar su capacidad funciona l

Mutación de pérdida de f unción Causa una pérdida total o parcial de la función

Mutación de ganancia Causa la aparición de un nuevo rasgo o función, o la aparición de un rasgo en un tejido inapropiado o en un
de función momento inadecuado

Mutación letal Causa muerte prematura

Mutación supresora Suprime el efecto de una mutación previa en un sitio diferente

Mutación supresora intragénica Suprime el efecto de una mutación previa dentro del mismo gen
Mutación supresora intergénica Suprime el efecto de una mutación previa en otro gen

Asimismo, las mutaciones supresoras intergénicas pueden actuar

por interacciones génicas (véase cap. 5). Las cadenas polipept.ídi-
cas producidas por dos genes pueden interactuar para producir una
proteína funcional. Una mutación de un gen puede modificar el Un gen codifica una proteína con la siguiente secuencia de ami-
polipéptido codificado, de manera que puede destruir la interacción noácidos:
entre los dos polipéptidos, en cuyo caso no se produce una proteí-
na funcional. Una mutación supresora del segundo gen p uede pro- Met-Arg-Cys-lle-Lys-Arg
vocar un cambio compensatorio en su polipéptido; por consiguien-
te, se restablece la interacción original. El cuadro 18-2 resume las Una mutación de un solo nucleótido modifica la secuencia de
características de los diferentes tipos de mutaciones. aminoácidos a:

Met-Asp-Ala-Tyr-Lys-Gly-Glu-Ala-Pro-Val
CONCEPTOS
Se produce una .m utación de un segundo nucleótido en el n1i smo
Una mutación supresora contrarresta el efecto de una mutación ante-
gen, que suprime los efectos de la p1imera mutación (una muta-
rior en un sitio diferente. Una mutación supresora intragénica se pro-
ción supresora intragénica) . Con la mutación original y la mu-
duce dentro del mismo gen que el que contiene la mutación original;
tación supresora intragénica presentes, la proteína tiene la
una mutación supresora intergénica se produce en un gen diferente.
siguiente secuencia de aminoácidos:

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2 Met-Asp-Gly-Ile-Lys-Arg

¿En qué se diferencia una mutación supresora de una mutación inversa?

¿Cuál es el cm·ácter y la localización de la primera mutación y
de la mutación supresora int.ragénica?
501
502 CAPITULO 18
Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
El üpo y la locali zació n de la prín1era mutación y la mutación
supresora int:ragénica.
¿Qué información se proporcion a para resolver el problema?
■ La secuencia de aminoácidos de la proteína modificada por
el gen no mutado original.
■ La secuencia de aminoácidos de la proteína codificada por
el gen mutado.
■ La secuencia de aminoácidos de la proteína codificada por
el gen mutado y por el supresor intragénico.
Pasos de la solución
La primera mutación altera el marco de lectura, porque se n1odi-
fi can todos los aminoácidos después de Met. Las inserciones y las
deleciones afectan el marco de lectura; la 1n utación original con-
siste en una inserción o una deleción de un único nucleótido en el
segundo codón. El supresor intragénico restablece el marco de
lectura; la mutación supresora intragénica también consiste, muy
probablemente, en la inserción o la deleción de un solo nucleóti-
do. Si la primera mutación es una inserción, el supresor deberá ser
una deleción; si la prünera mutación es una delec ión, el supresor
deberá ser una inserción. Adviértase que Ja proteína producida
por el supresor difiere de la proteína ori ginal en el segundo y el
tercer aminoácido, pero el segundo aminoácido producido por
el supresor es el 1nismo que el de la proteína p roducida por la
mutación original. Así, la mutación supresora debe haberse pro-
ducido en el tercer codón, porque el supresor no modifica el
segundo aminoácido.
► Para mayor práctica en el análisis de mutaciones, intente resolver el
Problema 23 al final del capítu lo.
Tasas de mutación
La frecuencia con la que un alelo de tipo silvestre de un locus
ca1n bia a un alelo m utante se denomina tasa de mutación, y por
lo general se expresa como el número de mu taciones por unjdad
biológica, que puede ser mutaciones por divi sión celular, por ga-
meto o por ciclo de rep licación. Por ejemplo, la acondroplasia es
un tipo de enanismo hereditario en los seres humanos que se debe
a una mutación dominante. En pro1nedio, surgen alrededor de
cuatro mutaciones de acondroplasia cada 100 000 gametos, y por
consiguiente, la tasa de mutación es 4/iooooo o 0,00004 mutacio-
nes por gameto. La tasa de mutación aporta información acerca
de la frecuencia con la que aparece una mutación.
FACTORES QUE AFECTAN LAS TASAS DE MUTACIÓN Tres factores in-
ciden en los cálculos de las tasas de mutación. Primero, estas
dependen de la frec uencia con la cual tiene lugar un cambio en el
DNA. Un cambio en el DNA puede ori ginarse por alteraciones
moleculares espontáneas del DNA o ser inducido por agentes quí-
1nicos, biológicos o físicos del an1biente.
El segundo fac tor que influye en la tasa de mu tación es la pro-
babilidad de que cuando se produce un cambio, este sea reparado.
La mayoría de las células tienen una serie de mecanismos de
reparación del DNA alterado, de manera que gran parte de las
alteraciones se corrigen antes de que sean replicadas. Si estos sis-
temas de reparación son eficaces, las tasas de mutación serán
bajas; si son defectuosos, las tasas de tnutación serán elevadas.
Algunas mutaciones aumentan la tasa de mutación global en otros
genes; por lo general, estas mutaciones se producen en genes que
codifican componentes de la maquinaria de replicación o enzimas
de reparación del DNA.
E l tercer factor es la probabilidad de que se detecte una muta-
ción. Cuando se secuencia el DNA, todas las mu taciones son po-
tencialmente detectables. Sin embargo, en la práctica, las muta-
ciones suelen detectarse por sus efectos fenotípicos. Algunas
mutaciones parecen surgir a una tasa más alta solo porque son
más fáciles de detectar.
VARIACIÓN DE LAS TASAS DE MUTACIÓN Podemos extraer varias
conclusiones similares acerca de las tasas de mutación, aunque
varían entre los d istintos genes y especies (cuadro 18-3). Pri-
mero, las tasas de mutación espontánea son bajas en todos los
organ ismos estudiados. L as tasas de mutación típicas para genes
bacterianos varían de alrededor de 1 a 100 mutaciones por 10 000
millones de células (de 1 x 10-8 a 1 x 10- 10) . Las tasas de muta-
ción de la mayoría de los genes eucarion tes son un poco más
altas, de alrededor de l a 1O .m utaciones por millón de gametos
(de 1 x 10- 5 a 1 x 10-6). Estos valores m ás altos en los eucarion-
tes pueden deberse al hecho de que las tasas se calculan por
gameto, y se requieren varias divisiones celulares para producir
un gameto, mientras que las tasas de m utación en células proca-
riontes se calculan por división celular.
Las diferencias de las tasas de mutación entre las especies pue-
den deberse a distintas capacidades para reparar mutaciones,
exposiciones desiguales a mutágenos o diferencias biológicas de
las tasas de mutaciones espontáneas. No se comprende por co1n-
pleto la razón de esta variación, pero algunas regiones del DNA
se conocen como puntos cali entes de mutaciones.
Investigaciones recientes sugieren que se producen menos muta-
ciones en las secuencias de DNA ocupadas por nucleosomas (véase
cap. 11) . En estas secuencias, puede haber tasas de mutación redu-
cidas, porque el DNA asociado con nucleosomas está menos
expuesto a n1utágenos, pero trunbién se podría explicru· por el efec-
to de nucleoso1n as sobre la reparación, la recombinación o la repli-
cación del DNA, todo lo cual influ ye en la tasa de mutación.
Vru·ios estudios recientes han deterrrunado directamen te las
tasas de mutación mediante la secuenciación de genes de orga-
nismos antes y después de una serie de generaciones. Estos nue-
vos estudios sugieren que las tasas de 111utación a n1enudo son
más altas que las n1edidas previamente sobre la base de los ca1n-
bios del fenotipo. En un estudio, los genetistas secuenciru·on al
azar segmentos elegidos de DNA del nematodo Caenorhabditis
elegans y observaron alrededor de 2,1 mutaciones por genoma,
por generación, lo que superó 1O veces las estimaciones previas
basadas en cambios fenotípicos. Los investigadores hallaron que
alrededor de la mitad de las mutaciones eran inserciones y dele-
c1ones.
Asimismo, la secuenciación reciente del genoma ha aportado
información más exacta acerca de las tasas de mu tación en seres
humanos. Varios estudios de secuenciación sugieren que la tasa
 Mutaciones génicas y reparación del DNA 503

Cuadro 18-3 Tasas de mutación de diferentes genes en distintos organismos

Organismo Mutación Tasa Unidad

Bacteriófago T2 Inhibición de la lisis 1 X 10-8 Por replicación
Espectro de huéspedes 3 X 10-9
Escherichia cofi Fermentación de lactosa 2 X 10- 7 Por división celular
Requerimiento de histidina 2 X 10-8
Neurospora crassa Requerimiento de inositol 8 X 10-8 Por espora asexual
Requerimiento de adenina 4 X 1Q-8
Malz Color del grano 2,2 X 1o-6 Por gameto
Drosophila Color de ojos 4 X 1Q-S Por gameto
Aloenzimas 5,14x10-6
Ratón Color del pelaje albino 4,5 X 10-5 Por gameto
Dilución del color del pelaje 3 X 1Q-S
Ser humano Enfermedad de Huntington 1 X 10-6 Por gameto
Acondroplasia 1 X 1o-s
Neurofibromatosis (Michigan) 1 X 1Q-4
Hemofil ia A (Finlandia) 3,2 X 10-5
Distrofia muscular de Duchenne (Wisconsin) 9,2 X 10-5

global de sustituciones de bases en seres humanos es alrededor de
1 x 10-8 mutaciones por par de bases por generación. Otras inves-
tigaciones sugieren que cada persona porta al rededor de 100
mutaciones de la línea germinal de pérdida de función.
MUTACIÓN ADAPTATIVA Como se analizará en los capítulos 24 a
26, la variación genética es crucial para el cambio evolutivo que
determina adaptación a nuevos ambientes. L as nuevas variantes
genéticas se originan fundamentalmente por 1nutación. Dw·ante
muchos años, se asumió que la variación genética surgía de ma-
nera aleatoria y a tasas que eran independientes de la necesidad
de adaptación. Sin embargo, cierta evidencia sugiere que los
ambientes estresantes - donde la adaptación puede ser necesaria
para sobrevivir- pueden inducir más n1utaciones en las bacterias,
un proceso que se ha denominado mutación adaptativa. La idea
de la mutación adaptativa se ha discutido en forma intensa; los
críticos replican que es esperable que la mayoría de las mutacio-
nes sean deletéreas y, por consiguiente, es probable que la mayor
mutagénesis sea nociva la mayoría de las veces.
CONCEPTOS
La tasa de mutación es la frecuencia con la que aparece una mutación
específica . Por lo general, las tasas de mutaciones son bajas y están
afectadas por factores ambientales y genéticos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿ Cuáles son los tres factores que influyen en las tasas de mutación ?
18.2 Las mutaciones son causadas
potencialmente por una serie
de factores diferentes
Las mutaciones se deben a factores internos y externos. Las que
ocu1Ten en condiciones normales se denominan mutaciones es-
pontáneas, mientras que las secundarias a cambios causados por
agentes químicos o radiación ambiental son mutaciones ind.ucidas.
Errores de replicación espontáneos
La replicación es sorprendentemente exacta: en el curso de la sín-
tesis de DNA, se produce menos de un error en 1000 millones de
nucleótidos (véase cap. 12). Sin embargo, a veces sobrevienen,
de hecho, errores de replicación espontáneos.
DESPLAZAMIENTOS TAUTOMÉRICOS Antes se consideraba que la
causa fundamental de los errores de replicación espontáneos eran
desplazamientos tautoméricos, en los que cambian las posiciones
de los protones de las bases del DNA. Las bases púricas y pirimí-
dicas existen en formas químicas diferentes denominadas tautó-
meros. Las dos formas tautoméricas de cada base se encuentran
en equilibrio dinámico, aunque Lma forma es más común que la
otra. Los apareamientos de bases convencionales de Watson y
Crick (adenina con timina y citosina con guanina) se producen
entre las formas comunes de las bases, pero si estas se encuentran
en sus formas tautoméricas raras, otros apareamientos de bases son
posibles. Por ejemplo, la forma común de citosina se aparea con
guanina, pero el tautómero raro de citosina se aparea con adenina.
Watson y C1ick postul aron que los desplazamientos tautoméri-
cos podrían provocar mutaciones, y durante n1uchos anos, su
 Apareamiento de bases incorrecta con guanina a través de tambaleo (fig. 18-11). En el
que no cumplen las reglas de Watson y Crick siguiente ciclo de replicación, se separan las dos bases incorrec-
, tamente apareadas, y cada una sirve de molde para la síntesis de
una nueva cadena nucleotídica. Esta vez, la timina se aparea con
adenina, lo que produce otra copia de la secuencia de DNA origi-
nal. Sin embargo, en la otra cadena, la guanina incorporada en
forma incorrecta sirve de molde y se aparea con citosina, lo que
produce una nueva molécula de DNA q ue tiene un error: un par
C • G en lugar del par original T • A (una sustitución de bases
T • A ➔ C • G). El error de incorporación original induce un
error replicado , que crea una mutación permanente, porque
todos los apareamientos de bases son correctos y no hay ningún
H mecanismo de los siste111as de reparación para detectar el error.
H \-H
CAUSAS DE DELECIONES E INSERCIONES Durante la replicación y el
H---<"0 ••••••••••••••••• H- / N entrecruzamiento, ta1nbién aparecen mutaciones espontáneas

/N ~ • • • • • • • • • • • • • • • • • H- Ñ~,\
FN
H man el bucle se encuentran en la cadena recién sintetizada, se pro-
Tambaleo citosina-adenina
Figura 18-10. Puede haber apareamientos de bases no convenciona-
les como resultado de la flexibilidad de la estructura del DNA. La
timina y la guanina pueden aparearse mediante tambaleo entre bases nor-
males. La citosina y la adenina pueden aparearse cuando la adenina está
protonada (tiene un átomo de hidrógeno adicional).
hipótesis fue el modelo aceptado para los errores de repli cación
espontáneos. Sin embargo, nunca hubo evidencia convincente de
que los tautómeros raros fueran la causa de mutaciones espontá-
neas. Más aún, ahora la investigación muestra escasa evidencia de
tautómeros en el DNA.
ERRORES DE APAREAMIENTO SECUNDARIOS A OTRAS ESTRUCTURAS
A menudo, los errores de apareamiento surgen por tambaleo o
titubeo (wobble) (véase cap. 15), en el que bases normales, pro-
tonadas y otras formas de bases pueden aparearse debido a la fle-
xibilidad de la estructura helicoidal del DNA (fig. 18-10). Estas
estructuras se han detectado en molécu las de DNA, y en la actua-
lidad se considera que son responsables de muchos de los errores
de apareamiento durante la replicación.
ERRORES DE INCORPORACIÓN y ERRORES REPLICADOS Cuando se ha
incorporado una base apareada de manera incorrecta a una cade-
na nucleotídica recién sintetizada, se dice que ha ocurrido un
error incorporado. Suponga que, en la replicación, la ti.mina
(que normalmente se aparea con adenina) se aparea en forma
secundarias a pequeñas inserciones y deleciones. Puede haber
deslizamiento de las cadenas cuando una cadena nucleotídica
forma un pequeño bucle (fig. 18-12). Si los nucleótidos que for-
duce una inserción. En el siguiente ciclo de replicación, la inser-
ción se replicará, y arnbas cadenas contendrán la inserción. Si los
nucleótidos que fonnan el bucle se encuentran en la cadena
molde, la cadena recién replicada presentará una del eción, la cual
será perpetuada en las sigujentes rondas de replicación.
Otro proceso que produce inserciones y deleciones es el entre-
cruzamiento desigual. En el entrecruzamiento normal, se alinean
las secuencias homólogas de las dos moléculas de DNA, y el
entrecruzamiento no produce ningún cambio neto en la cantidad
de nucleóti.dos de una u otra molécula. El apareamiento 1nal ali-
neado puede causar entrecruzamiento desigual, que da origen a
una 1nolécula de DNA con una inserción y a la otra con una dele-
ción (fig. 18-13).
CONCEPTOS
Los errores de replicación espontáneos surgen por alteración de la es-
tructura de las bases y por tambaleo en el apareamiento de bases.
Puede haber pequeñas inserciones y deleciones por desl izamiento de
las cadenas durante la replicación y por ent recruzamient o desigual.
Cambios químicos espontáneos
Además de las mutaciones espontáneas que se producen durante
la replicación, tan1bién aparecen mutaciones secundarias a cam-
bios químicos espontáneos del DNA. Uno de estos cambios es la
despurinación, la pérdida de una base púrica de un nucleótido.
Se produce despurinación cuando se rompe el enlace covalente

Se separan las cadenas de La timina de la cadena molde original se aparea con la base
DNA para la replicación. guanina por tambaleo, lo que induce un error incorporado.

______., Tipo
silvestre

~ - ~ Mutante
DNA Tipo silvestre
~ Tipo
silvestre
D En la siguiente ronda de replicación, el nucleótido de
guanina se aparea con citosina, lo que induce una
~ utación de transición.
Figura 18-11 . El apareamiento de bases por tambaleo induce un error de replicación.

504
 Mutaciones génicas y reparación del DNA 505

Cadena recién sintetizada 5'

Cadena molde 3' ,
J§M.ct+Jl.cfflW'
· ~ M S'
AAil.AAJI
TTAAUAA Si los cromosomas

La cadena recién
Íflacadena molde
X- ;: : : :====; homólogos se ali
nean de manera
incorrecta du-
sintetizada forma AATTAATT
un bucle, . .. forma un bucle, ... TTAATT_A_A_ _ __ rante el entre-
cruzamiento, ...
5• ,mct«10db· 5' CGGACTGAA AA~ 3'
3' GCCTGACTTTTTGCGAA 5' 3' 1fcfDlcfJli@fél0Ni.\jS' Entrecruzamiento desigual l a . :un producto del
~ entr~cruzamiento
... lo que determina
la adición de un
nucleótido a la
nueva cadena.
D ... lo que determin
la omisión de un
nucleótido en la
nueva cadena.
!
IT , , -
~ contiene una
~ nserción ... _ __.

A A TTAA
"'f"
7
5• rrtcMJ•wAumru 3' AATT ... y el otro tiene
3' GCCTGACTTTTTGCGAA 5' TTAA - ===:: :'.={_ una deleción.

Figura 18- 12. El deslizamiento de las cadenas puede causar insercio- Figura 18- 13. El entrecruzamiento desigual produce inserciones y
nes y deleciones. deleciones.

que conecta la purina al átomo de carbono 1' del azúcar desoxi-
rribosa (fig. 18-14a), lo que produce un sitio apurínico, un nu-
cleótido que carece de su base púrica. Un sitio apurínico no puede
actuar co1no n1olde para una base con1plementaria durante la
replicación. En ausencia de las restricciones del apareamiento de
bases, fre nte al s itio apurínico, se incorpora un nucleótido inco-
1Tecto (la mayoría de las veces, adeni na) a la cadena de DNA
recién sintetizado (fig. 18-14b), lo que suele causar un error
incorporado. Luego, el error incorporado se transforma en uno
replicado en la siguiente ronda de replicación. La despurinación
es una causa común de mutación espontánea; una célula de mamí-
fero en cultivo pierde alrededor de 1O000 purinas todos los días.
También se observa pérdjda de pirimidinas, pero con una tasa
mucho más baja que la despurinación.
Otro cambio químico espontáneo que se produce en el DNA es
la desaminación, la pérdida de un grupo amino (NH2) de una
base. La desa1ninación puede ser espontánea o inducida por mutá-
, .
genos qu1m1cos.
La desaminación puede alterar las propiedades de apareamien-
to de una base: por ejemplo, la desaminación de la citosina pro-
duce uracilo (fig. 18-Sa), que se aparea con adenina durante la
replicación. Tras otro ciclo de replicación, la adenina se aparear á
con timina y creará un par T • A en lugar del par 01iginal C • G
(C • G ➔ U • A ➔ T • A); este cambio químico es una mutación
de transición. Por lo general, las enzimas que eliminan uracilo
previenen este tipo de mutación sien1pre que los detectan en el
DNA. La capacidad de reconocer el producto de la desarninación
de la citosina puede explicar por qué se encuentra timina, y no ura-
cilo, en el DNA. En los mamíferos, incluidos los seres humanos,
algunas bases citosina del DNA están naturalme nte metiladas y
existen en forma de 5-metilcitosina (5mC; véase fig. 10-19). Cuan-
do es desaminada, la 5mC se transforma en timina (fig. 18-lSb).

(a) (b)

Esqueleto de
Durante la replicación, el sitio Un nucleótido con la base En la siguiente ronda de re- , ... lo que
azúcar-fosfato
apurínico no puede proporciona incorrecta (la mayoría de las plicación, esta base incor- inducirá una
del DNA mutación
un molde para una base veces A) se incorpora a la porada en forma incorrecta

\ 5' Bases
complementaria de la cadena ~ dena recién sintetizada. li: utilizará como molct=:J permanente.

,-->---,.
recién sintetizada. ~ Mutante
Cadenas
molde

Separación
Sitio Replicación
de las cadenas
apurínico

~~
·~ Purina
DNA
Separación
[ Replicación
de las cadenas
1Despurinación
1 Se incorpora un nucleótido en la
cadena recién sintetizada frente
Molécu la de DNA normal al sitio apurínico.
OH
(sin mutación)
3'

Figura 18-14. La despurinación (pérdida de una base purina de un nucleótido) produce un sitio apurínico.
506 CAPITULO 18

(a) (b)

H
NH 2

Desaminación
H
o

N
.....- H
r H1C
NH2

~ N
Desaminación
f{íC
o

N/
H

1 2N
► I UA ► I TA
H NA

1
O
'\ NH 2
H N
1
O H
' eN ......-l:: O
1
')
NH 2
H N
1
O

Figura 18-15. La desamina- Citosina Uracilo 5-metilcitosina Ti mina

ción modifica las bases del (SmC)
DNA.

Como la timi na se aparea con adenü1a dura11te la replicación, la
desaminación de 5-inetilcitosina cambia un par ori ginal C • G a
T • A (C • G ➔ 5mC • G ➔ T • G ➔ T • A). En consecuencia,
las transiciones C • G ➔ T • A son frecuentes en células de mamí-
feros, y los sitios 5mC son puntos calientes de mutación en seres
humanos. ~ SOLVER EL PROBLEMA 27
CONCEPTOS
Algunas mutaciones se originan por alteraciones espont áneas de la
estructura del DNA, como despurinación y desaminación, que pueden
modificar las propiedades de apareamiento de las bases y causar erro-
res en las rondas ulteriores de replicación.
Mutaciones inducidas químicamente
Aunque muchas mutaciones son espontáneas, una serie de agen-
tes ambientales son capaces de dañar el DNA, co1no ciertas sus-
tancias químicas y la radiación . Cualquier agente ambiental que
aumenta de manera significativa la tasa de mutación por encima
de la tasa espontánea se denomina mntágeno.
El primer descubrimie nto de un mutágeno químico lo realizó
Charlotte Auerbach, que con1enzó su carrera en Berlín investigan-
do el desarrollo de mutantes de Drosophila. Enfrentada con el an-
tisenútismo en la Alemania nazi, en1jgró a Gran Bretaña e n 1933.
Allí, continuó su investigación sobre la Drosophila y, en 1940,
comenzó a colaborar con el farmacólogo John Robson en el tema
de los efectos mutágenos del gas mostaza, que se había utilizado
como anna química en la Prin1era Guerra Mundial. L as condicio-
nes ex peri mentales eran rudimentarias. Calentaban gas 1nostaza
en estado líquido sobre un mechero Bunsen en el techo de] edifi-
cio de farmacología y exponían a las n1oscas aJ gas e n una cáma-
ra grande. D espués de presentar quemaduras graves en las manos
por el gas, Auerbach dejó que otros efectuaran las exposiciones,
y ella analizaba las moscas. A uerbach y Robson rnostraron que el
gas mostaza es, de hecho, un mutágeno poderoso que reduce la
viabi lidad de los gametos y aumenta el número de mutaciones en
la descendencia de las 1noscas expuestas. Como la investigación
formaba parte de un proyecto de guerra secreto, la publicación de
sus resultados se demoró hasta 1947.
ANÁLOGOS DE BASES Una clase de mutágenos químicos consiste
en análogos de bases, sustancias químicas con estructuras simila-
res a las de cual.quiera de Jas cuatro bases convencionales del
DNA. L as DNA polimerasas no pueden distinguir estos análogos
de las bases convencionales; por consiguiente, si hay análogos de
bases presentes durante la replicación, estos pueden ser incorpo-
rados e n las m oléculas de DNA recién sinte tizadas. P or ejemplo,
el 5-bromouracilo (5BU) es un análogo de tiJruna; tiene la
misma estructura que esta, excepto que e n el átomo de carbono
5 presenta un áton10 de bromo (Br) en lugar de un grupo metilo
(fig. 18-16a). Normalmente, el 5-bromouracilo se aparea con
adenina, al igual que la timina, pero en ocasiones se aparea de
manera incorrecta con guanina (fig. 18-16b), lo que causa una
transición (T • A ➔ 5BU • A ➔ SBU • G ➔ C • G), como mues-
tra la figura 18-17. Mediante errores de apareamiento, el 5-bro-
mouracilo también se puede incorporar en una cadena de DNA
recién sintetizada frente a guanina. En el siguiente ciclo de repli-
cación, el 5-bromouracilo se aparea con adenina, lo que provoca
otra transición (G • C ➔ G • 5BU ➔ A • 5BU ➔ A • T).

(a) (b)

Base normal Análogo de base Apareamiento normal Error de apareamiento

H H
Br O /
Br O ••••••••• H - N N H Sr O O H

H ~ : -H

/
N~
o
H
H

N
Bu N - H •·••·••· • • »i:
F'N
H ~ N -• •• •• • •• • H - N

N~ FN
G\ ~ ........
/ O H / O • • • • • • • • •H- N

Timina 5-bromouraciloj G -bromouracilo Adenina 5-bromouracilo (ionizado)

' Guanina
H

Figura 18-16. El 5-bromouracilo (un análogo de bases) se asemeja a la timina, excepto que tiene un átomo
de bromo en lugar de un grupo metilo en el átomo de carbono S. Dada la similitud de sus estructuras, el 5-
bromouracilo puede incorporarse en el DNA en lugar de timina. Al igual que la timina, el 5-bromouracilo se aparea
con adenina pero, cuando está ionizado, puede aparearse con guanina por tambaleo.
 Durante la replicación, el 5 -bromouracilo l En la siguiente replicación, este nucleótido
puede incorporarse en el DNA en lugar de de guanina se aparea con citosina, lo que
timina, lo que produce un error incorporado. j provoca una mutación permanente.
,
5' ----1►► 3
.. 5' 5' Error
3, -
'l:l,~
3' replicado
\
3' S' Áeparación S' - - - _ . , 3' S'
3' ~&aa.::1., 5 ' ----1►► S, 3'
3' ~ e las cadenas 5' 3'
1 , Mutante
Error .. 3
5' Áeparación
3' s • Áeparación 5' 3 1 ----1►► 5'
incorporado 3' ' -de las cadena
S' 3• \ las cadenas
,
Replicación J_ 5'
\ 3 ' ----1►
3' 5'
3 5' 5' 3'
S' 3, ►
S' 3' El 5-bromouracilo puede aparear~ [ Replicación
1Replicación de manera incorrecta con guanina
1 en la siguiente ronda de replicación. IJ Si el 5-bromouracilo se
aparea con adenina, no
se produce un error
Figura 18- 17. El 5-bromouracilo puede Conclusión: la incorporación de bramouracilo seguida por un aparea
replicado.
inducir un error de replicación. miento incorrecto produce una mutación por transición TA - • CG.

En el laboratorio, las mutaciones causadas por análogos de base nes provocadas por EMS mediante tratamiento adicional con
pueden revertirse mediante tratanuento con el mismo análogo o EMS. El gas n1ostaza es otro agente alquilante.
con uno diferente.
DESAMINACIÓN Además de su aparición espontánea (véase fig. 18-
AGENTES ALQUILANTES Los agentes alquilan.tes son sustancias 15), algunas sustancias químicas pueden inducir desaminación. Por
químicas que donan grupos alquilo, como grupos metilo (CH3) y ejemplo, el ácido nitroso desamina la citosina, lo que genera uraci-
etilo (CH3- C8i), a bases nucleotídicas. Por ejemplo, el etiln1etil- lo, que en la siguiente ronda de replicación se aparea con adenina
sulfonato (EMS) añade un grupo etilo a guanina, lo que produce (fig. 18-lSb), lo que produce una mutación de transición C • G ➔
O 6-etilguanina, que se aparea con ti mina (fig. 18-18a). Así, el T • A. El ácido nitroso transfonna la adenina en hjpoxantina, que
EMS provoca transiciones C • G ➔ T • A. El EMS también es se aparea con citosina e induce una transición T • A ➔ C • G.
capaz de añadir un grupo etilo a timina, lo que produce etiltimi- Asilnis.mo, el ácido nitroso desamina la guanina con la consiguien-
na, que después se aparea con guanina, lo que induce una transi- te producción de xantina, que se aparea con citosina al igual que la
ción T • A ➔ C • G, Como el EMS causa transiciones tanto C • guanina; sin embargo, la xantina también puede aparearse con timi-
G ➔ T • A como T • A ➔ C • G, es posible revertir las mutacio- na, lo que causa una transición C • G ➔ T • A. El ácido nitroso pro-

,.
Tipo de ' Figura 18-18. Las sustancias
Base original Mutágeno Base modificada Pareja de apareamiento m utación químicas pueden alterar las
bases del DNA. Aquí se mues-
H3C---<H 2 tran algunos ejemplos de muta-
\ ciones provocadas por agentes
H N O O CH 3
"y~º
f-{) ••••••••H
-N
» H
químicos.
/ 1/ G
N N- H
EMS
CG TA
(a)
N=<
N =< r N TA ..CG
H -H Alquilación
/ N - H •••••••• O \
H /
H
Guanina O 6-etilguan ina Timina

H
H NH 2 /

H-M
H O •••• • H - N N H

(b)
Ácido nitroso
(HNO:z) H
.
fu N - H ••·•• N
~A
y N,
CG TA

/N~ Desaminación
--
/
N-< O
>=N
H
TA •CG

Citosina Uracilo Adenina

H NH 2
HO
\ I
H

H~N
H N• • • • • H- N N H

(e) N-</ o
Hidr oxilamina
(NH20H)
-
H-h-H
N-<
......
~t
r
CG TA

H idroxilación / O H

Citosina Hidroxilamino- Adenina

citosina ,.
507
"
508 CAPITULO 18
H (a)
HYNH º Radicales
oxidativos
YN I
o
/N-( G } - H /~N-H
N~
N-H N=<N-H
I /
H H
Guanina 8-oxi-7,8-d ihidrodesoxiguan i na
(puede aparearse de manera
incorrecta con adenina)
Figura 18-19. Los radicales oxidativos convierten guanina en 8-oxi-
7,8-di hidrodesoxig uanina.
duce exclusivamente mutaciones de transición, y como se producen
tanto la transición C • G ➔ T • A como T • A ➔ C • G, estas muta-
ciones pueden revertirse con ácido nitroso.
HIDROXILAMINA La bidroxilamina es un mutágeno modificador de
bases muy específico que agrega un grupo hidroxilo a la citosina y
la convierte en hidroxilaminacitosina (fig. 18-18c). Esta conversión
aumenta la frecuencia de un tau tómero raro que se aparea con ade-
nina en lugar de con guanina e induce transiciones C • G ➔ T • A.
Co1no la hidroxilamina actúa solo sobre citosina, no general transi-
ciones T • A ➔ C • G; por lo tanto, la bidroxíJamina no revertirá las
mutaciones que provoca.
REACCIONES OXIDATIVAS Las formas reactivas del oxígeno (entre
ellas radicales superóxido, peróxido de hidrógeno y radicales
hidroxilo) se producen en el curso del metabolisn10 aerobio nor-
mal, así como por efecto de la radiación, el ozono, los peróxidos
y ciertos fármacos. Estas for1nas reactivas del oxígeno dañan el
DNA e inducen mutaciones al causar crunbios químicos en el DNA.
Por ejemplo, la oxidación convierte a la guanina en 8-oxi-7 ,8-di-
hidrodesoxiguanina (fig. 18-19), que con frecuencia se aparea de
manera incorrecta con adenina en lugar de con citosina, lo que
causa una mutación de transversión C • G ➔ T • A.
AGENTES INTERCALANTES La proflavina, el naranja de acridina, el
bromuro de etidio y la di oxina son agentes intercalantes (fig. 18-
20a) que provocan mutaciones al intercalarse entre bases adya-
centes de DNA, lo que distorsiona la estructura tiidimensional de
la hélice y causa inserciones y deleciones de nucleótido único
durante la replicación (fig. 18-20b). Estas inserciones y delecio-
nes suelen provocar mutaciones del mru·co de lectura, de manera
que los efectos mutágenos de los agentes intercalru1tes a n1.enudo
son graves. Como los agentes intercalantes generan adiciones y
deleciones, pueden revertir los efectos de sus propias mutaciones.
CONCEPTOS
Las sustancias quf micas pueden provocar mutaciones mediante una
serie de mecanismos. Los análogos de bases se incorporan en el DNA
y suelen aparearse con la base incorrecta. Los agent es alquilantes, las
sustancias químicas que causan desaminación, la hid roxila mina y los
radicales oxidat ivos cambian la estructura de las bases del DNA, lo
que altera sus propiedades de apareamiento. Los agentes intercalan-
tes forman una cuña ent re las bases y causan inserciones y deleciones
de base única durante la replicación.
(b)
H
H H H
H
H H
Proflavina
Bases
nitrogenadas
H H H Molécula
~ intercalada
X
Naranja de acr idina
Figura 18-20. Agentes intercalantes. La proflavina y el naranja de acridi-
na (a) se insertan entre bases adyacentes del DNA y distorsionan la estruc-
tura tridimensional de la hélice (b).
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
¿Los aná logos de bases son mutágenos debido a qué característica?
a. Provocan cambios de la DNA polimerasa que determinan su mal
funcionamiento.
b. Distorsionan la estructura del DNA.
c. Tienen una estructura similar a la de las bases normales.
d . Mod ifican químicamente las bases normales.
Radiación
En 1927, Hennann Muller demostró que los rayos X podían indu-
cir mutaciones en las moscas de la fruta. Los resultados de estu-
dios ulteriores mostraron que los rayos X aumentaban mucho las
tasas de mutación en todos los organisn1os. Dada su alta energía,
los rayos X, los rayos gamma y los rayos cósmicos son capaces
de atravesar los tejidos y dañar el DNA. Estas formas de radia-
ción, denominada radiación ionizante, desaloja electrones de los
átomos que encuentra y transforma moléculas estables en radica-
les libres e iones reactivos, que después alteran las estructuras de
las bases y rompen las uni ones fosfodiéster del DNA. La radia-
ción ionizante también suele causar roturas bicatenari as del DNA.
Los intentos de reparar estas roturas pueden provocar mutaciones
cromosóm.icas (analizado en el cap. 8).
L a luz ultravioleta (UV) tiene menos energía que la radiación
ionizante y no eyecta electrones, pero de todos 1nodos es altamen-
te 1n utágena. Las bases púricas y pu;rnídicas absorben con facili-
dad luz UV, con la consiguiente formación de enlaces quúnjcos
entre 1noléculas de pirim.idina adyacentes de la misma cadena del
DNA y la creación de dímeros de pirimidina (fig. 18-21a). Los
dímeros de pirimidina que consisten en dos bases timina (denomi-
nados dímeros de tirnina) son los más frecuentes, pero trunbién
pueden formarse dímeros de citosina y dín1eros timina-citosina.
Los dímeros de pirimidina distorsionan la configuración del DNA
(fig. 18-21b) y a menudo bloquean la replicación. La mayoría de
los dímeros de pirimidina son reparados de inmediato por mecanis-
mos que se analizarán más adelante en este capítulo, pero algunos
escapan a la reparación e inhiben la replicación y la transcripción.

(a) (b)
Luz UV
3'
T
~~""'
Bases Enlaces
de timina covalentes ...--a..
I
T
Esqueleto
de azúcar-fosfato
Figura 18-21 . La luz ultravioleta induce la formación
de dímeros de pirimidina. (a) Formación de dímero de
timina. (b) DNA distorsionado.
Cuando los dímeros de pirimidina bloquean la replicación, se
inhibe la división celular, y en general la célula rnuere; por esta
razón, la luz UV destruye bacterias y es un agente esterilizador
eficaz. Para que se produzca una mutación -un e1Tor hereditario
de las instrucciones genéticas- debe superarse el bloqueo de la
replicación. En ocasiones, las bacterias pueden eludir los bloqueos
de replicación causados por dímeros de pirimidina y otros tipos
de daño del DNA mediante el sistema SOS. Este siste1na permi-
te superar estos bloqueos pero, durante el proceso, comete nume-
rosos errores y aumenta mucho la tasa de mutación. De hecho, la
verdadera razón por la cual la replicación puede continuar en pre-
sencia de un bloqueo es que las enzimas del sistema SOS no cum-
plen de manera estricta las reglas de apareamiento de bases. La
replicación puede continuar y la célula sobrevive, pero a expen-
sas de sacrificar la precisión normal de la síntesis de DNA.
CONCEPTOS
La radiación ionizante, como rayos X y rayos gamma, daña el DNA al
desalojar electrones de los átomos; luego, estos electrones rompen unio-
nes fosfodiéster y alteran la estructura de las bases. Fundamentalmente,
la luz ultravioleta causa mutaciones por producir dímeros de pirimidina
que alteran la replicación y la transcripción . El sistema SOS permite que
las bacterias superen los bloqueos de replicación, pero introduce errores
de replicación.
18.3 Las mutaciones son foco de intenso
estudio por genetistas
Como las mutaciones suelen ejercer efectos deletéreos, son estu-
diadas con frecuencia por genetistas. Estos estudios han incluido
el desruTollo de pruebas pru·a determinar las propiedades 1nutáge-
nas de compuestos químicos y la investigación de poblaciones
humanas expuestas trágicamente a altos niveles de radiación.
Detección de mutaciones
con la prueba de Ames
Las personas que viven en sociedades industriales están rodeadas
de una multitud de sustancias químicas producidas en forma arti-
ficial: en la actualidad, hay más de 50 000 sustancias químicas
diferentes en uso comercial e industrial, y todos los años se intro-
ducen de 500 a 1000 sustancias químicas nuevas. Algunas de
Mutaciones génicas y reparación del DNA 509
estas sustancias químicas son carcinógenos potenciales, así como
también lo son muchos productos naturales. Un método para
investigar el potencial cancerígeno de las sustancias consiste en
administrarlas a animales de laborato1io (ratas o ratones) y com-
parar la incidencia de cáncer en los animales tratados y en anin1a-
les control. Lamentablen1ente, estas pruebas insumen tiempo y
son costosas. Más aún, la capacidad de una sustancia de causar
cáncer en roedores no siempre es indicativa de su efecto en seres
humanos. Después de todo, ¡no somos ratas !
En 1974, B1uce Ames creó una prueba simple para evaluar el
potencial de las sustancias químicas de provocar cáncer. La prue-
ba de Ames se basa en el principio de que tanto el cáncer como
las 1nutaciones se deben a daño del DNA, y los resultados de los
experimentos han demostrado que el 90% de los carci nógenos
conocidos también son mutágenos. Ames postuló que la mutagé-
nesis bacteriana podría servir como un indicador de carcinogéne-
sis en los seres humanos.
La prueba de An1es utiliza cuatro cepas de la bacteria Salmo-
nella typhimurium que tienen defectos en la cubierta de lipopoli-
sacáridos que, nonnalmente, protege a la bacteria de las sustan-
cias químicas del ambiente. Además, el sistema de reparación del
DNA de estas cepas ha sido desactivado , lo que aumenta su sus-
ceptibilidad a mutágenos.
La versión 1nás reciente de la prueba (denominada Ames II) uti-
liza varias cepas auxótrofas que detectan diferentes tipos de sus-
tituciones de pares de bases. Otras cepas detectan distintos tipos
de mutaciones del marco de lectura. Cada cepa porta una muta-
ción his, que la vuelve incapaz de sintetizar el aminoácido his-
tidina, y se siembran las bacterias en un medio que carece de
histidina (fig. 18-22). Solo las bacterias que han sufrido una
mutación inversa del gen de histidina (his ➔ his+) pueden sinte-
tizar histidina y crecer en el medio, lo que facilita la detección de
estas mutaciones. Se agregan diferentes diluciones de una sustan-
cia química para investigar las placas inoculadas con bacterias y
se compara el número de colonias bacterianas mutadas que apa-
recen en cada placa con el número que apru·ece en placas control
sin sustancia quínrica (es decir, las que surgieron por mutación es-
pontánea). Cualquier sustancia quí1nica que aumente de manera
significativa el número de colonias que aparecen en una placa tra-
tada es mutágena y, probablemente, también cancerígena.
Algunos compuestos no son carcinógenos activos, pero pueden
convertirse en compuestos causantes de cáncer en el organismo. Pa-
ra hacer que la prueba de Ames sea sensible a estos carcinógenos po-
tenciales, un compuesto para investigar debe incubarse primero en
extracto de hígado de mamífero que contenga enzimas metabólicas.
La prueba de Ames se ha aplicado a miles de sustancias quími-
cas y productos comerciales. Una demostración inicial de su utili-
dad fue el descub1imiento, en 1975, de que numerosas tinturas para
el cabello vendidas en los Estados Unidos contenían compuestos
que eran mutágenos para bacterias. Después, estos compuestos fue-
ron eliminados de la mayoría de las tinturas para cabello.
CONCEPTOS
La prueba de Ames utiliza cepas de bacterias hís- para investigar la
capacidad de sustancias químicas de provocar mutaciones his- ➔
hís+. Dado que existe una estrecha correlación entre la actividad
mutágena y la cancerígena, la prueba de Ames se emplea ampliamen-
te para investigar el potencial cancerígeno de las sustancias químicas.
510 CAPITULO 18

El 6 de agosto de l 945, un avión norteamericano aJ.Tojó una

Pregunta: ¿cómo se puede investigar con rapidez la capacidad sola bomba atómica sobre la ciudad de Hiroshi1na, en Japón. La
de las sustancias químicas para provocar cáncer? explosión devastó una zona de la ciudad que medía unos 12 kiló-
metros cuadrados (4,5 millas cuadradas), mató alrededor de 90 000
a 140 000 personas y dañó a casi otro tanto (fig. 18-23). Tres días
más tarde, Estados Unidos arrojó una bo1nba atómica en la ciudad
de Nagasaki, que esta vez arrasó unos 4 kilómetros cuadr ados
Bacter ias his- (1,5 millas cuadradas) y mató de 60 000 a 80 000 personas. Du-
rante estas explosiones, se liberó una enorme cantidad de radia-
Métodos
ción, y muchas personas estuvieron expuestas a ella.
Se mezclan cepas Algunas de las cepas Después de la guerra, se realizó un proyecto conjunto japonés-
bacterianas his- con bacterianas también
estadounidense para estudiar los efectos biológicos de la exposi-
enzimas hepáticas (qu~ se mezclan con la
tienen la capacidad de sustancia química cuya ción a radiación en los sobrevivientes de las explosiones atómicas
convertir los compues- actividad mutágena se y en sus hijos. Se examinaron mutaciones somáticas mediante el
tos en mutágenos ~ a investigar. estudio de la enfermedad por radiación y el cáncer entre los so-
potenciales).
" brevivientes; se evaluaron mutaciones de la línea germinal inves-
- tigando defectos congénitos, anormalidades cromosómicas y
mutaciones génicas en los hijos de las personas que habían esta-
do expuestas a la radiación.
El genetista James Neel y cols. exami naron a casi 19 000 niños
cuyos padres habían estado dentro de los 2000 metros (1,2 millas)
del centro de la explosión atómica en Hiroshi ma o Nagasaki,
j unto con una cantidad similar de niños cuyos padres no habían
estado expuestos a radiación. Las dosis de radiación de los padres
Después, se siem- de un niño se esti1naron sobre la base de una evaluación cuidado-
bran las bacterias sa de su ubicación, la postura y la posición en el momento de la
en medio que ca-
rece de histidina. explosión. Se extrajo una muestra de sangre de cada niño, y se
empleó electroforesis en gel para investigar sustituciones de ami-
noácidos en 28 proteínas. Cuando se detectaban variantes raras,
también se analizaban 1nuestras de sangre de los padres del niño
para establecer si la variante era heredada o se trataba de una
mutación nueva.
1 1 De un total de 289 868 genes exami nados por Neel y cols., solo
Incubar Incub ar )
se halló una mutación en los hijos de padres expuestos; no se

Resultados
+ +

Placa control \ /21aca de tratamiento

..J
(sin sustancia química)\_
Ú Las colonias bacterianas que aparecen en las .
LYlacas han sufrido una mutación his- - his+ .
J
(sustancia química añadida)

Conclusión: cualquier sustancia q uím íca q ue aum enta el

número de colonias que aparecen en la placa de t r atamiento
es mutágena y, por consiguiente, también es probable que
sea cancer ígena.

Figura 18-22. La prueba de Ames se utiliza para identificar mutáge-

nos químicos.

Exposición a radiación en seres humanos

Las personas están expuestas de manera sistemática a bajos nive-
les de radiación de fuentes cósmicas, médicas y ambientales, pero Figura 18-23. Hiroshima fue destruida por una bomba atómica el 6
trunbién se han producido sucesos trágicos que provocaron expo- de agosto de 1945. La explosión atómica provocó numerosas mutaciones
siciones de grado mucho 111ás alto. somáticas en los sobrevivientes. (© Bettmann/Corbis).
 Mutaciones génicas y reparación del DNA 511

detectó ninguna mutación en el grupo control. A partir de estos repeticiones no forman parte del elemento transponible y no se
resultados, se estimó una tasa de mutación de 3,4 X l o-6 para los movil izan con este. Más bien, son generadas en el proceso de
niños cuyos p adres habían estado expuestos a la explosión, lo que transposición, en el punto de inserción. Durante la transposición ,
se encuentra dentro del rango de tasas de mutación espontánea se crean repeticiones flanqueantes cuando se practican cortes
observada en otros eucariontes. Asimismo, Neel y cols. examina- escalonados en el DNA diana, co1no muestra la figura 18-24. Los
ron la frec uencia de mutaciones cromosómicas, proporciones de coites escalonados dejan frag111entos cortos de DNA rnonocatena-
sexo de los hijos de padres expuestos y frecuencia de aneuploidía rio a uno y otro lado del elemento transponible. Luego, la replica-
cromosómica. En ninguno de estos análisis hubo evidencia de ción de este DNA monocatenario crea las repeticiones directas
aumento de mutaciones en los hijos de personas expuestas a flanqueantes.
radiación de explosiones atómicas, lo que sugirió que las muta- En los extremos de numerosos elementos transponibles, aunque
ciones de la lú1ea germinal no fueron muchas. no de todos, hay repeticiones invertidas terminales, secuencias
Estudios en animales 1nuestran con claridad que la radiación de 9 a 40 p b de longitud que son complementos invertidos entre
causa 1nutaciones de la línea germi nal; en consecuencia, ¿por sí. Por ejemplo, las siguientes secuencias son repeticiones in-
qué no hubo un aumen to evidente de mutaciones de la línea ger- vertidas:
minal en los habitantes de Hiroshima y Nagasaki? Los padres
expuestos sí mostraron una mayor incidencia de leucemia y otros 5 '-ACAGTTCAG ... CTGAACTGT-3'
tipos de cáncer, lo que evidencia que se indujeron mutaciones
3'-TGTCAAGTC ... GACTTGACA-5'
somáticas. No se conoce la respuesta a la pregunta, pero la
ausencia de mutaciones de la línea germinal p uede deberse al
hecho de que las personas que recibieron las dosis más altas de En la misma cadena, las dos secuencias no son inversiones sim-
radiación murieron poco después de las explosiones. Otros cono- ples, com o su nombre implica; más bien, son invertidas y comple-
cimientos sobre los efectos genéticos de la radiación han prove- mentarias. (Adviértase que la secuencia de izquierda a derecha en
nido de estudios de personas expuestas a radiación en el acciden- la cadena superior es la 1nisma que la secuencia de derecha a
te nuclear de Chernobyl de 1986 y de otros accidentes nucleares,
así co1no de la exposición a radiación utilizada en la n1edicina y
en la industria.
Se realizan cortes escalo-
nados en el DNA diana.
18.4 Los elementos transponibles causan
mutaciones
CGTCGATAG
Los elementos transponibles (secuencias que pueden desplazar- GCAGCTATG
se por el genoma) también suelen ser una causa de 1nutaciones. t
Estos elementos de DNA móviles han recibido diversos nombres,
como transposones, elementos genéticos transponibles, genes
móviles, elementos de control y genes saltarines. Se hallan en los
geno1nas de todos los organismos y, en m uchos, son abundantes: CGTCGAT
por ejemplo, representan por lo menos el 45 % del DNA h u1nano. AGCTATC:
La mayoría de los elementos transpon ibles pueden insertarse en Elemento
muchas locaLizaciones diferentes, lo que depende de mecanismos tra nsponible fJ Se inserta un elemento
transponible en el DNA.
distintos de la recombinación homóloga. A través de su movi-
miento (transposición), los elementos transponibles suelen causar
mutaciones por insertarse en otro gen y alterarlo o por promover
AG
reordenarnientos del DNA, como deleciones, duplicaciones e AGCTATC:
inversiones cromosó1nicas (véase cap. 8).

La DNA po limerasa Los cortes escalonados

Características generales de los elementos rellena los hiatos.
dejan fragmentos cortos
de DNA monocatenario.
transponibles
Hay 1nuchos tipos diferentes de elemen tos transponibles: algunos
tienen estructuras simples, que abarcan solo las secuencias nece- CGTCGAT • •
sa1ias para su propia transposición, mientras q ue otros tienen GCAGCT~ AGCTAT~
'-----.,-.J
estructuras complejas y codifican una seri e de funciones no rela-
cionadas directamente con la transposición. Pese a esta vruiación, ~
Repeticiones ' La replicación de este
1n uchos elementos transponibles tienen ciertas características en d irectas DNA monocatenario crea
común. flanqueantes las repeticiones directas
Hay repeticiones directas tlanqueantes cortas, de 3 a 12 pb de flanqueantes. _J
longitud, a a1nbos lados de la mayoría de los elementos transpo-
nibles. Las secuencias de estas repeticiones varían, pero la longi- Figura 18-24. Cuando un elemento transponible se inserta
tud es constante para cada tipo de elemento transponible. Estas en el DNA, se generan repeticiones directas flanqueantes.
512 CAPITULO 18
(a) Elemento transponible
ACGTTTAGCGT
--,,,.--'--.....-----' '-~,--- -------..,---
e Repetición invertida terminal)
Repetición directa flanqueante
Figura 18-25. Muchos elementos transponibles tienen características comunes. (a) La mayoría de los
elementos transponibles generan repeticiones directas flanqueantes a cada lado del punto de inserción en el
DNA diana. Muchos elementos transponibles también poseen repeticiones invertidas terminales. (b) Estas
representaciones de repeticiones directas e indirectas se utilizan en ilustraciones de todo este capít ulo.
izquierda en la cadena inferior). Las repeticiones invertidas termi-
nales son reconocidas por enzin1as que catalizan la transposición
y son necesarias para que se produzca la transposición. La figura
18-25 resume las características generales de los elementos trans-
ponibles. Q tNTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 33
CONCEPTOS
Los elementos transponibles son secuencias de DNA móviles que a
menudo causan mutaciones. Hay muchos tipos diferentes de ele-
mentos transponibles; la mayoría genera repeticiones directas flan-
queantes cortas en los sitios diana cuando se insertan. Muchos ele-
mentos transponibles también tienen repeticiones invertidas termi-
nales cortas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
¿ Cómo se crean las repeticiones directas flanqueantes durante la
transposición?
Transposición
Como ya se mencionó, la transposición es el 111ovimiento de un
elemento transponible de un lugar a otro. Tanto en las células pro-
cariontes como en las células eucaiiontes, se utilizan diferentes
mecanismos para la transposición. No obstante, todos los tipos de
transposición tienen varias características en común: 1) se reali-
zan roturas escalonadas en el DNA diana (véase fig. 18-24); 2) el
elemento transponjb[e se une a los extremos monocatenarios del
DNA diana; 3) se replica el DNA en los hiatos monocatenarios.
Se utiliza una enzima transposasa, codificada a menudo por el
elemento transponible, para realizar roturas escalonadas en el DNA
e integrar el elen1ento transponible en un nuevo sitio; estos dos
procesos permiten el movuniento del elemento transponible.
Algunos elementos transponibles se transponen como DNA y
se denominan transposones de DNA (conocidos también como
elementos transponibles de clase II). Otros elementos transporu-
bles se transponen a través de un RNA intermediario. En este
caso, el RNA se transcribe a partir de un ele1nento transponible
(DNA) y después vuelve a ser copiado a DNA por una enzima
especial denominada transcriptasa inversa. Los elementos que se
transponen a través de un RNA intermediario se denomjnan
retrotransposones (llamados también transposones de clase I).
La mayo1ia de los elen1entos transponibles hallados en las bacte-
rias son transposones de DNA. En los eucariontes, hay tanto
(b) Elemento transponible
-
-~-"---.--' '---v--'----
C Repetición invertida terminal)
'--- - Repetición directa flanqueante
transposones de DNA como retrotransposones, aunque estos últi-
mos son más frecuentes.
Entre los trai1sposones de DNA, la transposición puede ser
replicativa o no replicativa. En la transposición replicativa
(denominada tan1bién transposición de copia y pegado), se intro-
duce una nueva copia del elemento tran sponible en un sitio nuevo,
mientras que la copia antigua permanece en el sitio original, de
manera que aumenta el número de copias del elemento transporu-
ble como resultado de la transposición. En la transposición no
replicativa (transposición de corte y pegado), se escinde el ele-
mento transponible del sitio antiguo y se inserta en un sitio nuevo,
sin ningún aum.e nto del número de copias. La transposición no
rephcativa requiere l.a replicación de solo los pocos nucleótidos
que constituyen repeticiones directas. Los retrotransposones utili-
zan únicamente transposición replicativa.
CONTROL DE LA TRANSPOSICIÓN Muchos organismos limltan la
transposición n1etiJando eJ DNA en regiones donde los transposo-
nes son frecuentes. Por lo general, la metilación del DNA supri-
me la transcripción (véase cap. 17) , lo que impide la producción
de la enzima transposasa, necesaria para la transposición.
Asimjsmo, las 1nodificaciones de la estructura de la cromatina se
utilizan para evitar la transcripción de transposones. En otros
casos, se controla la traducción del 111RNA de la transposasa.
Algunos animales utilizan moléculas pequeñas de RNA denomj-
nadas RNA de interacción con Piwi (piRNA, véase cap. 14) para
silenciar transposones; los piRNA se co1nbinan con proteínas
Piwi e inhiben la expresión de secuencias de transposones.
TRANSPOSICIÓN EN LOS SERES HUMANOS Alrededor del 45% del
genoma humano está compuesto por secuencias relacionadas con
elementos transponibles, la mayoría de ellos retrotransposones
(ciertas investigaciones sugieren que los elementos transponibles
representan casi dos tercios del genoma humano). Antes, los
investigadores asumían que la mayoría de estos elementos trans-
ponibJes eran inactivos y que boyen día la transpos ición es esca-
sa, aunque sin duda fue extensa durante la evolución pasada. Sin
embargo, en época más reciente, los investigadores han comenza-
do a mapear copias de transposones en todo el genoma y han des-
cubierto que las personas suelen diferir en el número y la locali-
zación de los transposones. Esto sugiere que las transposiciones
recientes son 1nás frecuentes de lo que se pensaba antes. Por
ejemplo, se estima que el transposón Ll presenta un evento de
transposición aproximadamente cada 100 nacimientos de seres
humanos.
La investigación también den1ostró que algunas células cance-
rosas tienen altos niveles de transposición, quizá debido a la alte-

ración de patrones de metilación deJ DNA que, en condiciones
normales, inhiben la transposición en estas células.
CONCEPTOS
La transposición puede tener lugar a través del DNA o de un RNA
intermediario. En la transposición replicativa, se inserta una nueva
copia del elemento transponible en un sitio nuevo, y la copia antigua
permanece en el lugar original; en la transposición no replicativa, se
escinde la copia antigua del sitio original y se moviliza a un sitio
nuevo. La transposición a través de un RNA intermediario requiere
transcripción inversa para integrarse en el sitio diana. Muchas células
regulan la transposición por diversos mecanismos.
Efectos mutágenos de la transposición
Co.mo los elementos transponibles pueden inse1tarse en otros
genes y alterar su función, la transposición suele ser mutágena.
De hecho, más de la mitad de las mutaciones espontáneas de
Drosophila se debe a la inserción de un elemento transponible en
un gen funcional o cerca de este.
Se han rastreado una se1ie de casos de enfermedad genética
humana hasta la inserción de un elemento genético transponible
en un gen vital. Por eje1nplo, la inserción del elemento transponi-
ble L 1 en el gen del factor VIII de coagulación de la sangre ha
causado hemofilia. Si bien la mayoría de las n1utaciones secunda-
rias a transposición son deletéreas, en ocasiones la transposición
puede activar un gen o cambio del fenotipo beneficioso para la
célula. Por ejemplo, los elementos transponibles bacterianos a
veces tran sportan genes que codifican resistencia a antibióticos, y
varios elementos transponibles han creados mutaciones que con-
fieren a los insectos resistencia a los insecticidas.
Un ejemplo in1portante del efecto mutágeno de los elementos
transponibles se observa en el color de las uvas, que tienen varie-
dades negras, rojas y blancas (fig. 18-26). Las uvas negras y rojas
se deben a la producción de pigmentos rojos (antocianinas) en la
piel, que están ausentes en las uvas blancas. Las uvas blancas
resultaron de una mutación de las uvas negras que desactivó la
producción de pigmentos antocianina. Esta 1nutación consistía en
la inserción de un retrotransposón de 10 422 pb, denominado
Gretl , cerca de un gen que promueve la producción de antociani-
nas. En apariencia, el retrotransposón Gretl alteró secuencias que
regulan el gen, lo que elimina con eficacia la producción de pig-
mento y da por resultado una uva blanca sin antocianinas. Intere-
sa destacar que las uvas rojas se originaron por una segunda muta-
ción que tuvo lugar en las uvas blancas (véase tig. 18-26). Esta
mutación (que probable1nente se deba a recon1binación de-
fectuosa) elüninó la mayo1ia de los retrotransposones (aunque no
todos), lo que restableció la producción de pigmento, pero no con
tanta intensidad como en .las uvas negras originales.
Como la transposición impli ca el intercambio y la recombina-
ción de secuencias de DNA, a n1enudo induce reordenamientos
del DNA. La reco1nbinación homóloga entre múltiples copias de
los transposones puede inducir duplicaciones, deleciones e inver-
siones, como se muestra en la figura 18-27. En la Drosophila , la
mutación Bar (véase fig. 8-6) es una duplicación en tándem que
se piensa ha surgido por recombinación homóloga entre dos
copias de un elemento transponible presente en distintas localiza-
ciones del cromosoma X. De modo similar, la recombin ación
Mutaciones génicas y reparación del DNA 513
En las uvas negras, el gen
VvmybA 7 regula la síntesis de
pigmentos antocianina.
VvmybA1
Mutación
En las uvas blancas, se ha
insertado un retrotransposón
Retrotransposón Gret1
\
cerca del gen VvmybA 1, lo
que altera la síntesis de
antocianinas.
VvmybA1
Mutación
En las uvas rojas, una segundt
mutación ha eli minado lama-
yoría de los retrotransposones,
pero queda un fragmento. Se
restablece de manera parcial
la producción de antocianinas.
VvmybA1
Figura 18-26. El color rojo y blanco de las uvas se debe a la
inserción y la deleción de un retrotransposón.
entre copias del elemento transponible Rider causó una duplica-
ción que dio por resultado frutos alargados en los to1nates.
La escisión de elementos transponibles en una transposición de
corte y pegado también puede causar reordenamientos del DNA.
Si el DNA roto no es reparado de manera apropiada, puede gene-
rarse un reordenamiento cromosómico.
Como la mayoría de los elen1entos transponibles se insertan de
manera aleatoria en secuencias de DNA, proporcionan a los
investigadores una hen:amienta poderosa para inducir mutaciones
en todo el genoma, lo que les permite determinar la fu nción de los
genes, estudiar fenómenos genéticos y mapear genes. Más aún,
como el elemento transponible empleado tiene una secuencia
conocida, puede servir como "etiqueta" para localizar el gen en
que se ha producido la mutación. Por ejemplo, los investigadores
diseñaron por inge1ú ería genética un elemento transponible deno-
minada Sleeping Beauty (Bella Durmjente) para inducir mutacio-
nes en ratones y lo utilizaron para investigar genes que causan
cáncer. Se introdujo Sleeping Beauty en una cepa de ratones que
producen la transposasa necesaria para la transposición, y se
insertó el elemento transponible al azar en diferentes localizacio-
nes del genoma. En ocasiones, se insertó en un gen que protege
contra el cáncer y destruyó su función. Al investigar la localiza-
ción de la secuencia Sleeping Beauty en el DNA de las células
tumorales que se desarrollaron con ulterioridad, los genetistas
identificaron una serie de genes que protegen contra el cáncer.
514 CAPITULO 18

(a) Elementos genéticos transponibles
As
IÍJEI apareamiento por forma
ción de bucle y entrecruza-
miento entre dos elemen-
tos transponibles orientados
en la misma dirección ...
Las bacterias y los organis mos eucariontes tienen un a serie de
~ tipos distintos de elementos transponibles, cuyas estructuras va-
-+- CD E ....
- -----""----
F G
tian ampliamente. En las dos secciones siguientes, consideramos
la estructura y los tipos de elementos transponibles de las bacte-
rias y de los eucariontes.
CONCEPTOS

-
---------- A B

Los elementos transponibles suelen causar mutaciones y reordena-

Producto de E mientos del DNA.
la deleción
A B F G ✓ EVALUAOÓN DE CONCEPTOS 6

... causa deleción. :::::==-'-----v-'

_. Explique de manera sucinta la manera en que la transposición causa
reordenamientos cromosómicos.

A F G
(b)

El apareamiento por incurvación Elementos transponibles en las bacterias

y entrecruzamiento entre dos
elementos transponibles orienta-
Los transposones de DNA hallados en las bacterias (las bacterias
dos en direcciones opuestas ... no contienen retrotransposones) pertenecen a dos grupos impor-

G F ... E
tantes: l ) elementos transponibles simples, denominados secuen-
cias de inserción, que solo portan la información requerida para
el n1 ovirniento, y 2) elementos transponibles n1ás complejos,
X deno1ninados transposones compuestos, que contienen secuen-
A B
- c
cias de DNA no relacionadas directamente con la transposición.

SECUENCIAS DE INSERCIÓN El tipo más simple de elemento trans-

A B .... 3 +o )
-- F G ponible en los cromosomas bacterianos y plásrnídos es una
\ ) secuencia de inserción (IS, insertion sequence). Este tipo de ele-
y
' ... causa una inversión. mento contiene solo la información genética necesaria para su
movimiento. L as secuencias de inserción son componentes comu-

(e)
B ... c D E ... F G
nes de las bacterias; ta1nbién pueden infectar plásmidos y virus, y
de esta manera, pueden transmitirse de una célula a otra. Los
genetistas designan cada tipo de inserción mediante IS seguido de
La mala alineación y el
intercambio desigual entre
elementos transponibles
localizados en cromátidas
hermanas ...
! un número identificador. Por ejemplo, IS 1 es una secuencia de in-
serción común hallada en la E. coli.
Se ha hallado una serie de secuencias de inserción diferentes.
Por lo general, tienen de 800 a 2000 pb de longitud y tienen las
dos características distintivas de los elen1entos transponibles:
A B ~ G
repeticiones invertidas terminales y generación de repeticiones
X directas flanqueantes en el sitio de inserción. La n1ayo1ia de las
F G secuencias de inserción contienen uno o dos genes que codifican
transposasa. En la figura 18-28 se muestra ISl, una secuencia de
inserción típica. !]INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 36

A B F G
/S1 (768 bp)

• .. .determina la formación

A B ... c D E ... c D
de un cromosoma con una
deleción ...

E ... F G
T __ G
_e_n_ d_
e_t ""'
r~_n_s_p _
os_a_s_a_ __,,,._____.,....._.,,..-J

--- - Repetición invertida _ _.,,

... y de un cromosoma terminal de 23 pb
con una duplicación. Repet ición directa flanqueante de 9 pb

Figura 18-27. La transposición genera muchos reordenamientos Figura 18-28. Las secuencias de inserción son elementos transponi-
cromosómicos. bles simples hallados en las bacterias.

JS10L /S10R
-~A~- Gen tetR -~A~-
/ 'I / 'I
Repetición directa Tn10
flanqueante (9 300 bp)
Figura 18-29. Tn10 es un transposón compuesto de las bacterias.
TRANSPOSONES COMPUESTOS Cualquier segmento de DNA que
esté flanqueado po r dos copias de un a secuencia de inserción
puede transponerse a sí mismo y se denon1ina transposón
compuesto. Cada transposón compuesto se designa con la
abreviatura Tn, seguida de un número. Por ejemplo, el trans-
posón compuesto TnlO consiste en alrededor de 9300 pb y
contiene un gen de resistencia a la tetraciclina entre dos
secuencias de inserción IS 1O (tig. 18-29). Las secuencias de
inserción tienen repeticiones invertidas terminales; por lo
tanto , también l as tiene el transposón compuesto. Asimismo,
los transposones compuestos generan repeticiones directas
flanqueantes en sus sitios de inserción (véase tig. 18-29). Las
sec uencias de inserción en los extre1nos de un transposón co1n-
puesto pueden tener la 1nisma orientación o estar invertidas
entre sí (como en Tn10).
Las secuencias de inserción en los extremos de un transposón
compuesto son responsables de la transposición. No se requiere el
DNA entre las secuencias de inserción para el movimiento y pue-
den portar información adicional (p. ej. , resistencia antibiótica).
Presumible1nente, los transposones compuestos se desarrollan
cuando una secuencia de inserción se transpone a un Jugar cerca-
no a otro del mismo tipo. La transposasa producida por una de las
secuencias de inserción cataliza la transposición de ambas se-
cuencias de inserción, lo que les permite moverse juntas y trans-
portar el DNA localizado entre ellas. En algunos transposones
compuestos (p. ej., TnlO), una de las secuencias de inserción
puede ser defectuosa, de manera que su 1novimiento depende de
la transposasa producida por la otra.
TRANSPOSONES NO COMPUESTOS Algunos elementos transponi-
bles de las bacterias carecen de secuencias de inserción y se cono-
cen como transposones no compuestos. Los transposones no
compuestos tienen un gen de transposasa y tienen repeticiones
invertidas en sus extremos. Por ejemplo, el transposón no com-
puesto Tn3 porta genes de transposasa y resolvasa (una enzima
que interviene en la recombinación), más un gen que codifica la
enzima ~-lacta1nasa, que confiere resistencia al antibiótico ampi-
cilina.
Algunos genomas de bacteriófagos se reproducen por transpo-
sición y recun·en a ella para insertarse en un cromosoma bacte1ia-
no durante su ciclo lisogénico; el bacteriófago transponible mejor
estudiado es Mu (tig. 18-30). Si bien Mu no tiene repeticiones
invertidas terminales, sí genera repeticiones directas flanqueantes
(5 pb) cuando se inserta de manera aleatoria en el DNA. Mu se
replica mediante transposíción y causa mutaciones en el sitio de
inserción, propiedades características de los elementos transpo-
nibles.
Mutaciones génicas y reparación del DNA 515
Mu (38 000 bp)
Repetición
v~Otros genes
7
Genes Repetición
directa del fago de la cabeza directa
flanqueante y la cola flanqueante
Figura 18-30. Mu es un bacteriófago transponible.
CONCEPTOS
Las secuencias de inserción son elementos transponibles procariontes
que solo transportan la información necesaria para la transposición .
Un transposón compuesto está formado por dos secuencias de inser-
ción más el DNA interpuesto. Los transposones no compuestos de las
bacterias carecen de secuencias de inserción, pero tienen repeticiones
invertidas terminales y transportan información no relacionada con la
transposición. Todos estos elementos transponibles generan repeticio-
nes directas flanqueantes en sus sitios de inserción.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
¿ Qué tipo de elemento transponible tiene repeticiones invertidas ter-
minales?
a. Secuencia de inserción.
b. Transposones compuestos.
c. Transposón no compuesto Tn3.
d . Todos los anteriores .
Elementos transponibles en los eucariontes
Los elementos transponibles de eucariontes pueden dividirse en
dos grupos. Un grupo tiene estructura similar a Los elementos
transponibl.es de las bacterias, suele terminar en repeticiones
invertidas cortas y se transpone como DNA: por eje1nplo, los ele-
mentos P de Drosophila, y los elementos Ac y Ds del maíz. El
otro grupo comprende retrotransposones; ellos utilizan RNA
intermediarios, y rnuchos son sun ilares en estructura y movimien-
to a los retrovirus (véase cap. 9). Sobre la base de su estructura,
función y secuencias genónli cas, algunos retrotransposones tie-
nen una evidente relación evolutiva con los retrovirus. Si bien su
mecanismo de movimiento tiene diferencias fundamentales con
el de otros elementos transponibles, los retrotransposones tam-
bién generan repeticiones directas en el punto de inserción. Los
retrotransposones incluyen elementos Ty en la levadura, elemen-
tos copia en la Drosophila y la secuencia Alu en seres hu.manos.
ELEMENTOS Ac Y Ds DEL MAÍZ Barbara McClintock identificó
por primera vez elementos transponibles en el maíz hace más de
50 años (tig. 18-31). McClintock invirtió gran parte de su prolon-
gada carrera en estudiar sus propiedades, y su trabajo es uno de
los descubrimientos fundamentales de la genética. Sin embargo,
sus resultados fueron malentendidos e ignorados durante muchos
años. Recién cuando se desarrollaron técnicas moleculares a fines
516 CAPITULO 18
Figura 18-31 . Barbara McClintock fue la primera en descubrir los
elementos transponibles. (Topham/fhe lmage Works).
de 1960 y en 1970 se aceptó an1pliamente la importancia de los
ele1nentos transponibles. Por ú1ti1no, se reconoció la significación
de los descubrimientos iniciales de McClintock en 1983, cuando
recibió el Nobel en fisiología o medicina.
El descubrimiento de McClintock de los elementos transponi-
bles tiene su génesis en el trabajo inicial de Rollins A. Emerson
sobre los genes del maíz que causaban granos multicolores. La
n1ayoría de los granos de maíz son totalmente píg1nentados o
incoloros (ama1illos), pero Emerson observó que algunos granos
amarillos tenían manchas o estrías de color (fig. 18-32). Postuló
que estos granos resultaban de una mutación inestable: una muta-
ción del gen de tipo silvestre para el pigmento producía un grano
incoloro, pero en algunas células la mutación revertía al tipo sil-
vestre y causaba una mancha de pigrnento. Si n embargo, Emerson
no sabía por qué estas mutaciones eran inestables.
McClintock descubrió que la causa de las mutaciones inesta-
bles era un gen que se movía. Advirtió que la rotura cromosómi-
ca en el maíz a menudo se producía en un gen que ella deno1ninó
Dissociation (Disociación, Ds), pero solo en presencia de otro
gen, Activator (Activador, Ac). En ocasiones, los genes se movían
juntos a una localización cromosómica diferente. McClin tock
denomi nó elementos de control a estos genes móvi les, porque
controlaban la expresión de otros genes.
Desde que se reconoció la significación del trabaj o de
McClintock, se han examinado en detalle los elementos Ac y Ds
del maíz. Son transposones de DNA que tienen repeticiones
invertidas terminales y generan repeticiones directas flanqueantes
en 1.o s puntos de inserción (fig. 18-33a). Cada elemento Ac con-
tiene un único gen que codi fi ca una enzima transposasa. Por
consiguiente, los elementos Ac son autónomos, capaces de trans-
ponerse. Los elementos Ds son elementos Ac con una o más dele-
ciones que tienen desactivado el gen de transposasa (fig.18-33b).
Los elementos Ds, incapaces de transponerse por sí mismos (no
autónomos), pueden transponerse en presencia de elem.e ntos Ac
porque aun así tienen repeticiones invertidas terminales reconoci-
das por la Ac transposasa.
Figura 18-32. Los granos multicolores del maíz son causados
por genes móviles. El estudio del maíz multicolor llevó a
Barbara McClintock a descubrir elementos transponibles. (Matt
Meadows/Getty lmages).
Cada grano de una espiga de maíz es un descendiente indivi-
dual que se origina en un óvulo fec undado por un grano de polen.
Vaiios locus determinan el patrón de pigmento de un grano. Se
puede designar C a un alelo que codifica pigmento en uno de
estos Jocus y e a un alelo del mismo locus que no confiere pig-
mento. Un grano con genotipo ce será incoloro, es decir, ama1illo
o bla nco (fig. 18-34a); un grano con genotipo CC o Ce producirá
pigmento y será de color púrpura (fig. 18-34b).
Un elemento Ds, que se transpone bajo la influencia de un ele-
mento Ac cercai10, puede insertarse en el alelo C, lo que destruye
su capacidad de producir pigmento (fig. 18-34c). Un alelo desac-
tivado por un elemento transponible se designa mediante un
subíndice "t"; por consiguiente, en este caso el alelo se1ia Cr
(a) Elemento Ac Elemento Ac (4563 bp)
Gen transposasa
(b) Elementos Ds
0s9
Ds2d1
Ds2d2
-
Ds6
!
~- - - - - - - - - - =':::::-------.y_ _ _)
Diferentes elementos Ds Deleciones
tienen deleciones diferentes
Figura 18-33. Ac y Ds son elementos transponibles del maíz.
 Mutaciones génicas y reparación del DNA 517

Si un grano es inicialmente heterocigótico con genotipo Ce,
después de la transposición de Ds al alelo C la célula del grano
tiene genotipo Cte. Este grano será incoloro (blanco o amaiillo),
porque ni el alelo Ct ni el alelo e confieren pigmento. A m edida
que se desarrolla el embrión unicelular de maíz y se divide por
mitosis, puede haber otras transp osiciones en algunas células. En
cualquier célula en la que se escinde el ele1nento trai1sponible del
alelo Ct y se moviliza a una nueva localización, el alelo C volve-
rá a ser funcional: todas las cél ulas derivadas de aquellas en las
que se ha producido este fenómeno tendrán genotipo Ce y serán de
color púrpura. La presencia de estas células pigmentadas, rodea-
das de las células incoloras (Ctc), produce u na mancha o estría de
color púrpura (denominada un sector) en el grano por lo demás
amarino (fig. 18-34d). El tamaño del sector varía, lo que depende
de cuándo tiene lugar la escisión del elemento transponible del
alelo Cr Si la escisión se produce en etapas tempranas del desarro-
llo, muchas células contendrán el alelo C funcional y el sector pig-
mentado será grande; si la escisión se produce en etapas tardías del
desarro llo, pocas células tendrán el alelo C funcional y el sector
pigmentado será pequeño. ► ··
ELEMENTOS TRANSPONIBLES EN DROSOPHILA En Drosophila, se
encuentran una serie de elementos transponibles diferentes. Los
elementos P son una fainilia de elementos transponibles de D 1v-
sophila. La mayoría de los elementos P funcionales tienen alre-
dedor de 2900 pb de longitu d, aunque tainbién existen elementos
P más cortos que contienen deleciones. Cada elemento P tiene
repeticiones invertidas ternunales y genera repeticiones directas
flanqueantes en el sitio de inserción. Al igual que los elementos
transponj bl.es de las bacterias, los ele1nentos P son transposones
de DNA. Cada ele1nento codifica tanto una transposasa como un
represor de la transposición.
E l papel de este r epresor en el control de la transposición se
demuestra con claiidad en la disgenesia bJbrida, que consiste en

(a) Genotipo ce : ausencia de transposición (b) Genotipo Ce: ausencia de transposición

, - , - - - - - - - - -----.. ~------------..
Las células con genotipo ce
no producen pigmento, ... un grano incoloro
(amarillo o blanco).
J
... lo que da por resultad Las células con genotipo
Ce producen pigmento,...
• ... lo que determina un grano
pigmentado (púrpura).

Ac Ds
Ac Ds e Fenotipo
Grano
Grano de color
amarillo púrpura

e
e

(e) Genotipo Ce-► etc: transposición (d) Genotipo Ctc -► Ctc/Cc: mosaico (transposición
durante el desarrollo)
Un elemento Ac produce , ... que estimula la transcripción de • Un elemento Ac , ... que estimula transposición adicion~
transposasa, ... un elemento Os al alelo C... produce transposasa,... del elemento Os en algunas células. __J
Ac
~----- Os e Ac_. ~ Ds ~ --- r
:

Ac
¡ e
et
Ac ! e
e
Transposición
temprana
Transposición
tardía

Grano Grano
amari llo multicolor

... y altera su función de
producción de pigmento.
e e A
Las células resultantes tiene Cuando Os se transpone, IÉ Una célula en la que Os se ha transpuesto
genotipo Ctc y son incoloras. deja el alelo C, lo que fuera del alelo C producirá pigmento, lo
restablece la función del que generará manchas de color en un
l. alelo. 1 grano por lo demás incoloro .

Conclusión: los g ranos de maíz mu lticol ores se deben a la escisión de elementos

Ds de los genes que contro lan la producción de pigmento durante el d esarrollo.

Figura 18-34. La transposición da por resultado granos de maíz multicolores.

518 CAPITULO 18

(a) Ausencia de disgenesia Cruzamiento de Cruzamiento de

híbrida un macho P-- con (b) Disgenesia híbrida un macho p+ y
una hembra p+_ una hembra p-_
Generación P Generación P
p+ o
X X

fiunrepreso~
!Producción de gametos 1 del citoplasma
del óvulo
~,-----,)
1Prod ucdón de gametos 1 ! \
,. No hay represorl
en el citoplasma

---
( lj
inhibe la trans-
osición de
del óvulo.
Represores

Elemento P
• ,•
\- ~. • • elementos P.
_)

Cromosomas Cromosomas
paternos maternos Cromosomas Cromosomas
sin elementos P con elementos P paternos con mate rnos sin
l J elem entos P elementos P

Por consiguiente, ]
no hay disgenesia
híbrida y el desa-
rrollo es norma~ Cigoto t~ •{(¡•
( Generación F1 Mosca fértil
O ...
1
y produce des~ •
Así, los elementos P
de los cromosomas
paternos presentan
- - ---====:., cendencia fértil.
L._ -'

t~·t(i· un estallido de trans-

posición -disgenesia
híbrida-...

Generación F1 Mosca estéril

' ... que provoca mutaciones,
-==:::::::::~ aberraciones cromosómicas
y descendencia estéril.
\.._

Figura 18-35. La disgenesia híbrida en Drosophila es causada Conclusión: solo el cruzamiento e ntre un macho p + y una
por la transposición de elementos P. (De W. Y. Chooi. Genetics hembra p - causa disgenesia híbr ida, porque el espermatozoide
68:2 13-230, 1971). no aporta el represor.

la aparición súbita de numerosas mu taciones, aberraciones cro-
mosómicas y esterilidad en la descendencia de un cruzamiento
entre una mosca macho p+ (con elementos P ) y una mosca hem-
bra P- (sin ellos). El cruzamiento recíproco entre una hembra p+
y un macho P- genera descendencia normal.
La disgenesia híb1ida se debe a un estallido de transposiciones
cuando se introducen eleme ntos P en una célula que no los tiene.
En una célula que contiene elen1entos P , un represor citoplas1ná-
tico inhibe la transposición. Cuando una hembra P+ produce óvu-
los, la proteína represora se incorpora en el citoplasma del óvulo,
lo que impide nuevas transposiciones en el embrión y evita que
surjan mutaciones. Los descendientes resultantes son fértiles
como adultos (fig. 18-3Sa). En cambio, una hembra P- no produ-
ce la proteína represora, de manera que esta no se almacena en el
citoplasma de sus óvulos. Los espermatozoides contienen cito-
plasma escaso o nulo, por lo que un macho p+ no aporta proteína
represora a su descendencia. Cuando los óvulos de una hembra P-
son fecundados por espermatozoides de un macho p+, la ausencia
de represión penn ite que los elementos .P proporcionados por el
esperm atozoide presenten transposición rápida en el emb1ión, lo
que causa disgenesia híbrida (fig. 18-3Sb).
La disgenesia hfbrida y los elen1entos P han atraído la aten-
ción de los genetistas, porque los elementos P parecen haber
surgido dentro de po blaciones de Drosophila melanogaster en
los últimos 50 años y pueden desempeñar un papel en la evolu-
ción de 1a especie. Otras especies de Drosophila carecen de ele-
mentos P, que también están ausentes por completo en las cepas
de laboratorio de D . melanogaster recogidas originalmente en

estado si lvestre antes de la década de 1960. Sin embargo, en la
actualidad la mayoría de las poblaciones sil vestres de la especie
tienen elementos P. Las cepas de laboratorio recogidas durante
la década de 1970 representan una mezcla: algunas tienen ele-
mentos P y otras, no. Esto sugiere que los ele1nentos P aparecie-
ron en algún n1omento del siglo pasado y se diseminaron con
rapidez por todas las poblaciones silvestres de D. melanogaster.
Como los cruzamientos entre machos con elementos P y hem-
bras sin ellos causan esterilidad, los elementos P y elementos
transponibles similares tienen el potencial de servir como meca-
nismos de aislamiento reproductivo entre las poblaciones y pue-
den desempeñar un papel en la especiación (véase cap. 26).
Estas observaciones avalan la idea de que los elementos trans-
poni bles tienen una participación importante en la evoluc ión.
►
ELEMENTOS TRANSPONIBLES EN LOS SERES HUMANOS Uno de los
ele1nentos transponibles n1ás frecuentes en el genon1a humano es
Alu. Cada célula humana contiene 1nás de J millón de copias rela-
cionadas, pero no idénticas, de Alu en sus cromosomas. Las se-
cuencias Alu son similares al gen que codifica la molécula de
RNA 7S, que transporta proteínas recién sintetizadas a través del
retículo endoplasmático. Las secuencias Alu crean repeticiones
directas flanqueantes cortas cuando se insertan en el DNA y tie-
nen características que sugieren que se han transpuesto a través de
un RNA intermediario.
Alu pertenece a una clase de secuencias repetitivas hall adas con
frecuencia en genomas de mamíferos y algunos otros genomas.
Estas secuencias se denominan en conjunto elementos dispersos
cortos (SINE) y representan alrededor del 11 % del genoma
humano. La 1nayoría de los SINE son copias de elementos trans-
ponibles que se han acortado en el extreino 5', quizá debido a que
el proceso de transcripción inversa usado en su transposición ter-
minó antes de que se copiara toda la secuencia. Se han identifica-
do SINE como causa de mutaciones en más de 20 casos de enfer-
medad genética humana.
El genoma humano también tiene 1nuchos transposones cla-
sificados como elementos dispersos largos (LINE), que tienen
una estructura algo más simil ar a la de los retrovi rus. Al igual
que los SINE, la mayoría de los LINE del genoma humano
están acortados en el extremo 5 ' . Por lo general, los LINE más
largos tienen alrededor de 6000 pb, pero como la m ayoría de
las copias están acor tadas, el LINE promedio tiene solo alrede-
dor de 900 pb. Hay aproximadamente 900 000 copias de LINE
en eJ genoma humano, que representan, en conjunto, e] 21 % del
DNA hu1nano total.
Cuadro 18-4 Características de dos clases importantes de elementos transponibles genéticos
Estructura
Clase 1 Repeticiones directas terminales lar-
(ret rotransposón) gas; repeticiones directas flanquean-
tes cortas en el sitio diana
Clase 11 Repeticiones invertidas terminales
cortas; repeticiones directas flanque-
antes en el sitio diana
Mutaciones génicas y reparación del DNA 519
CONCEPTOS
En los eucariontes, existe una gran variedad de elementos transpon i-
bles. Algunos se asemejan a los elementos transponibles de los proca-
riontes, tienen repeticiones invertidas terminales y se transponen como
DNA. Otros son retrotransposones con repeticiones directas largas en
sus extremos y se transponen a través de un RNA intermediario.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
Se produce disgenesia híbrida cuando
a. Una mosca macho con elementos P (p+-) se aparea con una mosca
hembra que carece de elementos P (?+).
b. Un macho p+ se aparea con una hembra p+_
c. Un macho p+ se aparea con una hembra f>+'.
d. Un macho p+ se aparea con una hembra p+_
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
Tipos de elementos transponibles
Ahora que hemos considerado algunos ejemplos de elementos trans-
ponibles, repasemos sus principa les tipos (cuadro 18-4).
Los elementos transponibles pueden dividirse en dos clases prin-
cipa les sobre la base de la estructura y el movimiento. La clase I com-
prende los retrotransposones, que tienen repeticiones directas ter-
minales y se transponen a través de RNA intermediarios. Generan
repeticiones directas flanqueantes en sus puntos de inserción cuando
se transponen en el DNA. Los retrotransposones no codifican trans-
posasa, pero algunos tipos tienen estructura similar a la de los retro-
virus y contienen secuencias que producen transcriptasa inversa. La
transposición tiene lugar cuando la transcripción produce un RNA inter-
mediario, que después se transcribe a DNA por medio de la transcrip-
tasa inversa y se inserta en el sitio diana. Los ejemplos de retrotranspo-
sones incluyen elementos Ty en la levadura y secuencias Alu en los seres
humanos. En los procariontes, no se hallan retrotransposones.
La clase II consiste en transposones de DNA que tienen repeticiones
invertidas termina les y se transponen como DNA. Al igual que los
transposones de clase 1, generan repeticiones directas flanqueantes en
sus puntos de inserción en el DNA. A diferencia de los transposones de
clase 1, todas las formas activas de los elementos transponibles de clase
11 codifican transposasa, que es necesaria para su movimiento. Algunos
también codifican resolvasa, represores y otras proteínas. Su transpo-
sición puede ser replicativa o no replicativa, pero nunca utilizan RNA
intermediarios. Las secuencias de inserción y todos los transposones
complejos de las bacterias, los elementos Ac y Ds del maíz y los ele-
mentos P en la Drosophi la son ejemplos de elementos transponibles.
Genes codificados Transposición Ejemplos
Transcriptasa inversa Por RNA 7y (levadura)
(y, en ocasiones, otros) intermediario copia (Drosophila)
A/u (ser humano)
Gen de transposasa IS 1 (E. coli)
(y, en ocasiones, otros) A través del DNA Tn3 (E.co/J)
(replicativa o no Ac, Os (maíz)
replicativa) Elementos P (Drosophila)
520 CAPITULO 18
Elementos transponibles que han
desempeñado un papel importante
en la evolución del genoma
Sin duda, los ele1nentos transponibles han dese1npeñado un papel
importante en modelar los genomas de muchos organismos. Gran
parte de la enorme variación del genoma hallada en organismos
eucariontes se debe a diferencias del número de elementos trans-
ponibles. Alrededor del 45% del genoma humano consiste en re-
manentes de elen1entos transponibles y alrededor del 50% de las
mutaciones espontáneas en la Drosophila se deben a transposi-
ción. L a recombinación homóloga entre copias de elementos
transponjbles ha sido una f11erza importante en la producción de
duplicaciones de genes y otros reordenamientos cromosómicos.
Más aún, algunos elementos transponibles pueden portar DNA
extra con ellos cuando se transponen a un nuevo sitio, lo que ofre-
ce la posibilidad de movilizar secuencias de DNA que regulan
genes a nuevos süios, donde pueden n1odificar la expresión de
genes.
ELEMENTOS TRANSPONIBLES COMO PARÁSITOS GENÓMICOS Como
hemos visto, 1nuchos elementos transponibles dejan una copia en
el sitio original cuando se transponen a una nueva localización
(transposición de copia y pegado) y, por lo tanto, aumentan de
número dentro de un geno1na con el transcurso del tiempo. La
capacidad de replicarse y diseminarse significa que muchos ele-
mentos transp onibles pueden no cumplir ninguna función en la
célula; solo existen porque son capaces de replicarse y diseminar-
se. La inserción de elementos transponibles en un gen a 1nenudo
destruye su función, con consecuencias nocivas para la célula.
Además, es probable que el tiempo y la energía requeridos para
replicar grandes números de elementos transponibles impongan
una carga metabólica a la célula. Por consiguiente, los elementos
transponibles pueden ser considerados parásitos genómicos que
no aportan ningún beneficio y que incluso pueden ser nocivos.
DOMESTICACIÓN DE ELEMENTOS TRANSPONIBLES Si bien muchos
elementos transponibles pueden ser parásitos genómicos, sin
duda algunos han evolucionado para cumplir fines útiles en sus
células huésped. En ocasiones, se dice que estos transposones
están domesticados, lo que implica que sus tendencias parasita-
1ias han sido reemplazadas por propiedades útiles para la célula.
Por ejen1plo, es probable que el mecanismo que genera la diver-
sidad de anticuerpos en los sistemas inmunitarios de 1.os verte bra-
dos (véase cap. 22) evolucionara a partir de un elemento transpo-
nible. Las células inmunitarias denominadas linfocitos tienen la
capacidad de unir varios segmentos de DNA que codifican prote-
ínas de reconocilniento de antígenos. Este mecanismo puede
haber surgido de un elemento transponible que se insertó en la
línea germinal de un ancestro vertebrado hace alrededor de 450
millones de años.
Asimismo, los elementos transponibles han desempeñado un
papel in1portante en la evolución del maíz. El maíz (maíz moder-
no) fue domesticado a pru1il· del teosinte de América Central hace
más de 8000 años. Una de las diferencias genéticas importantes
entre teosinte y maíz involucra a un gen denominado tbl, que
codifica un regul ador de la transc1ipción que reprime el creci-
miento de ramas laterales. En el maíz, la transcripción de tbl está
elevada en comparación con la de teosinte, con el resultado de
que el maíz n1oderno es más vertical y menos ramificado que el
teosi nte. La investigación reciente ha demostrado que el aumento
de transcripción de tbl en el maíz es el resultado de un elemento
transponible deno1ninado Hopscotch, que se insertó en secuencias
reguladoras que controlan la transcripción de tb 1. Es probable
que esta inserción estuviera presente en el teosinte con10 una
variante y que fuera seleccionada por los seres hun1anos durante
la domesticación del maíz, porque producía una planta de forma
más conveniente. Asimismo, los elementos transponibles pueden
participar en la especiación, el proceso por el cual surgen nuevas
esp ecies (véase sección previa en disgenesia hfbrida).
CONCEPTOS
Muchos elementos transpon ibles parecen ser parásitos genómicos,
que existen en grandes números debido a su capacidad de aumentar
de manera eficiente el número de copias. Los aumentos del número
de copias de elementos transponibles han contribuido al gran tama-
ño de muchos genomas eucariontes. En varios casos, se han adopta-
do elementos transponibles para funciones celulares específicas.
18.5 Los cambios del DNA se reparan
mediante una serie de vías
La il1tegridad del DNA está amenazada en forma constante por
radiaciones, mutágenos químicos y cambios espontáneos. Pese a
estos agentes lesivos, la tasa de mutación se mantiene notable-
mente baja gracias a la eficiencia con la que es reparado el DNA.
Hay una serie de vías complejas para reparar el DNA, pero es
posible efectuar varias afirmaciones generales acerca de este pro-
ceso. Primero, la mayoría de los mecanismos de reparación del
DNA requieren dos cadenas nucleotídicas de DNA, porque la
mayo1ia reemplaza nucleótidos completos, y se necesita la cade-
na molde para especificar la secuencia de bases.
Una segunda característica general de la reparación del DNA es
la redundancia, que i1nphca que muchos tipos de daño del DNA
pueden ser reparados por más de una vía de reparación. Esta
redundancia ilustra la extrema importancia de la reparación del
DNA para la supervivencia de la célula: si un error escapa a un
siste1na de reparación, es probable que sea reparado por otro sis-
tema, lo que garantiza que se corrij an casi todos los errores.
Consideraremos varios mecanismos generales de reparación del
DNA: reparación de los errores de apareamiento, reparación di-
recta, reparación por escisión de bases, reparación por escisión
de nucleótidos y reparación de roturas bicatenarias.
Reparación de los errores de apareamiento
La replicación es sumamente precisa: cada copia nu eva de DNA
presenta menos de un error por mil millones de nucleótidos. Sin
embargo, durante el proceso de replicación, los errores de apare-
amiento se incorporan en el DNA nuevo con una frecuencia de
alrededor de 10-4 a 10-5; por lo tanto, la mayoría de los errores
iniciales son corregidos y nunca se convie11en en mutaciones per-
manentes. AJgunas de estas correcciones se realizan durante la
corrección (proofreading) (véanse pp. 339-340 del cap. 12) por
las DNA polin1erasas.
 (a) En la replicación del DNA, se aña- Ó La metilación en las secuencias GATC permite diferenciar las cadenas nucleotídicas
dió una base apareada de mane]ra antíg1Ua y recién sintetizada: un retraso de la metilación ímplica que, inmediatamente
incorrecta a la nueva cadena. después de la replicación, la cadena antigua estará metílada, pero la cadena nueva, no.
DNA nu evo
~ m
DNA molde (antiguo) Grupo metilo ~
Complejo de reparación
de errores de apareamiento

Muesc
(b) Grupo metilo
Numerosos nucleótidos insertados de manera - - -;~,.:. GA. ~~ ---------------
incorrecta que escapan a la detección por correc-
ción se corrigen mediante reparación de errores Complej9 de
reparac1on
Ó El complejo de reparación de errores de aparea-
miento aproxima las bases apareadas de manera
l
de apareamiento. Las enzimas de reparación de de errores
de apare a- incorrecta a la secuencia GATC metilada, y se
errores de apareamiento detectan y corrigen las miento ídentifíca la nueva cadena.
bases aparead as de manera incorrecta. Además, el
sistema de reparación de errores de apareamiento
corrige pequeños bucles no apareados de DNA,
corno los causados por deslizamiento de las cade-
nas durante la replicación (véase fig. 18-12).
Algunas repeticiones de nucleótidos p ueden for-
mar estructuras secundarias en la cadena no apa-
(c)
5' GAT_C
i
reada (véase fig. 18-5), lo que les permite escapar
a la detección del sistem a de reparación de erro- Grupo metilo ./ , Las exonucleasas eliminan nucleótidos
res de apareamiento. de la cadena nueva entre la secuencia
Una vez reconocido el e1Tor de incorporación, GATC y el error de apareamiento. _)
las enzimas de reparación de errores de aparea-
mien to cortan una sección de la cadena recién
3'
si ntetizada y rellenan el hiato con nucleótidos
nuevos utilizando como molde la cadena original
de DNA. Para que esta estrategia dé resultado, la
reparación de errores de apareamiento debe tener
alguna manera de distinguir entre las cadenas
(d)
7
GATC

antigua y nueva del DNA, de manera que se eli-

mine el e1Tor de incorporación y no parte de la Grupo metilo ./ Después, la DNA polimerasa reemplaza los nucleótidos,
cadena original. lo que corrige el error de apareamiento, y la DNA lígasa
sella la muesca en el esqueleto de azúcar-fosfato.
En la E. coli, las proteínas que reparan los
e1Tores de aparea111iento diferencian entre las
cadenas antigua y nueva por la presencia de gru-
pos 1netilo en secuencias especiales de la cadena
Figura 18-36. Muchos nucleótidos insertados de manera incorrecta
antigua. Después de la replicación, se metilan los
que escapan a la corrección durante la lectura son corregidos por
nucleótidos de adenina de la secuencia GATC. El reparación de errores de apareamiento.
proceso de metilación es diferido ; por lo tanto ,
inmediatam ente después de la replicación, la
cadena antigua está n1etilada y la cadena nueva,
no (fig. 18-36a). El complejo de reparación de errores de aparea-
miento acerca una secuencia GATC no 1netiJada a las bases apa- CONCEPTOS
readas de manera incon·ecta. Causa una 1n uesca en la cadena no
Las bases apareadas de manera incorrecta y otras lesiones del DNA se
metilada en el sitio GATC (fig. 18-36b) y degrada la cadena entre
corrigen medíante la reparacíón de los errores de apareamiento. Las
la 1nuesca y las bases apareadas de manera incorrecta (fig. 18-
enzimas cortan una seccíón de la cadena recíén sintetizada del DNA
36c). La DNA polimerasa y la DNA ligasa rellenan el hiato de la
cadena no n1etilada con nucleótidos correctamente apareados y la reemplazan por nuevos nucleótidos.
(fig. 18-36d).
E n las céluJas eucariontes, la reparación de los errores de apa-
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
reamiento es similar a la observada en la E. coli, pero no se sabe
En la E. coli, la reparación de errores de apa reamíento distíngue entre
cómo se reconocen las cadenas antigua y nueva en estas células.
En algunos eucaiiontes, como levaduras y moscas de la fruta, no las cadenas antígua y nueva de DNA sobre la base de
hay metilación detectable del DNA, y aun así se produce la repa- a. diferencias de la composición de bases de las dos cadenas,
ración de en·ores de apareamiento. Los seres humanos que tienen b. modificación de las histonas,
mutaciones de los genes de reparación de errores de apareamien- c. análogos de base en la cadena nueva,
to a menudo presentan mayor cantidad de mutaciones somáticas d. grupos metilo en la cadena antigua.
y suelen ser susceptibles al cáncer de colon.
521
522 CAPITULO 18

Reparación directa Base dañada

La reparación directa no reemplaza los nucleótidos alterados,

sino que restablece sus estructuras originales (correctas). Uno de
los mecanismos de reparación directa mejor conocidos es la foto-
rreactivación de los dúneros de pirimidina inducidos por UV
(véase fig. 18-21). La bacteria E. coli y algunas células eucaiion-
tes tienen una enzima denominada fotoliasa, que utili za la energía
Cada DNA glucosilasa reconoce
capturada de la luz para ro1nper los enlaces covalentes que unen DNA y elimina un t ipo específ ico de
las pirimidinas en un dímero. glucosi lasa base dañada, lo que produce
Asimismo, la reparación directa corrige la 0 6-metilguanina, un un sitio apurín ico o un sitio
producto de la alquilación de la guanina que se aparea con adeni- apirimidínico (sitio AP).
(b)
na, lo que produce transversiones G • C ➔ T • A. Una enzima
denominada 0 6-metilguani na-DNA metiltransferasa eli nuna el
grupo meti lo de 0 6-metilguanina, Lo que restaL1ra la base a guani-
na (fig. 18-37).

OCH 3 o
("N

f G~ Metilt ransf erasa ~ endonucleasa

AP La AP endonucleasa rompe el
enlace fosfodiéster del lado 5'
/
N
N ► / N fG NH
del sitio AP ...
N~
NH 2

QG-metilguanin a
\ CH 3
N~
NH2

Guanina
(e)

Figura 18-37. La reparación direct a restablece la estructura

original de los nucleótidos. 3'

5'
~Prr
'x. 3'
. ..y elimina el azúcar
desoxirribosa .
Reparación por escisión de bases
DNA
En la reparación por escisión de bases, primero se escinde la polimerasa
base modificada y después se reemplaza el nucleótido completo. Desoxirr ibosa fosfato + dN MPs
L a escisión de bases modificadas es catalizada por un conj unto de ' La DNA polimerasa añade
enzimas denominadas DNA glucosilasas, cada una de las cuales nuevos nucleótidos al
reconoce y elimina un tipo específico de base modificada me- grupo 3 '-0 H expuesto.
diante la rotura del enlace que une esa base al átomo de carbono (d)
l ' del azúcar desoxirri bosa (fig. 18-38a). P or ej emplo, la uracilo
glucosilasa reconoce y elimina el uracilo producido por desarni-
nación de la citosina. O tras glucosilasas reconocen hipoxanti na,
3-metiladenina, 7-metilguanina y otras bases modificadas.
Una vez eliminada la base, un a enzüna denominada AP endo-
nucleasa (apurínica o apirimidínica) corta el e nlace fosfodiéster,
y otras enzi1nas eliminan el azúcar desoxin·ibosa (fig. 18-38b). DNA ligasa
Luego, .l a DNA polimerasa añade uno o más nucJeótidos nuevos ~ DNA ligasa sella la muesca en el
al grupo 3' -OH expuesto (fig.18-38c) y reemplaza una sección de esqueleto de azúcar-fosfato, lo que
nucleótidos de la cadena dañada. La DNA ligasa sella la muesca Nuevo DNA ~ blece la secuencia original.
del esqueleto fosfodiéster (fig. 18-38d), y se restablece la secuen- (e)
cia original intacta (fig. 18-38e).
Las bacter ias utilizan DNA polimerasa I para reemplazar los
nucleótidos escindidos, pero los eucariontes usan DNA polimera-
sa ~. que no tiene capacidad de corrección y tiende a cometer
errores. E n promedio, la DNA poli1nerasa ~ comete un error por 3'
4000 nucleótidos insertados. Se reparan alrededor de 20 000 a
40 000 modificaciones de bases por día mediante escisión de Figura 18-38. La reparación por escisión de bases escinde las
bases, y por consiguiente, la DNA polimerasa ~ puede introducir bases modificadas y después reemplaza uno o más nucleótidos.
 Mutaciones génicas y repa ración del DNA 523

hasta 1.0 mutaciones por día en el genoma humano. ¿Cómo se El daño del DNA distor-
corrigen estos errores? Resultados de investigaciones recientes siona la configuración
(a)
demuestran que algunas AP endonucleasas tienen capacidad de de la molécula.
corrección. Cuando la DNA polimerasa ~ inserta un nucleótido DNA dañado - ---..
con la base incon·ecta en el DNA, la DNA ligasa no puede sellar
la muesca del esqueleto de azúcar-fosfato, porque los grupos 3 ' -
OH y 5' -P de los nucleótidos adyacentes no están en la orienta-
ción correcta para que la ligasa los conecte. En este caso, la AP
endonucleasa I detecta los errores de apareamiento y utiliza la fÍUn complejo enzimático
actividad de endonucleasa 3' ➔5 ' para escindir la base apareada reconoce la distorsión
de manera incorrecta . Después, la DNA polimerasa ~ emplea su (b)
~ tante del daño.
actividad de polimerasa para incorporar el nucleótido faltante. De
esta manera, se mantiene la fidelidad de la reparación de errores
de aparea1n iento.

CONCEPTOS
El DNA es separado, y las
proteínas de unión a ca-
Los mecanismos de reparación directa restablecen la estructura denas simples estabilizan
correcta de los nucleótidos alterados. En la reparación por escisión de (e)
las cadenas simples.
bases, las enzimas glucosilasa reconocen y eliminan tipos específ icos ,,-
{
de bases modificadas. Luego, se elimina el nucleót ido completo, y se •
reemplaza una sección de la cadena polinucleotídica.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 10

¿En qué se diferencian los mecanismos de reparación directa de la

repa ración de errores de apaream iento y de la reparación por escisión ' Una enzima escinde
de bases? la cadena a ambos
(d) lados del daño.

Reparación por escisión de nucleótidos t •

•
••• ..• t
Otra vía de reparación es la reparación por escisión de nucleóti- I
dos, que elimina lesiones voluminosas del DNA (p. ej., dímeros
de pirimidina) que distorsionan la doble hélice. La reparación por
escisión de nucleótidos permite reparar 1n uchos tipos diferentes
\ •
• ...•• •••• I'
de daño del DNA y se observa en cél ulas de todos los organismos,
,...
desde bacterias hasta seres humanos. 0 Se elimina parte
El proceso de escisión de nucleótidos es complejo; en los seres de la cadena
humanos, interviene una gran cantidad de genes. Primero, un dañada, ...
(e)
complejo de enzimas barre el DNA y busca distorsiones de su con-
figuración tridimensional (fig. 18-39a y b). Cuando se detecta • •
•
una distorsión, otras enzimas separan las dos cadenas de nucleó-
tidos en la región dañada, y proteínas de unión a cadenas simples
estab ilizan las cadenas separadas (fig. 18-39c). A continuación, se
escinde el esqueleto de azúcar-fosfato de la cadena dañada a
ambos lados del daño (fig. 18-39d). Enzimas helicasas eliminan
parte de la cadena dañada (fig. 18-39e), la DNA polimerasa relle- DNA polimerasa , ...y el hiato es rellenado
na el hiato y la DNA ligasa lo sella (fig. 18-39f). DNA ligasa por la DNA polimerasa y
(f) sellado por la DNA ligasa.
Nuevo DNA
CONCEPTOS
La reparación por escisión de nucleótidos elimina y reemplaza nume-
rosos tipos de DNA dañado que distorsionan la estructura del DNA.
Se separan las dos cadenas de DNA, se elimina la sección del DNA que
contiene la distorsión, la DNA polimerasa rellena el hiato y la DNA Figura 18-39. La reparación por escisión de nucleótidos elimi-
ligasa lo sella. na lesiones voluminosas de DNA que distorsionan la doble
hélice.
524 CAPITULO 18

INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS RECOMBINACIÓN HOMÓLOGA La recombinación homóloga repara

Vía básica de reparación del DNA
Ahora que hemos examinado varios mecanismos de reparación del
DNA, analizaremos qué tienen en común estos métodos y en qué se
diferencian. La mayoría de los métodos de reparación del DNA depen-
den de la presencia de dos cadenas, porque los nucleótidos de la reg ión
dañada son eliminados y reemplazados. Los nucleótidos se reemplazan
en la reparación de errores de apareamiento, en la reparación por esci-
sión de bases y en la reparación por escisión de nucleótidos, pero no
son reemplazados por los mecanismos de reparación directa.
Los mecanismos de reparación que incluyen eliminación de nucleó-
t idos ut ilizan una vía común de cuat ro pasos:
1. Detección: se reconoce la sección dañada del DNA.
2. Escisión: las endonucleasas de reparación del DNA cortan el esque-
leto fosfodiéster a uno o ambos lados del DNA dañado y se elimi-
nan uno o más nucleótidos.
3. Polimerización: la DNA polimerasa añade nucleótidas al grupo 3'-
OH recién expuesto utilizando como molde la otra cadena y reem-
plazando los nucleótidos dañados (y con frecuencia, algunos no
dañados).
4. Ligamiento: la DNA ligasa sel la las muescas del esqueleto de azú-
car-fosfato.
Las principales diferencias de los mecanismos de reparación de
los errores de apareamiento, por escisión de bases y por escisión
de nucleótidos radican en los detalles de detección y escisión . En
la reparación de errores de apareamiento y por escisión de bases,
se realiza un solo corte en el esqueleto de azúcar-fosfato a un
lado del daño; en la reparación por escisión de nucleótidos, se
practican cortes a ambos lados de l daño del DNA. En la repara-
ción por escisión de bases, la DNA polimerasa desplaza los nucleóti-
dos antiguos a medida que añade nuevos nucleótidos al extremo 3'
de la muesca; en la reparación de errores de apareamiento, se
degradan los nucleótidos antiguos; en la reparación por escisión
de nucleótidos, las enzimas helicasa desplazan los nucleótidos
antiguos. Los tres mecanismos utilizan DNA pol imerasa y ligasa
para rel lenar el hiato producido por la escisión y eliminación de
nucleótidos dañados.
una molécula rota de DNA utilizando información genética idén-
tica o casi idéntica contenida en otra molécula de DNA, en gene-
ral una cromátida hermana: el mismo mecanismos empleado en el
proceso de reco1nbinación ho1nóloga que es responsable del entre-
cruzamiento (véase cap. 12). La recombinación homóloga co-
tnienza con la eliminación de algunos nucleótidos en los extren1os
rotos, seguida de invasión, desplazamiento y replicación de la ca-
dena (véase fig.12-20). Muchas de las mismas enzimas que llevan
a cabo el entrecruzamiento se utilizan en la reparación de roturas
bicatenarias mediante recombinación homóloga: dos de estas en-
zirnas son BRCA 1 y BRCA 2. Los genes que codifican estas pro-
teínas suelen estar n1utados en las células de cáncer de mama.
UNIÓN DE EXTREMOS NO HOMÓLOGOS La unión de extremos no
homólogos repara roturas bicatenarias sin utilizar un molde
homólogo. A menudo, esta vía se usa cuando la célula se encuen-
tra en G 1 y no se dispone de una cromátida hermana para la repa-
ración mediante reco1nbinación homóloga. La unión de extre1nos
no homólogos utiliza protefnas que reconocen los extremos rotos
del DNA, se unen a ellos y los reúnen. La unión de extremos no
homólogos es más proclive a error que la recombinación homólo-
ga y suele inducir deleciones, inserciones y translocaciones. El
cuadro 18-5 resume los diferentes tipos de reparación del DNA.
DNA polimerasas translesión
Como se comenta en el capítulo 12, las DNA polimerasas de alta
fidelidad que normalmente llevan a cabo la replicación operan a
alta velocidad y, al igual que un tren de alta velocidad, requieren
una vía uniforine, un molde no distorsionado. Algunas mutacio-
Cuadro 18-5 Resumen de mecanismos comunes de
reparación del DNA
Sistema
de reparación Tipo de daño reparado
Errores de Errores de replicación, como bases apare-
apareamiento adas de manera incorrecta y deslizamien-
to de las cadenas

Directo Dímeros de pirimidina; otros t ipos especí-

ficos de alteraciones
Reparación de roturas bicatenarias Escisión de bases Bases anormales, bases modificadas y
dímeros de pirimidina
Un tipo frecuente de daño del DNA es una rotura bicatenaria, en
la que se ro1npen a1nbas cadenas de la hélice de DNA. Las rotu- Escisión de Daño del DNA que distorsiona la doble
ras bicatenarias son causadas por radiación ionizante, radicales nucleótidos hélice, como bases anormales, bases
libres oxidativos y otros agentes lesivos para el DNA. Estos tipos modificadas y dímeros de pirim idina
de roturas son particularmente deletéreas para la célula porque
Recombinación Rupturas bicatenarias
atascan la replicación del DNA y pueden inducir reordenamien-
homóloga
tos cromosómicos, como deleciones, duplicaciones, inversiones y
translocaciones. Hay dos vías importantes para reparar roturas Unión de extremos Rupturas bicatenarias
bicatenarias: recombinación homóloga y unión de extremos no no homólogos
homólogos.
 Mutaciones génicas y reparación del DNA 525

nes, como los dímeros de pirimidina, provocan distorsiones de la

estructura tridimensional de la hélice de DNA, lo que bloq uea
la replicación por las polimerasas de alta velocidad. Cuando se
encuentran distorsiones del molde, DNA polimerasas transle-
sión especializadas se encargan de la replicación y sortean las
lesiones.
Lac; polimerasas translesión pueden sortear lesiones volumino-
sas, pero en el proceso suelen cometer en·ores. Por consiguiente,
la polimerasa translesión permite que proceda la replicación a
expensas de introducir mutaciones en la secuencia. Los sistemas
de reparación del DNA cor1igen algunas de estas n1utaciones,
pero otras escapan a la detección.
Un ejen1plo de una DN.A polimerasa translesión es la polimera-
sa h (eta), que sortea los dímeros de pirimidina en los eucarion-
tes. La polimerasa h inserta AA enfrente de un dímero de pirimi-
dina. Esta estrategia parece ser razonable, porque alrededor de
dos tercios de los dímeros de pirimidina son dímeros de timina.
Figura 18-40. La xerodermia pigmentosa se debe a defectos de la
Sin e1nbargo, la inserción de AA frente a un dímero CT determi-
reparación del DNA. La enfermedad se caracteriza por máculas similares a
na una transversión C • G ➔ T • A. Por lo tanto, la polimerasa Tl pecas en la piel (mostradas aquí) y una predisposición al cáncer de piel. (©
tiende a introducir mutaciones en la secuencia de DNA. Stephane AUDRAS/REA/Redux).

CONCEPTOS
Existen dos vías importantes para la reparación de roturas bicatena-
rias del DNA: recombinación homóloga y unión de extremos no
homólogos. Las DNA polimerasas translesión permiten que proceda la
replicación más allá de distorsiones voluminosas del DNA, pero a
menudo introducen errores cuando sortean la región distorsionada.
Enfermedades genéticas y reparación
defectuosa del DNA
Vaiias enfern1edades humanas están relacionadas con defectos de
la reparación del DNA. A menudo, estas enfennedades se asociai.1
con alta incidencia de determinados cánceres, porque los defectos
de reparación del DNA inducen aumento de las tasas de muta-
ción. En el capítulo 23, se analiza con más detalle este concepto.
Entre las enfermedades humanas por reparación defectuosa del
DNA se encuentra la xerodermia pigmentosa (fig. 18-40), un tras-
torno autosómico recesivo raro que consiste en pign1entación
anormal de la piel y sensibilidad aguda a la luz solar. Las perso-
nas que presentan esta enfermedad también tienen una intensa
predisposición al cáncer de piel, con una incidencia que varía de
1000 a 2000 veces la observada en personas no afectadas.
La luz solar incluye un fuerte co1nponente UV, de manera que
la exposición a dicha luz produce dímeros de pirünidina en el
DNA de las células cutáneas. Si bien las células humanas cai·ecen
de fotoliasa (la enzima que repara los dímeros de pirimidina en
las bacterias), la reparación por escisión de nucleótidos pe1mite
corregir la mayor parte de los dímeros de pirimidina en los seres
humanos (véase fig. 18-39). Sin embargo, las células de la mayo-
ría de las personas con xerodermia pigmentosa tienen defectos de
la reparación por escisión de nucleótidos, y muchos de sus díme-
ros de pirimidina no son corTegidos y pueden inducir cáncer.
La xerodernli a pign1entosa puede deberse a defectos de varios
genes diferentes. Algunas personas con esta enfermedad tienen
mutaciones de un gen que codifica Ja proteína que reconoce y se
une al DNA dañado ; otras tienen mutaciones de un gen que codi-
fica helicasa. Otras tienen defectos de los genes que intervienen
en el corte de la cadena dañada en los costados 3' y 5' del dúne-
ro de pirimidina. Algunas personas tienen una forma ligeramente
distinta de la enfern1edad (variante de xerodermia pig1nentosa)
debido a mutaciones del gen que codifica la polimerasa h, la DNA
polimerasa translesión que sortea los dímeros de pirimidina.
Otra enfermedad genética causada por reparación defectuosa del
DNA es una forn1a hereditaria de cáncer de colon denominada
cáncer de colon hereditario sin poliposis (HNPCC, hereditary non-
polypos is colon cancer). Este es uno de los cánceres hereditarios
más co1nunes, que representa alrededor del 15% de los cánceres de
colon. Los hallazgos de la investigación indican que el HNPCC se
debe a mutaciones de las proteínas que llevan a cabo la reparación
de errores de apareamiento (véase fig. 18-36). El cuadro 18-6
resun1e algunas enfermedades genéticas asociadas con reparación
defectuosa del DNA. l..!►:...!:!!:!!!!::!!i!!:!.!~~!:=!!'=:!:~!::!=~~
CONCEPTOS
Los defectos de reparación del DNA son la causa de base de varias
enfermedades genéticas. Muchas de estas enfermedades se caracte-
rizan por predisposición al cáncer.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 11
¿Por qué los defectos de reparación del DNA a menudo se asocian
con aumentos del cáncer?
526 CAPITULO 18

Cuadro 18-6 Enfermedades genéticas asociadas con defectos de los sistemas de reparación del DNA

Enfermedad Síntomas Defecto genético

Xerodermia pigmentosa Manchas similares a pecas en la piel, sensibi lidad a la luz Defectos de la reparación por escisión de
solar, predisposición al cáncer de piel nucleótidos

Síndrome de Cockayne Enanismo, sensibilidad a la luz solar, envejecimiento pre- Defectos de la reparación por escisión de
maturo, sordera, discapacidad intelectua l nucleótidos

Tricotiodistrofia Cabello quebradizo, anormalidades cutáneas, talla baja, Defectos de la reparación por escisión de
desarrol lo sexual inmaduro, rasgos faciales característicos nucleótidos

Cáncer de colon hereditario Predisposición al cáncer de colon Defectos de la reparación de errores de apa-
sin pol iposis reamient o

Anem ia de Fanconi Hiperpigmentación de la piel; anomalías esqueléticas, car- Posiblemente, defectos de la reparación de
díacas y renales; predisposición a la leucemia los enlaces cruzados entre las cadenas

Síndrome de Li-Fraumeni Predisposición al cáncer en muchos tejidos diferentes Defectos de la respuesta al daño del DNA

Síndrome de Werner Envejecimiento prematuro, predisposición al cáncer Defecto de la recombinación homóloga

■ Las mutaciones son cambios hereditarios de la información
genética. Las mutaciones somáticas afectan las células somáti-
cas; las mutaciones de la línea germinal se producen en las
células que dan origen a los gametos.
■ El tipo más simple de mutación es una sustitución de bases,
un ca1ubio de un único par de bases del DNA. Las transicio-
nes son sustituciones de bases en las que las purinas son
reemplazadas por purinas o las piri1nidinas son reemplazadas
por pirirnidinas. Las transversiones son sustituciones de bases
en las que una purina reempl aza a una pirimidina o una piri-
rnidina reemplaza a una pu1ina.
■ Las inserciones consisten en la adición de nucleótidos, y las
deleciones consisten en la eliminación de nucleótidos; estas
mutaciones a menudo cambian el m arco de lectura del gen.
■ La expansión por repetición de nucleótidos son mutaciones en
las que el nún1ero de copias de un conjunto de nucleótidos
aumenta con el transcurso del tiempo; son responsables de
varias enfermedades genéticas humanas.
■ Una mutación de sentido erróneo modifica la secuencia de
codificación, de manera que sustituye un aminoácido por
otro. Una mutación terminadora can1bia un codón que especi-
fica un a1uinoácido por un codón de ter1ninación. Una muta-
ción sil enciosa produce un codón sinónimo que especifica el
mismo aminoácido que la secuencia original, mientras que
una mutación neutral altera la secuencia de ami noácidos,
pero no cambia el funcionamiento de la proteína. Una muta-
ción supresora revierte el efecto de una 1nutación previa en
un lugar diferente y puede ser intragénica (dentro del 1nismo
gen que la mutación original) o intergénica (dentro de un gen
■ Algunas mutaciones son espontáneas. Estas mutaciones con-
sisten en errores de apareamiento de bases durante la replica-
ción, y despurinación y desaminación espontáneas.
■ Las inserciones y deleciones pueden deberse a deslizamiento
de las cadenas durante la replicación o a entrecruzamiento
desigual.
■ Los análogos de bases pueden incorporarse en el DNA duran-
te el cur so de la replicación y aparearse con la base incorrecta
en ciclos ulteriores de replicación. Los agentes alquilantes y la
hidroxilamina modifican la estructura qu.ímica de las bases e
inducen mutaciones. Los agentes intercalantes se insertan en
la molécula de DNA y causan adiciones y deleciones de
nucleótido único. L as reacciones oxidativas modifican la
estructura quúnica de las bases.
■ La radiación ionizante es mutágena, altera la estructura de las
bases y rompe los enlaces fosfodiéster. La luz ultravioleta pro-
duce dín1eros de pirimidina, que bloquean la replicación. Las
bacterias utilizan la respuesta SOS para superar los bloqueos
de replicación provocados por los dímeros de pirimidina y
otras lesiones del DNA.
■ La prueba de Ames utiliza bacte1ias para evaluar el potencial
mutágeno de las sustancias químicas.
■ Los elementos transponibles son secuencias de DNA móviles
que se insertan en numerosas localizaciones dentro de un ge-
noma y suelen causar mutaciones y reordenamientos del DNA.
■ La mayoría de los elementos transponibles tienen dos caracte-
rísticas comunes: repeticiones invertidas terminales y genera-
ción de repeticiones directas cortas del DNA en el punto de
• •

1nserc1on.
✓

diferente).
■ La transposición puede tener lugar a través de una molécula
■ La tasa de mutación es la frecuencia con la que aparece una de DNA o a través de la producción de una molécula de
determinada m utación en una población. Factores genéticos y mRNA que, por transcripción inversa, produce DNA. La
ambientales influyen en las tasas de mutación. transposición puede ser replicativa, en la que el ele1nento
 Mutaciones génicas y reparación del DNA 527

transponible es copiado y la copia se mueve a un nuevo sitio,
o no replicativa, en la que el elemento transponible es escindi-
do del sitio antiguo y se traslada a un nuevo sitio.
■ Los retrotransposones se transponen a través de moléculas de
RNA que son sometidas a transc1ipción inversa para producir
DNA.
■ Las secuencias de inserción son pequeños elementos transpo-
nibles bacterianos que transpo1ta11 solo la información necesa-
ria para su propio movin1iento. Los transposones compuestos
de las bacterias son e lementos más complejos que consisten
e n DNA entre dos secuencias de inserción. Algunos elementos
transponibles complejos de las bacterias no contienen secuen-
cias de inserción.
■ En las células eucariontes, los transposones de DNA son simi-
lares a los hallados en las bacterias, terminan en repeticiones
invertidas cortas y producen repeticiones directas flanqueantes
en el sitio de inserción. Otros son re trotransposones, de es-
tructura similar a los retrovirus y que se transponen mediante
RNA intern1ediarios.
■ Los transposones han desempeñado un papel importante en la
evolución del geno1na.
■ La mayor parte del daño del DNA se corrige mediante meca-
nismos de reparación del DNA. Estos rn.e canismos incluyen
reparación de errores de apareamiento, reparación directa,
reparación por escisión de bases, reparación por escisión de
nucleótidos y otras vías de reparación. La mayoría requiere
dos cadenas de DNA y exhibe cierto solapanúe nto en Los tipos
de daño re parado.
■ Las roturas bicatenarias se reparan mediante recombinación
homóloga y unión de extren1os no hon1ólogos. DNA polime-
rasas translesión especiales pernliten que la replicación proce-
da más allá de distorsiones voluminosas del DNA.
■ Los defectos de reparación del DNA son la causa de base de
varias enfermedades genéticas.

TÉRMINOS IMPORTANTES

agente íntercalante (p. 508)
análogo de base (p. 506)
deleción (p. 496)
deleción en el marco de
lectura (p. 496)
desaminación (p. 505)
desliza1niento de las cadenas
(p. 504)
despurinación (p. 504)
dímero de pirinúdina (p. 508)
disgenesia híbrida (p. 517)
ele1nento transpo11ible (p. 5 11)
entrecruzanúento desigual
(p. 504)
error incorporado (p.504)
error replicado (p. 504)
expansión por repetición de
nucleótidos (p. 496)
inserción (p. 496)
inserción en el marco de
lectura (p. 496)
mutación (p. 494)
mutación adaptativa (p. 503)
mutación condicional (p. 498)
mutación de ganancia de fun-
ción (p. 498)
mutación de la línea germinal
(p. 495)
mutación de pérdida de fun-
ción (p. 498)
1nutación de sentido erróneo
(p . 498)
mutación del n1arco de lectura
(p . 496)
mutación directa (p. 497)
mutación espontánea (p. 503)
mutación génica (p. 495)
mutación inducida (p. 503)
mutación inversa (reversión)
(p. 498)
mutación letal (p. 498)
mutación neutral (p. 498)
mutación silenciosa (p. 498)
mutación s01nática (p. 494)
mutación supresora (p. 498)
mutación supresora intergénica
(p. 500)
mutación supresora intragénica
(p. 499)
n1utación terminadora (p. 498)
mutágeno (p. 506)
prueba de Ames (p. 509)
reparación directa (p. 522)
reparación por escisión de
bases (p. 522)
reparación por escisión de
nuc1eótidos (p. 523)
repetición directa flanqueante
(p. 511)
repetición invertida ternlioal
(p. 511)
retrotransposón (p . 51 2)
secuencia de inserción (IS)
(p. 514)
sistema SOS (p. 509)
sustitución de bases (p. 495)
tasa de mutación (p. 502)
transición (p. 495)
transposasa (p. 512)
transposición (p. 512)
transposició n no replicativa
(p. 512)
transposición replicativa (p. 512)
transposón compuesto (p. 515)
transposón de DNA (p. 512)
transversión (p. 495)

l. c tarde, la replicación de los fragmentos monocatenarios de

2. Una mutación inversa restablece el fenotipo original al cam-
biar la secuencia de D NA a la secuencia de tipo silvestre.
Una mutación supresora restablece el fenotipo al causar un
cambio adicional del DNA en un sitio diferente del de la
mutación 01iginal.
3. La frecuencia con la que surgen cambios en el DNA, la fre-
cuencia con que estos cambios son reparados por mecanis-
mos de reparación del DNA y nuestra capacidad de detectar
la mutación.
4. c
5. En la transposición, se realizan cortes escalonados en el
DNA, y el elemento transponible se inserta en el corte. Más
DNA crea repeticiones directas flanqueantes cortas a uno y
otro lado del elemento transponible ínse11ado.
6. La transposición suele causar mutaciones porque el elemento
transponíble se inserta en un gen y destruye su función. Se
producen reordenamientos cromosómicos porque la transpo-
sición incluye la rotura y el intercambio de secuencias de
DNA. Además, múltiples copias de un elemento transponible
pueden ser sometidas a recombinación homóloga, lo que pro-
duce reordenanúentos cromosónlicos.
7. d
8. a
9. d
 528 CAPITULO 18

10. Los mecanismos de reparación directa restablecen la estruc-
tura correcta de una base alterada sin eliminar ni reemplazar
n ucleótidos. L a reparación de errores de apareamiento y la
reparación por escisión de bases eliminan y reemplazan
nucleótidos.
11. Los cambios de la estructura del DNA pueden no ser repa-
rados en personas con defectos de los mecanismos de re-
paración del DNA. En consecuencia, aumenta del número
de 1n utaciones en todos los genes, incluidos aquellos q ue
predisponen al cáncer. Esta observación in dica que el cán-
cer se origina en mutaciones del DNA.

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
L as mutaciones producidas por los siguientes compuestos son revertidas por las sustancias mostra-
das. ¿Q ué conclusiones puede extraer acerca de la naturaleza de las mutaciones producidas origi-
nal mente por estos compuestos?
Revertidas por
Mutaciones
producidas 5- Naranja
por compuesto bromouracilo EMS Hidroxi1amina de acridina
a. 1 Sí Sí No No
b. 2 Sí Sí Algunas No
c. 3 No No No Sí
d. 4 Sí Sí Sí Sí

Estrategia de solución C • G ➔ T • A, sabemos que el compuesto 1 no genera

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Las conclusiones que p ueda extraer acerca de los tipos de
mutaciones provocadas por cada compuesto sobre la base de
las sustancias que las revierten .
¿Qué información se proporciona para resolver los problemas?
Qué sustancias revierten las mutaciones causadas p or cada
compuesto.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Mutaciones inducidas químicamente en la Sección 18.2.
Pasos de la solución
a. Las mutaciones producidas p or el compuesto 1 son reverti-
das por 5-bromouracilo, que produce transiciones tan to A •
T ➔ G • C como G • C ➔ A • T, lo que nos dice que
Pista: la capaci- el compuesto 1 produce sustituciones de una sola
dad de diversos
base que p ueden incluir la generación de pares A • T
compuestos de
provocar muta- o G • C. Las 1n utaciones provocadas por el compues-
dones inversas to 1 ta1nbién son revertidas por EMS, que, al igual
revela informa- que el 5-bromouracilo, produce transiciones A • T ➔
ción importante
acerca del carác- G • C y G • C ➔ A • T; por lo tanto, aquí no se apor-
ter de la muta- ta información adicional. La hidroxilamina no revier-
ción original.
te las mutaciones producidas por el co1npuesto l.
Con10 la hidroxilamina produce solo transjciones
pares de bases C • G. El naranja de acridina, un agente
intercalante que causa mutacio11es del marco de lectura,
tampoco revierte las mutaciones, lo que revela que el com-
puesto l produce solo sustituciones de un único par de
bases, no inserciones ni deleciones. En resumen, el com-
puesto 1 parece causar susti tuciones de una sola base que
generan pares de bases T • A pero no G • C.
b. El compuesto 2 genera mutaciones que son revertidas por
5- bromouracilo y EMS, lo que indica que puede producir
pares de bases G • C o A • T. Algunas de estas 1n utaciones
son revertidas por hidroxilamina, que produce solo transi-
ciones C • G ➔ T • A, lo que in dica qu e algunas de las
mutaciones producidas por el compuesto 2 son pares de
bases C • G. Ninguna de las mutaciones es revertida por
naranja de acridina; por lo tanto, el compuesto 2 no induce
inserciones o deleciones. E n resumen, el con1puesto 2 pro-
duce sustituciones de una sola base que generan pares de
bases G • C y A • T.
c. El compuesto 3 provoca mutaciones que solo revíerten con
naranja de acridin a, de manera que el compuesto 3 parece
producir únicam.e nte inserciones y deleciones.
d. Las mutaciones inducidas por el compuesto 4 son reve1tidas
por 5 bromouracilo, EMS, hidroxilamina y n aranja de acri-
din a, lo que in dica que este co1npuesto produce sustituciones de
una sola base, que incluyen pares de bases G • C y A • T, inser-
ciones y delecion es.

Problema 2
En los eucariontes, ciertas secuencias repetidas son flanq ueadas por repeticiones directas cortas, lo
que sugiere que se originaron como ele.mentas transponibles. Estas mismas secuencias carecen de
intrones y tienen una cadena de nucleótidos de timina en un extremo. ¿Estos elementos se han
transpu esto a través de secuencias de DNA o de RNA? Explique su razonamiento.

Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Sí el elemento transponible se transpone a través de DNA o de
un RNA Í11termediario y por qué llegó a esa conclusión.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
■ El elemento está flanqueado por repeticiones directas cortas.
■ El elemento carece de intrones y tiene una cadena de T en
un extremo.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Transposición en la Sección 18.4.
Sección 18.1
l. ¿Cuál es la diferencia entre una transición y una transver-
sión? ¿Qué tipo de sustitución de bases suele ser más fre-
cuente?
2. Describa en forma sucinta la expansión por repetición de
nucleótidos. ¿Cómo explica el fenómeno de anticipación?
3. ¿ Cuál es la diferencia entre una mutación de sentido erróneo
y una mutación ternúnadora? ¿Entre una inutación silenciosa
y una mutación neutral?
4. Describa en forma sucinta dos maneras diferentes mediante
las cuales los supresores intragénicos pueden revertir los
efectos de las mutaciones.
Sección 18.2
4. ¿Cómo surgen las inserciones y las deleciones?
6. ¿De qué manera inducen mutaciones los análogos de base?
7. ¿Cómo provocan mutaciones los agentes alquilantes, el ácido
nitroso y la hidroxilamina?
Sección 18.3
8. ¿Cuál es el propósito de la prueba de Ames? ¿Cómo se utili-
zan Jas bacte1ias his- en esta prueba?
Sección 18.1
17. Un codón que especifica el aminoácido Gly sufre una sus-
titución de una sola base que se convíe1t e en una mutación
terminadora. De acuerdo con el código genético presenta-
do en la figura 15-10, ¿es esta mutación una transición o
una transversión? ¿En qué posición del codón se produce
la mutación?
M ut aciones génicas y reparación del DNA 529
Pasos de la solución
La ausencia de intrones y la cadena de nucleóti- Recuerde: los
premRNA en
dos de timina (que serían complem entarios de los eucariontes
nucleótidos de adenjna del RNA) en un extremo se procesan: se
agrega un cas-
son características del RNA procesado. Estas quete 5', se eli-
similitudes con el RNA sugieren que el elem ento minan intrones
fu e transcrito originalmente a mRNA, fue proce- y se agrega una
sado para eliminar los intrones y añadir una cola
cola poli(A) 3 '.
de poli(A), y después fue sometido a transcripción inversa
para formar un DNA complementario que se insertó en el ero-
mosoma.
Sección 18.4
9. ¿Qué características generales se encuentran en muchos ele-
mentos transponibles?
10. ¿Cómo se mueve un retrotransposón?
11. Dibuje la estructura de una secuencia de inserción típica e
identifique sus partes.
12. Explique de qué manera los elementos Ac y D s producen
granos de maíz multicolores.
13. ¿ Cuáles son algunas diferencias entre los elementos trans-
poníbles de clase I y clase II?
14. ¿Por qué suelen denominarse parásitos genómicos a los ele-
mentos transponibles?
Sección 18.5
15. Enumere por lo menos tres tipos diferentes de reparación
del DNA y explique de manera sucinta cómo se realiza
cada uno.
16. ¿Cuáles son los dos mecanismos principales para reparar las
ronu-as bicatenarias? ¿En qué se diferencian?
*18 a. Si se produce una única transición en un codón que
especifi ca Phe, ¿qué anúnoácidos pueden ser especifi-
cados por la secuencia mutada?
b. Si se produce una única transversión en un codón que
especifica Phe, ¿qué anúnoácidos pueden ser especifi-
cados por la secuencia mutada?
530 CAPITULO 18
c. Si se produce una única transición en un codón que
especifica Leu, ¿qué aminoácidos pueden ser especifi-
cados por la secuencia 1nutada?
d. Si se produce una única transversión en un codón que
especifica Leu, ¿qué aminoácidos pueden ser especifi-
cados por la secuencia mutada?
19. La hemoglobina es una proteína compleja que contiene
cuatro cadenas polipeptídicas. La hemoglobina normal
hallada en adultos (denominada hemoglobina adulta) con-
siste en dos cadenas polipeptídicas alfa y dos beta, que
son codificadas por diferentes locus. La hemoglobina dre-
panocítica, que causa anemia drepanocítica, se debe a una
mutación de la cadena beta de la hemoglobina adulta. La
hemoglobina adulta y la hemoglobina drepanocítica difie-
ren en un único aminoácido: el sexto aminoácido de un
extremo de la hemoglobina adulta es el ácido glutámico,
1nientras que la he1noglobina drepanocítica tiene valina en
esta posición. Después de consultar el código genético
presentado en la figura 15-10, indique el tipo y la locali-
zación de la 1nutación que dio origen a la anemia drepano-
cítica.
20. Se halla la siguiente secuencia de nucleótidos en la cadena
molde de DNA. Primero, determine los aminoácidos de la
proteína codificada por esta secuencia utilizando el código
genético presentado en la figura 15-10. Después, dé la
secuencia de aminoácidos alterada de las proteínas que se
hallará en cada una de las siguientes mutaciones.
Secuencia
delDNA
1nolde
L 3 1-TAC TGG CCG TTA GTT GAT ATA ACT-5 '
r 1 M produzca la proteína de longitud completa. Con la 1nuta-
Nún1ero
de nucleótidos
a. Mutante 1: una transición en el nucleótido 11
b. Mutante 2: una transición en el nucleótido 13
c. Mutante 3: una deleción de un nucleótido en el nucleó-
tido 7
d. Mutante 4: transversi.ón A T ➔ A en el nucleótido 15
e. Mutante 5: una adición de TGG después del nucleótido 6
f. Mutante 6: una transición en el nucleótido 9
21. Dibuje un giro de una horquilla como el mostrado en la
figura 18-5 para la secuencia repetida hallada en el sín-
drome del cromosoma X frági l (véase cuadro 18-1).
*22. Un polipéptido tiene la siguiente secuencia de aminoáci-
dos:
Met-Ser-Pro-Arg-Leu-Glu-Gly
Se determinó la secuencia de aminoácidos de este polipép-
tido en una serie de mutantes enumerados en las partes a a
e. Para cada mutante, indique el tipo de mutación que se
produjo en el DNA (sustitución de una sola base, inser-
ción, deleción) y el efecto fenotípico de la mutación
(mutación terminadora, mutación de sentido erróneo, del
marco de lectura, etc.).
a. Mutante 1: Met-Ser-Ser-Arg-Leu-Glu-Gly
b. Mutante 2: Met-Ser-Pro
c. Mutante 3: Met-Ser-Pro-Asp-Trp-Arg-Asp-Lys
d. Mutante 4: Met-Ser- Pro-Glu-Gly
e. Mutante 5: Met-Ser-Pro-Arg-Leu-Leu-Glu-Gly
*23. Un gen codifica una proteína con la siguiente secuencia de
aminoácidos:
Met-Trp-His-Arg-Ala-Ser-Phe
Se produce una mutación en el gen. La proteína mutante
tiene la siguiente secuencia de aminoácidos:
Met-Trp-His-Ser-Ala-Ser-Phe
Un supresor intragénico restablece la secuencia de a1nino-
ácidos a la de la proteína original:
Met-Trp-His-Arg-Ala-Ser-Phe
Dé por lo menos un ejemplo de cambios de bases que
podría producir la mutación original y el supresor intragé-
nico. (Consulte el código genético de la figura 15-10).
24. Un gen codifica una proteína con la siguiente secuencia de
aminoácidos:
Met-Lys-Ser-Pro-Ala-Thr-Pro
En este gen, se produce una mutación terminadora por una
sustitución de un único par de bases, lo que da por resulta-
do una proteína con la secuencia de aminoácidos Met-Lys.
Una mutación supresora intergénica permite que el gen
ción original y la mutación supresora intergénica presen-
tes, el gen produce ahora una proteína con la siguiente
secuencia de aminoácidos:
Met-Lys-Cys-Pro-Ala-Thr-Pro
Indique la localización y el carácter de la mutación origi-
nal y la mutación supresora intergénica.
Sección 18.2
*25. ¿Las mutaciones terminadoras pueden ser revertidas por la
hidroxilamina? ¿Por qué o por qué no?
26. En un segmento corto de DNA, se encuentra la siguiente
secuencia de nucleótidos:
5'-ATGT-3'
3'-TACA-5'
Si esta secuencia se trata con hidroxilainina, ¿qué secuen-
cias se obtendrán después de la replicación?
*27. En un segmento corto de DNA, se encuentra la siguiente
secuencia de nucleótidos:
5'-AG-3'
3'-TC-5'
 Mutaciones génicas y reparación del DNA 531

a. Mencione todas las secuencias mutantes que pueden 31. ¿Qué conclusiones extraería si el número de colonias bac-
resultar de la despurinación espontánea de este segmen- terianas de la figura 18-22 fuera el mismo en la placa
to de DNA. control que en la placa de tratamiento? Explique su razo-
b. Mencione todas las secuencias mutantes que pueden namiento.
resultar de la desaminación espontánea de este segmen- 32. Un instructor de genética diseña un experimento de labo-
to de DNA. ratorio para estudiar los efectos de la radiación UV sobre
28. En muchos organismos eucariontes, una proporción signi- la mutación en las bacterias. En el experimento, los estu-
ficativa de bases citosina son 1netiladas naturalmente a 5- diantes exponen bacterias sembradas en placas de Petri a
metilcitosina. Durante la evolución, aumenta la proporción luz UV durante períodos de diferente duración, colocan
de pares de bases AT del DNA de estos organismos. las placas en una incubadora durante 48 horas y después
¿Puede sugerir un posible n1ecanis1no para este au1nento? contabilizan el nún1ero de colonias que aparecen en cada
placa. Las placas que han recibido más radiación UV
deberían tener más dí1neros de pirimidina, que bloquean la
Sección 18.3 replicación; por consigu iente, deberían apai-ecer menos
colonias en las placas expuestas a luz UV por períodos
*29. Un químico sintetiza cuatro compuestos químicos nuevos
más prolongados. Antes de que los estudiantes realicen el
en el laboratorio y los denomina PFll , PFI2, PFI3 y PFI4.
experünento, el instructor les advierte que, mientras las
Le entrega los compuestos PFI a una genetista amiga y le bacterias estén en la incubadora, no deben abrir la pue1ta
pide que determine su potencial n1utágeno. La genetista
de esta a menos que la habitación esté a oscuras. ¿Por qué
observa que los cuatro son altamente mutágenos. También
no se debe exponer a las bacterias a la luz?
investiga la capacidad que tienen las mutaciones produci-
das por los compuestos PFI para ser revertidas por otros
n1utágenos conocidos y obtiene los siguientes resultados. Sección 18.4
¿Qué conclusiones puede extraer acerca de la naturaleza
de las mutaciones provocadas por estos compuestos? *33. Un elemento transponible particular genera repeticiones
directas flanqueantes de 4 pb de longitud. Indique la
Revertidas por
secuencia que se hallará a ambos lados del elemento trans-
ponible si este se inserta en la posición indicada en cada
,
Mutaciones 2-amino- Acido Hidroxi- Naranja de una de las siguientes secuencias.
producidas porpurina nitroso lamina de acridina
a. Elemento
transpo nible
PFI1 Sí Sí Algunas No
PFI2
PFI3
PFI4
No
Sí
No
No
Sí
No
No
No
No
No
No
Sí
""
l.._- r--¡
5'- ATTCGAACTGACCGATCA-3'
b. Elemento
30. Mary Alexander estudió los efectos de la radiación sobre transponible
tz;_" las tasas de 1nutación en los espermatozoides de \
º'ºA'º' Drosophila melanogaster. Irradió larvas de Drosophlla con
3000 roentgens (r) o con 3975 r, recolectó los machos
._____r-i
adultos que se desarrollaron a partir de las larvas irradia- 5'- ATTCGAACTGACCGATCA-3'
das, los apareó con hembras no üradiadas y después contó 34. En la Drosophila melanogaster, los ojos blancos se deben
la cantidad de 1noscas mutantes F 1 producidas por cada a una mutación recesi va ligada al cromosoma X. En oca-
1nacho. Todas las moscas mutantes que aparecieron se uti- siones, los mutantes de ojos blancos dan origen a descen-
lizaron en cruzamientos posteriores para determinar si sus dientes que tienen ojos blancos con pequeñas manchas
fenotipos mutantes eran genéticos. Obtuvo los siguientes rojas. El número, la distribución y el tamaño de las man-
resultados (M. L. Alexander. 1954. Genetics 39:409-428). chas rojas son variables. Explique por qué un elemento
transponible pod1ia ser responsable de este fenó1neno de
Número Descendencia moteado.
de con una
descendientes mutación genética
35. ¿Qué factor podría determinar potencialmente la longitud
Grupo
de las repeticiones directas flanqueantes que se producen
Control (O r) 45 504 o en la transposición?
In:adiado (3000 r) 49 512 71 *36. ¿Cuál de los siguientes pares de secuencias podrían hallar-
Irradiado (3975 r) 50 159 70 se en los extremos de una secuencia de inserción?

a. Calcule las tasas de mutación del grupo control y de a. 5 '-GGGCCAATT-3' y 5'-CCCGGTTAA-3'

los dos grupos de n1oscas i1radiadas. b. 5'-AAACCC'l'l"l'-3' y 5'-AAAGGG'l'l'l'-3'
b. Sobre la base de estos datos, ¿considera que la radia- c. 5'-TTTCGAC-3' y 5'-CAGCTTT-3'
ción tiene algún efecto sobre la n1utación? Explique su d. 5'-ACGTACG-3' y 5' -CGTACGT-3'
respuesta. e. 5'-GCCCCAT-3' y 5'-GCCCAT-3 '
 532 CAPITULO 18
37. Explique por qué el grano de maíz de la figura 18-34d es
1nulticolor, con algunas zonas coloreadas y otras que ca.re-
cen de pigmento.
*38. Se aparean dos cepas diferentes de Drosophila melanogas-
ter en cruzamientos recíprocos. Cuando los machos de la
cepa A se cruzan con hembras de la cepa B, la progenie es
normal. En cambio, cuando se cruzan he1nbras de la cepa
A con 1nachos de la cepa B, hay muchas mutaciones y
reordenamientos cromosómicos en los gametos de la pro-
genie Fl, y la generación F l es efectivamente estéril.
Explique estos resultados.
39. Una secuencia de inserción contiene una deleción grande
en su gen de transposasa. ¿En qué circunstancias se podría
transponer esta secuencia de inserción?
40. La zidovudina (AZT) es un fármaco empleado para tratar
a pacientes con sida. La AZT actúa bloqueando la enzima
transcriptasa inversa usada por el virus de la inmunodefi-
ciencia humana (HIV), el agente etiológico del sida.
¿Espera que la AZT ejerza algún efecto sobre los eletn en-
tos transponibles? De ser así, ¿qué tipo de elemento trans-
ponible sería afectado y cuál sería el efecto más probable?
41. Se observa un elemento transponible que codifica una
enzima transcriptasa inversa. Sobre la base de esta obser-
vación, ¿qué conclusiones puede extraer acerca de la pro-
bable estructura y el 1nétodo de transposición de este ele-
mento?
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 18.1
45. Robert Bos y Richard Cribbs estudiaron una cepa de E.
l,;.""USIS coli (araB14) que poseían una mutación terminadora en el
!,·º~ gen estructural que codifica L-ribulocinasa, una enzi 1na
que permite que las bacterias metabolicen el azúcar arabi-
nosa (R. Bost y R. Cribbs. 1969. Genetics 62:1-8). A par-
tir de la cepa araB14, aislaron algunas bacterias que pose-
ían mutaciones que inducían reversión al tipo silvestre. El
análisis genético de estos revertantes mostró que contenían
dos mutaciones supresoras diferentes. Una mutación
supresora (Rl) estaba ligada a la mutación 01iginal de
L-ribulocinasa y, probablemente, ocupaba el mismo locus.
Por sí misma, esta mutación permitía la producción de
L-ribulocinasa, pero la enzima no era tan eficaz para n1eta-
bolizar arabinosa co1no la enzima codificada por el alelo
de tipo silvestre. La segunda mutación supresora (SuB) no
estaba ligada a la mutación origi nal. En conjunto con la
mutación Rl , SuB permitía la producción de L-ribulocina-
sa, pero Su8 por sí misma no era capaz de suprimir la
mutación original.
a. Sobre la base de esta información, ¿las mutaciones Rl y
Su 8 son supresores intragénicos o intergénicos? Explique
su razonamiento.
b. Proponga una explicación para el modo en que Rl y Su 8
restablecen la capacidad de araB14 de metabolizar arabi-
nosa y por qué Su8 es capaz de restablecer en mayor
grado esta capacidad.
*42. Un genetista examina una espiga de maíz en la que la
mayoría de los granos son amarillos, pero encuentra unos
pocos granos con manchas de color púrpura, con10 se
muestra aquí. Dé una posible explicación para la aparición
de las manchas de color púrpura en estos granos por lo
demás amarillos y explique sus diferentes tamaños. (Pista:
véase la sección sobre elementos Ac y Ds del maíz).
Sección 18. 5
43. ¿ Qué mecanismo de reparación del DNA tendría mayor
probabilidad de corregir el error incorporado 1narcado por
el balón 2 en la figura 18-11?
*44. Un productor de plantas desea aislar mutantes de los
tomates que presentan defectos en la reparación del DNA.
Sin embargo, no tiene la experiencia ni el equipo para
estudiar las enzin1as de los sistemas de reparación del
DNA. ¿Có1no puede el productor identificar las plantas de
tomates con deficiencias en la reparación del DNA? ¿ Qué
rasgos debe buscar?
46. La acondroplasia es un trastorno autos6mico dominante
caracterizado por talla baja desproporcionada: las piernas y
los brazos son cortos en comparación con la cabeza y el
tronco. El trastorno se debe a una sustitución de bases en el
gen del receptor 3 del factor de crecimiento de fibroblastos
(FGFR3). Si bien sin dudas la acondroplasia se hereda
como un rasgo autosómico dominante, más del 80% de los
individuos con acondroplasia nacen de padres con talla nor-
mal. Este alto porcentaje indica que la n1ayoría de los casos
son causados por mutaciones nuevas; estos casos (no hereda-
dos de un progenitor afectado) se denominan esporádicos.
Algunos estudios han demostrado que los casos esporádicos
de acondroplasia son causados casi siempre por mutaciones
heredadas del padre (1nutaciones paternas). Además, la apa-
rición de acondroplasia es más alta en caso de padres año-
sos; alrededor del 50% de los niños con acondroplasia
nacen de padres ,nayores de 35 años de edad. No hay nin-
guna asociación con la edad materna. La tasa de mutación
para la acondroplasia (aproximada-
mente 4 x 10- 5 mutaciones por
gan1eto) es alta en comparación
con la de otros trastornos genéti-
cos. Explique por qué la mayoría
de las n1utaciones espontáneas
para acondroplasia son de origen
paterno y por qué la aparición de Una familia de tres miem-
este trastorno es más alta cuando bros que presentan acon-
los padres tienen mayor edad. droplasia. (Gail Burton/AP).

47. La enfermedad de Tay-Sachs es una enfermedad genética
autosómica recesiva, grave, que provoca sordera, ceguera,
convulsiones y, finalmente, la 1nuerte. La enfermedad se
debe a un defecto del gen HEXA, que corufica hexosamíni-
dasa A. En condiciones normales, esta enzima degrada los
gangliósidos GM2. En ausencia de h exosaminidasa A , hay
acumulación encefálica de gangliósidos GM2 . Los resulta-
dos de estudios moleculares recientes mostraron que la
1nutación más frecuente que causa la enfermedad de Tay-
Sachs es una inserción de 4 pb que produce un codón de ter-
minación prematuro en dirección 3' . Los resultados de otros
estudios han revelado que la transcripción del gen HEXA es
normal en p ersonas que tienen enfermedad de Tay-Sach s,
pero el mRNA de HEXA es inestable. Proponga un meca-
nis1no que explique la manera en que un codón de termina-
ción prematuro podría causar inestabilidad del 1nRNA.
48. Ocre y ámbar son dos tipos de mutaciones terminadoras.
Antes de que se descifrara el código genético, Sydney
Brenner, Anthony O. Stretton y Samuel Kaplan aplicaron
diferentes tipos de mutágenos a bacte1iófagos para tratar de
determinar las bases presentes en los codones responsables
de las mutaciones ámbar y ocre. Sabían que los mutantes
ocre y ámbar eran sup1imidos por distintos tipos de m uta-
ciones, lo que demostraba que cada una corresp ondía a un
codón de terminación diferente. Obtuvieron los siguientes
resultados:
1) U na sustitución de una sola base podía convertir una
mutación ocre en una mutación ámbar.
2) L a hidroxilarnina indujo mutaciones tanto de ocre como
de ámbar en fagos de tipo silvestre.
3) L a 2-aminopurina hizo que ocre mutara a ámbar.
4) L a hidroxilamina no hizo que ocre mutara a ámbar.
Estos datos no per1niten descifrar la secuencia de
nucleótidos completa de los codones ocre y ámbar,
pero sí aportan cie1ta información acerca de las bases
halladas en las mutaciones terminadoras.
a. ¿ Qué conclusiones pueden extraerse sobre las bases
halladas en los codones de .l as 1nutaciones ocre y ámbar
a partir de estas observaciones?
Mutaciones génicas y reparación del DNA 533
b. De los tres codones de terminación (UAA, UAG, UGA),
¿cuál representa la mutación ocre?
Sección 18.3
49. Para determinar si la radiación asociada con los bombarde-
os atómicos de Hiroshuna y Nagasaki produjo mutaciones
de la línea germinal, los científicos examinaron la propor-
ción de sexos de los hijos de los sobrevivientes de las
explosiones. ¿Puede explicar por qué cabría esperar que un
aumento de las mutaciones de la línea germinal modificara
la proporción de sexos?
Sección 18.4
50. Marilyn Houck y Margaret Kidwell postularon que los ele-
k:.."'""' mentos P fueron transnútidos ~e Drosophila w_illistoni a
L~~ Drosophila rnelanogaster por acaros que se alimentaban de
moscas de la fruta (M. A. Houck y cols. 199 1. Science
253: 1125-1129) . ¿Qué evidencia cree que se requeriría para
demostrar que D. melanogaster adquirió elementos P de
esta 1nanera? Proponga una serie de experin1entos que pro-
porcionen esta evidencia.
Sección 18.5
51. La tricotiodístrofia es un trastorno hereditario humano
caracteri zado por envejeci miento prematuro, como osteopo-
rosis, osteosclerosis, encanecimiento prematuro, infertilidad
y di sminución de la expectativa de vida. Los resultados de
estudios mostraron que la 1nutación que causa este trastorno
se produce en un gen que codifica una DNA helicasa.
Proponga un mecanismo por el cual una mutación de una
DNA helicasa podría causar encanecimjento prematuro .
Asegúrese de relacionar los sínto1nas del trastorno con posi-
bles funciones de la enzima helicasa.
 19
Análisis genético molecular
y biotecnología

Ayudando a los ciegos a ver

La ingeniería genética (] a .manipulación y transferencia de

genes de un organismo a otro) ha revolucionado el estudio
de la genética y se ha utilizado de manera exitosa para crear
numerosos productos nuevos, incluidas bacterias que gene-
ran sustancias quín1icas, cultivos resistentes a plagas y ani-
males de granja que secretan productos farmacéuticos por su
leche. Quizá en su última aplicación, la ingeniería genética
se está aplicando para tratar enfermedades en seres huma-
nos, un proceso conocido como terapia génica. En 2007, en
un ejemplo espectacular de esta terapia, los investigadores
transfirieron genes a cuatro personas ciegas, que recuperaron
parcialmente su visión.
La visión es el más preciado de los sentidos hu manos; nos
permite leer, evitar obstáculos físicos, reconocer amigos y
disfrutar de la deslumbrante belleza visual del mundo natu-
ral. A menudo, la visión se deteriora con la edad; de hecho,
la mayor parte de la ceguera afecta a adultos mayores. Sin
embargo, algunos niños nacen ciegos, y otros pierden la
La ceguera afecta a 45 millones de personas en todo el mundo. En la
vista a una edad temprana. La investigación sugiere que la
actualidad, se está utilizando ingeniería genética para tratar a pacientes con
herencia es responsable de alrededor de la mitad de los
amaurosis congénita de Leber, una forma genética de ceguera. (Paul
Doyle/Alamy). casos de ceguera que ocurren antes de los 45 años de edad.
Dada la complejidad del oj o, sus nervios asociados y las par-
tes del cerebro que intervienen en la percepción visual, los
defectos de un gran número de genes pueden provocar ceguera.
Se ha aplicado terapia génica en una rara forma genética de ceguera conocida como amau-
rosis congénita de Leber (ACL), en Ja que hay una mutación de uno de una serie de genes res-
ponsables del desarroll o o la fun ción de los fotorreceptores de la retina. L a ACL se hereda
como un trastorno autosómico recesivo; en personas con dos copias defectuosas de un gen,
mueren las células que perciben la luz. Los niños con ACL comienzan a perder la visión en el
tnomento del nacüniento, y la mayoría de ellos son completamente ciegos a los 40 años de
edad.
Un tipo de ACL se debe a un defecto del gen RPE65, que cod ifica una enzima que ay uda a
convertir la vitamina A en rodopsina, un pigmento que absorbe Juz. Sin esa enzilna, no se pro-
duce rodopsina y las células fotorreceptoras se atrofian con el transcurso del tiempo. E n 1998,
los investigadores descubrieron que algunos pen·os swedish briard también tienen un defecto
de RPE65 y se quedan ciegos. L a investigación en estos perros posibilitó un mejor conoci-
miento de la n1anera en que los defectos de RPE65 causan ceguera y sugitió un posible trata-
miento: terapia génica. E n 2001, los investigadores trataron a tres perros jóvenes con terapia
génjca. La visión estos animales mejoró lo suficiente para que pudieran evitar objetos y 01ien-
tarse en un laberinto.

535
536 CAP[TULO 19

En 2007, investigadores de Pennsy lvania y Londres utilizaron terapia génica para tratar a cuatro
adu ltos jóvenes con ACL. Se inyectó a cada paciente un virus genéticamente modificado que porta-
ba una copia funcional de RPE65. Los resultados fueron notables: todos los pacientes mostraron
mejoría significativa de la percepción visual. Algunos que antes habían sido capaces de detectar
movimientos de las manos pudieron leer varias líneas de la tabla optométrica. Un paciente que no
había podido sortear obstáculos pudo abrirse canl.ino entre ellos. Los cuatro pacientes todavía cun1-
plian Jos criterios de ceguera legal, pero los resultados indicaron que la terapia génica puede ser
eficaz en la ACL. Ahora, los investigadores han recun·ido a terapia génica para tratar a más perso-
nas con ACL; los resultados han sido particularmente notables en pacientes más jóvenes, algunos
de los cuales tuvieron una mejoría de la visión suficiente como para poder practicar deportes.

E ste capítulo presenta algunas de las técnicas utilizadas en in-

geniería genética. Comenzamos considerando la tecnología
genética n1olecular y algunos de sus efectos. Luego, exanl.inamos
una serie de métodos empleados para aislar, estudiar, modifi car y
recombinar secuencias de DNA y colocarlas de nuevo en las célu-
las. Por último, exploramos algunas de las aplicaciones del análi-
sis genético molecular.
19.1 Las técnicas de genética molecular
revolucionaron la biología
En 1973, un grupo de científicos produjo los primeros organismos
con moléculas de DNA recombinante. Stanley Cohen en la
Stanford University, y Herbert Boyer y cols. en la University of
California School of Medicine at San Francisco insertaron un
fragmento de DNA de un plásmido en otro, lo que creó una molé-
cu la de DNA recombinante totalmente nueva. Después, inu·odu-
jeron el plásmido recombinante en células de E. coli. Estos expe-
1imentos iniciaron una de las revoluciones más trascendentales en
la historia de la ciencia.
La tecnología de DNA recombinante es un conjunto de técni-
cas moleculares para localizar, aislar, 1nodificar y estudiar seg-
mentos de DNA. Se utiliza el término recombinante porque a
menudo el objetivo es combinar DNA de dos fuentes distintas.
Por ejemplo, podrían unirse genes de dos bacterias diferentes o
podría insertarse un gen humano en un cromosoma viral. La tec-
nología de DNA recombinante, denominada con frecuencia inge-
niería genética, abarca en la actualidad numerosas técnicas
moleculares que pueden emplearse para analizar, modificar y
recombinar casi cualquier secuencia de DNA de una serie de
fuentes.
La revolución de la genética molecular
Las técnicas de la tecnología de DNA recombinante son solo
parte de una vasta serie de métodos moleculares existentes en la
actualidad. Estas técnicas moleculares han modificado en forma
drástica la manera de estudiar los genes. Antes, la inforn1ación
acerca de la estructura y la organización de los genes se obte1úa
examinando sus efectos fenotípicos, pero el análisis genético
n1olecular permite leer las propias secuencias nucleotídicas. Este
análisis aportó nueva información sobre la estructura y la función
de los genes y modificó muchos conceptos fundamentales de la
genética. Nuestro conocimiento detallado de procesos genéticos,
como replicación, transcripción, traducción, procesamiento del
RNA y regulación génica, se obtuvo mediante el uso de técnicas
genéticas moleculares. Estas técnicas también se utilizan en
muchos otros campos, como bioquünica, .microbiología, biología
del desan·ollo, neurobiología, evolución y ecología.
Asimismo, la tecnología de DNA recombinante y otras técnicas
moleculares se emplean para crear una serie de productos comer-
ciales, como fármacos, hormonas, enzimas y cultivos (fig. 19-1).
Alrededor de la aplicación de estas técni cas para crear nuevos
productos, ha crecido una industria completa: la biotecnología.
En medicina, la genética molecular se emplea para investigar la
naturaleza del cáncer, diagnosticar enfermedades genéticas e
infecciosas, producir fánnacos y tratar trasto1nos hereditarios.
CONCEPTOS
La genética molecular y la tecnología de DNA recombinante se utili-
zan para localizar, analizar, modificar, estudiar y recombinar secuen-
cias de DNA. Estas técnicas se emplean para investigar la estructura y
función de los genes, abordar interrogantes de mu chas áreas de la
biología, crear productos comerciales y diagnosticar y tratar enferme-
dades.
Trabajo a nivel molecular
La n1anipulación de genes a nivel 1nolecular plantea un desafío
se1io, que a menudo requiere estrategias que, al principio, pueden
no parecer obvias. El problema básico es que los genes son dimi-
nutos y que cada célula contiene miles de ellos. No es posible
visualizar los nucleótidos individuales, y ninguna característica
física marca el comienzo o el final de un gen.
Considere1nos una situación típica a la que se enfrenta un gene-
tista molecular. Supongamos que deseamos utilizar bacterias para
producir grandes cantidades de una proteína humana. El p1imer
problema y el más formidable es hallar el gen que codifica la pro-
teína deseada. Un genoma haploide humano está formado por
3200 1nillones de pares de bases de DNA. Asu1namos que el gen
que queremos aislar tiene 3000 pb de longitud. Nuestro gen diana
ocupa solo una millonésima parte del genoma, de manera que su
búsqueda en la enorme extensión de DNA genó1nico es más difí-
cil que buscar la proverbial aguja en un pajar. Pero incluso si po-
demos localizar el gen, ¿cómo lo separamos del resto del DNA?

Figura 19-1. Se ha empleado tecnología de DNA recombinante para
crear cultivos modificados genéticamente. El maíz genomanipulado
representa ahora el 88% del maíz cultivado en los Estados Unidos. (Chris
Knapton/Photo Researchers).
Si consiguiéramos localizar y aislar el gen deseado, después
necesitaríamos insertarlo en una célula bacteriana. Los frag1nen-
tos lineales de DNA son degradados con rapidez por las bacterias,
de n1anera que el gen debe insertarse en una forma estable.
Asimismo, debe ser capaz de replicarse con éxito o no será trans-
ferido cuando la célula se divida. Si tenemos éxito para transferir
nuestro gen a bacterias en una forma estable, todavía debemos
garantizar que el gen se transcriba y se traduzca de la manera
apropiada.
Por últilno, los n1étodos e1npleados para aislar y transferir
genes son ineficientes y, de un millón de células que son someti-
das a estos procedimientos, podría ser que solo una célula capta-
ra y expresara con éxito el gen humano. Por lo tanto, debemos
investigar muchas células bacterianas para hallar la que contiene
el DNA recombinante. Regresamos al problema de la aguj a en el
paJ ar.
Aunque estos proble1nas podrían parecer insalvables, se han
desarrollado técnicas moleculares para superarlos. Los genes
humanos se transfieren de manera sistemática a células bacteria-
nas, donde se expresan.
CONCEPTOS
Los análisis genéticos moleculares requieren métodos especiales, por-
que los genes individuales representan una pequeña fracción del DNA
celular y no pueden ser visualizados.
19.2 Las técnicas moleculares se usan
para aislar, recombinar y amplificar genes
U n primer paso en el análisis molecular de un segmento de DNA
o de un gen es aislarlo del resto y hacer muchas copias de él para
poder realizar an álisis ulteriores. El aislamiento y la amplifica-
ción del DNA suelen requerir que este se recombine con otras
Anál isis genético molecular y biotecnología 537
moléculas de DNA. En las siguientes secciones, examinaremos
algunas de las técnicas moleculares que se emplean para aislar,
recombinar y amplificar segmentos de DNA.
Corte y unión de fragmentos de DNA
Un evento clave en el desarrollo de los 111étodos genéticos tnole-
culares fue el descubrimiento a fines de la década de 1960 de las
enzimas de restricción (denominadas también endonucleasas
de restricción), que reconocen y cortan el DNA bicatenario en
secuencias nucleotídicas específicas. Estas enzimas son produci-
das en forma natural por las bacterias, que las utilizan en la defen-
sa contra virus. Una bacte1í a protege su propio DNA de una enzi-
ma de restricción modificando ]a secuencia de reconoci miento, en
general por agregado de grupos metilo a su DNA.
Se aislaron varios tipos diferentes de enzimas de restricción de
las bacterias. Las enzin1as de restricción de tipo II reconocen
secuencias específicas y cortan el DNA en sitios defuudos dentro
o cerca de la secuencia de reconocinuento. Casi todo el trabajo de
genética molecular se reali za con enzimas de restri cción de tipo
II; las menciones a enzimas de restricción en todo este libro se
refieren a este tipo.
Se aislaron de bacterias n1ás de 800 enzimas de restricción
diferentes, que reconocen y cortan el DNA en más de 100
secuencias distintas. Muchas de estas enzün as se comercializan;
el cuadro 19-1 presenta ejemplos de algunas de las enzimas de
restricción utili zadas con frecuencia. El nombre de cada enzi ma
de restricción comienza con una abreviatura que indica su origen
bacteriano.
Por lo general, las secuencias reconocidas por las enzimas de
restricción tienen de 4 a 8 pb de longitud; la mayoría de las enzi-
mas reconocen una secuencia de 4 o 6 pb. Gran parte de las
secuencias de reconocimiento son paJindrómi cas, secuencias que
se leen igual (de 5' a 3') en las dos cadenas complementarias de
DNA.
Algunas de las enzimas realizan cortes escalonados en el DNA.
Por ejemplo, la Hindill reconoce la siguiente secuencia:
-i
5'-AAGCTI-3'
3'-TTCGAA-5'
i
La Hindill. corta el esqueleto de azúcar-fosfato de cada cadena
en el punto indicado por la flecha, lo que genera fragmentos con
extremos sobresalientes monocatenarios cortos:
5'-A AGCTI-3'
3'-TTCGA A-5'
Estos extremos se denomi nan extremos cohesivos o pegajo-
sos, porque son complementarios entre sí y pueden aparearse
en forma espontánea para conectar los fragn1entos. Por consi-
guiente, los frag mentos de DNA pueden "pegarse" : cualquier
par de fragmentos esci ndidos por la misma enzima tendrán
extremos complementarios y se aparearán (fig. 19-2). Cuando
sus extremos cohesivos se han apareado, dos fragmentos de
DNA pueden ser unidos de manera per1nanente por la DNA
538 CAP[TULO 19

Cuadro 19-1 Características de algunas enzimas de restricción de tipo II comunes usadas en la tecnología de DNA
recombinante

Microorganismos a partir del cual Tipo de fragmento

Enzima se produce la enzima Secuencia de reconocimiento terminal producido
j,
BamHI Bacil/us amylo/iquefaciens 5'-GGATCC-3' Cohesivo
3'- CCTAGG- 5'
i
j,
Cofl C/ostridium formicoaceticum 5'-GCGC-3' Cohesivo
3'-CGCG-5'
i
j,
EcoRI Escherichia coli 5'-GAATTC-3' Cohesivo
3'-CTTAAG- 5'
i
j,
EcoRII Escherichia coli 5'-CCAG G-3' Cohesivo
3'-GGTCC-3'
i
j,
Haelll Haemophilus aegyptius 5'-GGCC-3' Romo
3'-CCGG-5'
i
j,
Hindlll Haemophilus influenzae S'-AAGCTT-3' Cohesivo
3'- TTCGAA- 5'
i
j,
Pvull Proteus vulgaris S'-CAGCTG-3' Romo
3'- GTCGAC- 5'
i

Nota: las primeras tres letras de la abreviatura para cada enzima de restricción hacen referencia a la especie bacteriana de la que fue aislada la enzima (p. ej., Eco se refiere a f. coh).
La cuarta letra puede referirse a la cepa de bacterias de la que fue aislada la enzima (la "R" en fcoRI indica que esta enzima se aisló de la cepa RY13 de f . co/1). Los números roma-
nos que siguen a las letras identifican diferentes enzimas de la misma especie.

ligasa, que sella la muesca entre los grupos azúcar-fosfato de Los fragmentos que tienen extremos romos suelen unirse de
los frag mentos. otras maneras.
No todas las enzimas de restricción producen cortes y extre- Las secuencias reconocidas por una enzima de restricción se
mos cohesivos. La PvuIT corta en el medio de su sitio de reco- localizan de manera aleatoria dentro del genoma. En consecuen-
nocimiento, y los cortes de las dos cadenas son directamente cia, hay una relación entre la longitud de la secuencia de recono-
opuestos entre sí, lo que produce fragmentos con extremos cimiento y el número de veces que está presente en un genoma:
romos : habrá 1nenos secuencias de reconocimiento más largas que
secuencias de reconocimiento n1ás cortas, porque la probabilidad
J, de aparición de una secuencia particular formada por, digamos,
5'- CAGCTG-3' seis bases específicas es menor que la probabilidad de aparición
3'-GTCGAC-5' de una secuencia particular de cuatro bases específicas. Por lo
i tanto, las enzimas de restricción que reconocen secuencias 1nás
largas cortarán un fragn1ento dado de DNA en menos fragmentos,

5'- CAG
i CTG-3'
más largos, que las enzimas de restricción que reconocen secuen-
cias más cortas.
Las enzimas de restricción se utilizan siempre que se deben
3'-GTC GAC-5' cortar o unir fragmentos de DNA. En una reacción de restricción
(a) Análisis genético molecular y biotecnología 539
Hin~ 111
'
----===::::::::~~ Algunas enzimas de restric-
ción, como Hindlll, realizan
AAGCTT
~ cortes escalonados en el DNA, ...
das consisten en parte de una enzima de restricción que escinde el
DNA, acoplada a otra proteína que reconoce una secuencia espe-
• t cífica de DNA y se une a ella; la secuencia particular a la que se
GCTT une la proteína es determinada por su secuencia de aininoácidos.
TTCGA Modificando la secuencia de aminoácidos de la proteína de unión,
9oque produce extremos eche=---'
---~~¾~~~~-;¡ os (pegajosos) monocatena ríos. j la nucleasa genomanipulada puede diseñarse a n1edida para que
se una a cuaJquier secuencia particular de DNA y la corte. Las
Pvull
nucleasas genomanipuladas incluyen nucleasas de dedos de cinc
Otras enzimas de restric- (ZFN, zinc finger nucleases), que utilizan una proteína de uni6n a
♦ ción, como Pvu/1, ...
DNA denominada dedo de cinc, y las nucleasas efectoras tipo
~ activador de la transcripción (TALEN, transcription actívator-
t ' cortan justo enfrente ambas
like nucleases), que utiliza una proteína que normalmente se une
cadenas de DNA y producen a secuencias de pro1notores. t.:•:.!!!:!!!:!!!:!!:~~:=!:!:!!=!:!!!!:=!==~~:!I

:-:mm
+ iBIC'
extremos romos.

:IDilv :ffiIIIII:: CONCEPTOS

Extremos romos
Las enzimas de restricción t ipo 11 cortan el DNA en secuencias de bases
(b)
específicas que son palindrómicas. Algunas enzimas de restricción reali-

•
::IEfmillllC:
:lllimfDIIIC:
AAGCTT
TTCGAA
zan cortes escalonados que producen fragmentos de DNA con extremos
cohesivos; otras cortan las cadenas una frente a otra, lo que produce
fragmentos con extremos romos. Hay menos secuencias de reconoci-
1 t 1 t miento largas en el DNA que secuencias de reconocimiento cortas .
Digestióñ7 Digestión
con Hindi// con Hindi// ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
t t
GCTT

TTCGA :
.~
TTCGA
¿De dónde provienen las enzimas de restricción?

Las moléculas de DNA

Muesca en el Combina cortadas con la misma Visualización de fragmentos de DNA
esque leto fragmentos enzima de restricción
de azúcar- \. tienen ext remos cohe-.
Después de completar una reacción de restricción, surgen algunos
. interrogantes. ¿La enzima de restricción cortó el DNA? ¿En cuán-
fosfato \. s1vos que se aparean s1
TTCGA ~ se mezclan los tos fragmentos lo cortó? ¿Cuáles son los taJnaños de los fragmen-
\ fragmentos. tos resultantes? La electroforesis en gel nos ofrece un medio para
Muesca en el responder estas preguntas.
esqueleto de La electroforesis es una técnica bioquímica convencional para
azúcar-fosfato separar moléculas sobre la base de su tamaño y carga e léctrica.
, La DNA ligasa puede Hay una serie de tipos diferentes de electroforesis; para separar
-:;.-~;:;;-, sellar las muescas del molécu las de DNA, se utiliza la electroforesis en gel. Se prepara
esqueleto de un gel poroso, a menudo de agarosa (un polisacárido aislado de
azúcar-fosfato de los
las algas mai·inas), que se funde en una solución amo1tiguadora y
dos fragmentos.
se vuelca en un molde plástico. Cuando se enf ría, la agarosa se
solidifica y forma un gel que se asemeja a una gelatina firme.
Figura 19-2. Las enzimas de restricción realizan cortes bicatenarios En uno de los extremos del gel, se crean pocillos (pequeñas
en el DNA, lo que genera extremos cohesivos o pegajosos. concavidades) para contener las soluciones de fragmentos de
DNA (fig. 19-3a) y se hace pasar una corriente eléctrica a través
del gel. Como el grupo fosfato de cada nucleótido de DNA posee
típica, se coloca una solución concentrada de DNA purificado en una carga negativa, los fragmen tos de DNA migran hacia el extre-
un tubo pequeño con una solución a1nortiguadora (buffer) y una mo positivo del gel. En esta migración, el gel poroso actúa con10
pequeña cantidad de enzima de restricción. Después, se calienta un tamiz y separa los fragmentos según su tamaño. Los fragmen-
la mezcla de reacción a la temperatura óptima para la enzima, en tos de DNA pequeños migran con más rapidez que los grandes, y
general 37 ºC. En el término de algunas horas, la enzin1a corta los con el tien1po, se separan en función de su tamaño. Por lo gene-
sitios de restricción apropiados de todas las moléculas de DNA, ral, se colocan fragmentos de DNA de longitud conocida (están-
lo que produce un conjunto de frag1nentos de DNA. dares de tamaño) en otro pocillo. Comparando la distancia de
En los últin1os años, los genetistas han diseñado enzimas más migración de los frag mentos desconocidos con la distancia reco-
complejas, denominadas nucleasas genomanipuladas, que son rrida por los estándares de tamaño, un investigador puede deter-
capaces de realizar cortes bicatenarios del DNA en cualquier minar el tamaño aproximado de los fragmentos desconocidos
secuencia de DNA predeterminada. Las nucleasas genomanipula- (fig. 19-3b).
540 CAP[TULO 19

{a)
CONCEPTOS
Pipeta ....____

Los fragmentos de DNA pueden separarse y es posible determinar su

0 I ~__,,=-::;
'
Se colocan muestras de l tamaño mediante electroforesis en gel. Los fragmentos de DNA pue-
den visualizarse usando un colorante específico para ácidos nucleicos
1 DNA que contienen frag-
Pocillo mentas de diferentes o marcando los fragmentos con una sustancia química.
tamaños en pocillos de j
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
un gel de agarosa.

;------'\
Se hace pasar una comen-
te eléctrica a través del gel. Se separan por electroforesis fragmentos de DNA de 500 pb, 1000 pb
1
y 2000 pb de longitud. ¿Qué fragmento migrará más lejos en el gel?
a. Frag mento de 2000 pb.
b. Fragmento de 1000 pb.
Finalización
c. Fragmento de 5000 pb.
(b) de la migración
Estándar es d. Todos migrarán a la misma distancia.
de tamaño

0 ~- ~ Pocillo
y Fragmentos grandes
11 Todos los fragmentos de l
DNA se desplazan hacia Localización de los fragmentos de DNA
_ el polo posi'tivo; los frag - con transferencia de Southern y sondas
~ mentas pequeños migran
a mayor velocidad que los Si se corta un pequeño fragmento de DNA (p. ej., un plásmido)
fragmentos grandes. Des-
mediante una enzima de restricción, los pocos fragn1entos produ-
pués de la electroforesis,
"-J fragmentos de diferentes cidos pueden visualizarse con10 bandas di stintas en un gel elec-
. "-. tamaños han migrado a j troforético. En cambio, si se corta DNA genómico mediante una
Fragmentos • distintas distancias. enzima de restricción, se produce un gran número de fragmentos
pequeños 1 de distintos tamaños. En teoría, una enzima de restricción que
_ OSe añade al gel un colo-

(c)
~ rante específico para
l ácidos nucleicos.
J reconoce una secuencia de cuatro bases produciría un corte alre-
Los fragmentos
deDNA
aparecen como
bandas en el gel
Figura 19-3. La electroforesis en gel puede utilizarse para separar
moléculas de DNA según su t amaño y carga eléctrica. (Fotografía:
Klaus Guldbrandsen/Science Source).
Los fragmentos de DNA aún son demasiado pequeños para
observarlos, de manera que es necesario encarar el problema de la
visualización del DNA. La visualización puede lograrse de varias
maneras. El procedilniento más simple consiste en teñir el gel con
un colorante específico para ácidos nucleicos, co1no bro1nuro de
etidio, que se intercala con firmeza entre las bases de DNA y
emite fluorescencia cuando se lo expone a luz UV, lo que produ-
ce bandas brillantes en el gel (fig. 19-3c). Alternativamente, es
posible visualizar los fragmentos de DNA agregando un marca-
dor al DNA antes de colocarlo en el gel. Por ejemplo, pueden
detectarse marcadores químicos añadiendo anticuerpos u otras
sustancias que portan un colorante y que se unirán al DNA re-
levante, que después puede ser visualizado en forma directa.
~ SOLVER EL PROBLEMA 30
dedor de una vez cada 256 pb. El geno1na humano, con 3200
millones de pares de bases, generaría más de 12 1nillones de frag-
mentos al ser cortado por esta enzima de restiicción. Si se los
separara por electroforesis y se los tiñera, este gran conjunto de
fragmentos aparecería com o un extendido continuo en el gel,
debido a la presencia de tantos fragmentos de tamaño diferente.
Por lo general, los investigadores están interesados solo en unos
pocos de estos fraginentos, qu izá los que contienen un gen espe-
cífico. ¿Cómo pueden localizar los fragmentos deseados en un
conjunto tan grande de DNA?
Un enfoque consiste en utilizar una sonda, que es una molécu-
la de DNA o de RNA con una secuencia de bases complementa-
ria de una secuencia del gen de interés. Las bases de una sonda
solo se aparearán con las bases de una secuencia complementaria
y, si están marcadas de la manera adecuada, la sonda puede utili-
zarse para locaüzar un gen específico u otra secuencia de DNA.
Para emplear una sonda, un investigador corta primero el DNA en
fragmentos empleando una o más enzimas de restricción, y luego
separa los fragn1entos por electroforesis en gel (fig. 19-4). A con-
tinuación, es preciso desnaturalizar los fragmentos separados y
transferirlos a un 1nedio sólido pern1anente (como una 1nembrana
de nitrocelulosa o de nailon). La transferencia de Southern
(denominada así por Edwin M . Southern) es una técnica usada
para transferir fragmentos monocatenarios desnaturalizados de un
gel a un medio sólido permanente.
Una vez que se han transferido los fragmentos de DNA mono-
catenarios, se coloca la membrana en una solución de hibridación
de una sonda marcada (véase fig. 19-4). La sonda se unirá a cual-
quier fragmento de la membrana que tenga secuencias comple-
mentarias. A 1nenudo, una sonda se une solo a una parte del frag-
 ,: Los fragmentos de DNA Análisis genético molecular y biotecnología 541
~~;.,_,~ - -==::::: se separan mediante
~ ~~ ~ ~.,' electroforesis en gel.
~~,,/~~
,,~,,~~/.
~,, ~
Se embebe el gel en solución una proteína de un gel a una membrana. En este caso, la sonda
alcalina para desnaturalizar el
~ DNA bicatenario y después se
suele ser un anticuerpo, usado para determinar el tamaño de una
lo coloca sobre una platafor- determinada proteína y su patrón de expresión.
~ ma en una placa que contiene
amortiguador (buffer) .
....
Peso ---- / Papel secante CONCEPTOS
/ l'ise coloca una membraj a
Lpor encima del gel. Es posible utilizar son das ma rcadas, que son secuencias de RNA o de
,¡-
Nitrocelulosa u DNA complementarias de la secuencia de interés, para localizar genes
_______.-:.o tra membrana o secuencias de DNA individuales. Puede recurrirse a transferencia de
:- -- ~ Gel Southern para transferir fragmentos de DNA de un gel a una mem-
~---=-- - - Papel secante brana, por ejemplo, nitroceluosa.
~ El amortiguador es traído

/
Plat aforma
/
Solución
a la capa superior del pa-
pel secante a través del
gel transportando en
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3

alca li na l DNA por la membrana.

¿En qué se diferencian la transferencia Northern y Western de la
transferencia de Southern?

- Membrana

Se fija el
·- .-.:s::::<~~1 DNA a la
membrana, .. .
~ se coloca en un frasco de
1 hibridación con solución que
- -===;;...,:d contiene una sonda marcada y se
- lo rota con suavidad.
- - - - -Sonda radiactiva
Clonación de genes
Muchos métodos de DNA recombinante requieren numerosas co-
pias de un fragmento de DNA específico. Una manera de am-
plificar un fragmento específico de DNA es colocar el fragn1ento
en una célula bacte1iana y permitir que esta replique el DNA. Este
procedimiento se denomina clonación de genes, porque se pro-
ducen copias idénticas (clones) del fragmento original de DNA.
Un vector de clonación es una molécula de DNA estable que
se replica y a la cual puede unirse un frag1nento de DNA extraño
para introducirlo en una célula. Un vector de clonación eficaz
tiene tres características importantes (fig. 19-5): 1) un origen de
replicación, que garantiza que el vector se replique dentro de la
célula; 2) marcadores seleccionables, que permiten seleccionar o
identificar cualquier célula que contenga el vector; 3) uno o más

i La sonda se une a los

fragmentos de DNA
complementario de la
Estándares
de tamaño

l
membrana, .. .
-
-- -
-
---
0 Primero, un
vector de
Sitios de escisión únicos
de las enzimas de restricción
~Sa/1
... y un método
bioquímico detecta los -
-- --
clonación debe
contener un
origen de Pstl
8a 1 HI
;
\
... .
fragmentos unidos a la EcoRI
replicación JI'
sonda.
reconocido en
la célula hués- . . .,----on ..,..Hindlll
Figura 19-4. La transferencia de Southern y la hibridación con son- ped, de manera (origen de
das permiten localizar unos pocos fragmentos especificas en una que se replique replicación) 0 Tercero, un
colección grande de DNA. junto con el vector de clona-
DNA que porta. Marcador - - ción necesita un
seleccionable sitio de escisión
único para cada
n1ento de DNA, de manera que este puede contener secuencias no una de las enzi-
halladas en la sonda. Después, se lava la membrana para eliminar mas de restric-
L._
la sonda no unida; un método bioquímico revela la presencia de ción utilizadas.
f) Segundo, debe portar marcado-
la sonda unida.
res seleccionables, rasgos que
El RNA puede transferirse de un gel a un soporte sólido 1n e- permiten que las células que
diante un procedimiento relacionado denon1inado transferencia contienen el vector sean
Northern (cuyo nombre no se debe a su descubridor, sino que se seleccionadas o identificadas.
asignó para contraponerlo al método de Southern). La hibridación
de una sonda puede revelar el tamaño de una molécula de mRNA Figura 19-5. Un vector de clonación ideal tiene un origen de replica-
particular, su abundancia relativa o los tejidos en los que se trans- ción, uno o más marcadores seleccionables y sitios para una o más
cribe el mRNA. La transferencia Western es la transferencia de enzimas de restricción.
542 CAP[TULO 19

Sa/1 pequeños fragmentos de DNA sintéticos que contienen uno o más

Hincll
sitios de restricción. Se pueden unü· conectores a los extremos de
EcoRI Kpnl BamHI Accll Pstl Hind 111
cualquier fragmento de DNA, y después se los corta mediante una
~ ~
1
t t
• t
1
enzima de restricción, lo que genera extremos cohesivos que son
complementarios de los extremos cohesivos del plásmido.
t t t t t
Sac l Xmal Xbal BspMI Sph l TRANSFORMACIÓN Cuando se ha colocado un gen dentro de un
Sma l
plásmido, este debe ser introducido en una célula bacteriana. Por
Sitios de restricción lo general, esta tarea se logra mediante transformación, en la que
/acZ+.., ~ / las células bacterianas captan DNA del ambiente externo (véase
cap. 9). Algunos tipos de células presentan transformación de
~~ manera natural; otras deben ser tratadas quínú ca o físicainente
antes de que sufran transformación. Dentro de la cél ul a, los plás-
midos se replican y se 1nultjplican, y las propias células se multi-
plican.
_ orí
pUC19 DETECCIÓN DE PLÁSMIDOS RECOMBINANTES EN LAS CÉLULAS Es
posible detectar las células que contienen plásmidos reco1nbinan-
tes 1nediante el uso de los n1arcadores seleccionables deJ plásrni-

ampR Plásmido DNA extraño

, Eco ~I t
Figura 19-6. El plásmido pUC19 es un vector de clonación típico. Con-
tiene un grupo de sitios de restricción, un origen de replicación y dos mar-
cadores seleccionables: un gen de resistencia a la ampicilina y un gen /acZ. t t
El plásmido y el DNA extraño
son cortados por la misma
sitios de restricción únicos en los que puede insertarse un frag- enzima de restricción; en
mento de DNA. Los sitios de restricción empleados para la clona- este caso, EcoRI.
ción deben ser únicos; si se corta un vector en 1núltiples sitios de
restricción, se generan varios frag mentos de DNA, y volver a reu- \_,-
nirlos en el orden correcto es posible pero sumamente difícil. Extremos cohesívos
complementaríos

VECTORES PLASMiDICOS Los plásmidos, moléculas de DNA circu-

lar que existen naturalmente en las bacterias (véase cap. 9), sue-
len usarse como vectores para la clonación de fragmen tos de Cuando se mezclan, los extremos
DNA en estos microorganismos. Contienen orígenes de replica- cohesivos se hibridan, lo que une
ción y, por lo tanto, pueden replicarse en forma independiente del al DNA extraño y al plásmido.
cromosoma bacte1iano. Los plásmidos generalmente usados en la
clonación se han construido a partir de plásmidos bacte1ianos
naturales más grandes y tienen rnúltiples sitios de restricción, un
sitio de origen de replicación y 1narcadores seleccionables (6.g.
19-6).
El n1étodo más fácil para insertar un gen en un vector plasmí-
ctico consiste en cortar el DNA extraño (que contiene el gen) y el
plásmido con la misma enzilna de restricción (6.g. 19-7). Si la
enzima de restricción practica cortes escalonados en el DNA, se
producen extre1nos cohesivos comple1nentarios en el DNA extra-
DNA lígasa
ño y el plásmido. Después, se mezclan el DNA y el plásmido;
algunos de los fragmentos de .D NA extraño se aparearán con los
extremos cortados del plásmido. Se utiliza DNA ligasa para sellar
las muescas del esqueleto de azúcar-fosfato, lo que crea un plás- La DNA ligasa sella las muescas
mido reco1nbinante que contiene el fragmento de DNA extraño. de los enlaces azúcar-fosfato.
Puede aprender más sobre la clonación mediante plásmidos
observando la Animación 19.1.
En ocasiones, no se dispone de una enzima de restricción en un
sitio donde se debe cortar el DNA. En ese caso, es posible crear Figura 19-7. Un fragmento de DNA extraño puede insertarse en un
un sitio de restricción mediante la utilización de conectores, plásmido mediante el uso de enzimas de restricción.
 Análisis genético molecular y biotecnología 543

do. Los marcadores seleccionables comunes son genes que con- del plásmido recombinante. Las bacterias que será n transforma-
fieren resistencia a un antibiótico: cualquier célula que contenga das por el plásmido son lacz- y carecen del extremo delantero del
un plásmido de este tipo podría vivir en presencia del antibiótico, gen lacZ pero contienen su extremo posterior. Sin el plásmido, las
que normalmente destruye las células bacterianas. bacterias no pueden sintetizar ~-galactosidasa. Si no se ha inser-
U na manera común de investigar la presencia de un plásmido tado DNA extraño en el gen lacZ parcial del plásmido, el extremo
reco1nbinante en las células consiste en utilizar un fragmento del delantero del gen (provisto por el plásmido) y el extre1110 poste-
gen lacZ, una pequeña parte del extremo delantero del gen (fig. rior del gen (provisto por la bacteria) actúan juntos dentro de la
19-8). Este gen lacZ parcial contiene una serie de sitios de restric- célula bacteriana para producir p-galactosidasa. Sí el DNA extra-
ción únicos en los que es posible insertar y clonar un fragmento ño se inserta de manera exitosa en el sitio de restricción, altera el
de DNA. Las bacterias que realizarán el trabajo de clonación ten- extremo delantero del gen lacZ y no se produce ~-galactosidasa.
drán características especiales que tornan evidente la presencia Por lo general, el plásmido también contiene un marcador selec-
cionable, que puede ser un gen que confiere resistencia a un anti-
biótico, co1no ampícilin a.
Las bacterias lacZ- son tra nsformadas por los plásmjdos y sem-
Sitio de restricción bradas en medio que contiene ampicilina. Solo sobrevivirán y cre-
/,,,, cerán las células que han sido transformadas en forma exitosa y
.,,, ..--JacZ+ parcial
que contienen un plásmido con el gen de resistencia a ampicilina .
Algunas de estas células contienen un plásmido intacto, nuentras
que otras contienen un plás1nido recon1binante. El medio tan1bién
conti ene la susta ncia química X-gal, que produce un a sustancia
Plásmido intacto azul cuando es degradada. Las células bacterianas con un plásmi-
(ampR JacZ+) DNA
do otiginal intacto (sin un fragmento insertado) tienen un gen
extraño
lacZ funcional (el extremo delantero del gen provisto por el plás-
mido y el extremo posterior provisto por las bacterias). E stas bac-
terias pueden sintetizar ~-galactosidasa, que degrada X-gal y
El DNA extraño se inserta en
torna azul a las bacterias. En ca1nbio, las células bacterianas con
el gen lacZ parcial. un gen recombinante tienen el extre mo delantero del gen de
~-galactosidasa alterado por el DNA insertado; no sintetizan P-ga-
lactosidasa y permanecen blancas. (En estos experimentos, el pro-
Plásmido rec9mbinante pio gen de p-galactosidasa de la bacte1ia ha sido desactivado, y
(ampR tacz- )

¡ por consiguiente, solo las bacterias con el plásmido se tornan azu-

El plásmido transforma las
..__
ba
_c_te_r_ia_s_q_u_
e _so_n_a_c_z-
_ ._
Las bacterias con un
plásmido original (no re-
combinante) producen
~-galactosidasa, que
escinde X-gal y torna
azul las colonias.
• Las bacterias con un
plásm ido recombinante
no sintetizan ~-galactosi-
dasa. Sus colonias
permanecen blancas.
Las bacterias sin un
plásmido no crecerán.
Figura 19-8. El gen /acZ puede utilizarse para investigar bacterias
que contienen plásmidos recombinantes. Un plásmido especial trans-
porta un fragmento del gen lacZ y un gen de resistencia a la ampicilina.
(Fotografía cortesía de Edvotek).
_f:::::::==-4~ . : / Bacterias
. ..
•
..
Siembra en medio con
ampicilina y X-gal
Conclusión: una colonia blanca está
formada por bacterias que contienen
un plásmido recombinante.
les). Así, el col.or de la colonia bacteriana pennite determinar con
rapidez si la célula contiene un plásmido intac to o reco1nbinante.
Una vez identificadas las células con el plásmido recombinante,
se puede hacer que estas crezcan en grandes números y repliquen
el fragmento de DNA insertado .
Los plásmidos son vectores de clonación ideales, pero pueden
transportar solo DNA de menos de alrededor de 15 kb de ta1naño .
Cuando se insertan fragmentos grandes de DNA e n un vector
plasmídico, el plásmido se torna inestable.
OTROS VECTORES DE GENES Se ha desarrollado una serie de otros
vectores para clonar fragmentos más grandes de DNA en bacte-
rias. Por eje1nplo, se puede usar el bacteriófago A, que infecta la
E. coli, para clonar hasta 23 000 pb de DNA extraño; este fago
transfiere DNA a células bacterianas con alta eficiencia. Los cós-
midos son plásmidos que están empaquetados en cubiertas pro-
teicas virales vacías y que se transfieren a las bacterias por infec-
ción viral. Pueden transportar el doble de DNA extraño que un
vector fágico. Los cromosomas artificiales bacterianos (BAC)
son vectores construidos ori ginalme nte a partir del plásmido F
(un plásmjdo especial que controla el apareamiento y la transfe-
rencia de material gené tico en algunas bacterias; véase cap. 9) y
puede alojar fragmentos n1uy grandes de DNA, de hasta 300 000 pb
de longitud. El cuadro 19-2 compara las propiedades de los plás-
midos, los vectores fago 1, los cós1nidos y los BAC.
En ocasiones, el obj etivo de la clonación de genes no es solo
replicar el gen, sino también producir la proteína que este codifi-
ca. Para asegurar la transcripción y la traducción, suele insertarse
un gen extraño en un vector de expresión, que además del origen
de replicación, los sitios de restricción y los marcadores seleccio-
 544 CAP[TULO 19

Cuadro 19-2 Comparación entre vectores plasmídicos, fagos 1, cósmidos y cromosomas artificiales
Tamaño del DNA que puede
Vector de clonación ser clonado Método de propagación Introducción en las bacterias

Plásmido Hasta 15 kb Replicación del plásmido Transformación

Fago ,., Hasta 23 kb Reproducción del fago Infección por fago

Cósmido Hasta 44 kb Reproducción del plásmido Infección por fago

Cromosoma artificial bacteriano Hasta 300 kb Reproducción del plásmido Electroporación

Nota: 1 kb = 1000 pb. La electroporación consiste en pulsos eléctricos que aumentan la permeabilidad de una membrana.

nables habituales, contiene secuencias requeridas para la trans-
cripción y la traducción en células bacterianas (fig. 19-9).
Si bien la 1nanipulación de genes en las bacterias es simple y
eficiente, el objetivo puede ser transferir un gen a células euca-
1iontes. Por ejemplo, podría ser conven iente transferir un gen que
confiera resistencia a herbicidas a una planta de cultivo o transfe-
rir un gen de un factor de coagulación a una persona con hemofi-
lia. Muchas proteínas eucariontes son modificadas después de la
traducción (p. ej., pueden agregarse grupos azúcar). Estas modi-
ficac iones son esenciales para la fun ción correcta, pero las bacte-
tias no tienen la capacidad de llevar a cabo la modificación; por
consiguiente, una proteína funcional solo puede producirse en
una célula eucarionte.
Se ha desarrollado una serie de vectores de clonación que per-
miten la inserción de genes en células eucariontes. Se han creado
plásmidos especiales para la clonación en levaduras, y vectores
retrovirales, para la clonación en n1amíferos. Un cromosoma
artificial de levadura (YAC) es una molécula de DNA que tiene
un origen de replicación de levadura, un par de telómeros y un
centrómero. Estas caracte1isticas garantizan que los YAC sean
estables, se repliquen y se segreguen de la núsma manera que los
Los vectores de expresión Secuencias de Sitios de Secuencia de
contienen secuencias del iniciación de la restriccTión terminación
operón que permiten la transcripción ~ de la transcripción
transcripción y traducción
del DNA insertado.
Operador (0)--.;;~1
cromosomas de levadura. Los YAC son particularmente útiles
porque pueden transportar fragmentos de DNA hasta de 600 kb,
y algunos YAC especiales pueden contener insertos de más de
1000 kb. Los YAC se han modificado de manera que puedan uti-
lizarse en organisn1os eucarion tes distintos de las levaduras.
Se ha empleado la bacteria del suelo Agrobacteriu.m twnefa-
ciens, que invade las plantas a través de heridas e induce la for-
mación de tumores (crown galls), para transferir genes a plantas.
Esta bacteria contiene un plásmido grande denominado plásmido
Ti, parte del cual se transfiere a una célula vegetal cuando A .
tuniejacien.s infecta una planta. En la planta, parte del DNA del
plásmido Ti se integra en uno de los cromosomas de esta, donde
se transcribe y se traduce para producir varias enzimas que ayu-
dan a mantener la bacteria (fig. 19-l0a),
Los genetistas crearon por ingeniería genética un vector que
contiene las secuencias flanqueantes requeridas para transferir
DNA (denominadas TL y TR; véase fig. 19-l0a), un n1arcador
seleccionable y sitios de restricción en los que puede insertarse
DNA extraño (fig. 19-l0b). Cuando se lo coloca en A. tumefa-
ciens con un plásmido Ti auxiliar (que contiene secuencias que
posibilitan que la bacteria infecte la célula vegetal, de las que ca-
rece el vector artificial), este vector transferirá el DNA extraño
que transporta a una célula vegetal, donde se integrará en un cro-
mosoma de la planta. Este vector se ha utilizado para transferü·
genes que confieren atributos significativos desde el punto de
vista económico, como resistencia a herbicidas, virus vegetales y
plagas de insectos. L.:►~~~~~~~~~~~~

Secuencias - - -~ al ribosoma
del promotor CONCEPTOS
bacteriano (P)
Los fragmentos de DNA pueden insertarse en vectores de clonación,
También incluye secuencias
que regulan -activan o =====~ - fragmentos estables de DNA que se replicarán dent ro de una célula.
Un vector de clonación debe tener un origen de replicación, uno o
más sit ios de restricción únicos y marcadores seleccionables. Un vec-
Gen que codifica Marcador tor de expresión contiene secuencias que perm iten la transcripción y
el represor que se genético la traducción de un gen clonado. Se han desarrollado vectores de clo-
une al O y regula a P. seleccionable
nación especiales para introducir genes en células eucariontes.
(p. ej., resistencia
antibiótica)
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
Figura 19-9. Para garantizar la transcripción y la traducción, puede
insertarse un gen extraño en un vector de expresión; en este ejem- ¿Cómo se inserta un gen en un vector de clonación plasmídico?
plo, un vector de expresión de E. coli.
 Análisis genético molecular y biotecnología 545

(a)
Cromosoma
de la planta "'- - -.......

TL ¿~¡
( f) _1/ Infección

TR
Cromosoma Plásmido Ti
bacteriano Célula vegetal

Ó En la transf,erencia génica
natural, Agrobaeterium in-
7 Parte del plásmido Ti
se transfiere a la
... donde se integra l
en uno de los cromo-
Agrobacterium
tumefaciens
~ de la planta en una herida. j célula vegetal, .. . somas de la planta~

(b)
Sitio de Para la infección, se requie-
Vector
plasmídico restricción re el plásmido Ti auxiliar.
(JI / Secuencias requeridas
Jlf¿> para la transferencia Plásmido
/ DNA extraño Ti auxiliar
on .;\
Ma rcador
seleccionable
DNA extraño
O~
,,__,
Infección
►

Cromosoma Vector
bacteriano plasmídico
t t ~

IÍE!DNA extraño se inserta ' .. . y es transferido a ' El vector plasmídico, ... es transferido después a una
l en un vector plasmídico .. .J Agrobacterium tumefaciens junto con cualquier DNA célula vegetal, donde se integra
con el plásmido Ti. extraño que porte, ... en un cromosoma de la planta.

Figura 19-10. El plásmido Ti puede utilizarse para transferir genes a plantas. Se requieren las secuencias flanqueantes TL y TR para la transferencia del
segmento de DNA de las bacterias a la célula vegetal.

Aplicación: ingeniería genética
de plantas con pesticidas
La ingeniería genética de plantas que producen sus propios pla-
guicidas es u □ uso temprano e importante desde el punto de vista
económico de las técnicas moleculares de transferencia de genes
a otros organismos. La bacteria Bacillus thuringiensis produce en
forma natural una proteína, conocida como toxina Bt, que es letal
para numerosos insectos. La toxina Bt es particularmente intere-
sante con10 insecticida, porque es específica para determinados
insectos, se degrada con rapidez en el ambiente y no es tóxica
para seres humanos ni para otros anin1ales.
En 1987 , Mark Vaeck y cols. de Plant Genetic Syste.ms de Bél-
gica crearon por ingeniería genética plantas de tabaco que expre-
saban la toxina Bt. Otros investigadores habían aislado el gen que
codifica la proteína B t de B. thuringiensis y lo clonaron en un
plásmido de E. coli, de 111anera que pudieran 1nanipularse fácil-
n1ente las secuencias génicas (fig. 19-11). Vaeck y cols. utilizaron
enzi mas de restricción para escindir secuencias del gen Bt de
estos plásmidos en fragmentos de diferentes tamaños. Se unieron
fragmentos del gen Bt a un gen (neo) que confiere resistencia al
antibiótico kanamicina, que es tóxico para las plantas y otros
eucariontes, lo que proporciona un marcador seleccionable para
las células que contienen el gen Bt. Estas secuencias sintéticas
(denominadas constructos genéticos) contenían fragmentos del
gen Bt de diferente longitud ligados al gen neo (véase tig. 19-11).
Se insertaron los constructos en un vector de expresión que con-
tenía un promotor para garantizar la transcripción de las secuen-
cias introducidas. El vector de expresión también contenía
secuencias consenso poli(A), que aseguraban que el mRNA pro-
ducido a partir de los genes Bt y neo fusionados serían procesa-
dos de manera correcta y traducidos en las células vegetales.
Luego, se transformaron bacterias Agrobacterium tumefaciens
con los vectores de expresión. Una vez que los vectores estuvie-
ron en el inte1ior de Agrobacterium, las secuencias del vector se
recombinaron con las de un plásmido Ti, con la consiguiente
transferencia de los constructos génicos al plásnlido Ti. Se infec-
taron pequeños discos de hojas de una planta de tabaco con el
Agrobacteriu,n genomanipulado, que transfirió los plásmidos Ti
a las células vegetales. Se regeneraron plantas de tabaco enteras a
546 CAP[TULO 19

Cromosoma \._ rs;-;isló el gen de la toxina prutir de los discos de hojas y se las seleccionó por resistencia a
\.-----... ~ Bt de la bacteria Baci//us la kanamicina.
'thuringiensis ... D espués, se investigó la resistencia a plagas de insectos de las
l.
plantas transgénicas resultantes. Se alimentó con hojas de las plan-
tas a gusanos del tabaco, y se controlaron sus tasas de mortalidad.
Bacil/us thuringiensis Se observó alta mo1talidad de los gusanos del tabaco en alrededor
t de dos tercios de las plantas que contenían frag n1entos del gen Bt.
Interesa destacar que ninguna de las plantas que contenía el gen
Gen de la toxina Bt Bt de longitud completa produjo ninguna toxina destructora de
t insectos; en apariencia, las células vegetales tenían mejor capaci-
dad de traducir fragmentos del gen Bt que de traducir todo el gen.
~ Las plantas transgénicas que producía11 toxinas Bt crecieron con
normalidad. Se las entrecruzó para producir plantas Fl, que tam-
bién mostraron resistencia a insectos y a kanan1icina, lo que indi-
có que los genes introducidos estaban integrados de manera esta-
Plásmido de E. coli
ble en los cromosomas de la planta.
Tras la investigación llevada a cabo por Vaeck y cols., otros
Se ligaron el gen Bt de
longitud completa y frag- investigadores emplearon n1étodos sinulares para introducir el
Gen neo+ Gen Bt
mentos del gen al gen neo+. gen de la toxina Bt en algodón, ton1ate, 1naíz y otras plantas
l J (fig. 19-12). Hoy en día, se usan ampliamente en todo el mundo
plantas transgénicas que expresan la toxina Bt.
- Gen Bt de longitud completa
neo+ Bt
Constructos Amplificación de fragmentos de DNA
génicos neo+ Bt Genes Bt parciales
con la reacción en cadena de la polimerasa
neo+ Promotor Sitio de restricción
Bt
\ ~ Secuencia La manipulación y el aná]jsis de genes exigen múltiples copias de
~ consenso
las secuencias de DNA usadas. Un problema importante al traba-
de pol i(A) jar en el nivel molecular es que cada gen es una fracción diminuta
del DNA celular total. Como cada gen es único, se lo debe aislar
Vector y amplificar antes de poder estudiru·lo. Una manera de amplificar
de expresión un fragmento de DNA consiste en clonarlo en células bacterianas.
De hecho, durante muchos años, la clonación de genes fue la
única manera de amplificar un fragmento de DNA, y la clonación
Estos constructos era un pre1Tequisito para muchos otros métodos moleculares. Sin
génicos se
embargo, la clonación es trabajosa y requiere vatios días para
insertaron en un
vector de expresión.
lograr el crecimiento de las bacterias. En la actualidad, la reacción
en cadena de la polimerasa posibilita la amplificación de segmen-
tos cortos de DNA sin clonación, aunque esta todav ía se utili za
neo+ Bt mucho para a1nplificar fragmentos grandes de DNA y para otras
Promotor '---. ~ / Secuencia manipulaciones de secuencias de DNA.
, consenso de poli(A)
La reacción en cadena de la polimerasa (PCR), desarrollada
por primera vez en 1983 por Kary Mullís, permite an1plificai·
A. tumefaciens fragmentos de DNA miles de 1niliones de veces en el término de

Agrobacterium
tumefaciens fue 1
() 1
transformado con el Cromosoma Plásmido Ti
vector de expresión. bacteriano

J
/ _/
Recombinación Infección

La recombinación transfirió los constructos génicos, Se infectaron plantas de tabaco con

junto con el promotor y las secuencias poli(A), al A. tuberfaciens, recombinante, y se transfirieron
plásmido Ti. los constructos génicos Bt a las células vegetales.

Figura 19-11. El gen de la toxina Bt, que codifica un insecticida, se aisló de las bacterias y se transfirió a plantas de tabaco.
 Análisis genético molecular y biotecnología 547

Corno la molécu la de DNA consiste en dos cadenas nucleotídi-

cas, cada una de las cuales puede servir de molde, la cantidad de
DNA se duplica con cada evento de replicación. Los cebadores
usados en la PCR para replicar los moldes son fragmentos cortos
de DNA, en general de 17 a 25 nucleótidos de longitud, que son
complen1entarios de secuencias conocidas del molde.

REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA Para llevar a cabo la

Figura 19-12. En todo el mundo, se cultivan plantas transgénicas.
Aquí se muestra maíz Bt y maíz no modificado genéticamente, que crecen
en franjas alternadas, lo que ayuda a prevenir la aparición de resistencia de
las plagas a la toxina Bt creada por ingeniería genética. (John L. Obermeyer,
Purdue Extension Entomology).
solo algunas horas. Es posible utilizarla con cantidades sumrunen-
te pequeñas de DNA original, incluso una sola rn.olécula. La reac-
ción en cadena de la polirnerasa ha revolucionado la biología
molecular y ahora es una de las técnicas moleculares más utiliza-
das. La base de la PCR es la replicación catalizada por una DNA
polimerasa. En este caso, la replicación tiene dos requerimientos
esenciales: 1) un 1nolde de DNA a partir del cual se pueda copiar
una nueva cadena de DNA y 2) un par de cebadores con w 1 grupo
3 '-OH aJ que puedan añadirse nuevos nucleótidos.
PCR, los investigadores comienzan con una solución que contie-
ne el DNA diana, DNA polimerasa, los cuatro desoxirribonu-
cleósidos trifosfato (dNTP, los sustratos de la DNA polimerasa),
cebadores e iones magnesio y otras sales necesarias para que pro-
ceda la reacción. Una reacción en cadena de la polimerasa típica
consiste en tres pasos (fig. 19-13). En el paso 1, se calienta una
solución inicial de DNA hasta 90-100 ºC para romper los puentes
de hidrógeno entre las cadenas y, por lo tanto, producir los mol-
des monocatenarios necesa1i os. La mezcla de reacción se mantie-
ne a esta temperatura solo durante uno o dos minutos. En el paso
2, se enfría con rapidez la solución de DNA hasta 30-65 ºC y se
mantiene a esta temperatura durante un mi nuto o menos. Si bien
durante este breve intervalo, las cadenas de DNA no tendrán la
posibilidad de renaturalizarse, los cebadores podrán unirse a las
cadenas molde. En el paso 3, la solución se calienta durante 1
minuto o 1nenos hasta 72 º C, la temperatura a la cual la DNA
polirnerasa puede sintetizar nuevas cadenas de DNA. Al final del
ciclo, se producen dos molécul as nuevas de DNA bicatenru-io por
cada molécula original de DNA diana.
Luego se repite todo el ciclo. Con cada ciclo se duplica la can-
tidad de DNA diana, de manera que este aumenta en forma geo-
métrica. Una molécula de DNA aumenta de más de 1000 molécu-
las en 10 ciclos de PCR a más de 1 millón de moléculas en 20
ciclos y a más de 1000 n1illones de moléculas en 30 ciclos. Cada
ciclo se co1npleta en unos pocos minutos, de manera que es posi-

-
Se calienta Se enfría con rapidez Se calienta la Se repite todo el ciclo. Cada vez que se repite el
el DNA a el DNA a 30-65 ºC solución a 72 ºC, la ciclo, se duplica la cantidad de DNA diana.
90-100 ºC para permitir que los DNA polimerasa I'
para separar cebadores monoca- sintetiza nuevas
___.
las dos
cadenas.
tenarios cortos se
J cadenas de DNA, lo
que crea dos molé-
.. / - .. - ..
-
hibriden con sus
secuencias
complementarias.
culas nuevas de
DNA bicatenario.
~ ---...- .. -- .. ~

- --7-. .. ~ = . -- .. ~

~-
iiiill--

.. -- .. ~

. ___.
- ~
.;
- ..
►
~- .. - ~

l... •=--- - .. -- .. ~

C,iguo ;: : -.. . .. ~
___.
DNA

~- . - ..
Figura 19-13. La reacción en cadena de la polimerasa se usa para amplificar muestras incluso muy pequeñas de DNA.
548 CAP[TULO 19
ble lograr una gran amplificación del DNA en el término de unas
pocas horas. En la Animación 19.2, obsérvese cómo la reacción
en cadena de la polimerasa aumenta con rapidez el número de
copias de un fragmento de DNA.
Dos innovaciones clave facilitaron el uso de la PCR en el labo-
ratorio. El primero fue el descubrimiento de una DNA polimera-
sa estable a las altas te1np eraturas usadas en el paso 1 de la PCR.
La DNA polimerasa de E. coli que se utilizó origi nalmente en la
PCR se desnaturaliza a 90 ºC. Por esta razón, se debía agregar
enzima fresca a la mezcla de reacción en cada ciclo, lo que enlen-
tecía de manera considerable el proceso. Este obstáculo fue supe-
rado cuando se aisló la DNA polimerasa de la bacteria Thermus
aquaticus, que vive en manantiales de aguas calientes del Parque
Nacional Yel1owstone. Esta enzim a, apodada Taq polimerasa,
presenta notable estabilidad a altas temperaturas y no se desnatu-
raliza en el paso de separación de las cadenas de la PCR; puede
agregarse a la mezcla de reacción al comienzo del proceso de
PCR y continuará actuando durante n1uchos ciclos.
La segunda innovación clave fue el desa1Tollo de cicladores tér-
mj cos automatizados, aparatos que generan los cambios de tem-
peratura necesarios para los diferentes pasos de la PCR. En un
principio, los tubos que contenían la m ezcla de reacción se mo-
vían de 1nanera manual entre baños de agua a las diferentes te111-
peraturas requeridas para los tres pasos de cada ciclo. En los
cicladores tér1nicos auto1natizados, los tubos de reacción se colo-
can en un bloque .metálico que cambia de teinperatura con rapi-
dez según un programa computarizado.
Además de amplificar el DNA, la PCR puede utilizarse para
amplificar secuencias correspondientes a RNA. Esta amplifica-
ción se logra convirtiendo prünero el RNA en DNA comple1nen-
tario (cDNA) con la enzima transcriptasa irlversa. Después, es
posible a111p lificar el cDNA mediante la PCR habitual. Esta técni-
ca se denomina PCR por transcripción inversa.
LIMITACIONES DE LA PCR En la actualidad, la reacción en cadena de
la polimerasa suele utilizarse en lugar de la clonación de genes,
pero tiene varias limitaciones. En primer lugar, la PCR requiere el
conoci1niento previo de por lo rnenos parte de la secuencia del
DNA diana para permitir la construcción de los cebadores. En
segundo lugar, la capacidad de la PCR para amplificar cantidades
sumamente pequeñas de DNA determina que la contaminación
sea un problema significativo. Cantidades diminutas de DNA de
la piel de los empleados de laboratorio o pequeñas partículas del
aire pueden ingresar en un tubo de reacción y ser a1nplificadas
junto con el DNA diana. Se requieren técnicas de laboratorio
meticulosas y uso de controles para evitar este problema.
Una tercera limitación de la PCR es la exactitud. A diferencia
de otras DNA polimerasas, la Taq polimerasa no tiene capacidad
de corrección (proofreading) (véanse pp. 339-340 del cap. 12) y,
en las condiciones de PCR estándares, incorpora un nucleótido
incorrecto una vez cada 20 000 pb. Se han aislado nuevas DNA
polimerasas termoestables con capacidad de con·ección, que dan
resultados más exactos de la PCR.
Una cuarta limitación de la PCR es que el tarnaño de los frag-
mentos que pueden amplificarse m ediar1te Taq polimerasa están-
dar suelen ser menor de 2000 pb. Mediante la utilización de un
combinación de Taq polimerasa y una DNA polimerasa con capa-
cidad de con·ección, y la modificación de las condiciones de la
reacción, los investigadores han logrado extender la amplifica-
ción por PCR a fragmentos más grandes, pero aun estos se limi-
tan a una longitud de 50 000 pb o menos.
APLICACIONES DE LA PCR Pese a sus limitaciones, la PCR se ha con-
vertido en una de las herramientas más usadas dentro de la biolo-
gía molecular. Los cebadores utilizados en la PCR son específicos
para secuencias conocidas de DNA y, por lo tanto, la PCR puede
emplearse para detectar· la presencia de una secuencia particular de
DNA en una muestra. Por ejemplo, a menudo se recurre a PCR pa-
ra detectar la presencia de vir us en muestras de sangre ariadiendo
a la reacción cebadores complementari os de secuencias de DNA
viral conocidas. En presencia de DNA viral, los cebadores se uni-
rán a este, y la PCR amplificará un fragmento de DNA de longi-
tud conocida. La presencia de un fragmento de DNA de la longitud
apropiada en un gel indica la presencia de DNA vu·al en la 111ues-
tra de sangre. Las pruebas diagnósticas modernas para infección
por HIV, el agente etiológico del sida (véase cap. 9), utilizan este
tipo de amplificación por PCR de secuencias del HIV.
Otra aplicación frecuente de la PCR consiste en identificar
vaiiación genética en poblaciones naturales. Es posible usar PCR
para amplificar seg1nentos específicos de DNA, que después son
analizados con otras he1Tamientas moleculares que identifican
diferencias de las secuencias nucleotídicas. Asimjs1no, pueden
emplearse cebadores específicos de un variante particular de
DNA para determinar si esa variante está presente en el genoma
de un organismo individual.
La PCR también ha pennítido aislar DNA de fuentes antiguas,
como el DNA de neandertales (co1nentado en la introducción del
cap. 10). Con frecuencia, se utiliza para amplificar pequeñas can-
tidades de DNA de escenas de crímenes e identificar· la fuente de
una muestra de DNA mediante la detección de la variación de mi-
crosatélites (véase sección sobre huellas genéticas del DNA más
adelante en este mismo capítulo).
La PCR puede utilizarse para introducir secuencias nuevas en
un fragmento de DNA. Si bien el extremo 3' de los cebadores
empleados en la PCR debe ser co1nplernentari o del molde, puede
haber flexibilidad en las secuencias del extremo 5' del cebador.
Los cebadores pueden diseñarse de manera que contengan nuevos
sitios de restricción u otras secuencias convenientes en sus extre-
mos 5 ' . Después, estas secuencias serán copiadas por la reacción
y, por consiguiente, agregadas a los extremos del DNA amplifica-
do por PCR.
Es posible utilizar una modificación de la PCR, conocida como
PCR en tiempo real, para determinar de manera cuantitativa la
cantidad de ácido nucleico inicial. En este procedimiento, se
emplea PCR habitual para amplificar un frag1nento específico de
DNA, y se utiliza un instrumento sensible para detenninar· con
precisión la cantidad de DNA presente en la solución después de
cada ciclo de PCR. Suele usarse una sonda fluorescente y especí-
fica de la secuencia de DNA de interés en la reacción; por lo
tanto, solo se mide el DNA de interés. La técnica se denomina
PCR en tiempo real porque la cantidad de DNA arnplificada se
mi.de a medida que procede la reacción.
A ,nenudo, se co1nbina la PCR en tiempo real con PCR por
transcripción inversa para 1nedir la cantidad de mRNA de una
muestra, lo que permite que los biólogos detenninen el nivel de
expresión génica en diferentes células y en diversas condiciones.
Por ejemplo, los investigadores interesados en la n1odificación de
la expresión géruca en respuesta a la administración de un fánna-
co a menudo recurren a PCR en tiempo real para medir en forma
cuantitativa la cantidad de mRNA producido por genes específi-
cos en células expuestas al fármaco y compararla con la cantidad
de mRNA producida por los genes de células control no expues-
tas al fármaco.
 Análisis genético molecular y biotecnología 549

Múltiples copias de DNA genómico son digeridas por una enzi-

CONCEPTOS ma de restricción durante un período limitado, de manera que
solo se cortan algunos de los sitios de restricción de cada molécula.
La reacción en cadena de la polimerasa es un método in vitro enzimá-
Sitios de restricción
tico para amplificar con rapidez el DNA. En este proceso, se calienta
DNA
el DNA para separar las dos cadenas, se unen cebadores cortos al
DNA diana, y la DNA polimerasa sintetiza nuevas cadenas de DNA a genómico ++ + + ♦ + + + + + t + + +
partir de los cebadores. Cada ciclo de PCR duplica la cantidad de
DNA. La PCR tiene una serie de aplicaciones importantes en biología
molecu lar.
- ~
, Gen de
interés

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5

¿Por qué es important e la utilización de una DNA polimerasa termo-

·-
estable para el éxito de la PC R? 1

Se cortan diferentes molé-

culas en distintos lugares,
19.3 Las técnicas moleculares pueden lo que genera un conjunto
~ fragmentos solapados.
utilizarse para hallar genes de interés
l J
Para analizar un gen o transferirlo a otro organismo, prünero debe
ser localizado y aislado. Por ejemplo, si deseamos transferir un
gen humano de hormona de crecuníento a bacterias, prünero
debemos hallar el gen humano que codifica esta honn.o na y sepa-
rarlo de los 3200 1nillones de pb de DNA humano. Hasta ahora,
al considerar la clonación de genes hemos minimizado el proble-
,,--
ma de hallar la secuencia de DNA por clonar; se ha pospuesto de Luego, cada frag~
manera deliberada este problema hasta ahora porque, paradójica- mento se une a
mente, los investigadores a 1nenudo deben clonar un gen para un vector de
clonación ...
hallarlo.
, ... y se transfiere a una
Este enfoque (clonar primero y buscar más tarde) se denomina [ célula bacteriana, ...
"clonación de fragmentos escogidos al azar'' (en escopeta [shot-
gun en inglés]) porque es como cazar con una escopeta: los per-
digones se dispersan an1pliamente en la dirección general de la
presa, con una buena probabilidad de que uno o más de ellos den
f:Íllo que produce un
conjunto de clones
l
en el blanco. En la clonación al azar, el investigador clona pri1ne- que contienen frag-
mentos genómicos
ro un gran número de fragmentos de DNA sabiendo que uno o solapados, algunos
más contienen el DNA de interés, y después busca el fragmento de los cuales pueden
de interés entre los clones. incluir segmentos del
l gen de interés.

Genotecas
Una colección de clones que contiene todos los fragmentos de
DNA de una fuente se denomina genoteca de DNA. Por ejemplo,
podríamos aislar DNA genómico de células humanas, frag1nen-
tarlo, insertar los fragmentos en vectores y clonarlos en células Conclusión: algunos genes contienen todo el gen de interés,
bacterianas. El conj unto de colonias bacte1ianas o fagos que con- l~tros incluyen parte del gen, y la mayoría no contiene nada
tiene estos fr agmentos es una genoteca genómica, que compren- l?el gen de interés.
de todas las secuencias de DNA hall adas en el geno1na humano.
Figura 19-14. Una genoteca genómica contiene todas las secuencias
CREACIÓN DE UNA GENOTECA GENÓMICA Para crear una genoteca de DNA halladas en el genoma de un organismo.
genómica, se recolectan células y se las rompe, lo que determina
la liberación de su DNA y otros contenidos celulares a una solu-
ción acuosa, de donde se extrae el DNA. Una vez aislado el DNA,
se lo corta en fragmentos mediante una enzjma de restricción rio, distintas moléculas de DNA serán cortadas en lugares dife-
durante una cantidad limitada de tiempo (una digestión parcial), rentes, y se producirá un conjunto de fragmentos solapados (fig.
de manera que solo se cortan algunos de los sitios de restricción 19-14). Luego se unen los fragmentos a vectores, que pueden ser
de cada n1olécula de DNA. Como el corte de los sitios es aleato- transfe1idos a bacte1ias. Algunos de los clones contienen el gen de
550 CAP[TULO 19

interés completo (si este no es demasiado largo), y algunos con-
tienen partes del gen, pero la mayoría contiene fragmentos que no
poseen ninguna parte del gen de interés.
U na genoteca genómica debe contener un gran número de clo-
nes para garantizar que estén representadas en ella todas las
secuencias del genon1a. U na genoteca del genoina humano for-
n1ada mediante el uso de cósmidos, cada uno de los cuales porta
un fragmento aleatorio de DNA de 35 000 a 44 000 pb de longi-
tud, requeriría ah-ededor de 350 000 clones de cósmidos para
alcanzar una probabilidad del 99% de que todas las secuencias
estén incluidas en la genoteca.
GENOTECAS DE cDNA Una alternativa a la creación de una genote-
ca genórnica consiste en crear una genoteca que consiste solo en
las secuencias de DNA que son transciitas a mRNA (denominada
genoteca de cDNA, porque todo el DNA de esta genoteca es
complementario del mRNA). Gran parte del DNA eucarionte
consiste en secuencias repetitivas (y otro DNA) que no se trans-
cribe a mRNA (véanse pp. 308-309 del cap. 11), y estas secuen-
cias no están representadas en una genoteca de cDNA.
Una genoteca de cDNA tiene dos ventajas adicionales. Primero,
está enriquecida con fragmentos de genes que se transcriben de
tnanera activa. Segundo, los intrones no interrumpen las secuen-
cias clonadas~ los intrones plantearían un problema cuando el
objetivo es producir una proteína eucarionte en bacterias, porque
la mayoría de las bacterias no tienen ningún medio para e1iminar
intrones.
La desventaja de una genoteca de cDNA es que solo contiene
secuencias que están presentes en mRNA 1naduro. En ocasiones,
los investi gadores están interesados en secuencias que no se trans-
criben, como las de los promotores e intensificadores, que son
importantes para la transcripción pero que no se transcriben.

(a) - columna (b)

de elución IÍUna columna especial Cola de poli(A)
mRNA
contiene cadena
5' AAAAAA 3'
cortas de oligo(dD
unidas a celulosa.

'
Se añaden cebadores oligo(dl), que
TTTTTT se hibridan con las colas de poli(A)
del mRNA y proporcionan grupos
Celulosa 3'-0H para la síntesis de DNA.

Los mRNA tiene colas 5' AAAAAA 3'

de poli(A). Se aísla el OH-iiiiiii5'
RNA celular total de las Transcriptasa
células y se lo hace pasar inversa y dNTP : La transcriptasa inversa sintetiza
a través de la columna.
una cadena de DNA usando como j
molde el mRNA.
Híbrido mRNA-DNA
Las colas de poli(A) de las 5' AAAAAA 3'
moléculas de mRNA se 3' TTTTTT 5'
aparean con las cadenas

7_ de oligo(dT), y el mRNA es
retenido en la columna, .. .
RNase
' La molécula híbrida RNA-DNA
se trata en forma breve con
1

RNasa, que digiere parcial-

mente la cadena de RNA..:......J

-
mRNA
1
. 5' - AAA 3'
3' TTTTTT 5'
~
Amortiguador
(buffer)
_J
l~
5 ~ •. .
~.......... .-: : :.: ;
mientras que el resto
del RNA la atraviesa.
cDNA
• La DNA polimerasa se utiliza para
sintetizar la segunda cadena de DNA
DNA
usando los fragmentos cortos de RNA
polimerasa
no digeridos como cebadores, ...

11 Después, se puede lavar el mRNA ...._

-v-
de la columna agregando un amor- 5' 1,. AAA 3'
tiguador que rompe los puentes de 3' ,jjjj5'
hidrógeno entre las colas de poli(A)
l y las cadenas de oli'go(T),... J
DNA ligasa ... y la DNA ligasa sella las
muescas del esqueleto de
azúcar-fosfato.

~ lo que deja solo mRNA r

AAAA con colas de poli(A).
5'
AAA 3'

Figura 19-15. Una genoteca de cDNA contiene solo aquellas secuencias de DNA que se transcriben a mRNA.

Estas secuencias no están presentes en una genoteca de cDNA.
Más aún, una genoteca de cDNA contiene solo las secuencias
génicas expresadas en el tejido del que se aisló el mRNA, y la fre-
cuencia de una determinada secuencia de DNA en una genoteca
de cDNA depende de la abundancia del mRNA correspondiente
en el tejido dado. Por lo tanto, si un gen pa1ticular no es expresa-
do o solo es expresado con baja frecuencia en un tejido particular,
puede estar ausente en una genoteca de cDNA preparada a partir
de ese tejido. Por el contrario, casi todos los genes están presentes
con la misma frecuencia en una genoteca de DNA genómico.
Para crear una genoteca de cDNA, primero debe separarse el
m.RNA de otros tipos de RNA celular (tRNA, rRNA, snRNA, etc.).
La 1nayoría de los 1nRNA eucariontes poseen una cola de poli(A),
que representa un gancho conveniente para separar el mRNA
eucarionre de los otros tipos. Se aísla el RNA celular total de las
células y se lo vierte a través de una columna empaquetada con
fragmentos cortos de DNA, que consisten por entero en nucleóti-
dos de timina, es decir, cadenas de oligo(dT) (fig. 19-lSa). A
medida que el RNA se moviliza a través de la columna, la cola de
poli(A) de las moléculas de mRNA se aparean con las cadenas de
oligo(dT) y son retenidas en la columna, mientras que el resto del
RNA la atraviesa. Después, puede lavarse el mRNA de la colum-
na mediante la adición de un amortiguador que rompe los puentes
de hidrógeno entre las colas de poli(A) y las cadenas de oligo(dT).
Luego, se copian las 1noléculas de 1nRNA para generar cDNA.
La transcriptasa inversa, una enzima ai slada de retrovi rus (véase
cap. 9), sintetiza DNA complementario monocatenario a partir
del molde de RNA (fig. 19-lSb). Por último, la DNA polimerasa
convierte la molécula híbrida RNA-DNA resultante en una molé-
cula de cDNA bicatenario. a::•!:!!:!:!::!::!!:!!~2::~:!!:=!!!!:~~2!!::2.l
CONCEPTOS
Un método para hallar un gen es crear y exam inar una genoteca de
DNA. Una genoteca genómica se crea cortando DNA genómico en
fragmentos solapados y clonando cada fragmento en una célula bac-
teriana distinta. Una genoteca de cDNA se crea a partir del mRNA que
es convertido en cDNA y clonado en bacterias.
Colonias Filtro de
bacterianas n itroce Iu Iosa
de la placa
maestra
réplica
"" . .
Se coloca un disco de Unas pocas células Se rompen las células, y el
nitrocelulosa u otra de cada colonia se DNA se desnaturaliza y se
membrana sobre las adhieren al filtro de fija al filtro.
colonias bacterianas. nitrocelulosa.
Figura 19-16. Las genotecas genómica y de cDNA pueden estudiarse con una sonda para hallar el gen de interés.
Análisis genético molecular y biotecnología 551
BÚSQUEDA EN GENOTECAS DE DNA Crear una genoteca genómica
o de cDNA es relativrunente sencillo en comparación con la bús-
queda en la genoteca para hallar clones que contengan el gen de
interés. El procedimiento de búsqueda utilizado depende de lo
que se sabe acerca del gen.
E l primer paso del examen consiste en cultivar los clones de la
genoteca. Si para crear la genoteca se empleó un vector cósmido
o plasmídico, se diluyen las cél ulas y se las siembra de manera
que cada bacteria crezca en una colonia distinta. Si se utilizó un
vector fágico, se permite que los fagos infecten un césped de bac-
terias en una placa de Petri. Cada placa o colonia bacteriana con-
tiene un único frag1nento de DNA clonado que debe ser investi-
gado pru·a hallar el gen de interés.
Una manera frecuente de exa1ni nar genotecas es mediante
sondas. Para utili zar una sonda, primero se deben hacer ré-
plicas de las colonias o de las placas de la genoteca. L a figu-
ra 19-16 ilustra este procedimiento para una genoteca de cós-
1uidos.
¿ Cómo se obtiene una sonda cuando todavía no se ha aislado el
gen? Una opción es usar un gen similar de otro organismo como
sonda. Por ejemplo, si deseamos examinar una genoteca genómi-
ca humana para hallar el gen de la hormona de crecimiento y ya
se ha aislado este gen en ratas , podiíamos utilizar una secuencia
del gen de rata pulificado como sonda para hallar el gen humano
de la hormona de crecinúento. La hibridación exitosa no requiere
complementariedad perfecta entre la sonda y la secuencia diana,
de manera que a menudo es posible utilizar una secuencia relacio-
nada como sonda.
Alternativamente, pueden crearse sondas sintéticas si se ha ais-
lado la proteína producida por el gen y se ha determinado su
secuencia de aminoácidos. Con el uso de código genético y la
secuencia de anúnoácidos de la proteína, pueden deducirse posi-
bles secuencias nucleotídicas de una pequeña región del gen. Si
bien solo una secuencia del gen codifica una proteína particular,
la presencia de codones sinónimos ilnplica que la misma proteína
podría ser producida por varias secuencias nucleotídicas diferen-
tes, y es imposible saber cuál es la correcta. Para superar este pro-
blema, se utiliza co1no sonda una mezcla de todas las secuencias
nucleotídicas posibles. Con el fin de mini:mizar el número de
secuencias requeridas en la 1nezcla, se selecciona una región de la
El exceso de sonda se elimina
Sonda marcada por lavado, y se cubre la mem-
con 32 P brana con placa radiográfica, ...
Filtro Membrana Placa radiográfica
\ _ \
!
1
1
, .. . que detecta La comparación de la
la presencia de I membrana con la placa
' Una sonda marcada la sonda. __J maestra revela cuáles son
se híbrida con cualquier las colonias bacterianas que
DNA complementario. tienen el DNA de interés.
 552 CAP[TULO 19
proteína con degeneración relativamente escasa de sus codones.
Cuando se ha determinado parte de la secuencia de DNA del gen,
es posible sintetizar quími camente un conjunto de sondas de
DNA utilizando un aparato automatizado conocido como sinteti-
zador de oligonucleótidos.
Otro método de examinar una genoteca consiste en buscar el
producto proteico de un gen. Este método requiere que la genote-
ca de DNA sea clonada en un vector de expresión. Se puede
investigar la presencia de la proteína en los clones mediante un
anticuerpo que reconozca la proteína o mediante una prueba quí-
mica para el producto proteico. Este método depende de la exis-
tencia de una prueba para la proteína producida por el gen. Las
genotecas ta1nbién pueden examinarse por medio de PCR o por
. . /
secuenc1ac1on.
CONCEPTOS
'
Se puede buscar un gen específico en una genoteca de DNA median-
te la utilización de sondas complementarias que se hibridan con el
gen. Alternativamente, es posible clonar la genoteca en un vector de
expresión y localizar el gen examinando los clones para detectar el
producto proteico del gen.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
Explique de manera sucinta cómo se crean sondas sintéticas para exa-
minar una genoteca de DNA cuando se conoce la proteína codificada
por el gen.
Hibridación in situ
Las sondas de DNA pueden utilizarse para determinar la localiza-
ción cromosómica de un gen en un proceso den ominado hibrida-
ción in situ. El nombre deriva del hecho de que el DNA (o el
RNA) se visualiza mientras se encuentra en la célu la (in situ).
Esta técnica exige que se fijen las células, y se extiendan y desna-
turalicen los cromosomas en un portaobjetos. Después, se aplica
(a)
Figura 19-17. En la hibridación in situ, se utili-
zan sondas de DNA para determinar la localiza-
ción celular o cromosómica de un gen o su pro-
ducto. (a) Una sonda con fluorescencia verde es
específica del cromosoma 7, revelando una deleción
en una copia del cromosoma 7. (b) Se recurre a
hibridación in situ para detectar la presencia de
mRNA del gen tailless de un embrión de Drosophila.
(Parte a: Addenbrookes Hospital/Science Source.
Parte b: Cortesía de L. Tsuda).
una sonda marcada al portaobjetos, de la misma manera en que se
puede aplicar a un gel. Muchas sondas están unidas a colorantes
fluorescentes que pueden visualizarse directamente con el
microscopio (fig.19-17a). E s posible utilizar en forma simultánea
sondas con diferentes colorantes para investigar distintas secuen-
cj as de los cromosomas. La hibridación in situ con fluorescencia
(FISH) se ha utilizado 1nucho para identificar la localización cro-
mosómica de genes humanos.
La hibridación in situ también puede emplearse para determi-
nar la distiibución tisular de moléculas específicas de mRNA, lo
que sirve para conocer las diferencias de expresión génica entre
tipos celulares (fig. 19-17b). Se agrega al tejido una sonda de
DNA marcada complementaria de una n1olécula de 1nRNA espe-
cífi ca, y se determi na la localización de la sonda mediante el uso
de marcadores radiactivos o fluorescentes. A m enudo, determinar
dónde se expresa un gen ayuda a definir su función. Por ejemplo,
hallar que un gen muestra alta expresión solo en tejido cerebral
podría sugerir que desempeña un papel en la función neuronal.
Clonación posicional
Aún no se conoce el producto proteico asociado de muchos genes
con funciones importantes. Por ejemplo, las bases bioquínucas de
numerosas enfermedades genéticas humanas todavía son desco-
nocidas. ¿Cómo pueden aislarse estos genes? Un enfoque consis-
te en determ inar primero la localización general del gen en el cro-
mosoma uti Iizando las frecuencias de recombinación calculadas a
partir de cruzamientos o árboles genealógicos (véase cap. 7). Una
vez identificada la región cromosómica donde se halla el gen, es
posible clonar e identificar los genes de esta región. Luego, pue-
den aplicarse otras técnicas para identificar cuál de los genes
"candidatos" podría ser el que causa la enfermedad. Este enfoque
(aislar genes sobre la base de su posición en un mapa genético) se
denomina clonación posicional.
En el pritner paso de la clonación posicional, los genetistas uti-
lizan estudios de mapeo (véase cap. 7) para establecer el vínculo
entre marcadores moleculares y un fenotipo de interés, como una
enfermedad humana o un rasgo físico conveniente en una planta
o un animal. La demostración de una relación entre el fenotipo y
uno o más marcadores moleculares aportaría información acerca
de qué cromosoma porta el locus que codifica el fenotipo y su
localización general en ese cromosoma.
(b)
 Análisis genético molecular y biotecnología 553

Se utiliza una sonda complemen- patrón de expresión del gen -dónde y cuándo se transcribe-
taria del extremo del clan A para puede aportar indicios acerca de su función. Por ejemplo, es pro-
Clon A
• hallar el clan B que se superpone. bable que un gen de una enfermedad neurológica se exprese en el
cerebro. Los genetistas suelen buscar mutaciones en la región
• Se utiliza una sonda complemen-
taria del extremo del clon B para
hallar el clan C que se superpon~
codificante del gen en las personas con la enfermedad. En las
siguientes secciones y en el capítulo 20, se dirá n1ás acerca de la
Clon B
• Se utiliza una sonda com-
determinación de la función de los genes .

• plementaria del extremo del

don C para hallar el don D
CONCEPTOS
Clone que se superpone, que con-
tiene el gen de interés. La clonación posicional permite que los investigadores aíslen un gen

v_ _ _ _ , sin conocer su base bioquímica . Se utilizan estudios de ligamiento

para mapear el locus que produce un fenotipo de interés a una región
cromosómica particular. El paseo y el salto cromosómico pueden
Clon D
! emplearse para progresar de marcadores moleculares a clones que
contienen secuencias que cubren la región cromosómica. Después, se
Gen - - - - - - - - - - - Gen de evalúan los genes candidatos dentro de la región para determinar si
previamente clonado Dirección del paseo interés codifican el fenotipo de interés.

Co nclusión: al fabricar sondas comp lementarias a las

áreas de solapamiento entre fragmentos clonados en ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
una genoteca genómica, es posible conectar un gen de
interés con un gen ligado mapeado con anterioridad.
¿ Cómo se evalúan los genes candidatos identificados por clonación
posicional para determinar si cod ifican el fenotipo de interés?
Figura 19-18. En el paseo cromosómico, se utilizan genes vecinos
para localizar un gen de interés.

Aplicación: aislamiento del gen

El siguiente paso consiste en localizar con mayor precisión el
locus utilizando n1a.rcadores moleculares adicionales agrupados de la fibrosis quística
en la región cromosómica donde reside el locus. Una vez ubica- E l primer gen responsable de una enfermedad genética humru1a
do el gen e11 un mapa cron1osó1nico, pueden aislarse de una geno- que fue aislado co1npletan1ente por clonación posicional fue el
teca genómica los clones que cubren ta región. Aplicando una téc- gen de la fibrosis quística (CF, cystic fibrosis). La fibrosis quísti-
nica denominada paseo cromosómico (fig. 19-18), es posible ca es un trastorno autosómico recesivo caracterizado por infeccio-
progresar de genes vecinos a clones relacionados, uno de los cua- nes pulmonares crónicas, producción insuficiente de enzimas
les podría contener el gen de interés. La base del paseo cromosó- pancreáticas n ecesruias para la digestión y au1nento de la concen-
mico es el hecho de que una genoteca genómica está formada por tración de sal en el sudor (fig. 19-19). Es una de las enfe1meda-
un conjunto de fragmentos de DNA solapados (véase fig. 19-14).
Comenzamos con un marcador génico clonado que se encuentra
cerca del nuevo gen de interés, de manera que el "paseo" sea lo
más corto posible. Se utiliza un extremo del clon de un marcador
vecino (clon A en la fig. 19-18) para crear una sonda complemen-
taria. Esta sonda se usa p ara examinar la genoteca genómica con
el fin de hallar un segundo clon (clon B) que se superpone con el
primero y se extiende en la dirección del gen de interés. Se aísla
y se p urifica este segundo clon, y se prepara una sonda a partir de
su extremo. La segunda sonda se emplea para examinar la geno-
teca en busca de un tercer clon (clon C), que se superpone con el
segundo. De esta manera, se puede " pasear" sistemáticrunente
hacia el gen de interés, de a un clon por vez.
Una técnica relacionada denonúnada saJto cromosó1nico permi-
te moverse de marcadores relacionados más distantes a clones
que contienen la secuencia de interés. Una vez que se han obteni-
do por paseo o salto cromosómico los clones que cubren la región
delineada, se identifican todos los genes localizados dentro de la re-
Figura 19- 19. La fibrosis quística f ue la primera enfermedad genética
gión. Los genes pueden distinguirse de otras secuencias por la
cuyo gen causal se aisló complet amente por clonación posicional.
presencia de características tí picas, como secuencias consenso en Los nuevos tratamientos han ayudado mucho a los pacientes con fibrosis
el promotor, y un codón de iniciación y un codón de termi nación quística. Esta niña usa un "chaleco inteligente", que agita su tórax para
dentro del mismo mru·co de lectura. Después de haber identifica- ayudar a disolver el moco de sus pulmones e inhala de un nebulizador que
do los genes "candidatos", pueden evaluarse para deternlinar cuál contiene enzimas y agua salina, que también ayuda a disolver el moco.
tiene mayor probabilidad de ser el gen de interés. A menudo, el (Jeffrey Sauger Photography).
 554 CAP[TULO 19

des genéticas más comunes en los caucásicos, cuya frecuencia es

Se llevó a cabo análisis de alrededor de 1 cada 2000 nacidos vivos. Casi el 5% de los
_-,::::::;.:::::=:¡~ de ligamiento en familia! blancos son portadores de la mutación CF.
con fibrosis quística, .. .
Los genetistas que intentaron aislar el gen CF se enfrentaron
con una tarea formidable. Los síntomas de la enfern1edad, en
Análisis de ligamiento especial la elevada concentración de sal en sudor, sugirieron que
... y se observó una aso-
q31-32 ciación entre la herencia el gen CF interviene de alguna manera en el desplazamiento de
Cromosoma 7 de marcadores molecu- iones hacia el interior y el exterior de la cél ula, pero no se di spo-
1
lares del cromosoma nía de ninguna información sobre la proteína codificada por el
7 y la CF.
gen. En esa época, todavía no se había secuenciado el genoma
\ humano. Los análisis de árboles genealógicos mostraron que la
1 1 fibrosis quística se heredaba con10 un rasgo autosómico recesivo,
MET D7S8 de manera que podría estar localizado en cualquiera de los 22
pares de cromosomas autosómjcos. En consecuencia, los genetis-
Análisis de
ligamiento adicional Los estudios de ligamiento tas buscaban un gen desconocido (que era probable que abarcara
con marcadores adicionale algunos miles o decenas de miles de pares de bases) entre los
indicaron que el locus de 3200 millones de pares de bases del genoma humano.
1 CF está cerca de los mar- Los investigadores co1nenzaron por buscar una asociación entre
MET D7S340 D7S122 D7S8 cadores D7S340 y D7S 122.
la herencia de la fib rosis quística y la de otros rasgos (fig. 19-20).
Los estudios iniciales se vieron limitados por la escasez de rasgos
genéticos que variaban y que podían utilizarse para estudios de
Clones aislados Se aislaron los
mapeo de genes, pero en la década de 1980 los avances de labio-
clones de
la región por paseo y
logía molecular aportaron una gran cantidad de marcadores mole-
Clones con Salto
solapamientos cromosómi alto cromosómicos. culares que podían emplearse para análisis de ligamiento (véase
p. 190 del cap. 7). Los genetistas reunieron árboles genealógicos
/
r ----- de fainilias en las que varios miembros tenían fibrosis quística.
Compararon la herencia de fibros is quística con la de marcadores

- moleculares de los miembros de estas familias para buscar evi-

dencia de ligamento. Se observó que el gen CF estaba estrecha-
mente ligado a dos marcadores, MET y D7S8, localizados en el
brazo largo del cromosoma 7. MET y D7S8 están separados por
1 alrededor de 1,5 unidades de 111apa (véase cap. 7 ). En el geno1na
Gen marcador Genes El análisis de las secuencias ~ humano, cada unidad de 1napa con·esponde aproximadamente a 1
ligado DNA dentro de los clones reve-
millón de pares de bases; por consiguiente, el gen CF se localiza
laron cuatro genes candidatos.
en algún lugai· dentro de un segmento de 1,5 1nillones de pares de
bases de DNA, una enorme extensión de secuencia.
Se llevaron a cabo estudios de liga1niento adicionales con otros
marcadores para delinear con mayor precisión en qué región del
Cuatro genes candidatos 1,5 millones de pares de bases residía el gen CF. Los investiga-
Otros estud ios dores seleccionaron más marcadores moleculares de la región
Nuevos estudios
eli minaron tres de los que rodeaba a MET y D7S8, y realizaron estudios de ligamiento
de ligamiento
___.,.,:::::::::.:::;:::;:::::~7 genes candidatos. entre estos nuevos marcadores y CF (véase fig. 19-20). Estos
y expresión
- estudios identificaron otros dos marcadores, D7S 1122 y D7S340,
que estaban estrechamente ligados con CF. Más aún, n1ostraron
Posible gen de la CF que el orden de los cuatro marcadores era MET-D7S340-
La secuenciación del gen
D7S122-D7S8, y que el gen CF era muy próximo a D7S122 y
Secuenciación D7S340. Este hallazgo limitó a 500 000 pb la región en la que
reveló la presencia de una
del gen reside el gen CF.
~-;::::::-~ deleción de 3 pb en el
gen del paciente con CF. En esta etapa, los genetistas con1enzaron a aislar clones de
Persona CF Deleción de 3 pb secuencias de la región delineada. A partir de marcadores mole-
culares, utili zaron una combi nación de paseo cromosómico y
"'- TATCAT 7GGTGTTTCCTA salto cromosómico para identificai· clones de genotecas humanas
/ TATCATCTTTGGTGTTTCCTA
que cubrían por completo la región de interés (véase fig. 19-20).
Persona sana \ Un examen de secuencias dentro de estos clones reveló la presen-
Secuencia de la región cia de cuatro genes en la región abarcada por los n1arcadores liga-
codificante del gen
dos (véase fig. 19-20). Luego, se efectuai·on otros estudios para
caracterizar mejor estos genes candidatos. Tres de los genes can-
Figura 19-20. El gen de fibrosis quística se localizó mediante clona- didatos al final se eliminaron, porque los estudios de ligamiento
ción posicional. sugerían que no estaban estrechamente ligados con la herencia de
 Análisis genético molecular y biotecnología 555

19.4 Las secuencias de DNA se pueden

determinar y analizar
Además de clonar y amplificar DNA, las técnicas moleculares se
utilizan para analizar moléculas de DNA mediante el estudio y la
determinación de sus secuencias.
El mRNA se expresa int en-

-- samente en el páncreas,
un tejido que se sabe es
afectado por la CF.
Polimorfismos de longitud de los fragmentos
de restricción
Una contribución importante de la genética molecular consistió
en aportar numerosos marcadores genéticos que pueden utilizar-
se en eJ mapeo de genes. Aprendimos có1no estos marcadores son
esenciales para el éxito de la clonación posicional. Un grupo de
estos marcadores son los polimorfismos de longitud de los frag-
mentos de restricción (RFLP), que son variaciones (polimorfis-
1 2 3 4 5 6 7 8 910111213141516 mos) de los patrones de fragmentos producidos cuando se cortan
Calles moléculas de DNA con la misma enzima de restricción (fig. 19-
22). Estas diferencias se heredan y pueden ser utilizadas en el
Figura 19-21 . El gen candidato para la fibrosis quística se expresa en
los tejidos pancreático, respiratorio y de las glándulas sudoríparas,
afectados por la enfermedad. Se muestra una transferencia Northern del La secuencia de DN~
mRNA producido por el gen candidato en diferentes tejidos. Estos datos - --=====; tenía dos sitios de res-
aportaron evidencia de que el gen candidato es, de hecho, el que causa Cromosoma Sitio Haell l
tricción Haelll.
fibrosis quística. (De J.R. Riordan y cols., Science 245 :1066-1073, 1989.
ancestral
GGCC
t t
Reimpreso con autorización de AAAS). DNA J(ll'c{(
Una mutación crea un
polimorfismo. Algunas
copias tienen ambos
sitios de restricción, y
fibrosis quística o porque el análisis de las secuencias o sus patro- otras, solo uno.
nes de expresión sugerían que no eran el gen CF. José
Se realizaron estudios de hibridación con uno de los genes res-
tantes para deten11inar dónde se expresaba. Se aisló RNA 1nensa-
jero de diferentes tejidos y se estudió con sondas que contenían
secuencias del gen candidato. El gen mostró altos niveles de
expresión en páncreas, pulmones y glándulas sudoríparas (fig. 19-
21), tejidos que se sabe son afectados por la :fibrosis quística.
! Cuando el DNA de dos
personas es digerido
por Haelll, ...

Luego, se secuenciaron copias del gen candidato de una perso-

na sana y de una persona con fibrosis quística, y se exa1ninaron
diferencias de los datos de la secuencia que podiían representar
una mutación causante de fibrosis quística. Los resultados revela-
ron que la persona con fibrosis quística tenía una deleción de 3 pb Análisis de RFLP
en la región codificante del gen, 1nientras que la persona sana no ... aparecen d;s]
presentaba esta deleción. La deleción determinaba la ausencia de patrones diferentes.
DNA de DNA de )
un anunoácido fenilalanina de la proteína codificada por el gen El DNAde
Roberto José
Roberto está
candidato. Después, en un gran número de pacientes con fibrosis cortado en t res
quística los genetistas utilizaron PCR para amplificar la región bandas, porque , El DNA de José
del gen donde se hallaba la deleción; el 68% de los pacientes con sus cromosomas está cortado solo
poseen ambos si- en dos bandas,
fibrosis quística tenía esta deleción. Estudios ulteriores demostra- tios de restricción. porque sus cromo-
ron que los restantes pacientes con fibrosis quística presentaban
mutaciones en otros lugares del gen candidato, lo que probó que Polimorfismo de so mas tienen solo j
uno de los dos sitios.
longitud de los
este era, de hecho, el locus que causaba la enfermedad.
fragmentos de Patróh Patrón
Por último, los investigadores demostraron que el gen CF codi- restricción A B
fica una proteína de 1nembrana que controla el desplazamiento de
cloruro hacia el interior y el exterior de las células, y que se cono- Este ejemplo asume que Roberto es homocigótico para
el patrón A y que José es homocigótico para el patrón B.
ce en la actualidad como gen regulador de la conductancia trans- Una persona heterocigótica para RFLP presentaría bandas
membrana de la fibrosis quística (CFTR). Los pacientes con en ambos patrones, A y B.
fibrosis quística tienen dos formas mutadas de CFTR, las cuales
causan que los canales de cloruro permanezcan cerrados. Se acu- Figura 19-22. Los polimorfismos de longitud de los fragmentos de
mulan iones cloruro en la célula, lo que induce la formación de restricción son marcadores genéticos que pueden utilizarse en el
1noco espeso y los síntomas de la enfermedad. mapeo.
556 CAP[TULO 19
AC 88
Hh hh
11
a A8 (8 A8 C8 A8 a A8
Hh hh Hh hh Hh hh Hh hh
Todo niño que hereda el alelo C tiene la enfermedad. 7 E l método de Sanger, o didesoxi, de secuenciación del DNA se
Por consiguiente, el RFLP está estrechamente ligado
con el gen de la enfermedad.
J como molde p ara crear una serie de moléculas nuevas de DNA.
Figura 19-23. Los polimorfismos de longitud de los fragmentos de
restricción pueden utilizarse para detectar ligamiento. La letra H hace
referencia al alelo de la enfermedad de Huntington; h hace referencia al
alelo normal. A, 8 y C se refieren a alelos de RFLP. Todo niño que hereda el
alelo C de RFLP tiene enfermedad de Huntington, lo que indica que los
genes que codifican los RFLP y la enfermedad de Huntington están estre-
chamente ligados.
mapeo, de modo similar al u so de las diferencias alélicas p ara
mapear genes convencionales.
Para ilustrar el mapeo con RFLP, considérese la enfermedad de
Huntington, un trastorno autosómico do1ninante. En la familia
mostrada en la figura 19-23, el padre es heterocigótico tanto para
enfermedad de Huntignton (Hh) como para un patrón de restricción
(AC). Cada hijo hereda del padre un alelo de enfermedad de Hun-
tington (H) o un alelo normal (h); cualquier hijo que hereda el alelo
H presenta la enfermedad, porque esta es un trastorno autosómico
dominante. El niño también hereda uno de los dos alelos RFLP del
padre, ya sea A o C, que produce el patrón RFLP correspondiente.
En la figura 19-23, cada hijo que hereda el patrón C del padre tam-
bién hereda la e nfermedad de Huntington (y, por consiguiente, el
alelo H), porque el locus para el RFLP está estrechamente ligado
con el locus para el gen causante de la enfermedad. Si no hubiéra-
mos observado ninguna correspondencia entre la herencia del
RFLP y la herencia de la enfennedad, la fa lta de correspondencia
indicaría que los genes que codifican el RFLP y la enferm.e dad de
Huntington se segregan en forma independiente y no están ligados.
En los últimos años, el acceso a tecnología de secuenciación de
DNA no costosa (véase más adelante) ha disminuido la utilización
de RFLP en el 1napeo de genes y el diagnóstico genético. Hoy en
día, el diagnóstico de enfen11edad de Huntington se lleva a cabo de
manera sistemática amplificando medjante PCR una porción del
gen de esta enfermedad. i:•~~!!:a!i!!:=~=!=!!!=~~~!!:!:!!J
CONCEPTOS
Los poli morfismos de longitud de los fragmentos de restricción son
variaciones del patrón de fragmentos producidos por las enzimas de
restricción , que revelan variaciones de las secuencias de DNA. Son
muy utilizados en el mapeo de genes.
Secuenciación del DNA
Un 1nétodo molecular poderoso para analizar el DNA es una téc-
nica conocida como secuenciación del DNA, que determina con
rapidez la secuencia de bases del DNA. La secuenciación permi-
te leer la información genética del DNA, lo que aporta una enor-
me cantidad de datos acerca de la estructura y la función de los
genes. A mediados de 1970, F rederi ck Sanger y cols. crearon el
método de secuenciación didesoxi, basado en la elongación del
DNA por la DNA polimerasa. Aproximadamente al misn10 tiem-
po, Allan Maxam y Walter Gilbert desarrollaron un segundo
tnétodo basado en la degradación quí1nica del DNA. El método de
Sanger se convirtió rápidamente en el procedi mie nto estándar
para secue nciar cualqujer fragmento purificado de DNA.
basa en la replicación. El fragmento para secuenciar se e1nplea
En el proceso, la replicación a veces tennina (aunque no siempre)
cuando se encuentra una base específica, lo que produce cadenas
de DNA de diferentes longitudes, cada una de las cuales termina
en la misma base.
E l método se basa en la utilización de un sustrato especial para
la síntesis de DNA. Normalmente, el DNA se sintetiza a partir de
desoxir1ibonucleósidos trifosfato (dNTP), que tienen un grupo
OH en el áto1no de carbono 3' (fig. 19-24a). En el método de
Sanger, un nucleótido especial, denominado un didesoxirribonu-
cleósido trifosfato (ddNTP; fig. 19-24b), se utiliza como uno de
los sustr atos. Los ddNTP son idénticos a los dNTP, excepto que
carecen de un grupo 3' -OH . En el curso de la sfutesis de DNA, se
incorporan ddNTP en una cadena de DNA en crecimiento. Sin
e1nbargo, una vez incorporado un ddNTP en la cadena de DNA, no
pueden añadirse más nucleótidos, dado que no hay ningún gr upo
3' -OH para formar un enlace fosfodiéster con un nucleótido
incompleto. Por lo tanto, los ddNTP terminan la síntesis de D NA.
Si bien desde el punto de vista técnico es posible secuenciar
una sola molécula de DNA, la mayoría de los procedimientos de
secuenciación utilizados en la actualidad requieren una cantidad
consi derable de DNA; cualqLrier fragmento de DNA que se vaya
(a) (b)
o- o-
O =p1 - 0 - O=p1 - o-
1 1
o o
O =J- 0- o =J- o-
1 1
o o
o =J - o- o =J - o-
1 1
o o
1 1
CH 2 CH 2
OH H H H
Desoxirribonucleósido D idesoxi rribonucleósido
trifosfato (d NTP) trifosfato (dd NTP)
Figura 19-24. La reacción de secuenciación didesoxi requiere un sus-
trato especial para la síntesis de DNA. (a) Estructura del desoxirribonu-
cleósido trifosfato, el sustrato normal para la síntesis de DNA. (b) Estructura
del didesoxirribonucleósido trifosfato, que carece del grupo OH en el
átomo de carbono 3'.
 Análisis genético molecular y biotecnología 557

Cada una de las cuatro reaccio- :-======---- Molde - 3, 5'

nes contiene DNA diana mono- Cebador - 5' - OH 3'
[ catenario para secuenciar,... j ... un cebador, ...
f.taíi:I f.iii:1
1r!li:il '1ícii:il
... los cuatro desoxirribonucleósi- + DNA
dos trifosfato, DNA polimerasa ... polimerasa

Ó y un tipo de didesoxi-
rribonucleósido trifos-
f ato (ddNTP). + ddAI + dd CI + ddGIP + ddTJ P

ÚSe añaden nucleótidos al extremo 3' del

cebador, y el DNA diana se utiliza de
~ olde.

rlcuando se incorpora un didesoxinu- 1

L
cleótido a la cadena en crecimiento, Molde
GATTCGAGCTG • GATTCGAGC
termina la síntesis, porque el dideso-
'-xinucleótico carece de un grupo 3'-0~ ,..;.== - -

~
La síntesis termina en diferentes posiciones en las
distintas cadenas, lo que genera un conjunto de
fragmentos de DNA de diferente longitud, cada A C G T · 3' 5'
uno de los cuales termina en un didesoxinucleótid AT
con la misma base. GC
TA
Los fragmentos producidos en
C G
cada reacción se separan GC
mediante electroforesis en gel. AT Autorradiografía
GC de la electroforesis en gel
• La secuencia puede leerse directa- C G
TA
mente de las bandas que aparecen TA
en la autorradiografía del gel co- AT
menzando por la parte inferior. GC
L 5' 3'
• La secuencia obtenida es el com- / \
Secuencia de Secuencia de la
plemento de la cadena molde
original. la cadena cadena molde
complementaria original

Figura 19-25. El método didesoxi de secuenciación del DNA se basa en la terminación de la síntesis de DNA.

a secuenciar deber ser amplificado, primero, por PCR o por clo-
nación en bacterias. Las copias del DNA diana se aíslan y se divi-
den en cuatro paites (fig. 19-25). Cada parte se coloca en un tubo
diferente, a los que se añaden:
l. muchas copias de un cebador complementario de un extremo
de la cadena de DNA diana;
2. los cuatro tipos de desoxirribonucleósidos trifosfato, los pre-
cursores normales de la síntesis de DNA;
3. una pequeña cantidad de uno de los cuatro tipos de didesoxi-
rribonucleósidos trifosfato, que terminarán la síntesis de DNA
en cuanto sea incorporado en cualquier cadena en crecüniento
(cada uno de Los cuau·o tubos recibió un ddNTP diferente);
4. DNA polimerasa.
El cebador o uno de los dNTP están marcados radiactiva o quími-
camente, de n1anera de poder detectar el DNA recién producido.
Dentro de cada uno de los cuatro tubos, la enzima DNA poli-
merasa sintetiza DNA.. Consideremos la reacción en uno de los
cuatro tubos: el que ha recibido ddATP. Dentro de este tubo, cada
una de las cadenas simples del DNA diana sirve de molde para la
síntesis de DNA. El cebador se aparea con su secuencia comple-
mentaria en un extre1no de cada cadena molde. La DNA polime-
rasa elonga una cadena nueva de DNA a partir de este cebador.
Donde la DNA poJi merasa encuentra una T en la cadena 1nolde,
utiliza en fo rma aleatoria un d.ATP o un ddATP para introducil'
una A en la cadena recién sintetizada. Como en la mezcla de reac-
ción hay más dATP que ddATP, la mayoría de las veces se incor-
pora dATP, lo que pernrite que prosiga la síntesis de DNA. Sin
e1nbargo, en ocasiones se incorpora ddATP en la cadena, y ter1ni-
na la síntesis. La incorporación de ddA en la cadena nueva se pro-
duce de manera aleatoria en diferentes posiciones en distintas
copias, lo que produce un conjunto de cadenas de DNA de dife-
rente longitud (12, 7 y 2 nucleótidos de longitud en el ejemplo
 558 CAP[TULO 19

Se aísla un fragmento de DNA mono-
catenario cuya secuencia de bases
debe determinarse (el molde). _J
Se marca cada uno de los cuatro
ddNTP con un colorante fluorescente
distinto, y se lleva a cabo la secuen-
ciación de Sanger.
Los fragmentos que terminan con la
5' CCTATTATGACACAACCGCA 3' que contenía la reacción con ddGTP, lo que significa
ddCTP ddGTP ddTTP ddATP
que el primer nucleótido sintetizado contenía guanina
m ca o m (G) . La siguiente banda hacia arriba proviene del tubo
que contenía ddATP; por lo tanto, el siguiente nucleóti-
\I~ do de la secuencia es adenina (A), etc. De esta manera, se
r ~•~iíilW lee la secuencia desde abajo hacia arriba del gel, y los
nucleótidos de abajo corresponden al extremo 5' de la
cadena de DNA recién sintetizada y los de arriba, al extre-
Cadena Cebador
mo 3' . Recuérdese que la secuencia obtenida no es la del
molde I (secuencia
DNA diana, sino la de su complemento. Obsérvese la se-
\ ; conocida)
cuenciación didesoxi en acción en la Animación 19.3.
s' o o i d i f \ \ ~ d3' ► •
3' cij 5' Durante muchos años, la secuenciación del DNA se
realizaba, en gran medida, a mano , y resultaba trabajosa
5' CCTATTATGACACAACCGCA 3'

T misma base tiene el mismo colorante

unido.
3' GGATAATACTGTGTTGGCGT 5'

• Se desnaturalizan los productos, y se
mezclan y cargan en un solo pocillo
del gel de electroforesis los fragmen-
tos producidos por las cuatro reac-
ciones. Los fragmentos migran por el
gel según su tamaño, ...
1:1 ... y el colorante fluorescente del
'--
DNA es detectado por un haz láser.
5'
y costosa. Hoy en día, la secuenciación suele llevarse a
cabo en aparatos automatizados que utilizan colorantes
fluorescentes y escáneres láser para secuenciar miles de
3' pares de bases en unas pocas horas (fig. 19-26). Aquí
también se utiliza la reacción didesoxi, pero los ddNTP
Láser usados en la reacción son marcados con colorantes fluo-
rescentes y se utiliza un color diferente p ara cada tipo de
didesoxinucleótido. En este caso, las cuatro reacciones
Electroforesis
de secuenciación pueden tener lugar en el mismo tubo
de ensayo y es p osible colocarlas en el mismo pocillo
durante la electroforesis. Los aparatos de secuenciación
111111111111111 11 111 n1ás recientes llevan a cabo la electroforesis en tubos
capil ares que conti enen gel. Los fragmentos de diferen-
Fragmento
más largo
l
~~ ATAATACTGTG TTGGCGT

•
Fragmento
más corto
te tainaño producidos por la reacción de secuenciación
se separan dentro de un tubo y migran a través de un haz
láser y un detector. A medida que los fragmentos pasan
Dcada fragmento aparece como un Detector por el láser, se activan sus colorantes fluorescentes, y un
pico en el registro computarizado; el escáner óptico detecta la fluorescencia resultante. Cada
color del pico indica cuál es la base colorante emite fluorescencia de una longitud de onda
presente.
característica, que es leída por el escáner óptico. La
información se introduce en un ordenador para su inter-
La información de la secuencia se lee
pretación, y los resultados se imprimen con10 una serie
directamente en el ordenador.
de picos en un gráfico (véase fig. 19-26). Los aparatos
3' G GATA A T A C T G T G T T G GC G T 5' de secuenciación auto1natizada pueden contener 96 o
más tubos capilares, lo que pennite leer secuencias de
Figura 19-26. El método de secuenciación didesoxi puede ser auto- 50 000 a 60 000 pb en unas pocas horas.
matizado.

ilustrado en la fig. 19-25), cada una de las cuales termina en un
nucleótido que contiene adenina.
En los otros tres tubos tienen lugar reacciones equivalentes,
excepto que la síntesis se termina en nucleótidos con una base
diferente en cada tubo. Después de completar las reacciones de
polimerización, se desnaturaliza todo el DNA de los tubos y se
separan los productos monocatenai-ios de cada reacción mediante
electroforesis en gel.
Los contenidos de los cuatro tubos se separan uno al lado del
otro en gel de acrilamida, de manera que es posible distinguir las
cadenas de DNA que difieren en longitud solo por un nucleótido.
Después de la electroforesis, se revelan las localizaciones, y por
lo tanto los tamaños, de las cadenas de DNA en el gel mediante
el uso de marcadores radiactivos o químicos.
Leer la secuencia de DNA es la parte más simple y más corta
del procedimiento. En la figura 19-25, es posible observar que la
banda n1ás cercana al extremo inferior del gel proviene del tubo
CONCEPTOS
El método de secuenciación didesoxi utiliza ddNTP, que terminan la
síntesis de DNA en bases especificas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
En la reacción de secuenciación didesoxi, ¿ qué termina la síntesis de
DNA en una base particular?
a. La ausencia de una base en el ddNTP detiene la DNA polimerasa.
b. El ddNTP provoca una ruptura del esqueleto de azúcar-fosfato.
c. La DNA polimerasa no incorporará un ddNTP en la cadena de
DNA en crecimiento.
d. La ausencia de un grupo 3'-0H en el ddNTP impide la adición de
otro nucleótido.
 Análisis genético molecular y biotecnología 559

(a) (e)
$'
DNA ~· fj sobre la placa, fluye una solución ]
que contiene un desoxinucleósi-

!
0 Se rompe el DNA en
fragmentos ... Cadena
molde \
3' ATGCTAAC +dATP
/ do trifosfato específico (dATP).
;

S' lt.ml
... y se unen adaptadores q~ / O cuando se añade un nucleótido
Adaptadores 1 contiene secuencias del cebador
a cada fragmento. El DNA se
Cadena
recién
a la cadena en crecimiento, se
libera PPi y produce una reacción
hace monocatenario. sintetizada química que emite luz.
Adaptador 1
I
A
Cada fragmento de DNA esü.'7
(b) unido a una microesfera y rode-
. / ado de una gota de solución
M1croesfera
de captura de D
que contiene reactivos para PCR. j
• Un instrumento registra la
luz emitida por cada pocillo.

A -

Ninguna
reacción

• Se amplifica el fragmen- 3' ATGCTAAC

PCR de emulsión +dGTP
~de DNA por PCR. 5' itMffi"I

1/ - Ninguna
--7 ' reacción

El DNA se hace monocatenario.

Se introduce cada microesfera + dTTP Secuencia de
en un pocillo y se disponen en nucleótidos
l capas reactivos de secuenciación. j A - - TT

A C G T
, Dentro de
Nucleót ido
cada pocillo, 3' ATGCTAAC agregado
se sintetiza 5' TACGATT +dATP
DNA. mJLa cantidad de luz es propor-
cional al número de nucleó-
Microesfera con DNA tidos agregados.

Figura 19-27. Los métodos de secuenciación de próxima generación pueden determinar de manera simultánea
la secuencia de cientos de miles o millones de fragmentos de DNA. Aquí se ilustra la pirosecuenciación.

Tecnologías
. , de secuenciación de próxima
generac1on
Métodos 1nás modernos, denominados tecnologías de secuen-
ciación de próxima generación, han vuelto la secuenciación
cientos de veces más rápida y menos costosa que el método de
secuenciación tradicional de Sanger. La mayoría de las tecno-
logías de secuenciación de próxima generación realizan se-
cuenciación en paralelo, lo que significa que se secuencian en
forn1a simultánea cientos de miles o incluso millones de frag-
n1entos de DNA.
PIROSECUENCIACIÓN Un tipo de secuenciación de próxima gene-
ración, denominada pirosecuenciación, se basa en la síntesis de
DNA: se añaden nucleótidos de uno a la vez en el orden especifi-
cado por el DNA molde, y la adición de un nucleótido particular
se detecta con un destello de luz, generado cuando se añade el
nucleótido.
Para llevar a cabo la pirosecuenciación, se debe fragmentar pri-
mero el DNA que va a ser secuenciado (fig. 19-27a). Se agregan
adaptadores, que consisten en una cadena corta de nucleótidos, a
cada fragmento. El adaptador proporciona una secuencia conoci-
da para cebar una reacción de PCR. Después, los fragmentos de
DNA se hacen 1nonocatenarios. En una versión de la pirosecuen-
ciación, cada fragmento se adhiere después a una microesfera dis-
tinta y se lo rodea de una gota de solución (fig. 19-27b). La
microesfera se utiliza para sostener el DNA y, más tarde, deposi-
tarlo en una placa para la reacción de secuenciación (véase más
560 CAP[TULO 19
adelante). Dentro de la gota, el fragme nto se amplifica por PCR,
y las copias de DNA se mantienen unidas a la microesfera. Tras
la amplificación por PCR, se mezclan las microesferas con DNA
polimerasa y se depositan en una placa que contiene más de un
millón de pocillos (pequeños orificios). Cada microesfera de
deposita en un pocillo diferente.
La reacción de secuenciación tiene lugar en cada pocillo y se
basa en la síntesis de DNA. Recuérdese del capítulo 12 que el
sustrato para la síntesis de DNA es un desoxinucleósido trifosfa-
to formado por un azúcar desoxilTibosa unida a una base y tres
fosfatos. En el proceso de sú1tesis de DNA, se eliminan por esci-
sión dos fosfatos (pirofosfato), y el nucleótido resultante se une al
extre1no 3' de la cadena de DNA en crecimiento. Se hace pasar
por los pocillos una solución que contiene un tipo particular de
desoxinucleósido trifosfato: por ejemplo, desoxiadenosina trifos-
fato (tig. 19-27c). Si el molde de un pocillo particular especifica
un nucleótido de adenina en la siguiente posición de la cadena en
crecinlÍento, se escinde el pirofosfato del nucleósido trifosfato y
se añade el nucleótido de adenina. Una reacción quí1nica utiliza
el pirofosfato producido en la reacción para generar un destello de
luz, que es medido por un detector óptico. La cantidad de luz emi-
tida en cada pocillo es proporcional al número de nucleótidos
agregados: si el molde de un pocillo especifica tres nucleótidos de
adenina sucesivos (A), se añaden tres nucleótidos y se emite el tri-
ple de luz que si se agregara una sola A. Si la posición del molde
especifica una base distinta de adenina, no se añade ningún nu-
cleótido, no se produce pirofosfato y no se emite luz.
Como ya se mencionó, la primera solución que se pasa sobre la
placa contiene adenosina trifosfato y permite añadir nucleótidos
de adenina al molde. Cada pocillo con un molde que especifique
adenina en la siguiente posición generará un destello de luz. Des-
pués, se pasa una solución con un tipo diferente de nucleósido tri-
fosfafo, por ejemplo desoxiguanosina trifosfato, por los pocillos.
Cualquier fragmento que especifique una G en la siguiente posi-
ción de su cadena en crecimiento agregará un nucleótido de gua-
nina y emitirá un destello de luz. Los nucleósidos trifosfato se
pasan por los pocillos en un orden predeterminado, y se mide la
luz emitida por cada pocillo. De esta 1nru1era, se secuencian en
forma si multánea cientos de miles o millones de fragmentos de
DNA sobre la base del orden en que se añaden los nucleótidos al
extremo 3' de la cadena en crecimiento. La pirosecuenciación
determina solo la secuencia de los fragmentos de cada pocillo; no
perrnite, por sí lnisma, reunir las secuencias de estos fragmentos
en la secuencia de todo el fragn1ento original de DNA. La reunión
de los fragmentos secuenciados en un segmento continuo de
DNA es un problen1a general de la secuenciación de genomas que
se explicará en el capítulo 20.
SECUENCIACIÓN ILUMINA Existe un amplio uso de varias otras for-
mas de secuenciación de próxüna generación. La secuenciación
Ilumina emplea una tecnología similar a la del método didesoxi
de Sanger. Se utilizan nucleótidos especiales marcados con fl uo-
rescencia, con un marcador de color diferente para cada tipo de
nucleótido. Asimismo, cada nucleótido tiene un grupo químico
(un tern1Ínador) que, una vez incorporado en la cadena de DNA
en crecimiento, impide la incorporación de nucleótidos adiciona-
les. Esto es similar a la terminación causada por didesoxinucleó-
tidos en la secuenciación de Sanger. Si n embargo, aquí el terlni-
nador es reversible: puede eliminarse quími camente. Para llevar a
cabo la secuenciación, el DNA primero se fragmenta en millones
de fragmentos cortos solapados. Los fragmentos se adhieren a un
po11aobjetos y después se los amplifica, lo que crea grupos de
hasta 1000 copias de cada frag1nento en estrecha proximidad con
el portaobjetos. Luego, se desnaturalizan los fragmentos y se
agrega una solución de cebadores, DNA polin1erasa y los nucleó-
tidos especiales. El cebador se une a cada DNA molde y se incor-
pora el primer nucleótido a la cadena recién sintetizada. Se elimi-
na la solución por lavado y se excita el marcador del nucleótido
incorporado con un láser, que lo hace emitir fluorescencia. Como
ya se mencionó, cada tipo de nucleótico (A, T, G o C) tiene un
1narcador f luorescente de color disti nto, de manera que el color de
la luz producida revela el tipo de nucleótido recién agregado.
Después, se eliminan químicamente el terminador y el marcador
fluorescente, y se repite el proceso. A medida que se añaden
nucleótidos de uno a la vez, se lee la secuencia como una serie de
destellos de luz coloreada de cada grupo de DNA. Se secuencian
en for1na simultánea cientos de miles de grupos de DNA, cada
uno de los cuales está formado por copias de un fragmento dife-
rente de DNA, lo q ue permite secuenciar grandes cantidades de
DNA en un breve tiempo.
L a mayoría de las técnicas de secuenciación de próxima gene-
ración leen fragmentos de DNA más cortos que las reacciones de
secuenciación de Sanger, pero co1no se secuencian en forn1a
sitnultánea cientos de miles o millones de frag1nentos, estos
métodos son mucho más rápidos que la tecnología de secuencia-
ción de Sanger tradicional.
TECNOLOGÍA DE SECUENCIACIÓN DE TERCERA GENERACIÓN En la
actualidad, se están desan·ollando métodos de secuenciación aún
más avanzados y rápidos, que suelen deno1ninarse secuenciación
de tercera generación. Por ejemplo, la secuenciación por nanopo-
ros determina la secuencia de moléculas individu ales de DNA. En
este método, se hace pasar una cadena simple de DNA a través de
un orificio dinlinuto (un nanoporo) de una membrana. A 1nedida
que la molécula atraviesa el nanoporo, altera una corriente eléc-
trica de la 1nembrana, y el carácter de la alteración depende de la
forma de la molécu la que pasa por el nanoporo. Cada una de las
cuatro bases del DNA causa una alteración característica, de
manera que puede leerse la secuencia de DNA analizando la
corriente de la membrana a medida que pasa la cadena, de a un
nucleótido por vez, a través del nanoporo. Es posible crear cien-
tos de 1niles de nanoporos en un solo chip, de 1nai1era que pueden
leerse en forma simultánea muchos frag mentos de DNA. Uno de
los objetivos de la tecnología de secuenciación de tercera genera-
ción es desarrollar un método que permita secuenciar todo el
genoma humano por menos de 1000 US$.
CONCEPTOS
Los nuevos métodos de secuenciación de próxima y tercera generación
secuencian muchos fragmentos de DNA en forma simultánea y permi-
ten una determinación mucho más rápida y menos costosa de la secuen-
cia de bases de un DNA que el método de secuenciación de Sanger.
 Pregunta: ¿cómo se puede identificar a las personas sobre la base de diferencias
de su DNA?

Individuo 1 Ind ividuo 2 más largo que eJ DNA de una persona con menos
Métodos repeticiones.
~
Se recolectan
- Los cebadores usados en la reacción de PCR tie-
muestras de
nen un marcador flu orescente, de manera que los
DNA ... fragmentos de DNA resultantes pueden detectarse
DNA DNA con un láser. Los cebadores para diferentes locus de
STR se marcan con cebadores de diferentes colores,
Secuencia
microsatél ite +8 repeticiones de CA + repeticio nes
2
de manera que puedan diferenciarse productos de
tamaño similar de distintos locus. Después de la
"' I
GTGTG GTG GTGTGT
CACA
GTGT
I
PCR, los fra gm entos se separan en un gel o median-
te un aparato de electroforesis capilar. En la electro-
... y se las
somete a PCR. foresis capilar, la presencia de cada fragmento se
l. ,,,ONA CACA detecta cuando este migra a través de un láser, y
f,l!Mi1!MM!®ltf;1 m o lde
',- MfctC9fclM'5'CctfclW luego un ordenador calcula el tamaño de cada frag-
Cebador \f¡}'&}t}:fffrfflW--- 4 Cebador CACA mento sobre la base de su velocidad de migración.
'DNA Los fragmentos se representan como picos en un
~ longitud del fragmento m olde gráfico; la distancia sobre el eje horizontal represen-
de DNA producido por
PCR depende del número
ta el tamaño del fragmento, mientras que la altura
CACACACACACACACA CACA
de copias de la secuencia G GTGT GT T T del pico representa la cantidad de DNA (fig. 19-29).
~ icrosatélite Los hom.ocigotos para un alelo de STR tienen un
solo pico alto; los heterocigotos tienen dos picos
esultados más cortos. Cuando se examinan varios locus de nú-
fLos fragmentos se separa~
crosatélites diferentes, la probabilidad de que dos
por electroforesis en gel. personas tengan el mismo conjunto de patrones se
Fragmentos de diferente vuelve en extremo pequeña, a 1nenos que sean ge1ne-
tamaño aparecen como los idénticos.
bandas distintas. El Federal Bureau of lnvestigation (FBI) ha desa-
1rollado un sistema que utiliza 13 locus de STR
(cuadro 19-3) que suelen utilizarse para identificar
personas y resolver crímenes. Estos locus represen-
Resultados de un locus de STR
tan el Combined
, DNA Index System (CODIS,
Siste1na de Indice Combinado de DNA). Cada locus
Conclusión: los patrones de fragmentos de DNA producidos por los individuos de STR del CODIS tiene una gran cantidad de alelos
difieren. y se localiza en un cromosoma humano diferente;

Figura 19-28. Las huellas genéticas de DNA pueden emplearse para

identificar a las personas.
Esta persona es
homocigótica en el
locus 085119 ...

Huellas genéticas de DNA

La utilización de las secuencias de DNA para identificar a perso-
D85119 n
... y heterocigótica
en el locus 021 511.
CSF1PO

ro
nas individuales se deno1nina huellas genéticas de DNA o perfil
de DNA . Como algunas partes del genoma son sumamente vruia-
bles, la secuencia de DNA de cada persona es única y, al igual que
u
e:
Q)
u
"'
...Q)
o
D21511
r D7820
la huella dactilar tradicional, proporciona una característica dis- :::,
tintiva que posibilita la identificación. LL

Hoy en día, la n1ayoría de las huellas genéticas de DNA utili-

zan microsatélites o repeticiones cortas en tándem (STR), que
son secuencias de DNA muy cortas repetidas en tándem (véase
cap. 11). E stas secuencias repetidas se encuentran en numerosos - A.
. - .. ~
J
-
locus de todo el genoma humano. Las personas varían en el 100 350
número de copias de secuencias repetidas que poseen en cada
Tamaño d e l fragmento STR (pb)
locus. Por lo general, se detectan STR con PCR mediante la uti-
lización de cebadores que flanquean las repeticiones microsatéli-
Figura 19-29. Un perfil de DNA representa el patrón de fragmentos
tes, de manera que se amplifica un fragmento de DNA que con- de DNA producidos después de la PCR de los locus STR. Este perfil
tiene secuencias repetidas (fig. 19-28). La longitud del segmento muestra los resultados de cuat ro locus STR (O8S 11 79, 021 S11, O7S820 y
amplificado depende del número de repeticiones; el DNA de una CSF 1PO). El número debajo de cada pico representa la cantidad de repeti-
persona con más repeticiones producirá un segn1ento amplificado ciones STR de ese fragmento de DNA.
561
562 CAP[TULO 19

Características de 13 locus STR usados Locus STR

en CODIS para obtener huellas genéticas [ D85 1179 ] [D2 1511 . [D75820 f CSF1PO J
del DNA Sospechoso 1
113
Nombre Número Número u
e
del locus Cromosoma de repeticiones de alelos* (1)
u
VI

CSFl PO 5 5-17 10 ~
o
J
FGA 4 12-51 23 LL

TH0 l 11 3- 14 8 -·-J'----~~--,~----J~---
l][ITI [[][TI
TPOX 2 4-16 8

VWA 12 10-25 10 Sospechoso 2

113
D3S 1358 3 6-26 10 u
e
(1)
u
D5S8 18 5 4-29 9 VI
....
(1)

D7S820 7 5- 16 11 o
J
LL

D8S 1179 8 6-20 11

- - - '--~-~·-.,.-J. _ _ _J\ ~·- - - --' -,J - -
D13S317 13 5- 17 8
ITI [ill[[] ITr
D16$539 16 4- 17 7
Muestra de la escena del crimen
D18551 18 5-40 19 113
u
D21511 21 12-43 22 e
(1)
u
VI

*Población de los Estados Unidos. ~

Fuente: J.M. Butler y C. R. Hill. Forensic Science Review 24:15-26, 2012.
o
J
ü:
- - -
- J\ • -

por lo tanto, la variación en cada locus se segrega en forma inde-

100 fIT ITL .ill
Tamaño de l f ra gmento STR (pb)
-15 350

pendiente. Cuando se usan juntos los 13 locus del CODIS, la pro-

babilidad de que dos personas seleccionadas al azar tengan el Figura 19-30. Las huellas genéticas de DNA pueden utilizarse para
mismo p erfi l de DNA es menor de 1 en 1O000 millones. determinar la presencia de un sospechoso en una escena del crimen.
El perfil de DNA del sospechoso 2 coincide con la evidencia de DNA recogi-
En una aplicación típica, las huellas genéticas de DNA p odrían da en la escena del crimen. Aquí se muestran los resultados de 4 locus STP.
utilizarse p ara confirmar que un sospechoso estuvo presente en
la escena de un crimen. Se recoge una muestra de DNA de san-
gre, semen , pelo u otro tej ido corporal de la escena del crimen .
Si la muestra es demasiado pequeña, es posible recurrir a PCR paternidad, estudi ar relaciones genéticas entre individuos de po-
para ampl ificarl a, de manera de di sponer de suficiente D NA para blaciones natu rales, ide ntificar cepas específicas de bacteri as pa-
las pruebas . Se recolectan otras muestras de DNA de uno o más tógenas e identificar restos humanos.
sospechosos. Luego , se compara el patrón de los fragmentos de
DNA producidos por huellas genéticas del DNA de la muestra
con el patrón producido p or huellas genéticas del DNA del sos- CONCEPTOS
pechoso. La coincidencia entre las muestras puede aportar evi-
den cia de que el sospechoso estuvo presente e n la escena del cri- Las huellas genéticas de DNA detectan diferencias genéticas entre
men (fig. 19-30). personas por aná lisis de regiones muy va riables de los cromosomas.
D esde su introducción en la década de 1980, las huellas genéti-
cas del DNA han ayudado a condenar a una serie de sospechosos ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
en casos de asesinato y violación. En otros casos, se ha probado
que los sospechosos eran i nocentes cuando su DNA no coincidía ¿ Cómo se detectan los microsatélites 1
con el hallado e n la escena del crilnen. En un comienzo, el cálc u-
lo de las posibilidades de compatibilidad (la probabilidad de que
dos personas pudieran tener el mismo patrón) fu e motivo de con-
troversia, y hubo preocupaciones acerca del control de calidad Aplicación: identificación de personas
(como la conta1ninación accidental de las 1nuestras y la reprodu- que murieron en el derrumbe
cibilidad de los resultados) en los laboratorios donde se realiza el
del World Trade Center
análisis de D NA. En la actualidad, las huellas genéticas de D NA
se han convertido en un a herra mienta importa nte de las investiga- La mañana del 11 de septiembre de 2001, un grupo de terroristas
ciones forenses. Además de su aplicación en la resolución de crí- secuestró y estrelló dos aviones de pasajeros en las to1Tes del
1nenes, las huellas genéticas de DNA se utilizan para evaluar la World Trade Center de la ciudad de Nueva York . En unas pocas
 Análisis genético molecular y biotecnología 563

horas, el daño catastrófico y eJ fuego provocaron el derrumbe

completo de los 11 Opisos de ambos edificios, en el que mu,ieron
casi 3000 personas, entre ocupantes y personal de rescate. La tre-
menda fuerza destructiva generada por el derrumbe de las torres,
con sus 325 000 metros cúbicos de concreto y 200 000 toneladas
de acero, destrozó n1uchos de los cuerpos e hizo imposible su
reconociiniento.
En los días inmediata,nente posteriores al derrumbe del World
Trade Center, los científicos forenses comenzaron la tarea de
identificar los restos de quienes murieron en el desastre. Su obje-
tivo era aportar evidencias para la investigación criminal del ata-
que e identificar los cuerpos para entregarlos a sus familias y ami-
gos. No se disponía de una lista con1pleta de víctimas (como por
ejemplo la lista de pasajeros en caso de un accidente aéreo) con
la cual los investigadores pudieran comparar sus observaciones.
En total, se encontraron casi 20 000 restos individuales, desde
cuerpos completos hasta p equeños fragmentos de hueso carboni-
zado. Los restos estuvieron expuestos al fuego con temperaturas Figura 19-31. Se utilizaron las huellas genéticas de DNA para identi-
de más de 1000 ºC y que ardió durante rnás de 3 meses. El ficar los restos de las personas que murieron en el colapso del
World Trade Center. La oficina del M édico Forense Jefe de la ciudad de
derrumbe de los edificios entremezcló los restos de numerosas
Nueva York usó huellas genéticas de DNA automatizadas para buscar coin-
víctimas, y muchos fragmentos corporales no se recuperaron cidencias con el DNA de los restos humanos recuperados del World Trade
durante meses, tiempo durante el cual estuvieron expuestos al Center con el DNA extraído de muestras de referencia, como muestras de
polvo, el agua, las bacterias y la descomposición. sangre y cepillos de dientes, de las posibles víctimas. (Scott Gries/Getty
Los medios habituales de identificación de víctimas ( objetos lmages).
personales, huellas dactilares, registros dentales) fuero n de esca-
sa utilidad para la mayo1ia de los restos del World Trade Center.
La identificació n de la mayo1ía de ellos se llevó a cabo mediante
huellas genéticas de DNA (fig. 19-31). Utilizadas en conjunto, estas técnicas permitieron la identifica-
Primero, se extrajo DNA de las muestras tisulares empleando ción positiva de numerosas víctimas . De todos modos, pese a los
técnicas estériles para evitar la contaminación cruzada entre las esfuerzos heroicos de cientos de genetistas moleculares, antropó-
muestras. Una vez extraído el DNA, se utilizó PCR para amplifi- logos forenses y médicos foren ses, no se recuperaron restos con
car los l.ocus de STR del sistema CODIS (véase sección previa). identificación positiva de casi .l a mitad de las personas que se cree
La huella genética de DNA generada a partir de cada muestra cor- murieron en el desastre.
poral se comparó con la del D NA extraído de muestras de refe-
rencia, como cepillos de diente y muestras de sangre de las vícti-
mas, proporcionadas por familiares y amigos. Si el DNA de una 19.5 Las técnicas moleculares
parte corporal tenía los mismos alelos en los 13 locus que la se utilizan cada vez más para analizar
muestra de referencia, se efectuaba una identificación positiva. la función de los genes
Cuando no se contaba con una muestra de referencia, los investi-
gadores recolectaban DNA de miembros de la familia e intenta- En la sección precedente, conocimos técnicas moleculares po-
ban compatibilizar los perfiles de DNA de los restos con los de derosas para aislar, recombinar y analizar secuencias de DNA.
los familiares; en este caso, coincidiiian algunos de los alelos Si bien estas técnicas aportan mucha información acerca de la
de STR, pero no todos. organización y el carácter de las secuencias génicas, el objeti-
Lainentablemente, muchos de los restos se encontraban tan de- vo último de muchos estudios moleculares es conocer mejor la
gradados que quedaba poco DNA, y no fue posibl.e aniplificar uno función de las sec uencias. En esta sección, expl.oraremos algu-
o más de los locus de STR. En estos restos, también se estudiaron nas técnicas mo leculares avanzadas que se utilizan con fre-
las huellas genéticas del DNA mitocondrial (véase cap. 11). cuencia para determinar la función de los genes y comprender
Como hay muchas rnitocondrias por célula y cada mitocondria mejor los procesos genéticos a los que son sometidas estas
contiene múltiples moléculas de DNA, hay muchas más copias de secuencias.
DNA rnitocondrial por célula que de DNA nuclear; se ha extraí-
do y analizado con éxito DNA mitocondrial de restos antiguos, Genética directa e inversa
como los neande1tales (véase introducción del cap. 10). Por sí
solas, las huellas genéticas del DNA mitocondrial fueron insufi- El enfoque tradicional para el estudio de la función de los genes
cientes para permitir la identificación con un alto grado de con- conu enza con el aislamiento de organismos mutantes. Por ejem-
fianza (porque no hay tantas secuencias que varíen entre las per- plo, sup onga que un genetista está interesado en los genes que
sonas como en los locus del CODIS) pero cuando se las usó junto afectan la función cardíaca en los mruníferos. Un primer paso
con los datos de por lo menos algunos locus de STR, a menudo sería hallar individuos (quizá ratones) que tengan defectos here-
pudo hacerse LLna identificación positiva. ditarios de la función cardíaca. Después, podrían maperu·se las
564 CAP[TULO 19

mutaciones que causan los problemas cardíacos en los ratones, y Como difieren solo en algunas bases, el DNA diana y el oligonu-
se podrían aislar y secuenciar los genes implicados. Luego, sería cleótido se aparearán. El oligonucleótido, cuando se aparea de
factible predecir las proteínas producidas por los genes a partir de manera exitosa con el DNA diana, puede actuar como un cebador
las secuencias génicas y aislarlas. Por último, podría estudiarse la para iniciar la síntesis de DNA, lo que produce una molécula
bioquímica de las proteínas y dilucidar su papel en la función car- bicatenaiia con un error de apareruniento en la región del cebador.
diaca. Este enfoque, que comienza con un fenotipo (un individuo Cuando este DNA se transfiere a células bacterianas, las bases
n1utante) y procede a un gen que codifica el fenotipo, se denomi- apareadas de manera incorrecta serán reparadas por enzilnas bac-
na genética directa. terianas. Alrededor de la mitad de las veces, las bases normales
Un enfoque alternativo consiste en comenzar con un genotipo serán cambiadas a bases mutantes, y alrededor de la mitad de las
(una secuencia de DNA) y proceder al fenotipo alterando la veces, las bases mutantes serán cambiadas a bases normales.
secuencia o inhibiendo su expresión. Un genetista podría co1nen- Después, se investiga la presencia del gen mutante en las bac-
zar con un gen de función desconocida, inducir mutaciones en terias.
este y después buscar qué efecto tienen estas ,nutaciones sobre el
fenotipo de] organismo. Este enfoque se denomjna genética
inversa. Hoy en día, se aplican ampliamente los enfoques tanto _/ Secuencia diana
de genética directa como inversa en el análisis de la función de ,,
genes.
Se crea un oligonucleótido
que difiere de la secuencia
Creación de mutaciones aleatorias diana en un único
GG~ nucleótido.
La genética directa depende de la identificación y el aislamiento 3'
de mutaciones aleatorias que afectan un fenotipo de interés. En
las p1imeras etapas del estudio de la genética, los genetistas se Bases incorrectamente
vieron forzados a basarse en mutaciones naturales, que suelen ser 5, apareadas
~ / e _a_p-ar_e_a_n_e_l _o_lig_o__~
~ S_
raras y detectadas solo si se examina una gran cantidad de orga-
nismos. El descubrimiento de agentes mutágenos (factores ~~ -=::::::::= nucleótido y la secuen-
ambientales que aumentan la frecuencia de .m utaciones; véase ~ cia de DNA diana.
3'
cap. 18) proporcionó un medio de aumentar el número de mutan-
tes en poblaciones experünentales de organismos. Uno de los pri-
meros ejemplos de mutaciones creadas en forma experimental fue
el uso de los rayos X por Hermann Muller en 1927 para inducir El oligon ucleótido
n1utaciones ligadas al cromosoma X en Drosophila melano- es un cebador para
la síntesis de DNA, .. .
gaster.
En la actualidad, la radiación, los mutágenos químicos y los
elen1entos transponibles se utilizan a fin de crear mutaciones para , ... lo que produce una
análisis genético. Para determinar todos los genes que podrían molécula con un único par
afectar un fenotipo, es conveniente crear mutaciones en tantos de bases incorrectamente
apareado.
genes como sea posible, es decir, para saturar el genoma con
mutaciones. Este procedimiento se realiza con una pantalla mutá-
gena, que se describirá en el capítulo 20. Se transfiere el DNA a cé-
1ulas bacterianas, y las en-
zimas bacterianas reparan
Mutagénesis dirigida al sitio las bases incorrectamente
La genética inversa depende de la capacidad de crear 1nutaciones, apareadas.
no de manera aleatoria, sino en secuencias particulares de DNA y
después estudiar los efectos de estas mutaciones en el organismo. , Alrededor de la mitad de
Se inducen mutaciones en localizaciones específicas mediante un los plásmidos tendrán la
proceso denominado mutagénesis dirigida al sitio. secuencia original, y la
Se ha desarrollado una serie de estrategias diferentes para la otra mitad tendrá la
mutagénesis dirigida al sitio. Una estrategia que suele utilizarse secuencia alternada.
en las bacterias consiste en cortar con enzimas de restricción una
secuencia corta de nucleótidos y reemplazarla por un oligonucle-
ótido corto sintético que contiene la secuencia mutada deseada. El Plásmido con Plásmido con Después, se investiga la
la secuencia la secuencia presencia del gen alterado
éxito de este 1nétodo depende de la disponibilidad de sitios de res-
original deseada en las bacterias.
tricción que flanqueen la secuencia que será alterada.
Si no se dispone de sitios de restricción apropiados, es posible
utilizar mutagénesis dirigida por oligonucleótidos (fig. 19-32). Figura 19-32. La mutagénesis dirigida por oligonucleótidos se utiliza
En este método, se produce un oligonucleótido monocatenario para estudiar la función de los genes cuando no se dispone de sitios
que difiere de la secuencia diana en una o unas pocas bases. de restricción apropiados.
 Anál isis genético molecular y biotecnología 565

Los ovocitos de los ratones y otros mamíferos son lo bastante

CONCEPTOS grandes como para que pueda inyectarse en ell os DNA de mane-
ra directa. Inmediatamente después de la penetración por un
La genética directa comienza con un fenotipo y detecta y analiza el
genotipo que causa el fenotipo. La genética inversa comienza con
una secuencia gén ica y, mediante el aná lisis, determina el fenotipo
que codif ica. Pueden introducirse mutaciones particu lares en sitios
específicos dentro de un gen por medio mutagénesis dirigida al sitio X
~
y mutagénesis dirigida por oligonucleótidos.
~ o
l J
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 10 Se aparean ratones;!==- ¡
y se extraen óvulos
óvulo fecundado
fecundados del
Un genetista interesado en la función inmunitaria induce mutaciones
ratón hembra. /
aleatorias en una serie de genes específicos en ratones y después
Pronúcleos ¿:::...-
determina cuál de los ratones mutantes resultantes tiene alteración
de la función in munitaria. Este procedimiento es un ejemplo de Se inyecta DNA extraño
en uno de los pronúcleos.
a. Genética directa.
b. Genética inversa. Aguja de
inyección
e Genética tanto directa como inversa.
d. Ni genética directa ni genética inversa. Pipeta de
"\ aspiración
interés
Se implantan embriones en
una hembra seudopreñada.
Animales transgénicos

Otra posible manera de analizar la función génica consiste en

agregar secuencias de DNA de interés al genoma de un organis-
mo que nonnalinente carece de estas secuencias y después obser-
var el efecto que ejerce la secuencia introducida sobre el fe notipo
del organis1no. E ste n1étodo es una for1na de genética inversa. Un
organismo que ha sido alterado en forma permanente por el agre-
gado de una secuencia de DNA a su genoma se denomina trans-
génico, y el DNA que porta se denomina transgén (fig. 19-33). • Se investiga la dese~~
Aquí consideramos técnicas para la creación de ratones transgé- ciencia para detectar la
nicos, que suelen utilizarse en el estudio de la función de genes presencia del transgén 1
introducido. _J
humanos, porque es posible 1nanipularlos genéticamente de
maneras que son in1posibles en seres hum.anos y, como mamífe- a b e d e f
ros, son más similares a los seres humanos que las moscas de la
fruta, los peces y otros organismos modelos genéticos.

- --
X

~ l o
-¡------ Se cruzan ratones que
portan el gen para
producir una cepa de
ratones con el gen
extraño.

Figura 19-33. El genoma de un organismo transgénico se ha modifi- Figura 19-34. Los animales transgénicos t ienen genomas que han
cado de manera permanente por ingeniería genética. Izquierda : un sido modificados de manera permanente mediante tecnología de
rat ón transgénico en el que se ha desactivado un gen que afecta el creci- DNA recombinante. En la fotografía, se está inyectando DNA a un
miento del pelo. Derecha: un ratón normal. (Maggie Bartlett, NHGRI). embrión de ratón . (Fotografía: Chad Davis/PhotoDisc).
566 CAP[TULO 19

espermatozoide, un óvulo de ratón fecundado contiene dos pronú-

cleos, uno del espermatozoide y uno del óvulo; estos pronúcleos Pregunta: ¿cómo se puede determinar la función de un gen?
se fusionan más tarde para formar el núcleo del embrión.
Dispositivos mecánicos pueden manipular agujas de vidrio Métodos
hueco, sun1amente finas, para inyectar en forma directa DNA en Gen diana
uno de los pronúcleos de un óvulo fecundado (fig. 19-34). Por lo
general, se inyectan unos pocos cientos de copias de DNA lineal
neo+
clonado en un pronúcleo, y en algunos de los óvulos inyectados
las copias del DNA clonado se integran de 1nanera aleatoria en tk+
uno de los cromosomas mediante un proceso denominado recon1-
binación no homóloga. Después de la inyección, los embriones se Células madre
-=
Se desactiva un gen normal
implantan en una hembra seudopreñada, una madre sustituta que embrionarias(\_ insertando el gen neo+ . El gen
ha sido preparada fisiológicamente para la preñez por aparea- de ratón ¡ '\ tk+ está ligado al gen diana,
n1i ento con un n1acho vasectomi zado. negro y ...
Solo sobreviven alrededor del 10-30% de los embriones y, de
... el gen desactivado es trans-
los que sí sobreviven, solo algunos tienen una copia del DNA clo- ferido a células madre de
nado integrada de manera estable en un cromosoma. No obstan- Secuencia embrión de ratón, ...
te, si se inyectan e implantan varios cientos de embriones, existe transferida tk+
una buena probabilidad de que nazcan uno o n1ás ratones cuyos
cromosomas contengan el DNA extraño. Además, como el DNA
se inyectó en el estado unicelular del embrión, estos ratones sue-
X X -
len tener el DNA clonado en todas las células de su cuerpo, Cromosoma Gen diana ... donde la copia desactivada
incluidas las células reproductoras, y por lo tanto, transmitirán el de ratón
1 se recombina con el
DNA extraño a su progenie. Por cruzamiento entre ellos, puede Recombinación gen normal en el cromosoma
crearse una cepa de ratones que porten el gen extraño. homóloga de ratón.
Los ratones transgénicos han resultado útiles en el estudio de la
' El cromosoma recombinante
función de genes. Por ej emplo, la prueba de que el gen SRY es neo+ y tk-.
(véase cap. 4) es el gen determinante del macho en los ratones se v·
obtuvo inyectando una copia de este gen en embriones XX y
observando que estos ratones se desarrollaban como 1nachos. Las células crecen en un medio
Células de
Además, los investigadores han creado una serie de cepas de rato- que contiene el antibiótico
ratón neo+\ ' G418 y ganciclovir;
nes transgénicos que sirven co mo 1nodelos experin1entales para
solo sobreviven las célu las
enfermedades genéticas humanas.
que recibieron
el gen neo+, pero no el gen
Ratones con desactivación génica tk+, por recombinación
homóloga.
Una variante útil del enfoque transgénico consiste en producir Embrión~ , Después, se inyectan células que
ratones en los que un gen normal ha sido no solo mutado, sino de ratón contienen un gen desactivado
blanco _ __
desactivado por co1npleto. Estos animal es, denominados ratones neo+ en embriones tempranos
con desactivación génica (knockout), tienen particular utilidad de ratón, ...
para determinar la función de un gen: el fenotipo del ratón con .. . que son implantados en un
desactivación génica a menudo proporciona una buena indicación ratón hembra seudopreñada.
de la función del gen faltante.
La creación de ratones con desactivación génica comienza La progenie multicolor contiene
cuando se clona un gen normal en bacterias y después se lo una mezcla de células normales
"desactiva" . Hay una serie de n1aneras de desactivar un gen, pero y células con el gen desactivado.
un método común consiste en insertar un gen denominado neo,
que confiere resistencia al antibiótico G418, en el medio del gen
X
diana (fig.19-35). La inserción de neo altera el gen diana y apor-
ta un marcador conveniente para hallar copias del gen desactiva-
do. Además, un egundo gen, en general el gen de ti1nidina cin a-
sa (tk) del virus herpes simple, se liga al gen alterado. Después,
se transfiere el gen desactivado a células embrionarias de ratón
Resultados
- • Se cruzan ratones multicolores
con ratones blancos, y se entre-
cruza a la progenie para producir
cultivadas, donde puede intercambiar lugares con la copia normal algunos ratones homocigóticos
del cromosoma de ratón mediante recon1binación homóloga. para el gen desactivado.
1

Conclusión: mediante este procedimiento, se producen

ratones que no contienen ninguna copia funcional del gen, es
decir, el gen está desactivado. El fenotipo de los ratones con
Figura 19-35. Los ratones con desactivación génica tienen un geno- desactivación génica revela la función del gen.
ma en el que se ha inutilizado un gen.

Después de que el gen desactivado ha sido transferido a las
célul as embrionari as, se investigan las células añadjendo el anti-
biótico G418 al medio. Solo sobrevivirán las células con el gen
desactivado que contiene el inserto neo. Como la frecuencia de
recombinación no homóloga es más alta que la de recombinación
homóloga y con10 el gen diana intacto es reemplazado por la
copia desactivada sol o por recornbinación homóloga, se requiere
un medio para seleccionar los recombinantes homólogos más
raros. La presencia del gen tk viral torna a las células sensibles al
ganciclovir. Así, las células transfectadas que crecen en medio
que contiene G418 y ganciclovir contendrán el gen neo (gen
di ana desactivado), pero no el gen tk adyacente, porque el gen tk
será eli mi nado en el evento de dob le cruzamiento. Estas células
contienen los recombinantes homólogos deseados. Los recombj-
nantes no homólogos (inserciones aleatorias) contendrán tanto el
gen neo como el gen tk, y estas células transfectadas morirán en
el medio de selección debido a la presencia de ganciclovir. Las
células sobrevivien tes se inyectan en un embrión de ratón en esta-
dio te1nprano, que después se implanta en un rató n hembra seu-
dopreñada. Las célul as del emb1ión que portan el gen desactiva-
do y las células embrionarias normales que portan el gen de tipo
silvestre se desarrollarán j untas, lo que produce una quimera: un
ratón que es una mezcla genética de los dos tipos celulares. La
producción de ratones quiméricos no es deseable en sí n1isma,
pero es imposible reemplazar todas las células del embrión con
células inyectadas.
Los ratones quiméricos pueden identificarse fácil mente si las
células embrionarias inyectadas provienen de un ratón negro y los
embriones en las que se inyectan provienen de un ratón blanco;
las quimer as resultantes serán de pelaje multicolor negro y blan-
co. Algunas de las quimeras pueden tener el gen desactivado en
las células de la línea gernúnal y pueden transmitirlo a la siguien-
te generació n. Las quimeras se cruzan con ratones blancos; cual-
quier progenie negra es heterocigótica para la desactivación.
Después, puede entrecruzarse la progenie negra para producir
descendientes homocigóticos para el gen desactivado. En estos
ratones homocigótico s, es posible observar los efectos de desac-
tivar un gen particular. En 2007, tres científicos que ayudaron a
desarrollar las técnicas para crear ratones con desactivación géni-
ca (Mario Capecchi, Oliver Srnithies y Martín Evans) recibieron
el Nobel en fisiología o medicina por su trabajo.
Se han desarrollado otras técnicas para la desactivación de
genes solo en ciertos tejidos o en cie1tos períodos; esto se deno-
nuna desactivación condicional. Una variante del procedimiento
de desactivación es insertar en ratones una secuencia particul ar de
DNA en una localización cro1nosómica conocid a. Por ejempl o,
los investigadores podrían insertar la secuencia de un alelo huma-
no causante de enfermedad en el mismo locus de ratones a fm de
crear un modelo en ratón preciso de la enfern1edad humana. Los
ratones que tienen secuencias insertadas en localizaciones especí-
ficas se denomin an ratones knock-in.
Silenciamiento de genes con iRNA
En las secciones precedentes, consideran1os el análisis de la fun-
ción génica mediante la introducción de 1n utaciones o secuencias
nuevas de DNA en el genoma y el análisis del fenotipo resultan-
Anál isis genético molecular y biotecnología 567
CONCEPTOS
Un ratón transgénico se produce mediante la inyección de DNA clo-
nado en el pronúcleo de un óvu lo fertilizado, segu ido de implantación
del óvulo en un ratón hembra. En los ratones con desactivación géni-
ca, el DNA inyectado contiene una mutación que desactiva el gen.
Dentro del embrión de ratón, la cop ia del gen puede intercambiarse
con la copia normal del gen mediante recombinación homóloga.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 11
¿ Cuál es la ventaja de utilizar el gen neo para alterar la función de un
gen en ratones con desactivación génica?
a. El gen neo produce un antibiótico que destruye las células no
deseadas.
b . El gen neo tiene el tamaño apropiado para desactivar otros genes.
c. El gen neo proporciona un marcador seleccionable para hallar
célu las que contienen el gen desactivado.
d. El gen neo produce una toxina que inh ibe la transcripción del gen
diana .
te para obtener información sobre la función del DNA alterado o
introducido. Asimismo, podríamos analizar la función de genes
por desactivación transitoria de un gen y observación del efecto
que la ausencia del producto génico ejerce sobre el feno tipo.
Durante muchos años, no hubo ningún método para afectar de
manera selectiva la expresión génica. Sin embargo, los descubri-
mientos de siRNA (RNA de interferencia pequeños) y de rniRNA
(rnicro-RNA; véanse caps. 14 y 17) suministraron herramientas
poderosas para controlar la expresión de genes individuales.
Recuérdese que los siRNA y los 1niRNA son 1noléculas de
RNA pequeñas que se con1binan con proteínas para formar el
complejo de silenciamiento inducido por RNA (RISC). En un
proceso denominado interferencia por RNA o RNAi, el RISC se
aparea con secuencias complementarias del mRNA y degrada el
mRNA o impide su traducción. Los genetistas moleculares han
aprovechado la maquinaria natural para desactivar la expresión de
genes específicos. A 1nenudo, estudiar el efecto del silenciamien-
to de un gen con siRNA puede ser una fuente de información
sobre su función.
El primer paso para utilizar la tecno logía de RNAi consiste en
diseñar los siRNA de manera que sean reconocidos y escindidos
por Dicer (la proteína que procesa los siRNA; véase cap. 14). L a
secuencia complementaria debe ser única para el mRNA diana y
no debe ha1larse en otros mRNA para que los si RNA no inhiban
mRNA no di ana. Suelen en1plearse programas informáticos para
ctiseñar si.RNA óptimos.
U na vez diseñada la secuencia de siRNA, d ebe ser sinteti za-
da. Una manera de crear un siRNA es usar un sintetizador de
oligonucleótidos para sintetizar un fragmento de DNA corres-
pondiente a la secuencia de siRNA . El oligonucJeótido sin teti-
zado p uede clonarse en un vector de expresión plasmídico entre
568 CAP[TULO 19
dos promotores fuertes (fig. 19-36). Después, se transforma
Escherichia coli con el plásmido. Dentro de las bacterias, la trans-
cripción de los dos promotores procederá en ambas direcciones,
lo que producirá dos moléculas de RNA complementarias que se
aparearán para formar una n1olécula de RNA bicatenario recono-
cida por Dicer. Alternativamente, pueden sintetizarse en forma
directa secuencias de RNA bicatenarias con un sintetizador de
genes.
La siguiente tarea es hacer llegar el siRNA bicatenario a las
células. Esto puede realizarse de diversas maneras según el tipo
celular. Es posible alimentar con E. coli (su alimento natural) que
contiene el vector de expresión al organisrno 111odelo genético
Caenorhabditis elegans (véase p . A6). La transcripción dentro
de las bacterias produce RNA bicatenario, que los gusanos
ingieren e incorporan en sus células. Alternativamente, puede
inyectarse en forma directa RNA bicatenario en células o en
cavidad corporal. Otro enfoque consiste en sintetizar una
secuencia corta de DNA que tenga complementariedad interna,
de manera que, al ser transcrita, se pliegue en un RNA con hor-
quilla corta (shRNA), con una sección bicatenaria. Dentro de una
célula, los shRNA son procesados por Dicer para producir siRNA
que causan silencia.miento génico. Las secuencias de DNA que
contienen siRNA pueden introducirse en un vector 1nediante el
uso de técnicas de clonación convencionales, y es posible utili-
zar el vector para llevar el DNA al interior de una célula. Una
ventaja de este enfoque es que, con la adición de una secuencia
de DNA, la secuencia de RNAi tiene la posibilidad de convertir-
se en una parte permanente del genon1a de la célula y de trans-
mitirse a la progenie.
Una de las principales ventajas del siRNA para controlar la
expresión génica es que actúa en trans, es decir, una sola copia
de un gen siRNA anul ará la expresión de ambas copias del gen
diana. Otra ventaja es que el gen diana permanece intacto y,
por consiguiente, los efectos del silenciamiento son reversibles.
.'
Plásmido de
expresión Cadena con sentido de siRNA
1 3' 5'
Promotor Promotor
s• ---------► 3'
Cadena antisentido de siRNA
RNA bicatenario
"'
5'
3'
3'
5'
Figura 19-36. Se pueden producir RNA de interferencia pequeños
mediante la clonación de secuencias de DNA correspondientes a los
siRNA ubicados entre dos promotores fuertes. Cuando son clonadas
en un vector de expresión, ambas cadenas serán transcritas, y las moléculas
de RNA complementario se hibridarán para formar RNA bicatenario, que
será procesado por Dicer para formar siRNA.
Aplicación: uso de RNAi para tratar
enfermedades humanas
Aden1ás de su valor para determinar la función génica, el RNAi
tiene potencial como agente terapéutico para el tratamiento futu-
ro de enfennedades humanas. Este potencial incluye el uso de
siRNA contra virus RNA, por ejemplo mv, así como su utiliza-
ción para tratar enfermedades genéticas y cáncer.
TRATAMIENTO DE LA HIPERCOLESTEROLEMIA CON RNAI Se ha inves-
tigado el potencial del RNAi para el tratamiento de los trastornos
deJ metaboli smo del colesterol. Si bien e l colesterol es esencial
para la vida, demasiado colesterol no es saludable: la hiperco-
lesterolemia contribuye de manera in1portante a la enfern1edad
cardíaca, la principal causa de muerte en los Estados Unidos.
En condiciones normales, el colesterol es transportado por todo
el cuerpo en for1na de partículas pequeñas denominadas lipo-
proteínas, que consisten en un núcleo de lípidos rodeado por
una cubierta de fosfolípidos y proteínas (véase fig. 6-6 del cap. 6).
La proteína ApoB es una parte esencial de las lipoproteínas.
Algunas personas poseen mutaciones genéticas que causan
altas concentraciones de ApoB, que los predisponen a arterio-
patía coronaria. Los resultados de estudios sugieren que el des-
censo de la cantidad de ApoB puede reducir el nún1ero de lipo-
proteínas y la concentración sanguínea de colesterol en estas
personas, así como en aquellas que tienen hipercolesterolemia
por otras razones.
En 2006, Tracy Zimmermann y cols. de Alnyla1n Pharn1aceuti-
cals y Protiva Biotherapeutics demostraron que era posible utili-
zar RNAi para reducir las concentraciones de ApoB y colesterol
sanguíneo en primates no hu1nanos. Prilnero, los investigadores
crearon siRNA cuya diana era la expresión del gen apoB (apoB-
siRNA) sobre la base de la secuencia conocida del gen. Se sinte-
tizaron los apoB-siRNA en el laboratorio, que consistieron en 21
nucleótidos de la cadena sentido (la cadena co1nplementaria del
mRNA de apoB) y 23 nucleótidos de la cadena antisentido com-
plementaria, de la que sobresalían 2 nucleótidos.
La siguiente tarea fue hacer IJegar el apoB-siRNA al interior de
la célula. Si bien los siRNA son captados fácilmente por las célu-
las de invertebrados como C. elegans, la mayoría de los siRNA no
atravesarán fácilmente las membranas de células de mamíferos en
una forma que sea eficaz para el silenciarniento génico. Aden1ás,
los siRNA son elinl.inados con rapidez de la circulación. Para
superar estos problemas, Zimmerrnann y cols. encapsularon los
apoB-siRNA en lípidos para crear partículas estables de ácidos
nucleicos y lípidos (denominadas SNALP). Las SNALP prolon-
garon mucho el tiempo que los siRNA permanecían en la circula-
ción y aumentaron su captación por la célula.
Luego, los investigadores estudiaron los efectos de los apoB-
siRNA sobre la reducción de la síntesis de la proteína ApoB y
sobre las concentraciones de colesterol. Inyectaron a monos
cynomolgus (fig. 19-37a) con SNALP que contenían apo-siRNA
en dos dosis: 1 mg/kg y 2,5 mg/kg. Aden1ás, inyectaron a un ter-
cer grupo de monos con solución salina co1110 control.
Observaron que el apoB-siRNA silenció con claridad el gen
apoB: 48 horas después del tratamiento, el RNA de apoB del
 Análisis genético molecular y biotecnología 569

{a)
19.6 La biotecnología aprovecha
las posibilidades de la genética molecular

Aden1ás de aportar nueva infonnación valiosa acerca de la natu-

raleza y la func ión de los genes, las técnicas de genética 1nolecu-
lar tienen muchas aplicaciones potenciales, como la producción
de productos farmacéuticos y otras sustancias químicas, bacterias
especializadas, plantas importantes desde el p unto de vista de la
agricultura y genomanipulación de animales de granja. La tecno-
logía también se utiliza de manera extensa en la investigación
médica y, en unos pocos casos, incluso se emplea para corregir
defectos genéticos humanos. En la actualidad, cientos de co1npa-
ñías se especiali zan en desarrollar productos mediante ingeniería
genética, y muchas corporaciones multinacionales de gran enver-
gadura han invertido enormes sumas de dinero e n investigación
de genética molecular. Como ya se comentó, el análisis de DNA
también se utiliza en investigaciones criminales y en la identifica-
ción de restos hu1nanos.
El colesterol sérico se mantuvo
alto en monos que recibieron
{b) solución salina. Productos farmacéuticos
Solución salina
120
1 mg/kg Los p1imeros productos farmacéuticos desarrollados con el uso de
ingeniería genética fueron productos usados en el trata1niento de en-
- 2,5 mg/k g
o 100 fermedades y trastornos humanos. En 1979, la corporación Eli
>
+-'
1 Lilly co1nenzó a vender insulina humana producida mediante tec-
ro
....
(1) - V> 80 1 nología de DNA recombinante. Se insertó el gen de insulina huma-
ou V>o na en plásmidos y se los transfirió a bacterias que después produ-
·;:: -o
•(lJ (lJ
.... 60 cían insulina humana. Con ante1io1idad, la insulina se aislaba de
V>
c.. páncreas porcino y bovino; algunos diabéticos presentaban reaccio-
o ::::R
....
o
(1) -
nes alérgicas a esta proteína extraña. La insulina recombinante
+-'
V> 40
(1) tiene la ventaja de ser igual a la producida en el organis1no hu ma-
o
u no. Otros productos farmacéuticos producidos por tecnología de
20 DNA recombinante son hormona de crecimiento (para niños con
deficiencias de crecimiento), factores de coagulación (para hemofí-
o licos) y activador tisular del plasminógeno (usado para disolver
24 48 144 264
Tiempo (h oras)
coágulos de sangre en pacientes con infarto de miocardio).

En los monos que recibieron la dosis más alta l Bacterias especializadas

de siRNA, se observó una gran reducción del J
colesterol sérico.
Figura 19-37. La transferencia de siRNA para la proteína ApoB a
monos cynomolgus (cangrejeros) redujo de manera significativa las
concentraciones sanguíneas de colesterol. (a) Mono cynomolgus. (b) Se
administró solución salina (control), una dosis de 1 mg/kg o una dosis de
2,5 mg/kg de siRNA a diferentes grupos de monos. (Parte a: Tony
Camacho/Science Source. Parte b: de T. S. Zimmerman, Nature, 441: 112,
2006, Figura 3b).
hígado se redujo un 68% en 1.o s .m onos que recibieron la dosis de
1 mg y un 90% en los que recibieron la dosis de 2,5 mg.
Cuando los investigadores examinaron las concentraciones
séricas de colesterol en los monos, hallaron que los tratados con
apoB-siRNA tenían una reducción significativa de las concentra-
ciones sangumeas de colesterol (fig. 19-37b). Importa destacar
que no observaron efectos negativos del tratamiento con siRNA.
Este estudio, aunque es preliminar, sugiere que los siRNA tienen
potencial p ara el tratamiento futuro de enfern1edades humanas.
Las bacterias desempeñan un papel importante en muchos procesos
industriales, incluida la producción de etanol a partir de material
vegetal, filtración de 1ninerales a partir de núnerales metalíferos y
tratamiento de aguas servidas u otros desechos. Las bacterias en1-
pleadas en otros procesos son modificadas por ingeniería genéti-
ca, de manera que actúan con mayor eficiencia. Se están desarro-
llando nuevas de cepas de bacterias útiles desde el punto de vista
tecnológico que degradarán sustancias químicas y agentes de
polución tóxicos, aumentarán la recuperación de petróleo, incre-
mentarán la captación de nitrógeno por las p lantas e inhi birán el
crecimie nto de bacterias y hongos patógenos.
Productos para la agricultura
L a tecnología de DNA recombinante tuvo en efecto importante
sobre la agricultura, donde ahora se utiliza para crear plantas de
cultivo y animales domésticos con rasgos útiles. Durante muchos
años, los patólogos de plantas habían reconocido que las plantas
infectadas con cepas leves de virus eran resistentes a la infección
por cepas virulentas. Utilizando este conocimiento, los genetistas
570 CAP[TULO 19
crearon resistencia viral en plantas mediante la transferencia de
genes de proteínas virales a las células vegetales. Un zapallo
genomanipulado, denominado Freedom II, porta genes del virus
mosaico 2 de la sandía y el virus mosaico amarillo del zucchini,
que protegen al zapallo contra infecciones virales.
Otro objetivo ha sido geno1nanipular la resistencia a plagas en
las plantas para reducir la dependencia de plaguicidas quí1nicos.
Como se comentó antes en este capítulo, se ha transferido un gen
de la bacteria Bacillus thuringiensis que produce una toxina
insecticida al maíz, el tomate, la papa, el algodón y otras plantas.
Ahora, estos cultivos Bt crecen en todo el mundo. Se han introdu-
cido otros genes que confieren resistencia a virus y herbicidas en
una serie de plantas de cultivo. Durante 2011, 16,7 millones de
granjeros de todo el mundo plantaron 160 millones de hectáreas
de cultivos genomanipulados. En los Estados Unidos, el 88% del
maíz, el 94% del algodón y el 93% de la soja cultivados en 2012
estaban genomanipulados.
Las técnicas de DNA recombinante ta1nbién se aplican en ani-
males domésticos. Por ejemplo, el gen de la hormona de creci-
mjento se rusló de ganado vacuno y se clonó en E. coli; estas bac-
terias producen grandes cantidades de hormona de crecimiento
bovina que se administra al ganado lechero para aun1entar la pro-
ducción de leche. Se están desarrollando animales transgénicos
que porten genes que codifiquen productos farmacéuticos; algu-
nas proteínas eucariontes pueden 1nodificarse después de la tra-
ducción, y solo otros eucruiontes (pero no ]as bacterias) son capa-
ces de llevar a cabo las modificaciones. Por ejemplo, un gen del
factor VIII de coagulación humano se unió a la región reguladora
del gen ovino de ~-lactoglobulina, una proteína de la leche. Se
inyectó el gen fusionado a embriones de oveja, y se creru·on ove-
jas transgénicas que producían el factor de coagulación humano
en su leche, que se utilizó para tratar a hemofílicos. Se ha creado
salmón transgénico que porta un gen de hormona de crecimiento
extraño y un promotor; el pez transgénico crece todo el año en
lugar de solo durante los meses cálidos, y alcanza el tamaño de
mercado con más rapidez y m enos alimento que el salmón silves-
tre. Y a través de la ingeniería genética, los científicos han creado
pol1os transgénicos que expresan un RNA pequeño que bloquea
la infección por el virus de la gripe aviar.
La ingeniería genética de los productos agrícolas es controver-
tida. Un área de preocupación se centra en los posibles efectos de
liberar organismos nuevos producidos por ingeniería genética al
medioambiente. Hay 1nuchos ejemplos en los que organismos
innovadores liberados en un ambiente nuevo causaron alteracio-
nes ecológicas, porque están Jjbres de predadores y otros meca-
nismos de control naturales. Normalmente, la ingeniería genéti ca
transfiere solo pequeñas secuencias de DNA en relación con las
grandes diferencias genéticas que suelen existir entre las especies,
pero aun pequeñas diferencias genéticas puede alterar rasgos
importantes desde el punto de vista ecológico que podrían afectar
el ecosistema.
Otra área de preocupación es el efecto de los cultivos genoma-
nipulados sobre la biodiversidad. En el estudio de campo más
grande de plantas genomanipuladas llevado a cabo, los científicos
cultivaron re1nolachas, 111aíz y se1nillas de colza genon1anipuladas
para resistir a herbicidas junto con cultivos tradicionales en 200
parcelas de prueba de todo el Reino Unido. Después, determina-
ron la biodiversidad de plantas y animales nativos en los campos
agrícolas. Observru·on que las plantas genomanipuladas fueron
1nuy eficaces en la supresión de maleza; sin embargo, las parce-
las con ren1o lachas y semillas de colza genon1anipuladas tenían
una cantidad significativamente menor de insectos que se alimen-
tan de la maleza. Por ejemplo, las parcelas con semillas de colza
genomanipuladas tenían una cantidad 24% menor de mariposas
que las parcelas con cultivos tradicionales.
Asimismo, existe la preocupación de que los organismos trans-
génicos puedan hibridru·se con organismos nativos y transferir sus
rasgos creados por ingeniería genética. Por ejemplo, la creación
de resistencia a herbicidas en plantas de cultivo podiía transferir-
se a la maleza, que entonces sería resistente a los herbicidas utili-
zados en la actualidad para su control. Algunos estudios han
detectado hibridación entre cultivos genomanipulados y poblacio-
nes silvestres de plantas. Por ejemplo, la evidencia sugiere que la
semjlla de colza transgénica (Brassica napus) se bahibridado con
la hierba Brassica rapa en Canadá. Otras preocupaciones se cen-
tran en cuestiones de seguridad para la salud asociadas con la pre-
sencia de productos genomanipulados en alimentos naturales;
algunos críticos han propugnado exigir el etiquetado de todos los
alin1entos genomanipulados que contienen DNA o proteína trans-
gén ica. Este etiquetado se exjge en países de la Unión Europea,
pero no en los Estados Unidos.
Por otra parte, el uso de cultivos y animales domésticos geno-
manipulados conlleva posibles beneficios. Los cultivos genoma-
nipulados que son resistentes a las plagas tienen el potencial de
reducir el uso de sustancias químicas nocivas para el n1edioan1-
biente, y los resultados de la investigación indican que en los
Estados Unjdos se emplean cantidades más bajas de plaguicidas
como resultado de la adopción de plantas transgénicas. Estudios
realizados en China muestran que cuando se utilizan cultivos Bt
los granjeros pulverizan menos insecticidas quín1icos, lo que per-
mite la supervivencia de más insectos predadores y genera un
control más natural de las plagas. Asin1ismo, los cu ltivos transgé-
nicos aumentan los rendimientos y producen más alimentos por
acre, lo que reduce la cantidad de tierra que se debe utilizar para
la agricultura. Las plantas genomanipuladas ofrecen la posibili-
dad de mayores rendimientos, que pueden ser necesarios pru·a ali-
mentar a la futura población del mundo.
CONCEPTOS
La tecnología de DNA recombinante se utiliza para crear un amplio es-
pectro de productos comerciales, como productos farmacéuticos, bac-
terias especializadas, cultivos genomanipulados y animales domésticos
transgénicos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 12
¿ Cuáles son algunas de las preocupaciones acerca de los cultivos
genomanipulados?
Pruebas genéticas
La identificación y la clonación de muchos genes humanos que
provocan enfermedades importantes permitieron desarrollar son-
das para detectar las mutaciones causantes de enfermedad. Ya se
dispone de pruebas prenatales para n1uchos trastornos genéticos
 Análisis genético molecular y biotecnología 571

(véase cap. 6). Además, existen pruebas genéticas presintomáti-
cas para adultos y niños para un número cada vez mayor de tras-
tornos. En la actualidad, se ofrecen una serie de prue bas genéti-
cas directan1ente a los consumidores, sin requerir la participación
de un profesional sanitaiio. Estas pruebas directas pai·a el consu-
midor, que por lo general se ofrecen por Internet, investigan un
conjunto grande y creciente de trastornos genéticos, desde trastor-
nos monogénicos, como la fibrosis quística, hasta condiciones
multifactoriales, como obesidad, enfermedad cardiovascular, ren-
dimiento deportivo y predisposición a adicción a la nicotina.
La disponibilidad cada vez mayor de pruebas genéticas plantea
una serie de interrogantes éticos y sociales. Por ejen1plo, ¿es ético
investigar enfermedades genéticas para las que no hay cura ni tra-
tamiento? Otras cuesti ones éticas y legales conciernen a la confi-
dencialidad de los resultados de las pruebas. ¿Quién tiene acceso
a los resultados de las pruebas genéticas? ¿Se debe informar de
los resultados de las prue bas genéticas a los fa1niliares que tam-
bién podría.11 estar en riesgo?
Otra serie de preocupaciones se relacionan con la exactitud de
las pruebas genéticas. Para muchas enfermedades genéticas, las
únicas pruebas predictivas existentes son las que identifican una
mutación predisponente en el DNA, pero numerosas enfermeda-
des genéticas pueden ser causadas por docenas o cientos de 1nuta-
ciones diferentes. Es posible desarrollar sondas que detectan mu-
taciones frecuentes, pero ellas no detectarán m utaciones raras y
pueden dar un resultado falso-negativo. Aparte de secuenciar todo
el gen, que es costoso e insume tiempo, no hay ninguna manera de
identificar a todas las personas predispuestas. En la actualidad,
estos interrogantes y preocupaciones son tema de intenso debate
por esp ecialistas en ética, médicos, científicos y pacientes.
Terapia génica
Quizá la aplicación última de la tecnología de DNA recombinan-
te sea la terapia génica, la transferencia directa de genes a seres
humanos pai·a tratai· enfern1edades. Hoy en día, miles de pacien-
tes han recibido terapia génica, y se están llevando a cabo 1nuchos
estudios clínicos. La terapia géni.c a se ha en1pleado co1no trata-
miento experi1nental de enfermedades genéticas, cáncer, cardio-
patía e incluso algunas enfermedades infecciosas como el sida.
En la actualidad, se están desarrollando una serie de métodos
diferentes para transferir genes al interior de células humanas.
Los vectores usados habitualn1ente son retrovirus, adenovirus y
virus adenoasociados sometidos a n1odificaciones genéticas (cua-
dro 19-4).
Pese a la creciente cantidad de ensayos clínicos sobre terapia
génica, continúa habiendo problemas significativos para trans-
ferir genes extraños a células humanas, hacer que se expresen y
limitar las respuestas inmunitarias a los productos génicos y los
vectores empleados para transferir los genes a las células.
Asi mismo, hay preocupaciones respecto de la seguridad. En
1999, un paciente que participaba en un ensayo de terapia géni-
ca presentó una reacción inmunitaria fatal después de ser inyec-
tado con un vector viral que portaba un gen para tratar su tras-
torno metabólico. Además, cinco niños so1netidos a terapia
génica por in1nunodeficiencia severa combinada presentaron
leucemia que pareció estar directamente relacionada con la
inserción de vectores génicos retrovirales en genes que causan
cáncer. Pese a estos contratiempos, la investigación de la terapia
génica ha avanzado. En la actualidad , se han publicado resulta-
dos inequívocos que demuestran beneficios positivos de latera-

Cuadro 19-4 Vectores empleados en terapia génica

Vector Ventajas Desventajas

Retrovirus Transferencia eficiente Transfiere DNA solo a las células en división, inserta de
manera aleatoria, riesgo de producir virus de tipo silvestre

Adenovirus Se transfiere a células que no están en división Causa reacción inmunitaria

Virus asociados con los adenovirus No causa reacción inmunitaria Contiene pequeña cantidad de DNA; difícil de producir

Herpesvirus Se puede insertar en células del sistema nervioso; Difícil de producir en grandes cantidades
no causa reacción inmunitaria

Lentivirus Puede alojar genes grandes Preocupaciones respecto de la seguridad

Liposomas y otros vectores revestidos No hay replicación; no estimula reacción Baja eficiencia
de lípidos inmunitaria

Inyección directa No hay replicación; dirigida hacia tejidos específicos Baja eficiencia; no actúa bien dentro de algunos tejidos

Tratamiento con presión Seguro, porque los tejidos se tratan f uera del Más eficiente con moléculas de DNA pequeñas
organismo y después se trasplantan al paciente

Pistola génica (revestimiento de DNA en No requiere vectores Baja eficiencia

la superficie de pequeñas partículas de
oro, que se inyectan en el tejido)

Fuente: De E. Marshall, Gene therapy growing pains, Science 269: 1050-1055, 1995.
572 CAP[TULO 19

pia génica e n varias enfermedades diferentes (véase la introduc- CONCEPTOS

ción a este capítulo).
La terapia génica llevada a cabo hasta la fecha se ha dirigido
solo a células no reproductoras o somáticas. Corregir un defecto
genético de estas células (denominado terapia génica somática)
puede ofrecer beneficios a los pacientes, pero no afectará los
genes de futuras generaciones. La terapia génica que altera célu-
las reproductoras o de la línea germinal (denominada terapia
génica de la línea germinal) es posible desde el punto de vista
técnico, pero plantea una serie de problemas éticos importantes,
porque tiene Ja capacidad de alterar el conjunto de genes de futu-
ras generaciones.
La terapia génica es la transferencia directa de genes a seres humanos
para tratar enfermedades. La terapia génica se implementó con éxito
por primera vez en 1990 y, en la actualidad, se está utilizando para tra-
tar enfermedades genéticas, cáncer y enfermedades infecciosas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 13
¿ Cuál es la diferencia entre la terapia génica somática y la terapia
génica de la línea germinal?

RESUMEN DE CONCEPTOS

■ Las endonucleasas de restricción son enzimas que realizan cor-
tes bicatenarios en el DNA, en secuencias de bases específicas.
■ Los fragmentos de DNA se pueden separar mediante electro-
foresis en gel y visualizar por la tinción del gel con un colo-
rante esp ecífico para ácidos nucleicos o por 1narcaje de los
fragmentos con una sustancia radiactiva o quí1nica.
■ En la clonación génica, se coloca un gen o un fragn1ento de
DNA en una célula bacteriana, donde se multiplicará cuando
la célula se divida.
■ Los plásmidos, pequeños fragmentos circulares de DNA, sue-
len utilizarse como vectores para garantizar que un gen clonado
sea estable y que se replique dentro de las células receptoras.
Los vectores de expresión contienen secuencias necesarias
para que el DNA extraño sea transcrito y traducido.
■ La reacción en cadena de la polimerasa es un método de
amplifi cación e nzimática de .D NA, sin clonación. Se calienta
una solución que contiene DNA, de manera que se separe n las
dos cadenas de DNA y después se la enfría con rapidez, lo
que permite que los cebadores se unan al DNA molde. Luego,
vuelve a calentarse la sol ución, y la DNA polimerasa sintetiza
nuevas cadenas a partir de los cebadores. Cada vez que se
repite el ciclo, se duplica la cantidad de DNA.
■ Los genes pueden aislarse creando una genoteca de DNA, un
conjunto de colonias bacterianas o placas virales en el que
cada una contie ne un fragmento clonado diferente de DNA.
Una genoteca genómica contiene todo el genoma de un orga-
nismo; una genoteca de cDNA contiene fragmentos co1nple-
1nentarios de todos los mRNA diferentes de una célula.
■ La hibridación in situ puede utilizarse para determinar la loca-
1ización cro1nosómica de un gen y la distribución del mRNA
producido por un gen.
■ La clonación posicional recurre a relaciones de ligamiento para
determinar la localización de genes sin conocer sus productos.
■ El método de Sanger (didesoxi) de secuenciación del DNA
usa sustratos especiales para la síntesis de DNA (didesoxinu-
cleósidos trifosfato, ddNTP) que terminan la síntesis después
de ser incorporados en el DNA recién fabricado . Los métodos
de secuenciación de próxima generación y de tercera genera-
ción secuencian en forma simultánea 1nuchos fragn1entos de
DNA, lo que permite una determinación n1ucho más rápida y
menos costosa de una secuencia de DNA.
■ Las repeticiones cortas en tándem (STR) y los microsatélites
se utilizan para identificar a las personas por sus secuencias
de DNA (huell as genéticas de DNA) .
■ La genética directa comienza con un fenotipo y realiza análi-
sis para localizar los genes responsables. La genética inversa
comienza con una secuencia de DNA y realiza análisis para
determinar su efecto fenotípico.
■ La mutagénesis dirigida al sitio puede utilizarse para producir
mutaciones en sitios específicos del DNA, lo que permite
adaptar los genes para un propósito p articular.
■ Los animales transgénicos, produ cidos inyectando DNA en
óvulos fec undados, contienen DNA extraño que se integra
en un cromosoma. Los ratones con desactivación génica
(knockout) tienen un gen n ormal desactivado.
■ Se utiliza interferencia por RNA para silenciar la expresión de
genes específicos.
■ Las técnicas de genética molecular se emplean para crear pro-
ductos de importancia comercial, desarrollar pruebas diagnós-
ticas y tratar enfermedades.
■ En la terapia génica, se tratan las enfermedades mediante la
alteración de genes de las células humanas.

TÉRMINOS IMPORTANTES

biotecnología (p. 536)
clonación génica (p. 541)
clonación posicional
(p. 552)
conector (p. 542)
cósmido (p. 543)
cromosoma artificial bacteria-
no (BAC) (p. 543)
cromosoma artificial de leva-
dura (YAC) (p. 544)
didesoxirribonucleósido trifos-
fato (ddNTP) (p. 556)
electroforesis en gel (p. 539)
endon ucleasa de restricción
(p. 537)
enzin1a de restricción (p. 537)
extremo cohesivo (p. 537)
genética directa (p. 564)
genética inversa (p. 564)
genoteca de cDNA (DNA com-
plementario) (p. 550)
genoteca de DNA (p. 549)
genoteca genórnica (p. 549)
hibridación in situ (p. 552)
 Análisis genético molecular y b iotecnología 573

huellas genéticas de DNA
(p. 561)
ingeniería genética (p. 536)
1nicrosatélite (p. 561)
mutagénesis dirigida al siti o
(p. 564)
mutagénesis dirigida por oligo-
nucleótidos (p. 564)
nucleasa genomanipulada
(p. 539)
paseo c romosómico (p. 553)
PCR en tiempo real
(p. 548)
PCR por transcripción inversa
(p . 548)
plásmido Ti (p. 544)
polimorfismo de longitud de
los fragmentos de restricción
(RFLP) (p. 555)
ratones con desactivación
génica (knockout)
(p . 567)
ratones knock-in (p. 567)
reacción en cadena de la poli-
merasa (PCR) (p . 546)
repetición corta en tándem
(STR) (p. 561)
secuenciación del DNA
(p. 556)
sonda (p. 540)
Taq polimerasa (p. 548)
tecnología de DNA recombi-
nante (p. 536)
tecnologías de secuenciación de
próxima generación (p. 559)
terapia génica (p. 571)
transferencia de Northern
(p. 541)
transferencia de Southern
(p. 540)
transferencia Western (p. 541)
transgén (p. 565)
vector de clonación (p. 541)
vector de expresión (p. 544)

l. Las enzimas de restricción existen naturalmente en las bac-
terias, que las utilizan para evitar e l ingreso de DNA viral.
2. c
3. La transferencia de Southern se emplea para transferir DNA
de un gel a un medio sólido. La transferencia de Nortbern
se utiliza para transferir RNA de un gel a un medio sólido,
y la transferencia Western, para transferir proteína de un gel
a un medio sólido.
4. Se cortan el gen y el plásnrido con la misma enzima de res-
tricción y se los mezcla. Se utiliza DNA ligasa para sellar
las muescas del esqueleto de azúcar-fosfato.
5. Una enzima DNA polimerasa termoestable es importante
para el éxito de la PCR, porque el p1imer paso de la reac-
ción requiere que se caliente la solución hasta 90-100 º C
para separar las dos cadenas de DNA. La 111ayoría de las
enzi mas se desnaturalizan a esta temperatura. Con el uso de
una polimerasa termoestable, la enzi ma puede agregarse al
comienzo de la reacción y actuará dw·ante múltiples ciclos.
6. Con la utilización del código genético y la secuencia de
a1n inoácidos de la proteína, es posible deducir posibles
secuencias nucleotídicas que cubren una pequeña región del
gen. Para investigar la genoteca, se utiliza una mezcla de
todas las posibles secuencias nucleotídicas que podrían
codificar la proteú1a tomando en consideración los codones
sinónimos. Con el fin de minimizar el número de secuen-
cias requeridas, se selecciona una región de la proteína que
tenga degeneración relativamente escasa de sus codones .
7. Puede examinarse el patrón de expresión del gen y compa-
rarse la región codificante de copias del gen de individuos
con el fenotipo mutante con Ja región de codificación de
individuos con fenotipo sil vestre.
8. d
9. Mediante la utilización de PCR con cebadores que flanque-
en la región que contiene las repeticiones en tándem.
10. b
11. c
12. Las posibles preocupaciones son: a) daño ecológico causa-
do por introducir organismos nuevos en el medioambiente;
b ) efectos negativos de los organismos transgénicos sobre la
biodiversidad; c) posible diseminación de transgenes a orga-
nis1nos nativos por hibridación; d) efectos sobre la salud de
la ingesta de alimentos modificados genéticamente.
13. La terapia génica somática modifica genes solo en tejidos
somáticos, y estas modificaciones no pueden heredarse. La
terapia génica de la línea ge1minal provoca alteraciones de
genes de células de la línea germinal, que serán heredadas.

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
Una molécula de DNA bicatenario de 5 nrillones de pares de bases de longitud tiene una composición
de bases de 62% de G + C. ¿Cuántas veces, en promedio, e s probable que estén presentes los siguien-
tes sitios de restricción en esta m olécula de DNA?
a. BamHI (la secuencia de reconocimiento es GGATCC)
b. HindIIl (la secuencia de reconocimiento es AAGCTT)
c. HpaIT (la secuencia de reconocimiento es CCGG)
 574 CAP[TULO 19

Pista: si conoce
Estrategia de solución el porcentaje de
cualquier base
del DNA, puede
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? El porcentaje de A+ T = (100% - G - C) = 38% y determinar el
%A= %T = 38%/2 = 19%. Para determinar la pro- porcentaje de
El número de sitios de restricción que probablemente estén todas las demás
presentes en la molécula de DNA para cada una de las enzi- babilidad de hallar una secuencia de bases particular, bases, porque G
mas de restricción especificadas. aplicamos la regla de la multiplicación, que multipli- = CyA=T.
ca la probabilidad de hallar cada base en un sitio
¿Qué información se proporciona para resolver el proble- particular. Recuerde: La
regla de la mul-
ma? tiplicación afir-
a. La probabilidad de hallar la secuencia GGATCC ma que la pro-
■ El tamaño de la molécula de DNA. = 0,3 1 X 0,31 X 0,19 X 0, 19 X 0,3 1 X 0,3 1 = babilidad de
■ La composición de bases G + C de la m olécula de DNA. 0,0003333. Para determinar el número promedio dos o más
eventos inde-
■ Las secuencias de reconocimiento para cada enzima de de secuencias de reconocimiento en un fragmento pendientes se
restricción. de DNA de 5 mi ll ones de pares de bases, multi- calcula multipli-
cando sus pro-
plicamos 5 000 000 pb x 0,00033 = 1 666,5 babilidades
Para obtener ayuda con este problema, repase: secuencias de reconocimiento. independiehtes.

Coite y unión de fragmentos de DNA en la Sección 19.2. b. El número de secuencias de reconocimiento

AAGCTT es 0,19 x 0 ,19 x 0 ,31 x 0,31 x 0,19 x 0 ,19 x
5 000 000 = 626 secuencias de reconocimiento.
Pasos de la solución
c. El número de secuencias de reconocimiento CCGG es 0 ,3 1
Los porcentajes de G y C son iguales en el DNA bicatenario; por x 0,31 x 0 ,31x0,31 x5000 000 = 46.176 secuencias de
lo tanto, s i G + C = 62%, entonces %G = %C = 62%/2 = 31 %. reconocimiento.

Problema 2
Usted recibe eJ siguiente fragmento de DNA para secuenciar: 5'-GCTIAGCATC-3'. Primero, usted
clona el fragmento en células bacterianas con el fin de producir suficiente DNA para secuenciar. Aísla
el DNA de las células bacterianas y aplica el método de secuenciación didesoxi. Luego, separa los pro-
ductos de las reacciones de polimerización mediante electroforesi s en gel. Dibuje las bandas que debe-
rían aparecer en el gel a partir de las cuatro reacciones de secuenciación. Pista: pequeños
fragmentos cerca-
nos al extremo 5'
de la hebra recién
sintetizada migran
Estrategia de solución más rápido y apa-
recerán cerca del
fondo del gel.
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Así, l a secuencia de la cadena recién sintetizada,
Las posiciones de las bandas en el gel de secuenciación. escrita en dirección 5' ➔3' es: 5 '-GATGCTA-
AGC-3 ' . En el gel, aparecerán las bandas que representan esta
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
secuencia, con las bandas correspondientes a los nucleótidos
La secuencia de bases del fragmento de DNA que debe ser
secuenciado. cercanos al extremo 5' de la 1nolécula en la pa11e inferior del
gel.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Secuenciación del DNA en la Sección 19.4.
Reacción que contiene
_ _ _ _ __,A_ _ _ _ __

'ddATP ddTTP ddCTP ddGTP'

Pasos de la solución 1 1 1 1 1 1 1 1 Origen

Recuerde: en la
La prrmera tarea es escribir la secuencia del fragn1ento
secuenclación recién sintetizado, que será comple:mentalio y antipara.-
didesoxi, se sinteti-
za una nueva lelo respecto del fragmento original. La secuencia origi- - -
cadena de DNA y nal es 5 '-GCTTAGCATC-3', de manera que la secuen-
esa cadena es la
que se secuencia. cia recién sintetizada será:
Por consiguiente,
las bandas que
aparecen en el gel Secuencia original (molde): 5 '-GCTTAGCATC-3'
representan el Secuencia recién sintetizada: 3'-CGAATCGTAG-5'
complemento de la
secuencia original.

Sección 19.1
l. Enumere algunos de los efectos y aplicaciones prácticas de
los anális is genéticos 1noleculares.
Sección 19.2
2. ¿Qué característica suele observarse en las secuencias reco-
nocidas por las enzunas de restricción de tipo II?
3. ¿Qué papel normal desempeñan las enzimas de restricción
en las bacterias? ¿Cómo protegen las bacterias su propio
DNA de Ja acción de las enzimas de restricción?
4. Explique cómo se utiliza la electroforesis en gel para sepa-
rar frag1nentos de DNA de diferente longitud.
5. Una vez separados los fragmentos de DNA mediante elec-
troforesis en gel, ¿cómo pueden visualizarse?
6. ¿Cuál es el propósito de la transferencia de Southem?
¿ Cómo se lleva a cabo?
7. Mencione tres características importantes de los vectores de
clonación.
8. Describa de manera sucinta dos métodos diferentes para
insertar DNA extraño en plásmidos e indique los puntos
fuertes y débiles de cada método.
9. Ex:pbque en forma sucinta cómo puede utilizarse un gen de
resistencia a antibióticos y el gen lacZ para determinar cuá-
les son las células que contienen un plásmido particular.
10. Explique en forma breve cómo se emplea la reacción en
cadena de la polimerasa para amplificar una secuencia espe-
cífica de DNA. ¿Cuáles son las limitaciones de la PCR?
11. ¿Qué es la PCR en tiempo real?
Sección 19.3
12. ¿En qué se diferencia una genoteca genómi.c a de una geno-
teca de cDNA?
Introducción
24. La introducción a este capítulo explica cómo se utiliza la
terapia génica para tratar la amaurosis congénita de Leber
(LCA, un tipo de ceguera severa). ¿Qué características de la
ceguera que afectan la retina (como la LCA) la convierten
en un candidato interesante para la terapia génica?
Sección 19.2
*25. Suponga que un genetista descubre una nueva enzima de
restricción en la bacteria Aeromomas ranidae. Esta enzima
de restricción es la primera en ser aislada de esta especie
bacteriana. Utilizando la convención estándar para la abre-
viatura de las e nzimas de restricción, dé un nombre a esta
nueva enzin1a (para ayuda, véase la nota al pie del cuadro
19-1).
Análisis genético molecular y biotecnología 575
13. ¿Cómo se utilizan las sondas para examinar genotecas de
DNA? Explique cómo puede prepararse una sonda sintética
cuando se conoce el producto proteico de un gen.
14. Explique brevemente el procedimiento de hibridación in
situ y mencione algunas aplicaciones de esta técnica.
15. Explique de manera sucinta cómo puede aislarse un gen
mediante clonación posicional.
16. Explique cómo puede emplearse el paseo cromosómico
para hallar un gen.
Sección 19.4
17. ¿ Cuál es el propósito del didesoxinucleósido trifosfato en la
reacción de secuenciación dídesoxi?
18. ¿ Qué son las huellas genéticas de DNA? ¿ Qué tipos
de secuencias se examinan en las huellas genéticas del
DNA?
Sección 19.5
19. ¿En qué se diferencia un enfoque de genética inversa de un
e nfoque de genética directa?
20. Explique en forma sucinta cómo se lleva a cabo la mutagé-
nesis dirigida al sitio.
21. ¿Qué son los ratones con desactivación génica, cómo se pro-
ducen y para qué se los utiliza?
22. ¿ Cómo se usa la interferencia por RNA en el análisis de la
.
✓ ✓ ?
f unc1on gen1ca.
•
Sección 19.6
23. ¿Qué es la terapia génica?
26. ¿ Con qué frecuencia, en promedio, esperaría que una
endonucleasa de restricción de tipo II cortara una molé-
cula de DNA si la secuencia de reconocimie nto para la
enzima tuviera 5 pb? (Asuma que la probabilidad de
hallar los c uatro tipos de bases en e l DNA es igual y que
las bases en una secuencia de reconocimiento son inde-
pendientes). ¿Con qué frecuencia cortaría el DNA la
endonucleasa si la secuencia de reconocimiento tuviera
8 pb ?
*27. Un microbiólogo describe un nuevo tipo de endonucleasa
de restricción de tipo II. Cuando e l DNA es digerido por
esta enzima, se producen frag1nentos cuya longitud pro-
medio es de 1 048 500 pb. ¿ Cuál es el número más proba-
ble de pares de bases en la secuencia de reconocitniento
de esta enzima?
576 CAP[TULO 19
28. ¿Los sitios de restricción para una enzima que tiene 4 pb
en su sitio de restricción estarán más cerca, mucho n1ás
separados o espaciados de manera similar en comparación
con los de una enzima que tiene 6 pb en su sitio de restric-
ción? ·ExpLique su razonamiento.
*29. Alrededor del 60% de los pares de bases de una molécula
de DNA humana son AT. Si el genoma humano tiene 3200
millones de pares de bases de DNA, ¿aproximadamente
cuántas veces estarán presentes los siguientes sitios de res-
tricción?
a. Bamlll (el sitio de restricción es 5'-GGATCC-3')
b. EcoRI (el sitio de restricción es 5'-GAATTC-3')
c. HaeIII (el sitio de restticción es 5'-GGCC-3')
*30. El mapeo de restricción de un fragmento lineal de DNA
revela los siguientes sitios de restricción para EcoRI.
EcoRI sitio 1 EcoRI sitio 2
2 kb l 4kb l 5 kb
a. Este fragmento de DNA es cortado por EcoRI, los frag-
mentos resultantes se separan por electroforesis en gel,
y el gel se tiñe con bromuro de etidio. Dibuje un esque-
ma de las bandas que aparecerán en el gel.
b. Si aparece una mutación que altera el sitio 1 para
EcoRJ en este fragmento de DNA, ¿en qué se diferen-
ciará el patrón de bandeo en el gel del que usted dibujó
en la parte a?
c. Si aparecen mutaciones que alteran los sitios 1 y 2 para
EcoRI en este fragmento de DNA, ¿en qué se diferen-
ciará el patrón de bandeo en el gel del que usted dibujó
en la parte a?
d. Si hay una inserción de 1000 pb de DNA entre los dos
sitios de rest:licción, ¿en qué se diferenciará el patrón
de bandeo en el gel del que usted dibujó en la parte a?
e. Si hay una deleción de 500 pb de DNA entre los dos
sitios de rest:licción, ¿en qué se diferenciará el patrón
de bandeo en el gel del que usted dibujó en la parte a?
*31. ¿Qué vectores (plásmido, fago 1, cósmido, cromosoma
artificial bacte1iano) pueden utilizarse para clonar un frag-
mento continuo de DNA con las siguientes longitudes?
a. 4 kb
b. 20 kb
c. 35 kb
d. 100 kb
32. Un genetista utiliza un plásmido para la clonación que
tiene el gen lacZ y un gen que confiere resistencia a la
penicilina. El genetista inserta un fragmento de DNA
extraño en un sitio de restricción que se localiza dentro
del gen lacZ y utiliza el plásmido para transforn1ar bac-
terias. Explique cómo el genetista puede identificar bacte-
rias que contienen una copia de un plásmido con el DNA
extraño.
33. En la figura 19-11, ¿cuál es el propósito del gen neo que
se une al gen Bt?
Sección 19.3
34. Suponga que usted recién se ha graduado en la universi-
dad y ha comenzado a trabajar en una firma de biotecnolo-
gía. Su prin1era asignación laboral es clonar el gen porcino
para la hormona prolactina. Suponga que el gen porcino
para prolactina todavía no se ha aislado, secuenciado ni
mapeado; en can1bio, se ha clonado el gen para prolactina
del ratón, y se conoce la secuencia de aminoácidos de la
prolactina de ratón. Explique de manera sucinta dos estra-
tegias diferentes que podría emplear para hallar y clonar el
gen porcino para prolactina.
*35. Un biólogo molecular desea aislar un gen de un escorpión
que codifica la toxina letal hallada en su aguijón con el
objetivo final de transferir
este gen a bacterias y pro-
ducir la toxina para uso
como plaguicida comer-
cial. El aislamiento del
gen requiere una genoteca
de DNA. ¿Debe crear el
biólogo molecular una
genotecta genómica o una
genoteca de cDNA?
(Sahara Nature/Fotalia.com).
Explique su razonamiento.
*36. Una proteína tiene la siguiente secuencia de aminoácidos:
Met-Tyr-Asn-Val-Arg-Val-Tyr-Lys-
Trp-Leu-Ile-1-lis-Thr-Pro
Usted desea crear un conjunto de sondas par·a exa1ninar
una genoteca de cDNA para detectar la secuencia que
codifica esta proteína. Sus sondas deben tener por lo
menos 18 nucleótidos de longitud.
a. ¿ Qué aminoácidos de la proteína deben utilizarse para
construir las sondas de 111anera que la degeneración sea
mínima? (Consulte el código genético de la figura 15-
10).
b. ¿Cuántas sondas diferentes deben sintetizarse para
tener la certeza de que hallará la secuencia con·ecta de
cDNA que especifica la proteína?
Sección 19.4
37. En la figura 19-22, Roberto y José son homocigóticos
para diferentes patrones de fragmentos de rest:licción.
¿ Cuántas bandas esperaria observar en el gel si una perso-
na fuera heterocigótica para los patrones A y B? Explique
su razonamiento.
38. Suponga que desea secuenciar el siguiente fragmento de
D NA:
5'-TCCCGGGAAA-primer sitio-3'
Primero, utiliza PCR para amplificar· el fragmento, de
manera que haya suficiente DNA para la secuenciación.
Después, separa los productos de las reacciones de poli-
merización por electroforesis en gel. Dibuje las bandas
que deberían aparecer en el gel a partir de las cuatro reac-
ciones de secuenciación.
 Análisis genético molecular y biotecnología 577

Reacción que contiene

A
*41. Un trastorno hipotético denominado síndrome G es una
~--d-A_T_P_ d_d_TT
_P_ ~d-d-C_
TP_ d_d_G_T_P' enfermedad autosómica dominante caracterizada por defec-
Origen tos visuales, esqueléticos y cardiovasculares. El trastorno
1 1 1 1 1 1 1 1
aparece en la mectiana edad. Como sus síntomas son vari a-
bles, el trastorno es ctifícil de diagnosticar. Sin embargo, el
diagnóstico temprano es importante, porque los defectos
cardiovasculares pueden u·atarse si se reconoce el trastorno
en estadios tempranos. Se sabe que el gen para el sú1drome
G reside en el cromosoma 7 y está estrechamente ligado a
dos RFLP del mi smo cromoso1na, uno en el locus A y uno
en el locu s C. Los locus G, A y C están muy cerca y hay
escaso entrecruzamie nto entre ellos. Los siguientes alelos
de RFLP se encuentran en los locus A y C:
*39. Suponga que recibe un ft·agmento corto de DNA para
secuenciar. A1nplifica el fragmento con PCR y prepara una
Locus A: Al, A2, A3
serie de cuatro reacciones didesoxi. Después, separa los
productos de las reacciones mediante electroforesis en gel Locus C: CI, C2, C3
y obtiene el siguiente patrón de bandeo:
Sandra, mostrada en el siguiente árboles genealógicos,
Reacción que contiene está preocupada por la posibilidad de tener síndrome G.
r,..dd_A
_T_P- -
dd_TT A
_ P_,.._
d_d_C_T_P_ d_d_G_T....,
P' Su madre fa Uecida tenia el síndro.me G y tiene un herma-
no con el trastorno. Su otro hermano es de 1nediana edad y
1 1 1 1 1 1 1 1 Origen no tiene la enfennedad; por lo tanto, se asume que no
porta los genes que la determinan. Un genetista determina
los genotipos de Sandra y su familia inmediata en los
locus A y C , y obtiene los genotipos mostrados en el árbol
genealógico.

Al Al
C2 C3

r-Sandra
E scriba la secuencia de bases del fragmento original que A 1 A3 Al A2 Al A2
recibió. CI C3 C2 C3 C2 C2
Secuencia original: 5'- - - - - - 3'
40. La imagen mostrada proviene del estudio original que a. Suponga que no hay ningún entrecruzamiento entre los
N.Msecuenció por primera vez el gen de la fibrosis quística
(CF) (J. R. Riordan y cols. 1989. Science 245: 1066-1 073).
locus A, C y G. ¿Sandra porta el gen que causa el sín-
drome G? Explique por qué.
O! OAtOS

A partir de ella, determine la secuencia de la copia normal
del gen y de la copia mutada. Identifique la ubicación de
la mutación que causa fibrosis quística. Pista: la mutación
CF es una deleción de 3 pb.
CTAG CTAG
b. Dibuje la disposición de los alelos A, C y G en los cro-
moso1nas para todos los miembros de la familia.
Sección 19.5
42. Usted ha descubierto un gen de los ratones que es similar
a un gen de levadura. ¿Cómo podría determinar si este gen
es esencial para el desarrollo de los ratones?
*43. Andrew Fire, Craig Mello y cols. fueron de los primeros
en examinar los efectos del RNA bicatenario en la expre-

--- ,.-- sión de genes (A. Fire y cols. 1998. Nature 391:806-81 1).
En un experimento, usaron una cepa u·ansgénica de C. ele-

-
--- ---
gans en la que habían introducido un gen (gfp) para un
pigmento fluorescente verde. Inyectaron a algun os gusa-

- - nos con RNA bicatenario con1ple111entario de las secuen-

cias de codificación del gen gfp e inyectaron a otros gusa-
n os con RNA bicatenario complementario de la región
DNA de una persona sana DNA de una persona con fibrosis quística codificante de un gen diferente (unc22A) que codifica una
(De J. R. Riordan y cols. Sdence 245:1066-1073. Reimpreso con autoriza- proteína muscular. Las fotografías de la página siguiente
ción de AAAS). muestran una larva y un adulto de la progenie de los
578 CAP[TULO 19
gusanos inyectados. El pigmento fluorescente verde apare-
ce co1no puntos b1illantes en las fotografías.
RNA bicatenario de RNA bicatenario de
unc22A gfp
Larva
Adulto
(Reimpreso con autorización de Macmilla Publishers Ltd: NATURE 391 :806-811
[19 de febrero de 1998); copyright 1998).
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 19. 5
44. Suponga que usted es contratado por una firma de biotecno-
logía para producir una cepa de moscas de la fruta gigantes
utilizando tecnología de DNA recombinante, de modo que
los estudiantes de genética no se vean obligados a forzar la
vista al observar moscas diminutas. Usted concun·e a la
biblioteca y aprende que el crecimiento de las 1noscas de la
fruta es inhibido normalmente por una hormona denomina-
da sustancia P corta (SSP). Usted decide que puede produ-
cir moscas de la fruta gigantes si, de alguna n1anera, puede
desactivar la producción de SSP. La sustancia P corta es
sintetizada a partir de un compuesto denominado XSP en
una reacción de un único paso catalizada por la enzima run-
tasa:
XSP --➔ SSP
nu1tasa
Un investigador ya ha aislado el cDNA para la runtasa y lo
ha secuenciado, pero se desconoce la localización del gen
de runtasa en el genon1a de Drosophila. Al intentar diseñar
una estrategia para desactivar la producción de SSP y pro-
a. Explique estos resultados.
b. Fire y Mello realizaron otro experimento en el que
inyectaron RNA bicatenario complementario de las
secuencias de los intrones y el pron1otor del gen gfp.
¿Qué resultados esperaría de este experimento?
Explique su respuesta
<lucir moscas de la fruta gigantes mediante técnicas de DNA
recombinante convencionales, descubre que resulta en
extremo difícil la deleción, la desactivación o la mutación
de esta secuencia de DNA de Drosophila. Por lo tanto,
usted debe limitar su ingeniería genética a procedinúentos
de au,m entación (agregado de genes nuevos a las células).
Describa los 1nétodos que usará para desactivar SSP y pro-
ducir moscas gigantes mediante la tecnología de DNA
recombinan te.
Sección 19.6
45. Gran parte de la controversia respecto de los alimentos
obtenidos por ingeniería genética se ha centrado en si se
debe exigir etiquetado especial de todos los productos ela-
borados a partir de cultivos genéticamente modificados.
Algunas personas han propugnado que la etiqueta indique
que el producto se ha fabricado a partir de plantas genética-
m ente modificadas. Otros han argumentado que se debe
exigir etiquetado solo para identificar los ingredientes, no el
proceso mediante el cual se produjeron. Tome una posición
respecto de este tema y justifíquela.
 20
Genómica y proteómica

Decodificando la danza de la abeja:

el genoma de Apis me/Jifera
La abeja, Apis mellifera, es uno de los animales más
sorprendentes del mundo. Las abejas son muy socia-
bles, viven en colonias complejas en las que cada indi-
viduo coopera y asume la responsabilidad de tareas
especializadas que benefician a todo el enjambre. Pese a
tener un cerebro muy pequeño, que contiene solo un
millón de neuronas (el cerebro humano contiene
100 000 millones), las abejas pueden realizar conductas
complejas y comunicarse de manera eficaz con miles de
otras abejas que componen el enjambre. Cada abeja
reconoce el olor de su propio enjambre, así como olores
que son señales de alarma, indican qué tareas deben
realizarse y distinguen la edad, la casta y el sexo de
otras abejas. L as abejas obreras tienen una memoria
extraordinaria. Al hallar un macizo de flores con una
importante cantidad de néctar, una obrera regresa a la
colmena y realiza la danza de la abeja, en Jaque descri-
be una figura de ocho al lado del panal. La danza trans-
mite la información a las demás abejas sobre la ubica-
En 2006, se secuenció el genoma de la abeja Apis me/Jifera, que aportó nueva ción de la fuente de alimento, incluida la dirección en
información sobre su comunicación, comportamiento, ecología y evolución. referencia al ángulo del sol y la distancia de la colmena
(K Wothe/age fotostock). a la fuente. Una abeja puede recordar hasta cinco locali-
zaciones diferentes de flores, la dirección y la distancia
de cada una de ellas respecto de la colmena, las caracte-
rísticas del terreno durante el trayecto y la hora del día en que las flores producen más néctar.
Las abejas no son solo objeto de curiosidad biológica; desempeñan un papel importante en
la polinización de muchos cultivos alimentarios, además de producir miel y cera. Dada su
importancia en la agricultura y en la ciencia, el National Genome Research Institute (Instituto
Nacional de Investigación del Genoma) de los National Institutes of Health de los Estados
Unidos seleccionó a la abeja para secuenciar su genoma. En 2006, se publicó la secuencia
completa del genoma, que ha aportado una gran cantidad de información acerca del compor-
tamiento, las funciones neurológicas, la ecología y la evolución de estos insectos.
El genoma de abeja está forn1ado por 10 157 genes que incluyen unos 236 millones de
pares de bases de DNA. Sobre la base de la información genómica, se identificaron 36 genes
que codifican neuropéptidos, proteínas cerebrales que inciden en el comportamiento y la
memoria. Hay más de 3000 genes activos en el cerebro de una abeja, y los investigadores
localizaron regiones reguladoras que controlan la expresión de muchos de ellos, incluidos
algunos que son unportantes para el desatTollo del co1npo1tamiento de búsqueda. En compara-
ción con otros insectos, las abejas también tienen más genes que codifican receptores olfati-
vos, lo que es consistente con su complejo sistema de co1n unicación química.
Durante mucho tiempo, l a abeja se ha asociado con seres humanos, pero hasta hace pocos
se desconocía su origen evolutivo preciso. Gracias a la información de la secuencia genómica,
los genetistas utilizaron polimorfismos de nucleótido único (SNP, sitios que varían en la base
presente en un solo nucleótido) para estudiar las relaciones evolutivas entre abejas de diferen-
579
580 CAP[TULO 20

tes partes del mundo. Este

, estudio reveló que la especie A. mellifera no se originó en Asia, como
.

se c reía antes, sino en Afiica. Posteriormente, las poblaciones africanas se expandieron a Europa y
Asia en dos olas, una que pobló Europa occidental, y otra que se expandió por Asia y Europa
01iental.
Las abejas europeas fueron introducidas en Norteamé1ica por los primeros colonos europeos,
pero algunas han sido reemplazadas en los últimos años por descendientes de las "abejas asesinas"
africanas, conocidas por su comporta1rue nto agresivo. Esas abejas fueron introducidas en Brasil en
1956 y luego se diseminaron hacia el Norte hasta llegar a los Estados Unidos. El análisis de SNP
de abejas recolectadas en los Estados Unidos antes de 1990 mostró que tenían solo genes europe-
os, pero de 1993 a 2001, las abejas del sur de Texas mostraron una transición a genes predominan-
temente de ascendencia africana.

L a secuenciación del genoma de la abeja ilustra las diversas

maneras en que se utiliza hoy en día la información genónri-
ca. La genómica es el campo de la genética que intenta conocer
el contenido, la organización, la función y la evolución de la
información genética de genomas completos. El campo de la
genómica está a la vanguardia de la biología moderna; la informa-
ción resultante de la investigación en este campo ha contribuido
de n1anera significativa a la salud humana, la agricultura y a
muchas otras áreas. Ha su1ninistrado secuencias de genes necesa-
rios para producir proteínas importantes desde el punto de vista
médico mediante tecnología de DNA recon1binante, y las con1pa-
raciones de secuencias de genomas de diferentes organismos
están posibilitando una mejor comprensión de la evolución y la
historia de la vida.
Comenzamos este capítul o exanúnando los 1napas genéticos y
físicos, y los métodos para secuenciar genomas completos. A
continuación, exploramos la genómica fu ncional, cómo se identi-
fi can los genes en las secuencias genómicas y cómo se definen
sus funciones. Por sí misma, la secuencia de un genoma es de
limitada utilidad, y ahora que la secuenciación de genomas se ha
convertido en rutina, gran parte de la genómica se centra en des-
cifrar la función de las secuencias que se obtienen. En Ja parte
final del capítulo, consideramos la proteómica, el estudio del con-
junto completo de proteínas halladas en una célula.
20.1 La genómica estructural determina
las secuencias de DNA de genomas enteros
La genómica estructural se ocupa de Ja organización y secuen-
cia de la información genética contenida dentro de un genoma. A
menudo, uno de los primeros pasos para caracterizar un genoma
consiste en preparar mapas genéticos y físicos de los cron1oso-
mas. Estos mapas aportan info1mación acerca de las localizacio-
nes relativas de los genes, los 1narcadores 1noleculares y los seg-
mentos cromosómicos, que suelen ser esenciales para posicionar
los segmentos de los cromosomas y alinear los tramos de DNA
secuenciados en una secuencia del genoma con1pleto.
Mapas genéticos
Todos hemos usado alguna vez un mapa. Los mapas son indispen-
sables para encontrar la casa de un nuevo amigo, el camino hacia
una ciudad del estado que no conocemos o la ubicación de un país.
Cada uno de estos ejemplos requiere un mapa con una escala dife-
rente. Para hallar la casa de un amigo, es probable que usted utili-
ce un mapa de las calles de la ciudad; para hallar el camino hacia
una ciudad desconocida, podría recurrir a un mapa de las catTete-
ras estatales; para encontrar un país, por ejemplo Kazakhstan,
necesitaría un atlas del mundo. De modo sinúlar, navegar por un
genoma requiere mapas de diferentes tipos y escalas.
CONSTRUCCIÓN DE MAPAS GENÉTICOS Los mapas genéticos
(denominados también mapas de ligamiento) proporcionan una
aproximación grosera de la localización de los genes respecto de
la ubicación de otros genes conocidos (fig. 20-1), Estos mapas se
basan en la función de recombinación genética (de ahí el nombre
de mapa genético). Los principios básicos de la construcción de
mapas genéticos se analizan en detalle en el cap. 7. En resumen ,
se cruzan organismos de genotipo conocido y se determina la fre-
cuencia de recombinación entre locus examinando la progenie. Si
la frecuencia de recombinación entre dos locus es del 50%, estos
locus se encuentran en cromosomas diferentes o 1nuy alejados en
el mismo cro1nosoma. Si la frecuencia de recon1binación es n1e-
nor deJ 50%, los locus se hallan cerca en el rnis1no cromoson1a
(pertenecen al mismo grupo de ligamiento). En los genes li gados,
la frecuencia de recombinación es proporcional a la distancia físi-
ca entre los locus. En los mapas genéticos, las distancias se miden
en porcentaje de recombinación (centimorgan, cM) o unidades de
mapa (u.n1.). Pueden integrarse datos de múltiples cruza1nientos
de dos o tres puntos en mapas de ligamiento para cro1noso1nas
co.m pletos.
Durante muchos años, los genes podían detectarse solo por ob-
servación de su influencia sobre un rasgo (el fenotipo), y la cons-
trucción de mapas genéticos estaba limitada por la existencia de
rasgos de un locus único que pudieran ser examinados pai·a detec-
tai· evidencia de reco1nbinación. Con el tiempo, esta linútac:ión se
superó gracias al desatTollo de técnicas moleculares, como el aná-
lisis de los polimorfismos de longitud de los segmentos de restric-
ción, la reacción en cadena de la polimerasa y la secuenciación
del DNA (véase cap. 19), capaces de suministrar marcadores
moleculares que pueden ser utilizados pai·a construir y refinar los
mapas genéticos.
LIMITACIONES DE LOS MAPAS GENÉTICOS Los mapas ge-
néticos tienen varias limitaciones, y la primera es la resolución o
el detalle. El genoma humai10 incluye 3200 millones de pares de
 Genómica y proteómica 581

O las distancias 1 ~ marcadores de DNA

en un mapa
genético se
y unos pocos genes
(en azul) de fenotipos
Se numeran las
bandas visibles
en un cromosoma
Este mapa muestra
la localización
real de los genes.
t.,ª~_
j-
--.¿ _ glk1
cha 1
... que este mapa,
que se crea a partir
de datos de la fre-
conocidos pueden uti- en metafase. Se
miden en Tiene mayor cuencia de recom-
lizarse para determinar
centimorgans. las posiciones de los han determinado resol~ción y glk 1 _ binación y tiene
genes. las localizaciones exactitud ... exactitud limitada.
de algunos - - - - - - ~ his4 - -- his4
Marcadores de DNA marcadores de
r - - - - - - - O1S160
, - - - - - -O1S243
DNA en relación
con las bandas
s~:i~ - _ __
- --
SUP53
teu2
. . . . - - - --..O1S548 Centró mero - - -- - Centró mero
,--- - - - - 1015450 cromosómicas :._J
~ - - - 015228 _ / - pgk1
,--- - - O1S507
- - - -01$436
1 - - - - O1S1592
V pgk1
~ - pet18
- - - -015199 36,3 pet18 -
- - - - 015482 ,,,,- cry 1
- - - 015234
r--- ----- O 1S247
36,2 cry1 _ _/¡-- MAT
Distancia , - - - - O1S513
(cM) r - - O1S233 36, 1 MAT _ _/
r - - O15201
13,7
015441
r - - - O15472
ÍL_ ! 35 thr4 - -- thr4
r - - O15186 34,3
r - - O151157
VI
34,2 SUP61 - \
/ r - - O15193 34, 1
r - - O15319 -suP61
- -015161 a, { 33
- -015417 --~
~
32,3
..32;2
ABP1 - -..._
47
/ r - - O15200
o 32, 1 - ABP1
- -O1S476
,-----.015220 31,3
11,4 - - - ~ - ~ O1S312 31,2
, - - - O1S473
13,4 r - - O1S246 31, 1 Mapa Mapa
//r - - O151613 físico genético
8,7 - - O1S198 22,3
/ r-- O15159
- ~ 015224 n;z Cromosom a 111
11,8 - - O1S532 22, 1
r--1 O1S500 Figura 20-2. Los mapas genéticos y físicos pueden diferir en las dis-
9,8 - -O1S1728 21
, - - - O1S207 13,3 tancias relativas e incluso en la posició n de los genes en un cromo-
11,0 l== = = = = / ,/ ~ - O15167
_____ _ _ _ _, , - - -015188 soma. Los mapas genéticos y físicos del cromosoma 111 de levadura revelan
14,2 _ _ _ _ __,/ -

9.4
44
~ -
, --
- - O1S239
- - O1S221
D1S236
- 015223

/ r - - O15187
- - - - ~ - -O1S418
1 estas diferencias.

13,9 - - 015189 12
r - - O1S440
015534 21, 1
1.,3,,;6~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ L =015498
21;2 bases de DNA y tiene una distancia genética total de alrededor de
~6,_5 _ _ _ _ _ _ .....__
....:. - 015305
O1S303 21,3
..22 4000 cM, un promedio de 800 000 pb/cM. Aun si hubiera un mar-
7,9 a--- - - - - - . '--- SPTA1
' - - - CRP cador por cada centi1norgan (lo que no es realista), la resolución
7, 5 a - - - - - -- ' O 154".":8~4 = 23
'---- APOA2 respecto de la estructura física del DNA todavía sería bastante
' - - - O1S104 baja. En otras palabras, el detalle del 1napa es 1nuy limitado. Un
' - -O1S194 24
'---- 015318
'----.. O 1S21 O
segundo problema de los mapas genéticos es que no siempre se
'---' O1S218 25 corresponden de manera precisa con las distancias físicas entre
'---- O1S416
,.___ O1s215 los genes. Los mapas genéticos se basan en frecuencias de entre-
- -.015399 31
'--- 015240 cruzamiento, que varían algo entre distintas partes de un cromo-
' - - O1S191
9,3 ' - - - O1S518
32, 1 soma; por lo tanto, las distancias en un n1apa genético solo son
\\'--- O1S461 32,2
\ ' - - O1S422 32,3 aproxitnaciones de las distancias físicas reales a lo largo de un
'---1015412
- - - 015310
41 cron1osoma. La figura 20-2 compara el mapa genético del cro-
'---'O1S510 42, 1 mosoma IlI de levadura con un mapa físico deter minado por
' - -015249
- - 015245 secuenciación del DNA. Hay ciertas discrepancias entre las dis-
15,8
------ 015414
- - - 015505
~:t tancias, e incluso entre las posiciones de algunos genes. Pese a
- - - 015237 43
---- - O15229 44
estas limitaciones, los mapas genéticos han sido cruciales para el
\' - - - -"O1S549 desarrollo de los mapas físicos y la secuenciación de geno1nas
' - - - - O1S213 Cromosoma
' - - -O1S225
- - - - - - 01 S459
completos.
humano 1
'--- - - 01 S446
.___ _ _ ,ACTN2
' - - - - -O1S547
- - - - O1S1609 Mapas físicos
---- - -- O1S180
Los mapas físicos se basan en el análisis directo del DNA y ubi-
, Este gen codifica cx-actinina, una proteína de unión
can los genes en relación con distancias medidas en número de
a actina hallada en células musculares. La mutación
de este gen puede asociarse con distrofia muscular. pares de bases, kilobases o megabases. Un tipo común de mapa
físico es uno que conecta fragmentos aislados de DNA genómico
Figura 20-1. Los mapas genéticos se basan en las frecuenci as de que se han clonado en bacterias o levaduras (fig. 20-3). Por lo
recombinació n. Se muestra un mapa genético del cromosoma 1 humano. general, los mapas físicos tienen una resolución más alta y son
582 CAP[TULO 20

Clones de YAC Figura 20-3. A menudo, se utilizan mapas físicos para ordenar
yOX224 - ---7\\_ fragmentos de DNA clonados. Se muestra una parte de un mapa físi-
yOX28 _ _:.,__{ co de un conjunto de clones solapados de YAC de un extremo del cro-
yoxss - -
yOX44 mosoma Y humano.
yOX222 - - -
'7cj~0:====
yOX223 - -

yOX225 yOX210
Y~~kg ------
yoxs - - - -
yo·x-62
--·-----
yOX38 - - -
yOXSs - - - -
yOX41
yOX32 ----- yOX205 - - - -
yOX31 OX33 - - -
y yOXl 10 - -- -
vi~113
Y~'b~l35_ __
yOX90
~8~~1 -
yOX160
yOX142
yOX184 -
Sitiosde yox200 -
yOX199 -
secuencia - m en en O-r---00- st m stU"\ <O r-- 00 en O N m st U"\ <O r--- 00 en O - N m st U"\ <O r-- 00 en O -

-- -
N st U"\ <O r-- U"\ O - N 00 - N M ,:t U"\

etiquetada -
,.... .-- r-,.. ------.-NNNNNNNNNNMMMMMMMMMM<IC';f'-c::toe:!'-c::toe:t~

más exactos que los mapas genéticos. Un mapa fís ico es análogo
a uno del vecindario que muestra la ubicación de todas las casas CONCEPTOS
de una calle, mientras que un mapa genético es análogo a uno de
carreteras que muestra las ubicaciones generales de los principa- Tanto los mapas genéticos como los físicos aportan información acer-
les pueblos y ciudades. ca de las posiciones y distancias relativas entre los genes, marcadores
Una de las técnicas empleadas para crear mapas físicos es el moleculares y segmentos del cromosoma. Los mapas genéticos se
mapeo de restricción, que determina la posición de los sitios de basan en las frecuencias de recombinación y se miden en porcentajes
restricción en el DNA. Cuando se corta un fragmento de DNA de recombinación (unidades de mapa) o centimorgans. Los mapas
con una enzima de restricción y se separan los frag1nentos me- físicos se basan en las distancias físicas y se miden en pares de bases.
diante electroforesis en gel, es posible determinar el número de
sitios de restricción en el DNA y las distancias entre ellos por el ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
número y las posiciones de las bandas en el gel (véase p. 555 del
cap. 19). Sin embargo, esta información no nos dice el orden ni ¿ Cuáles son algunas de las limitaciones de los mapas genéticos?
la localización precisa de los sitios de restricción. Para mapear los
sitios de restricción, se corta una m uestra del DNA con una enzi-
ma de restricción, y se corta otra muestra con una enzima de res- Secuenciación de un genoma completo
tricción diferente. Se corta una tercera muestra con ambas enzi-
mas de restricción juntas (una doble digestión). Los fragmentos Los pii meros genomas en ser secuenciados fueron pequeños ge-
de DNA producidos por estas digestiones con enzimas de restric- nomas virales. En 1982, se completó el genoma del bacteriófago
ción pueden utilizarse para ubicar los sitios de restricción en la A, formado por 49 000 pb. En 1995, Craíg Venter y Claire Fraser,
molécula original de DNA (véase el Problema resuelto al fma1 del de The Institute for Genomic Research (TIGR, Instituto de In-
capítulo). La n1ayor parte del mapeo de restricción se realiza con vestigación Genórnica), y Hamilton Snlith de la Johns Hopkins
varias enzin1as de restricción, usadas solas y en diversas combi- University secuenciaron el pri.Jner genoma de un organismo de
naciones, lo que produce numerosos fragmentos de restricción. vida libre (Haemophilus influenzae) . .Esta bacteria tiene un geno-
En caso de fragmentos largos de DNA (mayores de 30 kb) , se uti- ma pequeño de 1,8 millones de pares de bases (fig. 20-4). En
lizan programas informáticos para determinar los mapas de res- 1996, ya se había determinado el genoma del primer organismo
tricción, y el mapeo de restricción se p uede facilitar marcando un eucarionte (levadura), seguido de los genomas de Escherichia
extre1no de un fragmento grande de DNA con radiactividad o coli (1997), Caenorhabditis elegans (1998), D1vsophila melano-
identificando el extremo mediante el uso de una sonda. gaster (2000) y Arabidopsis thaliana (2000). El primer borrador
Los 1napas físicos, co1no los mapas de restricción de fragn1en- del genoma hun1ano se completó en junio de 2000.
tos de DNA o incluso de cromosomas completos, suelen crearse E l objetivo final de la genómíca estructural es determinar las
para análisis genómico. Estos mapas largos se crean combinando secuencias nucleotídicas ordenadas de genomas completos de or-
1n apas de fragmentos genó1nicos m.ás cortos, solapados. Existe ganismos. En el capítulo 19, considerarnos algunos de los méto-
una serie de técnicas adicionales para crear mapas físicos, co1no dos utilizados para secuenciar pequeños fragmentos de DNA. El
mapeo de sitios de secuencia etiquetada (STS), que localiza la principal obstáculo para secuenciar un genoma co1npleto es el
posición de secuencias cortas únicas de DNA en un cromosoma; inmenso tamaño de la mayoría de los genomas. Por Lo general, los
hibridación in situ, median te la cual es posible mapear visualmen- genomas bacterian.os tienen por lo menos varios millones de pares
te marcadores a localización crom osómicas; y secuenciación del de bases de longitud; muchos genomas eucariontes tienen miles
DNA. de millones de pares de bases y están distribuidos en docenas de
 Genómica y proteómica 583

Los números representan

Smal 1 una escala en pares de bases j
Smal
1 800 000
Smal
Los sitios de restricción s~ Clave
muestran con el nombre de
1 700 000 Biosíntesis de aminoácidos
la enzima. __,
1 600 000 200 000 • Biosíntesis de cofactores, grupos
Sma l postéticos, t ransportadores
El círculo externo mues-
Smal , ....... tra genes cuya función • Envoltura celular
Rsrll se indica en la clave. • Procesos celulares
• Metab olismo intermediario central
• Metabolismo d e la energía
El segundo círculo
- Metabolismo de los fosfolípidos de ácidos grasos
indica la composi-
ción de bases en • Purinas, p irimidinas, nucleósidos
..-€ ::=';---======~ esa área: y nucleótidos
rojo > 42 %1 GC • Funciones reguladoras
azu l > 40% GC D Rep licación
negro> 66% AT • Proteínas de transporte y unión
500 000
verde> 64% AT Traducción
• Transcripción

Sma l
---.;:::=:::::--...J El tercer clrcu lo muestra
la cobertura de algunos
l • Otras cat egorías
Hipotético
1 200 000
clones usados en la se- L Desconocido
cuenciación del genoma.

1 100 000
El cuarto círculo muestra Figura 20-4. La bacteria Haemophilus
Smal operones ribosómicos (verde),
1 000 000 influenzae fue el primer organismo de
Rsrll
tRNA (negro) y profago (azul). vida libre en ser secuenciado. (De R.D.
900 000
Fleischman y cols. Science 28 July 1995: 269
El quinto círculo muestra posiciones (5223), 496-512. Reimpreso con autorización
de repeticiones simples en tándem. de MAS; el barrido es cortesía de TIGR).

cromosomas. Más aún, por razones técnicas, la secuenciación no humano. El esfuerzo era un proyecto público que consistía en una
puede comenzar en un extremo de un cromosoma y continuar colaboración internacional de 20 grupos de investigación y cien-
directamente hasta el otro extremo; solo pequeños fragmentos de tos de investigadores individuales que formaban el Consorcio
DNA (por lo general, no más de 500 a 700 nucleótidos) pueden Internacional de Secuenciación del Genoma Humano. Este grupo
secuenciarse a la vez. Por lo tanto, determinar la secuencia de un utilizó una estrategia basada en mapas para secuenciar el genon1a
geno1na co111pleto exige dividir el DNA en miles o millones de humano.
fragmentos más pequeños que, entonces, pueden ser secuencia-
dos. La dificultad reside en volver a colocar estas secuencias cor-
tas en el orden co1Tecto. Se han utilizado dos enfoques diferentes
para ensamblar los fragmentos cortos secuenciados en un genoma
completo: secuenciación basada en mapas y secuenciación del
genoma co1npleto por fragmentos escogidos al a.zar (shotgun
[escopeta]). Consideraremos estos dos enfoques en el contexto
del Proyecto Genoma H umano.

El Proyecto Genoma Humano

En 1980, los métodos para mapear y secuenciar fragmentos de
DNA se habían desaiToll ado lo suficiente co,110 para que los gene-
tistas comenzai·an a proponer con se1iedad que era posible se-
cuenciar todo el genoma humano. Se planificó una colaboración
internacional para emprender el Proyecto Geno1na H umano (fig.
20-5); las estimaciones iniciales sugirieron que se requerirían 15
años y 3000 millones de dólares para lograr la tarea. Figura 20-5. Craig Venter (izquierda), presidente de Celera Genomics,
El Proyecto Genoma Humano comenzó ofic ialmente en octu- y Francis Collis (derecha), director de National Human Genome
bre de 1990. Los esfuerzos iniciales se centraron en desan·ollar Research lnstitute, NIH, anuncian la finalización de un borrador del
métodos nuevos y automatizados para clonar y secuencjar DNA, genoma humano en una conferencia de prensa en Washington, D. C.,
y en generar n1apas físicos y genéticos detallados del genon1a el 26 de junio de 2000. (Alex Wong/ Newsmakers/Getty lmages).
584 CAP[TULO 20

Figura 20-6. Los enfoques basados en mapas para la secuen-

ciación del genoma completo se basan en mapas genéticos y
La digestión parcial del DNA
- da origen a fragmentos
solapados que después
físicos detallados para alinear los fragm entos secuenciados.

son clonados en bacterias.

Sitios de Estos clones de insertos

t t 't t restricción grandes se analizan para1
detectar marcadores o
A B C Marcadores
sitios de restricción
solapados, .. .
_J
. .. lo que permite en- , Se selecciona un subgrupo de clones Se secuencia cada uno de estos
samblar los clones de solapados que cubren todo el cro- clones de insertos pequeños, y
insertos grandes en un mosoma y se los fractura. Después, se utiliza el solapamiento de las
cóntigo, un tramo se clonan estos fragmentos. secuencias para ensamblarlas en
t tt t contin uo de DNA. el orden correcto.

Subclones

TTATGCCA
AATACGGT , Se ensambla la secuencia final
Cóntigo reuniendo las secuencias de los
♦ ♦ ♦

Gen A Gen 8 Gen C

-- Gen D
- ATGCCTGGCTTATGCCA
ACGGACCGAATACGGT
clones grandes y rellenando
cualquier hiato.

SECUENCIACIÓN BASADA EN MAPAS En la secuenciación basada
en mapas, se ensamblan fragmentos cortos secuenciados en una
secuencia del genoma completo creando primero mapas genéti-
cos y físicos detallados del genoina, lo que proporciona localiza-
ciones conocidas de marcadores genéticos (sitios de restricción,
otros genes o secuencias de DNA conocidas) a intervalos espacia-
dos de manera regular a lo largo de cada cromosoma. Más tarde,
estos marcadores se utilizan para ayudar a alinear los fragmentos
cortos secuenciados en el orden correcto.
Una vez obtenidos los mapas genéticos y físicos, los cromoso-
mas o fragmentos cromosómi.cos grandes se separan mediante
electroforesis en gel de can1po pulsado (PFGE, pulsed-field gel
electrophoresis) o por citometría de flujo. La electroforesis en
gel convencional no puede separar fragmentos muy grandes de
DNA, co1no cromosomas completos, pero la PFGE permite sepa-
rar 1noléculas grandes de DNA o cromosomas completos en un
gel alternando en forma periódica la orientación de una corriente
eléctrica. En la citometría de flujo, los cromosomas se clasifican
ópticamente por tamaño.
Luego, se corta cada cro1nosoma (o, en ocasiones, todo el geno-
ma) por digestión parcial con enzimas de restricción (fig. 20-6).
D igestión parcial significa que se permite que las enzi1nas de res-
tricción actúen solo durante un tipo lin1itado, de n1anera que se
cortan no todos los sitios de restricción de cada molécula de DNA.
Por lo tanto, la digestión parcial produce un conjunto de fragmen-
tos de DNA grandes, solapados, que después son clonados 1ne-
diante la utilización de cósmidos, cromoso1nas a1tificiales de
levadura (YAC) o cromosomas artificiales bacterianos (BAC;
véase cap. 19).
A continuación, estos clones de insertos grandes se reúnen en
el orden con·ecto en el cromosoma (véase fig. 20-6). Este ensam-
blaje puede realizarse de varias n1aneras. Un método se basa en la
presencia de un mapa de alta densidad de marcadores genéticos.
Se crea una sonda de DNA complementario para cada marcador
genético y se investiga una genoteca de los clones de insertos
grandes con la sonda, que se hibridará a cualquier colonia que
contenga un clon con el marcador. Luego, se buscan en la geno-
teca los marcadores vecinos. Como los clones son mucho más
grandes que los marcadores usados como sondas, algunos clones
tendrán más de un marcador. Por ejemplo, el clon A podría tener
los marcadores Ml y M2; el clon B, los marcadores M2, M3 y
M4; el clon C, los marcadores M4 y M5. Un resultado de este tipo
indicaría que los clones tienen áreas de solapamiento, como las
aquí mostradas:
M1 M2 M4 MS
ClonA Clon C
M2 M3 M4
Clon B
M1 M2 M3 M4 MS
Cóntigo ......::=l-~~L-ll----1._ __¡__..=::r:=.~~~
Un conjunto de dos o más fragmentos de DNA solapados que for-
man un segmento continuo de DNA se denomina cóntigo. En
1993, se adoptó este enfoque para crear un cóntigo formado por
196 clones solapados de YAC (véase fig. 20-3) del cromosoma Y
humano.
Asimismo, el orden de los clones puede determinarse sin el uso
de mapas genéticos preexistentes. Por ejemplo, es posible cortar
cada clon con una serie de enzimas de restricción y, después,
 Genómica y proteómica 585

separar los fragmentos resultantes por electroforesis en gel. Este
método genera un conjunto único de fragmentos de restricción,
denominado huella genética, para cada clon. Los patrones de res-
tricción de los clones se almacenan en una base de datos. Luego,
se utiliza un progran1a inforn1ático para examinar los patrones de
restricción de todos los clones y buscar áreas de solapamiento.
Después, el solapamiento se utiliza para ordenar los clones, como
se muestra a continuación:
Sitios de restricción
ClonA
i
Clon C ,.....,....-==-
Clon B
Cóntigo
Pueden emplearse otros marcadores genéticos para ayudar a ubi-
car los cóntigos a lo largo del cromoso1na. i:.•~~~~2::~~!...I
PROBLEMA 27
Cuando se han ensamblado los clones de gr andes insertos en
el orden correcto en el cromoso1na, se puede elegir para se-
cuenciar un subconjunto de clo nes so lapados que cubran de
manera eficiente todo el cromosoma; el objetivo es seleccionar
el número mínimo de clones necesarios para representar al
cromosoma. Cada uno de los clones de grandes insertos selec-
cionado se fractura en fragmentos solapados m ás pequeños,
que son clonados (véase fig. 20-6). Se investiga el solapamien-
to en estos clones más pequeños (denominados clones de in -
sertos pequeño s), lo qu e permite ensamblarlos de manera
correcta para obtener la secuencia de los clones de grandes
insertos. Por lo general, se secuencian suficientes clones de
insertos pequeños solapados para garantizar que todo el geno-
ma sea secuenciado varias veces. Por últiino, se ensambla el
genoma comp leto reuniendo las secuencias de todos los cón ti-
gos solapados (véase fig. 20-6). A m.e nudo, aun así existen hia-
tos en el m apa del genoma que deben llenarse aplicando otros
métodos.
El Consorcio Internacional de Secuenciación del Genoma Hu-
mano recurrió a un enfoque sunilar basado en 1napas para secuen-
ciar el genoma huLnano. Se cortaron numerosas copias del geno-
ma humano en fragmentos de alrededor de 150 000 pb cada uno,
que se insertaron en cromosomas artificiales bacterianos. En las
primeras etapas del proyecto, se habían utilizado cromosomas
artificiales de levadura y cósmidos, pero de hecho no resultaron
tan estables como los clones de BAC, aunque los clones de YAC
rigiría una com pañía llamada CeJera Genomics en un proyecto
privado para secuenciar el genoma humano. Propuso utilizar una
enfoque de secuenciación por fragmentos escogidos al azar, que
sugirió sería más rápido que el enfoque basado en mapas emplea-
do por el Consorcio Internacional de Secuenciación del Genon1a
Humano. En la secuenciación del genoma completo por frag-
mentos escogidos al azar (fig. 20-7), se preparan clones de inser-
to pequeño directamente a partir del DNA genómico y se los
secuencia. Después, poderosos programas informáticos ensam-
blan el genoma completo examinando el solapamiento entre los
clones de inserto pequeño. Una ventaj a de la secuenciación por
fragn1entos escogidos al azar es que los clones de inserto peque-
ño pueden colocarse en el interior de pJásmidos, que son simples
y fác iles de manipular. El requerimiento de solapan1 iento in1plica
que la mayor parte del genoma será secuenciada múltiples veces
(a menudo, de 10 a 15 veces). E l número promedio de veces que
se secuencia un nucleótido del genoma se denonuna cobertura de
secuenciación. Por ejemplo, cobertura 10x significa que un nucle-
ótido promedio del genoma se ha secuenciado 10 veces.
En un principio, la secuenciación por fragmentos escogidos al
azar se usaba para ensamblar genomas pequeños, como los de las
bacterias. Cuando Venter propuso utilizar este enfoque para se-
cuenciar el genoma humano, no estaba del todo claro si el enfo-
que podría ensainblar con éxito un genoma complejo formado por
miles de 1nillones de pares de bases, como el genoma humano.
Hoy en día, casi todos los geno1nas se secuencian aplicando el
enfoque de secuenciación del genoma completo por fragmentos
escogidos al azar.
DNA genómico
El DNA genómico se
corta en numerosos
fragmentos pequeños
superpuestos, que son
clonados en bacterias.
Se secuencia
cada fragmento.
TACCACGGGGA ,
Se utiliza el solapamiento
de la secuencia para
ordenar los clones, ...
TACCACGGGGA
1 1
'' GGGACGATCCT
1'

fueron útiles para reunir algunos de los cóntigos más grandes. Se ''
' ' CCTGCG AGAC
utili zaron huellas genéticas de restiicción para ensamblar los clo- • ... y se ensambla todo el
nes de BAC en cóntigos, que se posicionaron en los cromosomas genoma mediante poderosos 1

!I
programas informáticos. GACGTG TCAA
1nediante el uso de marcadores genéticos y sondas. Los clones de
BAC individuales se cortaron en frag1nentos solapados 1nás pe-
queños y se secuenciaron, y se ensambló en geno1na completo TACCACGGGGACGATCCTGCGAGACGTGTCAA
juntando la secuencia de los clones de BAC.
Figura 20-7. La secuenciación del genoma completo por fragmentos
SECUENCIACIÓN DEL GENOMA COMPLETO POR FRAGMENTOS ESCO- escogidos al azar (shotgun) utiliza secuencias solapadas para alinear
GIDOS Al AZAR (SHOTGUN) En 1998, Craig Venter anunció que di- los fragmentos.
586 CAP[TULO 20
CONCEPTOS
La secuenciación de un genoma exige romperlo en pequeños frag-
mentos solapados a partir de los cuales es posible determinar las
secuencias de DNA en una reacción de secuenciación. En una secuen-
ciación basada en mapas, los fragmentos secuenciados se ordenan
para formar la secuencia final del genoma con el uso de mapas gené-
ticos y físicos. En la secuenciación del genoma completo por fragmen-
tos escogidos al azar, el genoma se ensambla comparando el solapa-
miento de las secuencias de pequeños fragmentos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
Un cóntigo es
a. un conjunto de marcadores moleculares usados en el mapeo
genético,
b. un conjunto de fragmentos solapados que forman un tramo con-
tinuo de DNA,
c. un conjunto de fragmentos generado por una enzima de restric-
ción,
d. un pequeño fragmento de DNA usado en la secuenciación.
RESULTADOS E IMPLICACIONES DEL PROYECTO GENOMA HUMANO
Durante el verano de 2000, los proyectos de secuenciación tanto
público como privado anunciaron la finalización de un borrador
que incluía la mayor parte de la secuencia del genoma humano, 5
años antes de lo planificado. La secuencia del genoma hu1nano se
declaró completa en la primavera de 2003, aunque todavía per sis-
ten algunos hiatos. Para la 1nayoría de los cromoso1nas, la secuen-
cia finali zada es 99,999% exacta, lo que equivale a menos de un
error de pares de bases por 100 000 pb, una tasa de precisión 1O
veces mayor que lo estipulado como objetivo inicial.
Una vez determinado el p1imer genon1a humano, la secuencia-
ción de otros geno1nas es mucho más fácil. Ahora es posible se-
cuenciar un genoma hu1nano completo en un solo día y, en la
actuali dad, se han secuenciado genomas de miles de personas
diferentes. El costo de secuenciar un genoma humano completo
también ha descendido de manera sustancial y continuará hacién-
dolo a medida que mejore la tecnología de secuenciación. Una
serie de compañías co1nerciales están compitiendo para desarro-
llar tecnología que permita secuenciar un genoma hu1nano co1n-
pleto por 1000 dólares o m.e nos.
El conoci miento de la secuencia completa del genoma humano
está probando ser muy beneficioso. La secuencia ha suministrado
herramientas para detectar y mapear variantes genéticas en todo
el genoma humano, lo que facilita 111ucho el mapeo génico en
seres humanos. Por ejemplo, ahora se han identificado varios mi-
llones de sitios en los que las personas d ifieren en un solo nucleó-
tido (denominados polimorfismos de nucleótido único; véase
siguiente sección), y estos sitios se están utilizando en estudios de
asociación en todo el genoma para localizar genes que inciden en
enferrned ades y rasgos de seres humanos. Asünismo, la secuencia
está apo1tando información unportante sobre el desarrollo y sobre
n1uchos procesos celulares básicos.
Se están utilizando técnicas de secuenciación de próxima gene-
ración que permiten la secuenciación rápida y económica de
DNA genómico (véase cap. 19) para encarar interrogantes funda-
mentales en numerosas áreas, Por ejemplo, ahora se han secuen-
ciado por completo los genomas de una serie de células cancero-
sas y se los ha comparado con las secuencias de células sanas de
la misma persona, lo que permite la determinación completa de to-
das las mutaciones que inducen for111ación de tumores y progre-
sión del cáncer. Hace poco, se secuenció el genoma con1pleto de
un bebé no nato a partir de DNA fetal aislado de sangre de lama-
dre. El Proyecto 1000 Geno1nas está secuenciando y compar ando
los genomas de varios miles de personas de diferentes grupos
étnicos con el objetivo de detectar la mayor parte de las variacio-
nes frecuentes que existen en la especie humana. La secuencia-
ción de los genon1as completos de padres e hijos ha permitido una
estimación directa de las tasas de 1nutación.
Se ha extraído DNA de los huesos de seres humanos de la anti-
güedad, como neandertales y deni sovanos (un grupo poco cono-
cido de seres humanos que parece estar estrechamente relaciona-
do con los neandertales), y se lo ha secuenciado por completo.
Las comparaciones del genon1a hu1nano moderno con estas y
otras especies se están sumando a nuestra comprensión de la evo-
lución humana, así como a nuestro conoci miento de la evolución
y la historia de la vida.
Pese a estos beneficios y éxitos, algunas personas se han de-
salentado por la ausencia de resultados tangibles del Proyecto
Genoma Humano. Cuando fue propuesto, se especuló que la se-
cuenciación del genoma hu1nano revolucionaría de inrnediato la
práctica de la medicina y que aportaría nuevos conocimientos
para tratar enfermedades comunes e induciría eJ desarrollo de
nuevos fármacos potentes. Si bien los datos sobre la secuencia
genómica han producido nuevos e interesantes hallazgos de
investigación y han per1nitido conocer mejor 1nuchas enfermeda-
des, los médicos en ejercicio aún utilizan pocas veces esta infor-
mación en el tratamiento de pacientes. Sin duda, la información
genómica será importante para la medicina en el futuro, tanto
para aj ustar el tratamiento a pacientes individuales (medicina per-
sonalizada) como para el descubrimiento de fármacos, pero por
ahora no se sabe con certeza cuándo tendrá lugar esto.
Junto con los numerosos beneficios potenciales de tener infor-
mación sobre la secuencia con1pleta, hay preocupaciones acerca
de su posible uso indebido. Gracias al conocüniento obtenido con
la secuenciación genómica, se identificarán muchos más genes de
enfermedades, trastornos y rasgos físicos y conductuales, lo que
puede utilizarse para efectuar predicciones acerca del futuro feno-
tipo y salud de una persona. Existe la preocupación de que las
pruebas genéticas puedan emplearse para discriminar a personas
portadoras de genes que causan enfermedades o que podrían estar
expuestas a alguna enfermedad futura. En los Estados Unidos, se
ha considerado en alguna medida esta cuestión con la promulga-
ción de la Genetic Information Nondiscrimination Act (Ley de no
disc1inúnación en función de la información genética) (véase
cap. 6), que proluoe a las aseguradoras de salud y a los emplea-
dores utilizar información genética para tomar decisiones acerca
de la cobertura del seguro de salud y el empleo (aunque no es
aplicable para seguros de vida, discapacidad y atención a largo
plazo). También surgen interrogantes sobre quién debe tener
acceso a la secuencia del genoma de una persona. ¿ Qué sucede
con los familiares, que tienen genomas similares, y trunbién
podrían estar expuestos al riesgo de algunas de las mismas enfer-
medades? Asimismo, hay preguntas acerca del empleo de esta
información para seleccionar rasgos específicos en Ja descenden-
cia futura. Todas estas preocupaciones son legítünas y deben con-

siderarse si la información de la secuenciación del genoma va a
utilizarse de mane ra respon sable.
CONCEPTOS
El Proyecto Genoma Humano fue un esfuerzo para secuenciar todo el
genoma humano. Los dos equipos que competían finalizaron un
borrador de la secuencia en 2000. Toda la secuencia se completó en
2003. La capacidad de secuenciar rápidamente genomas humanos
plantea una serie de cuestiones éticas.
Polimorfismos
, .
de nucleótido
un1co
Desde que finalizó la secuenciación del genoma hu1nano, los
secuenciadores han centrado gran parte de su esfuerzo en mapear
diferencias de las secuencias genóm.icas entre personas.
Imagine que está viajando en un ascensor con un extraño.
¿Cuánto de su genoma tiene en común con esta persona? Estudios
sobre la vaii ación del genoma humano i ndican que usted y el
extraño serán idénticos en alrededor del 99,9% de sus secuencias
de DNA. La diferencia entre usted y el extraño es muy pequeña
en ténninos relativos, pero como el genoma humano es tan gran-
de (3200 mi lJones de pares de bases), usted y el extraño tendrán
más de 3 millones de pares de bases diferentes e n su DNA genó-
mico. Estas diferencias son las que nos hacen únicos e influyen
mucho en nuestras características físicas, nuestra salud y, quizá,
incluso en nuestra inteligencia y personalidad.
Un sitio del genon1a e n el que nüen1bros individuales de una
especie difieren en un solo pai· de bases se denomi na poli morfis-
mo de nucleótido único (SNP). Los SNP, que se originan por
mutación , se heredan como va1iantes alélicas (como los alelos
que producen diferencias fenotípicas, por ej emplo los grupos de
sangre), aunque en general los SNP no causan una diferencia fe-
notípica. Los polimorfismos de nucleótido único son numerosos
y están presentes en todos los genomas. E n una comparación del
mismo cromosoma de dos personas diferentes, puede hallarse un
SNP aproximadamente cada 1000 pb.
HAPLOTIPOS y DESEQUILIBRIO DE LIGAMIENTO La mayoría de los
SNP presentes dentro de una población surgieron alguna vez por
una mutación ais lada que se produjo en un cromosoma particular
y después se diseminó por toda la población. Por consiguiente,
cada SNP se asocia inicialmente con otros SNP (así como con
otros tipos de variantes genéticas o alelos) que estaban presentes
en el cromoso1na particular en el que se originó la mutación. El
conjunto específico de SNP y otras variantes genéticas observa-
das en un solo cro1nosoma o parte de un cromosoma se denomi-
na haplotipo (tig. 20-8). Los SNP dentro de un baplotipo están
físicamente ligados y, por lo tanto, tienden a heredarse juntos.
Pueden surgir nuevos haplotipos por mutación o entrecn1zamien-
to, que ro1npe el conjunto particular de SNP de un haplotipo.
Como la tasa de entrecruzanüento es proporcional a las distancias
físicas entre los genes, los SNP y otras variantes genéticas que se
localizan cerca en el cromosoma estarán asociadas con firn1eza
como haplotipos. La asociación no aleatoria entre variantes gené-
ticas dentro de un haplotipo se denomina desequilibrio de liga-
Genómica y proteómica 587
Los cromosomas son idénticos para la La variación de una sola
mayor parte de las secuencias de DNA. base constituye cada SNP.
Cromosoma
1a
l SNP SNP SNP
: a b l ~~
1b
1e
1d
Haplotipo
a e G G
b C A A
e T G A
d C G A
Cada haplotipo está formado por un
conjunto particular de alelos en cada SNP.
Figura 20-8. Un haplotipo es un conjunto específico de SNP y otras
variantes genéticas observadas en un cromosoma individual o parte
de un cromosoma. Los cromosomas 1a, 1b, 1c y 1d representan diferen-
tes copias de un cromosoma que podrían hallarse en una población.
miento. Como los SNP de un haplotipo se heredan juntos, un
haplotipo que consiste en miles de SNP puede identificarse con la
utilización de solo unos pocos SNP. Los pocos SNP empleados
para identificar un haplotipo se denominan SNP etiqueta. Hay
alrededor de 10 millones de SNP en la población humana pero,
debido al desequilibrio de ligamiento, estos SNP están presentes
en un número mucho más pequeño de haplotipos. Por lo tanto, es
posible utilizar una cantidad relativamente pequeña de SNP
-quizá solo 100 000- par a ide ntificar la mayoría de los haplotipos
de seres humanos.
uso DE POLIMORFISMOS DE NUCLEÓTIDO ÚNICO Dada su variabi-
lidad y presencia generalizada e n todo el genoma, los SNP son
valiosos corno marcadores en estudios de ligamiento. Cuando un
SNP está físicamente cerca de un locus causante de enfermedad,
tenderá a ser heredado junto con el alelo que la causa. Las perso-
nas con la enfermedad tenderán a tener SNP diferentes de los de
las personas sanas. Una comparación de haplotipos de SNP en
personas con una enfermedad y personas sanas puede revelar la
presencia de genes que influyen en la enfermedad; como el gen
de la enfermedad y el SNP están estrechamente ligados, la locali-
zación del gen causante puede determinarse a partir de la loca-
lización de los SNP asociados. Este enfoque es el nrismo que se
aplica en el mapeo génico con RFLP (véase cap. 19), pero hay
muchos más SNP que RFLP, lo que proporciona un denso conjun-
to de mai·cadores genéticos que cubren todo el genoma y permite
que se los utilice de manera más eficaz en el mapeo.
En 2002 se inició un proyecto internacional, denominado In-
ternational H apMap Project (Proyecto Internacional de Mapa de
H aplotipos), con el objetivo de catalogai· y mapear SNP y otras
variantes genéticas que podrían utilizarse para identificar haploti-
pos comunes en poblaciones humanas con el fin de usarlos en
estudios de ligamiento y familiares. La fase I del proyecto, finali-
zada en 2005, catalogó más de 1 millón de SNP en los genomas
588 CAP[TULO 20
de 269 personas de cuatro poblaciones hum.a nas distintas (africa-
na, japonesa, china y europea). Estos SNP se extienden por los 23
cromosomas humanos a una distancia de alrededor de un SNP por
5000 pb. La fase II del proyecto, finalizada en 2006, catalogó un
total de 4,6 nlillones de SNP.
Los alelos de la n1ayoría de los SNP se encuentran en los cua-
tro grupos étnicos hu1nanos, aunque las frecuencias de los alelos
varían en forma considerable entre las poblaciones humanas. La
mayor diversidad genética de SNP se observa en los africanos, lo
que es consistente con muchos otros estudios que sugieren
, que los
seres humanos evolucionaron por prunera vez en Africa.
Los datos del HapMap Project han aportado información im-
portante acerca de la función y la evolución del genoma hu1nano.
Por ejemplo, estudios de desequilibrio de ligamiento con la utili-
zación de SNP han determinado que la recombinación no tiene
lugar de manera aleatoria en los cromosomas: hay numerosos
puntos calientes de recombinación, donde se produce más recom-
binación que la esperable solo por azar. La distribución de los
SNP también está proporcionando infonnación acerca de regio-
nes del genoma humano que han evolucionado rápidamente en el
pasado reciente, lo que aporta indicios respecto de cómo han res-
pondido los seres humanos a la selección natural.
ESTUDIOS DE ASOCIACIÓN EN TODO EL GENOMA Muchas enferme-
dades co1nunes son causadas por interacciones con1plejas entre
múltiples genes: el conocimiento de los SNP ha facilitado mucho
la búsqueda de estos genes. Los estudios de asociación en todo
el genoma utilizan numerosos SNP dispersos por el genoma para
hallar genes de interés. Poco después de la finalización de la fase
I del HapMap Project, los investigadores utilizaron los datos de
los SNP para llevar a cabo un estudio de asociación en todo el
geno1na para detectar la presencia de un impo11ante gen que causa
degeneración macular relacionada con la edad, una de las princi-
pales causas de ceguera en los ancianos. En este estudio, los
investigadores genotipificaron a 96 personas con degeneración
macular y 50 personas con ojos sanos para n1ás de los 100 000
SNP que cubrían el genoma. El estudio reveló una firme asocia-
ción entre la enfennedad y un gen del cron1osoma l que codifica
el fac tor H del complemento, que interviene en la función inmu-
nitaria. Este hallazgo sugiere que la degeneración macular podría
tratarse con fármacos que afecten las proteínas del co1nplemento.
Otro estudio reveló otro gen in1portante asociado con la enferme-
dad de Crohn, un trastorno inflamatorio común del tubo digesti-
vo. Otros estudios que recurren a barridos de SNP en todo el
genoma han detectado genes que contribuyen a la patología car-
díaca, la densidad ósea, el cáncer de próstata y la diabetes.
En una aplicación exitosa de los SNP para hallar asociaciones
con enfermedades, los investigadores genotipificaron 500 000
SNP en 17 000 personas del Reino Unido en 2007. Detectaron
una firme asociación entre 24 genes y segmentos cro1nosó1nicos,
y la incidencia de siete enfermedades comunes, incluidas arterio-
patía coronaria, enfermedad de Crohn, artritis reumatoidea, tras-
torno bipolar, hipertensión y dos tipos de diabetes. La importan-
cia de este estudio es que demostró que los estudios de asociación
en todo el genoma utilizando SNP podían localizar de manera
exitosa genes que contribuyen a enfennedades complejas causa-
das por múltiples genes y factores ambientales.
Dentro de los últimos años, los SNP se han utilizado en estu-
dios de asociación en todo el genoma para localizar con éxito
genes que influyen en 111uchos otros rasgos, con10 edad de co-
mienzo de la pubertad y menopausia en las mujeres, variación de
las facciones, pig1nentación de la piel, color de ojos, peso corpo-
ral, densidad ósea, glaucoma e incluso susceptibilidad a enferme-
dades infecciosas, por eje1nplo enfermedad meningocócica y tu-
berculosis. Lamentablemente, a menudo los genes identificados
explican solo una pequeña proporción de la influencia genética
sobre el rasgo. Por ejemplo, un enorme estudio de asociación en
todo el genoma combinó datos de más de 100 000 sujetos huma-
nos en un intento de localizar genes que codificaban lípidos san-
guíneos y enfermedad cardiovascular. Si bien el estudio identifi-
có 95 locus diferentes asociados con rasgos lipídicos, estos genes
correspondieron solo al 25-30% de la variación genética total de
estos rasgos.
Hasta ahora, las secuencias de DNA que codifican la mayor
prute de la variación genética fa ltante en estos rasgos (denomin a-
das a veces la "materia oscura del genoma") han permanecido en
gran medida no detectadas. El bajo porcentaje de vaiiación expli-
cado por la mayoría de los estudios actuales de asociación en todo
el genoma sigrnfica que los genes identificados no son, en sí nlis-
mos, factores predictivos útiles del riesgo de heredru: la enferm.e-
dad o el rasgo. No obstante, la identificación de genes específicos
que influyen en una enfermedad o un rasgo pueden posibilitai· un
mejor conocilniento de los procesos biológicos que producen el
fenotipo.
Variaciones del número de copias
Una persona diploide suele tener dos copias de cada gen, uno
heredado de la madre y uno heredado del padre. No obstante, los
estudios del genoma humano han revelado diferencias entre las
personas en el número de copias de secuencias grandes de DNA
(de 1nás de 1000 pb), denominadas variaciones del nún1ero de
copias (VNC). Las variaciones del número de copias pueden
consistir en deleciones, que hacen que algunas personas tengan
una sola copia de una secuencia, o en duplicaciones, que determi-
nan que algunas personas tengan más de dos copias. Un estudio
de VNC en 270 personas de cuatro poblaciones (las estudiadas en
el HapMap Project) identificó una cantidad sorprendente de estos
tipos de va1iantes: más de 1447 regiones genón1icas variaron en
el número de copias, lo que abarcaba el 12% del genoma huma-
no. Pero este estudio solo investigó una pequeña parte del geno-
ma humano, por lo que las VNC detectadas son solo un pequeño
subgrupo de todas las que existen. Muchas de las VNC abarcaban
regiones grandes de la secuencia de DNA, a menudo de varios
cientos de nliles de pares de bases de longitud. Por consiguiente,
las personas no solo difieren en mi11ones de SNP individuales,
sino también en el número de copias de muchos segmentos más
grandes del genoma.
La mayoría de las VNC contienen 1núltiples genes y pueden
afectar el fenotipo al alterar la dosificación génica y cambiar la
posición de secuencias, lo que puede incidir en la regulación de
genes vecinos. De hecho, varios estudios hallaron asociaciones
entre VNC y enfermedad, e incluso entre VNC y variabilidad fe-
notípica normal en poblaciones humanas. Por ejen1plo, vai·iacio-
nes del número de copias del gen UGT2817 contribuyen a las
diferencias del 1netabolismo de la testosterona entre individuos e
influyen en el riesgo de cáncer de próstata. Las variaciones del
número de copias se han asociado con enfermedad de Crohn, ar-
tritis reumatoidea, psoriasis, esquizofrerna, autismo, diabetes y
discapacidad intelectual.

Sitios de secuencia etiquetada
Un sitio de secuencia etiquetada (STS, sequence-tagged site) es
una secuen cia corta (200-300 pb) de DNA, presente solo una vez
en el genoma, cuya localización cromosómica se ha detemunado.
A n1enudo, los STS se utilizan para de terminar la localización
genó1nica de un clon de DNA. Los investigadores han desa1i:-olla-
do cebadores de PCR para cada STS, lo que posibilita la amplifi-
cación del STS por PCR. De esta mane ra, es posible utilizar la
PCR para detectar la presencia de un STS en un conjunto de clo-
nes. Como se conoce la localización cromosó1nica del STS, su
presencia en un clon particular aporta información acerca del
lugar del genoma en que se originó ese clon.
O tro tipo de secuencia identificada es la etiqueta de secuencia
expresada (EST, expressed sequence tag). Estas son secuencias
correspondientes a DNA que se transcribe a mRNA. E n la m ayo-
ría de los organismos eucariontes, solo un pequeño porcentaje del
DNA codifica proteínas, por ej emplo en los seres humanos, ali·e-
dedor del 1,5% del DNA codifica proteínas. Si solo interesan los
genes que codifi can proteínas, sue le ser más eficiente examinar el
mRNA en lugar de toda ]a secue ncia de DNA genómico. Las eti-
quetas de secuencias expresadas se obtienen aislando RNA de
una célula y sometiéndola a transcripción inversa, lo que produce
un conj unto de fragmentos de cDNA que co1resp onden a m olécu-
las de RNA de la célula. Luego, se secuencian seg1nentos cor tos
desde los extre1nos de estos frag1nentos de cDNA, y la secuencia
obte nida (denomi nada etiqueta) proporcion a un marcador que
identifica el fragmento de DNA. Las etiquetas de secuencia
expresada pueden utilizarse para hallar genes activos en un tejido
particular o en un punto paiticular del desarrollo.
CONCEPTOS
Además de reunir datos de la secuencia genom1ca, los proyectos
genómicos están recolectando bases de datos de nucleótidos que
varían entre organismos individuales (polimorfismos de nucleótido
ún ico, SNP), variaciones del número de copias de secuencias (variacio-
nes del número de copias), secuencias únicas cuya localización cro-
mosómica ha sido mapeada (sitios de secuencias etiquetadas, STS) y
marcadores asociados con secuencias transcritas (etiquetas de se-
cuencias expresadas, EST).
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿Cuá l era el objetivo del HapMap Project?
Bioi nformática
En la actualidad, se ha determinado la secuencia del genon1a
completo de numerosos organismos, y se están llevando a cabo
muc hos otros proyectos. Estos estudios están generando tre1nen-
das cantidades de datos de secuencias. Catalogar, almacenar,
recuperar y ana lizar este enorme conj unto de datos representa
desafíos importantes para la genética moderna. La bioinformáti-
ca es un campo emergente que consiste en biología molecular y
Genómica y prot eómica 589
ciencia informática, que se centra en e l desarrollo de bases de
datos, algoritm os de búsqueda computarizada, software de pre-
dicción de genes y otras herramientas analíticas que se utilizan
para entender los datos de las secuencias de DNA , RNA y prote-
ínas. La bioinforn1ática desarrolla y aplica estas herramientas
para "minar los datos" y extraer la información útil de los proyec-
tos de secuenciación. La creación y la utilización de algoritrnos y
software informático para analizar los datos de secuencia de DNA
y proteínas han ayudado a convertir ]a biología molecular en un
campo más cuantitativo. L a información de secue ncias de las
bases de datos en línea disponibles públican1ente pernute que
científicos y estudiantes de todo el mundo accedan a este espec-
tacular recurso.
Se ha creado una serie de bases de datos para la recolección y
el aná li sis de infor mación sobre la secuencia de DNA y proteí-
n as . Las bases de datos primarias contienen la información de la
secuencia, junto con datos que describen la fuente de la secuen-
cia y su determinación . Las bases de datos secundarias contie-
ne n los resultados de análisis realizados c on los datos de
secuencia primari os, co mo info rmación acerca de p atrones de
secue ncia p articulares, variaciones, mutaciones y relaciones
evolutivas.
U na vez secuenciado un genoma, una de las primeras tareas
consiste en identificar genes potenciales dentro de la secuencia.
Lamentable1ne nte, no hay ninguna característica universal que
marq ue el comienzo y e l fi nal de un gen. La enorme cantidad de
DNA de un genoma y las complejidades de la estruc tura del gen
dificultan hallar genes dentro de la secuencia. Se han desarrolla-
do programas informáticos para buscar secuencias específicas de
DNA que se asocian con cie1tos genes. Hay dos enfoques genera-
les pai·a encontrar genes. El e nfoque ab initio barre la secuencia
buscando características que suelen esta r presentes dentro de un
gen. Por eje1nplo, los genes que codifican proteínas se caracteri-
zan por un marco de lectura abierta, que incluye un codón de ini-
ciación y un codón de terminación en el mismo marco de lectura.
Secuencias específicas marcan los sitios de corte y en1palme al
comienzo y al final de los intrones; existe n otras secuencias espe-
cíficas en los pro1notores local.izados inmediata1nente en sentido
5' respecto de los codones de iniciación. E l e nfoque comparativo
busca similitud entre una secuencia nueva y secuencias de todos
los genes conocidos. Si se detecta una coincidencia, se asume que
la nueva secuencia es un gen similar. Algunos de estos programas
informáticos son capaces de examinar bases de datos de EST y
secuencias de proteínas para hallar evidencia de expresión de un
posible gen.
Es importante destacar que los programas que se han desarro-
llado para ide ntificar genes sobre la base de la secuencia de DNA
no son perfectos. Por lo tanto, el número de genes reportado en la
mayo1ia de los proyectos sobre geno1nas son estimaciones. La
presencia de 1n últiples intrones, corte y empalme alternativo,
múlti ples copi as de algunos genes y gra n cantidad de DN A no
codificante e ntre los genes dific ulta la ide ntificac ión y el recuen-
to precisos de genes.
Tras haber identificado un gen , este debe ser anotado, lo que
significa re lacionar la información de su secuencia con otra infor-
mación acerca de su función y expresión, la proteína que codifica
y la información sobre genes similares de otras especies. Hay un a
se1ie de métodos para investigar la función de un gen, que se ana-
lizarán en la Sección 20.2 de genómica fun cional. Se dispone de
programas informáticos para determinar si ya se han hallado
590 CAP[TULO 20
secuencias similares, ya sea en la mis.ma especie o en especies
diferentes. El más usado de estos programas es Basic Local
Alignrnent Search Tool (BLAST, Herramienta de búsqueda de ali-
neación local básica). Para llevai- a cabo una búsqueda con
BLAST, el investigador remite una secuencia de búsqueda y el
progra1na investiga la base de datos para detectar cualquier otra
secuencia que presente regiones de alta similitud con ella. EJ pro-
grama devuelve todas las secuencias de Ia base de datos que son
similares, j unto con información respecto del grado de similitud
y la significación de la coincidencia (la probabilidad de que la
similitud se deba solo al azar).
Otras bases de datos contienen información sobre la diversidad
de secuencia, cómo y dónde varía un genoma entre organismos
individuales. Hoy en día se han mapeado millones de SNP en el ge-
noma hLtmano, y se está reuniendo información acerca de la fre-
cuencia de estas variantes en diferentes poblaciones. Se han creado
bases de datos adicionales para catalogar todas las mutaciones
conocidas que causan enfern1edades particulares; el Variome
Project tiene por objeto recolectar y dar a conocer todas las varia-
ciones genéticas que afectan la salud humana. Asin1ismo, se está
compilando información importante acerca de los patrones de
expresión de miles de genes. ~•~~!:!=!!:!!:!~:!i:!:!!!.!:!::!!~===~~!.J
CONCEPTOS
La bioinformática es un campo interdisciplinario que combina biolo-
gía molecu lar y ciencia informática. Desarrolla bases de datos de las
secuencias de DNA y proteínas, y herra mientas pa ra anal izar esas
secuencias.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
El enfoque ab initio halla genes mediante la búsqueda de
a. secuencias comunes hall adas en la mayoría de los genes,
b. simil itud de secuencia con genes conocidos,
c. mRNA con el uso de hibridación in situ,
d. fenotipos mutantes.
Metagenómica
Los avances en tecnología de secuenciación, que ha tornado la
secuenciación más rápida y menos costosa, ofrecen ahora la posi-
bilidad de secuenciar no solo los geno1nas de especies individua-
les, sino los genomas de co1nunidades enteras de organismos. La
metagenómica es un campo emergente en el que se muestrean y
determinan las secuencias de genomas de todo un grupo de orga-
nismos que habitan un ambiente común.
Hasta ahora, la n1etagenómica se ha aplicado en gran n1edida a
comunidades microbianas. Tradicionalmente, las bacterias se han
estudiado mediante cultivo y análisis en el laboratorio. Sin embar-
go, muchas bacterias no pueden cultivarse con técnicas de labora-
torio. La metagenómica analiza comunidades microbianas extra-
yendo DNA del ambiente, determinando sus secuencias y recons-
truyendo la co1nposición y la fun ción de la comunidad sobre la
base de las secuencias genómicas. E sta técnica permite la identi-
ficación y el análisis genético de especies que no pueden crecer
en el laboratorio y que nunca han sido estudiadas por métodos
microbiológicos tradicionales. Se reconstruyeron los geno1nas
completos de algunas especies donlinantes a partir de muestras
ambientales, lo que aportó a los científico s una gran cantidad de
información sobre la biología de estos microbios.
Uno de los primeros estudios metagenómicos analizó la comu-
nidad microbiana hallada en el drenaje de ácido de una mina y
determinó que esta co1nunidad estaba formada solo por unas po-
cas especies bacterianas dominantes. Otro estudio, denominado
Global Ocean. Sampling Expedition (Expedición de muestreo glo-
bal del océano), sigui ó la ruta del viaje de Darwi n en el HMS
Beagle en el siglo XIX. Los científicos recolectaron muestras del
océano y emplearon métodos metagenómicos para determinar sus
comu1údades 1nicrobianas. En este estudio, los científicos catalo-
garon las secuencias de más de 6 1nillones de proteínas, incluidas
más de 1700 famflias proteicas nuevas. Ya han aparecido al gunos
resultados importantes de estudios metagenómicos. Los análisis
de genomas bacterianos hallados en muestras oceánicas llevaron
a descubrir proteínas proteortodopsina, que son bombas de proto-
nes dirigidas por luz . La investigación ulterior demostró que estas
protemas se hallan en diversos grupos microbianos y que son una
fuente impo1tante de fluj o de energía en los océanos del mundo.
Otros estudios metagenómicos han examinado los genes de las
bacterias que habitan en el intestino humano. Estas bacterias,
junto con las que habitan en la piel y otras partes del cuerpo hu-
mano , se denominan microbioma humano. El microbioma de
una persona típica incluye m ás de 100 trillones de células (lo que
decuplica la can tidad de células humanas) y contiene una canti-
dad 100 veces mayor de genes qu e el geno ma humano.
La investigación está demostrando que el microbioma humano
desempeña un papel importante en la salud humana. Un estudio
exanúnó la microflora intestinal de personas obesas y delgadas.
Dos grupos de bacterias son comunes en el intestino hun1ano:
Bacteroidetes y Finn icutes. Los investigadores descubrieron que
las personas obesas tienen un número relativamente mayor de
Firmicutes que las delgadas, y que la proporción de Firmicutes
disminuye en personas obesas que bajan de peso con una dieta
hipocalórica. Se observaron estos mismos resultados en ratones
obesos y delgados. En un experirn ento n1uy bien diseñado, los
investigadores transfirieron bacterias de ratones obesos a delga-
dos. Los que recibieron bacterias de ratones obesos extrajeron
más calorías de sus alimentos y almacenaron más grasa, lo que
sugirió que la microflora intestinal podría desempeñar algún
papel en la obesidad.
Tradicionalmente, las co1nunidades ecológicas se han caracteri-
zado sobre la base de las especies que contienen. La metagenómi-
ca ofrece la posibilidad de caracteri zar las comunidades en fun-
ción de sus genes componentes, un enfoque denominado geno-
céntrico. Un enfoque genocéntrico plantea nuevos inte1Togantes.
¿Son ciertos tipos de genes más frecuentes en algunas comunida-
des que en otras? ¿Hay algunos genes esenciales para el fluj o de
energía y el reciclado de nutrientes dentro de una comunidad?
Dado el tamaño más grande de sus genomas, las comunidades
eucariontes todavía no han sido el foco de estos enfoques, pero
muchos investigadores predicen que lo serán en el futuro.

CONCEPTOS
Los estudios de metagenómica examinan los genomas de comunida-
des de organismos que habitan en un ambiente común. Este enfoque
se ha aplicado a comunidades microbianas y permite determinar su
composición genética sin cultivar ni aislar especies individuales. Los
estudios metagenómicos son una fuente de nuevos conocimientos
importantes sobre comunidades microbianas.
Biología sintética
La capacidad de secuenciar y estudiar genomas completos, unida
a una mayor comprensión de la info1mación genética requerida
para procesos biológicos básicos, ofrece ahora la posibilidad de
crear -por entero a partir de cero- nuevos organis1nos que nunca
han existido antes. L a biología sintética es un nuevo campo que
busca diseñar organismos que podrían cumplir funciones útiles,
como microbios que proporcionen energía limpia o degraden
desechos tóxicos.
Los biólogos sintéticos ya han mezclado y compatibilizado par-
tes de diferentes organis1nos para sintetizar microbios. En 2002,
los genetistas recrearon e.l poliovirus uniendo frag1nentos de
DNA sintetizados en el laboratorio. Más impresionante todavía,
en 2010, Daniel Gibson y cols. sintetizaron a partir de cero el
genoma completo de 1,08 millones de pares de bases de la bacte-
1ia Mycoplasma mycoides. Comenzaron con mil fragmentos de
DNA sintetizados en el laboratorio y los unieron en fragmentos
cada vez más grandes hasta que ensamblaron una copia con1pleta
del genoma. Dentro de su genoma sintético, insertaron un conjun-
to de secuencias de DNA que permitían deletrear (en código) una
dirección de correo electrónico, los nombres de los investigado-
res que habían participado en el proyecto y varias citas bien cono-
cidas. Por último, los investigadores trasplantaron el genoma arti-
fi cial a una célula de una especie bacteriana diferente, M. capri-
colu,n, cuyo genoma original había sido eliminado. Luego, la
nueva célula comenzó a expresar los rasgos especificados por el
. , .
genoma smtettco.
Asimismo, la biología sintética se ha extendido a las células
eucariontes. En 2011 , los genetistas ree1nplazaron 90 000 pb de
DNA del cron1oso1na 9 de levadura y 30 000 pb del cro1nosoma 6
de levadura por DNA sintético. Estas célu las de levadura par-
cialmente sintéticas crecieron con normalidad y solo mostra-
ron diferencias menores de expresión génica. El objetivo final
de estos experimentos es reemplazar todo el geno1na de 12
millones de pb de la levadura por secuencias diseñadas por
hun1anos.
Estos tipos de experi1nentos han planteado una serie de preocu-
paciones. La posibilidad de crear nuevos genon1as a medida y de
mezclar y compatibilizar partes de diferentes organismos da la
oportunidad de sintetizar 1nicrobios peligrosos que podrían gene-
rar estrago ecológico al escapar del laboratorio o que podrían uti-
lizarse coro.o armas biológicas o para el bioterroris1no. Hay discu-
siones en curso entre genetistas en las que se están considerando
estas preocupaciones, así como la posibilidad de crear y usar de
manera segura genomas sintéticos.
Genómica y proteómica 591
20.2 La genómica funcional determina
la función de los genes aplicando enfoques
basados en el genoma
En sí misn1a, una secuencia es de utilidad limitada. El n1ero cono-
cimiento de la secuencia sería como contar con un enorme con-
junto de enciclopedias sin ser capaz de leerlas: usted podría reco-
nocer las diferentes letras, pero el texto carecería de significado.
La genómica funcional caracteriza lo que lleva a cabo la secuen-
cia: su función. Los objetivos de la genómica funcional son la
identificación de todas las moléculas de RNA transcritas de un
genoma, denominadas el transcriptoma de ese genoma, y todas
las proteínas codificadas por el genoma, denominadas el proteo-
ma. La genómica funcional recurre tanto a la bioinformática
como a enfoques experimentales de laborato1io en su búsqueda
para definir la función de las secuencias de DNA.
El capítulo 19 consideró varios métodos para identificar genes
y evaluar sus funciones, como hibridación in situ, n1utagénesis
expe1imental y utilización de animales transgénicos y con desac-
tivación génica. Estos métodos pueden aplicarse a genes indivi-
duales y aportar información importante. En esta sección, nos
centraremos principalmente en métodos basados en el conoci-
miento de las secuencias de otros genes o en aquellos que pueden
aplicarse de 1nanera simultánea a grandes nún1eros de genes.
Predicción de la función a partir
de la secuencia
La secuencia nucleotídica de un gen puede utilizarse para prede-
cir la secuencia de a1ninoácidos de la proteína que codifica.
Luego, es posible sintetizar o aislar Ja proteína y estudiar sus pro-
piedades para determinar su función. Sin embargo, este enfoque
bioquímico para conocer la función de los genes insume tiempo y
es costoso. Un objetivo importante de la genónúca funcional ha
sido desarrollar métodos informáticos para permitir identificar la
función de genes a partir de la secuencia de DNA sola, lo que
evita el proceso laborioso de ai slar y caracterizar proteínas indi-
viduales.
BÚSQUEDA DE HOMOLOGIA Un método informático (a menudo el
empleado en primer lugar) para determinar la función de genes es
realizar una búsqueda de ho1nología, que se basa en con1paracio-
nes de las secuencias de DNA y proteín as del mism.o organismo
y de diferentes. Se dice que los genes evolutivamente relaciona-
dos son homólogos. Los genes homólogos hallados en diversas
especies que evolucionaron a partir del mismo gen de un ancestro
común se denominan ortólogos (fig. 20-9). Por ejemplo , los
genomas del ratón y del ser humano contienen un gen que codifi-
ca la subunidad alfa de la hemoglobina; se dice que los genes de
alfa-he.m oglobina humana y de ratón son ortólogos porque ambos
genes evolucionaron a partir de un gen de alfa-hemoglobina de un
ancestro con1ún mamífero. Los genes homólogos del n1isn10
organisn10 (que se originan por duplicación de un solo gen en el
pasado evolutivo) se denominan parálogos (véase fig. 20-9).
Dentro del genoma humano, hay un gen que codifica la subuni-
dad alfa de hemoglobina y otro gen, homólogo, que codifica la
subu nidad beta de la hemoglobina. Estos parálogos aparecieron
porque un gen ancestral presentó duplicación, y los dos genes
592 CAP[TULO 20

busca de secuencias particulares. Suponga que un genetista se-

cuencia un geno1na y locali za un gen que codifica una proteín a
de función desconocida. Una búsqueda de homología llevada a
A cabo en bases de datos que contienen las secuencias de DNA o
---■ proteínas de otros organismos puede identificar una o más
l secuencias ortólogas. Si se conoce una función de una proteína
Duplicación del gen codificada por una de estas secuencias, esto podría aportar
+ información sobre la función de la proteína recién descubierta.
En ocasiones, las búsquedas no detectan genes homólogos; en

--·--~
ese caso, los investigadores pueden buscar partes de un gen que
sean sin1ilares a partes de otros genes con función conocida.

---• A

Evolución
.
A
DOMINIOS PROTEICOS A menudo, las proteínas complejas contie-
nen regiones que tienen formas o funciones específicas, denomi-
nadas dominios proteicos. Por ejemplo, ciertas proteínas de
unión a DNA se unen a este de la misma 1nanera; estas proteínas
tienen un dominio común que les confiere la función de unión al
DNA. Cada dominio proteico tiene una disposición de a1ninoáci-
A1 A2 dos común a ese dominio. Es probable que haya un número limi-
•• tado, aunque grande, de dominios proteicos que se han mezclado
y han compatibilizado a través de la evolución para determinar la
[Especiación diversidad proteica observada en los organismos actuales.
1 Se han caracterizado muchos dominios proteicos, así como sus
funciones 1noleculares. La secuencia de un gen recién identifica-
do puede compararse con una base de datos de do1ninios conoci-
dos. Si la secuencia del gen codifica uno o más dominios cuyas
funciones ya se han determinado, la función del dominio puede
aportar información impo1tante acerca de una posible función del
A2 A2 nuevo gen .
•• ••
Al Al

! Evolución
CONCEPTOS
.

. ..
'
-~
~ _, ...
•• •••
••• •
' En ocasiones, es posible determinar la función de un gen desconoci-
do al hallar genes con una secuencia similar cuya función se conoce .
~
La función de un gen también puede determinarse identificando
Al A2 81 B2
••
Conclusión: Los genes A 1 y A2 son parálogos.
dominios funcionales en la proteína que codifica .

Los genes B1 y B2 son parálogos.
Los genes A, y B1 son ortólogos.
Los genes A2 y B2 son o rtólogos.
Figura 20-9. Las secuencias homólogas están evolutivamente relacio-
nadas. Los genes ortólogos son genes homólogos hallados en diferentes
especies; los parálogos son genes homólogos de la misma especie.
resultantes divergieron durante la evolución para dar origen a los
genes de las subunidades alfa y beta (véase fig. 26-18). Los genes
homólogos (tanto ortólogos como parálogos) suelen tener la
1nisma función o funciones relacionadas, de manera que después
de asignar una función a un gen particular, esta puede aportar un
indicio sobre la función de un gen hon1ólogo.
Se dispone de bases de datos que contienen genes y proteínas
ha1lados en un amplio espectro de organismos para búsquedas de
homología. Se han desarrollado programas infonnáticos podero-
sos, por ejemplo BLAST, para barrer estas bases de datos en
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
¿ Cuál es la diferencia entre ortólogos y parálogos?
a. Los ortólogos son secuencias homólogas; los parálogos son
secuencia aná logas.
b. Los ortólogos son más similares que los parálogos.
c. Los ortólogos se encuentran en el mismo organismo; los parálo-
gos se encuentran en diferentes organismos.
d. Los ortólogos se encuentran en diferentes organismos; los parálo-
gos se encuentran en el mismo organismo.
Expresión de genes y micromatrices
Muchos indicios iJnportantes acerca de la función de los genes
provienen del momento y el lugar en que se expresan. La creación
de micromatlices ha permitido estudiar de manera simultánea la
expresión de miles de genes.
 Genómica y prot eómica 593

Las micromatrices se basan en la hibridación de ácidos
nucleicos (véase cap. 19), en la que se utiliza un fragmento de
DNA conocido como sonda para hallar secuencias complemen-
tarias (fig. 20-10). Se fijan numerosos fragmentos de DNA cono-
cidos a un soporte sólido con un patrón ordenado, o matriz, en
general co1no una serie de puntos. Estos frag1nentos de DNA (las
sondas) suelen con·esponder a genes conocidos de un organismo
particular.
U na vez construida la mi cromatri z, se marca eJ mRNA, DNA o
cDNA aislado de células experimentales con nucleótidos fluores-
centes y se lo aplica a la matriz. Cualquiera de las moléculas de
DNA o RNA que sea complementaria de las sondas de la matriz
se hibridará con ellas y en1itirá fluorescencia, que puede ser detec-
tada por un escáner automatizado. Una 111atriz con decenas de
tniles de sondas puede aplicarse a un portaobjetos de vidrio o a una
lámina de silicona de solo unos pocos centí1netros cuadrados.

Pregunta: ¿puede utilizarse la variación de la expresión génica, detectada por micromatrices,

para predecir la recurrencia del cáncer de mama?

Métodos M icromatriz con

- - - ~sondas de DNA
Una mi-
cromatriz 1.1
consiste en 1·111I• Cada punto consiste en una
~

Hibridación ~
sondas de 1 sonda de DNA diferente.
DNA fijadas 1 ·1
a un soporte
sólido, como
una membra- Células cDNA con
na de nailon o cancerosas RNA bases fluorescentes
un portaobje-
tos de vidrio. . - --
-
Células
no cancerosas
- -
.. --- -•111 ---1>-G
-o
-D
- --t)

Células cance- , El RNA .. .se convierte en Se mezclan ... y se hibridan a Se examina la micromatriz punto
rosas y no can- mensajero de cDNA y se marca con los cDNA ... sondas de DNA en por punto. La fluorescencia amarilla
cerosas extraídas las células .. . nucleótidos fluores- una micromatriz. (rojo + verde) indica igual expresión
de 78 mujeres con centes rojos (células del gen en ambos tipos de células;
cáncer de mamaJ cancerosas) o verdes j el rojo indica más expresión en
células cancerosas; y el verde, más 1
(células no cancerosas)
expresión en células no canceras~
...,
esultados Cada punto representa la expresión
de un gen en el tumor de una
paciente en comparación con la Los tumores por encima de la línea amarilla
expresión de ese gen en sus ~ continua provinieron principalmente de
células no cancerosas. pacientes que permanecieron sin cáncer
durante no menos de 5 años.

Los tumores por debajo de la línea amarilla

-
~ continua provinieron de pacientes cuyo
cáncer se diseminó dentro de los 5 años
del d iagnóstico.

Conclusión: se identificaron 70 genes cuyos patrones de expresión predijeron con exactitud la recurrencia del cáncer
de mama dentro de los 5 años de tratamiento.

Figura 20-10. Es posible emplear micromatrices para examinar la expresión de genes asociados con progre-
sión de la enfermedad. (Reimpreso con autorización de Macmillan Publishers Ltd: van T. Veer, Laura J. y cols., "Gene
expression profiling predicts clinical outcome of breast cancer'', NATIJRE 405:532, copyright 2002).
594 CAP[TULO 20

uso DE LAS MICROMATRICES Cuando se las utiliza con cD NA, las Se comparó la expresión de miRNA en
micromatrices pueden aportar inforn1ación acerca de la expresión células normales y células cancerosas.
de miles de genes, lo que permite que los científicos estudien qué
genes son activos en determinados tejidos. Asimis1no, pueden uti- Células normales Células cancerosas
lizarse para investigar cómo cambia la expresión 2 3 4 5 1 3 4 5
génica en el curso de procesos biológicos, como el hsa-miR-223
hsa-miR-16
desarrollo o la progresión de enfermedades. Por hsa-miR-1Sa
ejemplo, el cáncer de mama afecta a 1 de cada 1O El color representa hsa-miR-20a
mujeres en los Estados Unidos, y la mitad de ellas el grado de hsa-miR-17-Sp Algunos miRNA fueron
mueren por la enfermedad. El tratamiento actual expresión: hsa-miR-106a sobreexpresados en
el rojo indíca hsa-miR-20b células cancerosas en
depende de una serie de factores, con10 la edad de la hsa-miR-224
sobreexpresión en comparación con
mujer, el ta1naño del tumor, las características de las hsa-miR-185
células cancerosas; células normales, ...
células tun1orales y si el cáncer ya se ha dise1ninado el verde indica
hsa-miR-146a
hsa-miR-1Sb
a los gangl ios li nfáticos vecinos. M uchas muj eres en subexpres ión . hsa-miR-155
las que no hay diseminación se tratan mediante hsa-miR-93
resección del tumor y radioterapia; sin embargo, el hsa-miR-21
cáncer reaparece más tarde en algunas de las 1nuje- hsa-miR- 181 e
hsa-miR-148a
res tratadas de esta manera. Estos casos podrían beneficiarse con
hsa-m iR-182-
tratamiento 1nás agresivo e n el momento de la detección inicial hsa-m iR-183
del cáncer. hsa-miR-424
Utilizando micromatrices, los investigadores examinaron los hsa-m iR-125a
hsa-miR-30b
patrones de expresión de 25 000 genes de tumores primarios de hsa-miR-450
78 muj eres jóvenes con cáncer de mama (fig. 20-10). Se convir- hsa-miR-133b
tió el RNA mensajero de las células cancerosas y las no cancero- hsa-miR-133a
hsa-miR-455
sas e n cDNA y se lo marcó con nucleótidos fluorescentes rojos y
hsa-miR-324-Sp
con nucleótidos fluorescentes verdes, respectivamente. Se mez- hsa-miR-126
claron los cDNA y se los hibridó a un chip de DNA, que contenía hsa-miR-218
sondas de DNA de diferentes genes. La hibridación de los cDNA hsa-miR-574-
hsa-miR-127 ... mientras que
rojos (cáncer) y verdes (ausencia de cáncer) fue proporcional a las otros miRNA fueron
hsa-miR- 191 *
cantidades relativas de mRNA de las muestras. Se evaluó la fluo- hsa-miR-422b subexpresados.
rescencia de cada punto con ba1Tido microscópico, que apareció hsa-miR-422a
como un solo color. E l rojo indica la sobreexpresión de un gen en
Figura 20-11. Se han utilizado micromatrices para comparar la expre-
las células cancerosas respecto de las células no cancerosas (se
sión de miRNA en células cervicales cancerosas en comparación con
híbrida más cDNA n1arcado con rojo), mientras que verde indica
células cervicales normales. (Adaptado de X. Wang, S. Tang, S-Y. Le, R.
la subexpresión de un gen en las células cancerosas respecto de Lu, J.S. Rader y cols. (2008] Aberrant Expression of Oncogenic and Tumor-
las células no cancerosas (se hib1ida 1nás cDNA con verde). El Suppressive Micro RNAs in Cervical Cancer is Required far Cancer Cell
amarillo indica expresión equivalente en ambos tipos de células Growth. PloSONE 3[7]:e2557. doi: 10.1371/journal).
(igual hibridación de cDNA marcados con rojo y con verde) , y
ausencia de color indica que no hay expresión en ninguno de los
tipos de célula.
En 34 de 78 pacientes, el cáncer se diseminó más adelante a
otras localizaciones; las otras 44 pacientes permanecieron sin demostrado que la expresión de miRNA se asocia con resisten-
cáncer de mama durante 5 años después del diagnóstico inicial. cia de los tumores a la quimioterapia y la radioterapia, y que
Los investigadores identificaron un su bgrupo de 70 genes cuyos puede utilizarse para predecir la respuesta de algunos tumores al
patrones de expresión en los tumores iniciales predijeron con tratamiento oncológico. Resultados como estos sugieren que los
precisión si el cáncer presentaría diseminación ulterior (véase datos de expresión génica obtenidos a partir de micromatrices
fig. 20-10). Este grado de predicción fue mucho m ás alto que el pueden ser una herramienta poderosa para determinar el carácter
de los parámetros predictivos tradicionales, que se basan en el de la investigación y el tratamiento oncológicos. Se están exami-
tamaño y la histología del tumor. nando los productos de los genes que muestran diferencias de
Asinusmo, los investigadores han utilizado micromatrices para ex resión co1no osibles dianas de tratamiento farmacológico.
examinar la expresión de micro-RNA (miRNA) e n cánceres ►
humanos . La investigación reciente indi ca que suele haber expre- También se han creado micromatrices que permiten la detec-
sión anormal de miRNA en tejido canceroso y que puede contri- ción de alelos específicos, SNP e incluso proteínas particulares.
buir a la progresión del cáncer (véase cap. 23). Por ejemplo, un Importa destacar que no todas las 1noléculas de DNA se unen por
estudio que empleó 1nicromatrices observó sobreexpresión de igual a las micro1natrices y, por consiguiente, en ocasiones estas
varios miRNA en tejido cervical canceroso, en comparación con pueden sobrestimar o subestitnar la expresión de genes específi-
tejido cer vical normal, mientras que había subexpresión de otros cos. Por lo tanto, es conveniente verificar los resultados de las
miRNA (fig. 20-11). Otros estudios con micromatrices han micromatrices mediante otros métodos.

CONCEPTOS
Las micromatrices, que consisten en sondas de DNA unidas a un
soporte sól ido, pueden utilizarse para determinar qué secuencias de
RNA y DNA están presentes en una mezcla de ácidos nucleicos. Son
capaces de determinar qué moléculas de RNA se están sintetizando y,
por lo tanto, es posible utilizarlas para estudiar los cambios de expre-
sión génica.
Expresión génica y secuencias
indicadoras
Los patrones de expresión génica también pueden determinarse
visualmente utilizando una secuencia indicadora. En este enfo-
que, prin1ero se clonan frag1nentos genómicos en BAC u otros
vectores capaces de alojar la región codificante de un gen más sus
secuencias reguladoras. Después, la región codificante de un gen
cuya expresión va a ser estudiada se reemplaza por una secuencia
indicadora, que codifica un producto de fácil observación. Por
eje1nplo, una secuencia indicadora utilizada con frecuencia codi-
fica una proteína fluorescente verde (GFP) de la aguaviva. Luego,
se inserta el BAC en un embrión, lo que crea un organis mo tran s-
génico. La secuencia reguladora del gen clonado garantiza que
este se exprese en el momento y en el tejido apropiados dentro del
organismo transgénico. El producto de la expresión génica es un
pigmento fluorescente verde, fácil de observar (fig. 20-12).
Esta técnica se está aplicando para estudiar los patrones de
expresión de genes que afectan la función cerebral. En el proyec-
to Gene Expression Nervous System Atlas (GENSAT, Atlas de
expresión génica en el sistema nervioso), los científicos están
reemplazando de manera sistemática las regiones de codificación
de cientos de genes por la secuencia indicadora GFP y observan-
do sus patrones de expresión en ratones transgénicos. El objetivo
Figura 20-12. Puede utilizarse una secuencia indicadora para exami-
nar la expresión de un gen. El pigmento fluorescente verde revela la
expresión de un gen de ,8-tubulina específico de tejido nervioso en el cere-
bro de renacuajo. (Foto de Miranda Gomperts, cortesía de Enrique Anaya,
The Anaya Lab).
Genómica y proteómica 595
es producir un atlas completo de expresión génica en el cerebro
de ratón. Este proyecto ya ha arrojado luz sobre las partes del
cerebro donde se expresan varios genes que participan en t:rastor-
nos neurológicos hereditarios. Otro proyecto de genómica funcio-
nal, el Allen Brain Atlas, ha compilado inforn1ación sobre los
patrones de expresión de 20 000 genes del cerebro de ratón.
Mutagénesis en todo el genoma
Segú n se comentó en el capítulo 18, uno de los mejores métodos
para determinar la función de un gen es examinar los fenotipos de
organismos individuales que tienen una mutación de este.
Tradicionalmente, se mapeaban los genes que codificaban varia-
ciones naturales de un fenotipo, se ai slaban los genes causales y
se estudiaban sus productos. Pero este procedimiento se veía limi-
tado por el número de mutaciones naturales y por la dificultad de
mapear genes con una cantidad limitada de marcadores cromosó-
1nicos. Es posible incren1entar el número de mutaciones naturales
por exposición a agentes mutágenos, y la exactitud del mapeo
aumenta de manera sustancial al disponer de marcadores molecu-
lares mapeados, como RFLP, microsatélites, EST y SNP. Estos
dos métodos (inducción aleatoria de mutaciones en todo el geno-
ma y mapeo con marcadores moleculares) se combinan y se auto-
matizan en un cribado de mutagénesis.
Los cribados de 1nutagénesis en todo el geno1na pueden utili-
zarse para buscar todos los genes que afectan una función o un
rasgo particular. Por ejemplo, están empleándose cribados de mu-
tagénesis en ratones para identificar genes que intervienen en la
función cardiovascular. Cuando se localizan estos genes en rato-
nes, se llevan a cabo búsquedas de hon1ología para determinar si
existen genes sunilares en seres humanos. Luego, pueden estu-
diarse estos genes a fi n de comprender mejor la patología cardía-
ca humana.
Para realizar un cribado de mutagénesis, se inducen mutaciones
aleatorias en una población de organismos, lo que crea nuevos
fenotipos. Las mutaciones se inducen por exposición de los orga-
nismos a radiación, un 1nutágeno químico (véase cap. 18) o
secuencias de elementos transponibles (secuencias de DNA que
se insertan de manera aleatoria en el DNA; véase cap. 18). La
figura 20-13 ilustra el procedimiento para un cribado de m.utagé-
nesis típico. En este caso, se trata a peces cebra machos con etil-
metilsulfonato (EMS), una sustancia química que induce muta-
ciones de la linea gernunaJ en sus espermatozoides. Los machos
tratados se aparean con peces hembra de tipo silvestre. Algunos
de los descendientes serán heterocigóticos para las mutaciones
inducidas por EMS; se investiga a la descendencia para detectar
algún fenotipo mutante que pod1ia resultar de las mutaciones
dominantes expresadas en estos peces heterocigóticos. Las muta-
ciones recesivas no serán expresadas en la progenie Fl , pero pue-
den ser reveladas mediante cruzamientos adicionales.
Los peces con fe notipos variantes son so1netidos a nuevos expe-
1imentos de cruzamjento para verificar que cada fenoti po varian-
te se deba, de hecho, a una mutación de un único gen, aunque no
se conozca en qué gen reside la mutación. Sin en1ba.rgo, es posi-
ble localizar el gen por clonación posicional (véase cap. 19).
Se han utilizado cribados de mutagénesis para estudiar genes
que controlan el desarrollo de los vertebrados. Un equipo de
genetistas del desarrollo ha producido .miles de mutaciones en el
596 CAP[TULO 20

pez cebra que afectan el desarrollo y están localizando y car acte-

Pregunta: ¿cómo pueden identificarse los genes que rizando de manera sistemática los locus donde se producen las
codifican un rasgo o función particular? mutaciones. Los peces cebra son modelos genéticos ideales para
este tipo de estudio porque se reproducen rápidamente, son fáci-
Métodos $e tratan peces cebra ...y luego se los les de criar en el laboratorio y tienen en1briones transparentes en
machos con EMS para cruza con hembras
producir mutaciones en sus los que es fácil detectar deformidades del desru.Tollo. Esta inves-
espermatozoides ... de tipo silvestre. tigación ya ha identificado una serie de genes que son importan-
tes para el desan·ollo embrionario, 1nuchos de los cuales tienen su
contrapartida en seres humanos.

Macho t ratado con EMS Hembra de tipo silvestre

l J CONCEPTOS
t
e estudia la progenie de lo5 l Ólos peces va-
peces para detectar fenotipos riantes pueden El cribado de mutagénesis en todo el genoma unido a la clonación
mutantes. Una mutación rece- tener una posicional puede utilizarse para identificar genes que afectan una
siva (m2) no se expresará en el mutación do- característica o función específica.
fenotipo F1 . l minan~e (Ml).

T A A'
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
~
-.
. ~ -- -
.
~
. Af
.
¿ Cuál es orden correcto de los pasos de un cribado de mutagénesis?
+/+ m2/+ +/+ M1/+ a. Clonación posicional, mutagénesis, identificación de mutantes,
verificación de la base genética.
b. Mutagénesis, clonación posicional, identificación de mutantes,
verificación de la base genética.

I
X
- c. Mutagénesis, identificación de mutantes, verificación de la base
•I•l ml/•
genética, clonación posicional.

~
l
s peces de la progenie con
fenotipos normales se aparean
T

con peces de tipo silvestre .. .

J,
J J d. Identificación de mutantes, clonación posicional, mutagénesis,
verificación de la base genética .

20.3 La genómica comparada estudia

+/+ m2/+ cómo evolucionan los genomas
Los proyectos de secuenciación de genomas aportan información
, ...y se los somete a
detallada acerca del contenido y la organización de los genes en
cruzamiento retró-
grado para revelar diferentes especies e incluso en cüstintos miembros de la misma
mutaciones recesivas. especie, lo que permite inferir cómo funcionan los genes y cómo
evolucionan los genomas. Asimismo, proporcionan información
importante acerca de las relaciones evolutivas entre organismos y
Resultados
sobre factores que influyen en la velocidad y la dirección de la
evolución. La genómica comparada es el campo de la genómica
que compara similitudes y diferencias en el contenido, la función
Se producen algunos peses homo- y la organi zación de los genes, y entre genomas de distintos orga-
cigóticos para mutaciones recesivas.
rusmos.

Cruzamiento y Cruzamiento y Genomas de procariontes

clonación posicional
adicionales
Conclusión: el cribado de mutagénesis produce peces
con una mutación que afecta el rasgo. Estos peces son
analizados con más detalle para identificar la mutación .
Figura 20-13. Los genes que afectan una característica o función
pueden identificarse mediante el cribado de mutagénesis en todo el
genoma. En esta ilustración, M 1 representa una mutación dominante y rn2,
una mutación recesiva.
clonación posicional
adicionales En la actualidad, se han secuenciado más de 2000 genomas de
procariontes. La mayo1ía de estos genomas están formados por un
único cro1nosoma circular. Sin embargo, hay excepciones, como
el caso de Vibrio cholerae, la bacteria causante del cólera, que
tiene dos cromosomas circulares, y Borrelia burgdo,feri, que tie-
ne un cromosoma lineal grande y 21 cromosomas 1nás pequeños.
TAMAÑO DEL GENOMA y NÚMERO DE GENES La cantidad total de
DNA de los genomas procariontes varía de 490 885 pb en Na-
noarchaeuni equitans, una archaea que vive por entero dentro de

Cuadro 20-1 Características de genomas procariontes representativos que han sido secuenciados por completo
Especies Tamaño (millones de pares de bases)
Archaea
Archaeoglobus fufgidus
Methanobacterium thermoautotrophicum
Nanoarchaeum equitans
Eubacterias
Bacillus subtilis
Bradyrhizobium japonicum
Escherichia coli
Heamophilus influenzae
Mycobacterium tuberculosis
Mycoplasma genitalum
Staphylococcus aureus
Vibrio cholerae
Fuente: datos del Genome Atlas del Center for Biological Sequence Analysis, www.cbs.dtu.dk/services/GenomeAtlas.
otras archa.ea, a 9 105 828 pb en Brachyrhizobiumjaponicum, una
bacte1ia deJ suelo (cuadro 20-1). Si bien este rango de tamaño del
genoma parece extenso, es mucho menor que el enorme rango de
tamaño observado en los eucariontes, cuyos genomas pueden
variar de unos pocos 1nillones a cientos de miles de millones de
pares de bases. La bacteria Escherichia coli, utilizada con
mayor frecuencia en estudios genéticos, tiene un genoma de ta-
n1año bastante típico , 4,6 millones de pares de bases. Las archa-
ea y las bacterias son similares en sus rangos de tamaño del geno-
ma. Sorprendentemente, el tamaño del genoma también varía
mucho dentro de algunas especies; por ejemplo, diferentes cepas
de E. coli tienen genomas cuyo tamaño varía en más de 1 111illón
de pares de bases.
.E n Jos procariontes, la cantidad de genes suele variar de 1000 a
2000, pero algunas especies tienen hasta 6700, y otras, tan solo
480. Interesa destacar que la de nsidad de genes es bastante cons-
tante en todas las especies, con un promedio de alrededor de un
gen por 1000 pb. Por lo tanto, los procaiiontes con genomas más
grandes tendrán más genes, a diferencia de los eucariontes, en los
que hay escasa asociación entre el trunaño del genoma y el nú1ne-
ro de genes (véase sigu iente sección). Aún se desconocen , en gran
medida, los factores evolutivos que determinan el tamaño de los
genomas procaiiontes (así como los de los genomas eucariontes).
Sin embargo, el tiempo requerido para la división celular suele ser
más prolongado en organismos con genomas n1ás grandes, debi-
do al tie1npo requerido para replicar el DNA antes de la división.
En consecuencia, la selección puede favorecer genomas más
pequeños en organismos que ocupru1 ambientes donde la repro-
ducción rápida es ventajosa.
Los procariontes con genomas más pequeños tienden a pertene-
cer a especies que ocupan hábitats restringidos, como las bacte-
1ias que viven en el interior de otros organismos. El runbiente
constante y las funciones metabólicas llevadas a cabo por el orga-
nismo huésped pueden permitir que estas bacterias sobrevivan
con menos genes. Las bacterias con genomas más grandes tien-
den a residir en an1bientes muy complejos y variables, corno el
Genómica y proteómica 597
Número de genes previstos
2, 18 2407
1, 75 1869
0,49 536
4,21 4100
9, 11 8317
4,64 4289
1,83 1709
4,41 3918
0,58 480
2,88 2697
4,03 3828
suelo o los nódu los de las raíces de las plantas. En estos a1nbien-
tes, pueden ser útiles genes que solo se necesitan en forma oca-
sional. En los ambientes complejos donde los recursos son abun-
dantes, puede haber escasa necesidad de división rápida (que
favorece genomas más pequeños).
Un ejemplo de una bacteria con un geno1na grande que vive en
un a1nbiente complejo es Streptomyces coelíocolor, una bacteria
filan1entosa con un geno1na de 8 677 507 pb. E sta bacteria se ha
denominado la bacteria boy scout porque tiene un conjunto diver-
so de genes y, por lo tanto, cumple el lema de los scouts: estar
preparado. Además de los genes constitutivos habituales para las
funciones genéticas corno replicación, transcripción y traducción,
su genoma contiene una serie de genes que degradan hidratos de
carbono complejos, lo que les penni te consumir materia e n des-
composición de plantas, animales, insectos, hongos y otras bacte-
rias. Tiene genes para un gran número de proteínas que producen
metabolitos secundarios (productos de degradación) que pueden
actuar como antibióticos y protegen contra la desecación y las
bajas temperaturas. En esta especie, un genoma grande con gran
cantidad de genes parece ser beneficioso en el ainbiente comple-
j o que habita.
TRANSFERENCIA GÉNICA HORIZONTAL Las bacterias tienen una se-
rie de mecanismos por los que pueden ganar y perder DNA. El
DNA puede perderse a través de deleción simple y ganarse por
duplicación de genes y por inserción de elementos genéticos
transponibles. Otro mecanismo de ganancia de nueva información
genética es la transferencia génica horizontal, un proceso por el
cual especies bacterianas que presentan una relación estrecha o
distante intercan1bian periódican1ente información a lo largo de la
evolución. Este intercan1bio puede tener lugar por captación bac-
teriana de DNA del ambiente (transformación), por intercambio
de plásmidos y por vectores virales (véase cap. 9). Desde hace
algún tiempo, se ha reconocido la transferencia génica horizontal,
pero ahora los análisis de muchos genomas microbianos indican
que es más extensa de lo que se creía. La frecuencia generalizada
598 CAP[TULO 20
13
1 1. Metabolismo
2. Desconocida
3. Homeostasis iónica
11 4. Síntesis proteica
S. Energía
6. Facilitación del trarnsporte
7. Biogénesis celu lar
10
8. Transporte intracelular
9. Destino de las proteínas
9 1O. Comunicación celular y
2 transducción de señales
34
Figura 20-14. La función de muchos genes de procariontes no puede determinarse por comparación con
genes de otros procariontes. La proporción del círculo ocupada por cada color representa la proporción de genes
que afectan diversas funciones conocidas y desconocidas de E. coli.
de transferencia génica horizontal ha determinado que algunos
biólogos cuestionen, incluso, si existen especies distintas en las
bacterias (véase una mayor discusión de esta materia en el cap. 9).
FUNCIÓN DE LOS GENES Es posible asignar una función solo a la
mitad de los genes identificados en los genomas procariontes.
Casi un cuarto de los genes no tiene ninguna similitud de secuen-
cia significativa con ningún gen conocido de otras bacterias. El
número de genes que codifican funciones biológicas, como trans-
cripción y traducción , tiende a ser similar entre las especies, aun
cuando sus geno1nas tengan ta1naños 1nuy diferentes. Esta simili-
tud sugiere que dichas fu nciones son codificadas por un conjunto
básico de genes que no varía entre las especies. En cambio, la
cantidad de genes que intervienen en la biosíntesis, el metabolis-
mo de la energía, el transporte y las funciones reguladoras varían
mucho entre las especies y tiende a ser más alta en aquellas con
genomas n1ás grandes. La figura 20-14 presenta las funciones de
los genes anticipados (es decir, genes identificados por programas
informáticos) y los genes conocidos de E. coli. U na parte sustan-
cial de DNA "extra" hallado en los genomas bacterianos más
CONCEPTOS
La genómica comparada coteja el contenido y la organización de
secuencias genómicas completas de diferentes organismos. Los geno-
mas procariontes son pequeños, en genera l de 1 a 3 millones de pares
de bases de DNA, con varios miles de genes. Los procariontes con los
genomas más pequeños tienden a residir en hábitats restringidos,
mientras que aquellos con los genomas más grandes suelen hallarse
en ambientes complejos . La t ransferencia génica horizontal ha
desempeñado un papel importante en la evolución del genoma bac-
teriano.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
¿Cuál es la relación entre tamaño del genoma y número de genes en
los procariontes?
11. Rescate celular, defensa,
muerte celular y
envejecimiento
12. Crecimiento celu lar, división
celular y síntesis de DNA
13. Transcripción
grandes está compuesto por genes parálogos que se han origina-
do por duplicación.
Genomas de eucariontes
Se han secuenciado por completo los genomas de más de 150
organismos eucariontes, incluidos una serie de hongos y protistas,
varios insectos, casi 30 especies de plantas y numerosos vertebra-
dos. Los eucariontes secuenciados son papayas, maíz, arroz, sorgo,
parra, gusanos de seda, varias moscas de la fruta, áfidos, mos-
quitos, anémonas, ratones, ratas, perros, vacas, caballos, orangu-
tanes, chimpancés y seres humanos. Hoy en día, incluso se han
secuenciado genomas de algunos animales extintos, como los del
mamut lanudo y los neandertales. Se están secuenciando cientos
de otros genomas eucariontes. Es importante destacar que, aun-
que los geno1nas de estos organismos hayan sido "completamen-
te secuenciados", n1uchas de las secuencias fina les ensrunbladas
contienen hiatos y quizá no se hayan secuenciado en absoluto las
regiones de heterocromatina. Por lo tanto, los tamaños de los ge-
nomas eucariontes a menudo son estimaciones, y el número de pa-
res de bases indicado para el tamaño del genoma de una especie
particular puede variar. Asimis1no, es difícil predecir el número
de genes presentes en un geno1na y puede vru"iar, lo que depende de
las presunciones realizadas y e l programa informático particular
usado para encontrar los genes.
TAMAÑO DEL GENOMA y NÚMERO DE GENES Los genomas de orga-
nismos eucariontes (cuadro 20-2) son más grandes que los de los
procariontes, y en general los eucariontes mu lticelu lares tienen
más DNA que los eucariontes unicelul ares simples, como la leva-
dura (véase p. 308 del cap. 11). Sin embargo, no hay ninguna rela-
ción estrecha entre el tamaño y la complejidad del genoma en los
eucariontes multicelulares. Por ejemplo, el mosquito (Anopheles
gambiae) y la mosca de la fiuta (Drosophila melanogaster) son
insectos de complejidad estructw·al sinúlar, pero aun así, el mos-
quito tiene un 60% más de DNA que la m osca de la fruta.
En general, los genomas eucariontes también contienen más
genes que los procariontes (aunque algunas bacterias más grandes
tienen más genes que las levaduras unicelulares), y los genomas
 Genómica y proteómica 599

Cuadro 20-2 Características de genomas eucariontes representativos que han sido secuenciados por completo

Especies Tamaño (millones de pares de bases) Número de genes previstos

Saccharomyces cerevisiae (levadura) 12 6144

Physcomitrella patens (hongo) 480 38 354
Arabidopsis thaliana (planta de la mostaza) 125 25 706
Zea mays (maíz) 2400 32 000
Hordeum vulgare (cebada) 5100 26 159
Caenorhabditis elegans (nematelminto) 103 20 598
Drosophila melanogaster (mosca de la fruta) 170 13 525
Anophe/es gambiae (mosquito) 278 14 707
Danio rerio (pez cebra) 1465 22 409
Takífugu rubípres (pez globo tigre) 329 22 089
Xenopus tropícalis (rana de garras) 1510 18 429
Ano/is carolínensís (lagarto anales) 1780 17 792
Mus musculus (ratón) 2627 26 762
Pan troglodytes (chimpancé) 2733 22 524
Hamo sapiens (ser humano) 3233 - 20 000

Fuente: Ensembl Web site:http.//useast.ensembl.org/index/.html y plants.ensembl.org/index.html

de los eucariontes multicelulares tienen más genes que los geno-
n1as de los eucariontes unicelulares. A diferencia de las bacterias,
Jos eucari ontes no muestran ninguna correlación entre el tamaño
del genoma y el número de genes. El número de genes de los
eucariontes multicelulares tampoco tiene una relación obvia con
la co1nplejidad del fenotipo: los seres humanos tienen n1ás genes
que los invertebrados, pero solo el doble que las 1noscas de la
fruta y 1nenos que la planta A. thaliana. El nematodo C. elegans
tiene más genes que la D. melanogaster, pero es menos comple-
jo. Además, el pez globo tiene solo alrededor de la décima parte
de la cantidad de DNA presente en seres humanos y ratones, pero
aproximadamente la misma cantidad de genes. Los genomas
eucariontes contienen múltiples copias de numerosos genes, lo
que indica que la duplicación de genes ha sido un proceso in1por-
tante en la evolución de los genomas.
La mayor pa11e del DNA de los organismos multicelulares es
no codificante, y muchos genes están interrumpidos por intrones.
En los eucariontes más con1plejos, tanto el número como la lon-
gitud de los intrones son n1ayores.
DUPLICACIONES SEGMENTARIAS y FAMILIAS MULTIGÉNICAS Muchos
genomas de eucariontes, en especial aqueUos de los organismos
multicelulares, están llenos de duplicaciones segmentarias, re-
giones de más de 1000 pb de secuencia casi idéntica. Por ejemplo,
alrededor del 4% del genoma humano consiste en duplicaciones
segmentarias. En la n1ayoría de las duplicaciones segn1entarjas,
las dos copias se encuentran en el 1nismo cromosoma (duplicacjón
intracromosómica), pero en otras, las dos copias se encuentran en
cromosomas diferentes (duplicación intercromosómica). En el
genoma hu1nano, el tamaño promedio de las duplicaciones seg-
mentarias es de 15 000 pb.
Las duplicaciones segmentarías se deben a procesos que generan
duplicaciones cromosónucas, co.mo entrecruzamjento desigual
(véase cap. 8). Después de que aparece una duplicación segmen-
taria, esta promueve mayor duplicación por alineación incorrecta
entre las regiones duplicadas. Finalmente, estos cambios pueden
inducir una nueva función. La gran cantidad de familias multigé-
nicas que existen en n1uchos genomas eucariontes demuestra la
impo1tancia de la duplicación de los genes en la evolución del
genoma. Una familia multigénica es un grupo de genes evoluti-
vamente relacionados que aparecieron a través de la evolución
repetida de un gen ancestral. Por ejemplo, la familia del gen de
globina está formada por 13 genes que codifican moléculas simi-
lares a la globina, la mayoría de las cuales producen proteínas que
transportan oxígeno. Un ejemplo todavía más notable es la fami-
li a multigénica olfativa humana, que consiste en alrededor de
1000 genes que codifi can moléculas receptoras olfativas utiliza-
das en nuestro sentido del olfato.
DNA NO CODIFICANTE La mayoría de los genomas eucariontes
contiene grandes cantidades de DNA que no codifica proteínas.
Por ejemplo, sol.o alrededor del 1,5% del genoma humano está
formado por DNA que especifica directamente los amin oácidos
de las proteínas. Desde hace mucho, se ha planteado cuál es la
función de las secuencias de DNA restantes, denominadas DNA
no codificante. Algunas investigaciones han sugerido que gran
pa11e de este DNA no cumple ninguna función. Por ejemplo,
Marcelo Nobrega y cols. crearon ratones genomanipulados a los
que les faltaba una región cromosómica grande sin genes que
codificaban proteínas ( denominada desierto génico). En un expe-
1imento crearon ratones que carecían de un desierto génico de
1 500 000 pb del cromosoma de ratón 3; en otro, crearon ratones
600 CAP[TULO 20
que carecían de un desierto génico de 845 000 pb deJ cromosoma
19. Notablemente, estos ratones impresionaban saludables y eran
indistinguibles de los ratones control. Los investigadores conclu-
yeron que es posible eliminar gi·andes regiones del genoma de los
ma1níferos sin que aparezcan efectos fenotípicos importantes y
que, de hecho, estas pueden ser superfluas.
Sin embargo, otra investigación sugirió que los desiertos géni-
cos pueden contener secuencias que cumplen un papel funcional.
Por ejemplo, estudios de asociación en todo el genoma demostra-
ron que las secuencias de DNA contenidas en un desierto génico
del cro111osoma humano 9 se asocian con arteriopatía coronaria, y
estudios ulteriores de1nostraron la presencia de 33 intensificado-
res en este desierto génico.
En 2002, se inició el proyecto Encyclopedia of DNA Elements
(ENCODE, Enciclopedia de elemen tos de DNA) para determinar
si el DNA no codificante cumplía alguna función. Los investiga-
dores catalogaron todos los nucleótidos del genoma que desem-
peñaban alguna función, incluidas secuencias que codificaban
proteínas y moléculas de RNA, y las que servían co1no sitios de
control de la expresión génica. Este proyecto de 1O años estuvo a
cargo de un equipo de más de 400 científicos de todo el mundo.
En una serie de artículos publicados en 2012, la conclusión del
ENCODE fue que por lo menos el 80% del genoma humano está
involucrado en algún tipo de función génica. Muchas de las secuen-
cias funcionales consistían en sitios donde se unen proteínas e in-
fluyen en la expresión de genes. Antes de este estudio, gran parte
del genoma se consideraba "DNA redundante (junk)" sin función,
pero el estudio ENCODE ba modificado n1ucho este concepto y
sugiere que hay escaso DNA no funcional en el genoma humano.
ELEMENTOS TRANSPONIBLES Una parte sustancial de los genomas
de la mayoría de los organismos 1nulticelulares está formada por
secuencias 1noderada y alta1nente repetitivas (véase cap. 11), y el
porcentaje de secuencias repetitivas suele ser más alto en las espe-
cies con genomas más grandes (cuadro 20-3). La mayor parte de
estas secuencias repetitivas parecen haber surgido por transposi-
ción. En el genon1a humano, el 45 % del DNA deriva de elen1en-
tos transponibles, muchos de los cuales son defectuosos y ya no
pueden movi lizarse. En el maíz, el 85% del genoma deriva de ele-
mentos transponibles.
DIVERSIDAD PROTEICA Pese a un aumento solo modesto de la can-
tidad de genes, los ve1i ebrados tienen una diversidad proteica
Porcentaje del genoma que consiste
en repeticiones intercaladas derivadas
de elementos transponibles
Porcentaje del
Organismo genoma
Arabidopsis tha/iana (planta) 10,5
Zea mays (maíz) 85
Caenorhabditis e/egans (gusano) 6,5
Drosophila melanogaster (mosca de la fruta) 3, 1
Takifugu rubripes (pez globo tigre) 2,7
Homo sapiens (ser humano) 44,4
Número estimado de dominios proteicos
codificados por algunos genomas
eucariontes
Número de dominios
Especies proteicos previstos
Saccharomyces cerevisiae (levadura) 851
Arabidopsis thaliana (planta) 1O12
Caenorhabditis elegans (nematelminto) 1O14
Drosophila melanogaster (mosca de la fruta) 1035
Homo sapiens (ser humano) 1262
Fuente.· Number of genes and protein-domain families from the lnternational Human
Genome Sequencing Consortium, lnitial sequencing and analysis of t he human geno-
me, Nature 409:860-921, Cuadro 23, 2001.
considerablemente mayor que los invertebrados. Una manera de
medir el grado de diversidad proteica consiste en contar el nú1ne-
ro de dominios proteicos, que son partes características de las
proteínas que suelen asociar·se con una funció n. Los genomas de
los vertebrados no codifican una cantidad significativamente
mayor de do1ninios proteicos que los geno1nas de los invertebra-
dos; por ejemplo, hay 1262 do1ninios en los seres humanos y
1035 en las moscas de la fruta (cuadro 20-4). Sin embargo, en los
seres humanos los dominios existentes se ensan1blan en más com-
binaciones, lo que da origen a muchos más tipos de proteínas.
GENES HOMÓLOGOS Una tendencia evidente y notable observada
en los genomas eucariontes es el gi·ado de ho1nología entre genes
haUados en especies relacionadas aun en forma distante. Por
ejemplo, los ratones y los seres humanos tienen en común alrede-
dor del 99% de los genes. Aproximadamente el 50% de los genes
de las moscas de la fruta son homólogos a genes humanos, e
incluso en las plantas alrededor del 18 % de los genes son homó-
logos a los hallados en seres humanos.
COUNEALIDAD ENTRE GENOMAS RELACIONADOS Una de las carac-
te1i sticas de la evolución de los genomas revelada por compara-
ción de las secuencias génicas de diferentes organismos es que
muchos genes están presentes en el mismo orden en genomas
relacionados, un fenómeno que a veces se denomina colinealidad.
La razón de la colinealidad entre genomas es que descienden de
un genoma ancestral común, y las fuerzas evolutivas han mante-
nido el mismo orden en los genomas de los descendientes. Estu-
dios genómicos de gramíneas (plantas de la familia Poacease)
ilustran el principio de colinealidad.
Las gra1níneas comprenden más de 10 000 especies, incluidos
cultivos in1portantes desde el pucnto de vista económjco, como
arroz, tligo, cebada, maíz, mijo, avena y sorgo. En conjunto, las
gramíneas representan alrededor del 60% de la producción mun-
dial de alimentos. Los geno1nas de estas especies varían mucho en
tamaño y nú1nero de cromosomas. Por eje1nplo, el número de cro-
moson1as de las gramíneas varían de 4 a 266; el genoma del arroz
contiene solo alrededor de 460 millones de pares de bases, mien-
tras que el genoma del trigo contiene 17 000 millones de pares de
bases. Pese a estas grandes diferencias en el número de cromoso-
mas y el tamaño del genoma, la posición y el orden de muchos

Arroz
Brachypodium
Sorgo
Figura 20-15. Relaciones colineales entre bloques de genes hallados
en arroz, sorgo y Brachypodium (pasto silvestre). Cada banda colorea-
da representa un bloque de genes que es colineal entre cromosomas de las
tres especies.
genes dentro del genoma se conser van en forma notable. A lo
largo de la evolución, las regiones del DNA entre los genes
(regiones intergénicas) han aumentado, disminuido y sufrido
reordenainientos, mientras que los genes en sí nlis1nos han per-
manecido relativamente constantes respecto del orden y el conte-
nido. La figura 20-15 muestra un ejemplo de la relación colineal
de los genes entre atroz, sorgo y Barchypodium (pasto silvestre).
ª INTENTE RESOLVER El PROBLEMA 38
CONCEPTOS
El tamaño del genoma varía mucho entre las especies eucariontes. En
los organismos eucariontes multjcelulares, no hay una relación evi-
dente entre la complejidad del organismo y la cantidad de DNA o el
número de genes. Una parte sustancial del genoma de organismos
eucariontes consiste en DNA repetitivo, gran parte del cual deriva de
elementos transponibles. Muchos genomas eucariontes tienen en
común genes homólogos y, a menudo, los genes se encuentran en el
mismo orden en los genomas de organismos relacionados.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 8
Las dupl icaciones segmentarias desempeñan un papel importante en
la evolución por
a. dar origen a nuevos genes y familias multigénicas,
b. mantener constante el número de genes de un genoma,
c. eliminar secuencias repetitivas producidas por transposición,
d. controlar el contenido de bases del genoma.
Genómica y proteómica 601
Genómica comparada de Drosophila
La mosca de la fruta Drosophila melanogaster es un organismo
muy usado en genética. Su genoma fue secuenciado en 2000, el
segundo genoma anin1al en ser descifrado. En 2007, los investi-
gadores publicaron las secuencias genórnicas de otras 1O especies
de Drosophila. En combinación con los genomas ya secuenciados
de D. melanogaster y D. pseudoobscura, este proyecto aportó
datos genómicos de 12 especies de Drosophila, lo que posibilitó
un análisis evolutivo detallado de este grupo de insectos.
Las 12 especies de Drosophila secuenciadas se encuentran en
todo el mundo, y todas divergieron de un ancestro co1nún hace
alrededor de 60 millones de años (fig. 20-16). El tamaño del
genoma del grupo varía de 130 millones de pares de bases en D.
rnojavensis a 364 millones de pares de bases en D. virilis. La
variación del número de genes que codifican proteínas no es tan
amplia, de 13 733 a 17 325. Muchos de los genes se hallan en las
12 especies; por ejemplo, el 77% de los 13 733 genes hallados en
D. melanogaster tienen homólogos en todas las demás especies.
Los elementos transponibles han desempeñado un papel in,por-
tante en la evolución de los genomas de Drosophila. La extensión
de DNA que consiste en ren1anentes de elementos transponibles
vmía del 2,7% en el genoma de D. simulans al 25% en el genon1a
de D. ananassae. La cantidad de DNA aportada por elementos
transponibles explica gran parte de la diferencia de ta1naño del
geno1na entre las especies. Los reordenarnientos gen61nicos
(invers iones y translocaciones) fueron frecuentes en la evolución
de este gn1po. La velocidad de evolución varía entre diferentes
clases de genes: los genes que controlan el olfato, la inmunidad y
la resistencia a insecticidas han evolucionado más rápidamente
que otros genes.
El genoma humano
El genoma humano, que es bastante típico de los genomas de n1a-
míferos, se ha estudiado y analizado en forma exhaustiva debido
a su importancia para la salud y la evolución. Tiene 3200 millo-
D. melanogaster
,--
- D. simulans
D. sechellia
D.yakuba
- --- D. erecta
D. ananassae
- - D. pseudoobscura
- - D. persimilis
D. willistoni
D. mojavensis
--- D. virilis
D. grimshawi
Figura 20-16. Doce especies de Drosophila cuyos genomas se han
determinado y analizado divergieron de un ancestro común hace
alrededor de 60 millones de años.
602 CAP[TULO 20

60
Cuadro 20-5 Características promedio de los genes del
genoma humano Ser humano
V,
50
Q/
Característica Promedio e • Gusano
ol...
+-' 40 - Mosca
e
Número de exones 8,8 Q/
-o
30
Tamaño del exón interno 145 pb Q/
._,
~
+-'
e
Tamaño del intrón 3365 pb Q/
u
20
l...
o
o..
Tamaño de la región 5' no traducida 300 pb 10
Tamaño de la región 3' no traducida

Tamaño de la región codificante

770 pb
1340 pb
o
j
<1 1-2
•
2-5 5-30
-
>30
Longitud de los intrones (kb)
Longitud total del gen 27 000 pb
Figura 20-17. En los seres humanos, los intrones de los genes suelen
ser más largos que los intrones de los genes de gusanos y moscas.

nes de pares de bases de longitud, pero solo alrededor del 1,5%

codifica proteínas. A menudo, los genes activos están separados
por vastas regiones de DNA no codificante, gran parte del cual
consiste en secuencias repetidas derivadas de elementos transpo-
nibles.
E l gen promedio del genoma humano tiene aproxin1adamente
27 000 pb de longitud, con alrededor de 9 exones (cuadro 20-5).
(Un gen excepcional tiene 234 exones). Los intrones de los genes
humanos son mucho más largos, y su cantidad es mayor que en
otros genomas (fig. 20-17). El genoma humano no codifica una
cantidad sustancialmente mayor de dominios proteicos (véase
cuadro 20-4), pero los dominios se combinan de más maneras
para producir un proteoma bastante diverso. La figura 20-18 pre-
senta las funciones génicas codificadas por el genoma humano. A
menudo, un solo gen codifica múltiples proteínas a través de corte
y en1palme alternativo; cada gen codifica, en promedio, dos o tres
mRNA diferentes.
La densidad génica varía entre los cromosomas humanos;
los cromosomas 17, 19 y 22 tienen las densidades más altas, y los
cromosomas X, Y, 4, 13 y 18, las más bajas. Algunas proteínas
codificadas por el geno1na hun1ano que no se encuentran en otros
animales son las que afectan la función inmunitaria; el desarrollo,
la estructura y la función del sistema nervioso; las vías de señali-
zación intercelular e intracelular en el desarrollo; la hemostasia y
la apoptosis.
Los elementos transponibles son mucho más con1unes en el
genoma humano que en los genomas de gusanos, plantas y mos-
cas de la fruta (véase cuadro 20-3). El genoma humano contiene
diversos tipos de elementos transponibles, como LINE, SINE,
retrotransposones y transposones de DNA (véase cap. 18). La
mayoría de ellos parecen ser antiguos desde el punto de vista evo-
lutivo y son defectuosos, con mutaciones y deleciones que ya no
les permiten transponerse.

1. Varias Sintasa y sintetasa

11. 21. Protooncogén
28
25 2. Proteína viral 12.
Oxidorreductasa 22. Proteína estructural
4 -- 29 27 26 23

1 20
3. Proteína de transferencia
o transportadora
Liasa
13.
Ligasa
14.
del músculo
23. Motor
4. Factor de transcripción lsomerasa
15. 24. Canal iónico
5 9
18 5. Enzima de ácidos nucleicos Hidrolasa
16. 25. lnmunoglobulina
6 6. Molécula de señalización Función molecular
17. 26. Matriz extracelular
7. Receptor desconocida 27. Proteína estructural
7
18. Transportador citoesquelética
8. Cinasa
19. Transportador 28. Chaperona
8
9. Molécula reguladora
selecta intracelular 29. Adhesión celular
9
1O. Transferasa 20. Proteína selecta de
10 unión a calcio
11
12---,;15 17
14 16

Figura 20-18. Aún no se han determinado las funciones de numerosos genes humanos. La proporción del círculo ocupada por cada color repre-
senta la proporción de genes que afectan diversas funciones conocidas y no conocidas.
 Genómica y proteómica 603

(a)
20.4 La proteómica analiza el conjunto - S-e separa una L--,~• - - - - - Carga - - - - -•
1)
de todas las proteínas halladas en una célula mezcla de pro-
teínas según la 111 1111111111 1111 1
Los datos de la secuencia de DNA ofrecen enormes conocimien-
carga en una
dimensión .. .
• •
tos sobre Ja biología de un organismo, pero no cuentan la historia
completa. Muchos genes codifican proteínas, y las proteínas lle-
van a cabo la vasta mayoría de las reacciones bioquímicas que
...
l1l
:::i
u
Q/
•
• ••
•-·-
... y según la o

•
E
modelan el fenotipo de un organismo. Si bien las proteínas son
codificadas por DNA, muchas presentan modificaciones después
masa en una
segunda
l1l
VI
l1l •
de la traducción y, en los eucariontes más complejos, hay muchas
dimensión, .. . 2
• • •
más proteínas que genes. Por lo tanto, en los últimos años los bió-
IJ ... laque l •
logos moleculares han dirigido su atención al análisis del conte-
nido de proteínas de las célul as. El objetivo fi nal es determinar el
proteoma, el conju nto completo de proteínas halladas en una cé-
lula dada. El estudio del proteoma se denomina proteómica.
1
produce una
serie de pu;tos
en el gel. _J
r7 •
(b)
Hay planes en curso para identificar y caracte1izar todas las •
200 1---+---+-- -~ --1---'----1"-:-.i--r-+-r-.- ii--+-1
proteínas del cuerpo humano, un esfuerzo que se ha deno1ninado
.......
Proyecto Proteo1na Humano. El proyecto catalogaría qué proteí- -.\. . .......
nas están presentes en qué tipos celulares, dónde se localiza cada 100 1 --
... ~
-~- ~-::::-
- ,.....,t."-:":ri'""7--::-+-t- ...;.....-t--..,.,...~~ ....
proteína dentro de la célula y con qué otras proteínas interactúa .
cada una. Muchos investigadores consideran que esta informa- 70 Calcirret1c~iaa,____,_____ · ·
ción será de inmenso beneficio para identificar dianas far1nacoló- t ~ IIPtk
• a1 ·
gicas, co1nprender la base biológica de la enfermedad y conocer
50
la base 1nolecular de nun1erosos procesos biológicos. ,_ .,.• .. · J . ,
~
.
l1l •• • •
:::i
-• ...
• 4 •
u
Determinación de las proteínas Q/
o
•
Cadena
E
celulares l1l
VI 30

i"
ro
2 • •
El procedimiento básico para caracterizar el proteo1na consiste,
primero, en separar las proteínas halladas en una cél ula, y luego,
identificar y cuantificar las proteínas individuales. Un 111étodo
para separar proteínas es la electroforesis bidimensional en gel 20
Catepsina B e. :
TCTP

Cadena D de
..
..
1 ff ~ \ ~ ApoA 1 ..,;c adena B d
"
t\ ,I ..
. ·.
•• ¡' Glutatiór 5-tra sf¡ras
. l _;,..
roté<¼

de poliacrilamida (2D-PAGE), en la que las proteínas se separan

por carga en una dimensión, y por masa en una segunda dimen- AT\I sintasa Citocromo e 1
sión, y después son teñidas (fig. 20-19a). Este procedimiento oxidasa :'f-
\ .
' 1 • '- ...
• • ~ ranstireti na
separa las diferentes proteínas en puntos, cuyo tamaño es propor- 10 =i-,orreaoxina •
cional a la cantidad de proteínas presente. Un gel de 2D-PAGE 5,5
4 4,5 5 6 6,5 7 8
típico puede contener de varios cientos a vari os núles de puntos - - - - - - - - Carga-- - - - - - -
(fig. 20-19b).
Como la 2D-PAGE no detecta algunas proteínas que están en Figura 20-19. La electroforesis bidimensional en gel de acrilamida
baja cantidad y es difícil de automatizar, los investigadores han (2D-PAGE) puede utilizarse para separar proteínas celulares. (De G.
adoptado la cromatografía líquida para separar proteínas. En la Gibson y S. M use. 2004. A Primer of Genome Sdence, 2e. Sinauer
cro1natografía líquida, se disuelve una mezcla de 1noléculas en un Associates, lnc. p. 274, Fig. 5.4).

líquido y se lo hace pasar a través de una columna empacada con

partículas sólidas. Las diferentes afinidades por las fases líquida
y sólida hacen que algunos componentes de la muestra viajen con
más lentitud que otros por la columna, lo que deter1nina la sepa-
ración de los componentes de la muestra.
El método tradicional para identificar una proteína consiste en
extraer sus aminoácidos de a uno por vez y detenninar la identi-
dad de cada aminoácido extraído. Este .método es mucho más
lento y laborioso para analizar las miles de proteínas presentes en
una célula típica. Hoy en día, los investigadores utilizan espec-
trometría de masas, que es un método para determinar con pre-
cisión la masa molecular de una molécula. En la espectrometría
de masas, se ioniza una molécula y se mide su velocidad de
migración en un campo eléctri co. Como las molécul as pequeñas
migran con mayor rapidez que las más grandes, la velocidad de
1nigración permite determinar con exactitud la masa de una
molécula.
Para analizar proteínas mediante espectrometría de masas, p1i-
mero se digiere una proteína con la enzima tripsina, que escinde
la proteína en fragn1entos peptídicos más pequeños, cada uno de
los cuales contiene varios aminoácidos (fig. 20-20a). Después, se
utili za la espectron1etría de masas para separar los péptidos en
función de su relación masa-carga (fig. 20-20b). Esta separación
produce un perfil de picos, en el que cada pico corresponde a la
relación masa-carga de un péptido (fig. 20-20c). Luego , un pro-
graina informático busca en una base de datos de proteínas pai·a
hallar una coincidencia entre el perfil generado y el esper ado de
una proteína conocida (fig. 20-20d), lo que permite identificar a
la proteína de la muestra. Medi ante bioinformática, el ordenador
crea "digestiones virtuales" y predice el perfil de todas las prote-
ínas halladas en un genoma a partir de las secuencias de DNA de
los genes que las codifican.
604 CAP[TULO 20

Los métodos de espectrometría de masas también pueden utili-
zarse para medi r la cantidad de cada proteína identificada. Gra-
cias a avances recientes, los investigadores ahora realizan proteó-
(a)
mica "al azar (shotgu n)", que elimina la mayor parte de la etapa
inicial de separación de proteínas. En este procedimiento, se
digiere y se analiza mediante espectrometría de masas una mez-
cla compleja de proteínas. Luego, el programa informático clasi-
fica las proteínas presentes en la n1uestra original a partir de sus
perfiles peptídicos.

9
9000G9 .M ary Lipton y cols. aplicaron este enfoque para estudiar el pro-
\ - =-c. , proteína con la
teoma de Deinococcus radiodurans, una bacteria excepcional ca-
paz de tolerar altas dosis de radiación ionizante que son letales para
•••••• enzima tripsina, .. . todos los demás organismos. Ya se había secuenciado el genoma de
D. radiodurans. Lipton y cols. extrajeron proteínas de las bacterias,

I0 las digirieron con tripsina, separaron los fragn1entos mediante cro-

1natografía líquida y después determinaron las proteínas a partir de

ooeooo los fragmentos peptídicos por espectromettía de masas. Pudieron

identificar 19 l O proteínas, lo que supera el 60% de las proteínas
predichas sobre la base de la secuencia del genoma.
l Tripsina D escifrar el proteoma incluso de una sola célula es una tarea
difícil. Cada célula contiene una secuencia co1npleta de genes,
9900000 pero distintas células expresan proteínas n1uy diferentes. Cada
gen puede producir una serie de proteínas diferentes a tt·avés de
0000 ...que la fragmenta coite y empalme alternativo (véase cap. 14) y procesamiento pos-
OGG8099 ......-==;en péptidos cortos . .J
traducción de las proteínas (véase cap. 15). Una célula humana
típica contiene hasta 100 000 proteínas diferentes que varían

------ mucho en abundancia, y no es posible utilizar ninguna técnica

corno la PCR para amplificar proteínas con facilidad.

(b) l Captura por afinidad

Acelerador 1 Se analizan los péptidos
con un espectrómetro de
_¿::.;....., masas, que determina su
La proteómica se ocupa no solo de la identificación de todas las
proteínas de una célula, sino también de conocer sus interaccio-
relación masa-carga. nes y variaciones de expresión con el transcurso del tiempo. Los
investigadores han desarrollado una serie de técnicas para identi-
Espectrómetro ficar proteínas que interactúan dentro de la célula. En la captura
de masas
por afinidad, se utiliza un anticuerpo (véase tig. 22-20) contra
una proteína específica para capturar una proteína de una mezcla

-¡
Detector
proteica compleja. La proteína capturada será "aiTastrada" j unto
con cualquier proteína con la que la proteína capturada interactúe
físicamen te. Después, es posible anal izar la mezcla de proteínas
(c) arrastradas mediante espectrometría de masas para identificarlas.
.,.. Pueden utilizarse diversas modificaciones de la captura por afini-
o dad y otras técnicas para determinar el conjunto completo de inte-
+-'
e ~ Se produce un
(1)
racciones proteicas de una célula, que se denomina interactoma.

il - perfil de picos.
:J
V
(1)
o:::
111 111 1 11 1 Micromatrices de proteínas
M asa (m/z)

¡ Las interacciones proteicas también pueden analizarse con

(d)
Un programa informá-
tico compara el perfil
con los de proteínas
111111 1 11 J
conocidas y predichas.
micromatrices de proteínas (fig. 20-21), que son similares a las
micromatrices empleadas para exannnar la expresión génica. Con
esta técnica, se aplica un gran número de proteínas diferentes a un
portaobjetos de vidrio co1no una serie de puntos, cada uno de los
cuales contiene una proteína distinta marcada con una molécu la
que emite fluorescencia cuando se une. Se aplica un extracto de
tejido a la micromatriz de proteínas. Aparece un punto de fluores-
cencia cuando una proteína del extracto se une a un anticuerpo, lo

!
GIVPPTKVWYRAITNDEKTSLAFR
Una coincidencia
identifica la proteína
que indica la p resencia de esa proteína particular en el tejido.

.,,?--,
Proteóm ica estructura 1
Figura 20-20. Se utiliza espectroscopia de masas para identificar pro- La estructur a de alta resolución de una proteína aporta gran can-
teínas. tidad de infom1ación útil. A menudo, es una fuente de conoci-

(a) (b)
••
••
• -
- -- - de miles de proteínas para estudiar el proteoma, los investigadores
_..._ __ --- --
Figura 20-21 . Es posible emplear micromatrices de proteínas para
examinar interacciones entre proteínas. a) Micromatriz con 4400 prote-
ínas que se encuentra en la levadura. b) La micromatriz fue tratada con una
enzima que fosforila proteínas para determinar cuáles servían como sustra-
to de la enzima. Los puntos negros representan proteínas que fueron fosfo-
riladas por la enzima. En cada bloque de la micromatriz (mostrados en
recuadros azules), se incluyen proteínas que se fosforilan a sí mismas (se
autofosfori lan) como puntos de referencia. (De D. Hall, J. Ptacek, y
M.Snyder, 2006. M echanisms of Aging and Development 128 [2007] 161 -
167 . © 2006, con autorización de Elsevier).
mientos sobre la función de una proteína desconocida; también
puede suge1ir la localización de sitios activos y proporcionar
datos acerca de otras moléculas que interactúan con la proteína.
El conocimiento de la estructura de una proteína suele sugerir dia-
nas para posibles fár macos que podrían in teractuar con ella.
Como la estructura a menudo sum inistra info nn ación sobre la
■ La genómica es el campo de la genética que intenta conocer
el contenido, la organización y la función de la información
genética contenida en genomas completos.
■ Los m apas genéticos ubican los genes respecto de otros genes
mediante la determinación de Jas frecuencias de recombina-
ción y se miden en porcentajes de recombinación. Los mapas
físicos se basan en las distancias físicas entre los genes y se
miden en pares de bases.
■ El Proyecto Genoma Hum ano fue un esfuerzo para determinar
toda la secuencia del genoma humano. El proyecto se inició
de manera ofi cial en 1990; se compl etaron borTadores de la
secuencia del genoma humano en 2000. El borrador fin al de
la secuencia del genoma humano se obtuvo en 2003.
■ La secuenciación de un genoma completo exige que se lo
corte en pequeños fragmentos solapados, cuyas secuencias de
DNA pueden determinarse en reacciones de secuenciación.
Las secuencias individuales pueden ordenarse para formar la
Genómica y proteómica 605
fun ción, un objetivo de la proteómica es determjnar la estructura
de todas las proteínas halladas en una célul a.
En la actualidad , se utilizan dos procedimientos para resolver
las esttucturas de proteínas complejas: 1) la c1istalografía de
rayos X , en la que se bon1bardean cristales de la proteína con
rayos X, y se utilizan los patrones de difracción de los rayos X
para determinar la estructura (véase cap. 10), y 2) resonancia
magnética (RM), que aporta información sobre la posición de áto-
mos específicos dentro de la molécula al utilizar las propiedades
magnéticas de los núcleos.
Tanto la cristalografía de rayos X co1no la RM requieren inter-
vención humana en 1nuchas etapas y son demasiado lentas para
determinar las estructuras de 1niles de proteínas que pueden existir
dentro de una célul a. Como se necesitan las estructuras de cientos
esperan ser capaces, finalmente, de predecir la estn1ctura de una
proteína a partir de su secuencia de aminoácidos. Por ahora, este
método no es factible, pero la esperanza es que, si se resuelven sufi-
cientes estructuras de alta resolución, pueda ser posible en eJ futu-
ro m.odelar las estructu ras solo a partir de la secuencia de aminoá-
cidos. Mientras los científicos trabajan en métodos automatizados
que acelerarán la determinación estructural de proteínas, los bioin-
formáticos están desarrollando mejores programas informáticos
para predecir la estructura proteica a partir de la secuencia.
CONCEPTOS
El proteoma es el conjunto completo de protelnas halladas en una
célu la. Se aplican técnícas de separación de proteínas y espectrome-
tría de masas para ídentíficar las prot eínas presentes dentro de una
célu la. La capt ura por afinidad y las micromatrices se utilizan para
determ inar conjuntos de interacciones proteicas. La proteómica
est ructural intenta det erminar la estructura de todas las proteínas .
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 9
¿Por qué es importante conocer la estructura de una proteína?
secuencia de un genoma con1pleto aplicando un enfoque basa-
do en mapas, en eJ que se ensamblan los fragmentos en orden
utilizando mapas genéticos y físicos creados con ante1io1idad,
o mediante el enfoque de fragmentos escogidos al azar (shot-
gun), en el que el solapamiento entre fragmentos se utiliza
para ensa1nblar los en la secuencia de un genoma co1npleto.
Hoy en día, casi todos los genomas se secuencian medi ante
secuenciación por frag1nentos escogidos al azar.
■ Los polimorfismos de nucleótido único son diferencias de una
sola base en el DNA entre organism os individuales y resultan
valiosos como marcadores en estudios de ligamiento. L os
organis111os individuales también pueden diferir en el nú1nero
de copias de secuencias de DNA, lo que se denomina varia-
ción del número de copias.
■ Los sitios de secuencia etiquetada son secuencias de DNA
únicas cuya localización cromosómica se ha determinado. Las
etiqueta<; de secuencia expresada son marcadores asociados
606 CAP[TULO 20

con secuencias de DNA expresadas (transcritas) y pueden uti-
lizarse para hallar l os genes expresados de un genoma.
■ La bioinformática es una síntesis de biología molecular y
ciencia informática que desarrolla hen·a1nientas para almace-
nar, recuperar y analizar da tos de secuencias de DNA, cDNA
y RNA.
■ La metagenómica estudia los genomas de grupos enteros de
organismos. La biología sintética está desarrollando técnicas
para crear genomas y organ1smos.
■ Los genes homólogos están relacionados desde el punto de
vista evolutivo. Los ortólogos son secuencias hom ólogas
halladas en diferentes organismos, mientras que los parálogos
son secuencias homólogas halladas en el mismo organismo.
La función génica puede determinarse buscando secuencias
hom ólogas (tanto ortólogas con10 p arálogas) cuya fun ci ón se
ha determinado previamente.
■ Una micromatriz está formada por fragmentos de DNA fija-
dos en un patrón ordenado a un soporte sólido, com o un fil tro
de nailon o un portaobjetos de vidrio. Cuando se apl ica a la
1natríz una solució n que contiene una mezcla de DNA o RNA,
c ualquier ácido nucleico comple mentario de la sonda utilizada
se unirá a ella. L as micromatrices pueden emplearse para
estudiar la expresión de miles de genes en forma simultánea.
■ Vinculando una secuencia indicadora con las secuencias regu-
ladoras de un gen, es posible observar el patrón de expresión
del gen buscando el producto de la secuencia indicadora. Los
genes que afectan una función particular tan1bién pueden
identificarse mediante e l cribado de 111utagénesis en todo el
geno ma.
■ La mayoría de las especies procariontes tienen entre 1 y 3
millo nes de pares de bases de DNA y de 1000 a 2000 genes.
En comparación con los geno mas eucariontes, la densidad de
genes de los genomas procariontes es re lativamente uniforme,
con alrededor de un gen por 1000 pb. H ay relativamente poco
D NA no codificante entre los genes procariontes. La transfe-
rencia génica horizontal (el movimiento de genes entre dife-
rentes especies) ha sido un proceso evolutivo importante en
los procariontes.
■ Los genomas eucariontes son más grandes y varían más en
tamaño que los genon1as procariontes. No existe una re lación
clara e ntre la complejidad de l organismo y la cantidad de
DNA o el número de genes en organismos multicelulares.
Gran parte de los genomas de organismos eucariontes consis-
ten en DNA repetitivo. E n la mayoría de los genomas euca-
riontes, son muy frecuentes l os elem entos transponibles.
■ La proteómica determina el contenido de proteínas de una
célula y la función de esas proteínas . Las proteínas de una célu-
la se pueden separar e ide ntificar mediante espectro me tría de
masas. L a proteómica estructural intenta determinar la forma
tridimensio nal de las proteínas.

TÉRMINOS IMPORTANTES

anotación (p. 589)
bioinfonnática (p. 589)
captura por afmidad (p.604)
cóntigo (p. 584)
cribado de mutagénesis (p. 595)
desequilibrio de ligamiento
(p. 587)
desierto génico (p. 600)
dominio proteico (p. 592)
duplicación segmentaría
(p . 599)
electroforesis bidimensional en
gel de poliacrilamida (2D-
PAGE) (p. 603)
espectromet1ia de masas
(p. 603)
estudio de asociación en todo
el genoma (p. 588)
etiq ueta de secuencia expresa-
da (EST ) (p. 589)
fa1nilia multigénica (p. 599)
genes ho mólogos (p. 591)
genes ortólogos (p. 591)
genes parálogos (p. 591)
genómica (p. 580)
genómica comparada (p. 596)
genómica estructural (p. 580)
genómica funcional (p. 591)
haplotipo (p. 587)
interactoma (p. 604)
mapa físico (p. 581 )
mapa genético (ligamiento)
(p . 580)
metagenó mica (p. 590)
microbioma (p. 590)
micromatriz (p. 593)
micro1natriz de proteínas (p. 604)
polilnorfismo de nucleótido
único (SNP) (p . 587)
polimorfismo de nucleótido
único etiqueta (SNP-etiqueta)
(p. 587)
proteoma (p. 591)
proteó1nica (p. 603)
Proyecto Proteoma Humano
(p. 603)
secuenciació n basada en mapas
(p. 584)
secuenciació n por fragmentos
escogidos al azar (p. 585)
sitio de secuencia etiquetada
(STS) (p. 589)
transcriptoma (p. 591)
variación del número de copias
(VNC) (p . 588)

l. Exactitud y resolución. 7. Las especies con genomas más grandes suelen tener más
2. b genes que las especies con genomas más pequeños; por con-
sig uiente, la densidad génica es bastante constante.
3. Para catalogar y mapear SNP y otras variantes genéticas
humanas. 8. a
4. a
9. La estructura a m enudo aporta información importante acerca
S. d de la f unció n de una proteína y de los tipos de proteína con
6. e los que es probable que interactúe.
 Genómica y proteómica 607

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema
Un segmento lineal de D~A de 30 kb de longitud se corta primero con BamHI, después con HpaIT y, por ulti-
mo, con Bamlll y HpaITJuntas. De esta reacción, se obtuvieron fragmentos de los siguientes tamaños:
Bamlll: fragmentos de 20, 6 y 4 k b.
HpaIT: fragmentos de 21 y 9 kb.
BamHI y Hpall: fragmentos de 20, 5 , 4 y 1 kb.
Dib~je ~!1 mapa de restricción del fragmento de DNA de 30 kb e indique las localizaciones de los sitios de
restr1cc1on de BamHI y HpaIT.

Estrategia de solución

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema? Sitio para 8am HI

Un mapa que incluya el número y las l ocalizaciones relativas i
de los sitios de restricción para BamHI y HpaIT, y las distan- 20 kb 1 kb
cias en p b entre los sitios.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema? De modo similar, observamos que el Sitio para BamHI
■
■
El segmento de DNA tiene 30 kb de longitud.
Los tamaños de los fragmentos cuando se corta el DNA
con BamIIl, con Hpall y con ambas enzimas juntas.
fragmento de 9 kb producido por Hpall no
aparece en la doble digestión y que los
fragmentos de 5 kb y 4 kb suman 9 kb, de
-5 kb
!
4 kb
manera que otro sitio para BamHI debe
Para obtener ayuda con este problema, repase:
estar a 5 kb de un extremo del fragn1ento y a 4 kb del otro
Mapas físicos en Ja Sección 20. 1. extremo.
Ahora, examinemos los fragmen tos producidos cuando se
corta el DNA con BamHI sola. Los fragmentos de 20 kb y 4
Pasos de la solución kb también están presentes cuando se practica la doble diges-
tión; p or lo tanto, ninguno de estos fragmentos contiene un
Nota: este proble- Cuando se coita con Bamm sola, el seginento sitio para Hpall. En cambio, el fragmento de 6 k b no está pre-
ma puede resolver- sente al final de la doble digestión, por lo
se en forma correc- lineaJ de DNA se escinde en tres fragmentos, de
ta mediante diver• modo que debe haber dos sitios de restri cción que este fragmento conti ene un sitio para Sitio para
11
sos enfoques; esta HpaIT ubicado a 5 kb de un extremo y a 1 kb HP1ª
solución aplica uno
para esta enzima. Cuando se corta con Hpall
del otro extremo. t
de los posibles sola, un clon del mismo segm ento de DNA se
enfoques. escinde solo en dos fragmentos, de modo que Hemos explicado todos los sitios de resttic- 5 kb 1 kb
h ay un solo sitio para Hpall. ción, pero aún debemos determinar el orden
1 de los sitios en el frag1nento de 30 kb original.
Pista: en el DNA Comencemos por determinar la localización de
lineal, el número de
estos sitjos mediante el examen de los fragmen- Adviértase que el frag- Sitio pa ra Hpall Sitio para Bam HI
sitios de restricción mento de 5 kb debe ser
es uno menos la tos obtenidos con Hpall. Adviértase que el frag-
adyacente tanto al fragmento
+ +
cantidad de frag- mento de 2 1 kb producido cuando se corta el
mentos producidos. de 1 kb como al de 4 kb, de 1 kb 5 kb 4 kb
DNA con Hpall no está presente en los frag1nen-
tos producidos cuando se corta el DNA con manera que debe ubicarse entre estos dos fragmentos. Pista: dos fragmentos
Asimismo, h emos establecido que los fragmentos de la doble digestión
ambas enzimas juntas (doble djgestión); este que fueron produci-
resultado indica que el fragmento de 2 1 kb pro- de 1 kb y 20 kb son adyacentes; como el frag mento dos cortando un frag-
de 5 kb está de un lado, el fragmento de 20 kb debe mento de la digestión
Pista: busque los ducido por Hpall tiene en su interior un sitio simple deben ser
para BamHI. Si examinamos los fragmentos pro- estar del otro, lo que completa el mapa de restricción.
fragmentos de la adyacentes.
doble digestión que ducidos por la doble digestión, observamos que
sumen la longitud
de un fragmento de
la digestión simple.
los fragmentos de 20 kb y 1 kb suman 2 1 kb, de
n1anera que un sitio par a BamHI debe estar a
Sitio para 8am HI Sitio para
t+ Hpall
l
Sitio para 8am HI

20kb de un extremo del fragn1ento y a 1 kb del

otro extremo. 20 kb 1 kb 5 kb 4kb
608 CAP[TULO 20
Sección 20.1
l. ¿Cuál es la diferencia entre un mapa genético y un mapa físi-
co? ¿Cuál suele tener 1nayor resolución y exactitud, y por qué?
2. ¿ Cuál es la diferencia entre un enfoque de secuenciación
del geno1na completo basado en mapas y basado en frag-
mentos escogidos al azar?
3. ¿Cuáles son algunas de las preocupaciones éticas que sur-
gen de la infom1ación producida por el Proyecto Genoma
Humano?
4. ¿Qué es un polimorfismo de nucleótido único (SNP)?
¿Cómo se utilizan los SNP en los estudios genó1nicos?
5. ¿Qué es un haplotipo? ¿Cómo surgen los düerentes haplotipos?
6. ¿Qué es el desequilibrio de ligamiento? ¿Cómo da por
resultado haplotipos?
7. ¿ Cómo se lleva a cabo un estudio de asociación en todo el
geno1na?
8. ¿Qué es la variación del número de copias? ¿Cóm o surge?
9. a) ¿Qué es una etiqueta de secuencia expresada (EST)? b)
¿ Cómo se crean las EST? c) ¿ Cómo se utilizan las EST en
los estudios genómicos?
10. ¿Cómo se reconocen los genes dentro de secuencias genó-
micas?
Sección 20.2
11. ¿Qué son las secuencias homólogas? ¿Cuál es la diferencia
entre ortólogos y parálogos?
12. Describa varios métodos diferentes de inferir la función de
un gen examinando la secuencia de DNA.
13. ¿Qué es una micromatriz? ¿Cómo puede utilizarse para
obte ner información acerca de la función de los genes?
14. Explique cómo puede usarse una secuencia indicadora para
obtener inforn1ación acerca del patrón de expresión de un gen.
PREGUNTAS Y PROBLEMAS DE APLICACIÓN
Sección 20.1
*25. Un fragmento de DNA de 22 kb tiene los siguientes sitios
de restricción:
Sitio pa¡a Hpal l
Sitio para Hindlll Sitio para Hindlll
Sitio pa¡ a Hpal ¡sitit para Hpal
3 kb 4 kb 5 kb - 7 kb 1 kb
Primero, un lote de este DNA es digerido co1npletamente
por HpaI sola; después, otro lote es digerido completamen-
te por Hindlll sola; por último, un tercer lote es di gerido
completame nte por Hpal y Hindill juntas. Los fragmentos
resultantes de cada una de las tres digestiones se colocan
en pocillos separados de un gel de agarosa, se los separa
1nediante electroforesis en gel y se los tiñe con bro1nuro de
etidio. Dibuje las bandas que aparecerían en el gel.
15. Reseñe de manera sucinta cómo se lleva a cabo un cribado
de 1nutagénesis.
Sección 20.3
16. ¿Cuál es la relación entre el tamaño del genoma y el núme-
ro de genes en los procariontes?
17. ¿Qué es la transferencia génica horizontal? ¿ Cómo podría
llevarse a cabo entre diferentes especies de bacterias ?
18. El contenido de DNA varía de manera considerable entre
diferentes organismos mu lticelulares. ¿Hay una rel.ación
estrecha entre esta variación y el número de genes y la com-
plejidad del organismo? De no ser así, ¿cómo se explican
algunas de estas diferencias?
19. Más de la mitad del genoma de Arabidopsis thaliana está
for1nado por secuencias duplicadas. ¿ Qué mecanismos se
considera que han sido responsables de estas extensas
duplicaciones?
20. ¿Qué es una duplicación segmentarla?
21. El genom.a humano no codifica una cantidad sust:mcialmen-
te mayor de dominios proteicos que los geno1n as de inverte-
brados, pero aun así, codifica muchas más proteínas. ¿De
qué manera se codifican más proteú1as cuando el número de
dominios no difiere de manera sustancial?
22. a) ¿ Qué es la genómica y en qué se diferencia la genómica
estructural de la genó1nica funcional? b) ¿Qué es la genómi-
ca comparada?
Sección 20.4
23. ¿En qué difiere la pr oteómica de la genómica?
24. ¿Cómo se utiliza la espectrometría de masas para identificar
las proteínas de una célula?
*26. Un segmento lineal de DNA de 14 kb de longitud se corta
primero con EcoRI so la, después con SmaI sola y, por
último, con ambas e nzimas juntas. Se obtienen los
siguientes resultados:
Digestión por
EcoRI sola
Digestión por
S11w.I sola
Digestión por
EcoRI y Smal
fragmento de 3 kb
fragmento de 5 kb
fragmento de 7 kb
fragmento de 7 kb
fragmento de 2 kb
fragmento de 3 kb
fragmento de 6 kb fragmento de 4 kb
fragmento de 5 kb
Dibuje un mapa de los sitios de restricción para EcoRI y
S,nal en el segmento de DNA de 14 kb e indique las posi-
ciones relativas de los sitios de restricción y las distancias
entre ellos.

*27. En el siguiente cuadro, se indica la presencia (+) o la
ausencia (-) de seis sitios de secuencia etiquetada (STS)
en cada uno de cinco clones (A-E) de cromosomas artifi-
ciales bacterianos (BAC). UtiJizando estos marcadores,
ubique los clones de BAC en el orden cotTecto e indique
las localizaciones de los STS dentro de ellos.
STSs
Clon de BAC 1 2 3 4 5 6
A + +
B + +
e + +
D + +
E + +
28. Se cortó un segmento de DNA lineal en fragmentos sola-
pados aleatorios, y se secuenció cada frag1nento. A conti-
nuación, se muestra la secuencia de cada fragmento:
Fragmento 1: 5'- TAGITAAAAC-3'
Fragm.e nto 2: 5'-ACCGCAATACCCTAGTTAAA-3'
Fragmento 3: 5'-CCCTAGTIAAAAC-3'
Fragmento 4: 5'-ACCGCAATACCCTAGTI-3'
Fragmento 5: 5'-ACCGCAATACCCTAGTTAAA-3'
Fragmento 6: 5'-ATITACCGCMT- 3'
Sobre la base del solapamiento de la secuencia, cree la
secuencia de un cóntigo del fragmento original.
*29. ¿Cóm o se compara la densidad de los genes hallados en
el cromosoma 22 con la densidad de los genes hallados
en el cromosoma 2 1, dos croinosomas de tamaño simi-
lar? ¿Cómo se compara el número de genes del cromoso-
ma 22 con el número encontrado en el cromosoma Y?
Para responder estas pregun tas, vaya al sitio
www.ense1nbl.org. Bajo el encabezado Species, seleccio-
ne Human. En el lado izquierdo de la página siguiente,
haga clic en Kariotype. Aparecerán fotografías de los
cromosomas humanos. H aga clic en el cromosoma 22 y
seleccione Chromosome Summary. Verá una foto de este
cromosoma y un hi.stogra1na que ilustra la densidad de
los genes totales (barras no coloreadas) y de los genes
conocidos (barras coloreadas). El número total de genes,
junto con la longitud del cromosoma en pares de bases,
se muestran en la parte inferior del diagrama. Anote la
longitu d total del cromosom a y el número de genes que
codifican proteínas.
Ahora, vaya aJ cro1nosoma 21 seleccionándolo del
menú desplegable Change Chromosome. Examine la lon-
gitud total y el número total de genes que codifican pro-
teínas para el cromosoma 21. Ahora haga lo mismo para
el crornosoma Y. Calcule la densidad génica (número de
genes/longitud) para los cromosomas 22, 21 e Y.
a. ¿ Qué cromosoma tiene la mayor densidad y el mayor
número de genes? ¿Cuál tiene los menores?
Genómica y proteómica 609
b. Examine con más detalle los genes del extremo del
brazo corto del cromoso1na Y haciendo clic en el barra
superior del histograma de genes. Se mostrará una vista
más detallada ¿Qué genes conocidos se encuentran en
esta región? ¿Cuántos genes que codifican proteínas se
hallan en esta región?
Cromosomas humanos 21 y 22. (leonard Lessin/Science Source).
30. En los últimos años, las colonias de abejas de toda
A,.""'"'-"" Norteamé1ica se han diezmado por la muerte rápida de las
!.:~ abejas obreras, un trastorno denominado trastorno de
colapso de la colonia (CCD, colony collapse disorder). El
trastorno, advertido por primera vez en 2004 por los api-
cu ltores, ha sido responsable de la pérdida del 50-90% de
las operaciones de apicultura en los Estados U njdos. La
evidencia sugiere que el CCD es causado por un patógeno.
Diana Cox-Foster y cols. (2007. Science 318:283-287) uti-
lizaron un enfoque metagenómico para tratar de identificar
al agente etiológico del CCD aislando DNA de enjambres
de abejas normales y de enja1nbres que habían presentado
el trastorno. En el análisis metagenó1nico, se identificaron
una serie de bacterias, hongos y virus diferentes. El
siguiente cuadro presenta el porcentaje de enjambres con
CCD y de enjambres sin CCD que tuvieron pruebas posi-
tivas para cuatro patógenos potenciales identificados en el
análisis metagenómico. Sobre la base de estos datos, ¿qué
patógeno potencial parece tener mayor probabilidad de ser
responsable del CCD? Explique su razonamiento.
¿Prueban estos datos que este patógeno sea la cau sa del
CCD ? Explique.
CCD Sin CCD
enjambres enjan1bres
infectados infectados
Virus (n =30) (n = 21)
Virus israelí de la paráli- 83,3% 4,8%
sis aguda
Cachemira de las abejas 100% 76,2%
Nosema apis 90% 47,6%
Nosema cemae 100% 80,8%
31. James Noonan y cols. (2005. Science 309:597-599)
A...,.,.,.,,., comenzaron a estudiar secuencias del genoma de una
{ ,
0
~ especie extinta de oso de las cavernas. Extrajeron DNA de
huesos de 40 000 años de antigüedad y se utilizó un enfo-
610 CAP[TULO 20

que metagenómico para aislar, identificar y secuenciar el En un experimento, se convierte mRNA de una cepa
DNA del oso de las cavernas. ¿Por qué utilizaron un enfo- de bacterias resistentes a antibióticos (células experi-
que 1netagenómico si su objetivo era secuenciar eJ genoma mentales) en cDNA y se m arca con nucleótidos fl uo-
de una especie (el oso de ]as cavernas)? resce ntes rojos; el mRNA de una cepa no resistente de
la misma bacteri a (células contro l) se convierte en
cDNA y se n1arca con nucleótidos flu orescentes verdes.
Los cDNA de las células resistentes y no r esistentes se
mezclan e hibridan a una micromatriz que contienen
puntos de DNA de los genes l a 25. Los resultados se
1nuestran en la ilustración adjunta. ¿ Qué conclusiones
puede extraer acerca de qu é genes podrían estar impli-
cados en la resistencia antibiótica de estas bacterias?
¿ Cómo podría emplearse esta información para diseñar
nuevos antibióticos que sean m enos vulnerables a la
(Larry Miller/Photo Researchers). resis tencia?
35. En los genes de la micromatriz mostrada en la parte
inferior de la figura 20-10, ¿están sobreexpresados
Sección 20.2 o subexpresados la mayoría de estos genes en los
32. En la figura 20-9 , explique por qué los genes A2 y B2 son tumores de pacientes que permanecieron sin cáncer
ortólogos y no parálogos. durante no menos de cinco años? Explique su
razonamiento.
*33. Examine la figura 26-18. ¿Son ortólogos o parálogos los
genes épsilon (E) y beta (~) del cromosoma 11? Explique 36. ¿Qué revela la fotografía de la figura 20-12 sobre la
su respuesta. expresión de ~-tubulina?
*34. Las micromatrices pueden utili-
zarse para determinar los niveles 1 3 5 Sección 20.3
de expresión génica. En un tipo
de micromatriz, la hibridación de 6 7 8 9 10 37. Dictyostelium discoideum es una ameba social del suelo:
los cDNA rojo (experimental) y 11 12 13 14 15 Jt:."'-1""5 gran parte del tiempo, el organismo consiste en células
verde (control) es proporcional a L:~ 't:- aisladas, solita1ias, pero durante tiempos de inanición, las
las cantidades relativas de mRNA 16 19 20 amebas se reúnen para fonn ar agregados que presentan
de las n1uestras. El rojo indica 21
muchas características de los organismos multicelulares.
sobreexpresión de un gen, y el Desde hace tiempo, los biólogos han debatido si D. discoi-
verde, subexpresión de un gen en deum es un organismo unicelular o multicelular; en 2003,
las células expe1imentales respecto de las células control; se secuenció completamente su genoma. El siguiente cua-
el amarillo indica igual expresión en células expe1imenta- dro enumera algunas características genómicas de D. dis-
les y control; y la ausencia de color indica que no hay coideum y de otros eucariontes (L. Eichinger y cols. 2005.
expresión en células experimentales ni en células control. Nature 435:43-57).

Cuadro para el Problema 37

Característica D. discoideum P. falciparum S. cerevisiae A . thaliana D. melanogaster C. elegans H. sapiens

Organismo ameba parásito del levadura planta mosca de la fruta gusano humano
paludismo

Celularidad ·7
l· Uíll un1 multi multi multi multi

Tamaños del genoma 34 23 13 125 180 103 285 1

(millones de pares de bases)
Número de genes 12 500 5268 5538 25 498 13 676 19 893 22 287
Longitud promedio de los
genes (pb) 1756 2534 14 28 2036 1997 2991 27 000
Genes con intrones (%) 69 54 5 79 38 5 85
Número medio de intrones 1,9 2,6 1 5,4 4 5 8, 1
Tamaño medio de los intrones 146 179 nd* 170 nd* 270 3365
Media de G + C (exones) 27% 24% 28% 28% 55°/o 42 % 45%

*nd = no determinado.
 Genómica y proteómica 611

a. Sobre la base de los orga- tamaño del genoma y el nún1ero de genes en todos los
nismos distintos de D. eucru·iontes?
discoideum enumerados
en e.l cuadro, ¿cuáles son
a.lgunas diferencias de las Características de los genomas de 12 especies de Drosophila
, . , .
caracten sticas genom1cas
entre organismos unicelu- Tamaño del genoma Número de genes
lares y multicelulares? (millones de pares que codifican
Especie de bases) proteínas
b. Sobre la base de estos
datos, ¿piensa que el D. melanogaster 200 13 733
genoma de D. discoideum D. simulans 162 15 983
es más sinúlar a los de
otros eucariontes unicelu- D.sechellia 171 16 884
lares o más similar a los D.yakuba 190 16 423
de eucruiontes multicelu- Dictyostelium discoideum . [David
Scharf/Science Source.] D. erecta 135 15 324
lares? Explique su res-
puesta. D. ananassae 217 15 276
*38. ¿Cómo se comparan las siguientes características genómi- D. pseudoobscura 193 16 363
cas de los organismos procruiontes con las de los organis-
mos eucariontes? ¿Cómo se comparan entre los eucarion- D. persimilis 193 17 325
tes? D. willistoni 222 15 816
a. Tamaño del genoma D. virilis 364 14 680
b. Número de genes
D. mojavensis 130 14 849
c. Densidad génica (pb/gen)
D. grimshawi 231 15 270
d. Número de exones
39. Un grupo de científicos secuenció los genomas de 12
~· especies de Drosophila (Drosophila 12 Genomes
Consortium 2007. Nature 450:203-218}. En el cuadro pre-
OE OAtOS

sentado, se muestran los datos sobre el ta1naño del geno-
1na y el nú1nero de genes que codifican proteínas de este
estudio. Grafique el número de genes que codifican proteí-
nas como una función del tamaño del genoma para las 12
especies de Drosophila. ¿Hay una relación entre el tamaño
del genoma y el nún1ero de genes en las moscas de la
fruta? ¿Có1no se co,npara esto con la relación entre el
Sección 20.4
40. Un científico determina los genomas y los proteomas com-
pletos de una célula hepática y una célula muscular de la
mis1na persona. ¿Esperaría diferencias importantes en los
genomas o proteo1nas de estos dos tipos celulares? Explique
su respuesta.

PREGUNTAS DE DESAFÍO

Sección 20.1 *43. Algunos biólogos sintéticos han propuesto crear un orga-
nismo de vida libre totalmente nuevo, con un genoma
41. El genoma de Drosophila melanogaster, una mosca de la
mínimo, el conjunto más pequeño de genes que permita la
r;: fruta, se secuenció en 2000. Sin embargo, esta secuencia
"completa" no incluyó la mayoría de las regiones de hete-
Ol 0AfO5
replicación del organismo en un ambiente particulru·. Este
genoma podría utilizarse para diseñar y crear, "desde
rocromatina. La heterocromatina no se secuenció hasta
cero", nuevos organismos que podrían Llevar a cabo tareas
2007 (R. A. I-Ioskins y cols. 2007. Science 316:1625-
específicos, co1no la degradación de materiales tóxicos del
1628). La mayor parte de las secuencias completadas no
ambiente.
incluyen la heterocro1natina. ¿Por qué, en general, no se
secuencia la heterocro.matina en los proyectos genó1nicos? a. ¿ Cómo podría determinarse el genoma mínimo requeri-
(Pista: véase cap. 11 para una discusión más detallada do para la vida?
sobre heterocromatina). b. ¿Qué preocupaciones sociales y éticas , si hay alguna,
42. En los estudios metagenómicos, suele realizarse una com- podrían asociarse con la creación de un organism o
paración de las secuencias de RNA ribosómico para deter- completamente nuevo con un ge1101na 1nínimo?
minar el número de especies distintas presentes. ¿ Cuáles
son algunas de las características de las secuencias ribosó-
nlicas que las vuelven útiles para determinar qué especies
están presentes?
 21
Epi genética

¿Cómo pudo afectar su salud la dieta

de su abuelo?
El distrito Óverkalix, al norte
,
de Suecia, se ubica por
encima del Círculo Polar Artico y tiene un clüna inhós-
pito caracterizado por inviernos largos y fríos y veran os
cortos. La comunidad siempre ha sido pequeña; aun en
la actualidad, hay menos de 4000 residentes. Durante el
siglo XIX y comienzos del siglo XX, había muy pocos
caminos en la región, y el transporte durante el invierno
se veía limitado por el hielo y la nieve. Dada su locali-
zación septentrional extren1a, cultivar representaba un
constante desafío. Cuando fracasaban los cultivos, la
lejanía de la región limitaba la importación de alim.e n-
tos y la gente moría de inanición. Durante el siglo XIX
(p. ej., en 1800, 1812, 1821 y 1829), los cultivos fraca-
saron con frecuencia, y el período 1831-1836 se carac-
terizó por el fracaso total de los cultivos y por privacio-
nes extremas. Sin embargo, debido a la in1previsibilidad
del tiempo, a 1nenudo años malos fueron seguidos de
Mediante la epigenética, la abundancia y el fracaso de los cultivos pueden años de cosechas exitosas y abundancia de alimentos.
ejercer efectos sobre la salud que persisten por varias generaciones. (Harvest,
En la década de 1980, los investigadores se interesa-
por Hugh Cameron [183 5-19 18]; Prívate Collection/Bridgeman Art Library Ltd .).
ron en los efectos de la abundancia de alimentos y la
han1bruna sobre la salud a largo plazo de los habitantes
del norte de Suecia. Deseaban determinar si la escasez de alimentos que sufría la gente du-
rante la infancia afectaba la sa lud futura de sus descendientes. Repasando las estadísticas de
cosecha, los precios de los granos y otros hechos históricos, los investigadores pudieron deter-
minar la di sponibilidad de alimentos en la región durante todo el siglo XIX y comienzos del
xx. Asimismo, estudiaron los registros de salud de los habitantes; esto fue posible porque
Suecia conserva registros médicos centralizados de todos s us ciudadanos.
Los investigadores se centraron en la saJud de tres grupos de habitantes, nacidos en 1890,
1905 y 1920. Examinaron la expectativa de vida de estos individuos y su 1iesgo de morir por
enfermedad cardiovascular y diabetes. Luego, rastrearon a sus padres y abuelos, determinaron
eJ acceso a alimentos cuando eran niños e investigaron las correlaciones entre la dieta de los
padres y abuelos , y la salud de los descendientes.
Los hallazgos de los investigadores fueron sorprendentes. Los individuos cuyos padres y
abuelos habían estado expuestos a escasez de alimentos cuando eran niños vivieron n1ás que
los individuos cuyos ancestros habían estado expuestos a exceso de aliinentos. Por el contra-
rio, las personas cuyos ancestros habían crecido durante épocas de abundancia de alimentos
mu1ieron a una edad más te mprana y tuvieron mayor probabilidad de morir debido a enferme-
dad cardiovascular y diabetes. Por ejemplo, si un abuelo paterno había tenido acceso a un
exceso de alimentos durante la infancia, la probabilidad de 1norir por diabetes era del cuádru-
ple en sus nietos que en los nietos de personas que no habían estado expuestas a exceso de
alimentos durante la infancia.
¿Cómo puede afectar la cantidad de alimento di sponible para una persona durante la infan-
cia la salud de sus hijos o nietos que viven de 20 a 60 años más tarde? Uno de los principios
de la genética moderna es que nuestros genes son estables (excepto por mutaciones raras) y
613
614 CAPÍTULO 21

no son alterados por el ambient,e, de manera que ¿cómo puede influir la dieta en los rasgos de los
descendientes du rante dos generaciones? El efecto de la dieta del abuelo en generaciones ulteriores
fue particularmente notable. Las madres proporcionan a su descendencia el citoplasma del óvulo y
un medio uterino, al igual que genes, pero a través de sus espermatozoides, los padres aportan solo
un conjunto de genes a su descendencia.
Los investigadores postularon que el efecto observado se produce 1nediante cambios epigenéti-
cos de la croinatina y el DNA que son heredables, pero no implican 1nodificación de la secuencia
de bases del DNA. La herencia epigenética no fue prevista por Mendel ni, hasta hace poco, por la
mayoría de los genetistas modernos, pero los procesos epigenéticos parecen desempeñar un papel
importante en la herencia de numerosos fenotipos. Hoy en día, el estudio de la epigenética es el
centro de una intensa investigación.
Otra duda que plantea este estudio es por qué las condiciones adversas de ha1nbruna durante la
infancia reducen el riesgo de morir por enfermedad cardiovascular y diabetes en futuras generacio-
nes, mientras que las condiciones de exceso de alimentos aumentan el riesgo. Cabría esperar justo
lo contrario, que el estrés nutricional dur ante la infancia aumentara el 1iesgo de n1orir, y el exceso
de alimentos, lo redujera. Los biólogos evolucionistas han propuesto una explicación para esta
relación, que también se ha observado en otros estudios. Esta explicación, denominada hipótesis
del fenotipo ahorrador, se basa en la presunción de que la información acerca del ambiente paren-
tal puede ser útil para los descendientes y les permi te responder de maneras que aumentan su pro-
pia supervivencia y reproducción. Esta hipótesis postula que cuando las condiciones ambientales
son malas para el progenitor es probable que persistan y también sean malas para la descendencia.
Por lo tanto, cuando el progenitor atraviesa épocas difíciles, la selección natural favorece a proge-
nitores que producen descendencia ahon·adora desde el punto de vista n1etabólico (descendencia
que co1ne lo más posible cuando dispone de alimentos, minimiza el gasto de energía y acumula
calorías) porque el ambiente de los progenitores predice que habrá escasos alimentos disponibles
para la descendencia. Es probable que esta estrategia fuera ventajosa en el pasado distante, antes
de la agricu ltura, pero a menudo falla en la sociedad moderna. Comer todo lo que se pueda, mini-
mizar el gasto de energía y acumular calorías cuando hay abundancia de alimentos induce obesi-
dad, enfermedad cardíaca y diabetes, como se observó en los hijos y nietos de los habitantes de
Óverkalix.

E ste capítulo trata sobre la epigenética, la explicación pro-

puesta para el efecto de la dieta sobre la salud de los residen-
tes de Óverkalix. Co1nenza1nos analizando el origen del término
alentar la fusió n de la genética y el desarrollo. Sin embargo, su
utilización del tér1nino precedió al conocimiento moderno de la

epigenét:ica y lo que este térm ino abarca en la actualidad. Luego,

repasamos los tipos de cambios de la cromatina que puede produ-
cirse y los principales procesos que alteran la estructura de lacro-
1natina. Asimismo, consideramos cómo podrían transmitirse los
can1bios de la cromatina a futuras células y futuras generaciones.
A continuación, estudia1nos una serie de efectos epigenét:icos, co-
mo paramutación, efectos conductuales, efectos de agentes quí-
núcos, efectos metabólicos, efectos en gemelos monocigóticos,
desactivación de X, diferenciación celular e impronta genómica.
Finalizamos el capítulo comentando los esfuerzos para mapear la
localización en todo el geno1na de 1narcas epigenéticas: el epige-
noma.

21.1 ¿Qué es la epigenética?

Conrad Waddington (fig. 21-1) fue el primero en emplear el tér-
1nino epigenética en 1942 para describir cón10, durante el proce-
so de desarro llo, un genotipo produce un fenotipo. Al acuñar el
término, Waddington combinó la palabra "epigénesis", que es la Figura 21-1. Carl Waddington empleó por primera vez la palabra epi-
1nanera en la que se desarrolla un embrión, con "genética", el genética para referirse a la manera en que se desarrolla un fenotipo
estudio de los genes y la herencia. El objetivo de Waddington era a partir de un genotipo. (Godfrey Argent Studio/The Royal Society).

estructura del DNA y los crom.o somas, y en la actualidad, epige-
nética tiene un significado más restringido.
La raíz griega "epi" significa "sobre" o " por encima"; epige-
nética ha pasado a representar la herencia de variación por enci-
1na y n1ás allá de diferencias en la secuencia de DNA. Hoy en
día, epigenética suele hacer referencia a los fenotipos y los pro-
cesos que se trans1niten a otras células y, a veces, a generacio-
nes futuras, pero que no se deben a diferencias de la secuencia
de bases del DNA. A menudo, los efectos epigenéticos son cau-
sados por cambios de la expresión génica que se deben a altera-
ciones de la estructura de la cromatina o a otros aspectos de la
estructura del DNA, como metilación del DNA. Una definición
de un rasgo e pigenético es la s iguiente: fenoti po heredado de
1nanera estable, que se debe a cambi os de la cromatina sin modi-
ficaciones de la secuencia de DNA. Algunos han ampliado la
definición de epigenética para referirse a cualquier modifica-
ción de la cromatina o la estructura del DNA que afecta la
expresión génica. Aquí, utilizaren1os epigenética para referirnos
a can1bios de la expresión génica o de un fenotipo que son
potencialmente heredables sin modificación de la secuencia de
bases del DNA.
Numerosos ca1nbios epigenéticos son estables, persisten a tra-
vés de las divisiones celulares o, incluso, de generaciones. Sin
embargo, los factores ambientales también pueden influir en las
alteraciones epigenéticas. Por ejen1plo, la agresión ambiental ha
mostrado modificar la metilación del gen Bdnf de la rata, que
codifi ca un factor de crecimiento que desempeña un papel
importante en el desarrollo del cerebro. La metilación del DNA
se ha vinculado a la expresión de genes y los fenotipos que pro-
ducen. Como se verá, la modificación de la metilación del DNA
es capaz de ser replicada a través de la división celular, lo que
produce progenie con e] nuevo fenotipo, aunque no hay una
diferencia correspondiente de la secuencia de bases del DNA de
los individuos que ''heredan" el nuevo fenotipo. Algunos han
interpretado que el hecho de que puedan inducirse rasgos epige-
néticos mediante efectos ambientales y transmitirlos a genera-
ciones futuras significa que los genes tienen memoria a través
de la epigenética: que los factores ambientales que actúan sobre
individuos pueden tener efectos que se transmiten a futuras
generaciones, corno se observó con el efecto de la dieta sobre la
expectativa de vida en la introducción de este capítulo. La epi-
genética se ha denominado "herencia, pero no como la cono-
cemos".
La epigenética está ofreciendo una explicación sobre la mane-
ra en que los cambios fuera de la secuencia del DNA pueden
influir en el fenotipo y cómo se heredan estos cambios. Asimis-
mo, está haciendo contribuciones importantes al estudio del com-
portamiento, la ciencia ambiental, el cáncer, la neurobiología y la
farrnacología. ~ RESOLVER EL PROBLEMA 2
CONCEPTOS
Los efectos epigenéticos son fenotipos que se transmiten a otras célu-
las, y a veces a generaciones futuras, pero que no son el resultado de
diferencias en la secuencia de bases del DNA. El estudio de la epige-
nética está haciendo contribuciones importantes a muchas áreas de la
biología.
Epigenética 615
21 .2 Varios procesos moleculares inducen
cambios epigenéticos
La epigenética modifica la expresión de genes; estas modificacio-
nes son lo suficientemente estables para trans1nitirse a través de la
tnitosis (y en ocasiones la 1neiosis), pero también pueden ser cam-
biados. La mayor parte de la evidencia sugiere que los efectos
epigenéticos son desencadenados por cambios físicos de la
estructura de la cromatina. En el capítulo 11, considerarnos una
serie de cambios químicos del DNA y las proteínas histona que
afectan la estructura de la cromatina, como metilación del DNA,
n1odificación de las hjstonas y reposicíonamiento de los nucleo-
somas. En el capítulo 17 , analiza1nos el papel que desempeñan
estas modificaciones sobre la expresión de genes. Se considera
que estas modificaciones de la cromatina tienen una participación
importante en los rasgos epigenéticos. El capítulo 14 analizó mo-
léculas de RNA pequeñas, algunas de las cuales juegan un papel
importante en la inducción de cambi os epigenéticos.
Consideraremos tres tipos de mecanismos moleculares que
alteran la estructura de la cromatina y son la base de numerosos
fenotipos epi genéticos: 1) cambios de los patrones de metilación
del DNA, 2) 1nodificaciones quúnicas de las histonas y 3) molé-
culas de RNA que afectan la estructura de la cromatina y la expre-
. ,,, ,, .
s1on geruca.
CONCEPTOS
Muchos fenotipos epigenéticos son el resultado de alteraciones de la
estructura de la cromatina, mediadas por tres procesos principa les:
metilación del DNA, modificación de histonas y moléculas de RNA.
Metilación del DNA
El mecanismo mejor conocido de cambio epigenético es la meti-
lación deJ DNA, la hace referencia a la adición de grupos metilo
a las bases nucleotídicas. En los eucariontes, el tipo predominan-
te de metilación del DNA es la metilación de citosina para produ-
cir 5-metilcitosina (fig. 21-2a). Como se comentó en el capítulo
17, la metilación del DNA suele asociarse con represión de la
transcripción.
A n1enudo, la n1etilación del DNA se produce en bases citosina
que son inmediatamente adyacentes a nucleótidos de guanina,
denominados dinucleótidos CpG (donde p representa el grupo
fosfato que conecta los nucleótidos de C y G). En los dinucleóti-
cos CpG, los nucleótidos de citosina de las dos cadenas de DNA
están ubicados diagonaltnente entre sí. Por lo general, ai11bas
bases citosina están metiJadas, de 1nanera que hay grupos metilo
en a1nbas cadenas del DNA, como se muestra a continuación y en
la figura 21-2b.
m
5' -C G-3'
3'-GC-5'
m
En las plantas, la meti lación deJ DNA también se observa e n tri-
nucleótidos CpNpG, donde N representa un nucleótido con cual -
quier base.
616 CAPÍTULO 21

(a) NH 2
f2 tas. Antes de la replicación, las bases citosina de ambas cadenas
están 1netiladas (fig. 21-3). Inmediatamente después de la replica-
e ,,S;'---,.-, Grupo ción semiconservadora, la base citosina de la cadena molde esta-
N ~ 4" CH N j 4 5'í / metilo CH3 rá 1netilada, pero la base citosina de la cadena recién sintetizada
3
1

O ~ C ~ / CH
2
5
6 II

O
~e,I?
1
N
6 11
;e
no lo estará. Enzimas metiltransferasas especiales reconocen el
estado hemimetilado de los dinucleótidos CpG y agregan grupos

H H
Citosina (C) 5-metilcitosina
ntes de la replicación, el DNA
está totalmente metilado en
(b) dinucleótidos CpG.

~......-5-meti lcitosi na

DNA
E

Grupo
metilo

f.iDLi rante la replicación,

se sintetizan nuevas
cadenas de DNA sin
grupos metilo.

Figura 21-2. La metilación del DNA es una modificación epigenética

frecuente de la cromatina. a) A menudo, se modifican las bases citosina Después de la replicación,
para formar 5-metilcitosina. b) Estructura tridimensional del DNA que cada nueva molécula de
muestra metilación de dinucleótidos CpG. 1 DNA estará met11ada en
.,..d una cadena pero no en
la otra: el DNA está
~ mimetilado.
Algu nas regiones de DNA tienen muchos dinucleótidos y se
denomj nan islas CpG, que en las célul as de los ma1níferos a
menudo se localizan en los promotores de los genes o cerca de
ellos. Por lo general, estas islas CpG no están metiladas cuando
hay transcripción activa de los genes. En cambio, la metilación Enzima
de islas CpG cercanas a un gen induce represión de la transcrip- metiltransferasa ,--
. /

CIOn. / - -- ~ Los grupos metilo atraen

Las células reprimen y activan genes por metilación y desmeti- __. . . _ ~ enzimas metiltransferasas,
lación de bases citosina. Enzimas denominadas DNA metiltrans- E que agregan grupos
ferasas metilan el DNA al agregar grupos metilo a bases citosina metilo a la cadena no
para crear 5-metilcitosina. Otras enzimas, denominadas desmeti- metilada, . ..
lasas, elin1inan grupos metilo, lo que vuelve a convertir la 5-
111etilcitosina en citosina (véase cap. 17).

MANTENIMIENTO DE LA METILACIÓN El hecho de que los cambios

epigenéticos se transmitan a otras células y (en ocasiones) a gene- ~ lo que da origen a DNA
totalmente metilado.
raciones futuras implica que los cambios de la estn1ctura de la
cromatina asociados con fenotipos epigenéticos deben mantener-
se con fidelidad cuando se replican los cromosomas. ¿Có1no se
pueden conservar y replicar los cambios epígenéticos durante el
proceso de división celular?
La metilación de secuencias CpG implica que dos bases citosi- Figura 21-3. La metilación del DNA se mantiene en forma estable a
na n1etiladas se ubican diagonallnente entre sí en cadenas opues- través de la replicación del DNA.

metilo a las bases citosina no metiladas, lo que crea dos .molécu-
las nuevas de DNA completamente metiladas. De esta manera, el
patrón de metilación del DNA se mantiene a través de la división
celular. L:.•~~~:5~~~~2==!!!=!!=!.I
METILACIÓN DEL DNA EN LAS ABEJAS En las abejas, se observa un
eje1n plo notable de epigenética. Las abej as reinas y las obreras
son hembras, pero ahí termin a la sem ejanza. La reina es grande y
desarrolla ovarios funcionales, mientras que las obreras son
pequeñas y estériles (fig. 21-4). La reina realiza un vuelo de apa-
reamiento y pasa toda su vida reproduciéndose, mientras que las
obreras pasan toda su vida recolectando néctar y polen, cuidando
de la reina y cri ando a su descendencia. Pese a estas diferencias
significativas en la anatomía, fisiología y comportamiento, las rei-
nas y las obreras son iguales desde el punto de vista genético;
ambas se desan·ollan a partir de óvulos comunes. La diferencia
reside en la dieta: las abejas obreras producen y alimentan a unas
pocas larvas hembra con una sustancia especial denominada jalea
real, que hace que las larvas se desarrollen como reinas. Otras lar-
vas reciben alimento común para abejas y se desarroll an como
obreras. Esta simple diferencia de dieta influye mucho en la
expresión génica y determina la activación de genes diferentes en
reinas y obreras, lo que da origen a un conjunto muy distinto de
rasgos fenotípicos.
Desde hace tiempo, ha sido un misteri o la manera en que la
jalea real incide en la expresión génica, pero ahora la investiga-
ción sugiere que modifica una marca epigenética. En 2008,
Ryszard Kucharski y cols. demostraron que la jalea real silencia
la expresión de un gen clave denominado Dnmt3, cuyo producto
añade, en circunstancias normales, grupos metilo al DNA . Con la
desactivación de Dnmt3, el DNA de la abeja está menos m etilado
y se expresan muchos genes habitualn1ente silenciados en las
obreras, lo que determi na el desaiTollo de características de reina.
Kucharski y cols. demostraron la importancia de la metilación del
DNA en el desai-rollo de reinas inyectando en larvas de abeja
1noléculas de RNA pequeñas (RNA de interferencia pequeños o
siRNA; véase cap. 14) que inhibían de 111anera específica la
expresión de Dnmt3. Estas larvas tenían niveles más bajos de
metil ación del DNA, y muchas se desarrollaron como reinas con
ovarios funcionales por completo. Este experimento demostró
Figura 21 -4 . Los cambios epige néticos son responsables de las dife-
re ncias de los fe notipos de las abejas (Apis me/Jifera) reinas (izquier-
da) y obrera s (de recha). (WILDUFE GmbH/Alamy).
Epigenética 617
que la jalea real induce cambios epigenéticos (menor metilación
del DNA) que se transmj ten durante la división celular y modifi-
can las vías de desarrollo, lo que frnalmente da origen a una abeja
REPRESIÓN DE LA TRANSCRIPCIÓN POR METILACIÓN DEL DNA ¿Có-
LUO suprim e la metilación del DNA la expresión géni ca? El grupo
metilo de la 5-meti lcitosina se localiza dentro del surco mayor del
DNA, que es reconocido por muchas proteínas de unión a DNA.
La presencia del giupo metilo en el surco mayor inhibe la unión
de factores de transcripción y otras proteínas requeridos para que
tenga lugar la transcripción. Asimismo, la 5-metilcitosina atrae
ciertas proteínas que reprimen en forma directa Ja transcripción.
Además, la metilación del DNA atrae enzimas histona desacetil a-
sas que eliminan grupos acetilo de la cola de las histonas, lo que
modifica la estructura de la crom atina de una manera que reprinle
la transcripción (véase cap. 17).
CONCEPTOS
A menudo, las bases citosina son metiladas para formar 5-meti lcitosi-
na, que se asocia con represión de la transcripción. La metilación del
DNA es mantenida de manera estable a través de la replicación por
enzimas metiltransfersasas que reconocen el estado hemimetilado de
los dinucleóticos CpG y añaden grupos metilo a las bases citosina no
metiladas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
¿ Cuál de las siguientes afirmaciones sobre las islas CpG es verdadera?
a. Están metiladas cerca de promotores de genes que se transcriben
activamente .
b. No están metiladas cerca de promotores de genes que se transcri-
ben activamente.
c. La acetilación de las islas CpG induce represión de la transcripción.
d . Las islas CpG codifican moléculas de RNA que activan la trans-
cripción.
Modificaciones de histonas
Los can1bios epigenéticos también pueden producirse por modifi-
cación de las bistonas. En las células eucariontes, el DNA crea un
complejo con histonas en forma de nucleosomas, que son las uni-
dades básicas repetitivas de la estructura de la cromatina (véase
cap. 11). Se han detectado m ás de 100 modificaciones postraduc-
ción diferentes de las histonas. Muchas de estas modificaciones
tienen lugar en la cola con carga positiva de las histonas, que inte-
ractúan con el DNA y afectan la estructura de la cromatina. Las
modificaciones de las histonas incluyen adición de fosfatos, gi·u-
pos m etilo, grupos acetilo y ubicuitina a sus colas. A menudo,
estas modificaciones alteran la estructura de la cromatina y afec-
tan la transcripción de genes (véase cap. 17). Asimismo, las
modificaciones pueden servir como sitios de unión para proteínas
como factores de trai1scripción que son necesarios para la trans-
. .~
cr1pc1on.
618 CAPÍTULO 21
Por lo general, el agregado de grupos acetilo a aminoácidos de
la cola de las histonas (acetilación de histonas) desestabiliza la
estructura de la cromatina y hace que asuma tma configuración
1nás abierta, que se asocia con mayor transcripción (véase fig. 17-
2 en cap. 17). La adición de grupos metilo a las histonas (metila-
ción de histonas) también altera la estructura de la cromatina,
pero el efecto varía según el aminoácido específico que es m.eti-
lado; algunos tipos de 1netilación de hi stonas se asocian con
mayor transcripción, y otros tipos, con menor transcripción. Por
ejemplo, suele observarse la adición de tres grupos metilo a la
lisina 4 de la histona H3 (H3K4me3, K indica lisina) cerca de
genes que se transcriben en for1na activa. La metilación de la lisi-
na 36 de la histona H 3 (H3K361ne3) tan1bién se asocia con mayor
transcripción. Por el contrario, el agregado de tres grupos metilo
a la lisina 9 de H3 (H3K9me3) y a la lisina 20 de la histona 4
(H4K20me3) se asocia con represión de la transcripción. Asimis-
1no, se ha mostrado que muchas otras marcas de histonas se aso-
cian con el nivel de transcripción. Estos tipos de modificaciones
se han deno1ninado marcas epigenéticas.
Las modificaciones de histonas son agregadas y eliminadas por
proteínas especial es. Las proteínas del grupo polycomb (PcG) son
un grupo grande de proteínas que reprimen la transcripción por
1nodificación de histonas. Estas modificaciones alteran la estruc-
tura de la cromatina, de manera que el DNA no es accesible para
los factores de transcripción, la RNA polimerasa ni otras proteí-
nas requeridas para la transcripción. Por ejemplo, el co1nplejo
represor polycomb 2 (PRC2) agrega dos o tres grupos ro.e tilo a la
lisina 27 de la histona H3 y crea la marca epigenética H3K27me3,
que reprüne la transcripción.
Muchas de las enzimas y proteínas que producen marcas epige-
néticas no pueden unirse por sí mismas a secuencias específicas
de DNA. Por consiguien te, deben ser reclutadas a dianas especí-
ficas del cromosoma. Los factores de transcripción específicos de
secuencia, las marcas preexistentes de la cromatina y las molécu-
las de RNA no codificante sirven para reclutar enzimas 111odifica-
doras de histonas a sitios específicos.
La investigación indica que las 1nodificaciones aisladas de his-
tonas, como las aquí 1nencionadas, no determinan individual-
mente la actividad de transcripción de un gen. Más bien, es la
presencia combinada de múltiples marcas epigenéticas la que
determina el nivel de actividad. Asimismo , existe considerable
"conversación cruzada" entre marcas epigenéticas: una marca de
histonas puede incidir en si se producen 1narcas adicionales cer-
canas y en su manera de funcionar. La conversación cruzada se
produce porgue las modificaciones de hi stonas atraen enzimas y
proteínas que modifican otras histonas. Las modificaciones de
histonas no solo afectan la transcripción, sino que también pue-
den influir en otros procesos moleculares, como la reparación del
DNA y la señalización del punto de control del ciclo celular
(véanse pp. 670-672 del cap. 23). Por ejemplo, se requiere ubi-
cuitinación de la hi stona H2B para la reparación de rupturas
bicatenarias del DNA. Esta modificación induce otras modifica-
ciones de histonas, como metilación de la lisina 79 de H3
(H3K79me); estas modificaciones alteran la estructura de lacro-
1natina y permiten el acceso a proteínas que reparan las rupturas
bicatenarias.
MANTENIMIENTO DE LAS MODIFICACIONES DE HISTONAS El proce-
so por el cual se mantienen las modificaciones de histonas a través
de la división celular no se conoce tan bien como el de la 1ne-
tilación del DNA. No hay ningún mecanismo uni versal para man-
tener la modificación de las histonas; sin duda, diferentes tipos de
modificaciones son mantenidas por distintos mecanismos.
Se han propuesto varios modelos para explicar la manera en
que las n1odificaciones de histonas se transmiten con fidelidad a
las células hija. Durante el proceso de replicación del DNA, se
rompen los nucleosotnas, y las histonas originales de distribuyen
de manera aleato1ia entre las dos nuevas moléculas de DNA.
Luego, se agregan las histonas recién sintetizadas para completar
la formación de nuevos nucleosomas (véase cap. 12). La mayoría
de los modelos asumen que, después de la replicación, las n1arcas
epigenéticas se mantienen en las histonas originales, y estas 1nar-
cas reclutan enzi1nas que realizan cambios similares en las nuevas
histonas. Por eje1nplo, PRC2 añade la marca ep igenética
H3K27me3 a las histonas. PRC2 tiene como diana preferencial
histonas de la cromatina que ya contienen una marca H327rne3,
lo que asegura que cualquier nucleosoma nuevo que se agregue
después de la replicación también será metilado. De esta manera,
las modificaciones de histonas p ueden mantenerse a través de la
división celular.
CONCEPTOS
La modificación de histonas, como la adición de grupos metilo, gru-
pos aceti lo, fosfatos y la ubicu itinación, altera la estructura de la cro-
matina. Algunas de estas modificaciones se transmiten a células hija
durante la división celular y a generaciones futuras.
Efectos epigenéticos por moléculas
de RNA
La evidencia demuestra cad a vez más que las moléculas de
RNA desempeñan un papel importante en inducir efectos epi-
genéti cos. El primer eje1nplo desc ubierto y el 1nejor estudiado
de cambio epigenético mediado por RNA es la desactivación de
X, en la qu e un RNA largo, no codificante, denominado Xist,
suprime la transcripción en uno de los cromosomas X de los
mamíferos hembra. Otro ejemplo es la paramutación en el
maíz, en la que un alelo epigenéticamen te alterado induce un
cambio de otro alelo que después se transmite a generaciones
futuras. La paramutación en el maíz se debe a siRNA (véase
cap. 14). Estos dos ejemplos se analizarán más adelante en este
mismo capítulo.
En los cambios epigenéticos por moléculas de RNA intervienen
diferentes mecanismos. En el caso de la desactivación de X, el
RNA de Xist recubre un cromosoma X y luego atrae PRC2, que
deposita grupos .meti lo en la lisina 27 de la histona H3, lo que crea
una marca epigenética H3K27me3 que altera la estructura de la
cromatina y rep1ime la transcripción.
Otros ejemplos de fenotipos epigenéticos asociados con RNA
se producen mediante moléculas de siRNA que silencian genes
y elementos transponibles (véase cap. 18) por dirigir la metila-
ción del DNA o las modificaciones de histonas a secuencias
específicas de DNA. Además, la investigación ha demostrado
que procesos epigenéticos, como metilación y modificación de
histonas, influyen en la expresión de micro-RNA (véase cap.

14) que, a su vez, desempeñan un papel importante en la regu-
lación de otros genes. Los n1icro-RNA también controlan la
expresión de genes que producen efectos epigenéticos, como
enzimas que metilan el DNA y modifican las histonas. Es menos
clara la n1anera en que los can1bios epigenéticos basados en
RNA se n1antienen a través de las divisiones celulares, aunque
en apariencia algunos involucran RNA pequeños que se trans-
miten mediante el c itoplasma.
CONCEPTOS
Las moléculas de RNA inducen modificación de la cromatina median-
te diversos procesos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿Cuál no es un mecanismo de cambio epigenético?
a. Metilación del DNA.
b. Alteración de una secuencia de bases del DNA en un promotor.
c. Acetilación de histonas.
d. Acción de moléculas de RNA.
21.3 Los procesos epigenéticos causan
un conjunto diverso de efectos
Al principio, se consideraba que los mecanismos epigenéticos de-
sempeñaban un papel en un pequeño número de fenotipos inusua-
les. Sin embargo, la investigación durante los últimos 15 años
reveló que la epigenética es la base de una serie impresionante y
siempre creciente de fenó1nenos biológicos. En esta sección, exa-
nunaremos algunos ejemplos de estos efectos epigenéticos.
Paramutación
Uno de los primeros ejemplos de epigenética fue un cu1ioso feno-
tipo que describió Alexander Brink en el maíz en la década de
1950. Brink estaba estudiando el locus rl, que ayuda a determi-
nar la pigmentación de las se1nillas del maíz. El alelo R' de este
locus produce normalmente granos de color violeta, mientras que
el alelo R st codifica granos manchados. Brink observó que, cuan-
do estaba presente Rst en un genotipo con alelo Rr, el alelo R st alte-
raba de manera permanente la expresión del alelo RT, de modo
que entonces también producía senúllas manchadas. Esta dismi-
nución del efecto del alelo Rr alterado sobre la pigmentación per-
sistía durante varias generaciones, aun en ausencia del alelo Rst•
Brik denominó paramutación a este fenómeno. La paramutación
viola el principio de la segregación de Mendel, que afirma que
cuando se forman los gametos, cada alelo se separa y se transmi-
te de 1nanera independiente a la siguiente generación.
Hoy en día, la paramutación se defrne co1no una interacción
entre dos alelos que induce un cambio heredable de expresión de
uno de los alelos. Sorprendentemente, la paramutación produce
estas diferencias de fenotipo sin ninguna alteración de la secuen-
cia de bases del DNA del alelo convertido. El fenómeno de para-
Epigenética 619
mutación tiene varias caracte1isticas i1nportantes. P1imero, el
patrón de expresión recién establecido del alelo convertido se
transmite a generaciones futuras, aunque el alelo que causó la al-
teración ya no esté presente. Segundo, el alelo alterado ahora
puede convertir otros alelos al nuevo fenotipo. Y tercero, no hay
ninguna diferencia asociada de la secuencia de DNA en los alelos
alterados. En la actuaLidad, se ha descubierto una serie de ejem-
plos de paramutación en diferentes organismos, y los genetistas
han comenzado a desentrañar el mecanismo molecular de este
curioso fenómeno.
PARAMUTACIÓN EN EL MAÍZ Algunos años después de que Brink
comunicara paramutación en el locus rl del 1naíz, Ed Coe, h.
descub1i ó otro ejempl o relacionado. Este caso involucraba la
interacción entre los alelos del locus bl del maíz, que también
ayuda a determinar la pigmentación. La paramutación en el
locus bles más simple que en el locus rl, de manera que utili-
zaremos bl para examinar el proceso y el mecanisn10 de para-
1nutación.
El locus bl ayuda a determinar la cantidad de antocianin a vio-
leta que produce una planta de maíz. En realidad, el locus codifi-
ca un factor de transcripción que regula genes involucrados en la
producción de pign1ento. Las plantas homocigóticas para el alelo
B-1 (B-1 B-[) muestran alta expresión del locus bl y son de color
violeta oscuro (fig. 21-5). Las plantas homocigóticas para el alelo
B ' (B 'B ') tienen una expresión más baja de bl y están ligeramen-
Generación P
X
B-1 B '
U - -Paramutación
Generación F1
Figura 21-5. En la paramutación en el locus b1 del maíz, una copia
del alelo 8 1 convierte al alelo 8-1 en 8 1 *, que tiene el mismo fenotipo
que B'. El genotipo 8-1 8-1 produce una planta pigmentada, mientras que
los genotipos 8' 8' y 8' 8'* son ligeramente pigmentados.
 620 CAPÍTULO 21

te pigmentad as. Sin embargo, las secuencias de DNA de los
alelos B-1 y B ' son idénticas. Los alelos idénticos desde el pun-
to de vista genético como estos, que producen diferencias feno-
típicas heredables mediante procesos epigenéticos, se denomi-
n an epialelos.
En las plantas heterocigóticas B-1 B ', el alelo B-1 es convertido
en B ', lo q ue da por resultado q ue las p lantas tengan pigmenta-
ción ligera (véase fig. 21-5), al igual que las homocígóticas B 'B' .
Por lo general, el alelo recién convertido se designa B '*. Importa
destacar que no hay ninguna diferencia funcional entre B ' y B '*;
el alelo B'* ahora es totalmente capaz de convertir otros alelos B-
1 en alelos B' * en generaciones ulteriores.
La investigación ha de1nostrado que una de Jas características
requeridas para la paramutación en el locus bl es la presencia de
una serie de siete secuencias repetidas en tándem, que se locali-
zan alrededor de 100 000 pares de bases en dirección 5' respecto
de la secuencia de codificació n para el locus b l (fig. 21-6). Cada
repetición consiste en 853 pb y no codifica ninguna proteína.
Tanto los alelos B-1 como los alelos B ' tienen estas repeticiones
en tándem, pero la estructura de la cromatina de los dos alelos es
diferente: el alelo B -1 tiene cromatina más abierta. Se requieren
repeticiones en tándem par a la alta expresión del alelo B-1 y la
producción de pigmento. Se ha sugerido que las repeticiones
El alelo 8-1 muestra altos ~ .mientras que el alelo B' muest~
niveles de transcripción de bajos nivel_es de transcripción de b1
b1 y pigmento, ...
li escaso pigmento.
Repeticion es en tándem Locus b1
actúan co1no un intensificador (véase cap. 17) que estunula la
transcripción en el locus bl , pero solo cuando la cromatina que
rodea las repeticiones se encuentra en una configuración abierta,
como en el alelo B-l . L a configuración más cetTada del alelo B'
puede prevenir que las repeticiones interactúen con el promotor
de bl y estimulen la transcripción. No se sabe cómo pod1ían inte-
ractuar las repeticiones con el alelo B '.
Los diferentes estados de la cromatina de B-1 y B ' pueden expli-
car sus distintos niveles de expresión, pero ¿cómo convierte el
alelo B' al alelo B-I en B'*? Si bien no se conoce por completo
el mecanismo, la investigación reciente den1uestra que la comuni-
cación entre B' y B-1 probablemente se produce mediante la
acción de moléculas de RNA pequeñas.
Las repeticiones en tándem necesarias para la paramutación
codifican siRNA de 25 nucJeótidos de longitud (cap. 14). Se sabe
que algunos siRNA modifican la estructura de la cromatina al
dirigir la metilación del DNA a secuencias esp ecíficas de DNA.
Los genetistas han aislado varios genes del maíz requeridos para
que tenga lugar la paramutación; la desactivación de estos genes
eli mi na la paramutación. Uno de estos genes es mopl , que codi-
fica una RNA polimerasa dirigida por RNA (una enzima que sin-
tetiza RNA a partir de un molde de RNA). Este gen se requiere
para generar los siRNA codificados por las repeticiones en tán-
dem, aunque no parece ser la enzima que en realidad
transcribe las copias de DNA de las repeticiones en tán-
dem. Otro gen reque1ido para la para.mutación, denom i-
nado rmrl, codifica una proteína remodeladora de cro-
matina.
Por lo tanto, la evidencia actual sugiere que las molé-
culas de siRNA convie11en B-I en B' *, y es probable que

8-1 /
// 8'
........•: //
esta conversión implique un cambio de los estados de
cro1natina de los alelos. Hay otros ejemplos de plantas
en las que los siRNA influyen en la 1netilación del DNA
// •••• //
8 -1 8' y la estructur a de la cromatina. Sin embargo, se desco-
noce la n1anera exacta en que las moléculas de siRNA
inducen este cambio de la cromatina en la paramuta-
ción. Es probable que el estado alterado de la cromatin a
Se asume que las repeticiones • La cromatina de 8' se de las repeticiones del alelo B ' disminuya la transcrip-
en tándem estimulan la trans- encuentra en estado
ción del locus bl, quizá por interfe1ir con la interacción
cripción de b1, pero solo cuando cerrado.
la cromatina se encuentra en un entre las repeticiones en tándem y el promotor de bl. Se
estado abierto. asume que la alteración de la cromatina del alelo B ' es
estable y se transmite a generaciones futuras. Asimismo,

,,,------8, la investigación muestra que la transcripción de las

repeticiones en tándem y la generación de siRNA a par-
tir de elJas son necesarias pero no suficientes para la
siRNA
paramutación, de manera que deben intervenir otros fac-
~ 8-1
• tores. Tampoco se ha esclarecido cómo se transmite la
producción de los siRNA entre las generaciones.
Los siRNA producidos a
partir de las repeticiones PARAMUTACIÓN EN RATONES También se han observado
en tándem convierten varios ejemplos de paran1utación en los ratones. Uno
8-1 en B'* corresponde al locus Kit, que codifica un receptor tiro-

8'
!/ e sina cinasa y actúa en la producción de p igmento, el
desarrollo de células germinales y la producción de
células sanguíneas. Los genetistas habían creado antes

// por ingeniería genética un alelo Kit 1nutante (designado

Figura 21 -6. La paramutación en el locus b1 del maíz requiere la
presencia de 7 repeticiones en tándem en dirección S' respecto del
locus b1.
aq uí Kif), que contiene una porción de 3000 pb del gen
lacZ (véase cap. 16) insertada en el locus Kit. Los rato-
nes que son homocigóticos para el alelo de tipo silves-
tre (Kit+ Kit+) tienen pigmento normal. Los ratones que

Generación P
Los homocigotos Kft + Kit
rLos heterocigotos Kit+ Kit r tiene la
tienen color uniforme. punta de la cola y los pies blancos.
X mRNA de Kit+' Kit+'
Kit + Kit+
Generación F1
Algunos
deseen.dientes
Kit+ Kit desarrollan
el fenotipo del . t
genotipo Jat+ Kit ·
Conclusión: un cruzamiento entre Kit+ Kit+ Y Kit + Kitt produce
½ progenie Kit+ Kit+ y ½Kit+ Kitt, pero algunos Kit+ Kit+
desarrollan el fenotipo de los heterocigotos.
Figura 21-7. Paramutación en el locus Kit de ratones.
son homocigóticos para los alelos Kit mutantes (Kif K itf) mueren
poco después del nacimiento. Los ratones heterocigóticos para
alelos de tipo silvestre y n1utante (Kit+ Kif) tienen la punta de la
cola y los pies blancos (fig. 21-7). Cuando se cruza un ratón hete-
rocigótico con uno de tipo silvestre homocigótico, la mitad de la
progenie es homocigótica (Kit+ Kit+), y la mitad es heterocigótica
(Kit+ K if), como era previsible. Sin embargo, muchos de los rato-
nes Kit+ Kit+ presentan cola y pies blancos, el fenotipo esperado
de los heterocigóticos. En presencia del alelo Kif en el heteroci-
goto, el alelo Kit+ se altera de manera que tiene el mismo fenoti-
po que Kitt. Los ratones con estos alelos alterados se designan
Kit*. El alelo Kit* alterado se transmite en forma estable a gene-
raciones futuras, en las que continúa produciendo colas y pies
blancos. Algunos seres hu1nanos con un mechón blanco en el
cabello de la frente y zonas de pigmentación reducida (denon1Ína-
do rasgo de piebaldismo) tienen mutaciones del locus Kit; otras
1nutaciones de Kit causan predisposición a algunos cánceres.
Los investigadores demostraron que este ejemplo de paramuta-
ción también es mediado por moléculas de RNA, aunque es pro-
bable que el mecanismo sea diferente del observado en la para-
mutación en el maíz. En los ratones, la cola y los pies blancos del
alelo Kif parecen ser causados por rnicro-RNA (miRNA) que
degradan el .mRNA de Kit, y estos miRNA se transmiten a gene-
raciones futuras a través de los gametos. Los investigadores
observaron una reducción del doble del mRNA de Kit tanto en
ratones heterocigóticos con10 en ratones Kit* , lo que sugirió que
las colas y los pies blancos de los beterocigotos se deben a una
reducción del mRNA de Kit. Para determinar si el RNA era res-
ponsable de la paramutación, inyectaron RNA de homocigotos
Kit+ Kit+ a algunos embriones de tipo silvestre e inyectaron RNA
de heterocigotos Kit+ Kitt a otros embriones de tipo silvestre.
Epigenética 621
Cuadro 21-1 Efectos de la inyección de diferentes tipos de
l
RNA en ratones de tipo silvestre (Kit+ Kit+)
Presencia de puntas
Tipo de RNA inyectado de la cola y pies blancos
Infrecuente
mRNA de Kit+' Kir Más frecuente
miRNA para mRNA de Kit Más frecuente
miRNA inespecífico Infrecuente
Entre los ratones que completaron el desarrollo, observaron pun-
tas de la cola y pies blancos con mayor frecuencia en aquellos
inyectados con RNA de heterocigotos, lo que sugirió que este
RNA era capaz de alterar el alelo Kit+ de los ratones de tipo sil-
vestre (cuadro 21-1). Luego, los investigadores .i nyectaron
miRNA que degradan eJ mRNA de Kit a emb1iones de tipo silves-
tre. Esto produjo más r atones con colas y pies blancos que cuando
inyectaron miRNA inespecíficos a los embriones (cuadro 21-1).
La capacidad de producir la característica de colas y pies blancos
del genotipo Kit+ Kit: inyectando miRNA en embriones sugiere
que este caso de para1nutación se asocia con moléculas de
miRNA que son transferidas al embrión a través del óvulo y el
espermatozoide. De todos modos, todavía hay muchos aspectos
desconocidos de la paramutación en el locus Kit.
CONCEPTOS
La paramutación se produce cuando un alelo crea una alteración
heredable del otro alelo sin ningún cambio de la secuencia del DNA.
La investigación sugiere que la paramutación en el maíz y en los rato-
nes es mediada por moléculas de RNA pequeñas.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
¿Cuál es una característica de la paramutación?
a. Un alelo puede alterar otro alelo cuando ambos están presentes
en un heterocigoto.
b. Los alelos alterados deben transmitirse a generaciones futuras.
c. Los alelos alterados deben ser capaces de alterar otros alelos en
generaciones futuras.
d. Todas las anteriores.
Epigenética conductual
L a investigación ha mostrado que las experiencias de la vida, en
especial las de etapas tempranas, pueden tener efectos persisten-
tes sobre el comportamiento, en algunos casos hasta generaciones
futuras. Cada vez más, los investigadores observan que estos
efectos a largo plazo son mediados por procesos epigenéticos. Por
ahora, el número de estudios que den1uestran de manera convin-
622 CAPÍTULO 21
Figura 21 -8. Las ratas jóvenes expuestas a más lamido y acicalamien-
to de sus madres presentan patrones diferentes de metilación del
DNA, lo que altera la expresión de genes de respuesta al estrés y las
vuelve menos temerosas de adultas. (Eric lsselee/Shutterstock).
cente que la expe1iencia de vida altera la estructura de la croma-
tina es pequeña (y algunos todavía son controvertidos), pero una
serie de investigaciones está estudiando en forma activa los efec-
tos epigenéticos de la experiencia y sus efectos a largo plazo
sobre la estructura de la cromatina y el comportamiento.
CAMBIOS EPIGENÉTICOS INDUCIDOS POR COMPORTAMIENTO MATER-
NO Un ejemplo interesante de epigenética conductual correspon-
de a los efectos persistentes del comportamiento materno en las
ratas. Una rata madre lame y acicala a su descendencia (fig. 21-
8), en general mientras arquea la espalda y la amamanta. Los des-
cendientes de 1nadres que muestran mayor comportaJniento de
lamido y acicalamiento son menos temerosos de adultos y mues-
tran menores respuestas honnonales al estrés que los descendien-
tes de madres que los lamen y acicalan menos. Estas diferencias
persistentes en la descendencia no se deben a diferencias genéti-
cas heredadas de sus madres -por lo menos , no a diferencias
genéticas de las secuencias de bases del DNA-. La descendencia
expuesta a más lamido y acicalamiento desarrolla un patrón dife-
rente de metilación deJ DNA que la descendencia expuesta a
menos lamido y acicalamiento. Estas diferencias de metilación
del DNA afectan la acetílación de histonas, lo que persiste hasta
la adultez y modifica la expresión del gen del receptor de gluco-
corticoides, que desempeña un papel en la respuesta hormonal al
estrés. Asimismo, está afectada la expresión de otros genes de res-
puesta al estrés.
Para demostrar el efecto de la al teración de la estructura de la
cromatina sobre la respuesta al estrés de la descendencia, los
investigadores infundieron en el cerebro de ratas jóvenes un inhi-
bidor de desacetilasa, que impide la eliminación de grupos aceti-
lo de las histonas. Tras la infusión del inhibidor de desacetilasa,
desaparecieron las diferencias de metilación del DNA y acetila-
cíón de hi stonas asociadas con el con1porta1niento de acicalan,ien-
to, así como la diferencia en las respuestas al miedo y el estrés en
los adultos. Esto demuestra que el comportamiento de lamido y
acicalamiento de la madre induce cambios epigenéticos en la cro-
1natina de la descendencia que causan diferencias persistentes en
su con1portamiento. 1.::•~~~~~~~~~~~~:!J
EFECTOS EPIGENÉTICOS DEL ESTRÉS TEMPRANO EN SERES HUMANOS
Numerosos estudios demostraron que el estrés durante la infancia
y la adolescencia produce una serie de efectos adversos que per-
sisten hasta la vida adul ta. Por ejemplo, e.l maltrato infantil au-
menta la probab ilidad de que el niño presente depresión, ansiedad
y suicidio en la adultez. En un estudio, los investigadores exami-
naron el cerebro de 24 personas que habían cometido suicidio, la
mitad de las cuales había sufrido maltrato infantil. Observaron
que el grado de n1etilación del gen del receptor de glucocorticoi-
des, un gen involucrado en la respuesta al estrés, era mayor en
aquellos que habían sufrido maltrato infantil que en aquellos que
no lo habían sufrido. Si bien la cantidad de cerebros estudiados
fue pequeña, el estudio sugiere que el estrés en etapas tempranas
de la infancia puede causar, de hecho, modificaciones epigenéti-
cas de la estructura de la cron1atina en seres humanos.
Otros estudios demostraron que la ex periencia en etapas tem-
pranas de la vida afecta la expresión gén ica. Por ejemplo, los
investigadores observaron que crecer en un ambiente de bajo
nivel socioeconómico antes de los 5 años de edad alteró la expre-
sión de más de 100 genes relacionados con la función inmunita-
1ia de adultos. La introducción del capítulo 11 analiza la obser-
vación de que el estrés en etapas tempranas de la infancia (p. ej.,
crecer en un orfanato) altera la longitud de los telómeros, un tipo
de cambio epigenético.
EPIGENÉTICA DE LA COGNICIÓN Una serie de estudios de investiga-
ción mostraron que las anor111alidades de la 1netilación del DNA
se asocian con trastornos del desarrollo y la capacidad intelectual
en seres hu1nanos. Estos hallazgos instaron a los investigadores a
estudiar los efectos de la estructura de la cromatina sobre el
aprendizaje, la memoria y la capacidad cognitiva de ratones y
ratas. Un estudio halló que entrenar a los ratones para evitar un
estímulo adverso en un lugar específico redujo la metilación del
DNA del gen Bdnf, que codifica un factor de crecimiento que esti-
mula eJ crecimiento de conexiones interneuronales. El gen Bdnf
era más activo cuando estaba des metilado. Cuando los investiga-
dores inyectaron en el cerebro de ratones un fármaco que inhibe
la desmetilación, disminuyó la actividad del gen Bdnf y también
la 1nemoria de los ratones sobre dónde se producía el estímulo
adverso.
Otro estudi o observó que un :fármaco que promueve la acetil a-
ción de hi stonas mejoraba el aprendizaje y la memoria de ratones
que presentaban un trastorno similar a la enfermedad de Alzhei-
mer. La acetilación de histonas altera la estructura de la cromati-
na al relajar la asociación entre el DNA y las histonas, y estimu-
la la transcripción de muchos genes. Otros estudios hallaron que,
en los ratones, la acetilación de histonas disminuye con la edad y
que disminuye la expresión de genes relacionados con el aprendi-
zaje y la memoria. Cuando los investigadores inyectaron a los
ratones un fármaco que es un inhibidor de la actividad desacetila-
sa, aumentó la acetilación de histonas, incrementó la transcrip-
ción de genes involucrados en la n1e1noria y mejoró la memoria
de los ratones. Estos estudios sugieren que los cambios de la
estructura de la cromatina pueden participar en la 111e1noria y el
aprendizaje.
CONCEPTOS
Hay estudios que aportan evidencia de que las experiencias tempra-
nas de la vida pueden provocar cambios epigenéticos que tienen efec-
tos persistentes sobre el comportamiento.

Efectos epigenéticos de agentes
químicos ambientales
Como algunos agentes químicos son capaces de modificar la es-
tructura de la cromatina, los investigadores han estudiado los
efectos a largo plazo de tóxicos an1bientales sobre la estructura de
la cromatina y los rasgos epi.gené ticos.
Ha habido mucho interés reciente en agentes químicos, de no-
minados disruptores endocrinos, que remedan a hormonas natura-
les o interfieren con ellas . Los disruptores endocrinos son capaces
de interferir con procesos regulados por hormonas naturales,
con10 el desarrollo sexual y la reproducción. Un disruptor endo-
crino es la vi nc lozoli na, un fungicida común usado para controlar
e nfermedades micóti cas en uvas, frutas y verduras, y para tratar el
césped en campos de golf. La vinclozolina actúa como un anta-
gonista del receptor de andrógenos: la vinclozoilina y sus me-
tabolitos se asemejan a la testosterona y se unen al receptor de
andrógenos, lo que impide la unión de la testosterona. Pero la vin-
c lozolina y sus metabolitos no activan de 111anera apropiada el
receptor y, de esta manera, la vinclozolina inhi be la acción de los
andrógenos e impide la producción de espermatozoides .
En un estudio, los investigadores hallaron que la exposición de
embriones de rata a vinclozolina indujo menor producción de es-
permatozoides no solo en los animales tratados (al a lcanzar la
pubertad), sino ta1nbién en varias generaciones siguientes. Se ob-
servó mayor metilación del DNA en espermatozoides de los
machos expuestos a vinc lozolina, y estos patrones de metilación se
heredaron. Estos estudios y otros han planteado preocupaciones de
que, a través de cambios epi.genéticos, la exposición ambiental a
agentes quúnicos pueda tener efectos sobre la salud de las futuras
generaciones . i.:•~~~~~~~~~:::::~~:!.l
CONCEPTOS
'
A través de cambios epigenéticos, los agentes químicos ambientales
pueden tener influencias que se extienden a las generaciones siguient es.
Efectos epigenéticos transgeneracionales
sobre el metabolismo
En la introducción de este capítulo, comentamos cómo la dieta du-
rante la infancia puede tener efectos sobre la salud que pueden per-
sistir durante generaciones. Estos tipos de estudios epidemj ológi-
cos en seres humanos está n avalados por estudios de laboratorio en
ratones y ratas. En un estudio, los investigadores alimentaron a ra-
tones machos endogámicos con una dieta normal ( control) o con
una dieta hipoproteica. Después, cruzaron ratones de ambos grupos
con hen1bras control alimentadas con dieta normal. Luego, se separó
a los machos de las hen1bras y nunca tuvieron contacto con su des-
cendencia; su única contribución a la descendencia fue un conjunto
de genes paternos transferidos a través de los espermatozoides.
Se crio a los descendientes y se examinaron sus concentracio-
nes de lípidos y colesterol. Los descendientes de machos alünen-
tados con una dieta hipoproteica mostraron mayor expresión de
genes involucrados en el metabolismo de los lípidos y e l coleste-
rol y una disminución correspondiente de las concentraciones de
colesterol, en comparación con los descendientes de machos ali-
1nentados con una dieta non11al. A simisn10, se observaron nu1ne-
rosas diferencias en la metilación del DNA en la descendencia de
Epigenética 623
los dos tipos de padres, au nque no pudo hall arse n inguna diferen-
cia de los patrones de meti lación de los espermatozoides de los
dos grupos de padres. Estos resultados sugieren que los cambios
epi.genéticos alteraron el metabolismo del colesterol de la descen-
dencia, aunque no se esclareció cóm o se transmitieron las dife-
rencias de 1netilación del padre a la descendencia.
E n otro estudio, los investigadores alimentaron a ratas macho con
una dieta hipergrasa y no fue sorprendente que aumentaran de peso.
Después, cruzaron a estos machos con hembras alimentadas con
una dieta normal. La descendencia también recibió una dieta nor-
mal. Las hijas de las ratas n1achos alinlentados con dieta hipergra-
sa tenían p eso normal, pero con10 adultos presentaron un cuadro
silnilar a diabetes de alteración de la tolerancia a la glucosa y la
secreción de insultna. Los investigadores observaron que, en las
células de los islotes pancreáticos secretoras de insulina de las hi-
jas, había alteración de la expresión de 642 genes involucrados en
la secreción de insulina y la tolerancia a la glucosa, lo que demos-
tró que la dieta del padre afectó la expresión génica en sus hijas .
Efectos epigenéticos en gemelos monocigóticos
L os gemelos monocigóticos (idénticos) se desarrollan a partir de un
único óvulo fecundado por un solo espern1atozoide, que se divide y
da origen a dos cigotos (véase cap. 6). Los gemelos monocigóticos
son idénticos desde el punto de vista genético, en el sentido de que
poseen idénticas secuencias de DNA, pero a menudo difieren algo
en aspecto, salud y comportamiento. No se conoce el carácter de
estas diferencias fenotípicas de gemelos idénticos, pero evidencia
reciente sugiere que por lo menos algunas de estas ellas pueden de-
berse a cambios epigenéticos. E n un estudio, Mario Fraga y cols. del
Centro Nacional Español del Cáncer examinaron a 80 gemelos idén-
ticos y compararon el grado y la localización de la metilación del
D NA y la aceti lación de histonas . Observaron que la metiJación
del DNA y la acetilación de histonas en gemelos idénticos fueron
similares en etapas tempranas de la vida, pero los gemelos mayores
presentaron diferencias notables en el contenido general y la distri-
bución de la metilación del DNA y la acetilación de histonas. Más
aún, estas diferencias afectaron la expresión génica en los ge1nelos.
Esta investigación sugiere que los gemelos idé nticos sí difieren
desde el punto de vista epi.genético y que las diferencias fenotípicas
entre ellos pueden ser causadas por expresión génica diferencial.
CONCEPTOS
Las diferencias fenotípicas entre gemelos monocigóticos genética-
mente idénticos pueden deberse a efectos epigenéticos .
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
¿ Qué grado de diferencias esperaría observar en las secuencias de
bases del DNA y las marcas epigenéticas de gemelos monocigóticos?
a. Diferencias similares en la secuencia de bases del DNA y las mar-
cas epigenéticas.
b. Mayores diferencias en la secuencia de bases del DNA que en las
marcas epigenéticas.
c. Mayores diferencias en las marcas epigenéticas que en la secuen-
cia de bases del DNA.
d. Ninguna diferencia en la secuencia de bases del DNA ni en las
marcas epigenéticas.
624 CAPÍTULO 21
Desactivación de X
En mamíferos hen1bra, un cromosoma X de cada célula se desac-
tiva de manera aleatoria para que haya igual expresión de genes
ligados al cromosoma X en machos y hen1bras (véase cap. 4) .
Mediante un proceso denonúnado desactivación del cromoson1a
X, 1nuchos genes deJ cromosoma X desactivado son silenciados
de manera permanente y no se transcriben. Una vez que se desac-
tiva un cromosoma X particular de un a célula, ese mismo cromo-
soma X permanece desactivado cuando se replica el DNA, y la
1narca de desactivación se transmite a las células hija durante la 1ni-
tosis. Este fenómeno es responsable de la distribución en parches
de pig1nento negro y naranja observado en las gatas con manto
tortuga (véase cap. 4). La desactivación de X es un tipo de efec-
to epigenético, porque se debe a un cambio estable de la expre-
sión génica que se transmite a otras células.
Una gran cantidad de investigaciones demostró que un segmen-
to particular del cromosoma X denominado centro de desactiva-
ción de X, que tiene de 100.000 a 500.000 pb de longitud, con-
trola cuál de los cromosomas X se desactiva. La desactivación se
inicia en el centro de desactivación de X y después se extiende aJ
resto del cromosoma X desactivado. El examen del centro de
desactivación de X llevó al descubri1niento de varios genes que
desen1peñan un papel en la desactivación de un cromosoma X de
cada célula de las hembras y el mantenüniento del otro cromoso-
1na X activo (fig. 21-9).
E l elemento clave en la desactivación de X es un gen denomi-
nado Xist (para el transcrito específico de desactivación de X) que
codifica un RNA largo no codificante (lncRNA) de 17 000 pb de
longitud (fig. 21-10). Como su nombre lo implica, esta molécula
de RNA no codifica una proteína. En cambio, el lncRNA de Xist
recubre el cromoson1a X a partir del cual fue transcrito. El lncRNA
de Xist atrae después al complejo represor po lycomb 2 (PRC2) y,
finalmente, al complejo represor polycomb 1 (PRC l ). Estas pro-
teínas producen marcas epigenéticas, como trimetilación de la
lisina 27 de la histona 3 (H3K27me3) y otras modificaciones de
histonas que reprimen la transcripción. Con el tiempo, muchos
dinucleótidos CpG son metilados, lo que induce silenciamiento
permanente del cromosoma X desactivado.
anto el cromoso- El gen Xist de Xi ... que recubre
ma Xa como el Xi se transcribe a un Xi, pero no Xa.
t ienen el gen Xist. lncRNA ...
H3K27mc3
RNA de Xist
Cromosomas X
\
Gen / PCR2
~
Xist
---..... ~----L
1 1
. ..
Xa Xi Xa Xi Xa Xi Xa
activo inactivo
• El RNA de Xist recluta
PRC2, que produce
modificaciones de
histonas en Xi.
Figura 21 -9. En la desactivación del cromosoma X, el gen Xist
del cromosoma X inactivo produce un RNA largo no codifican-
te que lo recubre y suprime la transcripción.
En los ratones, hay dos eventos de desactivación separados.
Poco después de la fecundación, cuando el embrión alcanza el
estadio de 8 células, se desactiva el cromosoma X del progenitor
macho, mientras que el cromosoma X materno se mantiene activo.
En el embrión en desarrollo, el cromosoma X paterno se reactiva
durante la maduración del blastocisto. La desactivación se produ-
ce en etapas tempranas deJ desarrollo, pero ahora cuál de los cro-
mosomas X se desactiva es aleatorio: es igual de probable que se
desactive el cromosoma X deJ progenitor macho que el cromoso-
ma X del progenitor hembra. Desde este momento en adelante,
cualquiera de los cromosomas X desactivado permanece silencia-
do durante las divisiones celulares ulteriores. Sin embargo, algu-
nos genes del cromoso1na X desactivado escapan a la desactiva-
ción y siguen transcribi éndose. No se sabe cómo escapan estos
genes a la desactivación de X. Interesa destacar que, en los mamí-
feros marsupiales, el cromosoma X paterno es la copia que perma-
nece silenciada de manera permanente en todas las células.
Con10 ya se mencionó, la desactivación de X se debe a la trans-
cripción del gen Xist del cromoson1a X inactivo para producir
lncRNA de Xist, que recubre el cromosoma X inactivo e induce
cambios de la estructur a de la cromatina que silencian la trans-
cripción. Pero ¿qué sucede en el cromosoma X activo? ¿Por qué
no es recubierto por RNA de Xist y silenciado? Si bien todavía no
se conocen todos los detalles de este proceso, investigaciones
recientes demostraron que hay varios genes adicionales del cen-
tro de desactivación de X que codifican otros lncRNA. Estos
lncRNA ayudan a causar la desactivación de X del cromosoma X
inactivo, mientras que no silencian el cromosoma X activo (véase
fig. 21-9). Uno de ellos es el gen Tsix, que se transcribe en el cro-
mosoma X activo. El gen Tsix es antisentido respecto de Xist, lo
que significa que se superpone con el gen Xist y se transcribe a
pa1tir de la cadena opuesta (véase fig. 21-10), lo que produce un
lncRNA de Tsix que es complementario del lncRNA de Xist.
Mediante varios mecanismos, Tsi.x reprime la expresión de Xist en
el cromosoma X activo. Otro elemento importante es un gen
denominado Jpx, que codifica un lncRNA que estimula la trans-
cripción de Xist en el cro1nosoma X inactivo. Por lo tanto, Xist es
controlado por dos interruptores paralelos con efectos opuestos:
1) Jpx estimu la la expresión de Xist en el cromosoma X inactivo,
lo que causa transcripción de Xist e induce desactivación de X; y
2) Tsi.x reprime a Xist en el cromosoma activo, lo que determina
que Xist no se transcriba en ese cromosoma y evita la desactiva-
Cromosoma X
Centro de
..
desactivación
de X
Xi
Xist
DNA
5', 3'
3 5'
Jpx Tsix Xin
Figura 21-10. Varios genes dentro del centro de desactivación
de X interactúan para inducir la desactivación de un cromoso-
ma X y mantener activo el otro cromosoma X.
 Epi genética 625

Cuadro 21-2 Principales genes involucrados en la
desactivación del cromosoma X
Gen Codifica Acción del gen
Xist lncRNA Recubre el cromosoma X inactivo e induce silen-
ciamiento de la transcripción de muchos de sus
genes
Tsix lncRNA Inhibe la transcripción de Xist en el cromosoma
X activo
Jpx lncRNA Estimula la transcripción de Xist en el cremoso-
ma X inactivo
Xite lncRNA Sostiene la expresión de Tsix en el cromosoma X
activo, lo que inhibe a Xist y mantiene la trans-
cripción de genes del cromosoma X activo
ción. Asimismo, hay varios otros genes involucrados. Un gen de-
nominado Xite codifica un lncRNA que sostiene la expresión de
Tsix en el cromosoma X activo. El cuadro 21-2 resume los prin-
cipales genes involucrados en el proceso de desactivación de X.
Este proceso complejo asegura que, en cada célula fe1nenina, se
desactive un cromosoma X y el otro permanezca activo. Desde ha-
ce tiempo, los científicos han reconocido que la desactivación de X
también implica algún tipo de mecanismo capaz de contar los cro-
moson1as X, porque se desactivan todos excepto un cromosoma X
de cada célula. Por consiguiente, el único cromosoma X de las
células de un macho XY permanece activo (no se produce desacti-
vación del crom oson1a X) , y en las hembras XXX, se desactivan
dos cromosomas X (véase discusión sobre el corpúsculos de Barr
en el cap. 4). Todavía no se conoce bien el carácter de este mecanis-
mo de cuenta de cromosomas X. L.:►.!:!!:!!!!::!!:!!:!!!:!~:!:!::!:!!!::!:.!!!!!:!=~~
tina!. E stas diferencias fenotípicas son estables y se transmiten de
una célula a otra, pese al hecho de que las secuencias de DNA de
todas las células son iguales.
L as células madre son células indiferenciadas capaces de formar
todos los tipos de célula de un organismo, una propiedad denonri-
nada pluripotencia. Cuando una célula madre se divide y da ori-
gen a un tipo más especializado de célula, eJ programa de expresión
de genes de la célula se toma cada vez más fijo, de manera que cada
tipo celular particular expresa solo los genes necesarios para Hevar
a cabo las funciones de este tipo celular. Aunque no se conoce bien
el control de estos programas de expresión específicos de células,
los cambios de metilación del DNA y la estructura de la cromatina
desempeñan sin duda papeles importantes en el siJencia1njento de
algunos genes y la activación de otros.
Las células madre ofrecen una fuente potencial de células para
reparación de tejidos, tratamiento médico e investigación. En el
pasado, la única fuente de células 1nadre con capacidad de dife-
renciación en tejidos adultos eran células de embriones, pero
debido a preocupaciones éticas acerca de crear y utilizar embrio-
nes humanos para recoger cél ulas madre, los investigadores han
buscado desde hace tiempo la capacidad de inducir la desdiferen-
ciación de células somáticas adultas para que reviertan a células
madre. Estas células se denominan células madre pluripotentes
inducidas (iPSC). Ahora, los investigadores han creado de mane-
ra exitosa iPCS tratando fibrob lastos (células de tejido conjuntivo
humano totahnente diferenciadas) en cultivo con una cornbina-
Células adultas
Factores de
reprogramación
de iPS

Células iPS
CONCEPTOS
Los cambios epigenéticos son la base de la desactivación del
cromosoma X, en la que se silencia de manera permanente un
Endodermo Ectodermo
cromosoma X de las células femeninas. La desactivación de X se
(capa interna) (capa externa)
produce por la acción de varios genes del centro de desactiva-
ción de X que codifican RNA largos no codificantes. Los produc-
tos de estos genes interactúan para garantizar que un cromo-
+ t + !
soma X sea inactivo y uno permanezca activo en cada célula
femenina.
Células Neuronas Células
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5 pulmonares
Células
tiroideas
Célu la
pancreática Mesodermo
Células pigmentarias
epidérmicas
(capa media)

¿Cuál sería el efecto de introducir siRNA que degradan RNA de

Xist en una célula femenina? + ♦
•
! + ♦
- --
Células Células de Células Eritrocitos Células
Cambios epigenéticos asociados del músculo de lostúbulos de músculo
con la diferenciación celular miocardio esquelético renales liso
(en intestino)
Todas las células del cuerpo humano son idénticas desde el punto
de vista genético y, sin embargo, diferentes tipos celulares mues- Figura 21-11. Las células adultas diferenciadas pueden reprogramar-
tran fenotipos sorprendentemente distintos: una célula nerviosa es se para formar células madre pluripotentes inducidas (iPSC), capaces
bastante diferente en forma, tamaño y función de una célula intes- de diferenciarse a muchos tipos distintos de células.
626 CAPÍTULO 21
ción de factores de transcripción (fig. 21-11), aunque en realidad
menos del 1% de las células tratadas revierten a iPSC. Los fac to-
res de transcripción que inducen pluripotencia causan extensa
reprogramación epigenética y alteran los patrones de metilación
del DNA y modificaciones de histonas que se acumulan con la
diferenciación celular. Sin embargo, la investigación reciente ha
n1ostrado que las iPSC conservan una me1noria de su pasado y no
son completamente equivalentes a las células madre emb1ionarias
(las derivadas de embriones). Un estudio halló que, si bien los
patrones de metilación del DNA de las iPSC difieren mucho de
los de las células somáticas diferenciadas, las iPSC conservaban
algunas marcas de metilación de las células somáticas y que la
1netilación de las iPSC no era idéntica a la de las células n1adre
embrionari as. Otro estudio compar ó las modificaciones de hi sto-
nas de fibroblastos, iPSC y células madre embrionarias. Las iPSC
y las células madre embrionarias tenían muchas m enos marcas
H 3K27me3 y H3K9me3 que los fibroblastos, pero los investiga-
dores ta1nbién hallaron una cantidad significativamente mayor de
estas 111arcas en iPSC que en células madre embrionarias.
Impronta genómica
Por lo general, los organismos diploides tienen dos alelos en cada
locus autosómico, un alelo heredado de la madre y un alelo here-
dado de padre. Para la mayoría de los genes, se expresan an1bos
alelos, y el efecto de un alelo pruticular sobre el fenotipo es
independiente de cuál de los progenitores transmitió el alelo
a la descendencia. En cambio, para unos pocos genes, el sexo
del progenitor que aportó el alelo influye en la manera en que
este se ex presa: los alelos heredados de la madre y el padre
no son equivalentes (fig. 21-12). Este fenómeno, en el que el
sexo del progenitor que transmite el alelo detern1ina su expre-
sión, se denomina impronta genómica (véase cap. 5). Para
algunos genes con impronta genómica, se expresa el alelo
heredado del progenitor masculino y se silencia el alelo here-
dado del progenitor femenino; para otros genes, se expresa el
alelo heredado del progenitor femenino y se silencia el alelo
heredado del progenitor masculino. Como vin1os en el capí-
tulo 5, se considera que la impronta genómica se debe a dife- Cuando el alelo
rentes grados de metilación de los genes heredados de los mutante (A ) se1
progenitores. hereda del
Investigaciones previas sugirieron que el número de genes padre, ...
con impronta genó1nica era limitado, pero investigaciones
111ás recientes sugieren que la cantidad es 1nucho más alta. Un
estudio llevado a cabo por Christopher Gregg y co ls. en la
Harvard University observó que más de 1300 genes del cere-
bro de ratón muestran evidencia de impronta genómica.
Muchos de estos genes con impronta genómica no estaban
silenciados por completo: había sesgo de expresión, y un
sexo transmitía un alelo que tenía expresión más alta que el
alelo transmitido por el otro sexo. Gregg y cols. también
hallaron que .la impronta genón1ica era muy vaiiable; algunos .. . y se produce
genes tenían impronta genómica solo en determinados tejidos un fenotipo
o en ciertos períodos del desan·ollo. Lmutante.
La impronta genónúca guarda una serie de paralelos inte-
resantes con la desactivación de X. La mayoría de los genes
con impronta genómica se localizan en grupos de 3-12 ge-
nes que aparecen una región definida de un cromosoma par-
ticular. Cada grupo contiene genes que codifican proteínas,
así como genes que producen RNA no codificante. En cada
uno de los ejemplos bien estudiados, hay una región de con-
trol de la impronta genómjca que determina esta impronta; la
deleción de esta región destruye la capacidad de impronta genó-
mica. Además, la región de control de la impronta genómica
muestra diferentes modificaciones de la cromatina entre alelos
heredados de los progenitores de sexo masculino y femenino.
Cada grupo de impronta genómica contiene genes para uno o más
lncRNA que dese1npeñan un papel importante en la impronta
genómica y están, ellos mismos, sujetos a esta. Por ejemplo, el
gen del factor de crecimiento similar a la insulina 2 (/gf2) de los
seres humanos presenta impronta genómica; se expresa el alelo
l gf2 transmitido por el padre, mientras que se silencia el alelo /g/2
transmitido por la madre (véase fig. 5-18 de cap. S). Se requieren
varios lncRNA producidos por otros genes de la región de control
de la impronta genón1ica para el silenciarniento de genes de Igf2 de
las mujeres, aunque no se ha esclarecido cómo causan represión
de la transcripción.
Muchos de los grupos bien estudiados de genes con impronta
genón1ica se asocian con trastornos que se deben a la impron-
ta defectuosa. El síndrome de Beckwith-Wiedemann es uno de
estos trastornos. Los niños con este síndrome muestran creci-
miento excesivo durante el desan:ollo fetal y la primera infancia.
Asinúsmo, tienen tun1ores malignos embrionarios inusuales. El
síndrome de Beckwith-Wiedemann se asocia con impronta genó-
mica de un grupo de genes del cromosoma 11, incluido el gen
Jg/2. A menudo, los individuos con este síndrome presentan
ó Q
1
A 1 ! A+ A+ I A+ A 1
X
\ I \ I
1Cuando el alelo
mutante se
hereda de la
madre, ...
~ e L_ Proteína A 1
l !
Proteína A+ ~ se
l expresa. J Proteína A+ expresa ...
l ... y se produce un
fenotipo de tipo
silvestre.
Fenotipo Fenotipo de
mutante tipo silvestre
Figura 21-12. En la impronta genómica, la expresión de un alelo
depende de si este es heredado del progenitor macho o hembra. En
este caso, el alelo A 1 solo se expresa cuando es heredado del progenitor
macho, pero en otros casos, un alelo se expresa únicamente cuando es
heredado del progenitor hembra.

peq ueñas deleciones en eJ cromosoma l l que interfieren con el
proceso normal de impronta genómica. Por ejemplo, hay expre-
sión normal de /gj2 solo cuando se hereda del padre, pero en
algunos niños con síndrome de Beckwith-Wiede1nann, las dele-
ciones dentro del centro de impronta inducen la expresión de ale-
los de ambos progenitores. El resultado es que se produce dema-
siado lgj2, con el consiguiente crecimiento excesivo y cáncer. El
síndrome de Prader-Willi y el síndrome de Angelman son trastor-
nos que se deben a defectos de la impronta genómica en el cro-
mosoma 15 (véase cap. 15).
IMPRONTA E HIPÓTESIS DEL CONFLICTO GENÉTICO Muchos genes
con impronta genómica afectan el crecimiento embrionario ten1-
prano y fetal. Una posible expli cación de la impronta genómica es
la hipótesis del conflicto genético, que sugiere que hay presiones
evolutivas diferentes y contradictorias que actúan sobre alelos
1naternos y paternos para los genes (como /gj2) que afectan el
crecimiento fetal. Desde el punto de vista evolutivo, se favorecen
los alelos pate111os que maximizan el tamaño de la descendencia,
porque el peso de nacimiento se asocia firmemente con m.o rtali-
dad infantil y salud del adulto. Por consiguiente, es ventajoso que
el progenitor de sexo masculino transmita los alelos que pron1ue-
ven máximo crecimiento fetal de su descendencia. En can1bio, los
alelos n1aternos que causan crecimiento fetal más limitado son
favorecidos: dedicar demasiados nutrientes a cualquier feto puede
limitar la capacidad de la madre para reproducirse en el futuro y
dar a luz a bebés muy grandes tam bién es difícil y riesgoso. La
hipótesis del conflicto genético predice que se desarrollará
impronta genórnica: habrá expresión máxima de copias paternas
de los genes que afectan el crecimiento fetal , mientras que las
copias maternas de los mismos genes se expresarán en forma
1nenos activa o incl uso serán silenciados. E l /gj2 cumple con este
patrón: el alelo paterno es activo y promueve el crecimiento; el
alelo materno es silencioso y no contribuye al crecimiento.
Hallazgos recientes den1uestran que la copia paterna de /gj2 pro-
CONCEPTOS
La impronta genómica es causada por diferencias epigenéticas de los
alelos heredados de progenitores de sexo mascu lino o femenino. La
hipótesis del conflicto genético sugiere que la impronta genómica se
desarrolla debido a presiones evolutivas contrad ictorias que actúan
sobre los alelos maternos y paternos.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
¿Cuá l de las siguientes afirmaciones es verdadera acerca de la
impronta genómica?
a. El sexo del progenitor que transmite un alelo influye en la expre-
sión de este en la descendencia.
b. El sexo de la descendencia influye en la expresión de un alelo
heredado de uno de los progenitores.
c. El sexo del progenitor influye en la manera de transmisión del
alelo a la descendencia.
d. El sexo de la descendencia influye en cuál de los alelos es hereda-
do del progenitor.
Epigenética 627
mueve el crecimiento fetaJ al dirigir más nutrientes maternos al
feto a través de la placenta.
21.4 El epigenoma
En 2003, los investigadores declararon que, en esencia, se había
secuenciado todo el genoma humano. Este monumental logro
aportó una enonne cantidad de información acerca de cómo se
codifica la información genética dentro del genoma. Aun así, la
secuencia de bases del DNA es solo un registro parcial de la infor-
mación heredable. Como se comentó, la estructura de la cro111ati-
na conti ene información epigenética adiciona!: la infonnación
que es heredable y afecta la manera de expresión de la secuencia
de bases. El patrón global de las n1odificaciones de la cron1atina
de cada organismo individual se denomina epigenoma. En los
últimos años , se han desarrollado técnicas para detectar y descri-
bir modificaciones epigenéticas en todo el geno1na.
DETECCIÓN DE METILACIÓN DEL DNA Se han desarrollado una serie
de técnicas para examinar los niveles de metilación del DNA.
Algunas se basan en enzimas endonucleasas de restricción que
realizan cortes bicatenarios en el DNA en secuencias de bases
específicas (véase cap. 19). Algunas enzimas de restricción son
sensibles a la metilación y no cortarán una secuencia que contie-
ne 5-lnetilcitosina, mientras que otras enzitnas de restticción son
insensibl.es a la metilación. Mediante el corte del DNA con enzi-
mas sensibles a la metilación y con enzimas que no lo son, y el
análisis de los fragmentos resultantes, es posible determinar los
patrones globales de metilación.
Una técnica más precisa y a1npliamente usada para analizar la
metilación del DNA es la secuenciación con bisulfito (fig. 21-13).
En esta técnica, primero el DNA genómico se trata con bisulfito
de sodio, que convierte químicamente la citosina no metilada en
uracilo. Luego, se detectan los uracilos como timina durante la
secuenciación. En cambio, la 5-metilcitosina no es alterada quí-
micamente por el tratamiento con bisulfito y se detecta como cito-
sina durante la secuenciación (véase una discusión de la secuen-
ciación del DNA en el cap. 19). Medi ante secuenciación del DNA
genómico con tratamiento con bisulfito o sin él, los investigado-
res pueden determinar las localizaciones de todas las copias de 5-
metilcitosina en el DNA.
DETECCIÓN DE MODIFICACIONES DE HISTONAS Las modificaciones
de histonas pueden detectarse rompiendo la cromatina en fragmen-
tos y aplicando un anticuerpo específico contra una modificación
de histonas particular, un proceso denominado inmunoprecipita-
ción de la cro1natina (abreviado ChIP; véase cap.17). El anticuer-
po hace que la cromatina con la modificación de histonas precipi-
te y se separe de los fragmen tos de cro1natina sin la 1nodificación.
Después, se elimina la proteína por digestión con una enzi1na que
degrada la proteína pero no el DNA, y se secuencia el fragmento
de DNA con el que estaba asociada la histona. Esto aporta infor-
mación acerca de dónde se producen las n1odificaciones de histo-
nas en el genon1a.
MARCAS EPIGENÉTICAS EN TODO EL GENOMA Mediante la aplica-
ción de estas técnicas, los genetistas han comparado los epigeno-
mas de diferentes tipos de células. Por ejemplo, los investigado-
res determinaron la distribución de 5-n1etilcitosina en todo el
628 CAPÍTULO 21

ÓAJgunas cltosinas Otras citosinas genoma en dos tipos celulares: 1) una célula madre humana in-
no están metiladas. están metiladas. diferenciada y 2) un fibroblasto. Los investigadores hallaron di-
ferencias generalizadas en los patrones de metilación de estas
células. El hallazgo de que los patrones de metilación del DNA
varían entre los tipos celulares avala la idea de que la metilación
de la citosina proporciona los medios por los que los tipos celula-
res 1nantienen en fonna estable s us diferencias durante eJ desarro-
El tratamiento con llo. Otros investigadores compararon los epigenomas de células
bisulfito de sodio Tratamiento Sin cancerosas y células normales y observaron marcas epigenét:icas
convierte las citosi- con bisulfito tratamiento
nas no metiladas en de sodio
distintas asociadas con cáncer.
uracilo, . .. De modo similar, los investigadores han mapeado las localiza-
ciones genómicas de las modificaciones de histonas en diferentes
tipos celul ares. Estos estudios detectaron modifi caciones de his-
tonas específicas asociadas con pro motores e intensificadores de
genes activos. En un estudio, los investigadores mapearon nueve
marcas epigenéticas diferentes en nuevos tipos distintos de célu-
las humanas. Pudieron determinar cómo variaban las marcas de la
cromatina en los tipos celulares y compararon las marcas epige-
néticas asociadas con genes activos y reprinudos. Puesto que las
marcas epigenéticas específicas suelen asociarse con elementos
reguladores, como promotores e intensifica.dores, los investigado-
res han utilizado la presencia de estas marcas para mapear las
ATTTACGTT A ATCTACGTTA localizaciones de estos elementos reguladores en todo el genoma.

¿~
9 ... que se leen durante
_/
la comparación de las secuenclaj
1

~
~~s secuencias como
1na. l de DNA tratadas y no tratadas revela
qué citosinas fueron metiladas.
CONCEPTOS
El epigenoma es el conjunto completo de modificaciones de la croma-
Figura 21-13. Puede utilizarse secuenciación con bisulfito tina que posee un organismo individual.
para determinar las localizaciones de 5-metilcitosinas.

RESUMEN DE CONCEPTOS

■ El término epigenética, acuñado por Conrad Waddington, se
refiere en la actualidad a efectos mediante los cuales se trans-
miten fe notipos a otras células o a generaciones futuras, pero
que no incluyen diferencias en la secuencia de bases del DNA.
■ Muchos fenotipos epigenéticos se deben a cambios de la
estructura de la cro matina. Los efectos epigenéticos se produ-
cen a través de metilación del DNA, modificación de histonas
y moléculas de RNA.
■ Los cambios epigenéticos son estables, pero pueden ser afec-
tados por factores a1nbientales.
■ Tres mecanismos moleculares subyacen a numerosos fenoti-
pos epigenéticos: 1) cambios de los patrones de me tilación del
DNA, 2) modificaciones químicas de las proteínas histonas y
3) moléculas de RNA que afectan la estructura de la cromati-
na y la expresión génica.
■ Algunos efectos epigenéticos se deben a metilación del DNA,
en la que las bases citosina son metiladas para formar 5-metil-
citosina. A menudo, la metilación tiene lugar en dinucléotidos
CpG. La presencia de 1netil citosina se asocia con represión de
la transcripción.
■ Las regiones de DNA con muchos dinucleótidos CpG se
denominan islas CpG. La metilación de islas CpG cerca de un
gen suele inducir represión de la transcripción.
■ La metilacíón del DNA inhibe la transcripción al interferir
con la unión de factores de transcripción y otras proteínas
requeridas para que se produzca la transcripción. Asimismo,
la metilación del DNA atrae proteínas que reprimen la trans-
cripción y enzimas histona deacetil asa que n1odifican la
estructura de la cromatina.
■ La metilación del DNA a través de la división celular es man-
tenida por enzimas metiltransfersasas que reconocen la meti-
lación de dinucleótidos CpG de una cadena de DNA y añaden
grupos metilo a las bases citosina no metiladas de la otra
cadena.
■ Las modificaciones de bistonas alteran la estructura de la cro-
matina. Pueden transmitirse a través de la división celular.
■ Las moléculas de RNA causan modificación de la cromatina
mediante diversos procesos.
■ La paramutación es una alteración heredable de un alelo por
otro alelo, sin ningún cambio de la secuencia de DNA. En
el maíz y los ratones, es mediada por moléculas de RNA
peq ueñas.
■ Las experiencias en etapas tempranas de la vida pueden pro-
vocar cambios epigenéticos que tienen efectos persistentes
sobre el comportamiento.

■ Los agentes químicos ambientales pueden causar efectos epi-
genéticos que se transmiten a generaciones posteriores.
■ Las modificaciones epigenéticas tienen efectos sobre el meta-
bolismo, que se extienden por generaciones.
■ Las diferencias fenotípicas entre gemelos monocigóticos idén-
ticos desde el punto de vista genético pueden deberse a efec-
tos epigenéticos.
■ La desactivación de X se produce cuando un cromoson1a X de
células femeninas es silenciado en forma permanente. Los
cambios epigenéticos inducen la desactivación del cromosoma
TÉRMINOS IMPORTANTES
células madre (p. 625) centro de desactivación de X
células 1naclre pluripotentes (p. 624)
inducidas (p. 625) epialelos (p. 620)
l. b 5. No habría RNA de Xist para recubrir el cromosoma X , y no
2. b se produciiia desactivación del cromosoma X. Ambos cromo-
3. d
4. c
PROBLEMAS RESUELTOS
Problema
El alelo bl codifica un factor de transcripción que estünula la producción de antocianina, un pigmento violeta
de las plantas. ¿Cuál sería el efecto de la deleción de las siete repeticiones en tándem que están localizadas
100 000 pb e n sentido 5' respecto del locus bl en el maíz?
Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Los efectos de la deleción de las repeticiones.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
■ El locus bl codifica un factor de transcripción que estimu-
la la producción de antocianina en las plantas.
■ Las siete repeticiones en tándem están localizadas en sen-
tido 5 1 respecto del locus bl.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Paramutación en el maíz1 e n la Sección 21.3.
Pasos de la solución
La información proporcionada en el texto indica que la planta
B-1 B-1 tiene normalmente alta expresión del locus bl, produce
Epigenética 629
X y requieren la acción de varios genes que codifican RNA
largos no codificantes.
■ La impronta genómica se produce cuando la expresión de un
gen depende de cuál de los progenitores transmitió el gen. Es
causada por cambios epigenéticos de la estructura de la cro-
matina, que se transmiten a la descendencia. La hipótesis del
conflicto genético sugiere que la impronta genó1nica aparece
debido a presiones evolutivas contradictorias que actúan sobre
alelos maternos y paternos.
■ El epigenoma es el conjunto completo de modificaciones de
la cromatina que posee un organismo individual.
epigenoma (p. 627) marcas epigenéticas (p. 618)
hipótesis del confli cto genético paramutación (p. 619)
(p. 627) pluripotencia (p. 625)
somas X permanecerían activos.
6. a
antocianina y es de color violeta. Se requieren
repeticiones en tándem para la alta transcripción
Recuerde: los
del locus bl, que codifica un factor de transcrip- intensificado res
ción que estimula la p roducción de antocianina, estimulan la trans-
un pigmento violeta. Las repeticiones en tándem cripción en genes
que pueden estar
actúan co1no un intensificador y estimulan la alejados del inten-
transcripcjón del locus bl en el genotipo B-1 B-1. sificador (véase
cap 17).
Sin la acción si milar a un intensifi cador de las
repeticiones, habrá mínima transcripción de bl y
escasa producción de antocianina. Esto determina-
rá plantas B-l B-l ligeramente pigmentadas, el
mismo fenotipo que suele observarse en plantas
con genotipo B' B'.
Las repeticiones e n tándem también codifican siRNA de 25
nucleótidos de longitud, que son requeridos para la paramuta-
ción (conversión del alelo B-l en alelos B'*). Por con siguiente,
la deleción de las rep eticiones en tándem elimin aría la capaci-
dad de los alelos B ' para llevar a cabo la paran1utación.
630 CAPÍTULO 21
Introducción
l. ¿Cuál es la hipótesis del fenotipo ahorrador? ¿Cómo ayuda a
explicar los efectos a largo plazo de la dieta observados entre
los residentes de Óverkalix?
Sección 21.1
*2. ¿Cuáles son las características ímportantes de un rasgo epi-
genético?
Sección 21.2
3. ¿Cuáles son los tres mecanismos moleculares que alteran la
estructura de la cromatina y son responsables de muchos
fenotipos epigenéticos?
4. ¿Cuál es la principal forma de metilaci6n del DNA que se
observa en eucariontes? ¿En qué tipo de secuencia del DNA
suele hallarse metilación del DNA?
5. ¿Cómo reprime la transcripción la metilación del DNA?
6. Explique en forma sucinta cómo se transmiten los patrones de
n1etilación del DNA a través de la división celular.
7. ¿ Qué tipos de modificaciones de histonas son responsables de
los fenotipos epigenéticos?
Sección 21.3
8. ¿Qué es la paramutación? ¿Cuáles son las características
clave de este fenómeno?
9. Desc1iba en forma sucinta la paramutación en el locus Kit
de ratones. ¿Qué evidencia sugiere que las moléculas
PREGUNTAS Y PROBLEMAS DE APLICACIÓN
20. La introducción de este capítulo describe los efectos a largo
plazo de la dieta sobre los residentes de Óverkalix, Suecia.
a. ¿Qué evidencia sugiere que estos efectos se deben a
efectos epigenéticos?
b. ¿ Qué evidencia adicional ayudaría a demostrar que estos
cambios se deben a cambios epigenéticos?
Sección 21.1
21. ¿En qué se diferencian los rasgos epigenéticos de los rasgos
genéticos tradicionales, como diferencias del color y la
forma de los guisantes que estudió Mendel?
22. La epigenética se ha descrito como "herencia, pero no
como la conocemos". ¿Considera que esta es una buena
definición? ¿Por qué o por qué no?
Sección 21.2
23. ¿Qué se requeriría para probar que un fenotipo es causado
por un cambio epigenético?
de RNA pequeñas desempeñan un papel en este fenó-
meno?
10. ¿Qué evidencia sugiere que los cambios epigenéticos
influyen en la cognición en los ratones?
11. Explique cómo la vinclozolina actúa como disruptor
endocrino.
12. Dé un ejemplo de efecto epigenético transgeneracional
de la dieta sobre el metabolismo.
13. ¿Qué evidencia sugiere que las diferencias entre gemelos
1nonocigóticos pueden ser causadas por efectos epigenéti-
cos?
14. ¿De qué manera la desactivación de X es un fenotipo
epigenético?
15. Describa en forma sucinta los procesos moleculares que
determinan que un cromosoma X de cada célula femenina
sea activo y el otro cromosoma X sea desactivado.
16. ¿Qué son las células madre pluripotentes inducidas? ¿Cómo
se obtienen a partir de células somáticas adultas?
17. Defina impronta genómica
18. ¿ Cuál es la hipótesis del conflicto genético sobre el origen
de la impronta genómica?
Sección 21.4
19. ¿Qué es el epigenoma?
24. ¿Cuál de las abejas de la figura 21-4 (la obrera o la reina)
tendrá más copias de 5-metilcitosina en su DNA?
Explique su respuesta.
*25. ¿Cuál sería el efecto de la deleción del gen Dnmt3 en las
abejas?
*26. En los eucariontes, gran parte de la rnetilación del DNA se
produce en dinucleótidos CpG, pero algunos nucleótidos
de citosina individuales tan1bién son metilados para for-
mar 5-metilcitosina. Considerando que usted conoce el
proceso n1ediante el cual la n1etilación del DNA en los
dinucleótidos CpG se 1nantiene a través de la clivisión
celular, ¿considera que la metilación en nucleótidos C
individuales también se mantendría por el mismo proceso?
Explique su razonamiento.
Sección 21.3
27. ¿Cuál será el fenotipo de la progenie producida por un
cruzamiento entre el individuo F 1 de la figura 21-5 y una
planta con genotipo B-1 B-1?
 Epi genética 631

*28. Un científico realiza un experimento en el que aleja de la (a)

madre a las crías de ratas en el momento del nacimiento y - Control
o
hace que los estudiantes de genética las alimenten y las 250 Vinclozolina
críen. Asu1niendo que los estudiantes no lamen ni acicalan -t:-
::::s
V

a las ratas bebé como normalmente hacen las ratas madre,

¿qué efectos conductuales y epigenéticos a largo plazo
esperaría observar en las ratas cuando crezcan?
Q)
+-'
Q)
-o
ro
200
*P<0,001

1 I t
*29. Se expuso a ratas hembra preñadas a una dosis diaria de
....
V'l

~
V'l
e 150
t
100 o 200 mg/kg de vinclozolina, un fungicida usado ro
....
+-'
con frecuencia en la industria vitivinícola (M . D. Anway
Dl DATOS

y cols. 2005. Science 308:1466-1469). Se entrecruzó a

t
Q)

o I T
la descendencia F 1 de las ratas hembra expuestas para ~
ro
100 I
producir ratas F2, F3 y F4 • Ninguna de las ratas F2, F 3 o u
V'l
I
-o
F 4 fue expuesta a vinclozolina. Se examinaron los testí- +-'
c..
o 50
culos de las ratas macho F1-F4 , y se los comparó con los c..
ro
de ratas control de he1nbras que no habían sido expues- V'l
ro
tas a vinclozolina (véanse gráficos adj untos). Estos efec- ::::i o
tos se observaron en n1ás del 90% de los descendientes
macho F 1-F 4 . Más aún, el 8% de los machos F 1-F4 de las Generaciones
hembras expuestas a vincJozolina prese ntaro n infertili-
dad completa, en comparación con 0% de los machos (b)
F 1-F4 de las hembras control. El an álisis molecular de ::J' 40
los testículos demostró que los patrones de metilación E
del DNA difuieron entre la descendencia de las hembras --
V 'l
Q)
e
35
expuestas a vinclozolina y la descendencia de las hem- o
T
bras co ntro l. Ofrezca un a explicació n para los efectos
transgeneracionales de la vinclozoJina sobre la fertilidad
masculina .
-E
V 'l
Q)
"O
30

25 I
*
T

30. Sobre la base de la información de estudios de los efectos

oN
o
+-' 20
T
a largo plazo de la dieta sobre el metabolismo, ¿cuáles ro *
T
E
....
podrían ser ]os efectos sobre los hijos y nietos de habitan- Q)
c.. 15
tes de Óverkalix expuestos a hambruna durante la infan- V'l
Q)

cia? Incluya en su respuesta los tipos de cambios epigené- Q)

"O
10
ticos de la cromatina que esperaría observar y los efectos o
....
fenotípicos sobre el metabolismo de los lípidos y el coles- E o.5
•::::S
terol. z o
*31. ¿Cuál sería el efecto sobre la desactivación de X al agre-
gar siRNA que eliminaran los productos de cada uno de Generaciones
los siguientes genes?
(e)
a. Xist
90
b. Jpx
ro
-o 80
~ ,:
Sección 21.4 en-
-o t?. 70 ,-
32. Un fragmento de DNA con la siguiente secuencia de bases
tiene algunas bases citosina que están metiladas (indicadas ~ro ¡·- 60 t *
T
*
T
.::, oN
por C*) y otras qu e no lo están. Para determi nar la locali-
~ B 50
zación de las citosinas metiladas y no metiladas, los inves- ro
*T
tigadores secuenciaron eBte fragmento tratándolo con ·15
E
E 40
Q)

bisulfito de sodio y sin este tratamiento. Indique la Q)

c..
V'l
-o Q) 30
secuencia de bases que se leerá con trata1niento con bisul- o V'l
·- o
fi to y sin él. ~ Q) 20
E .::,
~
a.. 10
- ATCGC*GTTAC*ATTGC* ATCA-
o
33. Una genetista está interesada en determinar las localizacio- Generaciones
nes de las citosinas metiladas dentro de un fragmento de
DNA. Trata algunas copias del fragmento con bisulfito de (Gráficos modificados de M. D. Anway y cols., 2005, Science 308: 1466: 1469).
 632 CAPÍTULO 21
sodio y deja algunas copias sin tratar. Luego, secuencia las
copias tratadas y no tratadas del frag1nento y obtiene los
siguientes resultados. Indique la secuencia original del frag-
mento de DNA y 1a presencia de citosinas 1netiladas.
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 21.3
34. ¿Sería probable que la hipótesis del conflicto genético
explicara la itnpronta genón1ica para genes involucrados en
la memoria de adultos? ¿Por qué o por qué no?
35. En los últimos años, se han desarrollado técnicas para clo-
A::"''"' nar mamíferos a través de un proceso denominado transfe-
!,0~ rencia nuclear, en la que se transfiere el núcleo de una célu-
la somática a un óvulo del que se ha extraído el material
nuclear (véase cap. 22). La investigación ha demostrado
que cuando se transfiere el núcleo de una célula so1nática
diferenciada a un óvulo, solo un pequeño porcentaje de los
embriones resul tantes completan el desarrollo y muchos de
los que lo hacen mueren poco después del nacimiento. En
cambio, cuando se transfiere un núcleo de una célula 111adre
e1nbrionruia indiferenciada a un óvulo, el porcentaje de
e1nbriones que completan el desarrollo es significativan1ente
más alto (W. M. Rideout, K. Eggan y R. Jaenisch. 2001.
Science 293: 1095-1098). Proponga una posible razón por la
Secuencia sin tratamiento -AATTGCCCGATCGATTA-
AGCCA-
Secuencia con tratamiento -AATTGTTTGATCGATTA-
AGCTA-
que el desarrollo exitoso de en1briones clonados es más alto
cuando el núcleo transferido proviene de una célula madre
embrionaria indiferenciada.
Sección 21.4
36. Se ha propuesto la utilización de células madre embriona-
rias para reemplazar células que son destruidas por enfer-
1nedad o lesión. Debido a las preocupaciones éticas respec-
to de la creación y destrucción de en1briones para producir
células madre embrionarias, los investigadores han intenta-
do crear células pluripotentes inducidas (iPSC). En este
capítulo, analizamos estudios que muestran que las iPSC
conservan algunas marcas epigenéticas de las células dife-
renciadas adultas de las que se obtuvieron. ¿Qué implica-
ciones podría tener esta investigación en los intentos de
emplear iPSC para que vuelvan a crecer células y tejidos?
 22
Genética del desarrollo
e inmunogenética

El origen del espinoso sin espinas

Los peces espinosos o espinochos (Gasterosteus aculeatus) son
curiosos peces pequeños. Pese a su tamaño (solo miden alrede-
dor de 5 cm, 2 pulgadas de longitud), están fuertemente acora-
zados, con placas protectoras en el dorso, los costados y el vien-
tre, y tienen tres espinas en la superficie dorsal, lo que da ori-
gen a su nombre. Cada pez tiene también dos espinas pélvicas
impresionantes, que están fijadas a la cintura pelviana y se pro-
yectan hacia afuera por los costados (fig. 22-1). Las espinas dor-
sales y péJvicas dificultan la deglución de los espinosos, lo que
les permite sobrevivir en un medio en el que un pez de 5 cm no
protegido es una presa fácil para numerosos predadores.
La mayoría de los espinosos son marinos, viven en el océa-
no, pero se pueden hallar algunas poblaciones aisladas en el
lagos de agua dulce tierra adentro. En No1terunérica, estas
poblaciones de agua dulce se originaron hace 1O000 a 20 000
años, al final de la última era glacial, cuando los espinosos
marinos invadieron los lagos. M uchas poblaciones de espino-
Las alteraciones de secuencias reguladoras clave suelen causar cam- sos de tres espinas de los lagos han perdido su armadura y sus
bios del desarrollo importantes. Las mutaciones de un intensificador del espinas, quizá por la ausencia de predadores de peces que
gen p;txt causan la pérdida de aletas pélvicas en poblaciones de agua podrían comerlos, por el escaso calcio presente pru·a desarroJJar
du lce de espinosos (aquí mostrados). (Barrett & MacKay/AII Canada las placas y espinas, y porque los predadores invertebrados
Photos/Corbis). hallados en los lagos capturan a los peces agarrándose de sus
espinas. Desde hace tie1npo, los biólogos se han interesado por
la manera en que Los espinosos marinos r ealizaron su transición evolutiva del ambiente mari-
no al de agua dulce: ¿cómo un pez fuertemente acorazado pierde sus espinas? La investiga-
ción llevada a cabo por ge111etistas del desarrollo ha comenzado a responder esta pregunta.
En 1998, el genetista David Kingsley de la Stanford Unjversity inició una colaboración con
Dolph Schluter, un biólogo de la evolución de la University of British Columbia. Su objetivo
era comprender cómo los espinosos de tres espinas perdieron sus espinas pélvicas durante La
transición evolutiva de amlbientes marinos a los de agua dulce. Los científicos cruzaron un
espinoso marino he1nbra, q ue tenía espinas, con un macho del lago Fax.ton, Colun1bia
Británica, que carecía de espinas pélvicas. Todos los peces F 1 de este cruzamiento tenían espi-
nas pélvicas. Después, cruzru·on dos de los peces F 1 , lo que produjo una progenie total de 375
peces F2 . Esta progenie F 2 mostró un amplio espectro de variación de las espinas pélvicas:
algunos tenían espinas totalmente desarrolladas, algunos carecían en absoluto de espinas y
otros tenían diversos grados de reducción de las espinas.
Luego, Kingsley y cols. exa1ninaron la asociación de espinas pélvicas de la progenie F 2 y la
herencia de n1arcadores genéticos en todo el genoma. Observaron que la mayor parte de la
variación de las espinas pélvicas se asociaba con marcadores genéticos de una región particu-
lar del cromosoma 7 . Interesa destacar que esta misma región contiene Pitxl , un gen que
suele expresarse en las patas traseras de los vertebrados en desarrollo. Los ratones con una
1nutación del Pitxl suelen tener patas traseras reducidas, así corno otras anomalías del desa-
633
634 CAPITULO 22
(a) Espinosos marinos
Espinas
pélvicas
(b) Espinosos de agua dulce
Figura 22-1. Las poblaciones marinas de espinosos tienen espinas
pélvicas (a), pero las espinas están reducidas o faltan en los espino-
sos de numerosos lagos de agua dulce (b). (Adaptado con autorización
de Macmil lan Publishers Lt d: Neil H. Shubin and Randall D. Dan,
Evolutionary Biology: Lost and Found. Nature 428, 703-704 [15 april
2004), copyright 2004).
espinas pélvicas. Los peces sin espinas de otros lagos de Canadá, Alaska e incluso Islandia tan1-
bién tenían deleciones del intensificador, pero peces de diferentes lagos presentaban distintas
deleciones. Esta observación s ugiere que, durante el curso de la evolución, las espinas se han per-
dido múltiples veces por selección natural que actúa sobre diferentes 1nutaciones que tienen el
mi smo efecto fenotípico.
L a historia sobre cómo el espinoso perdió sus espinas ilustra
q ue puede haber modificaciones anató1nicas importantes a
través de pequeños cambios genéticos en secuencias regul adoras
clave que influyen en el desarrollo, un tema en todo este capítulo
sobre el control genético del desarrollo. El capítulo comienza
considerando cómo se produce la diferenciación celular, no a tra-
vés de la pérdida de genes, sino más bien por modificación de su
expresión. Después, analizamos el control genético del desarrollo
temprano de emb1iones de Drosophila, uno de los sistemas de
desarrollo mejor conocidos. A continuación, consideramos el
control genético de la estructura flor al de las plantas, otro sistema
n1odelo bien estudiado. Al final del capítulo, tratamos el desarro-
llo de la inmunidad y su control genético.
22.1 El desarrollo se produce mediante
la determinación celular
Todo organismo multicelular co111ienza la vida como un óvulo
fecundado unicelular. E ste cigoto unicelular presenta divisiones
celulares repetidas, lo que finalmente produce millones o trillones
de células que constituyen un organismo adulto completo. Al
principio, cada célu la del embrión es totipotente: tiene la posibi-
lidad de evolucionar a cualquier tipo celular. Muchas células de
plantas y hongos siguen siendo totipotentes, pero las células ani-
1Tollo. Esta observaci ón sugirió que las mutaciones del gen
Pitxl podrían ser responsables de la ausencia de espinas pél-
vicas en las poblaciones de espinosos de agua dulce. Pero
cuando los investigadores examinaron las secuencias de
DNA del gen Pitxl en espinosos de tres espinas marinos y
de agua dulce, no hallaron diferencias que pudieran alterar la
secuencia de aminoácidos de la proteína codifi cada por el
gen. Lo que sí detectaron fue que la expresión del gen Pitxl
difería entre peces marinos y de agua dulce. Los espinosos
con aletas pélvicas expresaban Pitxl en la región pélvica; los
espinosos sin aletas pélvicas expresaban Pitxl en otros teji-
dos, pero el gen era con1pletamente inactivo en la región pél-
vica. Esto sugirió que, aunque eJ gen Pitxl en sí 1nis1no no
había mutado en los peces sin espin as, mutac.iones de los
elementos reguladores que influyen en la expresión de Pitxl
podrían ser la fuente de variación en presencia o ausencia de
espinas pélvicas.
En 2010, Kingsley y cols. localizaron la mutación que
causa la ausencia de espinas en las poblaciones de agua
dulce de los espinosos de tres espinas. HalJ aron un intensifi-
cador a 500 pb en dirección 5' respecto del gen Pitxl. Los
intensificadores son secuencias de DNA que promueven la
transc1ipción de genes distantes, a menudo en forma especí-
fica de tejido (véase cap. 17) . Los investigadores determina-
ron que eJ pez sin espinas del lago Paxton tenía una deleción
que eliminaba este intensificador, lo que impedía la expre-
sión de Pitxl y, finalm.e nte, dete1minaba la pérdida de las
males en general están destinadas a convertirse en tipos específi-
cos de células después de solo algunas de las primeras divisiones
embrionarias. Este compromiso a menudo se produce mucho an-
tes de que una célula comience a mostrar características de un ti-
po celular particular; cuando se produce este compromiso, la cé-
lula no p uede volver atrás y transformarse en otro tipo celular.
La célula se compromete por un proceso denominado determi-
.,
nac1on.
Durante muchos años, el trabajo de los biólogos del desarro11o
se li1nitó a describir los cambios que tenían lugar en el curso del
desarrollo, porque no existían técnicas para evaluar los procesos
intracelulares subyacentes a estos cambios. Pero en los últimos
años, las poderosas técnicas genéticas y 1noleculares han ejercido
una enorn1e influencia en el estudio del desarrollo; por ejemplo,
la secuenciación del DNA ha aportado mucha información acer-
ca de la naturaleza y la organización de las secuencias de DNA
que controlan procesos del desarrollo. En algunos sistemas mode-
lo, con10 Drosophila y Arabidopsis, están empezando a conocer-
se los 1necanismos moleculares que determinan tales cambios.
Si todas las células de un organismo 1nulticelular de1ivan de la
misma célula original, ¿cómo surgen los diferentes tipos celula-
res? Antes de la década de 1950, se consideraban dos hipótesis.
Una posibilidad era que, durante el desarrollo, hubiera pérdida o
alteración selectiva de genes, lo que hacía que diferentes tipos
 Genética del desarrollo e inmunogenética 635

- Se fragmenta tejido
del f loema de una
zanahoria ...
... y se aíslan
células
individuales.
Se coloca una sola célula
en un medio nutritivo
que contiene hormonas
.. ' ... y finalmente da
I~~igen a una planta de
~ nahoria completa .
1111

de crecimiento .. .

Figura 22-2. Muchas plantas pueden clonarse a partir de células individuales aisladas. Este tipo de experi-
mento demuestra que no se pierde nada del material genético original durante el desarrollo de la planta.

celulares tuvieran distintos genomas. La otra alternativa era que
cada célula contuviera la misma información genética, pero
que se expresaran diferentes genes en cada tipo celular. Los resul-
tados de los primeros experimentos de clonación ayudaron a dilu-
cidar esta cuestión.
Experimentos de clonación en plantas
En la década de 1950, Frederick Steward desairolló métodos para
clonar plantas. Disgregó el tejido del floema de la raíz de una
zanahoria al separar y aislar células individuales y después colo-
có las células individuales en un medio estéril que contenía
nutlientes y otras sustancias requeridas para el crecimiento.
Stewai·d tuvo éxito en lograr que las células crecieran y se divi-
dieran, y fmalmente obtuvo zanahorias comestibles completas a
partir de células únicas (fig. 22-2). Como todas las partes de la
planta se regeneraron a partir de una célula especializada del flo-
ema, concluyó en que cada célula del tloe1na contenía el poten-
cial genético de una planta completa; nada del material genético
original se perdía durante la determinación.
renciadas en el tejido intestinal que se utilizaron de manera inad-
vertida corno fuente de los núcleos.
En 1997, los investigadores del Roslin Institute de Escocia
anunciaron que habían clonado con érito una oveja utilizando
material genético de una célula diferenciada de un animal adulto.
Para llevai- a cabo este experi mento, fusionaron una célula de la
ubre de un a oveja Finn Dorset de cara blanca con un óvu l.o sin
núcleo al que estimularon eléctricamente para iniciar su desarro-
llo. Después de permitir que el embrión creciera en el laboratorio
durante una semana, lo implantaron en una oveja escocesa de cara
negra que actuó como madre sustituta. Dolly, el primer mrunífero
clonado a paitir de una célula adulta, nació el 5 de j ulio de 1996
(fig. 22-3). Desde entonces, se clonaron una serie de otros anima-
les, como ovejas, cabras, ratones, conejos, vacas, cerdos, caballos,
mulas, perros y gatos a partir de células adultas diferenciadas.
Importa destacar que, aunque Dolly y otros mamíferos clonados
contienen el 1nismo material genético nuclear que el de su proge-
nitor clonado, no son idénticos en los genes citoplasmáticos, cotno
los del cromosoma mitocondrial, porque el citoplasma es donado
tanto por la célula donante como por el óvulo enucleado.

Experimentos de clonación en animales

Los resultados de otros estudios demostraron que la n1ayoría de las
células anjmales también conservaban un conjunto completo de
información genética durante el desan·ollo. En 1952, Robert
Briggs y Thomas King extrajeron los núcleos de óvulos no fecun-
dados de la rana Rana pipiens. Luego, aislaron los núcleos de blás-
tulas de rana (un estadio embrionaiio temprano) y los inyectaron
individualmente en los ovocitos. Después pincharon las células
con una aguja para esti1nul ar su división. Aunque la n1ayo1ía se
dañó en este proceso, algunos huevos se desarrol1aron y generaron
renacuajos completos que, fmalmente, se convirtieron en ranas.
A fmes de la década de 1960, John Gurdon aplicó estos méto-
dos para clonar con éxito algunas ranas, con núcleos aislados de
células intestinales de renacuajo. Esto sugirió que las células
intestinales diferenciadas llevaban la información genética nece- Figura 22-3. En 1996, los investigadores del Ros/in lnstitute de
saria para codificar los rasgos hallados en todas las demás célu- Escocia clonaron con éxito una oveja llamada Dolly. Utilizaron el mate-
las. Sin embargo, las clonaciones exitosas de Gurdon pueden rial genético de una célula diferenciada de un animal adulto. (Paul
haberse debido a la presencia de unas pocas células madre indife- Clemens/AP).
636 CAPITULO 22

Los experimentos de clonación demostraron que el material
genético no se pierde ni se altera durante el desarrollo: el desarro-
llo debe requerir la expresión selectiva de genes. Pero ¿cómo
regulan las células la expresión génica de una manera coordinada
para dar 01igen a un organismo multicelular co1nplejo? En la
actualidad, la investigación ha comenzado a dar algunas respues-
tas a esta ünportante pregunta.
complejos. Uno de los sistemas más estudiados para el contro l
genético de la formación de patrones es el desruTollo embrionario
temprano de Drosophila rnelanogaster. Los genetistas han aisla-
do varias mutaciones de las moscas de la fruta que influyen en
todos los aspectos de su desarrollo , y el análisis molecular de
estas mutaciones ha aportado mucha información acerca de la
1nanera en que los genes contro lan el desruTollo te1nprano de
Drosophila.

CONCEPTOS El desarrollo de la mosca de la fruta

La posibilidad de clonar plantas y animales a partir de células especia-
lizadas únicas demuestra que los genes no se pierden ni se alteran en
forma permanente durante el desarrollo.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
Los científicos han clonado algunos animales inyectando un núcleo de
un embrión temprano en un óvulo enucleado. ¿Demuestra este resul-
tado que el material genético no se pierde durante el desarrollo? ¿Por
qué o por qué no?
22.2 La formación de patrones en Drosophila
sirve como modelo del control genético
del desarrollo
La fo rmación de patrones consiste en procesos de desarrollo que
determinan la forma y la estructura de organismos multicelulares
El cuerpo de una mosca de la fruta adulta tiene tres partes bási-
cas: cabeza, tórax y abdon1en (fig. 22-4) . El tórax está formado
por tres segmentos: el primer segmento torácico lleva un par de
patas; el segundo segmento torácico presenta un par de patas y un
par de alas; el tercer segmento torácico tiene un par de patas y los
ronzales (n1dünentos del segundo par de alas hallado en la mayo-
ría de los demás insectos). El abdomen está formado por una serie
de segmentos.
Cuando un óvul o de Drosophila es fecundado, su núcleo diploi-
de (fig. 22-Sa) se divide de inmediato nueve veces, sin división del
citoplasma, lo que crea una única célula multinucleada (fig. 22-5b).
Estos núcleos están dispersos por todo el citoplasma, pero 1nás
tarde migran hacia la periferia del embrión y se dividen vru·ias
veces más (fig. 22-Sc). A continuación, la membrana celular se
invagina y rodea cada núcleo, lo que crea una capa de alrededor
de 6000 células en la superficie externa del embrión (fig. 22-Sd).
Los núcleos en un extremo del embrión generan las células del
polo, que finaltnente darán origen a las células germinales. Lue-
go, el embrión temprano se sigue desruTollando en tres estadios
diferentes: 1) se establecen los ejes anteroposterior y dorsoventral

Ó Un huevo de Drasaphila
se transforma en un
l
cilindro hueco de O El embrión evoluciona a
células.
'--
j larva, que atraviesa tres
estadios ...
Huevo

___1;)_..,........._____....,,
"'~i- '\._ 5- 8 horas 10 horas
O horas 2 horas
• •

Antenas Ojo Ronzales A la Pata

Embrión
(se muestra Estadios \""'-- - q f
~
i il
¡/ aumentado
de tamaño)
larvales
2 días
--

Pupa
1
.• 3 días
•
, : . e
. ro , X • QJ
' N t t E
~~ ➔1 ~-~ -➔1 - - º - -
ª f- ~ ... y emerge~un
adulto.
• ...antes de transformarse
en pupa. La pupa sufre
metamorfosis .. .
..__ 5 días

Figura 22-4. La mosca de la fruta Drosophila melanogaster atraviesa tres estadios larvales y uno de pupa antes
de desarrollarse en una mosca adulta. Las tres partes principales del cuerpo del adulto son cabeza, tórax y abdomen.
 Genética del desarrollo e inmunogenética 637

(a) Cigoto unicelular (a) Embrión de 2 horas Je<EimhiaONpostej133r and

diploide Se fusionan los núcleos del espermatozoide Yl aote~baJí€s of the
el óvulo para crear un cigoto diploide unicelular e~rmaedR!lllmron.
- - ---=-:..:- Núcleo
único 2n
Anterior Posterior

Ventral Embrión temprano

(b) Sincitio
Las múltiples divisiones nucleares crean

.----------17
multinucleado
una única célula multinucleada. (b) Embrión de 10 horas Jl,o,..,IJIOEO ehdúmero y
l:arierit.Btliaxrimf dt!Eloody
segments>il dee!ct.mJ¡iHb\ed .

70 minutos

(c) Blastodermo Los núcleos migran a la periferia del

-----------'-y--J----------~
Cabeza Segmentos Segmentos
sincicial embrión y se dividen varias veces más, torácicos abdom inales
lo que crea el bastodermo sincicial.
WAd~•
,,-----------
t ~ J-e(E
_ gU
_ -~ ~--~- ~- e-ac-h~
-;:::¡ ideruii:bill 6Eg!aaat is r---...

eegrt)lmtedndividual .
... ... ... . .... . ..... ....
120 minutos 1------l-- - - - - - - - -

O La membrana celular crece alrededor de

(d) Blastodermo cada núcleo, lo que produce una capa de
celular células que rodea al embrión. La estructura
Figura 22-6. En un embrión temprano de Drosophila, se
resultante es el blastodermo celular. __,
establecen los principales ejes del cuerpo, el número y la
orientación de los segmentos corporales, y la identidad de
cada segmento individual. Diferentes grupos de genes contro-
~ ><t - células lan cada uno de estos tres estadios.
del polo

180 minutos ,___ _ __ Los núcleos de un extremo del

blastodermo evolucionan a células del
polo, que se convierten en célu las Estadios del desarrollo temprano de moscas
germinales primordiales. de la fruta y genes que controlan cada
estadio
Figura 22-5. Desarrollo temprano de un embrión de Drosophila.
Estadio de desarrollo Genes
Establecimiento de los principales ejes cor- Genes de polaridad
del embrión (fig. 22-6a), 2) se determina el número y la orien- porales del huevo
tación de los segmentos del cuerpo (fig. 22-6b) y 3) se establece
Determinación del número y la polaridad Genes de segmen-
la identidad de cada segmento individual (fig. 22-6c). Diferentes
de los segmentos del cuerpo tación
grupos de genes controlan cada una de estos tres estadios (cua-
dro 22-1). Establecim iento de la identidad de cada Genes homeóticos
segmento
Genes de polaridad del huevo
Los genes de polaridad del huevo (aquellos que determinan la Los genes de polaridad del huevo se transcriben a mRNA en el
polaridad o la dirección) desempeñan un papel crucial en estable- curso de la formación del óvulo en la madre, y estos mRNA se
cer los dos ej es principales de desarrollo en las moscas de la fruta. incorporan e n el citoplasma del óvulo. Tras la fecundación, los
Usted puede pensar en estos ejes como en la longitud y la latitud mRNA se traducen a proteínas que desempeñan un papel impor-
del desan·ollo: cualquier localización en el embrión de tante e n determinar los ejes anteroposterior y dorsovent:ral del
Drosophila puede definirse en relación con estos dos ejes. embrión. Con10 los mRNA de los genes de polaridad son produ-
 638 CAPITULO 22

cjdos por la 1nadre e influyen en el fenotipo de la descendencia,
los rasgos codificados por ellos son ejemplos de efectos genéticos
maternos (véase cap. 5).
Hay dos conjuntos de genes de polaridad del huevo: un conjun-
to determina el eje anteroposterior, y el otro, el eje dorsoventral.
Estos genes actúan estableciendo gradientes de concentración de
1norfógenos dentro del embrión en desarrollo. Un morfógeno es
una proteína que varía de concentración e induce iliferentes res-
puestas de desmTollo a distintas concentraciones. Los genes de
polaridad del huevo funcionan produciendo proteínas que se dis-
tribuyen de manera asimétrica en el citoplasma y dan origen a la
polaridad del huevo. Esta distribución asimétrica puede tener
lugar de dos maneras. Un mRNA puede locaJi zarse en regiones
particulares del huevo, lo que genera abundancia de la proteína en
esas regiones cuando se traduce el mRNA. Alternativamente, el
mRNA puede distribuirse al azar, pero la proteína que codifica
puede presentar distribución asimétrica por un sistema de trans-
porte que la lleva a regiones particulares de la célula, por regula-
ción de su traducción o por su eliminación de determinadas regio-
nes medi ante degradación selectiva.
DETERMINACIÓN DEL EJE DORSOVENTRAL El eje dorsoventral defi-
ne la espalda (dorso) y el vientre de una mosca (véase fig. 22-6) .
Por lo m enos 12 genes diferentes determinan este eje, de los cua-
les uno de los más i mporta ntes es un gen denoininado dorsal. El
gen dorsal es transcrito y traducido en el ovario materno, y el
mRNA y Ja proteína resultantes se transfieren al óvulo durante la
ovogénesis. En un huevo recién puesto, el mRNA y la proteína
codificadas por eJ gen dorsal muestran dj stribución uniforme por
todo el citoplasma pero, después de que los núcleos han 1nigra-
do a la periferia del embrión (véase fig. 22-Sc), la proteína
Dorsal se redistribuye. A lo largo de un lado del embrión, la pro-
teína Dorsal se mantiene en el citoplasm a; este lado se converti-
rá en la superficie dorsal. A lo largo del otro lado, la proteína
Dorsal es captada por los núcleos; este lado se convertirá en la
superficie ventral. En este punto, hay un gradiente suave de con-
centración creciente de la proteína Dorsal, que aumenta del lado
dorsal al ventral (fig. 22-7).
Se considera que la captación nuclear de proteína Dorsal está
regida por una proteína deno1ninada Cactus, que se une a la pro-
teína Dorsal y la atrapa en eJ citoplas1n a. La presencia de otra
proteína, llamada Toll, induce la fos forilación de Cactus, con su
consiguiente degradación. Cuando Cactus es degradada, Dorsal
es liberada y puede trasladm·se al núcleo. En conjunto, Cactus y
Toll regulan la disttibución nuclear de la proteína Dorsal, que a su
vez determina el eje dorsoventral del e1n brión.
En el interior del núcleo, la proteína Dorsal actúa como un fac-
tor de transcripción al unirse a sitios reguladores del DNA y acti-
var o reprim ir la expresión de otros genes (cuadro 22-2). La alta
concentración nuclear de proteína Dorsal (como en las células del
lado ventral del embrión) activa un gen denolninado twist, que
induce el desarrollo de los tejidos ventrales. Las bajas concentra-
ciones nucleares de proteína Dorsal (como en las células del lado
dorsal del e1nbrión) activan un gen llamado decapentaplegic, que
especifi ca estructuras dorsales. De esta manera, se determinan los
lados ventral y dorsal del embrión.

Figura 22-7. La prote ína Dorsal de (a) (b)

los núcleos ayuda a det erminar el Dorsa l
eje dorsoventral del embrión de 1 - - -~ -
Drosophila. a) Concent raciones
relativas de proteína Dorsal en el
citoplasma y los núcleos de las célu-
las del embrión temprano de
Drosophila. b) M icrof otografía de un
corte transversal del embrión, que
muestra la proteína Dorsal, de tin- Después de que los núcleos
ción oscura, en los núcleos a lo largo migran a la periferia del
de la superficie ventral. (Parte b: Max embrión, la proteína Dorsal
Planck lnstitute far Developmental se concentra en los núcleos
1
de la superficie ventral. Ventral 100 m
Biology).

Cuadro 22-2 Genes clave que controlan el desarrollo del eje dorsoventral en las moscas de la fruta y su acción

Gen Dónde se expresa Acción del producto génico

dorsal Ova rio Afecta la expresión de genes como twist y decapentap!egic

cactus Ovario Atrapa la proteína Dorsal en el citoplasma

to// Ovario Induce la fosforilación de Cactus, que después es degradada, lo que libera la proteína Dorsal
que se moviliza al interior de los núcleos de las células ventra les

twist Embrión Interviene en el desarrollo de tejidos mesodérmicos *

decapentap!egic Embrión Interviene en el desarrollo de estructuras intestinales

*Una de las tres capas de tejido principales e n el embrión temprano.

 Genética del desarrollo e inmunogenética 639

Cuadro 22-3 Algunos genes clave que determinan el eje anteroposterior en las moscas de la fruta

Gen Dónde se expresa Acción

bicoid Ovario Regula la expresión de genes responsables de las estruct uras anteriores; estimu la a hunchback

nanos Ovario Regula la expresión de genes responsables de las estruct uras posteriores; inhibe la traducción del
mRNA de hunchback

hunchback Embrión Regula la transcripción de genes responsables de las estructuras anteriores

DETERMINACIÓN DEL EJE ANTEROPOSTERIOR Uno de los eventos
tempranos más in1portantes del desarrollo es la determin ación de
los extremos anterior (cabeza) y posterior (cola) del animal.
Consideraremos varios genes clave que establecen este eje ante-
roposterior del embrión de Drosophila (cuadro 22-3). En este
aspecto, un gen importante es bicoid, que es transcrito por prime-
ra vez en el ovario de una hembra adulta durante la ovogénesis. El
mRNA de bicoid queda anclado al extre1no anterior del óvulo por
parte de su extremo 3' . Este anclaje hace que el mRNA de bicoid
se concentre en el extremo anterior (tlg. 22-Sa). (Se requiere una
serie de otros genes que son activos en el ovario para la localiza-
ción apropiado del mRNA de bicoid en el huevo). Una vez pues-
to el huevo, el mRNA de bicoid se traduce a p roteína Bicoid.
Como la mayor parte del 1n RNA se encuentra en el extre1no ante-
1ior del huevo, la proteína Bicoid se sintetiza allí y genera un gra-
diente de concentración a lo largo del eje anteroposterior del
embrión, con una alta concentración en el extremo anterior y una
baja concentración en el extremo posterior. Este gradiente se
mantiene mediante la síntesis continua de proteína Bicoid y su
breve sernivida.
La alta concentración de proteína Bicoid en el extremo anterior
induce el desarrollo de estructuras anteriores, com o la cabeza de la
mosca de la fruta. Estimula el desarrollo de estructuras anteriores
al unirse a secuencias reguladoras del DNA e influir en la expresión
de otros genes. Uno de los genes más importantes estimulados por
la proteína Bicoid es hunchback, necesario para el desarrollo de la
cabeza y las estructuras torácicas de la mosca de la fruta.
Asimismo, el desarrollo del eje anteroposterior es muy influen-
ciado por un gen denominado nanos, un gen de polaridad del
huevo que actúa en el extremo poste1ior del huevo. El gen nanos

(a) Determinante anterior Distribución del mRNA de bicoid Distribución de la proteína Bicoid
Anterior

Determinante
anterior bicoid
OEI mRNA de bicoid se localiza en La proteína Bicoid forma un gradiente con alta concentra-1
el extremo anterior del huevo. ción en el extremo anterior, que induce el desarrollo de
local izado las estructuras anteriores de una mosca de la fruta.

(b) Determinante posterior Distribución del mRNA de nanos Distribución de la proteína Nanos
Anterior Posterior

mRNA de
El mRNA de nanas mRNA se , Después de la fecundación, el mRNA de nanos se traduce
localiza en el extremo nanos localizado a proteína Nanas, que se concentra en el extremo posterior
posterior del huevo. del huevo e inhibe la formación de las estructuras anterior::J

Figura 22-8. Las concentraciones de proteínas Bicoid y Nanos determinan el eje anteroposterior en un embrión de Drosophila. (Partes a y b: de
Christiane Nüsslein-Volhard, "Determination of the Embryonic Axes of Drosophi/a," Development Suppl. 1, 1991, 1. © Company of Biologists. Partes e y d:
cortesía de E. R. Gavis, L. K. Dickenson y R. Lehman, Massachusetts lnstitute of Technology).
640 CAPITULO 22
Cuadro 22-4 Genes de segmentación y efectos de sus mutaciones
Clase de gen Efecto de las mutaciones
Genes gap Elimina segmentos adyacentes
Genes de la regla Elimina la misma parte del patrón en segmentos .alternados
de los pares
Genes de polaridad Afect a la polaridad de los segmentos; parte del segmento es
del segmento reemplazado por la imagen especular de parte de otro segmento
se transcri be en la hembra adulta, y el mRNA resul tante se loca-
liza en el extre mo poste1i or de l huevo (fig. 22-Sb). D espués de la
fecundación, el mRNA de nanos es traducido a proteína Nanos,
que difunde con lentitud hacia el extremo anterior. El gradiente de
la proteína N anos es opuesto al de la proteína Bicoid: Nanos está
m ás concentrada en el extren10 posterior del e1nbrión y menos
concentrada en el extre.m o a nterior. La proteína Nanos inhibe la
formación de estructuras anteriores al reprimir la traducción del
mRNA de hunchback. Por lo tanto, la síntesis de la proteína
Hunchback es estimulada por la proteína Bicoid en el extremo
anterior del en1brión y reprimida por la proteína Nanos en el
extremo posterior de este. Esta estimulación y represión combina-
das gene ra un gradiente de concentración de la proteína
Hunchback a lo largo del eje anteroposterior que, a su vez, afecta
la expresión de otros genes y ayuda a determinar las estructuras
anteriores y posteriores.
CONCEPTOS
Los principales ejes de desarrollo en embriones tempranos de mosca
de la fruta se establecen como resultado de las diferencias inicia les de
distribución de mRNA y proteínas específicas codificadas por genes
de la madre (efecto genético materno). Estas diferencias de distribu-
ción generan gradientes de concentración de morfógenos, que hacen
que diferentes genes sean activados en distintas partes del embrión.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2
¿Qué proteína en alta concentración estimula el desarrollo de las
estructuras anteriores?
a. Dorsal c. Bicoid
b. Toll d. Nanos
Genes de segmentación
Al igual que todos los insectos, la 1nosca de la fruta tiene un cuer-
po segmentado. Una vez establecidos los ejes dorsoventral y an-
teroposterior del emb1ión de mosca de la fruta, los genes de seg-
mentación controlan la diferenciación del embrión en segmentos
individuales. Estos genes afectan el nú1nero y la organización de
los segmentos, y sus mutaciones suelen alterar conj untos comple-
tos de segmentos. Los aproximadamente 25 genes de segmentación
de Drosophila se transcriben después de la fecundación, de mane-
ra que no presentan un efecto genético materno y su expresión es
regulada por los gradientes de las proteínas Bicoid y Nanas .
Ejemplos de genes
hunchback, Krüppel, knirps, giant, tailless
runt, hairy, fushi tarazu, even-skipped, odd-paired,
skippy-paired, odd-skipped
engrailed, wingless, gooseberry, cubitus interruptus,
patched, hedgehog, disheveled, costal-2, fused
Con10 se muestra en el cuadro 22-4 y en la figura 22-9 , los
genes de segmentación pertenecen a tres clases, las cuales actúan
en forma secuencial y afectan regiones progresivamente más
pequeñas del embrión. Primero, los productos de los genes de
polaridad del huevo activan o reprimen los genes gap, que divi-
den aJ e nJbrión en amplias regiones. A su vez, los genes gap regu-
lan los genes de la regla de los pares, que afectan el desarrollo de
pares de segmentos. Por último, los genes de la regla de los pares
influyen en los genes de polaridad del segmento, que orientan
el desarrollo de cada segmento.
Los genes gap definen grandes secciones del embrión; las
mutaciones de es tos genes eliminan grupos e nteros de segn1entos
adyacentes. Por eje1nplo, las mutaciones del gen Krüppel deter-
mi nan la ausencia de vari os segmentos adyacentes. Los genes de
la regla de los pares defi nen secciones regionales del embrión y
afectan segmentos alternados. Las mutaciones del gen even-skip-
ped causan deleción de segmentos pares, mientras que las muta-
ciones del gen fushi tarazu cau san deleción de segmentos impa-
res. Los genes de polaridad del segn1ento afectan la orientación
de los segmentos. Las mutacio nes de estos genes determi nan que
parte de cada segmento sea eliminado y reemplazado por una
imagen especular de p arte de un segm ento adyacente o todo este .
Por ej emplo, las mutaciones del gen gooseberry hacen que la
mitad p osterior de cada segmento sea reemplazada por la 1nitad
anterior de un seg1nento adyacente.
CONCEPTOS
Cuando se han establecido los principales ejes del embrión de mosca
de la fruta, los genes de segmentación determinan el número, la
orientación y la organización básica de los segmentos corporales.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
La secuencia correcta en la que actúan los genes de segmentación es
la siguiente:
a. genes de polaridad del segmento ➔ genes gap ➔ genes de la
regla de los pares,
b. genes gap ➔ genes de la regla de los pares ➔ genes de polari-
dad del segmento,
c. genes de polaridad del segmento ➔ genes de la regla de los
pares ➔ genes gap,
d . genes gap ➔ genes de polaridad del segmento ➔ genes de la
regla de los pares.

Genes gap
Larva
•
normal / 11
2
Cabeza Segmentos Segmentos
torácicos + abdominales
Larva 41
mutante 1111
Krüppel
La mutación de Krüppel determina la
eliminación de los segmentos anteriores.
L ____)
Figura 22-9. Los genes de segmentación controlan la diferenciación del embrión de Drosophila en segmentos
individuales. Los genes gap afectan grandes secciones del embrión. Los genes de la regla de los pares afectan segmentos
alternados. Los genes de polaridad de segmento afectan la orientación de los segmentos.
Genes homeóticos en Drosophila
Después de que los genes de segmentación han establecido el
número y la orientación de los segmentos, se activan los genes
homeóticos y determinan la identidad de segmentos individuales.
En condiciones normales, los ojos solo aparecen en el seg1nento
de la cabeza, mientras que las patas solo se desarrollan en los seg-
mentos torácicos. Los productos de los genes homeóticos activan
otros genes que codifican estas características específicas de seg-
1nento. Las mutaciones de los genes homeóticos hacen que apa-
rezcan partes del cuerpo en segmentos incorrectos.
A fines de la década de 1940, Edward Lewis comenzó a estudiar
mutaciones homeóticas en la Drosophíla, aquellas que causan reor-
denamientos bizarros de partes del cuerpo. Por ejemplo, las muta-
ciones del complejo Antennapedia inducen el desarrollo de patas
en la cabeza de una mosca en lugar de las antenas (fig. 22-10). Los
genes homeóticos crean direcciones para las células de segn1entos
particulares y les indican dónde se encuentran dentro de las regio-
nes definidas por los genes de segmentación. Cuando muta un gen
homeótico, la dirección es incorrecta y las células del segmento se
desarrollan como si estuvieran en otra parte del emb1ión.
(a) (b)
Genética del desarrollo e inmunogenética 641
Genes de la regla de los pares Genes de polaridad de segmento
Segmentos eliminados
+
1 1 11 1 ,iu111111111
even-skipped gooseberry
La mutación de even-skipped determina La mutación de gooseberry determina
la deleción de los segmentos pares. que la mitad posterior de cada
\._
segmento sea reemplazada por una
imagen especular de la mitad anterior
de un segmento adyacente.
En la Drosophila, los genes homeóticos se expresan después de
la fecundación y son activados por concentraciones específicas
de las proteínas producidas por los genes gap, de la regla de los
pares y de polaridad del segmento. Por ejemplo, el gen homeóti-
co Vltrabithorax (Ubx) se activa cuando la concentración de pro-
teína Hunchback (un producto de un gen gap) se encuentra den-
tro de ciertos valores. Estas concentraciones solo existen en la
región n1edia del embrión; en consecuencia, el Ubx se expresa
únican1ente en estos segmentos.
En los animales, los genes hon1eóticos codifican proteínas re-
guladoras que se w1en a DNA; cada gen contiene un subgrupo de
nucleótidos, denominado caja homeótica, que son similares en
todos los genes homeóticos. La caja homeótica codifica 60 a1nj-
noácidos que sirven como dominio de unión a DNA; este domi-
nio está relacionado con el motivo hélice-giro-hélice (véase fig.
16-2a). Las cajas homeóticas también están presentes en los
genes de segmentación y otros genes que participan en el desarro-
llo espacial.
Hay dos grupos mayores de genes homeóticos en la Droso-
phila. Un grupo, el complejo Antennapedia, afecta el desarrollo
de la cabeza y los segmentos torácicos anteriores de la mosca
Figura 22-10. La mutación homeótica Antennapedia sus-
tituye las antenas por patas en una mosca de la fruta. a)
Normal, antenas de tipo silvestre. b) Mutante Antennapedia.
(Dr. Walter J. Gehring).
642 CAPITULO 22
IE-- - - - - - - - Comp lejo Antennapedia - - - - - - - -~
Cromosoma 3
lab pb ~--., Dfd
labial proboscipedia Deformed Sex combs
reduced
El ordenamiento de los genes el cromosoma corresponde a la secuencia en la que se
Anterior- - - - expresan los genes a lo largo del eje anteroposterior del cuerpo.
Figura 22- 11 . Los genes homeóticos, que determinan la identidad de segmentos individuales en Drosophila, están presentes
en dos complejos. El complejo Antennapedia tiene cinco genes, y el complejo bithorax tiene tres genes.
adulta. El otro grupo es el complejo bithorax, que incluye genes
que influyen en los seg1nentos torácicos poste1iores y abdomina-
les de la mosca adulta. Juntos, los genes bithorax y Antennapedia
se denominan complejo homeótico (HOM-C). En la Drosophila,
e] complejo bithorax tiene tres genes, y el complejo Antenna-
pedia, cinco; todos están localizados en el mismo cromosoma
(tig. 22-11). Además de estos ocho genes, HOM-C contiene mu-
chas secuencias que regulan los genes homeóticos. Sorprenden te-
mente, el orden de los genes del HOM-C es el 1nismo que el orden
en el que se expresan los genes a lo largo de eje anteroposterior
del cuerpo. Los genes que se expresan en los seg1nentos más ante-
1iores se ha11an en un extremo del complejo, mjentras que aque-
llos expresados en el extremo más posterior del embrión se
encuentran en el otro extremo del complejo (véase tig. 22-11).
CONCEPTOS
Los genes homeóticos ayudan a determinar la identidad de segmen-
tos individuales de embriones de Drosophila al producir proteínas de
unión a DNA que activan otros genes. Cada gen homeótico contiene
una secuencia consenso denominada caja homeótica, que codifica el
dominio de unión a DNA.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
Las mutaciones de genes homeóticos suelen causar
a. deleción de segmentos,
b. ausencia de estructuras,
c. demasiados segmentos,
d. aparición de estructuras en el lugar incorrecto.
Genes con caja homeótica en otros organismos
Una vez aislados y clonados los genes homeóticos de Drosophila,
los genetistas moleculares se dedicaron a determinar si existían
genes silnilares en otros animales; se usaron sondas comple1nen-
tarias de la caja homeótica de los genes de Drosophila para bus-
car genes homólogos que podrían desempeñar un papel en el
desarrollo de otros animales. La búsqueda fue muy exitosa: se
han hallado genes que contienen cajas homeóticas en todos los
ani males, incluidos nen1atodos, escru·abajos, erizos de mar, rru1as ,
aves y mamíferos. Se han descubierto genes con cajas homeóticas
it- 1<- - - - Comp lejo bithorax ~
Ubx abdA
- AbdB
Antennapedia Ultrabithorax Abdominal A Abdominal B
1-----► Po5terior
en hongos y plantas, lo que indica que la caja homeótica apareció
en etapas tempranas de la evolución de los eucariontes. Los genes
Hox son un grupo de genes con caja homeótica que incluyen el
complejo homeótico de Drosophila descrito en la sección ante-
rior. Los genes Hox se encuentran en todos los anjmales, excepto
en las esponjas.
En los vertebrados, suele haber cuatro grupos de genes Hox,
cada uno de los cuales contiene de 9 a 11 genes. Los genes Hox
de los 1namíferos, al igual que los de Drosophila, codifican facto-
res de transcripción que ayudan a deter1ninar la identidad de
regiones del cuerpo a lo largo de un eje anteroposterior. Los genes
Hox de otros organismos a menudo muestran la misma relación
entre el orden en el cromosoma y el orden de expresión a lo largo
del eje anteroposterior del embrión como en el caso de la Droso-
phila (fig. 22-12), pero este patrón no es universal. Por ejemplo,
el tunicado Oikopleura dioica (un pariente primitivo de los verte-
brados) tiene 9 genes Hox, pero los genes están dispersos por todo
el geno1na, a diferencia del ordenamiento agrupado observado en
la mayoría de los animales. Pese a la falta de agrupamiento físi-
co, los genes Hox del O. dioica se expresan en el mismo orden
anteroposterior que el observado en los vertebrados.
Los genes Hox de los vertebrados ta1nbién muestran una rela-
ción entre su orden en el cromosoma y eJ n1omento de su expre-
sión: los genes de un extremo del complejo (los expresados en eJ
extremo anterior) se expresan en estadios tempranos del desarro-
llo, mientras que los genes del otro extremo (los expresados en el
extremo posterior) lo hacen más tru·de. Un gen Hox que se m ueve
experimentalmente a una nueva localización dentro del complejo
de genes Hox se expresa en el tejido apropiado, pero se altera el
momento de su expresión, lo que sugiere que la cronología de ]a
expresión de los genes es controlada por su localización física
dentro del complejo. Aunque no se conoce bien el mecanismo de
este control secuencial, la evidencia sugiere que, en los ratones,
es controlada por un cambio progresivo de los patrones de meti-
lación de las rustonas, un can1bio epigenético que moclifica la
estructura de la cro1natina e influye en la transcripción (véase
cap. 21). Asimismo, estudios recientes identificaron genes de
micro-RNA (véase cap. 14) dentro de los grupos de genes Hox, y
la evidencia sugiere que los miRNA intervienen en el control de
la expresión de algunos genes Hox.
A 1nenudo, los genes Hox y su expresión se correlacionan con
cambios anatómicos en animales, y se ha postulado que estos
genes desempeñan un papel importante en la evolución de los ani-
males. Por ejemplo, el pez lanceta Bronchiostoma (otro pariente
p1imitivo de los ve1tebrados) tiene un cuerpo de forma simple y
tiene solo 14 genes Hox en 1 solo grupo, 1nientras que algunos
 Genética del desarrol lo e inmunogenética 643

Los genes representados en el

mismo color son homólogos.
/ab pb
Drosophila
Hay cuatro grupos de
•• •
1 2 3 4 5 6 7 9 10 11 13
genes Hox en mamíferos,
cada uno de los grupos
HoxA • •
•• r Los genes Hox de los7
mamíferos tienen una
1 2 3 4 5 6 8 9
contiene de 9 a 11 genes.
~
Mamífero
HoxB ■
==
5 6 8
■
■

9 10 11 12 13
secuencia similar a los
genes homeóticos
hallados en Drosophila
HoxC ■ y se encuentran en el
■

1 3 4 8 9 10 11 12 13
[ mismo orden. j
Hoxo : ====i ....___..1 ■
■ 1
Figura 22- 12. Los genes Hox de los mamíferos son similares a los hallados en Drosophila. Los complejos están dispuestos de manera que
los genes con secuencias similares queden en la misma columna. Véanse los nombres completos de los genes de Drosophila en la figura 22-11 .

p eces, de arqu i tectui-a corporal mucho m ás complej a, tienen h asta
48 gen es Hox en 7 grupos.
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
El control del desarrollo
El desarrollo es un proceso complejo que consiste en numerosos
eventos que deben tener lugar en una secuencia muy específica.
Estudios de moscas de la fruta y otros organismos revelan que este
proceso es regulado por una gran cantidad de genes. En la
Drosophi/a, genes maternos establecen los ejes dorsoventral y antero-
posterior; estos genes codifican mRNA y proteínas que se localizan en
regiones específicas dentro del huevo y determinan que genes espe-
cíficos se expresen en diferentes regiones del embrión. Después, las
proteínas de estos genes estimulan otros genes que, a su vez, estimu-
lan otros genes en una cascada de control. Como cabría esperar, la
mayoría de los productos gén icos de la cascada son proteínas regu la-
doras que se unen al DNA y activan otros genes.
En el curso del desarrol lo, se determinan regiones sucesivamente
expresi ón génica en eu cariontes, y de hech o, l a ep igen ética tam-
bién d esempeña un p apel importante en el desarrollo.
E n el capítulo 21, l os can1bios epi genéticos se definieron con10
al ter aci on es her edab l es d e la estruc tura d el DNA y l a cr om atina,
alter aciones que afectan l a expresi ón génica y se transmi ten a
otras cél ul as, p er o que no son cambios d e l a secuencia de b ases
del DNA. En el curso del desru-rollo, un ci goto unicel ular se div i -
de y d a ori gen a numerosas células, que se diferenci an y adqui e-
ren l as carac terísti cas de órganos y teji d os esp ecíficos. Po r úl ti-
Embrión unicelular
Genes de polaridad del huevo
7-
Dete r mina ció n de los principales
ejes del cuerpo
Genes gap

•
más pequeñas del embrión (fig. 22-13). En la Drosophila, se estable-
cen primero los principales ejes y las reg iones del embrión mediante
los genes de polaridad del huevo. A continuación, la acción de los Secciones regiona les del embrión
genes de segmentación determina los patrones dentro de cada definidas
1
región: los genes gap def inen secciones grandes, los genes de la regla
de los pares definen secciones regionales del embrión y afectan seg- Genes de la regla de los pares
mentos alternados, y los genes de pola ridad del segmento afectan
segmentos individuales. Por últ imo, los genes homeóticos confieren a
cada segmento una identidad ún ica. Los gradientes iniciales de pro- Segmentos individuales definidos
teínas y mRNA estimulan la expresión loca lizada de genes, lo que 1
genera gradientes de localización más fina que estimu lan expresión Genes de polaridad del segmento
génica aún más localizada. Por consiguiente, la regulación del desa-
rrollo se define de manera cada vez más estrecha.
No se conocen tan bien los procesos mediante los cuales se forman +
Polaridad de segmentos individuales
los miembros, los órganos y los tejidos (denominados morfogénesis), definida
aunque suele encontrarse este patrón de expresión génica generaliza- 1
da-localizada. l.!:►~!!:!!:!!:!.!:!!:!:~~~~~~~~ Genes homeóticos

Cambios epigenéticos del desarrollo +

E l desruTollo temprano d e l a m osca de l a fruta es contro lado, en
gran parte, por l os pro ductos de ci ertos genes cl ave que activan o
reprimen d e manera sel ectiva l a expresi ón de otros genes. Como
vimos en el capítulo 21, l os c ambios epigenéticos af ectan l a
Identidad de segmentos individua les
def inida
Figura 22-13. Una cascada de regulación génica establece la polari-
dad e identidad de cada segmento de Drosophila. Durante el desarro-
llo, se determinan regiones progresivamente más pequeñas del embrión.
644 CAPITULO 22

mo, cada tipo de célula expresa un subgrupo diferente de genes

que producen las proteínas necesarias para ese tipo celular, y este
programa de expresión génica se tr ansmite cuando se divide la
célula diferenciada.
E l programa de expresión de genes de células que componen un
órgano o tipo de tejido partic ular a menudo está definido por rr1ar-
cas epigenéticas. A medida q ue procede el desarroUo y la diferen-
ciación, las células adquieren cambios epigenéticos que activan y
desactivan grupos específicos de genes. En el capítulo 21 consi-
deramos varios tipos de marcas epi.genéticas, como metilación del
DNA, modificación de histonas y cambios secundarios a molécu-
las de RNA. Estos cambios epigenéticos ayudan a determinar qué
genes se expresan en una célula. En estadios tempranos del desa-
1rollo, los genes que pueden ser requeridos en estadios más tar-
díos suelen m antenerse silenciados en forma transitoria mediante
modificaciones de histonas. Por lo general, las modificaciones de
histonas son flexibles y fáciles de revertir, y por lo tanto, es posi-
ble activar estos genes en estadios 1nás tardíos del desarrollo. En
el curso del desa1rollo, otros genes son sile nciados de 1nanera per-
manente; a menudo, este sil enciamiento a plazo más largo se
acompaña de meti lación del DNA.

Figura 22-14. La flor producida por Arabidopsís thalíana tiene cuatro

22.3 Los genes controlan el desarrollo sépalos, cuatro pétalos blancos, seis estambres y dos carpelos.
de las flores en las plantas (Darwin Dale/Photo Researchers, lnc.).

Ya hemos examinado e n detalle el patrón de formación en la Dro-

sophila, que sirve como sistema modelo de desarrollo. Otro siste-
ma modelo que ha aportado conocimientos importantes sobre la
manera en que los genes influyen en los patrones de crecimiento
y desarrollo es la formación de las partes florales de las angios-
permas.
Uno de los eventos más importantes del desarrollo en la vida de
una planta es e l cambio del crecimiento vegetativo a la floració n.
E l momento preciso de este cambio es afectado por la estación, la
duración del día, el tamaño de la planta y una serie de otros fac-
tores, y está c ontrolado por una gran cantidad de genes difere nte.
E l desarrollo de la flor en sí misma también está bajo control
genético, y los genes homeóticos desempeñan un papel crucial en
la determi nación de las estructuras florales.
Anatomía de las flores
Una flor está formada por c uatro anillos concéntricos de hojas
1nodificadas, denominadas verticilos. El verticilo 111ás externo
(verticilo 1) está compuesto por sépalos verdes similares a hoj as .
E l siguiente verticilo (verticilo 2) está fonnado por los pétalos,
cuya característica es que carecen de clorofila. E l verticilo 3 está
constituido por los estambres, que contienen polen, y el verticilo
4 está formado por los carpelos que, a menudo, se fusionan p ara
for.mar un estig1na que contiene los óvulos. En la Arabidopsis de
tipo silvestre, una pla nta genética n1odelo (véase Guía de referen-
cia de o rganismos genéticos modelo y fig. 22-14), hay 4 sépalos,
4 pétalos blancos, 6 estambres (4 largos y 2 cortos) y 2 carpelos
(fig. 22-lSa).
Control genético del desarrollo de las flores
Elliot M eyerowitz y coJs. llevaron a cabo una serie de expe1imentos
para examinar la base genética del desaiTollo de las flores en la
Arabidopsis. Comenzaron por aislar y analizar mutaciones horneó-
ticas de Arabidopsis. En realidad, las mutaciones homeóticas se
identificaron por primera vez en plantas en 1894, cuando William
Bateson advirtió que las partes florales de las plantas en ocasiones
aparecí an en el lugar incorrecto: por ejemplo, halló flores en las
que crecían estan1bres donde nonnalinente crecen pétalos.
M eyerowitz y cols. uti ljzaron estos tipos de mutantes para reve-
lar los genes que controlan el desarrollo de las fl ores. Pudieron
ubicar las mutaciones homeóticas que aislaban en tres grupos
sobre la base de su efecto sobre la estructura floral. Los mutantes
de clase A te1úan carpelos en lugar de sépalos en el primer ver-
ticilo, y estambres en lugar de pétalos en el segundo verticilo
(fig. 22-lSb). El tercer verticilo estaba formado por estambre, y
el cuarto, por carpelos, el patrón normal. Los mutantes de clase B
tenían sép alos en el primero y segundo verticilos , y carpelos en
el tercero y el cuarto verticilos (fig. 22-lSc). El último grupo,
los mutantes de clase C , teníai1 sépalos y pétalos en el prin1ero
y segundo verticil os, respectivamente, com o es norn1al, pero
te nían pétalos en el tercer verticilo y sépalos en el cuarto vertici-
lo (fig. 22-lSd).
La conclusión de Meyerowitz y c ols. fue que cada clase de
mutante carecía del producto de un gen o de los productos de un
conjunto de genes que son cruciales para e l desarrollo adecuado
de las flores: los mutantes de clase A carecían de actividad de los
genes A; los mutantes de clase B, de actividad de los genes B; y
los mutantes de clase C, de actividad de los genes C. Postularon
que los genes de clase A son activos en el primero y segundo ver-
ticilos. L os productos de los genes de clase A solos determinan
que el prin1er ve1t icilo se diferencie a sépalos, y junto con los pro-
ductos de los genes de clase B hacen que el segundo verticilo se
diferencie a pétalos. Los productos de los genes de c lase C j unto
con los productos de los genes de clase B inducen el desarrollo
del tercer verticilo para formar estambres. Los genes de clase C
solos hacen q ue el cuarto verticilo se convierta en carpelos. Los
 Genética del desarrollo e inmunogenética 645

Figura 22-15. El análisis de

mutantes homeóticos de
Pregunta: ¿cómo contro lan los genes el desarro llo de las estructuras de las f lores? Arabidopsis thaliana llevó a
conocer los genes que determi-
Métodos aísle y analice los mutantes homeóticos que afectan el desarrollo de las flores. nan las estructuras florales de
las plantas.
Resultados
(a) Flor de tipo silvestre (b) Mutantes de clase A (c) Mutantes de clase B (d) Mutantes de clase C
Estambre lrpelo
Sépalo - \
• ~
~

~
~-~
Pétalo -
) A "l
(
-J)

Verticilo 1: Sépalos Verticilo 1: Carpelos Vertici lo 1: Sépalos Verticilo 1: Sépa los

Verticilo 2: Pétalos Verticilo 2: Estambres Vertici lo 2: SéP-alos Verticilo 2: Pétalos
Verticilo 3: Estambres Vertici lo 3: Estambres Vertici lo 3: Carpelos Verticilo 3: Pétalos
Verticilo 4: Carpelos Vertici lo 4: Carpelos Vertici lo 4: Carpelos Verticilo 4: Sépa los

Conclusión: en flo res de ti po silvestre:

Producto génico
Productos de genes de clase A - - - -•
Productos d e genes de clase A + clase B
Productos de genes de clase B + clase C
Productos de genes de clase C
Verticilo de la flor afectado
sépalos en el pri mer vert icilo
pétalos en el segundo verticilo
estambres en el tercer verticilo
carpelos en el cuarto vertici lo

productos de las diferentes clases de genes y sus efectos se resu-

men en la conclusión de la figura 22-15.
Para explicar los resultados, tambié11 prop usieron que los genes
de algunas clases afectan las actividades de otros. Si los de clase
A están activos, los de clase C están reprimidos, y si se activan los
de clase C, hay represión de los de clase A. Además, si una m uta-
ción desactiva a A, se activa C, y viceversa. Normalmente, los
genes de clase A se expresan en los verticilos 1 y 2, los genes de
clase B se expresan en los verticilos 2 y 3, y los genes de clase C
lo hacen en los verticilos 3 y 4 (fig. 22-16) .
.La interacción de estas tres clases de genes explica las diferen-
tes clases de mutantes de la figura 22-15. Por ejemplo, los mutan-
tes de clase A carecen de los productos de los genes de clase A, y
por consiguiente, los genes de clase C están activos en todos los
tejidos, porque cuando se desactiva A , se activa C. En consecuen-
cia, el ve1ticilo 1, que solo tiene productos de los genes de clase
C, estará for1nado por carpelos; el verticilo 2, con productos de
los genes de clase C y clase B , producirá estambres; el verticilo
3, con productos de los genes de clase B y clase C , producirá
estambres; y el verticilo 4, solo con actividad de genes de clase C,
producirá carpelos (véase fig. 22-15b):
Productos de los genes de clase C
(en ausencia de clase A) ➔ carpelos ( 1.er verticilo)
Productos de los genes de clase B
+ clase C (en ausencia de clase A) ➔ estambres (2.º verticilo)
Productos de los genes de clase B
+ clase C ➔ estambres (3.cr verticilo)
Productos de los genes de clase C ➔ carpelos (4 .0 verticilo)
Para confirmar la explicación, Meyerowitz y cols. cultivaron mu-
tantes dobles y triples, y predijeron el resultado. Las estructuras
florales obtenidas se ajustaron a sus predicciones. En estudios
Genes d@ clase 8
1 2 3 4
Sépalos Pétalos Estambres Carpelos
Figura 22-16. La expresión de genes de clase A, By C varía entre las
estructuras de una flor.
ulteriores, aislaron los genes de cada clase. H ay 2 genes de clase
A , deno1ninados APETALAJ (AP 1) y APETALA2 (AP2); 2 genes
de clase B , denominados APETALA3 (AP3) y PISTILLATA (PI),
y 1 gen de clase C, denominado AGAMOUS (AG). L a clonación
y la secuenciación de estos genes revelaron que todos son genes
con caja MADS, genes que funcionan como factores de tra ns-
cripción e inciden en la expresión de otros genes. Los genes con
caja MADS de las plantas desempeñan un papel similas al de los
genes con caja homeótica de los animales, aunque no son homó-
logos.
Los resultados de otros estudios demostraron la presencia de otro
grupo de genes denomi nados SEPALLATA (SEP), que se expresan
en los verticilos 2, 3 y 4, y que también son necesarios para el desa-
rrollo normal de las flores. Si los genes SEP son defectuosos, la flor
está totaln1ente formada por sépalos. Los hallazgos de estudios de
otras especies demostraron que este sistema de desairollo de las
flores existe no solo en la Arabidopsis, sino también en otras plan-
tas con flores. Es importante destacai· que estos genes son necesa-
Ii.os pero no suficientes para el desarrollo apropiado de las flores;
otros genes también participan en la identidad de las distintas par-
tes de las flores. ~•: .!!!:!:!::!~!!!:!~~:!!!::!::!.!:!!:!~===~~
646 CAPITULO 22

CONCEPTOS del desarroll o: es responsable de Ja desaparición de la cola de un

Los genes homeóticos de las plantas controlan el desarrollo de sus
estructuras florales. Los productos de las tres clases de genes homeó-
t icos interactúan para determinar la formación de los 4 verticilos que
componen una flor completa.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
¿Qué tipos de estructuras f lorales esperaría observar en los vertici los
1 a 4 de una planta mutante que no origina productos de los genes
de clase A ni de clase B?
a. Carpelos, estambres, estambres, carpelos.
b. Sépalos, sépalos, carpelos, carpelos.
c. Sépalos, sépalos, sépalos, sépalos.
d. Carpelos, carpelos, carpelos, carpelos.
INTERRELACIÓN DE CONCEPTOS
renacuaj o durante la 1netamorfos is y determina la eliminación
de tejido entre los dedos para producir la mano humana. Asi-
mismo, la muerte celular se utiliza para e liminar células peligro-
sas que han escapado a los controles normales ( véase la sección
sobre mutaciones en el control del ciclo celular y cáncer, en el
cap. 23) .
APOPTOSIS En los animales, la muerte celular a menudo es ini-
ciada por la propia célula en la apoptosis o suicidio celular. En
este proceso, se degrada el DNA de una célula, se contrae su
núcleo y citoplasma, y la célula es fagocitada por otra célula sin
liberar su contenido (fig. 22-17a). Por el contrario, las células que
son lesionadas mueren de una manera relativa1nente descontrola-
da denominada necrosis. En este proceso, la célula se torna tume-
facta y estalla, derrama su contenido sobre células vecinas y
desencadena una respuesta inflamatoria (fig. 22-17b). La apopto-
sis es esencial para la embriogénesis; la mayoría de los animales
1nulticelulares no pueden completar el desarrollo si se inhibe este
proceso.

Comparación del desarrollo en Drosophila y las flores (a) Apoptosis (b) Necrosis
Ya consideramos dos sistemas modelo muy diferentes de desarrollo:

~~
el establecimiento de la forma y el patrón del cuerpo en moscas de la
fruta, y el desarrollo de estructuras florales en angioespermas. Pese a
---:----i
sus diferencias, estos dos sistemas muestran similitudes en la manera
en que los genes controlan el desarrollo.
Primero, tanto la formación de patrones en la Drosophila como el
Se degrada
el DNA. ¡ O la célula
se torna
tumefacta .
desarrollo de las flores en las plantas son controlados por numerosos
genes que interactúan de maneras complejas. Por ejemplo, en la Dro-
sophila, observamos cómo un complejo grande de genes def ine suce-
sivamente regiones cada vez más pequeñas del embrión de mosca de Se contraen la célula
la fruta y cómo los genes en un nivel estimulan e inhiben genes en y el núcleo; el núcleo La célula
otros niveles. De modo simila r, el desarrollo de las flores es controla- se fragmenta. presenta lisis
do por genes de clase A, clase B y clase C. La acción de cada clase y libera material
depende de qué productos de las otras clases estén presentes, y los citoplasmático.
Macróf ago
genes individuales de cada clase interactúan de maneras complejas ,
para controlar la diferenciación de cada verticilo de una flor.
Otra característica común del desarrollo en moscas de la fruta y flo-
res es que muchos de los genes involucrados en estos procesos ac-
túan por influir en la expresión de otros genes. Tanto en las moscas
de la fruta como en las flores, hay una cascada de desarrollo, en la
que los productos génicos estimulan otros genes que, a su vez, esti-
mulan otros genes. Muchos de los productos génicos son proteínas La contracción continúa
y la célula es englobada
reguladoras que se unen a DNA y afectan la transcripción de otros por un macrófago.
genes. Por ejemplo, los genes Hox de la Drosophila y los genes con
caja MADS de las flores codifican factores de transcripción que
desempeñan un papel importante en el desarrollo.
Una última similit ud es que cada sistema contiene genes homeóti-
cos, los cuales definen la identidad de estructuras o segmentos parti-
culares. La mutación de estos genes homeóticos produce estructuras
que se ubican en lugares incorrectos, por ejemplo, patas donde nor-
malmente se hallan antenas en moscas de la fruta o carpelos donde
, El macrófago
fagocita la célula '
suele haber sépalos en las f lores. apoptósica.

22.4 La muerte celular programada

es una parte integral del desarrollo

Un aspecto unportante del desarrollo es la muerte de las células. Figura 22-17. La muerte celular programada por apoptosis es distin-
La muerte celular modela muchas partes del cuerpo en el curso ta de la muerte celular no controlada secundaria a necrosis.

REGULACIÓN DE LA APOPTOSIS Sorprendentemente, la mayoría de
las células están programadas para sufrir apoptosis y sobrevivirán
solo si se mantiene una inhibición continua del programa de
muerte interna. La apoptosis está muy regulada y depende de nu-
merosas señales del interior y el exterior de la célula. Los gene-
tistas identificaron una serie de genes que intervienen en diversas
etapas de la regu lación de la ap optosis . Algunos de estos genes
codifican enzimas, deno1ninadas caspasas, que escinden a otras
proteínas en sitios específicos (después de ácido aspártico). Cada
caspasa es sintentizada como un precursor inactivo grande (una
procaspasa), que es activado por escisión, a n1enudo por otra cas-
pasa. Cuando se activa una caspasa, escinde otras procaspasas
que desencadenan actividad aún 1nayor de caspasas. Por último,
la consiguie nte cascada de actividad de caspasas esci nde proteí-
nas esenciales para la función celular, como las que mantienen la
membrana nuclear y el citoesqueleto. Las caspasas también
escinden una proteína que normalmente mantiene en forma inac-
tiva una enzima que degrada DNA (DNasa). La escisión de esta
proteína activa la DNasa e induce la degradación del DNA celu-
lar, lo que ll eva, por últim o, a la muerte celular.
Las células sanas producen en forma continua procaspasas y
otras proteínas requeridas para la muerte celular, de manera que
la posibilidad de suicidio celular siempre está presente. Una se1ie
de señales diferentes pueden desencadenar apoptosis; por ejem-
plo, la infección por un virus puede activar células in1nunitarias
para que secreten sustancias hacia una célula infec tada, lo que
causa que la célul a sufra apoptosis. Se considera que este proce-
so es un mecanismo de defensa destinado a prevenir la reproduc-
ción y diseminación de virus. De modo similar, el daño del DNA
puede inducir apoptosis y de esta n1anera evitar la replicación de
secuencias mutadas. El daño de las mitocondrias y la acumula-
ción de una proteína 1nal plegada e n el retículo e ndoplásnúco
también estimulan la muerte celular programada.
APOPTOSIS DURANTE EL DESARROLLO La apoptosis desempeña un
papel crucial en el desarrollo. A medida que los animales se desa-
rrollan, suele producirse un exceso de células que más tarde son
destruidas por apoptosis para producir el nú1nero adecuado de
células requeridas para un órgano o un tejido. En alg unos casos,
se crean estructuras completas que posteriorme nte son eliminadas
por apoptosis. Por ejemplo, los embriones te mpranos de mamífe-
ros desarrollan conductos reproductores tanto masculinos como
femeninos, pero los conduc tos de Wolff degeneran en las muj eres,
y los conductos de Muller, en los varones. Asimismo, la apopto-
sis desempeña un papel importante en el desarrollo de la fun ción
inmunitaria (véase Sección 22.6), donde los linfocitos que reco-
nocen las células propias del organismo por lo general sufren
apoptosis, de manera que no ataquen tej idos propios. El sistema
in1nunitario también puede inducir apoptosis de células infecta-
das por virus.
Durante el desarrollo en1brionario de la Drosophila, mueren
gran cantidad de células . Tres genes de Drosophila activan las
caspasas que son esenciales para la apoptosis: reaper (rpr), grim
y head involution defective (hid). Los embriones que tienen una
deleción que elimina los tres genes no presentan apoptosis y 111ue-
ren en el curso de la embriogénesis con un exceso de células.
Muchos otros genes también afectan el proceso de apoptosis.
Asimismo, la apoptosis es crucial durante la metamo1fos is, un
proceso por el cual las estructuras larvales se transforman e n
estructuras adultas. Por ejemplo, las grandes glándulas salivales de
Genética del desarrollo e inmunogenética 647
las larvas de moscas de la fruta presentan regresión durante la
metamorfosis. La hormona ecdisona estimula la me tamorfosis,
incluido el comienzo de la apoptosis. La ecdisona induce la expre-
sión de rpr y hid, e inhibe la expresión de otros genes, que después
inducen apoptosis de las células de las glándulas salivales.
APOPTOSIS DURANTE LA ENFERMEDAD Los síntomas de numerosas
enfermedades son causados por apoptosis o, en algunos casos,
por su ausencia. En trastornos neurodegenerativos, como la enfer-
medad de Parkinson y el Alzheimer, los síntomas se deben a una
pérdida de neuronas por apoptosis. En los infartos de miocardio y
el accidente cerebrovascular, algunas células 1nueren por necro-
sis, pero 1nuchas otras sufren apoptosis. A 1nenudo, el cáncer es
estimulado por mutaciones de genes que regula n la apoptosis, lo
que induce un fracaso de este proceso que, normalmente, elinú-
naría las células can cerosas (véase cap. 23).
CONCEPTOS
Las células tienen capacidad de present ar apoptosis (muerte celular
programada), un proceso altamente regulado que depende de enzi-
mas denominadas caspasas. La apoptosis desempeña un papel impor-
tante en el desarrollo de animales y se asocia con una serie de enfer-
medades.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
¿En qué se diferencia la muerte celular por apoptosis de la muerte
celular por necrosis?
22.5 El estudio del desarrollo revela patrones
y procesos de evolución
"La ontogenia recapitula la filogenia" es una frase familiar acu-
ñada en la década de 1860 por el zoólogo alemán Ernst H aeckel
para describir su concepto (considerado ahora una sobresimplifi-
cación) de que durante su desarrollo (ontogenia), los organismos
repiten su historia evolutiva (filogenia) . Según la opinión de
H aeckel, un embrión humano atraviesa estadios de pez, anfibio,
reptil y manúfero antes de desarrollar rasgos humanos. D esde
hace tie1npo, los científicos han reconocido que los organis1nos
no pasan por los estadios adultos de sus ancestros durante su de-
sarrollo, pero a menudo los embriones de estos organismos rela-
cionados muestran similitudes.
GENES COMUNES DE LAS VÍAS DE DESARROLLO Aunque la ontoge-
nia no recapitula con precisión la filogenia, en la actualidad
muchos biólogos de la evolución se está n dedicando a estudiar el
desruTolJo para conocer mejor los procesos y los patrones de evo-
lución. El estudio de la evolución mediante el análisis del desa-
1rollo, denon1Ínado a veces "evo-devo", está revelando que los
núsmos genes suelen deter1ninru· vías de desarrollo en organis1nos
que tienen una relación distante. Algunas vez, los biólogos consi-
deraron que la segmentación de los vertebrados e invertebrados
solo era similar e n la superficie, pero en la actualidad sabemos
que tanto en la Drosophila como en el cordado primitivo Bran-
quiostonia, el gen engrailed divide al embrión en segmentos espe-
648 CAPITULO 22
cíficos. Un gen llamado distalless, que crea las patas de una
mosca de la fruta, desempeña un papel en el desan·oll o de los
apéndices ramificados de los crustáceos. Este mismo gen también
estimula la apaii ción de excrecencias corporales en muchos otros
organismos, de gusanos poliquetos a estrellas de mar. Otro ejem-
plo es el papel de P itxl en el control de la presencia o ausencia de
espinas pélvicas en los espinosos, analizado en la introducción
de este capítulo. Este mismo gen se encuentra e n ratones, en los
que también afecta el desaiTollo de las patas traseras, y en los
seres humanos, en quienes las mutaciones del gen se han asocia-
do con la aparición de pie zambo.
Un ejemplo sorprendente de la manera en que los 111ismos
genes de organis1nos distantemente relacionados pueden detenn i-
nar vías de desarrollo similares se observa en el desarrollo de los
ojos en moscas de la fruta, ratones y seres humanos. Walter
Gehling y cols. examinaron los efectos del gen eyeless en la
Drosophila, que se requiere para el desarrollo apropiado del ojo
de la mosca de la fruta. Gehring y cols. crearon por ingeniería
genética células que expresaban eyeless en partes de la mosca
donde normalmente no se expresa este gen. Al nacer, estas mos-
cas tenían ojos en las alas, las antenas y l.as patas (fig. 22-1.8).
Estas estructuras no eran solo tejido similar al de los ojos, sino
ojos completos con córnea, conos y fotorreceptores que respon-
dían a la luz, aunque las moscas no podían utilizai·los para ver,
porque carecían de conexión con el sistema nervioso.
El gen eyeless tiene equivalentes en ratones y seres humanos
que afectan el desan·ollo de los ojos en los mamíferos. Hay una
llamativa similitud entre el gen eyeless de la Drosophila y el gen
Small eye presente en los ratones. En los ratones, una mutación
de una copia de Small eye causa ojos pequeños; un ratón homo-
cigótico para la 1nutación de Small eye no tiene oj os. Asimismo,
existe una si1nilitud e ntre eJ gen eyeless de la Drosophila y el gen
Aniridia de los seres humanos; una m utación de Aniridia produ-
ce malformaciones graves del ojo humano. Las similitudes de las
secuencias de eyeless, Small eye y Aniridia sugieren que los tres
Figura 22- 18. La expresión del gen eyeless induce el desarrollo de un
ojo en la pata de una mosca de la fruta. Asimismo, genes similares a
eye/ess controlan el desarrollo del ojo en ratones y seres humanos. (U.
Kloter y G. Halder/Biozentrum).
genes evolucionaron a partir de una secuencia ancestral común y
que hay una vía con1ún subyacente al desarrollo del ojo en 1nos-
cas, ratones y seres humanos. Esta posibilidad es sorprendente,
porque se creía que los ojos de los insectos y los mamíferos habí-
an evolucionado de manera independiente.
Genes similares pueden formar parte de una vía de desarrollo
común a dos especies diferentes, pero tienen efectos bastante dis-
ti ntos. Por ejemplo, un gen Hox denominado AbdB ayuda a defi-
nir el extremo posterior de un emb1ión de Drosophila; un grupo
similar de genes de aves divide el ala en tres segmentos. En otro
ejemplo, el gen sog de moscas de la fruta estimula a las células
para que adopten una orientación ventral en el embrión, pero la
expresión de un gen s imilar, denomjnado chordin, en los vertebra-
dos determina que las células asuman orientación dorsal, justo lo
opuesto a lo observado en las moscas de la fruta. En los vertebra-
dos, los genes toll codifican proteínas denominadas receptores
similares a Toll que se unen a moléculas de patógenos y estimu-
lan el sistema inmunitai·io. En las moscas de la fruta, el gen toll
funciona de manera similar en la irununidad, pero también codi-
fica una proteína que ayuda a determinar el eje dorsoventral,
como se mencionó antes. El tema emergente de estos estudios es
que un pequeño conjunto en común de genes puede subyacer a
numerosos procesos básicos del desaiTollo en muchos organis-
mos diferentes.
EVOLUCIÓN MEDIANTE EL CAMBIO DE EXPRESIÓN GÉNICA Otro con-
cepto revelado por m uchos estudios de evo-devo es que muchas
adaptaciones evolutivas importantes no se logran por cambios de
los tipos de proteínas producidos , sino por cambios de la expre-
sión de genes que codifican proteú1as que r egulan el desarrollo.
Esto es ilustrado en la introducción de este capítulo, donde la
deleción de un intensificador que esti1nula al gen Pit.xl de los
espinosos es responsable de la evolución a reducción de espinas
pélvicas en poblaciones de agua dulce del pez.
Este concepto ta1nbién se observa en la evolución del pez ciego
de las cuevas. L os tetras mexicanos (Astyanas mexicanus, sardi-
nita mexicana, pez ciego de las cuevas) habitan normalmente en
aguas superficiales de arroyos y ríos de Texas y el norte de Mé-
xico. H ace alrededor de 1O 000 años, algunos tetras migraron a
cuevas. En la total oscuridad del ambiente de las cuevas, la visión
no era necesaria y, con el transcurso del tiempo, estos tetras perdie-
ron los oj os. En la actualidad, alrededor de 30 poblaciones distin-
tas de tetras mexicanos son totalmente ciegos y carecen de ojos (fig.
22-19), mientras que las poblaciones de la misma especie que resi-
den en la superficie han conservado el desarrolJo ocular normal.
Figura 22-19. Los t etras mexicanos que viven en cuevas han perdido
los ojos debido a un cambio de la expresión génica durante el desa-
rrollo. (Mark Smith/Science Source).

¿Cómo perdieron sus ojos los tetras mexicanos? Los cigotos de
tetra mexícanos comíenzan a desan·ollar ojos, al igual que sus pri-
mos que habitan en la superficie, pero alrededor de 24 horas des-
pués de la fecundación se inte1n11npe el desan·ollo ocular y las célu-
las que estaban destinadas a convertirse en el cristalino mueren en
forma espontánea. La ausencia de cristalino impide el desarrollo de
otros cornponentes del ojo, como la córnea y el iris . Se forman la
papila óptica y la retina, pero su crecimiento se retrasa, y nunca se
diferencian las células foto1receptoras. El ojo degenerado se hunde
en la órbita y, finalmente, es cubierto por un colgajo de piel.
Los tetras mexicanos ciegos tienen los mismos genes que los
tetras 111exicanos que viven en la superficie; lo que difiere es la
expresión génica. Dos genes, denominados sonic hedgehog (shh)
y tiggy-winkle hedgehog (twhh) se expresan de manera m.ás am-
plia en el primordio del ojo del pez ciego de las cuevas que en el
pez de la superficie. (El gen hedgehog original recibió ese nom-
bre por un fenotipo mutante de Drosophila, en el que el embrión
1nutante está cubierto de espículas, co1110 un erizo. El gen sonic
hedgehog se denomina así por el personaje del videojuego, y el
gen tiggy-winkle hedgehog, por un personaje de los libros de
Beatrix Potter). La expresión ampliada de shh y twhh activa la
transcripción de otros genes que inducen apoptosis de las células
del cristalino, con su consiguiente degeneración.
Cuando los genetistas inyectaron mRNA de twhh o shh en em-
briones de peces de la superficie, se inte1rumpió el desarrollo del
cristalino, y los adultos que se desarrollaron a partir de estos
embriones carecían de ojos. Cuando se utili zaron fármacos para
inhibir la expresión de twhh y shh en en1briones de peces de las
cuevas, se restableció en parte el desarrollo ocular. Estos resulta-
dos demuestran que el desan·ollo de los ojos de los tetras mexica-
nos está regulado por la expresión precisa de shh y twhh. La
sobreexpresión de uno de estos genes o de ambos e n peces de las
cuevas induce la .m uerte de las célul as del c1istalino e interrumpe
el desarrollo ocular norn1al. Un pequeño aumento de la transcrip-
ción de uno u otro gen durante el desarrollo embrionario determi-
na un cambio anatómico importante en peces adultos, el cambio
que ha pern1itido que el pez se adapte a la oscuridad del ambien-
te de las cuevas. l!•~~:!!=.!!!:!:~!::!:!:!!!=:!.!:!!!~!:=:!!~:!!.I
Otro ejemplo de diferencias de expresión génica que inducen
cambios evolutivos se observa en los pinzones de Darwin, un
grupo de 14 pájaros muy relacionadas hallados en las Islas Ga-
lápagos (véase fig. 26-9). Los pájaros difieren fundamentalmente
en el tamaño y la for111a del pico: los pinzones terrestres tienen
picos profundos y anchos, los pinzones de los cactus tiene picos
largos y puntiagudos, y los pinzones trinadores tienen picos agu-
dos y finos. Estas diferencias se asocian con la dieta, y los cam-
bios evolutivos en la forma y el tamaño del pico han tenido lugar
en el pasado, cuando las alteraciones climáticas causaron cambios
en la abundancia de alimentos.
Para investigar la base genética subyacente de estos cambios
evolutivos, Arkaht Abzhanov y cols. utilizaron micromatrices
(véase cap. 20) para estudiar diferencias de los niveles de trans-
cripción de varios miles de genes de cinco especies de pinzones
de Darwin. Observaron diferencias en la expresión de un gen que
codifica una proteína, denonlinada calmodulina (CaM); la expre-
sión del gen que codifica calmodulina era más alta en el pico
largo y puntiagudo de los embriones de pinzón de los cactus que
en los picos de otras especies. La CaM interviene en un proceso
denominado señalización de calcio, que se sabe afecta muchos
aspectos del desarrollo. Cuando Abzhanov y cols. activaron la
señalización de calcio en embriones de pollo en desarrollo, los
Genética del desarrollo e inmunogenética 649
pollos tuvieron picos más largos, como los del p in zón de los cac-
tus. Por consiguiente, estos investigadores pudieron reproducir,
por lo menos en parte, la diferencia evolutiva que distingue a los
pinzones de los cactus. Este experimento muestra que los cam-
bios de expresión de un solo gen en el curso del desarrollo pue-
den producir diferencias anatónucas significativas en los adultos.
En estos y otros estudios, los esfuerzos co1nbinados de biólogos
del desarrollo, genetistas y biólogos de la evolución son fuentes
de información importante respecto de cómo tiene lugar la evolu-
ción. Si bien la frase eufónica de Haeckel "la ontogenia replica la
filogenia" era incorrecta, la evo-devo está probando que el desa-
rrollo puede revelar mucho acerca del proceso de evolución.
22.6 El desarrollo de la inmunidad se produce
mediante reordenamiento genético
Como hemos visto en nuestra consideración sobre el desarrollo
de animales y plantas, un principio básico de la biología del desa-
rrollo es que cada célula somática contiene un conjunto idéntico
de información genética y que ningún gen se pierde durante el
desarrollo. Aunque este principio básico es válido para la mayo-
1ia de las células, hay algunas excepciones importantes, una de las
cuales concierne a los genes que codifican la función inmunitaria
en los vertebrados. Durante el desarrollo de la inmunidad, seg-
mentos individuales de cie rtos genes se reordenan en diferentes
combinaciones, lo que genera células inmunitarias que contienen
distinta información genética y que están adaptadas, cada una,
para atacar una sustancia extraña en particular. Este reordena-
miento y pérdida de material genético son la clave del poder de
nuestro sistema inmunitario para protegernos contra casi cual-
quier sustancia extraña concebible.
El siste1na iJ1munitario confiere protección contra infecciones
por bacterias, virus, hongos y parásitos. El foco de una respuesta
inmunitaria es el antígeno, definido como cualquier molécula (en
general, una proteína) que provoca una reacción inmunitaria. El
sistema inmunitario es sorprendente por su capacidad de recono-
cer una cantidad casi ilimitada de posibles antígenos. El organis-
mo está lleno de proteínas, de rnanera que es esencial que el sis-
tema inmunitario distinga entre antígenos propios y antígenos
extraños. En ocasiones, la capacidad de realizar esta distinción
falla, y el organismo genera una reacción inmunitaria contra antí-
genos propios, lo que causa una enfermedad autoinmunitaria
(cuadro 22-5).
Cuadro 22-5 Ejemplos de enfermedades autoinmunitarias
Enfermedad Tejidos atacados
Enfermedad de Graves, Glándu la tiroides
tiroiditis de Hashimoto
Fiebre reumática Músculo cardíaco
Lupus eritematoso sistémico Articulaciones, piel y otros órganos
Artritis reumatoidea Articulaciones
Diabetes mellitus insulinode- Células pancreáticas productoras
pendiente de insulina
Esclerosis múltiple Vaina de mielina alrededor de las
células nerviosas
650 CAPITULO 22
Organización del sistema inmunitario
El sistema inmunitario contiene una serie de componentes distintos
y utiliza varios mecanismos para proteger contra patógenos, pero la
mayoría de las respuestas inmunitarias pueden agruparse en dos
clases principales: irnnunidad humoral e inn1unidad celular. Si bien
es conveniente considerar estas clases como siste1nas independien-
tes, entre ellas existe interacción e influencia significativas.
INMUNIDAD HUMORAL La función inmunitaria es llevada a cabo
por células especializadas de la sangre denominadas linfocitos,
que son un tipo de leucocitos. La inmunidad humoral se centra
en la producción de anticuerpos por linfocitos especializados, lla-
mados linfocitos B (fig. 22-20), que maduran en la médula ósea.
Los anticuerpos son proteínas que circulan por la sangre y otros
líquidos orgánicos, se unen a antígenos específicos y los marcan
para que sean destruidos por células fagocíticas. Los anticuerpos
también activan un conjunto de proteínas, deno1ninadas comple-
mento, que ayudan alisar células y a atraer macrófagos.
INMUNIDAD CELULAR Los linfocitos T (véase fig. 22-20) son lin-
focitos especializados que maduran en el timo y responden solo a
antígenos hallados en las superficies de las células propias del
organismo. Estos linfocitos son responsables del segundo tipo de
respuesta inmunitaria, la inmunidad celular.
Después de que un patógeno, por ejemplo un virus, ha infecta-
do una célula huésped, algunos antígenos virales aparecen en la
superficie de la célula. Proteínas, denominadas receptores de lin-
focitos T , de la superficie de los linfocitos T se unen a estos antí-
genos y marcan a la célula infectada para que sea destruida. Los
receptores de linfocitos T se deben unir en forma simultánea a un
antígeno extraño y a un antígeno propio, denominado antígeno
del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) de la su-
perficie de la célula (analizado más adelante en este mismo capí-
tulo). No todos los linfocitos T atacan células que tienen antíge-
nos extraños; algunos ayudan a regular las respuestas inmunitarias
al establecer cornunicación entre distintos componentes del siste-
ma inmunita1io.
ÓLos linfocitos se originan Los linfocitos B maduran
L a partir de células madre
de la médula ósea.
en la médula ósea.
Célula precursora
CC9
Linfocito B
de linfocitos
Célula
plasmáticq
Ó Los linfocitos T maduran en eT7
~ mo e ingresan en la circulaciónJ
u
,===o,Q - - - - - - .
Linfocito T
Timo
Figura 22-20. Las respuestas inmunitarias se clasifican en inmunidad humoral, en la que los lin-
focitos B producen anticuerpos, e inmunidad celular, mediada por linfocitos T.
SELECCIÓN CLONAL ¿Cómo puede reconocer el sistema inmunita-
rio una cantidad casi ilimitada de antígenos extraños? Sorpren-
dentemente, cada linfocito maduro está genéticamente programa-
do para atacar uno y solo un antígeno específico: cada linfocito B
maduro produce anticuerpos contra un solo antígeno, y cada lin-
focito Tes capaz de unirse solo a un tipo de antígeno extraño.
Si cada linfocito es específico para solo un tipo de antígeno,
¿cómo se desan·olla una respuesta inmunitaria? La teoría de la
selección clonal afirma que al principio hay un gran conjunto de
millones de linfocitos diferentes, cada uno de los cuales es capaz
de unirse a un único antígeno (fig. 22-21), de m anera que es posi-
ble detectar nullones de antígenos extraños diferentes. Para ilus-
trar la selección clonal, in1aginemos que una proteína extra11a
ingresa en el cuerpo. Solo unos pocos linfocitos del conjunto
serán específicos para este antígeno extraño en particular. Cuando
uno de estos linfocitos encuentra el antígeno extraño y se une a
este, se estimula la división de ese linfocito. El linfocito prolifera
rápidamente y produce una gran población de células genética-
1nente idénticas (un clon), cada una de las cuales es específica
para este antígeno en particular.
Esta proliferación inicial de linfocitos B y T específicos de antí-
geno se conoce como respuesta inmunitaria primaria (véase fig.
22-21); en la mayoría de los casos, la respuesta primaria destruye
el antígeno extraño. Después de la respuesta primaria, la mayoría
de los linfocitos del clon 1nueren, pero unos pocos continúan circu-
lando por el organis1no. Estas células de memoria pueden perma-
necer en la circulación durante años, o incluso durante el resto de
la vida de una persona. En caso de que el mismo antígeno reapa-
rezca en el futuro, se activan las células de memo1ia específicas de
ese antígeno y dan origen rápidamente a otro clon de células capa-
ces de unirse al antígeno. El surgimiento de este segundo clon se
denonúna respuesta inmunitaria secundaria (véase fig. 22-21).
La capacidad de producir rápidamente un segundo clon de células
específicas del antígeno posibilita la inmunidad persistente que
suele seguir a la recuperación de una enfermedad. Por ejemplo, las
personas que tienen varicela suelen tener inmunidad contra la
enfermedad durante toda la vida. La respuesta inmunitaria secun-
daria ta1nbién es la base de la vacunación, que estin1ula una res-
Cuando los linfocitos B
encuentran antígenos,
maduran a células plasmáticas,
1
Médula Anticuerpos l
que secretan anticuerpos que ¡
se unen al antígeno
(inmunidad humoral). J
ósea
Antígenos ----
Se unen a las células
huésped y provocan su lisis
•
(inmunidad celular) .
•
I • •l
• ...
•
Receptores
de linfocitos T •
•
se unen a antígenos I \
 Genética del desarrollo e inmunogenética 651

En un conjunto puesta inmunitaria primaria contra un antígeno y da origen a célu-

grande de linfocitos las de memoria que pueden generar rápidamente una respuesta
B, cada uno es secundaria si ese mismo antígeno aparece en el futuro. En las res-
específico para un puestas inmunitarias, se usan tres conjuntos de proteínas: anticuer-
antígeno. pos, receptores de linfocitos T y antígenos del complejo mayor de
••
••
Antígeno histoco111patibilidad. La siguiente sección explora cómo se genera
Cuando un antígeno la enor1ne diversidad de estas protefuas.
se une a un linfocito
B, este se divide .. .
CONCEPTOS
Cada linfocito B y linfocito T del sistema inmunitario es genéticamen-
Respuesta
te capaz de unirse a un tipo de antígeno extraño. Cuando un linfocito
inmunitaria :-o-.
primaria jclon de linfocitosy 1 se une a un antígeno, el linfocito presenta división repetida, lo que da
I origen a un clon de linfocitos genéticamente idénticos (la respuesta
... y da origen a un primaria), todos los cuales son específicos para ese mismo antígeno .
clon de linfocitos B, Las células de memoria permanecen en la circulación por períodos pro-
todos específicos para
longados; si reaparece el antígeno, las células de memoria proliferan
el mismo antigeno.
rápidamente y generan una respuesta in munitaria secundaria.
, Esta proliferación de
linfocitos es la
respuesta inmunitaria
Células
.
pnmana.
. Estructura de las inmunoglobulinas
,,...
plasmáticas ~ Los principales productos de la respuesta inmunitaria humoral
Algunas células se

~~
diferencian a células
plasmáticas secretoras
de anticuerpos.
, Los anticuerpos son
específicos para el
antígeno .
son anticuerpos, deno1ninados tan1bién in1nunogJobulinas. Cada
molécula de in1nunoglobulina (lg) está formada por cuatro ca-
denas polipeptídicas (dos cadenas livianas idénticas y dos cade-
nas pesadas idénticas) que forman una estructura en forma de Y
(fig. 22-22). Los puentes disulfuro unen las dos cadenas pesadas
{a) Sitio de unión Sitio de unión
al antígeno al antígeno

4"'\
Cadenas

~
pesadas
Respuesta
Células de ~~ Las células de memo- ~
ria se mantienen en "t]Región
inmunitaria memoria ~~
secundaria
Antígeno ••
r-
. la circulación.

el mismo antígeno
s
s
s 5
s
5
\-' variable {V)
¡ \Región de

TI
•• / s 5 1
eaparece más Cadena Cad ena unión (J)
delante, ... liviana liviana Región
,.. L constante (C)

é l
• ... el antfgeno se
une a las células de
memoria, ...
Sitio de
+ + + + + ♦
(b) Sitio de unión Cadenas livianas
al antígeno unión al
ntígeno

cveG~cv~
l l J J
\ ~ ::\.

.
Ce lulas
+
f.¡j) ~ .que rápidamente
an origen a una
(0-
plasmáticas

€S) ~ U
Células
ecundaria. __
espuesta inmunitaria
...,
Cadenas
pesadas

de memoria

Figura 22-22. Cada molécula de ínmunoglobulina está formada por

cuatro cadenas polipeptídicas (dos cadenas livianas y dos cadenas
Figura 22-21. La respuesta inmunitaria contra un antígeno
pesadas) que se combinan para crear una estructura en forma de Y.
específico se produce por medio de selección clona!.
a) Estructura de una inmunoglobu lina. b) Modelo espacial, plegado .
652 CAPITULO 22
en el tall o de la Y y unen una cadena liviana a una pesada en cada
ra1na de la Y. Los sitios de unión para antígenos se localizan en
los extremos de las dos ramas.
Las cadenas livianas de una irunu noglobulina son de dos tipos
básicos: cadenas kappa y cadenas lambda. Una molécula de in-
1nunoglobulina puede tener dos cadenas kappa o dos cadenas
lambda, pero no una cadena de cada tipo. Tanto la cadena liviana
como la pesada tienen una región variable en un extremo y una
región constante en el otro; las regiones variables de diferentes
moléculas de inmunoglobulinas varían en la secuencia de amino-
ácidos, mientras que las regiones constantes de diferentes inmu-
noglobulinas tienen secuencia sinular. Las regiones variables
tanto de las cadenas livianas como de las pesadas representan las
regiones de uni ón al antígeno y especifican el tipo de antígeno al
que puede unirse el anticuerpo.
Generación de la diversidad
de anticuerpos
.El siste.ma inm uni tario es capaz de fab ricar anti cuerpos contra
casi cualquier antígeno que podría encontrarse durante la vida
de una persona: cada persona es capaz de fabricar ali-ededor de
10 15 moléculas de anticuerpos. Los anticuerpos son proteínas,
de manera que las secuencias de aminoácidos de los 1015 anti-
cuerpos potenciales deben estar codifi cadas en el genoma hum a-
no. Sin e1n bargo, hay menos de 1 x 10 5 genes en el genoma
humano, y de hecho, solo 3 x 109 pares de bases totales, de
(a) Hay 30-3 5 egmentos ... 5 segmentos del gen J
diferentes del gen V, ...
Segmentos
- ... - ------
- 1~
de la región variable
2 -¡¡¡¡¡¡¡- 3~
de la región de unión
- - - ---',
(b) --·
, -_-
(e)
=
= ~ ~~:i¡---=_=...
2
(d)
(e)
Figura 22-23. La diversidad de anticuer-
pos es producida por recombinación
4~
somática. Aquí se muestra la recombina-
ción entre segmentos de genes que codif i-
can la cadena liviana kappa humana.
manera que ¿cómo puede codificarse esta enorme diversidad de
anticuerpos?
La respuesta reside en el hecho de que los genes de anticuerpos
están compuestos por segmentos. Hay una se1ie de copias de cada
tipo de segmento, cada una de las cuales difiere de n1anera ligera
de las demás. Durante la n1aduración de un linfocito, los segmen-
tos se unen para crear un gen de inmunoglobulina. La copia parti-
cular de cada seg.mento utili zado es aleatoria y, como hay múlti-
ples copias de cada tipo, existen muchas combinaciones posibles
de los segmentos. Por lo tanto, una cantidad limitada de segmen-
tos puede codificar una enorme diversidad de anticuerpos.
Para ilustrar este proceso de ensamblaje de anticuerpos, consi-
deremos las cadenas li vianas de las inmunoglobulinas. Las cade-
nas kappa y la1nbda son codificadas por genes distintos de dife-
rentes cromosomas. Cada gen está compuesto por tres tipos de
segmentos: V, por variable; J, por unión; y C, por constante. Los
segmentos V codifican la mayor paite de la región variable de las
cadenas livianas, el segmento C codifica la región constante de la
cadena, y los segmentos J codifican un conj unto corto de nucleó-
tidos que unen los segmentos V y C. El número de segmentos V,
J y C difiere entre las especies. Para el gen humano de kappa, hay
de 30 a 35 segmentos génicos funcionales diferentes V, 5 genes J
distintos y un solo segmento génico C, todos los cuales están
presentes en el DNA de la línea germinal (fig. 22-23a). Los seg-
mentos génicos V, que tienen alrededor de 400 pb de longitud, se
localizan en el mismo cromosoma y están separados entre sí por
alrededor de 7000 pb. Los segmentos génicos J tienen alrededor
... y 1 segmento del gen e en
~ DNA de la línea germinal.
,-A---.,
Segmentos Segmentos de la región constante
1 3 4 5
DNA
de la línea
germinal
2 3 4 5
- -~ - - DNA del
linfocito B
• En este ejemplo, V2 se desplaza al lado de J3 por
recombinación somática, lo que produce el DNA hallado
Transcriptión en un linfocito B maduro.
¡
::;---~ -.-----_=-=-=-=-=-
3 4 5
=- =-=--=-:::J Pre-
mRNA
El pre-MRNA de V-J-C pre-mRNA es procesado de
manera que el mRNA maduro contiene secuencias de
solo un segmento génico V, J y C.
AAAAAAA RNA
2 3 m aduro
Traducción l~ e mRNA se traduce a una cadena liviana funcionaQ
♦
C Proteína
 Genética del desarrollo e inmunogenética 653

de 30 pb de longitud y e ntre todos ell os abarcan aproximadan1en-

te 1400 pb.
CONCEPTOS
Inicialmente, un linfocito inn1aduro hereda todos los segmentos
Los genes que codifican las cadenas de anticuerpos están organ iza-
génicos V y todos los segmentos génicos J presentes en la línea
dos en segmentos, y el DNA de la línea germinal contiene múltiples
germinal. Durante la maduración del linfocito, la recombinación
versiones de cada segmento. Las numerosas combinaciones posibles
somática dentro del mismo cromosoma mueve uno de los seg-
de los segmentos V, J y O permiten generar una inmensa variedad de
1nentos génicos V a una posición adyacente a la de un segmento
anticuerpos diferentes. Esta diversidad aumenta por las distintas com-
génico J (fig. 22-23b). En la figura 22-23b, V 2 (el segundo de
binaciones de cadenas livianas y pesadas, la adición y deleción alea-
alrededor de 35 segme ntos génicos V diferentes) sufre recombi-
torias de nucleótidos durante la unión de los segmentos y las altas
nación somática, que lo coloca al lado de J3 (el tercero de 5 seg-
tasas de mutación de los genes de inmunoglobulina.
mentos génicos J); los seg111entos interpuestos se pierden.
Una vez que se ha producido la recombinación somática, se
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7
transcribe el gen de la cadena liviana a pre-mRNA que contiene
un gen Vy varios genes J, junto con el gen C (fig. 22-23c). El pre-
¿En qué se diferencia la recombinación somática del corte y empalme
mRNA resultante es procesado (fig. 22-23d) para producir un
alternativo de RNA?
mRNA maduro que solo contiene secuencias de un solo segm en-
to V, J y C; este mRNA se traduce a una cadena liviana funcional
(fig. 22-23e). De esta manera, cada linfocito B humano maduro
produce un tipo único de cadena liviana kappa, y diferentes linfo- Diversidad de los receptores de linfocitos T
citos B producen cadenas kappa li gerame nte disti ntas, lo que
depende de la combinación de segmentos Vy J que se unan. Al igual que los linfocitos B , cada linfocito T maduro tiene espe-
El gen que codifica la cadena liviana lambda se organiza de una cificidad genéticamente deternú nada para un tipo de antígeno,
manera similar, pero difiere de la cadena kappa en el nú1nero de mediada a través de los receptores de la célula. Los receptores de
copias de los distintos segmentos. La recombinación son1ática linfocitos T tienen una estructura similar a la de las in1nunoglobu-
entre los segmentos tie ne lugar del mis1no modo que e n el gen de linas (fig. 22-24) y están localizados en la supe1ñcie celular; la
kappa, lo que genera much as co.m binaciones posibles de cade nas mayoría de los receptores de linfocitos T están co1npuestos por
livianas lambda. El gen que codifica la cadena pesada de la inmu- una cadena polipeptídica alfa y una beta unidas por puentes di sul-
noglobulina también se ordena en segmentos V, J y C, pero tiene furo. Un extremo de cada cadena está incluido en la membrana
también segmentos D (por diversidad) . Por lo tanto, hay muchos celular; el otro extremo se proyecta fuera de la célula y se une a
tipos posibles de cadenas livianas y pesadas. antígenos. Al igual que las cadenas de inmunoglobulinas, cada
La recombinación somática es inducida por las proteínas RAG 1 cadena del receptor de linfocitos T tiene una región constante y
y RAG2, que generan roturas bicatenarias en secuencias nucleo- una vru·iable (véase 6g. 22-22); las regiones variables de las dos
tídicas específicas, denominadas secuencias de señal de recombi- cadenas forman el si tio de unión al antígeno.
nación, que flanquean los segmentos génicos V, D , J y C. Luego,
las proteínas de reparación del DNA procesan y unen los extre-
Receptores Región de unión
1nos de segn1entos particulares. de superficie al antígeno
Además de la recombinación somática, otros mecanismos au-
mentan la diversidad de antic uerpos. Priine ro, cada tipo de cade-
na liviana puede combinarse, potencialmente, con cada tipo de
v
cade na pesada para formar una molécula fu ncional de inmuno- Reg ión
globulina, lo que aumenta la cantidad de posible vruiación de variable
Linfocito T
los anticuerpos. Segundo, el proceso de recombinación que une
los segmentos génicos V, J, D y C en el linfocito en desarrollo
es iJnpreciso, y se suelen perder o ganar de manera aleatoria s s Región
algunos nucleótidos en la unión de los segmentos recombinan- Exterior de la célula
s s constante
tes. La diversidad por unión aumenta mucho la variación entre s s
antic uerpos. U n tercer mecanismo que aumenta la diversidad de
anticuerpos es la hipermutación somática, un proceso que
induce una alta tasa de 1nutación de los genes de anticuerpos.
Este proceso se inicia c uando se desamina n bases de citosi na, lo
que Jas convierte e n uracilo. Las bases de uraci lo son detectadas
y reemplazadas p or mecanismos de reparació n deJ DNA (véase Interior de la célula
cap. 18) que son proclives a error y a menudo reemplazan la / \
citosina original por una base diferente, lo que induce una muta- Cadena alfa Cadena beta
.,
ClOil.
Figura 22-24. Un receptor de linfocitos T está compuesto por dos
Mediante los procesos de recombinación somática, diversidad
cadenas polipeptídicas, cada una de las cuales tiene una región
de unión e hipermutación somática, cada linfocito llega a tener un variable y una constante. La mayoría de los receptores de linfocitos T
conjunto úni co de información genética (diferente de la de otros están compuestos por cadenas polipeptídicas alfa y beta unidas por puen-
linfocitos) que codifica un anticuerpo específico contra un antíge- tes disulfuro. Un extremo de cada cadena atraviesa la membrana celu lar; el
no en particulru·. D INTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 28 otro extremo se proyecta fuera de la célula y se une a antígenos.
654 CAPITULO 22

Los genes que codifi can las cadenas alfa y beta del receptor de
linfocitos T están organizados de manera m uy similar a los que
CONCEPTOS
codifican las cadenas pesadas y livianas de las inmunoglobulinas:
Los genes del MHC codifican proteínas que dan ident idad a las célu-
cada gen está formado por segmentos que sufren recombinación
las de cada organismo individual. Para provocar una respuesta inmu-
somática antes de la transcripción. Por ejemplo, el gen humano de
nitaria, un receptor de linfocitos T debe unirse de manera simu ltánea
la cadena alfa está compuesto inicialn1ente por 44 a 46 seg1nen-
a un antígeno de histocompatibilidad (propio) y a un antígeno extra-
tos génicos V, 50 segmentos génicos J y un solo segmento géni-
ño específico.
co C. La organización del gen para la cadena beta es similar,
excepto que también contiene segmentos génicos D . Las cadenas
alfa y beta se combinan de manera aleatoria y hay diversidad por
unión, pero no hay evidencia de hiperm utación somática en los Genes y trasplante de órganos
genes de los receptores de linfocitos T.
En una persona con daño grave de un órgano, una operación de
trasplante puede representar la única esperanza de supervivencia.
CONCEPTOS E l trasplante exitoso requiere más que la habilidad de un ciruja-
no: también requiere una compatibilidad genética entre el pacien-
Al igual que los genes que codifican anticuerpos, los genes de las te y la persona que dona el órgano. El destino del tejido trasplan-
cadenas del receptor de linfocitos T están formados por segmentos tado depende, en gran medida, del tipo de antígenos presente en
que presentan recombinación somática, lo que genera una enorme la superficie de sus células. Como los tejidos extraños suelen ser
diversidad de sitios de unión a antígeno. rechazados por el huésped, el trasplante exitoso ele tej idos entre
diferentes personas es muy dif ícil. Es posible inhibir en forma
parcial el rechazo del tejido mediante fármacos que interfieren
con la inmunidad. Lamentablemente, este tratamiento puede crear
Genes del complejo mayor
de histocompatibilidad
Cuando se transfieren tej idos de una especie a otra, o incluso de Macrófago .~ M olécula del MHC

~ ~ --~'=f==~ ~
un miembro a otro dentro de la especie, los tejidos trasplantados
. • • virus es ingerido
suelen ser rechazadas por el animal huésped. Los resultados de V 1rus U ur
los primeros estudios demostraron que este rechazo de injertos se L .______/! l por un macr6fago•. .. 1
debe a una respuesta inmunitaria que tiene lugar cuando los antí-
genos de las células del tej ido injertado son detectados y atacados
por linfocitos T del organismo huésped. Los antígenos que provo-
♦ Antígeno viral (extraño)
/""'-
can el rechazo de injertos se denominan antígenos de histocom-
..
✓· ·
. ·.) ... que procesa y
patibilidad y son codificados por un grupo de genes llamados

L.J ·~
presenta los antígenos
complejo mayor de histocompatibilidad (MHC). extraños en su
Los linfocitos T se activan solo cuando el receptor de linfocitos _______
...__superficie . _,
T se une en forma simultánea a un antígeno ex traño y al antígeno
de histoco1npatibilidad propio de la célula huésped. No se ha
esclarecido la razón de este requerimiento; puede reservar linfo-
citos T para actuar contra patógenos que han invadido células.
o
Linfocito T o
Un receptor de
linfocitos T se une al
antígeno extraño y a
Cuando un cuerpo extraño, como un virus, es ingerido por un / ../"-. .. las moléculas de
histocompatibilidad
1nacrófago u otra célula, los fragmentos parcialmente digeridos (MHC) propias de la
: } Receptor
del cuerpo extraño que contienen antígenos son presentados en la
superfic ie celul ar (fig. 22-25). u ·na célula infectada por un virus
L.J' i~focitos T
célula huésped.

•
también puede expresar antígenos virales en su superficie celular.
A través de sus receptores, los linfocitos T se unen tanto a la pro-
teína de histocompatibilidad como al antígeno extraño y secretan / ../""'-.. ~
sustancias que destruyen la célula que contiene el antígeno, acti- . )
van otros linfocitos B y T o hacen an1bas cosas.
Los genes del MHC se encuentran entre los 111ás var iables cono-
\ ..JJ Perfo~r":
in~a:::;;::-._ _ _ _ _ _ ___
(_ • Esta unión estimula al

o
cidos: hay más de 100 alelos diferentes para algunos locus del
1 linfocito Ta liberar
MHC. Como cada persona tiene cinco o más locus de MHC y
como hay numerosos alelos posibles en cada locus, no hay dos _; .> ,_!,,':::: moléculas ...
personas (salvo los gemelos idénticos) que produzcan el 1nismo .. . .
conjunto de antígen os de histocompatibilidad. La variación de los ... que lisan la célula pre-
antígenos de histocompatibilidad proporciona a cada uno de no- , , ,....'r' ..--.. sentadora de antígenos.
sotros LLna identidad única para nuestras células, lo que permite
que nuestros sistemas inmunitaiios distingan lo que es propio de Figura 22-25. Los linfocitos T son activados por la unión a un antíge-
lo que no lo es. E sta variación también es la causa del rechazo en no extraño y a un antígeno de histocompatibilidad en la superficie
trasplantes de órganos. de una célula propia.

problemas graves a los pacientes trasplantados, porque pueden
tener dificultad en combatir patógenos comunes y, por consi-
guiente, pueden n101ir por infección. La única otra opción para
controlar la reacción inmunitaiia es compatibilizar de manera cui-
dadosa al donante y al receptor, lo que maxinuza las similitudes
genéticas.
Los antígenos tisulai·es que desencadenan la reacción inn1u1üta-
ria más intensa son los mismos que utiliza el sistema inmunitario
para marcar las células propias: los codificados por el MHC. El
MHC abarca una región de más de 3 millones de pares de bases
en el cromoson1a 6 humano y tiene numerosos alelos, lo que
genera diferentes antígenos de MHC en las células de personas
distintas y pe1mite que el sistema inn1unitai·io reconozca las célu-
las extrañas. La gravedad del rechazo inmunitario de un órgano
trasplantado depende del número de antígenos del MHC no com-
patibles presentes en las células del tejido trasplantado. Los antí-
genos ABO de los eritrocitos ta1nbién son importantes, porque
inducen una intensa reacción inmunitaria. El donante ideal es el
gemelo idéntico del paciente, que tendrá exactamente los 1nis1nos
antígeno de MHC y ABO. Pero la mayoría de los pacientes no tie-
nen un gemelo idéntico. E l mejor donante siguiente es un herma-
■ Cada organismo multicelular se inicia como una sola célula
que tiene el potencial de convertirse en cualquier tipo celular.
A medida que avanza el desatTollo, las células se comprome-
ten con un destino particular. Los resultados de los experi-
mentos de clonación demostraron que este proceso surge de la
expresión génica diferencial.
■ En el embrión temprano de D rosophila, la determinación se
produce mediante una cascada de control génico.
■ L os ejes dorsoventral y anteroposterior del embrión de
Drosophila se establecen por la acción de genes de polaridad
del huevo, que se expresan en la madre y producen RNA y
proteínas que se depositan en el citoplasma del óvulo. L as
diferencias iniciales de distribución de estas moléculas regu-
lan la expresión génica en distintas partes del embrión. El eje
dorsoventral se define por un gradiente de concentración de la
proteína Dorsal, y el eje anteroposterior, por gradientes de
concentración de las proteínas Bicoid y Nanos.
■ Tres tipos de genes de segmentación actúan de manera
secuencial para determinar el número y Ja organización de los
segmentos embrionaiios de Drosophila. Los genes gap esta-
blecen grandes secciones del embrión, los genes de la regla de
los pares afectan segmentos alternados y los genes de polari-
dad del segmento afectai1 la organización de segmentos indi-
viduales. Luego, los genes homeóticos definen la identidad de
cada segmento de Drosophila.
■ Los genes homeóticos controlan el desarrollo de la estructura
floral. Tres conjuntos de genes interactúan para determinar la
identidad de los cuatro verticilos hallados en una flor completa.
■ La apoptosis, o muerte celular programada, es un proceso
n1uy regulado que depende de caspasas, proteínas que escin-
den proteínas. La apoptosis desempeña un papel importante
en el desarrollo de muchos animales.
Genética del desarrollo e inmunogenética 655
no con los mismos antígenos pri ncipales de MHC y ABO. Si no
se tiene un hermano, se consideran donantes de la población
general. Se intenta buscar compatibilidad entre la mayor cantidad
posible de antígenos de MHC del donante y del receptor, y se
indican fármacos inmunosupresores para controlar el rechazo por
incon1patibilidad. El éxito a largo plazo de los trasplantes depen-
de del grado de co1npatibilidad. Las tasas de supervivencia des-
pués de trasplante de 1iñón (el más exitoso de los trasplantes de
órganos importantes) aun1entan del 63% sin ninguna o con una
coincidencia al 90% con cuatro coincidencias.
En la actualidad, los científicos han tenido éxito en inducir la
pérdida de características especializadas en células adultas para
que recuperen un estado indiferenciado denominado célula 1nadre
pluripotente (véase cap. 21), que es capaz de convertirse en
muchos tipos celulares distintos. En el futuro, quizá será posible
crear células madre pluripotentes a pattir de las células adultas de
una persona y después hacer que se desarrollen para formai· teji-
dos u órganos que podríat1 ser trasplantadas a la misma persona.
Estas células tendrían los nlismos antígenos de MHC que la célu-
la original, lo que evitaría el rechazo inmunitario que se produce
con los trasplantes entre personas diferentes.
■ El sistema inmunitario es la red de defensa primaria de los
vertebrados. En la inmunidad humoral, los linfocitos B produ-
cen anticuerpos que se unen a antígenos extraños; en la inmu-
nidad celular, los linfocitos T atacan células que contienen
an tígenos extraños.
■ Cada linfocito B y T es capaz de unirse a un único tipo de
antígeno extraño. Cuando un linfocito se une a un antígeno, el
linfocito se divide y da origen a un clon de células, cada una
específica para ese mismo antígeno: la respuesta inmunita1ia
primaria. Algunas células de memo1ia permanecen en la circu-
lación por períodos prolongados y, ante la exposición al
mismo antígeno, pueden proliferar rápida1nente y generai· una
respuesta inmunitaria secundai~ia.
■ Las inmunoglobulinas (anticuerpos) son codificadas por genes
formados por varios tipos de segmentos; el DNA de la línea
ger1ninal contiene múltiples copias de estos segmentos géni-
cos, cuya secuencia difiere de 1nanera ligera. La recombina-
ción somática une en forma aleatoria una versión de cada seg-
mento para producir un único gen completo, lo que posibilita
numerosas combinaciones. La diversidad aumenta aún más
por la adición y deleción aleatorias de nucleótidos en las unio-
nes de los segmentos y por una alta tasa de 1nutación.
■ Los genes de la línea germinal de los receptores de linfocitos
T están formados por segmentos con múltiples copias varian-
tes. La recombinación somática genera muchos tipos dife-
rentes de receptores de linfocitos T en distintas células. La
diversidad por unión también aumenta la variabilidad de los
receptores de linfocitos T.
■ El complejo mayor de hlstocompatibilidad codifica una serie de
antígenos de histocompatibilidad. El antígeno del MHC permite
que el sistema inmunitario distinga lo que es propio de lo que
no lo es. Cada locus del MHC contiene numerosos alelos.
 TÉRMINOS IMPORTANTES

antícuerpo (p. 650) complejo homeótico gen elle polaridad del huevo (p. 637) morfógeno (p. 638)
antígeno (p. 649) (HOM-C) (p. 642) gen d!e polaridad del segmento (p. 640) receptor de linfocito T (p. 650)
apoptosis (p. 646) complejo 1nayor de histocon1- gen elle segmentación (p.640) recombinación somática
caja homeótica (p. 641) patibilidad (MHC) (p. 650) gen gap (p. 640) (p. 653)
caspasa (p. 647) determinación (p. 634) gen hon1eótico (p. 640) respuesta inmunitaria primaria
cé1 ula de n1emoria diversidad por unión gen Hox (p. 642) (p. 650)
(p. 650) (p. 653) hipermutación somática (p. 653) respuesta inmuníta1ia secunda-
complejo Antennapedia enfermedad autoinmunitaria inmunidad celular (p. 650) 1ia (p. 650)
(p. 641) (p. 649) inmunidad humoral (p. 650) teoria de la selección clona!
complejo bitlwrax gen de la regla de los pares linfocito B (p. 650) (p. 650)
(p. 642) (p. 640) linfocito T (p. 650) totipotencia (p. 634)

l. No, no prueba que el material genético no se pierde durante
el desan:ollo, porque la diferenciación todavía no ha tenido
lugar en el embrión temprano. Es probable que el embrión
temprano aún contenga todos sus genes y, por lo tanto, podría
dar origen a un animal completo. El uso de células especiali-
zadas, como una célula de una ubre, sí prueba que los genes
no se pierden durante el desarrollo, porque sí se perdieran no
habría ni ngún animal clonado.
2. c
3. b
4. d
5. d
6. En la muerte celular por necrosis, la célula se hincha y esta-
lla, lo que causa una respuesta inflamatoria. En la muerte
celular por apoptosis, se degrada el DNA de la célula, se con-
traen su núcleo y citoplasma, y la célula es fagocitada, sin
que libere el contenido celular.
7. La recombinación somática se produce por reordenamiento de
segmentos de DNA, de n1anera que cada linfocito tiene una
secuencia diferente de nucleótidos en su DNA. El coite y em-
palme alternativo (cap. 14) tiene lugar por reordenamiento de
secuencias de RNA en el pre-mRNA; no hay ningún cambio
del DNA que coctifica el pre-rnRNA. La generación de la diver-
sidad de anticuerpos requiere tanto recombinación somática
como corte y empalme alte1nativo de secuencias de pre-mRNA.

PROBLEMAS RESUELTOS

Problema 1
Si se punza un huevo fecundado de Drosophila en el extremo anterior y se permite que se derrame una peque-
ña cantidad de citoplasma, ¿cuál sería el efecto más probable sobre el desarrollo del embrión de 111osca?

Estrategia de solución Recuerde: el gen

¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Probables efectos sobre el desarrollo de extraer citop las1na del
extremo anterior de un huevo de mosca fecundado.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
Se extrae el citoplasma del extremo anterior.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Genes de polaridad del huevo en la Sección 22.2.
Pasos de la solución
Los genes de polaridad del h uevo deter1ninan los principales
ejes de desarrollo en el embrión de Drosophila. Uno de estos
bicoid es un gen
de polaridad del
genes es bicoid, que se transcribe en la madre. huevo que ayuda a
Cuando el mRNA de bicoid pasa al huevo, el determinar el eje
anteroposterior del
mRNA queda anclado en el extremo anterior del embrión en desa-
huevo. Una vez que se ha puesto el huevo, el rrollo.
mRNA de bicoid se traduce a proteína B icoid, que
genera un gradiente de concentración a lo largo del eje antero-
poste1ior del embrión. La alta concentración de proteína
Bicoid en el extremo anterior induce el desarrollo de las
estructuras anteriores, como la cabeza de la mosca de la fruta.
Si se punza el extre1no anterior del huevo, se derramará cito-
plasma que contiene altas concentraciones de proteína Bicoid,
lo que reduce su concentración en el extremo anterior. El
resultado será que el embrión no desarrolla la cabeza ni las
estructuras torácicas en el extremo anterior.

Problema 2
Las moléculas de inmunoglobulina de una especie mamífera en particular tienen cadenas kappa y lambda, y
cadenas pesadas. El gen de kappa está formado por 250 segmentos V y 8 segmentos J. E l gen de lambda
contiene 200 segmentos V y 4 segmentos J. El gen de la cadena pesada está compuesto por 300 segmentos
V, 8 J y 4 D. Sí solo se tom an en consideraci6n la recombínacíón somática y las combinaciones aleatorias de
las cadenas livianas y pesadas, ¿cuántos tipos diferentes de anticuerpos puede producir esta especie?

Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
El número de diferentes tipos de anticuerpos que pueden pro-
ducirse si se considera la recombinación somática y la combi-
nación aleatoria de cadenas livianas y p esadas.
¿Qué información se proporciona para resolver el
problema?
■ El gen de kappa tiene 250 segmentos V y 8 segmentos J.
■ El gen de lambda tiene 200 segmentos V y 4 segmentos J.
■ La cadena pesada tiene 300 segmentos V, 8 J y 4 D.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Generación de la diversidad de anticuerpos en la Sección 22.6.
Sección 22.1
l. ¿Qué experimentos sugirieron que los genes no se
pierden ni se alteran en forn1a permanente durante
el desan·ollo?
Sección 22.2
2. Explique en forma sucinta cómo se redistribuye la proteína
Dorsal en la formación del embrión de Drosophila y cómo
esta redistribución ayuda a establecer el ej e dorsoventral del
embrión temprano.
3. Describa brevemente cómo los genes bicoid y nanos ayudan
a determinar el eje anteroposterior de la mosca de la fruta.
4. Enumere las tres clases principales de genes de segmentación
y resuma la función de cada uno.
5. ¿Qué papel desempeñan los genes homeóticos en el desarro-
llo de las moscas de la fruta?
PREGUNTAS Y PROBLEMAS DE APLICACIÓN
Sección 22.1
10. Si los telómeros normalmente se acortan después de cada
ronda de replicación en las células somáticas ( véase
cap. 12), ¿qué predicción haría acerca de la longitud de
los telómeros de Dolly, la primera oveja clonada?
Sección 22.2
11. Un fármaco causa la degradación de la proteína Cactus.
¿ Cuál sería el efecto de administrar este fármaco a
embriones de Drosophila en desarrollo?
12. ¿ Cuál sería el efecto de la deleción del gen toll en embrio-
nes de Drosophila?
Genética del desarrollo e inmunogenética 657
Pasos de la solución
Pista: el número de
cada tipo de cadena
Para la cadena liviana kappa, hay 250 x 8 = liviana consiste en el
2000 combinaciones; para la cadena liviana número de segmentos
V x el número de seg-
lambda, hay 200 x 4 = 800 con1binaciones; por mentos J.
lo tanto, existe la posibilidad de un total de
2800 tipos diferentes de cadenas livianas. Para
las cadenas pesadas, hay 300 X 8 X 4 = 9600 Pista: para determinar
tipos posibles. Cualquiera de las 2800 cadenas el número de tipos
diferentes de anticuer-
livianas puede combinarse con cualquiera de las pos, multiplique el
9600 cadenas= 26 880 000 tipos diferentes de número de posibles
cadenas livianas x el
anticuerpos posibles por recombinación somáti- número de posibles
ca y combinación aleatoria solas. La diversidad cadenas pesadas.
por unión y la hipermutación somática aumenta-
rían mucho esta diversidad.
Sección 22.3
6. ¿Cómo actúan juntos los genes A, By C de las plantas para
detenninar las estructuras de la flor?
Sección 22.4
7. ¿Qué es la apoptosis y cómo se regula?
Sección 22.6
8. Explique la manera en la que cada uno de los siguientes pro-
cesos contribuye a la diversidad de anticuerpos.
a. Recombinación somática.
b. Diversidad por unión.
c. Hipermutación.
9. ¿Cuál es la función de los antígenos del MHC? ¿Por qué son
tan variables los genes que codifican estos antígenos?
13. ¿Por qué las mutaciones de bicoid y nanos muestran efec-
tos genéticos matemos (una mutación en la mach"e produce
un fenotipo que aparece en la descendencia; véase cap. 5),
pero las 1nutaciones de runt y gooseberry, no? (Pista:
véanse cuadros 22-3 y 22-4).
*14. Dé ejemplos de genes que afecten el desarrollo de las
moscas de la fruta mediante la regulación de la expresión
génica en el nivel de a) la transcripción y b) la traducción.
15. Utilizando la figura 22-6, indique en qué estadio los
genes de segmentación, los genes homeóticos y los genes
de polaridad del huevo ejercerían un efecto sobre el desa-
rrollo.
658 CAPITULO 22
16. ¿Cuál sería el efecto más probable sobre el desarrollo de
una punción en el extremo posterior de un huevo de
D rosophila que permita el derrame de una pequeña canti-
dad de citoplasn1a y de inyectar después ese citoplasma e n
el extremo anterior de otro huevo?
17. Christiane Nü sslein-Volhard y cols. llevaron a cabo varios
/5:." experimentos para intentar cornprender qué determina los
º'º.'º' extremos anterior y posterior de una larva de Drosophila
(revisado en C. Nüsslein-Volbard , H. G. Frohnhofer y R.
Lehmann. 1987. Science 238:1675-1681). Aislaron mos-
cas de la fruta con 1nutaciones del gen bicoid (bcd-). Estas
moscas produjeron embriones que carecían de cabeza y
tórax. Cuando trasplantaron citoplasma del extremo ante-
rior de un huevo de una hembra de tipo silvestre al extre-
mo anterior de un huevo de una hembra con mutación de
bicoid, hubo un desarrollo normal de la cabeza y el tórax
en el embrión. En cambio, el trasplante de citoplasma del
extremo posterior de una hembra de tipo silvestre al extre-
mo anterior de una hembra bicoid no ejerció ningún efec-
to. Explique estos resultados con respecto a lo que usted
sabe acerca de las proteínas que controlan la determina-
ción del eje anteroposterior.
18. ¿ Cuál sería el resultado más probable de inyectar mRNA
de bicoíd en el extremo posterior de un embrión de
Drosophila e inhibir la traducción del mRNA de nanos?
19. ¿Cuál sería el efecto más probable de inhibir la traducción
del mRNA de hunchback en todo el embrión?
*20. Los genetistas moleculares realizaron experimentos en los
que alteraron el número de copias del gen bicoid en mos-
cas, lo que afectó la cantidad de proteína Bicoid produ-
cida.
a. ¿Cuál sería el efecto sobre el desarrollo de un mayor
número de copias del gen bicoid?
b. ¿Cuál sería el efecto de un menor número de copias del
gen bicoid? Justifique sus respuestas.
21. ¿Cuál seria el efecto más probable sobre el desarrollo de
la mosca de la fruta de una deleción del gen nanas?
*22. Dé un ejemplo de un gen hallado en cada una de las cate-
gorías de genes ( de polaridad del huevo, gap, de la regla
de los pares, etc.) enumerados en la figura 22-13.
23. En el capítulo 1, consideramos el preformacionismo, la
idea inicial acerca de la herencia que sugería que dentro
del óvulo o del esper1natozoide había un adulto pequeño
denom inado hon1únculo, con todas las características de
un adulto humano en miniatura. Según esta idea, el
homúnculo simplemente aumentaba de tamaño durante el
desarrollo. ¿ Qué tipos de evidencia presentados en este
capítulo prueban que el preformacionismo es falso?
Sección 22.3
24. Explique cómo a) la ausencia de expresión de genes de
clase B produce las estructuras florales observada en los
mutantes de clase B (véase fig. 22-15c) y b) la ausencia de
productos de genes de clase C produce las estructuras
observadas en los mutantes de clase C (véase fig.22-15d).
*25. ¿ Cómo esperaría que se viera una flor de una planta que
careciera de genes de clase A y clase B? ¿De una planta
que careciera de genes de clase B y clase C?
26. ¿Cuál será la estructura floral de una planta en la que se
inhibe la expresión de los siguientes genes?
a. Se inhibe la expresión de los genes de clase B en el
segundo verticilo, pero no en el tercer verticilo.
b. Se inhibe la expresión de los genes de clase C en el ter-
cer verticilo, pero no en el cuarto verticilo.
c. Se inhibe la expresión de los genes de clase A en el pri-
mer ve1ticilo, p ero no en el segundo verticilo.
d. Se inhibe la expresión de los genes de clase A en el
segundo verticilo, pero no en el tercer verticilo.
Sección 22.5
*27. William Jeffrey y cols. cruzaron tetras mexicanos que resi-
A:.."'""' den en la superficie con ojos totalmente desarrollados y
!.~~ teu·as mexicanos ciegos que residen en cuevas. La proge-
nie de este cruza1niento tenía oj os uniform.e mente peque-
ños en comparación con los de los peces de la superficie
(Y. Yamamoto, D. W. Stock y W. R. Jeffrey. 2004. Nature
43 1:844-847). ¿Qué predicciones puede hacer acerca de la
expresión de shh en los e1nbriones de esta progenie res-
pecto de su expresión en los en1briones de peces de la
superficie?
Sección 22.6
*28. En una especie particular, el gen de la cadena liviana
kappa tiene 200 segmentos V y 4 segmentos J. En el gen
de la cadena liv iana lambda, esta especie tiene 300 seg-
mentos V y 6 segmentos J. Si solo se considera la variabi-
lidad secundaria a recon1binación somática, ¿cuántos tipos
diferentes de cade nas livianas son posibles?
29. Sobre la base de la información provista en la figura 23-
21, ¿cuál sería el efecto probable de una mutación que
impidiera la formación de células de memoria?
30. En el libro
Chromoso,ne 6 de
Robín Cook, un a com -
pañía de b iotecnología
manipula genéticamen-
te a bonobos (un tipo
de clúmpancé) para
que sirvan corno futu-
ros donantes de órga-
nos para clientes. Los
genes de los bonobos
son alterados para que
no sobrevenga rechazo
tisular cuando sus
órganos sean trasplan-
tados a un cliente.
¿Qué genes habría que
alterar para que esto
diera resultado?
Explique su respuesta. (Ronald van der Beek/Shutterstock).

PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 22.2
31. Como hemos aprendido en este capítulo, la proteína Nanos
inhibe la traducción del mRNA de hunchback, lo que redu-
ce las concentraciones de la proteína Hunchback en el
extremo posterior de un embrión de mosca de la fruta y
estimula la diferenciación de características posteriores. Los
resultados de los experimentos demostraron que la acción
de N anos sobre el mRNA de hunchback depende de la pre-
sencia de una secuencia de 11 bases que se localiza en la
región 3' no traducida (3' UTR) del mRNA de hunchback.
Esta secuencia se ha denominado elemento de respuesta a
Nanos (NRE). Hay dos copias de .N RE en la 3' UTR del
rnRNA de hunchback. Si se agrega una copia a la 3' UTR
de otro rnRNA producido por un gen diferente, el rnRNA
ahora es reprimido por Nanos. La represión es mayor si se
añaden más NRE. Sobre la base de estas observaciones,
proponga un 111ecanisn10 sobre la manera en que Nanos
inhibe la traducción de Hunchback.
32. Dada la distribución de los genes Hox entre animales, ¿qué
anticiparía acerca del número y el tipo de genes Hox del
ancestro común de todos los animales?
Genética del desarrollo e inmunogenética 659
Sección 22.6
33. La ataxia-telangiectasia (ATM) es una enfermedad neurode-
/u"'º"' generativa genética rara. Alrededor del 20% de las personas
!,~:; con ATM presentan leucemia linfocítica aguda o linfoma,
cánceres de las células írununitarias. Las células de muchos
de estos cánceres muestran reordenamientos cromosómicos,
con roturas cromosómicas en los genes de anticuerpos y
receptores de linfocitos T (A. L. Bredemeyer y cols. 2006.
Nature 442:466-470). Asimismo, muchas personas con
ATM tienen un sistema inn1unitario debilitado, que las vuel-
ve susceptibles a infecciones respiratorias. La investigación
ha mostrado que el locus que causa ATM dese1npeña un
papel en la reparación de roturas bicatenarias. Explique por
qué las personas con un defecto genético de la reparación
de roturas bicatenarias podrían tener una incidencia más
alta de reordenamientos cromosómicos en sus células inmu-
nitarias y por qué su sistema inn1unitario podría estar debi-
litado.
 23
Genética del cáncer

Palladin y la diseminación del cáncer

El cáncer de páncreas es uno de los tumores malignos
más graves. Aunque es apenas el décimo tipo de cáncer
en frecuencia, con unos 45 000 casos nuevos cada año
en los Estados U nidos, esta enfermedad es la cuarta
causa de muerte por cáncer y mata a más de 38 000 per-
sonas por año. La mayoría de los pacientes con cáncer
de páncreas sobreviven menos de 6 meses después del
diagnóstico; solo el 5% sobrevive más de 5 años. Una
de las principales razones de esta alta mortalidad es que
este tipo de cáncer es proclive a diseminarse rápidamen-
te a los ganglios linfáticos y a otros órganos. La mayo-
ría de los síntomas no aparecen hasta que la enfermedad
está avanzada y el cáncer ya ha invadido otros órganos.
Pero ¿qué hace que el cáncer de páncreas sea tan pro-
penso a diseminarse?
En 2006, los investigadores identificaron un gen clave
que contribuye a la aparición de cáncer de páncreas y
que representó una importante fuente de información
Villa diseñada por el arquitecto del Renacimiento Andrea Palladio, en sobre el carácter agresivo de la enfermedad. Genetistas
honor a quien recibió su nombre el gen palladin. Pa/ladin codifica un compo- de la University of Washington en Seattle encontraron
nente esencial del citoesqueleto celular; cuando presenta una mutación, contribu-
una fanlilia singular en la cual se había diagnosticado
ye a la diseminación del cáncer pancreático. (Giann i Dabli Orti/The Art Archive at
cáncer de páncreas a nueve nliembros a lo largo de tres
Art Resource, NY).
generaciones (fig. 23-1). Nueve miembros más de la
familia tenían tumores precancerosos que probablemen-
te evolucionarían a cáncer de páncreas. En esta familia,
la enfermedad se heredaba como un rasgo autosómico dominante.
Mediante técnicas de mapeo genético, los genetistas determinaron que el gen que causaba el
cáncer de páncreas en esta fanlilia estaba ubicado en una región del brazo largo del cromoso-
ma 4. Lamentablemente, esta región con1prende 16 nlillones de pares de bases e inc luye 250
genes.
Para determinar cuál de los 250 genes de la región delineada podría ser responsable de la
enfermedad en la familia, l os investigadores diseñaron una nlicromatriz única (véase cap. 20)
que contenía secuencias de la región. Utilizaron esta micromatriz para examinar la expresión
génica en los tumores pancreáticos y en las lesiones precancerosas de los miembros de
la fam1lia, así como en tumores pancreáticos esporádicos de otras personas y en tejido pan-
creático nonnal de personas sanas. Los investigadores supusieron que podría haber sobreex-
presión o subexpresión del gen del cáncer en los tumores respecto del tejido norma l. Los
datos de la micromatriz revelaron que el gen que mayor sobreexpresión mostraba en los
tun1ores pancreáticos y las lesiones precancerosas era uno que codificaba un con1ponente
crucial del citoesqueleto, deno1ninado gen palladin. La secuenciación de1nostró que todos
los miembros de la fa111ilia con cáncer de páncreas tenían una mutación idéntica en el exón 2
de este gen.
El gen palladin recibe este nombre por el arquitecto del Renacimiento Andrea Palladio, ya
que desempeña un papel central en la arquitectura de la célula. La proteína palladin actúa

661
662 CAPITULO 23

como un andam io para la fijación de otras proteí-

Cáncer
••
Crecimiento ~ @
nas del citoesqueleto necesarias para mantener la
forma, el movimiento y la diferenciación de la
precanceroso célula. La capacidad de diseminación de una célula
cancerosa está directamente relacionada con el
citoesqueleto; las células que se disenunan suelen
tener una arquitectura pobre de su citoesqueleto, lo
que les pe1mite desprenderse con facilidad de una
masa tumoral primaria y migrar a través de otros
4 2 4 3 tejidos. Para determinar si las mutaciones del gen
Figura 23-1. El cáncer de páncreas se hereda con un rasgo autosómico dominante en palladin afectan la 111ovilidad celular, los investiga-
una familia que posee un gen palladin mutante. (De K. L. Pague y cols., Plos Medicine dores crearon por ingeniería genética células con
3:2216-2228, 2006). una copia mutante del gen palladin y estudiaron su
capacidad de migrar. La migración era 33% más
eficiente en las células con pall adin m utado que en
aquellas con palladin normal, lo que demostró que este gen contribuye a la capacidad de disemina-
ción de las células cancerosas pancreáticas.

E 1 descubrimiento del vínculo entre palladin y cáncer de pán-

creas ilu stra el poder de la genética molecular moderna para
revelar la naturaleza biológica del cáncer. En este capítulo, exa-
1ninamos el carácter genético del cáncer, una enfermedad que es
fundamentalmente genética pero, a 1nenudo, no hereditaria. Co-
menzamos por considerar la naturaleza del cáncer y có1no se
requieren múltiples alteraciones genéticas para transfo1mar una
célula normal en una célula cancerosa. Luego, estudiarnos algu-
nos de los tipos de genes que contribuyen al cáncer, como onco-
genes y genes supresores de tu1nores, genes que controlan el ciclo
celular, genes que codifican sistemas de reparación de DNA y
telon1erasa, y genes que, con10 palladin, contribuyen a la disen1i-
nación del cáncer. A conti nuación, examinamos los cambios epi-
genéticos asociados con cáncer y la manera e n que determinados
genes contribuyen a la progresión del cáncer de colon . Por últi-
1no, analizamos las 1nutaciones cromosómicas asociadas con cán-
cer y el papel de los virus en algunos cánceres.
cado equilibrio entre estas fuerzas opuestas. En una célula cance-
rosa, hay alteración de una o más de estas señales, lo que causa
proliferación de la célula a una velocidad anor1na1Inente rápida. A
medida que dejan de responde!" a los controles normales, las célu-
las cancerosas pierden de manera gradual su forn1a y sus lími tes
regu lares, y por último, forman una masa definida de células
anormales: un tumor. Si las células tumorales se mantienen loca-
li zadas, se dice que el tumor es bemgno; si las células invaden
otros tejidos, se dice que el tumor es maligno. Las células que
viajan a otras localizaciones del cuerpo, donde establecen tu1no-
res secundarios, han sufrido metástasis.
(a)

23.1 El cáncer es un grupo de enfermedades

caracterizadas por proliferación celular
En los Estados Unidos, una de cada cinco personas n1orirá por
cáncer, y los tratamientos oncológicos cuestan miles de millones de
dólares por año. El cáncer no es una enfermedad única; más bien,
es un gn1po heterogéneo de trastornos caracterizados por la presen-
(b)
cia de células que no responden a los controles normales de la divi-
sión. Las células cancerosas se dividen de manera rápida y conti-
nua, lo que genera tumores que desplazan las células normales y
finalmente privan de sus nutrientes a los tejidos sanos (fig. 23-2).
Las células de un tumor avanzado pueden separarse del tumor y
viajar a sitios alejados del cuerpo, donde pueden fijarse y trans-
formarse en nuevos tumores. En los Estados Unidos, los cánceres
más frecuentes son los de próstata, mama, pulmón, colon y recto ,
y sangre (cuadro 23-1).

Formación de tumores Figura 23-2. La proliferación anormal de células cancerosas produce

Las células normales crecen, se dividen , maduran y .mueren en
respuesta a un conjunto complejo de señales internas y externas.
Una célula non11al recibe señales tanto estin1uladoras como inhi-
bitorias, y su crecimiento y división están regulados por un deli-
un tumor que desplaza a las células normales. a) Masas de cáncer de
mama metastásico (protrusiones blancas) que crecen en un hígado huma-
no. b) Microfotografía óptica de un corte hepático con tumores. Las cance-
rosas son las células claras de tinción pálida; las más oscuras son células
hepáticas normales. (CNRI/Science Source).
 Genética del cáncer 663

Incidencias estimadas de diversos cánceres algunos tipos específicos de cáncer tienden a aparecer en familias.
y mortalidad por cáncer en los Estados El retinoblastoma, un cáncer raro de la retina que afecta a niños,
Unidos en 2013 aparece con alta frecuencia en algunas familias y se hereda como
un rasgo autosómico dominante, lo que sugiere que un único gen
Casos nuevos Muertes es responsable de estos casos de la enfermedad.
Tipo de cáncer por año por ano Aunque estas obse1·vaciones sugieren que los genes desempe-
Próstata 238 590 29 720 ñan algún papel en el cáncer, la teoría del cáncer como enfenne-
dad genética tiene varios problemas significativos. Si el cáncer se
Mama 234 580 40 030 hereda, cada célula de organismo debe recibir el gen causante del
cáncer y, por lo tanto, cada célula debería tornarse cancerosa. Sin
Pulmón y bronquio 228 190 159 480
embargo, en los tipos de cáncer que aparecen en familias, los
Colon y recto 142 820 50 830 tu1nores suelen aparecer solo en determinados tejidos, y a menu-
do solo cuando la persona alcanza una edad avanzada. Por últi1no,
Linfoma 79 030 20 200 muchos cánceres no se repiten en fam ilias en absoluto, y aun en
Melanoma 76 690 9 480 aquellos que sí lo hacen, aparecen casos aislados en familias sin
antecedentes de la enfermedad.
Vejiga 72 570 15 21 O
MODELO DEL CÁNCER EN MÚLTIPLES ETAPAS DE KNUDSON En 1971,
útero 49 560 8 190
Alfred Knudson propuso un modelo para explicar la base genéti-
Leucem ias 48 610 23 720 ca del cáncer. Knudson estaba estucLiando el retinoblastoma, que
suele aparecer solo en un ojo pero en ocasiones aparece en am-
Páncreas 45 220 38 460
bos. Halló que, cuando el retinoblastoma aparece en ambos ojos,
Cavidad oral y faringe 41 380 7 890 se inicia a una edad temprana, y los niños afectados suelen tener
familiares cercanos que también presentan la enfer1nedad.
Hígado 30 640 21 670 Knudson postuló que el retinoblastoma se debe a dos defectos
Cerebro y sistema nervioso 23 130 14 080 genéticos distintos, ambos necesarios para que aparezca el cáncer
(fig. 23-3). Sugirió que, en los casos en que la enfermedad afecta
Ovario 22 240 14 030 solo un ojo, una sola célula de un ojo sufre dos mutaciones suce-
sivas. Como la probabilidad de que estas dos mutaciones afecten
Estómago 21 600 10 990
a una única célula es remota, el retinoblastoma es raro y en gene-
Cuello uterino 12 340 4 030 ral afecta solo un ojo. Para el caso bilateral, Knudson postuló que
el niño heredaba una de las dos mutaciones requeridas para el
Cánceres de partes blancas, 11 41 O 4 390 cáncer, de manera que cada célula contiene esta mutación inicial.
incluido corazón En estos casos, todo lo que se requiere para el desarrollo del cán-
Todos los cánceres 1 660 290 580 350 cer es que una célula del ojo sufra la segunda mutación. Como
cada ojo tiene millones de células, la probabilidad de que se pro-
Fuente: American Cancer Society, Cancer Facts and Figures, 2013 (Atlanta, American
duzca la segunda 1nutación en por lo menos una célula de cada
Cancer Society, 2013), p. 4 . ojo es alta, lo que causa tumores en a1nbos ojos a una edad tem-
prana.
La proposición de Knudson sugiere que el cáncer es el resulta-
do de un proceso en múltiples etapas que requiere varias mutacio-
El cáncer como enfermedad genética nes. Si se hereda una o más de las mutaciones requeridas, son
necesarias menos 1nutaciones adicionales para provocar cáncer y
El cáncer surge como resultado de defectos fundamentales en la este tenderá a aparecer en familias. La idea de Knudson se ha
regulación de la división cel ular; por consiguiente, su estudio denominado "hipótesis de los dos eventos" porque, para el retino-
tiene significación no solo para la salud pública, sino también blastoma, solo se requieren dos mutaciones para causar un tumor.
para nuestro conocimiento básico de la biología celular. A lo En cambio, en la mayoría de los cánceres participan más de dos
largo de los años, se han propuesto muchas ideas para explicar el mutaciones en la transformación de células normales en cancero-
cáncer, pero ahora reconocemos que la mayoría de los cánceres, sas. En el caso del retinoblasto1na, las dos mutaciones requeridas
si no todos, se deben a defectos del DNA. se producen en el mis1no locus (mutan ambos alelos), pero en
muchos cánceres se requieren mutaciones en locus diferentes
EVIDENCIA GENÉTICA DE CÁNCER Las observaciones iniciales sugi- para el desarrollo del cáncer. La idea de que el cáncer se debe a
rieron que el cáncer podría ser el resultado de daño genético. En múltiples mutaciones resulta correcta en la mayoría de los casos.
primer lugar, numerosos agentes, con10 radiación ionizante y La teoría genética de Knudson sobre el cáncer se ha confir1na-
agentes químicos, que causan mutaciones también provocan cán- do mediante la identificación de genes que, cuando 1nutan, causan
cer (son carcinógenos; véase cap.18). En segundo lugar, algunos cáncer. Hoy en día, reconoce1nos que el cáncer es fundamental-
cánceres se asocian en fo rma consistente con anomalías cromosó- mente una enfermedad genética. La mayoría de los tumores sur-
micas particulares. Por ejemplo, alrededor del 90% de las perso- gen por mutaciones somáticas que se acumulan durante la vida de
nas con leucemia mieloide crónica tienen una translocación recí- una persona, ya sea por mu tación espontánea o en respuesta a
proca entre el cromosoma 22 y el cro1nosoma 9. En tercer lugar, mutágenos ambientales. ►
664 CAPITULO 23

Rara vez, una sola célula presenta dos ... lo que da origen a
mutaciones somáticas, ... un solo tumor, por
ejemplo, en un ojo.

---- T
Primera Segunda
mutación mutaciónr---+
11 1
j somática somática l •• •• •

Una persona ' Algunas células presentan una Como solo se requiere una única mu-
predispuesta única mutación somática que tación para provocar cáncer, aumenta
hereda una provoca cáncer. la probabilidad de que se produzca dos
mutación. veces (en ambos ojos, por ejemplo).

Primera
- mutación--l~
►
somática

(f 1
Primera
-mutación---1

11
...___ _ _ _ _ _ _ _ _ _ Conclusión: se requieren múltiples mutaciones 1 - - - - - - - - - - - - - - - -
para producir células cancerosas.

Figura 23-3. Alfred Knudson postuló que el retinoblastoma se debe a dos defectos genéticos distintos, ambos nece-
sarios para que aparezca el cáncer.

EVOLUCIÓN CLONAL DE LOS TUMORES El cáncer se inicia cuando
una sola célula sufre una mutación que la hace dividirse a una
velocidad anor1naln1ente rápida. La célula prolifera y da origen a
un clon de células, cada una de las cuales contiene la 1nisma
mutación. Co1no las células del clon se dividen con mayor rapi-
dez que la normal, pronto superan en número a las otras células.
Una mutación adicional que aparece en algunas de las células del
clon puede aumentar aún más la capacidad de proliferación de
esas células, y las que contienen ambas mutaciones pronto se con-
vierten en las células más comunes del clon. Con el tiempo, pue-
den ser superadas por células que contienen todavía n1ás mutacio-
nes que aumentan la proliferación. En este proceso, denominado
evolución clonal, las células tumorales adquieren más mutacio-
nes que les permiten tornarse cada vez más agresivas en sus pro-
piedades proliferativas (fig. 23-4).
La velocidad de evolución clonal depende de la frecuencia con
la que surgen nuevas mutaciones. Cualquier defecto genético que
permita la aparición de nuevas mutaciones acelerará la progresión
del cáncer. A menudo , se observa que los genes que regulan la
reparación del DNA han n1utado en las células de cánceres avan-
zados, y por lo general los trastornos hereditarios de la reparación
del DNA se caracterizan por aumento de la incidencia de cáncer.
Como en condiciones normales los mecanismos de reparación del
DNA eliminan muchas de las mutaciones originales, las células
con sistemas defectuosos de reparación del DNA ti enen mayor
probabilidad de conservar mutaciones que las normales, incluidas
mutaciones de los genes que regulan la división celular. Por ejem-
plo, la xerodermia pigmentosa es un trastorno raro causado por un
defecto en la reparación del DNA (véase cap. 18). Las personas
con este trastorno tienen tasas elevadas de cáncer de piel cuando
se exponen a la luz solar (que induce mutación). De 1nodo similar,
el cáncer de ma ma puede ser causado por mutaciones de BRCAl
y BRCA2, dos genes que intervienen en la reparación del DNA.
Las mutaciones de genes que afectan la segregación cromosó-
mica también pueden contribuir a la evolución clona! de los tumo-
res. Muchas células cancerosas son aneuploides (contienen copias
extra o faltantes de cromosomas individuales; véase cap. 8), y sin
duda, las mutaciones cromosómicas contribuyen a la progresión
del cáncer al duplicar algunos genes (los de los cromosomas ex-
tra) y elin1inar otros (los de los cromosomas sujetos a deleción).
 Genética del cáncer 665

(e) Papel de los factores ambientales

en el cáncer
Si bien es una enfermedad genética, la mayoría de los cánceres no
Pr imera mutación
se heredan , y muchos son influenciados por factores ambientales.
Una célula está pre-
dispuesta a proliferar
Las diferencias de incidencia de determinados cánceres en todo el
a una velocidad in undo s ugieren la inter vención de factores a1n bienta]es (cuadro
anormalmente alta . 23-2). Los resultados de estudios muestran que las poblaciones
migratorias suelen adquirir la incidencia de cáncer de su país
Segunda m ut acioñ)
huésped. Por ejemplo, las tasas globales de cáncer son considera-
blemente más bajas en Japón que en Hawái. S in embargo, dentro
t Una segunda mu- de la primera generación tras la migración a Hawái, los j aponeses
@®@ ©
tación determina
que la célula se
divida con rapidez.
presen tan cán cer con tasas similares a l.as de los hawai anos nati-
vos. El aumento del cáncer en los inmigrantes se debe a que están
~
expuestos a los mismos factores ambientales que los nativos.
1
1 Una serie de factores ambientales contribuyen al cáncer, pero
1 Tercera m utación
1
1
aquellos con mayor efecto son consumo de tabaco, dieta, obesidad,
, Después de una tercera mutación, la alcohol y radiación UV (cuadro 23-3). Otros factores ambientales
' ' célula sufre cambios estructurales
que inducen cáncer son cie1tos tipos de agentes químicos, con10
benceno (utilj zado como solvente industrial), benzo[a] piremo
(hallado en el humo de cigarrillo) y bifenilos policlorados (PCB;
usados en transformadores y capacitores industriales). La mayoría
de los factores ambientales asociados con cáncer causan mutacio-
nes somáticas que estimulan la división celular o afectan de otra
Cuarta
1
1 t t manera el proceso de progresión del cáncer.
mutación

' ' ' +

Los factores ainbientaJes pueden interactuar con predisposicio-
nes genéticas al cáncer. Por ejemplo, el cáncer de pulmón muestra

®@ ©00 tt Célula
mal igna
una clara asociación con tabaquismo, un factor ambiental. Los estu-
dios de asociación en todo el genoma (véase cap. 20) revelaron que

, Una cuarta mutación hace que la célula se divida

de manera incontrolable e invada otros tejidos.
Cuadro 23-2 Ejemplos de variación geográfica en la
Figura 23-4. A través de la evolución clonal, las células tumorales incidencia de cáncer
'

adquieren múltiples mutaciones que les permiten volverse cada vez más
agresivas y proliferativas. Con el f in de ahorrar espacio, se utiliza una flecha
Tipo de Tasa de
de guiones para representar una segunda célula del mismo tipo en cada caso. cáncer Lugar incidencia*

Labio Canadá (Newfound land) 15, 1

Brasil (Forta leza) 1,2
Los defectos celulares que interfieren con la separación de los
cromosomas aumentan la aneuploidía y, por consiguiente, pueden Nasofaringe Hong Kong 30
acelerar la progresión del cáncer. Estados Unidos (Utah) 0,5

Colon Estados Unidos (lowa) 30, 1

India (Mumbai) 3,4
CONCEPTOS
Pulmón Estados Unidos (Nueva Orleans, 11 O
El cáncer es fundamentalmen t e una enfermedad genética. Por lo afroamericanos)
general, se requieren mutaciones de varios genes para provocar cán- Costa Rica 17,8
cer. Si una de estas mutaciones se hereda, se necesitan menos muta-
Próstata Estados Unidos (Utah) 70,2
ciones somáticas para que aparezca el cáncer, y la persona puede
China (Shangai) 1.8
est ar pred ispuesta a esta enfermedad. La evolución clona! es la acu-
mulación de m utaciones en un don de células. Vejiga Estados Unidos (Connecticut, blancos) 25,2
Filipinas (Rizal) 2,8
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1
Todos los Suiza (Basilea) 383 ,3
¿Cómo explica el modelo de cáncer en múltiples etapas la observa- cánceres Kuwait 76,3
ción de que los casos esporádicos de retinoblastoma suelen aparecer
Fuente: C. Muir y cols., Cancer lncidence in Five Continents, vol. 5 (Lyon: lnternational
en un solo ojo, mientras que las formas hereditarias del cáncer afec- Agency f or Research on Cancer, 1987), Table 12-2.
tan ambos ojos? *La tasa de incidencia es la tasa estandarizada por edad en varones por 100 000 habi-
tantes.
666 CAPITULO 23

rentes de alteraciones genéticas que pueden contribuir al cáncer.

Cuadro 23-3 Porcentaje de casos de cáncer en el Reino
Se identificaro n más de 350 genes humanos q ue contribuyen a
Unido causados por factores ambientales
esta enfermedad; es probable que la cantidad real sea mucho n1ás
Porcentaje de casos alta. L a investigación en ratones sugiere que más de 2000 genes
Factor de cáncer pueden contribuir, cuando están mutados, a la aparición de cán-
cer. En las siguientes secciones, considerare111os algunos de los
Tabaco 19,4
diferentes tipos de genes que suelen tener participación en el
,
Dieta 9,2 cancer.
Sobrepeso y obesidad 5,5
Oncogenes y genes supresores
Alcohol 4
de tumores
Ocupación 3,7
Las señales que regulan la división celular pertenecen a dos tipos
Radiación (UV) 3,5 básicos: moléculas que estimulan la divi sión celular y aquellas
Infecciones 3, 1 que la inhiben. Estos mecanismos de control son similares al ace-
lerador y el freno de un automóvil. En las células normales (pero
Radiación (ionizante) 1,8 esperamos que no en su automóvil) se aplican aceleradores y fre-
Todos los factores ambientales 42,7 nos al mis1no tien1po, lo que determina que la división celular
proceda a la velocidad adecuada.
Fuente: Parkin, D. M., L. Boyd y L. C. Walker. 2011 . Fraction of cancer attributable a Como la división celular es afectada tanto por aceleradores
lifestyle and environmental factors in the UK in 201 O. British Joumal of Cancer
105:S77-S81. como por frenos, el cáncer puede surgir por m utaciones de cual-
quiera de los tipos de señal, y hay varias vías muy djferentes para
llegar al cáncer. U n gen estünulador puede tornarse hiperactivo o
activo en momentos inapropiados, como si el acelerador de un
la variación de varios genes predispone a algunas personas aJ cán- auto quedara trabado en su posición 1nás baja. Por lo general, las
cer de pullnón inducido por tabaquis1no. Otros genes predisponen- mutaciones de los genes estimuladores son dominantes, porque
tes codifican receptores que se unen a posibles carcinógenos pre- aun la cantidad reducida de producto génico producida por un
sentes en el humo de cigarrillo. DJ.filfilrrE RESOLVER EL PROBLEMA 23 solo alelo suele ser suficiente para provocar un efecto estimula-
dor. Los genes estimuladores de acción dominante mutados que
23.2 Las mutaciones de una serie de tipos causan cáncer se denominan oncogenes (fig. 23-Sa). Asimismo,
la división celular puede ser estimulada cuando se desactivan los
diferentes de genes contribuyen al cáncer genes inh ibitorios, lo que es análogo a tener un freno defectuoso
Como hemos comentado, el cáncer es una enfermedad causada en Ltn automóvil. Por lo general, los genes inhibitorios mutados
por alteraciones del DNA. Sin embargo, hay muchos tipos dife- tienen efectos recesivos, porque debe haber mutación de ambas

{a) Oncogenes {b) Genes supresores de tumores

Mutación dominante Mutación recesiva

Homocigoto de Homocigoto d e
tipo silvest r e (+/+) Heterocigoto {+/-) tipo silvestre (+/+) Homocigoto (- /- )

M utación en

-
Mutación

• •
uno u otro alelo • •
en ambos alelos
• •
• (o mutación en uno
+ +
Factor es Fact o r
+
Factor + i y d eleción en ot ro) + +
Fact ores Ningún factor Ningún f actor
estimu lantes del estimulante estimulante limitantes del inhibitorio inhibitorio
crecimiento normales cr ecimiento
hiperactivo normal l J
i i
norma les

+ ¡
División Proliferación División Proliferación
celular normal celu lar normal celular excesiva

Los protooncogenes
producen normal-
mente factores que
estimulan la división
celular.
Los alelos mutantes (oncogenes) Los genes supresores • Los alelos mutantes son
tienden a ser dominantes: de tumores producen recesivos (ambos alelos
una copia del alelo mutante es normalmente factores deben estar presentes para
suficiente para inducir proliferación que inhiben la división causar proliferación celular
celular excesiva. celular. excesiva).

Figura 23-5. Tanto los oncogenes como los genes supresores de tumores contribuyen al cáncer, pero difieren en sus modos de acción
y dominancia.
 Genética del cáncer 667

copias para eliminar toda la inhibición. Los genes inhi bitor ios del
Cuadro 23-4 Algunos oncogenes y funciones de sus
cáncer se denominan genes supresores de tumores (fig. 23-Sb). correspondientes protooncogenes
Muchas células cancerosas tienen mutaciones tanto en oncogenes
como en genes supresores de tumores. Cáncer en el que está
Aunque se requieren oncogenes o genes supresores de tumores Gen Función normal mutado el gen
111utados para provocar cáncer, las mutaciones de los genes de erbB Parte del receptor de Muchos tipos de cáncer
reparación del DNA p ueden aumentar la probabilidad de adquirir
factor de crecimiento
mutaciones en estos genes. Tener mutaciones de los genes de
reparación del DNA es análogo a tener un mal mecánico que no tos Factor de transcripción Osteosarcoma y carcinoma
realiza las reparaciones necesaiias cuando se descompone el endometria l
freno o el acelerador. ¡un Factor de transcripción, Cáncer de pulmón, cáncer de
control del ciclo celular mama
ONCOGENES Los oncogenes fueron los p1imeros genes causantes
de cáncer en ser identificados. En 1909, un granjero le llevó al myc Factor de transcripción Linfomas, leucemias, neuro-
médico Peyton Rous una gallina con un gran tumor de tejido con- blastoma
juntivo (sarcoma) en el pecho. Cuando Rous inyectó fragmentos ras Unión a GTP y GTPasa Muchos tipos de cáncer
de este tumor en otras gallinas, estas también presentaron sai·co-
1nas. Rous llevó a cabo experin1entos que demostraron que los SIS Factor de crecimiento Glioblastomas y otros cánceres
tumores eran transmitidos por un virus, el cual llegó a ser conoci- src Cinasa de tirosina de Muchos tipos de cáncer
do como virus del sarco.ma de Rous. Más adelante, se aislaron una proteínas
serie de otros virus causantes de cáncer de diversos tejidos anima-
les. Por lo general, se asumía que estos virus portaban un gen cau-
sante de cáncer que era transferido a la célula huésped. En 1970,
se aisló del virus del sarcoma de Rous el primer oncogén, deno- descubierto una gran cantidad de oncogenes (cuadro 23-4). Se
n1inado src. considera que alrededor del 90% de los genes causantes de cán-
En 1975, Michael Bishop, Harold Var1n us y cols. co1nenzaron cer son oncogenes domi nantes.
a utilizar sondas para oncogenes vi rales con el fi n de buscar
secuencias relacionadas en células normales. Descubrieron que GENES SUPRESORES DE TUMORES Los genes supresores de tumo-
los genomas de todas las células normales tienen secuencias de res son más difíciles de identificar que los oncogenes porque inhi-
DNA estrechamente relacionadas con los oncogenes. Estos ben el cáncer y son recesivos; ambos alelos deben estar mutados
genes celulai·es normales se denonrinan protooncogenes. En las antes de que se elimine la inhibición de la división celular. Como
células non nales, son responsables de funciones celulares bási- laf alta de su funció n pro mueve la prolifer ación ce lular, los genes
cas pero, cuando mutan, se convierten en oncogenes que contri- supresores de tumores no pueden identificarse agregándolos a
buyen al desarrollo del cáncer. Cuando un virus infecta una célu- células y observando si sobreviene cáncer. Se considera que alre-
la, puede incorporarse un protooncogén en el genoma viral dedor del 10% de los genes que causan cáncer son genes supre-
1nediante recombinación. Dentro del genoma viral, el protoonco- sores de tumores.
gén puede 111utar a un oncogén que, cuai1do vuelve a insertarse Por lo general, se requieren defectos de a1nbas copias de un gen
en una célula, causa división celular rápida y cáncer. Como es supresor de tu1nores par a provocar cáncer; un organismo puede
más probable que los protooncogenes sufran mutación o recom- hered ar una copia defectuosa del gen supresor de tu1nores (es
binación dentro de un virus, la infección viral a menudo se aso- heterocigótico para la mutación causante de cáncer) y no presen-
. ,
eta con cancer. tar cáncer, porque el alelo normal restante origina el producto
En los virus, los protooncogenes pueden convertirse en oncoge- supresor de tumores. Sin embargo, estos heterocigotos a menudo
nes de varias m aneras diferentes. La secuencia del protooncogén están predispuestos al cáncer porque la desactivación o la pérdida
puede ser alterada o truncada cuando este se incorpora en el geno- del único alelo restante es todo lo que se necesita para elüninar
ma viral. Luego, esta copia mutada del gen puede producir una por completo el producto supresor de tumores. La desactivación
proteína alterada que causa proliferación celular descontrolada. del alelo de tipo si lvestre restante se deno mina pérdida de la he-
Alternativainente, por recombinación, un protooncogén puede terocigosis. Un mecanismo frecuente de pérdida de la heterocigo-
terminar cerca de un promotor o intensificador viral, que después sis es una deleción en el cromosoma portador de la copia normal
causa sobreexpresión del gen. Por último, la función de un proto- del gen supresor de tumores (fig. 23-6).
oncogén en la célula huésped a veces puede alterarse cuando un Entre los primeros genes supresores de tumores identificados,
virus inserta s u propio DNA en el gen, Jo que altera su función se encontraba el gen que causa el retinoblastoma. En 1985,
normal. Si bien l.o s virus son capaces de convertir protooncogenes Raymond White y Webster Cavenne mostraron que, en las célu-
en oncogenes, la mayoría de los protooncogenes mutan para for- las de los retinoblastomas, faltaban grandes segmentos del cro-
1nar oncogenes sin la pai·ticipación de un virus. mosom a 13, y más adelante se aisló de estos segmentos el gen
Se identificaron numerosos oncogenes mediante experin1entos supresor de tumores. Otro ejen1plo de un gen supresor de tun10-
en los que se añaden determinados fragmentos de DNA a células res es BRCAl, cuyas mutaciones se asocian con mayor riesgo de
en cultivo. Algunas células captan el DNA, y si estas células se cáncer de mama y de ovario. BRCAl produce una proteína que,
tornan cancerosas, entonces el fragmento de DNA agregado al en condiciones norm ales, ayuda a reparar rupturas bicatenarias
cultivo debe contener un oncogén. Luego, es posible secuenciai· del DNA mediante recombinación homóloga (véase cap. 18).
los fragmentos e identificar el oncogén. En la actualidad, se ha También actúa como factor de transcripción e interactúa con enzi-
668 CAPITULO 23

La pérdida del alelo de tipo CONCEPTOS

Esta persona es heterocigótic~
(Aa) para un gen supresor de
tumores.
a a
silvestre, en este caso a través
de una deleción cromosómica,
causa pérdida de la actividad
supresora de tumores.
Los protooncogenes son genes que controlan funciones celulares nor-
males; cuando mutan, se convierten en oncogenes que estimulan la
proliferación celular. Tienden a ser dominantes en su acción. Los
genes supresores de t umores normalmente inh iben la proliferación
celular; cuando mutan, permiten que las células proliferen. Los genes
supresores de tumores tienden a ser recesivos en su acción. Los orga-
nismos individuales heterocigóticos para genes supresores de tu mores
a menudo están predispuestos al cáncer.

Deleción
cromosómica ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2

¿Por qué en genera l los oncogenes son dominantes en su acción,

mientras que los genes supresores de tumores son recesivos?

Conclusión: las personas heterocigóticas para un gen

1supresor de tumores están predispuestas al cáncer. Mutaciones de genes que controlan
Figura 23-6. La pérdida de la heterocigosis a menudo induce cáncer el ciclo de división celular
en una persona heterocigótica para un gen supresor de tumores.
El ciclo celular es el proceso normal mediante el cual las células
crecen y se dividen. Normaln1ente, la progresión a lo largo de este
ciclo está controlada de manera estri cta, por lo que las células
mas histona desacetilasas, que afectan la transcripción. En la so lo se dividen cuando se requieren otras células, están presentes
actualidad, se ha descubierto una serie de genes supresores de todos los componentes necesarios para la división y el DNA se ha
tumores (cuadro 23-S), replicado sin daño. Sin embargo, a veces surgen errores en uno o
En ocasiones, la mutación o la pérdida de un solo alelo de un más de los componentes que regulan el ciclo celular. A menudo,
gen supresor de tumores recesivo es suficiente para causar cáncer. estos errores determinan que las células se dividan en momentos
Este efecto -la aparición del rasgo en una célula o un organismo inapropiados o a velocidades inadecuadas, lo que induce cáncer.
individual que es heterocigótico para un rasgo normalmente rece- De hecho, muchos protooncogenes y genes supresores de tumo-
sivo- se denomina haploinsuficiencia. Se considera que este res funcionan normalmente ayudando a controlar el ciclo celular.
fenómeno se debe a los efectos de dosificación: el heterocigoto Antes de considerar la 1nanera en que los errores de este sistema
produce solo la mitad del producto codificado por el gen supresor contribuyen al cáncer, debemos conocer primero cómo se regula
de tumores. En condiciones normales, esta cantidad es suficiente el ciclo celular.
para los procesos celulares que i1npiden la formación de tu1nores,
pero la cantidad es menor que la óptima, y a veces otros factores CONTROL DEL CICLO CELULAR Como se comentó en el capítulo 2,
pueden combinarse con la menor cantidad de producto supresor de el ciclo celular comprende el período entre una división celular y
tumores para causar cáncer. l.!•~~~!!!=~~!!!!:~~===~~~ la siguiente. Las células que se encuentran en división activa
pasan por las fases G 1, S y G2 de la interfase y luego van directa-
mente a la fase M, en la que tiene lugar la división celular. Las
células que no se dividen pasan del estadio 0 1 al 0 0, en el que son
Cuadro 23-5 Algunos genes supresores de tumores funcionales pero no crecen ni se dividen en forma activa. L a pro-
y sus funciones normales gresión de un estadio del ciclo celular a otro es influenciada por
una serie de señales internas y externas regulada en puntos clave
Cáncer en el que del ciclo, denominados puntos de control.
Gen Función normal está mutado el gen
Durante muchos años, se desconocieron por co1npleto los even-
APC Andam iaje proteico, inte- Colorrectal tos bioquímicos que controlan la progresión de las células a lo
ractúa con microtúbu los largo del ciclo celular, pero en la actuali dad la investigación ha
revelado muchos de los detalles de este proceso. Los eventos
BRCA1 Reparación del DNA, fac- Mama y ovario
tor de transcripción
clave del ciclo celular son controlados por cinasas dependientes
de ciclina (CDK), que son enzimas que agregan grupos fosfato a
CDKN2A Regula la división celular Melanoma otras proteínas. En ocasiones, la fosforilación activa la otra prote-
NF1 Activador de GTPasa Neurofibromatosis ína, y otras veces la desactiva. Con10 in1plica su non1bre, las CDK
so lo son funcionales cuando se asocian con otra proteína, deno-
p53 Regula la división celular Muchos tipos de cáncer minada ciclina. La concentración de ciclina oscila en el curso del
RB Regu la la división celular Retinoblastoma ciclo celular; cuando está unid a a una CDK, la ciclina especifica
qué proteínas fosforilará la CD K. Cada ciclina aparece en un
 Genética del cáncer 669

punto específico deJ ciclo celular, en general porque otra ciclin a
regula su síntesis y destrucción. Las ciclinas y las CDK reciben
distintos nombres en diferentes organismos; aquí emplearemos
los términos aplicados a estas moléculas en los mamíferos.
TRANSICIÓN G 1 A s Comencemos por consíderar la transición de
G 1 a S. Como se mencionó antes, los puntos de control garantizan
que todos los componentes celulares estén presentes y funciona n-
do de manera correcta antes de que la célula proceda al siguiente
estadio del ciclo. El punto de control G 1/S se encuentra en G 1 ,
justo antes de que la célula ingrese en la fase S y replique su
DNA. El paso de la célula a través del punto de control G 1/S es
impedido por la proteína del retinoblastorna (RB) (fig. 23-7), que
se une a otra molécula denominada E2F y la 1nantiene inactiva.
En Gi, las ciclinas D y E aumentan continuamente su concentra-
ción y se combinan con sus CDK asociadas. Tanto la CDK-cicli-
na-D como la CDK-ciclina E fosforilan moléculas de RB. Al final
de G 1 , se completa la fosforilación de RB, con su consiguiente
desactivación. Sin los efectos inhibitorios de RB , la proteína E2F
es liberada. E2F es un factor de transcripción que estimul a la
transcripción de genes que producen enzimas necesarias para la
replicación del DNA, y la célula pasa al estadio S del ciclo celu-
lar.
TRANSICIÓN G2 A La regulación de la transición de
M a M es
similar a la de G 1 a S. En la transición de G 2 a M, la ciclina B se
º2
fato (fig. 23-Sa). Durante G 1 , las concentraciones de ciclinaB son
bajas, de manera que la cantidad de MPF también lo es. A medi-
da que se produce más ciclina B, esta se combina con CDK para
formar cantidades crecientes de MPF. Cerca del final de G2 , la
cantidad MPF activo alcanza una concentración crítica, que com-
pro1nete a la célula a dividirse. La concentración de MPF sigue
aumentando y alcanza un n1áxüno durante Ja mitosis.
La forma activa de MPF fosfori la otras proteínas, que luego
desencadenan muchos de los eventos asociados con la mitosis,
como la rusgregación de la membrana nuclear, la formación del
huso y la condensación de los cromosomas. Al final de la meta.fa-
se, hay degradación abrupta de la ciclina B, lo que reduce la can-
tidad de MPF, y al injcio de la anafase, pone en 1novimiento un a
se1ie de eventos que finalmente terminan la mitosis (fig. 23-Sb).
En resumen, altas concentraciones de MPF estimulan la mitosis,
y bajas concentraciones de MPF restablecen las conruciones de
interfase.
El punto de control G 2/M se encuentra al final de G 2, antes de
que la célula entre en 1nitosis. Una serie de factores estiinulan la
síntesis de ciclina B y la activación de MPF, mientras que otros
factores inhiben el MPF. En conj unto, estos factores garantizan
que no se inicie la mitosis basta que las condiciones sean apropia-
das para la división celular. Por ejemplo, el daño del DNA inhibe
la activación del MPF; en consecuencia, la célula queda detenida
en G 2 y no se divide.

combina con una CDK para fo rmar un complejo inactivo denomj- PUNTO DE CONTROL DEL ENSAMBLAJE DEL HUSO Otro punto de
nado factor promotor de la mitosis (MPF). Una vez formado el control, denominado punto de control del ensamblaje del huso, se
MPF, debe ser activado mediante la eliminación de un grupo fos- encuentra en la meta.fase. Este punto de control retrasa el comien-
zo de la anafase hasta que todos los cro1nosomas están alineados
en el plano ecuatorial de la meta.fase y los cinetocoros hermanos
Proteína se hallan un.idos a fibras deJ huso de polos opuestos. Si no hay a.Li-
RB se une a E2F y lo
neación correcta de todos los cromoso1nas, el punto de control
RB ---
E2F
- ~=~ mantiene inactivo.
bloquea la destrucción de la ciclina B. La persistencia de ciclina
B mantiene activo al MPF y conserva a la célula en un estado

Ciclina-D- CDK
Las concentraciones 7 mitótico. Otro punto de control adicional controla la salida de la
crecientes de ciclina-D-CDK célula de la 1nitosis.
Fosforilación y ciclina-E-CDK fosforilan
Ciclina-E-CDK a RB, ... MUTACIONES DEL CONTROL DEL CICLO CELULAR y CÁNCER Muchos
cánceres son causados por defectos de la maquinaría reguladora
del ciclo celular. Por ejemplo, las mutaciones del gen que codifi-
p p ca la proteína RB ( que en condiciones normales mantiene a la
r 1 ... que desactiva a RB y
.-e=-::=;:-, libera E2F. célula en G 1 hasta que el DNA está listo para ser replicado) se
RB E2F asocian con nun1erosos cánceres, incluido retinoblasto ma.
Cuando el gen RB está mutado, las céluJ as atraviesan el punto de
control G/S sin los controles normales que impiden su prolifera-
ción. El gen que codifica ciclina D (que estimul a el pasaje de
E2 F se une al DNA l
células a través del punto de control G 1/S) está sobreexpresado en
y estimula la
alrededor del 50% de los cánceres de ma1na, así como en algunos
DNA = -
Gen
-- transcripción de los
genes requeridos
para la replicación
casos de cáncer de esófago y de piel. De modo similar, el gen
supresor de tun1ores p53, que está mutado e n alrededor del 75%
Promotor
del DNA.
de los cánceres de colon, regula un potente inhibidor de la activi-
dad de CDK.
Algunos protooncogenes y genes supresores de tumores inter-
Transcripción vienen en la apoptosis, un proceso de 1nuerte celular programada
en el que se degrada el DNA de la célula, se contraen su núcleo y
RNA su citoplasma, y la célula es fagocitada por otras células sin derra-
mar su contenido. Las célu las tienen la capacidad de autoevaluar-
Figura 23-7. La proteína RB ayuda a controlar la progresión a través se y, cufil1do son anormales o están dañadas, suelen sufrir apopto-
del punto de control G/S al unirse al factor de transcripción E2F. sis (véanse pp. 646-647 del cap. 22). Con frecuencia, las células
670 CAPITULO 23

Pu nto de contro l del Desintegr ación de la envoltura nuclear,

ensamb laje del huso condensación de cromosomas, ensamblaje

~
del huso
M PF
activo e ,,,,,,, ~ --~- - - • ~ Degradación de ciclina B
COK
Punto de control G2/M

Fase M:
(desfosforilación) 4- división nuclear
y celular
MPF 0
inactivo COK ~ Punto de contro l G1/ S
p
_, ] Í fosforilación
Aumento ) Interfase:
de ci cl ina s crecimiento
0 celular COK
p

Interfase
- Interfase
- 1nterfase
G2
= Mitosis
G1 s G2
Mitosis == G1

Concentración
de ciclina B

- "' - Concentración de M PF activo

.,.,,.,,,., (factor promotor de mitosis)

Se acumula ciclina B
durante toda la interfase.
Cerca del final de G2 , el
MPF activo alcanza un nivel
crít ico, que determina que
la célula progrese a través
del punto G2/M y hasta la
mitosis. __J
La degradación de
ciclina B cerca del f ina l
de la mitosis hace que
descienda el nivel de
MPF activo, y la célula
reingresa en interfase.
Durante la int erfase, los Cerca del f inal de la interfase,
niveles crecientes de los factores activadores elimina
ciclina B se combinan con grupos fosfato del MPF, lo que
CDK para producir niveles genera MPF activo, que induce
crecientes de MPF inactivo. la desintegración de la envoltura
J nuclear, la condensación de los
cromosomas, el ensamblaje del
huso y otros eventos asociados
con la mitosis.
Cerca del final de la metafase, la
degradación de ciclina B reduce la
cant idad de MPF activo, lo que
induce la anafase, la telofase, la
citocinesis y, finalmente, la
interfase.

Figura 23-8. La ciclina B regula la progresión a través del punto de control G:z!M.

cancerosas presentan n1utaciones cro1nosó1nicas, daño del DNA y ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3

otras anomalías celul ares que normalmente estimul arían la apop-
tosis y evitarían su proliferación. A menudo, estas células tienen
mutaciones en los genes que regulan la apoptosis y, por lo tanto,
no presentan muerte celular programada. Por eje1nplo, la capaci-
dad de una célula de desencadenar apoptosis en resp uesta al daño
del DNA depende de p53, que es inacti vo en muchos cánceres
hurnanos.
CONCEPTOS
La progresión a lo largo del ciclo celular se controla en los puntos de
control, que están regu lados por interacciones entre ciclinas y cinasas
dependientes de ciclinas. Con frecuencia, los genes que controlan el
ciclo celular presentan mutaciones en las células cancerosas.
¿ Cuál sería el efect o más probable de una mutación que impide la
unión de ciclina B con CDK?
a. Las células pasan a través del punto de control G2/M e ingresan
en mitosis aun cuando no se haya replicado el DNA.
b. Las células nunca atraviesan el punto de control G/S.
c. Las células atraviesan la mitosis con mayor rapidez que las célu las
no mutadas.
d. Las células no pasan el punto de control G/M y no entran en
mitosis.
ViAS DE TRANSDUCCIÓN DE SEÑALES Un gran número de señales
internas y externas influyen para que la célula progrese a lo largo
del ciclo celular y continúe dividiéndose. Las señales externas son
 Genética del cáncer 671

desencadenadas por hormonas y factores de crecimiento. A me- Membrana Receptor

nudo, estas moléculas no pueden atravesar la membrana celular celular transmembrana
debido a su tamaño o carga; ejercen sus efectos mediante la unión \
a receptores de la superficie celular, lo que desencadena una serie
de reacciones intracelulares que luego llevan el mensaje al núcleo
/ GDP La unión del facto
o a otro sitio dentro de la célula. Este tipo de sistema, en el que
una señal externa desencadena una cascada de reacciones intrace- Ras inactivo de crecimiento al
receptor causa un
lulares que por último provocan un a respuesta específica se deno- ...-::::-:::::;.., cambio de
mina vía de transducción de señales. Los defectos en estas vías Factor de conformación y la
suelen asociarse con cáncer. crecimiento adición de grupos
Una vía de transducción de señales comienza con la unión de fosfato.
una molécula de señalización externa a un receptor específico
incluido en la 1nembrana celular. En general, los receptores de las
Moléculas
vías de transducción de señales tienen tres partes: 1) un dominio adaptadoras
extracelular que protruye de la célula y se une a la molécula de
señalización; 2) un dominio transmembrana que atraviesa la
1nembrana y lleva la señal al interior de la célula y 3) un donúnio l
intracelular que se extiende al interior del citoplasma y, ante la
unión de la n1olécula de señalización, sufre un cambio químico o
GTP ---=:::::::::::::..._.J Las moléculas
adaptadoras se unen

de conformación que se transmjte a moléculas de la vía de trans- í '\ al receptor y se ligan

con Ras. Ras se une
ducción de señales en el citoplasn1a. La unión de una molécula de GTP GDP
a GTP y es activada.
señalización al receptor unido a la membrana activa una proteína
de la vía. Al ser activada, esta proteína activa la siguiente molécu-
la de la vía, a n1enudo por añadir o eliminar grupos fosfato o cau-
sar cainbios de conformación de la proteína. La proteína recién
activada activa la siguiente molécula de la vía, y de esta manera,
la señal avanza a lo largo de una cascada de reacciones y por últi-
mo provoca la respuesta, por ejemplo estimulación o inhibición
del ciclo celular.
En la última década, se investigó mucho para determinar las GTP
vías por las que diversas señales influyen en el ciclo celular. A fin
de ilustrar la transducción de señales, consideremos la vía de
transducción de señales Ras, que desempeña un papel importante
en el control del ciclo celular. Cada proteína pasa de una forma
Raf
inactiva
•
....-
-- Raf
activa
Ras activada activa a
Raf, que activa a una
proteína denominada
MEK, que activa a MAP

•
activa a una inactiva. En la for1na inactiva, la proteína Ras se une cinasa.
a la guanosina difosfato (GDP); en la forma activa, se una la gua- ....-
nosina trifosfato (GTP).
.L a vía de transducción de señales Ras se activa cuando un fac-
MEK
inactiva
-- MEK
activa

tor de crecimiento, como el factor de crecimiento epidérmi co

(EGF), se une a un receptor de la membrana celular (fig. 23-9). MAP
i
....- MAP
La unión de EGF causa un cambio de conformación del receptor
y la adición de grupos fosfatos a este. La adición de grupos f os-
fato permite que las moléculas adaptadoras se unan al receptor.
Estas moléculas adaptadoras vinculan al receptor con una molé-
onasa
inactiva -- cinasa
activa
MAP cinasa
activada se
mueve hacia el
~ in~erior del .
cula inactiva de la proteína Ras. Las moléculas adaptadoras esti-
1nulan a Ras para que libere GDP y se una a GTP, lo que la acti-
- nucleo y act iva
factores de
va. Luego, la proteína Ras recién activada se une a una forma
MAP
l
transcripción.
inactiva de otra proteína, denominada Raf, y la activa. Después de cinasa
activai· a Raf, Ras hidroliza el GTP a GDP, lo que vuelve a con- Núcleo
activa
vertirla en la fo rma inactiva.
Luego, Raf activada inicia una cascada de reacciones que fina-
lizan en la activación de una proteína, denominada MAP cinasa.
La MAP cinasa activada se desplaza al núcleo y activa una serie Factores de
de factores de trai1scripción, que estimulan la transcripción de transcripción
genes que intervienen en el ciclo celular. De esta n1anera, la señal
externa original promueve a la división celular. Se identificó una
serie de otras vías de transducción que afectan el ciclo y la proli-
feración celulai·es. Figura 23-9. La vía de transducción de señales Ras conduce señales
Como las vías de transducción de señales ayudan a controlar el de factores de crecimiento y hormonas hacia el núcleo y estimula el
ciclo celular, los defectos de sus con1ponentes a menudo contri- ciclo celular. Las mutaciones de esta vía suelen contribuir al cáncer.
672 CAPITULO 23
buyen al cáncer. Por ejempl o, los genes que codifica n las proteí-
nas Ras suelen ser oncogenes, y con frecuencia se hallan mutacio-
nes de ellos en células cancerosas: el 75% de los tumores de pán-
creas y el 50% de aquellos de tiroides y colon tienen mutaciones
de los genes ras. Las mutaciones de estos genes producen proteí-
nas Ras 1nutantes que están activadas en forma permanente y esti-
n1ulan continuamente la división celular.
CONCEPTOS
Las moléculas del exterior de la célula a menudo desencadenan reac-
ciones intracelulares mediante la unión a un receptor de membrana y
la estimulación de una cascada de reacciones intracelulares, lo que se
conoce como vía de transducción de seña les. Numerosas moléculas
de la vía son proteínas que alternan entre formas activas e inactivas.
Los defectos de las vías de transducción de señales suelen asociarse
con cáncer.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
Las proteínas Ras se activan cuando
a. se unen a GTP,
b. li beran GTP,
c. se unen a GDP,
d. presentan acetilación.
Genes de reparación del DNA
El cáncer surge por la acumulación de múltiples mutaciones de
una sola célula. Algunas células cancerosas tienen tasas norma-
les de mutaciones, y se acumulan múltiples mutaciones porque
cada una confiere a la célula una ventaja de replicación respec-
to de célul as que no presentan las mutaciones. Otras células can-
cerosas pueden tener tasas de mutación más altas que las norma-
les en todos sus genes, lo que induce mutación más frecuente de
oncogenes y genes supresores de tumores. ¿ Cuál podría ser la
fuente de estas altas tasas de mutación en algunas células can-
cerosas?
Dos procesos controlan la tasa de aparición de mutaciones: 1) la
tasa con la que se producen en·ores durante la replicación y des-
pués de ella y 2) la eficiencia con la que se corrigen los errores.
La tasa de error en la replicación se controla por la fidelidad de
las DNA polimerasas y otras proteínas en el proceso de replica-
ción (véase cap. 12). Sin embargo, los defectos de los genes que
codifican proteínas de replicación no se han vinculado fi nnemen-
te con el cáncer.
La tasa de mutación también es muy afectada por los errores
que con1eten, o no, los sisten1as de reparación del DNA (véanse
pp. 520-526 en el cap. 18). Los defectos de los genes que codifi-
can componentes de estos sistemas de reparación se han asociado
de manera consistente con una serie de cánceres. Por ejemplo, las
personas con xeroderrnia pigmentosa tienen defectos de la repa-
ración por escisión de nucleótidos, un sistema de reparación cel u-
lar importante que, en condiciones normales, corrige el daño del
DNA causado por una serie de mutágenos, inclui da la luz ultra-
violeta. De modo sitnilar, alrededor del 13% de los cánceres colo-
rrectales, endometriales y gástricos tienen células que son defec-
tuosas en la reparación de errores de apareamiento, otro sistema
de reparación importante de la célula.
Un tipo paiticular de cáncer de colon, denominado cáncer colo-
rrectal sin poliposis, se hereda co1no un rasgo autosómico domi-
nante. En familias con esta entidad , una persona puede heredar un
alelo mutado y uno normal de un gen que controla la repai·ación
de errores de apareamiento. El alelo normal proporciona niveles
suficientes de la proteína para que funcione la reparación de erro-
res de apareamiento, pero es n1uy probable que este alelo normal
111ute o se pierda por lo menos en algunas células. Si esto sucede,
no hay reparación de los e1Tores de apareamiento y estas células
presentan tasas de mutación más altas que las normales, lo que
induce defectos de los oncogenes y los genes supresores de tumo-
res, lo que causa proliferación celular.
Asimismo, los defectos de los siste1nas de reparación del DNA
pueden contribuir a generai· reordenamientos cron1osómicos e
inestabilidad genómi ca. Muchos sistemas de reparación del DNA
realizan rupturas mo no y bicatenarias en e l DNA que, si no son
repai·adas de manera apropiada, a menudo causan reordenamien-
tos cromosómicos.
Genes que regulan la telomerasa
Otro factor que puede con tribuir a Ja progresión del cáncer es la
activación inapropiada de la enzima telomerasa. Los telómeros
son secuencias especiales en los extremos de los cromosomas
eucariontes. Recuérdese que los extremos de los cromosomas no
pueden replicarse y los teló1neros se acortan con cada división
celular. Finalmente, este acortamiento lleva a la destrucción del
cromoson1a y la 1nuerte celular, de manera que las célul as somá-
ticas solo son capaces de una limitada cantidad de divisiones
celulares.
En las células ger1ninales y en las células madre, la telo1nerasa
replica los extremos de los cromosomas (véanse pp. 344-346 del
cap. 12), lo que mantiene los telómeros, pero esta enzima no se
expresa normal mente en células somáticas. En cambio, en
muchas células cancerosas hay mutaciones de las secuencias que
regulan la expresión del gen de telomerasa, lo que permite la
expresión de la enzima, y la célula es capaz de dividirse en forma
ilinútada. Esta 1nutación posibilita que las células cancerosas se
dividan indefinidamente. Si bien la expresión de la telomerasa
parece contJi buir al desarrollo de muchos cánceres, se desconoce
su papel preciso en la progresión del tumor y se lo está investi-
gando.
Genes que promueven la vascularización
y la diseminación de tumores
Un último grupo de factores que contribuyen a la progresión del
cáncer son los genes que afectan el crecimiento y la diseminación
de los tumores. El oxígeno y los nutrientes, esenciales pai·a la
supervivencia y el crecimiento de los tumores, son aportados por
vasos sanguíneos, y la neovascularización (angiogénesis) es
importante para la progresión del tumor. La angiogénesis es esti-
mu lada por factores de crecimiento y otras proteínas codificadas
por genes cuya expresión está cuidadosamente regulada en las
células normales. En las células tumorales, los genes que codifi-

can estas proteínas a menudo muestran sobreexpresión respecto
de las células normales, y los inhibidores de los factores promo-
tores de la angiogénesis pueden estar desactivados o expresarse
1nenos. Por lo menos un cáncer hereditario (la enfermedad de von
Hippel-Lindau, en la que las personas presentan múltiples tipos
de tumores) se debe a la mutación de un gen que afecta la angio-
génesis.
En el desan·ollo de muchos cánceres, el tumor p1imario da ori-
gen a células que se diseminan a sitios distantes, donde producen
tumores secundaiios. Este proceso de metástasis es la causa de
1nuerte en el 90% de los casos de cáncer humano; es influencia-
do por cambios celulai·es inducidos por mutación somática.
Como se comentó en la introducción de este capítul o, el gen
palladi n, cuando está mutado, contribuye a las metástasis del
cáncer de páncreas. Mediante la utilización de micromatrices
para medir los niveles de expresión génica, los investigadores
identificaron otros genes que se transcriben a una tasa significa-
tivamente más alta en las células metastásicas que en las no
111etastásicas. Por ejemplo, un estudio detectó un conjunto de 95
genes que estaban sobreexpresados o subexpresados en una
población de células metastásicas de cáncer de mama que afec-
taban de manera intensa el pulmón, en comparación con una
población de células que solo metastatizaban débilmente al pul-
1nón. A menudo, los genes que contribuyen a las metástasis codi-
fican componentes de la 1natriz extra.cel ular y el citoesqueleto.
Otros codifican proteínas de adhesión, que ayudan a mantener
juntas las células.
En la actualidad, los avances de la tecnología de secuenciación
han posibilitado la secuenciación completa del DNA de células
tumorales para ver cómo sus geno1nas difieren de los de las célu-
las norn1ales. En un experimento, los investigadores secuenciaron
todo el genoma de células de un cáncer de mama metastásico y lo
compararon con el de células no cancerosas de la misma persona.
También compararon el genoma del tumor metastásico con el
genoma del tumor primario (a partir del cual se originaron las
1netástasis), que se había resecado nueve años antes. Los investi-
gadores hallai·on 32 mutaciones somáticas diferentes en las regio-
nes de codificación de los genes de las células tumorales, 19 de
las cuales no se detectaron en el tumor p1imari o. Este hallazgo
sugiere que el tumor metastásico sufrió cambios genéticos consi-
derables en su evolución de nueve años a pattir del tumor p1ima-
rio. En cambio, otro estudio de un cáncer de mama metastásico
halló solo dos mutaciones que no estaban presentes en el tumor
primario, pero en este caso la metástasis había evolucionado en
solo un año.
CONCEPTOS
Las mutaciones de genes que codifican componentes de los siste -
mas de reparación de l DNA a menudo se asocian con cáncer; estas
mutaciones aumentan la tasa de conservación de las mutaciones y
determinan un mayor número de mutaciones en protooncogenes,
genes supresores de tumores y otros genes que contribuyen a la
proliferación celu lar. Las mutaciones que permiten la expresión de
telomerasa en células somáticas y las que afectan la vasculariza-
ción y las metástasis tamb ién pueden contribuir a la progresión del
cáncer.
Genética del cáncer 6 73
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 5
¿ Qué tipo de mutación de la telomerasa se asocia con células cance-
rosas?
a. Mutaciones que producen una forma inactiva de telomerasa.
b . Mutaciones que disminuyen la expresión de telomerasa.
c. Mutaciones que aumentan la expresión de telomerasa.
d. Todas las anteriores.
Micro-RNA y cáncer
Los micro-RNA (miRNA) son una clase de moléculas de RNA
pequeñas que se aparean con secuencias complementarias del
mRNA y lo degradan o inhiben su traducción (véase cap. 14).
Como los miRNA son importantes para controlar la expresión
gén ica y el desarrollo, no es sorprendente que también se asocien
con la aparición de tumores. Muchas células tumorales muestran
reducción generalizada de la expresión de numerosos miRNA.
Los investigadores genomanipularon células tumorales de ratón
que carecían de la maquinaria para generar miRNA y observaron
que estas células mostraban 1nayor progresión del tu1nor cuando
se implantaban en ratones. Interesa destacar que este efecto se
observó solo en células que ya habían iniciado el desarrollo del
tumor, lo que sugiere que los rniRNA desempeñan un papel en
estadios n1ás avanzados de la progresión del tumor.
Las concentraciones más bajas de miRNA pueden contribuir
al cáncer al permitir altos niveles de expresión de oncogenes
normalmente controlados por los 1niRNA. Por ejemplo, en con-
diciones norma les, el miRNA let-7 controla la expresión del
oncogén ras, probablemente por unión a secuencias comple-
mentarias de la región 3' no traducida del rnRNA e inhibición de
la traducción. En células de cáncer de pulmón, las concentracio-
nes de miRNA let-7 suelen ser bajas, lo que posibilita una alta
expresión de proteína Ras que después induce la aparición de
cáncer pulmonar.
Un factor de transcripción denominado c-MYC a menudo se
expresa en altos niveles en células cancerosas. La evidencia
sugiere que c-MYC ayuda a ilnpulsar la proliferación celular y la
aparición de cáncer. Entre otros efectos, c-MYC se une a los pro-
motores de los genes de núRNA y disminuye su transcripción, lo
que reduce la abundancia de miRNA. Se sabe que algunos de
estos miRNA suprim.e n el desarrollo tumoral. La investigación ha
mostrado que, si mediante manipul ación genética los miRNA se
expresan en altos niveles, disminuye el desarrollo de tumores.
Todos estos hallazgos sugieren que la alteración de la expresión
de 1niRNA desempeña un papel importante en el cáncer.
Se ha in1plicado a varios miRNA en el proceso de metástasis.
Un miRNA particul ar, denominado miR-l 0b, se ha asociado con
la formación de tumores de mama metastásicos. En un experi-
mento, los investigadores manipularon una línea de células de
cáncer de mama, de manera que hubiera sobreexpresión de miR-
l üb. Cuando se inyectaron las células manipuladas a ratones, 1nu-
chos presentaron tumores metastásicos. A diferencia de los ejem-
plos precedentes en los que la expresión más baja de miRNA se
asocia con cáncer, aqtú los altos niveles de miRNA parecen pro-
mover la diseminación de células cancerosas. Estudios adiciona-
674 CAPITULO 23
les revelaron que, en seres humanos, las concentraciones de miR-
10b son más altas en tumores 1netastásicos que en tumores de
pacientes sin metástasis. Este miR-l0b regula la expresión de una
serie de otros genes, incluidos algunos que se sabe sup1imen la
diseminación de células tumorales. Es sabido que otros 1niRNA
inhiben la metástasis.
Proyectos de genomas
de cánceres
El Consorcio Internacional del Genoma del Cáncer (lnternational
Cancer Genome Consortiuni), formado en 2008, coordina los
proyectos para detenninar las secuencias genó1nicas de tun1ores.
Un objetivo del consorcio es secuenciar por completo 500 tumo-
res de 50 tipos diferentes de cáncer, junto con los genomas de teji-
dos normales de las mismas personas. Este esfuerzo está dando
resultados importantes, que revelan la cantidad y los tipos de
1nutaciones que se asocian con detern1inados cánceres. La espe-
ranza es que se identifiquen nuevos genes causantes de cáncer, lo
que Ilevará a conocer mejor la naturaleza de la patología y suge-
rirá nuevas dianas de tratamiento oncológico. Otro proyecto de
investigación, denominado Toe Cancer Genome Atlas (TCGA,
Atlas del Genoma del Cáncer), con1enzó en los Estados Unidos
en 2005. Este proyecto busca proporcionar un análisis genético
completo de 111ás de 100 tipos diferentes de células cancerosas,
incluida la secuenciación de todos los exones en el genoma, así
como la caracterización de la expresión de mRNA, la metilación
del DNA, las variaciones del número de copias y los micro-RNA
de las células tumorales.
Se secuenciaron los genomas de una serie de tumores, y en la
actualidad están secuenciándose muchos más. Por ejemplo, en
20 1O se secuenció todo el geno1na de un carcinoma microcítico
de pulmón (un tipo de cáncer pulmonar) y se lo comparó con el
genoma de células nom1ales de la misma persona. Se identifica-
ron más de 22 000 mutaciones de pares de bases en el tumor, de
los cuales 134 con·espondieron a genes codificantes de proteí-
nas. Asimismo, el tumor tenía 58 reordenamientos cromosón1i-
cos y 334 variaciones del nún1ero de copias (véase cap. 20). En
otro estudjo que formó parte del TCGA, los investigadores exa-
minaron la expresión de mRNA, micro-RNA, metilación de
DNA y variaciones del número de copias en 489 adenocarcino-
1nas ováricos y secuenciaron el DNA de los exones de 316 de
los tumores. Casi todos los tu1nores contenían mutaciones de p53,
un gen supresor de tu1nores involucrado en la reparación del
DNA y el control del ciclo celular. En el 22% de los tumores, se
observaron mutaciones del BRCAl y BRCA2, dos genes supre-
sores de tumores que también aparecen en el cáncer de mama.
Las mutaciones de otros siete genes fueron estadísticamente
1nás frecuentes que en las células normales. Los resultados sugi-
rieron nuevos enfoques para el tratamiento farmacológico del
cáncer de ovario.
Otra serie de estudios secuenció un conjunto de genes en mues-
tras de gliomas malignos, una forma incurable y letal de cáncer
cerebral. Los investigadores examinaron secuencias de DNA, va-
riaciones del número de copias, metilación del DNA y expresión
de RNA de estos tumores. Los análisis revelaron mutaciones de
varios genes que parecen ser importantes en el desarrollo de glio-
mas. Todos estos estudios genómicos están aportando nuevos
conocimientos acerca de la base genética del cáncer.
La gran cantidad de mutaciones halladas en los genomas de
cánceres pueden dividirse en dos tipos: mutaciones impulsoras
y mutaciones pasajeras. Las impulsoras son mutaciones que
estimulan el proceso del cáncer: contribuyen directamente a la
aparición del cáncer. Comprenden mutaciones de oncogenes,
genes supresores de tumores, genes de reparación del DNA y
otros tipos de genes del cáncer analizados en este capítulo. Las
pasajeras son mutaciones que surgen de manera aleatoria en el
proceso de desarrollo tumoral y que no contribuyen al proceso del
cáncer. Muchas mutaciones pasajeras se encuentran en intrones
(regiones entre los genes) y otro DNA que no se transcribe ni se
traduce, pero también pueden surgir dentro de los genes que codi-
fican proteínas. Un desafío importante es deten11inar cuál de las
nu1nerosas 1nutaciones halladas en los tum.o res son impulsoras y
contribuyen realmente a la aparición del cáncer y cuáles son pasa-
jeras sin ningún efecto.
23.3 . Los cambios
,
epigenéticos suelen
asociarse con cancer
En muchas células cancerosas se observan cambios epigenéticos,
alteraciones de la estructura cromatínica que afectan la expresión
génica (véase cap. 21). Dos amplias Líneas de evidencia sugieren
que los ca1nbios epigenéticos desempeñan un papel de importa11-
cia en la progresión del cáncer. Primero, los genes que codifican
proteínas que son importantes reguladores de los cambios epi-
genéticos a menudo están mutados en algunos cánceres. Por
ejemplo, casi el 90% de los casos de linfoma folicular muestran
mutaciones del gen MLL2, que codifica una enzima rustona
metiltransferasa; esta enzima agrega grupos metilo al DNA, un
tipo de modificación epigenética que altera la estructura de la
cromatina y afecta la transcripción. De modo silnilar, el gen
UTX, que codifica una histona desmetilasa (enzima que elimina
grupos metilo de histonas), está mutado en una serie de tipos
diferentes de cáncer.
Una segunda línea de evidencia que sugiere que las alteraciones
epigenétícas son importantes en el cáncer proviene de estudios
genómicos recientes que compararon la estructura de la cromati-
na de células cancerosas y normales del mismo individuo. Estos
estudios suelen hallar que las células cancerosas tienen alteracio-
nes significativas de la metilación del DNA y la estructura de las
histonas. Un tipo de alteración epigenética que suele observarse
en células cancerosas es un nivel general de menor n1etilación del
DNA (hipometilación). Co1no se comentó en el capítulo 17, la
metilación del DNA a menudo se asocia con represión de la trans-
cripción. Se presume que la rupometilación induce transcripción
de oncogenes que después estimulan el cáncer. Asimismo, cierta
evidencia sugiere que la hipo1netilación causa inestabilidad cro-
mosómica, un signo distintivo de muchos tumores. Las células
tu1norales de ratones geno1nan ipuladas para tener 1nenor metila-
ción del DNA muestran mayores ganancias y pérdidas de cromo-
somas, pero no se ha esclarecido cómo podría causar inestabili-
dad cromosómica la hipometilación.
En una serie de estudios se observó que, aunque el nivel global
de n1etilación del DNA suele ser más bajo en las células cancero-
sas, algunas islas CpG específicas (véase cap. 17) tienen metila-
ción extra (están hipermetiladas). Por ejemplo, un estudi o halló
que del 5 al 10% de las islas CpG no metiladas localizadas en pro-
 Genética del cáncer 675

motores se tornan anorma lmente metiladas en células cancerosas. Corte a través

Esta n1etilación excesiva puede inhibir la transcripción de genes del colon normal
supresores de tumores, lo que estimula el desarrollo de cáncer. Se
observa metilación del pro1notor del gen Apaf-1 en muchas célu-
las de melanoma maligno. Apaf-1 ayuda a desencadenar apopto-
sis de las células con DNA dañado; la metilación de su promotor
reduce la expresión de Apaf-1, lo que interru1npe el proceso de
apoptosis y permite la supervivencia de células cancerosas anor-
males.
La investigación también demostró que las histonas de los nu- /
cleosomas , la unidad fundamental de la cromatina, a n1enudo pre- Células normales
sentan 1nodificaciones anormales en las células cancerosas. La
1nodificación de las histonas, como 1netilación y acetilación, alte-
ra la estructura de la cromatina e influye en si se produce la trans-
•
Pérdida del gen supresor
de tumores APC
cripción. Con frecuencia, los patrones globales de acetilación de
histonas están alterados en las células cancerosas. Sin embargo, la
acetilación no solo afecta a las histonas, sino también a una serie Se forma un pólipo
de otras proteínas que pueden estimular o suprii11ir la di visión (crecimiento pequeño) en
la pared del colon.
celular, de manera que no queda claro si el efecto de la acetilación
en el cáncer se produce a través de cambios de la est1uctura de la
cromatina. Los investigadores de cáncer están prestando cada vez
n1ás atención a los procesos epigenéticos, porque pueden ser pasi- Crece un tumor benigno,
bles de farmacoterapia. precancersoso.

Vaso - - ~ - ~ ----- -~
CONCEPTOS sanguíneo
Activación
Los cambios epigenéticos, como metilación del DNA y modif icación del oncogén ras
de histonas, a menudo se asocian con cáncer.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 6
l
c------------- ===t.:;:t;;~r.;~;::i
Crece un adenoma l::: ,.-
(tumor benigno).
Se considera que la hipermetilación contribuye al cáncer por
a. inhibir la replicación del DNA,
b. inhibir la expresión de genes supresores de tumores, Pérdida del gen 7
c. estimular la traducción de oncogenes, supresor de tumores p53J

!
d. estimular la telomerasa .

l'.IAParece un carcinoma -1::::=~=l: -: ;;..:fi{!,11

:
l (tumor maligno). !,~r~:~. .
23.4 El cáncer colorrectal surge por mutación
secuencial de una serie de genes
,~,_iii,iií......... • •
~
1

El cáncer colorrectal es un excelente ejemplo de cómo suele apa-

recer el cáncer por acumulación de defectos genéticos sucesivos.
J
Otros cambios; pérdida
Se han estudiado de manera exhaustiva las mutaciones que con- del gen antimetástasis
tribuyen al cáncer colorrectal.
~
Este cáncer se origina en las células que revisten el colon y el
recto. Cada afio, se diagnostican más de 143 000 casos nuevos de ~ 111,¡
cáncer colon·ectal en los Estados Unidos, donde esta enfennedad
es responsable de más de 51 000 muertes anuales. Si se detecta en
El cáncer metastatiza
(se disemina a otro tejido
~~Jli',1 ~. ~
forma temprana, el cáncer colorrectal puede tratarse en forma exi- a través del torrente
tosa; en consecuencia, ha habido mucho interés en identificar los sanguíneo).
eventos n1oleculares responsables de los estadios iniciales de este
,
cancer.
Se considera que el cáncer colorrectal se ori gina como tumores
Figura 23-10. Mutaciones de múltiples genes contribuyen a la pro-
benignos denominados pólipos adenomatosos (fig. 23-10). Al prin-
gresión del cáncer colorrectal.
cipio, estos pólipos son 111icroscópicos, pero con el tiempo au-
676 CAPITULO 23
mentan de tamaño y sus células adquieren características anorma-
les de células cancerosas. En los estadios más tardíos de la enfer-
1nedad, el tumor puede invadir la capa muscular que rodea al in-
testino y dar metástasis. La progresión de la enfermedad es lenta;
pueden requerirse de l O a 35 años para que un tumor benigno
evolucione a uno maligno.
La 1nayoría de los casos de cáncer colorrectal son esporádicos
y afectan a personas sin antecedentes familiares de la enferme-
dad, pero algunas familias presentan una clara predisposición ge-
nética a esta enfermedad. En una forma de cáncer de colon here-
ditario, conocida como poliposis adenomatosa familiar del colon,
aparecen cientos o miles de pólipos en colon y recto; si no se rese-
car, estos pólipos, uno o más casi siempre se vuelven malignos .
Como los pólipos y los tumores de colon y recto se pueden
observar y resecar· con facilidad con un colonoscopio (un instru-
mento de fibra óptica utilizado para visualizar el interior del recto
y el colon), se sabe n1ucho acerca de la progresión del cáncer
colorrectal, y se identificaron algunos de los genes responsables
de su evolución clonal. Las mutaciones de estos genes son res-
ponsables de los diferentes pasos de progresión del cáncer colo-
rrectal. U no de los primeros pasos es una mutación que desactiva
el gen APC, que aumenta la velocidad de división celular e indu-
ce la formación de un pólipo (véase fig. 23-10). Una persona con
poliposis adeno1natosa familiar del colon hereda una copia defec-
tuosa del gen APC, y los defectos de este gen se asocian con los
numerosos pólipos que aparecen en aquellos que presentan el
trastorno. También se observan mutaciones de APC en los pólipos
que aparecen en personas que no tienen poliposis adenomatosa
del colon.
Por lo general, las mutaciones del oncogén ras se producen más
tarde, en pólipos más grar1des formados por células que han
adquirido algunas mutaciones genéticas. Co1no se co1nentó antes
en este capítulo, el protooncogén ras normal es un componente
clave de una vía de transducción de señales que transmite señales
de factores de crecimiento al núcleo, donde la señal estimula la
división celular. Cuando hay mutación de ras, la proteína que
codifica trar1sn1ite en forma continua una señal estin1uladora de la
división celular, incluso en ausencia del factor de crecimiento.
Las mutaciones de p53 y otros genes aparecen aún más tarde e n
la progresión tumoral; estas mutaciones son rar·as en los pólipos,
pero frecuentes en células malignas. Alrededor del 75 % de los
cánceres colorrectales tienen mutaciones del gen supresor de
tumores p53. Como p53 in1pide la replicación de las células con
daño genético y controla la segregación correcta de los cromoso-
mas, las mutaciones de p53 pueden permitir que una célula
adquiera más mutaciones génicas y cromosómicas, las cuales des-
pués contribuyen a mayor proliferación e invasión de los tejidos
circundantes.
La secuencia de pasos recién delineada no es la única vía para
el cáncer colorrectal, y no es necesario que las mutaciones tengan
lugar en el orden aquí presentado. Sin embar·go, esta secuencia es
una vía común por la que las células colónicas y rectales se tor-
nan cancerosas.
23.5 Los cambios de la estructura y el número
de cromosomas suelen asociarse con cáncer
La mayoría de los tumores contienen células con mutaciones cro-
1nosómicas. Durante muchos años, los gene tistas debatieron acer-
ca de si estas mutaciones eran la cau sa o el resultado del cáncer.
Algunos tipos de tumores se asocian de manera consistente con
mutaciones cromosómicas específicas; por ejemplo, la mayoría
de los casos de leucemia 1nieloide crónica se asocian con una
translocación recíproca entre los cromosomas 22 y 9. Estos tipos
de asociaciones sugieren que las mutaciones cromosómicas con-
tribuyen a la causa del cáncer. Aun así, muchos cánceres no se
asocian con tipos específicos de anomalías cron1osómicas, y en la
actualidad se sabe que mutaciones de genes individuales contri-
buyen a muchos tipos de cáncer. No obstante, la inestabilidad cro-
mosómica es una característica general de las células cancerosas,
que hace que acumulen 1nutaciones cron1osómicas que después
afectan genes individuales que pueden contribuir el proceso del
cáncer. Por consiguiente, las n1utac.iones cromosómicas parecen
ser tanto una causa como un resultado del cáncer.
Por lo menos tres tipos de reordenainientos cromosómicos
(deleciones, inversiones y translocaciones) se asocian con cie1tos
tipos de cáncer. Las deleciones pueden provocar la pérdida de uno
o más genes supresores de tumores. Las inversiones y las translo-
caciones contribuyen de varias maneras al cáncer. Prünero, los
puntos de corte cromosómicos que acompañan a estas mutaciones
pueden localizarse dentro de genes supresores de tumores, lo que
altera su función e induce proliferación celular. Segundo, las
translocaciones e inversiones pueden acercar secuencias de dos
genes diferentes y generar una proteína de fusión que estimula
algún aspecto del proceso del cáncer.
Se observan proteínas de fusión en la mayoría de los casos de
leucemia mieloide crónica, que afecta a las célLtlas de la médula
ósea. La mayoría de los pacientes con leucemia mieloide crónica
tienen una translocación recíproca entre el brazo largo del cromo-
soma 22 y el extremo del brazo lar·go del cromosoma 9 (fig. 23-11).
Esta translocación genera un cromosoma 22 acortado, denominado
cro1noso1na Filadelfia porque fue descubierto por p1imera vez en
esa ciudad. Al final de un cromoso1na 9 normal, hay un posible gen
causante de cáncer, denominado c-ABL. Como resultado de la
- -
■ ■
■ 4s
Translocación
recíproca
■
1 1
- • - •-
~
1 1
■ ■ -
c-ABL{-=-=- -- ---
9 22
}BCR
-
- } BCR
} c-ABL
9-22 Cromosoma
Filadelfia
Figura 23-11. Una translocación recíproca entre los cromosomas 9 y
22 causa leucemia mielógena crónica.
 Genética del cáncer 6 77

-- -- ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 7

-- -- ¿ Con qué tipo de reordena miento cromosómico suele asociarse la

leucem ia mieloide crónica?

•- •- •- •- a. Dupl icación.
b. Deleción.

■ ■ c. Inversión.

■ -
• .J Translocación,.. d. Translocación.

■
-- ■ -- ■
1 ..
■ 1 - ■ La mayo1ía de ]os tumores avanzados contienen células que
m uestran una variedad sustancial de anomalías cromosórnicas,

~~ /■
como cromosomas extra, cromosomas faltantes y reordenamien-
c-MYc{ -- Gen de tos cromosómicos (fig. 23-13). Algunos investigadores de cáncer
~ - -- - inmunoglobulina consideran que este se inicia cuando tienen Jugar cambios genéti-
} c-MYC cos que vuelven inestable al genoma, lo que genera numerosas
8 14
anomalías cromosómicas que después alteran la expresión de
8 14 oncogenes y genes supresores de tumores.
Figura 23-12. Una translocación recíproca entre los cromosomas 8 y En la actualidad, se han identificado una serie de genes que
14 causa el linfoma de Burkitt. contribuyen a la inestabilidad del genoma y determinan la pérdi-
da o adición de cromosomas (aneuploidía). Por lo general, la
aneuploidía de las células somáticas surge cuando los cromoso-
mas no se segregan de manera apropiada durante la mitosis. Las
translocación, parte del gen c-ABL se fusiona con el gen BCR del células normales tienen un punto de control del ensamblaje del
cromosoma 22. La proteína producida por este gen de fusión huso, que controla el ensamblaje correcto del huso mitótico
BCR-c-ABL es mucho más activa que la proteína producida por el (véase p. 671); si los cromosomas no están unidos en forma ade-
gen normal c-ABL; la proteína de fusión estiinula el aumento de la cuada a los microtúbulos en la metafase, se bloquea el comienzo
división celular no regulada y, :finalmente, induce leucemia. de la anafase. Algunas células cancerosas aneuploides contienen
Un tercer mecani s1no medi.an te el cual el reordenanliento cro- alelos mutantes para genes que codifican proteínas que participan
1nosómico puede provocar cáncer es por transferencia de un posi- en este punto de control; en estas células, se ingresa en la anafa-
ble gen causante de cáncer a una nueva localización, donde es
activado por secuencias reguladoras diferentes. El linfoma de
Burkitt es un cáncer de los linfocitos B, los linfocitos que produ-
cen anticuerpos. Muchas personas con linfoma de Buikitt tienen
una translocación recíproca entre el cromosoma 8 y el cro1noso-
ma 2, 14 o 22 (fig. 23-12). Esta translocación reubica un gen
denominado c-MYC del extremo del cromosoma 8 a una posición
del cromosoma 2, 14 o 22 adyacente a un gen que codifica una
inmunoglobulina. En esta nueva localización, c-MYC, un gen cau-
sante de cáncer, queda bajo el control de secuencias reguladoras
que nonnalmente activan la producción de in111unoglobulinas y se
expresa en los linfocitos B . La proteína c-MYC estimula la divi-
sión de los linfocitos B e induce linfo1na de Burkitt.

CONCEPTOS
Muchos tumores contienen diversos tipos de mutaciones cromosómi-
cas. Algunos tumores se asocian con deleciones, inversiones y trans-
locaciones específicas. Las deleciones pueden eliminar o desactivar
genes que controlan el ciclo celular; las inversiones y translocaciones
pueden causar cortes en genes que suprimen tumores, fusionar genes
para producir proteínas causantes de cáncer o desplazar genes a loca-
lizaciones nuevas, donde se encuentran bajo la influencia de distintas
secuencias reguladoras.
Figura 23-13. A menudo, las células cancerosas poseen anomalías
cromosómicas, como cromosomas extra, cromosomas f altantes y
reordenamientos cromosómicos. Aquí se muestran cromosomas de una
célula de cáncer de colon que presenta numerosas anomalías cromosómi-
cas. Para comparación, véase un cariotipo normal en la figura 2-6
(Cortesía del Dr. Peter Duesberg, UC Berkely).
 678 CAPITULO 23
se pese al ensamblaj e incon·ecto del huso o su ausencia, con las
consiguientes anomalías cromosó1nicas. Por ejemplo, las muta-
ciones de RB aumentan la aneuploidía al incrementar la expresión
de una proteína denominada Mad2, que es un componente crucial
del punto de control del ensamblaj e del huso.
Las mutaciones de genes que codifican partes del aparato del
huso ta1nbién pueden contribuir a la segregación anormal. e inducir
anomalías cromosómicas. APC es un gen supresor de tumores que
a menudo está 1nutado en las células de cáncer de colon. Cumple
varias funciones, una de las cuales es interactuar con los extremos
de los microtúbulos que se asocian con el cinetocoro. Las células
en división del ratón que tienen copias defectuosas del gen APC
dan origen a células con muchos defectos cro1nosómicos.
El gen supresor de tumores p53, además de controlar la apop-
tosis , desempeña un papel en la duplicación del centrosoma, que
es necesaria para la formación correcta del huso y la segregación
de los cromosomas . Nor1nalmente, el centrómero se duplica una
vez por ciclo celular. Sin embargo, en caso de 1nutación o ausen-
cia de p53, el centrómero puede presentar duplicaciones extra, lo
que determina segregación desigual de los cromosomas. D e esta
1nanera, la mutación del gen p53 puede generar mutaciones cro-
n1osómicas que conuibuyen al cáncer. El gen p53 también es un
gen supresor de tumores que impide la división celular cuando
hay daño del DNA. •
23.6 Los virus se asocian con algunos cánceres
Como se mencionó antes en este capítulo, los virus son responsa-
bles de una serie de cánceres en animales, y hay evidencia de que
algunos virus contribuyen por lo menos a algunos cánceres en seres
hutnanos (cuadro 23-6). Por ejemplo, aJrededor del 95% de las
1nujeres con cáncer de cuello uterino están infectadas por el viras
de) papiloma humano (HPV). De modo similar, la infección por
el virus que causa hepatitis B aumenta el riesgo de cáncer hepático
en algunas p ersonas. El virus de Epstein-Barr, responsable de la
1nononucleosis, se ha vinculado
, con varios tipos de cáncer que son
prevalentes en partes de A:frica, incluido el linfoma de Burkitt.
RETROVIRUS Y CÁNCER Muchos de los vin1s que causan cáncer en
animales son retrovirus; con anterioridad , vimos cómo los esn1-
Cuadro 23-6 Algunos cánceres humanos asociados con virus
Virus Cáncer
Virus del papiloma humano (HPV) Cánceres cervical, peniano y vulvar
Virus de hepatitis B Cáncer hepático
Virus linfotrópico de linfocitos T Leucemia de li nfocitos T adu ltos
humanos 1 (HTLV-1)
Virus linfotrópico de linfocitos T Tricoleucemia
humanos 2 (HTLV-2)
Virus de Epstein-Barr Li nfoma de Burkítt, cáncer nasofa-
ríngeo, linfoma de Hodgkin
Herpesvírus humano Sarcoma de Kaposí
Poliomavírus de células de Merkel
Carcinoma de células de Merkel
Nota: algunas de estas asociaciones entre cáncer y virus solo existen en ciertas poblaciones y
áreas geográficas.
dios del retro virus del sarcoma de Rous en los poJlos Ilevaron a
ide ntificar oncogenes en seres humanos. En ocasiones, los retro-
virus provocan cáncer por mutación y reordenamiento de los
genes huésped, que convierten protooncogenes en oncogenes
(fig. 23-14a). Otra manera en que los virus pueden contribuir al
cáncer es rnediante la 1nodificación de la expresión de genes del
huésped (fig. 23-14b). A menudo, los retrovirus contienen promo-
tores fuertes para garantizar la transcripción de su propio materi al
genético por la célula huésp ed. Si el provirus se inserta cerca de
un protooncogén, los promotores virales pueden estimular altos
niveles de expresión del protooncogén, lo que induce prolifera-
ción celular.
En los seres hu1nanos, solo unos pocos retrovirus causan cán-
cer. El HTLV-1 , el p1imer retrovirus descubierto, se asocia con
leucemia de linfocitos T adultos en seres humanos. Otros cánce-
res humanos se asocian con virus DNA, que, al igual que los
re trovirus, se integran en el cromosoma huésped , pero a diferen-
cia de los retrovi.rus no utilizan transcripción inversa. Por ej em-
plo, el HPV es un virus DNA firme mente asociado con cán cer de
cuello uterino.
PAPILOMAVIRUS HUMANO y CÁNCER DE CUELLO UTERINO El virus
del papilo1na humano causa verrugas y otros tipos de tumores
benignos de células epiteliales. Se conocen más de 100 tipos dife-
rentes de HPV, de los cuales alrededor de 30 son de transmisión
sexual y causan condilomas acumi nados. Unos pocos de ellos se
asocian con cáncer de cuello uterino. En los Estados U nidos, el
70% de los casos de cáncer de cuello uterino son causados por
HPV-16 y HPV-18. Estos vi.rus causan cáncer de cuello uterino al
producir proteínas que se unen a RB y p53, dos proteínas que
desempeñan papeles clave en la regulación del ciclo celular, y las
desactivan. Cuando estas proteínas están desactivadas, se estin1ula
la progresión a lo largo del ciclo celular de las células, que se divi-
den sin los controles no1males que impiden la proliferación celular.
Alrededor del 75 % de las mujeres sexualmente activas de los
Estados Unidos están infectadas por HPV, pero solo una pequeña
cantidad de estas mujeres presentará cáncer de cuello uterino. El
riesgo de in fección por HPV puede reducirse li1nitando la canti-
dad de parejas y mediante una vacuna que fue aprobada e n 2006
por la Food and Drug Admini stration. Esta vacuna es muy efi caz
contra cuau·o de los HPV más comunes asociados con cáncer de
cuello ute1ino. Pese a la gran cantidad de mujeres infectadas por
HPV, la incidencia de cáncer de c uello uterino en los Estados
Unidos ha declinado el 75% en los últimos 40 años. La razón
principal de esta declinación es e l uso generalizado de la prueba
de Papanicolau , que detecta estadios tempranos de cáncer de cue-
llo uterino, así como displasia cerv ical, una lesión precancerosa
que puede ser resecada antes de que evolucione a cáncer.
Si bien es raro en los Estados Unidos, el cáncer de cuello uteri-
no es la segunda causa de cáncer en orden de frecue ncia en muje-
res de todo el mundo, con , alta incidenc.i a en muchos países e n
desarroll o, como los de Africa al sur del Sahara, sur de Asia, y
América Central y del Sur. Se estima que 510 000 mujeres de to-
do el mundo presentan cáncer de cuello uterino cada año y que
288 000 mueren por la enfern1edad. La p1incipal razón de la alta
incidencia y tasa de mortalidad en las regiones e n desarrollo es la
falta de acceso a los procedimientos de detección sistemática de
cáncer de c uell o uterino, como la prueba de Papanicolau. En estos
países en desarrollo, la disponibilidad de esta vacuna contra el
cáncer de cuello uterino podría reducir mucho la incidencia de
esta enfermedad.
 Genética del cáncer 679

(a) (b) Un retrovirus infecta]

u na célula .. .
Un retrovirus inserta
su RNA en la célula; el
RNA
_-,,,:;:::;.-¡ RNA viral sufre trans-
viral
cripción Inversa y se

l
:ranscripción
inversa
inserta en el cromosoma
huésped cerca de un
protooncogén.
... y el provirus se
inserta cerca de un
El promotor
viral fuerte
7
protooncogén. estimula la
Cromosoma sobreexpresión
huésped del protooncogén.

Promotor
viral fuerte
Provirus Proto-
Provirus / Protooncogén
oncogén - --,,
Reproducción
vira l
Sobre-
expresión

Cuando el virus se reproduce, mRNA

el protooncogén se incorpora
en el virus.

iRESUMEN DE CONCEPTOS

■ El cáncer es fundamentalmente un trastorno genético que se

En repetidas rondas
de infección y
Rondas repetidas reproducción viral,
de infección y el protooncogén se
reproducción reordena o muta o
._ambas cosas, ...
origi na por n1utaciones son1áticas de 1núltiples genes que
afectan la división y la proliferación celulares. Si se heredan
una o más mutaciones, se requieren menos mutaciones adicio-
nales para que aparezca un cáncer.
■ Una mutación que permite que una célula se divida rápida-
mente le confiere una ventaja de crecimiento; esta célula da
origen a un clon de células que presentan la misn1a mutación.
Dentro de este clon, aparecen otras mutaciones que confieren
ventajas adicional.es, y las células con estas 1nutaciones adi-
cionales se tornan dominantes en el clon. De esta manera,
evoluciona el clon.
■ Los factores ambientales desempeñan un papel importante en
la aparición de numerosos cánceres al aumentar la tasa de
mutaciones somáticas.

j
:rranscripción
inversa .. .lo que produce un
oncogén que vuelve a
■ Los oncogenes son copias mutadas dominantes de genes nor-
males (protooncogenes) que estimulan la división celular.
Normalmente, los genes supresores de tumores inhiben la
insertarse en el
cromosoma huésped. división celular; las mutaciones recesivas de estos genes pue-
Cromosoma
den contribuir al cáncer. En ocasiones, la mutación de un solo
huésped

___ ___
Provirus Oncogén
Figura 23-14. Los retrovirus pueden causar cáncer por a)
mutación y reordenamiento de protooncogenes o b) inser-
ción de promotores fuertes cerca de protooncogenes.
CONCEPTOS
Los virus contribuyen a algunos cánceres de los seres humanos
por mutación y reordenamiento de los genes huésped que des-
pués contribuyen a la proliferación celu lar, o por alteración de la
expresión de los genes huésped.
/
Mutación
_,,
a lelo de un gen supresor de tumores es suficiente para causar
cáncer, un fenómeno conocido co1no haploinsuficiencia.
■ El ciclo celular es controlado por ciclinas y cinasas depen-
dientes de ciclinas. Las mutaciones de genes que controlan el
ciclo celular suelen asociarse con cáncer.
■ Las vías de transducción de señales conducen señales exter-
111as para generar respuestas intracelulares. Estas vías consis-
ten en una serie de proteínas que son activadas y desactivadas
en una cascada de reacciones. Las mutaciones de los compo-
i1.1entes de las vías de transducción de señales alteran el ciclo
celular y pueden contribuir al cáncer.
■ A menudo, los defectos de los genes de reparación del DNA
aumentan la tasa de mutación global de otros genes, lo que
induce defectos de los protooncogenes y los genes supresores
de tu1nores, que pueden contribuir a la progresión del cáncer.
680 CAPITULO 23
■ Las mutaciones de secuencias que regulan la telomerasa posi-
bilitan la división indefinida de las células, lo que contribuye
a la progresión del cáncer.
■ Las mutaciones de los genes que promueven la vasculariza-
ción y la diseminación de los tumores también inciden en la
progresión del tun1or.
■ Numerosas células tumorales muestran una reducción genera-
lizada de la expresión de muchos rniRNA, lo que sugiere que
una reducción del control de la ex presión génica por m_iRNA
puede desempeñar un papel en la progresión de los tu mores.
■ Los cambios epigenéticos de la estructura de la cromatina,
como metilación del DNA y modificación de histonas, a
1nenudo se asocian con cáncer.
■ El cáncer colorrectal ofrece un sistema modelo para compren-
der la progresión del tumor en seres humanos. Las mutaciones
iniciales estimulan la división celular, lo que da origen a un
pequeño pólipo benigno. Mutaciones adicionales per1niten
TÉRMINOS IMPORTANTES
apoptosis (p. 669) haploinsuficiencia (p. 668)
cinasa dependiente de ciclinas metástasis (p. 662)
(CDK) (p. 668) mutación impulsora (p. 674)
evolución clonal (p. 664) mutación pasajera (p. 674)
gen supresor de tumores (p. 666)
l. El retinoblastoma se debe a por lo menos dos defectos gené-
ti cos di stintos, ambos necesarios para que aparezca el cáncer.
En casos esporádicos, deben producirse dos mutaciones suce-
sivas en una sola célula, lo que es improbable y, por lo tanto,
suele afectar un solo ojo. En personas que han heredado una
de las dos mutaciones requeridas, cada célula contiene esta
1nutación, de manera que solo se requiere una única mutación
adi cional para que aparezca el cáncer. Dados los millones de
células de cada ojo, hay una alta probabilidad de que la
segunda mutación se produzca en por lo menos una célula de
cada ojo, lo que produce tumores en ambas ojos y la herencia
de este tipo de retinoblastoma.
2. Los oncogenes tienen un efecto estimulador sobre la prolife-
ración celular. Por lo general, las mutaciones de oncogenes
PROBLEMAS RESUELTOS
Problema
En algunas células cancerosas, un gen específico se ha duplicado muchas veces. ¿Es probable que este gen sea
un oncogén o un gen supresor de tumores? Explique su razonamiento.
que el pólipo aumente de tamaño, invada la capa muscular del
intestino y, con el tiempo, se disemine a otros sitios. Las
mutaciones de determinados genes afectan diferentes etapas
de esta progresión.
■ Algunos cánceres se asocian con mutaciones cromosómicas
específicas, como deJeciones, inversiones y translocaciones
cromosó1nícas. Las deleciones pueden causar cáncer al elimi-
nar o alterar genes que supri1nen tumores; las inversiones y
las translocaciones pueden cortar genes supresores de tumores
o movilizar genes a posiciones adyacentes a secuencias regu-
ladoras diferentes, lo que 1nodifica su expresión.
■ Las mutaciones de algunos genes causan o permiten la segre-
gación incorrecta de los cromosomas, lo que determina aneu-
ploidía que puede contribuir al cáncer.
■ Los virus se asocian con algunos cánceres; contribuyen a la
proliferación celular por 1nutación y reordenarniento de los
genes del hu ésped o por alteración de su expresión.
oncogén (p. 666) tumor maligno (p. 662)
pérdida de la heterocigosis vía de transducción de
(p. 667) señales (p. 671)
protooncogén (p. 667) virus del papiloma
humano (HPV) (p. 678)
so n do1n_inantes, porque un a mutacjón de una sola copia suele
ser suficiente para provocar un efecto estimulador. Los genes
supresores de tumores inhiben la proliferación celular. En
general sus mutaciones son recesivas, porque ambas copias
deben estar mutadas para eliminar toda la inhibición.
3.d
4.a
5.c
6. b
7.d

Estrategia de solución
¿Qué información se requiere en su respuesta al problema?
Si es probable que el gen sea un oncogén o un gen supresor de
tumores y por qué.
¿Qué información se proporciona para resolver el problema?
En las células cancerosas, el gen se ha amplificado muchas
veces.
Para obtener ayuda con este problema, repase:
Oncogenes y genes supresores de tumores en la Sección 23.2.
Sección 23.1
l. ¿Qué tipos de evidencia indican que el cáncer se origina por
cambios genéticos?
2. ¿En qué se diferencia el cáncer de la mayor parte de los otros
tipos de enfermedades genéticas?
3. Resuma la hipótesis de los dos eventos de Knudson sobre
retinoblastoma y describa cómo ayuda a explicar los casos
unilaterales y bilaterales de retinoblastoma.
4. Explique en fonna sucinta cómo surge el cáncer mediante
evolución clona!.
Sección 23.2
5. ¿ Cuál es la diferencia entre un oncogén y un gen supresor
de tumores? Dé algunos ejemplos de protooncogenes y
genes supresores de tumores en células norn1ales.
6. ¿Qué es la haploinsuficiencia? ¿Cómo podría incidir en el
riesgo de cáncer?
7. ¿En qué se diferencian las cíclinas y las CDK? ¿Cómo inte-
ractúan para controlar el ciclo celular?
8. Resuma en forma breve los eventos que controlan la progre-
sión de las células a través del punto de control G 1/S del
ciclo celular.
9. Resuma en forma breve los eventos que controlan la progre-
sión de las células a través del punto de control G2/M del
ciclo celular.
10. ¿Qué es una vía de transducción de señales? ¿Por qué las
mutaciones de los componentes de las vías de transducción
de señales a menudo se asocian con cáncer?
PREGUNTAS Y PROBLEMAS DE APLICACIÓN
Introducción
21. ¿Qué características del pedigrí mostrado en la figura 23-1
sugieren que el cáncer de páncreas en esta familia se hereda
con10 un rasgo autosómico dominante?
Genética del cáncer 681
Pasos de la solución Recuerde: un
oncogén es un ace-
lerador de la divi-
sión celular, mien-
Es probable que el gen sea un oncogén. Los tras que un gen
oncogenes estimulan la proliferación celular y supresor de tumo-
actúan en forma dominante. Por lo tanto, las res es un freno.
copias extra de un oncogén provocarán prolifera-
ción celular y cáncer. Por el contrario, los genes
supresores de tumores suprimen la proliferación celular y
actúan en forma recesjva; una úruca copia de un gen supresor
de tumores es suficiente para impedir la proliferación celular.
Por consiguiente, las copias extra del gen supresor de tumores
, ,
no provocaran cancer.
11. ¿Có.mo se activa y desactiva la proteína Ras?
12. ¿Por qué las mutaciones de los genes que codifican enzimas
de reparación del DNA suelen deternunar una predisposi-
ción al cáncer?
13. ¿Qué papel desempeñan los tel6meros y la telomerasa en la
progresión del cáncer?
Sección 23.3
14. ¿En qué se diferencia un cambio epigenético de una muta-
ción?
15. ¿Cómo se relaciona con el cáncer la metilación del DNA?
Sección 23.4
16. Reseñe algunos de los cambios genéticos comúnmente aso-
ciados con la progresión del cáncer colorrectal.
Sección 23.5
*17. Explique cómo las deleciones, las inversiones y las trans-
locaciones cromosómicas pueden provocar cáncer.
18. Describa brevemente cómo el cromosoma Filadelfia indu-
ce leucemia mieloide crónica.
19. ¿Qué es la inestabilidad genómica? Mencione algunas
maneras en las que puede surgir inestabilidad genómica.
Sección 23.6
*20. ¿Cómo contribuyen los virus al cáncer?
Sección 23.1
22. Si el cáncer es fundamentalmente una enfermedad genéti-
ca, ¿cómo pod1ia causar cáncer un factor ambiental como
el tabaquisn10?
682 CAPITULO 23
*23. Tanto los genes como los factores ambientales contribuyen
al cáncer. El cuadro 23-2 muestra que el cáncer de prósta-
ta es 30 veces más frecuente en caucásicos de Utah que en
chi nos de Shangai. Reseñe brevemente cómo pod1ia deter-
minar si estas diferencias en la incidencia del cáncer de
próstata se deben a diferencias de la composición genética
de ambas poblaciones o a diferencias de sus an1bientes.
*24. Una pareja tiene un hijo con retínoblastoma bilateral. La
madre no tiene cáncer, pero el padre presenta retinoblasto-
ma unilateral y tiene un hermano con retin oblastoma bila-
teral.
a. Si la pareja tiene otro hijo, ¿cuál es la probabilidad de
que el siguiente hijo presente retinoblastoma?
b. Si el siguiente hijo presenta retinoblastoma, ¿cuál es la
probabilidad de que sea bilateral o unilateral?
c. Explique por qué el caso de retinoblastoma del padre
es unilateral, mientras que los casos de su hijo y su her-
mano son bilaterales.
Sección 23.2
*25. Se afirma que el gen palladin, que desempeña un papel en
el cáncer de páncreas (véase la introducción de este capí-
tulo), es un oncogén. ¿ Cuál de sus características sugiere
que es un oncogén en lugar de un gen supresor de tumo-
res?
26. Las mutaciones del gen RB se asocian a menudo con cán-
cer. Explique cómo una mutación que da origen a una pro-
teína RB 110 funcional contribuye al cán cer.
27. Las células de un tumor contienen copias mutadas de un
determinado gen que pro1nueve el crecimiento tumoral. Es
posible aplicar terapia génica para introducir una copia
normal de este gen en las células tumorales. ¿Esperaría
que esta terapia fuera eficaz si el gen mutado fuese un
oncogén? ¿Un gen supresor de tumores? Explique su res-
puesta.
28. ¿Cuál sería el efecto sobre el ciclo celular de un fármaco
que inhibiera cada uno de los siguientes?
PREGUNTAS DE DESAFÍO
Sección 23.2
34. Muchas células cancerosas son inmortales (se dividirán de
manera indefinida) porque tienen mutaciones que permiten
que se exprese la telon1erasa. ¿ Cómo podría utilizarse esta
información para diseñar fármacos antineoplásicos?
35. El síndrome de Bloom es una enfermedad autosómica rece-
siva que muestra haploinsuficiencia. Un estudio reciente
mostró que las personas heterocigóticas para mutaciones en
el locus BLM tienen mayor riesgo de cáncer de colon.
Suponga que usted es un asesor genético. Le derivan a una
a. MPF
b. CDK-ciclina-E
c. CDK-ciclina-D
29. ¿Cuál sería el efecto de un fármaco que inhibiera la degra-
dación de ciclina B ?
Sección 23.3
30. David Seligson y cols. examinaron los niveles de modifica-
/\.:''""' ción de histonas en tumores de próstata y su asociación con
!..~ la evolución clínica (D. B. Seligson y cols. 2005. Nature
435: 1262-1266). Utilizaron anticuerpos para teñir la acetila-
ción en tres sitios diferentes y la metilación en dos sitios
diferentes de las hi stonas. Observaron que el grado de aceti-
lación y metilación de las histonas ayu daba a predecir si eJ
cáncer de próstata recidivaría dentro de los 1O años en
pacientes que habían sido sometidos a resección de un
tumor de próstata. Explique cómo la acetilación y la 1netila-
ción podrían asociarse con recurrencia del tumor en el cán-
cer de próstata. (Pista: véase cap. 17).
31. Algunos cánceres se han tratado con fármacos que desmeti-
lan el DNA. Explique có1no podrían actuar estos fár1nacos.
¿Piensa que es probable que los genes causantes de cáncer
que responden a la desmetilación sean oncogenes o genes
supresores de tumores? Explique su razonamiento.
Sección 23.5
*32. Algunos cánceres se asocian de manera consistente con la
deleción de una determinada parte de un cromosoma. ¿La
región eliminada contiene un oncogén o un gen supresor
de tumores? Explique por qué.
Sección 23.6
33. Suponga que el provirus de la figura 23-14 se inserta justo
en dirección 5' respecto de un gen supresor de tumores.
¿Sería probable que esto causara cáncer? ¿Por qué o por
qué no?
mujer joven cuya madre tiene síndrome de Bloom; eJ padre
de la 1nujer no tiene antecedentes familiares de este síndro-
me. La joven le pregunta si es probable que presente cual-
quier otro problema de salud asociado con sus antecedentes
familiares de síndrome de Bloom. ¿Qué consejo le daría?
36. Imagine que descubre una familia grande en la que el cán-
cer vesical se hereda como un rasgo autosómico dominante.
Reseñe brevemente una serie de estudios que usted podría
realizar para identificar el gen que causa la enfer1nedad en
esta familia.
 24
Genética cuantitativa

Aceite de maíz y genética cuantitativa

En 2012, la población mundial superó los 7000 millo-
nes. Naciones Unidas proyecta que en 2050 aumentará
en otros 2000 1nillones: alimentar a estos nliles de
millones de personas adicionales será un desafío impor-
tante para la agricultura en las siguientes décadas. Las
plantas de cultivo tendrán que aportar la mayoría de las
calorías y los nutrientes requeridos para la futura pobla-
ción mundial. Debido a los suministros cada vez más
limitados de petróleo y las preocupaciones acerca del
calentamiento global, las plantas se están utilizando
cada vez más como fuente de biocombustibles, lo que
impone mayores demandas a la producción de cultivos.
Para ayudar a satisfacer la necesidad de mayor rendi-
miento de los cultivos, los agricultores están empleando
las últimas técnicas genéticas en su búsqueda de plantas
de cultivo más eficientes y de mayor rendimiento. La
investigación destinada a au1nentar el contenido de acei-
te del maíz demuestra el poder de este enfoque. El con-
tenido de aceite del maíz se hereda, pero la herencia es
más compleja que la de las características que hemos
estudiado hasta ahora; no es una característica monogé-
Se han empleado métodos de genética cuantitativa unidos con técnicas molecu-
lares para identificar un gen que determina el contenido de aceite del maíz. (Jim
ruca, como la forma de la se1nilla de los guisantes.
Craigmyle/Corbis). Numerosos genes y :factores ambientales contribuyen al
contenido de aceite del maíz. En características como el
contenido de aceite del maíz, suelen interactuar varios
locus, cuya expresión es afectada por factores ambientales. ¿Puede estudiarse la herencia de
una característica compleja como el conterudo de aceite? ¿Es posible predecir el contenido
de aceite de una planta sobre la base de su cultivo? La respuesta es sí (al menos en parte),
pero estas preguntas no pu,eden encararse con los métodos que utilizrunos para las característi-
cas genéticas simples. En cambio, debemos recu1Tir a procedimientos estadísticos que se han
desarrollado para analizar características complejas. El análisis genético de caractetisticas
complejas, corno el contenido de aceite del maíz, se denomina genética cuantitativa.
En 2008, los genetistas utilizaron una combinación de genética cuantitativa y técnicas mole-
culares para identificar un gen clave que controla el conterudo de aceite del maíz. En prüner
lugar, realizaron cruzamientos entre plantas con alto y bajo contenido de aceite para identifi-
car regiones cro1nosómicas que dese1npeñan un papel importante en determinar la producción
de aceite. Las regiones cromosómicas que contienen genes que influyen sobre un rasgo cuan-
titativo se denominan locus de rasgos cuantitativos (QTL, quantitative trait loci). Mediante
estos cruzamientos, los genetistas localizaron varios QTL que afectaban el contenido de acei-
te; uno de ellos estaba en el cromosorna 6.
El mapeo genético a fina escala limitó aún más el QTL a una pequeña región de 4,2 centi-
morgans del cromosoma 6. Los investigadores secuenciaron el DNA de la región y observaron
que contenía cinco genes, uno de los cuales era DGATl -2, un gen que produce una enzima
que cataliza el paso final de una vía de biosíntesis de triglicéridos. El DNA del gen DGATJ-2
de una cepa productora de alto contenido de aceite contenía una inserción de un codón que
683
684 CAPÍTULO 24

añadía :fenilalanina a la enzima. una inserción que faltaba en una cepa productora de bajo conteni-
do de aceite. Los investigadores confirmaron el efecto del codón de fenilalanina adicional sobre la
producción de aceite al crear maíz transgénico que contenía el codón extra; la producción de aceite
de estas cepas transgénicas fue más alta que la de las cepas tr ansgénicas sin el codón extra.
Interesa destacar que el codón de fenilalanina adicional está presente en parientes silvestres del
n1aíz, lo que sugiere que el codón se perdió durante el proceso de domesticación o de cultivo ulte-
rior de variedades modernas.
Esta investigación sugiere que el contenido de aceite del maíz y otras plantas podría aumentarse
modificando genéticamente sus genes D GATJ-2 para que contengan el codón extra de fenilalanina.
Otros estudios que combinan de manera similar análisis cuantitativos y moleculares han llevado a
identificar genes que aumentan el contenido de vitamina A del arroz y la producción de azúcar en
los ton1ates.

E ste capítulo trata sobre el análisis genético de características

complejas como el contenido de aceite del maíz. Comenza-
1nos por considerar la diferencia entre características cuantitativas
(a) Característica discontinua

Una característica Ólas plantas son altas

discontinua (cualitativa) o enanas.

l
y cualitativas, y por qué la expresión de algunas características
varía continuamente. Veremos cómo las características cuantitati- muestra solo algunos feno-
vas suelen estar influ enciadas por muchos genes, cada uno de los tipos, fáciles de distinguir. Enan as
VI
cuales ejerce un efecto pequeño sobre el fenotipo. A continua- o
::::,
ción, examinaremos procedimientos estadísticos para describir y -o
> Altas
analizar características cuantitativas. Estudiaremos cómo gran -o
e:
parte de la variación fenotípica puede atribuirse a influencias (lJ
genéticas y a1nbientales. Por últi1no, observaremos los efectos de -o
la selección sobre las características cuantitativas. o
'-
(lJ
E
, ::::,
z
24.1 Las características cuantitativas varían
continuamente y muchas son influenciadas
por alelos de múltiples locus Fen ot ip o (altura)

Las características cualitativas o discontinuas tienen solo algunos

fenotipos distintos (fig. 24-la); estas características son los tipos (b) Característica continua
estudiados por Mendel (p. ej., guisantes lisos y rugosos) y han
sido el foco de nuestra atención hasta ahora. Sin e1nbargo, Una característica continua • La planta presenta un
n1uchas características varían en forma continua a lo largo de una (cuantitativa) muestra un amplio rango de alturas.
rango continuo de
escala de medición, con 1nuchos fenot ipos superp uestos (fig. 24-
lb). Se las denomina características continuas y también carac-
fenotipos.
V,
r
terísticas cuantitativas, porque el fenotipo de cualquier individuo o
::::,
debe describirse mediante una medición cuantitativa. Los ejem- -o
>
plos de características cuantitativas son, entre otros, talla, peso y -o
e
presión arterial en seres humanos, velocidad de crecimiento en (l)

ratones, peso de las senullas en las plantas y producción de leche -o

o
.....
en el ganado. (1)

Las características cuantitativas surgen a partir de dos fenóme- E

-::::,
nos. Primero, n1uchas son poligénicas: son influenciadas por ge- z
nes de muchos locus. Si participan 1nuchos locus, hay muchos
genotipos posibles, cada uno de los cuales produce un fenotipo Enan as A ltas
ligeramente distinto. Segundo, las características cuantitativas a Fenotipo (alt ura)
menudo surgen cuando factores ambientales afectan el fenotipo,
porque las diferencias ambientales determinan que un solo geno- Figura 24-1. Las características continuas y discontinuas se diferen-
tipo produzca un rango de fenotipos. La mayo1ia de las caracte- cian en el número de fenotipos exhibidos.
 Genética cuantitativa 685

rísticas que varían en forma continua son tanto poligénicas como Ejemplo hipotético de la altura de una
influenciadas po r factores ambie ntales, y se dice que estas carac- planta determinada por pares de alelos
terísticas son multifactoriales. en cada uno de tres locus

Genotipo de la planta Dosis de hormona Altura (cm)

Relación entre genotipo y fenotipo
o 10
Para algunas características discontinuas, la re lación entre geno-
tipo y fe notipo es simple. Cada genotipo produce un único feno- A+A- a-a- c-c- 1 11
tipo, y la mayoría de los fenotipos son codificados por un único A-A- B+ a- c-c-
genotipo. L a dominancia y la epistasis pueden permitir que dos o A-A- a-a- e-e+
tres genotipos produzcan el mism o fenotipo, pero la relación
sigue siendo simple . Esta relación sin1ple entre genotipo y fenoti- A+A+ a-a- c-c- 2 12
po hi zo posible que M endel descifrara las reglas básicas de la A-A- a+a+ c-c-
here ncia a partir de sus cruzamientos entre plantas de g uisantes; A-A- a-a- c+c+
tambié n nos permite predecir e l resultado de cruzamientos gené- A+A- a+a- c-c-
ticos y asignar genotipos a individuos. A+A- a-a- c+c-
Para las características cuantitativas , la relación entre genotipo A-A- a+a- c+c-
y fenotipo suele ser más compleja. Si la característica es poligé-
nica, existe la p osibilidad de n1uchos geno tipos diferentes, varios A+A+ a+a- c-c- 3 13
de los cuales pueden producir el mismo feno tipo. Por ej emplo, A+A+ a-a- c+c-
considere una planta cuya altura está determinada por tres locus A+A- a+a+ c-c-
(A, B y C), cada uno de los cuales tiene dos alelos. Suponga que A-A- a+a+ c+-c-
un alelo de cada locus (A+, B+ y e+) codifica una hormona vege-
A +A- a-a- c+c+
tal que determina que esta crezca 1 cm por encima de su altura A-A- s+a- c+c+
basal de 1O cm. El otro alelo de cada locus (A- , S- y C-) no codi- A+A- s+a- c+c-
fica una hormona vegetal y, por consig uiente, no contribuye a la
altura adiciona l.. Si consideramos solo los dos alelos de un único A+A+ a+a+ c-c- 4 14
locus, hay 3 genotipos posibles (A+A+, A+A- y A-A- ) . Si se ton1ru1
A+A+ a•a- c+c-
en cuenta los tres locus, hay un total de 33 = 27 genotipos multi- A+A- a+a+c+c-
locus posibles (p. ej., genotipos A+A- B+B+ c+c+, A+A- B+W A-A- a+s+ c+c+
c+c+, etc.). Si bien hay 27 genotipos, estos producen solo siete A+A+ a-a- c+c+
fenotipos (1O c1n, 11 c m, 12 c m, 13 cm , 14 c m , 15 cm y 16 c1n de A+A- a+a- c+c+
altura). A lg unos de los genotipos producen e l mismo fenotipo
(cuadro 24-1); por ejemplo, los genotipos A+A- S-S-C-C-, A-A- A+A+ a+a+ c+c- 5 15
B+s- C-C- y A-A- B-s- c+C-tienen todos un gen que codifica una A+A- a+a+ c+c+
hormona vegetal. Cada uno de estos genotipos produce una dosis A+A+ e+a- c+c+
de la hormona y da origen a una planta que tiene 11 cm de altu-
ra. Aun en este eje1nplo simple de solo tres locus, la re lación entre
6 16
geno tipo y fenotipo es bastante compleja. Cuantos más locus
codifican una característica, mayor es la complejidad. A medida Nota: cada alelo + contribuye con 1 cm a la altura por encima de un nivel basal de 1O cm.
que aumenta e l número de locus que codifican una característi-
ca, también lo hace el número de posibles fenotipos, y las di-
ferencias entre cada fenotipo se vuelven 111ás difíciles de dis-
tinguir. V,
o:::,
Asimis.m o, la influenc ia del ambiente sobre una caracte1istica "O
puede complicar la relación e ntre genotipo y fenotipo. D ebido a º>
"O
efectos ambientales, el mismo genotipo puede producir un rango e
de fenotipos potenciales. Los rangos fenotípicos de diferentes <l)
"O
genotipos pueden superponerse, lo que dificulta saber si los indi- ...o
viduos difieren en su fenotipo debido a diferencias genéticas o <l)
E
ambi entales (fig. 24-2). , :::,

En resumen , la relación simple entre genotipo y feno tipo que

z
existe en muchas características cualitativas (discontinuas) está Enanos Í\_ Altos
ausente en el caso de las características cuantitativas, y es impo- Es imposible saber si un individuo con este
sible asignar un genotipo a un individuo solo en función del feno- fenotipo t iene un genotipo M o Aa.
tipo. Los métodos empleados pru·a analizru· características c ualita-
tivas (examinru· las proporciones fenotípi cas de la progenie de un Figura 24-2. Para una característica cuantitativa, cada genotipo
cruzamie nto genético) no darán resultado en las características puede producir un rango de fenotipos posibles. En este ejemplo
cuantitativas. Nuestro objetivo sigue sie ndo e l mismo: deseamos hipotético, se superponen los fenotipos producidos por los genotipos
re alizar predicciones acerca de los fenotipos de la descendencia M, Aa yaa.
686 CAPÍTULO 24
producida por un cruzamiento genético. También nos gustaría
saber cuánto de la variación de un a caracte1i stica se debe a dife-
rencias genéticas y cuánto a diferencias ambientales. Para res-
ponder estas preguntas, debe1nos recurrir a métodos estadísticos
que nos permitan predecir la herencia de fenotipos en ausencia
de infonnación acerca de Jos genotipos subyacentes. ....•-===-'
RESOLVER EL PROBLEMA 16
Tipos de características
cuantitativas
Antes de examinar con n1ás detalle l.as características poligénicas
y los métodos estadísticos correspondientes, debemos definir con
mayor claridad a qué nos referimos cuando hablamos de una
característica cuantitativa. Hasta ahora, hemos considerado solo
las características cuantitativas que varían de manera continua en
una población. En teoría, una característica continua puede asu-
111ir cualquier valor entre dos extremos; el número de fenotipos
solo se ve limitado por nuestra capacidad de medir con precisión
el fenotipo. La talla es una característica continua porque, dentro
de ciertos límites, las personas pueden tener cualquier talla. Si
bien el número de fenotipos posibles con una característica con-
tinua es infinito, a menudo agrupamos fenotipos similares por
comodidad; podemos decir que la talla de dos personas es de
1,61 m, pero una medición más cuidadosa puede mostrar que una
es ligeramente más alta que la otra.
Algunas características no son continuas, pero aun así se las
considera cuantitativas porque son determinadas por múltiples
factores genéticos y ambientales. Por ejemplo, las características
merísticas se miden en números enteros. Un ejemplo es el tama-
ño de la camada: un ratón hembra puede tener 4, 5 o 6 crías, pero
no 4,13 crías. Una característica merística tiene una cantidad
limitada de fenotipos distintos, pero su determinación de base
puede ser, de todos modos, cuantitativa. Por lo tanto, estas carac-
terísticas deben analizarse con las mis1nas técnicas utilizadas para
estudiar las características cuantitativas continuas.
Otro tipo de característica cuantitativa es Ja característica
umbral, que simplemente está presente o ausente. Aunque las
características umbral muestran solo dos fenotipos, se las consi-
dera cuantitativas porque ellas también están determinadas por
1núltiples factores genéticos y ambientales. La expresión de la
característica depende de una susceptibilidad de base (denomina-
da en general propensión o riesgo) que varía de manera continua.
Cuando la susceptibilidad supera el valor umbral, se expresa un
rasgo específico (fig. 24-3). A menudo, las enfermedades son
características umbral debido a que muchos factores, tanto gené-
ticos como ambientales, contribuyen a la susceptibilidad a la
enfermedad. En presencia de suficientes factores de susceptibili-
dad, sobreviene enfermedad; de lo contrario, está ausente. Si bien
en este capítulo nos concentran1os en la genética de las caracte-
rísticas continuas, los mismos principios son aplicables a muchas
características merísticas y umbral.
Solo porque una característica pueda medirse en una escala
continua no significa que presente variación cuantitativa. Una de
las características estudiadas por Mendel fue la altura de la plan-
ta de guisantes, que puede describirse midiendo la longitud del
tallo de la planta. Sin embargo, las plantas particulares de Mendel
1nostraban solo dos fenotipos distintos (algunas eran altas, y las
Umbral
CI) VI
"O o
o ::i
,_ "O
CI) ·-
E·->
•::i "O
z ·-e
Sanos
Susceptibilidad a la enfermedad
Figura 24-3. Las características umbral muestran solo dos fenotipos
posibles (el rasgo está presente o ausente) pero son cuantitativas,
porque la susceptibilidad subyacente a la característica varía en
forma continua. Cuando la susceptibilidad supera el valor umbral, se
expresa la característica.
otras, bajas), y estas diferencias eran determinadas por alelos de
un solo locus. Por consiguiente, Jas diferencias estudiadas por
Mendel eran de carácter discontinuo.
CONCEPTOS
Las características cuyos fenotipos varían de manera continua se
denominan características cuantitativas. Para la mayoría de ellas, la
relación entre genotipo y fenotipo es compleja. Algunas característi-
cas cuyos fenotipos no varían de manera continua también se consi-
deran cuantitativas, porque son influenciadas por múltiples genes y
factores ambientales.
Herencia poligénica
Tras el redescubrimiento del trabajo de Mendel en 1900, pronto
surgieron preguntas acerca de la herencia de caracte1isticas conti-
nuas. Estas características ya habían sido el tema de estudio de un
grupo de biólogos y estadígrafos, dirigidos por Francis Galton,
que utilizaron procedin1ientos estadísticos para exa1ninar la
herencia de características cuanti tativas, como la talla y la inteli-
gencia en seres humanos. Los resultados de estos estudios mos-
traron que las características cuantitativas eran, por lo menos en
parte, hereditarias, aunque todavía no se conocía el mecanismo de
herencia. Algunos biometristas argumentaron que la herencia
de las características cuantitativas no podía explicarse por los
principios de Mendel, mientras que otros consideraban que su
aplicación a los numerosos genes (poligenes) podía explicar de
manera adecuada la herencia de características cuantitativas.
Este conflicto co1nenzó a resolverse con el trabajo de Wilhelm
Johannsen, que mostró que la variación continua del peso de las
alubias era influenciada por factores tanto genéticos como am-
bientales. George Udny Yule, un 1natemático, postuló en 1906 que
la acción conjunta de varios genes podía producir características
continuas. Esta hipótesis fue confirmada más adelante por Her-
man Nilsson-Ehle, que trabajó con trigo y tabaco, y por Edward
East, que lo hizo con n1aíz. Por últüno, la discusión terminó cuan-
do Ronald Fisher de1nostró que la herencia de características
cuantitativas podía ser explicada, de hecho, por los efectos acu-
mulados de varios genes, cada uno de los cuales cumplía con las
reglas de Mendel.
 Genética cuantitativa 687

Color del grano de trigo
Para ilustrar la manera en que múltiples genes que actúan sobre
una característica pueden producir un rango continuo de feno-
tipos, examinemos una de las primeras demostraciones de he-
rencia poligénica. Nilsson-Ehle estudió el color del grano de
trigo y observó que la intensidad de la pigtnentación roja
dependía de tres locus no ligados, cada uno de los cuales tenía
dos alelos.
CRUZAMIENTO DE NILSSON-EHLE Nilsson-Ehle obtuvo varias varie-
dades homocigóticas de trigo que diferían en el color. Al igual
que Mendel, realizó cruzamientos entre estas variedades homoci-
góticas y estudió las proporciones de fenotipos de la progenie. En
un experimento, cruzó una variedad de trigo de granos blancos
con otra de granos púrpura (rojo muy oscuro) y obtuvo los
siguientes resultados:
p Plantas con granos Plantas con granos
de color blanco X de color púrpura
Advierta que los fenotipos púrpura y blanco son codificados por
un solo genotipo, pero los otros fenotipos pueden resultar de
varios genotipos diferentes.
A partir de estos resultados, observamos que hay cinco feno-
tipos posibles cuando alelos de dos locus influyen en el fenoti-
po y los efectos de los genes son aditivos. Cuando alelos de n1ás
de dos locus influyen en eJ fenotipo, hay 1nás fenotipos posibles,
y el color parecería variar de manera continua entre el color
blanco y el púrpura. Si factores ambientales hubieran influido
sobre la característica, los individuos del mismo genotipo ha-
brían variado algo de color, lo que hubiese dificultado aún más
la distinción entre distintas clases fenotípicas. Por fortuna, el
a1nbiente tuvo escasa participación en la detenninación del
color del grano en los cruzamientos de Nilsson-Ehle, y solo
unos pocos locus codificaban el color; en consecuencia,
Nilsson-Ehle pudo distinguir entre las diferentes clases fenotípi-
cas. Esta posibilidad le permitió detectar el carácter 1nendeliano
de la característica.
Vea1nos ahora cómo explican los principios de Mendel la pro-
porción obtenida por Nilsson-Ehle en su progenie F2 . Recuerde
que Nilsson-Ehle cruzó Ja variedad homocigótica púrpura (A+A+

t
Plantas con gran.os de color rojo
B+B+) con la variedad homocigótica blanca (A-A- B-B-), lo que
produjo progenie F 1 heterocigótica en ambos locus (A+A- B+B-).
Este es un cn1zamiento dihlbrido, como los que estudiamos en el
t
1/16 plantas con granos de color púrpura
capítulo 3, excepto que ambos locus codifican el mismo rasgo.
Todas las plantas de F 1 poseían dos alelos productores de pig1nen-
4 to que permitían dos dosis de color para generar granos rojos. Los
/16 plantas con granos de color rojo oscuro
tipos y las proporciones de progenie esperados en F 2 pueden esti-
6/ 16 plantas con granos de color rojo marse aplicando los principios de segregación y segregación inde-
4
/t6 plantas con granos de color rojo claro pendiente de Mendel.
1/16 plantas con granos de color blanco Examinemos primero los efectos de cada locus por separado.
En el primer locus, se cruzan dos heterocigotos de F 1 (A+A- x
A+A- ). Como aprendimos en el capítulo 3, cuando se cruzan
dos heterocigotos, se espera que las proporciones de la proge-
INTERPRETACIÓN DEL CRUZAMIENTO Nilsson-Ehle interpretó esta nie sean 1/ 4 A+A+, ½ A+A- y 1/ 4 A-A- . En el segundo locus, tam-
proporción fenotípica como el resultado de la segregación de bién se cruzan dos heterocigotos y, también en este caso, se
alelos de dos locus (aunque halló alelos de tres locus que afec- esperan las siguientes proporciones de progenie: 1/ 4 B+B+, 1/ 2
tan el color del grano, las dos variedades usadas en este cruza- s+s- y ¼ -s-.s-.
miento diferían solo en dos de los locus). Postuló que había dos Para calcular la probabilidad de combinaciones de los genes de
alelos en cada locus: uno que producía el pigmento rojo y otro los dos locus, debemos aplicar la regla de la multiplicación de la
que no producía ningún pigmento. Designare1nos A+ y B+ a los probabilidad (véase capítulo 3), cuyo uso asume el p1incipio de
alelos que codificaban pigmento, y A- y B- a los que no lo codi- Mendel de la segregación independiente. La proporción esperada
ficaban. Nilsson-Ehle reconoció que los efectos de los genes de progenie F2 con genotipo A+A+ B+B+ es el producto de la pro-
eran aditivos. Cada gen parecía contribuir por ig ual al color; por babilidad de obtener el genotipo A+A+ ( 1/ 4) y la probabilidad de
consiguiente, el fenotipo global podía determinarse sumando obtener el genotipo B+B+ ( 1/4), o 1/4 x 1/4 = 1/16 (fig. 24-4). Luego,
los efectos de todos los genes, co1no se muestra en el siguiente es posible obtener las probabilidades de cada uno de los fenotipos
cuadro: sumando las probabilidades de todos los genotipos que producen
ese fenotipo. Por eje1nplo, el fenotipo rojo es producido por tres
genotipos:
Genotipo Dosis de pigmento Fenotipo
Genotipo Fenotipo Probabilidad
A+A+ B+B+ 4 Púrpura 1
A+A+ B-B- Rojo /16
A+A+ B+JJ-} Rojo oscuro
A+A- s+s+ 3 A-A- s +s+ Rojo 1
fi6
A+A+ S-S-}
A-A- s+s+ 2 Rojo
A+A- B+JJ- Rojo l/4

A+A- B+B- Por lo tanto, la probabilidad global de obtener granos rojos en la

A+A- B-B-}
1 Rojo claro progenie F2 es 1/16 + 1/16 + ¼ = 6/16- La figura 24-4 muestra que
A-A- B+B- la proporción fenotípica esperada en la generación F2 es 1/ 16 púr-
A-A- B-B- o Blanco pura, 4/16 rojo oscuro, 6/16 rojo, 4/ 16 rojo claro y 1/16 blanco. Esta
 Pregunta: ¿cómo se hereda un rasgo continuo, como el color
de los granos en el trigo?

Métodos Cruce trigo de granos blancos con trigo de granos proporción fenotípica es precisamente la que Nilsson-Ehle obser-
púrpura. Entrecruce la generación F1 para
vó en su progenie F2 , lo que demostró que la herencia de una
producir la g eneración F2 .
característica con variación continua, como el color del grano,
Generación P cumple, de hecho, con los p1incipios básicos de Mendel.
A+A+B+B+ X A_A_B_B_
~/ ,,/
CONCLUSIONES E IMPLICACIONES Los cruzamientos de Nilsson-
- -~- Blanco Ehle demostraron que la diferencia entre la herencia de genes que
influyen en las características cuantitativas y la herencia de genes
que influyen en las características discontinuas reside en el núme-
Resultados ro de locus que determinan esa característica. Cuando múltiples
locus afectan una característica, hay más genotipos posibles, de
Descomponga en cruzam ientos simples
manera que la relación entre genotipo y fenotipo es 111eoos evi-

A+A- X A+A- ¡ B+B- X B+B-

dente. A 111edida que au1nenta el nún1ero de locus que afectan un a
caracterfstica, aumenta el número de clases fenotípicas de la
; ;
• t
• t generación F2 (fig. 24-5).
Varias condiciones de los cn1zamientos de Nilsson-Ehle simpli-
ficaron mucho la herencia poligénica del color del grano y posi-
Combine los resultados
bilitaron que reconociera el carácter mendeliano de la caracterís-
tica. Prin1ero, los genes que afectaban el color se segregaban solo
Generación F2 Número de genes
de pigmentos , Fenotipo
en dos o tres locus. Si los genes se hubi eran segregado en n1uchos
locus, le habría resultado mucho más difícil distinguir las clases
J1+~ 1/4 X¼ =1/16
1¡4 4 fenotípicas. Segundo, los genes que afectaban el color del gr ano
A+A+lJ+lJ+
tenían efectos estrictamente aditivos, lo que simplificab a la re-
lfi J1+ B'"~ ¼ X 1/i :2/16 3
A+A+_B+B'" t:ffl!ro lación entre genotipo y fenotipo. Tercero, el a1nbiente casi no
1/4 X ¼ desempeñaba ningún papel en el fenotipo; de no haber sido así,
1/ 4 B'" B'"_. =1'16 2 íi&Jl@jo
A+A+»- a- habría sido difíc il distingui r las cinco clases fenotípicas. Po r
'
...,..___ B . último, los locus que estudió Nilsson-Ehl e no estaban ligados,
J1+ ~ ~~l f~/º
1/2 X 1/4 =2'16
1/
4 3 ..-" curo
de manera que los genes se segregaban en forma independiente .
A+A- lJ+lJ+
Nilsson-Ehle fue afortunado, porque en muchas características
1/i J1+ B'"_. 1/2 X 1'2 =41,6 ~

2 ~o poligénicas no están presentes estas condiciones simplificado-

A+A- lJ+lr
flli.!ibt ras, en cuyo caso la herencia mendeliana no es tan obvia.
1/4 1, 1,_. 1/7Xl/4 =2/16 1
A+A- /J a- 8láTo ►

1/,
4
J1+ ~ 1/4 X 1/4 =1/16 2
A- A- J1+ J1+
1/4 A- A- + .1/2 J1+ a-_. x~ ~2 Jr.=¡p
1 1
Determinación del número de genes
para una característica poligénica
114 J, 1,_. l/4 x l/4 =1h6 O _.. B:lanco
A- A- a--a- Es pos ible utilizar la proporción de individuos F 2 que se parecen a

Combine los fe~ot ipos comunes _J uno de los progenitores ori ginales para estimar el número de genes
que afectan un rasgo poligénico. Cuando se cruzan dos individuos
homocigóticos para diferentes alelos de un solo locus (A 1A 1 x
Proporción de F2 A 2A 2) y se entrecruza la generación F 1 resultante (A 1A2 x A 1A 2) , un
Número de genes
Frecuencia de pigmentos Fenotipo
cuarto de la generación F2 será homocigótica como cada uno de
los progenitores originales. Si los progenitores originales son
4 ___.... ' .._ ura
__
~ :,..,. homocigóticos para diferentes alelos de dos locus, con1 0 los de los
3
-
.. .... • .,..ra"""··j'dr imjaro cruzamientos de Nilsson-Ehle, 1/ 4 x 1/ 4 = 1/ 15 de la generación F 2
se parecerá a uno de los progenitores homocigóticos originales.
2
Por lo general, la proporción de individuos de la progenie F 2 que
1 se parecerá a cada uno de los progenitores homocigóticos orinales
será (¼)'1, donde n es igual al número de locus con un par de ale-
o - - • Btanco 1os que se segregan e influyen en la car acterísti ca. Esta ecuación
nos proporciona un posible medio para determinar el número de
Conclusión: en el trigo, el color del grano se hereda de acuerdo locus que influyen en una característica cuantitativa.
con los principios de Mendel que actúan sobre alelos de dos locus. Para ilustrar el uso de esta ecuación, suponga que cruzamos dos
variedades homocigóticas diferentes de plantas de guisantes que
Figura 24-4. Nilsson-Ehle demostró que el color del grano de trigo se difieren entre sí en 16 cm de altura, entrecruza1n os la generación
hereda de acuerdo con los principios mendelianos. La proporción de F 1 y hallamos que alrededor de 1/ 2s6 de los individuos F2 son simi-
f enotipos en la generación F2 puede determinarse descomponiendo el cru- lares a un a de las varied ades parentales ho mocigóticas originales.
zamiento dihíbrido en dos cruzamientos simples de un único locus y combi- Este resultado sugeriría que cuatro locus con pares de alelos que
nando los resultados mediante la regla de la multiplicación. se segregan ( 1/ 2s6 = [¼]4) serían responsables de la diferencia de
688
 Genética cuantitativa 689

Un locus, Aa X Aa CONCEPTOS
Los mismos principios determinan la herencia de las características
cuantitativas y discontinuas, pero intervienen más genes en la deter-
minación de las características cuantitativas.

✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 1

Dos locus, Aa Bb X Aa Bb Explique en forma sucinta cómo puede determinarse el número de

A medida que
Q)
genes que influyen en un rasgo poligénico.
e aumenta el número
Q)
en de locus que afect an
...oc. L:.1 rasgo, . .. _ _ ___,
cu
Q) sección, se explicarán los conceptos básicos de las estadísticas
"'O
o que se utilizan para analizar características cuantitativas.
>
+-'
cu Cinco locus,
~ Aa Bb Ce Dd Ee X Aa Bb Ce Dd Ee Distribuciones
...o
Q) El conocimiento de la base genética de cualquier característica
E comienza con una descripción del nún1ero y las clases de fenoti-
-::J
z pos presentes en un grupo de individuos. La variación fenotípica
de un grupo puede representarse de manera conveniente median-

-
Muchos locus
... aumenta el
te una distribución de frecuencias, que es un gráfico de las fre-
cuencias (nún1eros o proporciones) de los diferentes fenotipos
(fig. 24-6). En una distJ.ibución de frecuencia típica, las clases
fenotípicas se grafican en el eje horizontal (x), y los números (o
número de clases
proporciones) de individuos de cada clase se grafican en el eje
fenotípicas.
vertical (y). Una distribución de frecuencia es un método conciso
para resumir todos los fenotipos de una característica cuantitativa.
La conexión de los puntos de una distribución de frecuencia
con una línea crea una curva que es característica de la ctistribu-
ción. Muchas características cuantitativas muestran una curva
Clases fenotípicas
simétrica (en forma de campana) denominada distribución nor-
mal (fig. 24-7a). Las distribuciones normales surgen cuando una
Figura 24-5. Resultados del cruzamiento de individuos het erocigóti-
cos para distintos números de locus que afectan una característica.
gran cantidad de factores independientes contribuyen a una medi-
ción, como suele ser el caso de las caracte1isticas cuantitativas. En

altura entre las dos variedades. Dado que las dos cepas homoci-
góticas difieren en 16 cm de altura y existen cuatro locus con dos
alelos cada uno (ocho alelos en total) , cada uno de los alelos con-
tribuye con 16 cm/8 = 2 cm a la altura. Vl
o:::,
Este 1nétodo para determinar el nún1ero de Jocus que afectan las
"O
diferencias fenotípicas requiere la utilización de cepas homocigó- >
ticas, que pueden ser difíciles de obtener en algunos organismos. "O
e:
Asimismo, presume que todos los genes que influyen sobre la (]J
característica tienen los mismos efectos, que sus efectos son adi- "O
tivos y que los locus no están ligados. Para 1nuchas características o
'-
(]J
poligénicas, estas suposiciones no son válidas, de manera que E
, :::,
este n1étodo para detenninar el nún1ero de genes que afectan una z
característica tiene limitada aplicación.
PROBLEMA 19
•
__. ,_
24.2 Se requieren métodos estadísticos Clases fenotípicas
para analizar las características cuantitativas
Figura 24-6. Una distribución de frecuencia es un gráfico que mues-
Dado que las características cuantitativas se describen mediante tra el número o la proporción de los diferentes fenotipos. Los valores
una mectición y son influenciadas por múltiples factores, su he- fenotípicos se grafícan en el eje horizontal, y las cantidades (o proporcio-
rencia debe analizarse desde un punto de vista estadístico. En esa nes) de individuos de cada clase se grafican en el eje vertica l.
690 CAPÍTULO 24

(a) Porcentaje de sacarosa de la remolacha (b) Longitud del zapallo (c) Longitud de las pinzas de la tijereta
ÓEste tipo de ~ distribución de la Duna distribuc-ió-n"""
distribución longitud del fruto con dos picos
simétrica (en entre la progenie F2 es bimodal.
forma de está sesgada a la
campana) se derecha.
denomina 30
distribución
normal.
ro
u
e:
~ 20 20 20
u
....
(1/
u..

10 10 10

12 13 14 15 16 17 18 19% 4 6 8 10 12 14 16 18 20 cm 3 4 5 6 7 8 9 mm

Figura 24-7. Las distribuciones de los fenotipos pueden asumir varias formas diferentes.

la figura 24-7b y e, se ilustran otros dos tipos de distribuciones ✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 2

con1unes (sesgada y bimodal).
Una genetista está interesada en saber si el asma es causada por una
Muestras y poblaciones mutación del gen 05112. La genetista obtiene DNA de 120 personas
con asma y 100 personas sanas, y secuencia el DNA. Observa que 3 5
Con frecuencia, los biólogos deben describir la distribución de los
de las personas con asma y ninguna de las personas sanas tienen una
fenotipos de un grupo de individuos. Podríamos querer describir mutación del gen 05112. ¿Cuál es la población en este estudio?
la talla de los estudiantes de la Texas University (UT), pero esta
universidad tienen 1nás de 40 000 estudiantes y no resulta prácti- a. Las 120 personas con asma.
co medir a cada uno de ellos. Los científicos se enfrentan cons- b. Las 100 personas sanas.
tante1nente con este problema: el grupo de interés, lla1nado po- c. Las 35 personas con una mutación del gen.
blación, es demasiado grand e para realizar un censo completo.
d. Todas las personas con asma.
Una solución consiste en medir a un grupo más pequeño de indi-
viduos, denominado muestra, y utilizar las mediciones efectua-
das en ella para describir la población.
Para delinear con exactitud una población, una buena muestra Media
debe tener varias características. En primer lugar, debe ser repre-
sentativa de toda la población: por ejemplo, si nuestra muestra La media, denominada también promedio, aporta información
estuviera formada solo por los miembros del equipo de balonces- acerca del centro de la distribución. Si medimos la talla de varo-
to de la UT, es probable que se sobrestimara la verdadera tall a de nes de 1O años edad y de 18 años de edad, y graficamos una dis-
los estudiantes. Una manera de garantizar que una muestra es tribución de frecuencia para cada grupo, hallaríam os que ambas
representativa de la población es seleccionar al azar a sus 111ie111- distribuciones son nor111ales , pero Jas dos distribuciones estarían
bros. En segundo lugar, la n1uestra debe ser suficienten1ente gran- centradas en diferentes tallas, y esta diferencja se vería reflejada
de para que las diferencias aleatorias entre los individuos que la en sus disti ntas n1edias (fig. 24-8).
componen y la población global no distorsionen la estimación de Suponga que tenemos cinco mediciones de talla en centímetros:
las mediciones pobJacionales. Si medimos solo a tres estudiantes 160, 161, 167, 164 y 165. Si representamos un grupo de medicio-
de la UT y solo por azar los tres fueran bajos, subestimaríamos la nes como x 1, x2 , x3 , etc., la media ( x) se calcula sumando las me-
verdadera talla de la población estudiantil. Las estadísticas pue- diciones individuales y dividiéndola por el número total de medi-
den aportar información acerca de cuán ta confian za se puede ciones en la m uestra (n):
tener en las estimaciones basadas en 1nuestras aleatorias.
- x 1 + x2 + x3 + ... + X11
X - (24.1)
n
CONCEPTOS En nuestro ejemplo, x 1 = 160, x2 = 161, x 3 = 167, etc. L a inedia
de talla ( x) es igual a:
En estadística, la población es el grupo de interés; una muestra es un
subgrupo de la población. La muestra debe ser representativa de la
-X 160 + 161 + 167 + 164 + 165 817
población y suficientemente grande para minimizar diferencias alea-
torias entre la población y la muestra.
-------------
5
-
5
= 163,4
 Genética cuantitativa 691

Figura 24-8. La media propor-

x = 1~5 cm x= 175 cm
50 ciona información acerca del
centro de una distribución. Las
distribuciones de talla de varones
de 1O años y de 18 años de edad
son normales, pero t ienen diferen-
tes localizaciones a lo largo de un
continuo de talla, lo que determi-
na que las medias sean dist intas.
Varones de 10 años Varones de 18 años
de édad de edad
120 130 140 150 160 170 180 190 200
Talla (cm)

Una manera más breve de representar esta fórmula es La varianza (s2) se define como el promedio de las desviacio-
nes de la inedia elevadas al cuadrado:
:Ex.1
X = (24.2)
n s2 (24.4)
o
1
X =-Lx (24.3) Para calcular la varianza, 1) resta1nos la media de cada 1nedición
n 1
y elevamos al cuadrado el valor obtenido, 2) sumamos todos los
cuadrados de las desviaciones y 3) dividin10s esa suma por el
donde el símbolo :E significa "l.a sumato1ia de" y xi representa los número de mediciones originales menos 1.
valores individuales de x . Otro parámetro estadístico estrechamente relacionado con la
varianza es la desviación estándar (s), que se define como la raíz
Varianza y desviación estándar cuadrada de la varianza:

La varianza es un parámetro estadístico que aporta inforn1ación s=Y (24.5)

clave acerca de una distribución e indica la variabilidad de un
grupo de mediciones, o sea, el grado de dispersión de la distiibu-
ción. Las distribuciones pueden tener la misma media pero dife-
rentes varianzas (fig. 24-9). Cuanto mayor es la varianza, mayor
es la dispersión de las mediciones de una distribución alrededor
de su inedia.
Media (x)
Mientras que la vaiianza se expresa en unidades cuadráticas, la
desviación estándar está en las mismas unidades que las medicio-
nes originales; por eso se prefiere la desviación estándar para des-
cribir la variabilidad de una medición.
U na distribución normal es sin1étrica, de manera que la n1edia
y la desviación estándar son sufi cientes para describir su forma.
La media más o menos una desviación estándar (x + s) incluye

99%
s2 = 0,25
95%
Cuanto mayor es
I<
66%
co la varianza, más
u extendida es la
e co
(1)
::::, distribución u
u alrededor de la e
,_
(1) (1)
:::,
LL media. u
.
•
,_
(1)
LL

5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
Longitud -3s -2s - 1s X 1s 2s 3s
Fenotipo
Figura 24-9. La varianza proporciona información acerca de la varia-
bilidad de un grupo de fenotipos. Aquí se muestran tres distribuciones Figura 24-10. Proporciones de una distribución normal ocupadas por
con la misma media pero diferentes varianzas. más o menos una, dos y tres desviaciones estándares de la media.
692 CAPÍTULO 24

alrededor del 66% de las mediciones en una distribución normal;
la media más o menos dos desviaciones estándares (x + 2s) inclu-
ye alrededor del 95 % de las mediciones, y la media más o 1nenos
tres desviaciones estándares (x + 3s) incluye aproximadamente el
99% de las mediciones (fig. 24-10). Por lo tanto, solo el 1 % de
una población con distribución nonnal se encuentra fuera del
rango de x + 3s. IJINTENTE RESOLVER EL PROBLEMA 22
CONCEPTOS
La media y la va rianza describen una distribución de mediciones: la
media aporta información acerca de la ubicación del centro de la dis-
tribución, y la varianza aporta información acerca de su variabilidad.
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 3
1: (x¡ -x) (y1-y)
covxy (24.6)
n- 1
La covarianza se calcula de la siguiente manera: 1) se toma un
valor x para un individuo y se lo resta de la inedia de x (x ); 2) se
torna un valor y para el tnismo individuo y se lo resta de la media
de y (y); 3) se multiplican los resultados de estas dos sustraccio-
nes; 4) se suman los resultados para todos los pares xy; y 5) se di-
vide esta suma por n - 1 (donde n es igual al número de pares .xy).
El coeficiente de correlación (r) se obtiene dividiendo la cova-
rianza de x e y por el producto de la desviación estándar de x e y:
covxy
r=--- (24.7)

Las mediciones de una distribución con una ___ más alta estarán
más dispersas.
a. media c. desviación estándar
b. varianza d. varianza y desviación estándar
Correlación
La media y la varianza pueden utilizarse para describir una carac-
terística individual, pero los genetistas suelen estar interesados en
más de una característica. A menudo, varían juntas dos o más
características. Por ejemplo, tanto el número como el peso de los
huevos producidos por las gallinas son importantes para la indus-
tria avícola. Estas dos características no son independientes entre
sí. Hay una relación inversa entre eJ número de huevos y su peso.
Esta clase de re lación entre dos características se denomina
correlación. Cuando dos características están correlacionadas, es
probable que un cambio de una de ellas se asocie con un cambio
de la otra.
Las correlaciones entre las características se 1niden mediante un
coeficiente de correlación (designado r), que mide la fuerza de
la asociación. Considere dos características hu1nanas co1no la
talla (x) y la longitud del brazo (y). Para determinar cómo se
correlacionan estas características, obtenemos primero la cova-
rianza (cov) de x e y:
En teoría, un coeficiente de correlación varía de - 1 a+ 1. Un valor
positivo indica que hay una asociación directa entre las variables
(fig. 24-lla): a medida que aumenta una variable, la otra variable
también tiende a aumentar. Existe una correlación positiva entre
la talla y el peso en los seres humanos: la gente alta tiende a pesar
más. Un coeficiente de correlación negativo indica que hay una
relación inversa entre las dos variables (fig. 24-llb): a medida
que aumenta una variable, la otra tiende a distninuir (co1no en el
caso del número de huevos y su peso en las gallinas).
El valor absoluto del coeficiente de co1Telación (la magnitud
del coeficiente ignorando su signo) aporta información acerca de
la fuerza de la asociación entre las variables. Un coeficiente de - 1
o + l indica una correlación perfecta entre las variables, lo que
significa que un cambio de x siempre se acompaña de un cambio
proporcional de y. Los coeficientes de correlación cercanos a -1
o cercanos a + 1 indican una asociación fuerte entre las variables:
un cambio de x casi sie mpre se asocia con un aumento proporcio-
nal de y, como se observa en la figura 24-llc. Por el contrario,
un coeficiente de con·elación cercano a O indica una correlación
débil: un cambio de x se asocia con un cambio de y, pero no siem-
pre (fig. 24-lld). Una correlación de O indica que no hay ningu-
na asociación entre las variables (fig. 24-lle).
Es posible calcular un coeficiente de correlación para dos varia-
bles medidas en el mismo individuo, como la talla (x) y el peso
(y). También puede calcularse un coeficiente de correlación para

(a) r= 0,7 (b) r = - 0,7 (c) r= 0,9 (d) r = 0,3 (e) r= O

•
• • • • •
• •
• .• . .
•:
• ••
••
.•• •••...•a•••-• ••• •·•..••
y y •
• •••• •
• • • ..•, • 1 •
•
. . ..... y y
.
:
• ••
•
'•
. y •
.. : '\ . ' . ,.
.. •

... .. .....••..
. ·....r. -~
•• •• .

• • •I
: • • t ...
•
X X X X X
Una correlación positiva Una correlación negativa Correlación positiva Correlación positiva Una correlación de cero
indica que hay una indica que hay una fuerte. débil. indica que no hay
asociación directa entre asociación inversa entre ninguna asociación entre
las variables. las variables. las dos variables.

Figura 24-11. El coeficiente de correlación describe la relación entre dos o más variables.
 Genéti ca cuantitativa 693

ro Regresión
·o
e 110
(1)
La correlación solo proporciona información acerca de la fuerza
'"O
/
y·
e
(1)
u
y la dirección de la asociación entre variables. Sin embargo, a
V'I
(1) 1nenudo no solo deseamos saber si dos variables están asociadas,
'"O
ro sino que tam bién queren1os predecir el valor de una variable dado
(1) • el valor de la otra.
'"O
V'I
/ Existe una correlación positiva entre el peso corporal de los
...
ro
..o
(1)
...
y· padres y el de su descendencia; en parte, esta correlación se debe

. /•
+-'
•<1)
a que los genes influyen en el peso corporal y a que padres e hijos
> tienen genes en común. Dada esta asociación entre los fenotipos
(1)
./

-~
'"O
o parentales y los de la descendencia, podemos predecir el peso de
'"O
./ un individuo sobre la base del peso de sus padres. Este tipo de pre-
(1) El número de vértebras del
E dicción estadística se denomina regresión. Esta técnica desem-
...o
(1)
E 105
,::,
z
/• la descendencia tiene una
sólida correlación positiva
con el número de
vértebras de la madre.
peña un papel importante en la genética cuantitativa, porque nos
permite predecir las características de la descendencia de un de-
tenninado apareamiento, aun sin conocer los genotipos que codi-
fican las características.
100 105 110 11 5 Se puede conocer la regresión graficando una serie de valores
Número de vértebras de la madre de x y de y. La figura 24-13 ilustra la relación entre el peso de un
padre (x) y el peso de su hijo (y). Cada par padre-hijo está repre-
Figura 24-12. El coeficiente de correlación puede calcularse a partir sentado por un punto del gráfico. La relación global entre estas
de una sola variable medida en pares de individuos. Aquí se compara
dos variables se ilustra mediante la línea de regresión, que es
el número de vértebras en las madres y la descendencia del pez Zoarces
v1v1parus.
aquella que mejor se aj usta a todos los puntos del gráfico (las des-
viaciones de los puntos respecto de la línea están miniinizadas).
La línea de regresión define la relación entre las variables x e y, y
p uede representarse por

una sola variable medida en pares de individuos. Por ejemplo, en y = a + bx (24.8)

un pez, podemos calcular la correlación en tre el número de vérte-
bras de un progenitor (x) y el número de vé11ebras de su descen-
dencia (y), como se muestra en la figura 24-12. En genética cuan-
titativa, sueJe emplearse este enfoque.
Una correlación entre dos variables solo indica que están aso-
ciadas; no implica una relación causa-efecto. L a correlación tam-
poco ünplica que los valores de dos variables sean iguales; solo
significa que un cambio de una variable se asocia con un can1bio
proporcjonal de Ja otra. Por ejemplo, las variables x e y de la
siguiente Lista están casi perfectamente correlacionadas, con un
coeficiente de correlación de 0 ,99.
En la Ecuación 24.8, x e y representan las variables x e y (en este
caso, el peso del padre y el peso del hijo, respectivamente). L a
variable a es el valor de la intersección de la línea con el eje y, que
corresponde al valor esperado de y cuando x es O. La variable b
es la pendiente de la línea de regresión, llamad a también coefi-
ciente de regresión.
Tratar de posicionar una línea de regresión a ojo no solo es muy
difícil, sino también inexacto cuando hay muchos p untos disper-
sos en un área extensa. Por fortuna, el coeficien te de regresión y

valor de x valor dey

12 123 •
14 140 ..-..
Cl
10 110 ~ •
----
o
6 61 ::"
.e • ~ :a línea de regresión es
3 32 (1) la que mejor se ajusta a
'"O
o • • todos los puntos del
Pron1edio: 9 90 V'I
(1) gráfico.
Cl. •
Se observa una alta con·elación entre estas variables x e y; los •
valores más altos de x se asocian siempre con valores más altos
de y . Observe que los valores de y son alrededor de 10 veces más Peso del padre (kg )
altos que los valores correspondientes de x; por lo tanto, aunque Figura 24-13 . Una línea de regresión define la relación entre dos
x e y están con-elacionados, no son idénticos. La distinción entre variables. Aquí se ilustra una regresión de los pesos de los padres frente a
correlación e identidad cobra importancia al considerar los efec- los pesos de los hijos. Cada par padre-hijo está representado por un punto
tos de la herencia y el ambiente sobre la correlación de caracterís- del gráfico: el valor x de un punto es el peso del padre, y el valor y de un
punto, el peso del hijo.
694 CAPÍTULO 24

El coeficiente de regresión representa

la pendiente de la línea de regresión. j

-
b_ 1 J Cuando el coeficiente de
regresión es 1, un aumento
Los pesos corporales de 11 peces hembra y el número de huevos
que producen son:
7 de~1 unidad en x se asocia con
E aumento de 1 unidad en y.
Peso (mg) Huevos (miles)
y b = 0,4
X y
14 61
17 37
X
24 65
25 69
Figura 24- 14. El coeficiente de regresión, b, representa el cambio de
y por unidad de cambio de x. Aquí se muestran líneas de regresión con
27 54
distintos coeficientes de regresión. 33 3
34 87
la intersección la línea con el eje y pueden calcularse 1natemáti- 37 89
camente. Es posible calcular el coeficiente de regresión (b) a par - 40 100
tir de la covaiianza de x e y (covxy) y la varianza de x (s) de la 41 90
siguiente manera: 42 97
covxy
b= (24.9) ¿Cuáles son los coeficientes de con·elación y de regresión para
s2
X el peso corporal y el nú:mero de huevos en estos 11 peces?

El coeficiente de regresión indica cuánto aumenta y, en promedio, Estrategia de solución

por aumento de x. La figura 24-14 ilustra varias líneas de regre-
sión con diferentes coeficientes de regresión. Observe que a
1nedida que aumenta el coeficiente de regresión, ta1nbién lo hace
la pendiente de la línea de regresión.
Una vez calculado el coeficiente de regresión, puede calcularse
la intersección de la línea con el eje y reemplazando el coeficiente
de regresión y los valores medios de x e y en la siguiente ecuación:
a= y -bx (24 .10)
Luego, puede utilizarse la ecuación de regresión (y = a + bx;
Ecuación 24.8) para predecir cualquier valor de y dado el valor
de x.
CONCEPTOS
Un coeficiente de correlación mide la fuerza de la asociación entre
dos variables. El signo (positivo o negativo) indica la dirección de la
correlación; el valor absoluto mide la fuerza de la asociación. La regre-
sión se utiliza para predecir el valor de una variab le sobre la base del
va lor de una variable correlacionada .
✓ EVALUACIÓN DE CONCEPTOS 4
¿Qué información se requiere en su respuesta al
problema?
El coeficiente de correlación (r) y el coeficiente de regresión (b)
para el peso corporal y el número de huevos del pez.
¿Qué información se proporciona para resolver el
problema?
Los pesos corporales y el número de huevos para una muestra
de 11 peces.
Pasos de la solución
Los cálculos necesarios para responder esta pregunta se presentan
en el siguiente cuadro. Para calcular los coeficientes de correla-
ción y de regresión, obtenemos prünero la su111a de los todos los
valores X¡ (Lxi) y la suma de todos los valores yi (LY¡); estas sumas
se muestran en la última fila del cuadro. Podemos calcular las
medias de las dos vruiables dividiendo las sumas por el número
de mediciones, que es 11:
ú 1. 334
x = -- - = 30,36
n 11

En Lubbock, Texas, la lluvia y la temperatura muestran una correlación

842
significativa de -O, 7. ¿ Cuá I de las siguientes conclusiones es correcta? y = -- 76,55
n 11
a. Por lo general, llueve más cuando la temperatura es alta.
b. Por lo general, llueve más cuando la temperatura es baja. Una vez calculadas las medias, se calculan las desviaciones de
c. La lluvia es igual de probable cuando la temperatura es alta o baja. cada valor respecto de la m edia; estas desviaciones se muestran
en las columnas B y E del cuadro. D espués, se elevan al cuadra-
 Genética cuantitativa 695

A B e o E F G
Peso Huevos
(mg) (miles)

X X1 - X (x 1 - xY y Y; - Y (y¡- y;)2 (X ¡ - x} (y¡- y)

14 - 16,36 267,65 61 - 15,55 241,8 254,4
17 - 13,36 178,49 37 -39,55 1564,2 528,39
24 - 6 36
t 40,45 65 - 11,55 133,4 73,46
25 -5 36
t 28,73 69 -7 55
t 57 40,47
27 -3 36
t 11 ,29 54 -22,55 508,5 75,77
33 2,64 6,97 93 16,45 270,6 43,43
34 3,64 13,25 87 10,45 109,2 38,04
37 6,64 44,09 89 12,45 155 82,67
40 9,64 92,93 100 23 ,45 549,9 226,06
41 10,64 113,21 90 13,45 180,9 143, 11
42 11,64 135,49 97 20,45 418,2 238,04
LX¡ = 334 I (x 1 - x)2 = 932,55 IY; = 842 I(y;-YF = 4188,70 I(x 1 - x)(y; - y)= 1743,84

Fuente: R. R. Sokal y F. J. Rohlf, Biometry, 2d ed. (San Francisco: W. H. Freeman and Company, 1981 ).

do las desviaciones (columnas C y F) y se suman (última fila de Coeficiente de regresión:

las columnas C y F). A continuación, se calculan los productos de
la desviación de los valores de x y la desviación de los valores COVX), 174,38
de y [(x¡ - x) (yi - y)]; estos productos se muestran en la columna b= ---- 1,87
G, y la suma se muestra en la últin1a fi la de la col umna G. s2 93,26
.X

Para calcular la covaiianza, utilizamos la Ecuación 24.6:

L (xi-x) (y¡-Y) _ 1743,84 ► Practique su comprensión de la correlación y la regresión resolviendo el

COY.=
XI
= 174,38 Problema 26 al final del capítulo.
n- 1 10

Para calcular la correlación y la regresión, se requieren las varian-

zas y las desviaciones estándares de x e y:
Aplicación de la estadística al estudio
SXz = - - - - - - 93,26
de una característica poligénica
n - 1~ - 10 Edward East llevó a cabo uno de los primeros estudios estadís-
ticos de herencia poligénica sobre la lo ngitud de las fl ores del
sx = ~ = '1 93,26 = 9,66 tabaco (Nicotiana longiflora). Obtuvo dos variedades de tabaco
que diferían en la lo ngitud de las flores: una variedad tenía una
L (yi -y)2 4188,70 longitud media de las flores de 40,5 mn1, y la otra, de 93,3 mm
s2 - - - - - - 418,87 (fig. 24-15). Estas dos variedades habían sido endogámicas du-
Y
n-1 10
rante 1nuchas generaciones y eran ho1nocigóticas para todos los
loc us que contribuían a la lo ngitud de las flores. Por lo tanto, no
sy = ~ = '1 418,87 = 20,47 babfa ninguna variación genética en las cepas parentales origi-
nales; las pequeñas diferencias de longitud de las flores dentro
Ahora podemos calcular los coeficientes de correlación y regre- de cada cepa se debían a efectos ainbient:11es sobre esa caracte-
sión de la siguiente n1anera. rística.
Coeficiente de correlación: Cuando East cruzó las dos cepas, observó que la longitud de las
flo res de la generación F 1 era intermedia entre la de los dos pro-
covzy 174,38 genitores (véase fig. 24-15), como cabría esperar si los genes que
r=--- - - - - = 0,88 determinaban las diferencias entre las dos cepas tuvieran efectos
s,!y 9,66 X 20,47 aditivos. La varianza de la longitud de las flores en la generación
696 CAPÍTULO 24

F 1 fue similar a la observada en sus progenitores, porque toda la

Pregunta: ¿cómo se hereda la longitud d e la flor en las plantas generación F 1 tenía el mismo genotipo, al igual que cada cepa
de tabaco? parental (la generación F 1 era heterocigótica en los genes que
diferían entre las dos variedades parentales).
Long itud de la flor Luego, East entrecruzó la generación F 1 para producir la proge-
~
nie F 2. La longitud media de las flores de la generación F2 era
Métodos Generación P siinilar a la de la F 1, pero la varianza de la generación F 2 fue
mucho mayor (véase fig. 24-15). Esta mayor variabilidad indica
Cepa Cepa
parental A parental B
que no toda la progenie F2 tenía el mismo genotipo.
East seleccionó algunas plantas F 2 y las entrecruzó para produ-
cir la progenie F3 . Observó que la longitud de las flores de la
ro
generación F3 dependía de la longitud de las flores de las plantas
seleccionadas co1no progenitores. Este hallazgo demostró que las
diferencias de longitud de las flores en la generación F2 eran en

-· t
31 34 37 40 43 46
.1 -
84 87 90 93 96 99 102
parte genéticas y, por lo tanto, se transmitían la siguiente genera-
ción. Ninguna de las 444 plantas de la generación F 2 cultivadas
por East 1nostró una longitud de la flor similar a la de las dos
Longitud de la flor
t
Longitud de la flor
cepas parentales. Este resultado sugirió que más de cuatro locus
x= 40,5 mm x= 93,3 mm con pares de alelos afectaban la longitud de la flor en sus varie-
dades, porque se espera que cuatro pares alélicos produzcan 1
descendiente cada 256 [(1/ 4 ) 4 = 1/ 256] con uno u otro de los feno-
Resultados Generación F1 La longitud de la flor en la
generación F1 es aproxima-
tipos parentales originales.
damente intermedia entre la
de los dos progenitores, ...
24.3 La heredabilidad se usa para estimar
ro
u
e
la proporción de variación de un rasgo
Q/
:J que es genético
___1 -
u

~ Además de ser poligénicas, las características cuantitativas suelen

55 58 61 64 67 70 73
ser influenciadas por factores ambientales. A menudo, es útil
Longitud de la flor saber cuánto de la variación de una característica cuantitativa se
debe a diferencias genéticas y cuánto a diferencias an1bientales.
La proporción de la variación fenotípica total debidas a diferen-
... y la varianza en la generación cias genéticas se conoce como heredabilidad.
F1 fu e similar a la observada en
los progenitores. Considere un tambero que posee varios cientos de vacas leche-
ras. El tambero advierte que algunas vacas producen de manera
Generación F2 - La media de la generación F2
fue similar a la observada en la
consistente n1ás leche que otras. El carácter de estas diferencias
es importante para la rentabilidad de sus operaciones lecheras. Si
_______
generación F1, .. . _, las diferencias de la producción de leche son en gran medida de
70 origen genético, el productor podría aumentar la producción de le-
ro 60 che criando de manera selectiva las vacas que producen más
"ü 50
e leche. Por el contrario, si las diferencias son en gran medida de
Q/ 40
a 30
origen ambiental, la crianza selectiva ejercerá escaso efecto sobre
~ 20
u.
la producción de leche, y al productor Je convendría aumentar la
10 producción de leche aj ustando los factores ambientales asociados
o
52 55 58 61 64 67 70 73 76 79 82 85 88 con esta. Para detetminar el grado de influencias genéticas y
Longitud de la flor (mm) ambientales sobre la variación de una característica, se debe divi-
dir su variación fenotípica en componentes atribuibles a diferen-
tes factores.
, ... pero la varianza fue mayor
en la generación F2, lo que
indica la presencia de diferentes Varianza fenotípica
genotipos entre la progenie F2.
Para determinar cuánto de la variación fenotípica de una pobla-
ción se debe a factores genéticos y cuánto a factores ambientales,
Conclusión: la longitud de la f lor de las generaciones F1 y F2
es consistente con la hipótesis de que la caract erística está
primero debemos tener alguna 1nedida cuantitativa del fenotipo
determinada por varios genes con efectos aditivos. en consideración. Consideremos una población de plantas silves-
tres que difieren de tamaño. Podríamos recolectar una muestra
Figura 24- 15. Edward East llevó a cabo uno de los primeros estudios representativa de plantas de la población, pesar cada planta de la
estadísticos sobre la herencia de la longitud de la flor en la planta muestra y calcular la media y la varianza del peso de las plantas.
de tabaco. Esta varianza fenotípica se representa por VF.
 Genética cuantitativa 697

COMPONENTES DE LA VARIANZA FENOTÍPICA En primer lugar, Asimismo, hay d iferencias en los pesos de los dos genotipos,
p arte de la varianza fenotípica p uede deberse a diferencias del pero los rendi mientos relativos de los genotipos dependen de si
genotipo entre miembros individuales de la población. Estas las plantas crecen en un ambiente húmedo o en uno seco. En este
diferencias se denomin an varianza genética y se representan caso, las influencias sobre el fenotipo no pueden asignarse con
p or V0 . precisión a componentes genéticos ni ambientales, porque la ex-
En segundo lugar, algunas de las diferencias del fenotipo pue- presión del genotipo depende del ambiente en el que crece la
den ser secundarias a diferencias a1nbiental.es entre las plantas; planta. Por lo tanto, la varianza fenotípica debe incl uir un com-
estas diferencias se denomi.nan varianza ambiental, VA· La va- ponente que explique la manera en la que interactúan los facto-
rianza ambiental incluye diferencias de factores ambientales, res genéticos y ambientales.
como la cantidad de luz o de agua que recibe la planta; también En resumen, la varianza feno típica total puede ser repartida en
incluye diferencias aleatorias del desarrollo, que no p ueden ser tres co111ponentes:
atribuidas a ningún factor específico. Por definición, cualquier
variación del fenotipo que no se hereda es una parte de la varian- (24.11)
za ambiental.
E n tercer lugar, la varianza por interacción genético- COMPONENTES DE LA VARIANZA GENÉTICA La varianza genética
ambiental (VGA) surge cuando el efecto de un gen depende del puede subdividirse aún más en componentes que consisten en
ambiente específico en el que se encuenti-a. En la figura 24-16 se diferentes tipos de efectos genéticos. E n primer lugar, la varian-
presenta un ejemplo. En un ambiente seco, el genotipo AA pro- za genética aditiva (VAD) comprende los efectos aditivos de los
duce una planta que pesa, en promedio, 12 g, y el genotipo aa genes sobre el fenotipo, que pueden sumarse para determinar el
produce una planta más peq ueña que pesa, en promedio, 10 g. En efecto global sobre el fenotipo. Por ejemplo, suponga que en una
un ambiente húmedo, el genotipo aa produce la pl anta más gran- p lanta el alelo A 1 contribuye con 2 g al peso, y el alelo A 2 lo hace
de, de 24 g de peso en promedio, mientr as que el genotipo AA con 4 g. Si los alelos fueran estrictamente aditivos, los genotipos
produce una planta de 20 g de peso en pro1nedio. En este ejen1- tendrían los siguientes pesos:
plo, hay diferencias claras entre los dos ambientes: an1bos geno-
tipos producen plantas n1ás pesadas en an1biente h úmedo.
A 1A 1 = 2 + 2 = 4 g
A 1A 2 = 2 + 4 = 6 g
A 2A 2 = 4 + 4 = 8 g
aa
• Los genes que estudió Nilsson-Ehle, que afectan el color del gra-
ltl
+-' no de trigo, eran aditivos de esta manera. Fundamentalmente, la
e
ltl
o.
•
AA
varianza genética aditiva determina el parecido entre los padres y
su descendencia. Por ejemplo, si toda la varianza fenotípica se
ltl
(1)
debe a la varianza genética aditiva, el fenotipo promedio de la
-o descendencia será exactan1ente intermedio entre los de los proge-
o AA
~
Q..
. nitores.
En segundo lugar, existe varianza genética por dominancia
(V0) cuando algunos genes tienen un componente dominante. En
• este caso, los alelos de un locus no son aditivos; más bien, el efec-
ªª to de un alelo depende de la identidad del otro alelo de ese locus.
Seco Húmedo Por ejemplo, con un alelo dominante (T), los genotipos IT y Tt
Ambiente presentan el mismo fenotipo. En este caso, simplemente no pode-
1nos sumar los efectos de los alelos, porque el efecto del alelo t
pequeño está enmascarado por la presencia del alelo T grande. En
cambio, debemos sumar un componente (V0 ) a la varianza gené-
tica p ara explicar la forma en la que interactúan los alelos.
En tercer lugar, genes de diferentes locus pueden interactuar de
AA aa - la mis1na forma en que lo hacen los alelos del mismo locus.
Cuando se produce este tipo de interacción génica, los efectos de
>-i,.k"
( \O.- ~ ,'<' los genes no son aditivos. Por ejemplo, en el capítulo S se descri-
' >. < bió cómo el color del pelaje del pen·o labrador presenta interac-
.
- ..- ~ te-
ción génica ; los genotipos BB ee y bb ee producen perros de color
AA aa amarillo, porque el efecto de los alelos del locus B está enmasca-
rado cuando están presentes los alelos ee en el locus E. Con la
figura 24-16. La varianza por interacción genética-ambiental se interacción génica, debemos incluir un tercer co1nponente, deno-
obtiene cuando el efecto de un gen depende del ambiente específi- minado varianza por interacción génica (V1), a la varianza ge-
co en el cual se encuentra. En este ejemplo, el genotipo afecta el peso nética:
de la planta, pero las condiciones ambientales determinan qué genotipo
produce la planta más pesada. (24.12)
698 CAPÍTULO 24
ECUACIÓN DE RESUMEN Ahora, podemos integrar estos componen-
tes en una ecuación para re presentar todas las posibles contribu-
ciones a la varianza fenotípica:
(24.13)
Esta ecuación nos proporciona un modelo que describe las causas
potenciales de diferencias observadas entre fenotipos individua-
les. Es importante destacar que este modelo considera estricta-
1nente las diferencias observables (varianza) de los fenotipos en
1nie1nbros individuales de una población; no indica nada acerca
del valor absoluto de la caracte1istica ni sobre los genotipos sub-
yacentes que provocan estas diferencias.
Tipos de heredabilidad
El modelo de varianza fenotípica que acabamos de desarrollar
puede utilizarse para deter1ninar cuánto de la varianza fenotípica
de una característica se debe a diferencias genéticas. Heredabili-
dad en sentido amplio (fP) representa la proporción de varianza
fenotípica que se debe a varianza genética y se calcula dividien-
do la varianza genética por la varianza fenotípica:
heredabilidad en sentido a1nplio = I-í2 = (24. 14)
El símbolo J{2 representa heredabilidad en sentido amplio, porque
es una medida de la varianza, que se expresa en u
varias maneras de medir la he redabilidad de una característica.
Estas consisten en la elimin ación de uno o más componentes de
la varianza, la comparación del parecido de los padres y la des-
cendencia, la comparación de las varianzas fenotípicas de indivi-
duos con diferentes grados de parentesco y la medición de la res-
puesta a la selección. La teoría maten1ática que subyace a estos
cálculos de heredabilidad es con1pleja; por lo tanto, aquí nos cen-
traremos en desarrollar una explicación general de cómo se mide
la heredabilidad.
HEREDABILIDAD POR ELIMINACIÓN DE COMPONENTES DE LA VA-
RIANZA Una manera de calcular la heredabilidad en sentido am-
plio es eliminar uno de los co1nponentes de la varianza. Ya he1nos
visto que VF = VG + VA+ VGA· Si eliminamos toda la varianza
ambiental (VA= O), entonces VGA = O (porque si V0 o VA es cero,
no puede haber ninguna interacción genético-ambiental), y VF =
V0 . En teoría, podríamos lograr que VA fuera igual a cero asegu-
rándonos de que todos los individuos fueran criados exacta1nente
en el mismo ambiente, pero en la práctica esto es casi iinposible.
En lugar de eso, podríamos lograr que V0 fuera igual a O criando
individuos idénticos desde el punto de vista genético, lo que
determinaría que V F fuera igual a VA. En un experimento típico,
podría1nos criar individuos hon1ocigóticos idénticos clonados o
sometidos a cruzamiento endogánuco en gran medida, en un
a1nbiente definido, y medir su varianza fenotípica para estin1ar la
VAº Después, podríamos criar un grupo de individuos variables
desde el punto de vista genético y medir su varianza fenotípica
(Vp)- Utilizando la VA calculada en los individuos genéticamente
idénticos, podríamos obtener la varianza genética de los indivi-