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GUÍA DE PRÁCTICA DE LABORATORIO Fecha: 15/Oct/2015

INTEGRANTES: Juan Esteban Vivas, Cristian David Alvarez, Matheo Guerrero, Santiago
Olarte, Samuel Morales Quiroga

1. IDENTIFICACIÓN

PROGRAMA ACADÉMICO Ingeniería Ambiental

Biología General
UNIDAD DE ESTUDIO

Microscopía
PRACTICA DE LABORATORIO

2. MEDIDAS DE SEGURIDAD PARA LAS PERSONAS Y EL AMBIENTE A TENER EN CUENTA EN

EL DESARROLLO DE LA PRACTICA

REACTIVOS
Cantidad Nombre Clase de riesgo* Medidas de En caso de
seguridad accidente
1 Aceite de Biológico Bata, Guantes de Revisar las fichas
Inmersión nitrilo, Gafas de de seguridad,
seguridad primeros auxilios,
servicio médico y
ARL.
1 Cristal violeta Químico Bata, Guantes de Revisar las fichas
nitrilo, Gafas de de seguridad,
seguridad primeros auxilios,
servicio médico y
ARL.
1 Lugol Químico Bata, Guantes de Revisar las fichas
nitrilo, Gafas de de seguridad,
seguridad primeros auxilios,
servicio médico y
ARL.
1 Fucsina Químico Bata, Guantes de Revisar las fichas
nitrilo, Gafas de de seguridad,
seguridad primeros auxilios,
servicio médico y
ARL.
1 Mezcla Alcohol Químico Bata, Guantes de Revisar las fichas
acetona 1:1 nitrilo, Gafas de de seguridad,
seguridad primeros auxilios,
servicio médico y
ARL.

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EQUIPOS
Cantidad Nombre Clase de riesgo * Medidas de En caso de
seguridad accidente
1 Microscopio No Aplica No Aplica No Aplica
1 Mechero No aplica No Aplica
MATERIALES
Cantidad Nombre Clase de riesgo* Medidas de En caso de
seguridad accidente
3 por grupo Cubre Objeto No Aplica No Aplica No Aplica
1 Porta Objetos No Aplica No Aplica No Aplica

*Clase de riesgo: Biológico grado 1, Químico, Eléctrico, Físico, ninguno

Aquí se relacionan todos los reactivos, equipos y materiales a utilizar durante el desarrollo de la práctica, en
dado caso de no ser requerido se escribe no aplica.

3. BUENAS PRÁCTICAS DE SOSTENIBILIDAD AMBIENTAL EN EL MANEJO DE RESIDUOS A

TENER EN CUENTA EN EL DESARROLLO DE LA PRACTICA

Nombre residuo Clasificación de la Manejo del residuo En caso de accidente

peligrosidad *
Guantes Biológico Caneca Roja Dar aviso inmediato al
Docente y/o profesional
de laboratorio.

*Clasificación de peligrosidad: según la “Guía de almacenamiento de sustancias químicas y residuos

químicos”.
Se relacionan los tipos de residuos generados durante la práctica, si no hay residuos generados se escribe
no aplica.

4. PRACTICA DE LABORATORIO
4.1 OBJETIVO
1. Reconocer la importancia del uso del microscopio como herramienta básica
en el estudio de la Biología.
2. Identificar y conocer la función de las partes del microscopio y desarrollar
habilidades para el uso correcto del mismo.
4.2 FUNDAMENTOS TEÓRICOS
El microscopio es un instrumento que permite observar objetos tan pequeños que no se pueden ver a simple
vista. Además, sirve para realizar mediciones, estimar el tamaño de una población de microorganismos,
estudiar estructuras celulares en general, hacer estudios morfológicos y fisiológicos de células y tejidos.
Uno de los microscopios más utilizados en biología es el microscopio óptico, el cual contiene una o varias
lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto, funciona por refracción gracias a los fotones
de luz que llegan al objeto y permiten observar sus características.
La refracción se define como el cambio de dirección que se observa cuando una onda pasa de un medio
material a otro. Únicamente se produce si la onda incide oblicuamente sobre la superficie de separación de

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los dos medios. Un ejemplo de este fenómeno se ve cuando se sumerge un lápiz en un vaso con agua: el
lápiz parece quebrado (figura 1).

Figura 1. Refracción de la luz

Fuente: recuperado de: https://goo.gl/p82vHC

1. Conceptos básicos de microscopia

1.1 Poder de resolución
Es la capacidad que posee un instrumento óptico para diferenciar dos puntos que
a simple vista parecen uno solo, debido a la pequeña distancia que hay entre
ellos. El poder de resolución del ojo humano es de 100 micras (μ), el del
microscopio compuesto es de 0.2 μ y el del microscopio electrónico de 0.001 μ. Lo
anterior significa que para que el ojo humano pueda diferenciar claramente dos puntos, estos deben estar
separados entre sí por una distancia igual o mayor a
100 μ.
2.2 Poder de aumento
Es la capacidad que posee un instrumento óptico para dar una imagen aumentada de un objeto y depende
del tipo y calidad de las lentes utilizadas. Una lente dada puede dar una imagen mayor o menor
dependiendo de la distancia a la cual se encuentra el objeto. No obstante, hay una distancia óptima entre
objeto y lente que proporciona una imagen nítida. Así por ejemplo, si un objeto tiene un tamaño de 1 mm y
una lente dada origina una imagen de 10 mm, se dice que el objeto fue aumentado 10 veces, es decir el
poder de aumento de la lente es de 10X, donde X representa el tamaño original del objeto.

El microscopio que se utiliza consta de 2 lentes (ocular y objetivo), cada una de ellas con su respectivo
poder de aumento. Cuando se observa un objeto a través del microscopio, su aumento total (At) está dado
por el producto del poder de aumento de cada una de las lentes, o sea, aumento del objetivo (Aob),
multiplicado por el aumento del ocular (Aoc):
At = Aob x Aoc

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Siendo X el tamaño real del objeto. Veamos la tabla a continuación:

Tabla 1. Poder de aumento total en el microscopio

Poder de aumento del Poder de aumento del Aumento total
objetivo ocular

10X 10X 100X

60X 20X 1200X
Fuente: elaboración propia

1.3 Campo visual del microscopio

Es el área circular que se observa al mirar a través del microscopio y varía según
las lentes utilizadas.

En el marco teórico de su informe defina los siguientes términos:

Historia del desarrollo del microscopio
Tipos de microscopio
Partes del microscopio: Nombres y descripción.

4.3 PROCEDIMIENTO
Material a traer al laboratorio
Por cada grupo de estudiantes deben traer los siguientes materiales para realizar la práctica de
laboratorio:
● Hoja seca
● Hoja húmeda
● Champiñón
● Uva verde
● Insecto.
● Hoja de periódico
● Isopo estéril
● Bisturí

Procedimiento A

1. Limpiar las láminas portaobjetos y su laminilla cubre-objetos usando un paño y alcohol antiséptico.
2. Con un gotero coloque una gota de agua en el centro del portaobjetos.
3. Cortar la letra “e” del periódico y colocarlo en el centro de la lámina y cubrir con la laminilla
Para evitar burbujas de aire: Poner el borde de la laminilla cubreobjetos sobre la gota de agua del porta-
objetos de tal manera que el borde se humedezca totalmente, luego déjela caer sobre el recorte de
periódico.
4. Observe la “e” con el objetivo panorámico (4x). Describa la imagen y la orientación de la letra
5. Observe la “e” con el objetivo panorámico (10x y 40x).
Introduzca por medio de imágenes sus observaciones

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4X 10X 40X
6. Repita los procedimientos 3, 4 y 5 para las otras muestras en el listado a llevar al laboratorio. Deben
contar con el bisturí una lámina de espesor lo más pequeño posible del material que llevan (El
insecto no deben cortarlo).

Periodico.

4x 10x 40x

Champiñón.

4x 10x 40x

Hoja Seca

4x 10x 40x

Hoja Mojada

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4x 10x 40x

Insecto

4x 10x 40x

Uva

4x 10x 40x

Procedimiento B
Limpiar las láminas portaobjetos y su laminilla cubre-objetos

1. Recoger la muestra de bacterias a estudio mediante un isopo (bastón estéril de algodón).

2. Extender dicha muestra sobre un portaobjetos y dejarla secar utilizando el calor del mechero.
3. Aplicar el tinte de violeta de genciana sobre el portaobjetos y esperar un minuto.
4. Enjuagar la muestra con agua y aplicar un fijador del violeta de genciana (lugol). El lugol y el violeta
de genciana forman un complejo insoluble en agua capaz de penetrar en la pared de las células
bacterianas.
5. Lavar de nuevo el portaobjetos con una mezcla de alcohol y acetona durante unos segundos.
6. Añadir una tinción de safranina o fucsina para distinguir las gram negativas que aparecerán bajo el
microscopio (en lugar de incoloras) con un tono rosado o rojo. Lavar con agua.
7. Observar la muestra al microscopio donde se visualizarán de color violeta las gram positivas y de
color rosa-rojizo las gram negativas. A 4X, 10 X y 40 X
8. Con un gotero colocar una gota de aceite de inmersión y cambar al objetivo 100x. Introduzca las
imágenes en cada aumento realizado.

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4X 10X 100X

Isótopo bacteria

100x. 10x

4.4 CUESTIONARIO

1. ¿Cuál es la diferencia entre un microscopio óptico y un microscopio electrónico?

Microscopio electrónico es un aparato súper potente que, a diferencia de microscopio óptico, en vez de flujo
luminoso utiliza un haz de electrones

2. ¿Con qué aumentos se puede observar una bacteria, una célula animal y una célula vegetal?
Con la ayuda del microscopio compuesto es posible observar células humanas, células vegetales, levaduras,
protozoarios, y bacterias logrando aumentos hasta de 1000x

3. ¿Podría observar separadamente con el microscopio óptico, dos puntos que están a 10μ entre sí?
¿Y dos puntos que están a 0.1μm? Explique.
Si se mide desde un objeto de un milímetro al nosotros expandir con el lente x100 si será perceptible
los puntos separados por 10um, pero por más aumento seguirá sin ser perceptible la de 0.1

4. Determine el poder de aumento del microscopio, es decir; defina ¿cuántas veces se aumentó el
tamaño de la imagen de la letra cuando utilizó los diferentes objetivos, teniendo en cuenta que el
ocular del microscopio era de 10X?

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La imagen ampliada x4 genera una amplitud que da más resolución y detalle sobre el objeto, la imagen x10
hará que el objeto ocupe todo el campo de visión dando detalles más óptimos de la superficie, la imagen x40
dependiendo de la nitidez del objeto dará un resultado muy detallado y amplio de cosas ya no perceptibles
al ojo humano, en cambio si no es tan nítido habrá detalles pero la imagen será menos clara

5. Escribir los nombres de las partes que corresponden al microscopio

1. Ocular
2. Tubo
3. Objetivos
4. Brazo
5. Anillo macrometrico
6. Anillo micrométrico
7. Interruptor
8. pie o base
9. fuente de luz
10. Graduador
11. compensador
12. Platina
13. Revolver

4.5 BIBLIOGRAFÍA.

Freeman, S (2009) Biología. Tercera Edición. Editorial Pearson (Texto Guía)

Campbell, Reece (2007) Biología. 7ma. Ed. Editorial Médica Panamericana.

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Online.

Curtis, Barnes (2006) Invitación a la Biología. Ed. Médica Panamericana, 6ª

edición.

Mader, S. (2008). Biología. Novena Edición. Biología. McGraw-Hill

COMPETENCIA RESULTADOS DE APRENDIZAJE

Reconocer el material básico
Identificar las normas de seguridad
para trabajo en los Laboratorios de
Ciencias Básicas
Reconocimiento de material de vidrio
Reconocimiento de material de porcelana
Reconocimiento de material metálico
Reconocer los pictogramas de seguridad
Reconocer las fichas de seguridad de algunos reactivos
usados en las prácticas de sistemas biológicos.

ELABORA REVISA APRUEBA

DOCENTE COORDINADOR DIRECTOR
Diana Angélica Varela Martínez. Andrés Cruz Pérez Eduardo Ramírez
Fecha: Julio 2016 Fecha: 17-08-16 Fecha: 17-08-16

CONTROL DE CAMBIOS

FECHA DESCRIPCIÓN DEL CAMBIO

Isabel Cristina Cambio de formato y ajuste a metodología PAT.
Castellanos
Fecha: Julio 2020 Fecha: 17-08-16

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