Determinación de proteínas por el método de Lowry

Curva de calibración Preparar una serie de

tubos de la sig. manera:

Tubo No 1 y 1´
-solución de proteínas
(0.25 mg/mL) 0.1 mL
- reactivo A 0.4 mL
- reactivo C 5.0 mL

Tubo No 2 y 2´
-solución de proteínas
(0.25 mg/mL) 0.2 mL
- reactivo A 0.3 mL
- reactivo C 5.0 mL
Mezclar y dejar Adicionar
en reposo a T. reactivo D
Tubo No 3 y 3´
ambiente 10 0.5 mL
-solución de proteínas
(0.25 mg/mL) 0.3 mL min
- reactivo A 0.2 mL
- reactivo C 5.0 mL
Agitar fuertemente cada
Tubo No 4 y 4´ tubo inmediatamente
-solución de proteínas después de ser agregado
(0.25 mg/mL) 0.4 mL el reactivo D
- reactivo A 0.1 mL
- reactivo C 5.0 mL

Dejar desarrollar
Tubo No 5 y 5´
el color por 30
-solución de proteínas
min a T. ambiente
(0.25 mg/mL) 0.5 mL
- reactivo C 5.0 mL

Tubo No 6 y 6´ Tapar tubos con platico

- reactivo A 0.5 mL Leer en el
y agitar por inversión,
- reactivo C 5.0 mL espectrofotóme
después de sus tiempos
tro a 590 nm
establecidos

Ajustar el espectrofotómetro
al 100%T con el tubo 6

NOTA: por se inestable, el reactivo C será preparado al momento de ser usado,

mezclando 1 mL de reactivo B con 50 mL de reactivo A