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MEDIDOR DE GLUCOSA
Proyecto integrador
Autor:
Emiliano A. Segade
2021
CONTENIDO
Indice de ilustraciones ...................................................................................................... 2
Glosario ............................................................................................................................ 3
1. Introducción .................................................................................................................. 4
4. Justificación ................................................................................................................ 16
5. Objetivo ...................................................................................................................... 17
6. Desarrollo ................................................................................................................... 18
7. Resultados................................................................................................................... 36
8. Conclusión .................................................................................................................. 39
9. Bibliografía ................................................................................................................. 39
Especie electroactiva: Todas aquellas sustancias con carácter oxidante y reductor, que
son capaces de transportar carga, sin sufrir modificación atómica.
Disolución: Es una mezcla homogénea de dos o más sustancias, donde se llamará soluto
a la sustancia presente en menor cantidad, y disolvente a la sustancia que está en mayor
cantidad.
Sustrato (Química): Es, típicamente, la especie química que se observa en una reacción
química, que reacciona con un reactivo para generar un producto.
Si bien el método más común para medir la glucemia es aquel utilizado por los
glucómetros amperométricos, existen otros métodos para medir estos valores que quizá
no son tan comunes o eficientes, o incluso aún están en etapas de desarrollo. De todas
maneras, debido a que el glucómetro a diseñar utilizara el método amperométrico, no se
exploraran el resto de opciones.
• Agentes oxidantes: son especies que oxidan a otras sustancias, tienen átomos
que se reducen y ganan electrones.
• Agentes reductores: son especies que reducen a otras sustancias, tienen átomos
que se oxidan y pierden o ceden electrones.
Estas reacciones de tipo redox tienen lugar en casi todas las áreas de la química y la
bioquímica, pero, en la rama de la electroquímica, donde se estudia la transformación
entre la energía eléctrica y la energía química, los procesos electroquímicos siempre
serán reacciones redox. Generalmente, en esta rama se estudiarán las situaciones en las
que ocurren reacciones de oxidación y reducción separadas, físicamente o
temporalmente, en un entorno conectado a un circuito eléctrico.
Se pueden distinguir dos tipos de celdas electroquímicas: las celdas galvánicas, que
producen energía eléctrica neta, y las celdas electrolíticas, que consumen energía
eléctrica; un ejemplo común de una celda electroquímica galvánica es una pila eléctrica.
Las celdas galvánicas son aquellas utilizadas generalmente en los métodos
electroanalíticos y producen energía eléctrica mediante reacciones redox, en la que uno
de los analitos será el agente reductor y el otro será un agente oxidante. En ambas
celdas, el electrodo en el que ocurre la reducción será el cátodo; mientras que el
electrodo en el que ocurre la oxidación será el ánodo. Por tanto, para que se lleve a cabo
la reacción electroquímica se debe provocar una perturbación de carácter eléctrico y
como consecuencia se obtiene una respuesta de tipo eléctrico, de donde se obtiene
información del compuesto analizado. En la práctica solo se monitorean los procesos
que ocurren en una de las interfases y es en esta donde se limita la respuesta del analito
de interés.
Mas allá de si todos los dispositivos de este tipo tienen el mismo funcionamiento básico,
estos se pueden diferenciar entre sí debido a algunas características clave como: su
forma y tamaño, el volumen de muestra de sangre necesario, el tiempo que tarda en leer
la información proveniente de la tira reactiva, la unidad en la que es mostrada el valor
de glucosa (mg/dL o mmol/L), la memoria del dispositivo y, por supuesto, el costo.
Una enzima es una proteína que tiene una alta selectividad para un sustrato
determinado, al cual ata, causando un cambio catalítico. Estas son disponibles
comercialmente en estados altamente purificados y son, por tanto, útiles para la
producción en masa. Los biosensores que utilizan enzimas como bioreceptor tienen
múltiples ventajas, como una alta selectividad y sensibilidad.
H 2O2 ⎯⎯⎯⎯
Potencial
→ O2 + 2e− + 2H + (2)
Si bien se mantuvo este modelo durante muchos años, la tecnología utilizada en estos
biosensores ha avanzado enormemente. Como primera instancia se agregó un tercer
electrodo, un electrodo auxiliar, para mejorar la precisión de la prueba y minimizar la
interferencia, haciendo que estos biosensores tengan un funcionamiento y construcción
básica similar, o prácticamente igual, a las celdas electroquímicas de tres electrodos
utilizadas en electroanálisis. Otro de los problemas de estos biosensores era que la
precisión y la exactitud de la medición se podían ver afectadas por la variación del
oxígeno en el entorno, es por esto que se introdujo el diseño por capas de la tira reactiva
y un mecanismo capilar para la absorción de la gota de sangre, que también permitió
mover la zona de introducción de la gota de sangre al área de reacción, al borde de la
tira. Además, se mejoró el proceso por el cual se producía el flujo de electrones,
introduciendo una coenzima, que cambia su estado de oxidación, y, luego, agregando un
agente mediador artificial, monitoreado electroquímicamente, que suele funcionar como
agente oxidante o reductor en sistemas redox, concretamente, se utiliza como agente
oxidante de esta coenzima y se encarga de la transferencia de electrodos para la
medición.
Se considera a estos biosensores de glucosa que utilizan una coenzima, sin un agente
mediador, como los biosensores de primera generación modernos, que, específicamente,
utilizaban al oxigeno como aceptador de electrones, es decir, agente oxidante; y a los
que utilizan a este agente, como los de segunda generación, que reducían la
interferencia de la concentración de oxígeno en la muestra de sangre. Además de estas
dos generaciones, existe una tercera generación, que no utiliza un agente mediador para
aceptar y transferir los electrones a un electrodo, sino que utiliza un sistema de
comunicación eléctrica directa para esto. Si bien este último método es más efectivo que
los anteriores, el procedimiento para llevarlo a cabo es muy complicado, lo que inhibe
su uso para producciones en masa, es por esto que hoy en día se suelen utilizar los
biosensores de glucosa de segunda generación.
Todas estas enzimas tienen sus ventajas y desventajas, que pueden llevar a una
farmacéutica a decantarse a utilizar una o la otra, aun así, de entre todas las
mencionadas, la glucosa oxidasa sigue siendo la enzima más popular para la
determinación de los niveles de glucosa debido a su bajo precio, alta bioactividad,
estabilidad y sensibilidad hacia la glucosa, de todas maneras, las glucosas
deshidrogenasas aportan un gran atractivo en que no pueden recibir interferencias por
parte de los niveles de oxígeno en la muestra, es por esto que se han hecho, y se siguen
haciendo, grandes avances tecnológicos para reducir las desventajas de estas enzimas.
Ilustración 6: Tabla que resume las características principales de las enzimas utilizadas en la medición de glucosa.
Ferri, S., Kojima, K., & Sode, K. (2011). Summary of Major Features of Glucose Sensing Enzymes. Journal of
diabetes science and technology. https://doi.org/10.1177/193229681100500507
Así es cómo funcionan las tiras reactivas de segunda generación, las cuales son las más
utilizadas hoy en día.
3. PROPUESTA DE VALOR
La propuesta de valor consiste en realizar un medidor de glucosa amperométrico, con
propósitos demostrativos o académicos, que muestre la medida tomada en una pantalla
LCD.
4. JUSTIFICACIÓN
El propósito principal por el cual existen los medidores de glucosa es para realizar un
seguimiento de la enfermedad conocida como diabetes, para así, mantenerla bajo
control y evitar problemas serios que pueden ocurrir como consecuencia de esta
enfermedad.
La diabetes es una enfermedad crónica, ante la cual existen dos variantes, o tipos, que se
caracterizan por la baja segregación o absorción de insulina, específicamente:
Es por esto que el proyecto a realizar se hará para informara al publico general, junto a
aquellos que padecen esta enfermedad, sobre como funcionan estos dispositivos.
5. OBJETIVO
El objetivo es realizar un medidor de glucosa con pantalla LCD que tenga, según la
normativa ISO 2013, un margen de error de:
6.2. CIRCUITO
Por último, los LEDs indicadores, rojo y verde, se conectan a unos pines digitales del
microcontrolador, que, mediante el código programado en este, se utilizaran para
múltiples funciones, como indicar si el dispositivo este prendido o no, si se inició el
proceso de medición, etc.
Esta etapa funciona de manera que, al alimentar la tira reactiva a través del electrodo de
trabajo (WE) con 2,5𝑉, mediante la entrada no inversora conectada a la salida, junto
con la tensión de 2,1𝑉 proveniente del potenciostato, se produce una caída de voltaje
entre este electrodo y el auxiliar (CE) de −400𝑚𝑉, ya que: 2,1𝑉 − 2,5𝑉 = −400𝑚𝑉.
Esta caída de tensión en la tira es la necesaria para que se produzca la reacción redox
que provocara la circulación de una corriente 𝐼𝑔 , del orden de los 𝜇𝐴, que será
proporcional al nivel de glucosa. Esta viajará desde el electrodo de trabajo (WE) hasta
la entrada no inversora del operacional y se producirá en la salida una tensión
equivalente a este valor, esta tensión es la que será leída por el microcontrolador y será
utilizada para calcular el valor de glucosa y estará dada por:
Vout = − R6 I g .
6.2.2.1. LM358
Este es un circuito integrado de 8 pines, conformado internamente por dos
amplificadores operacionales independientes de alta ganancia con compensación de
frecuencia interna y capaces de ser alimentados por una sola fuente de alimentación.
Para mejorar la precisión de este dispositivo se pueden utilizar como alternativas, otros
amplificadores operacionales hechos para tareas sensibles y no de uso general, como:
LT1014CN, LMC6484, AD8508, etc.
Esta etapa del circuito sirve simplemente para prender el display LCD y que se
muestren los caracteres deseados en este, todo esto mediante el PCF8574, que se
conectara al microcontrolador, a través de 2 resistencias de pull up, en los pines SCL y
SDA, que en el caso del Arduino Nano son los pines A5 y A4 respectivamente. Esto se
hace para reducir la cantidad de pines del Arduino utilizados y, por consiguiente, el
número de pistas en la placa.
Además, se utilizará una resistencia variable, o preset, para regular el backlight del
display.
6.2.3.1. PCF8574
El PCF8574 es un circuito integrado de 16 pines, que funciona como un expansor de
puertos de entrada y salida, de 8bit, que utiliza el bus con protocolo I2C, este mismo
integrado también puede ser encontrado montado en módulos, junto con sus
componentes pasivos necesarios, que se pueden utilizar para integrarse fácilmente a
placas Arduino.
void setup(){
Serial.begin(9600);
setTime(hora, minuto, segundo, día, mes, año);//configurar fecha y hora
pinMode(interruptor,INPUT);
pinMode(A3,INPUT);
pinMode(A6,INPUT);
pinMode(LedVerde,OUTPUT);
pinMode(LedRojo,OUTPUT);
lcd.init();
lcd.backlight();
}
void loop(){
digitalWrite(LedVerde,LOW);
digitalWrite(LedRojo,HIGH);
digitalWrite(LedRojo,LOW);
digitalWrite(LedVerde,HIGH);
lcd.setCursor (1, 0);
lcd.print ("Aplicar sangre");
while (1){
transimpedance_output = analogRead(6) * (5.0 / 1023.0);
if (transimpedance_output > threshold) break;
}
lcd.clear();
tiempo();
//cálculo de la glucosa
transimpedance_output = analogRead(6) * (5.0/1023.0);
float concentracion = 495.6 * transimpedance_output - 1277.5; //revisar formula
lcd.setCursor(1,1);
lcd.print (concentracion);
lcd.print ("mg/dl");
leer_bateria();
while (1){
if(digitalRead (interruptor) == LOW) break;
}
lcd.clear();
}
//lectura de la fecha
void tiempo(){
time_t Fecha = now();
lcd.setCursor(0,0);
lcd.print(day(Fecha));
lcd.print("/");
lcd.print(month(Fecha));
lcd.print("/");
lcd.print(year(Fecha));
lcd.print(" ");
lcd.print(hour(Fecha));
lcd.print(":");
lcd.print(minute(Fecha));
}
1. Iniciar encendiendo solo el LED rojo, para que luego, mediante una estructura
de control “while” con condición siempre verdadera, se analice si se presionó el
pulsador, si esto no es así se mantendrá en esta función eternamente hasta que
sea presionado.
2. Una vez presionado, borra todo lo que pueda haber escrito en el LCD, se apaga
el LED rojo y se enciende el Verde, al mismo tiempo que se imprime en el LCD
el mensaje “Aplicar sangre”.
3. A partir de esto, se ingresa en otra estructura “while” con condición siempre
verdadera, donde se lee la tensión a la salida del amplificador de
transimpedancia, obtenida a través del pin analógico numero 6 (A6), y, solo si
esta supera el valor definido en threshold de 2,8𝑉, se saldrá de esta función y se
limpiará el mensaje previamente impreso en el LCD.
4. Luego, mediante el uso de una estructura de control “for”, se inicia una cuenta
regresiva desde el cinco, con un delay de un segundo entre cada número,
logrando que se cuenten cinco segundos. Cada número de esta cuenta regresiva
será impreso en el display, hasta que se llegue al cero, donde se saldrá de esta
función y se limpiara, nuevamente, lo escrito en el display.
5. De aquí, se llama a la función de nombre “tiempo”, en esta se utilizan funciones
provenientes de la librería “TimeLib.h”, que permite configurar el tiempo en el
“void setup” y luego llamarlo para mostrarlos en el LCD.
6. Mas adelante es donde se realiza el cálculo para obtener el valor de glucosa en
base a la tensión leída en el pin analógico “A6”, que mediante la multiplicación
entre este y (5,0/1023,0) se pasa de un valor entre 0 y 1023, a uno entre 0 y 5.
Esta fórmula es la siguiente:
Esta se diseño de manera que quepa el display de 16x2 y una batería de 9v, y que todos
los puertos o conectores, ya sea el mini USB del Arduino Nano o el puerto para la tira
reactiva, sobresalgan de la placa. Luego, alrededor de estos se ubicaron el resto de
conponentes por etapas, de acuerdo a como era mas conveniente, tratando de evitar la
mayor cantidad de puentes.
6.5. ENCAPSULADO
Para presentar la placa se diseñó una caja que será impresa mediante una impresora 3D.
En esta encajará la placa y estará compuesta por una parte inferior donde, mediante
tornillos, esta ira sostenida, y una parte superior, que funcionará de tapa para la caja, la
que también ira atornillada.
Esta tapa tendrá ranuras para que sobresalgan: el display, para que se puedan leer los
datos; el pulsador de inicio de medición, los leds indicadores y un interruptor de
encendido. A su vez, esta tendrá un encastre para sostener la batería en su lugar y evitar
pegarla, esto para, si es necesario, poder reemplazarla.
Mientras tanto, la parte inferior de la caja estará compuesta de: 4 ranuras para tornillos
en cada esquina, que servirán para fijar la placa a 3𝑚𝑚 del suelo; 4 ranuras mas para
tornillos que atravesaran la placa y servirán para atornillar la caja; una ranura para que
sobresalga el puerto para la tira reactiva y otra para el conector micro USB del Arduino
Nano.
7. RESULTADOS
Este fue el resultado final de la placa armada:
Luego de realizar las primeras pruebas se observo que el proyecto funcionaba como
debería, mostrando los mensajes que se quería que se muestre en pantalla y pudiendo
realizar mediciones:
Esta medición fue tomada poco después de comer que, si se la compara con otra
medición tomada previamente con un glucómetro comercial, bajo las mismas
condiciones, se puede observar que el número obtenido con este de 108 𝑚𝑔⁄𝑑𝑙 es muy
similar al número obtenido con el medidor construido.
8. CONCLUSIÓN
Si bien se obtuvo una buena medición con el glucómetro construido, comparándola con
la obtenida con el modelo comercial, el resto de mediciones obtenidas no se lograron
comparar, por lo que se puede concluir que, en cuanto a precisión, el dispositivo no es
satisfactorio.
Aun así, este sigue cumpliendo el objetivo de ser para fines demostrativos.
9. BIBLIOGRAFÍA
Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires (s.f.). Definiendo términos.
NOVEDADES SACT. Faba Informa. Recuperado de:
http://www.faba.org.ar/fabainforma/478/sact02.htm
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https://freestylediabetes.co.uk/images/uploads/documents/White_Paper__Clinical_Free
Style_Optium_Neo.pdf
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http://sedici.unlp.edu.ar/bitstream/handle/10915/88628/Documento_completo.pdf?sequ
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