INSTITUCIÓN EDUCATIVA COLEGIO LOYOLA

PARA LA CIENCIA Y LA INNOVACIÓN

Creada por Resolución N° 00003 de Enero 5 de
2010.
DANE: 105001025984      NIT: 900339251-3
Núcleo 920

“Humanismo e investigación para la vida”

Título:

Micorremediación de Cadmio en suelos de cultivo de cacao mediante

Trichoderma Sp.

Autores:

Arbelaez, Mariana
Calle, Mariana
Cardona, Estefany
Florez, Santiago
López, Saray

Asesores:
Gómez, Álvaro1
Montoya, Anlly 2
Urrego, Dallany3

Resumen:

En Colombia los cultivos de cacao presentan una grave problemática: la alta presencia de el
metal pesado Cadmio (Cd) en los suelos, que lleva posteriormente a su acumulación en las
semillas de cacao, ha ocasionado una gran variedad de problemas socio - ambientales. El
presente proyecto de investigación tiene como objetivo determinar el potencial
micorremediador del Trichoderma Sp en tierra contaminada con Cd. Para el desarrollo de
este, se pretendía agregar una solución de esporas extraídas del hongo en muestras de
tierra contaminadas, para posteriormente evaluar el porcentaje de reducción del Cadmio (Cd)
mediante Absorción atómica con lámpara Cd (AA) para más adelante llevar a cabo un
análisis estadístico de los resultados obtenidos.

Palabras clave:

Micorremediación , Cadmio, Theobroma cacao, Trichoderma Sp.

Abstract :

1
Magister de la Universidad de Buenos Aires en Estudios Literarios. Maestro de Investigación Escolar.
2
Licenciada en Ciencias Naturales y Educación ambiental de la Universidad de Antioquia, Magíster en enseñanza de las
ciencias exactas y naturales, estudiante de doctorado en Educación de la Universidad de Antioquia. Docente de biología e
investigación
3
Licenciada de la Universidad de Antioquia en biotecnología. Asesora de investigación en Tecnoacademia, Sena.
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Creada por Resolución N° 00003 de Enero 5 de
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Núcleo 920

“Humanismo e investigación para la vida”

In Colombia, cocoa crops present a serious problem, the high presence of the heavy metal
Cadmium (Cd) in the soil, which subsequently leads to its accumulation in cocoa beans, has
caused a wide variety of socio-environmental problems. The objective of this research project
is to determine the mycoremediator potential of Trichoderma Sp in soil contaminated with Cd.
For its development, it was intended to add a solution of spores extracted from the fungus in
contaminated soil samples, to later evaluate the percentage of reduction of Cadmium (Cd) by
means of Atomic Absorption with a Cd lamp (AA) to later carry out a statistical analysis of the
results obtained.

Keywords:

Mycoremediation, Cadmium, Theobroma cacao, Trichoderma Sp.

Introducción:

La presencia de Cadmio ( Cd ) en los suelos para los cultivos de cacao a ocasionado

problemáticas en los frutos y árboles de Theobroma cacao plantados, estos sufren un
deterioro tanto en la raíz como en las hojas y semillas, que posteriormente absorben el metal
pesado, en consecuencia, se presentan problemas de salud en las personas que consumen
productos derivados del cacao y se dificulta el proceso de exportación de los frutos; con base
en esto, el presente proyecto de investigación, busca micorremediar el Cd presente en
muestras de tierra mediante una solución de esporas provenientes del hongo Trichoderma
Sp a nivel de laboratorio.

Para esto se sembró un cultivó Trichoderma Sp en agar PDA y se incubó durante 7 días para
posteriormente repicarlo; después en 15 ml de agua estéril se inocularon las esporas
cercenadas del hongo para producir una solución acuosa.

Materiales y método:

Siembra del cultivo en agar PDA

- Se realiza el cálculo Estequiométrico:

39 gPDA/ 1000 ml de Agua → 60 ml de Agua = 2.34gPDA

Para determinar los ml de agua y los gramos de agar necesarios para crear el
cultivo.

- En una plancha de agitación se trabaja la disolución a 60 ° C durante 5 minutos.

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Núcleo 920

“Humanismo e investigación para la vida”

- Se esterilizan 5 cajas de petri en el autoclave a 121 C° x 15 psi durante 15

minutos.

- Una vez se completó el proceso de esterilización de los materiales, se sirven

20 ml del medio de cultivo en las cajas de petri.

Activación del hongo.

- Se calienta el agar PDA en la plancha de agitación durante 5 min.

- Se inoculan con Trichoderma sp, 5 cajas de petri con 20 ml de Agar

- Se incuba la muestra a 25°C durante 7 días

- Se realiza un análisis macroscópico y se observa que la cepa de control

presentó un crecimiento radial y masivo; poseia micelio de tono
blanquecino en los bordes y verde en el centro, contaba con una textura
esponjosa y la pigmentación de los conidios era verdecina.

- Se realiza un análisis microscópico y se observa quela misma cepa

posee

Con el objetivo de poseer mayor cantidad de microorganismos útiles para

la muestra experimental, se realiza un Repique del hongo.

- Se esteriliza un asa de aro en el mechero durante 5 segundos.

- Se enfría el asa en un espacio libre del cultivo del hongo.

- Con el asa, en la parte más periférica del cultivo, se cercena 3

fragmentos de los micelios del hongo.

- Se adicionan los fragmentos amputados en el centro de 3 cajas

de petri con cultivo PDA libre de sustancias bacteriostáticas y se
sellaron con papel vinitel.

- Se incuban las placas a 25ºC durante 7 días.

- Solución de esporas.

- Se realiza conteo de esporas en cámara de Neubauer para evaluar el volumen

de esporas.
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“Humanismo e investigación para la vida”

- Se esterilizan 5 tubos de ensayo en autoclave a 121°C, 15 psi durante 15 min.

- Se adicionan 15 mil de agua desionizada a cada tubo de ensayo.

- Se cercenan esporas con asa de aro y se inoculan al tubo de ensayo ( Un

cultivo del hongo por tubo de ensayo )

Resultados y discusión:

Durante la fase de desarrollo del del hongo se realizó un análisis macroscópico y se observó
que la cepa de control presentó un crecimiento radial y masivo; poseia micelio de tono
blanquecino en los bordes y verde en el centro, contaba con una textura esponjosa y la
pigmentación de los conidios era verdecina.

También se realizó un análisis microscópico y se observa que la misma cepa posee forma
elipsoide en los conidios, los cuales a su vez presentan gran abundancia; también se
observaron hifas de núcleo pequeñas y abundantes micelios.

Posteriormente para el desarrollo del segundo objetivo, se realizó un análisis de la solución

de esporas del hongo Trichoderma sp en el cual se llevó a cabo un conteo de esporas en
cámara de Neubauer. Luego se desarrolló el siguiente cálculo:

- 671 esporas / 0.1 ml de Agua → 6710 esporas / 1 ml de agua.

Con base en esto se determinó que el número de esporas disponibles en 5 tubos de ensayo,
( Cada uno con 15 ml de solución ) era de 100.650. Esto con el objetivo de establecer la
cantidad de solución que se inoculará por muestra de tierra contaminada.

En esta etapa del proyecto se culminó la investigación; pues para el desarrollo de la fase
experimental se requería hacer uso de Cadmio concentrado; sin embargo por motivos de
salubridad pública y ambiental no se otorgó los permisos necesarios para su manipulación.
Entre los posibles problemas que se podrían ocasionar se encuentran:

- Intoxicación por acumulación de Cadmio en los riñones.

- Irritación grave del estómago.

- Contaminación de fuentes hídricas.

- Daños en la estructura y en los procesos biológicos del suelo.

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“Humanismo e investigación para la vida”

Por su parte, la fase experimental consistía en sembrar semillas de cacao en envases de

plástico aptos para esterilización repartidos de la siguiente manera: tierra contaminada por
Cd y tierra contaminada por Cd e inoculada con la solución de Trichoderma sp ; esto con el
fin de evaluar los factores fisiológicos y químicos de las plantas durante su crecimiento y las
diferencias que presentan en un periodo de prueba de 3 meses. Transcurrido este tiempo se
tendrá en cuenta el estado de las plantas sembradas en tierra contaminada con Cadmio,
para comparar sus condiciones con aquella que adicionalmente fue inoculada con el medio
líquido de Trichoderma sp y valorar la efectividad micorrmediativa de esta.

Con esta prueba experimental se esperaba que efectivamente se redujera el porcentaje de

Cadmio sin afectar los procesos biológicos naturales en el crecimiento de las plantas y sus
frutos.

Para desarrollar este proceso sin que se generen riesgos de sufrir las secuelas previamente
mencionadas se requiere de un profesional capacitado y acreditado para la manipulación de
metales pesados, también es necesario equipo especializado y un ambiente estrictamente
regulado.

Conclusiones:

A pesar del corto desarrollo que se imparte al proyecto de investigación; durante la fase de
consulta se adquirió un amplio conocimiento sobre hongos y plantas a nivel de
características, componentes y factores de crecimiento; también se adquirió riguroso
conocimiento del Cadmio, especialmente a lo que propiedades, factores contaminantes y
afecciones socio - ambientales se refiere.

Agradecimiento:

Agradecemos al Sena y su institución por facilitarnos el espacio y los materiales necesarios

para llevar a cabo el desarrollo de este proyecto.

Agradecemos a nuestros asesores, pues sin ellos no hubiera sido posible la realización de
este. A Dallany Milena Urrego García, por ser de gran ayuda y utilidad para la asesoría de
todos los procesos realizados en los laboratorios del Sena, a la docente Anlly Viviana
Montoya Rodriguez, por ser quien ayudó y fomentó la idea de la realización de este proyecto,
corrigiendo y siendo un apoyo fundamental para el desarrollo de los conceptos y factores
claves de la investigación; por último al docente Álvaro Gómez Trejos fue de gran ayuda a la
hora de redactar el proyecto de una manera eficaz.

Bibliografía:
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“Humanismo e investigación para la vida”

1. Andrea, R. (2016). Efecto del tratamiento con 3 cepas de estreptomicetos en la

acumulación de cadmio en plantas de Theobroma Cacao L. Universidad Peruana
Cayetano Heredia. https://hdl.handle.net/20.500.12866/1475

2. Beltrán-Pineda, M. E., & Gómez-Rodríguez, A. M. (2016). Biorremediación de metales

pesados cadmio (Cd), cromo (Cr) y mercurio (Hg), mecanismos bioquímicos e
ingeniería genética: una revisión. Revista Facultad de Ciencias Básicas, 12(2),
172–197. https://doi.org/10.18359/rfcb.2027

3. Cayotopa, J. Arévalo, L. Pichis, R. Olivera, D. Rimachi, M. Márquez, K. (2022, 28 abril).

Nuevos agentes de biorremediación de cadmio: Especies de Trichoderma nativas de
la rizósfera de árboles de cacao. Scientia Agropecuaria, 12(2).
http://www.scielo.org.pe/scielo.php?pid=S2077-99172021000200155&script=sci_arttex
t&tlng=en

4. Instituto de Seguridad y Servicios Sociales de los Trabajadores del Estado Mexico,

Azcona, M. I., & Pérez, P. E. (2012). Los efectos del cadmio en la salud. Revista de
Especialidades Médico-Quirúrgicas. https://www.redalyc.org/pdf/473/47324564010.pdf