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18-04-2022

NUCLEO CELULAR
Estructura y función
(parte 1)

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Escuela de Kinesiología - Facultad de Medicina

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Funciones del Núcleo:


Almacenar la información
genética en el ADN. ADN

Recuperar la información
almacenada en el ADN en la
forma de ARN. ARN
Ejecutar, dirigir y regular las
actividades citoplasmáticas, a
través del producto de la
expresión de los genes: las PROTEINA
proteínas.

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Procesos:
Duplicación del ADN y su
ensamblado con proteínas
(histonas) para formar la
cromatina.

Transcripción de los genes


a ARN y el procesamiento de
éstos a sus formas maduras,
muchas de las cuales son
transportadas al citoplasma
para su traducción y

Regulación de la expresión
genética
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Estructura del Núcleo

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matriz nuclear

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Envoltura nuclear
Membrana doble que delimita el compartimiento nuclear.
espacio perinuclear
10 a 50 nm

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Lamina nuclear
Soporte estructural del núcleo, punto de anclaje de la cromatina

Lamina A
B
C

FUNCIÓN: Mantener la estabilidad nuclear, organiza la cromatina y


la estabilidad de los complejos de poros
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. Proteinas transmembrana:
Emerina (lamina A y C)
LBR (receptor lamina B/ADN)
LAPs (lamina B)
LAP2 (lamina A)

Muchir A , Worman H J Physiology 2004;19:309-314

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©2004 by American Physiological Society LAP: PROTEINAS ASOCIADAS A LAMINA
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lamin A/C (C), lamin B1 (D), emerin (E), and the nuclear pore complex protein p62 (F).

Broers J L V et al. Physiol Rev 2006;86:967-1008

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©2006 by American Physiological Society
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quinasas

fosfatasas

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Complejo de Poro Nuclear


Mediador de la traslocación entre núcleo y citoplasma

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núcleo mamífero posee 3000 a 4000 poros o 10 a 20 poros /µm 2

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Estructura Proteica octamérica

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Funciones del Complejo de Poro Nuclear


Exportación Nuclear:
RNAm
RNAt
RNAsn
Pre-ribosomas Difusión pasiva?
Fact. Transcripción Moléculas de 9 nm o 50 kDa

Tráfico de proteínas integrales


de membrana

Importación Nuclear:
Proteínas nucleares
Difusión pasiva? Proteínas ribosomales
Moléculas de 9 nm o 50 kDa Factores de transcripción
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RNPs
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120 nm

9nm

9nm ó 50 kD

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Ciclo de Importación
NLS señales de localización nuclear

1. unión NLS-importina
2. translocación CPN
3. unión RanGTP-importina,
liberación de la proteína
4. RanGTP-Importina hacia el
citosol
5. Hidrólisis GTP, liberación
de la importina

GEF factor intercambiador de nucleotidos guanina


GAP proteina activadora GTPasa
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Ciclo de Exportación

NES señal de exportación nuclear

1. RanGTP- exportina
2. promueve la unión a la
carga señal NES
3. complejo exportina-
carga-GTP al citosol
4. Hidrólisis GTP, liberación
de exportina y carga
5. reciclaje de la exportina

GEF factor intercambiador de nucleotidos guanina


GAP proteina activadora GTPasa
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Matriz Nuclear:
Red de proteínas fibrilares insolubles que establecen uniones
cruzadas a través del espacio nuclear concepto operativo
Soporte físico para el anclaje de los dominios estructurales y
funcionales de la cromatina y de los complejos de replicación,
transcripción y procesamiento del RNA

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Nucleolo
Síntesis y procesamiento de ARNr y
formación de la subunidades ribosómicas
NOR (región organizadora nucleolar)
cromosomas 13, 14, 15, 21 y 22

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fc: centro fibrilar (ADNr y ARN polimerasa I)


d : fibrilar denso (transcripción ARNr procesamiento)
FG : fibrogranular (ensamblaje subunidades ribosomicas)
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ADNr: genes repetitivos en tandem

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ADNr: genes repetitivos en tandem

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NUCLEO CELULAR
Organización de la cromatina
(parte 2)

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Niveles de organización de la Cromatina

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ADN poseen dos cadenas antiparalelas ( una 5 -3 y la otra 3 -5 ) unidas entre sí


mediante las bases nitrogenadas, por medio de puentes de hidrógeno.

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CROMATINA EN UN NÚCLEO INTERFÁSICO

HETEROCROMATINA: R condensada
Constitutiva: secuencias repetidas que no codifican
(Telómeros, centrómeros)
Facultativa: se inactiva en forma especifica según el tipo celular

EUCROMATINA: R laxa, activa transcripcionalmente

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Cromatina está constituida por ADN e Histonas


Histonas: residuos de arginina y lisina (carga +) y que se
asocian fuertemente a los grupos fosfato (carga -) del ADN
Histonas nucleosómicas (102-135 aá)
Participan en el plegamiento del ADN en los nucleosomas
H2A H2B H3 H4
Histonas H1 (220 aá)
- Conecta a los nucleosomas

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HISTONAS SON PROTEÍNAS ALTAMENTE CONSERVADAS


Plegamiento de las histonas: tres alfa helices

N-teminal esta fuera del nucleosoma, puede ser modificado


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Modificaciones Covalentes de los NH3 de las Histonas

Modifican la cromatina
-COCH3
determinando que pueda
transcribir (eucromatina).

Determinan la condensación de
-CH3 la cromatina, silencia la
actividad transcripcional
(heterocromatina facultativa).

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Componentes del nucleosoma: 146 pb ADN (1,8 vuelta)


octámero de Histona (H2A, H2B, H3, H4)

H1

---20 a 70 pb---

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Fibra de 30 nm forma un espiral: SOLENOIDE

Gira en forma de resorte alrededor de un eje central


6 nucleosomas son estabilizados por la histona H1.

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Bucles o asas superenrolladas :


Unidad de replicación (domino funcional) 100.000 pb

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INTERACCIONES PARA LA FORMACIÓN DE BUCLE

Scaffold proteína de la matriz nuclear


Secuencias de unión, ricas en adenina y timina (heterocromatina)
SAR (Scaffold Attachment Regions)
MAR (Matrix Attachment Region)
Topoisomerasas II (girasa): controla el grado de superenrollamiento
del ADN

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Estructura de un Cromosoma Metafásico


Satelite
(NOR)
Brazo p

contrición 2
contrición 1 cinetocoro
centrómero

Cromatida

bandas
Brazo q

Telómeros
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TelómeroS
secuencias repetitivas del extremo del cromosoma
(Heterocromatina)
Protegen de las nucleasas
Evita la fusión de los cromosomas entre sí
Facilita la interacción de los cromosomas a la envoltura nuclear.

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Centrómero
Contricción primaria localizada centralmente o hacia los extremos
del cromosoma
secuencias altamente repetitivas (Heterocromatina)
Interacción con el cinetocoro: estructura proteica que se une al
cromosoma y a los Mts y participa en el desplazamiento hacia los
polos

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Clasificación de los cromosomas


según la posición del centrómero

Metacéntricos: El centrómero se localiza a mitad del cromosoma y los dos brazos presentan igual longitud.
Submetacéntricos: La longitud de un brazo del cromosoma es algo mayor que la del otro.
Acrocéntricos: Un brazo es muy corto (p) y el otro largo (q).
Telocéntricos: Sólo se aprecia un brazo del cromosoma al estar el centrómero en el extremo.
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,X

,Y

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Método de identificación de los cromosomas


TINCIÓN G GIEMSA
Los cromosomas se tratan con tripsina para desnaturalizar las proteínas
cromosómicas y luego se tiñen con Giemsa. Cada par de cromosomas se
tiñe con un patrón característico de bandas claras y oscuras.

(R)

Estructurales Específicos

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Idiograma = representación esquemática del


patrón de bandas G de un cariotipo (se numeran
los segmentos según la nomenclatura estándar)

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