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Los cultivos celulares y sus aplicaciones I (cultivos de células animales)

Se han desarrollado metodologías que aíslan células para obtener poblaciones celulares

homogéneas.

1. Obtención de células:

El primer paso para aislar células consiste en separar la matriz extracelular que las

mantiene unidas, con ese fin es necesario tratar la muestra de tejido con diversas enzimas

proteolíticas (como tripsina y colagenasas) que degradan las proteínas de la matriz; y también se

utilizan agentes (como el EDTA ácido etilendiaminotetraacético).

Para separar los diferentes tipos celulares se pueden utilizar varios métodos:

a) La elutriación centrífuga separa las células en función de su tamaño. El elutriador

consiste en una centrifugadora células.

b) La capacidad que tienen algunos tipos celulares de adherirse al vidrio o al

plástico.

c) La afinidad de anticuerpos hacia determinados epítopos de la superficie celular.

d) La unión a ciertos anticuerpos acoplados a colorantes fluorescentes.Las células

marcadas por interacción con el anticuerpo pueden ser separadas de las no marcadas en un

separador de células activado por fluorescencia

e) La técnica, denominada “microdisección de captura por láser”, puede utilizarse,

por ejemplo, para aislar diferentes partes de un tumor, y analizarlas. Otra técnica relacionada

emplea un láser para disectar un grupo de células y catapultarlas a un contenedor apropiado para

comenzar los análisis de las mismas.

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2. Tipos de cultivos:

a) Cultivos primarios: son aquellos cultivos preparados directamente a partir de los

tejidos de un organismo, sin proliferación (multiplicación) in vitro.

b) Cultivos secundarios: en estas condiciones, las células suelen crecer hasta cubrir

la superficie del recipiente de cultivo, formando una monocapa (capa de una

célula de espesor), donde como consecuencia del contacto entre las células se

detiene temporalmente su proliferación, hasta que se las subcultiva a un

recipiente con medio fresco; así podrán subcultivarse durante semanas o meses.