4 Uce

UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR
FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

CARRERA DE BIOQUÍMICA CLÍNICA
Evidencia científica del diagnóstico para la Enfermedad de Pompe infantil y de inicio tardío en
Ecuador
Proyecto de investigación presentado como requisito previo para la obtención del Título de
Bioquímico Clínico
AUTOR: Vallejos Tabango Kevin Eduardo

TUTOR: Eduardo Patricio Mayorga Llerena
DMQ, septiembre 2020

Derechos de Autor
Yo, Kevin Eduardo Vallejos Tabango con CI: 1003993845, en calidad de autor y titular de los
derechos morales y patrimoniales del trabajo de titulación: “Evidencia científica de diagnóstico
para la Enfermedad de Pompe infantil y de inicio tardío en Ecuador”, modalidad trabajo de
investigación, de conformidad con el Art. 114 del CÓDIGO ORGÁNICO DE ECONOMÍA
SOCIAL DE LOS CONOCIMIENTOS, CREATIVIDAD E INNOVACIÓN, concedo a favor de
la Universidad Central del Ecuador la licencia gratuita, intransferible y no exclusiva para el uso no
comercial de la obra, con fines estrictamente académicos.
Conservados a mi favor todos los derechos de autor sobre la obra, establecidos en la normativa
citada. Así mismo, autorizo a la Universidad Central del Ecuador para que realice la digitalización
y publicación de este trabajo de titulación en el repositorio virtual, de conformidad a lo dispuesto
en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior.
El autor declara que la obra objeto de la presente autorización es original en su forma de
expresión y no infringe el derecho de autor de terceros, asumiendo la responsabilidad por cualquier
reclamación que pudiera presentarse por esta causa y liberando a la Universidad Central del
Ecuador medio del presente documento, dejo constancia que he participado en la elaboración del
Proyecto.
Firma
______________________________
Kevin Eduardo Vallejos Tabango
Cd. N°1003993845
Correo. kevallejos@uce.edu.ec
ii
Aceptación del Tutor
Por medio del presente documento, dejo constancia que he participado en la elaboración del
Proyecto de Investigación, presentado por el (la) señor (a/ita) Kevin Eduardo Vallejos Tabango,
para optar por el Título Profesional (O Grado Académico) en Bioquímica Clínica, cuyo título es:
“Evidencia científica de diagnóstico para la Enfermedad de Pompe infantil y de inicio tardío en
Ecuador”.
Dejo constancia, además, que dicho tema no consta en la base de datos de tesis aprobadas en la
Facultad (Instituto), y en tal virtud, ACEPTO realizar la asesoría, en calidad de tutor, durante el
proceso de ejecución del presente Proyecto de Investigación, hasta su presentación y sustentación
por parte del tribunal lector-evaluador que se designe.
En la ciudad de Quito, a los 12 días del mes de junio de 2020.
Firma
_________________________
Dr. Eduardo Patricio Mayorga Llerena
Cd. N° 1801508019
iii
Constancia de Aprobación del Trabajo Final por el Tribunal
El Tribunal constituido por la Dra. Verónica Sánchez, la Dra. Lourdes Pazmiño luego de revisar
el trabajo de investigación titulado: “Evidencia científica de diagnóstico para la Enfermedad de
Pompe infantil y de inicio tardío en Ecuador¨, previo a la obtención del título Bioquímico Clínico
presentado por el señor estudiante Kevin Eduardo Vallejos Tabango, APRUEBA el trabajo
presentado.
Para constancia de lo actuado firman:
Firma Firma
_________________________ _________________________
Dra. Verónica Sánchez Dra. Lourdes Pazmiño
Cd. N° 1710358746 Cd. N° 1714392907
iv
Índice de Contenidos
Derechos de Autor......................................................................................................................... ii
Aceptación del Tutor ................................................................................................................... iii
Constancia de Aprobación del Trabajo Final por el Tribunal ................................................ iv
Índice de Contenidos..................................................................................................................... v
Lista de Anexos ........................................................................................................................... vii
Lista de Figuras .......................................................................................................................... viii
Lista de Tablas ............................................................................................................................. ix
Listado de Abreviaturas ............................................................................................................... x
Resumen ....................................................................................................................................... xii
Abstract ....................................................................................................................................... xiii
Introducción .................................................................................................................................. 1
Capítulo I ....................................................................................................................................... 3
El Problema ................................................................................................................................... 3
1.1 Planteamiento del Problema ......................................................................................... 3
1.2 Formulación del Problema ............................................................................................ 6
1.3 Preguntas Directrices ..................................................................................................... 6
1.4 Objetivos ......................................................................................................................... 6
1.4.1 Objetivo General ............................................................................................................ 6
1.4.2 Objetivos Específicos ..................................................................................................... 7
1.5 Justificación e Importancia ........................................................................................... 7
1.5.1 Marco Teórico .............................................................................................................. 10
Capítulo II.................................................................................................................................... 19
Metodología de Investigación..................................................................................................... 19
2.1 Diseño de Investigación ..................................................................................................... 19
2.1.1 Paradigma de Investigación ........................................................................................ 19
2.1.2 Nivel de Investigación.................................................................................................. 20
2.1.3 Tipo de Investigación ................................................................................................... 20
2.2 Población y Muestra.......................................................................................................... 20
2.3 Diseño Metodológico ......................................................................................................... 21
2.3.1 Criterios de Evaluación ............................................................................................... 21
2.3.2 Técnica de Investigación ............................................................................................. 22
v
2.4 Hipótesis Conceptual ........................................................................................................ 23
2.5 Técnicas e Instrumentos ................................................................................................... 23
2.6 Procesamiento de Datos .................................................................................................... 24
2.7 Resultados y Beneficios Esperados .................................................................................. 25
Capítulo III .................................................................................................................................. 26
Resultados y Discusiones ............................................................................................................ 26
3.1 Análisis de Datos ............................................................................................................... 26
3.2 Resumen de la Búsqueda .................................................................................................. 27
3.3 Resultados .......................................................................................................................... 35
3.3.1 Categorías y Subcategorías ......................................................................................... 35
3.3.2 Tipo de Muestra ........................................................................................................... 36
3.3.3 Pruebas Enzimáticas ................................................................................................... 37
3.3.4 Prueba Morfológica ..................................................................................................... 41
3.3.5 Pruebas Moleculares ................................................................................................... 42
3.3.6 Validez Diagnóstica ..................................................................................................... 44
3.3.7 Pseudodeficiencia ........................................................................................................ 46
3.3.8 Actualidad Diagnóstica ............................................................................................... 47
3.3.9 Actualidad Diagnóstica en el Ecuador ....................................................................... 47
3.3.10 Algoritmos Diagnósticos ............................................................................................ 50
3.4 Discusiones ......................................................................................................................... 56
Capítulo IV .................................................................................................................................. 59
Conclusiones y Recomendaciones.............................................................................................. 59
Bibliografía .................................................................................................................................. 62
vi
Lista de Anexos
Anexos ........................................................................................................................................................ 71
Anexo A. Árbol de Problemas.............................................................................................................. 71
Anexo B. Registro de Base de Datos 1 ................................................................................................. 72
Anexo C. Registro de Base de Datos 2 ................................................................................................. 89
vii
Lista de Figuras
Figura 1. Diagrama de PRISMA. Metodología de la búsqueda ........................................................... 27

Figura 2. Primera búsqueda en bases de datos...................................................................................... 28
Figura 3. Preselección de la bibliografía .............................................................................................. 29
Figura 4. Selección de la bibliografía ................................................................................................... 30
Figura 5. Proceso de Selección de Información ................................................................................... 30
Figura 6. Categorías registradas............................................................................................................ 35
Figura 7. Subcategorías registradas ...................................................................................................... 36
Figura 8. Tipo de muestras más usadas ................................................................................................ 37
Figura 9. Estudio del GAA ................................................................................................................... 38
Figura 10. Metodologías para la determinación del GAA .................................................................... 39
Figura 11. Otras pruebas enzimáticas ................................................................................................... 40
Figura 12. Metodologías para la determinación de los niveles de tetrasacárido................................... 41
Figura 13. Frotis sanguíneo con tinción PAS ....................................................................................... 42
Figura 14. Metodologías para el análisis genético ................................................................................ 43
Figura 15. Validez diagnóstica de la actividad del GAA...................................................................... 45
Figura 16.Validez Diagnóstica para las pruebas moleculares .............................................................. 46
Figura 17. Algoritmo General para el Diagnóstico de EP .................................................................... 51
Figura 18. Propuesta de un algoritmo diagnóstico para Ecuador ......................................................... 54
viii
Lista de Tablas
Tabla 1. Signos y síntomas de los subtipos de la variante infantil ........................................................ 14

Tabla 2. Términos empleados en las bases de datos ............................................................................. 26
Tabla 3. Documentos revisados por cada año ....................................................................................... 31
Tabla 4. Documentos por idioma .......................................................................................................... 32
Tabla 5. Tipos de Documentos ............................................................................................................. 32
Tabla 6. Nivel de Evidencia .................................................................................................................. 33
Tabla 7. Grados de Recomendación ..................................................................................................... 34
ix
Listado de Abreviaturas
EP: Enfermedad de Pompe
GAA: Alfa-Glucosidasa Ácida
EIM: Errores Innatos del Metabolismo
DBS: Gotas de Sangre Seca Recogida sobre Papel Filtro
GSDII: Glucogenosis de Tipo II
EDL: Enfermedad de Deposito Lisosomal
CK: Creatinina Kinasa
GLc4: Glucosa Tetrasacárido
NHI: National Institutes of Health
NCBI: National Center for Biotechnology Information
PAS: Ácido Peryódico Schiff
MS/MS: Espectrometría de masas en tándem
FIA-MS/MS: Espectrometría de masas en tándem de inyección de flujo
LC-MS/MS: Cromatografía liquida con espectrometría de masas
FMD: Fluorometría de Microfluidos Digitales
tNGS: Secuenciación de próxima generación dirigida
SPN: Análisis de matriz de polimorfismos de un solo nucleótido
WES: Secuenciación de Exoma Completo
PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa
RT-PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa con transcriptasa inversa
qPCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa en Tiempo Real o Cuantitativa
VPP: Valor Predictivo Positivo
x
CNVs: Número de Copias Genómicas
MSP: Ministerio de Salud Pública
COS: Código Orgánico de la Salud
FEPEL DASHA: Fundación Ecuatoriana de Pacientes con Enfermedades de Depósito
Lisosomal
xi
TÍTULO: Evidencia científica del diagnóstico para la Enfermedad de Pompe infantil y de inicio
tardío en Ecuador.
Autor: Kevin Eduardo Vallejos Tabango
Tutor: Dr. Eduardo Patricio Mayorga Llerena
Resumen
La Enfermedad de Pompe (EP) al ser considerada una enfermedad rara o huérfana debido a su baja
prevalencia, en el Ecuador ha sido relegada a un subdiagnóstico y diagnóstico tardío por motivo
de la falta de información de un algoritmo y de guías clínicas pertinentes que ayuden al profesional
de salud a cómo actuar ante una sospecha. El presente trabajo pretende recopilar la información
validada y actualizada acerca del diagnóstico para la Enfermedad de Pompe infantil y de inicio
tardío propuestas en otras partes del mundo, para comparar con la actualidad de la enfermedad en
el Ecuador, determinando en qué estado se encuentra el diagnóstico en el país y proponiendo un
posible algoritmo diagnóstico. Se realizó una revisión bibliográfica, con el uso base de datos y
portales científicos como Scopus, PubMed, Science Direct, Scielo, entre otros; con una ventana de
tiempo entre 2009 a 2020. Los resultados demostraron qué método diagnóstico más utilizado y
estudiado es la determinación de la enzima GAA; para la confirmación del diagnóstico es necesario
la realización de una prueba de segundo nivel, como puede ser el método de secuenciación de
ADN de Sanger, los niveles de tetrasacárido, determinación de linfocitos PAS positivos y/o el
cálculo de la relación creatina creatinina; en cuanto a la situación actual del Ecuador hacen falta
estudios tanto de prevalencia como diagnóstico frente a una sospecha clínica de EP en la población
ecuatoriana.
PALABRAS CLAVE: ENFERMEDAD DE POMPE, GLUCOSIDASA ACIDA, GLUCOSA
TETRASACÁRIDO, INICIO INFANTIL, INICIO TARDÍO, CRIBADO NEONATAL.
xii
TÍTULO: Scientific evidence for diagnosis for childhood and late-onset Pompe disease in
Ecuador.
Author: Kevin Eduardo Vallejos Tabango
Tutor: Dr. Eduardo Patricio Mayorga Llerena
Abstract
Pompe disease (PD), is considered a rare or orphan disease due to its low prevalence, in Ecuador
this disease has been downgraded to an underdiagnosis and late diagnosis due to the lack of
information from on an algorithm and relevant clinical guidelines that help the health professional
how to act in the event of suspicion. This current work aims to compile the validated and updated
information about the diagnosis for childhood Pompe disease and late-onset proposed in other
parts of the world, to compare with the current status of the disease in Ecuador, determining in
what state the diagnosis is in the country and proposing a possible diagnostic algorithm. A
bibliographic review was carried out, with the use of database and scientific portals such as Scopus,
PubMed, Science Direct, Scielo, among others; With information ranking between 2009 and 2020.
The results showed that the diagnostic method most used and studied is the determination of the
GAA enzyme; To confirm the diagnosis, it is necessary to perform a second level test, such as the
Sanger DNA sequencing method, tetrasaccharide levels, determination of PAS-positive
lymphocytes, and/or calculation of the creatine-creatinine ratio; Regarding the current situation in
Ecuador, both prevalence and diagnosis studies are needed when showing clinical suspicion of PD
in the Ecuadorian population.
KEY WORD: POMPE DISEASE, ACID GLUCOSIDASE, GLUCOSE TETRASACCHARIDE,
CHILDHOOD-ONSET, LATE-ONSET, NEONATAL SCREENING.
xiii
Introducción
La Enfermedad de Pompe es un trastorno denominado glucogenosis de tipo II, el cual se ve
involucrado el depósito de glucógeno a nivel lisosomal donde la ausencia de la enzima alfa
glucosidasa ácida evita que se realice un proceso de glucogenosis normal. Tiene el tipo de herencia
autosómico recesivo, y puede llegar afectar al músculo esquelético, cardíaco y también en otros
órganos y sistemas que pueden verse alterados (González Hernández, 2019).
El diagnóstico precoz de esta enfermedad ayuda al recién nacido ya que en ellos la enfermedad
es rápidamente progresiva, con esto se reduce la mortalidad y morbilidad neonatal, así mismo en
las formas tardías sirve como diagnóstico diferencial sobre otras enfermedades musculares,
conocer los métodos diagnósticos conlleva a una mejora en la identificación entre los individuos
aparentemente sanos de aquellos que están en riesgo a sufrir esta enfermedad de desorden
metabólico (Longo et al., 2019).
El presente trabajo consta de cuatro capítulos detallados de la siguiente manera:
Capítulo I El problema consta de: planteamiento del problema, formulación del problema en
forma de pregunta para una mejor comprensión del tema, las preguntas directrices, los objetivos
tanto el general como los específicos y la justificación e importancia del proyecto de investigación.
Capítulo II Marco metodológico se encuentra una descripción de la metodología del proyecto,
el diseño de la investigación, el paradigma, el nivel y los tipos de investigación, categorización de
variables, instrumentos para la recolección de datos, con la respectiva técnica de procesamiento y
análisis de datos.
Capitulo III Resultados y discusiones, donde se presenta el análisis y la interpretación de los
datos conseguidos mediante la metodología aplicada, con la consecuente evaluación y discusión
para dar una resolución y justificación a la hipótesis planteada.
1
Capítulo IV Conclusiones y recomendaciones. Donde se expone las impresiones acerca de los
resultados obtenidos, estableciendo una solución los objetivos planteados y finalmente
proporcionando las recomendaciones que amerite. Se presenta también la respectiva bibliografía
y los anexos.
2
Capítulo I
El Problema
1.1 Planteamiento del Problema
La Enfermedad de Pompe (EP) o glucogenosis de tipo II, es una enfermedad de depósito
lisosomal, que por causa de una deficiencia de la enzima alfa-glucosidasa ácida (GAA)
proveniente de la autofagia lisosómica, provoca la acumulación de glucógeno lisosomal que a nivel
sistémico llega afectar al corazón, diafragma y músculos, entre otros órganos (González
Hernández, 2019).
Esta enfermedad también entra en el grupo de los errores innatos del metabolismo (EIM), ya
que adquiere su origen a nivel genético que conlleva a las mutaciones de genes, que pueden alterar
un proceso enzimático. La EP se puede manifestar tanto en los lactantes como en la edad adulta
(inicio tardío), y el no ser diagnosticada a tiempo puede provocar un retraso en el desarrollo motriz
en los niños y debilidad muscular extrema en adultos, llegando incluso, al deceso del neonato antes
de su primer año de vida y en los adultos a la pérdida de su movilidad, esta progresión rápida de
la enfermedad hace evidencia de que su diagnóstico debe ser dado a tiempo para tratarlo de manera
rápida y efectiva (González Hernández, 2019).
La incidencia verdadera de la enfermedad es todavía una incógnita, pero en estudios realizados
en población holandesa y americana se estima que es de 1 de cada 40.000 nacidos vivos en la
población mundial. En el caso de Latinoamérica se desconoce de registros y datos epidemiológicos
actualizados, debido al poco manejo por parte de los profesionales de la enfermedad al ser esta de
frecuencia rara, guiados por estos datos, estadísticamente, en el Ecuador al menos existen 400
casos por diagnosticar, o son subdiagnosticados con otra afección muscular (Arias et al., 2017;
Leslie & Bailey, 2007).
3
Actualmente, el diagnóstico de la enfermedad de Pompe comprende en un conjunto de
procedimientos que involucran desde la clásica anamnesis, pruebas de carácter clínico, análisis
bioquímicos y pruebas especiales que son específicas de la enfermedad, como la determinación
enzimática de la GAA en el suero del paciente que, con un resultado de actividad bajo, da pie a
que se continúe con su posterior confirmación mediante la actividad de la enzima en tejido o por
pruebas moleculares. Países de Latinoamérica como Chile, Colombia y México, tienen una
prevalencia baja de la enfermedad análoga a Ecuador, sin embargo, a diferencia de Ecuador, en
estos países es posible realizar el diagnóstico en cuanto a pruebas especiales en los pacientes con
sospecha clínica de EP. De la misma forma estos países han planteado guías clínicas basadas en la
evidencia científica actualizada (estado de arte), donde se describe el diagnóstico y el tratamiento
de la enfermedad, esto, en función del estado actual de los casos reportados en el territorio y como
se resolvió su diagnóstico posteriormente, para que así se tenga una actualización de la información
en el manejo de la Enfermedad de Pompe en cada país. Este tipo de información, ayuda a que los
médicos asistentes puedan actuar ante una sospecha de EP y conozcan la actualidad de la oferta
de pruebas diagnósticas en el país y de su manejo, (CENETEC, 2010). Hay que recalcar que los
diversos métodos en los que se basa las pruebas analíticas deben tener una sensibilidad y
especificidad aceptable y a su vez sea asequible para el paciente.
A pesar de que el diagnóstico de la enfermedad es factible, en el Ecuador tan solo se ha podido
diagnosticar a 5 pacientes con la afección, dando un margen de al menos 1,25% de la población
prevaleciente en el país, así, de acuerdo con la estadística alrededor de 300 pacientes reciben un
diagnóstico no acertado y por lo tanto un tratamiento inadecuado. Las causas de que no exista un
diagnóstico temprano y apropiado de la enfermedad se deben a la demora de su sospecha, ya que
actualmente existe un desconocimiento de los profesionales, en cuanto a su manejo y protocolos
4
diagnósticos, en forma de guías y actualización de información, esto conlleva a que su diagnóstico
se demore hasta 7 años en dar con él (Coello, 2017). Además, la probable causa de
desconocimiento por parte de profesionales puede deberse a que los mismos se guían por su baja
prevalencia en el país, así, dejándolo como última opción en la sospecha clínica, implicando su
tardío diagnóstico.
En Australia, Taiwán, EE. UU, España entre otros, el diagnóstico precoz para la fase inicial de
la EP, lo incluyen dentro del cribado neonatal, mientras que para América Latina la inclusión de
la EP en el tamizaje neonatal es selectivo, al considerarla como una afección sin prioridad, no
obstante, los lineamientos diagnósticos en algunos países están instaurados, en base a la
actualización científica del diagnóstico y del estado actual de la enfermedad en cada país. Caso
omiso es lo que sucede en Ecuador, donde la EP no se establece en el programa de tamizaje
neonatal por falta de soporte en el diagnóstico, y a su vez no existen guías de prácticas clínicas
específicas de la enfermedad que actualicen el manejo de la Enfermedad de Pompe de acuerdo con
la situación actual del país.
Si no se establece la evidencia científica del diagnóstico de la Enfermedad de Pompe en sus dos
formas (infantil e inicio tardío), relacionada con la realidad de la enfermedad en el Ecuador, esto
acarreará la falta de conocimiento en cuanto al correcto manejo ante la sospecha clínica, y
continuará el subdiagnóstico y el consecuente manejo errado de un posible tratamiento, afectando
así la calidad de vida del paciente que, dependiendo de su edad tendrá posteriormente
complicaciones que lo lleven a postrarse y a fallas respiratorias que podrían comprometer a la vida
del paciente.
5
1.2 Formulación del Problema
¿Es factible el diagnóstico de la Enfermedad de Pompe a través del diseño de un algoritmo,
mediante la búsqueda de la evidencia científica actualizada de los protocolos, guías y metodologías
de diagnóstico, establecidos para su forma infantil y de inicio tardío, en pacientes con sospecha
clínica en base a la realidad diagnóstica en el Ecuador?
1.3 Preguntas Directrices
¿Existe el conocimiento general sobre de la Enfermedad de Pompe infantil y de inicio tardío,
en cuanto a diagnóstico?
¿Es posible recopilar el estado de arte actualizado acerca de los diferentes diagnósticos
bioquímicos y moleculares sobre la Enfermedad de Pompe?
¿Hay variación en cuanto a metodologías diagnósticas entre la forma de inicio tardío y la forma
adulta?
¿Existen avances científicos sobre nuevas metodologías para el screening de la Enfermedad de
Pompe?
¿Se puede establecer los mejores métodos en base al análisis comparativo correlacionando por
sensibilidad, especificidad y valores predictivos?
¿Existe evidencia científica sobre la actualidad del diagnóstico de la Enfermedad de Pompe en
Ecuador?
¿Se puede elaborar algoritmos actualizados basados en guías clínicas y estudios actuales de la
Enfermedad de Pompe?
1.4 Objetivos
1.4.1 Objetivo General
6
Describir la evidencia científica actualizada sobre el diagnóstico de la Enfermedad de Pompe
infantil y de inicio tardío conforme a la situación actual en el Ecuador.
1.4.2 Objetivos Específicos
- Describir las diferencias metodologías diagnósticas entre la forma de inicio tardío y la
forma adulta.
- Recopilar el estado de arte actualizado acerca de los diferentes diagnósticos bioquímicos y
moleculares sobre la Enfermedad de Pompe.
- Evaluar avances científicos sobre nuevas metodologías para el screening de la Enfermedad
de Pompe.
- Determinar los mejores métodos en base al análisis comparativo correlacionando por
sensibilidad, especificidad y valores predictivos.
- Establecer evidencia científica sobre la actualidad del diagnóstico de la Enfermedad de
Pompe en Ecuador.
- Elaborar algoritmos actualizados basados en guías clínicas y estudios actuales para
Enfermedad de Pompe.
1.5 Justificación e Importancia
La enfermedad de Pompe al ser una enfermedad de progresión rápida que si no se trata a tiempo
puede evolucionar precipitadamente hasta causar graves complicaciones o la muerte, el
diagnóstico ante su sospecha es fundamental para realizar un tratamiento rápido y efectivo, algo
que en Ecuador no sucede en cuanto a diagnóstico con pruebas de laboratorio clínico, ya que
actualmente, se desconoce de protocolos y guías establecidas por la autoridades pertinentes para
el manejo de la enfermedad en el país, con este conocimiento difundido la enfermedad seria
fácilmente diagnosticada a partir de un prueba de laboratorio de sangre, esto puede economizar al
7
paciente que es derivado a distintas unidades médicas gastando recursos económicos en varias
pruebas de diagnóstico, y que al final sea diagnosticado con otra afección muscular, aplicando un
tratamiento incorrecto.
Según la tesis doctoral elaborado por (Lobato, 2012), enfocada a la actualización del algoritmo
de la Enfermedad de Pompe, en la implantación de la determinación de GAA en muestras de sangre
seca en papel filtro como screening, se determinó que de los 506 individuos de estudio, 16
pacientes de diferentes edades fueron diagnosticados con la enfermedad de Pompe, estableciendo
así 4 técnicas dentro del algoritmo: la prueba de la actividad α-glucosidasa ácida en sangre seca
recogida sobre papel (DBS), la determinación de actividad α-glucosidasa ácida intralinfocitaria, la
determinación de niveles de glucosa tetrasacárido en orina y detección molecular de la mutación.
Esto se traduce al desuso de la utilización de pruebas diagnósticas clínicas e histopatológicas como
la biopsia que implica un riesgo importante para el paciente, por ese motivo, estas técnicas
diagnósticas se obviarán en la investigación para la realización de los algoritmos.
Además de las pruebas bioquímicas, de acuerdo a la tesis “Identificación y caracterización
funcional de mutaciones en el gen GAA en pacientes colombianos afectados por la Enfermedad
de Pompe” de la autora Mónica Niño Martínez que se realizó en el año 2013 en la ciudad de
Bogotá, establece como punto principal la investigación de las mutaciones de GAA en pacientes
que ya fueron diagnosticados, relacionando tales mutaciones con la actividad enzimática del GAA
(Niño Martínez, 2013).
La etapa del estudio en donde se evalúa la actividad de la GAA, reporta resultados frente a una
población control, en relación a los pacientes con Pompe, los controles mostraron un porcentaje
de inhibición fue menor al 85 % (percentil 95 %= 83,9); mientras que, individuos afectados por
enfermedad de Pompe (n=13) un porcentaje de inhibición de 87,2 a 95,9 (Niño Martínez, 2013).
8
Esto demuestra que la inhibición del GAA en pruebas diagnósticas serológicas evidencia su falta
de actividad en personas con la enfermedad.
En cuanto a estudios en el Ecuador, son muy escasos, uno de ellos es el realizado como parte
de tesis de pregrado, por Ganchala Andaluz Cristina Elizabeth, en el año 2018, la "Propuesta de
implementación de Pruebas Bioquímicas para Tamizaje de Errores Innatos del Metabolismo en el
Laboratorio Clínico de la Facultad de Ciencias Químicas de la Universidad Central del Ecuador
2017 - 2018", establece que los EIM son viables para su diagnóstico en laboratorios del Ecuador,
siempre y cuando la capacidad técnica y operativa sea conforme con los profesionales del área,
igualmente acerca de la enfermedad de Pompe establece que la barrera de ofertar pruebas
diagnósticas son varias, como la demanda, el costo de kits y la prevalencia de la enfermedad
(Ganchala Andaluz, 2018). Con estas conclusiones podemos plantear que uno de los objetivos de
esta investigación es establecer la actualidad diagnóstica en el país y examinar hasta donde es
probable el diagnóstico de la enfermedad a partir de la sospecha clínica.
La idea de que sea considerado como una prueba dentro del programa de tamizaje neonatal, se
justifica a que el recién nacido con la afección puede fallecer si no es diagnosticado antes del año
de vida, con la prueba realizada en este período de vida se evitaría rápidamente las complicaciones.
De acuerdo con la ley 67 reformada de la ley orgánica de la salud en el año 2012, que incluye a
las enfermedades raras y catastróficas, la enfermedad de Pompe forma parte de estas, con esto, su
diagnóstico dado ayudará a las familias afectadas en cuanto a soporte y facilidad de que adquieran
el tratamiento, ya que puede que la familia no pueda acceder fácilmente a los mismos.
Así mismo, existen otros países con semejante prevalencia de la enfermedad que informan a su
pertinente comunidad médica sobre el manejo de la EP, en cuanto al diagnóstico y si el mismo es
posible aplicarlo dentro de su territorio, o si se ajustan a medidas internacionales (derivación de
9
pruebas), basándose en el estado del arte actual de la enfermedad para el screening tanto de la
forma de inicio tardío como la forma en adultos, pero, como ya se había mencionado la posibilidad
de realizar el diagnostico en cuanto a pruebas bioquímicas en el Ecuador, así como el screening
no existe o se desconoce, por lo que existe la necesidad de dar a conocer hasta donde es posible el
diagnóstico en el país.
1.5.1 Marco Teórico
A la enfermedad de Pompe, también se la conoce como glucogenosis de tipo II, déficit de
maltasa ácida o deficiencia de alfa-glucosidasa ácida, esta es una enfermedad rara neuromuscular,
hereditaria de tipo autosómica recesiva, que se caracteriza por el acúmulo de glucógeno en el
lisosoma (depósito lisosomal) a causa de una deficiencia de la actividad enzimática de la alfa-
glucosidasa acida en los lisosomas, puede afectar principalmente al tejido muscular. El gen que
codifica la enzima α-glucosidasa está ubicado en el brazo largo del cromosoma diecisiete
específicamente el (17q25.2-q25.3), y de acuerdo a los registros del Centro Erasmus MC de
Holanda para la EP ya se han identificado aproximadamente más de 350 mutaciones (Barba-
Romero et al., 2012; Pompe Center, 2020).
De forma general esta enfermedad afecta a la función de células y tejidos, específicamente el
musculo liso, cardiaco y esquelético, produciendo debilidad muscular de forma rápida y progresiva
alcanzando finalmente a ser una enfermedad multisistémica, y en algunos casos llegar a la muerte.
La manifestación de la EP puede comprender a un amplio rango de edades, ya que puede afectar
a infantes, adolescentes y adultos, tanto la progresión como la afectación a los órganos puede variar
entre una persona a otra. Es por eso que su pronóstico es complicado, sin embargo, la severidad
de la enfermedad puede relacionarse de forma inversa con la actividad enzimática del GAA
(Lobato, 2012).
10
La EP fue descrita por primer vez en el año 1932 por el medico Joannes Casiano Pompe a través
de su publicación “Concerning idiopathic hypertrophy of the heart”, donde explica el caso de una
niña de 7 meses de edad que fallece por una supuesta neumonía, al realizarle la correspondiente
autopsia se observa una hipertrofia cardíaca y a partir de muestras de tejido cardiaco pudo observar
alteraciones de las células musculares debido a la acumulación masiva del glucógeno en las
vacuolas, siendo esto la responsable de la deformación de las fibras cardiacas (Pompe, 1932).
Para el año 1954, la enfermedad sospechosa del cúmulo de glucógeno en células musculares se
la clasificó como uno de los desórdenes de almacenamiento de glucógeno siendo catalogado como
el tipo II (GSDII) (Y. H. Chien, 2009). A pesar de ser identificada la enfermedad de Pompe,
estudios posteriores liderados por el Dr. H.G. Hers, describieron que la base de la afección en
forma de cúmulos de glucógeno se debía a la ausencia de enzimas lisosomales, específicamente la
alfa glucosidasa ácida presentes en los lisosomas. A partir de estos descubrimientos se empiezan
a realizar estudios sobre este nuevo grupo de enfermedades, denominadas como Enfermedades de
depósito lisosomal (EDL).
Actualmente, es incógnita el número exacto de personas que tienen la EP. Las investigaciones
y registros existentes han sugerido que la incidencia de la enfermedad es de aproximadamente de
1 de cada 40.000 nacidos en la población mundial, esta prevalencia incluye de forma general a las
todas las formas de la EP, así como la edad, el sexo y la etnografía. No obstante, los datos separados
en cuanto a raza y cada forma clínica son variables. Como en el caso de la población caucásica
donde la frecuencia de la forma infantil es de 1:100.000 mientras que la forma tardía es de 1:60.000
(Martiniuk et al., 1998). Evaluados estadísticamente estos datos, dan como estimado de 5.000-
10.000 con la enfermedad a nivel mundial (Kanters et al., 2011).
11
El proceso fisiopatológico de esta enfermedad de depósito lisosomal se basa en una cadena de
efectos denominada hipótesis citotóxica, en primera instancia el acúmulo intracelular de una
molécula como el glucógeno que al ser compleja su degradación sea limitada. La fisiopatología de
esta enfermedad implica que la enzima lisosomal GAA cataliza la hidrólisis del glucógeno en un
pH de entre 4 a 5 para producir la ruptura de los enlaces α 1-4 y α 1-6 de la molécula; a causa de
esto existe la acumulación de este en diversos tejidos. La continua acumulación del glucógeno
provoca una alteración de la morfología de la estructura celular, y consecuentemente la ruptura de
la membrana lisosomal, esta etapa se denomina la lesión básica o primaria lo que origina una
interferencia en el progreso normal de autofagia; este glucógeno liberado se dirige hacia el citosol
lo cual constituye una acumulación tanto intra como extra lisosomal. El exceso de glucógeno en
la célula afecta a miocito y produce un daño en el aparato contráctil de las fibras musculares
(Bravo-Oro et al., 2013; Dubrovsky et al., 2014).
El defecto a nivel genético de la enfermedad de Pompe se debe a que existe una o varias
mutaciones qué pueden ser homocigótica o heterocigótica, Las diversas mutaciones pueden
ubicarse en diferentes secciones del gen y puede afectar en las diversas fases de la síntesis de la
enzima, es decir, estas mutaciones pueden intervenir tanto en los procesos de la síntesis de la
proteína, la postraducción y la maduración. Igualmente, el predominio de una u otra mutación
depende de ciertas condiciones etnográficas, tal es el caso de qué población caucásica predomina
la mutación c.-32-13T>G (IVS1) está presente en al menos un alelo entre el 36 a 90% , donde la
síntesis está entre el 10 al 20% de la enzima; en Europa se ha visto una mutación común de él
c.del525 que se da por una deleción del exón 18; para población asiática en especial Taiwán la
aparición de la mutación c.1935C>A (p.Asp645Glu), ha sido más prevalente y estudiada en este
12
sector y en cuanto a los afroamericanos la más común es c.2560C>T (p.Arg854Ter) (Kohler et al.,
2018; Salillas, 2019).
A pesar de esto, también se ha observado la existencia de secuencias y variantes que no causan
la enfermedad pero que asocian un nivel bajo de la actividad enzimática, las secuencias más
comunes han sido c.1726G>A y c.2065G>A y esta afección se la ha denominado como
pseudodeficiencia.
La EP tiende a presentarse a cualquier edad, con la característica de presenciar una debilidad
muscular progresiva qué puede progresar a una afección muscular respiratoria como también se
asocia la cardiopatía, pero más presente en las formas infantiles. Este trastorno clínicamente
incluye un espectro de fenotipos, específicamente en tres: infantil, juvenil y adulta, estas dos
últimas se les agrupa como la forma de inicio tardío (Murphy & Straub, 2018).
Variante infantil: Su sintomatología es la más severa y tiene un mal pronóstico en comparación
con los otros tipos de la EP. A pesar de que el neonato aparenta estar sano y estable, este llega a
presentar signos y síntomas durante el primer y segundo mes de vida, empezando con una
dificultad en alimentación, debilidad muscular, hipotonía y falta de desarrollo; que son
rápidamente progresivos hasta comprometer la vida del recién antes de los dos años por problemas
cardiorrespiratorios y miocardiopatía puede ser detectable en el 50% de las casos, es decir, un
aumento considerable del depósito de glucógeno en el músculo esquelético y en el corazón
(Fernández Salido, 2011).
Los pacientes con esta variante se caracterizan por tener una deficiencia completa o casi
completa de la actividad de la enzima GAA, encontrándose con una actividad menor al 2% (Di
lorio et al., 2011). Dentro de esta clase infantil es posible hallar dos subclases explicados en la
(Tabla 1):
13
Tabla 1. Signos y síntomas de los subtipos de la variante infantil
Clásica No Clásica
- Cardiomegalia marcada - Problemas respiratorios
- Hipotonía - Hepatomegalia leve
- Flacidez - Dificultad para alimentarse
- Macroglosia - Hipotonía
- Debilidad progresiva - Flacidez
- Alteraciones en el electrocardiograma - Fragilidad ósea
(Kohler et al., 2018)
- Clásica: En esta variante los depósitos de glucógeno se presentan principalmente en
miocardio, musculo esquelético y liso, hígado, epitelio del túbulo renal y sistema nervioso central.
El promedio de mortalidad de los infantes en esta variante es de 6 a 8 meses de edad, la causa de
muerte más común fue la presencia de cardiomiopatía con afección pulmonar comprometida.
- No clásica: En esta variante el termino enfermedad infantil no clásica de Pompe se refiere
al grupo de nacidos con un promedio de edad de 4-8 meses, en estos pacientes se presenta una
sintomatología de menor intensidad con respecto a la variante infantil clásica, la expectativa de
vida de estos pacientes no supera los dos años (Cabello & R, 2015). El pronóstico de este grupo
es mejor que la clásica, con un promedio de 19 meses de supervivencia.
Variante juvenil: Es menos severa, en esta forma existe cierta actividad enzimática residual, es
decir la actividad de la enzima GAA es variable y oscila entre el 2% y 40%. Los síntomas se
manifiestan durante los primeros 10 años de vida, con debilidad muscular que afecta también a los
músculos respiratorios. No existen alteraciones cardíacas tan graves como en el caso anterior. Su
pronóstico oscila entre más de año hasta la edad adulta, la causa de muerte asociada es por una
insuficiencia respiratoria (Chan et al., 2017; Salillas, 2019).
14
Variante adulta: Esta variante ocurre entre la edad de 20-70 años, caracterizado por una
miopatía que tiene una progresión más lenta que las demás variantes, y sin llegar a una afección
cardiaca franca. También se presenta el denominador común de la EP, la debilidad muscular que
evoluciona en zonas como la cintura pélvica, la musculatura para espinal y el diafragma. El cuadro
clínico se caracteriza por debilidad muscular proximal de lenta evolución acompañada de afección
del tronco. Las zonas más afectadas son la cintura pélvica, la musculatura para espinal y el
diafragma. La mayoría de los pacientes no diagnosticados acuden a las unidades de salud por
insuficiencia respiratoria (Longo et al., 2019).
El diagnóstico de la EP aborda varias pruebas en el área de laboratorio clínico a más de las
características clínicas ya mencionadas para cada variante, las pruebas bioquímicas inespecíficas
que se encuentran alteradas en el desarrollo de la enfermedad son la Creatinina Kinasa (CK) en
suero donde su concentración se eleva a valores mayores a 2000 UI/L en la EP infantil, pero en las
formas tardía puede estar en rangos normales. Las enzimas AST, ALT y LDH por lo general están
elevadas en todas las variantes, los valores aumentan mientras la enfermedad va progresando.
La prueba más específica para la EP es la determinación de la Actividad Enzimática de Alfa
glucosidasa acida considerada como el Gold Estándar para su diagnóstico: Este tipo de análisis se
lo realiza por diferentes métodos, uno de ellos es el análisis de muestras de sangre seca sobre papel
filtro (DBS), este ensayo requiere de inhibidores como la maltosa o la acarbosa para evitar que
interfieran otras enzimas permitiendo un análisis más preciso de la actividad, este tipo de pruebas
están siendo incluidas en programas de screening en neonatos (Reuser et al., 2011).
De igual forma, la confirmación se lo realiza mediante la medición de la actividad de GAA,
pero en otro tejido que aumenta la especificidad de las pruebas analíticas, como lo es el cultivo de
fibroblastos de piel, ya que en estos se encuentra una mayor actividad de GAA. Estos análisis
15
ayudan a establecer la severidad y la variante de la enfermedad. Sin embargo, puede tomar de
cuatro a seis semanas en obtener resultados, por lo cual el retraso en el diagnóstico y el inicio del
tratamiento, sobre todo en los lactantes, puede afectar el resultado (Lukacs et al., 2010).
Se ha comprobado que en la EP existe aumento de la glucosa tetrasacárido (Glc4) un
oligosacárido que se detecta en la orina, su valor diagnóstico es de casi un 100% de sensibilidad,
pero no específico para la EP ya que puede estar presente en otras enfermedades de depósito de
glucógeno, por eso es necesario correlacionarlo con la clínica que se presente, a su vez es un buen
biomarcador para valorar la eficacia de un tratamiento en un paciente (Young et al., 2009).
Existe evidencia creciente del valor diagnóstico de un tetrasacárido de glucosa detectable en la
orina, la glucosa tetrasacárido (Glc4: Glc-α1→6-Glc-α1→4-Glc-α1→4-Glc), específico para la
evaluación de la EP. La Glc4 es un marcador sensible, aunque no específico para la EP siendo útil
tanto para el diagnóstico como para valorar la eficacia del tratamiento de los enfermos ya que
muestra una muy buena correlación con la respuesta clínica de los pacientes sometidos a
tratamiento enzimático sustitutivo. También puede estar elevada en otras enfermedades por
almacenamiento de glucógeno, por lo que es necesaria una correlación clínica adecuada. Este
método ha sido validado incluso para orina seca recogida sobre papel cromatográfico, lo que
facilita la recogida y el traslado desde lugares alejados del centro de análisis. Cuando se combina
con el ensayo de actividad enzimática GAA en DBS, la sensibilidad diagnóstica se encuentra
cercana al 100% para la forma infantil de la enfermedad; igualmente es importante tener en cuenta
que los resultados negativos de ambas pruebas permiten descartar con un buen margen de
seguridad el diagnóstico de la patología, eliminándose así la necesidad de procedimientos
invasivos tales como biopsias de piel o músculo, acortando los tiempos de respuesta del
16
laboratorio. Estos ensayos se realizan en laboratorios especializados y en estudios clínicos en
investigación
Al ser una enfermedad genética la identificación de las mutaciones causantes sirve como
análisis de confirmación, pero su función principal es proporcionar información para una posible
detección familiar y para el asesoramiento genético. Los análisis moleculares se basan en la
búsqueda de mutaciones que afectan al gen que codifica la GAA mediante el análisis de ADN. En
algunos pacientes donde quede inconclusos con el análisis enzimático al tener resultados variables
de la actividad residual, el análisis molecular sería el paso por seguir para una confirmación
(Kishnani et al., 2006).
La identificación de la/s mutación/es causante/s de la enfermedad en el gen que codifica la GAA
mediante análisis de ADN no es esencial para el diagnóstico de EP, pero proporciona una valiosa
información para la detección familiar y el consejo genético. En situaciones poco frecuentes en
que el diagnóstico no está claro por el análisis de actividad enzimática, el análisis molecular puede
ser útil para confirmarlo. La identificación de la/s mutación/es que presenta el paciente y el
genotipo de los familiares debe ser considerado parte de la gestión de los pacientes con EP. Al
igual que con otros trastornos de depósito lisosomal, debido a la posibilidad de solapamiento de la
actividad enzimática residual GAA en individuos heterocigotos, el análisis molecular del gen
puede ser necesarios para confirmar el diagnóstico. Aunque el análisis de actividad de la enzima
sigue siendo la prueba diagnóstica de elección para los individuos con EP, las pruebas moleculares
tienen aplicaciones importantes. Son particularmente útiles para establecer un programa de
actuación cuando la mutación es bien conocida y existen correlaciones genotipo-fenotipo.
A pesar de que la determinación enzimática es más relevante a la hora del diagnóstico de la EP,
la parte molecular adquiere importancia por su utilidad. Son particularmente útiles para establecer
17
un programa de actuación cuando la mutación es bien conocida y existen correlaciones genotipo-
fenotipo (Lobato, 2012).
La EP en algunos países como Taiwan ha sido incluida en el programa de tamizaje neonatal
con la justificación de que se ha visto el mejoramiento de los neonatos a nivel cardiaco y motriz,
que fueron diagnosticados precozmente al tratar a tiempo con la terapia sustitutiva enzimática. La
metodología que se utiliza es la actividad de la enzima GAA en gotas de sangre seca sobre papel
filtro como herramienta de tamizaje primario (Y. H. Chien, 2009).
El apoyo respiratorio por la noche en sujetos con enfermedad de comienzo tardío mejora la
calidad de la vida y es benéfico durante la descompensación respiratoria. Actualmente existe
tratamiento definitivo e incluye a la glucosidasa alfa, una glucosidasa alfa ácida humana obtenida
por bioingeniería, que se administra a dosis de 20 mg/kg de peso corporal cada dos semanas en
goteo intravenoso. En las investigaciones clínicas se demostró que este producto mejora la
sobrevida sin necesidad de respirador, así como la función motora en individuos con enfermedad
de Pompe de inicio infantil, en comparación con testigos no tratados. Un estudio clínico
aleatorizado y controlado con placebo en adultos demostró la estabilización de la evolución
musculo esquelética y de los parámetros respiratorios (Y. H. Chien, 2011).
18
Capítulo II
Metodología de Investigación
2.1 Diseño de Investigación
El diseño de investigación en el que se basó el presente trabajo es el diseño documental, el
principio de este diseño es el de la búsqueda exhaustiva, organizada y planificada de información
que puede obtenerse de libros, artículos científicos, revisiones sistemáticas, revistas y bases de
datos acerca de los distintos procedimientos diagnósticos para la Enfermedad de Pompe, para que
la misma sea analizada, comparada y discutida, teniendo una mayor perspectiva acerca de
problema planteado y con ello generar nuevos conocimientos, soluciones y conclusiones.
2.1.1 Paradigma de Investigación
La investigación realizada cumple con un paradigma de investigación de enfoque mixto, debido
a que a través de este paradigma se obtendrá datos tanto cuantitativos como cualitativos.
Cualitativo porque se detallará las características y cualidades de un fenómeno, a través de un
proceso de revisión sistemática de la información de fuentes bibliográficas, para interpretar la
realidad del fenómeno en cuestión, en este caso, la actualidad del diagnóstico de la Enfermedad de
Pompe en el país.
Cuantitativo ya que, al aplicar la síntesis de la información, se conseguirá detallar y recolectar
datos de una serie de investigaciones y estudios que aportarán con resultados numéricos, como lo
son la especificidad, la sensibilidad y los valores predictivos de los ensayos diagnósticos para la
Enfermedad de Pompe, y a partir de estos elaborar un algoritmo diagnóstico actualizado.
19
2.1.2 Nivel de Investigación
El nivel elegido es el descriptivo, con este nivel mediante el análisis de las distintas variables o
conceptos con el uso adecuado de los estudios e información seleccionados, se consiguió explicar
las propiedades y la caracterización de un fenómeno que es objeto de estudio, para establecer una
estructura o comportamiento.
2.1.3 Tipo de Investigación
El tipo de investigación utilizada en base a los objetivos es el tipo básico, ya que se orienta a la
búsqueda de nuevos conocimientos actualizados, con el objetivo de establecer conocimientos
teóricos.
Por la fuente de datos es una investigación de tipo revisión bibliográfica que permite utilizar
herramientas de información de fuentes primarias, secundarias: libros, documentales, revistas
científicas comprobadas previamente.
Dentro del diseño documental, el tipo de investigación que también se ve involucrado es el
informativo mediante variables independientes a partir de datos secundarios, con la finalidad de
informar acerca de una temática en especial sobre la base de información ya existente.
2.2 Población y Muestra
Por motivo del tipo de investigación documental, no aplicó el tener una población o muestra
para analizar.
Cabe mencionar que al utilizar estudios y revisiones se obtendrán algunos datos que para ser
seleccionados deben cumplir criterios evaluativos, tanto de exclusión e inclusión que se detallarán
posteriormente.
20
2.3 Diseño Metodológico
Las fuentes de información utilizadas para esta revisión bibliográfica son las de origen primario
y secundario. El uso de fuentes primarias contribuirá documentación nueva y original acerca de
estudios sobre las metodologías tanto bioquímicas como moleculares para el diagnóstico de la EP,
así como la evidencia de los reportes de casos clínicos y su resolución diagnóstica. Los documentos
implicados son libros, artículos científicos, artículos de revistas, tesis, que sean de información de
primera mano por parte del autor.
En cuanto a las fuentes secundarias, se justifica su uso ya que colabora con información ya
compilada y organizada acerca de la EP, todas las generalidades que implica la enfermedad, como
síntomas, epidemiología, tratamiento, y lo más importante para la investigación que son los
protocolos diagnósticos. Los documentos que se utilizaran son guías clínicas, manuales, protocolos
y artículos de revisión.
2.3.1 Criterios de Evaluación
Criterios de Inclusión. Fue incluido la bibliografía que cumpla con los siguientes
requisitos:
- Bibliografía con un máximo de diez años de haber sido publicados (2009-2019).
- Libros clásicos sin límite de fecha de publicación, especializados en ciencias de la salud
que aborden a la Enfermedad de Pompe.
- Artículos que sean gratuitos a excepción de artículos de pago que sean únicamente
imprescindibles para la investigación con un valor máximo de $35.
- Estudios en que los participantes padezcan la Enfermedad de Pompe infantil y/o de inicio
tardío y se evidencie su diagnóstico.
21
- Bibliografía que aborde específicamente el diagnóstico bioquímico y molecular de la
Enfermedad de Pompe.
- Bibliografía predominante en inglés, español y portugués.
- Investigaciones bibliográficas que estén validadas y avaladas por instituciones,
organismos.
Criterios de Exclusión. Se excluyó a la bibliografía que no cumpla con los siguientes
requisitos:
- Bibliografía que ha sido publicado en años anteriores al 2010.
- Publicaciones que no sean asequibles por tener un costo monetario elevado.
- Investigaciones que no indiquen la resolución del diagnóstico de la Enfermedad de
Pompe.
- Bibliografía que aborde solo el diagnóstico clínico de la Enfermedad de Pompe.
- Artículos que son abstracts o resúmenes incompletos.
- Bibliografía extraída de fuentes no confiables que no están validadas por instituciones
científicas.
2.3.2 Técnica de Investigación
Para la investigación bibliográfica se documentó mediante la observación estructural y la
lectura comprensiva de libros, artículos científicos, artículos de revisión, manuales, guías clínicas
y tesis, con esto se pudo elaborar tablas comparativas registrando las ideas de cada autor para así
comparar la información obtenida.
La recopilación de la información se realizó principalmente mediante internet, donde se
accederá a la biblioteca virtual de la Universidad Central del Ecuador (UCE), cuya base cuenta
con distintas fuentes de información. A parte se utilizó otros sitios web como repositorios de otras
22
universidades para la obtención de tesis, bases de datos que no se encuentre en la biblioteca virtual
para la búsqueda de artículos científicos y de revisión, páginas web de instituciones y
organizaciones que documenten guías clínicas y manuales de la EP, y para los libros clásicos se
utilizaron los obtenidos durante el proceso académico de la carrera de Bioquímica Clínica.
2.4 Hipótesis Conceptual
Con la evidencia científica actualizada sobre el diagnóstico de la Enfermedad de Pompe infantil
y de inicio tardío en Ecuador la elaboración de un algoritmo diagnóstico con las diferentes
metodologías bioquímicas y moleculares ayudara como guía para pacientes con sospecha clínica
de EP.
2.5 Técnicas e Instrumentos
La recopilación documental se realizó con el uso de las siguientes bases de datos y fuentes de
E-books: SCOPUS, Scielo, Dialnet, Taylor and Francis Online, Digitalia, Springer, PubMed,
Science Direct, Redalyc, DOAJ. También se accederá a repositorios universitarios, así como webs
de organizaciones e instituciones validadas como la National Institutes of Health (NHI), National
Center for Biotechnology Information (NCBI), entre otros que se irán descubriendo a lo largo de
la investigación.
La terminología para la búsqueda de información que se usó en estos sitios será la siguiente:
Enfermedad de Pompe, diagnóstico de la enfermedad de Pompe, screening de la enfermedad de
Pompe, análisis molecular de la enfermedad de Pompe, algoritmo y protocolos de la enfermedad
de Pompe, métodos analíticos de la enfermedad de Pompe, diagnóstico de la enfermedad de Pompe
de inicio tardío, diagnóstico de la enfermedad de Pompe infantil, determinación de la alfa
glucosidasa ácida, determinación de la glucosa tetrasacárido en la enfermedad de Pompe. Esta
23
búsqueda se lo hizo principalmente en inglés como también en español. De igual forma, se revisará
las citas de cada documento para la búsqueda de más artículos relevantes.
Para almacenamiento organizado de los documentos se lo realizó mediante ZOTERO, que
servirá como el gestor bibliográfico adecuado para la investigación y el programa Excel que ayudó
con la recopilación de datos específicos de los artículos seleccionados.
2.6 Procesamiento de Datos
La preselección de información se estableció con los documentos que sean obtenidos en la
búsqueda mediante los términos ya establecidos, toda la documentación forma parte del universo
de los datos.
Para la selección de los artículos, primero se realizó la lectura y análisis breve de su título y
resumen, que cumpliendo los criterios de evaluación se procedió a la lectura del texto completo.
Esto arrojó un número reducido de documentos que cumplan las características requeridas.
Una vez seleccionados los artículos con los filtros ya indicados, se les concedió una categoría
y subcategoría en relación con la matriz de categorización. Luego se analizó comparativamente
entre la metodología y resultados de cada artículo, y se los gestionó de acuerdo con una variable
en común, se ordenó así mismo por año de publicación para la evaluación frente a información
reciente de la más antigua (Anexo B, C).
Se recopilaron los siguientes datos de los documentos seleccionados: autor, tipo de estudio, y
que prueba diagnóstica se le realizaron: bioquímica o molecular. Para la eficacia diagnóstica se
reportaron y compararon la sensibilidad, especificidad y valores predictivos de las pruebas
seleccionadas.
Y, para finalizar, se examinó cada categoría establecida para los artículos que serán
seleccionados y a partir de esto se realizó un algoritmo actualizado acerca del diagnóstico de la
24
Enfermedad de Pompe y se procedió a establecer las conclusiones y recomendaciones de la
investigación final.
2.7 Resultados y Beneficios Esperados
La presente investigación detalla los métodos diagnósticos más efectivos para la Enfermedad
de Pompe infantil y de inicio tardío, explicando la eficacia con referencia a la sensibilidad y
especificidad de los métodos, así como sus valores de referencia, y en qué casos se requiere llegar
a un análisis más específico y todo el protocolo que se realiza desde la sospecha clínica. De igual
forma se espera informar la actualidad del diagnóstico de la enfermedad en el Ecuador para el
conocimiento de la comunidad médica.
Con esta información se espera establecer un algoritmo actualizado sobre el diagnóstico de cada
tipo de la EP, así como ver la efectividad de estas metodologías para un diagnóstico seguro
evitando caer en el subdiagnóstico.
25
Capítulo III
Resultados y Discusiones
3.1 Análisis de Datos
Las principales bases de datos utilizadas fueron: SCOPUS, Pubmed, Science Direct y
SpringerLink. La fase de búsqueda de la información se la desarrolló entre el mes de junio y julio
concluyendo el día 22 de julio del 2020.
Durante el periodo de preselección y selección de información se emplearon distintos términos
de búsqueda como se observa en la Tabla 2, de la misma manera se utilizó filtros para limitar tanto
los tipos de documentos como su fecha de publicación. Para los tipos de documentos se filtró
solamente artículos científicos, revisiones sistemáticas, capítulos de libros, protocolos y en casos
estrictamente necesarios se incluyó cartas y notas de editor que fueran de gran aporte a la revisión
bibliográfica.
Tabla 2. Términos empleados en las bases de datos
Categoría Término
1. Enfermedad - Enfermedad de Pompe
- Diagnóstico de la Enfermedad de Pompe
2. Diagnóstico - Detección de la Alfa Glucosidasa Ácida
(GAA)
- Determinación del Glucosa Tetrasacárido
- Detección molecular, análisis molecular,
mutaciones del GAA
3. Actualidad - Actualidad diagnóstica de la enfermedad de
Pompe
- Aplicación del criado neonatal para la
enfermedad de Pompe
- Enfermedad de Pompe en el Ecuador
Autor: Eduardo Vallejos
En cuanto a los años de publicación como se explicó en la sección de criterios de inclusión se
filtró los documentos con fecha de publicación desde 2009 a 2020. En cuanto al idioma se
26
seleccionó los artículos escritos principalmente en inglés, español y por último en portugués, no
obstante, también se incluyó documentos de otros idiomas, pero que los mismos hayan sido
traducidos a uno de tres idiomas ya mencionados.
3.2 Resumen de la Búsqueda
Para que el trabajo de investigación sea objetivamente lo más confiable posible se utilizó una
metodología llamada declaración PRISMA que está compuesta por un diagrama de flujo de cuatro
fases que se explica en la Figura 1.
Figura 1. Diagrama de PRISMA. Metodología de la búsqueda
27
La búsqueda inicial con los primeros términos de búsqueda arrojo un total de 9866 artículos a
través de 11 bases de datos, adicionalmente se obtuvo 30 artículos más provenientes de otras
fuentes que se fueron descubriendo a lo largo de la revisión bibliográfica. Tras eliminar artículos
homónimos que se encuentran en más de dos bases de datos y filtrarlos por años e idioma se
preseleccionó 3827 artículos, de los cuales 650 cumplen los criterios de inclusión; una vez leídos
los resúmenes detenidamente, se seleccionó 188 documentos. Se excluyeron 462 por motivo de
que no cumplían los criterios de inclusión, como se planteó en la metodología de la investigación.
Entre los documentos incluidos los países con más relevancia son Taiwan, Japón, Australia,
Estados Unidos y Colombia todos publicados dentro del rango de 10 años ya establecido, esto se
explica ya que estos países presentan mayor prevalencia de la enfermedad en el mundo, a
excepción de Colombia país que en últimos años ha dado prioridad a la enfermedad a pesar de la
incertidumbre que existe sobre su prevalencia.
A continuación, se detalla la estadística de la primera búsqueda que arrojó cada base de datos
utilizada:
Figura 2. Primera búsqueda en bases de datos
PRIMERA BÚSQUEDA
F&TO
2%
PM
14% SD
35%
SP
21%
SL
24%
Nota. SD: Science Direct, SL: SpringerLink, SC: Scopus, PM: PubMed, T&F: Taylor
and Francis Online. Autor: Eduardo Vallejos
28
Como ya se mencionó la búsqueda inicial total de referencias fue de 9896 (100%) esto solo
habiendo utilizado los términos de búsqueda establecidos, en la Figura 2 se observa que el Science
Direct arrojo la mayoría de los resultados con el 35% del total de artículos, seguido por
SpringerLink con un 24%, Scopus 21% Pubmed 14% y Francis and Taylor Online con el 2%. El
porcentaje restante corresponde a bases restantes con menos del 1%.
Para la preselección se empezó con la lectura del título, así realizando la eliminación de los
duplicados, se encontró una gran medida de homólogos en las bases Science Direct, Scopus ya que
comparten una misma editorial, Elsevier. Para Science Direct su cantidad se redujo en gran medida
porque en la búsqueda de la información introdujo documentos alejados al tema principal a pesar
de la filtración por términos. En la Figura 3 Scopus tomo el lugar de base con mayores artículos
preseleccionados con un (33%).
Figura 3. Preselección de la bibliografía
Taylor and
PRESELECCIÓN Francis Online
Scielo 3%
2%
DOAJ
SCOPUS 5%
33% Springerlink
13%
Science Direct
14%
PubMed
25%
En cuanto a la selección final de bibliografía se la realizó mediante la lectura rápida del
resumen, quedando un total de n=188 (100%) artículos seleccionados. Como lo muestra la Fig.4
Scopus es la base con más bibliografía con n=104 (55%), seguido de SpringerLink con n=18 (10%)
29
y Science Direct n=18 (10%) con la misma cantidad de documentos seleccionados, seguido ese
encuentra PubMed n=21 (8%), etc. Finalmente, durante todo el proceso de búsqueda de
información a partir de los documentos filtrados, solo el 6,09% fueron seleccionados como lo
indica la Figura 5.
Figura 4. Selección de la bibliografía
Taylor and SELECCIÓN

Francis Online
4%
Scielo
5%
PubMed
8%
SCOPUS
Science Direct 55%
10%
Springerlink
10%

Figura 5. Proceso de Selección de Información
Proceso de Selección de Información

100%
90% 100%
80% 16,98%
4,91%
70%
60%
50%
40%
30%
20%
10%
0%
2 3 4
Filtrado Preseleccionados Seleccionados
30
La estadística por año de publicación de la búsqueda de información resume que existe una
constante publicación sea estudios como de revisiones bibliográficas y estos han ido aumentando
durante el tiempo, con un promedio de 15 documentos por año, siendo el año 2017 con más
información seleccionada que pueda aportar con base de la investigación. Se han incluido
publicaciones del año 2009 estrictamente necesarias gracias al gran aporte diagnóstico que
ofrecieron, siendo como referentes frente a posteriores estudios.
Tabla 3. Documentos revisados por cada año
Año de Publicación N° Documentos Revisados

2020 20
2019 11
2018 20
2017 25
2016 14
2015 16
2014 18
2013 12
2012 19
2011 15
2010 9
2009 9
La recopilación principalmente se encontró en inglés, no obstante, hay que considerar que
muchas publicaciones son originarias de otros países de habla no inglesa pero sus artículos se
redactaron en inglés para una mejor distribución en la comunidad científica, de igual manera varios
documentos fueron rechazados ya que solo contenían abstracts en inglés, pero estaban redactados
en otro idioma.
31
Tabla 4. Documentos por idioma
Idioma N° Documentos
Español 22
Inglés 164
Portugués 2
Los tipos de documentos que predominan son los artículos científicos y las revisiones,
correspondiendo a más de la mitad de las publicaciones seleccionadas. Hubo excepciones como el
caso de una carta editorial, una nota bibliográfica y un artículo de conferencia, que fueron incluidos
por la información que podía aportar para la estadística final de la investigación.
Tabla 5. Tipos de Documentos
Tipo de Documento N° Documentos

Artículo Científico 129
Revisión 35
Capítulo de Libro 11
Protocolo 3
Carta 2
Libro 2
Nota 1
Tesis 3
Editorial 1
Artículo de Conferencia 1
Una última clasificación que se realizó a la información encontrada fue la del nivel de evidencia
científica y el grado de recomendación, dentro de todos los modelos existentes se eligió el modelo
Centre for Evidence-Based Medicine, Oxford (OCEBM), el cual proporciona una clasificación en
el ámbito del diagnóstico que coincide con los fines principales de la investigación.
Este modelo se basa en la categorización de la información en 10 valoraciones, que caracteriza
el escenario clínico en el que se está trabajando con su respectivo tipo de estudio. De todos los
32
documentos elegidos la mayor parte se ubica en el nivel 1 de evidencia dentro del mismo los
ensayos clínicos aleatorizados con un intervalo de confianza estrecho con un 47,34% de
documentos del total, seguido luego de las practicas clínica (26,59%) donde se buscaba el
establecer los valores de referencias de las pruebas diagnósticas, es así que, se incluyen
documentos como los experimentales con inhibidores en la detección de la GAA y con un 15,42%
se ubicaban las revisiones sistemáticas de estos ensayos clínicos que sirven como meta-análisis
comparativos de las distintas formas de detección diagnósticas; algo notorio que se puede observar
es la cantidad de documentos que se encuentran en el nivel 5 estos su relacionan ampliamente con
las cartas, y artículos de conferencias, entre otros, que se basan en la explicación de la experiencia
de personal frente a la EP.
Tabla 6. Nivel de Evidencia
Nivel de Evidencia Tipo de Evidencia Científica N° Documentos Porcentaje (%)

Científica
1a Revisión sistemática de 29 15,42
ensayos clínicos aleatorizados,
con homogeneidad
1b Ensayo Clínico aleatorizado 89 47,34
con intervalo de confianza
estrecho
1c Práctica Clínica 50 26,59
2a Revisión sistemática de 3 1,59
estudios de cohorte, con
homogeneidad
2b Estudios de cohorte o ensayo 2 1,06
clínico de baja calidad
2c Estudios ecológicos 0 0,00
3a Revisión sistemática de estudio 2 1,06
caso control con
homogeneidad
3b Estudio caso-control 2 1,06
33
4 Series de casos o estudios de 1 0,53
cohorte y caso-control de baja
calidad
5 Opinión de expertos sin 9 4,78
valoración crítica explícita
A partir de la clasificación por nivel de evidencia se categoriza la recomendación del uso,
encontrando con un grado A de recomendación (89,89%), esto nos indica que la evidencia
proporcionada por los documentos son fuertemente recomendados, el grado B con un 4,78% es
evidencia con recomendación razonable, para el grado C con el 0,53% se pide tener en cuenta esta
evidencia considerando todos los sesgos posibles para poder o no recomendarla y por ultimo para
el grado D con el 4,78% los estudios e información disponible de estos no pueden ser utilizados
como evidencia, pero el investigador o grupo consenso consideraría por experiencia que el uso de
la misma es favorable y podría ser recomendable.
Tabla 7. Grados de Recomendación
Grados de Nivel de Evidencia N° Documentos Porcentaje (%)

Recomendación Científica
A 1a,1b,1c 169 89,89
B 2a, 2b, 2c, 3a, 3b 9 4,78
C 4 1 0,53
D 5 9 4,78
Finalmente, la evidencia de información analizada se la puede encontrar en los anexos
detallándose la información explicada en las tablas y cuadros anteriores (Anexo A). En la sección
bibliográfica no se introdujo todas las publicaciones ya que la mayoría formaban parte de la
estadística, y no se encuentran citadas. Las fuentes registradas en bibliografía se encuentran citadas
porque aportaron información básica y relevante a la investigación, tanto en marco teórico,
resultados y discusiones.
34
3.3 Resultados
3.3.1 Categorías y Subcategorías
Durante la clasificación de las publicaciones se identificó cuatro categorías Figura 6. De los
188 documentos en 132 mencionan a los métodos enzimáticos siendo la prioridad estos como una
prueba de primera línea para la EP; seguido se encuentran las pruebas moleculares que se reporta
en 77 artículos. Un hallazgo imprevisto en la revisión fue la categoría morfológica que se incluyó
por ser una nueva alternativa como prueba diagnóstica y que aborda el carácter analítico necesario.
Por otro lado, la categoría de salud pública que aborda 21 artículos se relaciona con todas las
consideraciones éticas, profesionales, políticas y humanas alrededor de toma de decisiones que se
realizan a través de las diferentes situaciones de los pacientes con sospecha clínica.
Figura 6. Categorías registradas
Categorías
140 132
120
100
Documentos
77
80
60
40
21
20
7
0
Enzimas Molecular Morfológico Salud Pública
Para las subcategorías se tabuló los resultados mediante porcentaje, de entre las 4 categorías se
pudo extraer 7 subcategorías Figura 7. En la categoría enzimas se subcategorizó en alfa glucosidasa
ácida (GAA), transaminasas, creatinina kinasa (CK) y niveles de glucosa tetrasacárido; siendo la
35
determinación del GAA la más frecuentada en la bibliografía con una aparición del 43%, dando
hincapié en que su ensayo es importante a la hora de diagnosticar la EP.
Figura 7. Subcategorías registradas
SUBCATEGORÍAS
Actualidad Linfocitos PAS
Creatinina Diagnóstica Transaminasas
Kinasa 2%
5% 2%
9%
Niveles de
GAA
Tetrasacárido
43%
8%
Mutación y/o
Pruebas
Genética
31%
Las categorías restantes proporcionaron una subcategoría cada una. La segunda subcategoría
en más proporción son las pruebas moleculares con un 31% de frecuencia, que hace uso de razón
por la importancia molecular que se le ha dado en los últimos años a la EP mediante el testeo
genético.
3.3.2 Tipo de Muestra
En el análisis de los resultados también se extrajo la información del tipo de muestra preferente
para la detección de la EP, como lo explica la Figura 8 se identifica seis muestras que se usan tanto
en los análisis enzimáticos como en los moleculares; y un tipo de muestra exclusivo de la categoría
morfológica.
El tipo de muestra más utilizada y recomendada es la de dried blood spot o gotas de sangre seca
en papel filtro (DBS) con mención del 59%, esto por motivo a que su usó en el cribado neonatal
es imprescindible en algunos países de Europa para el diagnóstico de la forma infantil. Como lo
36
indica Chiang et al. (2020) la toma de muestra del DBS se realiza de 48 a 72 horas después del
nacimiento, en casos de pacientes con clara sospecha clínica y de alto riego se espera que los
resultados demoren 72 horas después de haber recibido la muestra.
El uso de la sangre entera se centra más en el análisis molecular sobre el enzimático, al ser el
más viable para la extracción del ADN, pero de igual manera es posible el uso de muestras DBS
para el análisis enzimático.
Figura 8. Tipo de muestras más usadas
TIPOFrotis
DEdeMUESTRA
Fibroblastos Biopsia
5% Sangre
Suero 2% 2%
5%
Orina
7%
Sangre Entera DBS

20% 59%

La muestra de orina únicamente se utiliza para la determinación de la glucosa tetrasacárido; el
suero se utiliza para la determinación de transaminasas y la CK; los fibroblastos son los cultivos
utilizados para la detección de la actividad enzimática en tejido. Por último, los frotis sanguíneos
se utilizan para la categoría morfológica con la observación de linfocitos con tinción de ácido
Peryódico de Schiff (PAS).
3.3.3 Pruebas Enzimáticas
En las publicaciones donde se aborda la subcategoría de la enzima GAA se describe distintos
métodos como la determinación de su actividad, su cuantificación en sangre o la determinación
total de la enzima. La principal medida de la enzima GAA cómo se indica en la Figura 9 es su
37
actividad en sangre (84%), así también se ha incluido la actividad del misma en tejido mediante
ensayos enzimáticos de fibroblastos en cultivos de piel la cual fue evaluada frente a al ensayo en
sangre, para su posible inclusión en los algoritmos diagnósticos. Cabe mencionar que algunos
estudios y publicaciones han incluido a la actividad del GAA principalmente como prueba de
primera línea de la enfermedad de Pompe, en algunos casos incluso han reemplazado como prueba
de segunda línea al ensayo histopatológico de biopsias como prueba gold estándar.
Otros estudios indicaron que el diagnóstico puede realizarse mediante la determinación de la
enzima cuantitativamente, para ello utilizaron como indicadores la concentración de la enzima en
vez de la actividad enzimática, validado en que la mayor parte de mutaciones patógenas de la
enfermedad se correlacionan con una notoria disminución de la cantidad de enzima existente,
siendo proporcional a la baja actividad de esta. El método utilizado es el de inmunocaptura con
una correspondiente sensibilidad del 83%, este método implica el empleo de anticuerpos
específicos de la proteína que son más difíciles de obtener, por lo cual este método para el
diagnóstico es poco accesible, a pesar de tener una sensibilidad aceptable (Sanders et al., 2020;
Hall et al., 2020).
Figura 9. Estudio del GAA
Actividad del
GAA en tejido
ESTUDIO DE LA GAA
Actividad del GAA 2da Confirmatoria
4%
GAA Total 4%
4%
Cuantificación
del GAA
4%
Actividad del
GAA
84%
38
Centrándose sólo en las metodologías para determinar la actividad del GAA se encontró
distintos métodos analíticos qué pueden usarse, tal cómo se describe en la Figura 10. Dos técnicas
fueron reportadas en la misma cantidad de documentos, la espectrometría de masas en tándem
(MS/MS) y la espectrometría de masas en tándem de inyección de flujo (FIA-MS/MS) en un 24%
cada una, fueron las metodologías más utilizadas y recomendadas para el diagnóstico de la EP.
Figura 10. Metodologías para la determinación del GAA
Actividad del GAA

25
% de Documentos
20
15
10
En algunos artículos el uso de la acarbosa en la espectrometría de masas en tándem (5%) se
frecuenta para eliminar interferencias y reacciones cruzadas enzimáticas qué pueden invalidar los
resultados. De la misma forma los ensayos multiplexados como en el caso del 4 plex y 8 plex se
utilizan en programas de cribado neonatal donde se intenta discriminar entre 4 a 8 enfermedades
cómo lo son los desórdenes metabólicos, estos métodos utilizan distintos sustratos para poder
llegar a identificar de manera más precisa cada enfermedad. El resto de los métodos utilizados
están adquiriendo importancia en el diagnóstico, sin embargo, estos métodos todavía continúan
estudios.
39
Dentro de las pruebas enzimáticas que se identificaron durante la revisión, están la
determinación de la creatinina kinasa, las transaminasas y la relación creatina/creatinina. Como
indica la Figura 11 la determinación de la CK es más evaluada durante el diagnóstico o la sospecha
diagnóstica de la EP.
El cálculo de las relaciones creatina/creatinina en relación con la actividad del GAA son
utilizadas en algunos casos como pruebas de segundo nivel, porque se ha visto el aumento del
rendimiento diagnóstico en favor de aumentar la especificidad; estudios demostraron una
concordancia del 92% como VPP siendo eficaz para la identificación de falsos positivos, estos
resultados son una evidencia prometedora como prueba de segundo nivel (Tortorelli et al., 2018).
Figura 11. Otras pruebas enzimáticas
Determinación Enzimática
17%
50%
33%
CK Relacion Creatina/Cretinina Transaminasas
Por último, los documentos que mencionaban a los niveles de GLc4 como una opción para el
diagnóstico presentaron tan sólo un método analítico para su determinación y éste es la
cromatografía liquida con espectrometría de masas (LC-MS/MS) (60%), mientras que el (40%)
restante no reportó el método de su determinación Figura 12.
40
Figura 12. Metodologías para la determinación de los niveles de tetrasacárido
Niveles de Tetrasacárido
40%
60%
(LC-MS/MS) Sin Reporte de Metodo
3.3.4 Prueba Morfológica
Como ya se mencionó en la sección de categorías y subcategorías, en la investigación
bibliográfica se reportó estudios de una “nueva metodología” diferente del análisis enzimático y
molecular donde también puede intervenir el bioquímico, se trata de la observación de linfocitos
con vacuolas llenas de glucógeno en tinción de Schiff (PAS). Anteriormente la base de esta
metodología era en realizarlo en biopsias de la piel, no obstante, esta intervención histopatológica
ha podido ser adaptada nivel sanguíneo mediante la examinación el frotis de sangre periférica. Un
diagnóstico positivo de EP a partir de este método es cuándo hay la presencia de linfocitos con
vacuolas de glucógeno y que la misma cuantificación de linfocitos PAS positivos vacuolados estén
valores elevados (PAS>10%).
Esta técnica es una reacción colorimétrica donde actúa un colorante incoloro el cual, al detectar
una alta cantidad de hidratos de carbono como el glucógeno, torna de color rojo aquellos
componentes celulares que los contenga, en este caso de la EP el almacenamiento de glucógeno se
da en vacuolas contenidas dentro de los linfocitos, el porcentaje de linfocitos PAS positivos se
calcula mediante el conteo celular en el extendido de linfocitos PAS positivos en 100 linfocitos
(Hagemans et al., 2010). En la siguiente Figura.13, se muestra un extendido de sangre con tinción
41
PAS, indicando el control sano sin vacoulación (A), paciente con EP de inicio tardío con un
linfocito con vacuolaciones PAS positivas notándose la coloración roja que se torna (B) y el
seguimiento al paciente ya con tratamiento aplicado demostrando la disminución de las
vacuolaciones (C); esto es un gran indicador de que la técnica puede ser usada tanto para
diagnóstico como para seguimiento terapéutico.
Figura 13. Frotis sanguíneo con tinción PAS
Nota. Frotis sanguíneo con tinción PAS. Tomado de “Vacuolated PAS-positive lymphocytes on blood
smear”, por D. Parisi, 2018, Frontiers in Neurology. Volumen 9, p.3.
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC6204381/figure/F1/
3.3.5 Pruebas Moleculares
Las pruebas moleculares reportadas en los artículos revisados son variadas, cómo lo indica la
Figura 14 se encontraron 7 metodologías utilizadas. Con el 45% de mención la técnica de la
secuenciación de ADN Sanger es la más utilizada durante los ensayos qué estudiaban a la
enfermedad de Pompe; seguido con el 22% la secuenciación de próxima generación dirigida
(tNGS). En los últimos dos años se ha visto la introducción de nuevos métodos como lo son el
análisis de matriz de polimorfismos de un solo nucleótido (SPN) y el análisis de minigen.
El análisis molecular, de manera general busca las regiones codificantes de GAA mediante
PCR. Luego, el procedimiento es realizado mediante la metodología de secuenciación de ADN de
Sanger que tiene como objetivo detectar las variantes en las regiones codificantes del GAA que
42
estén más cerca a los sitios de corte y empalme. La detección de estas variantes debe ser notificadas
en el registro de base de datos en la página oficial de la enfermedad de Pompe (Groen et al., 2020).
El tNGS dentro del cribado neonatal ha sido recomendado como prueba de segundo nivel para
beneficiar la toma de decisiones clínicas ya que este análisis incluye una posible predicción de las
variantes mutacionales y aumentó a una reducción de los resultados falsos positivos (Smith et al.,
2020).
Figura 14. Metodologías para el análisis genético
Mutación y/o Pruebas Genética

50
45
% de Documnetos
40
35
30
25
20
15
10
5
0
Para los métodos de la PCR con transcriptasa inversa (RT-PCR) y la (qRT-PCR), más que
metodología principal son un paso intermedio para las demás metodologías con un proceso más
avanzado, como la tNGS. Sin embargo, algunos documentos aplican estos métodos cómo pruebas
diagnósticas, ya que se ha evidenciado qué esta metodología puede detectar variantes patógenas
correlacionadas al pre-mRNA.
El método de análisis de matriz de polimorfismos de un solo nucleótido (SNP) se utilizó para
explicar fenotipos que puedan tener grandes deleciones o variaciones en el número de copias
43
genómicas (CNV), mientras que el modelo de minigen es la construcción de fragmentos genéticos
que incluye un exón y sus correspondientes regiones control para la expresión del gen GAA, este
ensayo evalúa los patrones de empalme y la naturaleza patógena de distintas mutaciones génicas
frente a fragmento wild type o tipo silvestre (in ’t Groen et al., 2020; Bali et al., 2011; Bergsma
et al., 2016).
3.3.6 Validez Diagnóstica
Para la validez diagnóstica no todos los métodos reportados en los artículos indicaron la
sensibilidad, especificidad y valor valores predictivos. Esto dificulta la apreciación de la calidad
diagnóstica que pueda tener la prueba en sí, sin embargo, la inclusión de estas pruebas en esta
revisión bibliográfica se amerita por motivo de que las conclusiones de los estudios recomiendan
como alternativas diagnósticas para EP.
En las pruebas enzimáticas solo la actividad del GAA reportó valores predictivos y
sensibilidades, el resto de las pruebas enzimáticas excluyeron esta información Figura 15. Los
mejores resultados indican que la (FIA-MS/MS) otorga una sensibilidad del 100% con valores
predictivos positivos (VPP) del 86%, seguido encontramos al espectrometría de masas en tándem
con el 89.30% de valores predictivos positivos, esto puede relacionarse con qué estas dos
metodologías sean las más utilizadas para el diagnóstico de la EP; para el 8 plex y los microfluídos
digitales aportan VPP y sensibilidad mayores del 80% respectivamente, esto las hacen pruebas de
confianza para la detección de la EP.
A pesar de no tener un registro sobre su validez diagnóstica el método fluorométrico en estudios
como el reportado por Liao et al. (2017) han considerado que tienen menor sensibilidad frente a la
que la espectrometría de masas tándem por motivo de que este método puede distinguir las
pseudodeficiencias mientras que la fluorometría no. De igual forma VPP de ensayos
44
fluorométricos tuvieron valores muy por debajo de lo aceptable (mayor al 20%), con resultados de
entre 0,37% al 1,25% (Matern et al., 2015). Con estas pruebas, se necesitan más estudios qué
enfrenten ambas metodologías para realizar un análisis comparativo de su confiabilidad
diagnóstica.
Figura 15. Validez diagnóstica de la actividad del GAA
Actividad del GAA: Validez Diagnóstica

100%
100,00% 89,30%
84% 86,70% 83%
80,00%
60,00%
40,00%
20,00%
0,00%
Espectrometría de Espectrometría de Espectrometría de Microfluidos
masas en tándem masas en tándem 8 masas en tándem Digitales
(MS/MS) plex (UPLC-MS/MS) de inyección de flujo
(FIA-MS/MS)
VPP S
Para la prueba de la tinción PAS en frotis de sangre el reporte la validez diagnóstica resultó
exitosa, ya se evidenció que la metodología utilizada en los estudios ha podido calcular una
sensibilidad y especificidad del 100% así como su valor predictivo positivo también del 100%;
esto lo convierte en una de las técnicas más confiable qué pueden contribuir al diagnóstico de la
EP. Además, otra de sus ventajas es la accesibilidad tanto a nivel de técnica como económica frente
a las metodologías enzimáticas y moleculares.
En lo que respecta a las pruebas moleculares Figura 16, todas las metodologías indicaron sus
valores predictivos positivos, pero solo la secuenciación de ADN en Sanger reportó la sensibilidad
respectiva. En la Figura 15 se observa que todas las metodologías superan el 95% de validez, esto
45
es evidente ya que las pruebas moleculares son las que mejores resultados diagnósticos puede
proporcionar.
Figura 16.Validez Diagnóstica para las pruebas moleculares
Pruebas Moleculares : Validez Diagnóstica

99,90%
100,00%
99% 99% 99% 99%
98,00%
97,00%
96,00%
95,00% 95%
94,00%
VPP S
La secuenciación de ADN Sanger facilita una sensibilidad del 99. 9% con un valor predictivo
positivo del 97% lo cual confirma que este método sea el más utilizado. A pesar de esto, los
resultados indica que cualquier metodología molecular es viable para la detección de la EP.
3.3.7 Pseudodeficiencia
Durante la investigación bibliográfica fue posible evidenciar un problema qué ocurría a menudo
durante los diagnósticos propuestos para la EP, es la resolución de la existencia de personas con
pseudodeficiencia de la enzima que GAA, es decir que, a pesar de tener valores bajos de actividad
residual, no finalizaban en la enfermedad como tal. La presencia de un alelo de pseudodeficiencia
es el resultado de un cambio en la secuencia del gen GAA provocando una reducción enzimática
en la actividad del GAA (Kumamoto et al., 2009; Mashima & Okuyama, 2017).
46
Durante el cribado de primera línea en los ensayos enzimáticos se ha evidenciado la presencia
de pseudodeficiencias que, a pesar de ser clínicamente benignas, han sido un inconveniente a la
hora de descartar un diagnóstico verdadero positivo. Ha existido conflictos con estos resultados
falsos positivos en las pruebas de primer nivel porque provocan una alta derivación, esto se ha
visto relacionado a qué gran parte de la población posee alelos portadores de pseudodeficiencia.
3.3.8 Actualidad Diagnóstica
El correcto manejo del diagnóstico de la EP, en especial de la forma infantil debe garantizar la
identificación de falsos positivos frente a los verdaderos casos positivos. Como lo explica Pruniski
et al. (2018), hay que tener en cuenta estos resultados sobre el impacto que causa en las familias
que reciben los resultados y de la misma forma para el sistema de atención que debe tratar de forma
urgente estos casos.
Las pruebas de primera línea como las actividades enzimáticas del GAA concluyen de que sí la
deficiencia se encuentran por debajo de valores normales ya establecidos, es de manera obligatoria
y necesaria realizar una prueba de segundo nivel para confirmar o refutar el diagnóstico de EP; la
mayoría de algoritmos promueven una prueba de segundo nivel a través de una misma muestra de
DBS para rehacer la actividad enzimática en cambio otros algoritmos admiten la utilización de
pruebas moleculares como la secuenciación de ADN Sanger o la tNGS o en última instancia la
relación creatina/creatinina (Burton et al., 2017).
3.3.9 Actualidad Diagnóstica en el Ecuador
En comparativa de la gran cantidad de información que se logró recolectar acerca de la
actualidad diagnóstica de la enfermedad de Pompe a nivel internacional fue totalmente inverso a
la hora de buscar información acerca de la actualidad diagnóstica en el Ecuador, del total de los
documentos tan solo dos publicaciones fueron desarrolladas en base a la realidad del país. Está
47
limitada información conllevó a qué se consultará e indagará en páginas oficiales del Ministerio
de Salud Pública (MSP) del Ecuador, al código orgánico de salud (COS), entrevistas e informes
periodísticos que puedan aportar información para esta revisión.
A grandes rasgos tanto el diagnóstico como el tratamiento de la EP han sido de poca relevancia
para el estado ecuatoriano, cómo le explica Quispe, (2014), director de la Fundación Ecuatoriana
de Pacientes con Enfermedades de Depósito Lisosomal (FEPEL DASHA), el seguimiento del
estado de arte de la EP en conjunto con las enfermedades raras carece de actualizaciones por parte
del Ministerio de Salud esto se relaciona a que no exista elaborado y publicado una guía de práctica
clínica sobre la enfermedad de Pompe en Ecuador.
La FEPEL DASHA en el año 2015 requirió un registro al MSP sobre el número de pacientes
identificados con la EP pero él mismo no emitió una respuesta, no fue hasta el año 2017 que el Dr.
Francisco Espinel en su entrevista con El Diario la Hora, difundió la situación actual de la EP en
el país explicando que tan sólo se habían diagnosticado a 5 pacientes pero que por falta de apoyo
diagnóstico sigue existiendo pacientes subdiagnosticados y declaró que existe una demora de por
lo menos 7 años en diagnosticar la afección (Diaz, 2015; Hora, 2017).
La única contribución por parte del Gobierno es la inclusión de una reforma a la Ley Orgánica
de Salud en enero del 2012 en la que se incluye el tratamiento de enfermedades raras huérfanas y
catastróficas donde consta la EP; esto conseguido por parte de la presión pública de los pacientes
que necesitaban el soporte terapéutico el cual tiende a ser de costo elevado y de difícil obtención.
Sin embargo, la FEPEL DASHA a asegura que existió incumplimiento al proveer el tratamiento
de la EP siendo demoroso en costearlo a los familiares en este caso (Diaz, 2015).
Algo que hay que recalcar sobre el manejo de la EP en el Ecuador en la ley orgánica es que
dispone tan sólo con el tratamiento y soporte de la enfermedad de Pompe mas no del pilar
48
fundamental de la enfermedad que es su diagnóstico ya que él mismo no se oferta en el país. está
resolución aporta la mitad de una completa solución clínica que debería involucrar tanto un
diagnóstico como tratamiento. El soporte diagnóstico es primordial, pues sí se evidencia que un
neonato presenta alguna forma de enfermedad este requiere un seguimiento continuo con el
respectivo tratamiento antes de que los síntomas puedan progresar una enfermedad con una etapa
irreversible. Otro motivo del subdiagnóstico que se menciona, es que no existe personal
especialista capacitado (genetistas) para tratar la enfermedad, aumentando la dificultad
diagnóstica, además la falta de investigación y propuestas médicas para estudiar la enfermedad
acarrea la falta de registros de prevalencia.
Básicamente, no existe laboratorio alguno en el país que realice tanto la determinación del GAA
como las pruebas moleculares pertinentes. Los casos diagnosticados de EP en el país se han
logrado con ayuda del procesamiento de las técnicas mediante derivación a países aliados como
Colombia, Brasil y Argentina. Como en el único caso clínico registrado sucedido en el Hospital
Pediátrico Baca Ortiz, tuvieron un paciente femenino de 5 meses de edad con presencia de
cardiomegalia, miocardiopatía, hipotonía muscular y neumonía, que luego de ser evaluado en
varias áreas del hospital como cardiología, neumología y neurología; dieron como presunción
diagnóstica de EP, no obstante, la paciente sufrió asfixia por insuficiencia respiratoria provocando
su fallecimiento, con el consentimiento de los padres se obtuvo una biopsia post-mortem, el área
de patología detectó depósitos de glucógeno, pero para la confirmación se tuvo que enviar muestras
a EE. UU porque en el país no se realizan las pruebas requeridas, la universidad de Pittsburgh fue
quien luego del análisis corroboraron la EP (Oliveros-Rivero et al., 2017).
Un desafío para el diagnóstico molecular como el caso de la secuenciación de ADN qué se
incluye en muchos de los algoritmos propuestos, es el acceso a los recursos para la realización de
49
estas metodologías, de la misma forma puntos de referencia que abordan enfermedades que
prescinden de un diagnóstico molecular no presentado algún interés sobre el diagnóstico de EP. El
caso del tamizaje neonatal en el Ecuador qué ha sido un programa muy difícil en cuestión de
control y manejo para el estado ecuatoriano, es por eso que actualmente el programa de tamizaje
neonatal está encargado de realizarlo el centro de referencia Synlab, a pesar de esto no adquiere la
necesidad de realizar el diagnóstico de EP, ni de incluirlo dentro de su programa con la
justificación de que es poco sustentable en base a la prevalencia nacional y a la poca oferta que
pudiera existir al incluirla.
Recientemente, el día 25 de agosto del 2020 se aprobó en el Ecuador el nuevo código orgánico
de la salud (COS), donde la situación de la EP empeoraba al eliminarse las normativas que la ley
orgánica de la salud del 2012 ejecutaba, sin embargo, el día 25 de septiembre del 2020 este código
fue vetado por un año por el ejecutivo, por lo tanto, es de esperar que el rediseño de un futuro
código establezca el soporte que necesita la EP tanto a nivel diagnóstico como terapéutico (EL
NORTE, 2020).
3.3.10 Algoritmos Diagnósticos
Con toda la información recopilada y basándose en los mejores métodos tanto de primera como
de segunda línea para el diagnóstico de la EP, se presenta un algoritmo diagnóstico elaborado por
el autor, que detalla los pasos a seguir en cuestión de pruebas de laboratorio clínico para el
diagnóstico oportuno de la patología a partir de la presunción de síntomas y diagnósticos clínicos
Figura 17.
Por otra parte, también se ha elaborado una propuesta de algoritmo diagnostico Figura 18 que
podría aplicarse en el Ecuador para el diagnóstico de EP, basándose en las metodologías que se
podrían implementar y cuales todavía requerirían la derivación de las muestras hacia otros países.
50
3.3.10.1 Algoritmo General de la Enfermedad de Pompe.
Figura 17. Algoritmo General para el Diagnóstico de EP
51
52
Nota. Se adjunta enlace para descargar el algoritmo completo para mejor visualización https://mega.nz/folder/7NhmgJyJ#-qrh4Yz2O7bNW3zzMnyrKQ. Autor:
Eduardo Vallejos
53
3.3.10.2 Propuesta de Algoritmo de la Enfermedad de Pompe en Ecuador.
Figura 18. Propuesta de un algoritmo diagnóstico para Ecuador
54
Nota. Se adjunta enlace para descargar el algoritmo completo para mejor visualización https://mega.nz/folder/7NhmgJyJ#-qrh4Yz2O7bNW3zzMnyrKQ. Autor:
Eduardo Vallejos
55
3.4 Discusiones
En un inicio durante el proceso de búsqueda de la información existió inconveniencias a la hora
de la filtración en las distintas bases de datos utilizadas, la razón fue que cada base de datos tiene
diferentes opciones para filtrar los documentos deseados. Algunas bases de datos ofrecían la
discriminación de artículos por idiomas, autor, años y categorías mientras qué otras bases
simplemente tenían filtros por términos de búsqueda lo que provoca una complicación a la hora de
discriminar artículos sobre todo en las primeras búsquedas en las bases como el caso de
SpringerLink que en la primera búsqueda filtro una alta cantidad de documentos que de ellos más
del 50% eran documentos un poco alejados al tema de búsqueda, es por eso que se llegó a reportar
hasta 9000 artículos en la primera búsqueda de las 12 bases de datos utilizadas.
La información recogida por los diversos artículos establece que la detección enzimática
necesita de 2 niveles de diagnóstico ya que usualmente el primer nivel otorga resultados falsos
positivos, una prueba de segundo nivel realizado de manera inmediata sobre la muestra DBS es
necesaria para situar el estado de salud del neonato. Cómo le explica Sawada et al. (2020), también
se pueden producir resultados falsos negativos esto se debe a que los neutrófilos en la sangre
contienen una enzima llamada maltasa glucoamilasa que forma parte de las enzimas glucosidasas
al igual que la GAA, esta enzima al reaccionar a un pH similar cómo el que reacciona también la
GAA, camufla la verdadera actividad enzimática qué tiene en el paciente, a pesar de esto se ha
incluido en el cribado el uso de la acarbosa qué es un inhibidor de la actividad de la maltasa
glucoamilasa, con esto se discriminaría la actividad enzimática extra y se obtendrían los verdadera
actividad del GAA.
En un estudio realizado por Tang et al. (2020), observó que las formas de la EP , es decir, tanto
la forma tardía como la infantil tienen un vínculo entre si con respecto a las actividades del GAA,
56
en este estudio era evidente la correlación , ya que la etapa de inicio tardío tenía valores del GAA
menores que los pacientes que tenían la etapa infantil, y a su vez los neonatos con sospecha de
EP infantil tenían menor actividad residual del GAA en comparación con posibles
pseudodeficiencias y con pacientes falsos positivos. Como ya se mencionó en los resultados, es
importante clasificar a este tipo de pacientes, por lo tanto, esta resolución puede ayudar a
discriminar los pacientes verdaderamente positivos de lo que no lo son.
Los estudios que evaluaron la determinación de la Glc4 en orina, donde apreciaron que en
individuos sanos excretan ínfimas cantidades de Glc4 y conforme aumentan los años de edad estas
cantidades pequeñas siguen en constante disminución, sin embargo, los valores en personas con la
enfermedad de Pompe superaba con gran notoriedad a los valores de las personas sanas; valores
de la enfermedad de Pompe de inicio infantil se obtuvieron de 99 ±68 mmol/mol de creatinina
frente a los 4 mmol/mol de creatinina en pacientes sanos. En el caso de la enfermedad de inicio
tardío existe menos diferencia, pero de la misma forma son notables estas diferencias, valores en
enfermos de 12.1 ±17.4 mmol/mol de creatinina frente a 1.7 mmol/mol los controles sanos (Bobillo
Lobato et al., 2013; Canbay et al., 2020). Estoy resultados nos ayudan evidenciar que el nivel de
tetrasacárido en orina es ideal como disyuntiva para el diagnóstico de la enfermedad de Pompe, no
obstante, hay que considerar que los niveles pueden variar en función a la edad.
A pesar de la revisión bibliográfica sí incluyó los métodos enzimáticos del GAA en fibroblastos
de la piel como parte del diagnóstico, los algoritmos clínicos no se les incluyo. Anteriormente este
tipo de muestra era aceptado como el estándar de oro para el diagnóstico, pese a esto, actualmente
es poco utilizado debido a que implica un alto costo, el tiempo que toma realizar los cultivos, es
altamente invasivo y para su proceso necesito técnicas especiales de laboratorio, algo que
actualmente los especialistas intentan evitar.
57
Los estudios que se enfocaron la técnica de tinción PAS, como el realizado por Parisi et al.
(2018), se evaluó le eficacia de este método al utilizar pacientes diagnosticados con EP frente a
pacientes controles y pacientes con como otro tipo de glucogenosis muscular (MGSD),
evidenciando que los linfocitos PAS positivos en pacientes con EP son más elevados frente a los
controles y pacientes con otras MGSD. La capacidad de respuesta rápida de esta técnica la
convierte en una herramienta a considerarse cómo ensayo de primer nivel para el diagnóstico ante
la sospecha de EP y posteriormente como prueba control de la eficacia del tratamiento.
Los estudios acerca de la pseudodeficiencias han detectado que algunas variantes con
pseudodeficiencias puede influir al modificar variantes patógenas (ej. Variante c.
1726G>A [p. G576S]) provocando que la actividad se reduzca aún más (Y.-H. Chien et al., 2013).
Con estos resultados podemos decir que los programas de cribado para la EP deben ser capaces de
distinguir los casos de EP con los que portan los alelos pseudodeficientes.
La realización del algoritmo diagnóstico general de la EP se basa en la recomendación de las
mejores técnicas probadas en todos los estudios encontrados, los cuales han generado mejores
resultados en cuanto a la validez diagnóstica, así como la identificación de la pseudodeficiencia y
la disminución de posibles falsos positivos, de igual forma sí incluye la discriminación de la forma
infantil frente a la forma de inicio tardío de la enfermedad esto de acuerdo con la sintomatología.
El planteamiento de elaborar un algoritmo adecuado a las circunstancias diagnósticas en el
Ecuador fue conflictivo al no existir ofertas de pruebas de laboratorio específicas, ni ninguna
propuesta diagnóstica que se haya intentado implementar o de igual manera la falta de información
sobre el manejo de la EP en el país, sin embargo, basándose en la asequibilidad de pruebas
diagnósticas se propone un algoritmo diagnóstico por el cual el Ecuador puede ser apto de efectuar
en base a las capacidades técnicas, operarias y presupuestaria.
58
Capítulo IV
Conclusiones y Recomendaciones
Se ha descrito la evidencia científica actualizada acerca de la enfermedad de Pompe,
demostrando que actualmente sigue existiendo la búsqueda de nuevos métodos diagnósticos que
permitan mejorar los protocolos ya establecidos.
Sí identificó las diferencias metodológicas que existe para cada forma de enfermedad de Pompe,
para la forma de inicio infantil se requiere de un diagnóstico precoz que se base en metodologías
diagnósticas rápidas y fiables, es por eso que los métodos enzimáticos han sido el pilar para la
detección de la afección, mientras que para la forma inicio tardía, es la identificación de variantes
patogénicas mediante procesos moleculares, que a largo plazo se mira cómo un punto de partida
para un pronóstico a futuro en personas asintomáticas.
El DBS es el tipo de muestra ideal para la detección de la EP para cualquiera de sus formas, se
establece que las mediciones de la GAA con valores críticos de actividad residual tienen una
interpretación de alto riesgo para el paciente de adquirir la EP y que las pruebas confirmatorias y
segundo nivel de diagnóstico son necesarias.
Fue posible compilar la información relacionada a los diagnósticos bioquímicos y moleculares
de la enfermedad de Pompe, demostrando en conjunto que forma parte de un protocolo clínico qué
puede asegurar un diagnóstico eficaz en pacientes con sospecha clínica.
La determinación de la actividad enzimática del GAA mediante la muestra DBS ha sido el tipo
de muestra con mayores estudios reportados, por la necesidad de establecer protocolos de cribado
neonatal.
El gold estándar el diagnóstico de la EP es la determinación de actividad del que GAA
linfocitaria mediante el análisis en tejidos, actualmente está en debate por ser un procedimiento
59
invasivo, por el costo qué implica y el tiempo qué demora en dar resultados, con ello se ha
intentado reemplazarla como gold estándar por la determinación de la actividad del GAA en DBS,
de igual manera sí intentado mejorar este método mediante el uso qué otro tipo de muestras que
no sean biopsias cómo cultivo de linfocitos
El análisis de la glucosa tetrasacárido en muestra de orina ha sido estudiado cómo un
biomarcador adecuado para el diagnóstico del EP, su accesibilidad y eficacia ubicaron como una
prueba de primer nivel qué debería hacerse en conjunto con la actividad del GAA.
El análisis molecular ha incluido distintas metodologías que ha dejado resultados exitosos la
hora de proporcionar variantes patogénicas conocidas, nuevas variantes y la presencia de alelos
pseudodeficientes.
Al ser una enfermedad multivariante a nivel molecular se requiere la introducción de nuevos
métodos para la validación diagnóstica de la EP, estos métodos ayudarían identificar nuevas
variantes y poder llegar a pronosticar la patogenicidad de estas.
Fue posible describir nuevas metodologías qué pueden ser consideradas futuros consensos
internacionales para ser introducidas en los algoritmos actualizados.
La determinación de linfocitos vacuolados PAS positivos en frotis de sangre se considera como
la mejor nueva técnica de diagnóstico qué podría emplearse en los protocolos oficiales, esta técnica
demostró tener una validez diagnóstica qué es 100%.
Se reportó la existencia de una pseudodeficiencia de la GAA en ciertos pacientes con sospecha
de EP, por ello la evaluación del gen para detectar esta afección mejora el éxito de los programas
de cribado diagnóstico.
La Enfermedad de Pompe en el Ecuador no ha tenido relevancia en el diagnóstico en los centros
de atención de salud, uno de los problemas evidenciados es la falta de divulgación científica acerca
60
de la existencia de la enfermedad en el país, esto concluye en que en el país no existe actualización
diagnostica sobre la enfermedad de Pompe.
No existe protocolos y cómo tratar la enfermedad en el Ecuador y de igual manera no existe la
oferta de pruebas diagnósticas oportunas. A pesar de que las metodologías moleculares son un
desafío para su implementación en el Ecuador, otra de las dificultades que acarrea esto es la
experiencia profesional qué puedo acompañar a una buena determinación diagnóstica.
Un primer paso para que la enfermedad de Pompe sea de importancia médica en el Ecuador es
que se realicen investigaciones científicas y estudios acerca de la prevalencia mediante programas
piloto, es por lo que se recomienda un mayor enfoque en esta enfermedad.
Con la actualidad diagnóstica descrita se propuso un algoritmo diagnóstico qué sintetizaba de
forma clara y coherente el proceso diagnóstico que debe realizarse para llegar a establecer un
diagnóstico definitivo de la EP.
Ecuador tiene la capacidad técnica operativa y presupuestaria para iniciar el diagnóstico de la
enfermedad de Pompe con la implementación de los métodos más económicos y fiables, en base
a esto se propuso un posible algoritmo el cual Ecuador puede estar capacitado de implementarlo.
61
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70
Anexos
Anexo A. Árbol de Problemas
Desatención a Falta de un diagnóstico

Diagnóstico erróneo temprano de la enfermedad de
sobre una afección la existencia de
casos nuevos pompe
muscular Derivaciones al exterior
para el diagnóstico
Efecto ¿Se puede encontrar la evidencia científica necesaria de

los protocolos y guias de diagnóstico establecidos para la
Enfermedad de Pompe en pacientes con sospecha clínica
Causa en Ecuador?
Diagnóstico
Diferencial Falta de conocimiento acerca de
complejo pruebas diagnósticas para su
Prevalencia Desconocimiento de la
baja en detección en el país
enfermedad de pompe
Latinoamérica por profesionales
71
Anexo B. Registro de Base de Datos

20 de mayo 2020
Proyecto de Investigación Bibliográfica
Registro de las fuentes de información preseleccionadas obtenidas en base a la terminología de Búsqueda

BASE DE DATOS BIBLIOGRÁFICOS
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Científico
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OT12-002 CENETEC 2010 Español Protocolo Otros
tipo II (Enfermedad de Pompe)
Guía informativa para la glucogenosis tipo II
OT12-003 Fernández Salido Javier 2011 Español Protocolo Otros
(Enfermedad de Pompe)
Video reportaje sobre las enfermedades
llamadas raras. Estudio de caso niños de la
OT12-004 Pabon Ana Elizabeth 2015 Español Tesis Otros
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SP01-046 glycosidase, and α-galactosidase activities in Sozmen, E.Y., Sezer, E.D. 2017 Inglés SCOPUS
Libro
dried blood spot samples
82
Pascual-Pascual, S.I., Nascimento,
Clinical guidelines for infantile-onset Pompe
A., Fernández-Llamazares, C.M., Artículo
SP01-047 disease | [Guia clínica de la enfermedad de 2016 Español SCOPUS
(...), Manrique-Rodríguez, Científico
Pompe infantil]
S., Blasco-Alonso, J.
Diagnosis of late-onset Pompe disease and Lévesque, S., Auray-Blais,
Artículo
SP01-048 other muscle disorders by next-generation C., Gravel, E., (...), Austin, 2016 Inglés SCOPUS
Científico
sequencing S., Kishnani, P.
Combination of acid phosphatase positivity
and rimmed vacuoles as useful markers in the Dolfus, C., Simon, J.-
Artículo
SP01-049 diagnosis of adult-onset Pompe disease P., Landemore, G., Leroy, 2016 Inglés SCOPUS
Científico
lacking specific clinical and pathological F., Chapon, F.
features
Importance of clinical suspicion in the
diagnosis of late-onset Pompe disease |
Barba-Romero, M.A., García-
SP01-050 [Importancia de la sospecha clínica en el 2016 Español Nota SCOPUS
Cuartero, I.
diagnóstico de la enfermedad de pompe de
inicio tardío]
Reference values of intralymphocyte acid
Del Castillo Figueruelo, B., Durán
alpha-glucosidase activity | [Valores de Artículo
SP01-051 Parejo, P., Bobillo Lobato, 2016 Español SCOPUS
referencia de la actividad enzimática alfa- Científico
J., Jiménez, L.M.
glucosidasa ácida linfocitaria]
Extended use of dried-leukocytes impregnated
Camelier, M., De Mari, J., Burin, Artículo
SP01-052 in filter paper samples for detection of Pompe, 2015 Inglés SCOPUS
M., Civallero, G., Giugliani, R. Científico
Gaucher, and Morquio A diseases
Newborn screening for lysosomal storage Matern, D., Gavrilov, D., Oglesbee,
disorders D., (...), Rinaldo, P., Tortorelli, S.
Pérez-López, J., Selva-
Delayed diagnosis of late-onset Pompe
O'Callaghan, A., Grau-Junyent, Artículo
SP01-054 disease in patients with myopathies of 2015 Inglés SCOPUS
J.M., (...), Torralba-Cabeza, Científico
unknown origin and/or hyperCKemia
M.A., Vilardell-Tarrés, M.
Mattosova, S., Hlavata, A., Spalek,
Artículo
SP01-055 Late onset form of Pompe disease P., (...), Macekova, D., Chandoga, 2015 Inglés SCOPUS
Científico
J.
Inherited metabolic disorders: Prenatal Verma, J., Thomas, D.C., Sharma, Artículo
diagnosis of lysosomal storage disorders S., (...), Bijarnia, S., Verma, I.C. Científico
83
Lysosomal storage disorder screening
Hopkins, P.V., Campbell, C., Klug,
implementation: Findings from the first six Artículo
SP01-057 T., (...), Raburn-Miller, J., Kiesling, 2015 Inglés SCOPUS
months of full population pilot testing in Científico
J.
Missouri
Development of Biomarker Assays for Clinical
Millington, D.S., Sista, R., Bali, Capítulo de
SP01-058 Diagnostics Using a Digital Microfluidics 2014 Inglés SCOPUS
D., Eckhardt, A.E., Pamula, V. Libro
Platform (Book Chapter)
Detecting multiple lysosomal storage diseases
Liao, H.-C., Chiang, C.-C., Niu, D.- Artículo
SP01-059 by tandem mass spectrometry - A national 2014 Inglés SCOPUS
M., (...), Lin, W.-D., Chen, Y.-J. Científico
newborn screening program in Taiwan
Determination of the lysosomal hydrolase Castilhos, C.D., Mezzalira,
Artículo
SP01-060 activity in blood collected on filter paper, an J., Goldim, M.P.S., (...), Mello, 2014 Inglés SCOPUS
Científico
alternative to screen high risk populations A.S., Coelho, J.C.
Development of a feasible assay for the
Er, T.-K., Chen, C.-C., Chien, Y.-H., Artículo
SP01-061 detection of GAA mutations in patients with 2014 Inglés SCOPUS
(...), Kan, T.-M., Jong, Y.-J. Científico
Pompe disease
Capítulo de
SP01-062 Glycogen Storage Diseases (Book Chapter) Kishnani, P.S. 2014 Inglés SCOPUS
Libro
Screening for late-onset Pompe disease in Palmio, J., Auranen, M., Kiuru- Artículo
Finland Enari, S., (...), Bodamer, O., Udd, B. Científico
Kishnani, P.S., Amartino,
Methods of diagnosis of patients with Pompe Artículo
SP01-064 H.M., Lindberg, C., (...), Wilson, 2014 Inglés SCOPUS
disease: Data from the Pompe Registry Científico
A., Keutzer, J.
Diagnosis recommendations for late-onset
pompe disease | [Recomendações para o Brito-Avô, L., Alves, J.D., Costa, Artículo
SP01-065 2014 Portugués SCOPUS
diagnóstico da forma tardia da doença de J.M., (...), Oliveira, A., Gomes, D. Científico
pompe]
Artículo
SP01-066 The diagnostic path to Pompe disease Bodamer, O.A., Hung, C. Y 2014 Inglés SCOPUS
Científico
Argentine consensus on the diagnosis,
monitoring and treatment of Pompe disease | Dubrovsky, A., Fulgenzi,
Artículo
SP01-067 [Consenso argentino para el diagnóstico, E., Amartino, H., (...), Taratuto, 2014 Español SCOPUS
Científico
seguimiento y tratamiento de la enfermedad A.L., Zgaga, M.
de Pompe]
Tetra-saccharide glucose as a diagnostic Bobillo Lobato, J., Durán Parejo, Artículo
SP01-068 2013 Español SCOPUS
biomarker for Pompe disease: A study with 35 P., Tejero Díez, P., Jiménez, L.M. Científico
84
patients | [Glucosa tetrasacárido como
biomarcador diagnóstico de la enfermedad de
Pompe: Estudio en 35 pacientes]
Pompe disease: Early diagnosis and early
SP01-069 Chien, Y.-H., Hwu, W.-L., Lee, N.-C. 2013 Inglés Revisión SCOPUS
treatment make a difference
Identification of infants at risk for developing
Fabry, Pompe, or mucopolysaccharidosis-I Scott, C.R., Elliott, S., Buroker, N., Artículo
from newborn blood spots by tandem mass (...), Gelb, M.H., Turecek, F. Científico
spectrometry
Screening for later-onset Pompe's disease in Spada, M., Porta, F., Vercelli, L., Artículo
patients with paucisymptomatic hyperCKemia (...), Comi, G., Mongini, T. Científico
Detection of c. -32T>G (IVS1-13T>G) Bobillo Lobato, J., Sánchez Peral,
SP01-072 mutation of Pompe disease by real-time PCR B.A., Durán Parejo, P., Jiménez, 2013 Inglés Carta SCOPUS
in dried blood spot specimen L.M.
Selective screening for lysosomal storage
diseases with dried blood spots collected on Capítulo de
SP01-073 Uribe, A., Giugliani, R. 2013 Inglés SCOPUS
filter paper in 4,700 high-risk colombian Libro
subjects
Artículo
SP01-074 Late-onset Pompe's disease Teener, J.W. 2012 Inglés SCOPUS
Científico
Diagnosing lysosomal storage disorders: Artículo
SP01-075 Bodamer, O.A., Dajnoki, A. 2012 Inglés SCOPUS
Pompe disease Científico
First pilot newborn screening for four
Paciotti, S., Persichetti,
lysosomal storage diseases in an Italian Artículo
SP01-076 E., Pagliardini, S., (...), Dardis, 2012 Inglés SCOPUS
region: Identification and analysis of a putative Científico
A., Beccari, T.
causative mutation in the GBA gene
Short-incubation mass spectrometry assay for Mechtler, T.P., Metz, T.F., Müller,
Artículo
SP01-077 lysosomal storage disorders in newborn and H.G., (...), Herkner, K.R., Kasper, 2012 Inglés SCOPUS
Científico
high-risk population screening D.C.
Newborn screening for lysosomal storage Artículo de
SP01-078 Ross, L.F. 2012 Inglés SCOPUS
diseases: An ethical and policy analysis Conferencia
Rapid ultraperformance liquid
chromatography-tandem mass spectrometry Sluiter, W., Van Den Bosch,
Artículo
SP01-079 assay for a characteristic glycogen-derived J.C., Goudriaan, D.A., (...), Van Der 2012 Inglés SCOPUS
Científico
tetrasaccharide in pompe disease and other Ploeg, A.T., Ruijter, G.J.G.
glycogen storage diseases
85
Algorithm for Pompe disease newborn
Chiang, S.-C., Hwu, W.-L., Lee, N.- Artículo
SP01-080 screening: Results from the Taiwan screening 2012 Inglés SCOPUS
C., Hsu, L.-W., Chien, Y.-H. Científico
program
Assessing disease severity in Pompe disease:
Young, S.P., Piraud, M., Goldstein, Artículo
SP01-081 The roles of a urinary glucose tetrasaccharide 2012 Inglés SCOPUS
J.L., (...), Bashir, M.R., Bali, D.S. Científico
biomarker and imaging techniques
Newborn screening for Pompe disease: An Artículo
SP01-082 Burton, B.K. 2012 Inglés SCOPUS
update, 2011 Científico
How common is misdiagnosis in late-onset
SP01-083 Hobson-Webb, L.D., Kishnani, P.S. 2012 Inglés Carta SCOPUS
pompe disease
Neonatal screening for lysosomal storage
Mechtler, T.P., Stary, S., Metz, T.F., Artículo
SP01-084 disorders: Feasibility and incidence from a 2012 Inglés SCOPUS
(...), Streubel, B., Kasper, D.C. Científico
nationwide study in Austria
Newborn screening for lysosomal storage Wittmann, J., Karg, E., Turi, S., Capítulo de
disorders in Hungary (...), Mühl, A., Rolfs, A. Libro
Urine analysis of glucose tetrasaccharide by
Manwaring, V., Prunty,
HPLC; A useful marker for the investigation of Artículo
SP01-086 H., Bainbridge, K., (...), Vellodi, 2012 Inglés SCOPUS
patients with Pompe and other glycogen Científico
A., Heales, S.
storage diseases
Clinical guidelines for late-onset pompe Barba-Romero, M.A., Barrot,
Artículo
SP01-087 disease | [Guía clínica de la enfermedad de E., Bautista-Lorite, J., (...), Solera, 2012 Español SCOPUS
Científico
pompe de inicio tardío] J., Vílchez-Padilla, J.J.
Molecular analysis and protein processing in
Bali, D.S., Tolun, A.A., Goldstein, Artículo
SP01-088 late-onset pompe disease patients with low 2011 Inglés SCOPUS
J.L., Dai, J., Kishnani, P.S. Científico
levels of acid α-glucosidase activity
Improved assay for differential diagnosis
between Pompe disease and acid α- Shigeto, S., Katafuchi, T., Okada, Artículo
glucosidase pseudodeficiency on dried blood Y., (...), Reuser, A.J.J., Okumiya, T. Científico
spots
Newborn screening for lysosomal storage Artículo
SP01-090 Nakamura, K., Hattori, K., Endo, F. 2011 Inglés SCOPUS
disorders Científico
¿Prenatal diagnosis of pompe disease - Prajnya, R., Rehder, C., Phadke, Articulo
Enzyme assay or molecular testing? S.R., Bali, D. Científico
Later-onset pompe disease: Early detection
Chien, Y.-H., Lee, N.-C., Huang, H.- Artículo
SP01-092 and early treatment initiation enabled by 2011 Inglés SCOPUS
J., (...), Tsai, F.-J., Hwu, W.-L. Científico
newborn screening
86
A tandem mass spectrometry triplex assay for
Duffey, T.A., Bellamy, G., Elliott, S., Artículo
SP01-093 the detection of fabry, pompe, and 2010 Inglés SCOPUS
(...), Gelb, M.H., Scott, C.R. Científico
mucopolysaccharidosis-I (Hurler)
Hagemans, M.L.C., Stigter,
PAS-positive lymphocyte vacuoles can be
R.L., Van Capelle, C.I., Artículo
SP01-094 used as diagnostic screening test for Pompe 2010 Inglés SCOPUS
(...), Beishuizen, A., Van Der Ploeg, Científico
disease
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Infantile-onset pompe disease: A diagnosis Dixon, C.A., Anderson, J.B., Ruddy, Artículo
not to miss R.M., Cripe, L.H. Científico
Genetic heterozygosity and pseudodeficiency Labrousse, P., Chien, Y.-
Artículo
SP01-096 in the Pompe disease newborn screening pilot H., Pomponio, R.J., (...), Scholl, 2010 Inglés SCOPUS
Científico
program T., Hwu, W.-L.
Diagnostic efficacy of the fluorometric
determination of enzyme activity for Pompe Lukacs, Z., Nieves Cobos,
Artículo
SP01-097 disease from dried blood specimens P., Mengel, E., (...), Keil, A., Santer, 2010 Inglés SCOPUS
Científico
compared with lymphocytes- possibility for R.
newborn screening
Antenatal diagnosis of pompe disease by fetal Hamdan, M.A., El-Zoabi,
Artículo
SP01-098 echocardiography: Impact on outcome after B.A., Begam, M.A., Mirghani, 2010 Inglés SCOPUS
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early initiation of enzyme replacement therapy H.M., Almalik, M.H.
Llerena Jr., J.C., Horovitz,
The Brazilian Consensus on the Management D.M., Nagahashi Marie, S.K., Artículo
of Pompe Disease (...), Muñoz Rojas, M.V., Martins, Científico
A.M.
New strategy for the screening of lysosomal
storage disorders: The use of the online La Marca, G., Casetta, B., Malvagia, Artículo
trapping-and-cleanup liquid S., Guerrini, R., Zammarchi, E. Científico
chromatography/mass spectrometry
Long-term monitoring of patients with infantile-
onset Pompe disease on enzyme replacement Young, S.P., Zhang, H., Corzo, D., Artículo
therapy using a urinary glucose (...), Kishnani, P.S., Millington, D.S. Científico
tetrasaccharide biomarker
Screening for pompe disease using a rapid Goldstein, J.L., Young,
Artículo
SP01-102 dried blood spot method: experience of a S.P., Changela, M., (...), Kishnani, 2009 Inglés SCOPUS
Científico
clinical diagnostic laboratory P.S., Bali, D.S.
87
Al-Lozi, M.T., Amato, A.A., Barohn,
Diagnostic criteria for late-onset (childhood Artículo
SP01-103 R.J., (...), Mozaffar, T., Kishnani, 2009 Inglés SCOPUS
and adult) Pompe disease Científico
P.S.
High frequency of acid α-glucosidase
Kumamoto, S., Katafuchi,
pseudodeficiency complicates newborn Artículo
SP01-104 T., Nakamura, K., (...), Reuser, 2009 Inglés SCOPUS
screening for glycogen storage disease type II Científico
A.J.J., Okumiya, T.
in the Japanese population
Taylor and
Meta-opinion: from screening to diagnosis of Artículo
TF06-001 Lukacs, Z., Schoser, B. 2016 Inglés Francis
Pompe disease – a European perspective Científico
Online
Reuser, A.J.J., Verheijen, Taylor and
Enzymatic and molecular strategies to
TF06-002 F.W., Kroos, M.A., (...), Van Der 2010 Inglés Revisión Francis
diagnose Pompe disease
Ploeg, A.T., Halley, D.J.J. Online
Taylor and
Advances in newborn screening for Pompe
TF06-003 Chien, Y.-H., Hwu, W.-L., Lee, N.-C. 2016 Inglés Revisión Francis
disease and resulting clinical outcomes
Online
Roberto Giugliani, Ana-Carolina
Taylor and
Current molecular genetics strategies for the Brusius-Facchin, Gabriela
TF06-004 2016 Inglés Revisión Francis
diagnosis of lysosomal storage disorders Pasqualim, Sandra Leistner-Segal,
Online
Mariluce Riegel & Ursula Matte
Digital microfluidics comes of age: high- David Millington, Scott Norton, Taylor and
Artículo
TF06-005 throughput screening to bedside diagnostic Vamsee Pamula, Raj Singh, Rama 2018 Inglés Francis
Científico
testing for genetic disorders in newborns Sista, Vijay Srinivasan Online
Glycogen Storage Diseases: A Brief Review
Taylor and
and Update on Clinical Features, Genetic John Hicks, Eric Wartchow & Gary
TF06-006 2011 Inglés Revisión Francis
Abnormalities, Pathologic Features, and Mierau
Online
Treatment
Identifying and overcoming barriers to Yolanda González-Irazabal, Taylor and
TF06-007 harmonize newborn screening programs Guillermo Hernandez de Abajo & 2020 Inglés Revisión Francis
through consensus strategies Eduardo Martínez-Morillo Online
Michael G Pollack, Vamsee K Taylor and
Applications of electrowetting-based digital
TF06-008 Pamula, Vijay Srinivasan and Allen 2011 Inglés Revisión Francis
microfluidics in clinical diagnostics
E Eckhardt Online
88
Anexo C. Plantilla o Matriz de Registro de Base de Datos 2


20 de mayo 2020
Proyecto de Investigación Bibliográfica
Registro de las fuentes de información seleccionadas para el análisis comparativo

BASE DE DATOS BIBLIOGRÁFICOS
Código Título Autor Categoría Subcategoría Tipo de estudio Prueba Diagnóstica Año
89

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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUÍMICAS

AUTOR: Vallejos Tabango Kevin Eduardo

DMQ, septiembre 2020

derechos morales y patrimoniales del trabajo de titulación: “Evidencia científica de diagnóstico

para la Enfermedad de Pompe infantil y de inicio tardío en Ecuador”, modalidad trabajo de

investigación, de conformidad con el Art. 114 del CÓDIGO ORGÁNICO DE ECONOMÍA

SOCIAL DE LOS CONOCIMIENTOS, CREATIVIDAD E INNOVACIÓN, concedo a favor de

comercial de la obra, con fines estrictamente académicos.

y publicación de este trabajo de titulación en el repositorio virtual, de conformidad a lo dispuesto

en el Art. 144 de la Ley Orgánica de Educación Superior.

El autor declara que la obra objeto de la presente autorización es original en su forma de

expresión y no infringe el derecho de autor de terceros, asumiendo la responsabilidad por cualquier

“Evidencia científica de diagnóstico para la Enfermedad de Pompe infantil y de inicio tardío en

proceso de ejecución del presente Proyecto de Investigación, hasta su presentación y sustentación

por parte del tribunal lector-evaluador que se designe.

En la ciudad de Quito, a los 12 días del mes de junio de 2020.

Dr. Eduardo Patricio Mayorga Llerena

el trabajo de investigación titulado: “Evidencia científica de diagnóstico para la Enfermedad de

Para constancia de lo actuado firman:

Dra. Verónica Sánchez Dra. Lourdes Pazmiño

Cd. N° 1710358746 Cd. N° 1714392907

Figura 1. Diagrama de PRISMA. Metodología de la búsqueda ........................................................... 27

Tabla 1. Signos y síntomas de los subtipos de la variante infantil ........................................................ 14

EP: Enfermedad de Pompe

GAA: Alfa-Glucosidasa Ácida

EIM: Errores Innatos del Metabolismo

DBS: Gotas de Sangre Seca Recogida sobre Papel Filtro

GSDII: Glucogenosis de Tipo II

EDL: Enfermedad de Deposito Lisosomal

CK: Creatinina Kinasa

GLc4: Glucosa Tetrasacárido

NHI: National Institutes of Health

NCBI: National Center for Biotechnology Information

PAS: Ácido Peryódico Schiff

MS/MS: Espectrometría de masas en tándem

FIA-MS/MS: Espectrometría de masas en tándem de inyección de flujo

LC-MS/MS: Cromatografía liquida con espectrometría de masas

FMD: Fluorometría de Microfluidos Digitales

tNGS: Secuenciación de próxima generación dirigida

SPN: Análisis de matriz de polimorfismos de un solo nucleótido

WES: Secuenciación de Exoma Completo

PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa

RT-PCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa con transcriptasa inversa

qPCR: Reacción en Cadena de la Polimerasa en Tiempo Real o Cuantitativa

VPP: Valor Predictivo Positivo

MSP: Ministerio de Salud Pública

COS: Código Orgánico de la Salud

FEPEL DASHA: Fundación Ecuatoriana de Pacientes con Enfermedades de Depósito

Autor: Kevin Eduardo Vallejos Tabango

Tutor: Dr. Eduardo Patricio Mayorga Llerena

prevalencia, en el Ecuador ha sido relegada a un subdiagnóstico y diagnóstico tardío por motivo

de la falta de información de un algoritmo y de guías clínicas pertinentes que ayuden al profesional

el Ecuador, determinando en qué estado se encuentra el diagnóstico en el país y proponiendo un

estudiado es la determinación de la enzima GAA; para la confirmación del diagnóstico es necesario

PALABRAS CLAVE: ENFERMEDAD DE POMPE, GLUCOSIDASA ACIDA, GLUCOSA

TETRASACÁRIDO, INICIO INFANTIL, INICIO TARDÍO, CRIBADO NEONATAL.

Author: Kevin Eduardo Vallejos Tabango

Tutor: Dr. Eduardo Patricio Mayorga Llerena

Sanger DNA sequencing method, tetrasaccharide levels, determination of PAS-positive

in the Ecuadorian population.

KEY WORD: POMPE DISEASE, ACID GLUCOSIDASE, GLUCOSE TETRASACCHARIDE,

CHILDHOOD-ONSET, LATE-ONSET, NEONATAL SCREENING.