Universidad Científica del Sur

INDUCCIÓN ANESTÉSICA Y RECUPERACIÓN DE

HIPPOCAMPUS REIDI EXPUESTOS A LA ACEITE
ESENCIAL DE LIPPIA ALBA
SABINA AGUILAR, NAOMY HUALLANCA & SUSANNE SALAZAR

INTRODUCCIÓN
El caballito de mar esbelto, Hippocampus reidi, es una de las
especies de peces ornamentales marinos brasileños más
exportadas (Monteiro-Neto et al., 2003).

Es uno de las especies de peces

ornamentales marinos brasileños más
exportadas (Monteiro-Neto et al.,
2003)
La mortalidad generalmente ocurre ya sea
durante el transporte o dentro de las semanas
posteriores a la llegada al destino como una
respuesta retardada de estrés fisiológico a la
El estrés severo o crónico a menudo se asocia con un recolección, manipulación y transporte.
bajo rendimiento y durante mucho tiempo se ha
sospechado que causa inmunosupresión en los peces
de cultivo (Pickering, 1998). Puede inducir la
liberación de epinefrina y norepinefrina por parte del
tejido cromafín en respuesta a la estimulación del OBJETIVO
sistema nervioso simpático, lo que podría aumentar
los niveles de glucosa en plasma (Gomes et al., 2006) Identificar los tiempos de
inducción y recuperación
anestésica en caballitos de
MATERIALES Y MÉTODOS mar delgados que fueron
expuestos a EO, así como la
eficacia de EO como agente
ANIMALES Los caballitos de mar juveniles delgados fueron adquiridos de un productor local en la ciudad de Serra -
ES, Brasil. Se transportaron al laboratorio y se mantuvieron en acuarios de 100 L aireados continuamente reductor de estrés en el
con temperatura controlada (22,3ºC), salinidad 27,5 ± 0,2 y niveles de oxígeno disuelto 5,5 ± 0,5 mg L-1.
transporte de esta especie.
MATERIAL Lippia alba (Mill.) NE Brown fue cultivada en el campus de la Universidade Federal de Santa Este es también el primer
Maria (UFSM), Santa Maria, RS, Brasil. Las muestras de las porciones aéreas de la planta fueron
VEGETAL estudio que trata sobre el
colectadas en octubre de 2008. El material vegetal fue identificado por el Dr. Gilberto Dolejal
Zanetti, del Departamento de Farmácia Industrial, UFSM. transporte de caballitos de
EXTRACCIÓN El aceite esencial utilizado se obtuvo de hojas frescas de la planta por hidrodestilación utilizando mar.
DEL ACEITE un aparato tipo Clevenger durante 2 h (Farmacopea Europea, 2007). Las muestras de aceite
esencial se almacenaron a -20 ºC en botellas de vidrio color ámbar.

INDUCCIÓN Y Los experimentos de control se realizaron utilizando acuarios que contenían solo etanol a una concentración equivalente a la dilución utilizada para el
RECUPERACIÓN DE tratamiento de 450 ÿL L-1 EO. Para evaluar el tiempo requerido para la inducción de la anestesia, se utilizaron 10 caballitos de mar. Tiempo máximo de
LA ANESTESIA observación : 45 min, excepto en los caballitos de mar expuestos a las concentraciones más bajas de EO (10 y 20 ÿL L-1). Después de la inducción, los
juveniles se transfirieron a acuarios sin anestesia para medir el tiempo de recuperación de la anestesia.

Se colocaron caballitos de mar esbeltos en bolsas plásticas (un caballito de mar por bolsa) que contenían 0,5 L de agua con 15 ÿL L-1 de EO previamente diluido
TRANSPORTE en etanol y transportado durante 4 o 24h. Se recolectaron muestras de agua antes de cerrar las bolsas de plástico y después del transporte para determinación
de oxígeno disuelto, temperatura y salinidad con un medidor de oxígeno YSI. Se recolectaron muestras de sangre, para la determinación de glucosa con un
aparato digital Accu Check™ y otra alícuota se untó en portaobjetos limpios (dos por pez),

Para verificar la homogeneidad de las varianzas, todos los datos fueron sometidos a la prueba de Levene. Como los datos eran
ANÁLISIS
homocedásticos, se analizaron mediante ANOVA de dos vías y pruebas de Tukey. Se utilizó STATISTICA (versión 5.1) para estos
ESTADÍSTICO análisis y la significancia se fijó en un nivel del 95 % (P < 0,05).
 RESULTADOS Una concentración creciente de EO
disminuyó proporcionalmente el
TABLA 1. Tiempo requerido para la inducción y recuperación de la anestesia utilizando el aceite esencial de Lippia alba
tiempo requerido para la inducción de
en caballito de mar delgado juveniles Etapas según Schoettger & Julin (1967). El tiempo máximo de observación fue de
45 min. El tiempo para llegar a cada etapa en segundos (s) se muestra. N = 10 para cada concentración probada. No hay la anestesia. Caballitos de mar
relación entre concentraciones del aceite esencial de L. alba y se encontró el tiempo de recuperación. y = tiempo en llegar esbeltos que fueron expuestos a bajas
al estadio, y x = concentración del aceite esencial de L. alba (ÿL L-1). concentraciones (10 y 20 ÿL L-1) de AE
durante 6 h mantuvieron un estado
uniforme de sedación, es decir,
permanecieron en el estadio 2 (tabla
1).
No hubo diferencia significativa en la
disolución niveles de oxígeno
(16,60±4,20 mg L-1), salinidad
(27,6±0,2) o temperatura (22,8±0,6 o
C) después del transporte, y sin
mortalidad se observó en ninguno de
Cuadro 2. Parámetros hematológicos (%) de caballitos de mar esbeltos transportados en bolsas plásticas con el aceite
esencial de L. alba (15 µL L-1). N= 10 para cada tratamiento probado. Las letras diferentes en las columnas indican una los tratamientos. Se observó un
diferencia significativa entre los tratamientos basados en ANOVA de dos vías y prueba de Tukey (P < 0.05). cambio significativo en eosinófilos,
trombocitos, recuentos de monocitos
y basófilos (Tabla 2).
Los niveles de glucosa en sangre de
los caballitos de mar delgados de
control aumentó significativamente
después de 4 y 24 h de transporte en
comparación con antes del
transporte. Pescado transportado
bajo condiciones de 15 ÿL L-1 EO no
Fig. 1. Niveles de glucosa en sangre de caballitos de mar exhibieron ninguna cambio en sus
transportados en bolsas de plástico (un caballito de mar niveles de glucosa en sangre en
por bolsa) durante 4 o 24 h. N= 10. BT=Antes del comparación con antes transporte
transporte; Control= solo agua; EO = aceite esencial de L. (Fig. 1).
alba previamente diluida en etanol (1:10) 15 µL L-1. *
significativamente diferente de antes del transporte
usando dos vías ANOVA y prueba de Tukey (P < 0,05). +
significativamente diferente del grupo de control al
CONCLUSIÓN
mismo tiempo del transporte usando ANOVA de dos vías
y la prueba de Tukey (P < 0.05). EO es eficaz para inducir
una ligera sedación en el
caballito de mar esbelto a
concentraciones de 10-20 µL
L-1 y en profundidad
anestesia a concentraciones
DISCUSIÓN DE RESULTADOS de 50–450 µL L-1, y para
rápida anestesia profunda,
Inducción y recuperación de la anestesia se recomienda una
El tiempo máximo permisible para la inducción de profunda la anestesia (etapa 4) en peces es de 10 concentración de 150 µL L-1.
min (Roubach et al., 2005;Ross y Ross, 2008).
En el bagre plateado, el más bajo concentración de EO de L. alba que es capaz de inducir a anestesia es de 100
ÿL L-1, mientras que se alcanza una anestesia rápida con concentraciones de 300-500 ÿL L-1, y el tiempo de Adicionar 15 µL L-1 de EO al
recuperación es 350-450 s (Cunha et al., 2010a).
El tiempo de recuperación suele ser más rápido a menor concentraciones de anestésico, y se vuelve más
agua en la que los caballitos
prolongada a medida que aumenta la concentración (Ross & Ross, 2008). . Sin embargo, las diferentes de mar son transportados,
concentraciones de EO probadas en el delgado caballito de mar no afectó el tiempo de recuperación.
inhibe la elevación de la
El efecto del aceite de clavo varía según la especie, pero generalmente 20-50 mg L-1 indujo la etapa 4 de la
anestesia dentro 120-360s (Cho & Heath 2000; Keene et al., 1998; Sladky et al., 2001; Iversen et al., 2003). Por lo sangre glucosa y neutrófilos
tanto, una menor concentración de aceite de clavo o eugenol que AE de L. alba es necesario para inducir
y disminución de linfocitos
anestesia profunda en las especies de teleósteos estudiadas hasta ahora.
que se producen sin este
Transporte anestésico en el
El nivel de glucosa en sangre de los caballitos de mar delgados de control aumentó después del transporte, lo Hippocampus reidi
cual está de acuerdo con hallazgos previos en salmón Chinook, Oncorhynchus tshawytscha (Barton et al.,
1986), salmón coho, Oncorhynchus kisutch (Vijayan & Leatherland, 1989), etc.
Los caballitos de mar delgados transportados con EO no presentó este aumento en los niveles de glucosa en
sangre, lo que indica un menor nivel de estrés durante el transporte.
El número de leucocitos presentes en un organismo cambia en situaciones de estrés, dependiendo de la Es sugerido usar EO en el
especie estudiada.
Se produjo un cambio significativo en los caballitos de mar delgados transportados con AE de L. alba, transporte de esta especie
indicando que esta AE es beneficiosa para reduce el estrés. El estrés aumenta el número de neutrófilos y
porque aparentemente reduce
reduce los recuentos de linfocitos ) (Bauer et al., 2001).
En conclusión, la AE es eficaz para inducir una ligera sedación en el caballito de mar esbelto a concentraciones el estrés del transporte.
de 10-20 µL L-1 y anestesia profunda a concentraciones de 50-450 µL L-1, y para anestesia profunda rápida a
una concentración de 150 µL L -1.