Flores CL

Universidad Nacional Mayor de San Marcos
Universidad del Perú. Decana de América

Facultad de Medicina
Escuela Profesional de Nutrición
Efecto de la suspensión de semilla Moringa oleífera

Lam frente a la neurotoxicidad inducida por etanol en
ratones
TESIS
Para optar el Título Profesional de Licenciada en Nutrición
AUTOR
Lorena Margot FLORES CASTRO
ASESOR
Dr. Oscar Gustavo HUAMÁN GUTIÉRREZ
Lima, Perú
2022
Reconocimiento - No Comercial - Compartir Igual - Sin restricciones adicionales
https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/
Usted puede distribuir, remezclar, retocar, y crear a partir del documento original de modo no
comercial, siempre y cuando se dé crédito al autor del documento y se licencien las nuevas
creaciones bajo las mismas condiciones. No se permite aplicar términos legales o medidas
tecnológicas que restrinjan legalmente a otros a hacer cualquier cosa que permita esta licencia.
Referencia bibliográfica
Flores L. Efecto de la suspensión de semilla Moringa oleífera Lam frente a la

neurotoxicidad inducida por etanol en ratones [Tesis de pregrado]. Lima:
Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Facultad de Medicina, Escuela
Profesional de Nutrición; 2022.
Metadatos complementarios
Datos de autor
Nombres y apellidos Lorena Margot Flores Castro
Tipo de documento de identidad DNI
Número de documento de identidad 75204496
Datos de asesor
Nombres y apellidos Oscar Gustavo Huamán Gutiérrez
Tipo de documento de identidad DNI
URL de ORCID https://orcid.org/0000-0002-6224-9165
Datos del jurado
Presidente del jurado
Nombres y apellidos Jorge Luis Arroyo Acevedo
Tipo de documento DNI
Miembro del jurado 1
Nombres y apellidos Henry Guija Guerra
Miembro del jurado 2
Nombres y apellidos Doris Hilda Delgado Pérez

Datos de investigación
Línea de investigación Bases moleculares de

enfermedadesmultifactoriales y
emergentes
Grupo de investigación BIOQUIMICA Y GENOMICA
MOLECULAR APLICADA
Agencia de financiamiento Autofinanciado
Ubicación geográfica de País: Perú

lainvestigación Departamento:
LimaProvincia:
Lima
Distrito: Cercado de
Lima Latitud: -
12.057827
Longitud: -77.023030
Año o rango de años en que se 2019 – 2020
realizóla investigación
URL de disciplinas OCDE https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.00

Firmado digitalmente por QUINTANA
SALINAS Margot Rosario FAU
20148092282 soft
Motivo: Soy el autor del documento
Fecha: 30.05.2022 16:31:28 -05:00
Firmado digitalmente por

FERNANDEZ GIUSTI VDA DE PELLA
Alicia Jesus FAU 20148092282 soft
Motivo: Soy el autor del documento
Fecha: 31.05.2022 10:24:36 -05:00
5:00 pm
AGRADECIMIENTOS
A mi asesor, Dr. Oscar Huamán Gutiérrez por brindarme su apoyo y confianza en la

realización de la presente investigación.
A mi alma máter, la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, por compartirme
conocimientos, enseñarme grandes valores y encaminarme hacia nuevos retos.
A la escuela Profesional de Nutrición por abrirme las puertas hacia mi formación como
profesional y ser humano, por conocer dentro de sus aulas a grandes maestros y amigos,
además, de vivir un sinfín de experiencias que jamás olvidaré.
i
DEDICATORIA
Dedico la presente investigación, a mi madre y tíos que son mi inspiración y fortaleza para
seguir luchando y alcanzar todas mis metas.
También a todos mis familiares y amigos por brindarme su apoyo, cariño y aliento
incondicional.
ii
EN MEMORIA
La presente investigación está realizada en memoria a Elva Ugaz y Sebastiana Castro por
enseñarme que en todo lo que hagas siempre debes entregar amor y compromiso.
Muchas gracias por cuidar de mí y de mi familia.
iii
ÍNDICE
I. INTRODUCCIÓN ........................................................................................................ 1
I.1 Introducción ............................................................................................................ 1
I.2 Planteamiento del problema ................................................................................... 2
I.2.1. Determinación del problema ........................................................................... 2
I.2.2 Formulación del problema ............................................................................... 4
I.3 Objetivos .................................................................................................................. 4
I.3.1 Objetivo General ............................................................................................... 4
I.3.2 Objetivos Específicos ....................................................................................... 4
I.4 Importancia y alcance de la investigación ............................................................ 5
I.5. Limitaciones de la investigación ........................................................................... 5
II. REVISIÓN DE LITERATURA ..................................................................................... 6
II.2 Antecedentes .......................................................................................................... 6
II.2. Bases teóricas ....................................................................................................... 7
II.3 Definición de términos ......................................................................................... 11
III. HIPÓTESIS Y VARIABLES .................................................................................. 13
III.1 Hipótesis .............................................................................................................. 13
III.2 Variables .............................................................................................................. 13
III.3 Operacionalización de las variables .................................................................. 14
IV. MÉTODOS Y MATERIALES ................................................................................. 15
IV.1 Tipo de estudio: .................................................................................................. 15
IV.2 Materiales: ........................................................................................................... 15
IV.2.1 Material biológico ......................................................................................... 15
IV.2.2 Reactivos químicos ...................................................................................... 15
IV.3 Equipos e instrumentos ..................................................................................... 15
IV.4 Unidad de análisis y tamaño de muestra: ......................................................... 16
IV.5 Criterios de inclusión y exclusión: .................................................................... 16
IV.6 Adquisición y obtención de la suspensión de semilla ..................................... 16
IV.7 Acondicionamiento y aclimatación de los animales de experimentación (de la
unidad de análisis) ..................................................................................................... 17
IV.8 Evaluación del efecto neuroprotector ............................................................... 18
IV.9 Procesamiento de los indicadores .................................................................... 19
IV.10 Análisis de los datos estadísticos ................................................................... 20
IV.11 Aspectos éticos ................................................................................................ 21
iv
V. RESULTADOS ......................................................................................................... 22
V.1 Niveles de glutatión, glutatión total y GSH/GSSG en tejido cerebral: .............. 22
V.2 Niveles de grupos sulfhídrilos proteicos en tejido cerebral: ............................ 23
V.3 Niveles de lipoperoxidación en tejido cerebral: ................................................ 23
V.4 Índices de cerebro y cerebelo: ............................................................................ 24
V.5 Cambios histológicos del tejido cerebral: ......................................................... 25
VI. DISCUSIÓN .......................................................................................................... 30
VII. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES ........................................................ 40
VII.1 Conclusiones ..................................................................................................... 40
VII.2 Recomendaciones ............................................................................................. 40
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS ..................................................................... 41
IX. ANEXOS ............................................................................................................... 50
v
ÍNDICE DE TABLAS
Tabla 1. Perfil de Glutatión en tejido cerebral según grupo de tratamiento ................ 21

Tabla 2. Niveles de grupos sulfhídrilos proteicos en tejido cerebral según grupo de
tratamiento ............................................................................................................... 22
Tabla 3. Niveles de lipoperoxidación en tejido cerebral según grupo de tratamiento . 23
Tabla 4. Índices de cerebro y cerebelo según grupo de tratamiento .......................... 24
Tabla 5: Cambios histológicos del cerebro y cerebelo según grupo de tratamiento ... 25
ÍNDICE DE MICROFOTOGRAFÍAS
Microfotografía 1: grupo I (cerebro) ........................................................................ 27

Microfotografía 2: grupo I (cerebelo) ....................................................................... 27
Microfotografía 3: grupo II (cerebro) ........................................................................ 27
Microfotografía 4: grupo II (cerebelo) ...................................................................... 27
Microfotografía 5: grupo III (cerebro) ....................................................................... 27
Microfotografía 6: grupo III (cerebelo) ..................................................................... 27
Microfotografía 7: grupo IV (cerebro) ...................................................................... 28
Microfotografía 8: grupo IV (cerebelo) ..................................................................... 28
Microfotografía 9: grupo V (cerebro) ....................................................................... 28
Microfotografía 10: grupo V (cerebelo) .................................................................... 28
vi
RESUMEN
Introducción: A nivel mundial está acrecentando el número de adultos mayores, y ello
estaría relacionado con el incremento de las enfermedades neurodegenerativas, debido a
que conforme avanza la edad, aumenta los niveles de estrés oxidativo a nivel cerebral
ocasionando deterioros cognitivos. La ingesta de alimentos vegetales puede prevenir el
desarrollo de dichos trastornos. Objetivo: Evaluar el efecto de la suspensión de semilla
Moringa oleifera Lam frente a la neurotoxicidad inducida por etanol en ratones. Materiales
y métodos: diseño de tipo experimental. Se empleó semilla Moringa oleifera Lam y 35
ratones macho. Los ratones fueron distribuidos aleatoriamente en cinco grupos (n=7),
recibiendo por 15 días de tratamiento por vía orogástrica: grupo I y II (agua), grupo III
(vitamina E), grupo IV y V (semilla de moringa a dosis 200 y 600 mg/kg). Los grupos II-V
recibieron etanol 40% por vía intraperitoneal. Finalizado el tratamiento, los animales se
mantuvieron en ayuno para después ser sacrificados y se procedió a lavar los órganos en
NaCl 0,9%. Se utilizó el hemisferio derecho para pruebas bioquímicas, el hemisferio
izquierdo y cerebelo fue conservado en solución de formol 10% para los análisis
morfológicos. Se determinó marcadores bioquímicos (LPO, grupos -SH y perfil de GSH) y
cambios morfológicos (índices de cerebro y cerebelo e histológicos). Resultados: Los
grupos IV y V presentaron una tendencia al aumento en los niveles de grupos -SH proteicos
(24 al 27%) y disminución de la lipoperoxidación (10 al 24%) Histológicamente, la
administración de la suspensión mostró protección a nivel del cerebro y cerebelo.
Conclusión: La administración de suspensión de semilla Moringa oleifera Lam según dosis
de experimentación presentó efecto neuroprotector frente a la toxicidad inducida por etanol
en ratones.
Palabras clave: Moringa oleifera Lam, etanol, estrés oxidativo, neuroprotección
vii
ABSTRACT
Introduction: Worldwide, the number of older adults is increasing, and this would be related
to the increase in neurodegenerative diseases, because as age advances, oxidative stress
levels increase at the brain level causing cognitive deterioration. Eating plant foods can
prevent the development of these disorders. Objective: To evaluate the effect of Moringa
oleifera Lam seed suspension against ethanol-induced neurotoxicity in mice. Materials and
methods: experimental type design. Moringa oleifera Lam seed and 35 male mice were
used. The mice were randomly distributed into five groups (n = 7), receiving for 15 days of
orogastric treatment: group I and II (water), group III (vitamin E), group IV and V (moringa
seed at 200 doses and 600 mg / kg). Groups II-V received 40% ethanol intraperitoneally.
After the treatment, the animals were fasted to later be sacrificed and the organs were
washed in 0.9% NaCl. The right hemisphere was used for biochemical tests, the left
hemisphere and cerebellum were preserved in 10% formaldehyde solution for morphological
analyzes. Biochemical markers (LPO, -SH groups and GSH profile) and morphological
changes (brain and cerebellum and histological indices) were determined. Results: Groups
IV and V showed a tendency to increase in the levels of protein -SH groups (24 to the 27%)
and decrease in lipoperoxidation (10 to the 24%). Histologically, the administration of the
suspension showed protection at the level of the brain and cerebellum. Conclusion: The
administration of Moringa oleifera Lam seed suspension according to the experimental dose
showed a neuroprotective effect against ethanol-induced toxicity in mice.
Keywords: Moringa oleifera Lam, ethanol, oxidative stress, neuroprotection
viii
“Efecto de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam frente a la neurotoxicidad
inducida por etanol en ratones”
I. INTRODUCCIÓN
I.1 Introducción
En la actualidad, se observa un mayor número de personas adultas mayores, a nivel

mundial, es decir, la población está envejeciendo.1 Este grupo se caracteriza por el
deterioro de sus capacidades físicas y mentales producto del avance de la edad.2
Por otra parte, las enfermedades neurodegenerativas (END) tipo demencial está
relacionado con el aumento del estrés oxidativo a nivel cerebral, conllevando a
problemas cognitivos y funcionales en el individuo generando dependencia y
disminución en el bienestar físico, material y social de la persona y familia causando
repercusiones laborales y económicos.3,4
El incremento de la población longeva está relacionado con el aumento de la

prevalencia de END porque se considera a la edad como el principal factor causante
de daño cognitivo.4,5 El acrecentamiento de estas enfermedades se vincula también
con una alimentación no saludable, poca práctica de actividad física y la presencia
de hábitos nocivos. Por ello, es importante una alimentación que contenga
sustancias protectoras como los antioxidantes.6,7
Dentro de los productos vegetales con presencia de antioxidantes encontramos a la

semilla de moringa. En nuestro estudio se observó que este alimento redujo los
niveles de lipoperoxidación, incrementó los niveles de grupos sulfhídrilos y perfil de
GSH. A nivel histológico se encontró vasos sanguíneos bien conservados, ausencia
de linfocitos, escasos componentes inflamatorios, células sin alteraciones y no hubo
diferencia significativa en los resultados de índices de cerebro y cerebelo.
Estudios demuestran que las moléculas bioactivas de la semilla de moringa tienen

el efecto de disminuir el estrés oxidativo, captar y neutralizar los radicales libres
(RL), restaurar y aumentar la actividad de los sistemas antioxidantes endógenos;8 y
de esta forma modulan y contrarrestan la vía de señalización de la inflamación
(disminuye los marcadores de inflamación, inhibe la expresión de citocinas
inflamatorias y de vías apoptóticas),9 es decir, la semilla tiene propiedades
antioxidantes, neuroprotectoras y antiinflamatorias.10
1
I.2 Planteamiento del problema
I.2.1. Determinación del problema
A nivel mundial, están aconteciendo diversos cambios demográficos, por ejemplo,

la disminución de la tasa de natalidad y tasa global de fecundidad y, por otro lado,
el aumento de la esperanza de vida en la población adulta mayor.1 Se ha previsto y
calculado que esta población pasará del 11% al 22% desde el año 2000 al 2050,
cifras que demuestran el rápido crecimiento del envejecimiento poblacional en el
mundo. Sin embargo, vivir más tiempo no significa tener buena salud, ya que la gran
mayoría se ve afectado por la pérdida de capacidades o presencia de enfermedades
producto de la edad.11
Para el año 2015, se calculó 900 millones de personas mayores de 60 años

alrededor del mundo y esta cifra podría llegar a 3 200 millones para el año 2100.11
En América Latina y el Caribe, la población adulta mayor es el 18% de la población
en general.12 En el Perú, de acuerdo con los últimos reportes del Instituto Nacional
de Estadística e Informática (INEI), la población adulta mayor concentra una cifra de
10,7% en el primer trimestre del año 2019, a diferencia del año 1950; que solo era
el 5,7%, es decir, prácticamente se ha duplicado esta cifra.13
Según la Organización Mundial de la Salud (OMS), un adulto mayor es aquel

individuo por encima de los 60 años, presenta algún deterioro en la salud (problemas
de audición, visión y movilidad) y/o enfermedades no transmisibles (cardiopatías,
cáncer, enfermedades neurodegenerativas, entre otras) relacionado íntimamente
con el avance de la edad.2 Se ha considerado a la edad como principal factor de
deterioro cognitivo, lo que ha conllevado a la intensificación en la prevalencia de las
END.3,5
Se les define a las END como afecciones hereditarias o adquiridas en el que se

produce una degeneración paulatina en áreas concretas del Sistema Nervioso
Central (SNC). The National Institute of Neurological Disorder and Stroke Study
(NINDSS) ha encontrado más de 600 eventos, entre ellas, la Enfermedad de
Alzheimer (EA), Enfermedad de Parkinson (EP), Enfermedad de Huntington (EH) y
2
la Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA), patologías con una alta prevalencia y

gravedad. Estas enfermedades generan dependencia, disminución de la calidad de
vida de la persona afectada y a la familia, repercusiones laborales y económicas
tanto en la atención sanitaria y social.3,4
La OMS calcula que 36 millones de personas sufren de END a nivel mundial (la
prevalencia global alcanzada es 7.1%) y para el año 2050 se estima un alrededor
de 130 millones de personas.14,15 Se ha encontrado tasas bajas de estas patologías
en países de África y Asia (Singapur, Japón, China, etc.), en comparación con los
países del continente europeo.4,15,16 La prevalencia en la Región de las Américas
oscila entre el 6,46% y el 8,48% y se espera que, en los próximos 20 años, estas
cifras se dupliquen debido a la proliferación de la población adulta mayor.12 Los bajos
niveles de factores socioeconómicos, educativos y la poca atención en salud en los
diferentes países en desarrollo, se han relacionado con las altas tasas de
prevalencia.16
La END tipo demencial es un síndrome clínico de deterioro cognitivo producto del

envejecimiento normal a causa de la elevación del estrés oxidativo, atrofia del
hipocampo y alteraciones en la neurotransmisión colinérgica, conllevando a cambios
en las funciones cerebrales como la autonomía, memoria y aprendizaje e
interfiriendo en las actividades y capacidades del individuo afectado.17 La demencia
es el resultado de múltiples enfermedades como la EA, Demencia por Cuerpos de
Lewy (DLB), Demencia Fronto-Temporal (DFT) y Demencia Vascular (DV).18
La demencia es considerada como un problema de salud pública, ya que aparecen

10 millones de casos nuevos cada año. El Alzheimer es el tipo de demencia más
común en la población. Su efecto fisiológico se caracteriza por los bajos niveles de
neurotransmisores y la pérdida de neuronas. Los primeros síntomas que se
manifiestan son la pérdida de la memoria a corto plazo y juicio, dificultad para
realizar tareas y concentrarse, desorientación en tiempo y lugar, problemas de
lenguaje y cambios de comportamiento.18
En nuestro país, según el Ministerio de Salud (MINSA), hay más de 3 mil casos
(6,85%) de personas longevas reportados con la EA, diagnóstico que se presentan
3
con mayor frecuencia.19 Por otra parte, las defunciones por EA y otras demencias
ha sufrido una tendencia de incremento desde el 2005 al 2016, ocupando el tercer
puesto entre las principales causas subyacentes de fallecimiento, dejando de lado
a otras enfermedades como la diabetes mellitus (DM) y la enfermedad pulmonar
obstructiva (EOP).18 Esta patología genera grandes costos por los cuidados de
atención a largo plazo, gestando preocupaciones en términos de bienestar integral,
repercusiones económicas y desarrollo social.20
El acrecentamiento de las END se vincula con llevar un mal estilo de vida, por
ejemplo, alimentación no saludable, baja o poca actividad física y de ejercicio
mental, práctica de hábitos nocivos influyendo en la calidad de vida de la persona.6,7
Por ello, es importante una alimentación que contenga sustancias protectoras como
los antioxidantes. Estas sustancias son idóneas para retardar y prevenir la formación
de los RL.21 La evidencia corrobora que la formación y acumulación de los RL está
vinculada con el origen de las enfermedades neuronales.22
I.2.2 Formulación del problema
Por todo lo expuesto, nos preguntamos ¿Cuál es el efecto de la suspensión de

semilla Moringa oleifera Lam frente a la neurotoxicidad inducida por etanol en
ratones?
I.3 Objetivos
I.3.1 Objetivo General
Evaluar el efecto de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam frente a la

neurotoxicidad inducida por etanol en ratones.
I.3.2 Objetivos Específicos
• Determinar el efecto de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam sobre

los marcadores bioquímicos del estrés oxidativo en el tejido nervioso frente
a la toxicidad por etanol en ratones.
• Determinar el efecto de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam sobre
los cambios morfológicos en el tejido nervioso inducido a toxicidad por etanol
en ratones.
4
I.4 Importancia y alcance de la investigación
Las END se presentan en gran mayoría en la población adulta mayor causando

disminución en sus actividades y capacidades, por ello, es importante prevenir y
manejar estos problemas con el consumo de ciertos alimentos, una de ellas, es la
semilla Moringa oleifera Lam.
Es un alimento natural consumido por la población en presentaciones como harina

o en grano. Esta semilla presenta un alto contenido de compuestos antioxidantes
(kaempferol, ácido gálico, elágico, entre otros) que pueden hacerles frente a los
posibles daños que se pueden presentar a nivel del tejido cerebral. Además, es muy
fácil de consumir, seguro, costo módico y accesible.
Por ende, la importancia del estudio radica en conocer el efecto neuroprotector de

la semilla moringa frente a las enfermedades neurodegenerativas, generando
nuevas perspectivas, saberes y preguntas para el campo de la investigación y llenar
un vacío de conocimientos.
I.5. Limitaciones de la investigación
Una limitación del estudio fue la forma de administración del tratamiento, el cual se
realizó con una cánula metálica por vía orogástrica, exponiendo a cierto grado de
estrés a los animales.
5
II. REVISIÓN DE LITERATURA
II.2 Antecedentes
En la extensa bibliografía revisada, no se han encontrado estudios relacionados

entre la semilla de Moringa oleifera Lam y el efecto neuroprotector que esta puede
causar, por lo tanto, se presentan trabajos realizados con la hoja de moringa, la cual
contienen similares compuestos bioactivos que la semilla.
Ganguly R. y cols. indicaron un efecto neuroprotector contra un modelo de

Alzheimer infundido con colchicina donde el tratamiento mejoró la memoria y
aumentó la actividad de antioxidantes endógenos indicando como responsables del
efecto a compuestos bioactivos como la quercetina y kaempferol presente en el
extracto de hoja de Moringa oleifera.23
En otro estudio, llevado a cabo por Sutalangka C. y cols. evaluaron la mitigación del
deterioro de la memoria y la neurodegeneración en un modelo animal de demencia
relacionada con la edad. Se halló en el extracto de hojas Moringa oleifera según
dosis posee efecto neuroprotector y mejora la función colinérgica debido a la
presencia de flavonoides encontrados en la hoja.17
En otra investigación se encontró en la administración de extracto de hoja Moringa

oleifera no tiene efectos adversos sobre los cambios morfológicos, redujo los niveles
de lipoperoxidación e inhibió la generación de radicales libres en el tejido cerebral
frente a la toxicidad a aluminio, esto se debe a la actividad antioxidante (flavonoides)
que presenta.24
Otro estudio dio a conocer que el extracto de hoja de moringa tiene efecto protector
al mantener la integridad funcional y estructural del cerebelo en una inducción con
nicotina. Esta investigación describió que la hoja presenta varios fitoconstituyentes
con características antiinflamatorias y antioxidantes.25
Alqahtani W. y Albasher G. evidenciaron que el extracto de hojas Moringa oleifera

posee actividad neuroprotectora en un protocolo de toxicidad por plomo en ratas
6
porque disminuyó los marcadores de estrés oxidativo (mejoró la actividad de

sistemas enzimáticos y no enzimáticos), inhibió la inflamación, redujo la apoptosis y
protegió los tejidos neuronales (no hubo cambios estructurales), atribuyéndose
estos resultados a la presencia de ácido cafeico, quercetina y kaempferol, fitoactivos
encontrados en la hoja de moringa.26
II.2. Bases teóricas
La demencia es la enfermedad que más afecta a las personas longevas y es

considerada un problema de salud pública. El Alzheimer es el tipo de demencia más
común, es el diagnóstico que se presentan con mayor frecuencia y ocupa el tercer
puesto entre las principales causas de muerte en nuestro país.18,27
Existen varias hipótesis para descifrar la causa de esta enfermedad. La más antigua
es la deficiencia de acetilcolina (ACh) y la más convincente es la formación de
fibrillas de -amiloide. Otros factores como el daño oxidativo y la neuroinflamación
contribuyen a agravar esta situación. A nivel histopatológico, se observa formación
de placas neuríticas y marañas neurofibrilares (NFT) en el cerebro. 28 Los síntomas
que se manifiestan son un deterioro cognitivo y funcional, como la pérdida de
memoria y de habilidades de forma progresiva e irreversible.3
El sistema nervioso controla las actividades funcionales del organismo con el medio
externo e interno, donde anatómicamente se divide en SNC que contiene al encéfalo
y médula espinal; el Sistema Nervioso Periférico (SNP) se encuentra compuesto por
tres tipos de nervios (craneales, espinales y periféricos).22,29 El encéfalo se
encuentra subdividido por el cerebro, cerebelo y tronco encefálico, protegido por la
corteza cerebral, recubierto por tres meninges y rodeado por el líquido
cefalorraquídeo (CFS). 29,30
El cerebro es la pieza más importante y grande del encéfalo, compuesto por dos
hemisferios unidos por el cuerpo calloso. Los hemisferios son cubiertos por una
capa externa gris (cuerpos neuronales) y una capa interna blanca (núcleos basales).
Esta corteza presenta millones de neuronas y varios pliegues separados por fisuras.
Estas fisuras se usan para subdividir cada hemisferio en lóbulos.29
7
Este tejido nervioso contiene millones de neuronas y células gliales. Las neuronas
son células funcionales encargadas de recoger, interpretar, elaborar y conducir
impulsos electroquímicos a otras neuronas cercanas como respuesta adecuada a
los estímulos; y metabólicamente activas porque usan grandes cantidades de
oxígeno. Las células nerviosas son muy especializadas, no se dividen ni se
reproducen y se calcula más de cien mil millones en el cerebro humano.30 Las
células gliales o de sostén cumplen la función de soporte, mantenimiento y
reparación en el SNC.31
El cerebro presenta un alto contenido de lípidos y demanda de energía, pero una

capacidad antioxidante limitada, acondicionándose a poseer un elevado
metabolismo oxidativo. Un desequilibrio en el sistema redox genera la liberación
excesiva de especies reactivas de oxígeno (ROS) y causará injurias celulares.32 Se
ha comprobado que el tejido cerebral acopia estrés oxidativo conforme avanza la
edad de la persona, un factor predisponente para el desarrollo de las enfermedades
neurodegenerativas en la etapa del envejecimiento.33,34
En la mitocondria se produce la fosforilación oxidativa, siendo fuente de energía

para el cerebro, y como resultado de este proceso se originan las ROS. Este
producto derivado se considera esencial y juega un papel importante en la
generación de energía, fagocitosis, regulación del crecimiento y señalización celular,
pero si existe una sobreproducción, es peligrosa. Una gran cantidad de ROS
provocan la permeabilidad de la barrera hematoencefálica, daño a las distintas
biomoléculas y cambios en la morfología cerebral.33
El estrés oxidativo es un estado de alteración celular. Esta inestabilidad se debe al

desbalance entre los componentes prooxidantes y antioxidantes, es decir, la
producción excesiva de ROS (radical hidroxilo, superóxido y óxido nítrico) y la
deficiencia de la defensa de los mecanismos antioxidantes.35 Al existir una gran
generación de ROS, se ejerce una oxidación proteica y peroxidación lipídica,
causantes de la degeneración celular y deterioro funcional.33 El tejido nervioso sufre
una pérdida de las capacidades cognitivas caracterizadas por la agregación y
acumulación de proteínas mal plegadas, pérdida del volumen cerebral y bajos
8
niveles de neurotransmisores (dopamina, serotonina, etc.) produciendo muerte

cerebral.4
Al existir una disfunción mitocondrial, se apertura los mecanismos de oxidación y la

degradación proteínica a nivel celular, responsables de la vulnerabilidad a nivel del
SNC.21 Este daño oxidativo se vincula con las patologías como la EA y EP. La
fisiopatología las describe como la pérdida progresiva de las neuronas a nivel del
hipocampo (sustancia negra) o del tálamo. Estudios informan que el hipotálamo es
una parte del cerebro propenso a sufrir daños provocados por el estrés oxidativo y
juega un rol valioso en la función cognitiva (neurogénesis), igual forma que el
receptor de señalización N- metil- d -aspartato (NMDA), ya que ambos intervienen
en el aprendizaje y memoria.33,36
Las causas de estas enfermedades son aún desconocidas, pero se les considera
trastornos multifactoriales (factores genéticos, ambientales, entre otros) por lo que
actualmente la mejor medicina para evitar y retrasar estos problemas es la
prevención.37
Existen varias sustancias que alteran el funcionamiento del sistema nervioso, por
ejemplo, elementos como el aluminio, cobre, plata u otros componentes como la
nicotina y el etanol. Este último tiene efectos tóxicos, es desencadenante de un
ambiente de oxidativo afectando en mayor proporción al cerebro y cerebelo,
causando graves lesiones tisulares.38
Los antioxidantes son sustancias que neutralizan las moléculas oxidantes, evitan la
propagación de reacciones redox y disminuyen el estrés oxidativo celular, es decir,
regulan la actividad y los niveles de ROS.33 Estos agentes de defensas se
encuentran en nuestras propias células como enzimas celulares primarias (glutatión
peroxidasa, el superóxido dismutasa y la catalasa) o las podemos incluir en nuestra
alimentación (vitamina A, E y C, -caroteno, flavonoides, selenio y zinc).39
Se ha encontrado en la semilla Moringa oleifera Lam una gran cantidad de

compuestos con actividad antioxidante que reducen los marcadores del estrés
oxidativo (formadores de RL). Entre los componentes fitoquímicos que se han
9
hallado son los flavonoides, glucósidos, glucosinolatos, ácidos fenólicos,

isocianatos, esteroles y ácidos grasos.21 Diversos estudios comprueban la
efectividad de la propiedad antioxidante de la semilla como protector de las células
frente al daño oxidativo asociado con el envejecimiento, cáncer, protección de
enfermedades inflamatorias y neurodegenerativas.40
La moringa es una planta proveniente del Himalaya (noreste de India, Pakistán y

Afganistán) y años más tarde, fue cultivado en lugares tropicales, subtropicales y
áridos, ya que tiene la capacidad de soportar diferentes temperaturas y suelos.41 Es
conocida como el “árbol de la vida” porque desde hace siglos las diferentes partes
de esta planta ha sido utilizado para la alimentación humana y animal por sus
grandes propiedades nutricionales y para solucionar problemas de la salud.40
Se le identifica por ser un árbol pequeño, ramas inclinadas, flores blancas-

amarillentas, hojas pinadas, vainas largas de color verde y que al madurar obtienen
un color marrón y se visualiza en su interior a las semillas. Estas semillas son de
color pardo oscuro, globulares y con tres alas blancas.42 Las semillas de Moringa
pueden consumirse de diversas maneras, por ejemplo: fritas, tostadas, en salsas o
tomarse como infusión.43
Se ha descubierto en la planta distintos compuestos como saponinas, taninos,

terpenos, alcaloides, ácidos grasos monoinsaturados y poliinsaturados (omega 3 y
6), carotenoides, tocoferoles, fitoestrógenos, glucosinolatos, flavonoides,
polifenoles, entre otros.43,44 Asimismo han presencia de macronutrientes y
micronutrientes en donde los elementos que más abundan son el potasio, calcio y
magnesio.42
Según el Sistema de Clasificación Angiosperm Phylogeny Group (APG) III, presenta

la taxonomía de la moringa como:45
10
DIVISIÓN Magnoliophyta
CLASE Magnoliopsida
SUB CLASE Mangoliidae
ORDEN Brassicales
FAMILIA Moringaceae
GÉNERO Moringa
ESPECIE Moringa oleifera Lam
La semilla de moringa es rica en ácido oleico y tocoferol pero pobre en ácido

linoleico, resaltándose sus propiedades y composición similar al aceite de oliva, por
lo que ha sido adicionado a otros aceites para evitar el deterioro oxidativo y obtener
productos mejorados.40 Además es fuente importante de proteínas (principalmente
de metionina y cisteína), minerales (calcio y magnesio) y gran variedad de
compuestos fitoquímicos (flavonoides y polifenoles), lo que le da el poder de atenuar
el daño oxidativo, reduciendo los marcadores de estrés oxidativo y activando las
defensas celulares frente a los radicales libres.46,47
II.3 Definición de términos
Enfermedades Neurodegenerativas (END): “son patologías que producen una

disfunción progresiva del SNC”.8
Radicales Libres (RL): “son moléculas que contienen un electrón no apareado y
que los hace sumamente reactivos y capaces de dañar a otras moléculas”.48
Especies Reactivas de Oxígeno (ROS): “se forman como producto del
metabolismo de los RL”.48
Glutatión peroxidasa (GPx): “es una enzima dependiente de selenio y su principal
función es proteger al organismo del efecto degradante de los hidroperóxidos y
lipoperóxidos”.49
Glutatión (GSH): “es el antioxidante intracelular más importante en cuanto a la
eliminación de hidroperóxidos en el cerebro”.49
GSH/GSSG: “es un índice del estado oxidativo a nivel celular y una guía para valorar
el riesgo crónico en los seres humanos”.50
11
Factor nuclear eritroide 2 (Nrf2): “es el regulador genético del sistema de defensa
antioxidante”.51
Malondialdehído (MDA): “es el marcador de oxidación de lípidos de la membrana
celular producido por los RL”.48
Lipoperoxidación: “es una reacción que deteriora las funciones membranales
provocando disminución en la fluidez, reducción del potencial electroquímico y
aumento de la permeabilidad”.48
Alcohol deshidrogena (ADH): “es una enzima ampliamente distribuida en el
cerebro y presenta una afinidad muy baja por el etanol”.52
Citocromo P-450 2E1 (CYP-450): “enzima que se encarga de metabolizar al etanol
y está presente en varias regiones del cerebro”.52
Apoptosis: “es un proceso activo que involucra muerte celular en la cual no se
desarrolla inflamación y se caracteriza por cambios morfológicos”.48
Excitotoxicidad: “es un efecto excitatorio exagerado provocado por los receptores
glutaminérgicos”.49
Antioxidante: “es cualquier sustancia que presente en bajas concentraciones,
retrasa o inhibe la oxidación”.49
Polifenoles: “son moléculas que poseen propiedades antioxidantes y
antiinflamatorias capaces de barrer con los RL por su capacidad de donar electrones
y átomos de hidrógeno”.53
12
III. HIPÓTESIS Y VARIABLES
III.1 Hipótesis
La suspensión de semilla Moringa oleifera Lam presenta efecto neuroprotector

frente a la toxicidad por etanol en ratones.
III.2 Variables
III.2.1 Variable independiente:

Suspensión de la semilla Moringa oleifera Lam: Es resultado de la trituración de la
semilla Moringa oleifera Lam más agua. Se realiza el procedimiento con la ayuda
de un mortero de cerámica.
III.2.2 Variable dependiente:

Efecto neuroprotector: Es la técnica de prevenir o retrasar la pérdida de células
nerviosas ante un evento adverso (lesión neuronal, evento traumático, etc.) y así
mantener la estructura y operatividad del cerebro.54
13
“Efecto de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam frente a la neurotoxicidad inducida por etanol en ratones”
III.3 Operacionalización de las variables
DEFINICIÓN CATEGORÍAS/ PUNTO DE TIPO/ESCALA

VARIABLE DIMENSIONES INDICADORES
OPERACIONAL CORTE MEDICIÓN
Variable
independiente: Es la administración de la
suspensión suspensión de la semilla Administración de la suspensión de la Dosis: 200 mg/kg
Cuantitativa
de la semilla que ha sido obtenido por la semilla Moringa oleifera Lam Dosis: 600 mg/kg
- Continua/Razón
Moringa trituración.
oleifera Lam
• Nivel de GSH
• Nivel de la relación GSH/GSSG

Comparado con el
Cuantitativa
grupo II (control)
Bioquímico • Nivel de sulfhidrilos proteico. Continua/Razón
Es el efecto benéfico que

presenta la administración • Nivel de lipoperoxidación
Variable
de la suspensión de la
dependiente:
semilla de Moringa oleifera
Efecto • Nivel de índice de cerebro
Lam sobre los indicadores
neuroprotector Cuantitativa
bioquímicos y
morfológicos. Continua/Razón
• Nivel de índice de cerebelo
Comparado con el
Morfológico
grupo II (control)
• Descripción histológica del cerebro.
Cualitativa/Nominal
• Descripción histológica del cerebelo.
14
IV. MÉTODOS Y MATERIALES
IV.1 Tipo de estudio:
Según Hernández Sampieri, nuestro trabajo es de enfoque cuantitativo,

experimental puro, con grupo control y postprueba.55
IV.2 Materiales:
IV.2.1 Material biológico
• Ratones albinos macho, variedad BALB/c, especie Mus musculus

• Semilla Moringa oleifera Lam
IV.2.2 Reactivos químicos
• 2-thiobarbituric acid (TBA). Sigma-Aldrich

• 5,5′-dithiobis (2-nitrobenzoic acid) (Ellman's reagent, DTNB), marca Sigma-
Aldrich.
• Trichloroacetic acid (TCA), marca Sigma-Aldrich.
• Buffer fosfato 0.5M
• Buffer trifosfato 0.01M pH 7,4
• Etanol (SPECTRUM)
• Formol
• Cápsula en gel de vitamina E (D-alphatocopherol acetate equivalent to
vitamin E 400UI) PROCAPS®
• Folin-Ciocalteu reagent, marca MERCK®.
IV.3 Equipos e instrumentos
• Espectrofotómetro (Genesys 10 S)
• Homogenizador Tissue Tearor (A. BIOSPEC PRODUCTS, INC)
• Centrífuga refrigerada (DALB)
• Centrífuga clínica (FARLAB)
15
• Baño maría (BOECO Germany)

• Balanza analítica electrónica
• Estufa Unic´s
• Guillotina (Kent Scientific)
IV.4 Unidad de análisis y tamaño de muestra:
Unidad de análisis: ratones macho BALB/c, especie Mus musculus.

Tamaño de muestra: se emplearon 35 ratones con un peso promedio de 30 ± 3,5 g.
Los ratones fueron distribuidos aleatoriamente en cinco grupos (n=7).
IV.5 Criterios de inclusión y exclusión:
IV.5.1 Criterios de inclusión

• Ratones macho sin enfermedad.
• Con tres meses de edad.
• Y un peso aproximado entre 25 a 30 gramos.
IV.5.2 Criterio de exclusión

• Ratones que hayan sido manipulado en estudios anteriores “ratones
vírgenes”
• Los animales con alguna patología o herida.
• Amputación de alguna de las extremidades y cola.
IV.6 Adquisición y obtención de la suspensión de semilla
Las semillas de Moringa oleifera Lam fueron adquiridas en una feria de productos
orgánicos ubicado en el distrito de Lurín, con marca registrada y procedente del
mismo lugar (Anexo I). Este alimento se conservó en un lugar fresco, seco y
protegido de la luz solar. Algunas muestras de las semillas de Moringa oleifera Lam
fueron identificadas y clasificadas taxonómicamente por un biólogo especialista en
botánica (Anexo II).
16
Las semillas fueron descascarilladas una por una de forma manual, luego se pesó
una cantidad exacta, guardándose en sobres de aluminio y en refrigeración (5°C)
hasta el momento de la preparación de la suspensión.
Para la obtención de la suspensión de ambas dosis (200 y 600 mg/kg peso corporal),
las semillas fueron pesadas en balanza analítica y trituradas en un mortero de
porcelana, luego se agregó agua para obtener una suspensión con una
concentración de 10 y 30 mg/mL, correspondiente a las dosis. Dicha preparación se
realizó para cada día de tratamiento.
IV.7 Acondicionamiento y aclimatación de los animales de experimentación
Los ratones fueron comprados en el Centro Nacional de Productos Biológicos del

INS. Luego se mantuvieron en el bioterio de la Facultad de Medicina de la
Universidad Nacional Mayor de San Marcos (UNMSM), con un periodo de
adaptación (cinco días) para lograr condiciones metabólicas y comportamentales
saludables. Se acondicionó el espacio (5 ratones por jaula), temperatura, humedad
y ciclos alternados de luz/oscuridad de 12 horas cada uno adecuados según las
pautas de cuidado y uso del animal de experimentación del INS.
Los animales fueron ubicados en jaulas de plástico (24 cm x 20 cm x 42 cm),

teniendo acceso a una alimentación balanceada de acuerdo con sus necesidades,
siendo adquirido en el Centro de Producción de la Universidad Nacional Agraria La
Molina. El agua fue renovada diariamente con un consumo ad libitum. El ambiente
estuvo libre de ruido y olores irritantes. Durante el período del ensayo, los pesos de
los ratones fueron registrados de forma interdiaria (Anexo III).
El presente estudio fue aprobado por el Comité de Ética en Investigación de la

Facultad de Medicina de la UNMSM porque se cumplió con las recomendaciones
metodológicas y éticas para la investigación en animales de laboratorio (Anexo IV).
17
IV.8 Evaluación del efecto neuroprotector
Para la inducción a la neurotoxicidad, se ejecutó la técnica propuesta por Witte and

Bada (1983),56 que consiste en administrar alcohol (solución 40%) por vía
intraperitoneal (VIP), con una dosis de 1,8 g/kg de peso del ratón, por un lapso de
15 días. Se utilizó la VIP para lograr una eficiente administración y absorción de la
sustancia directamente a la sangre.57
Los ratones fueron divididos de forma aleatoria en cinco grupos (n=7), recibiendo el
siguiente tratamiento por vía orogástrica (VOG) durante 15 días:
Grupo I: Se suministró Agua (10 mL/kg de peso) por VOG + NaCl 0,9% (10 mL/kg
de peso) por VIP
Grupo II: Se suministró Agua (10 mL/kg de peso) por VOG + Etanol 40% (1,8 g/kg
de peso) por VIP
Grupo III: Se suministró Vitamina E (20 UI/kg de peso) por VOG + Etanol 40% (1,8
g/kg de peso) por VIP
Grupo IV: Se suministró la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam (200 mg/kg)
por VOG + Etanol 40% (1,8 g/kg de peso) por VIP
Grupo V: Se suministró la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam (600 mg/kg)
por VOG + Etanol 40% (1,8 g/kg de peso) por VIP
Finalizado el tratamiento, los animales fueron colocados en un ayuno de 12 horas,

para luego, ser sacrificados por decapitación. Se usó este método porque produce
una muerte indolora. Para el procedimiento, se utilizó una guillotina (Kent Scientific),
seguidamente el animal fue sujetado con firmeza para introducir la cabeza hasta la
región cervical, finalmente se realizó la acción bajando la palanca de la guillotina
(Anexo V).
El cerebro y cerebelo se extrajeron de la cavidad craneana y fueron lavados con

NaCl 0,9%. Todo el procedimiento se realizó sobre placas de hielo (4°C) y para el
pesado de los órganos se utilizó una balanza analítica. El hemisferio derecho del
cerebro fue empleado para la preparación del homogenizado y el hemisferio
izquierdo y cerebelo para el análisis morfológico.
18
IV.9 Procesamiento de los indicadores
IV.9.1 Determinación de los indicadores morfológicos
Índice de cerebro o cerebelo: Es un indicador utilizado para determinar la relación

proporcional entre peso del cerebro o cerebelo y el peso corporal del animal. Los
índices se expresaron en términos porcentuales, según la fórmula:
�
��: %
Ic: índice del cerebro o cerebelo
Wc: peso del cerebro o cerebelo
W: peso del animal
Estudio histológico: El hemisferio izquierdo y cerebelo fueron conservados en

formol al 10% tampón buffer fosfato pH 7,4 a 0,075 mol/L para los respectivos
análisis morfológico. Estas muestras fueron fijadas en parafina y teñidas con
hematoxilina-eosina por un profesional Tecnólogo Médico. Luego fueron leídas y
analizadas por un Médico Patólogo del Instituto de Medicina Legal y Ciencias
Forenses (Anexo VI). Se consideraron los siguientes aspectos: núcleo y citoplasma
de las neuronas, neuroglias, células de Purkinje y la presencia de células
sanguíneas (Anexo VII)
IV.9.2 Determinación de los indicadores bioquímicos
Preparación del homogenizado y obtención del sobrenadante

Se pesó aproximadamente 0,150 g. de tejido cerebral (hemisferio derecho) y se
homogenizó con buffer fosfato pH 7,4 a 0,01 mol/L, en la proporción de 1/10. Luego
fue centrifugado a 2500 rpm por cinco minutos para obtener un sobrenadante libre
de detritus.
19
Determinación de los niveles de glutatión (GSH) en tejido cerebral

Fundamento: para determinar los grupos sulfhidrilos del GSH, se utilizó el ácido
5,5-ditiobis-2- nitrobenzoico (DTNB) para que reaccione con los grupos y forme un
cromógeno, cuya longitud de onda máxima fue 412 nm. Para eliminar los grupos
presentes en la estructura proteica se utilizó el ácido tricloroacético (TCA),
compuesto que se encarga también de desnaturalizar a las proteasas. Se usó el
método de Boyne y Ellman (1972).58
Determinación de los niveles de GSH total

Fundamento: para determinar los grupos sulfhídricos totales se empleó un buffer
fosfato que contenía 20 mg de vitamina C y 10 mg de ácido glioxílico en un volumen
de 20 mL.
Determinación de los niveles de grupo sulfhidrilo proteico:

Fundamento: se tomó 0,1 mL del sobrenadante del homogenizado y se agregó 0,9
mL de buffer fosfato pH 7,4 a 0,01 mol/L. De la dilución se tomó 0,3 mL y se agregó
1 mL de buffer fosfato pH 6,8 a 0,5 mol/L. Luego se llevó a baño María a 37 °C por
cinco minutos. Terminado el tiempo, se le añadió 0,3 mL de DNTB 1,5 mg/mL, se
dejó incubar por cinco minutos y fue leído en el espectrofotómetro a 412 nm.
Determinación de los niveles de lipoperoxidación (TBARs):

Fundamento: en el proceso de la lipoperoxidación se genera una serie de
compuestos dialdehídos, entre ellos, el malondialdehido (MDA). Estas especies
reaccionan con dos moles de ácido 2-tiobarbitúrico para formar un cromógeno de
color rosado y que representa una máxima absorción a los 535 nm. El grado de
oxidación de los ácidos grasos en la membrana celular será proporcional a la
intensidad del color. Se empleó el método de Buege y Aust (1978).59
IV.10 Análisis de los datos estadísticos
Se procedió a ingresar los datos y ordenar la información en una hoja de cálculo de

MS-Excel 2010 para luego ser exportado al Paquete Estadístico para las Ciencias
Sociales (SPSS 25). Se aplicó la prueba de normalidad utilizando el estadístico
Shapiro-Wilk. Los datos que presentaron una distribución normal (p> 0,05), se
20
sometieron al análisis de varianza (ANOVA), luego se aplicó la prueba de

homogeneidad de varianzas de Levene y finalmente la prueba post hoc Tukey
(varianzas iguales) y Games-Howell (varianzas diferentes) para comparar las
medias entre grupos. Para comprobar la diferencia estadística entre grupos se utilizó
como p< 0,05, como valor significativo.
IV.11 Aspectos éticos
Los animales fueron tratados y manipulados según las normas éticas estipuladas
sobre el trato adecuado a los animales de experimentación, realizado por la
Asociación Española de Bioética y Ética Médica.60
También se aplicó Ley peruana N° γ0407: “Ley de Protección y Bienestar Animal”

del artículo 19, donde su finalidad es cuidar y proteger a la especie animal contra el
sufrimiento basado en buenas prácticas de manejo en los “centros que realizan
actos de experimentación, investigación o docencia”.61
Además, se cumplieron dos principios de la experimentación humanizada con los

animales, propuesta por William Russell (zoólogo y psicólogo) y Rex Burch
(microbiólogo) en 1959: Reducir y Refinar.62
21
V. RESULTADOS
Los indicadores del estudio, como el perfil glutatión, grupos sulfhídrilos proteicos,
lipoperoxidación e índices de cerebro y cerebelo mostraron una distribución normal
(p>0.05) tras someterse a la prueba de Shapiro-Wilk. Luego se procedió a aplicar la
prueba ANOVA (p<0.05), encontrándose diferencias significativas.
V.1 Niveles de glutatión, glutatión total y GSH/GSSG en tejido cerebral:

después de la administración de etanol (1,8 g/kg peso) por VIP, se observó en el
grupo II, menores niveles de glutatión en el tejido cerebral respecto al grupo I,
llegando a ser significativos. Por otro lado, el tratamiento con vitamina E más etanol
por VIP (grupo III), solo mostró mayores niveles de GSH total, pero niveles bajos de
GSH y GSH/GSSG con respecto al grupo II, sin ser significativos (tabla 1).
Tabla N°1: Perfil de Glutatión en tejido cerebral según grupo de tratamiento*
GSH‡ GSH total‡ GSH/GSSG†

Grupo y tratamiento (µmol/g tejido) (µmol/g tejido)
Media ±DE
Media ±DE Media ±DE
Grupo I: Agua 10 mL/kg + NaCl 0,9% 3,46 ± 0,53 14,9 ± 2,17 0,31 ± 0,04(a)
Grupo II: Agua 10 mL/kg + Etanol 40% 2,65 ± 0,29 14,4 ± 0,94 0,23 ± 0,03
Grupo III: Vitamina E 20 UI/kg + Etanol 40% 2,62 ± 1,18 16,0 ± 4,21 0,19 ± 0,05
Grupo IV: 200 mg/kg de semilla + Etanol 40% 2,33 ± 0,38 15,9 ± 1,94 0,17 ± 0,03
Grupo V: 600 mg/kg de semilla + Etanol 40% 3,03 ± 1,00 16,8 ± 2,16 0,23 ± 0,08
*Shapiro Wilk (p>0,05)
‡ANOVA (p>0,05)
†ANOVA (p<0,05) - Levene (p<0,05) - Post hoc prueba Games-Howell
(a) p<0,05 comparado con el grupo II
El grupo que recibió menor dosis de semilla moringa (grupo IV) evidenció bajos
niveles en la relación glutatión reducido-oxidado en comparación con el grupo II. Por
el contrario, en el grupo V se observó que los niveles de GSH y GSH total fueron
mayores respecto al grupo II, ambos resultados no fueron significativos.
22
V.2 Niveles de grupos sulfhídrilos proteicos en tejido cerebral: se identificó que

en el grupo II tras la administración de etanol (1,8 g/kg peso) por vía intraperitoneal,
los niveles de grupos sulfhídrilos proteicos fueron menores respecto al grupo I, no
llegando esta diferencia a ser significativos. Sin embargo, el tratamiento con
vitamina E más etanol por VIP (grupo III) mostró mayores niveles de grupos
sulfhídrilos proteicos respecto al grupo II, aunque las diferencias tampoco fueron
significativas (tabla 2).
Tabla N°2: Niveles de grupos sulfhídrilos proteicos en tejido cerebral

según grupo de tratamiento*
Grupos-SH Grupos-SH
proteicos proteicos Incremento
Grupo y tratamiento
(µmol/g tejido) (µmol/mg proteína) (%)
Media ± DE Media ± DE
Grupo I: Agua + NaCl 0,9% 204 ± 17 1,72 ± 0,09 -
Grupo II: Agua + Etanol 40% 183 ± 28,2 1,57 ± 0,24 -
Grupo III: Vitamina E 20 UI/kg + Etanol 40% 199 ± 13,2 1,77 ± 0,13 12,74
Grupo IV: 200 mg/kg de semilla + Etanol 40% 199 ± 14,9 1,99 ± 0,19(a) 26,75
Grupo V: 600 mg/kg de semilla + Etanol 40% 234 ± 16,6(a, b) 1,94 ± 0,29(c) 23,57
*Shapiro Wilk (p>0,05) - ANOVA (p<0,05) - Levene (p>0,05) - Post hoc prueba Tukey
(a) p<0,01; comparado con el grupo II
(b) p<0,05; comparado con el grupo III
(c) p<0,05; comparado con el grupo II
En los grupos que recibieron las semillas de moringa a las diferentes dosis (grupo
IV y V) más etanol por VIP, se observó una tendencia al aumento en los niveles de
grupos sulfhídrilos en tejido cerebral, dosis dependiente respecto al grupo II,
presentándose diferencia significativa.
V.3 Niveles de lipoperoxidación en tejido cerebral: se observó que los niveles de

lipoperoxidación en el grupo II fueron mayores respecto al grupo I, sin ser
significativo. Por el contrario, el tratamiento con vitamina E más etanol por VIP
(grupo III) mostró menores niveles de lipoperoxidación respecto al grupo II sin que
esta diferencia llegara a ser estadísticamente significativa.
23
En los grupos que recibieron semillas de moringa a diferentes dosis (grupo IV y V)

más etanol por VIP, se observó una tendencia a la disminución en los niveles de
lipoperoxidación, dosis dependiente; sin embargo, no se encontró diferencia
significativa con el grupo II (tabla 3).
Tabla N°3: Niveles de lipoperoxidación en tejido cerebral según grupo de

tratamiento
Lipoperoxidación Inhibición
Grupo y tratamiento (nmol/g tejido)
Media ± DE (%)
Grupo I: Agua 10 mL/kg + NaCl 0,9% 149 ± 25,0 -
Grupo II: Agua 10 mL/kg + Etanol 40% 168 ± 39,9 -
Grupo III: Vitamina E 20 UI/kg + Etanol 40% 128 ± 18,0 23,80
Grupo IV: 200 mg/kg de semilla + Etanol 40% 152 ± 18,0 9,52
Grupo V: 600 mg/kg de semilla + Etanol 40% 127 ± 15,7 24,40

Shapiro Wilk (p>0,05) – ANOVA (p<0,05) – Levene (p<0,05) – Games Howell
V.4 Índices de cerebro y cerebelo: en el grupo II se observó que los valores de

índices cerebro y cerebelo fueron mayores respecto al grupo I, sin encontrarse
diferencias significativas. Pero el tratamiento con vitamina E más etanol por VIP
(grupo III), mostró menores niveles de índice de cerebelo y mayores de cerebro
respecto al grupo II, sin ser significativo (tabla 4).
24
Tabla N°4: Índices de cerebro y cerebelo según grupo de tratamiento*
Índice cerebro‡ Índice cerebelo†

Grupo y tratamiento (%) (%)
Media ± DE Media ± DE
Grupo I: Agua 10 mL/kg + NaCl 0,9% 0,85 ± 0,12 0,24 ± 0,02
Grupo II: Agua 10 mL/kg + Etanol 40% 0,98 ± 0,05 0,24 ± 0,02
Grupo III: Vitamina E 20 UI/kg + Etanol 40% 0,99 ± 0,10 0,21 ± 0,03
Grupo IV: 200 mg/kg de semilla + Etanol 40% 0,92 ± 0,08 0,20 ± 0,04
Grupo V: 600 mg/kg de semilla + Etanol 40% 1,01 ± 0,11 0,24 ± 0,04
*Shapiro Wilk (p>0,05)

‡
ANOVA (p<0,05) – Levene (p<0,05) - Post hoc prueba Games-Howell
†
ANOVA (p<0,05)
Los grupos que recibieron semilla a diferentes dosis (grupo IV y V) no mostraron

diferencia significativa en los índices de cerebro y cerebelo con respecto al grupo II.
V.5 Cambios histológicos del tejido cerebral: a continuación, presentamos la

descripción de los tejidos del cerebro y cerebelo de los ratones sometidos a daño
por etanol (tabla 5):
A nivel histológico se observó, tanto en el cerebro y cerebelo, en los grupos

experimentales (IV y V) un espacio subaracnoideo conservado, algunas células
neuronales sin edemas ni alteraciones en su citoplasma, y ausencia de
componentes inflamatorios.
25
Tabla N°5: Cambios histológicos del cerebro y cerebelo según grupo de tratamiento
Grupo Cerebro Cerebelo

Presencia del espacio subaracnoideo bien El espacio subaracnoideo bien distribuido y rodeado
distribuido y revestido por epitelio plano con de epitelio plano. Se observó vasos sanguíneos en
endotelio sin alteraciones. No hubo edemas ni todas las capas. No hubo presencia de edemas en
lesiones neuronales. Hubo ausencia de linfocitos en las neuronas cerebelosas ni de células
todas las capas del tejido. Se observó la presencia polimorfonucleares y linfocitos. En la capa molecular
de células piramidales sin ninguna alteración se encontró escasa presencia de células redondas
I histológica, algunas presentaban nucleolo. También con cromatina firme y bien distribuidas. En la capa
se hallaron células gliales bien distribuidas. de Purkinje, las células presentaron citoplasma bien
diferenciado, núcleo presente y algunos con axones.
Y en la capa granulosa, se observaron grupos
celulares uniformes y bien distribuidos.
El espacio subaracnoideo ligeramente aumentado y Se aprecia el espacio subaracnoideo bien
con escasas células intravasculares. Se conservado, rodeado de epitelio simple plano y con
encontraron vasos congestivos a nivel linfocitos. Se observó la presencia de vasos
intraparenquimal del área cortical. En las células congestivos en todas las capas. Las células
neuronales se apreció un foco necrótico y edemas neuronales presentaron edemas en todas las capas
en todas las capas. También se presentaron focos del cerebelo y medula. En la capa molecular se
II neuronales con núcleo picnótico y escaso encontraron las células redondas bien distribuidas,
citoplasma a nivel de la corteza. Se encontró escasa pero algunas con retracción citoplasmática. Algunas
presencia de linfocitos reactivos. Se hallaron células de Purkinje con alteraciones en el citoplasma
algunas células gliales con retracción del con marcada eosinofilia y núcleo hipercromático.
citoplasma. Algunos grupos celulares presentaron retracción
citoplasmática en la capa granular.
El espacio subaracnoideo presentó vasos En el espacio subaracnoideo se encontró
congestivos y escasa presencia de linfocitos y ligeramente dilatado y aumentado, con presencia de
glóbulos rojos. Además, se presenció edemas en vasos congestivos y escasos linfocitos. Se hallaron
las capas superficiales de la corteza. También se células neuronales y células redondas
halló escasos componentes inflamatorios a nivel edematizadas. Algunas células de Purkinje se
perivascular y en la capa externa se encontraron observaron alteraciones de estructuras
III células piramidales con alteraciones en el citoplasmáticas, picnosis nuclear y borramiento de la
citoplasma (marcada eosinofilia), edemas y picnosis membrana citoplasmática. En la capa granular se
nuclear. Las células gliales se encontraban bien encontraron grupos celulares que forman focos bien
distribuidas y sin alteraciones. distribuidos y que presentaban retracción unicelular.
26
El espacio subaracnoideo ocupado por vasos El espacio subaracnoideo rodeado del epitelio
sanguíneos en todas las capas, pero algunos se plano, bien conservado, sin alteraciones y con la
encontraban ligeramente congestivos. Algunas presencia de vasos capilares pletóricos. Se observa
células neuronales presentaron edemas leves. células con edemas mayormente en las capas
Hubo ausencia de linfocitos y polimorfonucleares en intermedias y medular. No hay presencia de células
el tejido. Las células de la capa superficial no inflamatorias. Algunas células redondas
IV presentaban alteraciones. En la capa intermedia se presentaban retracción citoplasmática en la capa
encontró algunas células con alteraciones en su molecular. En la capa de Purkinje, algunas células
citoplasma (eosinofilia) presente en forma focal. presentaron alteraciones a nivel del citoplasma con
Algunas células gliales ubicadas en la capa cortical marcada eosinofilia y retracción citoplasmática; y en
se encontraban con retracción citoplasmática. la capa granular hubo presencia multicelular,
algunas con leve retracción citoplasmática y otras
sin alteraciones histológicas.
Se presentó un espacio subaracnoideo conservado Se observó el espacio subaracnoideo con epitelio
con vasos bien distribuidos, pero ligeramente plano y vasos sanguíneos bien conservados y sin
congestivos y escasas células tipo linfocitario. Se alteraciones. Se evidenciaron algunas células
presenció algunas células neuronales con edemas neuronales con edemas en todas las capas. No hay
de forma focal, otras con alteraciones presencia de células inflamatorias en las diferentes
citoplasmáticas de forma multifocal y el resto sin capas. En la capa molecular se observa a algunas
alteraciones. En la capa superficial, la mayoría de células redondas con alteraciones en su citoplasma
V las células no presentaban alteraciones y solo y células de Purkinje con borramiento de estructuras
algunas con edemas; en la capa intermedia, células citoplasmáticas y nucleares. En la capa granulosa
con leve eosinofilia en el citoplasma; y en la capa se observaron grupos celulares bien distribuidas y la
medular, algunas células con alteraciones. También mayoría sin alteraciones citoplasmáticas.
se encontró algunas células gliales con leve
retracción citoplasmática y núcleo picnótico en la
capa cortical.
27
MICROGRAFÍAS:
Micrografía 1. Grupo I: Cerebro. Se observa la corteza Micrografía 2. Grupo I: Cerebelo. Se observan las capas del
cerebral sin alteraciones histológicas. HE (40x) cerebelo sin alteraciones histológicas. HE (40x)
(a)
(a)
(b)
(b)
Micrografía 3. Grupo II: Cerebro. Se observa en la Micrografía 4. Grupo II: Cerebelo. (a) célula de Purkinje con
corteza del cerebro (a) vaso congestionado y (b) neurona edema y eosinofilia. (b) capa granular con retracción
con edema y eosinofilia. HE (40x) citoplasmática. HE (40x)
(a)
(a)
(b)
(b)
Micrografía 5. Grupo III: Cerebro. Se observa (a) célula Micrografía 6. Grupo III: Cerebelo. Se observa (a) célula de
linfocítica (b) célula piramidal con eosinofilia y picnosis Purkinje con edema, eosinofilia plasmática y picnosis nuclear
nuclear. HE (40x) (b) célula con retracción citoplasmática. HE (40x)
28
(b)
(b)
(a)
(a)
Micrografía 7. Grupo IV: Cerebro. Se observa (a) vaso Micrografía 8. Grupo IV: Cerebelo. Se observa (a) célula de
congestivo (b) célula con eosinofilia. HE (40x) Purkinje con eosinofilia y (b) célula con retracción
citoplasmática. HE (40x)
(a)
(b) (c)
(b)
(a)
(c)
Micrografía 9. Grupo V: Cerebro. Se observa (a) célula Micrografía 10. Grupo V: Cerebelo. Se observa (a) célula
sin alteraciones (b) vaso congestivo (c) célula con edema con alteraciones en su citoplasma (b) célula de Purkinje con
y leve eosinofilia. HE (40x) borramiento de estructuras citoplasmática y nuclear y
marcada eosinofilia (c) célula de Purkinje sin alteraciones
estructurales HE (40x)
29
VI. DISCUSIÓN
En la actualidad, la población adulta mayor está sometida a diferentes factores

(fisiológicos, psicológicos, sociales y ambientales) que desencadenan procesos
oxidativos e inflamatorios afectando principalmente al cerebro y dando origen a las
END. Una forma de prevenir o tratar estos procesos, es optando por una
alimentación saludable, en el que se incluyen alimentos vegetales, caracterizados
por su potencial antioxidante y asociado a que su consumo produce efectos
benéficos para la salud.49,53
Nuestro estudio observó en el grupo II mayores niveles de lipoperoxidación e índices

de cerebro y cerebelo, por otra parte, menores niveles del perfil glutatión y de los
grupos -SH proteicos. A nivel histológico, en el cerebro se encontró un espacio
subaracnoideo aumentado, vasos congestivos en el área cortical, poca presencia
de linfocitos reactivos, glías con retracción citoplasmática, células neuronales con
edemas, foco necrótico, núcleo picnótico y con escaso citoplasma. En el tejido
cerebeloso se halló vasos congestivos, células con edemas y retracción
citoplasmática y algunas células de Purkinje con alteraciones en su citoplasma
(marcada eosinofilia y núcleo hipercromático).
El cerebro es un órgano muy susceptible para ser dañado debido a la alta demanda
de oxígeno, la acumulación de metales de transición (hierro y cobre) y la presencia
de ácidos grasos poliinsaturados (PUFA) en las membranas neuronales que hacen
que pueda ser vulnerable al estrés oxidativo.63 Una sustancia capaz de generar este
cuadro a nivel cerebral es el etanol.
El etanol atraviesa la barrera hematoencefálica (BBB) y se oxida en el SNC con la

ayuda de diferentes vías. Las enzimas responsables de la oxidación del etanol son
el alcohol deshidrogenasa (ADH), citocromo P-450 y la catalasa. La ADH tipo III es
la isoforma que presenta baja afinidad por el etanol. El citocromo P-450 variedad
2E1 es parte importante del sistema de oxidación microsomal de etanol (MEOS)
para la conversión a acetaldehído, y la catalasa se encargada del 60% del
metabolismo del etanol produciendo bajas concentraciones de peróxidos.52,64 En la
oxidación del etanol se forman radicales libres que reaccionan con las moléculas
30
biológicas (proteínas, ácidos grasos y ADN) de las células, dando origen a un cuadro
de estrés oxidativo y causando alteraciones como la disfunción mitocondrial,
acumulación de agregados intracelulares, excitoxicidad y apoptosis.65,66
El etanol modula al receptor ácido -aminobutírico (GABA) y N-metil-D-aspartato

(NMDA) del SNC, causando simpatoexcitación y consecuentemente la disminución
de la excitabilidad y funcionalidad neuronal. Este hecho ocurre al haber grandes
concentraciones de glutamato en el cerebro, activa al receptor NMDA, que permite
la entrada de calcio (Ca+2) a las neuronas produciendo muerte celular por
excitoxicidad, liberación de NO (óxido nítrico) y ROS, peroxidación y
proteólisis.49,52,67
Estudios realizados en personas alcohólicas reportan pérdida y contracción de

neuronas piramidales del hipocampo, pérdida de células de Purkinje y granulares,
atrofia en la capa molecular del cerebelo, entre otros, trayendo como consecuencia
un aumento de las células gliales por causa de la muerte neuronal cortical. A nivel
cerebral, se genera el aumento de los valores de difusión media (MD) y, por ende,
una mayor difusión de agua microscópica que altera y produce cambios en las
estructuras de las diferentes células.67 Estos sucesos están asociados a los niveles
altos de índices de cerebro, cerebelo y cambios histológicos encontrados en el
grupo II.
Cuando se genera la desestabilización de la membrana celular por lipoperoxidación,

disminuye el potencial electroquímico y aumenta la permeabilidad, desencadenando
un incremento de los niveles de calcio intracelular.63 Este incremento origina la
activación de proteasas, lipasas, endonucleasas. Las proteasas lesionan el
citoesqueleto y proteínas de la membrana, las lipasas fomentan la hidrólisis de los
fosfolípidos de membrana y la endonucleasa provoca la ruptura del ADN, a esto se
suma el ingreso masivo de calcio a la mitocondria conllevando a una disminución
en la producción de ATP, por lo que se genera una despolarización de la membrana
plasmática originándose deterioro en la función neuronal y muerte celular.48 Este
suceso explica los resultados histológicos obtenidos en el grupo II.
El malondialdehído (MDA) es la creación de la degradación de los PUFAs de la
membrana celular por los RL, presenta afinidad y reactividad con los grupos -SH de
31
las proteínas ocasionando daños estructurales y funcionales. Además, forma

sustancias modificadas (pirimidopurinona) citotóxicas con el ADN causando agravio
a los distintos compartimientos celulares, provoca edemas celulares, inflamación y
permeabilidad vascular.49,66 Este suceso explica el porqué de las modificaciones
histológicas en el grupo II.
Durante el proceso inflamatorio crónico se genera una gran variedad de citocinas

que inducen la activación de una vía llamada óxido nítrico sintasa inducible (iNOS).
Ésta vía produce NO, una sustancia que modifica a los residuos de aminoácidos de
proteínas y al ADN, induciendo a la apoptosis. Este último evento y la excitoxicidad
son activadas por el aumento del calcio al espacio intracelular y mitocondrial
causando una mayor generación de ROS y muerte celular. La apoptosis conlleva a
una condensación de la cromatina (picnosis), fragmentación del núcleo, retracción
citoplasmática y la fragmentación celular en cuerpos apoptóticos.49 Estos eventos
están relacionados con los exámenes histológicos del cerebro y cerebelo del grupo
II.
Los niveles aumentados de Ca2+ activarán a la vía óxido nítrico sintasa neuronal
(nNOS) y producirá también NO. Esta especie reactiva atraviesa la membrana
celular, pero al haber grandes cantidades, daña a la célula y a sus proximidades. Es
una molécula con alta afinidad por los centros hemo de las proteínas (que controlan
el tono vascular) por lo que si ocurre una alteración de este mecanismo habrá una
desregularización del calibre vascular.66 Por ello, una exposición de etanol a altas
concentraciones causa vasoconstricción, por ende, una disminución y acumulación
del flujo sanguíneo.67 Estos datos explicarían los resultados histológicos del grupo
II.
La excesiva producción de NO reaccionará con el oxígeno celular formando nitrito y

nitrato, luego este último reaccionará con el anión superóxido (O2-) formando el
peroxinitrito (ONOO-), una sustancia tóxica que hidroxila a los grupos sulfhídrilos y
tioéster de las proteínas, modificando la estructura y actividad celular, expresándose
la apoptosis.66,68 Todos estos sucesos explicarían los niveles bajos de los grupos
sulfhídrilos proteicos en el grupo II.
32
El GSH reacciona de forma espontánea con el O2-, NO, hidroxilo (OH-), ONOO-,
entre otros y es metabolizado por la glutatión-s-transferasa (GST). En condiciones
de estrés oxidativo, los radicales peróxidos oxidan el GSH a GSSG. En este proceso
disminuye el GSH produciendo una modificación en la relación GSH/GSSG, el cual
es un indicador del estado redox celular.50 Al reducirse los niveles de GSH, la
actividad del GSH peroxidasa (GPx) estaría limitada, suscitándose una mayor
acumulación de peróxidos y consecuentemente la muerte celular.69 Este suceso
explicaría los niveles bajos del perfil de glutatión y los niveles altos de
lipoperoxidación en el grupo II.
Las células gliales (astrocitos y microglía) se activan por un daño a nivel cerebral
(formación de ROS) liberando diferentes citocinas proinflamatorias neurotóxicas
(interleucinas, TNFα y factores de crecimiento) y a la par, también se activan vías
de señalización como el Factor Nuclear potenciador de las cadenas ligeras Kappa
de las células B activadas (NF-κB), proteína kinasa mitógeno activado (MAPK) y la
vía de señalización de la fosfatidilinositol-3-kinasa (PI3K/AKT) que contribuyen en
la respuesta inflamatoria, producción excesiva de NO y ROS, transcripción de genes
y finalmente desencadenando la muerte neuronal.34,51,68 Por todo lo anterior, se
considera a la neurodegeneración una combinación de desequilibrios en la
señalización de glutamato y dopamina, neuroinflamación (alteración de procesos
bioquímicos) y activación de las células gliales se manifiesta por el metabolismo del
etanol.52 Esto resume lo observado a nivel bioquímico e histológico en el grupo II.
En el estudio de Hamid y col. 2018 se observó altos niveles de MDA, bajos niveles
del perfil GSH, características picnóticas en las células neuronales de la corteza
cerebral (núcleo oscuro y con pérdida de su estructura) en el que se les administró
etanol por vía intraperitoneal a dosis de 1,8 g/kg (40% v/v) durante 14 días
consecutivos.70 En línea con esta observación, en la investigación de Palomino
también se encontró los mismos resultados bioquímicos, células neuronales
edematizadas en el cerebro y células de Purkinje deformadas, edematizadas y con
núcleo picnótico.71 Por otro lado, Arteaga y col. 2016, reportaron que luego de
administrar etanol por vía oral a diferentes dosis (10, 20, 30 y 40%) por 56 días y
dos semanas de abstinencia, se observó resultados similares a nuestro estudio
(niveles altos de lipoperoxidación y bajos del perfil GSH).72 Finalmente, en un
33
estudio tras la administración crónica de etanol (2g/kg/d) durante 12 semanas, se

encontró niveles altos de lipoperoxidación y bajos de grupos sulfhidrilos.73
El grupo de tratamiento que recibió vitamina E más etanol (grupo III) se observó
menores niveles de lipoperoxidación e índice de cerebelo, mayores niveles de GSH
total y grupos sulfhídrilos, sin embargo, fue mayor el índice de cerebro y menores
los niveles de GSH y GSH/GSSG. En el estudio histológico, a nivel cerebral se
presenció células gliales sin alteraciones, vasos congestivos y escasos linfocitos en
el espacio subaracnoideo, pocos componentes inflamatorios a nivel perivascular,
células piramidales con edemas, picnosis nuclear y alteraciones en el citoplasma.
En el cerebelo, el espacio subaracnoideo presentó vasos congestivos y escasos
linfocitos, algunas células de Purkinje con picnosis nuclear, borramiento de las
membranas y alteraciones de estructuras citoplasmáticas.
La vitamina E es el principal antioxidante soluble en lípidos con un potencial mayor

que el glutatión y el -caroteno; presenta un pequeño tamaño y peso molecular, su
vitámero más abundante en la naturaleza es el α-Tocoferol (αT), y lo podemos
encontrar en tejidos, membranas celulares y lipoproteínas.74
La vitamina E protege contra el daño oxidativo, captando y neutralizando a los RL,

formando nuevos radicales menos reactivos e inhibiendo la reacción en cadena de
la peroxidación lipídica. En la etapa de propagación, cuando el radical lipídico (L•)
reacciona con el oxígeno para producir un radical lípido peroxilo (LOO•), aparece el
α-Tocoferol (α-TocH) donando átomos de hidrógeno y formando un nuevo
compuesto llamado hidroperóxido de lípidos (LOOH), entonces el α-TocH se
convierte en un radical α-tocoferol (α-Toc•) y se une con el LOO• formando
compuestos pocos reactivos, manteniendo la integridad de la membrana celular.75
Este suceso explicaría los niveles bajos de lipoperoxidación en el grupo III.
Estudios muestran que la vitamina E tiene la actividad de inhibir la obtención de

prostaglandinas E2 (PGE2) y promover la producción interleucina 2 (IL-2) y linfocitos
como respuesta inmune. Otra acción es bloquear la entrada de calcio, reprimiendo
la actividad de la 5-lipoxigenasa (5-LOX), modulando y mejorando la respuesta
inmunitaria. 76 Investigaciones hechas en animales y humanos han evidenciado que
34
la deficiencia de esta vitamina altera las funciones inmunitarias, sin embargo, la

suplementación mejoró la respuesta de este sistema y disminuyó la producción de
marcadores proinflamatorios (IL-1 , IL-6 y TNF-α).77 Estos datos explicarían los
resultados a nivel histológicos del grupo III.
Los grupos -SH se unen a los RL para neutralizarlos y evitar acciones nocivas. 78 El
glutatión es un sistema antioxidante no enzimático que protege a los grupos -SH de
la oxidación.79 Se ha evidenciado que la vitamina E restaura el agotamiento del
glutatión.74 Sin embargo, la suplementación con este antioxidante redujo la actividad
enzimática del SOD y CAT debido a una menor formación de RL ya que la vitamina
tiene efecto de captación de radicales y aumentó la actividad del glutatión
peroxidasa (GPx) porque hay una mayor necesidad de eliminar peróxidos de
hidrógeno (H2O2),80 pero existe otro estudio donde la suplementación de vitamina E
aumentó la actividad del SOD, CAT y GPx,81 todo ello afectando el perfil de GSH.
Estos sucesos explicarían los resultados inesperados de los niveles de GSH,
GSH/GSSG y grupos sulfhídrilos en el grupo III.
Gueroui M. y Kechrid Z. 2016 observaron un aumento del GSH, reparación y

restauración de los daños cerebrales (histoarquitectura normal) en ratas, frente a la
administración de nitrato de plata (AgNO3), dieta con vitamina E (400 mg/kg) y
selenio (Se) durante tres meses.82 Otro estudio demostró que la administración oral
de vitamina E (100 mg/kg/día) por 30 días contrarrestó los efectos tóxicos (formación
de RL) frente a la inducción con nanopartículas de plata (AgNP), disminuyendo la
activación de las células gliales (destrucción de la capa granular del cerebelo) pero
no se contrarrestó la apoptosis.83
El estudio de Beytuta 2018, consistió en un tratamiento con vitamina E (20 mg

disuelto) por vía oral durante 30 días y se demostró una disminución de los niveles
de lipoperoxidación (LPO) acompañado de una mejora en los niveles de GSH frente
a altas dosis de prednisolona.84 Similar resultado se encontró en la investigación de
Sung y col. donde el consumo de vitamina E (2 UI/g de dieta) a edades tempranas
reduce la peroxidación lipídica en ratas mutagénicas a nivel cerebral.85
35
En un estudio de exposición crónica al humo del tabaco en pipa de agua y vitamina

E (100 mg/kg) por sonda oral en animales de experimentación durante un mes se
observó una reducción, no significativa, de los niveles de GSSG y GSH, sin
embargo, aumentó la relación GSH/GSSG conjuntamente con una disminución de
la lipoperoxidación.86 En otra investigación se encontraron resultados similares, en
donde la administración con vitamina E (100 mg/kg de dieta) más dimetoato (DM)
durante 30 días produjo niveles bajos de MDA (lipoperoxidación), niveles mayores
de GSH y grupos -SH; sin embargo, no hubo cambios histopatológicos en la corteza
cerebral.87
En relación con los grupos experimentales (IV y V) que recibieron tratamiento con
semilla Moringa oleifera Lam y etanol, se observaron mayores niveles de grupos
sulfhídrilos proteicos, menores niveles de lipoperoxidación y una tendencia de
incremento en el GSH y GSH/GSSG; aunque respecto a los índices de cerebro y
cerebelo, solo el grupo IV mostró un menor nivel. A nivel histológico, en el tejido
cerebral se observó vasos sanguíneos bien distribuidos y conservados, ausencia de
linfocitos, escasos componentes inflamatorios y células sin alteraciones, sin
embargo, se encontró vasos ligeramente congestivos en el espacio subaracnoideo,
algunas células con edemas, alteraciones citoplasmáticas (retracción y eosinofilia)
y núcleo picnótico. En el tejido cerebeloso se notó al espacio subaracnoideo bien
conservado, sin presencia de células inflamatorias, células bien distribuidas y sin
alteraciones en el citoplasma, no obstante, también se observó vasos capilares
pletóricos, algunas células con alteraciones citoplasmáticas y otras con borramiento
en sus estructuras.
Los resultados encontrados en los grupos tratados con la semilla Moringa Oleifera
Lam pueden estar relacionados con los componentes que presenta. Se han
identificado compuestos fitoquímicos como flavonoides (catequina, epicatequina,
kaempferol, quercetina, miricetina), ácidos fenólicos (ácido gálico, ferúlico, cafeico
y elágico), glucósidos (glucosinolatos e isotiocianatos), alcaloides, fitoesteroles ( -
sitosterol), entre otros; que hacen resaltar su gran potencial y parecido biológico con
las hojas de moringa.46,88,89,90 En un artículo de revisión, varios estudios han
demostrado que los compuestos bioactivos encontrados en las semillas de Moringa
presentan propiedades antioxidantes, antiinflamatorias y neuroprotectoras.10
36
Otra especie de la familia Moringaceae (Moringa peregrina) presenta compuestos

fenólicos, isotiocianatos (isotiocianato de isobutilo, isotiocianato de isopropilo,
isotiocianato de bencilo, entre otros), glucósidos de nitrilo (niazirina, niazirinina, 4-
(4′-O-metil-α-L-ramnosiloxibencilnitrilo) y es considerado fuente de ácido oleico. Su
aceite presenta ácidos grasos (ácido mirístico, ácido palmítico, ácido láurico, acido
esteárico, ácido linoleico, ácido α-linolenico, etc.), isotiocianatos y esteroles ( -
sitosterol, estigmasterol).91 Esta especie de la semilla tiene características muy
parecidas a la Moringa oleifera Lam.
El gran poder antioxidante que tiene la semilla Moringa oleifera Lam se debe a la
presencia y alto contenido de polifenoles, entre ellos los flavonoides; por ejemplo,
un estudio revela que la miricetina posee mayor actividad antioxidante que el α-
tocoferol.90 Este hallazgo comprueba que las fitomoléculas que contiene la semilla
de moringa se encargan de eliminar RL, atrapar iones metálicos de transición, y a
su vez, presentar efectos sinérgicos con otro antioxidante (trolox), inhibiendo el daño
sobre el ADN y actividad protectora frente al estrés oxidativo.92 Estos resultados
explicarían los bajos niveles de lipoperoxidación en los grupos IV y V.
Los polifenoles de las semillas de Moringa se encargan de eliminar los RL (limitando

la sobreproducción de ROS), quelan metales de transición (afinidad por los grupos
-SH) y aumentan las actividad de los antioxidantes endógenos a nivel cerebral.8,93
Velaga y col. 2014 encontró que el tratamiento con polvo de la semilla (500mg/kg
peso/día) por vía oral en ratas expuestas a la toxicidad del plomo, protegió del estrés
oxidativo (disminuyó los niveles de ROS y lipoperoxidación), aumentó la actividades
enzimáticas (SOD, CAT, GPx), restauró los parámetros sanguíneos y disminuyó la
toxicidad producida por el plomo.93 Deshmukh y col. 2016 halló que el ácido cafeico
restauró los niveles de GSH, mejoró las funciones cognitivas y redujo el estrés
oxidativo atenuando la neurotoxicidad por estreptozotocina.94 Estos resultados
explicarían los niveles en aumento del perfil GSH y grupos -SH en los grupos IV y
V.
Las propiedades nutracéuticas de la semilla de moringa también se deben a la
presencia de los glucosinolatos (GL) e isotiocianatos (ITC). Los ITC son metabolitos
secundarios del glucosinolato y desempeña capacidad de activar la vía factor
37
nuclear eritroide 2 (Nrf2), induciendo acciones antioxidantes y antiinflamatorias

(disminuye los marcadores de inflamación, inhibe la expresión de citocinas
proinflamatorias y de vías apoptóticas). Estudios han demostrado que los ITC
protege contra enfermedades que atacan al sistema nervioso.95 Este suceso
explicaría la ausencia de componentes inflamatorios.
Otro estudio encontró que la semilla de moringa tiene un efecto protector contra la
disfunción endotelial. Los RL, productos del estrés oxidativo, se unen con el NO
originando inflamación y remodelación vascular, e inactivan al eNOS. Los
polifenoles contenidos en la semilla (glucosinolatos e isotiocianatos) mejoran la
función endotelial aumentando la actividad del eNOS y contribuyendo a la relajación
vascular.96 Este suceso explicaría los resultados del índice de cerebro y cambios
histológicos.
Estudios demuestran que el pretratamiento con ácido gálico protege a las células
dopaminérgicas de la disfunción mitocondrial, previene la apoptosis, recupera los
niveles de enzimas antioxidantes y reduce los niveles de ROS intracelulares frente
a la exposición inducida de una sustancia neurotóxica catecolaminérgica, llamada
6-OHDA (6-hidroxidopamina);8 por otro lado, la quercetina y kaempferol protegen al
cerebro, disminuyendo la actividad de la señalización NFkB (vía inflamatoria).9 Estos
resultados resumen lo observado a nivel bioquímico e histológico.
La semilla presenta un alto contenido de ácido grasos monoinsaturados (MUFA)

donde el más predominante es el ácido oleico (76.73%), seguido de los ácidos
grasos saturados (SFA) como el palmítico, behénico, esteárico y araquídico
(21.18%) y en menor proporción a los ácidos grasos poliinsaturados (PUFA) como
el α-linolénico y linoleico (1.18%).44,46
Se ha encontrado que los MUFA exógenos inhiben la ferroptosis y lipotoxicidad. En

la ferroptosis, los MUFA dependiente del miembro 3 de la familia de cadena larga
de acil-CoA sintetasa (ACSL3) previene la acumulación de ROS, dependiente de
hierro, disminuyendo los niveles de PUFA oxidables en la membrana celular; por
otra parte, inhiben la lipotoxicidad al disminuir los niveles de SFA almacenándolos
en gotitas de lípidos.97 Un estudio en ratones en el que se administró una dieta alta
38
en grasas (HFD) más MUFA (oleato) durante 24 semanas, protegió la función

mitocondrial, previno la apoptosis de las neuronas del ganglio de raíz dorsal (DRG)
y conservando la producción de ATP debido a que evitó la despolarización
mitocondrial.98 Estos hechos se relacionan con los datos bioquímicos e histológicos
encontrados en los grupos experimentales.
Una limitación del estudio es que no se encontraron diferencias significativas entre

los grupos I y II (control positivo y negativo), sin embargo, se evidencia una
tendencia del daño causado por el etanol en el tejido cerebral, siendo más evidente
a nivel histológico según patólogo. Un estudio realizado por Pal y cols. evaluaron el
efecto de etanol (2 g/kg peso corporal por VIP) en las regiones del cerebro de ratas
adultas (cepa Wistar), midiendo los niveles de lipoperoxidación y actividad de
enzimas antioxidantes. En esta investigación no se encontró diferencias
significativas entre el grupo control y el grupo (etanol) pero hubo una tendencia de
daño en los resultados.99
39
VII. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
VII.1 Conclusiones
• La administración de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam según

dosis de experimentación disminuyó los niveles de lipoperoxidación y
aumentó los niveles de grupos sulfhídrilos proteicos, observándose mejores
resultados en el grupo de mayor dosis, los niveles de GSH y GSH/GSSG
presentaron incremento, sin llegar a ser estadísticamente significativo.
• La administración de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam, a nivel
histológico, protegió a los órganos frente al daño con etanol, respecto a los
índices cerebro y cerebelo disminuyeron sin llegar a ser significativos.
• La administración de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam según
dosis de experimentación presentó efecto protector a nivel histológico, en
ambos tejidos, sin embargo, los otros marcadores evaluados en el estudio
no alcanzaron a ser significativos.
VII.2 Recomendaciones
• Ejecutar estudios experimentales a mayores dosis en la semilla Moringa

oleifera Lam ya que se observó una tendencia en los marcadores
bioquímicos respecto a las dosis.
• Realizar estudios empleando una mayor dosis de alcohol y/o duración del
tratamiento experimental para poder observar diferencias significativas en
los indicadores bioquímicos de los grupos.
• Evaluar la actividad del superóxido dismutasa y catalasa en el tejido cerebral.
• Realizar ensayos con la semilla Moringa oleifera Lam en otros tejidos como
el hígado, riñón, corazón, entre otros.
40
VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1. Organización Panamericana de la Salud. Envejecimiento y cambios

demográficos. 2019. [citado 22 marzo del 2019]. Disponible en:
https://www.paho.org/salud-en-las-americas-2017/mhp-aging-es.html)
2. Organización Mundial de la Salud. Informe mundial sobre el envejecimiento y la
salud. Ginebra: OMS. 2015.
3. Varela L., Tello T. Salud y calidad de vida en el adulto mayor. Rev. perú. medi.
exp. salud pública. 2016; 33(2): 19-24.
4. Ministerio de Sanidad, Servicios Sociales e Igualdad. Estrategia en
Enfermedades Neurodegenerativas del Sistema Nacional De Salud. Centro de
publicaciones. 2016.
5. Organización Panamericana de la Salud. Reducción de los riesgos de deterioro
cognitivo y demencia: Directrices de la OMS. 2020
6. Shaw M. La 6ª Conferencia Mundial de Promoción de la Salud. Carta de
Bangkok para la Promoción de la Salud en un Mundo Globalizado. Tailandia.
OMS. 2005. Pag.1-6.
7. Organización Mundial de la Salud. Trastornos neurológicos: desafíos para la
salud pública. Ginebra. 2006.
8. González E, Ureña I, Sánchez M, Gómez M. Nutritional Value of Moringa
oleifera Lam. Leaf Powder Extracts and Their Neuroprotective Effects via
Antioxidative and Mitochondrial Regulation. Nutrients. 2021; 13(7): 1-15.
9. Almeida S, Alves M, Sousa M, Oliveira P, Silva B. Are Polyphenols Strong
Dietary Agents Against Neurotoxicity and Neurodegeneration? Neurotox Res.
2016. 30(3): 1-22.
10. Vargas K, Garay E, González R. Efectos de la Moringa oleifera en los niveles de
glucemia e insulina: una revisión de estudios en animales y humanos.
Nutrientes. 2019. 11(12): 1-19.
11. Organización Mundial de la Salud. Acción multisectorial para un envejecimiento
saludable basado en el ciclo de vida: proyecto de estrategia y plan de acción
mundiales sobre el envejecimiento y la salud. 69.ª Asamblea Mundial de la
Salud. Ginebra. 2016.
41
12. Organización Mundial de la Salud. Estrategia y plan de acción sobre demencias

en las personas mayores. 72.º Consejo Directivo, 67.ª sesión del Comité
Regional de la OMS para las Américas. Washington. 2015.
13. Instituto Nacional de Estadística e Informática. Situación de la población adulta
mayor. Informe técnico. 2019.
14. Garre J. Epidemiología de la enfermedad de Alzheimer y otras demencias.
Revista de Neurología. 2018. 66(11): 377-386.
15. El-Metwally A. et al. Epidemiología de la enfermedad de Alzheimer y la demencia
en los países árabes: una revisión sistemática. Neurología conductual. 2019.
16. Custodio N, Wheelock A, Thumala D, Slachevsky A. Demencia en América
Latina: evidencia epidemiológica e implicaciones para las políticas públicas.
Front Aging Neurosci. 2017. 9(221).
17. Sutalangka C, Wattanathorn J, Muchimapura S, Thukham-mee W. Moringa
oleifera mitigates memory impairment and neurodegeneration in animal model
of age-related dementia. Oxid Med Cell Longev. 2013.
18. Alzheimer's Disease International. The global voice on dementia. [Internet].
2019. [citado 22 marzo del 2019]. Disponible en: https://www.alzint.org/
19. Ministerio de Salud. [Internet]. MINSA. 2018. [citado 22 marzo del 2019].
Disponible en: https://www.gob.pe/institucion/minsa/noticias/19206-minsa-
recomienda-ejercicio-mental-y-estilos-de-vida-saludables-en-el-dia-mundial-
del-alzheimer
20. Organización Panamericana de la Salud. Enfermedades no trasmisibles
[Internet]. 2018. [citado 22 marzo del 2019]. Disponible en:
https://www.who.int/es/newsroom/factsheets/detail/noncommunicablediseases)
21. Velázquez M, Peón I, Zepeda R, Jiménez M. Moringa (Moringa oleifera Lam):
usos potenciales en la agricultura, industria y medicina. Revista Chapingo Serie
Horticultura. 2016; 22(2): 95-116.
22. Smeltzer S, Bare B. Estrés y Adaptación. Brunner S. Suddarth S. Manual de
Enfermería Médico Quirúrgico. 8ª Edición. México. 1998.
23. Ganguly R, Hazra R, Ray K, Guha D. Effect of moringa oleifera in experimental
model of alzheimer's disease: role of antioxidants. Annals of Neurosciences.
2005. 12: 33-36.
42
24. Ekong M, Ekpo M, Akpanyung E, Nwaokonko D. Neuroprotective effect of

Moringa oleifera leaf extract on aluminium-induced temporal cortical
degeneration. Metab Brain Dis. 2017. 1-11
25. Omotoso G. et al. Moringa oleifera phytochemicals protect the brain against
experimental nicotine-induced neurobehavioral disturbances and cerebellar
degeneration. Pathophysiology. 2017. 1-6.
26. Alqahtani W. Albasher G. Moringa oleifera Lam. extract rescues lead-induced
oxidative stress, inflammation, and apoptosis in the rat cerebral cortex. Journal
Food Biochemistry. 2020. 1-11.
27. Custodio N. Vivir con demencia en Perú: ¿El sistema de salud está enfrentando
la sobrecarga? Revista Neuropsiquiatría. 2016. 79 (1).
28. Mehla J, Gupta P, Pahuja M, Diwan D, Diksha D. Indian Medicinal Herbs and
Formulations for Alzheimer's Disease, from Traditional Knowledge to Scientific
Assessment. Brain Sci. 2020. 10(12): 1-31.
29. Ross M. Pawlina W. Histología. Correlación con biología molecular y celular.
7ma edición. España. Wolters Kluwer. 2015.
30. Lesson T, Lesson C, Paparo A. Texto Atlas de Histología. Mc Graw Hill
Interamericana. México. D.F. 1990.
31. Lopategui I, Herrera A, Pentón G. Papel de la glía en la enfermedad de
Alzheimer. Futuras implicaciones terapéuticas. Neurología. 2014. 29(5): 305-
309.
32. Halliwell B. Oxidative stress and neurodegeneration: ¿where are we now? 2006.
1634-1658.
33. Salim S. Estrés oxidativo y el sistema nervioso. 2017. 360 (1): 201-205.
34. Sarubbo M. Estrategias neuroprotectoras en el envejecimiento cerebral.
Mecanismos neuroquímicos y moleculares y su correlación con los efectos sobre
las capacidades cognitivas. [Tesis doctoral]. España. 2016.
35. Floyd R. Hensley K. Oxidative stress in brain aging. Implications for therapeutics
of neurodegenerative diseases. Neurobiol. Aging. 2002. Vol.23: 95–807.
36. Zhou J. Yang WS, Suo DQ, Li Y, Peng L, Xu L. et al. Moringa oleifera Seed
Extract Alleviates Scopolamine-Induced Learning and Memory Impairment in
Mice. Front Pharmacol. 2018. 9(389): 1-11.
37. Estudio sobre las enfermedades neurodegenerativas en España y su impacto
económico y social. Neuroalianza. 2016.
43
38. Colomé J, Jordá J, Fernández G, Segoviano R, Díaz A, Espinós D. Radicales

libres y citotoxicidad del etanol en los leucocitos humanos de sangre venosa
periférica. An. Med. Interna. 2003. 20: 396-398.
39. Jordán J. Avances en el tratamiento de las enfermedades neurodegenerativas.
2003; 22(3): 102-114.
40. Martín C, Martín G, García A, Fernández T, Hernández E, Puls J. Potenciales
aplicaciones de Moringa oleífera. Pastos y Forrajes. 2013. 36(2):137-149.
41. López S, Pazos A, Rivero G, Crespo J, Vargas C. Morfometría de fruto y semilla
de Moringa oleífera Lam “moringa”. SCIÉNDO. β018. β1(β): β01-204.
42. Alli Rani E, Arumugam T. Moringa oleifera (Lam): A nutritional powerhouse.
Journal of Crop and Weed. 2017. 13(2): 238-246.
43. Prakash L, Singh S, Elamathi S, Anandhi P, Abraham T. Moringa: A multipurpose
potential crop. Proc Indian Natn Sci Acad. 2019. 85 (3): 589-601.
44. Maizuwo A, Hassan A, Momoh H, Muhammad J. Phytochemical constituents,
biological activities, therapeutic potentials and nutritional values of Moringa
oleifera (Zogale): a review. JDDMC. 2017; 3(4):60-66.
45. Haston E, Richardson E, Stevens F, Chase W, Harris J. The Linear Angiosperm
Phylogeny Group (LAPG) III: a linear sequence of the families in APG III.
Botanical Journal of the Linnean Society. 2009. 161(2), 128-131.
46. Leone A. et al. Moringa oleifera Seeds and Oil: Characteristics and Uses for
Human Health. International journal of molecular sciences. 2016; 17(12): 1-14.
47. Omotesho F, Sola E, Fayeye R, Babatunde O, Otunola A, Aliyu H. The potential
of Moringa tree for poverty alleviation and rural development: Review of
evidences on usage and efficacy. International Journal of Development and
Sustainability. 2013. 2(2), 799-813.
48. Dorado C, Rugerio C, Rivas S. Estrés oxidativo y neurodegeneración. Rev Fac
Med UNAM. 2003. 46(6): 229-235.
49. López A. Actividad neuroprotectora de antocianidinas y leguminosas crudas y
procesadas. [Tesis doctoral]. Universidad Complutense de Madrid. Facultad de
Farmacia. 2015.
50. Díaz M, González M, Blanco L. El sistema antioxidante del glutatión en la
etiopatología de la disfunción nigro-estriatal. Revista Cubana de Investigaciones
Biomédicas. 2015; 34(2):168-186.
44
51. Ramli NZ, Yahaya MF, Tooyama I, Damanhuri HA. A Mechanistic Evaluation of
Antioxidant Nutraceuticals on Their Potential against Age-Associated
Neurodegenerative Diseases. Antioxidants. 2020. 9(10): 1-41.
52. Escarabajal D. Mecanismos implicados en las conductas inducidas por el
alcohol: el papel de los enzimas cerebrales responsables del metabolismo del
acetaldehído. [tesis doctoral]. 2000.
53. Sandoval S, Díaz NF, Gómez U, Canales AA, Gutierrez YK, Padilla E, et al.
Neuroprotective effects of phytochemicals on dopaminergic neuron cultures.
Neurología. 2019. 34(2): 114-124.
54. Estrada F, Morales J, Tabla E, Solis B, Navarro H, Martínez M. et al.
Neuroprotección y traumatismo craneoencefálico. Rev. Fac. Med. México. 2012.
55(4): 16-29.
55. Hernández R, Fernández C, Baptista P. "Metodología de la Investigación." Mc.
Graw Hill. 6ta edición. 2014.
56. Witte D, Bada M. Self-stimulation and alcohol administered orally or
intraperitoneally. Exp.Neurol. 1983. 82: 675-682.
57. Viruete S. Manual de conocimientos básicos de farmacología. 1era Edición.
México: Ediciones de la noche. 2015.
58. Boyne F, Ellman L. A methodology for analysis of tissue sulfhydryl components.
1972. 46(2): 639-53.
59. Buege J, Aust S. Microsomal lipid peroxidation. Methods Enzymology. (1978).
52: 302-306.
60. Pardo A. Ética de la Experimentación Animal. Directrices Legales y Éticas
Contemporáneas: Departamento de Humanidades Biomédicas. Ediciones 3ª.
Universidad de Navarra. 2005; 16(3):393-417.
61. Congreso de la República. Ley peruana N° 30407. Ley de protección y bienestar
animal. El Peruano. [Internet]. 2016. Enero. [citado 2020 Jul 13]. Disponible en:
https://busquedas.elperuano.pe/normaslegales/ley-de-proteccion-y-bienestar-
animal-ley-n-30407-1331474-1/
62. Fuentes F, Mendoza R, Rosales A, Cisneros R. Guía de manejo y Cuidado de
animales de Laboratorio: ratón. Ministerio de Salud. Centro Nacional de
Productos Biológicos. INS. Lima. 2008.
63. Shichiri M. The role of lipid peroxidation in neurological disorders. J Clin Biochem
Nutr. 2014. 54(3): 151–160.
45
64. Pohanka M. Toxicology and the biological role of methanol and ethanol: Current
view. Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub. 2016.160(1):
54-63.
65. Hernández J, López R, Rendon A. Lipids and Oxidative Stress Associated with
Ethanol-Induced Neurological Damage. Oxid Med Cell Longev. 2016. 1-15.
66. Gutiérrez J, Mondragón P, García L, Hernández S, Ramirez S, Núñez N. Breve
descripción de los mecanismos moleculares de daño celular provocado por los
radicales libres derivados de oxígeno y nitrógeno. Rev Esp Med Qui. 2014. 19:
446-454.
67. Schlesinger A, Pescador B, Roa L. Neurotoxicidad alcohólica. Revista Med.
2017. 25(1): 87-101.
68. Cobb C, Cole M. Oxidative and Nitrative Stress in Neurodegeneration. Neurobiol
Dis. 2015. 84: 4-21.
69. Gaschler M, Stockwell B. Lipid peroxidation in cell death. Biochemical and
Biophysical Research Communications. 2017. 482(3): 419-425.
70. Hamid A, Wahida F, Hooi T, Nazir M, Eusoff N, Husain K, et al. Zingiber zerumbet
L. (Smith) extract alleviates the ethanol-induced brain damage via its antioxidant
activity. BMC Complementary and Alternative Medicine. 2018. 18(101):1-9.
71. Palomino L. Efecto neuroprotector del cocimiento de hojuelas de Chenopodium
quinoa (quinua) variedad negra en ratones sometidos a daño por etanol [Tesis].
Lima: Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Facultad de Medicina,
Escuela Profesional de Nutrición; 2019.
72. Arteaga M, Díaz M, Ross Y, Gabilondo P. Daño cerebral por estrés oxidativo y
alteraciones en el comportamiento después de la abstinencia alcohólica en ratas
Lewis. Revista Archivo del Hospital Universitario “General Calixto García”. β017.
133-146.
73. Calabrese V, Renis M, Calderone A, Russo A, Reale S, Barcelona M, et al.
Stress Proteins and SH-Groups in Oxidant-Induced Cellular Injury After Chronic
Ethanol Administration in Rat. Free Radical Biology and Medicine.
1998. 24(78):1159-1167.
74. Butterfield A, Castegna A, Drake J, Scapagnini G, Calabrese V. Vitamin E and
Neurodegenerative Disorders Associated with Oxidative Stress. Nutritional
Neuroscience. 2002. 5(4):229-239.
46
75. Miyazawa T, Burdeos G, Itaya M, Nakagawa K, Miyazawa T. Vitamin E:

Regulatory Redox Interactions. 2019. 71 (4): 430-441.
76. Lloret A, Esteve D, Monllor P, Cervera A, Lloret A. The Effectiveness of Vitamin
E Treatment in Alzheimer's Disease. Int J Mol Sci. 2019. 20(4):1-17.
77. Lewis E, Meydani S, Wu D. Regulatory role of vitamin E in the immune system
and inflammation. IUBMB Life. 2019. 71(4): 487-494.
78. Arrieta J, Reyes B, Reyes A, Sánchez M. Papel de los grupos sulfhidrilos, las
prostaglandinas y el óxido nítrico endógeno, en la gastroprotección del lanosterol
sobre las lesiones gástricas inducidas por etanol en rata. Revista Mexicana de
Ciencias Farmacéuticas. 2009. 40(3): 17-21.
79. Deneke S. Thiol-based antioxidants. Current Topics in Cellular Regulation. 2001.
36: 151–180.
80. Chin SF, Ibahim J, Makpol S, Hamid A, Abdul Latiff A, Zakaria Z, et
al. Tocotrienol rich fraction supplementation improved lipid profile and oxidative
status in healthy older adults: A randomized controlled study. Nutrition and
metabolism. 2011. 8(42): 1-14.
81. Taridi NM, Yahaya MF, Teoh SL, Latiff AA, Wan Ngah WZ, Das S, et al.
Tocotrienol rich fraction (TRF) supplementation protects against oxidative DNA
damage and improves cognitive functions in Wistar rats. Clin Ter. 2011; 162(2):
93-98.
82. Gueroui M, Kechrid Z. Evaluation of Some Biochemical Parameters and Brain
Oxidative Stress in Experimental Rats Exposed Chronically to Silver Nitrate and
the Protective Role of Vitamin E and Selenium. Toxicol. Res. 2016. 32(4): 301-
309.
83. Yin N, Yao X, Zhou Q, Faiola F, Jiang G. Vitamin E attenuates silver
nanoparticle-induced effects on body weight and neurotoxicity in rats.
Biochemical and Biophysical Research Communications. 2015. 405-410.
84. Beytuta E, Yilmazb S, Aksakalc M, Polatd S. The possible protective effects of
vitamin E and selenium administration in oxidative stress caused by high doses
of glucocorticoid administration in the brain of rats. Journal of Trace Elements in
Medicine and Biology 2018: 131-135.
85. Sung S, Yao Y, Uryu K, Yang H, Lee V, Trojanowski J, et al. Early Vitamin E
supplementation in young but not aged mice reduces A levels and amyloid
47
deposition in a transgenic model of Alzheimers disease. The FASEB Journal.

2003; 18(2): 323-325.
86. Alzoubia K, Halboup A, Alomari M, Khaboure O. The neuroprotective effect of
vitamin E on waterpipe tobacco smokinginduced memory impairment: The
antioxidative role. Life Sciences. 2019: 46-52.
87. Amara I, Soudani N, Hakim A, Troudi A, Mounir K, Boudawara T, et al. Selenium
and vitamin E, natural antioxidants, protect rat cerebral cortex against
dimethoate-induced neurotoxicity. Pesticide Biochemistry and Physiology. 2011:
165-174.
88. Mahajan S, Mali R, Mehta A. Protective Effect of Ethanolic Extract of Seeds of
Moringa oleifera Lam. Against Inflammation Associated with Development of
Arthritis in Rats. Journal of Immunotoxicology. 2007. 4(1): 39-47.
89. Paikra B, Dhongade H, Gidwani B. Phytochemistry and Pharmacology of
Moringa oleifera Lam. J Pharmacopuncture. 2017; 20 (3):194-200.
90. Abd Rani N, Husain K, Kumolosasi E. Moringa Genus: A Review of
Phytochemistry and Pharmacology. Front. Pharmacol. 2018. 9(108): 1-26.
91. Senthilkumar A, Karuvantevida N, Rastrelli L, Kurup S, Cheruth A. Traditional
Uses, Pharmacological Efficacy, and Phytochemistry of Moringa
peregrina (Forssk.) Fiori. - A Review. Front. Pharmacol. 2018; 9(465): 1-17.
92. Singh BN, Singh BR, Singh RL, Prakash D, Dhakarey R, Upadhyay G, et al.
Oxidative DNA damage protective activity, antioxidant and anti-quorum sensing
potentials of Moringa oleifera. Food and Chemical Toxicology. 2009; 47 (6):
1109-1116.
93. Velaga M, Daughtry L, Jones A, Yallapragada P, Rajanna S, Rajanna B.
Attenuation of lead-induced oxidative stress in rat brain, liver, kidney and blood
of male Wistar rats by Moringa oleifera seed powder. J Environ Pathol Toxicol
Oncol. 2014. 33(4):323-337.
94. Deshmukh R, Kaundal M, Samardeep V. Caffeic acid attenuates oxidative
stress, learning and memory deficit in intra-cerebroventricular streptozotocin
induced experimental dementia in rats. Biomedicine and Pharmacotherapy.
2016; 81: 56–62.
95. Lopez N, Gaytán M, Reyes L, Loarca G. Glucosinolates and Isothiocyanates
from Moringa oleifera: Chemical and Biological Approaches. Plant Foods for
Human Nutrition. 2020: 1-11.
48
96. Randriamboavonjy I, Heurtebise S, Pacaud P, Loirand G, Tesse A. Moringa

oleifera Seeds Improve Aging-Related Endothelial Dysfunction in Wistar
Rats. Oxidative medicine and cellular longevity. 2019.
97. Magtanong L, Ko PJ, To M, Yinuo J, Forcina G, Tarangelo A, et al. “Exogenous
Monounsaturated Fatty Acids Promote a Ferroptosis-Resistant Cell State.” Cell
chemical biology. 2019. 26(3): 420-432.
98. Rumora A, LoGrasso G, Hayes J, Mendelson F, Tabbey M, Haidar J, et al. The
Divergent Roles of Dietary Saturated and Monounsaturated Fatty Acids on Nerve
Function in Murine Models of Obesity. The Journal of neuroscience: the official
journal of the Society for Neuroscience. 2019. 39(19): 3770-3781.
99. Pal R, Nath R, Dip Gill KD. Lipid Peroxidation and Antioxidant Defense Enzymes
in Various Regions of Adult Rat Brain after Co-Exposure to Cadmium and
Ethanol. 1993. 73(4), 209–214.
49
IX. ANEXOS
Anexo 1. Semilla de Moringa oleifera Lam
A. Semilla y B. Grano
50
Anexo 2. Constancia de Clasificación Taxonómica de la semilla Moringa oleifera

Lam
51
Anexo 3. Caja o jaula para ratones
20 cm de alto x 24 cm de ancho x 45 cm de largo
52
Anexo 4. Acta de Evaluación Ética de Estudios de Investigación
53
Anexo 5. Guillotina – Kent Scientific
54
Anexo 6. Constancia de la Comisión Científica
55
Anexo 7. Reporte ampliatorio de los hallazgos histológicos
56
57
58
59

Flores CL

Cargado por

Información del documento

Título original

Derechos de autor

Formatos disponibles

Compartir este documento

Compartir o incrustar documentos

Opciones para compartir

¿Le pareció útil este documento?

¿Este contenido es inapropiado?

Copyright:

Formatos disponibles

Flores CL

Cargado por

Copyright:

Formatos disponibles

Universidad Nacional Mayor de San Marcos

Universidad del Perú. Decana de América

Efecto de la suspensión de semilla Moringa oleífera

Flores L. Efecto de la suspensión de semilla Moringa oleífera Lam frente a la

Nombres y apellidos Lorena Margot Flores Castro

Tipo de documento de identidad DNI

Número de documento de identidad 75204496

Nombres y apellidos Oscar Gustavo Huamán Gutiérrez

Tipo de documento de identidad DNI

Número de documento de identidad 10454580

URL de ORCID https://orcid.org/0000-0002-6224-9165

Datos del jurado

Presidente del jurado

Nombres y apellidos Jorge Luis Arroyo Acevedo

Tipo de documento DNI

Número de documento de identidad 06785241

Miembro del jurado 1

Nombres y apellidos Henry Guija Guerra

Tipo de documento DNI

Número de documento de identidad 09398610

Miembro del jurado 2

Nombres y apellidos Doris Hilda Delgado Pérez

Tipo de documento DNI

Número de documento de identidad 06158953

Línea de investigación Bases moleculares de

Agencia de financiamiento Autofinanciado

Ubicación geográfica de País: Perú

URL de disciplinas OCDE https://purl.org/pe-repo/ocde/ford#1.06.00

Firmado digitalmente por

A mi asesor, Dr. Oscar Huamán Gutiérrez por brindarme su apoyo y confianza en la

Tabla 1. Perfil de Glutatión en tejido cerebral según grupo de tratamiento ................ 21

Microfotografía 1: grupo I (cerebro) ........................................................................ 27

En la actualidad, se observa un mayor número de personas adultas mayores, a nivel

El incremento de la población longeva está relacionado con el aumento de la

Dentro de los productos vegetales con presencia de antioxidantes encontramos a la

Estudios demuestran que las moléculas bioactivas de la semilla de moringa tienen

I.2 Planteamiento del problema

I.2.1. Determinación del problema

A nivel mundial, están aconteciendo diversos cambios demográficos, por ejemplo,

Para el año 2015, se calculó 900 millones de personas mayores de 60 años

Según la Organización Mundial de la Salud (OMS), un adulto mayor es aquel

Se les define a las END como afecciones hereditarias o adquiridas en el que se

la Esclerosis Lateral Amiotrófica (ELA), patologías con una alta prevalencia y

La END tipo demencial es un síndrome clínico de deterioro cognitivo producto del

La demencia es considerada como un problema de salud pública, ya que aparecen

I.2.2 Formulación del problema

Por todo lo expuesto, nos preguntamos ¿Cuál es el efecto de la suspensión de

I.3.1 Objetivo General

Evaluar el efecto de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam frente a la

I.3.2 Objetivos Específicos

• Determinar el efecto de la suspensión de semilla Moringa oleifera Lam sobre

I.4 Importancia y alcance de la investigación

Las END se presentan en gran mayoría en la población adulta mayor causando

Es un alimento natural consumido por la población en presentaciones como harina

Por ende, la importancia del estudio radica en conocer el efecto neuroprotector de

I.5. Limitaciones de la investigación

II. REVISIÓN DE LITERATURA

En la extensa bibliografía revisada, no se han encontrado estudios relacionados

Ganguly R. y cols. indicaron un efecto neuroprotector contra un modelo de

En otra investigación se encontró en la administración de extracto de hoja Moringa

Alqahtani W. y Albasher G. evidenciaron que el extracto de hojas Moringa oleifera

porque disminuyó los marcadores de estrés oxidativo (mejoró la actividad de

II.2. Bases teóricas