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Haemophilus. Bordetella.
Lic. Liliana Gmez Gamboa (M.Sc.)
Clasificacin
Grupo Homologa ARNr I Pseudomonas
Haloflicos Shewanella
Pigmento rosado
Clasificacin
Gnero Pseudomonas
Grupo Fluorescens
P. aeruginosa P. fluorescens (5 biovar I-VI) P. ptida (3 biovar A,B,C) P. verona (relacionada con P. fluorescens biovar II) P. monteilii (relacionada con P. putida biovas A) P. stutzeri y P. mendocina P. alcaligenes y P. pseudoalcaligenes P. luteola y P. oryzihabitans
Grupo no Fluorescens
Clasificacin
Gnero Burkholderia
Sin nombre (genomovar III) B. stabilis (genomovar IV) B. vietnamiensis (genomovar V) B. ambifaria (genomovar VII) B. anthinia (genomovar VIII) B. pyrrocinia (genomovar IX)
Clasificacin
Clasificacin
Gnero Delftia D. acidovorans (Pseudomonas acidovorans, Comamonas acidovorans) Gnero Comamonas C. testosteroni C.terrigenas Gnero Pandoreae Pandoreae spp.
Gnero Ralstonia R. pickettii (Burkholderia, pseudomonas pickettii) R. mannitolilytica (P. pickettii biovar 3 thomasii)
Grupo Sacaroltico A. calcoaceticus A. baumannii (19 biotipos y 34 serovars) A. haemolyticus Grupo Asacaroltico A. junni A. jhonsonii (genoespecie 3 con 26 serovars) A. lwoffii (genoespecie 6) A. radioresistens A. ursingii
Gnero Massilia
M. timonae
Gnero Moraxella (Familia Moraxellaceae) M. atlantae M. canis M. catarrhalis M. lincolnii M. lacunata M. nonliquefaciens M. osloensis Gnero Psychrobacter P. phenylpyruvicus Gnero Oligella O. urealytica (CDC grupo IV-e) O. urethralis (M. urethralis, CDC grupo M-4).
Gnero Alcaligenes
A. faecalis
Gnero Achromobacter
Gnero Myroides
Gnero Bordetella
Gnero Ralstonia
CDC grupo C1 CDC grupo O-1, O-2 y O-3 Gnero Sphingomonas S. paucimobilis S. parapaucimobilis
BGNNFG Oxidasa Positiva, Indol Negativo, Sacarolticos de forma bacilar o cocoide. Clasificacin Gnero Sphingobacterium
S. spiritivorum (Flavobacterium spiritivorum, F. yabunchiae, CDC grupo II K-3) S. mizutaii S. thalpophilum S. faecium S. antarcticum Sphingobacterium genoespecies 1 y 2
BGNNFG Oxidasa Positiva, Indol Positivo, Mtiles o no Mtiles con Pigmento Amarillo. Clasificacin
Familia Flavobacteriaceae
Gnero Chryseobacterium C. meningosepticum (F. meningosepticum) C. indologenes (F. indologenes) C. gleum (F. gleum) Gnero Empedobacter E. brevis (F. breve) Gnero Weeksella W. virosa Gnero Bergeyella B. zoohelcum (W. zoohelcum) Gnero Balneatrix B. alpica
Gnero Shewanella
S. algae
Gnero Alishewanella
A. fetalis
Gnero Halomonas
H. venusta
Gnero Methylobacterium M. extorquens M. organophilum M. rhodinum M. rhodesianum M. zatmanii M. aminovorans M. radiotolerans M. mesophilicum M. fujisawaense
Genoespecies 4, 5 y 6
Caractersticas Generales
Pseudomonas
Bacilos Gram Negativo aerobios estrctos. No esporulados, mtiles. Oxidasa y catalasa positiva. No fermentadores de la lactosa. Metabolismo oxidativo. Reducen los nitratos a nitritos. Temperatura ptima de crecimiento 30 - 35C. Pueden producir pigmento y olor caracterstico. Ampliamente distribuidos en la naturaleza. Importantes patgenos nosocomiales.
Pseudomonas aeruginosa
Caractersticas Generales
Pseudomonas aeruginosa
Caractersticas Generales
En su hbitat natural estos microorganismos desempean un importante papel en la descomposicin de la materia orgnica.
Diversas especies son importantes patgenos vegetales, mientras que otras infectan animales.
Aunque algunas especies de Pseudomonas no infectan al hombre, algunas son patgenos oportunistas importantes que infectan a individuos con defensas alteradas.
Caractersticas de Crecimiento
Pseudomonas aeruginosa
Es aerbico estricto, pero puede utilizar nitrato y arginina como aceptores de electrones y crecer anaerbicamente. Una temperatura de 30-35C es ptima para su crecimiento, pero pueden crecer a 42C.
Caractersticas de Crecimiento
Pseudomonas aeruginosa
Cepas mucosas son frecuentemente aisladas de muestras de esputo de pacientes con fibrosis qustica. La mayora de las cepas excretan piocianina y pioverdina, dando a la colonia un color azul verdoso.
Pseudomonas aeruginosa
Es ms resistente a la desinfeccin qumica que otras bacterias. Sobrevive en una amplia variedad de lugares (equipos para atencin respiratoria, humidificadores con agua fra, instrumental, pisos y baos). Muchos de los antibiticos y desinfectantes de uso comn son inefectivos contra Pseudomonas. Se ha aislado de compuesto de amonio cuaternario y de jabones de hexaclorofeno y cloruro de banzalconio.
Pseudomonas aeruginosa
Los desinfectantes fenlicos y el betaglutaraldehido, son generalmente efectivos. El agua a 100C, as como la desecacin destruye completamente al microorganismo.
Pseudomonas aeruginosa
Gentica
Algunas
mutaciones dificultan la identificacin de P. aeruginosa, como la prdida de los flagelos y la capacidad de producir el pigmento caracterstico (piocianina).
Generalmente los miembros del grupo poseen factores de transferencia de resistencia (plsmidos) y factores de virulencia como la produccin de piocianina (bacteriocina). Puede transferencia gentica entre cepas Pseudomonas mediante conjugacin y transduccin. ocurrir de
Las cepas de Pseudomonas pueden tipificarse mediante serologa y tipificacin por fagos.
Pseudomonas aeruginosa
Estructura Antignica
Antgeno Somtico (O) Antgeno Capsular (K) Antgeno Flagelar (H) Antgeno Poliaglutinante (AP)
Pseudomonas aeruginosa
Determinantes de Patogenicidad
Pseudomonas aeruginosa
Productos Extracelulares
Colagenasa Elastasa Lecitinasa Lipasa Proteasa Hemolisina Exotoxina A, B y C Pigmentos: Pioverdina Piocianina Piorrubrina
Pseudomonas aeruginosa
Produccin de Pigmento
PIGMENTO
Piocianina Piorrubrina (aeruginosin A y B)
COLOR
Azul Rojo
Pioverdina * (fluoresceina)
Pioverdina (fluoresceina)
Amarillo verdoso
Ninguno
Amarillo marrn
Marrn negro
Pseudomonas aeruginosa
Infecciones Clnicas
Foliculitis Otitis
Queratitis
lcera corneal Infecciones de heridas Infecciones urinarias
Pseudomonas fluorescens
Shock Sptico
Bacteriemias
P. alcaligenes
Endocarditis.
Caractersticas Generales
Burkholderia
Significado Clnico
Burkholderia
Patgenos en el hombre
B. cepacia B. pseudomallei
B. mallei
Burkholderia pseudomallei
Caractersticas Generales
Burkholderia pseudomallei
Caractersticas Generales
Caractersticas Generales
Burkholderia cepacia
Se asla con frecuencia del medio hospitalario y de muestras clnicas. Causa bacteriemia, infecciones del tracto urinario, tracto respiratorio, artritis sptica, peritonitis, infecciones de heridas y endocarditis.
Es motil, produce un pigmento difusible que fluorece violeta bajo luz ultravioleta.
Produce acidez oxidativa en el OF glucosa.
Caractersticas Generales
Burkholderia mallei
Es el agente causal del MUERMO. El hombre se infecta por el contacto directo a travs de abrasiones en la piel e inhalacin. Ha sido aislado de sangre, esputo o pus de pacientes con muermo. Es no motil. La oxidasa puede ser positiva, positiva dbil o negativa. OF glucosa oxidativo.
Es una infeccin tpica de equinos, aunque tambin afecta ovejas, cabras, perros y gatos. Ocasionalmente se contagia a los humanos y debe ser considerada una zoonosis. La enfermedad en humanos incluye: neumona, necrosis de la piel y mucosas y un cuadro linfoide agudo o crnico, con ndulos diseminados. Puede ocurrir una infeccin sistmica (septicemia).
Stenotrophomonas maltophilia
Caractersticas Generales
Es ubicua en la naturaleza y se ha aislado del medio ambiente hospitalario. Este microorganismo puede producir infecciones y en algunos casos slo es un colonizador. Produce septicemias asociadas a catteres intravenosos, neumonas, infecciones de heridas y raramente otras infecciones como endocarditis y meningitis. Presenta un penacho de flagelos polares y crecen a 37C.
Las colonias son secas, grandes y presentan una pigmentacin verde en agar sangre con olor a amonio.
Son oxidasa negativa y oxidan la maltosa ms rpidamente que la glucosa.
Caractersticas Generales
Acinetobacter
Oxidasa y nitratos negativo, no mtiles. En McConkey se presentan como fermentadoras o ligeramente rosadas. colonias no
Ampliamente distribuidos en la naturaleza y en el ambiente hospitalario. Segundo patgeno Pseudomonas. en frecuencia despus de
Importancia Clnica
Acinetobacter
El tratamiento con antibiticos, cirugas, instrumentacin y permanencia en UCI son factores predisponentes para la infeccin.
Caractersticas Generales
Alcaligenes
Bacilos Gram negativos, aerobios estrictos, mtiles por presentar flagelos polares. Oxidasa positiva. Bioqumica y filogenticamente relacionados con el gnero Bordetella. Se encuentran en el medio ambiente.
Poseen poca accin sobre los carbohidratos, no producen cido a partir de la glucosa. La especie clnicamente importante es A. xilosoxidans subespecie xyloxosidans, frecuentemente agente productor de septicemias en ambientes hospitalarios.
Las especies asacarolticas son raramente observadas como patgenos humanos.
Caractersticas Generales
Moraxella
Cocobacilos Gram negativos en pares o cadenas cortas. Oxidasa positiva, no motiles y asacaroliticos. Aerobios estrictos. Forman parte de la flora normal de piel y mucosas.
La especie ms frecuentemente nonliquefaciens. aislada es M.
Son patgenos oportunistas y son raros agentes de infeccin (conjuntivitis, meningitis, septicemia, endocarditis y artritis).
Caractersticas Generales
Chryseobacterium
Chryseobacterium meningosepticum
Caractersticas Generales
la
mayora
de
los
agentes
CULTIVO
SIEMBRA DE MUESTRAS CLNICAS EN MEDIOS DE CULTIVO SELECTIVOS
INCUBACIN EN AEROBIOSIS A 30-35C durante 24-horas
Medios de Cultivo:
Identificacin
Agar Sangre Agar peptona Agar McConkey Agar EMB Leifson Desoxicolato Agar Cetrimide Agar Irgasan Otros
TSI Oxidasa, motilidad y morfologa flagelar. OF basal medio con carbohidratos. Arginina, lisina y ornitina. Crecimiento a 42C. Urea, citrato, indol y fenilalanina. Nitratos. Acetamida, esculina, almidn.
TAXONOMA
Gnero Haemophilus
(22)
Familia Haemophileae
H. influenzae H. aegyptius
H. aphrophilus
H. ducreyi
Son bacilos gramnegativos pequeos y, en ocasiones, pleomorfos. Haemophilus influenzae es la especie que se asocia con mayor frecuencia a enfermedad y las infecciones en pacientes peditricos eran las ms frecuentes con anterioridad a la introduccin de la vacuna frente a H. influenzae tipo b (HIB).
Haemophilus aegyptius causa importante de conjuntivitis aguda purulenta. Es el agente etiolgico de la enfermedad peditrica fulminante conocida como FIEBRE PURPRICA BRASILEA.
Haemophilus ducreyi es el agente etiolgico de la enfermedad de transmisin sexual CHANCRO BLANCO O CHANCROIDE.
La mayora de las especies de Haemophilus complementados con los siguientes factores de crecimiento: 1) hemina (tambin conocido como factor X por factor desconocido). 2) nucletido de nicotinamida y adenina (NAD, tambin llamado factor V por vitamina), o 3) ambos.
SEROTIPOS
Antes de la introduccin de la vacuna HIB, el serotipo b de H. influenzae era el responsable de > 95% de las infecciones invasivas por Haemophilus. Casi todas las enfermedades causadas por este serotipo han desaparecido tras la introduccin de esta vacuna. En la actualidad, los serotipos c y f y los serotipos no encapsulados de H. influenzae producen la mayor parte de las infecciones por H. influenzae.
En resumen, H. influenzae se subdivide en: 1) SEROTIPOS desde la a hasta la f (determinados por la presencia de antgenos capsulares; el tipo b es el ms importante); 2) BIOTIPOS desde I hasta VIII (determinados por sus propiedades bioqumicas).
Las especies pertenecientes al gnero Haemophilus (H. parainfluenzae y H influenzae no encapsulado), colonizan el tracto respiratorio superior en prcticamente todos los individuos durante los primeros meses de vida. Estos microorganismos se pueden diseminar localmente y producir enfermedad.
Celulitis
Otitis media
Epiglotitis
Sinusitis
Meningitis
Bronquitis Neumona
Los PILI Y LAS ADHESINAS no relacionadas con los pili intervienen en la colonizacin de la orofaringe por H. influenzae.
Los componentes de la pared celular bacteriana (LIPOPOLISACRIDOS Y GLUCOPPTIDOS de bajo peso molecular) alteran la funcin ciliar y ocasionan daos en el epitelio respiratorio.
A continuacin, las bacterias se pueden traslocar a travs de clulas epiteliales y endoteliales para ingresar en el torrente circulatorio. En ausencia de anticuerpos opsonizantes especficos dirigidos contra la cpsula polisacardica, se puede producir una bacteriemia con un gran nmero de bacterias y diseminacin a las meninges u otros focos distales.
El principal factor de virulencia de H. influenzae tipo b es la CPSULA ANTIFAGOCTICA POLISACARDICA (PRP). Los anticuerpos frente a la cpsula suponen un estmulo importante de la fagocitosis bacteriana y la actividad bactericida mediada por el complemento. Estos anticuerpos se desarrollan como consecuencia de una infeccin natural, la vacunacin con PRP purificado, o la transferencia pasiva de anticuerpos maternos. El riesgo de meningitis y epiglotitis es significativamente mayor en los pacientes carentes de anticuerpos frente a la cpsula, aquellos con reduccin del complemento o los sometidos a una esplenectoma.
Infecciones producidas por Haemophilus influenzae. Con la introduccin de la vacuna conjugada, la mayora de las infecciones en el adulto afecta a zonas contiguas a la bucofaringe (p. ej., tracto respiratorio inferior, senos, odos). Las infecciones sistmicas graves (meningitis, epiglotitis) pueden darse en sujetos no vacunados.
El chancroide es una enfermedad de transmisin sexual que se diagnostica con mayor frecuencia en el hombre, supuestamente debido a que las mujeres pueden presentar una enfermedad asintomtica o latente. Se forma una ppula dolorosa a la palpacin con una base eritematosa en la regin perianal o genital entre 5 y 7 das despus de la exposicin. La lesin se ulcera y torna dolorosa en un plazo de 2 das, y con frecuencia aparece una linfadenopatia inguinal. Para diagnosticar chancroide se deben excluir otras causas de lceras genitales, como la sfilis y el herpes simple.
Cultivo en agar GC-HgS: 3 mg de Va/L, 1% Hb, 5% suero fetal bovino y 1% Isovitalex. 33C, 5% CO2. 3-4 das de incubacin.
FIEBRE PURPRICA BRASILEA: Enfermedad peditrica fulminante caracterizada por conjuntivitis inicial seguida unos das despus de una fiebre de comienzo agudo, vmitos y dolor abdominal. En los pacientes que no reciben tratamiento aparecen rpidamente petequias, prpura y un cuadro de shock que termina con la muerte.
CULTIVO
SIEMBRA DE MUESTRAS CLNICAS EN MEDIOS DE CULTIVO ENRIQUECIDOS + Suplemento INCUBACIN EN MICROAEROFILIA A 35-37C durante 24 horas
IDENTIFICACIN: Morfologa colonial Morfologa celular Pruebas bioqumicas: requerimiento de los factores (X, V) y satelitismo. Susceptibilidad a los antimicrobianos (CLSI 2011).
Bordetella
TAXONOMA
17 gneros
Familia Alcaligenaceae
CARACTERSTICAS GENERALES
Son cocobacilos gramnegativo muy pequeos (0,2-0,5x1m de dimetro), aerobios estrictos y no fermentadores. Motilidad variable. Catalasa positiva. Crecimiento ptimo: 35-37C.
Son aislados de humanos y animales de sangre caliente (B. petrii especie ambiental aislada de sedimentos de ros). B. pertussis produce enfermedad slo en humanos, quien tambin sirve como nico reservorio nico. Ha sido considerado como un patgeno respiratorio estricto, sin embargo puede ocasionar infeccin invasiva.
Presentan necesidades nutricionales sencillas, aunque algunas especies son muy sensibles a sustancias y metabolitos txicos presentes en los medios de laboratorio empleados habitualmente. El medio de cultivo de B. pertussis debe ser complementado con carbn, almidn, sangre o albmina, las cuales absorben las molculas txicas.
Adherencia bacteriana a las CE ciliadas del aparato respiratorio Crecimiento de las bacterias
Adherencia y toxinas
Pertactina o Protema P69.
Hemaglutinina filamentosa facilita la unin a integrinas glucoprotecas sulfatados de las membranas de las clulas respiratorias ciliadas. Se une tambin al receptor CR3 de la superficie de los macrfagos (supervivencia y replicacin intracelulares de las bacterias). Fimbria. Toxina pertussis toxina A-B, con una subunidad txica y cinco subunidades de unin. Otras toxinas.
TOXINAS
Toxina pertussis
Lipopolisacridos
Adenil ciclasa/hemolisina
Citotoxina traqueal
Toxina dermonecrtica
Toxina pertussis
Tiene actividad ribosilasa de ADP para las protenas G de la superficie de la membrana, que regulan la actividad adenil ciclasa. La toxina inactiva a Gta, protena inhibidora que controla la actividad de la adenil ciclasa. La expresin incontrolada de la enzima conlleva un incremento de las concentraciones de AMPc y un ulterior aumento de las secreciones respiratorias y la produccin de mucosidad caracterstica de la fase paroxstica de la tos ferina.
Adenil ciclasa/hemolisina
Cataliza la conversin de ATP a AMPc en las clulas eucariotas e inhibe la quimiotaxis, fagocitosis y destruccin mediada por leucocitos.
Toxina dermonecrtica
Toxina termolbil que causa vasoconstriccin de los vasos perifricos isquemia local, migracin de los leucocitos hasta los espacios extravasculares y aparicin de hemorragia. Es responsable de la destruccin tisular localizada.
Citotoxina traqueal
Monmero de peptidoglucano de la pared celular de bajo PM que tiene afinidad especfica por las clulas epiteliales ciliadas. Produce ciliostasis ( movimientos de los cilios) y destruccin de las clulas ciliadas. Interfiere en la sntesis de ADN, por lo que impide la regeneracin de las clulas daadas. Este proceso altera los mecanismos normales de aclaramiento y limpieza del rbol respiratorio, dando lugar a la tos caracterstica. Estimula la liberacin de IL-1, produciendo fiebre. Lpido A y Lpido X (2 LPS) activa la va alternativa del complemento y estimulan la liberacin de citocinas.
Incidencia y morbimortalidad vacuna 1949. La enfermedad sigue siendo endmica en todo el mundo, afectando > 60 millones de personas cada ao.
En los ltimos aos ha habido un aumento importante de la enfermedad en nios mayores y adultos.
La infeccin se inicia cuando los aerosoles infecciosos son inhalados y las bacterias se adhieren y proliferan en las clulas epiteliales ciliadas.
Aislamiento
B. pertussis.
MEDIOS DE TRANSPORTE: Casamino cido. Medio de Amies con carbono vegetal. Medio Rean-Lowe. T 4 C
AISLAMIENTO
El CULTIVO provee el diagnstico ms especfico de pertussis y produce aislados para anlisis genotpicos y ensayos de susceptibilidad antimicrobiana. MEDIOS Bordet-Gengou, Regan-Lowe suplementado con glicerol, peptona y sangre. T: 35-36C Atmsfera: 5-10% CO2 3-4 das de incubacin, hasta 7 das.
Vacuna acelular (toxina pertussis inactivada + uno o ms componentes bacterianos ej. hemaglutinina filamentosa, pertactina, fimbrias) en combinacin con vacunas frente a la difteria y ttanos a nios de edades 2, 4, 6 y 15 a 18 meses y la quinta dosis entre los 4 y 6 aos.
Elevado grado de proteccin Modificaciones antignicas detectadas en la toxina pertussis y pertactina peligro de eficacia