Técnica histológica

Este artículo o sección necesita referencias que aparezcan en una publicación acreditada.

Se denomina técnica histológica al conjunto de operaciones a que se somete una materia

organizada (tejido biológico), a fin de que sea posible su estudio por medio del microscopio,
posibilitando la observación de estructuras no visibles al ojo humano.[1] ​

Pasos de la técnica histológica

Obtención del material histológico para estudiar

Proceso de fijación

Lavados

Deshidratación

Aclaramiento

Infiltración

Inclusión

Microtomía

Tinción

Observación (Este último no es considerado como un paso de la técnica histológica por

varios autores)

Obt ió d l t i l hi t ló i
Obtención del material histológico

Los tejidos se pueden obtener de diferentes formas:

Biopsia

- Biopsia excisional - Biopsia incisional - Biopsía endoscópica

- Biopsia colposcópica
- Punción
aspiración con aguja fina (PAAF) - Biopsia por punción con aguja gruesa (Tru-cut)

Necropsia/autopsia

Fijación

En este paso el tejido obtenido se coloca en una sustancia fijadora, generalmente líquida, para
evitar los cambios post-mortem y para lograr conservar la forma original del tejido. Uno de los
fijadores más usado es el formol al 10% (formaldehído). En el caso de que realicemos estudios
mediante el microscopio electrónico, deberemos usar otros fijadores más específicos como
paraformaldehído, glutaraldehído y tetróxido de osmio.

Lavados

Se debe lavar el tejido para quitar el exceso de fijador (químico).

El exceso de fijador durante el
posterior proceso de infiltración, incluso en la microtomía, podría afectar los cortes histológicos,
y por ello se debe lavar con agua destilada.

Deshidratación

La deshidratación se realiza empleando diferentes soluciones de alcohol a concentraciones

crecientes hasta llegar a alcohol puro. La técnica de la parafina, para cortar fácilmente.

Aclaramiento

En este paso se sustituye el alcohol por una sustancia que haga de intermediario entre el agua y
la parafina que se usará posteriormente para la infiltración. La sustancia comúnmente utilizada
es el xilol (xileno) aunque también pueden usarse otros disolventes orgánicos como benceno.
Tras varios baños, se consigue eliminar el alcohol puro y todo el tejido queda impregnado del
xilol, el cual habrá entrado hasta lo más profundo del tejido. Durante este proceso el tejido
pierde color dando lugar al término de aclaramiento.
Infiltración

La muestra se coloca en parafina histológica en estado líquido, lo cual se consigue calentando

la parafina por encima de su punto de fusión. Como se ha dicho en el paso anterior el tejido está
completamente impregnado de xilol que es un disolvente de la parafina, por lo que tras varios
baños con concentración creciente de parafina se consigue embeber todo el tejido en parafina
pura.

La deshidratación, aclaramiento e infiltración pueden ser realizadas manualmente pero hoy en

día se realizan de modo automático en máquinas específicas.

Inclusión

Tiene como finalidad proporcionarle al tejido un soporte sólido que posibilite realizar un corte
muy fino, por lo que es de suma importancia que el medio utilizado para la inclusión penetre al
interior del tejido.
Aquí se forman bloques de parafina dentro de los cuales están las muestras a
estudiar.
También hay máquinas especializadas para la inclusión en parafina de tejidos.
Después de su inclusión y posterior secado, estos se deben poner a enfriar en un congelador
para su posterior corte. Puede llevarse a cabo en Parafina

Microtomía

Se realizan cortes histológicos muy delgados según lo requerido o la costumbre del laboratorio
donde se realice la técnica. Los cortes van desde 0,5 micras hasta 8 u 10 micras. Los cortes se
echan al baño de flotación y se ´pescan´ con un portaobjetos, se marcan con la fecha, el tipo de
tejido y la tinción con que se van a procesar.
El ángulo de corte entre el cuchillo del microtomo y
el bloque ha de estar entre 10º y 15º.
Una vez realizado el corte se da un baño de agua
destilada, para que la parafina se estire.
Un buen corte histológico debe tener un grosor
aproximado de 3-5 micras para que sea fácilmente atravesado por la luz del sol y atraviese los
poros celulares.

Tinción

Las células, por sí mismas, no poseen coloración. Por tanto, para poder observar la morfología
tisular deben "teñirse". Existen muchos tipos de tinciones para diferenciar las distintas
estructuras o sustancias en los tejidos..
La tinción más usada o también llamada "de rutina" es la de hematoxilina y eosina (H&E).
Se usa
un colorante llamado hematoxilina que tiñe las sustancias ácidas o que las contengan, como el
núcleo que contiene ácido desoxirribonucleico (ADN)
La eosina amarillenta tiñe las estructuras
básicas como el citoplasma y demás orgánulos eosinofílicos de la célula.

Como se mencionó anteriormente hay muchas tinciones .

Otros ejemplos son:

Masson

PAS

Perls

Plata metenamina

Warthin-Starry

Ziehl-Neelsen

Van Gieson

Azul alcian

Sudán III

Rojo Congo

Observación

Como se mencionó al principio algunos autores no consideran la observación como un paso de

la técnica histológica sino el objetivo final de la misma. Como se puede deducir, se observa la
laminilla al microscopio y se busca lo que se necesite ver para llegar a un diagnóstico.

La técnica histológica es muy empleada en laboratorios y hospitales. Permite hacer

diagnósticos de distintas enfermedades, como para saber si un tumor es maligno o benigno,
etc.

Véase también

Histología

Referencias

1. Técnica histológica (https://web.archive.org/web/20120907003705/http://www.dermato101.

 com.ar/tecnica.pdf) . Dr. Gabriel Magariños. Dermatología en red.

Histología: Métodos e instrumentos de estudio de la Histología. Parte I: Técnica histológica,

Guía de actividad N.º 1 (2005) Prof. titular: Dra. O. Z. de Gorodner, Prof. adjunta: Dra. R. R. de
Godoy, Facultad de Medicina de la Universidad Nacional del Noreste.

Enlaces externos

Wikimedia Commons alberga una categoría multimedia sobre Técnica histológica.

Universidad de Salamanca (https://web.archive.org/web/20081218155727/http://www.usal.e

s/~histologia/histologia.htm) Anatomía e histología humana

Histology for Dummies (https://web.archive.org/web/20110416053214/http://www.histologyf

ordummies.com/) Histología humana en español

Datos: Q6154492

Multimedia: Histology (https://commons.wikimedia.org/wiki/Category:Histology)

Obtenido de
«https://es.wikipedia.org/w/index.php?
title=Técnica_histológica&oldid=143218995»

Última edición hace 4 días por 177.222.96.43