Guía de practica

Jorge Andrés Delgado

David Felipe Martínez
Maicol Smith Quintero

MVZ. Leydy Sandoval Romero

Biología molecular

Universidad cooperativa de Colombia

4/05/2022
 Introducción

Los laboratorios de biología molecular se usan para hacer diferentes estudios, en este caso
lo usamos para detección de ADN mediante electroforesis en gel agarosa, el cual es un
proceso corto. La electroforesis es un proceso que se usa para diferentes métodos como lo
es la extracción de ADN, amplificación de ADN o ADNc mediante PCR.
Preguntas

1. Describa en que se basa el principio de electroforesis.

R= El principio básico de la electroforesis consiste en la migración de las moléculas

a través de un gel u otro tipo de matriz de naturaleza porosa, en el cual, por acción
de un campo eléctrico, serán separadas de acuerdo a su tamaño o peso molecular.
(INS, 2003).

2. ¿Qué factores afectan la velocidad de migración del DNA en geles de agarosa?

R= Estos factores pueden ser por el tamaño del ADN, las moléculas de ADN mas
grande generalmente migran mas lento, Concentración de la agarosa, a medida
que varía la concentración de agarosa, la velocidad de la molécula de ADN será
diferente, conformación del ADN, voltaje aplicado, dirección del campo
eléctrico, composición de las bases y temperaturas, presencia de agentes
intercalantes, composición del buffer de electroforesis.

3. En qué caso se utiliza la poliacrilamida para la separación de ácidos nucleicos.

R= Se suele usar en situaciones donde se usará fragmentos de bajo tamaño

molecular.

4. ¿Qué es el buffer de carga y qué propósito cumple en la electroforesis?

R= El buffer de carga contiene colorante que sirve para visualizar la migración de

DNA durante el proceso de electroforesis.

5. ¿Cuáles son los buffers utilizados en el corrido electroforético? ¿Cuáles son sus
componentes y propiedades?

R= Se utilizan dos buffers: el buffer TBE y el buffer TAE, el buffer TBE tiene de
componente a tris, molécula responsable del taponamiento y regulación del pH.
El buffer TAE tiene dos moléculas a acido bórico y acido acético.

6. ¿Por qué se utiliza la luz ultravioleta para visualizar el ADN?

R= Porque gracias a la luz ultravioleta se tiñe el ADN facilitando la observación de

la posición en el gel.

7. ¿Para qué se utiliza el reactivo SyberGreen?

R=El SYBR Green se utiliza en varias áreas de la bioquímica y la biología
molecular. Se emplea como colorante para la cuantificación de ADN de doble
cadena en algunos métodos de PCR cuantitativa o para la visualización del ADN en
la electroforesis con geles de agarosa.
Referencias

INS (Instituto nacional de salud). (2003). MANUAL DE PROCEDIMIENTOS

DE ELECTROFORESIS PARA PROTEÍNAS Y ADN.
https://www.ins.gob.pe/insvirtual/images/otrpubs/pdf/manual%20electroforesis%20
38.pdf#:~:text=El%20principio%20b%C3%A1sico%20de%20la%20electroforesis
%20consiste%20en,el%C3%A9ctrico%2C%20ser%C3%A1n%20separadas%20de
%20acuerdo%20a%20su%20tama%C3%B1o