Universidad Nacional Autónoma de México

Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Laboratorio
Bioquímica celular y de los tejidos I

Actividad 
“Informe: Aminoácidos "

Profesor
Hernández Clemente Fernando Francisco

Equipo 2
Ríos Guzmán Zianya Alejandra Elena
Vargas Gerónimo Elena
Venegas Argueta Frida Michell

                                       Grupo
  1451
 a) TITULACIÓN ÁCIDO-BASE
1) Gráfica de pH vs miliequivalentes de NaOH del aminoácido neutro con formol.
Desglosar el cálculo para obtener los miliequivalentes para por lo menos tres
valores de los que se pongan en el eje de las "X" (p.ej. uno cerca del inicio,
otro intermedio y otro cerca del final) A partir de ella, obtener el pKa del grupo
carboxilo y amino.

ml NaoH mEq de NaOH pH

0 0 1.3
2 0.2 1.30
4 0.4 1.30
6 0.6 1.40
8 0.8 1.40
10 1 1.45
12 1.2 1.50
14 1.4 1.55
16 1.6 1.55
18 1.8 1.60
20 2 1.65
22 2.2 1.75
24 2.4 1.80
26 2.6 1.90
28 2.8 2.00
30 3 2.10
32 3.2 2.20
34 3.4 2.35
36 3.6 2.50
38 3.8 2.85
40 4 3.15
42 4.2 4.25
44 4.4 6.00
46 4.6 6.45
48 4.8 6.80
50 5 7.20
52 5.2 7.75
54 5.4 9.45
56 5.6 10.25
58 5.8 10.50
60 6 10.75
62 6.2 10.90
64 6.4 11.00
 66 6.6 11.05
68 6.8 11.10
70 7 11.20
72 7.2 11.30
74 7.4 11.40
76 7.6 11.40
78 7.8 11.40

⮚ Calculos de los meq:

N= meq / mL
(N) (ml) = meq
Ejemplos de 3 valores:
▪ (3 ml) (0.1 N) = 0.3 meq
▪ (40 ml) (0.1 N) = 4 meq
▪ (73 ml) (0.1 N) = 7.3 meq
⮚ Determinación del pka del grupo carboxilo y amino.
Glicina:
Pka1: -COOH 2.35
Pka2: -NH3 9.78
2) EN OTRA GRÁFICA. graficar tanto los datos del aminoácido neutro con/sin formol,
para observar si hay algún cambio en las pendientes.

Titulación ácido-base de glicina

 Sin formol Con formol
NaOH (mL) pH NaOH (mL) pH

0 1.18 0 1.3
1 1.34 2 1.3
2 1.47 4 1.3
3 1.64 6 1.4
4 1.71 8 1.4
5 1.82 10 1.45
6 2.08 12 1.5
7 3.2 14 1.55
8 8.25 16 1.55
9 8.75 18 1.6
10 9.06 20 1.65
11 9.27 22 1.75
12 9.49 24 1.8
13 9.69 26 1.9
14 9.88 28 2
15 10.06 30 2.1
16 10.29 32 2.2
17 10.55 34 2.35
18 10.87 36 2.5
19 11.66 38 2.85
20 12.05 40 3.15
21 12.3 42 4.25
22 12.47 44 6
23 12.59 46 6.45
24 12.68 48 6.8
25 12.75 50 7.2
26 12.82 52 7.75
27 12.87 54 9.45
28 12.91 56 10.25
29 12.95 58 10.5
30 12.98 60 10.75
31 13.01 62 10.9
    64 11
    66 11.05
    68 11.1
    70 11.2
    72 11.3
    74 11.4
    76 11.4
    78 11.4
3) a) Hacer una gráfica pH vs. volumen NaOH con los datos de lisina o ácido
glutámico con formol

 Titulación de ácido glutámico

Con formol
NaOH (mL) pH

0 1.03
1 1.047
3 1.09
5 1.12
6 1.13
8 1.14
10 1.17
12 1.21
14 1.26
16 1.31
18 1.37
20 1.42
22 1.49
24 1.56
26 1.64
28 1.73
30 1.85
32 1.98
34 2.13
36 2.21
37 2.32
38 2.43
40 2.56
42 2.87
44 3.35
46 3.83
48 4.24
50 4.7
52 5.42
54 6.85
56 7.64
58 8.12
59 8.81
60 9.18
61 9.64
62 10.03
64 10.5
66 10.77
68 10.95
70 11.08
72 11.18
74 11.26
75 11.29
b) Auxiliándose del método de primera o segunda derivada, tratar de obtener los
puntos de equivalencia y semiequivalencia de los grupos carboxilo y amino.

Titulación de ácido glutámico 

Con formol
NaOH (mL) pH ΔV ΔpH

0 1.03 0 0
1 1.047 1 0.017
3 1.09 3.5 0.043
5 1.12 6.5 0.03
6 1.13 8.5 0.01
8 1.14 11 0.01
10 1.17 14 0.03
12 1.21 17 0.04
14 1.26 20 0.05
16 1.31 23 0.05
18 1.37 26 0.06
20 1.42 29 0.05
22 1.49 32 0.07
24 1.56 35 0.07
26 1.64 38 0.08
28 1.73 41 0.09
30 1.85 44 0.12
32 1.98 47 0.13
34 2.13 50 0.15
36 2.21 53 0.08
37 2.32 55 0.11
38 2.43 56.5 0.11
40 2.56 59 0.13
42 2.87 62 0.31
44 3.35 65 0.48
46 3.83 68 0.48
48 4.24 71 0.41
50 4.7 74 0.46
52 5.42 77 0.72
54 6.85 80 1.43
56 7.64 83 0.79
58 8.12 86 0.48
59 8.81 88 0.69
60 9.18 89.5 0.37
61 9.64 91 0.46
62 10.03 92.5 0.39
64 10.5 95 0.47
66 10.77 98 0.27
68 10.95 101 0.18
70 11.08 104 0.13
72 11.18 107 0.1
74 11.26 110 0.08
75 11.29 112 0.03
c) Localizar y señalar los puntos de semiequivalencia obtenidos en el inciso
anterior (b), en la gráfica del inciso a) para obtener los 3 valores de pKA´s
respectivos.
 B) CCF

1) Calcular los Rf´s de los estándares de aminoácidos (desglosar cálculos)

𝐷𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑢𝑡𝑜

𝑅𝑓 = 𝐷𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑠𝑜𝑙𝑣𝑒𝑛𝑡𝑒

Aspargina Serina Valina Metionina Histidina Isoleucina Treonina

1.2 2.2 3.1 3.3 1.4 3.8 2.3
6.5
= 0. 184 6.5
= 0. 33 6.5
= 0. 47 6.5
= 0. 507 6.5
= 0. 215 6.5 = 0. 584 6.5
= 0. 35

2) Calcular los los Rf´s o Rx y proponer la identificación de los aminoácidos en

las muestras problema

aa1 aa2 aa3 aa4

2 3.9 2.3 4.3
6.5
= 0. 3077 6.5
= 0. 6 6.5
= 0. 3538 6.5
= 0. 6615
Conclusion:

Los RF obtenidos de las alicuotas corresponden en un aproximado a los valores experimentales

de los aminoacidos conocidos, sin embargo en este informe los valores se aproximan a los
experimentales, por lo que no hay un defecto de por medio.

Referencias:

● Marta del Puerto . (2013). Determinación d proteínas . 24/octubre/2021, de Grupo EMA

Sitio web:
http://www.fagro.edu.uy/~nutrical/ensenanza/AVI%20WEB/cursoema/detdePC.pdf

● Malaver Ortega . (2009). Cuantificación de aminoácidos en plasma empleando

Cromatografia . 24/Octubre/2021, de ABCL Sitio web:
https://www.redalyc.org/pdf/535/53516748011.pdf

● https://classroom.google.com/u/1/w/NTUxMzczNzQ1MTRa/t/all
● https://www.researchgate.net/figure/Figura-2-Curva-de-calibracion-para-aminoacidos-con
-leucina-como-estandar-Fuente_fig28_320472196