HEMATOLOGIA Y BIOQUÍMICA SANGUÍNEA.

HEMATOLOGÍA

Técnicas hematológicas
Volumen de muestra máximo 1% del peso corporal (expresado en ml )
Puntos de extracción Vena yugular derecha, vena cutánea cubital (a nivel del codo),
vena braquial (cara ventral del húmero), vena medial metatarsal
(por encima de la articulación metatarsal), corte de uña
Anticoagulantes Heparina : 25 UI por ml de sangre.
Suele provocar artefactos de tinción. Ideal si se desea obtener
plasma.
EDTA : 1-2 mg de EDTA por ml de sangre.
Anticoagulante de elección en hematología si el almacenamiento
de la muestra no es prolongado
Extensión Técnica de portaobjetos-portaobjetos, portaobjetos-cubreobjetos o
cubreobjetos-cubreobjetos ( minimiza el daño celular).
Tinción Tipo Romanowsky para hematología

Parámetros hematológicos
• Serie roja: Valor Hematocrito, Sólidos Totales, Recuento Total de
Eritrocitos, Concentración de Hemoglobina, Índices Eritrocitarios y
Recuento de Reticulocitos e Índice de eritrocitos policromáticos.
• Serie Blanca: Recuento Total de Leucocitos y Recuento Diferencial de
Leucocitos.

Dado que todas las células sanguíneas de las aves son nucleadas, los
contadores electrónicos de células sanguíneas no pueden emplearse en para
el estudio del leucograma es hematología aviar. En la práctica clínica se usan
métodos hemacitométricos para realizar los recuentos celulares. El método de
Natt y Herrick permite el recuento de eritrocitos y leucocitos simultáneamente.
El procedimiento y características se especifican en la tabla siguiente:

Método de Natt y Herrick para recuento de eritrocitos y leucocitos

Se trata de un método directo. El violeta de metilo 2B tiñe todas las células con diferentes tonos de azul
Material: Camara de Neubauer modificada
Pipeta hemacitométrica de bola roja
Aspirar sangre hasta la marca 0.5 y limpiar la parte exterior de la pipeta
Aspirar solución de Natt y Herrick hasta la marca 101 (Dilución 1 : 200)
Mezclar durante 1-2 minutos. Desechar las primeras gotas, llenar la cámara de recuento y esperar 3 minutos
Contar el número total de eritrocitos en cinco cuadros ( cuadros de las esquinas y el cuadro central) del retículo
central de un lado de la cámara de recuento
Multiplicar el número de eritrocitos por 10.000 ( Expresado en eritrocitos/ul)
Contar el número total de leucocitos en los nueve cuadros grandes de un lado de la cámara y aplicar la fórmula :
Recuento Total de Leucocitos (células/ul) = Leucocitos contados x 1.1x 200
Los leucocitos se tiñen de color azul oscuro

Composición de la Solución de Natt y Herrick

NaCl 3.88 g
Na2 SO4 2.5 g
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Na2HPO4 x 12 H2O 2.91 g

KH2PO4 0.25 g
Formalina 37% 7.5 ml
Metil Violeta B 0.10 g
Disolver en el orden indicado y disolver en agua destilada hasta un volumen total de 1000 ml.
Se deja 12 horas en reposo y posteriormente se filtra (paper Whatman nº 2). El pH final ha de
ser de 7.3

Otro método hemacitométrico frecuentemente empleado es el sistema

Unopette 5877 de eosinófilos (Becton-Dickinson, Rutherford, NJ 07070). En al
tabla siguiente se resume el procedimiento:

Método Unoppette para recuento de leucocitos

Se trata de un método indirecto. La floxina B tiñe especificamente heterófillos y eosinófilos.
Llenar la pipeta Unopette con sangre (25ul)
Mezclar durante menos de 5 minutos, desechar las primeras gotas, cargar la cámara de recuento y esperar 5
minutos.
Contar los leucocitos granulocitos en todo el retículo a ambos lados de la cámara de recuento
Los heterófilos, eosinófilos se tiñen de color rojo-anaranjado y aparecen redondos y refráctiles
Realizar el Recuento diferencial a partir de la extensión
Calcular el recuento total de leucocitos aplicando la fórmula:
Recuento Total de Leucocitos (por ul) = Número de células teñidas contadas x 1.1x 16x 100

% Heterófilos + % Eosinófilos

Método estimativo: Aunque se trata de un método menos preciso, el recuento

estimativo de leucocitos a partir de la extensión de sangre es fácil de realizar y
posee un gran valor diagnóstico. Se cuentan los leucocitos en 10 campos de
40x, se calcula la media y se multiplica por 2000.

• Estudio de trombocitos:
Método estimativo : Consiste en contar el número de trombocitos en
cinco campos de immersión y aplicar la Fórmula :

Recuento estimado de trombocitos (trombocitos/ul) =

Media de trombocitos en cinco campos x 3.500.000

1.000

Si el valor hematocrito no se encuentra en el rango normal (35-55%) se realiza una

corrección del recuento mediante la Fórmula :

Recuento estimado x Hematocrito observado

Hematocrito normal

• Estudio del frotis sanguíneo: Se basa en la evaluación de las células

sanguíneas y la valoración de la morfología, abundancia relativa de
cada tipo celular y presencia de hemoparásitos.

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 Morfología de las células sanguíneas de las aves
Eritrocitos La célula madura es oval o elíptica, con citoplasma anaranjado, núcleo oval de color
púrpura situado centralmente. Las formas inmaduras son más redondeadas y con
citoplasma azulado (basófilo). En aves sanas son frecuentes formas juveniles
Leucocitos
Heterófilos Gránulos alargados o redondeados eosinófilos. Citoplasma incoloro
Eosinófilos Gránulos redondos, eosinófilos y refráctiles. Citoplasma azulado, ligeramente
granulado. Las rapaces sanas poseen un número elevado de eosinófilos
Basófilos Célula de pequeño tamaño con gránulos intensamente basófilos.
Monocitos Forma irregular. Núcleo redondo, bilobulado, normalmente excéntrico; citoplasma azul-
gris, finamente granulado o vacuolado
Linfocitos Núcleo normalmente redondo y central, con cromatina condensada. Alto ratio
núcleo/citoplasma (escaso citoplasma) Citoplasma basófilo. Se diferencian tres
poblaciones celulares (medianos, pequeños y grandes).
Trombocitos Citoplasma claro o ligeramente azulado. Núcleo oscuro. Pueden observarse gránulos
de color magenta. Menor tamaño que el eritrocito.

Hemoparásitos
Género Características Vector Cuadro clínico Aves afectadas
Haemoproteus Gametocito en Culicoides, Anemia en casos Palomas
eritrocitos; moscas de infecciónAnseriformes,
esquizogonia en hipoboscidas masiva rapaces,
células endoteliales Passeriformes,
(pulmón, hígado, riñón) Psitaciformes
Leucocytozoon Gametocito en Simulium, Anemia, disnea, Anseriformes,
eritrocitos y leucocitos Culicoides muerte súbita Galliformes,
;esquizogonia en Passeriformes,
células endoteliales Psitàcides y rapaces
(pulmón, hígado, riñón)
Plasmodium Gametocitos i Mosquitos Anemia, Pingüinos, rapaces,
esquizontes en (Aedes, debilidad, muerte Passeriformes,
eritrocitos Culex) súbita Galliformes,
Anseriformes

BIOQUÍMICA SANGUÍNEA:

Técnica: Las determinaciones se realizan a partir de suero o plasma

heparinizado.

Parámetros recomendados : AST, Ácidos biliares, Glucosa, Calcio,

Creatínfosfoquinasa, Ácido úrico, Proteínas totales Plasmáticas, Fibrinógeno y
Cociente albúmina/globulinas.

Parámetro Indicación Interpretación comentario

Proteínas totales Enfermedad gastrointestinal, ↑ Durante la puesta, deshidratación, Se aconseja el empleo
hepática o renal. enfermedades infecciosas crónicas. de técnicas
colorimétricas
↓ Malnutrición, parasitismo, enteropatía, (Biuret/Lowry) ya que el

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 enfermedad renal, estrés y enfermedad método refractométrico
hepática crónica es inexacto
Cociente Procesos inflamatorios, ↓ Enfermedad infecciosas crónicas Permite evaluar la
Albúmina : Globulinas enfermedad hepática, (Tuberculosis, Clamidiosis, Aspergilosis), respuesta al
gastrointestinal y renal hipoalbuminemia (hepatopatía, nefropatía). tratamiento
Glucosa Convulsiones, glucosuria ↑ Estrés, diabetes mellitus e hipertermia Si se realiza la
determinación en
↓ Inanición , malnutrición, septicemia y menos de dos horas no
enfermedad hepática es necesario emplear
floururo sódico para
prevenir glucólisis
Colesterol Lipidosis hepática ↑ Hipotiroidismo, enfermedad hepática, dieta Escaso valor diagnóstico
rica en grasas, obstrucción de conductos
biliares
↓ Enfermedad hepática , aflatoxicosis, dieta
baja en grasa
Acido úrico Enfermedad renal ↑ Fallo renal, ayuno, trauma tisular, Representa el 60-80 %
contaminación de la muestra con uratos. del total del nitrógeno
excretado
Urea Deshidratación ↑ Deshidratación, obstrucción ureteral. La reabsorción en
túbulos renales
depende del grado de
hidratación.
Creatinina Deshidratación, Deshidratación, fallo renal Elevación artefactual
debido a cromógenos
Ácidos biliares Enfermedad hepática ↑ Enfermedad hepática
Aspartato Lesión hepática o muscular ↑ Enfermedad de Pacheco, Clamidiosis, No específica de
Aminotransferasa intoxicaciones, necrosis muscular. enfermedad hepática
Creatín fosfoquinasa Lesión muscular ↑ Necrosis muscular, inyecciones Permite diferenciar
(CK) intramusculares, deficiencia de Vitamina E y lesión hepática de
Selenio , clamidiasis, septicemia, neuropatías e lesión muscular
intoxicación por plomo
Sodio Colapso circulatorio, diarrea, ↑ Deshidratación, intoxicación por sal Los valores son
vómito, quemaduras falsamente bajos si
↓ Diarrea, enfermedad renal, insuficiencia existe hiperlipemia o
adrenocortical hiperproteinemia
Potasio Diarrea, vómito, parálisis, ↑ Enfermedad renal, insuficiencia En muestras de suero,
arritmias, debilidad, tratamientos adrenocortical, deshidratación, acidosis, el tiempo de
con diuréticos ingestat excesiva de potasio almacenamiento
provoca un descenso
↓ Diarrea crónica, dieta deficitaria, anorexia, en la concentración de
vómito, alcalosis potasio. Los valores
son falsamente bajos
si existe hiperlipemia o
hiperproteinemia
Calcio Temblores, ataques, poliuria ↑ Hipervitaminosis D3 , durante la puesta Debe medirse la
polidipsia, arritmias concentración de
↓ Hipoalbuminemia, hiperparatiroidismo albúmina.
nutricional avanzado

Tabla: Parámetros de bioquímica sanguínea en aves y su aplicación en el diagnóstico

BIBLIOGRAFIA SELECCIONADA

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1988.
2. Dein FJ: Laboratory Manual of Avian Hematology. American Association of Avian
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11. Natt MP, Herrick CA: A new diluent for counting erytrhocytes and leucocytes of the
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