Cecilia González P. M.Sc.

Tema 2
Herramientas
para obtener
plantas OGM
10 de noviembre 2020

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 Procesos naturales que resultan en
cambios genéticos

Sustitución Inserción Delección

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Maíz gemas de cristal -
híbrido

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https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs11103-019-00913-y
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TRANSFOR-
MACIÓN

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• Cisgénesis: Gen introducido
invariable con intrones y
secuencias reguladoras
propias.
• Intragénesis: ADN insertado
va combinación de fragmentos
de ADN de la misma especie o
especies compatibles, en
orientación sentido o
antisentido

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ARN de interferencia

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EDICIÓN DE GENOMAS
La edición de genomas
emplea herramientas que
incrementan
sustancialmente la
precisión y eliminan
muchos de los problemas
de las técnicas
tradicionales.

Se realiza a partir del corte del ADN en

ambas cadenas en secuencias
específicas y únicas en un genoma,
seguido de procesos de reparación por
recombinación homóloga o no
homóloga.
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NUCLEASAS DE DEDOS DE ZINC

Los dedos de Zinc Son

dominios de naturaleza
proteica capaces de
reconocer un
trinucleótido de una
secuencia específica.

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 Se componen de dos partes:
1

Los dedos de Zinc

pueden manipularse
de manera modular
para dirigir su unión a
una secuencia en
particular.

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 Se componen de dos partes:
2

La nucleasa FokI es una

nucleasa de Flavobacterium
okeanokoites que ha sido
modificada para generar un corte
secuencia independiente.

Los dominios de dedos de Zinc, fusionados a la

nucleasa FokI, trabajan juntos para unir
secuencias específicas de 18 pb.

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¿Resultado?

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TALENS - Transcription Activator Like Effector NucleaseS
Nucleasa de actividad similar a activador de transcripción - tipo de enzimas de restricción

Sistemas originalmente
caracterizados en
Xantomonas en donde las
proteínas TALE son
secretadas cuando infectan
una gran variedad de
plantas activando en éstas
genes que ayudan a la
patogénesis.

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 Se pueden generar secuencias personalizadas de
TALEs para reconocer secuencias genómicas únicas

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Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats -
Repeticiones palindrómicas cortas agrupadas CRISPR / CAS9
regularmente interespaciadas.

CRISPR / CAS Los CRISPR han

sido encontrados en el 40 % de
las eubacterias y 90 % de las
arqueas secuenciadas.

Es un “sistema inmune” de las

bacterias para defenderse del
ataque de bacteriófagos.

El sistema CRISPR se
compone de dos partes
1) Un componente proteico
CAS9 con actividad de
nucleasa.
2) Un RNA guía que brinda
especificidad al sistema.
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 USO DE CRISPR / CAS9
Al igual que en los
sistemas anteriores
la edición con
CRISPR puede
emplearse para
generar
mutaciones
puntuales,
deleciones o
inserciones cortas.

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Ventajas de CRISPR

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